BRPI0717109A2 - Composto, métodos de tratamento ou redução do risco de doenças, ou distúrbios ou condições, e de tratamento ou profilaxia de doença, e de uma condição, e, uso e processo para a preparação de um composto - Google Patents

Composto, métodos de tratamento ou redução do risco de doenças, ou distúrbios ou condições, e de tratamento ou profilaxia de doença, e de uma condição, e, uso e processo para a preparação de um composto Download PDF

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BRPI0717109A2
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amino
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pyrimidin
formula
hydroxymethyl
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Rolf Johansson
Sofia Karlstroem
Annika Kers
Gunnar Nordvall
Tobias Rein
Can Slivo
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Astrazeneca Ab
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Description

"COMPOSTO, MÉTODOS DE TRATAMENTO OU REDUÇÃO DO RISCO DE DOENÇAS, OU DISTÚRBIOS OU CONDIÇÕES, E DE TRATAMENTO OU PROFILAXIA DE DOENÇA, E DE UMA CONDIÇÃO, E, USO E PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE UM COMPOSTO" Campo da invenção
A presente invenção expõe novos derivados [l,3]tiazol[4,5- d]pirimidin-2-(3H)-ona 5,7-dissubstituídos, junto com processos para a sua preparação, formulações farmacêuticas que os compreendem e o seu uso em terapia.
Fundamentos da Invenção
As quimioquinas despenham uma função importante em respostas imunes e inflamatórias em várias doenças e distúrbios, incluindo a asma, ateroesclerose e doenças alérgicas, assim como em patologias autoimunes, tais que a artrite reumatóide e a esclerose múltipla. Estas moléculas secretadas, pequenas, são uma superfamília crescente de proteína 8-14 kDa, caracterizadas por um motivo cisteína conservado. No presente momento, a família de quimioquina compreende quatro grupos, que exibem motivos estruturais característicos, as famílias C-X-C, C-C e C-X3-C e XC. As famílias C-X-C e C-C possuem uma similaridade de seqüência e se distinguem, uma da outra, com base em uma inserção de aminoácido única entre o par NH-proximal de resíduos de cisteína. A família C-X3-C se distingue das outras duas famílias com base no fato de que possui uma inserção de aminoácido tripla entre o par NH-proximal dos resíduos de cisteína. Em contraste, os membros da família XC carecem de um dos dois resíduos de cisteína.
As quimioquinas C-X-C incluem vários quimioatraentes potentes e ativadores de neutrófilos, tais que interleucina-8 (IL-8) e um peptídeo de ativação de neutrófilo 2 (NAP-2).
As quimioquinas C-C incluem quimioatraentes potentes de monócitos, linfócitos e neutrófilos, Os exemplos incluem proteínas quimiotáticas de monócito humano 1-3 (MCP -1, MCP-2 e MCP-3), RANTES (Regulated on Activation, Normal T-cel Expressed and Secreted), eotaxina e as proteínas inflamatórias de macrófago Ia e 1β (ΜΙΡ-la e MIP- 1β).
A quimioquina C-X3-C (também conhecida como fractaquina) é um quimioatrante potente e um ativador de microglia no sistema nervoso central (CNS), assim como de monócitos, células T, células NK e células tronco.
Os estudos demonstraram que as ações de quimioquinas são
mediadas pelas subfamílias de receptores acoplados à proteína G, dentre os quais estão os receptores designados por CCRl, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCRl 0, CCRll (para a família C-C); CXCR1, CXCR2, CXCR3, CXCR4 e CXCR5 (para a família C-X-C) e CX3CRl para a família C-X3CRl para a família C-X3-C. Estes receptores representam bons alvos para o desenvolvimento da droga, pois os agentes que modulam estes receptores seriam úteis no tratamento de distúrbios e doenças, tais que aquelas acima mencionados.
A WOO1/25242 expõe certos derivados tiazol[4,5-
d]pirimidina, que são úteis como antagonistas de receptores ligados às famílias de quimioquina C-X-C e C-C, em particular como antagonistas do receptor CXCR2.
A presente invenção refere-se a um grupo de compostos, que estão relacionados aos compostos expostos na WO 01/25242, mas são de um tipo estrutural aqui não exemplificado de um modo específico. Quando comparados aos Exemplos expostos na WO /01 58907, os compostos da presente invenção exibem, de um modo surpreendente, propriedades úteis como antagonistas do receptor CX3CRl. Exposição da Invenção
A presente invenção provê compostos da fórmula (I):
em que:
R1 representa CH3 ou CF3; R representa halo, CN ou alquila Ci.6;
o
R representa H ou CH3; R4
representa H ou CH3; η representa 0, 1 ou 2;
como uma base livre ou como um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, solvato ou um solvato de um sal dos mesmos.
Em uma modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que η representa 1.
Em uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I),em que R1 representa CH3. Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os
compostos da fórmula (I), em que R representa halo ou CN.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que R representa F ou Cl.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que R representa CN.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os
1 2
compostos da fórmula (I), em que η representa 1; R representa CH3; e R representa F, 1 ou CN.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que
A piridina está ligada em usa posição 5 e possui Cl na posição 2.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que a piridina está ligada na posição 2 e possui CN na posição 4.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que a piridina está ligada na posição 2 e possui F na posição 5.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que a piridina está ligada na posição 2 e possui Cl na posição 5.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os
compostos da fórmula (I), em que a piridina está ligada na posição 2 e possui F na posição 3.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que a piridina está ligada na posição 4 e possui F na posição 3.
Em ainda uma outra modalidade, são providos os compostos
•3
da fórmula (I), em que R representa H.
Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os compostos da fórmula (I), em que R4 representa CH3. Em ainda uma outra modalidade da invenção, são providos os
compostos da fórmula (I), selecionados a partir de:
5- {[(1S)-1 -(5-cloropiridin-2-il)etiltio} -7- {[(1R)-1 - (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona;
5- {[(1S)-1 -(5-fluoropiridin-2-il)etil]tio}-7- {[(1R)-1 - (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [ 1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona;
5- {[ 1 -(3-fluoropiridin-4-il)etil]tio} -7-[( 1R)-1 -(hidroximetil)-3 - metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona;
- {{(1S)-1 -(3 -Fluoropiridin-4-il)etil]tio} -7- {[(1R)-1 - (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [ 1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2-(3H)-ona;
- {[(1R)-1 -(3 -Fluoropiridin-4-il)etil]tio} -7- {[(1R)-1 - (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2-(3H)-ona;
5- {[(1S)-1 -(3-fluoropiridin-2-il)til]tio}-7- {[(1R)-1 - (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [l,3]tiazol[4,5-d]pirimidin-2 (33H)-ona; 5 {[(1S)-1 -(3 -fluoropiridin-2-il)etil]tio} -7- {[ 1R)-1 -
(hidroximetil)-3-metilbutil]amino}[l,3] tiazol [4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona;
2- {(1S)-1 - [(7- {[(1R)-1 -(hidroximetil)-3-metilbutil] amino } -2- oxo-2,3-diidro[l,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-5-il) tio ]etil}isonicotinonitrila;
5- {[(1S)-1 -(6-cloropiridin-3-il)etil]tio } -7- {[(1R)-1 - (hidroximetil)butil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2 (3H)-ona; e
5- {[(1S)-1 -(6-cloropiridin-3 -il)etil]tio} -7- [[(1R)-1 - (hidroximetil)butil(metil)amino] [l,3]tiazol[4,5-d]pirimidin-2-(3H)-ona;
como uma base livre ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato ou solvato de um sal dos mesmos. Os compostos da fórmula (I) podem existir em formas
estereoisoméricas e/ou tautoméricas. Deve ser entendido que todos os enanciômeros, diastereômeros, racematos, tautômeros e misturas dos mesmos estão incluídos dentro do escopo da invenção.
Quando comparados aos compostos expostos na WO 01/25242, os compostos da presente invenção são caracterizados pela presença do grupo tioalquilpiridila ramificado na posição 5 do sistema de anel tiazolpirimidina. Ou seja, os compostos da presente invenção incorporam um grupo R1, que não é hidrogênio.
De acordo com a invenção, fornecemos ainda um processo para a preparação de um composto da fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, que compreende: a) reagir um composto da fórmula (II):
(li)
»3 _ τ-»4
em que ReR são como definidos na fórmula (I); com um composto da fórmula (III):
R1
N
(II!)
12 · ' em que R1, Rz e η são como definidos na fórmula (I) e L1
representa um grupo de saída; ou
b) hidrolisar um grupo da fórmula (IV):
OH
HjC-OH3X1X
N
(IV)
em que R1, R2, R3, R4 e η são como definidos na fórmula (I); e, quando necessário, converter o composto resultante da
fórmula (I), ou um outro sal do mesmo em um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou converter o composto resultante da fórmula (I) em um outro composto da fórmula (I); e quando desejado converter o composto resultante da fórmula (I) em um isômero óptico do mesmo.
Em um processo (a), os reagentes (II) e (III) são acoplados, de um modo conjunto, em um solvente orgânico adequado, tal que sulfóxido de dimetila (DMSO), acetonitrila ou l-metil-2-pirrolidona (NMP). A reação é executada, de um modo opcional, na presença de uma base orgânica ou inorgânica adicionada, tal que trietilamina, Ν,Ν-diisopropiletilamina (DIPEA) ou hidreto de sódio. A reação é executada na presença de um agente de redução brando, tal que um boroidreto de sódio. A reação é conduzida em uma temperatura adequada, normalmente entre a temperatura ambiente e o ponto de ebulição do solvente. A reação é geralmente continuada durante um período de cerca de uma hora a uma semana, ou até que a análise indique que a formação do produto requerido foi completada. Um grupo de saída adequado L1 é halogênio, de um modo particular cloro ou bromo. Em uma modalidade, L1 representa cloro.
No processo (b), o reagente (IV) é submetido à hidrólise catalisada por ácido em um solvente orgânico adequado, tal que 1,4-dioxano, tetra-hidrofurano (THF), ou sulfóxido de dimetila (DMSO) ou l-metil-2- pirrolidinona (NMP). Os ácidos adequados incluem os ácidos inorgânicos, tais que o ácido clorídrico ou o ácido bromídrico, ou ácidos orgânicos fortes, tais que o ácido trifluoroacético. A reação é conduzida em uma temperatura adequada, normalmente entre a temperatura ambiente e o ponto de ebulição do solvente. A reação é continuada, de um modo preferido, durante um período de cerca de uma hora a um dia, ou até que a análise indique que a formação do produto requerido foi completada.
Será evidente para aquele versado na arte, que nos processos acima pode ser desejável, ou necessário, proteger um grupo amina, hidroxila ou um outro grupo potencialmente reativo. Grupos de proteção adequados e detalhes de processos para a adição e a remoção de tais grupos são, de um modo geral, bem conhecidos na arte. Vide, por exemplo, "Protective Groups in Organic Synthesis", 3a Edição (1999) de Greene and Wuts.
A presente invenção inclui os compostos da fórmula (I) sob a forma de sais. Os sais adequados incluem aqueles formados cm ácidos orgânicos ou inorgânicos ou com bases orgânicas ou inorgânicas. Tais sais serão, de um modo geral, farmaceuticamente aceitáveis, embora os sais de ácidos ou bases não-farmaceuticamente aceitáveis possam ser de utilidade na preparação e purificação do composto em questão.
Os sais dos compostos da fórmula (I) podem ser formados através da reação do composto livre, ou de um sal, enanciômeros ou racemato do mesmo, com um ou mais equivalentes do ácido ou base apropriado. A reação pode ser executada em um solvente ou meio, no qual o sal é insolúvel, ou em um solvente no qual o sal é solúvel, por exemplo, água, dioxano, etanol, tetra-hidrofiirano ou éter dietílico, ou uma mistura de solventes, que podem ser removidos in vácuo ou através de secagem por congelamento. A reação pode ser também um processo metatético ou ela pode ser executada em uma resina de troca iônica.
Os compostos da fórmula (II) podem, de um modo geral, ser preparados usando os métodos conhecidos, que serão prontamente evidentes para aquele versado na arte. Uma tal via adequada é apresentada no Esquema 1. Esquema 1
(H) Os compostos das fórmulas (III) ou estão comercialmente disponíveis, ou são conhecidos na literatura, ou podem ser preparados através do uso de métodos conhecidos, que serão prontamente evidentes para aquele versado na arte.
Os compostos da fórmula (IV) ou são conhecidos a partir
de, por exemplo, a WO 01/25242 ou a WO 05/33115, ou podem ser preparados usando os métodos conhecidos, que serão prontamente evidentes para aquele versado na arte. Uma tal via adequada é apresentada no Esquema 2.
Esquema 2:
Os compostos da fórmula (V) ou são conhecidos a partir da WOP 01/58907, WO 01/25242, ou WO 02/76990, ou podem ser preparados usando métodos conhecidos, que serão prontamente videntes para aquele versado na arte.
Por exemplo, os compostos da fórmula (V), e portanto aqueles
da fórmula (VI), podem ser preparados tal como apresentado no Esquema 3. Esquema 3:
Os métodos específicos adequados para a preparação dos compostos das fórmulas (II), (III), (IV), (V) e (VI) são detalhados na seção de Exemplos d presente pedido e tais métodos representam modalidades específicas dos processos da invenção.
Os compostos intermediários podem ser usados como tais ou em uma forma protegida. Grupos de proteção adequados e detalhes dos processos para a adição e a remoção de tais grupos são, de um modo geral, bem conhecidos na arte. Vide, por exemplo, "Protective Groups in Organic Synthesis", 3 a Edição (1999) por Greene and Wuts.
Os compostos da invenção e os intermediários dos mesmos podem ser isolados a partir de suas misturas de reação, e se necessário, adicionalmente purificados, através do uso de técnicas convencionais.
Os compostos da fórmula (I) podem existir em formas estereoisoméricas. Portanto, todos os enanciômeros, diastereômeros, racematos e misturas dos mesmos estão incluídos dentro do escopo da invenção. Os vários isômeros ópticos podem ser isolados através da separação de uma mistura estereoisomérica dos compostos através do uso de técnicas convencionais, por exemplo, cristalização fracionária, ou HPLC. De um modo alternativo, os vários isômeros ópticos podem ser preparados diretamente através do uso de materiais de partida opticamente ativos.
Os compostos da fórmula (I) contêm dois centros estereogênicos e podem, deste modo existir em quatro formas estreoisoméricas distintas, tal como exposto nas fórmulas (Ia) a (Id).
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N-Nrs-S1"
Todos tais estreoisômeros e quaisquer misturas dos mesmos estão incluídos dentro do escopo da invenção. Em uma modalidade, os compostos da fórmula (I) possuem a estereoquímica apresentada na fórmula (Ia). Em uma outra modalidade, os compostos da fórmula (I) possuem a estereoquímica apresentada na fórmula (Ib).
Os compostos intermediários podem também existir em formas estreoisoméricas e podem ser usados como enanciômeros purificados, diastereômeros, racematos ou misturas.
Neste relatório, o termo "alquila CW' inclui tanto cadeia reta como ramificada, assim como grupos alquila cíclicos. Alquila C]_6 tendo de 1 a 6 átomos de carbono pode ser, mas não está limitada a, metila, etila, n- propila, i-propila, n-butila, i-butila, s-butila, t-butila, n-pentila, i-pentila, t- pentila, neo-pentila, n-hexila, i-hexila ou ciclo-hexila.
Neste relatório, o termo "halo" ou "halogênio" refere-se a flúor, cloro, bromo e iodo.
Os compostos da fórmula (I), e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis são úteis porque eles possuem atividade farmacológica como antagonistas do receptor CX3CRl. Em particular, quando comparados aos compostos especificamente exemplificados na WO 01/25242, os compostos da fórmula (I) da presente invenção possuem potências significativamente aperfeiçoadas para a inibição do receptor CX3CRl e/ou potência diminuídas para a inibição do receptor CXXR2. Os compostos preferidos da presente invenção exibem tanto potência aumentada para a inibição de CX3CRl e potência diminuída para a inibição de CXCR2.
Em um aspecto, a presente invenção provê um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o uso como um medicamento.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na manufatura de um medicamento, parta o tratamento ou a profilaxia de doenças ou condições, nas quais o antagonismo do receptor de CX3CRl é benéfico.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na manufatura de um medicamento, para o tratamento ou a profilaxia de distúrbios neurodegenerativos, doenças desmielinizante, distúrbios ateroescleróticos cardio- e cerebrovasculares, doença arterial periférica, artrite reumatóide, doenças pulmonares, tais que COPD, asma ou dor.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na manufatura de um medicamento, para o tratamento ou a profilaxia de esclerose múltipla (MS).
Em um outro aspecto, a presente invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na manufatura de um medicamento, para o tratamento ou a profilaxia de ateroesclerose, através da prevenção e/ou da redução da formação de novas lesões ateroescleróticas ou placas e/ou a prevenção ou o retardo da progressão de lesões e placas existentes.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na manufatura de um medicamento, para o tratamento ou a profilaxia de ateroesclerose através da alteração da composição das placas, de um modo a reduzir o risco da ruptura da placa e de eventos aterotrombóticos.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê o uso de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na manufatura de um medicamento, para o tratamento ou a profilaxia de derrame ou de lesão cerebral transitória (TBI).
De acordo com a invenção, é também provido um método de tratamento, ou a redução do riscos de, doenças ou condições, nas quais o antagonismo do receptor CX3CRl é benéfico, que compreende administrar a uma pessoa, que apresente o risco da referida doença ou condição, uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
r
E também provido um método de tratamento, ou a redução do risco de distúrbios neurodegenerativos, doenças desmielinizante, distúrbios, ateroescleróticos cardio e cerebrovasculares, doença arterial periférica, artrite reumatóide, doenças pulmonares, tais que COPD, asma ou dor em uma pessoa que apresente o risco da referida doença ou condição, em que o método compreende administrar a uma pessoa uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
É também provido um método de tratamento, ou de redução do risco de, esclerose múltipla (MS) em uma pessoa que apresente ou que esteja em risco da referida doença ou condição, em que o método compreende administrar a uma pessoa uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
r
E também provido um método de tratamento, ou de redução do risco de ateroesclerose através da prevenção e/ou da redução da formação de novas lesões ateroescleróticas ou placas e/ou através da prevenção ou do retardo da progressão de lesões e placas existentes em uma pessoa que apresente ou que esteja em risco da referida doença ou condição, em que o método compreende administrar à pessoa uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
E também provido um método de tratamento, ou de redução do risco de ateroesclerose, através da alteração da composição das placas, de um modo a reduzir o risco de ruptura da placa e de eventos aterotrombóticos em uma pessoa que apresente ou que esteja em risco da referida doença ou condição, em que o método compreende administrar a uma pessoa uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Em um outro aspecto, a invenção prove uma formulação farmacêutica, que compreende uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente do mesmo, em mistura com um adjuvante farmaceuticamente aceitável, diluente ou carreador, para o uso no tratamento ou profilaxia de doenças ou condições, nas quais o antagonismo do receptor CX3CRI é benéfico.
Em um outro aspecto, a invenção provê uma formulação farmacêutica, que compreende uma quantidade terapeuticamente efetivas de um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em mistura com um adjuvante farmaceuticamente aceitável, diluente ou carreador, para o uso no tratamento ou profilaxia de distúrbios neurodegenerativos, doença desmielinizante, distúrbios ateroescleróticos cardiovasculares e cerebrovasculares, doença arterial periférica, artrite reumatóide, COPD, asma ou dor.
Em um outro aspecto, a invenção provê uma formulação farmacêutica, que compreende uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em mistura com um adjuvante farmaceuticamente aceitável, diluente ou carreador, para o uso no tratamento ou profilaxia de esclerose múltipla.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê uma formulação farmacêutica, que compreende uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em mistura com um adjuvante farmaceuticamente aceitável, diluente ou carreador, para o uso no tratamento ou a profílaxia de ateroesclerose através da prevenção e redução da formação de novas lesões e/ou ateroescleróticas, e/ou através da prevenção ou retardo do progresso de lesões e placas existentes.
Os compostos podem ser usados como uma terapia única, ou em combinações, seja como um tratamento profilático ou terapêutico de condições e doenças inflamatórias do sistema nervoso central, tais que o derrame e a lesão cerebral transitória (TBI). (Soriano et al., J- Neuroimmunology, 2002, 125, 59-65).
Em um outro aspecto, a presente invenção provê uma formulação farmacêutica, que compreende uma quantidade terapeuticamente efetiva de um composto da fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em mistura com um adjuvante farmaceuticamente aceitável, diluente ou carreador, para o tratamento ou a profílaxia de ateroesclerose, através da alteração da composição das placas, de um modo a reduzir o risco de ruptura da placa e de eventos aterotrombóticos.
Os compostos da fórmula (I) e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis são indicados para o uso no tratamento ou a profilaxia de doenças ou condições, nas quais a modulação da atividade no receptor CX3CRI é desejável. De um modo particular, os compostos são indicados para o uso no tratamento de distúrbios neurodegenerativos ou de doença desmielinizante em mamíferos, que incluem o homem. De um modo mais particular, os compostos são indicados para o tratamento de esclerose múltipla. Os compostos são também indicados para serem úteis no tratamento de dor, artrite reumatóide, distúrbios ateroescleróticos cardiovasculares e cerebrovasculares, doença arterial periférica e hipertensão arterial pulmonar.
As condições, que podem ser especificamente mencionadas, são:doenças neurodegenerativas e distúrbios de demência, por exemplo, mal de Alzheimer, esclerose lateral amiotrófica, e outras doenças neuronais motoras, mal de Creutzfeld-Jacobs e outras doenças de prion, encefalopatia por HIV, mal de Huntington, demência frontotemporal, demência do corpo de Lewy e demência vascular, polineuropatias, por exemplo, síndrome de Guillain-Barré, polirradiculoneuropatia desmielinizante inflamatória crônica, neuropatia motora multifocal e plexopatias; desmielinização do CNS, por exemplo encefalomielite disseminada/hemorrágica e panecefalite esclerosante subaguda; distúrbios neuromusculares, por exemplo, miastenia grave e síndrome de Lambert-Eaton; distúrbios espinhais, por exemplo paraparese espástica tropical e síndrome do homem rígido; síndromes paraneoplásticas, por exemplo, a degeneração cerebelar e encefalomielite; lesão cerebral traumática; enxaqueca; câncer; rejeição de aloenxerto; esclerose sistêmica; infecções virais; doenças transmitidas por parasita; malária; doença periodontal; enfarte do miocárdio; derrame; doença cardíaca coronária; doença cardíaca isquêmica; e restenose; artrite reumatóide; doenças pulmonares, tais que COPD; asma ou dor.
Os compostos da invenção são também indicados para o uso no tratamento de ateroesclerose através da prevenção e/ou da redução de formação de novas lesões ou placas ateroescleróticas, e/ou através da prevenção ou retardo da progressão de lesões e placas existentes.
Os compostos da invenção são também indicados para o uso no tratamento de ateroesclerose através da alteração da composição das placas, de um modo a reduzir o risco de ruptura da placa e de eventos aterotrombóticos.
Os compostos da invenção são também indicados para o uso no tratamento de doença intestinal inflamatória (IBD), por exemplo, mal de Crohn e colite ulcerativa, através da indução da remissão e/ou manutenção da remissão de IBD.
É esperado que a profilaxia seja, em particular, relevante para o tratamento de pessoas que sofreram um episódio prévio de, ou são de um outro modo consideradas como estando em risco de contrair a doença ou a condição em questão. Pessoas, que estejam em risco de desenvolver uma doença ou condição em particular, incluem, de um modo geral, aquelas que possuem uma história familiar da doença ou condição, ou aquelas que foram identificadas através de testes genéticos ou de varredura como sendo particularmente suscetíveis de desenvolver a doença ou a condição.
Para as indicações terapêuticas acima mencionadas, a dosagem administrada irá, naturalmente, variar de acordo com o composto empregado, o modo de administração e o tratamento desejado. De um modo geral, no entanto, resultados satisfatórios são obtidos quando os compostos são administrados em uma dosagem da forma sólida de entre 1 mg e 2000 mg por dia.
Os compostos da fórmula (I) e os sais farmaceuticamente aceitáveis da mesma, podem ser usados em si mesmos, ou sob a forma de composições farmacêuticas apropriadas, nas quais o composto ou o derivado está em mistura com um adjuvante farmaceuticamente aceitável, diluente ou carreador. A administração pode ser, mas não está limitada a, enteral (incluindo oral, sublingual ou retal), intranasal, intravenosa, tópica, ou outras vias parenterais. Os procedimentos convencionais para a seleção e a preparação de formulações farmacêuticas adequadas estão descritos em, por exemplo, "Pharmaceuticals -The Science of Dosage Form Designs", Μ. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988. A composição farmacêutica compreende, de um modo preferido, menos do que 80% e de um modo mais preferido, menos do que 50% de um composto da fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
É também provido um processo para a preparação de uma tal composição, que compreende a mistura dos ingredientes.
É também provido um processo para a preparação de uma tal composição farmacêutica, que compreende a mistura dos ingredientes.
A invenção também se refere a terapias combinadas, em que um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou uma composição farmacêutica, que compreende um composto da fórmula (I), é administrada de um modo concorrente ou seqüencial com terapia e/ou um agente para o tratamento de quaisquer distúrbios ateroescleróticos cardiovasculares e cerebrovasculares e doença arterial periférica.
De um modo particular, um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado em associação com compostos de um ou mais dos grupos que se seguem:
1) agentes antiinflamatórios, por exemplo,
a) NSAIDs (por exemplo, ácido acetilssalicílico, ibuprofeno, naproxeno, flurbiprofeno, diclorfenaco, indometacina);
b) inibidores de síntese de leucotrieno (inibidores de 5-LO, por exemplo AZD 4407, zileutona, licofelona, CJ 13610, CJ 13454; inibidores de FLAP, por exemplo BAY-Y-1015, DG-031, MK 591, MK 886, A81834; inibidores de LTA4 hidrolase, por exemplo SC 56938, SC 57461 A);
c) antagonistas do receptor de leucotrieno; (por exemplo, CP 195543, amelubante, LY 293111, acolato, MK 571);
2) agentes anti-hipertensivos, por exemplo,
a) beta-bloqueadores (por exemplo, metoprolol, atenolol,
sotalol);
b) inibidores da enzima de conversão de angiotensina (por exemplo, captopril, ramipril, quinapril, enalapril);
c) bloqueadores do canal de cálcio (por exemplo, verapamil, diltiazem, felodipina, amlodipina);
d) antagonistas do receptor de angiotensina II (por exemplo, irbesartan, candesartan, telemisartan, losartan);
3) anticoagulantes, por exemplo,
a) inibidores de trombina (por exemplo, ximelagatran, heparinas, nibidores do fator Xa;
b) inibidores de agregação de plaqueta (por exemplo clopidrogrel, ticlopidina, prasugel, AZ 4160);
4) moduladores do metabolismo de lipídeo, por exemplo,
a) sensibilizadores de insulina, tais que agonistas de PPAR (por exemplo, pioglitazona, rosiglitazona, Galida, muraglitazar, gefembrozil, fenofibrato);
b) inibidores de HMG-CoA redutase, estatinas (por exemplo, simvastatina, pravastatina, atorvastatina, rosuvastatina, fluvastatina,
pitavastatina);
c) inibidores de absorção de colesterol (por exemplo
ezetimibe);
d) inibidores de IBAT (por exemplo, AZD -7806); e) agonistas de LXR (por exemplo, GW - 683965A, T-
0901317);
f) moduladores do receptor de FXR;
g) inibidores de fosfolipase;
5) agentes antianginais, por exemplo, nitratos e nitritos;
6) moduladores de estresse oxidativo, por exemplo, antioxidantes (probucol), inibidores de mieloperoxidase.
A invenção é ilustrada, mas de modo algum limitada, através dos exemplos que se segue: Métodos Gerais:
Todos os solventes usados foram de grau analítico e solventes anidros comercialmente disponíveis foram usados, de um modo rotineiro, para as reações. As reações foram executadas, de um modo típico, sob uma atmosfera inerte de nitrogênio ou de argônio.
Os espectros 1H e 13C RMN foram registrados em 400 MHz para próton e 100 MHz para carbono-13, ou em um Espectrômetro Varian Unity + 400 equipado com uma sonda BBO de 5 mm com gradientes Z ou um espectrômetro Bruker Avance 400 RMN, equipado com uma sonda de fluxo inverso duplo com gradientes Z, ou um espectrômero Bruker DPX 400 RMN, equipado com uma sonda de 4 núcleos, equipada com gradientes Z. Os espectros RMN 1H 600 MHz foram registrados em um espectrômetro Bruker avóOO RMN, equipado com uma cabeça de sonda BBI de 5 mm com gradientes Z. Espectros de RMN 1H de 360 MHz foram registrados em um Varian Gemini de 300 RMN, equipado com uma sonda de cabeça BBI de 5mm. Espectros RMN 1H de 500 MHz foram registrados em um Espectrômetro Varian Inova 500, operando em um campo magnético de 11,74 T, equipado com uma sonda de gradiente de núcleos de 5 mm com gradientes Z. Espectros RMN 1H de 300 MHz foram registrados em um Varian Gemini de 300 RMN, equipado com uma cabeça de sonda BBI de 5 mm. Espectros RMN 1H de 500 MHz foram registrados em um Espectrômetro Varian Inova 500 operando em um campo magnético de 11, 74 T, equipado com uma sonda de gradiente de núcleos de 5 mm. A não ser que especificamente observado nos exemplos, os espectros foram registrados em 400 MHz para próton e 100 MHz para carbono -13. S sinais de referência que se seguem foram usadosra linha mediana de DMSO d6 δ 2,50 (1H), δ 39, 51 (13C); a linha mediana de CD3OD δ 3, 31 (1H) ou δ 49, 15 (13C); acetona -d6 2,04 (1H), 206, 5 (13C); e CDCl3 δ 7, 26 (Ή), a linha mediana de CDCl3 δ 77, 16 (13C) (a não ser que indicado de outro modo). O excesso enanciomérico (ee) foi determinado através de CG
em uma coluna Cyclodex B (eluição isotérmica a 100°C) ou em uma coluna Cyclosil B (gradiente de temperatura 110-130°C). O excesso diastereomérico (de) foi determinado através de HPLC.
Os espectros de massa foram registrados em um LCMS Waters consistindo de um Alliance 2795 (LC) e de um espectrômetro de massa quadripolar único ZQ. O espectrômetro de massa foi equipado com uma fonte iônica de eletropulverização (ESI), operado em um modo de íon positivo ou negativo. A voltagem capilar foi de 3 kV e o espectrômetro de massa foi escaneado em de m/z 100-700, com um período de tempo de varredura de 0,3 a 0,8 segundos. As separações foram executadas ou em um Waters X-Terra MS, colunas C8, (3,5 μιη, 50 ou 100 mm χ 2,1 mm d. i.) ou em uma coluna ScantexLab's ACE AQ (100 mm χ 2,1 mm d. i.). A temperatura da coluna foi ajustada para 40°C. Um gradiente linear foi aplicado usando um sistema de fase móvel neutro ou ácido, sendo operado em uma fase de 0% a 100% orgânica em 4-5 minutos, em uma taxa de fluxo de 0, 3 ml/minuto. Sistema de fase móvel neutro:acetonitrila/[10 mM NH4Oac (aq.)/MeCN (9/1)]. Sistema de fase móvel ácida [133 mM HCOOH (aq.)/MeCN (5/95)]/[ 8 mM HCOOH (aq.)/MeCN (98/2)]. De um modo alternativo, os espectros de massa foram registrados em um espectrômetro de massa Micromass LCT, equipado com uma fonte iônica de eletropulverização (ESI), operada em um modo de íon positivo.
A identificação do composto foi efetuada em um CG-MS (CG 6890, 5973 MSD) suprido por Agilent Technologies. A coluna usada foi uma VF - 5 MS, DI 0,25 mm χ 30 m, 0,25 μηι (Varian Inc.). Um gradiente de temperatura linear foi aplicado, sendo iniciado a 40°C (manutenção durante 1 minuto) e terminado a 300°C (manutenção durante 1 minuto), 25°C/minuto. MS foi equipado com uma fonte de íon EI. O MS foi escaneado entre m/z 50- 500 e a velocidade de varredura foi ajustada para 3,25 varreduras/segundo. A voltagem eletrônica foi ajustada para 70 eV.
As análises de HPLC foram efetuadas em um sistema Agilent HP 100, que consiste de um Desgaseificador a Vácuo Micro G 1379A, Bomba Binária G1312A, Autocoletor Wellplate G1367A, Compartimento de Coluna com Termostato G1316A e Detector de Conjunto de Diodo G1315B. Coletor:X-Terra MS, Waters, 4, 6 χ 50 mm, 3, 5 μηι. A temperatura da coluna foi ajustada para 40°C e a taxa de fluxo para 1, 5 ml/minuto. O Detector de Conjunto de Diodo foi escaneado a partir de 210 - 300 nm, a graduação e a largura de pico foram ajustados para 2 nm e 0,05 minutos, respectivamente. Um gradiente linear foi aplicado, processado em de 0% a 100% de acetonitrila, em 4 minutos. Fase móvel:acetonitrila/acetato de amônio 10 mM em 5% de acetonitrila em MilliQ Water.
Um procedimento de elaboração típico após uma reação consistiu da extração do produto com um solvente, tal que acetato de etila, lavagem com água, seguida pela secagem da fase orgânica com MgSO4 ou Na2SO4 e concentração da solução in vácuo. A cromatografia de camada delgada (TLC) foi executada em placas TLC Merck (Sílica gel 60 F254) e UV foi usado para visualizar as manchas. A cromatografia por vaporização instantânea foi executada em Sílica gel Merck 60 (0,0040 -0,063 nm). Os solventes típicos usados para a cromatografia por vaporização instantânea foram misturas de clorofórmio/metanol, tolueno/acetato de etila e acetato de etila/hexanos.
A cromatografia preparativa foi executada em um HPLC autopreparativo Gilson com um detector de conjunto de diodo, usando uma coluna MS Xterra (C8, 19 χ 300 mm, 7 μπι), e um gradiente com acetonitrila/acetato de etila 0, 1 M em 5% de acetonitrila em MilliQ Water, processado em de 20% a 60% de acetonitrila, em 13 minutos, e em uma taxa de fluxo de 20 ml/minuto, a não ser que seja mencionado de um outro modo nos exemplos. Em alternativa, a purificação foi alcançada em HPLC Shimadzu LC-8 A com um detector de UV-vis SPD-10A, equipado com uma coluna Waters Simetry® (Cl8, 5 μπι, 100 mm χ 19 mm). Gradiente com acetonitrila/0,1 % de ácido trifluoroacético em Miiliq Water, processado em de 35% a 60% de acetonitrila em 20 minutos. Taxa de fluxo: 10 ml/minuto. De um modo alternativo, o HPLC preparativo dois executado em um instrumento Agilent 1100 com detecção de UV . Coluna:Kromasil -C18, 20 χ 250 mm, 10 μηι. Eluição isocrática com uma fase móvel de acetonitrila/MilliQ Water/Ácido Fórmico (46/54/0,1). Taxa de fluxo: 19 ml/minuto.
A recristalização foi executada, de um modo típico, em solventes ou misturas de solventes, tais que éter/acetato de etila/heptanos e metanol/água.
Foram usadas as abreviações que se seguem:DCM = diclorometano; de = excesso diastereomérico; DIPCI = β- clorodiisopinocanfenilborano (DIP-Chloride™); DIPEA = N,N- diisopropiletilamina; DMF = Ν,Ν-dimetilformamida; DMSO = sulfóxido de dimetila; ee= excesso enanciomérico; NCS = N-clorossuccinimida; NMP = 1- metil-2-pirrolidona; THF tetra-hidrofurano; aq = aquoso; conc. = concentrado.
Os materiais de partida usados ou foram disponíveis de fontes comerciais ou preparados de acordo com procedimentos da literatura e apresentaram dados experimentais de acordo com aqueles relatados. Os que se seguem são exemplos de materiais de partida, que foram preparados:
(2R)-2-[(2-amino-5-mercapto[l,3]tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol:WO 02/076990 (Exemplos 1-4); 5-(benziltio)-7-cloro [1,3] tiazol [4,5-d]pirimidin-2-amina:WO
00/09511 (Exemplos 6 e 7);
5-Fluoro-piridina-2-carbonitrila:WO 2005/066155 (Exemplo
2);
1-(3-fluoropiridin-4-il) etanol:Marsais, F. et al. Tetrahedron 1983, 39, 2009 - 2021 (Exemplo 3);
2-Acetil-isonicotinonitrila:Citterio et al. J. Chem Res. Synopses, 1982, 10, 272-273 (Exemplo 5);
l-(6-Cloropiridin-3-il) etanona:Lee, C. et al. J. Med. Chem., 2001, 44, 2133 (Exemplos 6 e 7). Nos métodos gerais que se seguem, R3 e R4 sao como
definidos na fórmula (I); Py representa piridila opcionalmente substituído, e LG representa um grupo de saída. Método Geral A:
^ià + uA, — hKXXA.
N SH N N S Py
LG « α Br
(V) (IH) (VI)
Boroidreto de sódio (0,1 equiv.), DIPEA (1, 5 equiv.) e (III) (1,2 equiv.) foram adicionados (V) (1,0 equiv.) em DMSO, sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura da reação resultante foi agitada a 40°C até que a reação fosse completada (monitorada por LC-MS, HPLC ou TLC). A mistura foi despejada em água gelada e produto foi extraída com DCM ou EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secadas e concentradas in vácuo. O produto bruto foi, se necessário, purificado através do uso de HPLC preparativo ou através de cromatografia de coluna por vaporização
instantânea.
Método Geral B:
(VI) (VM)
HCl conc. (2,5 ml/mmol (VI)) foi adicionado a (VI) (1,0 equiv.) em CH3CN. A mistura da reação foi resfriada em um banho de gelo e nitrito de sódio (2,0 equiv.) foi dissolvido em uma quantidade mínima de água, que foi adicionada em gotas. A reação foi agitada a O0C até que a reação fosse completada (monitorada por LC -MS, HPLC, ou TLC) e foi então despejada em água, neutralizada com bicarbonato de sódio, e extraída com DCM ou EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram secadas e concentradas in vácuo, de modo a fornecer o produto. Método Geral C:
(Vll) (IV)
Hidróxido de potássio (2,0 equiv.) dissolvido em metanol foi adicionado, em gotas, a uma solução resfriada (O0C) de (VII) (1,0 equiv.) em metanol. A mistura resultante foi agitada a O0C até que a reação fosse completada (monitorada por LC-MS, HPLC ou TLC). O solvente foi evaporado e o produto foi usado no próximo estágio de reação, sem purificação adicional. Método Geral D
A-R1
.4
/
X
N ^hj s
O
Py
H
(IV)
Uma solução de HCl concentrado (1,0 equiv.) foi adicionada a
uma solução resfriada (O0C) de (IV) (1,0 equivalentes) em 1,4-dioxano. A mistura resultante foi agitada a 40°C até que a reação fosse completada (monitorada por LC-MS, HPLC ou TLC). A mistura da reação foi neutralizada com NaHCO3 saturado (aquoso) e o dioxano foi evaporado. O resíduo foi dissolvido em DCM ou EtOAc, lavado com salmoura, secado e concentrado in vácuo. Produto bruto foi, se necessário, purificado através do uso de HPLC preparativo ou de cromatografia de coluna por vaporização instantânea.
Método Geral El:
(+)-DIPCI (para fornecer (IX)) ou (-)-DIPCI (para fornecer (X)) (1,5 equivalentes) em THF, sob atmosfera de argônio. A mistura da reação foi deixada lentamente alcançar a temperatura ambiente, durante a noite. O solvente foi evaporado, seguido pela adição de Et2O e dietanolamina (2,2 equivalentes). A mistura foi agitada até que a reação fosse completada (monitorada por LC-MS, HPLC ou TLC). O precipitado que foi formado foi
OH
(X)
(VIII) (1,0 equivalentes) em THF foram adicionados a O0C a precipitado, lavado com Et2O e o filtrado foi concentrado in vácuo. Produto bruto foi, se necessário, purificado usando HPLC preparativo ou através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea. Método Geral E2:
(R)-(+)-2-metil-CBS-oxazaborolidina (1M em tolueno, 0,10
1 equivalente) foi dissolvido em THF e resfriado a O0C. Foi adicionado complexo de sulfeto de borano-metila (2 M em THF, 1 equivalente), em gotas, e a mistura da reação foi agitada durante 1 hora. A mistura da reação foi resfriada a -IO0C e (VIII) (1 equivalente), dissolvido em THF foi adicionado, em gotas, durante 0,5 horas. A mistura resultante foi agitada durante 1 hora, ou até que a reação fosse completada, e a temperatura foi lentamente elevada para IO0C . HCl aquoso 1 M foi adicionado, de modo a resfriar subitamente a reação. NaHCOs aquoso saturado foi adicionado, até que o pH fosse de aproximadamente 8. O produto foi extraído com DCM. Os extratos orgânicos combinados foram secados com Na2SO4 e concentrados in vácuo, de um modo a fornecer (X)> O produto foi purificado, de modo opcional, através de cromatografia de coluna. Método Geral Fl:
çi
X
Py -~ Py
(IX) (W)
OH
Λ
Py ^ Py
W (Xii)
Trifenil fosfina (1,3 equivalentes) em THF foi adicionado a
O0C a NCS (1,3 equivalentes) em THF, sob atmosfera de argônio. A mistura resultante foi agitada, em temperatura ambiente, durante 30 minutos. (IX) ou (X) (1 equivalente) foi adicionada a O0C e a mistura da reação foi agitada, em temperatura ambiente, até que a reação estivesse completada (monitorada por LC-MS, HPLC ou TLC). O solvente foi evaporado, seguido pela adição de hexano e remoção do precipitado através de filtração. O filtrado foi concentrado in vácuo e o produto bruto foi, se necessário, purificado através do uso de HPLC preparativo ou de cromatografia de coluna por vaporização instantânea.
Método Geral F2:
acetato de etila. DMF (1, 5 equivalentes) foi adicionado e a mistura foi agitada, em temperatura ambiente, durante 10 minutos. A mistura da reação foi resfriada a O0C. (IX) ou (X) (1 equivalente) foi dissolvido em acetato de etila e adicionado, em gotas, durante 10 minutos. A mistura resultante foi agitada, em temperatura ambiente, durante a noite. Isopropanol (cerca de 0, 25 ml/mmol (IX) ou (X) foram adicionados. O precipitado foi filtrado e lavado com EtOAc. O filtrado foi concentrado de um modo a fornecer (XI) ou (XII). Método Geral G:
(1,0 equivalente) em DMSO). Uma vez cessada a efervescência, (III) (2-2,5 equivalentes) foi adicionado. A mistura da reação resultante foi agitada a 40°C, até que a reação fosse completada (monitorada por LC-MS, HPLC ou TLC). A purificação, se necessário, foi alcançada através do uso de HPLC preparativo ou através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea.
Cloreto cianúrico (0,6 equivalentes) foi dissolvido em
(li)
Boroidreto de sódio (1 a 2 equivalentes) foi adicionado a (II) Exemplo 1
5-ίΓΠ_S)-1 -C5-Cloropiridin-2-il)etil1tio 1 -7- i\( 1RV1 -(hidroximetil V3 -
metilbutillaminol Γ 1,3Itiazolr4,5-D1pirimidin-2(3HVona
a) 1 -(5-Cloropiridin-2-il)etanona
o
5-Cloropiridina-2-carbonitrila (10, 71 g, 77 mml) foi
dissolvido em éter dietílico (65 ml) e THF (35 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura foi resfriada até que a temperatura interna fosse de - 63°C. Brometo de metil magnésio (3 M em THF, 35 ml, 105 mmol) foi adicionado durante 30 minutos. A mistura da reação foi então deixada em agitação a -60°C durante 45 minutos e foi então aquecida à temperatura ambiente. 50 ml de THF foram então adicionados, de um modo a dissolver qualquer material precipitado. Após 1 hora em temperatura ambiente, a reação foi julgada completa através de HPLC. Ácido clorídrico 2 M (aquoso, 100 ml) foi adicionado e a mistura da reação foi agitada durante 4 horas. O pH foi ajustado para 7 com bicarbonato de sódio. As fases foram separadas e o produto extraído a partir da fase aquosa, duas vezes com DCM. Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de sódio e concentrados in vácuo. O produto foi purificado a través de cromatografia de coluna (gradiente de eluente heptano:acetato de etila) de modo a fornecer 7, 9 g (64% de rendimento do composto do título.
RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ ppm 8,62 (m, 1H); 7, 80 (m,l H); 2, 70 (s, 3 H). b) Π SV1 -(5-Cloropiridin-2-il)etanol
Cl
OH
O composto do título foi preparado através do método Geral
E2, a partir de l-(5-cloropiridin-2-il) etanona (780 mg, 5 mmol). A purificação através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea forneceu 695 mg (88% de rendimento) do composto do título com 92% ee.
(d, 1 H); 4, 87 (q, 1 H); 3, 87 (Br s, 1 H); 1, 47 (d, 3 H); MS (ESI) m/z 140 e 142 [M+ 1]+.
c) 5-Cloro-2-[( 1RV1 -cloroetillpiridina
a partir de (lS)-l-(5-cloropiridin—2-il) etanol (695 mg, 4, 41 mmol). O produto bruto foi usado no estágio seguinte, sem purificação.
RMN 1H (400 MHz, CDC13):5 ppm 8,46 (d, 1 H), 7, 64 (dd, 1 H), 7,41 (d, 1 H), 5,08 (q, 1 Η), 1, 80 (d, 3 H); MS (ESI) m/z 176 e 178 [ M + 1]+.
d) (2R)-2-r(2-Amino-5 -(IT1SV1 -(5-cloropiridin-2-iOetilltio}r 1,31 tiazoir4,5- dlpirimidin-7-illamino]-4-metilpentan-l-ol
RMN 1H (300 MHz, CDC13):8, 47 (s, 1H); 7, 65 (d, 1H); 7, 26
10
Cl
O composto do título foi preparado através do método geral F2
O composto do título foi preparado através do método geral A, a partir de (2R)-2-[ (2-amino-5-mercapto[l,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol (823 mg, 2,75 mml) e 5-cloro-2-[(lR)-l- cloroetil]piridina (< 4,4 mmol). A purificação através de cromatografia de coluna (gradiente de eluente DCM:metanol) fornece 350 mg (30% de rendimento do composto do título.
RMN 1H (400 MHz, CD3OD):ô ppm 8,49 (d, 1 H), 7,79 (dd, 1 H), 7,66 (d, 1H), 5,22 (q, 1 H), 4,46 (br s, 1 H), 3,40 -3,57 (m, 2 H), 1,66 - 1,78 (m, 4 H), 1,40-1,61 (m, 2 H), 0,93 -1,03 (m, 6H); MS (ESI m/z 439 e 441 [M + 1]+.
e) (2R)-2-IY2-Cloro-5- (IY2-Cloro-5- (IY1S)-1 -(5-cloropiridin-2-il)etilltio IΓ L3J. tiazol[4,5-dlpirimidin-7-il)aminol-4-metilpentan-l-ol
O composto do título foi preparado através do método geral B, a partir de (2R)-2-[(2-amino-5-{[(IS)-I-(5-cloropiridin-2-
il)etil]tio}[l,3]tiazol[4,5-d]pirimidin-7-il)amino]-4-metilpentan-l-ol (340 mg, 0,77 mmol).
MS (ESI) m/z 458 e 460 [M + 1]+. f) (2R)-2-Γ(5-{T(IS)-I-(5-Cloropiridin-2-il)etilltio>-2-metóxiΓ 1.31 tiazoir4,5^ dlpirimidin-7-il)aminol-4-metilpentan-1 -ol
O composto do título foi preparado a partir de (2R)-2-[(2- cloro-5- {[(1S)-1 -(5-cloropiridin-2-il)etil]tio} [ 1,3]tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol a partir do estágio precedente, usando o método geral C, exceto pelo fato de que a mistura da reação foi aquecida a 5O0C, durante 1 hora. Após a reação ser completada, a mistura da reação foi diluída com água e o produto foi extraído com DCM (quatro vezes). Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de sódio e concentrados in vácuo, de um modo a fornecer o composto do título, que foi usado no estágio seguinte, sem purificação.
MS (ESI) m/z 453 e 455 [M + 1]+. g) 5 - (Γ(1 SV1 -(5-Cloropiridin-2-iDetilltio 1 -7- (\( 1R)-1 -(hidroximetin-3 - metilbutil]amino} [ 1,3]tiazolr4.,5-d~|pirimidin-2 (3H)-ona
O composto do título foi preparado a partir de (2R)-2-[(5- {[(1S)-1·-(5-cloropiridin-2-il)etil]tio} -2-metóxi [ 1,3]tiazol [4,5·-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol a partir do estágio precedente, usando o método geral D, exceto pelo fato de que a mistura da reação foi agitada a 5 O0C durante 2,5 horas e então em temperatura ambiente durante a noite. Após a reação ser completada, a mistura da reação foi diluída com salmoura e extraída com DCM (três vezes). Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de sódio e concentrados in vácuo.
O produto foi purificado através de cromatografia por vaporização instantânea (gradiente de eluente DCM:metanol) de um modo a fornecer um rendimento de 160 mg. A purificação adicional através de HPLC preparativo (Coluna:Chiracel OJ, eluente:etanol/heptano 30/70, fluxo: 12 ml/minuto) forneceu 82 mg do composto do título. RMN 1H (400 MHz, CD3OD):ô ppm8, 24 (d, 1 Η), 7,56 (dd, 1 Η), 7, 38 (d, 1 Η), 4,90 (q, 1 Η), 4,19 (br s, 1 H), 3,16 - 3,30 (m, 2 H), 1,39 - 1,51 (m, 4 Η), 1, 15 -1,34 (m, 2H), 0,68 - 0,76 (m, 6H); RMN 1H (DMSOd6) δ ppm 8, 24 (d, 1 H), 7, 56 (dd, 1 H), 7, 38 (d, 1 H), 4,90 (q, 1 H), 4, 19 (br s, 1 H), 3,16 - 3,30 (m, 2 H), 1,39-1,51 (m, 4 Η), 1, 15 - 1,34 (m, 2 H), 0,68 - 0,76 (M, 6H); RMN 1H (DMSOd6) δ ppm 12, 36 (br s, 1 H), 8,57 (d, 1 H), 7,86 (dd, 1 H); 7, 57 (d, 1H); 7, 23 (d, 1 H); 5, 03 (q, 1 H); 4, 69 (t, 1 H); 4, 29 (br s, 1 H); 3,40 - 3,25 (m, 2 Η), 1, 66 (d, 3 H), 1,63 - 1, 52 (m, 1 H); 1, 48 - 1,32 (m, 2 H), 0,88 (d, 3 H), 0,85 (d, 3 H); MS (ESI m/z 440 e 442 [ M + 1]+, 438 e 440 [ M-l]+. Exemplo 2
5- {\( 1S)-1 -(5 -Fluoropiridin-2-inetilltio 1 -7- {\( 1RV1 -(hidroximetil V3 - metilbutil]aminoj [1,3] tiazol[4,5-dlpirimidin-2(3 HVona
a) 1 -(5-Fluoropiridin-2-il)etanona
o
5-Fluoro-piridina-2-carbonitrila (29 g, 240 mmol) foi
dissolvido em THF (150 ml), sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura da reação foi resfriada a uma temperatura interna de -64°C. Brometo de metil magnésio (3M em THF, 105 ml, 315 mmol) foi adicionado durante 40 minutos. A mistura da reação foi agitada a -65°C durante 1,5 horas, e então ela foi aquecida à temperatura ambiente. THF (50 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada durante um período adicional de 3 horas. Ácido clorídrico 2 M (aquoso, 100 mL) foi adicionado até que a mistura estivesse ligeiramente ácida e a mistura da reação foi agitada, em temperatura ambiente, durante a noite. O bicarbonato de sódio foi então adicionado para neutralizar a mistura da reação. As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com DCM. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secados com sulfato de sódio e concentrados in vácuo. O produto bruto foi purificado através de cromatografia por vaporização instantânea, de um modo a fornecer 18 g (55% de rendimento) do composto do título.
RMN 1H (300 MHz, CDC13):8, 50 (m, 1 H); 8, 10 (m, 1H); 7,52 (m, 1 H); 2,70 (s, 3 H). b) (lS)-l-(5-Fluoropiridin-2-il) etanol
OH
O composto do título foi preparado através do método geral E2, a partir de l-(5-fluoropiridin-2-il) etanona (3, 18 g, 22, 9 mmol). A purificação através de cromatografia de coluna forneceu 2, 73 g (*4% de rendimento) do composto do título, com 84% ee.
RMN 1H (300 MHz, CDC13):8, 38 (m, 1 H); 7, 5-7, 2 (m, 2 H); 4, 89 (q, 1 H); 3, 9 (br s, 1 H); 1, 49 (d, 3 H). c) 2-IY1R)-1 -Cloroetill-5-fluoropiridina
α
O composto do título com 80% ee foi preparado através d método geral F2, a partir de (lS)-l-(5-fluoropiridin-2-il) etanol (720 mg, 5,1 mmol). O produto bruto foi usado no estágio seguinte sem purificação adicional. RMN 1H (300 MHz, CDC13):8, 44 -8,40 (m, 1 H); 7, 6 - 7, 4 (m, 2 H); 5, 16 (q, 1 Η), 1, 86 (d, 3 H).
d) (2R)-2-r(2-Amino-5-(r(lS)-l-(5-fluoropiridin-2-inetilltio> Γ1.31 tiazoir4,5- d]pirimidin-7-il)amino]-4-metilpentan-1 -ol
O composto do título foi preparado através do método geral A,
a partir de (2R)-2-[(2-amino-5-mercapto [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol (940 mg, 3,1 mmol) e 2-[(lR)-l-cloroetil]-5- fluoropiridina (0,81 g, 5,1 mmol). O produto foi purificado através de cromatografia por vaporização instantânea, de um modo a fornecer 0,75 g (56% de rendimento) do composto do título.
RMN 1H (400 MHz, DMSOd6) δ ppm 8,51 (d, 1 H), 7,98 (s, 2H), 7,65 (dt, 1 H); 7,58 (dd, 1 H), 6,88 (d, 1 H), 5, 12 (q, 1H); 4, 66 (t, 1 H); 4, 27 (br s, 1 H); 3,41 - 3,27 (m, 2 H), 1,66 (d, 3 Η), 1, 65 - 1, 55 (m, 1 H); 1, 48- 1,35 (m, 2 H), 0,88 (d, 3 H), 0,85 (d, 3 H); MS (ESI) m/z 423 [Μ + 1 ]+. e) (2R)-2-r(2-Cloro-5-(r(lS)-l-(5-fluoropiridin-2-inetilltio}ri,31 tiazoir4,5- d]pirimidin-7-il)amino]-4-metilpentan-1 -ol
O composto do título foi preparado usando o método geral B a partir de (2R)-2-[(2-amino-5-{ [(IS)-I-(5-fluoropiridin-2-il)etil]tio} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7-il)amino]-4-metilpentan-l-ol (750 mg, 1,77 mmol).
MS (ESI) m/z 442 e 444 [ M + 1]+. f) (2R)-2-[(5-{[(lS)-l-(5-fluoropiridin-2-il)etil]tio}-2-metóxi [1,3] tiazol[4,5- d]pirimidin-7-il)amino]-4-metilpentan-1 -ol
cloro-5- {[(1S)-1 -(5-fluoropiridin-2-il)etil]tio} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol a partir do estágio precedente usando o método geral C, exceto pelo fato de que a mistura da reação foi aquecida a 50°C durante 1,5 horas. Após a reação ser completada, a mistura da reação foi diluída com água e salmoura e o produto foi extraído com clorofórmio (três vezes). Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de magnésio e concentrados in vácuo de modo a fornecer o composto do título, que foi usado sem purificação.
g) 5- (ΓΠ S)-1 -(5-Fluoropiridin-2-il)etil]tio) -7- (\( 1R)-1 -Chidroximetil)^- metilbutil]amino|[l,31tiazoir4,5-d1pirimidin-2 (3H)-ona
O composto do título foi preparado a partir de (2R)-2-[(5- {[(1 S)-l-(5-fluoropiridin-2-il)etil]tio}-2-metóxi [1,3] tiazol[4,5-a]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol a partir do estágio precedente usando o método
O composto do título foi preparado a partir de (2R)-2-[(2-
MS (ESI) m/z 438 [M + 1]+. geral D, exceto que a mistura da reação foi agitada, a 50°C, durante 3 horas. Após a reação ser completada, a mistura foi diluída com salmoura e extraída com DCM (três vezes). Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de magnésio e concentrados in vácuo. O produto foi purificado através de cromatografia por vaporização instantânea (gradiente de eluente DCM:metanol). A purificação adicional através de HPLC (coluna Chiralcel OJ, eluente:etanol, fluxo:8 ml/minuto) forneceu 113 mg do composto do título.
(dt, 1H), 4,97 (q, 1 H), 4, 26 (br s, 1 H), 3,23 - 3,34 (M, 2 H), 1,44 - 1, 55 (m,
4 Η), 1, 19 - 1, 37 (m, 2 H), 0,75 (dd, 6 H); RMN 1H (DMSO-d6) δ ppm 12, 36 (br s, 1H), 8,52 (d, 1H), 7, 66 (dt, 1 H); 7,60 (dd, 1H), 7,23 (d, 1 H); 5, 07 (q, 1H); 4, 69 (t, 1 H); 4,30 (br s, 1 H); 3,40 -3, 26 (m, 2 Η), 1, 67 (d, 3 Η), 1, 64 - 1, 53 (m, 1 H); 1, 48 - 1,33 (m, 2 H), 0,88 (d, 3 H), 0,85 (d, 3 H); MS
(ESI) m/z 424 [Μ + 1 ]+. OK Exemplo3
- (Γ1 -(3 -Fluoropiridin-4-il)etil1tio} -7- (IY1R)-1 -(hidroximetil)-3- metilbutil]amino} [1,3]tiazol |"4,5-dlpirimidin-2(3H)-ona
RMN 1H (CD3OD):δ ppm 8, 19 (d, 1 H), 7,46 (dd, 1H), 7,36
a) 4-(l-Cloroetil)-3-fluoropiridina
20
l-(3-fluoropiridin-4-il)etanol (0,8 g, 5,7 mmol) foi tratado com cloreto de tionila (5 ml) e a mistura resultante foi aquecida a 80°C durante 2 horas. Água (10 ml) e bicarbonato de sódio saturado (aquoso, 10 ml) foram adicionados. O produto foi extraído com DCM (três vezes). Os extratos combinados foram lavados com salmoura, secados com sulfato de sódio e concentrados in vácuo. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea (gradiente de eluente heptano:acetato de etila) de modo a fornecer 0, 36 g (39% de rendimento) do composto do título.
RMN 1H (300 MHz, CDCl3) 8, 45 (m, 2 H), 7,50 (m, 1 H), 5,34 (q, 1 Η), 1, 83 (d, 3 H).
b) (2R)-2-r(2-Amino-5-{ri-(3-fluoropiridin-4-il)etil1tio>ri,31 tiazoir4,5- dlpirimidin-7-il)amino"|-4-metilpentan-1 -ol
O composto do título (370 mg, 47% de rendimento) foi preparado usando o método geral A, a partir de (2R)-2-[(2-amino-5- mercapto[[l ,3]tiazol[4,5-d]pirimidin-7-il)amino-4-metilpentan-l-ol (560 mg, 1, 87 mmol).
MS (ESI) m/z 423 [ M + 1]+.
ç)_(2R)-2-r(2-Cloro-5-{ri-(3-fluoropiridin-4-il)etilltioUK31tiazoir4,5-
dlpirimidin-7-il)aminol-4-metilpentan-1 -ol
O composto do título foi preparado usando o método geral B, a partir de (2R)-2-[(2-amino-5-{[l-(3-fluoropiridin-4-il)etil]tio}[l,3]tiazol[4,5- d]pirimidin-7-il)amino]-4-metilpentan-l-ol (370 mg, 0, 84 mmol). d) (2RV2-[(5-(Γ1 -(3 -Fluoropiridin-4-il)etil1tio} -2-metóxi Π,31ϋαζο1Γ4,5- dlpirimidin-7-il)amino1-4-metilpentan-1 -ol
γ OH NH
O composto do título foi preparado a partir de (2R)-2-[(2- cloro-5-{[l-(3-fluoropiridin-4-il)etil]tio } [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol a partir do estágio precedente usando o método geral C, exceto que a mistura da reação foi aquecida a 50°C durante 1,5 horas. Após a reação ser completada, a mistura foi diluída com água e salmoura (1:1) e o produto foi extraído com DCM (duas vezes). O pH da fase aquosa foi então ajustado para 7 com cloreto de amônio e o produto foi extraído com DCM (duas vezes). Os extratos combinados foram secados com sulfato de sódio e concentrados in vácuo, de um modo a fornecer o composto do título.
e)_5- {Γ1 -(3 -Fluoropiridin-4-il)etil]tio} -7- {\(\ R)-1 -(hidroximetil>3 -
metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona
Y OH NH
O composto do título foi preparado a partir de (2R)-2-[(5- {[ 1 - (3-fluoropiridin-4-il)etil]tio}-2-metóxi [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol a partir do estágio precedente usando o método geral D, exceto que a mistura da reação foi agitada a 50°C durante 2 horas. Após a reação ser completada, a mistura da reação foi diluída com bicarbonato de sódio saturado aquoso e água (1:1) e extraída com DCM (três vezes). Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de sódio e concentrados in vácuo. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea (gradiente de eluente heptano:acetato de etila) de um modo a fornecer o composto do título como uma mistura de diastereômeros (194 mg).
Exemplo 4
- {IYl S V1 -(3 -Fluoropiridin-2-il)etil1tio) -7- (IY1RV1 -(hidroximetil )-3 - (metilbutilIaminoiriJI tiazoir4,5-d1pirimidin-2 (3HVona
em éter dietílico em temperatura ambiente, sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura da reação foi resfriada até que a temperatura interna foi de -66°C . Butil lítio (2,5 M em hexanos, 26 ml, 65 mmol) foi adicionado, em gotas, 0, 5 hora. A mistura da reação resultante foi deixada a -65°C durante 1 hora. N,N- dimetilacetamida (6,5 ml, 70 mmol) foi adicionado durante 10 minutos e a
r
mistura da reação foi agitada a -65°C durante 2 horas. Acido clorídrico aquoso 1 M (50 ml) foi adicionado e a mistura foi aquecida à temperatura ambiente. O pH foi ajustado para 7 com ácido clorídrico adicional. A fase aquosa foi extraída com éter dietílico, três vezes. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secadas com sulfato de sódio e concentradas in vácuo. A purificação através de cromatografia de coluna (gradiente de eluente heptano:éter dietílico) forneceu 4,6 g (34 % de rendimento) do composto do
MS (ESI) m/z 424 [M + 1]+.
a) 1 -(6-Bromo-3-fluoro-piridin-2-il)etanona
o
2-Bromo-5-fluoro-piridina (11 g, 62, 5 mmol) foi dissolvido título.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6):8, 0 - 7, 8 (m, 2 H); 2, 57 (s, 3
H); MS (ESI) m/z 218 e 220 [ M + 1]+.
b) (1 S)-l-(6-Bromo-3-fluoro-piridin-2-il)etanol
OH
O composto do título foi preparado usando o método geral E2,
a partir de l-(6-bromo-3-fluoro-piridin-2-il) etanona (1,76 g, 8,19 mmol). O produto foi purificado através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea (gradiente de eluente:heptano: acetato de etila) de um modo a fornecer 1, 31 g (73% de rendimento) do composto do título com 80% ee. RMN 1H (300 MHz, CDCl3) 7, 38 (m, 1H); 7, 26 (m, 1 H); 5,
06 (q, 1 H); 3, 38 (br s, 1 H); 1, 47 (d, 3 H); MS (ESI) m/z 220 e 222 [M +
I]+, m/z 202 [M-H20]+.
c) (lS)-l-(3-Fluoro-piridin-2-il) etanol
OH
(lS)-l-(6-Bromo-3-fluoro-piridin-2-il) etanol(l,3 g, 5,9 mmol) trietilamina (1,6 ml, 11,5 mmol) e paládio sobre carbono (0,64 g, 0, 34 mmol) foram misturados em DCM (25 ml). O frasco foi evacuado/enchido com gás de hidrogênio, em 4 ciclos, e então deixado em pressão de gás de hidrogênio de 2,5 atm., em temperatura ambiente, durante 24 horas. A mistura foi filtrada e o sólido lavado com DCM. O filtrado foi lavado com água e salmoura e secado com sulfato de sódio e concentrado in vácuo. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea (gradiente de eluente DCM:metanol) de um modo a fornecer 0,54 g (65% de rendimento) do composto do título. d) 2-((R)-1 -CloroetilV3-fluoro-piridina
èi
O composto do título (0,24 g) foi preparado usando o método geral F2, a partir de (IS)—l-(3-fluoro-piridin-2-il) etanol (254 mg, 1,8 mmol).
RMN 1H (300 MHz, CDC13):8,46 (m, 1 H):7,47 (m, 1 H); 7,34
(m, 1 H); 5,48 (q, 1 Η), 1, 94 (d, 3 H); MS (ESI) m/z 160 e 162 [M + 1]+.
e) (2R)-2-IY2-Amino-5-(T(IS)-I-(3-fluoropiridin-2-il)etil1tioIΓ1,31 tiazoir4,5- d]pirimidin-7-il)amino-4-metilpentan-1 -oi.
O composto do título foi preparado usando o método geral A, a partir de (2R)-2-[ (2-amino-5-mercapto [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol (348 mg, 1,16 mmol) e 2-((R)-l-cloroetil)-3- fluoro-piridina (240 mg, 1,5 mmol). A purificação através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea (gradiente de eluente DCMrmetanol) resultou em 190 mg (47% de rendimento) do composto do título com um excesso diastereomérico de 60%.
RMN 1H (400 MHz, DMSO -d6) δ ppm 8, 40 (dt, 1H), 7, 98 (s, 2H), 7, 70 (m, 1 H), 7, 40 (m, 1 H); 6, 92 (d, 1 H); 5, 45 (q, 1 H); 4, 65 (t, 1H); 4, 27 (br s, 1 H); 3,45 - 3,30 (m, 2 Η), 1, 69 (d, 3 Η), 1, 66 - 1, 58 (m, 1 Η), 1, 50 -1, 35 (m, 2 H), 0,88 (d, 3 H), 0, 85 (d, 3 H); MS (ESI m/z 423 [ M + 1]+. f) (2R)-2-r(2-Cloro-5-{r(lSVl-(3-fluoropirídin-2-inetilltioHl,31tiazoir4,5- d]pirimidin-7-il)aminol-4-metilpentan-l-ol
a partir de (2R)-2-[(2-amino-5-{[(lS)-l-(3-fluoropiridin-2-il)(etil]tio}[l,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7-il)amino]-4-metilpentan-l-ol (135 mg, 0,32 mmol).
g) (2RV 2- IY5- {IY1S V1 -(3 -Fluoropiridin-2-il)etintio} -2-metóxi Γ1,31 tiazoir4,5-d]pirimidin-7-il)aminol-4-metilpentan-l-ol
cloro-5-{[ (IS)-I-(3-fluoropiridin-2-il)etil]tio} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]-4-metilpentan-l-ol a partir do próximo estágio usando o método geral C, exceto que a mistura da reação foi aquecida a 50°C, durante 1,5 horas. Após a reação ser completada, a mistura da reação foi diluída com água e salmoura (2:1) e o produto foi extraído com clorofórmio (três vezes). Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de magnésio e concentrados in vácuo, de um modo a fornecer o composto do título.
O composto do título foi preparado usando o método Geral B,
MS (ESI) m/z 442 e 444 [ M + 1]+.
O composto do título foi preparado a partir de (2R)-2-[ (2-
MS (ESI) m/z 438 [M + 1]+. h) 5- (Γ( 1SV1 -(3-fluoropiridin-2-il)etilltio I -7- {\( 1RV1 -ChidroximetiD-S - metilbutillamino) Γ1,31 tiazoH"4,5-d1pirimidin-2 (3HVona
{[(IS)-I-(3-fluoropiridin-2-il)etil]tio} -2-metóxi [l,3]tiazol[4,5-d]pirimidin- 7-il)amino]-4-metilpentan-l-ol usando o método geral D, exceto que a mistura da reação foi aquecida a 50°C durante 1,5 horas. Após a reação ser completada, a mistura da reação foi diluída com salmoura e extraída com DCM (três vezes). Os extratos orgânicos combinados foram secados com sulfato de magnésio e concentrados in vácuo. O produto foi purificado através de cromatografia de coluna (gradiente de eluente DCM:metanol) seguido por HPLC preparativo, de um modo a fornecer 20 mg do composto do título.
7,72 (m, 1H); 7,42 (m, 1 H); 7, 27 (br, s, 1 H); 5, 43 (q, 1H); 4, 67 (t, 1 H); 4, (br s, 1 H); 3,44 - 3,30 (m, 2 Η), 1, 70 (d, 3 Η), 1, 65 - 1, 55 (m, 1 H); 1, 52- 1,32 (M, 2 H), 0,89 (d, 3 H), 0,86 (d, 3 H); MS (ESI) m/z 424 [ M + 1]+. Exemplo 5
2- { (1SV 1- IY7- {IY1RV1 -(hidroximetil V3 -metilbutill amino 1 -2-oxo-2,3 - diidro|"l,3] tiazol[4,5-dlpirimidin—5-il) tio letillisonicotinonitrila
O composto do título foi preparado a partir de (2R)-2-[(5-
RMN 1H (DMSOd6) δ ppm 12, 37 (br s, 1H), 8,41 (dt, 1 H), a) 2-(YSM-hidróxi-etil) isoniconitinonitrila
O composto do título (1,13 g, 7,63 mmol) foi preparado de acordo com o Método Geral El, a partir de 2-acetil-isnicotinonitrila (1,42 g, 9,72 mmol) e (-) DIPCI (4,67 g, 14,57 mmol).
RMN 1 H (500 MHz, CDCl3) δ 8, 72 (d, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,44 (dd, 1 H), 4, 96 (q, 1 Η), 1, 54 (d, 3 H). b) 2-(YR)-1 -Cloro-etiD-isonicotinonitrila
cr J^Jj
O composto do título (32,2 mg, 0,19 mmol) foi preparado de acordo com o método geral Fl, a partir de 2-((S) -1-hidróxi-etil)- isonicotinonitrila (400 mg, 2, 7 mmol).
RMN 1H (500 MHz, CDCl3) δ 8, 74 (d, 1 H), 7,76 (s, 1 H), 7,46 (dd, 1 H), 5, 16 (q, 1H), 1, 88 (d, 3 H).
c) (2R)-2-{2-Cloro-5-r2-cloro-7-('(,lR)-l-hidroximetil-3-metil-butilamino)- tiazolf4,5-d1pirimidin-5-ildissulfanil]4iazol[4,5-d1pirimidin-7-ilamin^ metil-pentan-1 -ol.
Nitrito de sódio (5,19 g, 75 mmol) em água (25 ml) foi adicionado, em gotas, a 0°C a (2 R)-2-[[2-amino-5-mercapto [1,3] tiazol[4,5- a]pirimidin-7-il]amino]-4-metilpentan-l-ol (7,50 g, 25 mmol) em ácido clorídrico concentrado (150 ml) e acetonitrila (150 ml). A mistura da reação foi agitada durante 18 horas a de 0 -5°C, e então despejada sobre gelo (500 ml), e extraída com acetato de etila. Qualquer sólido remanescente foi filtrado. As fases orgânicas combinadas foram lavadas de um modo seqüencial com salmoura e com uma solução de bicarbonato de sódio aquosa saturada. A fase orgânica foi secada e evaporada e o sólido previamente filtrado foi adicionado a esta. O sólido total foi suspenso em acetato de etila, após o que a filtração forneceu o composto do título (6,3 g, 80% de rendimento).
4 H), 1,40 (m, 4 H), 1,21 (m, 2 H), 0,68 (d, 6H), 0, 51 (d, 6H); MS (ESI m/z 635 [M+ 1]+.
d) (2R)-2-Ι5-Γ7 (YlRH-Hidroximetil-3-metil-butilamino)-2-met<^ tiazoir4,5-dlpirimidin-5-ildissulfanill-2-metóxi-tiazoir4,5-d1pirimidin-7- ilamino|-4-metil-pentan-1 -ol
foi adicionado a O0C a uma solução de (2R)-2-{2-cloro-5-[2-cloro-7-((lR)-l- hidroximetil-3-metil-butilamino)-tiazol [4,5-d]pirimidin-5-ildissulfanil]-tiazol [ 4,5-d]pirimidin-7-ilamino}-4-metil-pentan-l-ol (3,0 g, 4,7 mmol) em metanol (200 ml). A reação foi mantida em de 0 -5 0C, durante 18 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo absorvido em metanol/acetato de etila (1:1). Esta solução foi rapidamente cromatografada (eluente acetato de etila) de um modo a prover o composto do título (2,0 g, 68% de rendimento).
10
RMN 1H (DMSOd6) δ 8, 25 (d, 2 H), 4, 19 (m, 2 H), 3,35 (m,
Hidróxido de potássio (0,53 g, 9,4 mmol) em metanol (5 ml)
MS (ESI m/z 627 [M+ 1]+.
25 e) 5-Γ7- {Γ( 1R)-1 -(Hidroximetiiy3-metilbutillamino I -Γ 1,31 tiazoir4,5- d1pirimidin-2(3H)-ona-5-ildissulfanil1-7- (IY 1RV1 -Qiidroximetil)-3- metilbutillaminoiri.,31 tiazoir4,5-dlpirimidin-2(3 HVona
(20 ml) foi adicionada a uma solução de (2R)-2-{5-[7-((lR)-l-hidroximetil-3- metil-butilamino)-2-metóxi4iazol[4,5-d]pirimidin-5-ildissulfanil]-2-metóxi- tiazol[4,5-d]pirimidin-7-ilamino}-4-metil-pentan-l-ol (1,5 g, 2,4 mmol) em 1,4-dioxano (20 ml). A solução foi então agitada a 45°C, durante 18 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo foi absorvido em acetato de etila. Qualquer resíduo não dissolvido foi coletado através de filtração. O filtrado foi submetido à cromatografia de coluna por vaporização instantânea (eluente acetato de etila:metanol 95:5). O resíduo sólido e o produto coletado a partir da cromatografia foram colocados em um reservatório juntos, de um modo a fornecer o composto do título (600 mg, 42 % de rendimento).
H), 4, 17 (br s, 2 Η), 1, 48 - 1,31 (m, 4 Η), 1, 25 - 1,14 (M, 2 H), 0, 72 (d, 6 H), 0,56 (d, 6 H); MS (ESI) m/z 599 [Μ + 1 ]+.
f) 2- {(1S)-1 - Γ(7- {IY1R)-1 -(Hidroximetil V3 -metilbutill amino) -2-oxo-2.3 - diidrofl ,3] tiazoir4,5-dlpirimidin-5-il)tioletil}isonicotinonitrila
Uma mistura de ácido clorídrico concentrado (20 ml) e água
RMN 1H (DMSOd6) δ 12, 45 (s, 2 H), 7,33 (d, 2 H), 4,62 (t, 2
O composto do título foi preparado de acordo com o método geral G, com a adição de DIPEA (2 equivalentes). A partir de 5,5'-ditiobis [7- {[(1R)-1 -(hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2- (3H)-ona ] (64 mg, 0,096 mmol) e 2-((R)-l-cloro-etil) isonicotinonitrila (32 mg, 0,192 mmol, o composto do título foi obtido como uma mistura diastereomérica. A purificação através de HPLC preparativo (Coluna:Kromasil-C18) forneceu 15 mg (36% de rendimento do composto do título com 98 % de.
7,56 (d, 1 H), 5, 17 (q, 1 H), 4,4 (s, 1 H), 3,40 - 3,52 (m, 2 Η), 1, 72 (d, 3 H), 1, 60 - 1, 71 (m, 1 Η), 1, 38 -1, 54 (M, 2 H), 0, 90 -0, 98 (m, 6H); MS (ESI+) m/z 431 [ M + H]+. Exemplo 6
5- {ΓΠ SV1 -(6-Cloropiridin-3-i0etil"ltio I -7- (Γ( 1R)-1 - (hidroximetiObutillaminoHl.,31 tiazoir4,5-dlpirimidin - 2 (3H) - ona
a) (2R)-2-(r 2-Amino-5-(benziltio)ri,31 tiazoir 4,5-dlpirimidin-7-illamino} pentan-1 -ol
RMN 1H (500 MHz, CD3OD) δ 8, 71 (d, 1 H), 7,92 (s, 1 H),
5-(Benziltio)-7-cloro[l,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2-amina (6,0 g, 19,4 mmol) foi dissolvido em NMP (30 ml). DIPEA (8, 4 ml, 48,5 mmol) e 2-amino-(2 R)-l-pentanol (3,5 g, 33, 9 mmol) foram adicionados e a mistura foi aquecida a IlO0C, durante 4 dias. Após o resfriamento à temperatura ambiente, a mistura foi despejada em água (200 ml). O produto precipitado foi coletado através de filtração, lavado com água e usado no próximo estágio sem purificação adicional (7, 0 g, 97% de rendimento).
b) (2 R)-2-[(2-Amino-5-mercapto Γ1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7- il)amino]pentan-1 -ol
de gelo seco-etanol e imerso em um banho de resfriamento de gelo seco- etanol. Amônia (250 ml) foi condensada ao interior do frasco, seguida pela adição de (2 R)-2-{[2-amino-5-(benziltio)[l,3] tiazol[ 4,5-d]pirimidin-7- il]amino} pentan-l-ol (6, 8 g, 18,1 mmol). A mistura resultante foi deixada aquecer a -33 0C e o metal de sódio foi adicionado em pequenas peças, até que uma cor azul aparecesse e persistisse durante 30 segundos. A reação foi então subitamente resfriada através da adição de uma colher cheia de cloreto de amônio. A amônia foi evaporada e água (250 ml) foi adicionada ao resíduo. A mistura resultante foi neutralizada com ácido clorídrico 1 M (aquoso. O produto precipitado foi coletado através de filtração, lavado com água e secado in vácuo,de um modo a fornecer 4, 15 g (80% de rendimento) do composto do título.
MS (ESI+) m/z 376 [M + H]+.
10
Um frasco de base redonda foi equipado com um condensador
MS (ESI+)m/z 286 [M + H]+. c) (2R)-2-{2-Cloro-5-r2-cloro-7-(Y 1R)-1 -hidroximetilbutilaminoVtiazol Γ4.5- dlpirimidin-5-ildissulfanill-tiazoir 4.5-d1pirimidin-7-ilaminol -pentan-1 -ol
(2 R)-2-[(2-Amino-5-mercapto [l,3]tiazol [4,5-d]pirimidin-7- il)amino]pentan-l-ol (4,0 g, 14 mmol) foi dissolvido em acetonitrila (100 ml) e ácido clorídrico concentrado (150 ml). Nitrito de sódio (1,93 g, 28 mml) foi dissolvido em água (10 ml) e adicionado a 0°C. A mistura da reação foi deixada a 0°C durante 2 dias, até que a reação estivesse completa por LCMS. A mistura da reação foi despejada sobre gelo e o produto precipitado foi coletado através de filtração. O sólido foi secado in vácuo, de um modo a fornecer 3,3 g (78% de rendimento) do composto do título.
RMN 1H (DMSOd6) δ 8, 27 (d, 1 H), 4,32 -3, 81 (m, 2 H), 3, 50 -3,23 (m, 2 Η), 1, 37 -1, 19 (m, 2 Η), 1, 10 -0, 93 (m, 1 H), 0, 94 -0,78 (m, 1 H), 0, 49 (t, 3 H); MS (ESI m/z 607 [M + 1]+.
d) (2RV 2- {5 - Γ7-(Υ 1 RVHidroximetilbutilamino )-2-metóxi-tiazol Γ 4,5- dlpirimidin-5-ildissulfanill-2-metóxi-tiazoir4,5-dlpirimidin-7-ilamino}- pentan-1 -ol
Hidróxido de potássio (495 mg, 8, 8 mmol) foi adicionado a (2 R)-2- {2-cloro-5 - [2-cloro-7-(( 1R)-1 -hidroximetilbutilamino)-tiazol [4,5 - d]pirimidin-5-ildissulfanil]-tiazol[4,5-d]pirimidin-7-ilamino}pentan-l-ol (2,68 g, 4,41 mmol) em metanol (200 ml) a 0°C . A reação foi agitada a 0°C durante a noite e então o metanol foi evaporado. O resíduo foi despejado em água e o precipitado resultante foi coletado através de filtração. O produto úmido bruto foi usado no próximo estágio sem qualquer purificação adicional.
MS (ESI) m/z 599 [ M + 1]+. e) 5-Γ7-(Γ(IRVl-(Hidroximetiniaminol-Π,31 tiazoir4,5-dlpirimidin-2(3H)- ona-5-ildissulfonill-7- (IYl R)-1 -(hidroximetilbutillamino} Γ1,31tiazol Γ4,5- dlpirimidin-2(3H)-ona
(2R)-2- {5-[7-(( 1R)-1 -hidroximetilbutilamino)-2-metóxi- tiazol[4,5-d]pirimidin-5-ildissulfanil]-2-metóxi-tiazol[4,5-d]pirimidin-7- ilamino} pentan-l-ol bruto (4, 41 mmol) a partir do estágio precedente foi dissolvido em 1,4-dioxano (100 ml). Ácido clorídrico concentrado (2ml) e água (2 ml) foram adicionados e a mistura resultante foi agitada a 45°C durante a noite. O solvente foi evaporado in vácuo e o produto foi precipitado através da adição de água. O precipitado foi coletado através de filtração e lavado com água. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna por vaporização instantânea (gradiente de eluente DCM: acetato de etila) de um modo a fornecer 1,5 g (59% de rendimento ao longo de dois estágios) do composto do título.
RMN 1H (DMSOd6) δ 12, 46 (s, 1H), 7,33 (d, 1 H), 4, 61 (t, 1 H), 4, 10 (br. s., 1 H), 3,35 (t, 2 Η), 1, 37 -1,20 (m, 2 H), 1,13 - 1,10 (m, 1 H), 0,96 -0,82 (m, 1 H), 0,59 (t, 3 H); MS (ESI) m/z 571 [M + 1]+. f) (1SV1 -(6-Cloropiridin-3-il)etanol
O composto do título foi preparado de acordo com o método geral El, usando l-(6-cloropiridin-3-il) etanona (0,80 g, 5,14 mmol), fornecendo 0,71 g (88% de rendimento) do composto do título.
RMN 1H (CDCl3) δ ppm 8,40 -8,28 (m, 1 H), 7,75 -7,63 (m, 1 H), 7,35 -7,24 (m, 1 H), 5,04 -4,79 (m, 1 Η), 1, 63 -1,45 (m, 3 H); MS (ESI) m/z 158 e 160 [Μ + 1].
g) 2-Cloro-5-[(lR)-l-cloroetil]piridina
O composto do título foi preparado de acordo com o método geral Fl usando (1 S)-l-(6-cloropiridin-3-il)etanol (0,20 g, 1,27 mmol), fornecendo 0,16 g (72% de rendimento) do composto do título.
RMN Ή (CDCl3) δ ppm 8,45 - 8,35 (m, 1 H), 7,79 -7,70 (m, 1 H), 7,39 -7,29 (m, 1 H), 5,07 (q, 1 H), 1,85 - 1,78 (m, 3 H); MS (ESI m/z 176 e 178 [M + 1]+.
h)_5- {rei SV1 -(6-Cloropiridin-3 -iOetilltio} -7- {ΓΠ RV1 -
(hidroximetil)butillaminoIi 1,3] tiazol[4,5-dlpirimidin-2(3H)-ona
O composto do título foi preparado de acordo com o método geral G usando 5-[7-{[(lR)-l-(hidroximetil)]amino}-[l,3] tiazol[4,5- d]pirimidin-2(3H)-ona-5-ildissulfanil]7- ([(IR)-I-
(hidroximetilbutil]amino}[l,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2 (3H)-ona (0,10 g, 0,175 mmol), 2-cloro-50-[(lR)-l-cloroetil]piridina (0,069 g, 0, 39 mmol) e boroidreto de sódio (0,040 g, 1,05 mmol), fornecendo 0,055 g (37% de rendimento) do composto do título.
RMN Ή (CDCl3) δ ppm 8,52 - 8, 38 (m, 1 H), 7,87 - 7, 72 (m, 1 Η), 7,30 - 7, 26 (m, 1 Η), 4,91 - 4,81 (m, 1 Η), 4,74 -4, 65 (m, 1 Η), 4,29 - 4, 17 (m, 1 Η), 3, 68 - 3, 52 (m, 2 Η), 1, 69 -1, 64 (m, 3 Η), 1, 56 -1, 46 (m, 2 Η), 1, 46 - 1,32 (m, 2 Η), 0,988 -0,90 (m, 3 H); MS (ESI) m/z 426 e 428 [ M + 1]+ .
Exemplo 7:
5-ΙΙΥ1_S)-1 -(6-Cloropiridin-3 -il)etilltio) -7- Γ Γ( IRVl-
(hidroximetil)butil1(metil)aminol Γ1,31tiazoir4,5-dlpirimidin-2(3H)-ona
a) N-(Etoxicarbonil)-D-norvalina
p-^y
NH
,OH O
D-norvalina (10,0 g, 85,3 mmol) foi dissolvido em hidróxido de sódio aquoso (4 M, 25 ml). Cloroformiato de etila (10,6 ml, 111 mmol) e hidróxido de sódio aquoso (4 M, 25 ml) foi adicionado, durante 15 minutos, a O0C . A mistura da reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada nesta temperatura durante 4 horas. A mistura da reação foi lavada com éter dietílico três vezes e então acidificada com ácido clorídrico (2 Μ). O produto foi extraído com éster dietílico três vezes. As fases orgânicas combinadas foram secadas com sulfato de magnésio e concentradas in vácuo de um modo a fornecer o composto do título em um rendimento quantitativo.
RMN 1H (CDCl3) δ ppm 6,43 (br s, 1 H), 5, 22 (d, 1 H), 4, 37 (q, 1 H), 4, 13 (q, 2H), 1, 84 (m, 1 Η), 1, 68 (sexteto, 1 H), 1,42 (sexteto, 1 H), 1, 25 (t, 3 H), 0, 95 (t, 3 H); MS (CI) 144 (100%), 190 [M + 1]+. b) (2 RV2-(Metilamino)pentan-1 -ol
Hidreto de alumínio e lítio (6, 5 g, 171 mmol) foi suspenso em THF, a 0°C, sob uma atmosfera de nitrogênio. N-(etoxicarbonil)-D-norvalina foi dissolvido em THF e adicionado, em gotas, a O0C. A mistura da reação foi refluída durante a noite. Após o resfriamento à temperatura ambiente, sulfato de sódio aquoso saturado foi adicionado de modo a formar uma suspensão. A mistura resultante foi filtrada através de Celite. O sólido foi lavado com DCM até que todo o produto tivesse sido extraído. O filtrado combinado foi secado com sulfato de sódio e concentrado in vácuo. A destilação bulbo a bulbo a 0,1 mbar coletando a fração entre 75 -85°C forneceu 7,1 g (71% de rendimento) do composto do título.
RMN 1H (CDCl3) 3, 63 (dd, 1 H); 3, 30 (dd, 1 H); 2, 51 (m, 1 H); 2,41 (s, 3 H); 2, 09 (br s, 2 H); 1, 50-1, 28 (m, 4 H); 0,93 (t, 3 H); MS (CI) 86(100%), 118 [ M + 1]+.
c) (2R)-1 - (r2-Amino-5-(benziltio)r 1,31 tiazoir4,5-d1pirimidin-7- il(metil)amino} pentan-l-ol
Cu
/"Ti N HjN-4 Il I
5-(Benziltio)-7-cloro [1,3] tiazol [4, 5-d]pirimidin-2-amina (6,0 g, 19,4 mmol) foi dissolvido em NMP (25 ml). DIPEA (6, 8 ml, 38,8 mmol) e (2R)-2-(metilamino)-pentan-l-ol (3,4 g, 29,1 mmol) foram adicionados e a mistura foi aquecida, a 120°C, durante 3 dias. (2R)-2- (metilamino) pentan-l-ol (350 mg, 2, 99 mmol) adicional e DIPEA (lml, 5,74 mmoL) foram adicionados e a mistura da reação foi aquecida, durante 6 horas, a 120°C. Após o resfriamento à temperatura ambiente, a mistura foi despejada em gelo. O produto precipitado foi coletado através de filtração e purificado através de cromatografia de coluna (gradiente de eluente DCMracetato de etila) de um modo a fornecer o composto do título (5,74 g, 76% de rendimento).
RMN 1H (DMSOd6); 7, 98 (br s, 2 H), 7,41 (m, 2 H), 7, 29 (m, 2 H), 7, 22 (m, 1 H), 4, 73 (t, 1 H), 4,54 (br s, 1 H), 4,33 (m, 2 H), 3,55 - 3,40 (M, 2 H), 3,01 (s, 3 Η), 1, 52 - 1,44 (m, 2 Η), 1, 25 - 1,10 (m, 2 H), 0,84 (t, 3 H); MS (ESI) m/z 390 [ M + 1]+.
d) (2R)-2-r(2-Amino-5-mercapto Γ1,31 tiazoir4,5-dlpirimidin-7-iD (metiDaminolpentan-i-ol
H
Um frasco de fundo redondo foi equipado com um condensador de gelo seco-etanol e imerso em um banho de resfriamento de gelo seco-etanol. Amônia (200 ml) foi condensada ao interior do frasco, seguida pela adição de (2R)-2-{[ 2-amino-5-(benziltio)[l,3] tiazol [4,5-
d]pirimidin-7-il (metil)amino} pentan-l-ol (5,43 g, 13,9 mmol). A mistura resultante foi deixada aquecer a -33°C e metal de sódio foi adicionado em peças pequenas até que uma cor azul aparecesse e persistisse durante 30 segundos. A reação foi então subitamente resfriada pela adição de uma colher de cloreto de amônio sólido. A amônia foi evaporada e água (250 ml) foi adicionada ao resíduo. A mistura resultante foi neutralizada com ácido clorídrico I M (aquoso). O produto precipitado foi coletado através de filtração, lavado com água e acetonitrila e secado in vacuo, de um modo a fornecer 3, 38 g (81% de rendimento) do composto do título.
RMN 1H (DMSOd6) 12,81 (br s, 1 H); 8,45 (br s, 2 H), 4,84 (br s, 1 H), 3,55 - 3,40 (m, 2 H), 3,02 (s, 3 Η), 1, 48 (M, 2 H), 1,21 (m, 2 H), 0,87 (t, 3 H); MS (ESI) m/z 300 [ M + 1]+. e) (2R, 2’RV2.2’-(Ditiobis r(2-clorori,3-tiazoir4,5-d1pirimidina-5,7-diila) (metilimino)l I dipentan-1 -ol
(2R)-2-[(2-Amino-5-mercapto[l,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-7-il) (metil)amino]pentan-l-ol (1,0 g, 3,34 mmol) foi dissolvido em acetonitrila (25 ml) e ácido clorídrico concentrado (40 ml). Nitrito de sódio (461 mg, 6,67 mmol) foi dissolvido em água (2 ml) e adicionado a 0°C. A mistura da reação foi mantida a O0C durante três dias. A mistura da reação foi despejada sobre gelo e o produto precipitado foi coletado através de filtração e lavado com água. A secagem in vacuo forneceu 800 mg do composto do título (75% de rendimento).
MS (ESI) m/z 635 e 637 [M + 1]+.
f) (2R, 2’RV2.2’-(Ditiobis IY2-metóxi n.31tiazoir4,5-dlpirimidina -5,7-diila) metilimino)11 dipentan- l-ol
Hidróxido de potássio (210 mg, 3,75 mmol) dissolvido em metanol (20 ml) foi adicionado a (2R, 2’R)-2,2’-{ ditiobis [ (2- cloro[l,3]tiazol[4,5-d]pirimidina-5,7-diila) (metilimino)]} dipentan-l-ol (295 mg, 1,25 mmol) em metanol (40 ml) a O0C . A reação foi agitada a O0C durante a noite e então o metanol foi evaporado. O resíduo foi despejado em gelo e o precipitado resultante foi coletado através de filtração. O filtrado foi extraído com acetato de etila. A fase orgânica foi secada com sulfato de sódio e concentrada in vacuo e o resíduo foi combinado com o sólido antes coletado, de um modo a fornecer o composto do título, que foi usado no próximo estágio sem qualquer purificação.
MS (ESI) m/z 627 [ M + 1]+.
g) 5-r7-{r(lRM-(HidroximetilWmetil)amino|-ri,31 tiazoir4.5-d1pirimidin-2-
(3 HVona_-5-ildissulfanil-7-( TQRV l-fhidroximetilbutillaminoir 1,31
tiazol Γ4,5 -dlpirimidin-1 (3H)ona
(2R, 2’R)-2,2’-{ditiobis[(2-metóxi [1,3] tiazol[4,5- d]pirimidina-5,7-diila) (metilimino)]} dipentan-l-ol (1, 25 mmol) a partir do estágio precedente foi dissolvido em 1,4-dioxano (25 ml). Ácido clorídrico concentrado (0,5 ml) e água (0,5 ml) foram adicionados e a mistura resultante foi agitada a 45°C durante a noite. Dioxano foi evaporado in vacuo e o resíduo foi despejado sobre gelo, de um modo a precipitar o produto, que foi coletado através de fíltração. A secagem in vacuo forneceu 590 mg (78% de rendimento em dois estágios) do composto do título.
MS (ESI) m/z 599 [M + 1]+.
h) 5- {IYIS)-1 -(6-Cloropiridin-3-il)etil1tio} -7- {Γ (I R)-1 -(hidroximetil)butill (metil)amino) Γ1,31 tiazoir4,5-dlpirimidin-2(3H)-ona
O composto do título foi preparado de acordo com o método geral G usando 5-[7{[(lR)-l-(hidroximetil) (metil)amino}-[l,3] tiazol[4,5- d]pirimidin-2(3H)-ona-5-ildissulfanil]-7- {[(IR)-1 -(hidroximetilbutiljamino}
[1,3] tiazol [4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona (0,10 g, 0,167 mmol), 2-cloro-5-[(lR)-l- cloroetil]piridina (Exemplo 6, 0,065 g, 0, 37 mmol) e boroidreto de sódio (0,038 g, 1,00 mmol) fornecendo 0,060 g (41% de rendimento) do composto do título.
RMN 1H (CDCl3) δ ppm 8,56 - 8, 38 (m, 1 H), 7,87 - 7, 73 (m, 1 H), 7, 28 - 7,26 (m, 1H), 4, 86 (q, 1 H), 4, 75 - 4,62 (m, 1H), 3,76 - 3,55 (m, 3 H), 3,03 (s, 3H), 1,70 - 1,63 (m, 3H), 1,53 0 1,45 (m,2H), 1, 26- 1,21 (M, 2 H), 0,95 -0,88 (m, 3 H):
MS (ESI) m/z 440 e 442 [M + 1]+.
Exemplo 8: Exemplo 8a
5-ÍIY1 R) -1 -(3-Fluoropiridin-4-iDetilltio} -7-1Γ (lR)-l-(hidroximetil)—3- metilbutillaminol Γ1,31 tiazol r4,5-d1pirimidin-2-(3H)-ona e Exemplo 8b
5- {IY1SV1 -(3 -Fluoropiridin-4-iQetilltio) -7- {IY1R)-1 -Oiidroximetin-3- metilbutil]amino} Γ 1,3Itiazol [4,5-d]pirimidin-2 (3H)-ona
"OH
NH
A mistura diastereomérica de 5-{[l-(3-fluorpiridin-4-
il)etil]tio} -7- {[(1R)-1 -(hidroximetil)-3-metilbutil] amino} [1,3] tiazol [4,5- d]pirimidin-2(3H)-ona (179 mg) do Exemplo 3 foi separado através de HPLC preparativo, de um modo a fornecer 25 mg do primeiro isômero de eluição:
RMN 1H (DMSOd6) δ ppm 12, 31 (br s, 1 H), 8,51 (m, 1H), 8,38 (d, 1 H); 7, 62 (m, 1H); 6,97 (br s, 1 H); 5, 16 (q, 1H); 4, 66 (t, 1H); 4,12 (m, 1 H); 3,44-3,30 (m, 2 H, obscurecido pelo sinal de água), 1, 66 (d, 3 H), 1,61 -1, 27 (m, 3 H), 0,84 (d, 3 H), 0,74 (d, 3 H); MS (ESI) m/z 424 [M + 1]+. e 45 mg do último isômero de eluição:
RMN 1H (DMSOd6) δ ppm 12, 35 (br s, 1 H), 8, 52 (d, 1 H), 8, 38 (d, 1 H); 7, 62 (dd, 1 H); 7,12 (br s, 1 H); 5, 15 (q, 1H); 4, 62 (t, 1 H); 4, 21 (m, 1H); 3,35 - 3,15 (m, 2 Η, parcialmente obscurecido pelo sinal de água), 1, 65 (d, 3 Η), 1, 63-1, 29 (m, 3H), 0,88 (d, 3 H), 0,85 (d, 3 H); MS (ESI) m/z 424 [M + 1]+. Varreduras Farmacológicas Materiais
Fractalquina humana recombinante (IiCX3CL 1) e interleucina- 8 humana recombinante (IL-8 ou hCXC18) foram adquiridas de Pepro Tech. Inc., UK.[125I]-fractalquina recombinante (humana) e [125I]hIl-8 com atividade específica de 2200 Ci/mmol, foram adquiridas de NEN® Life Science Products, Inc., UK. Fluo4-AM foi adquirido de Molecular Probes, US. Todas as outras substâncias químicas eram de grau analítico. Células
CDNA CX3CRl humano completo (número de acesso GenBank U20350) foi extraído a partir de mRNA de cérebro humano (Superscript, Life Technlogies) e ligado em um vetor pCR-Blunt II TOPO (In Vitrogen). A inserção correspondente hCX3CRl foi isolada e adicionalmente subclonada em pcDNA3.1zeo. O DNA do plasmídeo foi preparado usando o Plasmid Midi Kit (Qiagen). Usando o Superfect Transfection Reagent (Qiagen) de acordo com o protocolo do fabricante, o plasmídeo de expressão para hCX3CRl foi então introduzido em uma linhagem celular 293 de suspensão renal embriônica humana (HEKS) contendo um vetor para a suspensão estável de uma proteína G quimérica Gctqi5. Um clone estável foi gerado utilizando seleção de zeocina (500 μg/ml) e higromicina (100 μg/ml). Para aplicações adicionais, as células foram mantidas em uma mistura de nutriente de Ham F12/meio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM/F12) contendo piridoxina e suplementado com 10% (v/v) de soro bovino fetal, L - glutamina 2 mM, 100 U/ml de penicilina e 100 mg/ml de estreptomicina, 250 μg/ml de zeocina e 100 μg/ml de higromicina.
As células que expressam CXCR2, obtidas de AstraZeneca Charnwood, são cultivadas em EMEM contendo Glutamax e suplementadas com 10% de FBS (de PAA, Áustria), 1 % de aminoácidos não-essenciais (NEAA), 100 U/ml de penicilina e 100 μ&ηιΐ de estreptomicina (PEST) e 500 μ§/πι1 de geneticina/G 418. Preparação de Membrana
As células foram desenvolvidas a 37°C e 5% de CO2 e coletadas em de 60-80% de confluência em tampão contendo Tris-HCl 10 mM, pH 7,4 EDTA 5 mM, 0,1 mg/ml de bacitracina. As células foram centrifugadas a 300 xg durante 10 minutos e a pelota foi novamente suspensa em tampão de coleta (Tris-HCl 10 mM, pH 7,4, etilenodiaminatetra-ácido acético (EDTA) e 0,1 mg/ml de bacitracina), foram colocadas em reservatórios e homogeneizadas usando um homogeneizador Dounce. O homogeneizado é centrifugado em 48000 xg durante 10 minutos e novamente suspenso em tampão de coleta usando Ultra-Turrax T8. As alíquotas de membrana são armazenadas a -80°C. A concentração de proteína foi determinada em placas de microtitulação conforme descrito por Harrington (1990, Anal. Biochem. 186, 285-287). Ensaio de Ligação de receptor In vitro
Estudos de ligação de competição de [125I] fractalquina foram executados em placas de 96 reservatórios profundos de 2 ml (Beckman, Alemanha) em um volume total de 1000 μΐ/reservatório. Cada reservatório continha IOpM de [125I]-fractalquina e membrana equivalentes à concentração de receptor de 1 pM em tampão de ensaio (Hepes - KOH 50 mM, pH 7, 4, MgCl2 10 mM, EDTA 1 mM, 0,1% de gelatina (p/v). Dez concentrações (2 pontos/unidade log) dos compostos de teste foram previamente dissolvidas em DMSO e adicionadas, de um modo a que fosse alcançada uma concentração final de 1% (v/v) DMSO. O ensaio foi iniciado com a adição de membranas e incubado a 25°C, durante 24 horas. As reações foram interrompidas pela filtração rápida através de filtros de vidro GF/B Whatman, previamente tratados com 0,3 % de polietilimina e subseqüente lavagem com tampão gelado (Hepes - KOH 10 mM, pH 7, 4, 500 mM de NaCl) usando um coletor de ligação do receptor Brandel. O coquetel de cintilação foi adicionado e a radioatividade foi determinada em um contador de cintilação líquido Packard 2500 TR (Perkin Elmer, USA).
Os estudos de ligação de competição de [,25I]-hIL-8 (atividade específica 2200 Ci/mmol), preparação de membrana SPA equivalente a 20 pM de receptores e 1,5 mg de contas de SPA em um tampão de ensaio (HEPES- KOH 50 mM, pH 7,4, MgCl2 10 mM, EDTA 1 mM, 0,5% (p/v) de gelatina]. Os compostos de teste foram tratados como acima. A ligação não-específica é determinada na presença de hIL-8 não-rotulado 500 nM. O agonista hIL -8 (uma concentração de curva de resposta de 3 pM a 30 nM) é usada como o composto de referência em cada ocasião de teste. A curva de peptídeo não contém DMSO. A reação de ligação é iniciada através da adição de 140 μι de preparação de membrana-SPA, e as amostras são incubadas no escuro, em temperatura ambiente, durante 4 horas. As placas de ensaio são contadas em um contador de cintilação líquido (Wallac Microbeta® TrilUx 1450, de PerkinElmer, USA). Ligação de T35SI GTPyS
IC
Os estudos de ligação de [ S] GTPyS foram executados em placas de microtitulação de fundo claro, em duplicatas com 10 concentrações do inibidor (2 conc./unidades log) diluídas em DMSO (concentração final, 1 %) e em temperatura ambiente. As membranas que expressam o receptor I1CX3CRI (concentração final, 20 μg proteína/reservatório) foram adicionados junto com contas de SPA (concentração final 1 mg/reservatório) todos suspensos em tampão de ligação GTPyS (Tris-HCl 50 mM, NaCl 100 mM, 0,1 % de gelatina, 15 μg de saponina/ml e 3 μΜ de GDP, pH de 7,4, em temperatura ambiente). Membranas, contas de SPA e drogas foram previamente incubadas durante 30 minutos, antes da adição de 310 pM de fractalquina, para a estimulação máxima. A atividade basal foi definida como a atividade encontrada sem a estimulação de fractalquina (tampão de ligação GTPyS). Após um período adicional de 30 minutos, a reação foi iniciada com a adição de [35S] GTPyS a uma concentração final de 0, 1 nM e um volume de ensaio final de 0,2 ml. O experimento foi terminado 30 minutos após, através de centrifugação a 2000 rpm durante 2x5 minutos (direções diferentes) e a radioatividade foi determinada em um contador de cintilação líquido (Wallac MicroBeta® TriLux 1450). Resultados
Valores de CX3CRl Ki para os compostos da presente invenção estão em uma faixa de cerca de 0,1 a cerca de 1000 nM. Outros valores para CX3CRl ki estão em uma faixa de cerca de 0, 1 nM a cerca de 500 nM. Outros valores para CX3CRl ki estão em uma faixa de cerca de 0,1 nM a cerca de 500 nM. Outros valores para CX3CRl Ki estão em uma faixa de cerca de 0, 1 nM a cerca de 25 nM. Os resultados a partir do ensaio de ligação de hCX3CRl in vitro são apresentados na Tabela 1. Tabela 1:
N0 do Exemplo Ki (nM) 1 5,8 2 20 3 Não testado 4 18 Não testado 6 21,4 7 440 8a 97 8b 1,5
*) mistura diastereomérica dos exemplos 8a e 8b
**) não disponível em quantidade suficiente para os testes no ensaio de ligação de para hCX3CRl in vitro.
Os compostos da presente invenção, em que R1 representa Me (contendo um grupo tioalquilpiridila ramificado na posição 5) são ambos antagonistas mais potentes no receptor CX3CRl e/ou antagonistas menos potentes no receptor CXCR2 do que os compostos de referência correspondentes, em que R1 representa H. É esperado que uma tal seletividade aumentada com relação ao antagonismo do receptor CX3CRl resulte em um benefício terapêutico significativo.

Claims (23)

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser da fórmula (I): <formula>formula see original document page 64</formula>em que: R1 representa CH3 ou CF3; R2 representa halo, CN ou alquila C1-6; R3 representa H ou CH3; R4 representa H ou CH3; n representa 0, 1 ou 2; como uma base livre ou um sal, solvato ou solvato de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
2. Composto da fórmula 1, caracterizado pelo fato de que η representa 1.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 representa CH3.
4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R representa halo ou CN.
5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R representa F ou Cl.
6. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R representa CN
7. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que n representa 1; R1 representa CH3; e R2 representa F, Cl ou CN.
8. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a piridina está ligada em sua posição 5 e possui Cl na posição 2.
9. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a piridina está ligada em sua posição 2 e possui CN na posição 4.
10. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a piridina está ligada em sua posição 2 e possui F na posição 5.
11. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a piridina está ligada em sua posição 2 e possui Cl na posição 5.
12. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a piridina está ligada em sua posição 2 e possui F na posição 3.
13. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a piridina está ligada em sua posição 4 e possui F na posição 3.
14. Composto de acordo cm a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R3 representa H.
15. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R4 representa CH3.
16. Composto, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir de: 5- {[(1S)-1 -(5-cloropiridin-2-il)etiltio} -7- {[(1R)-1 - (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona; 5- {[(1S)-1 -(5-fluoropiridin-2-il)etil]tio} -7- {[(1R)-1 - (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona; .5 - {[ 1 -(3-fluoropiridin-4-il)etil]tio} - 7-[( 1R)-1 -(hidroximetil)-3 - metilbutil]amino}[l,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona; 5- {{(1S)-1 -(3-Fluoropiridin-4-il)etil]tio} -7- ([(IR)-I- (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2-(3H)-ona; 5 - {[(1R)-1 -(3 -Fluoropiridin-4-il)etil]tio }-7-{ [(IR)-I- (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2-(3H)-ona; 5- {[(1S)-1 -(3-fluoropiridin-2-il)til]tio} -7- ([(IR)-I- (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [ 1,3 jtiazol[4,5-d]pirimidin-2 (3H)-ona; 5 {[(1S)-1 -(3 -fluoropiridin-2-il)etil]tio} -7- {[ 1R)-1 - (hidroximetil)-3-metilbutil]amino} [1,3] tiazol [4,5-d]pirimidin-2(3H)-ona; 2- {(1S)-1 - [(7- {[(1R)-1 -(hidroximetil)-3 -metilbutil] amino} -2- oxo-2,3-diidro[l,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-5-il) tio ]etil}isonicotinonitrila; 5- {[(1S)-1 -(6-cloropiridin-3-il)etil]tio} -7- ([(IR)-I- (hidroximetil)butil]amino} [1,3] tiazol[4,5-d]pirimidin-2 (3H)-ona;e 5- ([(1S)-1 -(6-cloropiridin-3-il)etil]tio} -7-[[( 1R)1 - (hidroximetil)butil(metil)amino] [l,3]tiazol[4,5-d]pirimidin-2-(3H)-ona; como uma base livre ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato ou solvato de um sal dos mesmos.
17. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para o uso como um medicamento.
18. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser em mistura com um diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável.
19. Uso de um composto da fórmula (I), como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na manufatura de um medicamento para o tratamento ou a profilaxia de distúrbios neurodegenerativos, doença desmielinizante, distúrbios ateroescleróticos Card10- e cerebrovasculares, doença arterial periférica, artrite reumatóide, doenças pulmonares tais que COPD, asma ou dor.
20. Uso de um composto da fórmula (I), como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, CaffiCterizado pelo fato de ser na manufatura de um medicamento para o tratamento ou a profilaxia de esclerose múltipla.
21. Uso de um composto da fórmula (I), como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a ,6, ou de um sal fa^aceuticamente aceitável do mesmo, P3asia^ pe|o fa(0 de ser na ^^ ^ ^ medicamento para o tratamento ou a profilaxia de ateroesclerose através da alteração da composição das placas, de um modo a reduzir o risco de ruptura da placa e de eventos aterotrombóticos.
22. Uso de um composto da fórmula (I), como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a ,6, ou de um sa, farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na manufatura de um medicamento para o tratamento ou a profilaxia de ateroesclerose através da prevenção e/ou reduçSo da fo^ação de novas lesões ou placas ateroescleróticas e/ou através da prevenção ou retardo da progressão de ,esões e placas existentes.
23. Uso de um composto da fórmula (I), como definido em qualquer uma das reivindicações , a 16, ou de um sa, farmaceuticamente aceitável do mesmo, çaraçjerizado pelo fato de ser na manufatura de um medicamento para o tratamento ou a profilaxia de den-ame ou de lesâo cerebral transitória (TBI).
BRPI0717109-9A 2006-09-29 2007-09-27 Composto, métodos de tratamento ou redução do risco de doenças, ou distúrbios ou condições, e de tratamento ou profilaxia de doença, e de uma condição, e, uso e processo para a preparação de um composto BRPI0717109A2 (pt)

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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR071036A1 (es) * 2008-03-26 2010-05-19 Astrazeneca Ab Derivados 5, 7-disustituidos de [1, 3]tiazolo[4, 5-d]pirimidin-2 (3h)-ona, una composicion farmaceutica que los comprende y su uso en el tratamiento de enfermedades mediadas por el receptor cx3cr1.
US8476301B2 (en) 2011-09-13 2013-07-02 Eisai R&D Management Co., Ltd. Pyrrolidin-3-ylacetic acid derivative
TWI543975B (zh) 2011-09-13 2016-08-01 Eisai R&D Man Co Ltd Pyrrolidin-3-yl acetic acid derivatives
US9550732B2 (en) 2013-03-12 2017-01-24 Eisai R&D Management Co., Ltd. Salt of pyrrolidin-3-yl acetic acid derivative and crystals thereof
GB201811169D0 (en) * 2018-07-06 2018-08-29 Kancera Ab New compounds
JP2025537492A (ja) 2022-10-19 2025-11-18 アストラゼネカ・アクチエボラーグ ＣＸｓｕｂ３ＣＲ１のモジュレーターとしての２，４，６－三置換１，３，５－トリアジン

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE9802729D0 (sv) 1998-08-13 1998-08-13 Astra Pharma Prod Novel Compounds
SE9903544D0 (sv) 1999-10-01 1999-10-01 Astra Pharma Prod Novel compounds
JP2003522191A (ja) 2000-02-11 2003-07-22 アストラゼネカ・アクチエボラーグ ケモカイン受容体活性のモジュレーターとしてのピリミジン化合物およびそれらの使用
GB2359081A (en) 2000-02-11 2001-08-15 Astrazeneca Uk Ltd Pharmaceutically active thiazolopyrimidines
GB2359551A (en) * 2000-02-23 2001-08-29 Astrazeneca Uk Ltd Pharmaceutically active pyrimidine derivatives
SE0101082D0 (sv) 2001-03-27 2001-03-27 Astrazeneca Ab Novel use
GB0221828D0 (en) * 2002-09-20 2002-10-30 Astrazeneca Ab Novel compound
GB0221829D0 (en) * 2002-09-20 2002-10-30 Astrazeneca Ab Novel compound
EP1675862A1 (en) 2003-10-07 2006-07-05 AstraZeneca AB New 2-substituted, 4-amino-thiazolo 4,5-d pyrimidines, useful as chemokine receptor antagonists, esp. cx3cr1
US20090239882A1 (en) 2004-12-17 2009-09-24 Astrazeneca Ab Thiazolopyramidine Compounds for the Modulation of Chemokine Receptor Activity
AR053347A1 (es) * 2005-04-06 2007-05-02 Astrazeneca Ab Derivados de [1,3]tiazolo[4,5-d]pirimidin-2(3h)-ona 5,7-sustituidos
UA90707C2 (en) 2005-04-06 2010-05-25 Астразенека Аб Novel 5-substituted 7-amino-[1,3]thiazolo[4,5-d]pyrimidine derivatives

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