BRPI0718283A2

BRPI0718283A2 - Tratamento de distúrbios desmielinizantes

Info

Publication number: BRPI0718283A2
Application number: BRPI0718283-0A
Authority: BR
Inventors: Jenny P-Y Ting; Jeffrey Browning
Original assignee: Biogen Idec Inc; Univ North Carolina
Priority date: 2006-10-20
Filing date: 2007-10-18
Publication date: 2013-11-12
Also published as: US20120244153A1; US20100099608A1; MX2009004134A; CN101653599A; WO2008049053A2; EP2311481A3; AU2007311052B2; SG154441A1; US8067375B2; AU2007311052A1; CA2666934A1; EP2073833A2; JP2013227340A; JP2010506955A; IL198196A0; KR20090083958A; EA200900581A1; NZ576424A; SG178002A1; KR20090071652A

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "TRATAMEN- TO DE DISTÚRBIOS DESMIELINIZANTES".

Antecedentes da Invenção

O receptor beta (β) de Linfotoxina (LTpR) é um elemento da fa- mília do receptor do fator de necrose de tumor (TNFR). O receptor é expres- so sobre a superfície das células no parênquima e estroma dos órgãos mais linfóides, mais é ausente nos linfócitos T e Β. A sinalização através do LTpR pelo heterotrímero (LT) LTa/p é importante durante o desenvolvimento linfói- de. O LTpR é também conhecido para ligar o ligando LIGHT (homólogo às linfotoxinas, exibe expressão induzível e compete com a glicoproteína D do vírus da herpes simples para HVEM1 um receptor expresso pelos linfócitos Τ), o qual tem sido implicado em eventos de ativação da célula T, na periferia e no timo. O LT e LIGHT são expressos na superfície de linfócitos ativados. O bloqueio do percurso do LT com um LTpR atrativo solúvel tem sido mos- trado como sendo efetivo no tratamento de doenças autoimunes em diversos modelos de animais. Sumário da Invenção

A presente invenção refere-se, em parte, na descoberta de que uma forma solúvel do LTpR (por exemplo, LTpR-Fc) pode efetivamente pro- mover a remielinização em um sujeito. Consequentemente, a invenção pro- porciona métodos, composições (por exemplo, uma proteína de fusão de LTpR solúvel), dispositivos e kits de utilidade no tratamento de um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla) em um sujeito, assim co- mo, para monitoramento da remielinização no sujeito. Em um aspecto, a invenção caracteriza um método de tratamen-

to de um distúrbio desmielinizante em um sujeito. O método inclui as etapas de:

(i) administrar a um sujeito uma dose de um LTpR solúvel (por exemplo, uma proteína de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) suficiente pa-

ra promover a remielinização; e, opcionalmente,

(ii) monitorar o sujeito quanto à remielinização. Opcionalmente, o método pode também incluir a etapa de identificar um sujeito (por exemplo, um ser humano (por exemplo, um paciente humano), em fase de adquirir ou em risco de desenvolver um distúrbio desmielinizante.

Em algumas modalidades o método pode incluir a etapa de se- lecionar um sujeito (por exemplo, um paciente humano) fundamentado em que o sujeito necessita de remielinização.

Em algumas modalidades, o método pode também incluir a eta- pa de classificar o sujeito (por exemplo, o paciente humano) como estando com necessidade de remielinização.

Em algumas modalidades, o método pode incluir ainda a etapa de classificar o sujeito (por exemplo, o paciente humano) como tendo um nível pré-selecionado de remielinização, por exemplo, nenhuma remieliniza- ção ou tendo algum nível de remielinização. Preferivelmente, o paciente é classificado como tendo remielinização, por exemplo, o paciente é classifi- cado como tendo um nível pré-selecionado, por exemplo, um nível selecio- nado de um conjunto de níveis graduados de remielinização, por exemplo, uma quantidade mínima, intermediária ou uma quantidade maior de remieli- nização. O nível graduado ou quantidade de remielinização pode também ser expresso ou atribuído como um valor prudente, por exemplo, em uma escala de valores ascendentes, como, por exemplo, de 1-10, em que um primeiro marcador, por exemplo, um primeiro marcador de "10", indica uma maior quantidade de remielinização em um paciente do que no caso de se ter um segundo marcador mais baixo, por exemplo, um segundo marcador de "9". A classificação pode ser efetuada uma ou mais vezes. Pode ser de- sejável se classificar um paciente após um primeiro marco miliário previa- mente selecionado, por exemplo, um número previamente selecionado de administrações, um predeterminado período de tratamento, ou um nível pre- viamente selecionado de um aumento ou diminuição de um ou mais sinto- mas. Opcionalmente, a classificação pode ser novamente executada em um segundo ou subsequente marco miliário, por exemplo, um marco miliário do mesmo tipo. Em uma modalidade correlata, um registro da classificação (por exemplo, o nível previamente selecionado de remielinização) do sujeito é feito, por exemplo, através de um registro legível por computador. Em algumas modalidades, o sujeito é tratado com um LTpR so- lúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc). Em algumas modalidades, o LTpR solúvel é um polipeptídeo de fusão de LTpR-Fc tendo a seqüência de aminoácido ilustrada na SEQ ID N°:1 (vide abaixo).

O sujeito pode ser qualquer mamífero, incluindo, por exemplo, um camundongo, um coelho, um porquinho-da-índia, um macaco ou um hu- mano (por exemplo, um paciente humano). O sujeito (por exemplo, um paci- ente humano) pode ser qualquer sujeito tendo ou se encontrando em risco de desenvolver um distúrbio desmielinizante. Conforme aqui usado, um "dis- túrbio desmielinizante" é qualquer doença associada com a destruição ou remoção da mielina, a bainha gordurosa que envolve e isola as fibras nervo- sas dos nervos. Os distúrbios desmielinizantes incluem, por exemplo, Escle- rose Múltipla (por exemplo, Esclérose Múltipla Reincidente/Remitente, Escle- rose Múltipla Secundária Progressiva, Esclerose Múltipla Reincidente Pro- gressiva, Esclerose Múltipla Primária Progressiva e Esclerose Múltipla Agu- da Fulminante), Mielinólise Pontina Central, Encefalomielite Aguda Dissemi- nada, Leucoencefalopatia Multifocal Progressiva, Panencefalite Subaguda Esclerosante, Encefalomielite Pós-infecciosa, Polineuropatia Desmielinizante Inflamatória Crônica, Síndrome de Guillain-Barre, Leucoencefalopatia Multi- focal Progressiva, Doença de Devic, Esclerose Concêntrica de Balo e uma Leucodistrofia (por exemplo, Leucodistrofia Metacromática, doença de Krab- bé, Adrenoleucodistrofia, doença de Pelizaeus-Merzbacher, doença de Ca- navan, Ataxia de Infância com Hipomielinização Central, doença de Alexan- der ou doença de Refsum). Um paciente humano tendo um distúrbio desmie- linizante pode apresentar um ou mais sintomas de um distúrbio desmielini- zante, tal como, mas sem que seja a isso limitado, redução de visão, dor- mência, fraqueza nas extremidades, tremores ou espasticidade, intolerância ao calor, redução da fala, incontinência, vertigem ou propriocepção reduzida (por exemplo, equilíbrio, coordenação, sentido da posição do limbo). Um humano (por exemplo, um paciente humano) com um histórico familiar de um distúrbio desmielinizante (por exemplo, uma predisposição genética para um distúrbio desmielinizante) ou que exibe sintomas brandos ou não fre- qüentes de um distúrbio desmielinizante descrito acima, pode ser, para o objetivo do método, considerado em risco de desenvolvimento de um distúr- bio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla).

Em algumas modalidades, o LTpR solúvel pode ser administrado

ao sujeito numa quantidade, freqüência e/ou por um período de tempo sufi- ciente para induzir a remielinização no sujeito.

Em algumas modalidades, com o objetivo de induzir a remielini- zação em um sujeito, o LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fu- são de LTpR1 tal como, LTpR-Fc) é administrado uma vez ao sujeito. Em outras modalidades, o LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) é administrado ao sujeito mais de uma vez, por exemplo, uma vez a cada 3 a 10 dias; pelo menos duas vezes e não mais que uma vez a cada 5 a 20 dias; pelo menos duas vezes e não mais que uma vez a cada 28 a 31 dias; semanalmente; bisemanalmente; mensalmen- te; semnalmente, durante um período de pelo menos 4 semanas; bisema- nalmente, durante um período de pelo menos 6 semanas; ou mensalmente, durante um período de pelo menos 6 meses.

Em algumas modalidades, uma adequada dose de partida do LTpR solúvel em experimentos para determinar uma dosagem (por exemplo, a quantidade suficiente para induzir a remielinização em um sujeito) é de 0,001 mg de LTpR solúvel por quilograma de peso do corpo do sujeito.

Em algumas modalidades, uma adequada dose ou dose de par- tida é determinada por diversos fatores subjetivos, específicos do paciente, tais como, sem que seja a isso limitado, sexo, idade, peso, saúde física ou qualquer outro fator aqui descrito.

Em algumas modalidades, o LTpR solúvel (por exemplo, um po- lipeptídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) é administrado a um sujeito pela via intravenosa ou parenteral (por exemplo, pela via subcutânea, intra- muscular, íntranasal ou oral).

Em algumas modalidades, o LTpR solúvel (por exemplo, um po- lipeptídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) pode ser administrado a um sujeito como uma monoterapia.

Em algumas modalidades, o LTpR solúvel (por exemplo, um po- lipeptídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) pode ser administrado a um sujeito como uma terapia combinatória com outro tratamento, por exem- pio, outro tratamento para um distúrbio desmielinizante (por exemplo, quais- quer dos distúrbios desmielinizantes aqui descritos (por exemplo, Esclerose Múltipla)). Por exemplo, a terapia combinatória pode incluir a administração ao sujeito (por exemplo, um paciente humano), um ou mais adicionais agen- tes terapêuticos que proporcionam um benefício terapêutico ao sujeito, o qual apresenta ou se encontra em risco de desenvolvimento de um distúrbio desmielinizante. Em algumas modalidades, o Em algumas modalidades, o LTpR solúvel e o dito um ou mais adicionais agentes são administrados ao mesmo tempo. Em outras modalidades, o LTpR solúvel é administrado inici- almente e o dito um ou mais agentes adicionais são administrados em se- guida. Em algumas modalidades, o dito um ou mais agentes adicionais são administrados inicialmente e o LTpR solúvel é administrado em seguida. O LTpR solúvel pode substituir ou aumentar uma terapia anteriormente ou atu- almente administrada. Por exemplo, após tratamento com o LTpR, a admi- nistração de um ou mais agentes adicionais pode cessar ou diminuir, por exemplo, ser administrada em níveis inferiores. Em outras modalidades, a administração da terapia prévia é mantida. Em algumas modalidades, uma terapia prévia será mantida até o nível em que o LTpR alcance um nível su- ficiente para proporcionar um efeito terapêutico. As duas terapias podem ser administradas em combinação. Em algumas modalidades, um humano que recebe uma primeira

terapia para um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla), por exemplo, Beta Interferon 1a (Avonex), Beta Interferon 1b (Rebif), acetato de glatiramer (Copaxona), mitoxantrona (Novantrona), azatiprina (Imuran), ciclofosfamida (Citoxan ou Neosar), ciclosporina (Sandimmune), metotrexa- to, Cladribine (Leustatin), metilprednisona (Depo-Medrol ou Solu-Medrol), prednisona (Deltasona), prednisolona (Delta-Cortef), dexametasona (Medrol ou Decadron), hormônio adreno-corticotrófico (ACTH), ou Corticotropin (Ac- thar), pode também ser administrado de um LTpR solúvel, por exemplo, LTpR-Fc. Em algumas modalidades, quando o humano recebe a administra- ção do LTpR solúvel, a primeira terapia é interrompida. Em outras modalida- des, o humano é monitorado quanto a um primeiro resultado previamente selecionado, por exemplo, uma melhoria em um ou mais sintomas de um distúrbio desmielinizante (tal como, um aumento da remielinização), por e- xemplo, quaisquer dos sintomas de distúrbios desmielinizantes aqui dsescri- tos. Em algumas modalidades, quando é observado o primeiro resultado previamente selecionado, o tratamento com o LTpR solúvel é diminuído ou interrompido. Em algumas modalidades, o humano é depois monitorado quanto a um segundo resultado previamente selecionado, após o tratamento com o LTpR solúvel ser interrompido, por exemplo, quando piora de um sin- toma de um distúrbio desmielinizante. Quando o segundo resultado previa- mente selecionado é observado, a administração do LTpR solúvel ao huma- no é reiniciada ou aumentada, ou o humano recebe a administração com um LTpR solúvel ou uma quantidade aumentada de LTpR solúvel, dentro de um primeiro regime terapêutico.

Em uma modalidade, um humano que recebe uma primeira tera- pia para um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla ou qualquer outro distúrbio desmielinizante aqui descrito), sendo depois tratado com um LTpR solúvel, por exemplo, um LTpR-Fc, continua a receber a pri- meira terapia na mesma quantidade ou numa quantidade reduzida. Em outra modalidade, o tratamento com a primeira terapia supera durante um deter- minado tempo o tratamento com o LTpR solúvel, porém, o tratamento com a primeira terapia é subseqüentemente interrompido.

Em algumas modalidades, o LTpR solúvel pode ser administrado a um sujeito recebedor de uma terapia anti-TNF (por exemplo, Humira, En- brel ou Remicade). Em algumas modalidades, o sujeito que recebe a terapia anti-TNF apresenta um distúrbio autoimune, tal como, mas sem que seja a isso limitado, artrite reumatóide.

O monitoramento de um sujeito (por exemplo, um paciente hu- mano) quanto à remielinização, conforme aqui definida, significa avaliar o sujeito quanto a uma mudança, por exemplo, uma melhoria em um ou mais parâmetros que são indicativos da remielinização, por exemplo, alguém po- de monitorar a melhoria em um ou mais sintomas de um distúrbio desmieli- nizante. Tais sintomas incluem quaisquer dos sintomas de um distúrbio des- mielinizante aqui descrito. A remielinização pode também ser monitorada através de métodos que incluem a determinação direta do estado da mielina no sujeito, por exemplo, alguém pode medir a massa de matéria branca u- sando formação de imagem por ressonância magnética (MRI) ou medir a espessura das fibras da mielina usando uma varredura do cérebro por es- pectroscopia de ressonância magnética (MRS). Em algumas modalidades, a avaliação é realizada, pelo menos, 1 hora, por exemplo, pelo menos, 2, 4, 6, 8, 12, 24, ou 48 horas ou, pelo menos, 1 dia, 2 dias, 4 dias, 10 dias, 13 dias, dias ou mais ou, pelo menos, 1 semana, 2 semanas, 4 semanas, 10 se- manas, 13 semanas, 20 semanas ou mais, depois de uma administração, preferivelmente, a primeira administração do LTpR solúvel. O sujeito pode ser avaliado em um ou mais dos seguintes períodos: antes de começar o tratamento; durante o tratamento; ou depois de um ou mais elementos do tratamento terem sido administrados. A avaliação pode incluir avaliar a ne- cessidade de posteior tratamento, por exemplo, avaliação quanto a uma do- sagem, freqüência de administração ou duração do tratamento ser alterado. Também, pode se incluir a necessidade de se adicionar ou parar uma sele- cionada modalidade terapêutica, por exemplo, adição ou interrupção de quaisquer dos tratamentos para distúrbios desmielinizantes aqui descritos. Por exemplo, a administração continuada do LTpR solúvel pode ser feita com um ou mais agentes adicionais de tratamento, se necessário. Numa modalidade preferida, se for obtido um resultado previamente selecionado da avaliação, é executada uma etapa adicional, por exemplo, o sujeito rece- be a administração de outro tratamento ou outra avaliação ou teste é reali- zado. O nível da remielinização pode ser usado para fazer uma determina- ção sobre a proteção do paciente, por exemplo, uma seleção ou modificação de um curso de tratamento ou a decisão de uma terceira parte em reembol- sar o tratamento. Em algumas modalidades, o monitoramento de um sujeito (por exemplo, um paciente humano) quanto à remielinização pode também incluir monitorar uma redução do tamanho ou número de lesões inflamatórias (isto é, escleroses), usando, por exemplo, exames de Formação de Imagem por Ressonância Magnética (MRI), exames de Tomografia por Emissão de Pósi- tron (PET), Formação de Imagem Ponderada por Difusão (DW-I ou DW- MRI), Formação de Imagem do Tensor por Difusão, Mielografia, Transferên- cia de Magnetização. Em algumas modalidades, o monitoramento de um sujeito quanto à remielinização pode incluir a detecção no fluido cerebroes- pinhal da presença de, por exemplo: (i) proteínas anormais, tais como, frag- mentos minúsculos de mielina; (ii) elevados níveis de ou tipos específicos de linfócitos; e/ou (iii) níveis anormais de moléculas de imunoglobulina (IgG) no fluido obtido de um puncionamento lombar (isto é, puncionamento espinhal). Em outras modalidades, o monitoramento de um sujeito quanto à remielini- zação pode incluir a determinação de uma mudança na neuropsicologia do sujeito (por exemplo, a situação de diversas capacidades, tais como, a me- mória, a aritmética, a atenção, o juízo e a razão). Em algumas modalidades, o monitoramento de um sujeito (por exemplo, um paciente humano) quanto à remielinização pode envolver o teste de uma urina do paciente quanto à di- minuição dos níveis de material tipo proteína básica de mielina (MBPLM), cuja substância se torna elevada na medida em que ocorrem danos axonais durante a progressão da doença. Em algumas modalidades, onde o distúrbio desmielinizante afeta os olhos ou a visão de um sujeito, o monitoramento de um sujeito quanto à remielinização pode envolver o teste de melhorias, por exemplo, na cegueira de cor.

Em um aspecto, a descrição caracteriza um método de avaliar um sujeito, para determinar, por exemplo, se um sujeito está respondendo ou não a um tratamento para um distúrbio desmielinizante, por exemplo, uma terapia que aumenta a remielinização em um sujeito, tal como, a admi- nistração de um LTpR solúvel. O método inclui a provisão de um valor de referência (por exemplo, um valor de administração prévia) para o nível ou estado da mielina no sujeito e, opcionalmente, administrar ao sujeito um me- dicamento que aumente a remielinização (por exemplo, um LTpR solúvel, por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR1 tal como, LTpR-Fc). Nas modalidades onde um medicamento é administrado, o método também inclui a provisão de um valor de pós-administração para o nível ou estado da mie- Iina no sujeito (por exemplo, o nível ou estado da mielina após a administra- ção de uma terapia de remielinização) e comparação do valor de pós- administração com o valor de referência, dessa forma, avaliando o sujeito, por exemplo, determinando se o sujeito está respondendo ou não à terapia. O valor de pós-administração (isto é, o valor correspondente ao estado ou nível da mielina em um sujeito após uma terapia de remielinização) pode ser determinado, por exemplo, através de quaisquer dos métodos de exame a- qui descritos. O valor de referência (isto é, o estado ou nível de mielina em um sujeito antes do tratamento com uma terapia de remielinização) pode também ser determinado, por exemplo, através de quaisquer dos métodos de exame aqui descritos.

Em algumas modalidades, o método inclui a atribuição de uma classe ao sujeito e, opcionalmente, o registro da atribuição, por exemplo, em um registro legível de computador.

Em algumas modalidades, a avaliação inclui a determinação se o sujeito está respondendo. Em outras modalidades, a avaliação inclui a de- terminação se o sujeito não está respondendo.

Em algumas modalidades, a avaliação inclui a provisão de in- formação, pela qual se toma uma decisão sobre o sujeito.

Em algumas modalidades, o método inclui ainda a etapa se se- lecionar o sujeito para um tratamento previamente selecionado.

Em algumas modalidades, o método inclui ainda a etapa de se- lecionar um período de duração de tratamento de um distúrbio desmielini- zante (por exemplo, Esclerose Múltipla) em um sujeito.

Em algumas modalidades, uma determinação de que um sujeito está respondendo indica que um período mais curto de duração do trata- mento pode, deve, será ou é administrado ao sujeito (por exemplo, mais cur- to que o tratamento que é recomendado para um sujeito que não está res- pondendo à terapia ou um período mais curto de duração que o atualmente usado com as terapias existentes para os distúrbios desmielinizantes e, op- cionalmente, que a indicação é introduzida em um sistema de registro).

Em algumas modalidades, uma determinação de que um sujeito está respondendo indica que um período mais curto de duração do trata- mento é contra-indicado para o sujeito (por exemplo, uma duração mais cur- ta que a atualmente usada nos tratamentos existentes para os distúrbios desmielinizantes, por exemplo, quaisquer dos tratamentos para distúrbios desmielinizantes aqui descritos) e, opcionalmente, que a indicação é intro- duzida em um sistema de registro.

Em algumas modalidades, a provisão de comparação de um va- lor de pós-administração com um valor de referência inclui: provisão de uma determinação de um nível de pós-administração de mielina em um sujeito em um primeiro ponto de tempo (por exemplo, quando o primeiro ponto de tempo é 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ou mais dias; 3, 4, 5, 6, 8 ou mais se- manas; 3, 4, 6, 12 ou mais meses), após o começo da administração da te- rapia de remielinização (por exemplo, mediante uso de LTpR solúvel); provi- são de uma determinação de um valor de referência do estado ou nível de mielina no sujeito em um segundo ponto de tempo que é anterior ao primeiro ponto de tempo (por exemplo, quando o segundo ponto de tempo é anterior ou está dentro de aproximadamente 1, 2, 3, 4, ou 5 dias do começo da ad- ministração de uma terapia de remielinização (por exemplo, mediante uso de LTpR solúvel); e provisão de uma comparação do nível de pós-administração e valor de referência de uma mielina de um sujeito, em que níveis crescen- tes de mielina em um sujeito (por exemplo, os níveis diferindo de não mais que cerca de 60%, cerca de 50%, cerca de 40%, cerca de 30%, cerca de 20%, cerca de 10%, cerca de 5%, cerca de 2%, ou cerca de 1%) entre o ní- vel de pós-administração e o valor de referência, indicam que o sujeito está respondendo.

Em outro aspecto, a invenção caracteriza um método de seleção

de uma classe de pagamento para um curso de tratamento de uma terapia de remielinização (por exemplo, um LTpR solúvel, por exemplo, um polipep- tídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) para um paciente que apresenta um distúrbio desmielinizante, por exemplo, Esclerose Múltipla. O método inclui a provisão (por exemplo, recepção) de uma avaliação se o paciente está ou não respondendo a uma terapia para um distúrbio desmielinizante; e executa pelo menos uma ação de (1) se o paciente estiver respondendo (por exemplo, ocorre a remielinização no paciente), seleciona uma primeira clas- se de pagamento, e (2) se o sujeito não estiver respondendo (por exemplo, nenhuma ocorrência de remielinização no paciente) seleciona uma segunda classe de pagamento. A terapia pode incluir um LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR1 tal como, LTpR-Fc). A terapia pode tam- bém incluir uma ou mais de quaisquer outras terapias para distúrbios desmi- elinizantes aqui descritas. Em algumas modalidades, a terapia é do tipo que aumenta a remielinização em um paciente, tal como, uma terapia que utiliza um LTpR solúvel.

Em algumas modalidades, a atribuição ao paciente é para a pri- meira classe de pagamento e a atribuição autoriza o pagamento para um curso de tratamento para uma primeira duração. Em algumas modalidades, o paciente está respondendo a uma terapia para um distúrbio desmielinizan- te e uma duração de tratamento inferior a 52, 48, 36, 24, 18, 12, 10, 8, 4 ou 2 semanas é autorizada.

Em algumas modalidades, a atribuição ao paciente é para a se- gunda classe de pagamento e a atribuição autoriza o pagamento para um curso de tratamento para uma segunda duração. Em algumas modalidades, o paciente não está respondendo a uma terapia para um distúrbio desmieli- nizante e uma duração de tratamento superior a 52, 48, 36, 24, 18, 12, 10, 8, 4 ou 2 semanas é autorizada.

Em algumas modalidades, a determinação se um paciente está respondendo a uma terapia é feita mediante avaliação do sujeito quanto a uma mudança, por exemplo, uma melhoria em um ou mais parâmteros que sejam indicativos de remielinização, por exemplo, o monitoramento da me- lhoria de um ou mais sintomas de um distúrbio desmielinizante. Tais sinto- mas incluem quaisquer sintomas de um distúrbio desmielinizante aqui des- crito. A remielinização pode também ser monitorada através de métodos que incluem a determinação direta do estado da mielina em um sujeito, por e- xemplo, a possibilidade de se medir a massa de matéria branca usando for- mação de imagem por ressonância magnética (MRI), a medição da espessu- ra de fibras de mielina usando um exame de varredura do cérebro por es- pectroscopia de ressonância magnética (MRS) ou qualquer outra avaliação direta aqui descrita.

Em outra modalidade, a determinação se um paciente está res- pondendo a uma terapia pode também ser avaliada por meio de qualquer outra determinação ou método aqui descrito, incluindo, sem que seja a isso limitado, o monitoramento de um paciente para redução do tamanho ou nú- mero de lesões inflamatórias (isto é, esclerose) presentes no paciente; o monitoramento de um fluido cerebroespinhal para uma redução da presença ou quantidade de: (i) proteínas anormais, tais como, fragmentos minúsculos de mielina; (ii) elevados níveis de ou tipos específicos de linfócitos; e/ou (iii) níveis anormais de moléculas de imunoglobulina (IgG); o monitoramento de um paciente quanto a uma mudança positiva na neuropsicologia (por exem- plo, a situação de diversas capacidades, tais como, a memória, a aritmética, a atenção, o juízo e a razão); e/ou o monitoramento da urina do paciente quanto à diminuição dos níveis de material tipo proteína básica de mielina (MBPLM).

Em algumas modalidades, pelo menos, uma melhoria de 5% (por exemplo, pelo menos, 10%; pelo menos, 15%; pelo menos, 20%; pelo menos, 25%; pelo menos, 30%; pelo menos, 35%; pelo menos, 40%; pelo menos, 50%; pelo menos, 60%; pelo menos, 70%) em um ou mais sintomas de um distúrbio desmielinizante ou outra indicação aqui descrita, após uma terapia de remielinização (por exemplo, uma terapia que induza a remielini- zação em um sujeito, por exemplo, uma terapia que utiliza, por exemplo, um LTpR solúvel) é suficiente para classificar o paciente como respondendo à terapia.

Em outro aspecto, a invenção caracteriza um método de provi- são de informação sobre como tomar uma decisão sobre um sujeito humano (por exemplo, um paciente) ou tomar tal decisão. O método inclui a provisão (por exemplo, recepção) de uma avaliação de um paciente, em que a avalia- ção foi feita por um método aqui descrito, por exemplo, determinando se um paciente apresenta ou está em risco de desenvolver um distúrbio desmielini- zante ou se é um paciente que se encontra com necessidade de ou, prova- velmente, de se beneficiar de um aumento de remielinização; provisão de uma determinação de um estado, nível ou quantidade de pós-administração de mielina em um paciente (por exemplo, o grau de intensidade da remielini- zação); dessa forma, proporcionando um valor de administração; proporcio- nando uma comparação do nível de pós-administração com um valor de re- ferência (por exemplo, o nível de mielina presente em um paciente antes do tratamento); e, dessa forma, proporcionando informação de como tomar uma decisão sobre um paciente ou, então, tomar tal decisão.

Em algumas modalidades, o método inclui tomar a decisão so- bre o paciente.

Em outras modalidades, o método também inclui comunicar a informação a uma outra parte (por exemplo, mediante um computador, CD1 telefone, fax, e-mail ou carta).

Em algumas modalidades, o método inclui o registro da informa- ção, por exemplo, em um registrolegível por computador ou em um arquivo do paciente.

Em algumas modalidades, a decisão inclui selecionar um pacien- te para pagamento, realizar ou autorizar o pagamento para um primeiro cur- so de ação, se o paciente estiver respondendo a uma terapia para um dis- túrbio desmielinizante (por exemplo, uma terapia que aumenta a remieliniza- ção em um paciente) e para um segundo curso de ação, se o paciente não estiver respondendo a uma terapia para um distúrbio desmielinizante.

Em algumas modalidades, a decisão inclui selecionar um primei- ro curso de ação se o valor de pós-administração apresentar uma primeira predeterminada relação com um valor de referência (por exemplo, o valor de pós-administração é superior ao valor de referência), e selecionar um se- gundo curso de ação se o valor de pós-administração apresentar uma se- gunda predeterminada relação com o valor de referência (por exemplo, o valor de pós-administração é inferior ao valor de referência).

Em algumas modalidades, a decisão inclui selecionar um primei- ro curso de ação se o paciente estiver respondendo e um segundo curso de ação se o paciente não estiver respondendo a uma terapia para um distúrbio desmielinizante (por exemplo, uma terapia que aumente a remielinização em um paciente).

Em algumas modalidades, o paciente está respondendo e o cur- so de ação é uma autorização de um curso de terapia. Em algumas modali- dades, o curso de terapia é mais curto do que aquele provido para um paci- ente similar que não está respondendo, por exemplo, o curso de terapia é inferior a 52, 48, 36, 24, 18, 12, 10, 8, 4 ou 2 semanas.

Em algumas modalidades, o paciente está respondendo a uma terapia e o curso de ação é designar o paciente para uma primeira classe. Em algumas modalidades, a atribuição da primeira classe irá possibilitar o pagamento de um tratamento proporcionado ao paciente. Em algumas mo- dalidades, o pagamento é feito por uma primeira parte para uma segunda parte. Em algumas modalidades, a primeira parte é uma parte diferente do paciente. Em algumas modalidades, a primeira parte é selecionada de um pagador de uma terceira parte, uma companhia de seguros, um empregador, um plano de saúde mantido pelo empregador, por HMO ou uma entidade governamental. Em algumas modalidades, a segunda parte é selecionada dentre um paciente, um provedor de proteção de saúde, um médico, um HMO, um hospital, uma entidade governamental ou uma entidade que vende ou fornece o fármaco. Em algumas modalidades, a primeira parte é uma companhia de seguros e a segunda parte é selecionada dentre um paciente, um provedor de proteção de saúde, um médico, um HMO, uma entidade go- vernamental ou uma entidade que vende ou fornece o fármaco. Em algumas modalidades, a primeira parte é uma entidade governamental e a segunda parte é selecionada dentre um paciente, um provedor de proteção de saúde, um médico, um HMO, uma entidade governamental ou uma entidade que vende ou fornece o fármaco. Em algumas modalidades, o paciente não está respondendo e o curso de ação é a autorização de um curso de terapia. Em algumas modali- dades, o curso de terapia é maior que aquele que é provido para um pacien- te similar que está respondendo a uma terapia para um distúrbio desmielini- zante (por exemplo, uma terapia que aumenta a remielinização em um sujei- to), por exemplo, o curso de terapia é superiora 52, 48, 36, 24, 18, 12, 10, 8, 4 ou 2 semanas.

Em algumas modalidades, o sujeito não está respondendo e o curso de ação é designar o paciente para uma segunda classe. Em algumas modalidades, a atribuição da segunda classe irá possibilitar o pagamento de um tratamento proporcionado ao paciente, por exemplo, um tratamento por um período de tempo que é maior que um período previamente selecionado (por exemplo, maior que o período de tratamento para um paciente que está melhor respondendo). Em algumas modalidades, o pagamento é feito por uma primeira parte para uma segunda parte. Em algumas modalidades, a primeira parte é uma parte diferente do paciente. Em algumas modalidades, a primeira parte é selecionada de um pagador de uma terceira parte, uma companhia de seguros, um empregador, um plano de saúde mantido pelo empregador, por HMO ou uma entidade governamental. Em algumas moda- lidades, a segunda parte é selecionada dentre um paciente, um provedor de proteção de saúde, um médico, um HMO, um hospital, uma entidade gover- namental ou uma entidade que vende ou fornece o fármaco. Em algumas modalidades, a primeira parte é uma companhia de seguros e a segunda parte é selecionada dentre um paciente, um provedor de proteção de saúde, um médico, um HMO, uma entidade governamental ou uma entidade que vende ou fornece o fármaco. Em algumas modalidades, a primeira parte é uma entidade governamental e a segunda parte é selecionada dentre um paciente, um provedor de proteção de saúde, um médico, um HMO, uma entidade governamental ou uma entidade que vende ou fornece o fármaco. Em algumas modalidades, o paciente é do tipo que apresenta ou

que está em risco de desenvolver um distúrbio desmielinizante, tal como, Esclerose Múltipla, ou qualquer outro distúrbio desmielinizante aqui descrito. Em outro aspecto, a presenta descrição caracteriza um método de seleção de uma classe de pagamento para um curso de tratamento com uma terapia de remielinização para um sujeito que apresenta ou que está em risco de desenvolver um distúrbio desmielinizante, e/ou um sujeito em necessidade de ou, provavelmente, para se beneficiar do aumento de remie- linização. O método inclui a identificação do sujeito como um sujeito que es- tá respondendo à terapia, e a aprovação, fabricação, autorização, recepção, transmissão ou outro modo de permissão de pagamento de um selecionado curso de tratamento, por exemplo, um curso mais curto de tratamento (por exemplo, inferior a 52, 48, 36, 24, 18, 12, 10, 8, 4 ou 2 semanas) do que se o sujeito tivesse sido identificado como um sujeito não respondedor a uma te- rapia.

Em outro aspecto, a invenção caracteriza um método de trata- mento de um distúrbio desmielinizante em um humano, cujo método inclui a etapa de administrar a um sujeito (por exemplo, um humano, isto é, um paci- ente humano) uma dose de um LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como LTpR-Fc), em que a dita administração é sufici- ente para que a remielinização ocorra no humano. Opcionalmente, o método pode incluir a etapa de identificar um sujeito, como um sujeito que apresenta ou está em risco de desenvolver um distúrbio desmielinizante. Opcionalmen- te, o método também pode incluir a etapa de monitorar o sujeito quanto à remielinização. O sujeito pode ser qualquer sujeito dentre os aqui descritos. O distúrbio desmielinizante pode ser qualquer distúrbio desmielinizante den- tre os aqui descritos (por exemplo, Esclerose Múltipla). O LTpR solúvel pode ser de qualquer das dosagens aqui descritas (por exemplo, consultar quais- quer dos métodos de administração descritos acima). Em algumas modali- dades, o LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como LTpR-Fc), pode ser administrado na forma de uma monoterapia ou em combinação com uma ou mais adicionais terapias para um distúrbio desmie- linizante, conforme descrito acima. Em algumas modalidades, o LTpR solú- vel pode ser administrado a um sujeito que esteja recebendo uma terapia anti-TNF (por exemplo, Humira, Enbrel ou Remicade). Um sujeito pode ser identificado como um sujeito que apresenta ou que está em risco de desen- volver um distúrbio desmielinizante usando quaisquer dos métodos aqui descritos. O monitoramento de um sujeito (por exemplo, um paciente huma- no) quanto à remielinização pode incluir quaisquer dos métodos aqui descri- tos.

Em outro aspecto, a invenção caracteriza um método de trata- mento de um distúrbio desmielinizante em um humano, cujo método inclui as etapas de: (i) administrar a um humano uma dose de um LTpR solúvel sufi- ciente para promover a remielinização; e (ii) classificar o humano como ten- do um nível previamente selecionado de remielinização. Opcionalmente, o método pode incluir a etapa de monitorar o humano quanto à remielinização. O método também pode, opcionalmente, incluir a etapa de identificar um humano, como um que apresenta ou está em risco de desenvolver um dis- túrbio desmielinizante ou como um humano em necessidade de ou prova- velmente de se beneficiar de um aumento de remielinização. O distúrbio desmielinizante pode ser qualquer distúrbio desmielinizante dentre os aqui descritos (por exemplo, Esclerose Múltipla). O LTpR solúvel pode ser de qualquer das dosagens aqui descritas. A administração do LTpR solúvel a um sujeito pode incluir quaisquer das rotas, dosagens ou esquemas aqui descritos (por exemplo, consultar quaisquer dos métodos de administração descritos acima). Em algumas modalidades, o LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como LTpR-Fc), pode ser administra- do na forma de uma monoterapia ou em combinação com uma ou mais adi- cionais terapias para um distúrbio desmielinizante, conforme descrito acima. Em algumas modalidades, o LTpR solúvel pode ser administrado a um sujei- to que esteja recebendo uma terapia anti-TNF (por exemplo, Humira, Enbrel ou Remicade). O monitoramento de um sujeito (por exemplo, um paciente humano) quanto à remielinização pode incluir quaisquer dos métodos aqui descritos. Métodos exemplificativos para classificar a remielinização em um humano (por exemplo, um paciente) são descritos acima.

Em outro aspecto, a invenção também proporciona um método de promoção da remielinização. O método inclui as etapas de: (i) administrar a um humano que esteja recebendo uma terapia anti-TNF uma dose efetiva de um LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR1 tal como LTpR-Fc) e, opcionalmente, (ii) monitorar o humano quanto à remieli- nização. O método pode também, opcionalmente, incluir a etapa de identifi- car um sujeito, como um que apresenta ou está em risco de desenvolver um distúrbio desmielinizante resultante de uma terapia anti-TNF. O sujeito pode ser qualquer sujeito dentre os aqui descritos. A administração do LTpR solú- vel a um sujeito pode incluir quaisquer das rotas, dosagens ou esquemas aqui descritos (por exemplo, consultar quaisquer dos métodos de adminis- tração descritos acima). Em algumas modalidades, o LTpR solúvel (por e- xemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como LTpR-Fc), pode ser administrado na forma de uma monoterapia ou em combinação com uma ou mais adicionais terapias para um distúrbio desmielinizante, conforme descri- to acima. Em algumas modalidades, o LTpR solúvel pode ser administrado a um sujeito que esteja recebendo uma terapia anti-TNF, por exemplo, Humira, Enbrel ou Remicade. Um sujeito pode ser identificado como um que apre- senta ou está em risco de desenvolver um distúrbio desmielinizante usando quaisquer dos métodos aqui descritos. O monitoramento de um sujeito (por exemplo, um paciente humano) quanto à remielinização pode incluir quais- quer dos métodos aqui descritos (vide os métodos exemplificativos descritos acima).

Em outro aspecto, a invenção caracteriza um método de seleção de um paciente, como um que esteja em necessidade ou que possa se be- neficiar da administração de um LTpR solúvel. O método inclui a etapa de determinar se um paciente está em necessidade de ou se o paciente pode se beneficiar da remielinização. O método pode também incluir a etapa de tratar o paciente selecionado com uma forma solúvel de LTpR. Os métodos de seleção de um paciente podem incluir quaisquer dos métodos aqui e- xemplificados, incluindo, por exemplo, o monitoramento de um ou mais sin- tomas de um distúrbio desmielinizante ou quaisquer das determinações dire- tas do estado da mielina em um sujeito, conforme descrito acima. O LTpR solúvel pode ser qualquer um dentre aqueles descritos acima. A dose, fre- quência de administração (isto é, programação) e duração do tratamento pode ser qualquer uma dentre aquelas descritas acima.

Em algumas modalidades do método, o paciente é um paciente diagnosticado com um distúrbio desmielinizante. Em outras modalidades do método, o paciente é um paciente que apresenta um ou mais sintomas as- sociados a um distúrbio desmielinizante, tais como, quaisquer dos sintomas aqui descritos.

Em outro aspecto, a invenção proporciona um método de sele- cionar uma dose, rota de administração, freqüência de administração e/ou duração de tratamento de um LTpR solúvel a um paciente. O método inclui as etapas de: (i) avaliar o paciente quanto a um ou mais fatores específicos do paciente, e (ii) selecionar uma dose, freqüência de administração e/ou duração de tratamento, baseado na determinação de um ou mais fatores, e (iii) opcionalmente, quando adequado, administrar ao paciente uma dose de LTpR solúvel, conforme a dose, freqüência de administração e/ou duração de tratamento determinados na etapa (ii). O método pode também incluir a etapa de selecionar um paciente como um que apresenta ou está em risco de desenvolver um distúrbio desmielinizante. Consequentemente, o paciente pode ser do tipo que apresenta ou tem a possibilidade de desenvolver um distúrbio desmielinizante. Consequentemente, o paciente pode ser um que apresenta ou tem a possibilidade de desenvolver um distúrbio desmielinizan- te. O método pode também incluir a etapa de monitorar o paciente quanto à remielinização seguinte ao tratamento. O LTpR solúvel pode ser qualquer um dentre aqueles descritos.

Em algumas modalidades, o paciente pode ser determinado co- mo não estando em necessidade de ou de ter a possibilidade de se benefici- ar da administração de um LTpR solúvel.

Em outro aspecto, a invenção proporciona um dispositivo de li- beração designado para administração intravenosa, subcutânea ou intra- muscular de um LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) a um sujeito (por exemplo, um humano, isto é, um paciente humano) que apresenta um distúrbio desmielinizante, em que a administração é suficiente para que ocorra a remielinização no sujeito. O dispositivo de liberação pode ser qualquer dispositivo de liberação adequado aqui descrito, incluindo, por exemplo, uma seringa. O distúrbio desmielini- zante pode ser qualquer distúrbio desmielinizante aqui descrito (por exem- pio, Esclerose Múltipla). O sujeito pode ser quaisquer dos sujeitos aqui des- critos. O LTpR solúvel pode ser quaisquer dos polipeptídeos de LTpR aqui decritos.

Em algumas modalidades, o dispositivo de liberação contém uma dose unitária de um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc), em que a dose unitária é suficiente para aumentar a remielinização.

Doses de aproximadamente 0,001 mg/kg de um LTpR solúvel são esperadas como sendo adequados pontos de partida para otimização de doses de tratamento.

Em algumas modalidades, o dispositivo de liberação contém um LTpR solúvel Iiofilizado (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc).

Em outro aspecto, a invenção caracteriza um kit contendo (i) uma ou mais doses unitárias de um LTpR solúvel (por exemplo, um polipep- tídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) e (ii) reagentes e instruções de como realizar o teste para a remielinização. As instruções de como realizar o teste para a remielinização podem incluir instruções para quaisquer dos mé- todos de determinação de remielinização aqui descritos (vide acima).

Em algumas modalidades, o kit é para o tratamento de um dis- túrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla). Em outro aspecto, a invenção caracteriza um dispositivo de libe-

ração contendo dois compartimentos, em que o primeiro compartimento con- tém uma dose unitária de um LTpR solúvel Iiofilizado (por exemplo, um poli- peptídeo de fusão de LTpR1 tal como, LTpR-Fc), em que a doase unitária é suficiente para que ocorra a remielinização em um sujeito (por exemplo, um humano, isto é, um paciente humano); e o segundo compartimento contém um líquido para reconstituição do LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptí- deo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc), antes da administração ao sujei- to. O dispositivo de liberação pode ser qualquer dispositivo de liberação a- dequado aqui descrito, incluindo, por exemplo, uma seringa. O sujeito pode ser qualquer um dos sujeitos aqui descritos. O LTpR solúvel pode ser qual- quer um dentre os polipeptídeos de LTpR solúvel aqui descritos. O líquido pode ser qualquer diluente farmaceuticamente aceitável aqui descrito, po- dendo incluir, por exemplo, um tampão (por exemplo, solução salina tampo- nada de fosfato) ou água destilada e/ou esterilizada.

Em algumas modalidades, o dispositivo de liberação contém uma dose unitária de um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc), de modo que a administração do LTpR solúvel resonstituído (por exemplo, LTpR-Fc) a um sujeito possa liberar ao mesmo, pelo menos, cerca de 0,001 mg do LTpR solúvel por kg de peso do corpo do sujeito.

Em outro aspecto, a invenção proporciona um método de instruir um paciente que apresenta um distúrbio desmielinizante, para tratamento do distúrbio desmielinizante do paciente, cujo método inclui as etapas de: (i) prover o paciente com, pelo menos, duas doses unitárias de um LTpR solú- vel (por exemplo, um LTpR-Fc); e (ii) instruir o paciente para auto-administrar as doses unitárias pela via subcutânea, uma dose de cada vez, em que a dose unitária do LTpR-Fc é suficiente para induzir a remielinização no paci- ente. Opcionalmente, o método pode incluir a etapa de instruir o paciente para se auto-monitorar quanto à remielinização. O distúrbio desmielinizante pode ser qualquer um dentre aqueles aqui descritos, como, por exemplo, Esclerose Múltipla. O LTpR solúvel pode ser qualquer polipeptídeo de LTpR solúvel aqui descrito, tal como, o LTpR-Fc descrito na SEQ ID N°:1. A admi- nistração de uma ou mais doses de um LTpR solúvel (isto é, as instruções de como proceder) pode incluir quaisquer dos métodos (por exemplo, pro- gramações) aqui descritos.

Um "LTpR solúvel" conforme aqui definido, é um polipeptídeo que inclui um fragmento de ligação de Iinfotoxina (LT), da região extracelular do LTpR. Por exemplo, um LTpR solúvel pode incluir todo ou apenas um fragmento do domínio extracelular do LTpR humano (por exemplo, pode in- cluir os resíduos 40-200, 35-200, 40-210; 35-220, 32-225, or 28-225 do LTpR humano, conforme ilustrado pela SEQ ID N°:2, abaixo).

MLLPW ATSAPGLAWGPLVLGLFGLLAASQPQAVPPYASENQTCRDQEKEY

YEPQHRICCSRCPPGTWSAKCSRIRDTVCATCAENSYNEHWNYLTICQLC

RPCDPVMGLEEIAPCTSKRKTQCRCQPGMFCAAWALECTHCELLSDCPPG

TEAELKDEVGKGNNHCVPCKAGHFQNTSSPSARCQPHTRCENQGLVEAA

PGTAQSDTTCKNPLEPLPPEMSGTMLMLAVLLPLAFFLLLATVFSCIWKSHP

SLCRKLGSLLKRRPQGEGPNPVAGSWEPPKAHPYFPDLVQPLLPISGDVS

PVSTGLPAAPVLEAGVPQQQSPLDLTREPQLEPGEQSQVAHGTNGIHVTG

GSMTITGNIYIYNGPVLGGPPGPGDLPATPEPPYPIPEEGDPGPPGLSTPHQ

EDGKAWHLAETEHCGATPSNRGPRNQFITHD (SEQ ID N°:2).

Em algumas modalidades, um LTpR solúvel inclui a região extra- celular da molécula de LTpR1 representada pelos resíduos 32-225 da SEQ ID N°:2 (ilustrado pela SEQ ID N°:11, abaixo).

AVPPYASENQTCRDQEKEYYEPQHRICCSRCPPGTYVSAKCSRIRDTVCA TCAENSYNEHWNYLTICQLCRPCDPVMGLEEIAPCTSKRKTQCRCQPGMF CAAWALECTHCELLSDCPPGTEAELKDEVGKGNNHCVPCKAGHFQNTSS PSARCQPHTRCENQGLVEAAPGTAQSDTTCKNPLEPLPPEMSGTM (SEQ ID N°:11).

Em algumas modalidades, o polipeptídeo LTpR R imaturo e de extensão total é um polipeptídeo de LTpR imaturo e de extensão total deri- vado de quaisquer espécies (por exemplo, qualquer mamífero, como, por exemplo, um camundongo, rato ou macaco) que expressa um homólogo de polipeptídeo de LTpR humano, conforme indicado na SEQ ID N°:2. Numa modalidade preferida, o polipeptídeo de LTpR é um LTpR humano.

Em algumas modalidades, a porção de LTpR é auto-solúvel. Em algumas modalidades, o LTpR é unido a uma porção heteróloga que aumen- ta a sua solubilidade, por exemplo, uma região de Fc de uma molécula de imunoglobulina. Em algumas modalidades, a porção heteróloga pode ser unida covalentemente à porção de LTpR.

Em algumas modalidades, um LTpR solúvel pode ser modificado por fixação covalente de uma segunda porção de polipeptídeo, por exemplo, um polipeptídeo heterólogo (por exemplo, para produzir uma proteína de fu- são de LTpR) ou uma porção isenta de polipeptídeo. Em alguns casos, tais porções podem melhorar um parâmetro farmacodinâmico ou farmacocinéti- co, como, a solubilidade ou a meia vida. As proteínas de fusão de LTpR po- dem incluir toda ou uma parte da região constante de um anticorpo (por e- xemplo, um domínio de Fc), transferrina ou albumina, tal como, albumina de soro humano (HSA) ou albumina de soro bovino (BSA). A proteína de fusão pode incluir uma região de ligação entre a seqüência de LTpR e o domínio da proteína isenta de LTpR. Em algumas modalidades, um LTpR solúvel é modificado pela fixação covalente a um polímero, tal como, polietilenoglicol (PEG). Embora não-limitado por qualquer teoria ou mecanismo em particu- lar, tais LTpR solúveis podem atuar como receptores atrativos para reduzir a atividade (bloquear) do LTpR. Um exemplo de LTpR solúvel é um LTpR-Fc1 por exemplo, um LTpR-Fc tendo a seqüência de SEQ ID N°:1, indicada abai- xo:

MLLPWATSAPGLAWGPLVLGLFGLLAA AW PPYASEN QTCRDQEKEYYEPQHRICCSRCPPGTYVSAKCSRIR DTVCATCAENSYNEHWNYLTICQLCRPCDPVMGLEE IAPCTSKRKTQCRCQPGMFCAAWALECTHCELLSDC PPGTEAELKDEVGKGNNHCVPCKAGHFQNTSSPSA RCQPHTRCENQGLVEAAPGTAQSDTTCKNPLEPLPP EMSGTMVDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPK DTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEV HNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEY KCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSR DELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENN YKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSC SVMHEALHNHYTQKSLSLSPG.

(Os aminoácidos em itálico indicam seqüência de sinal; os ami- noácidos sublinhados indicam seqüência derivada da região extracelular do LTpR; e os aminoácidos em negrito indicam a seqüência de IgG Fe. Uma valina ligando a seqüência de LTpR com a seqüência de IgG-Fc é artificial, não sendo derivada do LTpR ou da seqüência de IgG-Fc. A seqüência subli- nhada é uma parte substancial do domínio extracelular de LTpR e corres- ponde aos aminoácidos 32 a 225 da SEQ ID N°:2 (vide abaixo)).

"Polipeptídeo" e "proteína" são usados permutavelmente e signi- ficam qualquer cadeia de aminoácidos ligada a peptídeo, independentemen- te da extensão da modificação pós-translacional. O LTpR, polipeptídeos he- terólogos ou proteínas de fusão do mesmo, usados em quaisquer dos méto- dos da invenção podem conter ou ser proteínas humanas ou podem ser va- riantes que não tenham mais que 50 (por exemplo, não mais que dois, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove, dez, 12, 15, 20, 25, 30, 35, 40, ou 50) substituições conservativas de aminoácidos. As substituições conservativas, tipicamente, incluem substituições dentro dos seguintes grupos: glicina e alanina, valina, isoleucina e leucina; ácido aspártico e ácido glutâmico; aspa- ragina, glutamina, serina e treonina; lisina, histidina e arginina; e fenilalanina e tirosina. Tudo que se exige é que: (i) tais variantes dos polipeptídeos de LTpR solúvel tenham, pelo menos, 25% (por exemplo, pelo menos 30%; 40%; 50%; 60%; 70%; 75%; 80%; 85%; 90%; 95%; 97%; 98%; 99%; 99.5%, ou 100% ou ainda mais) da capacidade da proteína de fusão de LTBR-Fc (SEQ ID N°:1) para induzira remielinização em um sujeito.

Um "fragmento de polipeptídeo", conforme aqui usado, se refere a um segmento de polipeptídeo que é mais curto que um polipeptídeo imatu- ro de inteira extensão. Um "fragmento funcional" de um polipeptídeo apre- senta, pelo menos, 10% (por exemplo, pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 35%, pelo menos 40%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo me- nos 70%, pelo menos 80%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, pelo menos 99,5%, ou 100% ou mais) da atividade do polipeptídeo maduro. Os fragmentos de um polipeptídeo incluem varian- tes de depleção terminal, assim como, de depleções internas de um polipep- tídeo. As variantes de depleção podem omitir um, dois, três, quatro, cinco, seis, sete, oito, nove, dez, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ou 20 segmen- tos de aminoácidos (de dois ou mais aminoácidos) ou de aminoácidos úni- cos não-contíguos. A menos que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos aqui usados possuem o mesmo significado que o normalmente entendido por um especialista versado na técnica à qual concerne a presen- te invenção. Os métodos e materiais preferidos são descritos abaixo, con- quanto que outros métodos e materiais similares ou equivalentes aos aqui descritos posam ser usados na prática ou como teste da presente invenção. Todas as publicações, pedidos de patentes, patentes e outras referências aqui mencionadas são incorporadas integralmente por meio dessas referên- cias. Os materiais, métodos e exemplos aqui descritos são apenas ilustrati- vos, não sendo idealizados de serem limitativos.

Outras características e vantagens da invenção se tornarão evi- dentes a partir de descrição, desenhos e reivindicações seguintes. Descrição dos Desenhos

A figura 1 representa um gráfico que ilustra níveis de expressão de mNRA LtpR em camundongos tipo selvagem durante tratamento com cuprizona.

A figura 2 representa um gráfico que ilustra a gravidade de des- mielinização em camundongos portadores de LtpR"7" e do tipo selvagem. Numa escala que ilustra a gravidade de desmielinização, conforme testado por seções de LFB-PAS manchadas com parafina, O indica mielinização normal, e 3 indica completa desmielinização. Cada círculo representa um camundongo individual: círculos abertos, camundongos C57BL6 tipo selva- gem (peso); círculos preenchidos, camundongos portadores de LtβR"/". Li- nhas horizontais indicam a marcação média de cada grupo.

A figura 3 representa um gráfico que ilustra números de oligo- dendrócitos detectados em corpos de linha intermediária calosa, em seguida ao tratamento com cuprizona. Os camundongos tipo selvagem são indicados por barras de cor cinza e os camundongos portadores de LtftR"/_ são indica- dos por barras pretas.

A figura 4 é um gráfico que ilustra números de células microgli- ais/macrófagas detectadas em corpos de linha intermediária calosa, em se- guida ao tratamento com cuprizona. Os camundongos tipo selvagem são indicados por barras de cor cinza e os camundongos portadores de LtftR^' são indicados por barras pretas.

A figura 5 é um gráfico que ilustra a gravidade de desmieliniza- ção de camundongos C57BL6 tipo selvagem, após a administração de 5 hLtftR-lg ou controle de Ig humano. Numa escala que ilustra a gravidade de desmielinização, conforme testado por seções de parafina manchadas de LFB-PAS1 0 indica mielinização normal, e 3 indica completa desmielinização. Cada círculo representa um camundongo individual: círculos abertos, ca- mundongos tratados com Ig humano; círculos preenchidos, camundongos 10 tratados com hLtftR-lg. Linhas horizontais indicam a marcação média de ca- da grupo.

A figura 6 é um gráfico que ilustra a gravidade de desmieliniza- ção de camundongos C57BL6 tipo selvagem, após a administração de mLtftR-lg ou controle de Ig de camundongo. Numa escala que ilustra a gra- 15 vidade de desmielinização, conforme testado por seções de LFB-PAS man- chadas com parafina, 0 indica mielinização normal, e 3 indica completa desmielinização. Cada círculo representa um camundongo individual: círcu- los abertos, camundongos tratados com Ig humano; círculos preenchidos, camundongos tratados com hLtftR-lg. Linhas horizontais indicam a marca- 20 ção média de cada grupo.

Descrição Detalhada da Invenção

Os LtftRs solúveis aqui descritos são inibidores do percurso de Iinfotoxina (LT) e são indicados para promover a remielinização. Assim, os LtftRs solúveis podem ser de utilidade para o tratamento de distúrbios des- 25 mielinizantes. Os distúrbios desmielinizantes podem incluir, por exemplo, Esclerose Múltipla (por exemplo, Esclerose Múltipla Reincidente/Remitente, Esclerose Múltipla Secundária Progressiva, Esclerose Múltipla Reincidente Progressiva, Esclerose Múltipla Primária Progressiva e Esclerose Múltipla Aguda Fulminante), Mielinólise Pontina Central, Encefalomielite Aguda Dis- 30 seminada, Leucoencefalopatia Multifocal Progressiva, Panencefalite Suba- guda Esclerosante, Encefalomielite Pós-infecciosa, Polineuropatia Desmieli- nizante Inflamatória Crônica, Síndrome de Guillain-Barre, Leucoencefalopa- tia Multifocal Progressiva, Doença de Devic, Esclerose Concêntrica de Balo e uma Leucodistrofia (por exemplo, Leucodistrofia Metacromática, doença de Krabbé, Adrenoleucodistrofia, doença de Pelizaeus-Merzbacher, doença de Canavan, Ataxia de Infância com Hipomielinização Central, doença de Ale- 5 xander ou doença de Refsum). Os agentes e métodos aqui descritos são particularmente adequados para o tratamento de Esclerose Múltipla.

A Esclerose Múltipla é um distúrbio idiopático do sistema nervo- so central, no qual o sistema imune do corpo ataca a mielina no cérebro e na coluna vertebral. Apesar de que a doença se manifesta em repetidos episó- 10 dios de inflamação ou como um condicionamento doentio crônico, a mesma normalmente resulta em múltiplas escaras (escleroses) na bainha da mieli- na, levando à diminuição ou perda da função do nervo. A Esclerose Múltipla, que afeta, principalmente, os adultos jovens, pode se manifestar em pacien- tes de qualquer idade. Os sintomas de Esclerose Múltipla incluem, por e- 15 xemplo, diminuição da visão ou da função cognitiva, dormência, fraqueza nas extremidades, tremores ou espasticidade, intolerância ao calor, redução da fala, incontinência, vertigem ou propriocepção reduzida. Os pacientes com Esclerose Múltipla, normalmente, também apresentam depressão.

Após a administração de uma composição contendo LTpR solú- vel (por exemplo, LTpR-Fc) a um sujeito (por exemplo, um paciente huma- no), a eficácia do tratamento (isto é, a remielinização resultante do tratamen- to) de um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla) pode ser determinada, por exemplo, mediante comparação do grau de gravidade do distúrbio desmielinizante do paciente antes e depois do tratamento. A de- terminação após o tratamento pode ocorrer imediatamente ou após um curto período após o tratamento (por exemplo, uma hora após o tratamento, duas horas após o tratamento, três horas após o tratamento, seis horas após o tratamento, 12 horas após o tratamento ou 18 horas após o tratamento) ou pode ocorrer pelo menos um dia (por exemplo, pelo menos um dia, pelo me- nos dois dias, pelo menos três dias, pelo menos cinco dias, pelo menos uma semana, pelo menos duas semanas, pelo menos três semanas, pelo menos cinco semanas, pelo menos dois meses, pelo menos seis meses ou pelo menos um ano) após o tratamento. Quando a progressão da melhoria da Esclerose Múltipla após um ou mais tratamentos com LTpR-Fc (por exemplo, um ou mais tratamentos para induzir a remielinização) é para ser determina- da, um sintoma do paciente ou capacidade cognitiva podem ser avaliados ou 5 medidos em múltiplos pontos de tempo após o tratamento com LTpR-Fc (por exemplo, uma avaliação de um dia, dois dias e uma semana; uma avaliação de uma semana, um mês e seis meses; uma avaliação de um mês, seis me- ses e um ano). A progressão da melhoria de um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla) pode também incluir a medição ou deter- 10 minação, por exemplo, de uma mudança no tamanho ou número de lesões desmielinizantes em um paciente ou uma mudança (isto é, uma melhoria) na função do nervo.

Adequados métodos para avaliação do grau ou gravidade de um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla ou qualquer outro distúrbio desmielinizante aqui descrito) são bem conhecidos no segmento da técnica. Por exemplo, a presença, grau de intensidade ou gravidade da Es- clerose Múltipla pode ser determinada através do uso de um determinado número de testes e avaliações quantitativas. Por exemplo, um puncionamen- to lombar (isto é, um puncionamento da coluna) pode ser executado em um paciente para se obter uma amostra do fluido cerebroespinhal. O fluido ce- rebroespinhal é depois testado quanto à presença de, por exemplo (i) proteí- nas anormais, tais como fragmentos minúsculos de mielina (ii) elevados ní- veis de ou tipos específicos de linfócitos, e/ou (iii) níveis anormais de molé- culas de imunoglobulina (IgG). Outro exemplo de um teste quantitativo para um distúrbio desmielinizante é um teste de potencial evocado, que mede a atividade do nervo como função de quanto tempo ele toma impulsos nervo- sos do olho, orelha ou da pele para amcançar o cérebro. Um distúrbio des- mielinizante pode ser também examinado mediante avaliação do tamanho e/ou do número de lesões inflamatórias (isto é, escleroses) presentes no sistema nervoso central usando quaisquer dos diversos métodos de forma- ção de imagem, incluindo, sem que seja a isso limitado, exames de Forma- ção de Imagem por Ressonância Magnética (MRI), exames de Tomografia por Emissão de Pósitron (PET)1 Formação de Imagem Ponderada por Difu- são (DW-I ou DW-MRI), Formação de Imagem do Tensor por Difusão, Mie- lografia, Transferência de Magnetização. Os pacientes podem também ser diagnosticados usando uma variedade de determinações semi-quantitativas 5 e semi-qualitativas de sua neuropsicologia (por exemplo, a situação de di- versas capacidades, tais como, a memória, a aritmética, a atenção, o juízo e a razão) ou sintomas (parâmetros clínicos) apresentados pelo paciente, in- cluindo, por exemplo, quaisquer dos sintomas de Esclerose Múltipla descri- tos acima. Além disso, o grau de intensidade ou progressão de um distúrbio 10 desmielinizante pode ser detectado mediante teste de uma urina do paciente quanto aos elevados níveis de material tipo proteína básica de mielina (MB- PLM), cuja substância se torna elevada na medida em que ocorrem danos axonais durante a progressão da doença (vide, por exemplo, Whitaker e ou- tros, (1995), Ann. Neurol., 38(4):635-632). Determinados testes quanto à 15 cegueira de cor podem também ser de utilidade na busca do efeito dos dis- túrbios desmielinizantes nos olhos.

Quaisquer dos métodos de diagnóstico acima descritos podem também ser usados para avaliar o aumento de remielinização em um sujeito (por exemplo, um paciente) após o tratamento com um LTpR solúvel (por 20 exemplo, LTpR-Fc). Por exemplo, a remielinização pode coincidir com uma redução de tamanho ou número de escleroses presentes em um paciente, conforme determinado através de quaisquer dos métodos de formação de imagem aqui descritos. Também, a remielinização em um sujeito pode ser medida como um aumento na velocidade de transmissão de um sinal prove- 25 niente das orelhas, dos olhos ou da pele para o cérebro, conforme determi- nado pelo teste de potencial evocado. Em alguns casos, a remielinização pode ser avaliada como um aumento de volume de matéria branca (por e- xemplo, massa de nervo da coluna vertebral ou do cérebro), particularmente, quando o distúrbio desmielinizante foi resultado de atrofia do nervo. Em al- 30 guns casos, o grau de ocorrência de remielinização pode ser determinado medindo diretamente a espessura da mielina de um sujeito, usando, por e- xemplo, exames de espectroscopia por ressonância magnética. A eficácia de um determinado tratamento (isto é, o grau de in- tensidade de remielinização) ao se tratar um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla) pode ser definida como uma melhoria de um ou mais sintomas de distúrbio desmielinizante (por exemplo, quaisquer dos sín- 5 tomas descritos acima) de pelo menos 5% (por exemplo, pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 40%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo me- nos 65% ou mais). Em alguns casos, a eficácia de um tratamento com LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) pode ser determinada a partir da estabiliza- 10 ção de um ou mais sintomas de piora associados com Esclerose Múltipla (isto é, o encurtamento dos tratamentos da piora de um ou mais sintomas de Esclerose Múltipla). A eficácia do tratamento ou grau de intensidade da re- mielinização podem, também, ser avaliados em um paciente, usando quais- quer dos métodos de diagnóstico aqui decritos, por exemplo, MRI ou PET. 15 Por exemplo, a melhoria do tamanho ou número de lesões desmielinizantes (escleroses) após um tratamento com um LTpR-Fc pode ser monitorada u- sando MRI.

Terapias Combinatórias

Os métodos e composições aqui descritos podem ser usados em combinação com outras terapias usadas para o tratamento de distúrbios desmielinizantes. Por exemplo, uma composição de LTpR solúvel (por e- xemplo, LTpR-Fc) pode ser usada em combinação com terapias diretas para Esclerose Múltipla, tais como, sem que seja a isso limitado, Beta Interferon 1a (Avonex), Beta Interferon 1b (Rebif)1 acetato de glatiramer (Copaxona), mitoxantrona (Novantrona), azatiprina (Imuran), ciclofosfamida (Citoxan ou Neosar), ciclosporina (Sandimmune), metotrexato, Cladribine (Leustatin), metilprednisona (Depo-Medrol ou Solu-Medrol), prednisona (Deltasona), prednisolona (DeIta-Cortef)1 dexametasona (Medrol ou Decadron), hormônio adreno-eorticotrófico (ACTH)1 ou Corticotropin (Acthar). Os métodos e com- posições (por exemplo, um LTpR solúvel, tal como LTpR-Fc) aqui providos podem também ser usados em combinação com terapias designadas para tratar os sintomas associados com um distúrbio desmielinizante. Quando o distúrbio desmielinizante for, por exemplo, Esclerose Múltipla, pode ser ad- ministrado um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) em combinação com um ou mais tratamentos para a dor, associados com a Esclerose Múltipla, incluindo, por exemplo, carbamazepina, gabapentina, topiramato, zonisimi- da, fenitoína, pentoxifilina, ibuprofen, aspirina, ou acetaminofeno.

Um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) pode também ser ad- ministrado em combinação com um ou mais tratamentos para ansiedade ou depressão, associados com Esclerose Múltipla, incluindo, por exemplo, fluo- xetina, sertralina, vanlafaxina, citalopram, parocetin, trazodona, buproprion, diazepam, ou amitriptilina.

Além disso, um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) pode ser administrado em combinação com um ou mais tratamentos para outros sin- tomas de Esclerose Múltipla, incluindo, incontinência (por exemplo, oxibuti- nina, betano ou imipramina), tremores ou espasticidade (por exemplo, baclo- 15 fen, dantroleno sódico ou tizanidina) ou vertigem (por exemplo, mecizina, dimenidrinato, proclorperazina ou escopolamina).

A presente invenção também inclui o uso de métodos e compo- sições aqui descritas, em combinação com terapias ou medicamentos que possam causar condições desmielinizantes. Por exemplo, uma terapia anti- 20 TNF para tratamento de artrite reumatóide, como efeito colateral, pode resul- tar em um tipo de condicionamento doentio desmielinizante. Assim, um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) pode ser administrado (por exemplo, coad- ministrado) em combinação com uma terapia anti-TNF para prevenir, melho- rar ou reverter os efeitos colaterais da desmielinização e promover a remieli- 25 nização. As terapias anti-TNF incluem, sem que seja a isso limitado, adali- mumab (Humira), etanercept (EnbreI) ou infliximab (Remicade).

Quaisquer dos métodos ou composições aqui descritos, geral- mente, podem ser usados em qualquer circunstância em que um aumento da remielinização possa ser vantajoso.

Em alguns casos, um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) é

usado como uma terapia de segunda linha. Por exemplo, um paciente que é determinado como sendo não-responsivo a uma ou mais terapias para um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla) irá interromper o recebimento do referido um ou mais tratamentos e irá começar o tratamento com um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc). Alternativamente, o paciente irá continuar a receber a referida uma ou mais terapias para um distúrbio desmielinizante, recebendo, ao mesmo tempo, o tratamento com o LTpR solúvel.

Composições Farmacêuticas

Um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) pode ser formulado como uma composição farmacêutica, por exemplo, para administração a um sujeito de um tratamento de um distúrbio desmielinizante, tal como, Esclero- se Múltipla. Tipicamente, uma composição farmacêutica inclui um veículo farmaceuticamente aceitável. Conforme aqui usado, "veículo farmaceutica- mente aceitável" inclui quaisquer e todos os solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e anti-fungos, agentes isotônicos e de retardamento de absorção, e outros agentes similares, que sejam fisiolo- gicamente compatíveis. A composição pode incluir um sal farmaceuticamen- te aceitável, por exemplo, um sal de adição de ácido ou um sal de adição de base (vide, por exemplo, Bergee outros, J. Pharm. Sei. 66:1-19, 1977).

O LTpR solúvel pode ser formulado de acordo com métodos pa- dronizados. A formulação farmacêutica é bem conhecida no segmento da técnica, sendo ainda decrita, por exemplo, na publicação de Gennaro (ed.), Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20a. edição, Lippincott, Williams & Wilkins (2000) (ISBN: 0683306472); Ansel e outros, Pharmaceuti- cal Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7a. Edição, Lippincott Willi- ams & Wilkins Publishers (1999) (ISBN: 0683305727); e Kibbe (ed.), Hand- book of Pharmaceutical Exeipients, American Pharmaceutical Association, 3a. Edição (2000) (ISBN: 091733096X).

Em uma modalidade, um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) pode ser formulado com materiais excipientes, tais como, cloreto de sódio, fosfato dibásico de sódio heptaidratado, fosfato monobásico de sódio e um estabilizador. Pode ser provido, por exemplo, em uma solução tamponada sob uma adequada concentração, podendo ser armazenado na faixa de temperatura de 2-8°C.

As composições farmacêuticas podem se apresentar em uma variedade de formas. Estas incluem, por exemplo, formas de dosagem líqui- das, semissólidas e sólidas, tais como, soluções líquidas (por exemplo, solu- 5 ções injetáveis e de infusão), dispersões ou suspensões, comprimidos, pílu- las, pós, Iipossomas e supositórios. A forma preferida pode depender do modo pretendido de administração e da aplicação terapêutica. Tipicamente, as composições para os agents aqui descritos se apresentam na forma de soluções injetáveis ou soluções de infusão.

Tais composições podem ser administradas por meio de um

modo parenteral (por exemplo, injeção intravenosa, subcutânea, intraperito- neal ou injeção intramuscular). As expressões "administração parenteral" e "administrado parenteralmente", conforme aqui usadas, significam modos de administração diferentes dos modos de administração enteral e tópico, nor- 15 malmente, mediante injeção, e incluem, sem qualquer limitação, as adminis- trações pelas vias intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intra- capsular, intraorbital, intracardíaca, intradermal, intraperitoneal, transtraque- al, subcutânea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaraquinóide, in- traespinhal, epidural, intracerebral, intracranial, intracarótida e injeção intras- 20 ternal e infusão.

A composição pode ser formulada como uma solução, microe- mulsão, dispersão, lipossomo, ou qualquer outra estrutura ordenada ade- quada para armazenamento estável sob alta concentração. As soluções inje- táveis estéreis podem ser preparadas mediante incorporação de um agente 25 aqui descrito, na requerida quantidade, em um apropriado solvente com um ou uma combinação dos ingredientes enumerados acima, conforme neces- sário, seguido de esterilização filtrada. Geralmente, as dispersões são pre- paradas mediante incorporação de um agente aqui descrito, em um veículo estéril que contém um meio de dispersão básico e o requerido outro ingredi- 30 ente dentre aqueles enumerados acima. No caso dos pós estéreis para a preparação de soluções injetáveis estéreis, os métodos preferidos de prepa- ração incluem secagem a vácuo e secagem por congelamento, que produz um pó de um agente aqui descrito, mais qualquer adicional ingrediente dese- jado de uma solução filtrada, previamente esterilizada do mesmo. A adequa- da fluidez de uma solução pode ser mantida, por exemplo, mediante uso de um revestimento, tal como, lecitina, mantendo-se o tamanho de partícula 5 exigido, no caso de dispersão, e através do uso de tensoativos. A absorção prolongada de composições injetáveis pode ser produzida mediante inclusão na composição de um agente que retarda a absorção, por exemplo, sais de monoestearato e gelatina.

Em certas modalidades, o LTpR solúvel pode ser preparado com 10 um veículo que irá proteger o composto contra uma rápida liberação, tal co- mo, uma formulação de liberação controlada, incluindo, implantes e sistemas de liberação microencapsulada. Os polímeros biodegradáveis e biocompatí- veis podem ser usados, tais como, acetato de viniletileno, polianidridos, áci- do poliglicólico, colágeno, poliortoésteres e ácido poliláctico. Diversos méto- 15 dos para preparação de tais formulações são patenteados ou geralmente conhecidos. Vide, por exemplo, Sustained and Controlled Release Drug De- Iivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.

Um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) pode ser modificado, por exemplo, com uma porção que melhora sua estabilização e/ou retanção 20 na circulação, por exemplo, no sangue, soro ou outros tecidos, por exemplo, de pelo menos 1,5, 2, 5, 10 ou 50 vezes. O agente modificado pode ser ava- liado para determinar se o mesmo pode atingir locais de inflamação (por e- xemplo, lesões ou escleroses), tais como, aquelas que podem ocorer em um distúrbio desmielinizante, tal como, Esclerose Múltipla (por exemplo, median- 25 te uso de uma forma rotulada do agente).

Por exemplo, o LTpR solúvel pode ser associado com um polí- mero, por exemplo, um polímero substancialmente não-antigênico, tais co- mo, óxido de polialquileno ou um óxido de polietileno. Polímeros adequados irão variar substancialmente em peso. Os polímeros tendo pesos molecula- 30 res de números médios variando de cerca de 200 a cerca de 35.000 Daltons (ou cerca de 1.000 a cerca de 15.000, e 2.000 a cerca de 12.500 Daltons) podem ser usados. Por exemplo, um LTpR solúvel pode ser conjugado a um políme- ro solúvel em água, por exemplo, um polímero de polivinila hidrofílico, por exemplo, álcool polivinílico ou polivinilpirrodona. Uma lista não-limitativa de tais polímeros incluem os homopolímeros de óxido de polialquileno, tais co- 5 mo, polietilenoglicol (PEG) ou polipropilenoglicol, polióis polioxietilenados, copolímeros dos mesmos e copolímeros em bloco dos mesmos, desde que a solubilidade em água dos copolímeros em bloco seja mantida. Adicionais polímeros úteis incluem os polioxialquilenos, tais como, polioxietileno, polio- xipropileno e copolímeros em bloco de polioxietileno e polioxipropileno (Plu- 10 ronics); polimetacrilatos; carbômeros; e polissacarídeos ramificados ou não- ramificados.

Quando o LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) é usado em combinação com um segundo agente (por exemplo, quaisquer das terapias para Esclerose Múltipla e outros distúrbios desmielinizantes aqui descritos), 15 os dois agentes podem ser formulados separadamente ou em conjunto. Por exemplo, as respectivas composições farmacêuticas podem ser misturadas, por exemplo, pouco antes da administração, e administradas em conjunto ou podem ser administradas separadamente, por exemplo, nos mesmos tem- pos ou em tempos diferentes.

Administração

Um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc) pode ser administrado a um sujeito, por exemplo, um sujeito humano, mediante uma variedade de métodos. Para diversas aplicações, a rota de administração é uma dentre as seguintes: injeção intravenosa ou infusão (IV), injeção subcutânea (SC), in- 25 jeção intraperitoneal (IP) ou injeção intramuscular. Em alguns casos, a ad- ministração pode ser feita diretamente no sistema nervoso central (CNS), por exemplo, mediante injeção intratecal, intracerebroventricular (ICV), intra- cerebral ou intracranial. O agente pode ser administrado como uma dose fixa ou em uma dose tipo mg/kg.

A dose pode ser também escolhida para reduzir ou evitar a pro-

dução de anticorpos contra o agente.

A rota ou o modo de administração do LTpR solúvel pode ser também dimensionada para cada caso individual, por exemplo, mediante determinação do local, número ou tamanho de escleroses em um sujeito, por exemplo, usando exames de Formação de Imagem por Ressonância Mag- nética (MRI), exames de Tomografia por Emissão de Pósitron (PET), Forma- 5 ção de Imagem Ponderada por Difusão (DW-I ou DW-MRI), Formação de Imagem do Tensor por Difusão, Mielografia, Transferência de Magnetização. A gravidade ou grau de intensidade de um distúrbio desmielinizante podem também ser determinados a partir do pucionamento lombar (por exemplo, para verificar o número elevado de células brancas no fluido cerebroespi- 10 nhal) pelo teste do potencial evocado, como uma medida da função nervosa e/ou por meio de quaisquer outros parâmetros padrões associados com um distúrbio desmielinizante (por exemplo, Esclerose Múltipla), por exemplo, mediante quaisquer dos critérios de determinação aqui descritos.

Os regimes de dosagem são ajustados para proporcionar a res- posta desejada, por exemplo, uma resposta terapêutica ou um efeito tera- pêutico combinado. O regime de dosagem irá, por exemplo, provocar um aumento na remielinização. Geralmente, uma dose de um LTpR solúvel (por exemplo, LTpR-Fc), opcionalmente, formulada separadamente ou em con- junto com uma apropriada dose de um segundo agente terapêutico pode ser usada para prover ao sujeito o LTpR solúvel. Adequadas dosagens e/ou fai- xas de doses para o LTpR solúvel incluem uma quantidade suficiente para provocar um aumento de remielinização em um sujeito. Adequadas dosa- gens podem incluir quaisquer daquelas aqui descritas e incluem, por exem- plo, uma dose de pelo menos cerca de 0,001 mg de um LTpR solúvel por kg de peso do corpo de um sujeito (por exemplo, um paciente humano).

Uma dose de um LTpR solúvel (por exemplo, um polipeptídeo de fusão de LTpR, tal como, LTpR-Fc) requerido para aumentar a remieliniza- ção, pode depender de uma variedade de fatores, incluindo, por exemplo, a idade, sexo e peso do sujeito a ser tratado. Outros fatores que afetam a do- 30 se administrada ao sujeito incluem, por exemplo, o tipo de gravidade do dis- túrbio desmielinizante. Por exemplo, um paciente com Esclerose Múltipla Aguda Fulminante pode precisar da administração de uma diferente dosa- gem de um LTpR solúvel, diferentemente de um paciente com uma forma mais branda de Esclerose Múltipla. Outros fatores podem incluir, por exem- plo, outros distúrbios concomitantes ou que já afetam anteriormente o paci- ente, o estado de saúde em geral do paciente, a disposição genética do pa- 5 ciente, o regime de dieta, o tempo de administração, a velocidade de excre- ção, a combinação dos fármacos, e quaisquer outros adicionais agentes te- rapêuticos que são administrados ao paciente. Deve ser também entendido que uma dosagem e regime de tratamento específicos para qualquer pacien- te em particular, irá depender do julgamento do médico responsável pelo 10 tratamento. A quantidade de ingredientes ativos irá também depender do composto particularmente descrito e da presença ou ausência e natureza do adicional agente antiviral na composição.

A forma de dosagem unitária ou "dose fixa", conforme aqui usa- do, refere-se a unidades fisicamente distintas adequadas como dosagens 15 unitárias para os sujeitos a serem tratados; cada unidade contém uma pre- determinada quantidade de composto ativo, calculada para produzir o dese- jado efeito terapêutico (por exemplo, um aumento de intensidade da remieli- nização em um sujeito) em associação com o requerido veículo farmacêutico e, opcionalmente, em associação com o outro agente. Adequadas frequên- 20 cias de administração são descritas aqui em outros locais.

Uma composição farmacêutica pode incluir uma quantidade te- rapeuticamente efetiva de um LTpR solúvel aqui descrito. Tais quantidades efetivas podem ser determinadas baseadas no efeito do agente administra- do, ou no efeito combinatório de um agente e um agente secundário, no ca- 25 so de mais de um agente ser usado. Uma quantidade terapeuticamente efe- tiva de um agente pode também variar de acordo com fatores, tais como, estado da doença, idade, sexo e peso do indivíduo e da capacidade do composto em proporcionar uma resposta desejada no indivíduo, por exem- plo, melhoria de pelo menos um parâmetro do distúrbio , por exemplo, me- 30 Ihoria de pelo menos um sintoma de um distúrbio desmielinizante, por e- xemplo, Esclerose Múltipla. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente efetiva de um LTpR solúvel irá aumentar a remielinização e pode também tornar mais lenta e/ou melhorar a desmielinização. Uma quantidade terapeu- ticamente efetiva é também caracterizada por mostrar que quaisquer efeitos tóxicos ou prejudiciais são contrabalançados por efeitos terapêuticos benéfi- cos.

5 Dispositivos e Kits

As composições farmacêuticas que incluem um LTpR solúvel (por exemplo, um LTpR-Fc) podem ser administradas por meio de um dispo- sitivo médico. O dispositivo pode ser projetado com características, por e- xemplo, do tipo, portabilidade, armazenamento à temperatura ambiente, e 10 facilidade de uso, de modo que possa ser usado em situações de emergên- cia, por exemplo, por um sujeito não treinado ou por um pessoal de emer- gência no campo, ser removido para instalações médicas e para outros e- quipamentos médicos. O dispositivo pode incluir, por exemplo, um ou mais alojamentos para armazenamento das preparações farmacêuticas que inclu- 15 em um LTpR solúvel e pode ser configurado para liberar uma ou mais doses unitárias do agente. Por exemplo, a composição farmacêutica pode ser ad- ministrada com um dispositivo de liberação transcutânea, tal como, uma se- ringa, incluindo uma seringa hipodérmica ou de múltiplas câmaras. Outros adequados dispositivos de liberação incluem stents, catéteres, emplastros 20 subcutâneos, microagulhas e dispositivos de liberação controlada implantá- veis. O dispositivo (por exemplo, uma seringa) pode incluir um LTpR solúvel numa forma seca ou líquida, com uma dose suficiente para provocar uma remielinização. O dispositivo pode também ser um dispositivo de câmara dupla, em que uma câmara contém uma dose unitária de LTpR solúvel Iiofili- 25 zado (por exemplo, LTpR-Fc) suficiente para proporcionar um aumento de remielinização em um sujeito e uma segunda câmara contendo um líquido (por exemplo, um tampão) para reconstituição da dose unitária Iiofilizada de um LTpR solúvel.

Em outros exemplos, a composição farmacêutica pode ser ad- ministrada mediante um dispositivo de injeção hipodérmico sem agulha, co- mo, por exemplo, os dispositivos descritos nas Patentes U.S. Nos. 5.399.163; 5.383.851; 5.312.335; 5.064.413; 4.941.880; 4.790.824; ou 4.596.556. Exemplos de implantes e módulos bem conhecidos são descritos, por exemplo, na Patente U.S. N0 4.487.603, a qual descreve uma bomba de microinfusão implantável, para dispensa de medicação sob uma velocidade controlada; a Patente U.S. N0 4.486.194, a qual descreve um dispositivo te- 5 rapêutico para administração de medicações através da pele; a Patente U.S. N0 4.447.233, a qual descreve uma bomba de infusão de medicação para liberação de medicação com uma velocidade exata de infusão; a Patente U.S. N0 4.447.224, a qual descreve um dispositivo de infusão implantável de fluxo variável, para liberação contínua de um fármaco; a Patente U.S. N0 10 4.439.196, a qual descreve um sistema de liberação osmótica de fármaco, tendo compartimentos de múltiplas câmaras; e a Patente U.S. N0 4.475.196, a qual descreve um sistema de liberação osmótica de fármaco. Diversos ou- tros dispositivos, implantes, sistemas de liberação e módulos são, também, bastante conhecidos.

Um LTpR solúvel (por exemplo, um LTpR-Fc) pode ser provido

em um kit. Em uma modalidade, o kit inclui: (a) um recipiente que contém uma composição que inclui uma ou mais doses unitárias de um LTpR solúvel e, opcionalmente (b) um material de informação. As doses unitárias do LTpR solúvel são suficientes para provocar um aumento de remielinização em um sujeito. O material de informação pode ser descritivo, intrutivo, de marketing, ou qualquer outro material que seja referido aos métodos aqui descritos e/ou ao uso de agentes para benefício terapêutico. O kit pode também incluir rea- gentes e instruções de utilidade para o teste (ensaios) de remielinização. Esses métodos de ensaio quanto à remielinização incluem, sem que seja a isso limitado, quaisquer dos métodos de teste aqui descritos. Em uma moda- lidade, o kit inclui um ou mais agentes adicionais para tratamento de um dis- túrbio desmielinizante, tais como, um ou mais agentes para o tratamento de Esclerose Múltipla. Por exemplo, o kit inclui um primeiro recipiente que con- tém uma composição que compreende o LTpR solúvel e um segundo recipi- ente, que inclui o referido um ou mais agentes adicionais.

O material de informação dos kits não está limitado quanto à forma. Em uma modalidade, o material de informação pode incluir informa- ção sobre a produção do composto, peso molecular do composto, concen- tração, dados de prazo de vencimento, informação quanto à batelada ou lo- cal de produção, assim por diante. Em uma modalidade, o material de infor- mação refere-se a métodos de administração do LTpR solúvel (por exemplo, 5 LTpR-Fc), por exemplo, em uma adequada dose, forma de dosagem ou mo- do de administração (por exemplo, a dose, forma de dosagem ou modo de administração aqui descritos) para o tratamento de um sujeito que apresenta um distúrbio desmielinizante ou que está em risco de desenvolvimento ou de experimentar um episódio associado com um distúrbio desmielinizante. A 10 informação pode ser provida em uma variedade de formatos, incluindo, texto impresso, material legível por computador, registro em vídeo ou registro em áudio, ou uma informação que proporcione uma ligação ou um direciona- mento para um material substantivo.

Além do agente, a composição no kit pode incluir outros ingredi- 15 entes, tais como, um solvente ou um tampão, um estabilizador ou um con- servante. O agente pode ser fornecido de qualquer forma, por exemplo, lí- quida, seca ou liofilizada, preferivelmente, substancialmente pura e/ou esté- ril. Quando os agentes são providos em uma solução líquida, a solução lí- quida, preferivelmente, é uma solução aquosa. Quando os agentes são pro- 20 vidos em uma forma seca, geralmente, a reconstituição é feita mediante adi- ção de um adequado solvente. O solvente, por exemplo, água esterilizada ou tampão, opcionalmente, pode ser provido no kit.

O kit pode incluir um ou mais recipientes para a composição ou para as composições contendo os agentes. Em algumas modalidades, o kit 25 contém recipientes separados, divididos ou compartimentos para a composi- ção e para o material de informação. Por exemplo, a composição pode ser contida em uma garrafa, frasco ou seringa e o material de informação pode ser contido em um estojo ou pacote de plástico. Em outras modalidades, os elementos separados do kit são contidos dentro de um único recipiente não 30 dividido. Por exemplo, a composição contida em uma garrafa, frasco ou se- ringa que apresenta fixada à mesma o material de informação na forma de uma etiqueta. Em algumas modalidades, o kit inclui uma pluralidade (por e- xemplo, um pacote) de recipientes individuais, cada um contendo uma ou mais formas de dosagem unitária (por exemplo, uma forma de dosagem aqui descrita) dos agentes. Os recipientes podem incluir uma dosagem unitária combinada, por exemplo, uma dose unitária que inclua o LTpR solúvel e o 5 segundo agente, por exemplo, numa desejada proporção. Por exemplo, o kit inclui uma pluralidade de seringa, ampolas, embalagens em folhas, embala- gens em cartelas ou dispositivos médicos, por exemplo, cada um contendo uma única dose combinada. Os recipientes dos kits podem ser à prova de ar, à prova d'água (por exemplo, impermeáveis a mudanças de umidade ou 10 evaporação) e/ou à prova de luz.

O kit, opcionalmente, inclui um dispositivo adequado para admi- nistração da composição, por exemplo, uma seringa ou qualquer outro ade- quado dispositivo. O dispositivo pode ser provido de uma forma pré- carregado com um ou com ambos os agentes, ou pode se apresentar vazio, porém, adequado para ser carregado.

Métodos de Produção de LTBRs Solúveis

Adequados métodos de fabricação de LTpRs solúveis são co- nhecidos no segmento da técnica, sendo descritos, por exemplo, nos docu- mentos de patentes WO 97/03687, WO 98/17313, WO 00/21558, WO 99/38525 e WO 00/36092. Por exemplo, uma proteína de fusão de imuno- globulina de LTpR pode ser expressa na cultura celular (por exemplo, cultura celular de mamífero (tal como, células COS de macaco ou células de ovário de hamster Chinês), sob uma reduzida temperatura, para produzir uma quantidade aumentada de proteína de fusão adequadamente multiplicada. A proteína de fusão expressa pode ser purificada, por exemplo, mediante técnicas de cromatografia por afinidade ou convencionais (vide o documento de patente WO 00/36092). Todos os Pedidos de Patentes do PCT acima mencionados são aqui totalmente incorporados por meio dessas referências. Os exemplos seguintes são apresentados com o objetivo de apenas ilustrar, sem limitar a presente invenção. Exemplos

Exemplo 1 - Materiais e Métodos

Animais: Camundongos C57BL6 foram adquiridos de Jackson Laboratories (Bar Harbor, Maine) e criados em uma instalação de animais da 5 Universidade da Carolina do Norte (UNC). Os camundongos portadores de LtpR'7' foram também criados numa instalação para animais da UNC. Todos os procedimentos foram conduzidos emconformidade com o National Institu- tes of Health (NIH) e foram aprovados pelo Comitê Institucional de Proteção e Uso de Animal - Guide for the Care and Use of Laboratory Animais - da 10 UNC em Chapei Hill. Todos os camundongos tinham de 8-10 semanas de idade, antes do início do tratamento com cuprizona.

Tratamento dos Camundongos: Camundongos machos tipo LtpR_/" e C57BL6 tipo selvagem foram alimentados ad Iibitum com cuprizona

0,2% [bis(cicloexilidenohidrazida) oxálica] (Aldrich, St. Louis, MO), misturada 15 em ração moída. Os camundongos foram tratados durante 3, 3,5, 4, ou 5 semanas para estudar o processo de desmielinização. Para realização da remielinização, os camundongos foram retornados para um regime de dieta normal, com ração granulada durante 1, 2 ou 4 semanas, depois de 6 sema- nas de tratamento com cuprizona. Os camundongos não tratados foram 20 mantidos em um regime de dieta normal com ração granulada.

O LtpR-Ig humano e de camundongo e seus controles foram gentilmente fornecidos pelo Dr. J. Browning (Biogen Idec, Cambridge, MA) e são descritos no artigo de Gommerman e outros (2003), J. Clin. Invest. 112:755-767. Para estudar a desmielinização, os camundongos foram previ- 25 amente tratados no dia 1 e semanalmente depois com injeções intraperito- neais de 5 mg/kg de controle de Ig humano - LtpR humano (h LtpR-lgG-1- Fc) ou de Ig humano. O paradigma de pós-tratamento consistiu no tratamen- to com cuprizona durante seis semanas integrais. Depois de 5 semanas mais dois dias (aproximadamente oito de desmielinização) de tratamento 30 com cuprizona, os camundongos receberam injeções intraperitoneais de lgG-1 de camundongo - LtpR de camundongo ou um controle equivalente MOPC-21, seguido de injeções semanais após as 10 semanas. Essa versão de LtpR-Ig de roedor foi mostrada como sendo antigênica no camundongo.

Preparação do Tecido e Análise Histopatolópica: Seções do cé- rebro coronal embebidas em parafina foram preparadas a partir da região de fórnice do corpo caloso.

5 Seções manchadas de ácido periódico de Schiff- Luxol de rápido azul (LFB- PAS), foram lidas por três leitores de dupla venda e classificados numa es- cala de O (mielinização completa) a 3 (desmielinização completa), conforme descrito por Arnett e outros (2001), Nat. Neurosci. 4:1116-1122 e Plant e outros (2005), Glia 49:1-14.

Imunoistoguímica: A detecção de oligodendrócitos maduros, mi-

cróglia/macrófagos e astrócitos foi realizada por meio de imunoistoquímica (Plant e outros (2005), Glia 49:1-14). A análise quantitative de células positi- vas GS-Hi e RCA-1 foi restrita a uma área de 0,033 mm2 em uma porção intermediária do corpo caloso. Apenas células imunopositivas com um nú- 15 cleo manchado de DAPI observável foram incluídas na quantificação. A con- tagem das células é representada por médias de pelo menos 9 a 14 camun- dongos por ponto de tempo. As fibras mielinizadas foram detectadas medi- ante imunoistoquímica vom um anticorpo primário em relação à proteína bá- sica da mielina (Sternberger Monoclonals Inc. Lutherville1 MD), seguido de 20 anti-lgG de conjugado à fluoresceína (Invitrogen, Carlsbad, CA) diluted 1:1000.

Hibridizacão In Situ: Após o tratamento com cuprizona, os ca- mundongos foram submetidos à perfusão com PBS isento de RNase e, de- pois, paraformaldeído a 4%. Os cérebros foram removidos e incubados em 25 um agente fixador, até serem montados por meio de crio-seccionamento. A detecção do mRNA para o LtpR foi realizada por hibridização in situ, con- forme descrito no artigo de Schmid e outros (2002), J. Neurochem. 83:1309- 1320.

RT-PCR e RT-PCR Quantitativo em Tempo Real: O RNA total foi isolado de uma região dissecada do cérebro contendo o corpo caloso de camundongos portadores de LtpRv" e tipo selvagem em diversos pontos, du- rante e após o tratamento com cuprizona. O isolamento do RNA foi realizado usando o kit RNeasy da Qiagen, sob condições isentas de RNase (Qiagen, Valencia1 CA). O RT-PCR para LIGHT foi executado em reações de 20 μί usando os seguintes primers: Iniciador 5': CTGGCATGGAGAGTGTGGTA (SEQ ID N°:3); Iniciador 3’: GATACGTCAAGCCCCTCAAG (SEQ ID N°:4).

5 Ensaios quantitativos de PCR em tempo real de TaqMan 5' nu-

clease foram realizados usando um sistema de detecção de seqüência ABI Prism 7900 (PE Applied Biosystems1 Foster City, CA) em uma reação de 15 pL, com mistura master universal (Invitrogen)1 primers alvo de LtpR 200 nM e sonda de 100 nM. Os primers específicos de LtpR foram designados para 10 abranger junções de intron-exon, para diferenciar entre cDNA e DNA genô- mico. Os primers e sondas usados para detectar o LTpR de camundongo foram os seguintes: Iniciador 5’, GTACTCTGCCAGCCTGGCACAGAAGCC- GAGGTCACAGATG (SEQ ID N°:5); Iniciador 3’, GGTATGGGGTTGA- CAGCGGGCTCGAGGGGAGG (SEQ ID N°:6); sonda, Fam- 15 ACGTCAACTGTGTCCC-Tamra (SEQ ID N°:7). Os primers e sonda para o RNA ribossomal 18S de camundongo foram o Iniciador 5', GCTGCTGG- CACCAGACTT (SEQ ID N°:8); Iniciador 3\ CGGCTACCACATCCAAGG (SEQ ID N°:9); sonda, Fam-CAAATTACCCACTCCCGACCCG-Tamra (SEQ ID N°: 10). Os parâmetros de ciclo térmico foram otimizados para 2 minutos à 20 temperatura de 50°C, 2 minutos à temperatura de 95°C e para 40 ciclos compreendendo desnaturação à temperatura de 95°C durante 15 segundos e prolongamento de recozimento à temperatura de 56°C durante um minuto e meio. As reações para o 18 S foram realizadas junto com o LtpR durante cada experimento e usadas para normalizar quantidades de cDNA.

Análise Estatística: Testes de Student não equivalentes foram

usados para avaliar estatisticamente significativas diferenças. Os dados são expressos como média ± s.e.m.

Exemplo 2: Localização de LtBR e expressão de LIGHT no cérebro

Lta e LTp são encontrados numa ampla variedade de células hematopoiéticas, enquanto o LtpR é expresso em células dendríticas e mo- nócitos, assim como, na maioria das linhagens de células não- hematopoiéticas, células dendríticas foliculares e vênulas (pequenas veias) altas endoteliais (Gommerman e outros (2003), Nat. Rev. Immunol. 3:642- 655). O Lta e o LTp foram também detectados nos astrócitos, enquanto o LtpR foi detectado nos astrócitos e células de origem monocítica (Cannella e outros (1997), J. Neuroimmunoi 78:172-179 e Plant e outros, Glia 49:1-14).

5 Para examinar a expressão de LtpR no modelo de cuprizona, foram realiza- dos exames de RT-PCR quantitativo em tempo real, para examinar o nível de LtpR nos cérebros de camundongos não-tratados com cuprizona e de camundongos tratados com cuprizona. Pontos de tempo de desmielinização foram obtidos a partir de camundongos tratados durante 3, 3,5, 4 ou 5 se- 10 manas com cuprizona, enquanto que pontos de tempo de remielinização foram obtidos a partir de camundongos tratados durante 6 semanas e depois liberados da cuprizona durante 1, 2 ou 4 semanas, correspondendo às se- manas 7, 8 e 10. Sondas específicas de Taqman para o gene LtpR e o 18 S ribossomal foram usadas para detectar transcritos em cDNA gerados de 15 amostras de RNA do cérebro. Conforme mostrado na figura 1, a expressão do mRNA de LtpR cresceu moderadamente nos camundongos tipo selva- gem durante o tratamento com cuprizona (cerca de 6 semanas) (durante a fase de desmielinização). Os níveis de expressão de mRNA do LtpR diminuí- ram durante a fase de remielinização (7-10 semanas). Baixos níveis de LtpR 20 foram detectados em camundongos de controle não tratados. Para definir o tipo de célula que expressa o LtpR, foi usada hibridização in situ para locali- zar o LtpR nos cérebros de camundongos não tratados e camundongos tra- tados com cuprizona. O LtpR não foi expresso no cérebro antes do trata- mento. Durante 3 semanas de tratamento com cuprizona, uma pequena 25 quantidade de LtpR foi detectada na região de corpo caloso, entretanto, du- rante 5 semanas de tratamento, uma dramática suprarregulação do LtpR foi detectada nessa região inflamada. Para determinar qual tipo de célula ex- pressa o LtpR, a hibridização in situ foi acoplada com a análise imunoisto- química. A micróglia e os macrófagos foram visualizados nas ciroseções ce- 30 rebrais usando Iectina de tomate biotinilada, os astrócitos foram visualizados usando anticorpos específicos de GFAP, os oligodendrócitos usando anti- corpos específicos de CNP, e os neurônios usando anticorpos específicos de NeuN. A expressão do LtpR somente pôde ser detectada em células po- sitivas de lectina. Esses resultados indicaram que a micróglia e/ou macrófa- gos ativados, diferentemente dos astrócitos, oligodendrócitos ou neurônios, expressam o LtpR durante uma inflamação e desmielinização induzidas por 5 cuprizona

Conquanto que não-limitado por qualquer teoria ou mecanismo, em vista das descobertas precedentes de que os astrócitos constituem a fonte de Lta (Plant e outros (2005), Glia, 49:1-14), esses dados sugeriram que a sinalização Ltap- LtpR entre os astrócitos e a micróglia é principalmen- 10 te envolvida no processo inflamatório de desmielinização que ocorre durante o tatamento com cuprizona. Além do Ltap, o LtpR interage com o ligando ligado à membrana, LIGHT (homólogo às linfotoxinas, exibindo expressão induzível e competindo com a glicoproteína D do vírus da herpes simples para o mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM), um receptor ex- 15 presso pelos linfócitos T) (Granger e outros (2001), J. Clin. Invest. 108:1741- 1742). O LIGHT parece estar localizado principalmente nas células T, célu- las dendríticas imaturas, granulócitos e monócitos (Gommerman e outros, Nat. Rev. Immunol., 3:642-655), porém, não foi bem caracterizado no cére- bro. Para determinar se a expressão de LIGHT foi alterada durante o trata- 20 mento com cuprizona, os tecidos cerebrais foram analisados quanto à ex- pressão do LIGHT por meio de RT-PCR. Embora o LIGHT seja encontrado em altos níveis no baço e timo de controle, níveis extremamente baixos a irrelevantes foram encontrados nos cérebros de camundongos não tratados ou tratados com cuprizona. Além disso, o LIGHT não foi regulado pela pre- 25 sença do LtpR, na medida em que os camundongos que não possuem LtpR expressam níveis similares de LIGHT no cérebro. Embora não-limitado por qualquer teoria ou mecanismo particular, esses dados sugeriram que o Ll- GHT não desempenha um papel significativo durante uma ocorrência de in- flamação induzida por cuprizona.

Exemplo 3 - Desmielinização Retardada em Camundongos portadores de

LtBRv'

A presença de LTa exacerbou a desmielinização induzida pelo tratamento com cuprizona (Plant e outros, (2005), Glia 49:1-14). Além disso, a falta de LTa não alterou o curso da remielinização nem a proliferação de progenitores de oligodentrócitos seguintes à remoção da cuprizona da dieta. O LTa pode funcionar como uma molécula homotrimérica, sinalizando atra- 5 vés dos receptores de TNF, assim como, uma molécula heterotrimérica com LTp, para sinalizar através do LtpR. Conquanto que o papel dos receptores de TNF no modelo de cuprizona tenha sido anteriormente analisado (Arnett e outros (2001), Nat. Neurosci. 4:1116-1122), o papel do LtpR nesse modelo nao foi conhecido. Para analisar o papel do LtpR, camundongos sem a pre- 10 sença desse gene e de controles tipo selvagem, foram tratados com cupri- zona a 0,2% durante 3, 3,5, 4 ou 5 semanas. Comparado aos camundongos tipo selvagem, foi exibido um significativo retardamento na desmielinização pelos camundongos portadores de LtpR'7', quando examinados pelo proce- dimento de manchamento de LFB-PAS (Figura 2). As seções de parafina 15 manchadas por LFB-PAS foram examinadas por três pesquisadores usando dupla venda. Significativas diferenças na desmielinização foram observadas entre os camundongos tipo selvagem e os camundongos portadores de Lt- BR'7' em 3 semanas (p<0,02), 3,5 semanas (p<0,01) e 4 semanas (p<0,001). Conquanto que não-limitado por qualquer teoria ou mecanismo particular, 20 esses dados indicaram que a sinalização através do LtpR exacerbou o pro- cesso inflamatório de desmielinização. Esse retardamento pôde ser obser- vado anterior ao período de 3 semanas (p < 0,02) de tratamento com cupri- zona, tendo sido mais pronunciado em 3,5 semanas (p < 0,01) e 4 semanas (p < 0,001) de tratamento, sendo claramente revelado pelas imagens repre- 25 sentativas de LFB-PAS de camundongos tipo selvagem e portadores de LtpR'7' em 4 semanas de tratamento. O retardamento na desmielinização em camundongos portadores de LtpR'7" foi similar ao retardamento na remielini- zação observado nos camundongos portadores de LtpR*7' (Plant e outros (2005), Glia 49:1-14), portanto, conquanto que não-limitado por qualquer teo- 30 ria ou mecanismo particular, esses dados sugeriram que a sinalização de Ltap ligada à membrana através do LtpR está envolvida no processo de desmielinização. Exemplo 4 - Remielinização Retardada em Camundongos portadores de LtBRv'

A capacidade dos oligodendrócitos maduros em remielinizar o corpo caloso foi estudada em seções de parafina manchadas por LFB-PAS 5 em camundongos tipo selvagem e em camundongos portadores de LtpR'7'. Diferenças modestas, porém significativas na remielinização foram observa- das entre os camundongos tipo selvagem e os camundongos portadores de LtpR'7' em 7 (p < 0,001) e 10 semanas (p < 0,02) (Figura 2). Durante 12 se- manas, os camundongos portadores de LtpR'7' foram remielinizados no 10 mesmo grau que os camundongos de controle tipo selvagem (p = 0,11). Es- sas diferenças durante a remielinização foram inferiores a 0,5 na escala de gravidade de desmielinização, enquanto que diferenças observadas nos es- tudos de camundongos tipo selvagem versus camundongos portadores de TNFa'7' foram maiores que 1,5 na referida escala (Arnett e outros (2001), 15 Nat. Neurosci. 4:1116-1122), e persistiram até 14 semanas. Conquanto que não-limitada por qualquer teoria ou mecanismo em particular, a remieliniza- ção que se apresentou como retardada em camundongos portadores de LtpR'7', eventualmente, foi resolvida.

Exemplo 5 - Perda Retardada de Oligodendrócitos em Camundongos Por- tadores de LtBR'7' durante a Desmielinização

Para verificar se o retardamento na desmielinização observado pelo procedimento de LFB-PAS foi acompanhado por mudanças nos oligo- dendrócitos, foi realizado um procedimento de imunoistoquímica para detec- tar oligodendrócitos maduros em seções de parafina adjacentes às usadas 25 para manchamento com LFB. Foi usado GSTn+ como marcador para os oli- godendrócitos e as células na linha intermediária do corpo caloso foram quantificadas. Em ambos os tipos de camundongos tipo selvagem e camun- dongos portadores de LtpR'7' foram detectados abundantes oligodendrócitos em camundongos não tratados. Entretanto, depois de 3 e 3,5 semanas de 30 tratamento, foram detectados mais oligodendrócitos nos camundongos por- tadores de LtpR'7', comparado aos camundongos tipo selvagem (3,5 sema- nas; p < 0,01). Nenhuma diferença no número de oligodendrócitos foi encon- trada entre os camundongos tipo selvagem e os camundongos portadores de LtpR'7' em 4 semanas. Esses dados foram similares ao resultados de manchamento de LFB1 exceto no ponto de tempo de 4 semanas, onde o manchamento de LFB mostrou reduzida desmielinização nos camundongos 5 portadores de LtpR'7'. Ao contrário, o manchamento de GSTn+ não foi dife- rente entre os camundongos portadores de LtpR'7' e os camundongos tipo selvagem. Conquanto que não-limitado por qualquer teoria ou mecanismo em particular, a diferença entre os manchamentos de GSTn+ e LFB resultou, provavelmente, de um retardamento entre o desaparecimento de células de 10 GSTn+ e a perda real da mielina. Durante 5 semanas de tratamento com cuprizona, poucos oligodendrócitos de GSTn+ foram detectados no corpo caloso de camundongos tipo selvagem e camundongos portadores de LtpR'7'

. Conquanto que não-limitado por qualquer teoria ou mecanismo em particu- lar, novamente, esses dados são consistentes com a desmielinização grave para ambas as linhagens de camundongos.

Exemplo 6 - Repopulação de Oligodendrócitos Não-Modificados do Corpo Caloso em Camundongos Portadores de LtBR'7' durante a Fase de Remieli- nização

O envolvimento do LtpR no processo reparatório de remieliniza- ção foi explorado mediante exame das seções de parafina em 7, 8, 10 e 12 semanas (1, 2, 4 e 6 semanas depois da retirada da cuprizona do regime de dieta). Para detectar a presença de oligodendrócitos maduros no corpo calo- so durante a fase de remielinização, foi realizado o procedimento de imu- noistoquímica usando o anticorpo de GSTn nas seções de parafina dos ca- mundongos tipo selvagem e camundongos portadores de LtpR'7', seguido da quantificação de células positivas de GSTn. Conforme mostrado na figura 3, foram encontradas mais células GSTn+ nos camundongos portadores de LtpR'7', se comparado com os camundongos tipo selvagem em 3 semanas (p = 0,09), significativamente, mais células GSTn+ foram encontradas em ca- mundongos portadores de LtpRv' em 3,5 semanas (p < 0,03) e nenhuma di- ferença foi encontrada nos oligodendrócitos em 4 e 5 semanas de tratamen- to com cuprizona. Após a remoção da cuprizona, nenhuma diferença na re- população de oligodendrócitos do corpo caloso foi observada entre os ca- mundongos tipo selvagem e os camundongos portadores de LtpRv'. Assim, muito embora tenham sido detectados raros oligodendrócitos nesses cére- bros na altura da fase de remielinização (5 semanas), logo uma semana de- 5 pois da remoção da cuprizona (7 semanas), o corpo caloso foi repopulado de aproximadamente 75% em relação aos seus números originais de oligo- dendrócitos maduros. Na semana 10, o número de oligodendrócitos madu- ros residentes no corpo caloso foi recuperado aos níveis de pretratamento em ambos os camundongos tipo selvagem e camundongos portadores de 10 LtpRv'. Conquanto que não-limitado por qualquer teoria ou mecanismo em particular, novamente, esses dados indicaram que o LtpR não foi necessário para a proliferação e maturação do progenitor de oligodendrócitos durante a fase de remielinização.

Exemplo 7 - Recrutamento de Micróqlia/Macrófagos Não-Alterados em Ca- mundongos Portadores de LtBRv'

A cuprizona induz um estado inflamatório crônico no cérebro, incluindo o recrutamento de micróglia e macrófagos ativados para os locais de injúria (Matsushima e outros (2001), Brain Pathol. 11:107-116). As seções de para- fina dos camundongos portadores de LtpRv' e camundongos tipo selvagem 20 foram manchadas com a Iectina RCA-1 e a micróglia/macrófagos na linha intermediária do corpo caloso foram quantificados. Conforme mostrado na figura 4, o acúmulo de micróglia/macrófagos na linha intermediária do corpo caloso não foi afetado pela presença do LtpR. Nenhuma significativa dife- rença em números de células RCA-1+ foi observada em qualquer ponto de 25 tempo durante a fase de desmielinização ou remielinização desse modelo. Exemplo 8 - Inibição do LtBR Funcional reduz a Desmielinização

Conquanto que não-limitado por qualquer teoria ou mecanismo em particular, esses estudos sugeriram que o LtpR teve um efeito dramático de exacerbação sobre a desmielinização ou um efeito benéfico potencial- 30 mente modesto durante a remielinização. Entretanto, os camundongos com ausência de LtpR no nascimento apresentam significativos problemas de desenvolvimento. Por exemplo, os camundongos portadores de LtpRv' não apresentam nódulos linfáticos mesentéricos, emplastros de Peyer e tecidos linfóides associados ao cólon, dessa forma, não apresentam um sistema funcional totalmente imune (Futterer e outros (1998), Immunity 9:59-70). A- lém disso, é conhecido na técnica que níveis da síntese de quimocina e cito- 5 cina são controlados pelo LtpR (Chin e outros (2003). Immuno. Rev. 195:190-201), mas o impacto total do controle de LtpRde quimocinas e cito- cinas sobre o Sistema Nervoso Central não é conhecido. Além disso, as cé- lulas naturais exterminadoras nos camundongos portadores de LtpRv' não possuem expressão superficial do receptor NK1.1 devido à proximidade do 10 gene codificador e do gene Ltbr (Wu e outros (2001), J. Immunol. 166:1684- 1689).

A inibição funcional do LtpR em camundongos tipo selvagem foi tornada possível usando uma proteína atrativa de fusão. Para examinar a validade dos dados acima mencionados em camundongos portadores de 15 LtpRv', os quais demonstraram um papel prejudicial para o LtpR durante a desmielinização induzida por cuprizona, camundongos tipo C57BL6 foram tratados com LtpR-Ig (IgGI-Fc humano, LtpR de camundongo), proteína a- trativa de fusão ou controle policlonal de IgG humano, durante o tratamento com cuprizona. Os camundongos foram previamente tratados no dia 1, de- 20 pois, semanalmente, com injeções intraperitoneais (5 mg/kg) e foram manti- dos em situação de dieta ad Iibitum de cuprizona a 0,2%, durante 3,5 sema- nas. Depois de 3,5 semanas, os camundongos foram submetidos à perfusão e seções do cérebro em parafina foram manchadas pelo método de LFB- PAS para examinar o grau de desmielinização na linha intermediária do cor- 25 po caloso. Os camundongos que foram tratados com controle de Ig humana foram significativamente mais desmielinizados do que os camundongos que receberam a proteína atrativa do inibidor de LtpR-Ig (p < 0,02) (Figura 5). Depois de 3,5 semanas, o marcador médio de desmielinização de camun- dongos que receberam injeções de controle de Ig foi bastante similar ao dos 30 camundongos tipo selvagem tratados durante 4 semanas com cuprizona. O procedimento de imunoistoquímica para a proteína básica de mielina (MBP) confirmou a ausência de fibras mielinizadas em camundongos trata- dos com o controle de Ig humano, comparado aos camundongos tratados com LtpR-Ig. Em conclusão, esses resultados sugeriram que a desmieliniza- ção nos camundongos tratados com cuprizona foi significativamente retar- dada através da inibição do LtpR.

5 Exemplo 9 - Inibição do LtBR Intensifica a Remielinização

A seguir, a capacidade do tratamento mediante LtpR-IgGI em alterar o grau de remielinização depois de uma significativa desmielinização ocorrida foi examinada. Uma vantagem do modelo de cuprizona foi a capa- cidade de examinar eventos que influenciam a remielinização. Para investi- 10 gar o papel do LtpR no processo de remielinização, camundongos C57BL6 foram tratados com cuprizona a 0,2% durante 6 semanas. Esse período de tratamento com a cuprizona, reprodutivamente, resultou numa completa desmielinização em todos os camundongos estudados até o momento, inclu- indo os camundongos tipo selvagem C57BL6 (Arnett e outros (2001), Nat. 15 Neurosci. 4:1116-1122 e Plant e outros (2005), Glia 49:1-14). Após 5 sema- nas e dois dias de tratamento com cuprizona, os camundongos receberam a injeção de LtpR-lgG-1 de camundongo ou de lgG-1 de controle de camun- dongo. Isso foi seguido da injeção semanal do LtpR-IgGI de camundongo ou de IgGI de controle de camundongo até a semana 10, quando a remieli- 20 nização se tornou evidente. Devido à preocupação de que o Fc humano possa proporcionar uma resposta imune nesse prolongado experimento, uma proteína de fusão consistindo em LtpR de camundongo e IgGI-Fc de camundongo foi usada nesse experimento. Seções manchadas com LFB foram analisadas conforme disposto acima. De forma acentuada e surpreen- 25 dente, os camundongos tratados com mLtpR-mlgG1 mostraram uma remieli- nização significativamente maior (p < 0,007) do que os camundongos trata- dos com mlgG1 de controle (figura 6). Além disso, o procedimento de imu- noistoquímica para MBP confirmou uma reduzida remielinização em camun- dongos tratados com o controle de Ig humano, comparado com os camun- 30 dongos tratados com LtpR-Ig. Para examinar esses dados, o número de oli- godendrócitos maduros dentro do corpo caloso em 10 semanas foi quantifi- cado. Os oligodendrócitos positivos de GSTn foram mais abundantes no corpo caloso dos camundongos tratados com ml_tpR-lg1, comparado aos controles tratados com Ig de camundongo de controle (p < 0,04). Em conclu- são, a remielinização em camundongos tratados com cuprizona foi significa- tivamente intensificada mediante pós-tratamento com um inibidor de sinali- zação de LtpR.

Um determinado número de modalidades da invenção foi descri- to. No entanto, deverá ser entendido que diversas modificações poderão ser feitas sem que seja afastado o espírito e escopo da invenção. Consequen- temente, outras modalidades se encontram dentro do escopo das reivindica- ções seguintes.

Listagem de Seqüências

<110> BIOGEN IDEC MA INC.

UNIVERSITY OF NORTH CAROLINA AT CHAPEL HILL <120> TRATAMENTO DE DISTÚRBIOS DESMIELINIZANTES <130> BGG-735PC <140>

<141>

<150> PCT/US2007/081761 <151> 2007-10-18 <150> 60/862,343 <151> 2006-10-20 <160> 11

<170> VERSÃO de Patentln 3.5 <210> 1 <211> 448 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Descrição de seqüência Artificial: Polipetideo Sintético <400> 1

Met Leu Leu Pro Trp Ala Thr Ser Ala Pro Gly Leu Ala Trp Gly Pro 15 10 15 Leu Val Leu Gly Leu Phe Gly Leu Leu Ala Ala Ala Val Pro Pro Tyr 20 25 30

Ala Ser Glu Asn Gln Thr Cys Arg Asp Gln Glu Lys Glu Tyr Tyr Glu 35 40 45

Pro Gln His Arg Ile Cys Cys Ser Arg Cys Pro Pro Gly Thr Tyr Val 50 55 60

Ser Ala Lys Cys Ser Arg Ile Arg Asp Thr Val Cys Ala Thr Cys Ala 65 70 75 80

Glu Asn Ser Tyr Asn Glu His Trp Asn Tyr Leu Thr Ile Cys Gln Leu 85 90 95

Cys Arg Pro Cys Asp Pro Val Met Gly Leu Glu Glu Ile Ala Pro Cys 100 105 HO

Thr Ser Lys Arg Lys Thr Gln Cys Arg Cys Gln Pro Gly Met Phe Cys 115 120 125

Ala Ala Trp Ala Leu Glu Cys Thr His Cys Glu Leu Leu Ser Asp Cys 130 135 140

Pro Pro Gly Thr Glu Ala Glu Leu Lys Asp Glu Val Gly Lys Gly Asn 145 150 155 160

Asn His Cys Val Pro Cys Lys Ala Gly His Phe Gln Asn Thr Ser ser 165 170 175

Pro Ser Ala Arg Cys Gln Pro His Thr Arg Cys Glu Asn Gln Gly Leu 180 185 190

Val Glu Ala Ala Pro Gly Thr Ala Gln Ser Asp Thr Thr Cys Lys Asn 195 200 205

Pro Leu Glu Pro Leu Pro Pro Glu Met Ser Gly Thr Met Val Asp Lys 210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255

Arg Thr Pro Glu vai Thr Cys vai Val vai Asp Val ser His Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln vai Ser Leu Thr 355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn vai Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 435 440 445

<210> 2 <211> 435 <212> PRT

<213> Homo sapiens <400> 2

Met Leu Leu Pro Trp Ala Thr Ser Ala Pro Gly Leu Ala Trp Gly Pro 15 10 15

Leu Val Leu Gly Leu Phe Gly Leu Leu Ala Ala Ser Gln Pro Gln Ala 20 25 30 Val Pro Pro Tyr Ala Ser Glu Asn Gln Thr Cys Arg Asp Gln Glu Lys 35 40 45

Glu Tyr Tyr Glu Pro Gln His Arg Ile Cys Cys Ser Arg Cys Pro Pro 50 55 60

Gly Thr Tyr Val Ser Ala Lys Cys Ser Arg Ile Arg Asp Thr vai Cys 65 70 75 80

Ala Thr Cys Ala Glu Asn Ser Tyr Asn Glu His Trp Asn Tyr Leu Thr 85 90 95

Ile Cys Gln Leu Cys Arg Pro Cys Asp Pro Val Met Gly Leu Glu Glu 100 105 110

Ile Ala Pro Cys Thr Ser Lys Arg Lys Thr Gln Cys Arg Cys Gln Pro 115 120 125

Gly Met Phe Cys Ala Ala Trp Ala Leu Glu Cys Thr His Cys Glu Leu 130 135 140

Leu Ser Asp Cys Pro Pro Gly Thr Glu Ala Glu Leu Lys Asp Glu vai 145 150 155 160

Gly Lys Gly Asn Asn His Cys vai Pro Cys Lys Ala Gly His Phe Gln 165 170 175

Asn Thr Ser Ser Pro Ser Ala Arg Cys Gln Pro His Thr Arg Cys Glu 180 185 190

Asn Gln Gly Leu Val Glu Ala Ala Pro Gly Thr Ala Gln Ser Asp Thr 195 200 205

Thr Cys Lys Asn Pro Leu Glu Pro Leu Pro Pro Glu Met Ser Gly Thr 210 215 220

Met Leu Met Leu Ala vai Leu Leu Pro Leu Ala Phe Phe Leu Leu Leu 225 230 235 240

Ala Thr Val Phe Ser Cys Ile Trp Lys Ser His Pro Ser Leu Cys Arg 245 250 255

Lys Leu Gly Ser Leu Leu Lys Arg Arg Pro Gln Gly Glu Gly Pro Asn 260 265 270

Pro Val Ala Gly Ser Trp Glu Pro Pro Lys Ala His Pro Tyr Phe Pro 275 280 285 Asp Leu Val Gln Pro Leu Leu Pro Ile Ser Gly Asp Val Ser Pro Val 290 295 300

Ser Thr Gly Leu Pro Ala Ala Pro Val Leu Glu Ala Gly Val Pro Gln 305 310 315 320

Gln Gln Ser Pro Leu Asp Leu Thr Arg Glu Pro Gln Leu Glu Pro Gly

325 330 335

Glu Gln Ser Gln Val Ala His Gly Thr Asn Gly Ile His Val Thr Gly 340 345 350

Gly Ser Met Thr Ile Thr Gly Asn Ile Tyr Ile Tyr Asn Gly Pro vai 355 360 365

Leu Gly Gly Pro Pro Gly Pro Gly Asp Leu Pro Ala Thr Pro Glu Pro 370 375 380

Pro Tyr Pro Ile Pro Glu Glu Gly Asp Pro Gly Pro Pro Gly Leu Ser 385 390 395 400

Thr Pro His Gln Glu Asp Gly Lys Ala Trp His Leu Ala Glu Thr Glu

405 410 415

His Cys Gly Ala Thr Pro Ser Asn Arg Gly Pro Arg Asn Gln Phe Ile 420 425 430

Thr His Asp 435

<210> 3 <211> 20 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Descrição de Seqüência Artificial: Iniciador sintético <400> 3

ctggcatgga gagtgtggta 20

<210> 4 <211> 20

<212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Descrição de Seqüência Artificial: Iniciador Sintético <400> 4

gatacgtcaa gcccctcaag 20

<210> 5 <211> 40 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Descrição de seqüência Artificial: Iniciador Sintético <400> 5

gtactctgcc agcctggcac agaagccgag gtcacagatg 40

<210> 6 <211> 32 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Descrição de seqüência Artificial: Iniciador sintético <400> 6

ggtatggggt tgacagcggg ctcgagggga gg 32

<210> 7 <211> 16 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> Descrição de Seqüência Artificial: Sonda Sintética <400> 7

acgtcaactg tgtccc 16

<210> 8 <211> 18

<212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Descrição de Seqüência Artificial: Iniciador Sintético <400> 8

gctgctggca ccagactt 18

<210> 9 <211> 18 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Descrição de Seqüência Artificial: Iniciador Sintético <400> 9

cggctaccac atccaagg 18

<210> 10 <211> 22 <212> DNA

<213> seqüência Artificial <220>

<223> Descrição de seqüência Artificial: Sonda Sintética <400> 10

caaattaccc actcccgacc cg 22

<210> 11 <211> 194 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11

Ala Val Pro Pro Tyr Ala Ser Glu Asn Gln Thr Cys Arg Asp Gln Glu 15 10 15

Lys Glu Tyr Tyr Glu pro Gln His Arg Ile Cys Cys Ser Arg Cys Pro 20 25 30

Pro Gly Thr Tyr vai Ser Ala Lys Cys Ser Arg Ile Arg Asp Thr Val 35 40 45 Cys Ala Thr Cys Ala Glu Asn Ser Tyr Asn Glu His Trp Asn Tyr Leu 50 55 60

Thr Ile Cys Gln Leu Cys Arg Pro Cys Asp Pro Val Met Gly Leu Glu 65 70 75 80

Glu Ile Ala Pro Cys Thr Ser Lys Arg Lys Thr Gln Cys Arg Cys Gln

85 90 95

Pro Gly Met Phe Cys Ala Ala Trp Ala Leu Glu Cys Thr His Cys Glu 100 105 110

Leu Leu Ser Asp Cys Pro Pro Gly Thr Glu Ala Glu Leu Lys Asp Glu 115 120 125

Val Gly Lys Gly Asn Asn His Cys Val Pro Cys Lys Ala Gly His Phe 130 135 140

Gln Asn Thr Ser Ser Pro Ser Ala Arg Cys Gln Pro His Thr Arg Cys 145 150 155 160

Glu Asn Gln Gly Leu Val Glu Ala Ala Pro Gly Thr Ala Gln Ser Asp

165 I70 175

Thr Thr Cys Lys Asn Pro Leu Glu Pro Leu Pro Pro Glu Met Ser Gly 180 185 190

Thr Met

Claims

1. Método de tratamento de um distúrbio desmielinizante em um ser humano, o método compreendendo: (i) administrar a um ser humano uma dose de um LTpR solúvel, suficiente para promover uma remielinização, e (ii) monitorar o ser humano quanto à remielinização.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que o LTpR so- lúvel é administrado ao ser humano, até que a remielinização seja detectada no ser humano.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a dose é administrada uma vez a cada 3 a 10 dias; pelo menos duas vezes, e não mais que uma vez, a cada 5 a 20 dias; ou pelo menos duas vezes e não mais que uma vez a cada 28 a 31 dias.

4. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a dose é administrada semanalmente.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a dose é administrada bissemanalmente.

6. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a dose é administrada mensalmente.

7. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a dose é administrada semanalmente, durante o período de pelo menos 4 semanas.

8. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a dose é administrada bissemanalmente, durante o período de pelo menos 6 sema- nas.

9. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a dose é administrada mensalmente, durante o período de pelo menos 3 meses.

10. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que o LTpR solúvel é o LTpR humano ou um fragmento de ligação de LT do mesmo.

11. Método, de acordo com a reivindicação 10, em que o LTpR solúvel compreende um fragmento de ligação de LT da região extracelular do LTpR humano (SEQ ID N°:2), ligado a uma região Fe de um Ig.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11, em que o LTpR solúvel compreende a seqüência estabelecida na SEQ ID N°:1.

13. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a remieli- nização é monitorada por meio de Imagem de Ressonância Magnética, To- mografia por Emissão de Pósitrons, Imagem Pesada por Difusão, Imagem de Tensor por Difusão, Mielografia, Teste Potencial Evocado ou Transferên- cia de Magnetização.

14. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que a remieli- nização é monitorada por uma melhoria de um sintoma de um distúrbio desmielinizante.

15. Método, de acordo com a reivindicação 14, em que o sinto- ma é uma redução de visão, dormência, fraqueza nas extremidades, tremo- res, intolerância ao calor, redução da fala, incontinência ou propriocepção reduzida.

16. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que o distúrbio desmielinizante é Esclerose Múltipla.

17. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que o distúrbio desmielinizante é selecionado do grupo que consiste em Esclerose Múltipla Reincidente/Remitente, Esclerose Múltipla Secundária Progressiva, Esclero- se Múltipla Reincidente Progressiva, Esclerose Múltipla Primária Progressiva e Esclerose Múltipla Aguda Fulminante.

18. Método, de acordo com a reivindicação 1, em que o distúrbio desmielinizante é selecionado do grupo que consiste em Mielinólise Pontina Central, Encefalomielite Aguda Disseminada, Leucoencefalopatia Multifocal Progressiva, Panencefalite Subaguda Esclerosante, Encefalomielite Pós- infecciosa, Polineuropatia Desmielinizante Inflamatória Crônica, Síndrome de Guillain-Barre, Doença de Devic, Esclerose Concêntrica de Balo e Leucodis- trofia.

19. Método, de acordo com a reivindicação 18, em que a Ieuco- distrofia é Leucodistrofia Metacromática, doença de Krabbé, Adrenoleucodis- trofia, doença de Pelizaeus-Merzbacher, doença de Canavan, Ataxia de In- fância com Hipomielinização Central, doença de Alexander ou doença de Refsu m.

20. Método de tratamento de um distúrbio desmielinizante em um ser humano, o método compreendendo a administração a um ser huma- no de uma dose de um LTpR solúvel, em que a dosagem unitária, frequência de administração e duração do tratamento seja suficiente para que uma re- mielinização ocorra no ser humano.

21. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que o LTpR solúvel é administrado ao ser humano até que a remielinização seja detecta- da no ser humano.

22. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a dose é administrada uma vez a cada 3 a 10 dias; pelo menos duas vezes, e não mais que uma vez, a cada 5 a 20 dias; ou pelo menos duas vezes e não mais que uma vez a cada 28 a 31 dias.

23. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a dose é administrada semanalmente.

24. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a dose é administrada bissemanalmente.

25. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a dose é administrada mensalmente.

26. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a dose é administrada semanalmente, durante o período de pelo menos 4 semanas.

27. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a dose é administrada bissemanalmente, durante o período de pelo menos 6 sema- nas.

28. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a dose é administrada mensalmente, durante o período de pelo menos 3 meses.

29. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que o LTpR solúvel é o LTpR humano ou um fragmento de ligação de LT do mesmo.

30. Método, de acordo com a reivindicação 29, em que o LTpR solúvel compreende uma substancial porção da região extracelular do LTpR humano (SEQ ID N°:2), ligado a uma região Fe de um Ig.

31. Método, de acordo com a reivindicação 30, em que o LTpR solúvel compreende a seqüência estabelecida na SEQ ID N°:1.

32. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a remie- linização é monitorada por meio de Imagem de Ressonância Magnética, Tomografia por Emissão de Pósitrons, Imagem Pesada por Difusão, Imagem de Tensor por Difusão, Mielografia, Teste Potencial Evocado ou Transferên- cia de Magnetização.

33. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que a remie- linização é monitorada por uma melhoria de um sintoma de um distúrbio desmielinizante.

34. Método, de acordo com a reivindicação 33, em que o sinto- ma é uma redução de visão, dormência, fraqueza nas extremidades, tremo- res, intolerância ao calor, redução da fala, incontinência ou propriocepção reduzida.

35. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que o distúr- bio desmielinizante é Esclerose Múltipla.

36. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que o distúr- bio desmielinizante é selecionado do grupo que consiste em Esclerose Múl- tipla Reincidente/Remitente, Esclerose Múltipla Secundária Progressiva, Es- clerose Múltipla Reincidente Progressiva, Esclerose Múltipla Primária Pro- gressiva e Esclerose Múltipla Aguda Fulminante.

37. Método, de acordo com a reivindicação 20, em que o distúr- bio desmielinizante é selecionado do grupo que consiste em Mielinólise Pon- tina Central, Encefalomielite Aguda Disseminada, Leucoencefalopatia Multi- focal Progressiva, Paneneefalite Subaguda Esclerosante, Encefalomielite Pós-infecciosa, Polineuropatia Desmielinizante Inflamatória Crônica, Sin- drome de Guillain-Barre, Doença de Devic, Esclerose Concêntrica de Balo e Leucod istrofia.

38. Método, de acordo com a reivindicação 37, em que a Ieuco- distrofia é Leucodistrofia Metacromática, doença de Krabbé, Adrenoleucodis- trofia, doença de Pelizaeus-Merzbacher, doença de Canavan, Ataxia de In- fância com Hipomielinização Central, doença de Alexander ou doença de Refsu m.

39. Método de tratamento de um distúrbio desmielinizante em um ser humano, o método compreendendo: (i) administrar a um ser humano uma dose de um LTpR solúvel, suficiente para promover uma remielinização, e (ii) classificar o ser humano como tendo um nível previamente selecionado de remielinização.

40. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que o nível previamente selecionado de remielinização é nenhuma remielinização, um nível intermediário de remielinização ou um alto nível de remielinização.

41. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que o LTpR solúvel é administrado ao ser humano até que a remielinização seja detecta- da no ser humano.

42. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a dose é administrada uma vez a cada 3 a 10 dias; pelo menos duas vezes, e não mais que uma vez, a cada 5 a 20 dias; ou pelo menos duas vezes e não mais que uma vez a cada 28 a 31 dias.

43. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a dose é administrada semanalmente.

44. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a dose é administrada bissemanalmente.

45. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a dose é administrada mensalmente.

46. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a dose é administrada semanalmente, durante o período de pelo menos 4 semanas.

47. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a dose é administrada bissemanalmente, durante o período de pelo menos 6 sema- nas.

48. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a dose é administrada mensalmente, durante o período de pelo menos 3 meses.

49. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que o LTpR solúvel é o LTpR humano ou um fragmento de ligação de LT do mesmo.

50. Método, de acordo com a reivindicação 49, em que o LTpR solúvel compreende uma substancial porção da região extracelular do LTpR humano (SEQ ID N°:2), ligado a uma região Fe de um Ig.

51. Método, de acordo com a reivindicação 50, em que o LTpR solúvel compreende a seqüência estabelecida na SEQ ID N°:1.

52. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a remie- linização é monitorada por meio de Imagem de Ressonância Magnética, Tomografia por Emissão de Pósitrons, Imagem Pesada por Difusão, Imagem de Tensor por Difusão, Mielografia, Teste Potencial Evocado ou Transferên- cia de Magnetização.

53. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que a remie- linização é monitorada por uma melhoria de um sintoma de um distúrbio desmielinizante.

54. Método, de acordo com a reivindicação 53, em que o sinto- ma é uma redução de visão, dormência, fraqueza nas extremidades, tremo- res, intolerância ao calor, redução da fala, incontinência ou propriocepção reduzida.

55. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que o distúr- bio desmielinizante é Esclerose Múltipla.

56. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que o distúr- bio desmielinizante é selecionado do grupo que consiste em Esclerose Múl- tipla Reincidente/Remitente, Esclerose Múltipla Secundária Progressiva, Es- clerose Múltipla Reincidente Progressiva, Esclerose Múltipla Primária Pro- gressiva e Esclerose Múltipla Aguda Fulminante.

57. Método, de acordo com a reivindicação 39, em que o distúr- bio desmielinizante é selecionado do grupo que consiste em Mielinólise Pon- tina Central, Encefalomielite Aguda Disseminada, Leucoencefalopatia Multi- focal Progressiva, Panencefalite Subaguda Esclerosante, Encefalomielite Pós-infecciosa, Polineuropatia Desmielinizante Inflamatória Crônica, Sin- drome de Guillain-Barre, Doença de Devic, Esclerose Concêntrica de Balo e Leucodistrofia.

58. Método, de acordo com a reivindicação 57, em que a leuco- distrofia é Leucodistrofia Metacromática, doença de Krabbé, Adrenoleucodis- trofia, doença de Pelizaeus-Merzbacher, doença de Canavan, Ataxia de In- fância com Hipomielinização Central, doença de Alexander ou doença de Refsum.

59. Método para promover remielinização, o método compreen- dendo: (i) administrar a um ser humano receptor de uma terapia anti- TNF, uma dose de um LTpR solúvel, suficiente para promover a remieliniza- ção no ser humano, e (ii) monitorar o ser humano quanto à remielinização.

60. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que o ser humano tem uma doença autoimune.

61. Método, de acordo com a reivindicação 60, em que a doença autoimune é artrite reumatóide.

62. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a terapia anti-TNF consiste da administração de Humira, Enbrel ou Remicade.

63. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que o LTpR solúvel é administrado ao ser humano até que a remielinização seja detecta- da no ser humano.

64. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que o LTpR solúvel é um LTpR humano ou um fragmento de ligação de LT do mesmo.

65. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a dose é administrada uma vez a cada 3 a 10 dias; pelo menos duas vezes, e não mais que uma vez, a cada 5 a 20 dias; ou pelo menos duas vezes e não mais que uma vez a cada 28 a 31 dias.

66. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a dose é administrada semanalmente.

67. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a dose é administrada bissemanalmente.

68. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a dose é administrada mensalmente.

69. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a dose é administrada semanalmente, durante o período de pelo menos 4 semanas.

70. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a dose é administrada bissemanalmente, durante o período de pelo menos 6 sema- nas.

71. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a dose é administrada mensalmente, durante o período de pelo menos 3 meses.

72. Método, de acordo com a reivindicação 64, em que o LTpR solúvel compreende uma substancial porção da região extracelular do LTpR humano (SEQ ID N°:2), ligado a uma região Fe de um Ig.

73. Método, de acordo com a reivindicação 72, em que o LTpR solúvel compreende a seqüência estabelecida na SEQ ID N°:1.

74. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que o distúr- bio desmielinizante é selecionado do grupo que consiste em Esclerose Múl- tipla Reincidente/Remitente, Esclerose Múltipla Secundária Progressiva, Es- clerose Múltipla Reincidente Progressiva, Esclerose Múltipla Primária Pro- gressiva e Esclerose Múltipla Aguda Fulminante.

75. Método, de acordo com a reivindicação 59, em que a remie- linização é monitorada por uma melhoria de um sintoma de um distúrbio desmielinizante.

76. Método, de acordo com a reivindicação 75, em que o sinto- ma é uma redução de visão, dormência, fraqueza nas extremidades, tremo- res, intolerância ao calor, redução da fala, incontinência ou propriocepção reduzida.

77. Dispositivo de liberação projetado para administração subcu- tânea ou intramuscular de um LTpR solúvel em um ser humano que apre- senta um distúrbio desmielinizante, em que a dita administração seja sufici- ente para que uma remielinização ocorra no ser humano.

78. Dispositivo de liberação, de acordo com a reivindicação 77, em que o dispositivo de liberação compreende LTpR solúvel liofilizado.

79. Dispositivo de liberação, de acordo com a reivindicação 77, em que o LTpR solúvel é o LTpR humano ou um fragmento de ligação de LT do mesmo.

80. Dispositivo de liberação, de acordo com a reivindicação 79, em que o LTpR solúvel compreende uma substancial porção da região ex- tracelular do LTpR humano (SEQ ID N°:2), ligado a uma região Fe de um Ig.

81. Dispositivo de liberação, de acordo com a reivindicação 80, em que o LTpR solúvel compreende a seqüência estabelecida na SEQ ID N0:1.

82. Dispositivo de liberação, de acordo com a reivindicação 77, em que o dispositivo de liberação é uma seringa.

83. Dispositivo de liberação, de acordo com a reivindicação 77, em que o distúrbio desmielinizante é Esclerose Múltipla.

84. Kit, compreendendo (i) uma ou mais doses unitárias de um LTpR solúvel e (ii) reagentes e instruções de como realizar um ensaio para realizar a remielinização.

85. Kit, de acordo com a reivindicação 84, em que o kit é para tratamento de Esclerose Múltipla.

86. Kit, de acordo com a reivindicação 84, em que o LTpR solú- vel é o LTpR humano ou um fragmento de ligação de LT do mesmo.

87. Kit, de acordo com a reivindicação 86, em que o LTpR solú- vel compreende uma substancial porção da região extracelular do LTpR hu- mano (SEQ ID N°:2), ligado a uma região Fe de um Ig.

88. Kit, de acordo com a reivindicação 87, em que o LTpR solú- vel compreende a seqüência estabelecida na SEQ ID N°:1.

89. Dispositivo de liberação, compreendendo dois compartimen- tos, em que o primeiro compartimento compreende uma dose unitária de um LTpR solúvel liofilizado, em que a dose unitária é suficiente para que ocorra a remielinização em um ser humano; e o segundo compartimento compre- ende um líquido para reconstituir o LTpR solúvel antes da administração a um ser humano.

90. Dispositivo de liberação, como definido na reivindicação 88, em que o LTpR solúvel é o LTpR humano ou um fragmento de ligação de LT do mesmo.

91. Dispositivo de liberação, de acordo com a reivindicação 90, em que o LTpR solúvel compreende uma substancial porção da região ex- tracelular do LTpR humano (SEQ ID N°:2), ligado a uma região Fe de um Ig.

92. Dispositivo de liberação, de acordo com a reivindicação 91, em que o LTpR solúvel compreende a seqüência estabelecida na SEQ ID N°:1.

93. Método para instruir um paciente que apresenta um distúrbio desmielinizante, para tratar o distúrbio desmielinizante do paciente, o méto- do compreendendo: (i) proporcionar ao paciente pelo menos duas doses unitárias de um LTpR solúvel; e (ii) instruir o paciente para auto-administrar as doses unitárias subcutaneamente, uma dose de cada vez, em que a dose unitária de um LTpR solúvel é suficiente para induzir a remielinização em um paciente.

94. Método, de acordo com a reivindicação 93, compreendendo ainda a instrução ao paciente para se auto-monitorar quanto à remieliniza- ção.

95. Método, de acordo com a reivindicação 93, em que o pacien- te é instruído para auto-administrar as doses unitárias bissemanalmente, durante o período de pelo menos 4 semanas.

96. Método, de acordo com a reivindicação 93, em que o pacien- te é instruído para auto-administrar as doses unitárias mensalmente, durante o período de pelo menos 2 meses.

97. Método, de acordo com a reivindicação 93, em que o distúr- bio desmielinizante é uma forma de Esclerose Múltipla.

98. Método, de acordo com a reivindicação 93, em que o LTpR solúvel é o LTpR humano ou um fragmento de ligação de LT do mesmo.

99. Método, de acordo com a reivindicação 98, em que o LTpR solúvel compreende uma substancial porção da região extracelular do LTpR humano (SEQ ID N°:2), ligado a uma região Fe de um Ig.

100. Método, de acordo com a reivindicação 99, em que o LTpR solúvel compreende a seqüência estabelecida na SEQ ID N°:1.