BRPI0720291A2 - Derivados de piperidina usado para tratar doenças mediadas por receptor 5 da quimiocina - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADO DE PIPERIDINA USADO PARA TRATAR DOENÇAS MEDIADAS POR RECEPTOR 5 DA QUIMIOCINA".

A presente invenção refere-se a um composto de piperidina que 5 possui atividade farmacêutica, a processos para a preparação de tal com- posto, a composições farmacêuticas que compreendem tal composto e ao uso de tal composto como um agente terapêutico ativo.

As quimiocinas são citocinas quimiotáticas que são liberadas por uma ampla variedade de células de modo a atrair macrófagos, células T, eosinófilos, basófilos e neutrófilos para locais de inflamação e também exer- cem uma função na maturação de células do sistema imune. As quimiocinas exercem uma função importante em respostas imunes e inflamatórias em várias doenças e distúrbios, inclusive asma e doenças alérgicas, bem como patologias autoimunes, tais como, artrite reumatóide e aterosclerose. Essas pequenas moléculas secretadas são uma superfamília desenvolvida de pro- teínas de 8-14 kDa caracterizada por um motivo de quatro cisteínas conser- vadas. A superfamília de quimiocinas pode ser dividida em dois grupos prin- cipais que exibem motivos estruturais característicos, as famílias Cys-X-Cys (C-X-C1 ou a) e Cys-Cys (C- C, ou β). Essas são distinguidas sobre a base de uma única inserção de aminoácido entre o par NH-proximal de resíduos de cisteína e similaridade de seqüência.

As quimiocinas C-X-C incluem diversos quimiotáticos potentes e ativadores de neutrófilos, tais como, interleucina-8 (IL-8) e peptídeo ativador de neutrófilo 2 (NAP-2).

As quimiocinas C-C incluem quimiotáticos potentes de monóci-

tos e linfócitos, porém não neutrófilos, tais como, proteínas quimiotáticas de monócitos humanos 1-3 (MCP- 1, MCP-2 e MCP-3), RANTES (Células T Normais Expressas e Secretadas Reguladas à Ativação), eotaxina e as pro- teínas inflamatórias de macrófago 1a e 1β (MIP-1a e ΜΙΡ-1β).

Estudos demonstraram que as ações das quimiocinas são medi-

adas por subfamílias de receptores acoplados à proteína G, entre esses es- tão os receptores designados CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10, CXCR1, CXCR2, CXCR3 e CXCR4. Esses receptores representam boas metas para o desenvolvimento de fármacos visto que os agentes que modulam esses receptores poderiam ser úteis no tratamento de distúrbios e doenças, tais como aquelas mencio- nadas acima.

O receptor CCR5 é expresso mediante linfócitos-T, monócitos, macrófagos, células dendriticas, micróglia e outros tipos de células. Esses detectam e respondem a diversas quimiocinas, principalmente "células T normais expressas e secretadas reguladas à ativação" (RANTES), proteínas 10 inflamatórias de macrófago (MIP) MIP-Ia e ΜΙΡ-1β 1a e proteína-2 quimiotá- tica de monócitos (MCP-2).

Isso resulta no recrutamento de células do sistema imune para locais de doença. Em muitas doenças são as células que expressam CCR5 que contribuem, direta ou indiretamente, para o dano tecidual. Consequen- temente, inibir o recrutamento desses células é benéfico em uma ampla ga- ma de doenças.

CCR5 também é um correceptor de HIV-I e outros vírus, que permite que esses vírus entrem nas células. O bloqueio do receptor com um antagonista de CCR5 ou indução da internalização de receptor com um ago- nista CCR5 protege as células de infecção viral.

Os derivados de piperidina farmaceuticamente ativos são descri- tos em PCT/SE2005/000574 (WO 2005/101989). Um dos compostos descri- tos é 4-{(1R,3S/R)-1-(3,5-difluorofenil)-3-[4-(3-isopropil-5-metil-4/-/-1,2,4- triazol-4-il]piperidin-1 -il]butil}-1-(metilssulfonil)piperidina que é mostrado co- 25 mo dois diastereoisômeros distintos (Composto Comparador A). O composto da presente invenção possui potência e/ou propriedades DMPK particular- mente vantajosas (tais como, depuração e biodisponibilidade em espécies, tais como, porém sem caráter limitativo, ratos e cães) sobre o diastereoisô- mero do Composto Comparador A.

A presente invenção proporciona 4-{(1R,3R)-1-(3,5-difluorofenil)-

3-[4-(3-etil-5-isopropil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]piperidin-1 -il]butil}-1 - (metilssulfonil)piperidina (I): S(O)2CH3

F

ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem sais de adição de ácido (aductos), tais como, hidrocloreto, hidrobrometo, fosfato, acetato, fumarato, succinato, maleato, tartrato, citrato, oxalato, metanossul- fonato, p-toluenossulfonato ou formato.

O composto da invenção pode se apresentar como um solvato (tal como, um hidrato) e a presente invenção inclui todos tais solvatos.

O composto da presente invenção pode ser preparado por qual- quer um dos processos adequados descritos em PCT/SE2005/000574 (WO 2005/101989).

Por exemplo, o composto da presente invenção pode ser prepa- rado por reação de um composto da fórmula (II):

S(O)2CH3

com um composto da fórmula (III) na presença de um triazol apropriado (por exemplo, 1,2,3-triazol ou benzotriazol):

seguido pela reação com um reagente organometálico apropriado (por e- xemplo, brometo de metil magnésio).

Um composto da fórmula (III) pode ser preparado mediante a 10

15

remoção do grupo de proteção (PG) de um composto da fórmula (IV):

por exemplo, quando PG for benziloxilcarbonil ou benzila, a remoção pode ser realizada por hidrogenação (por exemplo, hidrogênio na presença de paládio sobre o catalisador de carbono); quando PG for terc-butiloxicarbonil, a remoção pode ser realizada por tratamento com ácido (tal como, ácido hi- droclórico ou ácido trifluoroacético).

Um composto da fórmula (IV): pode ser preparado a partir de um composto da fórmula (V):

utilizando um método "one-pot" de duas etapas, primeiro, ao ativar a amida com, por exemplo, pentacloreto de fósforo, e reagir o produto formado desse modo com hidrazida de acila, então por ciclização na presença de um ácido em temperatura elevada (tal como, ácido acético em tolueno aquecido até refluxo).

O composto da invenção pode ser preparado por alquilação de um composto da fórmula (VI):

S(O)2CH3

N

em que LG é um grupo de saída; com um composto da fórmula (III) na pre- sença de uma base adequada (tal como, carbonato de potássio ou trietilami- na) em um solvente adequado (tal como, acetonitrila ou THF) em temperatu- ra ambiente (por exemplo, 10 a 30°C).

(V)

F

LG

(VI)

F

O composto da invenção pode ser preparado por aminação re- dutiva de um composto da fórmula (VII):

S(O)2CH3

(VII)

com um composto da fórmula (III), na presença de um reagente de redução (tal como, NaBH(OAc)3, em que Ac é C(O)CH3) e um ácido de Lewis apropriado (tal como, Ti(OPr)4 em um solvente adequado (EtOH). Os 5 materiais de partida para esses métodos preparativos estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por métodos da literatura, métodos de literatura adaptativos, ou Métodos adaptativos descritos aqui.

O composto da presente invenção possui atividade como um produto farmacêutico, em particular como um modulador (tal como, agonista, 10 agonista parcial, agonista inverso ou antagonista) de atividade de receptor de quimiocina (por exemplo, CCR5), e pode ser usado no tratamento de do- enças autoimunes, inflamatórias, proliferativas ou hiperproliferativas, ou do- enças imunologicamente mediadas (inclusive rejeição de órgãos ou tecidos transplantados e Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS)).

O composto da presente invenção também é importante na inibi-

ção da entrada de vírus (tal como, vírus da imunodeficiência humana (HIV)) em células alvo e, portanto, são importantes na prevenção de infecção por vírus (tal como, HIV), no tratamento de infecção por vírus (tal como, HIV) e na prevenção e/ou tratamento de síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS).

De acordo com uma característica adicional da invenção propor- ciona-se 4-[3-(1,1 -difluorofenil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1 -{(1 R,3R)-3- (3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, para uso em um método de tra- 25 tamento de um animal de sangue quente (tal como, homem) por terapia (in- clusive profilaxia). De acordo com uma característica adicional da invenção propor- ciona-se um método para modular a atividade de receptor de quimiocina (por exemplo, atividade de receptor CCR5) em um animal de sangue quente, tal como, homem, necessitado de tal tratamento, que compreende administrar 5 ao dito animal uma quantidade eficaz de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4/-/-

1,2,4-triazol-4-il]-1 -{(1 f?,3f?)-3-(3,5-difluorofenil)-1 -metil-3-[1 - (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa.

A presente invenção também proporciona o uso de 4-[3-(1,1- difluoroetiO-õ-metil^H-I.Z^-triazol^-ill-l-^íR.SRJ-S-íS.õ-difluorofeniO-l-

metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuti- camente aceitável dessa, como um medicamento, por exemplo, um medi- camento para o tratamento de rejeição de transplante, doença respiratória, psoríase ou artrite reumatóide (tal como, artrite reumatóide). [Doença respi- 15 ratória é, por exemplo, COPD, asma {tal como, asma brônquica, alérgica, intrínseca, extrínseca ou da poeira, particularmente asma crônica ou asma inveterada (por exemplo, asma recente ou hiperresponsividade das vias aé- reas)} ou rinite {aguda, alérgica, rinite atrófica ou rinite crônica inclusive rinite caseosa, rinite hipertrófica, rinite purulenta, rinite seca ou rinite medicamen- 20 tosa; rinite membranosa inclusive rinite crupal, fibrinosa ou pseudomembra- nosa ou escrofulosa; rinite sazonal inclusive rinite nervosa (febre do feno) ou rinite vasomotora}; e é particularmente asma ou rinite].

Em outro aspecto a presente invenção proporciona o uso de 4- [3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1R,3f?)-3-(3,5- 25 difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, na fabricação de um medicamento para uso na terapia (por exemplo, modulação da atividade de receptor de quimiocina (tal como, atividade de receptor CCR5 (por exemplo, artrite reu- matóide)) em um animal de sangue quente, tal como, homem).

A invenção também proporciona 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-

4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1f?,3f?)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1- (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, para uso como um medicamento, por exemplo, um medi- camento para o tratamento de artrite reumatóide.

Em outro aspecto a presente invenção proporciona o uso de 4- [3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1R,3/?)-3-(3,5- 5 difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, na fabricação de um medicamento para uso em terapia (por exemplo, modulação da atividade de receptor de quimiocina (tal como, atividade de receptor CCR5 (por exemplo, artrite reu- matóide)) em um animal de sangue quente, tal como, homem).

A invenção proporciona ainda o uso de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-

metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1/?,3/?)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1- (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, na fabricação de um medicamento para uso no tratamento de:

(1) (o trato respiratório) doenças obstrutivas das vias aéreas in-

clusive: doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) (tal como, COPD irre- versível); asma {tal como, asma brônquica, alérgica, intrínseca, extrínseca ou da poeira, particularmente asma crônica ou inveterada (por exemplo, as- ma recente ou hiperresponsividade das vias aéreas)}; bronquite {tal como,

bronquite eosinofílica}; rinite aguda, alérgica, rinite atrófica ou rinite crônica inclusive rinite caseosa, rinite hipertrófica, rinite purulenta, rinite seca ou rini- te medicamentosa; rinite membranosa inclusive rinite crupal, fibrinosa ou pseudomembranosa ou escrofulosa; rinite sazonal inclusive rinite nervosa (febre do feno) ou rinite vasomotora}; sarcoidose; pulmão de fazendeiro e

doenças relacionadas; polipose nasal; pulmão fibróide ou pneumonia inters- ticial idiopática;

(2) (osso e articulações) artrite inclusive reumática, infecciosa, autoimune, espondiloartropatias soronegativas (tais como, espondilite anqui- losante, artrite psoríatica ou doença de Reiter), doença de Behcet, síndrome

de Sjogren ou esclerose sistêmica;

(3) (dor e remodelagem de tecido conjuntivo de distúrbios mus- culoesqueléticos devido a lesão [por exemplo, lesão esportiva] ou doença) artrite (por exemplo, artrite reumatóide, osteoartrite, gota ou artropatia por cristais), outras doenças das articulações (tais como, degeneração do disco intervertebral ou degeneração da articulação temporomandibular), doença da remodelagem óssea (tal como, osteoporose, doença de Paget ou osteo- 5 necrose), policondrite, escleroderma, distúrbio do tecido conjuntivo misto, espondiloartropatias ou doença periodontal (tal como, periodontite);

(4) (pele e olhos) psoríase, dermatite atópica, dermatite de con- tato ou outras dermatites eczmatosas, dermatites seborréicas, líquen plano, pênfigo, pênfigo bolhoso, Epidermólise bolhosa, urticária, angiodermas, vas-

culite eritematosa, eosinofilias cutâneas, uveíte, Alopécia areata ou conjunti- vite vernal;

(5) (trato gastrointestinal) doença celíaca, proctite, gastroenterite eosinofílica, mastocitose, doença de Crohn, colite ulcerativa, doença do in- testino irritável ou alergias relacionadas a alimentos que possuem efeitos

remotos do intestino (por exemplo, enxaqueca, rinite ou eczema);

(6) (Rejeição ao Aloenxerto) aguda ou crônica após, por exem- plo, transplante de rim, coração, fígado, pulmão, medula óssea, pele ou cór- nea; ou doença enxerto crônico contra hospedeiro; e/ou

(7) (outros tecidos ou doenças) doença de Alzheimer, esclerose

múltipla, aterosclerose, Sindrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS), Lú- pus (tal como, lúpus eritematoso ou sistêmico), eritematoso, tireoidite de Ha- shimoto, miastenia grave, diabetes tipo I, síndrome nefrótica, fasciíte eosino- fílica, síndrome da hiper IgE, hanseníase (tal como, hanseníase Iepromato- sa), doença Peridontal, síndrome de Sézary, púrpura trombocitopênica idio-

pática ou distúrbios do ciclo menstruai; em um animal de sangue quente, tal como homem.

A presente invenção proporcionada ainda um método para tratar um estado de doença mediada por quimiocina (por exemplo, um estado de doença mediada por CCR5) em um animal de sangue quente, tal como, ho-

mem, que compreende administrar a um mamífero necessitado de tal trata- mento uma quantidade eficaz de 4-[3-(1,1 -difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4- triazol-4-il]-1 -{(1 R,3R)-3-(3,5- difluorofenil)-1 -metil-3-[1 - (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa.

Para usar 4-[3-(1,1 -difiuoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1 - {(1R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[l-(metilssulfonil)piperidin-4- 5 il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, para o tra- tamento terapêutico de um animal de sangue quente, tal como, homem, em particular, modulação da atividade de receptor de quimiocina (por exemplo receptor CCR5), o dito ingrediente é normalmente formulado de acordo com a prática farmacêutica padrão como uma composição farmacêutica.

Portanto, em outro aspecto, a presente invenção proporciona

uma composição farmacêutica que compreende 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5- metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1f?,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1- (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa (ingrediente ativo), e um adjuvante, diluente ou veículo far- 15 maceuticamente aceitável. Em um aspecto adicional a presente invenção proporciona um processo para a preparação da dita composição que com- preende misturar 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1- {(1R,3/?)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4- il]propil}piperidina com um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente 20 aceitável. Dependendo do modo de administração, a composição farmacêu- tica irá compreender, por exemplo, de 0,05 a 99 %p (porcento por peso), tal como, de 0,05 a 80 %p, por exemplo, de 0,10 a 70 %p (tal como, de 0,10 a 50 %p), de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1R,3/?)-3- (3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina,

sendo que todas as porcentagens por peso estão baseadas na composição total.

A composição farmacêutica dessa invenção pode ser adminis- trada de maneira padrão para a condição de doença que se deseja tratar, por exemplo, por administração tópica (tal como, ao pulmão e/ou vias aéreas 30 ou à pele), oral, retal ou parenteral. Para esses propósitos, o composto des- sa invenção pode ser formulado por meio conhecido na técnica sob a forma de, por exemplo, aerossóis, formulações de pó seco, comprimidos, cápsulas, xaropes, pós, grânulos, soluções ou suspensões aquosas ou oleosas, emul- sões (lipídeo), pós dispersíveis, supositórios, pomadas, cremes, pastilhas e soluções ou suspensões aquosas ou oleosas injetáveis estéreis.

Uma composição farmacêutica adequada dessa invenção é uma adequada para administração oral em forma de dosagem unitária, por e- xemplo, um tablete ou cápsula que contém entre 0,1 mg e 1g de 4-[3-(1,1- difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1- metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina.

Em outro aspecto uma composição farmacêutica da invenção é uma adequada para injeção intravenosa, intra-articular, subcutânea ou in- tramuscular.

Cada paciente pode receber, por exemplo, uma dose intraveno- sa, intra-articular, subcutânea ou intramuscular de 0,01 mgkg'1 a 100 mgkg'1 do composto, por exemplo, na faixa de 0,1 mgkg'1 a 20 mgkg'1 dessa inven- 15 ção, sendo que a composição é administrada 1 a 4 vezes ao dia. A dose in- travenosa, intra-articular, subcutânea e intramuscular pode ser administrada por meio de uma injeção em bolus. Alternativamente, a dose intravenosa pode ser administrada por infusão contínua durante um período de tempo. Alternativamente, cada paciente irá receber uma dose oral diária que é apro- 20 ximadamente equivalente à dose parenteral diária, sendo que a composição é administrada 1 a 4 vezes ao dia.

A seguir são ilustradas formas de dosagem farmacêuticas repre- sentativas que contêm 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1- {(1R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4- 25 il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa ou um sol- vente dessa (mais adiante nesse documento, Composto X), para uso tera- pêutico ou profilático em humanos:

(a)

Tabela I mg/tablete Composto X 100 Lactose Ph.Eur 179 Corscarmelose sódica 12,0 Tabela I mg/tablete Polivinilpirrolidona 6 Estearato de magnésio 3,0 (b)

Tabela Il mg/tablete Composto X 50 Lactose Ph.Eur 229 Corscarmelose sódica 12,0 Polivinilpirrolidona 6 Estearato de magnésio 3,0 (c)

Tabela Ill mg/tablete Composto X 1,0 Lactose Ph.Eur 92 Corscarmelose sódica 4,0 Polivinilpirrolidona 2,0 Estearato de magnésio 1,0 (d)

Cápsula mg/cápsula Composto X 10 Lactose Ph.Eur 389 Corscarmelose sódica 100 Estearato de magnésio 1,0 (e)

Injeção* (50 mg/mL) Composto X 5,0% em peso Solução Aquosa Isotônica a 100 Tampões, cossolventes farmaceuticamente aceitáveis, tais co-

mo, polietileno glicol, polipropileno glicol, glicerol ou EtOH ou agentes de complexação, tais como, hidroxi-propil β-ciclodextrina podem ser usados para auxiliar a formulação. As formulações acima podem ser obtidas por procedimentos convencionais bem conhecidos na técnica farmacêutica. Os comprimidos (a)-(c) podem ser entéricos revestidos por meios convencionais, por exem- plo, para fornecer um revestimento de acetato ftalato de celulose.

5 A invenção refere-se ainda a terapias de combinação ou compo-

sições onde 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1R,3R)-3- (3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il3propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, ou uma composição farmacêuti- ca que compreende 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1- {(1R,3f?)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-

il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, é adminis- trada simultaneamente (possivelmente na mesma composição) ou seqüen- cialmente com um agente para o tratamento de qualquer um dos estados de doença acima.

Em particular, para o tratamento das doenças inflamatórias co-

mo artrite reumatóide, psoríase, doença inflamatória do intestino, COPD, asma e rinite alérgica o composto da invenção pode ser combinado com um inibidor de TNF-α (tal como, um anticorpo monoclonal anti-TNF (tal como, Remicade, CDP-870 e D.sub2.E.sub7.), ou uma molécula de imunoglobulina 20 do receptor de TNF (tal como, Enbrel.reg.)), um inibidor não-seletivo de COX-l/COX-2 (tal como, piroxicam ou diclofenac; um ácido propiônico, tal como, naproxeno, flubiprofeno, fenoprofeno, cetoprofeno ou ibuprofeno; um fenamato, tal como, ácido mefenâmico, indometacina, sulindac ou apazona; uma pirazolona, tal como, fenilbutazona; ou um salicilato, tal como, aspirina), 25 um inibidor de COX-2 (tal como, meloxicam, celecoxib, rofecoxib, valdecoxib ou etoricoxib) metotrexato em baixa dose, lefunomida; ciclesonida; hidroxi- cloroquina, d-penicilamina ou auranofina, ou outro parenteral ou oral.

A presente invenção refere-se ainda à combinação de 4-[3-(1,1- difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1- metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-íl]propil}piperidina, ou um sal farmaceuti- camente aceitável dessa, juntamente com:

• um inibidor da biossíntese de leucotrienos, um inibidor (5-LO) da 5-lipoxigenase ou uma antagonista da proteína ativadora de 5- Iipoxigenase (FLAP), tal como, zileutona, ABT-761, fenleutona, tepoxalina, Abbott-79175, Abbott-85761, uma tiofeno-2-alquilsulfonamida N-(5- substituída), 2,6-di-terc-butilfenol hidrazonas, um metoxitetraidropirano, tal 5 como, Zeneca ZD-2138, SB-210661, um composto 2-cianonaftaleno piridinil- substituído, tal como, L-739,010; um composto 2-cianoquinolina, tal como, L- 746,530; um composto indol ou quinolina, tal como, MK-591, MK-886 ou BAY x I005;

• um antagonista do receptor de um Ieucotrieno LTB.sub4.,

LTC.sub4., LTD.sub4. ou LTE.sub4. selecionado a partir do grupo que con- siste em fenotiazin-3-ona, tal como, L-651,392; um composto amidino, tal como, CGS-25019c; uma benzoxalamina, tal como, ontazolaste; uma ben- zenocarboximidamida, tal como, BIIL 284/260; ou um composto, tal como, zafirlucaste, ablucaste, montelucaste, pranlucaste, verlucaste (MK-679), RG-

12525, Ro-245913, iralucaste (CGP 45715A) ou BAY x 7195;

• um inibidor PDE4 que inclui um inibidor da isoforma PDE4D;

• um antagonista do receptor anti-histamínico [Eta].sub1., tal como cetirizina, loratadina, desloratadina, fexofenadina, astemizol, azelasti- na ou clorfeniramina;

· um antagonista do receptor gastroprotetor [Eta].sub2.;

• um agente simpatomimético vasoconstritor do agonista do a- drenoceptor a.subl. e a.sub2., tal como, propilexedrina, fenilefrina, fenilpro- panolamina, pseudoefedrina, hidrocloreto de nafazolina, hidrocloreto de oxi- metazolina, hidrocloreto de tetraidrozolina, hidrocloreto de xilometazolina ou

hidrocloreto de etilnorepinefrina;

• um agente anticolinérgico, tal como, brometo de ipratrópio, brometo de tiotrópio, brometo de oxitrópio, pirenzepina ou telenzepina;

• um agonista adrenoceptor β-sub 1- a p.sub4., tal como, meta- proterenol, isoproterenol, isoprenalina, albuterol, salbutamol, formoterol,

salmeterol, terbutalina, orciprenalina, mesilato de bitolterol ou pirbuterol, ou uma metilxantanina inclusive teofilina e aminofilina; cromoglicato de sódio; ou um antagonista do receptor muscarínico (M1, M2, e M3); • um mimético do fator de crescimento tipo I (IGF-I) similar à

insulina;

• um glucocorticóide inalado com efeitos colaterais sistêmicos reduzidos, tais como, prednisona, prednisolona, flunisolida, acetonida de

triancinolona, dipropionato de beclometasona, budesonida, propionato de fluticasona ou furoato de mometasona;

• um inibidor de uma metaloprotease de matriz (MMP), tal como, estromelisina, uma colagenase, ou uma gelatinase ou agrecanase; tal como, colagenase-1 (MMP-I), colagenase-2 (MMP-8), colagenase-3 (MMP- 13),

estromelisina-1 (MMP-3), estromelisina-2 (MMP-10), e estromelisina-3 (MMP-11) ou MMP-12;

• um modulador de função do receptor de quimiocina, tal como, CCR1, CCR2, CCR2A, CCR2B, CCR3, CCR4, CCR5, CCR6, CCR7, CCR8, CCR9, CCR10 e CCR1 (para a família C-C); CXCR1, CXCR2, CXCR3, CX-

CR4 e CXCR5 (para a família C-X-C e CX3CR1 para a família C-X3-C;

• um agente de osteoporose, tal como, raloxifeno, droloxifeno, Iasofoxifeno ou fosomax;

• um agente imunossupressor, tal como, FK-506, rapamicina, ciclosporina, azatioprina ou metotrexato;

· um composto útil no tratamento de AIDS e/ou infecção por

HIV, por exemplo: um agente que previne ou inibe a proteína viral gp120 de se juntar à célula hospedeira CD4 {tal como, CD4 solúvel (recombinante); um anticorpo anti-CD4 (ou anticorpo modificado/recombinante), por exemplo, PR0542; um anticorpo antigrupo 120 (ou anticorpo modifica-

do/recombinante); ou outro agente que interfere na ligação do grupo 120 a CD4, por exemplo, BMS806}; um agente que previne a ligação a um recep- tor de quimiocina, em vez de CCR5, usado pelo vírus HIV {tal como, um a- gonista ou antagonista de CXCR4 ou um anticorpo anti-CXCR4}; um com- posto que interfere na fusão entre o envelope viral do HIV e uma membrana

celular {tal como, um anticorpo antigrupo 41; enfuvirtida (T-20) ou T-1249}; um inibidor de DC-SIGN (também conhecido como CD209) {tal como, um anticorpo anti-DC-SIGN ou um inibidor de ligação DC-SIGN }; um inibidor da transciptase reversa de análogo de nucleosídeo/nucleotídeo {por exemplo, zidovudina (AZT), nevirapina, didanosina (ddl), zalcitabina (ddC), estavudina (d4T), Iamivudina (3TC), abacavir, adefovir ou tenofovir (por exemplo, como base livre ou como fumarato de disoproxila)}; um inibidor da transciptase 5 reversa de não-nucleosídeo {por exemplo, nevirapina, delavirdina ou efavi- renz}; um inibidor da protease {por exemplo, ritonavir, indinavir, saquinavir (por exemplo, como base livre ou como sal de mesilato), nelfinavir (por e- xemplo, como base livre ou como sal de mesilato), amprenavir, Iopinavir ou atazanavir (por exemplo, como base livre ou como sal de sulfato)}; um inibi- 10 dor da ribonucleotídeo redutase {por exemplo, hidroxiuréia}; ou um antirre- troviral {por exemplo, entricitabina}; ou,

• um agente terapêutico existente para o tratamento de osteoar- trite, por exemplo, um agente antiinflamatório não-esteroidal (mais adiante nesse documento, NSAIDIs), tal como, piroxicam ou diclofenac, um ácido 15 propiônico, tal como, naproxeno, flubiprofeno, fenoprofeno, cetoprofeno ou ibuprofeno, um fenamato, tal como, ácido mefenamico, indometacina, sulin- dac ou apazona; uma pirazolona, tal como, fenilbutazona; ou um salicilato, tal como, aspirina, um inibidor de COX-2 tal como, celecoxib, valdecoxib, rofecoxib ou etoricoxib, um analgésico ou terapia intra-articular, tal como, um 20 corticosteróide ou um ácido hialurônico, tal como, hyalgan ou synvisc, ou um antagonista do receptor P2X7.

A presente invenção refere-se ainda à combinação de 4-[3-(1,1- difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1- metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, ou um sal farmaceuti- 25 camente aceitável dessa juntamente com: (i) um inibidor da triptase; (ii) um antagonista do fator de ativação de plaquetas (PAF); (iii) um inibidor de en- zima de conversão de interleucina (ICE); (iv) um inibidor de IMPDH; (v) um inibidor de molécula de adesão que inclui um antagonista de VLA-4; (vi) uma catepsina; (vii) um inibidor de quinase MAP; (viii) um inibidor de desidroge- 30 nase de fosfato glicose-6; (ix) um antagonista do receptor de quinina-B.subl. e B.sub2.; (x) um agente antigota, por exemplo, colquicina; (xi) um inibidor de xantina oxidase, por exemplo, alopurinol; (xii) um agente uricosúrico, por exemplo, probenecida, sulfinpirazona ou benzbromarona; (xiii) um secreta- gogo do hormônio do crescimento; (xiv) um fator de crescimento de trans- formação (TGFP); (xv) um fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF); (xvi) um fator de crescimento de fibroblasto, por exemplo, fator de 5 crescimento de fibroblasto básico (bFGF); (xvii) um fator de estimulação de colônia de granulócitos macrófagos (GM-CSF); (xviii) um creme de capsaici- na; (xix) um antagonista do receptor de Taquicinina NK.subl. e NK.sub3. selecionado a partir do grupo que consiste em NKP-608C; SB-233412 (talne- tant); e D-4418; (xx) um inibidor de elastase selecionado a partir do grupo 10 que consiste em UT-77 e ZD-0892; (xxi) um inibidor de enzima de conversão de TNFa (TACE); (xxii) um inibidor de óxido nítrico sintase induzida (iNOS); ou (xxiii) uma molécula homóloga de receptor quimiotático expressa sobre células TH2 (um antagonista de CRTH2).

A invenção será ilustrada agora pelos seguintes Exemplos não- Iimitativos nos quais, exceto onde estabelecido em contrário:

(i) as temperaturas são dadas em graus Celsius (°C); as opera- ções foram realizadas em temperatura ambiente, ou seja, em uma tempera- tura na faixa de 18 a 25°C;

(ii) as soluções orgânicas foram secas sobre sulfato de magné- sio anidroso; a evaporação do solvente foi realizada utilizando um evapora-

dor rotativo sob pressão reduzida (600 a 4000 Pascais; 4,5 a 30 mm Hg) com uma temperatura de banho de até 60°C;

(iii) a cromatografia, exceto onde estabelecido em contrário, sig- nifica cromatografia flash sobre sílica gel; a cromatografia em camada del-

gada (TLC) foi realizada em placas de sílica gel; onde uma coluna "Bond Elut" é conhecida, isso significa uma coluna que contém 10g ou 20g de sílica de tamanho de partícula de 40 mícrons, sendo que a sílica está contida em uma seringa descartável de 60mL e sustentada por um disco poroso, obtido junto à Varian, Harbor City, Califórnia, USA sob o nome "Mega Bond Elut 30 SI". Onde uma "coluna SCX Isolute™" é conhecida, isso significa uma colu- na que contém ácido benzenossulfônico (sem extremidade terminada) obtida junto à International Sorbent Technology Ltd., 1 st House, Duffryn Industial Estate, Ystrad Mynach, Hengoed, Mid Glamorgan, UK. Onde a "resina se- questrante de PS-fr/s-amina Argonaut®" é conhecida, isso significa uma resi- na de poliestireno fr/s-(2-aminoetil)amina obtida junto à Argonaut Technolo- gies Inc., 887 Industrial Road, Suite G, San Carlos, Califórnia, USA.

(iv) em geral, o curso de reações foi seguido por TLC e os tem-

pos de reação foram determinados apenas para ilustração;

(v) os rendimentos, quando determinados, servem apenas para ilustração e não são necessariamente aqueles que podem ser obtidos por desenvolvimento de processo diligente; as preparações foram repetidas se

for requerido mais material;

(vi) quando determinados, os dados de 1H RMN são menciona- dos e estão sob a forma de valores delta para os principais prótons diagnós- ticos, determinados e, partes por milhão (ppm) relativas a tetrametilsilano (TMS) como um padrão interno, determinado em 400 MHz utilizando perdeu-

tério DMSO (CD3SOCD3) como o solvente, exceto onde estabelecido em contrário; as constantes de acoplamento (J) são determinadas em Hz;

(vii) os símbolos químicos possuem seus significados comuns; unidades SI e símbolos são usados;

(viii) as razoes de solvente são determinadas em porcentagem

por volume;

(ix) os espectros de massa (MS) foram calculados com uma e- nergia de elétrons de 70 elétrons volts no modo de ionização química (APCI) utilizando uma sonda de exposição direta; onde indicado a ionização foi rea- lizada por electrospray (ES); onde os valores de m/z são determinados, ge-

ralmente apenas íons que indicam a massa de origem são relatados, e exce- to onde estabelecido em contrário, o íon de massa determinado é o íon de massa positiva - (M+H)+;

(x) a caracterização de LCMS foi realizada utilizando um par de bombas Gilson 306 com amostrador Gilson 233 XL e espectrômetro de mas-

sas Waters ZMD4000. A LC compreende coluna em simetria de água 4,6x50 C18 com tamanho de partícula de 5 mícrons. Os eluentes eram: A, água com 0,05% de ácido fórmico e B, acetonitrila com 0,05% de ácido fórmico. O gradiente de eluente era de 95% A a 95% B em 6 minutos. Onde indicado, a ionização foi realizada por electrospray (ES); onde os valores de m/z são determinados, geralmente apenas os íons que indicam a massa de origem são relatados, e exceto onde estabelecido em contrário, o íon de massa de- 5 terminado é o íon de massa positiva - (M+H)+;

(xi) os compostos dos Exemplos e Métodos foram denominados utilizando o programa chamado IUPAC junto à Advanced Chemistry Deve- Iopment Inc, versão 6.00; e,

THF (xii) as seguintes abreviações são usadas Tetraidrofura no; DCM Diclorometano DIPE Di-/so-propil éter DIBAL Hidreto de /so-butilalumínio DMSO Dimetilssulfóxido IPA iso-propanol R-BINAP (R)-2,2'-Bis(difenilfosfino)-1,1 '-binaftil TPAP Perrutenato de tetrapropilamônio Mol eq Equivalentes molares Rel vol Volume relativo MTBE Metil terc-butiléter Exemplo 1 4-[3-(1,1 -difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1 -{(1 R,3R)-3-(3,5- difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina

Método A

4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-1,2,4-triazol-4-il]piperidina (21,0 g, 1,1 eq), (3R)-3-(3,5- difluorofenil)-3-(1-metilssulfonil-4-piperidill)propanal (27,5g, 1,0 eq) e 1,2,3-Triazol (5,8ml, 1,2eq) foram aquecidos em refluxo (110oC) em tolueno (412 ml, 10vol) sob condições Dean-Stark durante 3,5 horas, (~1,5ml de água coletada). A reação foi resfriada a 0°C e brometo de 5 metil magnésio (3M em dietiléter) (110,5 ml, 4,0eq) foi então adicionado du- rante 20 minutos, sem permitir que a temperatura interna exceda 20°C (exo- térmica 0°C a 8°C). A reação foi deixada agitar a 20°C durante 1 hora. A re- ação foi resfriada novamente a 0°C, então cuidadosamente extinguida com solução de cloreto de amônio saturada aquosa (250ml, 5vol) (muito exotér- 10 mica O0C a 30°C, após algumas quedas, e muita efervescência de gás). Es- sa foi deixada resfriar novamente a 20°C, então acetato de etila (500ml, 10 vol) foi adicionado. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa ex- traída com acetato de etila (1,0 litro, 20vol). Os orgânicos foram combinados, lavados com água (1,0 litro, 20vol), 50% de salmoura/água (1,0 litro, 20vol), 15 secos (sulfato de magnésio), filtrados e o solvente removido a vácuo obtive- ram 50,2g. Os diastereoisômeros foram separados por cromatografia em coluna sobre o Companion XL (1500g de coluna de sílica) eluindo com 5% a 20% de gradiente de metanol/acetato de etila.

O primeiro diastereômero eluído (isômero A) forneceu 19,5g de sólido branco e o segundo diastereômero eluído (isômero B, composto de título) obteve 21,5g de sólido branco.

Isômero A: 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1S,3F?)-3- (3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina; 1H RMN (400 MHz, DMSO) δ 0,78 (d, 3H), 0,97 a 1,37 (m, 3H), 1,38 a 1,68 (m, 25 2H), 1,70 a 2,31 (m, 12H), 2,31 a 2,75 (m, 7H), 2,75 a 2,91 (m, 4H), 3,39 a 3,52 (m, 1H), 3,52 a 3,67 (m, 1H), 4,14 a 4,32 (m, 1H), 6,87 a 7,12 (m, 3H) Isômero B: (composto de título), 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4- triazol-4-il]-1 -{(1 R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1 -metil-3-[1 - (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina; 1H RMN (400 MHz, DMSO) δ 30 0,92 (d, 3H), 0,97 a 1,25 (m, 2H), 1,25 a 1,37 (m, 1H), 1,48 a 1,92 (m, 6H), 1,91 a 2,02 (m, 2H), 2,05 a 2,34 (m, 6H), 2,44 a 2,68 (m, 7H), 2,69 a 2,88 (m, 4H), 3,46 (d, 1H), 3,57 (d, 1H), 4,13 a 4,25 (m, 1H), 6,84 a 7,14 (m, 3H) Método B

De maneira similar ao Método A, porém utilizando benzotriazol em vez de 1,2,3-Triazol, o Isômero A (rendimento de 11%) e Isômero B (rendimento de 12%) foram preparados.

(3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-(1-meti!ssulfoni!-4-piperidil)propana!

usado como material de partida foi preparado como se segue:

Etapa 1:

Preparação de 1-metanossulfonil-4-(etoxicarbonil)-piperidina

\ / \

SN V-CO2Et

O-^ V_/ 2

Isonipecotato de etila (1 mol eq) foi carregado em um recipiente de reação seguido por uma lavagem de linha de DCM (1 rei vol). Trietilamina (1 mol eq) foi carregada no recipiente seguida por uma lavagem de linha de DCM (1 rei vol). DCM (5 rei vol) foi carregado no recipiente e a mistura de reação resfriada entre O e 5°C. Uma solução de cloreto de metanossulfonil (1 mol eq) em DCM (2 rei vol) seguida por uma lavagem de linha de DCM (1 rei vol) foi adicionada ao recipiente mantendo a temperatura entre 1 e 10°C. A mistura de reação foi agitada entre O e 10°C até a reação ser completada. Água purificada (5 rei vol) foi carregada na mistura de reação e agitada du- rante 15 minutos entre 5 e 10°C. As fases resultantes foram separadas e a fase orgânica foi concentrada a aproximadamente 4,5 rei vol por destilação atmosférica. O concentrado foi clarificado, e então DIPE (10 rei vol) foi adi- cionado e a reação concentrada novamente a aproximadamente 4,5 rei vols por destilação de pressão reduzida. Outra parte de DIPE (10 rei vol) foi adi- cionada e a suspensão resultante foi agitada em temperatura ambiente du- rante pelo menos 60 minutos. O sólido foi isolado por filtração, lavado com DIPE (2 rei vols) e então seco em temperatura ambiente para obter o com- posto do subtítulo e aproximadamente 93% de rendimento.

1H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ 4,05 (q, J= 7,1 Hz, 2H), 3,46 (d, J= 12,0 Hz, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,76 (t, J= 11,5 Hz, 2H), 2,48 a 2,38 (m, IH), 1,90 (d, J= 13,3 Hz, 2H), 1,56 (dd, J= 35,4, 3,5 Hz, 2H), 1,16 (t, J= 7,2 Hz, 3H).

Etapa 2: Preparação de (1-metanossulfonilpiperidin-4-il)metanol

O '—/

1-Metanossulfonil-4-(etoxicarbonil)-piperidina (1 mol eq) foi car- regada em um recipiente de reação seguida por uma lavagem de linha de THF (6 rei vols). A mistura de reação foi resfriada entre 0 e 10°C. Uma solu- ção de hidreto de alumínio e lítio (1M em THF, 0,75mol eq) seguida por uma lavagem de linha de THF (1 rei vol) foi adicionada ao recipiente, mantendo a temperatura entre O0C e 20°C, e então a mistura de reação foi aquecida em temperatura ambiente e agitada até a reação ser completada. A mistura de reação foi resfriada entre 0 e 2°C. Água purificada (1 rei vol) foi então carre- gado no recipiente mantendo a temperatura entre O0 a 10°C. O pH da reação foi ajustada para <2 ao carregar 5M de HCI, mantendo a temperatura entre 0 e 10°C. A mistura de reação foi aquecida em temperatura ambiente, agitada durante pelo menos 15 minutos e então as fases foram separadas. DCM (5 rei vol) foi carregado na fase aquosa, agitado durante pelo menos 15 minu- tos e as fases foram separadas. A primeira fase orgânica (THF) foi concen- trada a aproximadamente 3,5 rei vols por destilação a vácuo a 40°C. A se- gunda fase orgânica (DCM) foi adicionada ao concentrado, as fases separa- das e a fase orgânica concentrada a aproximadamente 3,5 rei vol por desti- lação atmosférica. DIPE (10 rei vol) foi adicionado ao resíduo da destilação a 40 a 45°C. Após a concentração a aproximadamente 5 rei vol por destilação a vácuo, mais DIPE (5 rei vol) foi adicionado e a pasta fluida resultante res- friada em temperatura ambiente e agitada durante aproximadamente 60 mi- nutos. O composto do subtítulo foi isolado por filtração, lavado com DIPE (2 x 1 rei vol) e seco em temperatura ambiente para obter o composto do subtí- tulo em aproximadamente 87% de rendimento.

1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 3,84 (dd, J= 9,6, 2,2 Hz, 2H), 3,54 (d, J= 4,9 Hz, 2H), 2,78 (s, 3H), 2,67 (t, J= 12,0 Hz, 2H), 1,70 - 1,56 (m, 2H), 1,54 (s, 1H), 1,36 (qd, J = 12,5, 4,2 Hz, 2H).

Etapa 3:

Preparação de (1-metanossulfonilpiperidin-4-il)metanol Método A

(1-Metanossulfonilpiperidin-4-il)metanol (1 mol eq) foi dissolvido em DCM (5 rei vol) em um recipiente de reação seguido por uma lavagem de linha de DCM (1,2 rei vol). Clorocromato de piridínio (1 mol eq) como uma 5 pasta fluida em DCM (10 rei vol) foi adicionado seguido por DCM (5 x 1,2 rei vol) como lavagens de linha. A mistura de reação foi agitada durante a noite em temperatura ambiente, após isso, água (18,3 rei vol) foi adicionada e as fases separadas e a fase DCM passada através de uma "placa" curta de sílica eluindo com EtOAc. O solvente foi evaporado do filtrado para deixar o 10 composto de subtítulo como um sólido em aproximadamente 40% de rendi- mento.

Método B

(1-Metanossulfonilpiperidin-4-il)metanol (1 mol eq) e peneiras moleculares (2,5 eq de peso) e TPAP (0,05 mol eq) foram carregados em 15 um recipiente de reação com DCM (30 rei vols). N-óxido de N-Metil-morfolina (1,5 mol eq) foi dissolvido em DCM (5 rei vols) em um recipiente separado e adicionado ao primeiro recipiente, mantendo a temperatura abaixo de 24°C. Uma vez que a reação foi completada a mistura de reação foi filtrada através de celite e o solvente evaporado do filtrado in vacuo para deixar o composto 20 de subtítulo como um sólido branco em aproximadamente 40% de rendimen- to.

Método C

1-Metanossulfonil-4-(etoxicarbonil)-piperidina (1 mol eq) foi pe- sada em um recipiente de reação com DCM (16 rei vol) e resfriada a -77°C. 25 DIBAL (1M em THF, 1,5 mol eq) foi adicionado lentamente, mantendo a temperatura da reação abaixo de -75°C. Após 3 horas outra carga de solu- ção de DIBAL (1,5 mol eq) foi adicionada em baixa temperatura. Uma vez que a reação foi completada a mistura de reação foi extinguida com solução de cloreto de amônio (20% w/w, 2 rei vol), mantendo a temperatura abaixo 30 de -67°C. Após a agitação nessa temperatura durante 30 minutos, HCI (2M, 10

15

20

2 rei vol) foi adicionado, mantendo novamente a temperatura abaixo de - 68°C. A mistura resultante foi deixada se aquecer em temperatura ambiente durante a noite para obter uma pasta fluida branca. Água, HCI (5M) e sal- moura foram adicionados até precipitado ser dissolvido. As camadas foram separadas e o solvente foi removido da camada orgânica por evaporação in vacuo para obter o composto de subtítulo em aproximadamente 65% de rendimento (contaminado com 1-metanossulfonilpiperidin-4-il)metanol). Método D

Uma solução de DCM (5 rei vol) e cloreto de oxalil (3 mol eq) foi resfriada abaixo de -70°C. Em um recipiente separado, DCM (2 rei vol) e DMSO (6 mol eq) foram misturados antes da adição à solução de cloreto de oxalil através de uma seringa, mantendo a temperatura abaixo de -64°C du- rante a adição. Após agitação durante 10 minutos uma solução de (1- metanossulfonilpiperidin-4-il)metanol (1 mol eq) em DCM (5 rei vol) e DMSO (0,5 rei vol) foi adicionada, mantendo a temperatura abaixo de -60°C durante a adição. A mistura de reação foi mantida a -70°C durante 40 minutos antes da adição de trietilamina (7,5 mol eq) lentamente através de uma seringa. A mistura de reação foi deixada aquecer em temperatura ambiente durante a noite. HCI (2M, 5 rei vol) foi adicionado enquanto resfria a reação em um banho de água gelada. DCM (5 rei vol) foi adicionado antes de separar as camadas e lavar a camada de DCM com: HCI (2M, 5 rei vol); então solução de bicarbonato de sódio (saturada, 5 rei vol); e por fim, salmoura (5 rei vol). O solvente orgânico foi removido da fase orgânica in vacuo para deixar o composto de subtítulo em aproximadamente 75% de rendimento.

1HNMR (400 MHz, CDCI3) δ 9,69 (s, 1H), 3,68 a 3,54 (m, 2H), 2,96 (ddd, J= 12,3, 9,7, 2,8 Hz, 2H), 2,78 (s, 3H), 2,43 (dquintet, J= 9,5, 4,7 Hz, 1H), 2,10 a

Etapa 4:

Preparação de iso-propil 3-(1-metanossulfonilpiperidin-4-il)propenoato

2,00 (m, 2H), 1,81 (dtd, J= 13,8, 9,8, 3,9 Hz, 2H).

o (1-Metanossulfonilpiperidin-4-il)metanal (1 mol eq) foi carregado em um recipiente de reação seguido por uma lavagem de linha de tolueno (11 rei vol). Piperidina (0,1 mol eq) foi carregada no recipiente seguida por uma lavagem de linha de tolueno (0,5 rei vol), e a mistura de reação aqueci- 5 da entre 85 e 95°C. Uma solução do ácido iso-propil malônico (1,25 mol eq) em tolueno (preparada como descrito acima) foi adicionada em 10 partes aproximadamente iguais durante 6 a 8 horas e a mistura de reação foi agita- da entre 85 e 95°C até ser completada. A mistura de reação foi então resfri- ada entre 40 e 50°C e HCI (0,5M, 3 rei vol) foi adicionado à reação manten- 10 do a temperatura entre 40 e 50°C. Após agitação durante pelo menos 15 minutos as fases foram separadas. Bicarbonato de sódio (0,5M, 3 rei vol) foi adicionado à fase orgânica, mantendo ainda a temperatura entre 40 e 50°C. A mistura de 2 fases foi agitada durante pelo menos 15 minutos antes de separar as fases e lavar a fase orgânica com água (3 rei vol). A fase orgâni- 15 ca foi então concentrada a aproximadamente 16 rei vols por destilação a vacuo entre 40 e 50°C. Tolueno (3.5 rei vol) foi carregado, a solução clarifi- cada entre 40 e 50°C e então concentrada a aproximadamente 7 rei vol por destilação a vácuo. A mistura foi então resfriada entre 0 e 10°C e agitada durante pelo menos 60 minutos nessa temperatura antes de isolar o com- 20 posto de subtítulo por filtração e lavar o resíduo com tolueno (2 rei vol) entre 0 e 10°C. O sólido foi seco para deixar o composto de subtítulo em aproxi- madamente 59% de rendimento.

1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 6,87 (dd, J= 15,8, 6,5 Hz, IH), 5,81 (dd, J= 15,8, 0,9 Hz, 1H), 5,07 (quintet, J= 6,2 Hz, 1H), 3,82 (d, J= 12,0 Hz, 2H), 2,79 (s, 3H), 2,74 s (td, J= 12,0, 2,4 Hz, 2H), 2,36 a 2,17 (m, 1H), 1,95 a 1,80 (m, 2H), 1,57 (ddd, J= 24,9, 11,7, 4,0 Hz, 2H), 1,27 (d, J= 6,4 Hz, 6H).

Etapa 5:

Preparação de iso-propil (3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-[1-(metilssulfonil)piperi- din-4-il]propanoato Método A: (utilizando ácido 3,5-difluorofenilborônico) Uma solução catalisadora foi preparada ao carregar R-BINAP (0,045 mol eq) e bis(cloreto de 1,5-ciclooctadieno ródio), (0,02 mol eq) a um recipiente seguida por THF (2,8 rei. s vols). A mistura foi agitada para atingir a dissolução total.

5 A um recipiente de reação maior foi carregado iso-propil 3-(1-

metanossulfonilpiperidin-4-il)propenoato (1 mol eq), ácido 3,5-difluorofenilbo- rônico (1,35mol eq) e carbonato de potássio (1,35 mol eq). THF (7,8 rei vols) e IPA (1 mol eq) foram então carregados e a mistura foi aquecida a 60°C. A solução catalisadora foi então adicionada a essa mistura, e uma lavagem de 10 linha de THF (1,4 rei vols) foi usada para facilitar essa transferência. A mistu- ra resultante foi então mantida a 60°C durante 2 horas. A mistura de reação foi resfriada em temperatura ambiente, uma solução de L-cisteína (0,9 rei peso) em água (12 rei vols), foi adicionada. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. As fases foram então separadas e 15 a parte orgânica foi concentrada a uma volume de 3,5 rei vols. IPA (10,5 rei vols) foi então carregado e o lote foi então novamente concentrado a um vo- lume de 3,5 rei vols. Mais IPA (10,5 rei vols) foi carregado, e novamente o lote foi concentrado a um volume de 3,5 rei vols. Por fim, mais 10,5 rei vols de IPA foram carregados, e a mistura resultante foi mantida a 30 a 35°C du- 20 rante 15 a 30 minutos, então aquecida a 70°C. A mistura foi então filtrada em um recipiente de cristalização. Uma lavagem de linha de IPA (1,5 rei vols) foi usada para facilitar a transferência.

Cerca de 1% da solução de cristalização foi removido para pro- porcionar uma amostra de semente. Essa foi cristalizada mediante sustenta- ção.

A solução de cristalização foi resfriada a 50°C, e então foi resfri- ada a 12°C/hora a 20°C. A semente foi adicionada quando a solução de cris- talização estiver a 40°C. A solução de cristalização foi mantida em tempera- tura ambiente durante a noite.

O produto cristalizado foi isolado por filtração por sucção. A massa resultante foi lavada com IPA (3,5 rei vols). A massa lavada foi então seca até a massa constante em uma estufa a vacuo a 50°C para proporcio- nar o composto de subtítulo em 75 % de rendimento.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 0,96 (3H, d, J= 6), 1,02 (3H, d, J= 6), 1,10 (1H, qd, J= 12,5 e 4), 1,18 (1H, qd, J= 12,5 e 4), 1,33 (1H, d, J= 12,5), 1,60 (1H, m), 1,88 (IH, d, J=12,5), 2,49-2,66 (3H, m), 2,80 (1H, dd, J= 15 e 5), 2,81 (3H, s), 2,91 (IH, m), 3,46 (1H, d, J= 12), 3,57 (1H, d, J= 12), 4,71 (1H, septet, J= 6), 6,98 (2H, dd, J = 8 e 1,5), 7,05 (1H, tt, J= 9,5 e 1,5).

Método B: (utilizando 2-(3,5-difluorofenil)-5,5-dimetil-1,3,2-dioxaborinano)

Uma solução catalisadora foi preparada ao carregar R-BINAP (0,035 mol eq) e bis(cloreto de 1,5-ciclooctadieno ródio), (0,015 mol eq) a um recipiente seguida por THF (2,0 rei. vols). A mistura foi agitada para atingir a dissolução total.

A um recipiente de reação maior foi carregado /'so-propil 3-(1- metanossulfonilpiperidin-4-il)propenoato (1 mol eq), 2-(3,5-difluorofenil)-5,5- dimetil-1,3,2-dioxaborinano (1,5mol eq) e carbonato de potássio (0,2 mol eq). THF (10 rei vols) e IPA (1,1 mol eq) foram então carregados e a mistura foi 20 aquecida a 60°C. A solução catalisadora foi então adicionada a essa mistu- ra, e a mistura de reação foi mantida a 60 a 66°C durante 2 horas. A mistura de reação crua foi concentrada in vacuo. O resíduo foi abundantemente dis- solvido em MTBE, e essa solução foi filtrada através de uma placa de sílica. A solução resultante foi concentrada in vacuo e foi triturada utilizando//so- 25 hexano e MTBE. O sólido resultante foi coletado por filtração, e seco durante a noite em uma estufa à vácuo a 40°C. O composto do título foi obtido em 67% de rendimento.

Etapa 6:

Preparação de (3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-[1 -(metilssulfonil)piperidin-4-il]pro- pan-1-ol Hidreto de diisobutilalumínio (1M em tetraidrofurano (DIBAL-H) (5,8 litros, 3,5eq) foi adicionado por gotejamento durante 45 minutos, a uma solução de /'so-propil (3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4- il]propanoato (646g, 1,0 eq) em tetraidrofurano (6,5 litros, 10 vol) a 0°C, mantendo a temperatura abaixo de 5°C. A reação foi agitada a 0°C durante

3 horas. A reação foi resfriada a -15°C. Metanol (646ml, 1vol) foi adicionado por gotejamento à reação durante 15 minutos. A mistura foi agitada durante 30 minutos até ser resfriada novamente a -10°C.

Uma solução saturada aquosa de tartrato de sódio e potássio tetra-hidratado (2900g, 4,5wt) em água (8,1 litros, 12,5vol) foi então adicio- nada de forma bastante cuidadosa, mantendo a temperatura abaixo de 10°C (exotérmica -10°C - +5°C, quando o precipitado começar a se formar a exo- terma aumenta muito).

Acetato de etila (6,5 litros, 10 vol) foi então adicionado e a mistu- ra agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos. Essa foi então fil- trada através de uma placa de celite e lavada com acetato de etila (6,5 litros, vol). A camada aquosa foi separada e extraída com acetato de etila (2 x

10,0 litros). Os orgânicos foram combinados e lavados com 50% de á- gua/salmoura (2 x 16,0 litros), secos (sulfato de magnésio) e filtrados. O vo- 20 lume foi reduzido in vacuo para metade e então esse foi passado através de uma placa de sílica (~1000g, ~1wt) lavado com acetato de etila (8,0 litros, 8vol) e, por fim, o solvente foi removido in vacuo para obter um sólido bran- co. A recristalização de acetato de etila/isoexano forneceu o composto de subtítulo como um sólido branco (96%).

1H RMN (400 MHz, DMSO) δ 0,96 a 1,23 (2H, m), 1,26 a 1,42 (1H, m), 1,51 a 1,78 (2H, m), 1,85 a 2,03 (2H, m), 2,42 a 2,72 (3H, m), 2,86 (3H, s), 2,99 a 3,14 (1H, m), 3,19 (1H, qd), 3,45 (1H, d), 3,57 (1H, d), 4,38 (1H, t), 6,84 a 7,13 (3Η, m)

Etapa 7:

Preparação de (3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-(1-metilssulfonil-4-piperidil)pro- panai

A uma mistura de (3R)-3-(3,5-Difluorofenil)-3-[1-(metilssulfo-

nil)piperidin-4-il]propan-1-ol (258g, 1,0 eq), acetato de sódio (114g, 1,8eq) e N-óxido de tetra-metilpiperidina (1,2g, 0,01 eq) em diclorometano (5,0 litros, 20vol), resfriado a -5°C, foi adicionado a uma suspensão de ácido tricloroi- socianúrico (189g, 1,05eq) em diclorometano (2,5 litros, 10 vol) durante 20 10 minutos em lotes de ~50g (exoterma observada -5°C - +5°C). A reação foi agitada a 2°C durante 90 minutos. A reação foi filtrada e lavada com diclo- rometano (2,5 litros, 10 vol). O solvente foi removido in vacuo para obter um resíduo avermelhado (308g). O resíduo foi dissolvido em diclorometano (500ml) e um precipitado sólido fino foi filtrado através de uma placa de celi- 15 te (250g)/sílica (250g) (celite no fundo) e lavado com 30% de acetato de eti- la/diclorometano (5,0 litro, 20vol). O solvente foi removido in vacuo para dei- xar um óleo amarelo que foi purificado sobre uma coluna de sílica de 1,5 kg Novasep, eluindo inicialmente com 5% de acetato de etila/diclorometano, então um gradiente de até 30% de acetato de etila/diclorometano. As frações 20 de produto forneceram o composto de subtítulo como um sólido branco (174g, 68% de rendimento).

1H RMN (400 MHz, DMSO) δ 0,99 a 1,24 (2H, m), 1,37 (1H, d), 1,60 (1H, m), 1,84 (1H, d), 2,44 a 2,68 (2H, m), 2,73 a 3,02 (5H, m), 3,06 a 3,17 (1H, m), 3,54 (2H, m), 6,94 a 7,13 (3H, m), 9,55 (1H, s).

Intermediário 1:

Preparação de 2,2-difluoropropanoidrazida A uma solução de monoidrato de hidrazina (186ml) em etanol (2,5L), resfriara a -10°C, foi adicionado 2,2-difluoropropanoto de etila (500g) durante 45 minutos, mantendo a temperatura abaixo de 15°C. A reação foi então elevada para 25°C durante a noite e então aquecida a 35°C durante 2 5 horas. A reação foi então reduzida in vitro e misturada com tolueno duas ve- zes para obter um sólido. Esse foi filtrado e lavado com dietil éter/iso-hexano para obter o produto de título. Rendimento (384g, 85%).

1H RMN (400 MHz1 CDCI3) δ 1,8 (3H, t), 3,8 (2H, bs), 7,9 (IH, bs) Intermediário 2:

Preparação de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-1,2,4-triazol-4-il]piperidina

Etapa 1:

Preparação de N-(1-benzil-4-piperidil)acetamida

1-benzilpiperidin-4-amina (400g) foi suspensa em diclorometano (1,5L) em temperatura ambiente e anidrido acético (225,3g) foi adicionado 15 em tal taxa para induzir a reação a um refluxo constante. A reação foi então submetida a refluxo durante 1 hora antes do resfriamento a 10°C e adição de 4M de solução de hidróxido de sódio. A camada de diclorometano foi se- parada e seca sobre sulfato de magnésio, filtrada e reduzida in vacuo até o produto começar a se cristalizar fora da solução. Dietil éter foi então adicio- 20 nado para precipitar o produto, esse foi então agitado até esfriar e, então, filtrado para obter um sólido branco. Rendimento de 478g, (98%).

1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 1,45 (2H, m), 1,9 (2H, m), 1,95 (3H, s), 2,15 (2H, m), 2,8 (2H, m), 3,45 (2H, s), 3,8 (IH, m), 5,4 (1H, bs), 7,3 (5H, m). Etapa 2:

Preparação de 1 -benzil-4-[3-(1,1 -difluoroetil)-5-metil-1,2,4-triazol-4-il]piperi- dina

Uma solução de N-(1-benzil-4-piperidil)acetamida (478,Og, 1,0 eq) em diclorometano (7,2 litros, 15 vol) foi adicionada por gotejamento a uma solução de pentacloreto de fósforo (557g, 1,3eq) em diclorometano (9,6 litros, 20vol) a 0°C durante 20 minutos (uma leve exoterma observada 0 a 5°C). A reação foi deixada agitar a 0°C durante 30 minutos antes de ser a- quecida a 25°C e deixada agitar durante 2 horas. A reação foi novamente resfriada a 0°C e uma solução de 2,2-difluoropropanoidrazida (383g, 1,5eq) em diclorometano (4,8 litros, 10 vol) foi adicionada por gotejamento durante min, a reação foi aquecida a 25°C e agitada durante 18 horas. A reação foi resfriada a 0°C e basificada com 2M de hidróxido de sódio aquoso (11,5 litros, 24vol) a pH 12. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com diclorometano (12,0 litros, 25vol). Todos os orgânicos foram combinados e secos (sulfato de magnésio), filtrados e o solvente removido in vacuo para obter um sólido branco sujo: 675g. O sólido foi transformado em pasta fluido em tolueno (20,0 litros, 40vol), ácido acético (480ml, 1vol) foi adicionado e a reação aquecida para refluxo (~105°C) durante 3 horas. A reação foi resfriada em temperatura ambiente e agitada durante 18 horas. A mistura foi então reduzida em volume para um quarto. Essa foi basificada com 2M de hidróxido de sódio aquoso (10,0 litros, 21vol) e extraída com di- clorometano (2 x 7,5 litros, 2 x 16vol). Os orgânicos foram combinados e la- vados com 50% de salmoura/água (13,0 litros, 27vol), secos (sulfato de magnésio), filtrados e o solvente removido in vacuo para obter o composto de subtítulo como um sólido branco sujo: 615g , 93% de rendimento.

1H RMN (400 MHz, DMSO) δ 1,71-1,90 (2H, m), 1,95-2,29 (7H, m), 2,46- 2,66 (3H, m), 2,97 (2H, d), 3,46-3,63 (2H, m), 4,31 (1H, q), 7,06-7,43 (5H, m). Etapa 3:

Preparação de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-1,2,4-triazol-4-il]piperidina

A uma solução de 1-benzil-4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-1,2,4- triazol-4-il]piperidina (615g) em etanol (6,15L) sob uma atmosfera de argônio 5 foram adicionados 10% de paládio sobre carbono (123g). A mistura resultan- te foi hidrogenada utilizando pressão de 5 Barr a 70°C durante 3 horas. A mistura foi resfriada e filtrada através de uma placa de Celite, lavada com quantidades adicionais de etanol. Os orgânicos foram removidos in vacuo e o sólido resultante foi misturado com tolueno (2x 1,2L) para obter o compos- 10 to de título (436g, 99% de rendimento).

1HNMR (400 MHz, DMSO) δ 1,66 a 1,80 (2H, m), 1,91 a 2,06 (2H, m), 2,18 (3H, t), 2,43 a 2,62 (5H, m), 3,02 a 3,14 (2H, m), 4,38 (1H, q).

Exemplo 2:

A capacidade de o composto da presente invenção inibir a Iiga- ção de ΜΙΡ-1β (CCL-4) foi medida:

Uma linhagem de células T alorreativa foi gerada por exposição de células mononucleares do sangue periférico humanas (PBMCs) a fibro- blastos L-DR4/B7 (imobilizados com fixação de glutaraldeído e irradiação) e expansão subsequente com anti-CD3 e IL-2 durante 14 dias. As células Alo- 20 T resultantes foram congeladas. Quando requerido, as células foram desen- volvidas e desafiadas novamente com PBMCs HLA-DR4+ve irradiadas e expandidas com anti-CD3 e IL-2. Após 21 a 34 dias de cultura, as membra- nas foram preparadas a partir das células. Essas membranas foram incuba- das em placas de 96 poços com 2nM do antagonista CCR5 radiomarcado 25 [3H]1-{(3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-[4-(metilssulfonil)fenil]propil}-4-(2-{[4-

(metilssulfonil)fenil]sulfonil}etil)piperidina e várias concentrações do compos- to da invenção durante 2 horas em temperatura ambiente. As placas foram então colhidas em placas de filtro GF/B (que foram pré-embebidas em 0,3% de PEI contendo 0,2% de BSA durante 10 min a 4°C) utilizando um coletor Packard Unifilter que utiliza 10 etapas de lavagem. A quantidade de [3H]1- {(3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-[4-(metilssulfonil)fenil]propil}-4-(2-{[4- (metilssulfonil)fenil]sulfonil}etil)piperidina mantida sobre as placas de filtro foi determinada por contagem de cintilação. As curvas de competição foram 5 obtidas pelo composto da invenção e a concentração que deslocou 50% da 1-{(3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-[4-(metilssulfonil)fenil]propil}-4-(2-{[4- (metilssulfonil)fenil]sulfonil}etil)piperidina ligada foi calculada (IC50).

Os resultados desse teste de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-

1,2,4-triazol-4-il]-1 -{(1 R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1 -metil-3-[1 - (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina e o Composto Comparador A da invenção estão apresentados na Tabela I.

Tabela I

Composto IC50 (μΜ) Composto Comparador 0,039 4-[3-(1,1 -difluoroetil)-5-metil-4/+1,2,4-triazol-4-il]-1 -{(1 R,3R)- 0,0034 3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4- il]propil}piperidina Exemplo 3

A capacidade de o composto da presente invenção inibir a qui- miotaxia de células-T em resposta a ΜΙΡ-1β (CCL-4) foi medida:

Uma linhagem de células T alorreativa foi gerada por exposição de células mononucleares do sangue periférico humanas (PBMCs) a fibro- blastos L-DR4/B7 (imobilizados com fixação de glutaraldeído e irradiação) e expansão subsequente com IL-2 e anti-CD3. Quando requerido, as células 20 foram desenvolvidas e desafiadas novamente com PBMCs HLA-DR4+ve irradiadas e expandidas com anti-CD3 e IL-2. As células foram usadas entre o 21° e 34° dia. 1nM de ΜΙΡ-1β mais as concentrações variadas do antago- nista CCR5 [3H]1-{(3R)-3-(3,5-difluorofenil)-3-[4-(metilssulfonil)fenil]propil}-4- (2-{[4-(metilssulfonil)fenil]sulfonil}etil)piperidina foram colocados em tampão 25 de análise no fundo de uma placa de 96 poços de quimiotaxia Neuroprobe Chemo TX e as células que foram carregadas com um corante fluorescente e pré-incubadas com concentração variada do antagonista CCR5 foram pi- petadas sobre a superfície de uma membrana com tamanho de poro de 5 mícrons de acordo com as especificações dos fabricantes. Após 1 hora de incubação com o composto da invenção a 37°C, as células não-migradas foram lavadas fora da superfície da placa com PBS e as células não- 5 migradas quantificadas pela leitura de um leitor de placa fluorescente de 96 poços. As curvas de inibição foram obtidas pelo composto da invenção e a concentração que inibiu 50% da resposta quimiotática foi calculada (IC50).

Os resultados desse teste de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-

1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1ft,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1- (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina e o Composto Comparador A da invenção estão apresentados na Tabela I.

Tabela Il

Composto Ι050(μΜ) Composto Comparador A 0,068 4-[3-(1,1 -difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1 - 0,0021 {(1R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1- (metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina

Claims (6)

1. 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1/?,3/?)-3- (3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina (I): <formula>formula see original document page 35</formula> ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa.

2. Processo para a preparação de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4H-1,2l4-triazol-4-il]-1-{(1R,3/?)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, que compreende: reação de um composto da fórmula (II): <formula>formula see original document page 35</formula> com um composto da fórmula (III) na presença de um triazol apropriado: <formula>formula see original document page 35</formula> seguida pela reação com um reagente organometálico apropriado.

3. Composição farmacêutica que compreende 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1-{(1f?,3ft)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina, como definido na reivindicação1, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, e um adjuvante, diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

4. 4-[3-(1,1 -difluoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1 -{(1 R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4-il]propil}piperidina. como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável dessa, para uso como um medicamento.

5. Uso de 4-[3-(1,1-difluoroetil)-5-metil-4/-/-1,2,4-triazol-4-il]-1- {(1R,3/?)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4- il]propil}piperidina, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuti- camente aceitável dessa, na fabricação de um medicamento para o trata- mento de um estado de doença mediada por CCR5.

6. Método para tratar um estado de doença mediada por CCR5 que compreende administrar a um paciente necessitado de tal tratamento uma quantidade eficaz de 4-[3-(1,1-difiuoroetil)-5-metil-4H-1,2,4-triazol-4-il]-1- {(1R,3R)-3-(3,5-difluorofenil)-1-metil-3-[1-(metilssulfonil)piperidin-4- il]propil}piperidina, como definido na reivindicação 1.