BRPI0719481A2

BRPI0719481A2 - " composto, método de indução de apoptose em uma célula, de sensibilização de uma célula, para inibir a ligação de uma proteína iap a uma proteína caspase, para tratar uma doença ou condição associada com a superexpressão de uma proteína iap e para tratar câncer"

Info

Publication number: BRPI0719481A2
Application number: BRPI0719481-1A
Authority: BR
Inventors: Michael F T Koehler
Original assignee: Genentech Inc
Priority date: 2006-12-19
Filing date: 2007-12-14
Publication date: 2014-02-11
Also published as: RU2009127800A; JP2010513561A; CN101605786A; EP2125809A1; KR20090094461A; AU2007337104A1; NZ577150A; US20100130539A1; WO2008079735A1; US8063218B2; IL198927A0; CA2671607A1; US20120015974A1; RU2466131C2

Description

"COMPOSTO, MÉTODOS DE INDUÇÃO DE APOPTOSE EM UMA CÉLULA,

DE SENSIBILIZAÇÃO DE UMA CÉLULA, PARA INIBIR A LIGAÇÃO DE UMA PROTEÍNA IAP A UMA PROTEÍNA CASPASE, PARA TRATAR UMA DOENÇA OU CONDIÇÃO ASSOCIADA COM A SUPEREXPRESSÃO DE UMA PROTEÍNA IAP E PARA TRATAR CÂNCER"

Este pedido reivindica prioridade mediante 35 U.S.C. § 119(e) para patente U.S.S.N. 60/870.821, depositada em 19 de dezembro de 2006, que é integralmente incòrporada ao presente pedido como referência.

Campo Da Invenção

A presente invenção refere-se a compostos orgânicos úteis para

terapia e/ou profilaxia em um mamífero e, em particular, aos inibidores de proteínas IAP úteis para tratar câncer.

Antecedentes Da Invenção Apoptose ou morte celular programada é um mecanismo regulado geneticamente e bioquimicamente, que tem um papel importante no desenvolvimento e homeostase em invertebrados, bem como em vertebrados. Anormalidades na apoptose que levam à morte celular prematura tem sido relacionada a uma variedade de disfunções do desenvolvimento. Deficiências na apoptose que resulta na ausência de morte celular tem sido relacionada ao câncer e infecções virais crônicas (Thompson et aí., (1995) Science 267, 1456- 1462).

Uma das moléculas-chave efetoras da apoptose são as caspases (cisteína contendo proteases específicas para aspartato). Caspases são proteases fortes que clivam resíduos de ácido aspártico e, uma vez ativadas, digerem proteínas celulares vitais do interior da célula. Visto que as caspases são proteases fortes, o controle rígido desta família de proteínas é necessário para evitar morte celular prematura. Em geral, as caspases são sintetizadas como zimogênios amplamente inativos que necessitam de processo proteolítico para estarem ativos. Este processo proteolítico é apenas uma das maneiras nas quais as caspases são reguladas. O segundo mecanismo é através de uma família de proteínas que se liga e inibe as caspases.

Uma família de moléculas que inibe caspases são os Inibidores de Apoptose (IAP) (Deveraux et at., J Clin Immunol (1999), 19:388-398). As IAPs foram originalmente descobertos em baculovírus pelas suas capacidades funcionais em substituir a proteína P35, um gene anti-apoptótico (Crook et al (1993) J. Virology 67,2168-2174) As IAPs foram descritas em organismos, desde Drosófila até humanos. Apesar de sua origem, estruturalmente as IAPs compreendem um dos três domínios de repetições de IAP de baculovírus (BIR)1 e a maioria deles também possui um motivo RING fmger na terminação carboxila. O próprio BIR é um domínio de ligação de zinco com cerca de 70 resíduos que compreende 4 alfa-hélices e três fitas beta, com resíduos de cisteína e histidina que coordenam o íon zinco (Hinds et al., (1999) Nat. Struct. Biol. 6, 648-651). Acredita-se que o domínio BIR seja o causador do efeito anti- apoptótico pela inibição de caspases e, dessa forma, inibição da apoptose. Como um exemplo, o cromossomo X humano ligado a IAP (XIAP) inibe caspase 3, caspase 7 e a ativação de caspase 9 mediada pelo citocromo C (Deveraux et al., (1998) EMBO J. 17, 2215-2223). As caspases 3 e 7 são inibidas pelo domínio BIR2 de XIAP, enquanto o domínio BIR3 de XIAP é responsável pela inibição da atividade da caspase 9. XIAP é expresso simultaneamente na maioria dos tecidos fetais e adultos (Liston et al, Nature, 1996,3 79 (6563):349), e é superexpresso em várias linhagens de células tumorais do painel de linhagem celular NCI 60 (Fong et al, Genomics, 2000, 70:113; Tamm et al, Clin. CancerRes. 2000, 6(5):1796). A superexpressão de XIAP em células tumorais demonstrou conferir proteção contra uma variedade de estímulos pró-apoptóticos e promover a resistência à quimioterapia (LaCasse et al, Oncogene, 1998, 17(25):3247). Consistente com isso, uma correlação entre os níveis de proteínas XIAP e a sobrevida foi demonstrada para pacientes com leucemia mielogênica aguda (Tamm et al, supra). A infraregulação da expressão de XIAP por oligonucleotídeos antisense mostrou sensibilizar as células tumorais à morte induzida por uma ampla variedade de agentes apoptóticos, tanto in vitro como in vivo (Sasaki et al, Câncer Res., 2000, 60(20):5659; Lin et al, Biochem J., 2001, 353:299; Hu et al, Clin. Câncer Res., 2003, 9(7):2826). Peptídeos derivados de Smac/DIABLO também demonstraram sensibilizar várias linhagens de células tumorais para a apoptose, induzidas por uma variedade de drogas apoptóticas (Arnt et al, J. Biol. Chem., 2002, 277(46):44236; Fulda et al, Nature Med., 2002, 8(8):808; Guo et al, Blood,2002, 99 (9):3419; Vucic et al, J. Biol. Chem.,2002, 277 (14) 12275; Yang et al, CancerRes., 2003, 63(4):831)..

Melanoma IAP (ML-IAP) é um IAP não detectável na maioria dos tecidos adultos normais, mas é fortemente supraregulado em melanoma (Vucic et al., (2000) Current Bio 10:1359-1366). A determinação da estrutura da proteína demonstrou homologia significante dos domínios ML-IAP BIR e RING com os domínios correspondentes presentes em XIAP, C-IAPI e C-IAP2 humanos. O domínio BIR de ML-IAP parece ter a maior similaridade ao BIR2 e BIR3 de XIAP, C-IAPI e C-IAP2, e parece ser responsável pela inibição da apoptose, conforme determinado por análises delecionais. Além disso, Vucic et al., demonstrou que ML-IAP poderia inibir a apoptose induzida por agente quimioterapêutico. Os agentes como adriamicina e 4-terciário butilfenol (4-TBP) foram testados em um sistema de cultura celular de melanomas que superexpressam ML-IAP e os agentes quimioterapêuticos foram significativamente menos efetivos em destruir as células, quando comparados a um melanócito controle normal. O mecanismo pelo qual ML-IAP produz uma atividade antiapoptótica é, em parte, através da inibição das caspase 3 e 9. ML- IAP não inibiu efetivamente as caspases 1, 2, 6, ou 8. Já que a apoptose é uma via rigidamente controlada por fatores múltiplos de interação, a descoberta de que as próprios IAPs são reguladas não foi usual. Na mosca da fruta, Drosófila, as proteínas Reaper (rpr), Head Involution Defective (hid) e GRIM interagem fisicamente e inibem a atividade antiapoptótica da família de IAPs de Drosófila. Nos mamíferos, as proteínas SMAC/DIABLO agem para bloquear as IAPs e permitem que a apoptose ocorra. Foi mostrado durante a apoptose normal que SMAC é processada para uma forma ativa e é liberada a partir da mitocôndria para o citoplasma, onde fisicamente se liga às IAPs e previne a ligação da IAP a uma caspase. Esta inibição da IAP permite que a caspase permaneça ativa e, dessa forma, ocorra a apoptose. De maneira interessante, a ahomologia de seqüência entre os inibidores da IAP mostram que há um motivo com quatro aminoácidos no N- terminal das proteínas ativas processadas. Este tetrapaptídeo parece se ligar na área hidrofóbica no' domínio BIR e romper a ligação do domínio BIR às caspases (Chai et al., (2000) Nature 406:855-862, Liu et al., (2000) Nature 408:1004-1008, Wu et al., (2000) Nature 408 1008-1012).

Descrição Resumida Da Invenção Em um aspecto da presente invenção são fornecidos novos

inibidores das proteínas IAP que têm a fórmula geral (I):

R1

I

em que:

- Xi e X2 são independentemente O ou S; - Y é uma ligação, (CRyRyJm O ou S;

- Z é H, halogênio, hidroxila, carboxila, amino, nitro, ciano, alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por uma ou mais hidroxila, alcóxi,

acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil opcionalmente substituído, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído; e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, - S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8- SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, -NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-;

- Q é H, halogênio, hidroxila, carboxila, amino, nitro, ciano, alquil, um carbociclo ou um1 heterociclo; sendo que os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por uma ou mais hidroxila, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil opcionalmente substituído,

amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído; e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, - S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8- SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, -NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-; - Ri é H, OH ou alquil; ou Ri e R2 formam juntos um heterociclo

com 5 a 8 membros;

- R2 é alquil, um carbociclo, carbociclilalquil, um heterociclo ou

heterociclilalquil, cada um opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, oxo, tiona, mercapto, carboxila, alquil, haloalquil, acil, alcoxi, alquiltio, sulfonil, amino e nitro, sendo que os ditos alquil, acil, alcoxi, alquiltio e sulfonil são opcionalmente substituídos por hidroxi, mercapto, halogênio, amino, alcoxi,

hidroxialcoxi e alcoxialcoxi;

- R3 é H ou alquil opcionalmente substituído por halogênio ou hidroxila; ou R3 e R4 formam juntos um heterociclo com 3 a 6 membros;

- R3' é H1 ou R3 e R3' formam juntos um carbociclo com 3 a 6

membros;

- R4 e R4' são independentemente H, hidroxila, amino, alquil, carbociclo, carbocicloalquil, carbocicloalquiloxi, carbocicloalquiloxicarbonil,

heterociclo, heterocicloalquil, heterocicloalquiloxi ou

heterocicloalquiloxicarbonil; sendo que cada alquil, carbocicloalquil, carbocicloalquiloxi, carbocicloalquiloxicarbonil, heterociclo, heterocicloalquil, heterocicloalquiloxi e heterocicloalquiloxicarbonil é opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, mercapto, carboxila, alquil, alcoxi, amino, imino e nitro; ou R4 e R4' formam juntos um heterociclo;

- R5 é H ou alquil;

- R 6 e Re são cada um independentemente H, alquil, aril ou

aralquil;

- R7 é H, ciano, hidroxila, mercapto, halogênio, nitro, carboxila,

amidino, guanidino, alquil, um carbociclo, um heterociclo ou U-V-; sendo que U é -O-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, - NR8-SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, -NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O- C(O)- e V é alquil, um carbociclo ou um heterociclo, e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, -S-, - S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8-S02-, - NR8-C(O)-NR8-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-; e um alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por hidroxila, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído.

- R8 é H, alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH do dito alquil são opcionalmente substituídos por - o-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)- OU -C(O)-, e os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por hidroxila, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo (=O), carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído; e - m é O a 4.

Em outro aspecto da invenção, são fornecidas composições que compreendem compostos de fórmula I e um carreador, diluente ou excipiente.

Em outro aspecto da invenção, é fornecido um método de indução de apoptose em uma célula que compreende introduzir na dita célula um composto de fórmula I.

Em outro aspecto da invenção, é fornecido um método para sensibilizar uma célula para um sinal apoptótico que compreende introduzir na dita célula um composto de fórmula I. Em outro aspecto da invenção, é fornecido um método para inibir

a ligação de uma proteína IAP a uma proteína caspase que compreende colocar em contato a dita proteína IAP com um composto de fórmula I.

Em outro aspecto da invenção, é fornecido um método para tratar uma doença ou condição associada com a superexpressão de uma proteína IAP em um mamífero, que compreende administrar ao dito mamífero uma quantidade efetiva de um composto de fórmula I.

Descrição Detalhada Das Realizações Preferenciais "Acil" significa um carbonil contendo um substituinte representado pela fórmula -C(O)-R em que R é H, alquil, um carbociclo, um heterociclo, alquil substituído por carbociclo ou alquil substituído por heterociclo, sendo que o alquil, alcoxi, carbociclo e heterociclo são conforme definido no presente pedido. Grupos acil incluem alcanoil (por exemplo, acetil), aroil (por exemplo, benzoil), e heteroaroil. "Alquil" significa um grupo hidrocarboneto ramificado ou não- ramificado, saturado ou insaturado (isto é, alquenil ou alquinil) que tem até 12 ' átomos de carbono, a menos que espicificado de outra forma. Quando usado como parte de outro termo, por exemplo, "alquilamino", a porção alquil pode ser uma cadeia de hidrocarboneto saturada, embora também inclua cadeias carbônicas de hidrocarboneto como "alquenilamino" e "alquinilamino". Exemplos de grupos alquil específicos são metil, etil, n-propil, isopropil, n-butil, iso-butil, sec-bútil, tert-butil, n-pentil, 2-metilbutil,2,2-dimetilpropil, n-hexil, 2- metilpentil,2,2-dimetilbutil, n-heptil, 3-heptil,2-metilhexil, e similares. Os termos "alquil inferior" "alquil C1-C4" e "alquil com 1 a 4 átomos de carbono" são sinônimos, usados altérnadamente e significam metil, etil, 1-propil, isopropil, ciclopropil, 1-butil, sec-butil ou t-butil. A menos que especificado, grupos alquil substituídos contêm um, por exemplo, dois, três ou quatro substituintes, que podem ser o mesmo ou diferentes. Exemplos de substituintes são, a menos que definidos de outra forma, halogênio, amino, hidroxila, hidroxila protegida, mercapto, carboxi, alcoxi, nitro, ciano, amidino, guanidino, uréia, sulfonil, sulfinil, aminosulfonil, alquilsulfonilamino, arilsulfonilamino, aminocarbonil, acilamino, alcoxi, acil, aciloxi, um carbociclo, um heterociclo. Exemplos dos grupos alquil substituídos acima incluem, mas não se limitam a, cianometil, nitrometil, hidroximetil, tritiloximetil, propioniloximethyl, aminometil, carboximetil, carboxietil, carboxipropil, alquiloxicarbonilmetil, aliloxicarbonilaminometil, carbamoiloximetil, metoximetil, etoximetil, t-butoximetil, acetoximetil, clorometil, bromometil, iodometil, trifluorometil, 6-hidroxihexil, 2,4-dicloro(n-butil), 2- amino(iso-propil), 2-carbamoiloxietil e similares. O grupo alquil também pode ser substituído por um grupo carbociclo. Exemplos incluem grupos ciclopropilmetil, ciclobutilmetil, ciclopentilmetil, e ciclohexilmetil, bem como os grupos correspondentes -etil, -propil, -butil, -pentil, hexil, etc. Alquil substituído inclui metil substituído, por exemplo, um grupo metil substituído pelos mesmos substituintes como o grupo "alquil Cn-Cm substituído". Exemplos de grupos metil substituídos incluem grupos hidroximetil, hidroximetil protegido (por exemplo, ° tetrahidropiraniloximetil), acetoximetil, carbamoiloximetil, trifluorometil, clorometil, carboximetil, bromometil e iodometil.

"Amidina" significa o grupo -C(NH)-NHR em que R é H, alquil, um

carbociclo, um heterociclo, alquil substituído por carbociclo ou alquil substituído por heterociclo, sendo que o alquil, alcoxi, carbociclo e heterociclo são conforme definido no presente pedido. Uma amidina específica é o grupo -NH- C(NH)-NH2.

"Amino" ríieans primary (i.e. "Amino" significa aminas primária

(isto é, NH2), secundária (isto é, -NRH) e terciária (isto é, -NRR), nas quais R é H, alquil, um carbociclo, um heterociclo, alquil substituído por carbociclo ou alquil substituído por heterociclo, sendo que o alquil, alcoxi, carbociclo e heterociclo são conforme definido no presente pedido. Aminas secundária e terciária específicas são alquilamina, dialquilamina, arilamina, diarilamina, aralquilamina e diaralquilamina, sendo que o alquil é conforme definido no presente pedido e opcionalmente substituído. Aminas secundária e terciária específicas são metilamina, etilamina, propilamina, isopropilamina, fenilamina, benzilamina dimetilamina, dietilamina, dipropilamina e disopropilamina. O termo "grupo amino protetor", como usado no presente pedido,

refere-se a um derivado dos grupos comumente empregados para bloquear ou proteger um grupo amino enquanto as reações são realizadas nos outros grupos funcionais no composto. Exemplos de tais grupos protetores incluem grupos carbamatos, amidas, alquil e aril, iminas, bem como muitos derivados de N-heteroátomos que podem ser removidos para regenerar o grupo amina desejado. Grupos amino protetores específicos são Boc, Fmoc e Cbz. Exemplos adicionais destes grupos são encontrados em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2a ed., John Wiley & Sons, Inc., Nova York, NY, 1991, capítulo 7; E. Haslam, "Protective Groups in Organic Chemistry", J. G. W. McOmie, Ed., Plenum Press, Nova York, NY, 1973, Capítulo 5, e T.W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, Nova York, NY, 1981. O termo "amino protegido" refere-se a um grupo amino substituído por um dos grupos amino protetores acima.

"Aril" quando usado sozinho ou como parte de outro termo significa um grupo carbocíclico aromático unido ou não, que tem o número de átomos de carbono designados ou se nenhum número é designado, até 14 átomos de carbono. Grupos aril específicos são fenil, naftil, bifenil, fenantrenil, naftacenil, e similares (consulte, por exemplo, Lang's Handbook of Chemistry (Dean, J. A., ed) 13a ed. Tabela 7-2 [1985]). Um aril específico é fenil. Fenil substituído ou aril substituído significa um grupo fenil ou um grupo aril substituído por um, dois, três, quarto ou cinco, por exemplo, 1 a 2, 1 a 3 ou 1 a 4 substituintes escolhidos, a menos que especificado de outra forma, a partir de halogênio (F, Cl, Br, I), hidroxi, hidroxi protegido, ciano, nitro, alquil (por exemplo, alquil Ci-C6), alcoxi (por exemplo, alcoxi Ci-C6), benziloxi, carboxi, carboxi protegido, carboximetil, carboximetil protegido, hidroximetil, hidroximetil protegido, aminometil, aminometil protegido, trifluorometil, alquilsulfonilamino, alquilsulfonilaminoalquil, arilsulfonilamino, arilsulonilaminoalquil,

heterociclilsulfonilamino, heterociclilsulfonilaminoalquil, heterociclil, aril, ou outros grupos especificados. Um ou mais grupos metina (CH) e/ou metileno (CH2) nestes substituintes podem ser, por sua vez, substituídos por um grupo similar como aqueles estipulados acima. Exemplos do termo "fenil substituído" inclui, mas não se limita ao grupo mono- ou di(halo)fenil como 2-clorofenil, 2- bromofenil, 4-ccloroferiil, 2,6-diclorofenil, 2,5-diclorofenil, 3,4-diclorofenil, 3- clorofenil, 3-bromofenil, 4- bromofenil, 3,4-dibromofenil, 3-cloro-4-fluorofenil, 2- fluorofenil e similares; um grupo mono ou di(hidroxi)fenil como 4-hidroxifenil, 3- hidroxifenil,2,4-dihidroxifenil, os derivados hidroxi protegidos destes e similares; um grupo nitrofenil como 3- ou 4-nitrofenil; um grupo cianofenil, por exemplo, 4- cianofenil; um grupo mono- ou di(alquil inferior)fenil como 4-metilfenil, 2,4- dimetilfenil, 2-metilfenil, 4(iso-propil)fenil, 4-etilfenil, 3-(n-propil)fenil e similares; um grupo mono ou di(alcoxi)fenil, por exemplo, 3,4-dimetoxifenil, 3-metoxi-4- benziloxifenil, 3-metoxi-4-(1-clorometil)benziloxi-fenil, 3-etoxifenil, 4- (isopropoxi)fenil, 4-(t-butoxi)fenil, 3-etoxi-4-metoxifenil e similares; 3- ou 4- trifluorometilfenil; um mono- ou dicarboxifenil ou grupo (carboxi protegido)fenil como 4-carboxifenil, um mono- ou di(hidroximetil)fenil ou (hidroximetil protegido)fenil como 3-(hidroximetil protegido)fenil ou 3,4-di(hidroximetil)fenil; um mono- ou di(aminometil)fenil ou (aminometil protegido)fenil como 2- (aminometil)fenil ou 2,4-(aminometil protegido)fenil; ou um mono- ou di(N- (metilsulfonulamino))fenil como 3-(N-metilsulfonilamino))fenil. Também, o termo "fenil substituído" representa grupos fenil disubstituídos onde os substituintes são diferentes, por exemplo, 3-metil-4-hidroxifenil, 3-cloro-4-hidroxifenil, 2- metoxi-4-bromofenil, 4-etil-2-hidroxifenil, 3-hidroxi-4-nitrofenil, 2-hidroxi-4- clorofenil, e similares, bem como grupos fenil trisubstituídos onde os substituintes são diferentes, por exemplo, 3-metoxi-4-benziloxi-6-metil sulfonilamino, 3-metoxi-4-benziloxi-6-fenil sulfonilamino, e grupos fenil tetrasubstituídos onde os substituintes são diferentes como 3-metoxi-4- benziloxi-5-metil-6-fenil sulfonilamino. Grupos fenil substituídos específicos incluem grupos 2-clorofenil, 2-aminofenil, 2-bromofenil, 3-metoxifenil, 3- etoxifenil, 4-benziloxifenil, 4-metoxifenil, 3-etoxi-4-benziloxifenil, 3,4-dietoxifenil, 3-metoxi-4-benziloxifenil, 3-metoxi-4-(1-clorometil)benziloxi-fenil, 3-metoxi-4-(1- clorometil)benziloxi-6-metil sulfonil aminofenil. Anéis aril unidos também podem ser substituídos por qualquer um de, por exemplo, 1, 2 ou 3 dos substituintes especificados no presente pedido, da mesma maneira que os grupos alquil substituídos.

"CarbociclM", "carbocíclico" e "carbociclo" sozinhos, quando usados no presente pedido como um componente em um grupo complexo como carbocicloalquil, referem-se a um anel alifático mono-, bi-, ou tricíclico tendo 3 a 14 átomos de carbono, por exemplo, 3 a 7 átomos de carbono, que pode ser saturado ou insaturado, aromático ou não-aromático. Grupos carbocíclicos saturados específicos são grupos ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil e ciclohexil. Um carbociclo saturado específico é ciclopropil. Outro carbociclo saturado específico é ciclohexil. Carbociclos insaturados específicos são aromáticos, por exemplo, grupos aril, conforme previamente definidos, por exemplo, fenil. Os termos "carbociclil substituído" e "carbiciclo" significam esses grupos substituídos pelos mesmos substituintes do grupo "alquil substituído".

"Grupo protetor carbóxi", como usado no presente pedido, refere- se a um dos ésteres derivados do grupo ácido carboxílico, comumente empregado para bloquear ou proteger um grupo ácido carboxílico, enquanto as reações são realizadas nos outros grupos funcionais no composto. Exemplos de tais grupos de proteção de ácido carboxílico incluem 4-nitrobenzil, 4- metoxibenzil, 3,4-dimetoxibenzil, 2,4-dimetoxibenzil, 2,4,6-trimetoxibenzil, 2,4,6- trimetilbenzil, pentametilbenzil, 3,4-metilenodioxibenzil, benzidril, 4,4'- dimetoxibenzidril, 2,2',4,4,-tetrametoxibenzidril, alquil como t-butil ou t-amil, tritil, 4-methoxitritil, 4,4,-dimetoxitritil, 4,4,,4"-trimetoxitritil, 2-fenilprop-2-il, trimetilsilil, t-butildimetilsilil, fenacil, 2,2,2-tricloroetil, beta-(trimetilsilil)etil, beta-(di(n- butil)metilsilil)etil, p-toluenosulfoniletil, 4-nitrobenzilsulfoniletil, alil, cinamil, 1- (trimetilsililmetil)prop-1-èn-3-il, e componentes similares. O tipo de grupo de proteção carbóxi empregado não é importante, desde que o derivado do ácido carboxílico seja estável à condição da(s) reação(ões) subseqüentes nas outras posições da molécula e possa ser removido no ponto apropriado sem romper o restante da molécula. Em específico, é importante não submeter uma molécula protegida por carbóxi a bases nucleofílicas fortes, como hidróxido de lítio ou NaOH, ou condições de redução que empregam hídridos metálicos altamente ativados como LiAIH4. (tais condições de remoção hostis também devem ser evitadas na remoção dos grupos de proteção amino e grupos de proteção hidroxi, discutidos abaixo). Grupos de proteção de ácido carboxílico específicos são alquil (por exemplo, grupos metil, etil, t-butil, benzil e p-nitrobenzil). Grupos de proteção carbóxi similares usados na técnica como cefalosporina, penicilina e peptídeo também podem ser usados para proteger um substituinte do grupo carbóxi. Exemplos adicionais destes grupos são encontrados em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2a ed., John Wiley & Sons, Inc., Nova York, N.Y., 1991, capítulo 5; E. Haslam, "Protective Groups in Organic Chemistry", J. G. W. McOmie, Ed., Plenum Press, Nova York, N.Y., 1973, Capítulo 5, e T.W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, Nova York, NY, 1981, Capítulo 5. O termo "carbóxi protegido" refere-se a um grupo carbóxi substituído por um dos grupos de proteção carbóxi acima. "Guanidina" significa o grupo -NH-C(NH)-NHR em que R é H,

alquil, um carbociclo, um heterociclo, alquil substituído por carbociclo ou alquil substituído por heterociclo, sendo que o alquil, alcoxi, carbociclo e heterociclo são conforme definido rio presente pedido. Uma guanidina específica é o grupo -NH-C(NH)-NH2.

O termo "grupo protetor hidróxi", como usado no presente pedido,

refere_se a um derivado do grupo hidróxi comumente empregado para bloquear ou proteger um grupo hidróxi enquanto as reações são realizadas nos outros grupos funcionais no composto. Exemplos de tais grupos de proteção incluem grupos tetrahidropiraniloxi, benzoil, acetoxi, carbamoiloxi, benzil e sililéteres (por exemplo, TBS, TBDPS). Exemplos adicionais destes grupos são encontrados em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2a ed., John Wiley & Sons, Inc., Nova York, NY1 1991, capítulos 2- 3; E. Haslam, "Protective Groups in Organic Chemistry", J. G. W. McOmie, Ed., Plenum Press, Nova York, NY1 1973, Capítulo 5, e T.W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, Nova York, NY1 1981.

' O termo "hidróxi protegido" refere-se a um grupo amino substituído por um dos grupos hidróxi protetores acima.

"Grupo heterocíclico", "heterocíclico", "heterociclo", "heterociclil",

ou "heterociclo" sozinho e quando usado como um componente em um grupo complexo como um grupo heterocicloalquil, é usado alternadamente e refere-se a qualquer anel mono-, bi- ou tricíclico, saturado ou insaturado, aromático (heteroaril) ou não-aromático que tem o número de átomos designados, geralmente anel com 5 a cerca de 14 átomos, onde os átomos do anel são carbono e pelo menos um heteroátomo (nitrogênio, enxofre ou oxigênio), por exemplo, 1 a 4 heteroátomos. Tipicamente, um anel com 5 membros tem 0 a 2 ligações duplas e um anel com 6 a 7 membros tem 0 a 3 ligações duplas e os heteroátomos de nitrogênio ou enxofre podem ser opcionalmente oxidados (por exemplo, SO, SO2), e qualquer heteroátomo de nitrogênio pode ser opcionalmente quaternizado. Heterociclos não-aromáticos específicos são morfolinil (morfolino), pirrolidinil, oxiranil, oxetanil, tetrahidrofuranil, 2,3- diidrofuranil, 2H-piranil, tetrahidropiranil, tiiranil, tietanil, tetrahidrotietanil, aziridinil, azetidinil, 1-metil-2-pirrolil, piperazinil e piperidinii. Um grupo "heterocicloalquil" é um grupo heterociclo, conforme definido acima, covalentemente ligado a um grupo alquil conforme definido acima. Heterociclos com 5 membros específicos contendo um átomo de enxofre ou oxigênio e de um a três átomos de nitrogênio são tiazolil, em específico, tiazol-2-il e tiazol-2-il N-óxido, tiadiazolil, em específico 1,3,4-tiadiazol-5-il e 1,2,4-tiadiazol-5-il, oxazolil, por exemplo, oxazol-2-il, e oxadiazolil, comol ,3,4-oxadiazol-5-il, e 1,2,4-oxadiazol-5-il. Anéis heterociclos específicos com 5 membros contendo 2 a 4 átomos de nitrogênio incluem imidazolil, como imidazol-2-il; triazolil, como 1,3,4-triazol-5-il; 1,2,3-triazol-5-il, 1,2,4-triazol-5-il, e tetrazolil, como 1H-tetrazol-5-il. Heterociclos específicos com 5 membros unidos ao benzene são benzoxazol-2-il, benzotiazol-2-il e benzimidazol-2-il. Heterociclos com 6 membros específicos contêm um a três átomos de nitrogênio e opcionalmente um átomo de enxofre ou oxigênio, por exemplo, piridil, como pirid-2-il, pirid-3-il e pirid-4-il; pirimidil, como pirimid-2-il e pirimid-4-il; triazinil, como 1,3,4-triazin-2-il e 1,3,5-triazin-4-il; piridazinil, em específico, piridazin-3-il, e pirazinil. Os piridina N-óxidos e piridazina N-óxidos e os grupos piridil, pirimid- 2-il, pirimid-4-il, piridazinil e 1,3,4-triazin-2-il, um grupo específico. Substituintes para "heterociclos opcionalmente substituídos" e exemplos adicionais dos sistemas de anéis com 5 e 6 membros discutidos acima podem ser encontrados em W. Druckheimer et ai, patente US 4.278.793. Em uma realização específica, tais grupos heterociclo opcionalmente substituídos são substituídos por hidroxila, alquil, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano, nitro, amidino e guanidino.

"Heteroaril" sozinho e quando usado como um componente em um grupo complexo como grupo heteroaralquil, refere-se a qualquer sistema de anel aromático mono, bi ou tricíclico tendo o número de átomos designado, onde pelo menos um anel é um anel com 5, 6 ou 7 membros contendo de um a quatro heteroátomos selecionados a partir do grupo nitrogênio, oxigênio e enxofre, e em uma realização específica pelo menos um heteroátomo é nitrogênio (Lang's Handbook of Chemistry, acima). Estão incluídos na definição quaisquer grupos bicíclicos onde qualquer um dos anéis heteroaril acima são unidos a um anel benzeno. O heteroaril específico incorpora um heteroátomo de nitrogênio ou oxigênio. Os sistemas de anéis a seguir são exemplos dos grupos heteroaril (substituídos ou não-substituídos) denotados pelo termo "heteroaril": tienil, furil, imidazolil, pirazolil, tiazolil, isotiazolil, oxazolil, isoxazolil, triazolil, tiadiazolil, oxadiazolil, tetrazolil, tiatriazolil, oxatriazolil, piridil, pirimidil, pirazinil, piridazinil, tiazinil, oxazinil, triazinil, tiadiazinil, oxadiazinil, ditiazinil, dioxazinil, oxatiazinil, tetrazinil, tiatriazinil, oxatriazinil, ditiadiazinil, imidazolinil, diidropirimidil, tetrahidropirimidil, tetrazolo[1,5-b]piridazinil e purinil, bem como derivados unidos ao benzeno, por exemplo benzoxazolil, benzofuril, benzotiazolil, benzotiadiazolil, benzotriazolil, benzoimidazolil e indolil. Um "heteroaril" específico é: 1,3-tiazol-2-il, 4-(carboximetil)-5-metil-1,3-tiazol-2-il, sal de sódio de 4-(carboximetil)-5-metil-1,3-tiazol-2-il, 1,2,4-tiadiazol-5-il, 3-metil- 1,2,4-tiadiazol-5-il, 1,3,4-triazol-5-il, 2-metil-1,3,4-triazol-5-il, 2-hidroxi-1,3,4- triazol-5-il, sal de sódio de 2-carboxi-4-metil-1,3,4-triazol-5-il, 2-carboxi-4-metil- 1,3,4-triazol-5-il, 1,3-oxazol-2-il, 1,3,4-oxadiazol-5-il, 2-metil-1,3,4-oxadiazol-5-il, 2-(hidroximetil)-1,3,4-oxadiazol-5-il, 1,2,4-oxadiazol-5-il, 1,3,4-tiadiazol-5-il, 2- tiol-1,3,4-tiadiazol-5-il, 2-(metiltio)-1,3,4-tiadiazol-5-il, 2-amino-1,3,4-tiadiazol-5-il, 1 H-tetrazol-5-il, 1-metil-1 H-tetrazol-5-il, 1-(1-(dimetilamino)et-2-il)-1H-tetrazol-5- il, 1-(carboximetil)-1H-tetrazol-5-yl, sal de sódio de 1-(carboximetil)-IH-tetrazol- 5-il, 1-(ácido metilsulfônico)-]H-tetrazol-5-il, sal de sódio 1-(ácido metilsulfônico)-1 H-tetrazol-5-il ,2-metil-IH-tetrazol-5-il, 1,2,3-triazol-5-il, 1-metil- 1,2,3-triazol-5-il, 2-metil-1,2,3-triazol-5-il, 4-metil-1,2,3-triazol-5-il, pirid-2-il N- óxido, 6-metoxi-2-(n-óxido)-piridaz-3-il, 6-hidroxipiridaz-3-il, 1-metilpirid-2-il, 1- metilpirid-4-il, 2-hidroxipirimid-4-il, 1,4,5,6-tetrahidro-5,6-dioxo-4-metil-as-triazin- 3-il, 1,4,5,6-tetrahidro-4-(formilmetil)-5,6-dioxo-astriazin-3-il, 2,5-dihidro-5-oxo- 6-hidroxi-astriazin-3-il, sal de sódio de 2,5-dihidro-5-oxo-6-hidroxi-as-triazin-3-il, sal de sódio de 2,5-dihidro-5-oxo-6-hidroxi-2-metil-astriazin-3-yl, 2,5-dihidro-5- oxo-6-hidroxi-2-metil-as-triazin-3-il, 2,5-dihidro-5-oxo-6-metoxi-2-metil-as-

triazin-3-il, 2,5-dihidro-5-oxo-as-triazin-3-il, 2,5-dihidro-5-oxo-2-metil-as-triazin- 3-il, 2,5-dihidro-5-oxo-2,6-dimetil-as-triazin-3-il, tetrazolo[l,5-b]piridazin-6-il e 8- aminotetrazolo[1,5-b]-piridazin-6-il. Um grupo alternativo de "heteroaril" inclui: 4-(carboximetil)-5-metil-1,3-tiazol-2-il, sal de sódio de 4-(carboximetil)-5-metil- l,3-tiazol-2-il, 1,3,4-triazol-5-il, 2-metil-1,3,4-triazol-5-il, 1H-tetrazol-5-il, 1-metil- 1 H-tetrazol-5-il, 1 -(1 -(dimetilamino)et-2-il)-1 H-tetrazol-5-il, 1 -(carboximetil)-]H- tetrazol-5-il, sal de sódio de 1-(carboximetil)-1 H-tetrazol-5-il, 1-(ácido metilsulfônico)-1H-tetrazol-5-il, sal de sódio 1-(ácido metilsulfônico)-1H-tetrazol- 5-il, 1,2,3-triazol-5-il, l,4,5,6-tetrahidro-5,6-dioxo-4-metil-as-triazin-3-il, 1,4,5,6- tetrahidro-4-(2-formilmetil)-5,6-dioxo-as-triazin-3-ii, sal de sódio de 2,5-diidro-5- oxo-6-hidroxi-2-metil-as-triazin-3-il, 2,5-diidro-5-oxo-6-hidroxi-2-metil-as- triazin-3-il, tetrazolo[1,5-b]piridazin-6-il, e 8-aminotetrazolo[1,5-b]piridazin-6-il. Grupos heteroaril são opcionalmente suibstituídos conforme descrito para heterociclos.

"Inibidor" significa um composto que reduz ou previne a ligação de

proteínas IAPs às proteínas caspase ou que reduz ou previne a inibição de apoptose por uma proteína IAP. Alternativamente, "inibidor" significa um composto que previne a ligação de interação de X-IAP com caspases ou a ligação de interação de ML-IAP com SMAC. Opcionalmente substituído", a menos que especificado de outra

forma, significa que um grupo pode ser não-substituído ou substituído por um ou mais (por exemplo, 0, 1,2, 3, ou 4) dos substituintes listados para o grupo no qual os ditos substituintes podem ser o mesmo ou diferentes. Em uma realização um grupo opcionalmente substituído tem 1 substituinte. Em outra realização um grupo opcionalmente substituído tem 2 substituintes. Em outra realização um grupo opcionalmente substituído tem 3 substituintes.

"Sais farmaceuticamente aceitáveis" incluem a adição de sais ácidos ou básicos. "Sais ácidos de adição farmaceuticamente aceitáveis" referem-se àqueles sais que mantêm a efetividade e propriedades biológicas das bases livres e que não são biologicamente, ou de outra forma, indesejáveis, formados por ácidos inorgânicos como ácido clorídrico, ácido bromídico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido carbônico, ácido fosfórico e similares, e ácidos orgânicos podem ser selecionados a partir de classes de ácidos orgânicos alifáticos, cicloalifáticos, aromáticos, aralifáticos, heterocíclicos, carboxílicos e sulfônicos como ácido fórmico, ácido acético, ácido propiônico, ácido glicólico, ácido glucônico, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido málico, ácido maléico, ácido malônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido aspártico, ácido ascórbico, ácido glutâmico, ácido antranílico, ácido benzóico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido embônico, ácido fenilacético, ácido metanosulfônico, ácido etanosulfônico, ácido p-toluenesulfônico, ácido salicílico, e similares.

"Sais básicos de adição farmaceuticamente aceitáveis" incluem aqueles derivados a partir de sais de bases inorgânicas como sódio, potássio, lítio, amônio, cálcio, magnésio, ferro, zinco, cobre, manganês e alumínio. Sais básicos de adição são especificamente sais de amônio, potássio, sódio, cálcio e magnésio. Sais derivados a partir de bases não-tóxicas farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de aminas primárias, secundárias e terciárias, aminas substituídas incluindo as aminas substituídas de ocorrência natural, aminas cíclicas e básicas de resina de troca iônica, como isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamiría, tripropilamina, etanolamina, 2-dietilaminoetanol, trimetamina, diciclohexilamina, lisina, arginina, histidina, cafeína, procaína, hidrabamina, colina, betaína, etilenodiamina, glucosamina, metilglucamina, teobromina, purinas, piperizina, piperidina, N-etilpiperidina, resinas de poliamina e similares. Bases orgânicas não-tóxicas são especificamente isopropilamina, dietilamina, etanolamina, trimetamina, diciclohexilamina, colina e cafeína.

"Sulfonil" significa um grupo -SO2-R em que R é H, alquil, um carbociclo, um heterociclo, alquil substituído por carbociclo ou alquil substituído por heterociclo, sendo que o alquil, alcoxi, carbociclo e heterociclo são conforme definido no presente pedido. Grupos sulfonil específicos são alquilsulfonil (isto é, -S02-alquil), por exemplo, metilsulfonil; arilsulfonil, por exemplo, fenilsulfonil; aralquilsulfonil, por exemplo, benzilsulfonil.

A frase "e sais e solventes destes", como usado no presente pedido, significa que os compostos da invenção podem existir em uma ou mais misturas na forma de sais e solvatos. Por exemplo, um composto da invenção pode ser substancialmente puro em uma ou mais formas de sais ou solvatos ou pode ser uma mistura de duas ou mais formas de sais ou solvatos.

A presente invenção fornece novos compostos que têm a fórmula

I geral:

em que Q, X1, X2, Υ, Z, R1, R2, R3, R3', R4, R4', R5, R6, R6' e η são conforme descritos no presente pedido. Compostos da invenção incluem sais, solvatos e poliformas destes, a menos que especificado de outra forma.

- X1 e X2 são independentemente O ou S. Em uma realização específica, X1 e X2 são ambos O. Em uma realização específica X1 e X2 são ambos S. Em outra realização específica, X1 é S, enquanto X2 is O. Em outra realização específica, X1 é O, enquanto X2 é S.

- Y is a bond, (CR7R7)In, 0 or S. Em uma realização Y é uma ligação, (CR7R7)m, O ou S; em que m é 1 ou 2 e R7 é conforme definido no presente pedido ou é H, halogênio, alquil, aril, aralquil, amino, arilamino, alquilamino, aralquilamino, alcoxi, ariloxi ou aralquiloxi. Em uma realização específica Y é (CHR7)m, O ou S; em que m é 1 ou 2 e R7 é H, halogênio, alquil, aril, aralquil, amino, arilamino, alquilamino, aralquilamino, alcoxi, ariloxi ou aralquiloxi. Em uma realização específica, Y é CH2. Em uma realização específica m é 1. Em uma realização específica Y é uma ligação. Em uma realização específica m é 1 e Y é CHR7 , em que R7 é aralquiloxi, por exemplo, benziloxi. Em uma realização específica m é 1 e Y é CHR7 , em que R7 é F. Em uma realização específica m é 1 e Y é CHR7 , em que R7 é aralquilamino, por exemplo, benzilamino. Em outra realização específica Y é 0. Em outra

realização específica Y é S.

acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil opcionalmente substituído, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído; e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, - S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8- SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, -NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-. Em uma realização Z is H, halogênio, hidroxila, carboxila, amino, nitro, alquil, um carbociclo ou urrT heterociclo, sendo que os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por um halogênio, hidroxila, carboxila, amino e nitro. Em uma realização Z é H, halogênio ou alquil. Em uma realização Z é H. Em uma realização Z é alquil, por exemplo, metil, etil, propil e isopropil. Em uma realização Z é fenil ou naftil.

- Q é H, halogênio, hidroxila, carboxila, amino, nitro, ciano, alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por uma ou mais hidroxila, alcóxi,

acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil opcionalmente substituído, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído; e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, - S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8- SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, -NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-. Substituintes do "alquil opcionalmente substituído", "carbociclo opcionalmente substituído" e "heterociclo opcionalmente substituído" são substituídos pelos grupos precedentes alquil, carbociclo e heterociclo em Q. Em uma realização específica de tais "alquil opcionalmente substituídos" são hidroxila, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, amino, ciano, nitro, amidino e guanidino. Em uma realização específica, tais grupos carbociclo opcionalmente substituídos são substituídos por hidroxila, alquil, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil substituído, amino, ciano, nitro, amidino e guanidino. Em uma realização específica Q é um carbociclo ou heterociclo opcionalmente substituído por halogênio, amino, oxo, alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que um ou mais grupos CH2 or CH de um alquil é opcionalmente substituído por O-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8- , -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8-SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, -NR8- C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)- e sendo que os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por halogênio, amino, hidroxila, mercapto, carboxila, alcoxi, alcoxialcoxi, hidroxialcoxi, alquiltio, aciloxi, aciloxialcoxi, alquilsulfonil, alquilsulfonilalquil, alquilsulfinil e alquilsulfinilalquil. Em uma realização específica Q é um carbociclo ou um heterociclo, conforme definido no presente pedido, que é opcionalmente substituído conforme descrito no presente pedido, enquanto Z é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio, carboxila, amino, nitro e ciano. Em uma realização específica Q é um aril ou heteroaril, enquanto Z é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio, carboxila, amino, nitro e ciano. Em uma realização específica Z é H. Em outra realização específica, tais outros exemplos de Z é H, halogênio ou alquil.

Em uma realização específica, Q é um carbociclo or heterociclo selecionado a partir do grupo que consiste em 111-1 -111-16:

R7-

III-I

(R7)n

ef>

:N

III-2

-(R7)n

Jjv-ííV

V>

III-3

(R7)n

-T(R7)n

(R7)n

III-5

III-6

III-7

III-8

Ir(R7)n

III-9

r^Ir(R7)n

K

Ύ

O

III-IO

Re

ΙΠ-11

(R7)n

III-12

(R7)n

I

R8

III-13

(R7)n

,N

III-14

.N

(R7)n

111-15

N

(R7)n

III-16

- em que η é 1 a 4, por exemplo 1 a 3, por exemplo 1 a 2, por exemplo 1; T é O1 S1 NR8 ou CR7R7; W é O, NR8 ou CR7R7; e R7 e R8 são conforme definido no presente pedido. Em uma realização Q tem as fórmulas gerais 111-1 a 111-16, enquanto Z é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio, carboxila, amino, nitro e ciano. Em outra realização específica Z é H. Em outra realização específica Z é H, halogênio ou alquil. Em uma realização específica, Q é um carbociclo ou heterociclo selecionado a partir do grupo que consiste em lll-a - lll-s:

(R7)n . ΓΎ<«7)η

IlIa

-(R7)n

IlIb

IITc

IIId

IIIe

T(R7)n

Ij (R7)n

|r(R7)n

O

(R7)rt

IIIj

T(R7)n

IIIk

-(R7)n

III/

(R7)n

IIIm

(R7)n

ΠΙη

a

IIIo

N

(R7)n

(R7)n em que η é 1 a 4, por exemplo 1 a 3, por exemplo 1 a 2, por exemplo 1; T é O1 S, NR8 ou CR7R7; W é O, NR8 ou CR7R7; e R7 e R8 são conforme definido no presente pedido. Em uma realização específica, Q é qualquer um de Illa - Illi em que R8 é H e R7 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, F, Cl1 Me1 metoxi, hidroxietoxi, metoxietoxi, acetoxietoxi, metilsulfonil, metilsulfonilmetil, fenil e morfolino-4-il. Em outra realização específica, Qé llld. Em uma realização específica, Q é Illd que é substituído na posição 4 por R7. Em outra realização específica, Q é Illd que é substituído na posição 5 por R7. Em uma realização específica Q é F, Me, iPr, fenil, fenil Substituído, como segue: 2-CI, 3-CI, 4-CI, 2-F, 3-F ou 4-F substituído, benzil, pirid-3-il ou pirid-4-il. Em uma realização, Q tem as fórmulas gerais lll-a a lll-s, enquanto Z é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio, carboxila, amino, nitro e ciano. Em uma realização específica Z é H. Em outra realização específica Z é H, halogênio ou alquil. R1 é H1 OH ou alquil; ou Ri e R2 formam juntos um heterociclo

com 5 a 8 membros; Em uma realização específica R1 é H. Em uma realização específica, Ri e R2 formam juntos um heterociclo com 6 membros. Em uma realização específica, Ri e R2 formam juntos um heterociclo com 7 membros. Em uma realização específica, Ri e R2 formam juntos um heterociclo com 8 membros. Em outra realização específica, Ri e R2 formam juntos um heterociclo com 7 membros, enquanto Y é S. Em outra realização específica, R1 é H1 enquanto Y é CH2. Em outra realização específica, Ri é H, enquanto Y2 is S. Em outra realização específica, Ri é H, enquanto Y é O.

R2 é alquil, um carbociclo, carbociclilalquil, um heterociclo ou heterociclilalquil, cada um opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, oxo, tiona, mercapto, carboxila, alquil, haloalquil, acil, alcoxi, alquiltio, sulfonil, amino e nitro, sendo que os ditos alquil, acil, alcoxi, alquiltio e sulfonil são opcionalmente substituídos por hidroxi, mercapto, halogênio, amino, alcoxi, hidroxialcoxi e alcoxialcoxi; Em uma realização, R2 é alquil, um carbociclo, carbocicloalquil, um heterociclo ou heterocicloalquil, cada um opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, oxo, tiona, mercapto, carboxila, alquil, haloalquil, alcoxi, alquiltio, sulfonil, amino e nitro. Em uma realização específica, R2 é alquil, um carbociclo, carbocicloalquil, um heterociclo ou heterocicloalquil, cada um opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, oxo, mercapto, tiona, carboxila, alquil, haloalquil, alcoxi, acil, alquiltio, hridroxiacil, metoxiacil, sulfonil, amino e nitro. Em uma realização, R2 é alquil, um carbociclo, carbocicloalquil, um heterociclo ou heterocicloalquil, cada um opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, mercapto, carboxila, alquil, alcoxi, acil, amino e nitro. Em uma realização específica, R2 é alquil, cicloalquil, cicloalquilalquil, aril, aralquil, um heterociclo ou heterociclilalquil. Em uma realização específica, R2 é alquil, cicloalquil ou heterociclo. Em uma realização específica, R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em t-butil, isopropil, ciclohexil, tetrahidropiran-4-il, N-metilsulfonilpiperidin-4-il, tetrahidrotiopiran-4-il, tetrahidrotiopiran-4-il (em que S está na forma oxidada SO ou SO2), ciclohexan- 4-ona, 4-hidroxiciclohexano, 4-hidroxi-4-metilciclohexano, 1-metil- tetrahidropiran-4-il, 2-hidroxiprop-2-il, but-2-il, tiofen-3-il, piperidin-4-il, N- acetilpiperidin-4-il, N-hidroxietilpiperidin-4-il, N-(2-hidroxiacetil)piperidin-4-il, N- (2-metoxiacetil)piperidin-4-il, piridin-3-il, fenil, tetrahidrofuran-2-il-carbonil, metoxietanona, 2-metoxietoxietanona e 1-hidroxiet-1-il. Em uma realização da invenção, R2 é t-butil, isopropil, ciclohexil, ciclopentil, fenil ou tetrahidropiran-4- il. Em uma realização específica, R2 é fenil. Em uma realização específica, R2 é ciclohexil. Em outra realização, R2 é tetrahidropiran-4-il. Em outra realização específica, R2 é isopropil (isto é, a cadeia lateral do aminoácido valina). Em uma realização específica, R2 é t-butil. Em uma realização específica R2 é orientado de modo que o aminoácido ou análogo do aminoácido que este compreende está na configuração L. R3 é H ou alquil opcionalmente substituído por halogênio ou hidroxila; ou R3 e R4 formam juntos um heterociclo com 3 a 6 membros; Em uma realização R3 é H ou alquil; ou R3 e R4 formam juntos um heterociclo com 3 a 6 membros; Em uma realização R3 é H ou metil, etil, propil e isopropil. Em uma realização específica, R3 é H ou metil. Em outra realização específica, R3 é metil. Em outra realização específica R3 é fluorometil. Em outra realização específica R3 é etil. Em outra realização específica R3 é hidroxietil. Em uma realização específica R3 é fluorometil. Em uma realização específica R3 é hidroxietil. Em outra realização específica R3 é orientado de modo que o aminoácido ou análogo do aminoácido que este compreende está na configuração L. Em uma realização específica R3 e R4, junto com os átomos que eles dependem, formam um heterociclo com 3 a 6 membros Em uma realização específica, R3 e R4 formam juntos um anel azetidina. Em uma realização específica, R3 e R4 formam juntos uma pirrolidina. R3' é H, ou R3 e R3' formam juntos um carbociclo com 3 a 6

membros; Em uma realização R3' é H. Em uma realização específica, R3 e R3' formam juntos um heterociclo com 3 membros, por exemplo, um anel ciclopropil. Em uma realização específica, R3 e R3' são ambos metil.

R4 e R4' são independentemente H, hidroxila, amino, alquil, carbociclo, carbocicloalquil, carbocicloalquiloxi, carbocicloalquiloxicarbonil, heterociclo, heterocicloalquil, heterocicloalquiloxi ou

heterocicloalquiloxicarbonil; sendo que cada alquil, carbocicloalquil, carbocicloalquiloxi, carbocicloalquiloxicarbonil, heterociclo, heterocicloalquil, heterocicloalquiloxi e heterocicloalquiloxicarbonil é opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, mercapto, carboxila, alquil, alcoxi, amino, imino e nitro; ou R4 e R4' formam juntos um heterociclo. Em uma realização R4 e R4' são independentemente H, hidroxila, amino, alquil, aril, aralquil, cicloalquil, cicloalquilalquil, heteroaril ou heteroarilalquil, sendo que cada aril, aralquil, cicloalquil, cicloalquilalquil, heteroaril ou heteroarilalquil é opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, mercapto, carboxila, alquil, alcoxi, amino e nitro; ou R4 e R4' formam juntos um heterociclo. Em uma realização específica, R4 e R4' formam juntos um heterociclo, por exemplo, um anel azetidina ou um anel pirrolidina. Em uma realização específica, R4 e R4' são ambos H. Em outra realização específica, R4 é metil e R4' é H. Em uma realização específica, um dos R4 e R4' é hidroxila (OH), enquanto o outro é H. Em uma realização, um dos R4 e R4' é amino, como NH2, NHMe e NHEt, enquanto o outro é H. Em uma realização específica, R4' é H e R4 é H, alquil, aril, aralquil, cicloalquil, cicloalquilalquil, heteroaril ou heteroarilalquil. Em outra realização específica, R4 é um grupo selecionado a partir do grupo que consiste em:

V

\

HN

\

ΓΛ

HN-\ (CH2)2 L > (CH2)2

\

^ (CH2)2

(Me)2N

O5N

OH

H,N

PhO' - R5 é H ou alquil. Em uma realização específica, R5 é H ou metil. Em uma realização específica, R5 é H. Em outra realização específica, R5 é metil.

- R6 e R6' são cada um independentemente H, alquil, aril ou aralquil; Em uma realização específica, R6 é alquil, por exemplo, metil. Em outra realização específica, R6 é aril, por exemplo, fenil. Em outra realização específica, R6 é aralquil, por exemplo, benzil. Em uma realização específica, R6 e R6 são os mesmos, por exemplo, ambos alquil, por exemplo, ambos metil.

Em outra realização específica, R6 é metil e R6' é H.

R7 em cada ocorrência é independentemente H, ciano, hidroxila, mercapto, halogênio, nitro, carboxila, amidino, guanidino, alquil, um carbociclo, um heterociclo; sendo que U é -O-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)- NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8-SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, - NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)- e V é alquil, um carbociclo ou um heterociclo; e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil é opcionalmente substituído por -O-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)- NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8-SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, - NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-; e um alquil, carbociclo e heterociclo é opcionalmente substituído por hidroxila, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino e carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído. Substituintes do "carbociclo opcionalmente substituído" e "heterociclo opcionalmente substituído" são conforme definido no presente pedido. Em uma realização específica, tais grupos carbociclo e heterociclo são substituídos por hidroxila, alquil, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano, nitro, amidino e guanidino. Em uma realização, R7 é H, halogênio, alquil, haloalquil, aril, aralquil, amino, arilamino, alquilamino, aralquilamino, alcoxi, alcoxialcoxi,

ariloxi ou aralquiloxi.

R8 é H, alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH do dito alquil são opcionalmente substituídos por -O-, - S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)- ou -C(O)-, e os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por hidroxila, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo (=O), carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído. Substituintes do "carbociclo opcionalmente substituído" e "heterociclo opcionalmente substituído" são conforme definido no presente pedido. Em uma realização específica, tais grupos carbociclo e heterociclo são substituídos por hidroxila, alquil, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano, nitro, amidino e guanidino. Em uma realização específica, R8 é H, alquil ou acil. Em uma realização R8 é metil. Em outra realização R8 é acetil. Em outra realização específica R8 é H. Em outra realização específica R7 é H, halogênio, amino, hidroxil, carboxila, alquil, haloalquil ou aralquil. Em uma realização específica, R7 é halogênio, por exemplo, Cl ou F. Em uma realização específica R7 é H. Deve-se entender que às substituições definidas para R7 e R8, bem como para todos os outros grupos variáveis no presente pedido estão sujeitos à permissibilidade de valência.

- m é 0 ta 4. Em uma realização, m é 0. Em uma realização m é 1. Em uma realização m é 2. Em uma realização m é 3. Em uma realização m é 4.

Compostos da inveção contêm um ou mais carbonos assimétricos. Consequentemente, os compostos podem existir como diastômeros, enantiômeros ou misturas destes. A síntese dos compostos pode empregar racematos, diastereômeros ou enantiômeros como materiais de partida ou como intermediários. Compostos diastereoméricos podem ser separados por cromatografia ou por métodos de cristalização. De maneira semelhante, misturas enantioméricas podem ser separadas usando-se as mesmas ou outras técnicas conhecidas. Cada um dos átomos de carbono pode estar na configuração R ou S e ambas as configurações estão dentro do escopo da invenção. Em uma realização específica, os compostos da invenção têm a seguinte configuração estereoquímica de fórmula I:

- em que X1l X2, Υ, Z, Q Ri, R2, R3, R4, R4', R5, Re e R6' são

conforme descrito no presente pedido.

- Em uma realização específica, os compostos da invenção têm a

fórmula geral lla-lld:

R

Z

IIb

IIa - em que Xil X2, Y1 Ζ, Q Ri, R2, R3, R4, R4', R5, R6 e R6' e R7 são

conforme descrito no presente pedido.

A invenção também engloba pró-drogas dos compostos descritos acima. Pró-drogas adequadas, quando aplicáveis, encluem grupos protetores amino e grupos protetores carbóxi que são liberados, por exemplo, hidrolisados, para produzir o composto parental mediante condições fisiológicas. Uma classe específica de pró-drogas são os compostos em que um átomo de nitrogênio em um grupo amino, amidino, aminoalquilenoamino, iminoalquilenoamino ou guanidino é substituído por um grupo hidroxi (OH), um alquilcarbonil(-CO-R), um alcoxicarbonil (-CO-OR), um aciioxialquil- alcoxicarbonil (-CO-O-R-O-CO-R) onde R é um grupo monovalente ou bivalente e conforme definido acima, ou um grupo que tem a fórmula -C(O)-O- CPIP2-haloalquil, onde P1 e P2 são iguais ou diferentes, e são H, alquil inferior, alcoxi inferior, ciano, halo alquil inferior ou aril. Em uma realização específica, o átomo de nitrogênio é um dos átomos de nitrogênio do grupo amidino dos compostos da invenção. Estes compostos pró-droga são preparados pela reação dos compostos da invenção descritos acima com um composto acil ativado para ligar um átomo de nitrogênio no composto da invenção ao carbonil do composto acil ativado. Compostos carbonil ativados adequados contêm um bom grupo de saída ligado ao carbono carbonil e inclui acil halidos, acil aminas, sais acil piridínio, acil alcóxidos, em específico, acil fenóxidos como acil p-nitrofenoxi, acil dinitrofenoxi, acil fluorofenoxi e acil difluorofenoxi. As reações geralmente são exotérmicas e são conduzidas em solventes inertes em temperaturas reduzidas como -78°C a 50°C. As reações são usualmente conduzidas na presença de uma base inorgânica como • carbonato de potássio ou bicarbonato de sódio, ou uma base orgânica como amina, incluindo piridina, trietilamina, etc. Uma maneira para preparar pró- drogas está descrita na patente USSN 08/843.369 depositada em 15 de abril de 1997 (correspondente à publicação PCT documento WO 9846576), o conteúdo desta está incorporado ao presente pedido como referência.

Compostos específicos de fórmula I incluem os seguintes: 11

13

15

17

10

12

14

16

18

NH2

U1^

19

20 Compostos da invenção podem existir em diferentes formas de ressonância e todas as formas de ressonância estão dentro do escopo da

invenção no presente pedido.

Síntese

Compostos da invenção são preparados usando-se técnicas sintéticas orgânicas padrão de acordo com os materiais de partida e reagentes disponíveis comercialmente. Será apreciado que procedimentos sintéticos empregados na preparação de compostos da invenção dependerão dos substituintes específicos presentes em um composto e que várias etapas de proteção e desproteção que são padrão nos sistemas orgânicos podem ser necessárias, mas podem não estar ilustradas nos esquemas gerais a seguir. Em um esquema sintético geral específico, compostos da invenção podem ser preparados pelo acoplamento de análogos de resíduos de aminoácidos que empregam procedimentos típicos de acoplamento de amida. No esquema 1, em que Q, Υ, Z, R1, R6 e R6' são conforme definido no presente pedido e Pr é um grupo protetor adequado, os análogos do resíduo de aminoácido protegido por amina são acoplados e desprotegidos seqüencialmente para fornecer os compostos finais. Esquema 1

ζ

Será apreciado que os análogos de aminoácido possam ser acoplados em qualquer ordem e que possam ser preparados usando-se suporte de fase sólida que é de rotina na técnica Por exemplo, o esquema 2 ilustra uma rota de acoplamento alternativa de análogo de resíduo de aminoácido

Esquema 2

F\ R3' f I2 rV*'*1 R2

R AVji-OH + H-N-V

R4 I3 R5 X2

r

Intermediários imidazo[1,2a]piridina podem ser preparados de acordo com o esquema 3 em que Q, Υ, Z, Ri, R6 e R6' são conforme definido no presente pedido. Bromina de partida a é reagida com com 2-aminopiridil b para fornecer um composto protegido ç que é subseqüentemente desprotegido para fornecer o intermediário empregado na síntese dos compostso da invenção.

Esquema 3

R1 R1 R1

VY R Q V-V-R6 VyvR6

cVnV^ ♦ T? — Yn \ rO' — h-^R-·

•i A' η,Ν-Η b h

i L } ^J-Q zk>Q

ó

a ç d

Compostos da invenção em que R4 ou R4' são exceto H podem ser preparados de acordo com técnicas padrão de química orgânica, por exemplo, pela aminação redutiva na qual um análogo de resíduo de aminoácido de partida, por exemplo, NH2-CH(R3)-C(0)-0H é reagido com um aldeído adequado ou cetona para fornecer os substituintes R4and R4' desejados. Consulte esquema 4. O intermediário de aminoácido RaIRa substituído pode ser, então, conjugado com o intermediário de aminoácido seguinte ou com o remanescente do composto usando-se procedimentos de acoplamento peptídico padrão.

Esquema 4

9 R3' fí1 NaCNBH3 ψ LiOH H2O J3

ah . —r otr ottr

R3 Xi X'

DMF

Em uma realização específica, alanina é reagida com 1- metilindola-2-carboxaldeído e reduzida com cianoborohidreto de sódio dissolvido em HOAc/DMF a 1% para fornecer o resíduo de alanina N- substituído que pode ser usado na preparação de compostos da invenção. Consulte esquema 5.

Esquema 5

α

η ^

O NaCNBH3

H2N^Ai

OR' 1% AcOH DMF

sa, Alternativamente, o procedimento de aminação redutiva para introduzir substituintes R4/R4' é a etapa final na preparação do composto.

Quando os compostos da invenção incorporam substituintes R4 ou R4', exceto H, eles também podem ser preparados pela substituição de um intermediário de aminoácido adequado que incorpora um grupo de saída com uma amina desejada. Por exemplo, Br-CH(R3)-C(O)-OH é substituído por uma amina R4-NH2 ou R4-NH-R4' de acordo com o esquema 6.

Esquema 6

r4' r

DMF

or'

r4' I THF1H2O /

R3 R4

OH

Alternativamente, a reação de substituição que introduz substituintes R4 ou R4' pode ser realizada como uma etapa final na preparação do composto, conforme ilustrado no esquema 7.

Esquema 7

:nh +

RÍ

Em uma realização específica, as aminas a seguir são usadas nos esquemas 6 e 7:

' ""NH2

.NH2

>

"X_/

NH2

.NH2

NH2 .NH5

HO

H3CO'

OCH1

OCHa

NH5

HO-NH2

Compostos da invenção em que tanto Xi como X2 são enxofre, isto é, o composto incorpora uma tioamida, podem ser preparados de acordo com técnicas de química orgânica estabelecidas. Por exemplo, compostos em que X2 é enxofre podem ser preparados de acordo com o esquema 8, iniciando-se a partir de umanálogo de resíduo de aminoácido NH2-CH(R2)- COOH protegido por Fmoc que é dissolvido em THF e resfriado a -25°C, com a adição de DIPEA, seguido pela adição de isobutilcloroformato. Após 10 minutos, a diamina, 4-nitrobenzeno-1,2-diamina, é adicionada e a mistura de reação é continuamente agitada a -25°C por 2 horas, então em temperatura ambiente durante a noite. THF é submetido a vácuo e a mistura é então submetida à cromatografia rápida usando-se 50% EtOAc/Hexano para gerar o produto. O derivado Fmoc-alanina, fósforo pentasulfeto e carbonato de sódio são misturados e o THF é agitado durante a noite. A solução é concentrada e submetida à cromatografia usando-se EtOAc/Hexano a 80%, que produz a tioalanina ativada. A tioalanina ativada e o nitrito de sódio são então misturados em ácido acético e diluídos com H2O. O precipitado resultante é filtrado e seco para gerar o produto. A tioalanina é acoplada a um análogo de resíduo de aminoácido prolina no anel A pela dissolução de ambos em DMF. O produto tioamida pode ser então desprotegido com PIP/DMA a 20% por 15 minutos e usado para conjugar o R4ZRV-N-C(R3)(Rs)-COOH. Alternativamente a tioamida protegida por Fmoc é inicialmente acoplada ao análogo de resíduo de aminoácido prolina substituído no anel seguido pela desproteção de Fmoc e subsequente acoplamento análogo de resíduo de aminoácido R4ZRV-RVRV-N- C(R3)(Rs1)-COOH.

Esquema 8

Indicações

Os compostos da invenção inibem a ligação das proteínas IAP às caspases, em específico a interação da ligação X-IAP com as caspases 3 e 7. Os compostos também inibem a ligação de ML-IAP à proteína Smac. Consequentemente, os compostos da invenção são úteis para induzir apoptose nas células ou sensibilizar as células para os sinais apoptóticos, em específico, células cancerosas. Os compostos da invenção são úteis para induzir apoptose nas células que superexpressam proteínas IAP. Alternativamente, os compostos da invenção são úteis para induzir apoptose nas células nas quais a via apoptótica mitocondrial é interrompida de modo a inibir a liberação de Smac a partir das proteínas ML-IAP1 por exemplo, pela supraregulação ou infraregulação de Bax/Bak. De um modo geral, os compostos podem ser usados para o tratamento de topos os tipos de cânceres que não sofrem apoptose. Exemplos de tais tipos de câncer incluem neuroblastoma, carcinoma intestinal como carcinoma do reto, carcinoma do cólon, carcinoma de polipose adenomatosa e câncer colorretal hereditário não-polipose, carcinoma esofágico, Iabial carcinoma, carcinoma da laringe, carcinoma da hipofaringe, carcinoma da língua, carcinoma de glândula salivar, carcinoma gástrico, adenocarcinoma, carcinoma medular da tireóide, carcinoma papilar da tireóide, carcinoma renal, carcinoma do parênquima renal, carcinoma ovariano, carcinoma cervical, corpo uterino, carcinoma do endométrio, carcinoma do córeo, carcinoma pancreático, carcinoma de próstata, carcinoma do testículo, carcinoma de pulmão, carcinoma urinário, melanoma, tumores no cérebro como glioblastoma, astrocitoma, meningioma, meduloblastoma e tumores neuroectodermais periféricos, Iinfoma de Hodgkin, Iinfoma não-Hodgkin, Iinfoma de Burkitt, leucemia linfática aguda (ALL), leucemia linfática crônica (CLL), leucemia mielóide aguda (AML), leucemia mileóide crônica (CML), Iinfoma de leucemia de célula T adulta, carcinoma hepatocelular, carcinoma de vesícula biliar, carcinoma dos brônquios, carcinoma de pulmão de células pequenas, carcinoma de pulmão de células não-pequenas, mieloma múltiplo, basalioma, teratoma, retinoblastoma, melanoma de coróide, seminoma, rabdomiosarcoma, craniofaringeoma, osteosarcoma, condrosarcoma, miosarcoma, liposarcoma, fibrosarcoma, sarcoma de Ewing e plasmocitoma.

Os compostos da invenção são úteis para sensibilizar as células para os sinais apoptóticos. Consequentemente, os compostos podem ser administrados antes, concomitantemente ou após a administração da radioterapia ou quimioterapia citostática ou antineoplásica. Compostos quimioterapêuticos citostáticos adequados incluem, mas não se limitam a, (i) antimetabólitos, como citarabina, fludarabina, 5-fluoro-2-desoxiuiridina, gencitabina, hidroxiuréia ou metotrexato; (ii) agentes fragmentadores de DNA1 - como bleomicina, (iii) agentes reticulantes de DNA1 como clorambucila, cisplatina, ciclofosfamida ou mostarda de nitrogênio; (iv) agentes intercalantes como adriamicina (doxorrubicina) ou mitoxantrona; (v) inibidores de síntese protéica, como L-asparaginase, cicloheximida, puromicina ou toxina da difteria; (vi) toxinas da topoisomerase I, como camptotecina ou topotecan; (vii) toxinas da opoisomerase, como etoposido(VP-16) ou teniposido; (viii) agentes dirigidos ao microtúbulo como colcemida, colchicina, paclitaxel, vinblastina ou vincristina; (ix) quinase como flavopiridol, estaurosporina, ST1571 (CPG 57148B) ou UCN-01 (7-hidroxiestaurosporina); (x) diversos agentes investigaticos como taioplatin, PS-341, fenilbutirato, ET-18- OCH3, ou inibidores de farnesil transferase (L-739749, L-744832); polifenóis como quercetina, resveratrol, piceatanol, gaiato de epigalocatequina, theaflavinas, flavonóides, procianidinas, ácido betulínico e derivados destes, (xi) hormônios como glicocorticóides ou fenretinida; (xii) antagonistas de hormônios, como tamoxifeno, finasterida ou anatagonistas de LHRH. Em uma realização específica, os compostos da presente invenção são coadministrados com um composto citostático selecionado a partir do grupo que consiste em cisplatina, doxorubicina, taxol, taxotere e mitomicina C. Em uma realização específica, o composto citostático é doxorubicina.

Outra classe de compostos ativos que podem ser usados na presente invenção são aqueles capazes de sintetizar ou induzir apoptose pela ligação aos receptores de morte ("agonistas dos receptores de morte"). Tais agonistas dos receptores de morte incluem os Iigantes dos receptores de morte como fator α de necrose tumoral (TNF-α), fator β de necrose tumoral (TNF-β, linfotoxina-a), LT-β (linfotoxina-β), TRAIL (Apo2L, Iigante DR4), Iigante CD95 (Fas, APO-1), Iigante TRAMP (DR3, Apo-3), Iigante DR6, bem como fragmentos e derivados de qualquer um dos ditos ligantes. Em uma realização, o Iigante do receptor de morte é TNF-α. Em uma realização específica, o Iigante do receptor de morte é Apo2L/TRAIL. Além disso, os agonistas dos receptores de morte compreendem anticorpos agonísticos para os receptores de morte como anticorpo anti-CD95, anticorpo anti-TRAIL-RI (DR4), anticorpo anti-TRAIL-R2 (DR5), anticorpo anti-TRAIL-R3, anticorpo anti-TRAIL-R4, anticorpo anti-DR6, anticorpo anti-TNF-R1 e anticorpo anti-TRAMP (DR3), bem como fragmentos e derivados de qualquer um de tais anticorpos.

Para os propósitos de sensibilização de células para apoptose, os compostos da presente invenção também podem ser usados com radioterapia. A frase "radioterapia" refere-se ao uso de radiação eletromagnética ou radiação particulada no tratamento de neoplasia. A radioterapia é baseada no princípio de que altas doses de radiação entregues na área alvo resultarão na morte de células reprodutivas, tanto tumorais como nos tecidos normais. O regime de dosagem de radiação geralmente é definido em termos de dose de radiação absorvida (rad), tempo e fracionamento, e deve ser cuidadosamente definido pelo oncologista. A quantidade de radiação que um paciente recebe dependerá de várias considerações, mas as duas considerações mais importantes são a localização do tumor em relação a outras estruturas ou órgãos importantes, e a extensão na qual o tumor se espalhou. Exemplos de agentes radioterápicos são fornecidos, mas não limitados è terapias de radiações conhecidas na técnica (Hellman, Principies of Radiation Therapy, Câncer, in Principies I and Practice of Oncology, 24875 (Devita et ai, 4a ed., vol 1, 1993). Recentes avanços na térapia de radiação incluem emissão de radiação externa conformai tridimensional, terapia de radiação com intensidade modulada (IMRT), radiocirurgia ou braquiterapia esterostática (terapia de radiação intersticial), nesta última a fonte de radiação é colocada diretamente no tumor conforme "sementes" implantadas. Estas novas modalidades de tratamento emitem altas doses de radiação no tumor, o que aumenta sua efetividade em comparação às terapias padrão de emissão de radiação externa.

A radiação ioniozante com radionucleotídeos com emissão beta é considerada a mais útil das aplicações de radioterapia devido à transferência moderada de energia linear (LET) da partícula ionizante (elétron) e seu alcance intermediário (tipicamente diversos milímetros no tecido). Raios gama entregam dosagem em níveis mais baixos e para distâncias muito maiores. As partículas alfa representam o outro extremo, elas entregam doses muito altas de LET, mas têm alcance extremamente limitado, portanto, estão em íntimo contato com as células dos tecidos a serem tratados. Além disso, emissores alfa geralmente são metais pesados, que limitam a possibilidade química e apresentam perigo devido ao escoamento de radionucleotídeo da área a ser tratada. Dependendo do tumor a ser tratado, todos os tipos de emissores são concebíveis dentro do escopo da presente invenção. Além disso, a presente invenção engloba tipos de radiação não-

ionizantes como radiação ultravioleta (UV), luz visível com alta energia, radiação de micro-ondas (terapia de hipertermia), radiação infra-vermelho (IR) e lasers. Em uma realização específica da presente invenção é aplicada radiação UV.

A invenção também inclui composições farmacêuticas ou

medicamentos contendo os compostos da invenção e um carreador, diluente ou excipiente terapeuticamente inerte, bem como métodos de uso dos compostos da invenção para preparar tais composições e medicamentos. Tipicamente, os compostos de fórmula I usados nos métodos da invenção são formulados pela mistura em temperatura ambiente, pH apropriado e grau desejado de pureza, com carreadores farmaceuticamente aceitáveis, isto é, carreadores não-tóxicos para os receptores nas dosagens e concentrações empregadas na forma de administração galênica. O pH da formulação depende principalmente do uso específico e da concentração do composto, mas pode variar de cerca de 3 a cerca de 8. A formulação em um tampão acetato a pH 5 é uma realização adequada. Em uma realização, o composto inibitório para uso no presente pedido é estéril. O composto comumente será armazenado como uma composição sólida, embora formulações Iiofilizadas ou soluções aquosas sejam aceitáveis.

A composição da invenção será formulada, dosada e administrada em um modo consistente com as boas práticas médicas. Fatores para consideração neste contexto incluem a disfunção específica em tratamento, o mamífero específico em tratamento, a condição clínica individual do paciente, a causa da disfunção, o local de entrega do agente, o método de administração, o período de administração e outros fatores conhecidos pelo médico. A "quantidade terapeuticamente efetiva" do composto a ser administrado será dirigida por tais considerações, e será a mínima quantidade necessária para inibir a interação de IAP com caspases, indüzir apoptose ou sensibilizar uma célula maligna para um sinal apoptótico. Tal quantidade pode estar abaixo da quantidade tóxica para as células normais, ou do mamífero como um todo.

Geralmente, a quantidade terapeuticamente efetiva inicial do composto da invenção administrada de forma parenteral, por dose, estará situada na faixa de 0,01 a 100 mg/kg, por exemplo, cerca de 0,1 a 20 mg/kg do peso corporal do paciente por dia, com a faixa típica inicial do composto usado sendo de 0,3 a 15 mg/kg/dia. Formas de dosagem unitárias, como comprimidos e cápsulas, podem conter de cerca de 25 a cerca de 1000 mg do composto da invenção.

O composto da invenção pode ser administrado por qualquer meio adequado, incluindo oral, tópico, transdermal, parenteral, subcutâneo, intraperitonial, intrapulmonar e intranasal, e se desejado, por tratamento local e administração intralesional. Infusões parenterais incluem administração intramuscular, intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal ou subcutânea. Um exemplo de uma forma de dosagem oral adequada é um tablete contendo de cerca de 25 mg, 50 mg, 100 mg, 250 mg ou 500mg do composto da invenção junto com cerca de 90-30 mg Iactose anidra, cerca de 5 a 40 mg de croscarmelose de sódio, cerca de 5 a 30mg de polivinilpirrolidona (PVP) K30, e cerca de 1 a 10 mg de estearato de magnésio. Os ingredientes em pó são os primeiros a serem misturados e depois misturados com uma solução do PVP. A composição resultante pode ser seca, granulada, misturada com estearato de magnésio e comprimida para a forma de tablete, usando-se equipamento convencional. Uma formulação de aerossol pode ser preparada pela dissolução do composto, por exemplo, 5 a 400 mg, da invenção em uma solução tampão adequada, por exemplo, um tampão fosfato, adição de um tonificante, por exemplo, sal como cloreto de sódio, se desejado. A solução é tipicamente filtrada, por exemplo, usando-se um filtro com 0,2 mícron para remover impurezas e contaminantes.

Exemplos

A invenção será mais bem compreendida através da consülta dos

exemplos a seguir. Entretanto, eles não devem ser considerados como Iimitantes do escopo da invenção. Òs reagentes e os solventes foram obtidos de fontes comerciais e foram usados como recebidos. A menos que descrito de outro modo, as purificações cromatográficas foram realizadas usando-se colunas de sílica gel pré-embaladas em um sistema de CombiFIash Companion pela Teledyne-lsco, Inc. Lincoln, Nebraska. A identidade e a pureza dos compostos foram verificadas pela

análise por LCMS e Ή NWR.

As abreviações usadas no presente pedido são as seguintes:

AcOH: ácido acético ACN: acetonitrila;

Chg: ciclohexilglicina; DCM: diclorometano; DIPEA: diisopropiletilamina; DMAP: 4-dimetilaminopiridina; DME: 1,2-dimetoxietano; DMF: dimetilformamida; DMSO: dimetilsulfoxida;

EDC: 1-etil-3-(3 dimetiláminopropil)carbodiimida; EEDQ: 2-etoxi-1 -etoxicarbonil-1,2-diidroquinolina; EtOAc: acetato de etila; EtOH: etanol;

LCMS: cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa;

HATU: 0-(7-azobenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilurônio hexafluorofosfato;

HOBt: N-hidroxibenzotriazol;

HBTU: 2-(1 H-bénzotriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametil-urônio hexafluorofosfato;

HPLC: cromatografia líquida de alto desempenho;

MeOH: metanol;

NBS: N-bromosuccinamida;

TASF: tris(dimetilamino)sulfônico difluorotrimetilsilicato;

TEA: trietilamina;

TFA: ácido trifluoroacético;

THF: tetrahidrofurano;

ÁCIDO 2-rterc-butoxicarbonil-(1 H-pirr0l-2-ilmetil)-amin01-pr0piônic0

Exemplo 1

di-tert-buty ldicarbonate

THF, H2O, NaHCO-

DMF

a

b

c

Boc

Boc Éster etílico de alanina b (5 g; 32,5 mmol), pirrol-2-carboxaldeído a (3,1 g; 32,5 mmol), cianoboroidreto de sódio (2,04 g; 32,5 mmol) e AcOH (1%) foram misturados em DMF e agitados durante a noite. A reação foi interrompida com H2O e o DMF foi evaporado. A mistura foi diluída com EtOAc e lavada com NaOH 0,1 N, seca e concentrada para produzir 2,5 g do produto ç. O éster ç resultante (2,5 g; 12,8 mmol), di-terc-butildicarbonato (3,06 g; 14 mmol) foram misturados em THF, H2O com NaHCO3 e agitado durante a noite. O THF foi evaporado e a mistura foi diluída com EtOAc, lavada com NaOH 1N, NH4CI saturado e salmoura. Depois de seca, a mistura foi concentrada para produzir o 3,3 g do éster d protegido por Boc. O éster d protegido por Boc (1,67 g; 5,6 mol), hidróxido de lítio mono-hidrato (284 mg; 6,77 mmol) foram misturados em THF e H2O a 0°C. O THF foi mantido em vácuo e a solução foi acidificada pela diluição de H2S04, extraído por EtOAc duas vezes. As fases orgânicas foram combinadas, secas e evaporadas resultando no produto e, ácido 2-[terc-butoxicarbonil-(1H-pirrol-2-ilmetil)-amino]-propiônico.

Exemplo 2 Tetraidropiranilglicina

O

A tetraidropiranilglicina foi adquirida junto à NovaBiochem ou sintetizada de acordo com a literatura: Ghosh, A. K.; Thompson, W. J.; Holloway, M. K.; McKee1 S. P.; Duong, T. T.; Lee, H. Y.; Munson, P. M.; Smith, A. M.; Wai, J. M; Darke, P. L.; Zugay, J. A.; Emini, Ε. A.; Schleife, W. A.; Huff, J. R.; Anderson, P. S. J. Med. Chem, 1993, 36,2300-2310. Exemplo 3 Piperidinilglicina

H2N

õ

A piperidinilglicina foi sintetizada de acordo com os procedimentos descritos por Shieh et al. (Tetrahedron: Asymmetry, 2001,12, 2421-2425).

Exemplo 4

4.4-difluorociclohexilglicina

fv j

.OH Õ

A 4,4-difluorociclohexilglicina foi fabricada de acordo com os procedimentos descritos no pedido de patente US 20030216325.

Exemplo 5

Ácido (S)-2-amino-2-í4-hidroxiciclohexil)acético Boc

CbzHNx^CO2Me ^ \Q

+ oii^OMe OMe

CbzHN CO2Me c

O procedimento a seguir, descrito por Sheih et al. (Tetrahedron: Asymmetry, 2001, 12, 2421-2425), uma solução de cetona a (8,4 g) e EtOAc (30 ml) foram adicionados a uma solução de éster metílico N-Cbz- fosfonoglicina b, TMG (4,5 ml) e EtOAc (30 ml). A solução foi mantida em temperatura ambiente por 48 h, então, lavada com HCI 1N (3x50 ml), salmoura (1x50 ml), seca (Na2SO4), filtrada e concentrada. O resíduo foi adsorvido em Qelite e purificado por cromatografia, então outra vez purificado por recristalização a partir de EtOAc/hexanos para produzir 5,2 g de produto ç.

CbzHN CO2Me CbzHN CO2Me

c à

A seguir, o procedimento descrito por Sheih, (Tetrahedron:

Asymmetry, 2001, 12, 2421-2425), uma solução de eneamida ç (5,0 g), (SS)- Me-BPE-Rh(I) (1,5 g, Strem Chemicals, Newburyport, MA) e MeOH (100 ml) foi agitado vigorosamente sob 70 psi de H2 durante 48 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído em EtOAc e filtrado através de SiO2 com mais EtOAc. O solvente foi removido sob pressão reduzida para produzir 4,0 g de produto d como um sólido incolor.

0ί:>ζΗΝ''Χ02Μθ BocHN CO2Me

■ d ê

Uma mistura de Cbz-carbamato d, (4,0 g) Boc2O, (2,9 g), 20% de

Pd(OH)2 C (1,0g) e MeOH (30 ml) foi mantida sob uma atmosfera de H2 por 6 h.

A mistura foi filtrada através de Celite com MeOH. O solvente foi removido sob

pressão reduzida para proporcionar 4,5 g de resíduo e, o qual foi removido

diretamente.

o

BocHN^CO2Me BodHN CO2Me

e f

O resíduo e, descrito acima, foi dissolvido em H2O (10 ml), AcOH (30 ml), THF (5 ml) e ácido dicloroacético (3 ml) e mantido em temperatura ambiente durante a noite. Água (5 ml) foi adicionada e a solução foi mantida até que a hidrólise fosse concluída, monitorada por HPLC-MS. Na2C03 sólido foi adicionado com cuidado até que a eliminação de gás cessasse, a mistura foi diluída com NaHCO3 aq e extraído com EtOAc/DMC a 10%. As fases orgânicas combinadas foram lavadas uma vez com salmoura, secas (Na2SO4), filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia para produzir 2,9 g do produto f.

OH QH

Hj H/J

BoeHN^CO2Me BoeHN^CO2Me BocHN "CO2Me

f g h A mistura de cetona f (1,5 g), MeOH (50 ml) foi tratada com

NaBH4 (290 mg) a 0 0C durante 20 min. A mistura foi acidificada por aproximadamente pH=1 com ácido cítrico aq a 10% e o MeOH foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com água e extraído com EtOAc/DCM a 20%. As fases orgânicas combinadas foram lavadas uma vez com salmoura, secas (Na2SO4), filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia para produzir 1,17 g do produto g e 0,23 g do produto h.

OH OH

Hj H^

BoeHN^CO2Me BocHN "CO2H

g i

Uma mistura de éster g (1,17 g), LiOH H2O (160 mg), THF (3 ml) e água (4,5 ml) foi agitada vigorosamente durante a noite. A mistura foi diluída com salmoura e extraída exaustivamente com EtOAc. As fases orgânicas combinadas foram lavadas uma vez com salmoura, secas (Na2SO4)1 filtradas e concentradas para produzir o ácido i (525 mg).

Exemplo 6 N-Boc-N-ciclopropilmetil-L-alanina

9 O NaCNBH<

+ . THF/l%AcOH 0^

Y ° Γ7 H MeOH τ N

O

íV

di-t-Boc dicarbonate LiOH1H2O ^-y^^H

NaHCOi

OH

THFjH2O V I O lHf'HjU Boc

THF1H2O I O

Boc

d e

Cloreto de éster metílico L-alanina a (5 g; 35,8 mmol) e ciclopropano carboxaldeído b (2,67 ml; 35,8 mmol) foram suspensos em 50 ml de THF w/1% de AcOH. A adição de 5 ml de CH3OH fez a solução turva se tornar clara. NaCNBH4 (2,25 g; 35,8 mmol) foi adicionado e a mistura da reação agitada durante a noite. A reação foi interrompida pela adição de NaOH 1N aq., extraído por EtOAc duas vezes, as camadas orgânicas foram secas em Na2SO4 e concentradas por secagem. O material bruto foi purificado por cromatografia usando-se EtOAc/hexano a 30% (corado por niidrina) para obter o composto ç (1 g; 18%). O composto ç (1 g; 6,37 mmol) e di-t-bocdicarbonato (2,1 g; 9,55 mmol) foram diluídos em THF (20 ml) e H2O (20 ml), NaHCO3 (1,3 g; 15,9 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada durante a noite para a conclusão. O THF foi removido sob pressão reduzida e a camada aquosa foi extraída por EtOAc 3 vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas por NaOH 1N, sat, NH4CI seguida por salmoura e concentradas por secagem. O composto d protegido por Boc (1,39 g; 5,40 mmol) foi agitado com LiOH-H2O (1,14 g; 27 mmol) em THF (20 ml) e H2O (20 ml) durante a noite em temperatura ambiente. O THF foi extraído e a camada aquosa foi ajustada para pH=4 pela adição de ácido cítrico a 10%, então, extraído por EtOAc por 3 vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas por salmoura e . concentradas. O produto bruto foi purificado por coluna C-18 de fase reversa diluída por acetonitrila/H20 de 0% a 50% para resultar no composto puro e como um sólido branco (794 mg).

Exemplo 7

N-Boc-N-metil-L-alanina-L-ciclohexilglicina

Uma solução de Fmoc-L-ciclohexilglicina (3,6 g; 9,6 mmol) dissolvida em DCM (50 mL) e DIPEA (5,6 ml; 32 mmol) foi adicionada à resina de cloreto de 2-clorotritil (5 g; 8 mmol) e agitada gentilmente por 3 horas em temperatura ambiente. A resina foi adicionada com DCM 4 vezes, DCM/MeOH/DIPEA (17:2:1) 3 vezes, DCM 3 vezes e 2 vezes com dimetilacetamida (DMA). O grupo Fmoc foi removido pelo tratamento da resina com piperina/DMA a 20% (50 ml) durante 15 minutos. A resina foi lavada com DMA 6 vezes. Uma solução de Boc-N-metilalanina (3,3 g; 16 mmol), HBTU (6,1 g; 16 mmol) e DIPEA (5,6 mL; 32 mmol) e DMA/DCM (1:1; 50 ml) foi adicionado à resina e agitada gentilmente durante 2 horas em temperatura ambiente. A resina foi lavada com DMA 5 vezes, DCM 2 vezes e seca sob pressão reduzida. O dipeptídio foi clivado da resina pela leve agitação com HOAc/TFE/DCM (1:1:3; 100 ml) durante 2 horas em temperatura ambiente. A resina foi removida por filtração e a solução foi concentrada. O AcOH residual foi removido pela reação azeotrópica com hexanos (15 vezes o volume). O resíduo sólido foi purificado por HPLC de fase reversa (C18, MeCN-H2O1 TFA a 0,1%) e os solventes foram resolvidos pela liofilização para fornecer 1,2 g (43%) de N-Boc-N-metil-L-alanina-L-ciclohexilglicina dipeptídio como um pó branco.

Exemplo 8

N-Boc-N-metil-L-alanina-L-desidropiranilglicina .O.

o l j r°-

—O-^N CO2Me JL

(C^ H H2N CO2Me

o S

Uma mistura de éster metílico N-Cbz-desidropiranilglicina a (Burk, M. J.; Gross1 M. F.; Martinez, J. P. J. Am Chem. Soe. 1995, 117, 9375 e as referências neste) (5,2 g; 17 mmol), 5% de Pd C(500 mg), MeOH (75 ml) e THF (25 ml) foi mantida sob uma atmosfere de H2 durante 24 h. A mistura foi filtrada através de Celite e o Celite foi lavado com MeOH e concentrado sob pressão reduzida para fornecer uma produção quantitativa de amina b como um óleo colorido, que foi mantido diretamente.

__ O

H2N^CO2Me ^^-O^N" ^CO2Me

b e A amina b preparada acima foi combinada com CH2CI2 (40 ml), NaHCO3 aquoso saturado (40 ml) e resfriada a O °C. Cloreto de caronil benziloxi (3,0 ml) foi, então, adicionado por gotejamento e a mistura agitada vigorosamente durante a noite. As fases foram separadas e a fase aquosa extraídos com CH2CI2 (3 χ 20 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 χ 50 ml), secas (Na2SO4), filtradas, adsorvidas em Celite e cromatografadas (ISCO, 120 g; coluna de sílica, diluição em gradiente de 5 a 55% de EtOAc-hexanos) para proporcionar 4,15 g (80%) de éster metílico Cbz-piranilglicina racêmico. Os enantiômeros foram separados em uma coluna Chiracel OD diluindo com EtOH-hexanos de 10%. O S- enantiômero ç desejado dilui primeiro sob essas condições.

η

CO2Me ^ ^ „

2 H2N CO2Me

d

Uma mistura de éster metílico glicina (S)-N-Cbz-piranil ç (2,4 g; 7,82 mmol) 10 % de Pd-C (700 mg), MeOH (80 ml) foi mantida sob uma atmosfera de H2 durante 24 h. A mistura foi filtrada através de Celite com MEOH e concentrada sob a pressão reduzida para proporcionar 1,35 g (100%) de amina d como um óleo incolor. Alternativamente, a glicina piranil pode ser sintetizada em fórmula enantiopure seguindo o procedimento de Ghosh (Ghosh, A. K.; Thompson, W. J.; Holloway, M. K.; McKee, S. P.; Duong1 T. T.; Lee, H. Y.; Munson, P. M.; Smith, A. M.; Wai, J. M.; Darke, P. L.; Zugay, J. A.; Imini, Ε. A.; Schleif, W. A.; Huff, J. R.; Anderson, P. S. J. Med. Chem., 1993,

36, 2300). .CX

I 0

+ bocnYaOH H2N' "OO2Me ' "

d §

CO2Me

Uma mistura de amina d (1,35 g; 7,8 mmol), alanina N-Boc-N- metílico e (1,74 g; 8,6 mmol), EDC (1,65 g; 8,8 mmol) e MeCN (50 ml) foi mantida em temperatura ambiente durante a noite. A MeCN foi removida sob pressão reduzida e o resíduo diluído com EtOAc, lavado com HCI 0,5 N (3 χ 10 ml), NaOH 0,5 N (3 χ 10 ml), seco (MgSO4), filtrado e concentrado para fornecer 2,1 g (755) de deptídeo f protegido, como um óleo claro. η Ο.

I °

BocN Ν CO2Me

I ° I

BocN^^-N-^cOgH

ί 3 Para uma solução a O 0C do éster f (2,10 g; 5,86 mmol) e THF (50

ml) foram adicionados LiOH-H2O (1,23 g; 29,3 mmol) e água (2 ml). A mistura foi mantida a 0 0C por 2 h, então, o banho de gelo foi removido e a mistura foi agitada durante"a noite. A maior parte do THF foi, então, removida sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com CH2CI2, lavado com HCI 0,5 N, seco (MgSO4), filtrado e concentrado para fornecer 1,53 g (78%) de N-Boc-N-metil- L-alanina-L-deidropiramlglicina dipeptídio g, como um sólido incolor.

procedimento geral de Shieh [Shieh, W-C.; Xue, S.; Reel, N.; Wu, R.; Fitt, J.; Repic, O. Tetrahedron: Asymmetry, 2001, 12, 2421-2425], foi dissolvido em metanol (25 ml). Oxônio (4,5 g) foi dissolvido em água deionizada (25 ml). A solução de metanol do substrato foi resfriada a -10 0C e a solução aquosa de oxônio foi adicionada à reação vagarosamente. A reação foi mantida em gelo e gradualmente aquecida em temperatura ambiente enquanto agitada durante a noite. A água deionizada foi usada para diluir a reação para, aproximadamente, 150 ml, então, vertida em acetato de etil-hexanos a 90% para extração. A fase

Exemplo 9

Aminoácido sulfonil cíclico protegido por N-Boc

O sulfito a (810 mg; 2,5 mmol), sintetizado de acordo com o orgânica foi seca (Na2SO4)1 adsorvida em Celite e purificada por cromatografia ISCO CombiFIash 40 g de coluna, de 5 a 90% de acetato de etil - hexanes por min para produzir 804 mg (2,27 mmol; 91%) do produto sulfona b.

,o

U N

O

b £ O procedimento geral de Burk [Burk, M. J.; Gross, M. F.; Martinez,

J. P. J. Am. Chem. Soe. 1995, 117, 9375-9376.], alceno b (774 mg; 2,9 mmol), metanol seco (40 ml) e [(S,S)-Me-BPE-Rh(COD)]+OTf (500 mg; 0, mmol) foram misturados em frascos de agitador de Parr injetado com nitrogênio. Os frascos de Parr foram esvaziados, posteriormente carregados com 60 psi com gás hidrogênio e vigorosamente agitados durante a noite. O metanol foi removido sob pressão reduzida e o produto bruto foi filtrado através de um pequeno plugue de sílica gel usando-se acetato de etila. A evaporação do solvente produziu 730 mg (2,0 mmol; 94%) do produto ç com >98% de produto.

XX

O-------

Ul

O

d

Éster c amino protegido com Z (804 mg; 2,27 mmol) foi dissolvido

em metanol (16 ml). A esta solução foi adicionado BOC-anidrido (1,5 g; 6,8 mmol), seguido por Pd(OH)2-C a 20% (250 mg). Todo o ar foi removido do frasco de reação por vácuo e a mistura foi agitada vigorosamente por 5 min. O frasco foi, então, preenchido com gás nitrogênio e agitado vigorosamente em temperatura ambiente "por 6 h. Depois do esvaziamento da atmosfera de hidrogênio, a mistura foi filtrada através de Celite usando-se metanol e o produto bruto d foi obtido por evaporação do solvente (508 mg; 1,56 mmol; 70% do produto).

,o„

O

d Ê O éster d (508 mg; 1,56 mmol) foi dissolvido em 8 ml de THF. Água deionizada (4 ml) foi adicionada, seguida por LiOH-H2O (120 mg; 2,8 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, acidificada usando-se HCI 1 N aquoso e extraído em acetato de etila (3 χ 25 ml). Os extratos orgânicos foram secos com Na2SO4, filtrados e concentrados para resultar em 372 mg (1,21 mmol; 78% de produto) de aminoácido sulfonil cíclico protegido com N-Boc e, o qual foi mantido sem purificação.

Exemplo 10 N-Boc-N-metil-L-glicina

H ? I 9

ΥΥ'Λ»! -- N^0Yn--aOH

/-Λ o O

b

Seguindo o procedimento geral de Grigg [Blaney, P.; Grigg, R.; Rankovic, Z.; Thornton-Pelt, M.; Xu, J. Tetrahedron1 2002, 58, 1719-1737] um balão volumétrico de fundo redondo foi completado com hidreto de sódio (480 mg com 60% de dispersão em óleo, 12,0 mmol; 4,0 equivalente) e injetado com nitrogênio por 15 min. THF (6,0 ml) foi adicionado ao balão e a suspensão foi resfriada a O0C usando-se um banho de gelo. Um balão separado foi preenchido com BOC-glicina a (525 mg; 3,0 mmol), seco THF (6,0 ml) e iodeto de etila (1,0 ml; 12 mmol; 4 equivalente). Essa mistura foi adicionada por gotejamento à suspensão de NaH em THF, com agitação vigorosa a 0°C. Depois de 1 h, a reação foi aquecida em temperatura ambiente e agitada durante a noite. A reação foi novamente resfriada a 0°C e o metanol (4 ml) foi adicionado muito vagarosamenre para evitar o excesso de hidreto. Água deionizada foi adicionada para diluir a mistura e metanol foi removido sob pressão reduzida. As impurezas foram extraídas em acetato de etila - hexanos a 90%, a camada aquosa foi, então, acidificada pela adição de ácido cítrico sólido até que o pH de 2 a 3 fosse alcançado. O produto foi extraído em acetato de etila - hexanos a 90%. Essa camada orgânica foi seca (Na2SO4) e filtrada. A remoção dos solventes sob pressão reduzida proporcionou uma produção quantitativa do produto b. Exemplo 11

N-Boc-fluoro-L-alanina

o

+ X0X0X0X —- boc X^oh

a b Ç

Uma mistura de aminoácido não protegida a (775 mg; 7,24 mmol) e carbonato de sódio (1,69 g; 16,0 mmol) foi dissolvida em uma solução de 1:1 de água deionizada e THF (15 ml cada) A esta mistura foi adicionado anidrido de BOC b (1,73 g; 7,96 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite e o THF foi removido sob pressão reduzida. A mistura foi, então, acidificada a um pH entre 2 a 3 com ácido cítrico aquoso saturado e o produto foi extraído em acetato de etila-diclorometano a 10%. A camada orgânica foi seca (Na2SO4)1 filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir o aminoácido ç limpo protegido por BOC (1,40 g; 6,7 mmol; 93%) a ser utilizado sem purificação adicional.

Exemplo 12 Composto I

Em um balão volumétrico de fundo redondo de 100 ml, o composto a (1,62 g; 4,97 mmol) e 2-amino-5-bromopiridina b (1,0 g; 6,00 mmol) foram misturados em etanol (50 ml) e agitados a 80°C durante 48 h. A mistura foi, então, resfriada e concentrada. O resíduo foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (de DCM a 100% a Metanol/DCM a 10%) para proporcionar 881 mg (35,45) do composto ç como um óleo alaranjado. LCMS: M/Z = 401.

Em um balão volumétrico de fundo redondo de 25 ml, o composto ç (150 mg; 0,37 mmol), ácido fenilborônico (68 mg; 0,56 mmol), tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (30 mg; 0,03 mmol) e carbonato de potássio (78 mg; 0,56 mmol) foram misturados em DMF (2,0 ml). A mistura foi agitada a 100°C sob atmosfera de nitrogênio durante 18 h. A mistura foi, então, resfriada, diluída com acetato de etila (30 ml) e lavada com água (50 ml). A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (30 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO3 aquoso saturado (50 ml) e com salmoura (50 ml), secas com MgS04; filtradas e concentradas. O resíduo foi adsorvido em sílica gel e 10

15

purificado por cromatografia rápida (de acetato de etila/hexano a 30% a acetato de etila a 100%) para proporcionar 126 mg (84%) do composto d como um óleo amarelo claro. LCMS: M/Z = 398.

HN-/

COQ

H2, 10%Pd/C EtOH

Em um balão volumétrico de fundo redondo de 50 ml, o composto d (120 mg; 0,30 mmol) foi dissolvido em etanol (10 ml) e paládio a 10% em carbono (24 mg) foi adicionado. A mistura foi agitada em temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogênio durante 48 h. A mistura foi, então, filtrada em celite e lavada com etanol. O filtrado foi concentrado para fornecer 78 mg (98%) do composto e como um óleo amarelo claro. LCMS: M/Z = 264.

ι 0

BoCn-TaN

Em um balão volumétrico de fundo redondo de 10 ml, o composto e (78 mg; 0,30 mmol), o composto f (120 mg; 0,36 10 mmol), N,N- diisopropilcarbodiimida (0,074 ml; 0,47 mmol) e 1-hidroxi-7-azabenzotriazol (64 mg; 0,47 mmol) foram misturados em diclorometano (2,0 ml). A mistura foi agitada em temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogênio durante 5 h. A mistura foi, então, concentrada em sílica gel e purificada por cromatografia rápida (de DCM a 100% a MeOH/DCM a 7%) para produzir 182 mg (50%) do composto g como um óleo amarelo claro. LCMS: M/Z = 590.

Boc'

N-^A

20

4N HCl/dioxane Em um balão volumétrico de fundo redondo de 25 ml, o composto g (192 mg; 0,33 mmol) foi dissolvido em uma solução de cloreto de hidrogênio a 4 N em dioxano (4 ml; 30 mmol). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 h. A mistura foi, então, concentrada e o resíduo foi purificado por HPLC para produzir 13,3 mg (8,3%) do composto 1 como um sólido branco. LCMS: M/Z = 490.

Exemplo 13

(S)-benzil-2(2-bromoacetiüpirrolidina-1-carboxilato

Alfa bromó cetona foi preparada de acordo com os procedimentos gerais de Bures e Kulhanek (Tetrahedron: Assymetry (2005) 16(7):1347-1354.)

Uma solução de Diazald (4,9991 g; 23,3 mmol), sulfato de sódio (20,14 g) e éter dietílico (15 ml) foi agitada durante 15 min. A mistura resultante foi, então, filtrada e adicionada por gotejamento a uma solução de hidróxido de potássio (5,0050 g) em água (8 ml) e etanol (10 ml) a 65°C em um aparelho de mini Diazald e destilado até que a mistura da reação ficasse amarela clara. A solução de diazometano destilado foi armazenada em precipitados de hidróxido de sódio a 4°C.

Para uma solução de Cbz-Pro-OH (2,9986 g, 12,0 mmol) em tetraidrofurano seco (40 ml) e éter dietílico seco (40 ml) foi adicionada trietilamina (1,7 ml; 12,2 mmol). A solução foi resfriada a -25°C e cloroformato isobutílico (1,6 ml; 12,3 mmol) foi adicionado por gotejamento. A solução resultante foi agitada a -25°C por 30 min antes de ser aquecida a -10°C. A solução de diazometano foi adicionada à mistura de reação. A amostra foi agitada a -10°C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada à metade de seu volume original e lavada uma vez com bicarbonato de sódio saturado (50 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de magnésio e filtrada. O material bruto foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (40 g de SiO2; de 0 a 50% de acetato de etila em hexanos) para resultar em

diazocetona (2,29 g; 8,3 mmol; 69%).

A diazocetona (1,72 g; 6,3 mmol) foi dissolvida em ácido acético (40 ml) e resfriada a 0°C. HBr a 48% (1,1 ml; 9,7 mmol) foi adicionado por gotejamento à solução. A mistura da reação foi aquecida até temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. A amostra foi despejada em gelo e bicarbonato de sódio (5 g) foi adicionado. A solução foi extraída com diclorometano (3 χ 100 ml). Os extratos orgânicos foram lavados com bicarbonato de sódio saturado (3 χ 100 ml). Os extratos de diclorometano foram secos em sulfato de magnésio, filtrados e concentrados para resultar em α-bromocetona (S)-benzil-2-(2-bromoacetil)pirrolidina-1-carboxilato (1,771 g; 5,4 mmol; 86%). O α-bromocetona era instável em temperatura ambiente, bem como a 4°C, quando armazenado puro.

Exemplo 14

(S)-BENZlL 2-(8-FENILIMIDAZOn .2-A1PIRIDIN-2-IL)PIRR0LIDINA-1 -CARBOXILATO

(S)-benzil-2-(2-bromoacetil)pirrolidina-1-carboxilato (1,771 g; 5,4 mmol), 2-amino-3-bromo-piridina (0,9412 g; 5,4 mmol) e etanol (20 ml) foram combinados sob nitrogênio. A mistura de reação 5 foi aquecida até 78°C e agitada durante a noite. A amostra foi concentrada e bicarbonato de sódio saturado (50 ml) foi adicionado. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 χ 50 ml). Os extratos de acetato de etila foram secos em sulfato de magnésio e filtrados. O material bruto foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (40 g de SiO2; de O a 100% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (S)-benzil-2-(8-bromoimidazo[1,2-a]piridin-2- il)pirrolidina-1 -carboxilato (0,869 g; 8,3 mmol; 2,2 mmol; 40%).

carboxilato (0,258 g; 0,644 mmol), ácido fenilcorônico (0,1026 g; 0.8415 mmol) e carbonato de potássio (0,142 g; 1,03 mmol) foram adicionados a um frasco de microondas de 2 a 5 ml com uma barra magnética. O frasco de reação foi esvaziado e injetado com N2 por três vezes. Tetraquis(trifenilfosfina)-paládio(0) (0,0395 g; 0,0342 mmol) foi, então, adicionado e o frasco esvaziado e injetado com N2 por cinco vezès. 3 ml de DMF foi adicionado, então 1 ml de H2O desoxigenada, e o frasco foi submetido a microondas em 130°C durante 40 min. LC/MS não mostrou o material do início remanescente, então a reação foi despejada em 200 ml de H2O e extraída com acetato de etila (3 χ 50 ml) e os extratos combinados foram secos com MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O material bruto foi dissolvido em diclorometano e aplicado a uma coluna de 12 g, a qual tinha sido equilibrada em hexanos. O material foi apresentado rapidamente usando-se uma gradiente de 0% a 50% de acetato de etila em hexanos. As frações contendo o produto foram combinadas e evaporadas sob pressão reduzida para resultar em imidazopiridina (S)-benzil 2- (8-fenilimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1 -carboxilato desejada.

Exemplo 15

(2S1-BENZIL 2-(8-Q-TOLILIMIDAZOM .2-A1PIRIDIN-2-IÜPIRROLIDINA-1 -CARBOXILATO

Seguindo os procedimentos do exemplo 14, (S)-benzil-2-(8- bromoimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1 -carboxilato (0,250 g; 0,62 mmol),

(S)-benzil-2-(8-bromoimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1- ácido o-tolil borômico (0,1101 g; 0,81mmol), carbonato de potássio (0,1292 g; 0,93 mmol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (0,0360 g; 0,03 mmol) foram reagidos para resultar em (2S)-benzil 2-(8-o-tolilimidazo[1,2-a]piridin-2- il)pirrolidina-1 -carboxilato bruta. O material bruto foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (4g de SiO2; de 0 a 70% de acetato de etila em hexanos) para resultar em diazocetona (0,247 g; 0,60 mmol; 74%).

Exemplo 16

(2Si-benzil-2-(8-(2-ftrifluorometinfeni0imid^

1 -carboxilato

10

Seguindo os procedimentos do exemplo 14, (S)-benzil-2-(8- bromoimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,250 g; 0,62 mmol), ácido 2-trifluorometilfenil borômico (0,1538 g; 0.81 mmol), carbonato de potássio (0,1292 g; 0,93 mmol) e tretaquis(trifenilfosfina)paládio(0) (0,0360 g; 0,03 mmol) produziram o material bruto que foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (4 g de SiO2; de 0 a 100% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (2S)-benzil-2-(8-(2-(trifluorometil)fenil)imidazo[1,2-a]piridin-2- il)pirrolidina-1 -carboxilato (0,264 g; 0,57 mmol; 70%).

Exemplo 17

f2S)-BENZIL-2-(8-f2-METOXIFENIL)lMIDAZOri.2-AlPIRIDIN-2-IÜPIRROLIDINA-1-

carboxilato Seguindo os procedimentos do exemplo 14, (S)-benzil-2-(8- bromoimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,250 g; 0,62 mmol), ácido 2-metoxifenil borômico (0,1231 g; 0,81 mmol), carbonato de potássio (0,1292 g; 0,93 mmol) e tetraquis(trifenilfosfamina)-paládio(0) (0,0360 g; 0,03 mmol) produziram o material bruto que foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (4 g de SiO2; de 0 a 100% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (2S)-benzil-2-(8-(2- metoxifenil)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,269 g; 0,63 mmol; 78%).

Exemplo 18

( 2sí-Benzil-2-(8-(Naftalen-1 -ΙΟΙμιραζοΠ .2-A1Piridin-2-IüPirrolidina-1 -

Carboxilato

Seguindo os procedimentos do exemplo 14, (S)-benzil-2-(8- bromoimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,250 g; 0,62 mmol), ácido 1-naptil borônico (0,1405 g; 0,82 mmol), carbonato de potássio (0,1340 g; 0,97 mmol) e tetraquis(trifenilfosfeno) paládio(O) (0,0430 g; 0,04 mmol) produziram o material bruto que foi absorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (4 g de SiO2; de 0 a 50% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (2S)-benzyl 2-(8-(naftalen-1- il)imidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidino-1 -carboxilato (0,183 g; 0,41 mmol; 66%). Exemplo 19

(2S)-BENZIL-2-(8-(2-FLUOROFENIL)lMIDAZOri. 2-ΑΊ PIRIDI N-2-IL)PIRROLIDINA-1 -

CARBOXI LATO

bromoimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1 -carboxilato (0,2489 g; 0,62 mmol), ácido 2-metoxifenil borômico (0,1217 g; 0,87 mmol), carbonato de potássio (0,1449 g; 1,05 mmol) e tetraquis(trífenilfosfina)-paládio(0) (0,0532 g; 0,05 mmol) produziram o material bruto que foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (4 g de SiO2; de 0 a 60% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (2S)-benzil 2-(8-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-a]piridin- 2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,62 mmol; 100%).

Exemplo 20

(S)-benzil-2-(6-metil-8-fenilimidazoH .2-a1piridin-2-il)pirrolidina-1 -

CARBOXILATO

bromoacetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,295 g; 0,90 mmol) e 2-amino-3-bromo-5- metilpiridina (0,1765 g; 0,94 mmol) produziram o material bruto que foi adsorvido em sílica gem e purificado por cromatografia rápida (12 g SiO2; de 0 a 50% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (S)-benzil-2-(8-bromo-

Seguindo os procedimentos do exemplo 14, (S)-benzil-2-(8-

Seguindo os procedimentos do exemplo 14, (S)-benzil-2-(2- 6metilimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidino-1 -carboxilato (0,165 g; 0,40 mmol; 44%).

(S)-benzyl-2-(8-bromo-6-metilimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirro!idina-

1-carboxilato (0,165 g; 0,40 mmol), ácido fenil borônico (0,0740 g; 0,61 Mmol), carbonato de potássio (0,1449 g; 0,65 mmol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (0,0351 g; 0,03 mmol) produziram o material bruto que foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (4 g de SiO2; de 0 a 50% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (S)- benzil-2-(6-metil-8-fenilimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1 -carboxilato (0,40 mmol; 100%).

Exemplo 21

fS^-BENZIL-2-f7-METIL-8-FENILIMIDAZOri.2-AlPIRIDIN-2-IL)PIRROLIDINA-1-

carboxi lato

Seguindo os procedimentos do exemplo 14, (S)-benzil-2-(2-

bromoacetil)pirrolidina-1-carboxilato (0,400 g; 1,23 mmol) e 2-amino-3-bromo-4- metilpiridina (0,2344 g; 1,25 mmol) produziram o material bruto que foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (12 g SiO2, de 0 a 50% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (S)-benzil-2-(8-bromo-7- metilimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,239 g; 0,58 mmol, 47%).

(S)-benzil 2-(8-bromo-7-metilimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina- 1-carboxilato (0,239 g; 0,58 mmol), ácido fenil borônico (0,0936 g; 0,77 mmol), carbonato de potássio (0,1496 g; 1,08 mmol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0) (0,0534 g; 0,05 mmol) produziram o material bruto que foi adsorvido em sílica gel e purificado por cromatografia rápida (4 g de Si02; de 0 a 60% de acetato de etila em hexanos) para resultar em (s)benzil 2-(7-metil-8-fenilimidazo[1,2-a]piridin-2-il)pirrolidina-1-carboxilato (0,58 mmol; 100%).

Exemplo 22

Testes de inibicão de IAP Nos experimentos a seguir foram usados no domínio BIR quimérico, citado como MLXBIR3SG, no qual 11 de 110 resíduos correspondem àqueles encontrados no XIAP-BIR3, enquanto os remanescentes correspondem ao ML-IAP-BIR. A proteína quimérica MLXBIR3SG mostrou se ligar e inibir a caspase-9 significativamente melhor que os domínios BIR nativos, mas ligado a peptídeos com base Smac e Smac maduros com afinidades semelhantes àqueles da ML-IAP-BIR. A inibição da caspase-9 aprimorada do MLXBIR3SG domínio BIR quimérico foi correlacionado com a inibição aumentada da apoptose induzida por doxorrubicina quando transfectado em células MCF7. seqüência MLXBIR3SG:

MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMLETEEEEEEGAGATLSRGPAFPGMGSEELRL ASFYDWPLTAEVPPELLAAAGFFHTGHQDKVRCFFCYGGLQSWKRGDDPWT

EHAKWFPGCQFLL RSKGQEYINNIHLTHSL (SEQ ID NO.: 1)

Teste De Ligação Peptídica TR-FRET

Experimentos de competição de Transferência de Energia de Ressonância por Fluorescência Resolvida pelo tempo são realizados no Leitor de contagem Wallac Victor2 Multilabeled (Perkin Elmer Life and Analytical Sciences, Inc.) de acordo com os procedimentos de Kolb et al. (Journal of Biomolecular Screening, 1996, 1 (4):203). Um coquetel de reagentes contendo 300 nM de MLXBIR3SG marcado com his; 200 nM do peptídeo SMC biotinilado (AVPI); 5 tg/ml de aloficocianina anti-his (XL665) (CISBio International); e 200 ng/ml de estreptavidina-európio (Perkin Elmer) foi preparado em tampão " reagente (50 mM Tris [pH 7,2], 120 mM de NaCI; globulinas bovina a 0,1% e octilglicosida a 0,05%). (De maneira alternativa, esse coquetel pode ser feito usando-se anti-His marcado em európio (Perkin Elmer) e estreptavidina- aloficocianina (Perkin Elmer) em concentrações de 6,5 nM e 25 nM, respectivamente). O coquetel de reagente é incubado em temperatura ambiente por 30 minutos. Depois da incubação, o coquetel é adicionado em diluições seriais de 1:3 de um composto antagonista (concentração inicial de 50 μΜ) em placas pretas de 384 poços (Greiner Bio-One, Inc.).. Depois de 90 minutos de incubação em temperatura ambiente, a fluorescência é lida com filtros para excitacão de európio (340 nm) e para os comprimentos de onda de emissão do európio (615 nm) e aloficocianina (665 nm). Os dados antagonistas são calculados como uma proporção do sinal de emissão de aloficocianina em 665 nm para aquele da emissão do európio a 615 nm (essas proporções são multiplicadas por um fator de 10.000 para facilitar a manipulação dos dados). Os valores resultantes são plotados como uma função da concentração do antagonista e ajustado para uma equação de 4 parâmetros usando-se o programa Kaleidograph (Synergy Software, Reading, PA). As indicações da potência do antagonista são determinadas para os valores de IC5o- Teste De Ligação Peptídica de Polarização de Fluorescência

Os experimentos de polarização foram realizados em um Analyst HT 96-384 (Molecular Devices Corp.) de acordo com os procedimentos de Keating, S.M., Marsters, J, Beresini, M., Ladner, C., Zioncheck, K., Clark, K., Arellano, F., and Bodary., S.(2000) in Proceedings of SPIE : In Vitro Diagnostic Instrumentation (Cohn, G.E., Ed.) pp 128-137, Bellingham, WA. As amostras para as medidas de afinidade de polarização por fluorescência foram preparados pela adição de diluições seriais de 1:2 começando com uma concentração final de 5 μΜ de MLXBIR3SG no tampão de polarização (50 mM Tris [pH 7,2], 120 mM de NaCI, 1% de globulinas bovinas, 5 mM de DTT e 0,05% de octilglicosida) para AVPdi-Phe-NH2 (AVP-diPhe-FAM) conjugada com 5-carboxiflouresceína em 5 nM de concentração final.

OH

Sonda AVP-diPhe-FAM

As reações foram lidas depois do tempo de incubação de 10 minutos em temperatura ambiente com padrão filtros limite para o fluoróforo da fluoresceína (Xex = 485 nm; m = 530 nm) em placas HE96 pretas de 96 poços (Molecular Devices Corp.)·· Os valores da fluorescência foram plotadas como uma função da concentração da proteína e de IC50 foram obtidos pelo ajuste dos dados para uma equação de 4 parâmetros usando-se o programa Kaleidografh (Synergy software, Reading, PA). Os experimentos de competição foram realizados pela adição do MLXBIR3SG a 30 nM para poços que continham a 5 nM da sonda AVP-diPhe-FAM bem como diluições graduadas de 1:3 dos compostos antagonistas que iniciaram em uma concentração de 300 μΜ no tampão de polarização. As amostras foram lidas depois de uma incubação de 10 minutos. Os valores da polarização de fluorescência foram plotadas como uma função da concentração do antagonista e os valores de IC50 foram obtidos pelo ajuste dos dados para uma equação de 4 parâmetros usando-se o programa Kaleidografh (Synergy software, Reading, PA). As constantes de inibir (Ki) para os antagonistas foram determinadas a partir dos valores de IC50. Os compostos da invenção que foram testados nesse teste exibiram um Ki menor que 50 μΜ. Por exemplo, o composto 7 apresentava um Ki de 18,917, o composto 20 tinha um Ki de 1,8312, o composto 1 tinha um Ki de 0,0891 e o composto 8 tinha um Ki de 2,3067.

Claims

1. COMPOSTO, de fórmula (I): <formula>formula see original document page 73</formula> em que: - X1 e X2 são independentemente O ou S; - Y é uma iigação, (CR7R7)m, O ou S; - Z é H1 alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por uma ou mais hidroxila, alcóxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil opcionalmente substituído, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído; e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)- NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8-SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, - NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-. - Q é H, halogênio, hidroxila, carboxila, amino, nitro, ciano, alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por uma ou mais hidroxila, alcóxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil opcionalmente substituído, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído; e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, - S-, -S(O)-, S(C)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8- SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, -NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-. - R1 é H1 OH ou alquil; ou R1 e R2 formam juntos um heterociclo com 5 a 8 membros; - R2 é alquil, um carbociclo, carbociclilalquil, um heterociclo ou heterociclilalquil, cada um opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, oxo, tiona, mercapto, carboxila, alquil, haloalquil, acil, alcoxi, alquiltio, sulfonil, amino e nitro, sendo que os ditos alquil, acil, alcoxi, alquiltio e sulfonil são opcionalmente substituídos por hidroxi, mercapto, halogênio, amino, alcoxi, hidroxialcoxi e alcoxialcoxi; - R3 é H ou alquil opcionalmente substituído por halogênio ou hidroxila; ou R3 e R4 formam juntos um heterociclo com 3 a 6 membros; - R3' é H, ou R3 e R3' formam juntos um carbociclo com 3 a 6 membros; - R4 e R4' são independentemente H, hidroxila, amino, alquil, carbociclo, carbocicloalquil, carbocicloalquiloxi, carbocicloalquiloxicarbonil, heterociclo, heterocicloalquil, heterocicloalquiloxi ou heterocicloalquiloxicarbonil; sendo que cada alquil, carbocicloalquil, carbocicloalquiloxi, carbocicloalquiloxicarbonil, heterociclo, heterocicloalquil, heterocicloalquiloxi e heterocicloalquiloxicarbonil é opcionalmente substituído por halogênio, hidroxila, mercapto, carboxila, alquil, alcoxi, amino, imino e nitro; ou R4 e R4' formam juntos um heterociclo; - R5 é H ou alquil; - R6 e R6' são cada um independentemente H, alquil, aril ou aralquil; - R7 é H, ciano, hidroxila, mercapto, halogênio, nitro, carboxila, amidino, guanidino, alquil, um carbociclo, um heterociclo ou U-V-; sendo que U é -O-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2 NRb-, - NR8-SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8-C(NH)-NR8-, -NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O- C(O)- e V é alquil, um carbociclo ou um heterociclo, e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, -S-, - S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, -C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8-S02-, - NR8-C(O)-NR8-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-; e um alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por hidroxila, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo, carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído. - R8 é H, alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH do dito alquil são opcionalmente substituídos por - O-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)- ou -C(O)-, e os ditos alquil, carbociclo e heterociclo são opcionalmente substituídos por hidroxila, alcoxi, acil, halogênio, mercapto, oxo (=0), carboxila, acil, alquil substituído por halo, amino, ciano, nitro, amidino, guanidino, um carbociclo opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído; e - m é O a 4.

2. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de Z ser H, halogênio ou alquil.

3. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de Y ser CH2.

4. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de Q ser um carbociclo ou um heterociclo opcionalmente substituído por alquil, um carbociclo ou um heterociclo; sendo que qualquer alquil, carbociclo ou heterociclo é opcionalmente substituído por halogênio, amino, hidroxila, mercapto, carboxila, alcóxi, alcoxialcoxi, hidroxialcoxi, alquilltio, aciloxi, aciloxialcoxi, alquilsulfonil, alquilsulfonilalquil, alquilsulfinil e alquilsulfinillalquil; e sendo que um ou mais grupos CH2 ou CH de um alquil são opcionalmente substituídos por -O-, -S-, -S(O)-, S(O)2 -N(R8)-, - C(O)-, -C(O)-NR8-, -NR8-C(O)-, -SO2-NR8-, -NR8-SO2-, -NR8-C(O)-NR8-, -NR8- C(NH)-NR8-, -NR8-C(NH)-, -C(O)-O- ou -O-C(O)-.

5. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de Q ser um carbociclo ou heterociclo selecionado a partir do grupo que consiste em lll-a - lll-s: <formula>formula see original document page 76</formula> <formula>formula see original document page 77</formula> sendo que η é 1 a 4; T é O, S, NR8 ou CR7R7; e W é O, NR8 ou r.R^R,

6. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de Ri ser H.

7. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de R2 ser alquil, cicloalquil ou um heterociclo.

8. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de R2 ser selecionado a partir do grupo que consiste em t-butil, isopropil, ciclohexil, tetrahidropiran-4-il, N-metilsulfonilpiperidin-4-il, tetrahidrotiopiran-4-il, tetrahidrotiopiran-4-il (em que S está na forma oxidada SO ou SO2), ciclohexan-4-ona, 4-hidroxiciclohexano, 4-hidroxi-4- metilciclohexano, 1-metil-tetrahidropiran-4-il, 2-hidroxiprop-2-il, but-2-il, tiofen-3- il, piperidin-4-il, N-acetilpiperidin-4-il, N-hidroxietilpiperidin-4-il, N-(2- hidroxiacetil)piperidin-4-il, N-(2-metoxiacetil)piperidin-4-il, piridin-3-il, fenil e 1- hidroxiet-1-il.

9. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de R3 ser metil.

10. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de R4 ser H ou metil, e R4' ser H.

11. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de R5 ser H.

12. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de R6 e R6' serem ambos H.

13. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de Xi e X2 serem ambos O.

14. COMPOSTO, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de Ri ser H; R2 ser isopropil, t-butil, ciclohexil ou piranil; R3 ser metil; R3' ser H; R4 ser metil, R4' ser H; R5 ser H; Xi e X2 serem ambos O; e R6 e R6' serem ambos H.

15. MÉTODO DE INDUÇÃO DE APOPTOSE EM UMA CÉLULA, que compreende introduzir na dita célula um composto de acordo com a reivindicação 1.

16. MÉTODO DE SENSIBILIZAÇÃO DE UMA CÉLULA, para um sinal apoptótico, que compreende introduzir na dita célula um composto de acordo com a reivindicação 1.

17. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato do dito sinal apoptótico ser induzido pelo contato da dita célula com um composto selecionado a partir do grupo que consiste em citarabina, fludarabina, 5-fluoro-2-desoxiuiridina, gencitabina, metotrexato, bleomicina, cisplatina, ciclofosfamida, adriamicina (doxorubicina), mitoxantrona, camptotecina, topotecano, colcemida, colchicina, paclitaxel, vinblastina, vincristina, tamoxifeno, finasterida, taxotere e mitomicina C ou radiação.

18. MÉtODO, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato do dito sinal apoptótico ser induzido pelo contato da dita célula com Apo2L/TRAIL.

19. MÉTODO PARA INIBIR A LIGAÇÃO DE UMA PROTEÍNA IAP A UMA PROTEÍNA CASPASE, que compreende colocar em contato a dita proteína IAP com um composto de acordo com a reivindicação 1.

20. MÉTODO PARA TRATAR UMA DOENÇA OU CONDIÇÃO ASSOCIADA COM A SUPEREXPRESSÃO DE UMA PROTEÍNA IAP1 em um mamífero, que compréende administrar ao dito mamífero uma quantidade efetiva de um composto de acordo com a reivindicação 1.

21. MÉTODO PARA TRATAR CÂNCER, que compreende administrar ao dito mamífero uma quantidade efetiva de um composto de acordo com a reivindicação 1. <table>table see original document page 80</column></row><table>