BRPI0720633A2 - Composto e composições farmacêutica - Google Patents

Composto e composições farmacêutica Download PDF

Info

Publication number
BRPI0720633A2
BRPI0720633A2 BRPI0720633-0A BRPI0720633A BRPI0720633A2 BR PI0720633 A2 BRPI0720633 A2 BR PI0720633A2 BR PI0720633 A BRPI0720633 A BR PI0720633A BR PI0720633 A2 BRPI0720633 A2 BR PI0720633A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
phenyl
thien
trifluoromethyl
propyl
phenoxy
Prior art date
Application number
BRPI0720633-0A
Other languages
English (en)
Inventor
Jean-Francois Delhomel
Original Assignee
Genfit
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Genfit filed Critical Genfit
Publication of BRPI0720633A2 publication Critical patent/BRPI0720633A2/pt
Publication of BRPI0720633B1 publication Critical patent/BRPI0720633B1/pt
Publication of BRPI0720633B8 publication Critical patent/BRPI0720633B8/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/22—Radicals substituted by doubly bound hetero atoms, or by two hetero atoms other than halogen singly bound to the same carbon atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)

Description

I "COMPOSTOS E COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA"
A presente invenção refere-se aos compostos derivados de 3- fenil-l-(feniltienil)propano-l-ona e de 3-fenil-l-(fenilfuranil)propano-l-ona substituídos, às composições farmacêuticas compreendendo os mesmos, 5 assim como suas aplicações terapêuticas, notadamente nos domínios da saúde humana e animal.
Os inventores evidenciaram, de maneira surpreendente, que os compostos de acordo com a invenção possuem de maneira intrínseca propriedades agonistas PPAR (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor). As moléculas descritas na invenção são então de um interesse
particular para tratar as complicações associadas com a síndrome metabólica, aterosclerose, às doenças cardiovasculares, insulino-resistência, obesidade, hipertensão, diabete, as dislipidemias, as doenças inflamatórias (asma, etc.), isquemia cerebral, as doenças auto-imunes, as patologias neurodegenerativas 15 (Alzheimer, etc.), os cânceres, etc., assim como para permitir a diminuição do risco cardiovascular global. Preferivelmente, os compostos de acordo com a invenção são utilizados para o tratamento das dislipidemias e a melhoria do risco global cardiovascular.
A diabete, a obesidade e as dislipidemias (taxa plasmática de 20 colesterol LDL e de triglicerídeos elevada, taxa plasmática de colesterol HDL baixa, etc.) fazem parte dos fatores de risco cardiovasculares claramente identificados que predispõem um indivíduo a desenvolver uma patologia cardiovascular (Mensah M, 2004). Esses fatores de risco se adicionam aos fatores de risco ligados ao modo de vida como o tabagismo, a inatividade 25 física e os regimes alimentares desequilibrados. Um efeito sinérgico existe entre estes diferentes fatores: a presença concomitante de vários entre os mesmos conduz a um agravamento dramático do risco cardiovascular e convém então falar de risco global (“global risk”) para as doenças cardiovasculares. A predominância dos dislipidemias atingia 43,6% da população em 2004 nos principais países desenvolvidos. A predominância da diabete, atualmente em nítido aumento, está prestes a tomar-se cada vez mais significativa na epidemiologia das doenças cardiovasculares: a predominância da diabete é, com efeito, considerada em 7,6% da população para 2010 (Fox- Tucker J, 2005).
De acordo com Internacional Atherosclerosis Society (International Atherosclerosis Society, 2003), as doenças cardiovasculares que representam a primeira causa de mortalidade nos países industrializados ficam cada vez mais freqüentes nos países em vias de desenvolvimento. Estas 10 doenças são notadamente as doenças coronarianas, isquemia cerebral e as doenças arteriais periféricas.
Estes dados justificam então a adoção de medidas enérgicas para reduzir significativamente a morbidade e a mortalidade devido às patologias cardiovasculares e a necessidade de encontrar tratamentos eficazes, 15 complementares de uma modificação dos hábitos de vida, agindo sobre os fatores de risco das doenças cardiovasculares e sobre as suas conseqüências se tomam uma urgência mundial.
Os compostos de acordo com a invenção, devido às suas propriedades agonistas PPAR, apresentam um interesse específico para o tratamento das patologias ligadas às desregulações do metabolismo lipídico e/ou glicídico, como diabetes, obesidade, dislipidemias ou inflamação, assim para a diminuição do risco cardiovascular global.
Os PPAR (α, γ e δ) são com efeito conhecidos por serem implicados neste tipo de patologias (Kota BP et al., 2005): os ligandos para 25 estes receptores são comercializados para tratar tais patologias (Lefebvre P et al., 2006) e numerosos moduladores PPAR, agonistas ou antagônicos, seletivos ou não, estão atualmente em desenvolvimento farmacêutico avançado. Um modulador PPAR tendo efeitos benéficos sobre a resistência à insulina, obesidade, dislipidemias, hipertensão e/ou a inflamação poderia ser utilizado para o tratamento da síndrome metabólica (ou síndrome X) (Liu Y e Miller A, 2005).A família PPAR compreende três isoformas, designadas α, γ e δ (igualmente chamado β), cada uma codificada por um gene diferente. Estes receptores fazem parte da superfamília dos receptores nucleares e dos 5 fatores de transcrição que são ativados pela ligação de certos ácidos graxos e/ou seus metabólicos lipídicos. Os PPAR ativados formam heterodímeros com os receptores do ácido retinóico 9-cis (RXR ou Retinoid X Receptor) e fixam-se sobre elementos de resposta específicos (PPRE ou Peroxisome Proliferator Response Element) em nível do promotor dos seus genes alvos, IO permitindo assim o controle da transcrição.
PPARa controla principalmente o metabolismo lipídico (hepático e muscular) e a homeostase da glicose, por um controle direto da transcrição de genes que codificam para as proteínas implicadas na homeostase lipídica. Exerce efeitos antiinflamatórios e antiproliferativos e 15 previne os efeitos proaterogênicos da acumulação do colesterol nos macrófagos estimulando o fluxo do colesterol (Lefebvre P, Chinatti G, Fruchart JC and Staels B, 2006). Os fibratos (fenofibrato, bezafibrato, ciprofibrato, gemfibrozil), por intermédio de PPARa, são assim utilizados em clínica para o tratamento de certas dislipidemias reduzindo os triglicerídeo e 20 aumentando as taxas plasmáticas de colesterol HDL (High Density Lipoprotein).
PPARy é implicado para o metabolismo lipídico dos adipócitos maduros (regulador-chave da adipogênese), na homeostase da glicose (notadamente na resistência à insulina), na inflamação, na acumulação de 25 colesterol no nível dos macrófagos e na proliferação celular (Lehrke M and Lazar MA, 2005). PPARy desempenha consequentemente um papel na patogênese da obesidade, da insulino-resistência e da diabete. As tiazolidinadionas (Rosiglitazona, Troglitazona, etc.) são ligadas ao receptor PPARy utilizados para o tratamento da diabete de tipo 2. Existem ligandos de PPA Rô atualmente em desenvolvimento (por exemplo GW501516 (No. de Registro CAS 317318-70-0)), mas nenhum ligando PPARÔ não é atualmente utilizado como medicamento. Este receptor é um alvo atrativo para o desenvolvimento de medicamentos utilizados para o 5 tratamento dos fatores de riscos associados à síndrome metabólica e à aterosclerose como os dislipidemias, obesidade, a inflamação e a resistência à insulina. PPARÔ é com efeito implicado para o controle dos metabolismos lipídico e glicídico, no equilíbrio energético, na proliferação e na diferenciação de neurônios, e na resposta inflamatória (Gross B et al., 2005).
Além do papel direto desempenhado pela ligação PPAR sobre
a regulação do metabolismo dos lipídios e dos glicídeos, estas moléculas têm um espectro de ação pleiotrópica devido à grande diversidade dos genes alvos de PPAR. Estas múltiplas propriedades são alvos terapêuticos de interesse para o tratamento de diversas patologias, notadamente das patologias 15 cardiometabólicas (isto é patologias cardiovasculares e metabólicas) assim para permitir a diminuição risco cardiovascular global.
Os ligandos de PPAR têm um papel neuroprotetor no mal de Alzheimer, esclerose em placa, mal de Parkinson e mais geralmente em qualquer patologia que implica uma morte ou uma deterioração neuronal, 20 quer trata-se dos neurônios do sistema nervoso central ou periférico, uma morte ou uma deterioração dos oligodendrócitos, uma morte ou uma deterioração de células gliais, uma inflamação das células gliais (ou seja os astrócitos, a microglia ou os oligodendrócitos) ou as células de Schwann. Assim, foi recentemente mostrado que os agonistas de PPAR5 permitiam 25 preservar a aprendizagem e a memória em ratos em que a doença de Alzheimer tinha sido induzida (de Ia Monte SM et al., 2006). Foi mostrado igualmente que a administração oral de agonistas de PPARô reduzia os sintomas clínicos e a ativação da inflamação astroglial e microglial em um exemplar de esclerose em placas (Polak, 2005). Os compostos de acordo com a invenção, por suas propriedades agonistas de PPAR, representam, então, um instrumento terapêutico vantajoso para a melhoria das patologias ligadas às desregulações do metabolismo lipídico e/ou glicídico, para a diminuição do risco cardiovascular global assim para a neuroproteção.
Notadamente, os compostos de acordo com a invenção possuem propriedades agonistas PPAR5 e PPARa e apresentam, portanto, um interesse para o tratamento das patologias metabólicas como da síndrome metabólica (entre as quais as características são obesidade (em especial a 10 obesidade abdominal), uma concentração anormal de lipídios sanguíneos (taxa elevada de triglicerídeos e/ou taxas baixas de colesterol HDL (dislipidemia)), glicemia elevada e/ou uma resistência a insulina e hipertensão) e para o tratamento das dislipidemias.
A presente invenção tem como objeto os compostos derivados de 3-fenil-l-(feniltienil)propano-l-ona e de 3-fenil-l-(fenilfuranil)propano-l- ona substituídos de fórmula geral (!) a seguir:
(I)
na qual:
Xl representa um halogênio, um grupamento Rl, -SRl ou
-ORl;
X2 representa um átomo de enxofre ou de oxigênio;
X3 representa um halogênio, um grupamento R3, -SR3 ou
-OR3;
X4 representa um halogênio, um grupamento R4, -SR4 ou -OR4;
Χ5 representa um grupamento R5, -SR5 ou -OR5;
X6 representa um halogênio, um grupamento R6, -SR6 ou
-OR6;
X7 representa um halogênio, um grupamento R7, -SR7 ou
-OR7;
X8 representa um grupamento R8;
Rl, R3, R4, R6, R7 e R8, idênticos ou diferentes, representando um hidrogênio ou um grupamento alquila;
R5 representando um grupamento alquila substituído por um
ou vários substituinte(s) do grupo 1 ou do grupo 2;
R5 podendo, além da ou das substituições descritas acima, ser substituído por um grupamento cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila tal como definidos abaixo;
A representa:
(i) um grupamento carbonila (CO),
(ii) um grupamento oxima (C=N-O-H) ou éter de oxima
(C=N-O-Rl 1),
(iii) um grupamento -CR9R10, R9 e RlO diferentes, representando um hidrogênio, um grupamento alquila ou um grupamento
-ORl 1,
Rll representando um hidrogênio ou um grupamento arila, heterocicloalquila, ou heteroarila tal como definidos abaixo ou um grupamento alquila, substituído ou não por um grupamento cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila tal como definido abaixo;
B representa:
(i) um grupamento alquila não substituído, saturado apresentando dois átomos de carbono (CH2-CH2),
(ii) um grupamento alceno não substituído, apresentando dois átomos de carbono (CH=CH),
(iii) um grupamento alcino apresentando dois átomos de carbono (C=C);
os substituintes do grupo 1 são escolhidos entre -COOR12 e
-CONRl 2R13;
os substituintes do grupo 2 são escolhidos entre -SO3H e -
S02NR12R13;
Rl2 e Rl 3, idênticos ou diferentes, representando um hidrogênio ou um radical alquila não substituído;
seus estereoisômeros (diastereoisômeros, enantiômeros), puros
ou em mistura, misturas racêmicas, isômeros geométricos, tautômeros, sais, hidratos, solvatos, formas sólidas assim como suas misturas.
No quadro da presente invenção:
- o termo « alquila » designa um radical hidrocarboneto saturado, linear, ramificado, halogênio ou não, tendo mais particularmente de
1 a 24 átomos de carbono, de preferência de 1 a 10, e tendo mais particularmente 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 átomos de carbono. Podemos citar, por exemplo, os radicais metila, trifluorometila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, terciobutila, sec-butila, pentila, neopentila ou n- hexila.
Em particular, um radical alquila ou alcenila tendo 1 a 4 átomos de carbono é de preferência escolhido entre os grupos metila, etila, n- propila, w-butila, isopropila, sec-butila, isobutila terciobutila e seus derivados insaturados, apresentando pelo menos uma ligação secundário (como que notadamente: CH=CH).
- o termo « cicloalquila » designa um grupo alquila tal como foi definido acima e formando pelo menos um ciclo. Podemos citar, à título de grupos cicloalquila tendo de 3 a 8 átomos de carbono, o ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila e ciclo-octila. - o termo « heterocicloalquila » designa um grupo alquila saturado ou não e formando pelo menos um ciclo interrompido por um ou vários heteroátomos escolhidos entre N, O, S ou P. Podemos citar, à título de grupos heterocicloalquila, a aziridina, a pirrolidina, o tetraidrotiofeno, a
imidazolina, a piperidina, a piperazina e a morfolina.
- o termo « arila » faz referência aos grupos aromáticos compreendendo de preferência 5 a 14 átomos de carbono, vantajosamente 6 a
14 átomos de carbono (isto é 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ou 14 átomos de carbono), são geralmente mono- ou bicíclicas. Podemos citar como exemplo a
fenila, benzila, a-naftila, β-naftila, antracenila ou fluorenila. Para o quadro da presente invenção, os grupamentos arilas podem serem substituídos por um ou vários substituintes, idênticos ou diferentes. Entre os substituintes dos grupos arilas, podemos citar à título de exemplo, os halogênios, os grupamentos alquila (tal como definidas acima) e alquilóxi (definido como 15 uma cadeia alquila (tal como definida acima) ligada a molécula por intermédio de um oxigênio (ligação éter)) os grupamentos alquiltio (definido como uma cadeia alquila (tal como definida acima) ligada a molécula por intermédio de um enxofre (ligação tioéter)) tal que metila, trifluorometila, metóxi e trifluorometóxi, metiltio e trifluorometiltio, as aminas, os 20 grupamentos nitro, os grupamentos hidróxi, os grupamentos arila, heteroarila e heterociclo.
-o termo « heteroarila » faz referência aos grupos aromáticos compreendendo de preferência 3 a 14 átomos de carbono, vantajosamente 3 a 8 átomos de carbono (isto é 3, 4, 6, 7 ou 8 átomos de carbono), interrompidos 25 por um ou vários heteroátomos escolhidos entre N, O, S ou P. Podemos citar, à título de grupos heteroarilas tendo de 3 a 8 átomos de carbono, o pirrol, o imidazol, e a piridina.
Entre os substituintes dos grupos heteroarilas, podemos citar à título de exemplo, os halogênios, os grupamentos alquila (tal como definidas acima) e alquilóxi (definido como uma cadeia alquila (tal como definida acima) ligada a molécula por intermédio de um oxigênio (ligação éter)) os grupamentos alquiltio (definido como uma cadeia alquila (tal como definida acima) ligada a molécula por intermédio de um enxofre (ligação tioéter)). Dos 5 exemplos desses substituintes são o metila, o trifluorometila, o metóxi e o trifluorometóxi, o metiltio e o trifluorometiltio, as aminas, os grupamentos nitro, os grupamentos hidróxi, os grupamentos arila, heteroarila e heterociclo.
Os átomos de halogênio são escolhidos entre os átomos de bromo, flúor, iodo, cloro.
Para o quadro da presente invenção, na fórmula geral (I), os
átomos do ciclo II são numerados a partir do átomo X2, portando o número 1, os outros átomos do ciclo sendo numerados a partir do carbono do ciclo II ligado ao grupamento A-B. Assim, o carbono do ciclo II ligado ao grupamento A-B é o carbono 2 (ou C2), o carbono adjacente ao C2 é o carbono 3 (ou C3), etc.
Um aspecto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual A representa um grupamento carbonila (CO).
Um outro aspecto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual A representa um grupamento oxima 20 (C=N-O-H) ou éter de oxima (C=N-O-Rll), Rll representando um grupamento alquila, ramificado ou linear, notadamente um grupamento alquila tendo 1 a 7 átomos de carbono, substituído ou não por um grupamento cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila. Preferivelmente, Rll representa um grupamento metila.
Em um modo particular de realização, quando A representa
um grupamento C=N-O-Rll, Rll é um grupamento alquila tendo 1 a 7 átomos de carbono substituído por um grupamento arila, notadamente um grupamento fenila. De maneira particularmente selecionadas, Rll é um grupamento metila substituído por um grupamento fenila, em de outros termos Rl 1 é um grupamento benzila.
Um outro aspecto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual A representa um grupamento -CR9R10, R9 representando um hidrogênio e RlO representando um 5 grupamento hidróxi, um grupamento alquila ou um grupamento -ORl I, Rll representando um grupamento alquila, substituído ou não por um grupamento cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila. Os referidos grupamentos alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila são eventualmente halogenados.
Em particular, Rll representa um grupamento alquila, linear
ou ramificado, tendo 1 a 7 átomos de carbono, de preferência 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono, de preferência 1 ou 2 átomos de carbono, vantajosamente Rll representa o grupamento metila ou etila. por exemplo, Rl 1 pode igualmente ser um isopropila.
Vantajosamente Rll é substituído por um grupamento
cicloalquila, notadamente ciclo-hexila, um grupamento arila, notadamente fenila, um grupamento heterocíclica ou heteroarila, notadamente piridinila, os referidos grupamento cicloalquila, arila, heterocíclica ou heteroarila sendo eventualmente halogenados. De maneira ainda mais preferencial, Rll 20 representa um grupamento alquila, compreendendo de preferência um átomo de carbono substituído por um grupamento fenila, iodofenila, ciclo-hexila, ou piridinila.
Um outro aspecto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual A representa um grupamento -CR9R10, R9 representando um hidrogênio e RlO representando um grupamento hidróxi.
Um aspecto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual B representa um grupamento alquila não substituído, saturado compreendendo dois átomos de carbono (CH2-CH2). Um outro aspecto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual X5 representa um grupamento R5, -OR5 ou -SR5, R5 representando um grupamento alquila substituído por um substituinte do grupo 1.
Ainda mais preferivelmente, X5 representa um grupamento
-OR5 no qual R5 representa um grupamento alquila substituído por um substituinte do grupo I. De preferência, o substituinte do grupo 1 é — COOR12.
De preferência, R5 representa um radical alquila formado de 10 um cadeia carbonada linear e saturado tendo 1 a 4 átomos de carbono, a referida cadeia sendo ligada por sua extremidade oposta ao grupamento fenila (III), a um substituinte do grupo 1. A referida cadeia pode ser ramificada com pelo menos um grupamento alquila ou alcenila tendo 1 a 4 átomos de carbono, ou substituída por um grupamento fenila.
De preferência, Rl 2 e Rl 3, idênticos ou diferentes,
representando um hidrogênio ou um radical alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono.
Preferivelmente, o substituinte do grupo 1 é do tipo -COORl 2, Rl 2 sendo tal como foi definido acima e reapresentando preferivelmente um hidrogênio ou um grupamento alquila compreendendo 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono, de preferência compreendendo 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono, em particular um grupamento terciobutila.
Em um aspecto particular da invenção, X5 é escolhido entre os grupamentos: -OC(CHs)2COOR 12, -OCH(CH2CH3)COOR12,
-0(CH2)3C(CH3)2C00R12, -OCH(C6H5)COOR 12 e -OCH2COOR12. Vantajosamente, Rl2 pode notadamente ser escolhido entre hidrogênio e os grupamentos -CH3, -C(CH3)3 e -CH2CH3.
Ainda mais preferivelmente, X5 representa um grupamento -OC(CH3)2COOH, -OC(CH3)2COOC(CH3)3, -OCH(CH2CH3)COOC(CH3)3, -OCH(CH2CH3)COOH, -OCH2COOH, -OCh2COOC(Ch3)3,
-O(CH2)3C(CH3)2COOH, -O(Ch2)3C(Ch3)2COOCh3,
-OCH(C6H5)COO(C2H5), ou -OCH(C6H5)COOH.
Um aspecto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual X8 representa um átomo de hidrogênio.
De acordo com um outro aspecto da invenção, os compostos de fórmula geral (I) presente pelo menos em um dos grupamentos X3, X4, X6 e X7 designando um átomo de halogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono, de preferência um halogênio.
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos
compostos de fórmula geral (I) na qual X3 e/ou X4, idênticos ou diferentes, representando um halogênio, de preferência o cloro ou o flúor.
De preferência, X3 e X4 são idênticos e representando um halogênio, preferivelmente um átomo de cloro ou de flúor, ainda mais
preferivelmente de cloro.
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual X3 representa um átomo de hidrogênio e X4 representa um átomo de bromo ou de flúor.
De acordo com um outro aspecto da invenção, os compostos de fórmula geral (I) presente pelo menos em um dos grupamentos X3, X4, X6 e X7 designando um átomo de halogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a
4 átomos de carbono e o(s) grupamento(s) restante (quer dizer o(s) grupamento(s) não halogênio(s) ou não alquilados(s) escolhido(s) entre X3, X4, X6 e X7) designando um(uns) átomo(s) de hidrogênio.
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos
compostos de fórmula (I) nos quais X4 e/ou X6 designa(m) um grupamento alquila, em particular aos compostos nos quais X4 e X6 são dois grupamentos metilas, e X3 e X7 são átomos de hidrogênio.
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual X6 e X7 representando um átomo de hidrogênio.
De preferência, X6 e X7 representa um hidrogênio e X3 e/ou X4, idênticos ou diferentes, representando um halogênio, de preferência o
cloro ou o flúor.
Um outro aspecto preferido refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual Xl representa um grupamento Rl ou -ORl, Rl representando um hidrogênio ou um grupamento alquila. Preferivelmente, Rl representa um grupamento alquila comportando 1, 2 ou 3 átomos de carbono, ainda mais preferivelmente o grupamento alquila é halogênio.
De maneira preferida, Xl é escolhido entre um grupamento trifluorometila, um átomo de bromo, grupamento metilóxi, um grupamento metiltio, um grupamento trifluorometóxi e um átomo de hidrogênio. Facultativamente, Xl representa um grupamento -CF3, -OCF3, -SCH3.
Um outro aspecto preferido refere-se aos compostos de
fórmula geral (I) na qual Xl representa um halogênio, preferivelmente um bromo.
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual X2 representa um átomo de enxofre.
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos
compostos de fórmula geral (I) na qual o ciclo II é substituído pelo ciclo I na posição C4.
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual o ciclo II é substituído pelo ciclo I na posição C5.
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual o ciclo I é substituído pelo grupamento Xl na posição C3 (ou na meta por relação ao ciclo II).
Um outro objeto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual o ciclo I é substituído pelo grupamento Xl na posição C4 (ou em relação ao ciclo II).
Um outro aspecto particular da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual Rl representa um hidrogênio ou um 5 grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono, o referido grupamento alquila pode eventualmente ser halogênio e R3, R4, R6, R7 e R8, idênticos ou diferentes, são escolhidos entre um hidrogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono.
De maneira ainda mais preferencial, a invenção tem como objeto os compostos de fórmula geral (I) na qual pelo menos uma das condições a seguir, de preferência todas as condições, é atendida:
X6 e X7, idênticos representando um hidrogênio; e/ou X3 e/ou X4, idênticos ou diferentes, representando um halogênio, de preferência o cloro ou o flúor; e/ou X2 representa um oxigênio ou um enxofre, de preferência o
enxofre; e/ou
X5 representa um grupamento R5, -OR5 ou -SR5, R5 representando um grupamento alquila substituído por um substituinte do grupo 1; e/ou
O ciclo II é substituído pelo ciclo I na posição C4 ou na
posição C5.; e/ou
O ciclo I é substituído pelo grupamento Xl na posição C3.ou na posição C4.; e/ou
Xl representa um halogênio, um grupamento Rl, -SRl ou - ORl, Rl representando um hidrogênio ou um grupamento alquila; e/ou
A representa:
(i) um grupamento carbonila (CO),
(ii) um grupamento oxima (C=N-O-H) ou éter de oxima
(C=N-O-Rll), (iii) um grupamento -CR9R10, R9 e RlO diferentes, representando um hidrogênio, um grupamento alquila ou um grupamento -ORl I, Rl 1 sendo tal como foi definido abaixo,
Rll representando um hidrogênio ou um grupamento arila, heterocicloalquila, ou heteroarila tal como definido abaixo ou um grupamento alquila, substituído ou não por um grupamento cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila tal como definidas acima; e/ou
B representa um grupamento alquila não substituído, saturado compreendendo dois átomos de carbono (CH2-CH2).
Em um modo de realização particularmente preferido, a
invenção tem como objeto os compostos derivados de 3-fenil-l- (feniltienil)propano-l-ona e de 3-fenil-l-(fenilfuranil)propano-l-ona substituídos de fórmula geral (!) a seguir: X.
X,
'7
'6
(I)
na qual:
15
Xl representa um halogênio, um grupamento Rl, -SRl ou
-ORl;
X2 representa um átomo de enxofre ou de oxigênio;
X3 representa um halogênio, um grupamento R3, -SR3 ou
-OR3;
20
X4 representa um halogênio, um grupamento R4, -SR4 ou
-OR4;
X5 representa um grupamento R5, -SR5 ou -OR5;
X6 representa um halogênio, um grupamento R6, -SR6 ou
-OR6; Χ7 representa um halogênio, um grupamento R7, -SR7 ou
-OR7;
X8 representa um grupamento R8;
Rl representando um hidrogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono, o referido grupamento alquila pode eventualmente ser halogênio;
R3, R4, R6, R7 e R8 idênticos ou diferentes, escolhidos entre um hidrogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono;
R5 representando um radical alquila formado de uma cadeia
carbonada linear e saturada, tendo 1 a 4 átomos de carbono, de preferência 1 átomo de carbono, a referida cadeia carbonada sendo:
- ligada, por sua extremidade oposta ao grupamento fenila (III), a um substituinte escolhido entre -COORl 2 e -CONRl 2R13, Rl 2 e Rl3, idênticos ou diferentes, representando um hidrogênio ou um grupamento
alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono;
- não ramificada ou ramificada com pelo menos um grupamento alquila ou alcenila tendo 1 a 4 átomos de carbono, ou substituída por um grupamento fenila;
A representa:
(i) um grupamento carbonila (CO),
(ii) um grupamento oxima (C=N-O-H) ou éter de oxima (C=N-O-Rll), com Rll escolhido entre um átomo de hidrogênio, um grupamento alquila (linear ou ramificado) tendo 1 a 7 átomos de carbono, substituído ou não por um grupamento arila, notadamente um grupamento
fenila, os referidos grupamentos alquila e arila sendo eventualmente halogenados, ou
(iii)um grupamento -CR9R10, R9 representando um átomo de hidrogênio e RlO representando um grupamento -ORl I, Rl 1 sendo escolhido entre um átomo de hidrogênio, um grupamento alquila (linear ou ramificado) tendo I a 7 átomos de carbono, de preferência tendo 1, 2 ou 3 átomos de carbono, o referido grupamento alquila sendo substituído ou não substituído por um grupamento cicloalquila, notadamente ciclo-hexila, um grupamento arila, notadamente fenila, ou um grupamento heteroarila, notadamente piridinila, os referidos grupamentos alquila, cicloalquila, arila ou heteroarila sendo eventualmente halogenados,
B representa:
(i)um grupamento alquila não substituído, saturado apresentando dois átomos de carbono (CH2-CH2), ou
(ii)um grupamento alceno não substituído, apresentando dois átomos de carbono (CH=CH).
Uma variante do modo de realização particularmente preferido da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual A representa um grupamento carbonila (C=O).
Uma outra variante do modo de realização particularmente preferido da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual A representa um grupamento -CHORl I, Rll sendo de preferência escolhido entre um átomo de hidrogênio, um grupamento metila, etila, isopropila, ciclo- hexilmetila, benzila, iodobenzila e piridinilmetoxila.
Uma variante suplementar do modo de realização particularmente preferido da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual A representa um grupamento oxima ou éter de oxima (C=N-
O-Rl 1), o grupamento Rl 1 sendo de preferência escolhido entre um átomo de hidrogênio, um grupamento metila, etila, isopropila, ciclo-hexilmetila, benzila, iodobenzila, piridinilmetila, de maneira ainda mais preferida entre um átomo de hidrogênio e um grupamento metila.
Em uma outra variante, o modo de realização particularmente preferido da invenção refere-se aos compostos de fórmula geral (I) na qual X5 é um grupamento —OR5, ou um bioisômero do grupamento —OR5, notadamente um grupamento -SR5, com R5 designando um radical alquila cuja referida cadeia carbonada é ligada a um substituinte -COORl2.
Vantajosamente, X5 é escolhido entre os grupamentos: -OC(Ch3)2COORI2, -OCH(CH2CH3)COOR12, -O(CH2)3C(CH3)2COORi2, - OCH(C6H5)COORi2 e -OCH2COORi2.
Vantajosamente, R12 é escolhido entre hidrogênio e os grupamentos -CH3, -C(CH3)3 e -CH2CH3.
De acordo com uma variante do modo de realização particularmente preferido da invenção, X8 designa um átomo de hidrogênio.
Um objeto particular da invenção refere-se, para o modo
particularmente preferido da invenção, os compostos de fórmula geral (I) na qual o ciclo II é substituído pelo ciclo I na posição C4.
Um outro objeto particular da invenção refere-se, para o modo particularmente preferido da invenção, os compostos de fórmula geral (I) na qual o ciclo II é substituído pelo ciclo I na posição C5.
O grupamento Xl pode se encontrar em qualquer posição do ciclo I, quer dizer na posição orto, meta ou para em relação ao ciclo II. Em um modo particular de realização da invenção, para o modo particularmente preferido da invenção, Xl está na posição meta ou para, de preferência na posição para, por relação ao ciclo II.
Em um modo particular de realização da invenção, para o modo particularmente preferido da invenção, Xl é escolhido entre um grupamento trifluorometila, um átomo de bromo, um grupamento metilóxi, um grupamento metiltio, um grupamento trifluorometóxi e um átomo de hidrogênio.
De acordo com um aspecto particular da invenção, para o modo particularmente preferido da invenção, os compostos de acordo com a invenção presente pelo menos em um dos grupamentos X3, X4, X6 e X7 designando um átomo de halogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono. De preferência, o(s) grupamento(s) restante(s) (quer dizer o(s) grupamento(s) não halogênio(s) ou não alquilado(s) escolhido(s) entre X3, X4, X6 e X7) designando um(uns) átomo(s) de hidrogênio
A título de exemplo, pode também se tratar de compostos para os quais X3 e X4 são idênticos e correspondem aos átomos de halogênio (cloro, flúor, bromo ou iodo), notadamente de cloro ou de flúor.
Pode também se tratar de compostos para aqueles X4 e/ou X6 designa(m) um grupamento alquila, em particular aos compostos para aqueles X4 e X6 são dois grupamentos metila, e X3 e X7 são átomos de hidrogênio.
De acordo com um aspecto particular da invenção, para o
modo particularmente preferido da invenção, X4 e/ou X6 designa(m) um grupamento alquila, em particular X4 e X6 são dois grupamentos metilas, e X3 e X7 são átomos de hidrogênio.
De maneira preferida, os compostos de acordo com a invenção são escolhidos entre:
o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) - fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
- o 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(4-(3 -(4-iodobenzilóxi)--3 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
o ácido 2-(4-(3-(4-iodobenzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) - fenóxi)butanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)butanóico;
- o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) - fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 5-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) - fenóxi)-2,2-dimetilpentanoato de metila;
o ácido 5-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2,2-dimetilpentanóico;
o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) - fenóxi)acetato de terciobutila;
- o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)acético;
o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propÍl) - fenóxi)-2-fenilacetato de etila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)-fenóxi)-2-fenilacético;
o 2-(2-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil) fenóxi)-2-metilpropanóico;
- o 2-(3-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(3-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)acetato de terciobutila;
o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)acético;
o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)acético;
o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)-2-fluorofenóxi)acético;
o 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)butanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)butanóico;
o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)butanóico;
o 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)butanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)-fenóxi)butanóico;
o 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)acetato de terciobutila;
o ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)acético;
o 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico; ο 2-(2,3 -dicloro-4-(3 -oxo-3 -(5 -(4-(trifluorometil)fenil)fur-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico;
- o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(piridin-3-ilmetóxi)-3-(5-(4-(trifluorometil)- fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-etóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(ciclo-hexilmetóxi)-3-(5-(4-(trifluorometil)- fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2-
il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
- o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-;
o 2-(2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) - fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico;
- o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(hidróxiimino)-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(metóxiimino)-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(4-(3-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3-diclorofenóxi)-2- metilpropanoato de terciobutila;
o ácido 2-(4-(3-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3-dicloro- fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(2,3-dicloro-4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-oxopropil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de tercio-butila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-oxo- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-isopropoxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
- o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-feniltiofeno-2-il)propil)fenóxi)-2-metil- propanoato de terciobutila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-feniltien-2-il)propil)fenóxi)-2- metilpropanóico;
o 2-metil-2-(2-metil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tiofeno-2-il)- propil)fenóxi) propanoato de terciobutila;
o ácido 2-metil-2-(2-metil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)- tiofeno-2-il)propil)fenóxi)propanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
- o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)“3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,3-difluorofenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)- butanoato de terciobutila;
o ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-butanóico; o 2-metil-2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)propanoato de terciobutila;
o ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanóico;
- o 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)- acetato de terciobutila;
o ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) fenóxi)-acético;
o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)--3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2-fluorofenóxi)butanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)furan- 2-il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2- il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-
2.6-dimetilfenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-
2.6-dimetilfenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) - fenóxi)-2-metilpropanoato de etila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila;
o 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)-
propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil) tien- 2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico;
o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico.
Os compostos de acordo com a invenção podem conter um ou vários centros assimétricos. A presente invenção inclui os estereoisômeros (diastereoisômeros, enantiômeros), puros ou em mistura, assim como as 5 misturas racêmicas e os isômeros geométricos. Quando uma mistura enantiomericamente pura (ou enriquecida) é desejável, ela pode ser obtida quer por purificação do produto final ou intermediário quiral ou por síntese assimétrica dos seguintes métodos conhecidos para o versado na técnica (por exemplo utilizando reagentes e catalisadores quirais). Alguns compostos de 10 acordo com a invenção podem ter diferentes formas estáveis tautômeros, estas e todas as formas assim como as suas misturas sendo incluídas na invenção.
A presente invenção refere-se igualmente aos sais « farmaceuticamente aceitáveis » aos compostos de acordo com a invenção. De uma maneira geral, este termo designa os sais pouco ou não tóxicos obtidos a 15 partir de bases ou de ácidos, orgânicos ou inorgânicos. Estes sais podem ser obtidos durante a última etapa de purificação do composto de acordo com a invenção ou por incorporação do sal sobre o composto já purificado.
Certos compostos de acordo com a invenção e seus sais poderiam ser estáveis sob várias formas sólidas. A presente invenção inclui todas as formas sólidas aos compostos de acordo com a invenção, este que inclui as formas amorfas, polimorfas, mono - e poli-cristalinas.
Os compostos de acordo com a invenção podem existir sob forma livre ou sob forma solvatada, por exemplo, com solventes farmaceuticamente aceitáveis tais como a água (hidratos) ou o etanol.
Os compostos de acordo com a invenção marcados por um ou
por isótopos são igualmente incluídos na invenção: esses compostos são estruturalmente idênticos mas diferentes pelo fato que pelo menos um átomo da estrutura é substituído por um isótopo (radioativo ou não). Os exemplos de isótopos podendo ser incluídos na estrutura dos compostos de acordo com a invenção podem ser escolhidos entre o hidrogênio, o carbono, o oxigênio, o enxofre tais que 2H, 3H, 13C, 14C, 18O, 17O, 35S respectivamente. Os isótopos radioativos 3H e 14C são particularmente preferidos porque são fáceis de preparar e detectar no quadro de estudos de biodisponibilidade in vivo de 5 substâncias. Os Isótopos pesados (tais como 2H) são particularmente preferidos porque são usados como padrões internos nos estudos analíticos.
A presente invenção tem igualmente por objeto o processo de síntese dos compostos de fórmula geral (I), que compreende:
1. uma etapa de colocar em contato em meio básico ou em IO meio ácido de pelo menos um composto de fórmula (C) com pelo menos um composto de fórmula (D)
(C)
em que XI, X2, X3, X4, X6, X7 e X8 são tal como definidos previamente,
Y5 representa um grupamento R5, -SR5, -OR5, hidróxi ou tiol, R5 sendo tal como foi definido previamente;
2. eventualmente uma etapa de redução dos compostos
obtidos na etapa (1),
3. e eventualmente uma etapa de inserção de grupamentos
funcionais.
As condições de realização da etapa (1) em meio ácido ou básico e da etapa (2) são conhecidas de versado na técnica e podem variar em uma grande medida. Os protocolos de síntese podem ser em particular estes apresentados na parte « exemplos » da presente invenção.
A colocação em contato desses dois compostos é vantajosamente realizada de modo estequiométrico. Ela é realizada de preferência a uma temperatura apropriada (entre cerca de 18°C e 100°C) e de preferência em pressão atmosférica. Em meio básico, a reação é de preferência realizada em presença de uma base forte, tal que um hidróxido de metal alcalino, como o hidróxido de sódio ou um alcoolato de metal alcalino como o etilato de sódio.
Em meio ácido, a reação é de preferência realizada em presença de um ácido forte, tal como o ácido clorídrico.
Os compostos assim obtidos podem ser isolados pelos métodos clássicos e conhecidas de versado na técnica.
A presente invenção a também por objeto os compostos tais que descritos acima, à título de medicamentos.
A presente invenção tem igualmente por objeto um composto
tal como descrito acima, para o tratamento de complicações associadas com a síndrome metabólica, aterosclerose, isquemia cerebral, doenças auto-imunes, doenças cardiovasculares, insulino-resistência, obesidade, hipertensão, diabete, dislipidemias, doenças inflamatórias (tal como a asma), patologias 15 neurodegenerativas (em particular a esclerose em placas, o mal de Parkinson, o mal de Alzheimer, os tauopatias (demências fronto-temporais, doença de Pick, degeneração córtico-basal, paralisia supranuclear progressiva), as demências corticais, as amiotrofias espinhais, os transtornos cognitivos leves (MCI: Mild Cognitive Impairment), as sinucleopatias, as patologias corporais 20 de Lewy, a doença de Huntington, epilepsia, a esclerose amiotrófica lateral, as doenças de príons (Doença de Creutzfeldt-Jakob), síndrome de Down, a ataxia de Friedreich, as espino-ataxias cerebelares, a doença de Charcot- Marie-Tooth como complicações neurológicas associadas com a AIDS, dor óssea, a degeneração cerebelar, a hipoxia de cerebelo as neuropatia associadas 25 em diabetes), câncer, etc., assim como para permitir uma diminuição do risco cardiovascular global.
Preferivelmente, a invenção tem como objeto um composto tal como descrito acima, para tratar os fatores de risco cardiovascular ligados às desregulações do metabolismo lipídico e/ou glicídico, notadamente as hiperlipidemias e obesidade, e em particular a diabete (diabete de tipo II).
Ainda mais preferivelmente, a invenção refere-se um composto tal como descrito acima, para o tratamento das dislipidemias.
A presente invenção tem igualmente por objeto uma 5 composição farmacêutica compreendendo, em um suporte farmaceuticamente aceitável, pelo menos um composto tal como descrito acima, eventualmente em associação com um ou vários outros princípios ativos terapêuticos e/ou cosméticos.
Trata-se vantajosamente de uma composição farmacêutica para o tratamento de complicações associadas com as síndromes metabólicas, aterosclerose, isquemia cerebral, doenças auto-imunes, doenças cardiovasculares, insulino-resistência, obesidade, hipertensão, diabete, dislipidemias, doenças inflamatórias (tal como a asma), patologias neurodegenerativas (em particular a esclerose em placas, o mal de Parkinson, o mal de Alzheimer, as tauopatias (demências fronto-temporais, doença de Pick, degeneração córtico-basal, paralisia supranuclear progressiva), as demências corticais, as amiotrofias espinhais, os transtornos cognitivos leves (MCI: Mild Cognitive Impairment), as sinucleopatias, patologia corporal de Lewy, doença de Huntington, epilepsia, Esclerose Lateral Amiotrófica, como doenças de príons (Doença de Creutzfeldt-Jakob), síndrome de Down, ataxia de Friedreich, as espino-ataxias cerebelares, doença de Charcot-Marie-Tooth, como complicações neurológicas associadas com a AIDS, dor óssea, a degeneração cerebelar, hipoxia do cerebelo, as neuropatias associadas com diabetes), câncer, etc., assim como para permitir uma diminuição do risco cardiovascular global.
Trata-se preferivelmente de uma composição farmacêutica para tratar os fatores de risco cardiovascular ligados às desregulações do metabolismo lipídico e/ou glicídico, notadamente as hiperlipidemias e obesidade, e em particular a diabete (diabete de tipo II). Ainda mais preferivelmente, a composição farmacêutica de acordo com a invenção é destinada ao tratamento de dislipidemias.
Um outro objeto da invenção refere-se a uma composição nutricional compreendendo pelo menos um composto tal como descrito acima.
A presente invenção a também por objeto os compostos tais que descritos acima, à título de produtos cosméticos.
Um outro objeto da invenção reside na utilização de pelo menos um composto tal como descrito acima para a preparação de 10 composições farmacêuticas destinadas ao tratamento de diversas patologias tais como definidas acima, notadamente ligadas a problemas do metabolismo dos lipídios e/ou de glicídios entre as quais podemos citar as dislipidemias. Mais geralmente, a invenção tem como objeto a utilização de pelo menos um composto tal como descrito acima para a preparação de composições 15 farmacêuticas destinadas a tratar os fatores de riscos para as doenças cardiovasculares ligadas às desregulações do metabolismo dos lipídios e/ou dos glicídios e destinadas à diminuir assim o risco cardiovascular global.
A título de exemplo (e de maneira não limitativa), os compostos de acordo com a invenção poderiam de maneira vantajosa ser administrados em combinação com um ou vários outros agentes terapêuticos e/ou cosméticos, comercializados ou em desenvolvimento, tais que:
os anti-diabéticos: os insulino-secretores (sulfoniluréias (glibenclamida, glimepirida, gliclazida, etc.) e glinídeos (repaglinídeo, nateglinídeo, etc.)), os inibidores do alfa-glucosidase, os agonistas PPARy 25 (tiazolidinadionas tais como rosiglitazona, pioglitazona), os agonistas mistos PPARa/PPARy (tesaglitazar, muraglitazar), os pan-PPAR (compostos ativando simultaneamente as 3 isoformas de PPAR), biguanidas (metformina), os inibidores da Dipeptidyl Peptidase IV (sitagliptina, vildagliptina), os agonistas do Glucagon-Like Peptide-I (GLP-I) (exenatida), etc.
insulina
moléculas hipolipemiantes e/ou hipocolesterolemiantes: os fibratos (fenofibrato, gemfibrozil), os inibidores da HMG CoA redutase ou 5 hidróxilmetilglutaril Coenzima A redutase (as estatinas tais como atorvastatina, simvastatina, fluvastatina), os inibidores de absorção do colesterol (ezetimiba, fitosteróis), os inibidores de CETP ou Colesteril Ester Transfer Protein (torcetrapib), os inibidores do ACAT ou Acil-Coenzima A colesterol acilTransferase (Avasimibe, Eflucimibe), os inibidores MTP 10 (Microsomal Trigliceride Transfer Protein), os agentes sequestrantes dos ácidos biliares (colestiramina), a vitamina E, os ácidos graxos poliinsaturados, os ácidos graxos ômega 3, os derivados de tipo ácido nicotina (niacina), etc.
agentes anti-hipertensivos e os agentes hipotensivos: os inibidores de ACE (Angiotensin-Converting Enzime) (captopril, enalapril, 15 ramipril ou quinapril), os antagonistas do receptor de angiotensina II (losartan, valsartan, telmisartan, eposartan, irbesartan, etc.), os beta- bloqueadores (atenolol, metoprolol, labetalol, propranolol), os diuréticos tiazídicos e não tiazídicos (furosemida, indapamida, hidroclortiazido, anti- aldosterona), os vasodilatadores, os bloqueadores canal de cálcio (nifedipina, 20 felodipina ou amlodipina, diltiazem ou verapamil), etc.
agentes anti-plaquetários: Aspirina, Ticlopidina, Dipiridamol, Clopidogrel, flurbiprofeno, etc.
agentes anti-obesidade: Sibutramina, os inibidores de lipases (orlistat), os agonistas e antagonistas PPARô, os antagonistas do receptor cannabinoide CB1 (rimonabant), etc.
agentes anti-inflamatórios: por exemplo, os corticóides (prednisona, betametasona, dexametasona, prednisolone, metilprednisolone, hidrocortisona, etc.), os AINS ou Anti-Inflamatórios não Esteróides derivados do indol (indometacina, sulindac), os AINS do grupo dos arilcarboxílicos (ácido tiaprofênico, diclofenac, etodolac, flurbiprofeno, ibuprofeno, cetoprofeno, naproxen, nabumetona, alminoprofeno), os AINS derivados do oxicam (meloxicam, piroxicam, tenoxicam), os AINS do grupo dos fenamatos, os inibidores seletivos da COX2 (celecoxib, rofecoxib), etc.
- agentes anti-oxidantes: por exemplo o probucol, etc.
agentes utilizados para o tratamento de insuficiência cardíaca: os diuréticos tiazídicos ou não tiazídicos (furosemida, indapamida, hidroclortiazido, anti-aldosterone), os inibidores do ACE (captopril, enalapril, ramipril ou quinapril), os digitálicos (digoxina, digitoxina), os beta 10 bloqueadores (atenolol, metoprolol, labetalol, propranolol), os inibidores de Fosfodiesterases (enoximona, milrinona), etc.
agentes utilizados para o tratamento de insuficiência coronária: os beta-bloqueadores (atenolol, metoprolol, labetalol, propranolol), os bloqueadores canal de cálcio (nifedipina, felodipina ou amlodipina, bepridil, diltiazem ou verapamil), os agentes doadores de NO (trinitrina, isosorbide dinitrate, molsidomina), o Amiodarone, etc.
anticanceroso: os agentes citotóxicos (agentes interagindo com o DNA, agentes alquilantes, cisplatina e derivados), os agentes citostáticos (os semelhantes GnRH (Gonatropin-Releasing Hormone), os 20 semelhantes da somatostatina, progestativos, os anti-estrogênios, os inibidores da aromatase, etc.), os moduladores da resposta da imunidade (interferons, IL2, etc.), etc.
anti-asmáticos tais como broncodilatadores (agonistas de receptores beta 2), corticóides, cromoglicato, os antagonistas do receptor aos leucotrienes (montelukast), etc.
corticóides utilizados para o tratamento das patologias da pele tais como a psoríase e as dermatites
vasodilatadores e/ou agentes antiisquêmicos (buflomedil, extraído de Ginkgo Biloba, naftidrofuril, pentoxifilina, piribedil), etc. A invenção refere-se igualmente a um método de tratamento de diversas patologias tais como definidas acima, notadamente ligadas aos problemas do metabolismo dos lipídios e/ou dos glicídios compreendendo a administração à um sujeito, notadamente humano, de uma quantidade eficaz 5 de um composto ou de uma composição farmacêutica tal como defmido acima.
O significado da invenção, o termo «uma quantidade eficaz » se refere a uma quantidade do composto suficiente para produzir o resultado biológico desejado.
O termo « indivíduo» designa um mamífero e mais
particularmente um humano.
O termo « tratamento » designa o tratamento curativo, sintomático e/ou preventivo. Os compostos da presente invenção podem assim ser utilizados entre os indivíduos (como os mamíferos, em particular 15 humanos) sofrendo de uma doença declarada. Os compostos da presente invenção podem também ser utilizados para retardar ou impedir a progressão ou prevenir uma progressão mais avançada da doença, melhorando assim a condição dos indivíduos. Os compostos da presente invenção podem enfim serem administrados aos indivíduos não doentes, mas que poderiam 20 desenvolver normalmente a doença ou que correm um risco importante de desenvolver a doença.
As composições farmacêuticas de acordo com a invenção compreendem vantajosamente um ou vários excipientes ou veículos, aceitáveis sobre o plano farmacêutico. Podemos citar como exemplo as 25 soluções salinas, fisiológicas, isotônicas, tamponados, etc., compatíveis com uso farmacêutico e conhecidas de versado na técnica. As composições podem conter um ou vários agentes ou veículos escolhidos entre os dispersantes, solubilizantes, estabilizantes, conservantes, etc. Os agentes ou veículos utilizados nas formulações (líquidas e/ou injetáveis e/ou sólidas) são notadamente a metilcelulose, a hidroximetilcelulose, a carboximetilcelulose, o polisorbato 80, o manitol, a gelatina, a lactose, óleos vegetais, a acácia, os lipossomas, etc. As composições podem ser formuladas sob forma de suspensões injetáveis, géis, óleos, comprimidos, supositórios, pós, cápsulas de 5 gelatina, cápsulas, aerossóis, etc., eventualmente usando formulações ou dispositivos para proporcionar uma liberação sustentada e / ou retardada. Para este tipo vantajosamente tal formulação é utilizada como um agente da celulose, carbonatos e amidos.
Os compostos ou composições de acordo com a invenção 10 podem ser administrados de diferentes maneiras e sob diferentes formas. Assim, eles podem ser por exemplo administrados de maneira sistemática, por via oral, parenteral, por inalação ou por injeção, como por exemplo por via intravenosa, intra-muscular, subcutâneo, trans-dérmica, intra-arterial, etc. Nas injeções, os compostos são geralmente condicionados sob forma de 15 suspensões líquidas, que podem ser injetadas através de seringas ou de infusões, por exemplo.
É entendido que a vazão e/ou a dose injetada podem ser adaptadas por um versado na técnica em função do paciente, da patologia, do modo de administração, etc. Tipicamente, os compostos são administrados em 20 doses que podem variar entre 1 μg e 2g por administração, preferivelmente de 0,01 mg a 1 g por administração. As administrações podem ser diárias e até mesmo repetidas por vários dias, conforme o caso. De outro lado, tais composições de acordo com uma invenção podem compreender, além disso, outros agentes ou princípios.
LEGENDAS DAS FIGURAS
Abreviações utilizadas nas figuras e nas tabelas:
Cpd = compostos;
HDL-colesterol: High-Density-Lipoprotein cholesterol LDL-colesterol: Low-Density-Lipoprotein cholesterol VLDL-colesterol: Very-Low-Density-Lipoprotein cholesterol mpk =mg/kg/dia.
Figuras 1-1 a 1-9: Avaliação in vivo, em camundongos E2/E2, de propriedades hipolipemiantes e estimuladoras da síntese de HDL- colesterol dos compostos de acordo com a invenção por dosagens lipídicas e medida da expressão de genes implicadas no metabolismo lipídico e glicídico e a dissipação de energia
O efeito hipolipemiante dos compostos de acordo com a invenção foi avaliado in vivo em camundongos E2/E2 (humanizados para a IO isoforma E2 da apolipoproteína E) pela análise da distribuição do colesterol e dos triglicerídeos nas diferentes frações lipoprotéicas plasmáticas e pela medida das taxas de colesterol total e de HDL-colesterol plasmático após 7 e 13 dias de tratamento por via oral; essas taxas são comparadas às obtidas com os controles de animais (não tratados pelos compostos de acordo com a 15 invenção). A diferença medida testemunha o efeito hipolipemiante aos compostos de acordo com a invenção.
Figura 1-1: taxas de colesterol total plasmático após 7 e 13 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 50 mpk;
Figura 1-2: taxas de HDL-colesterol plasmático após 7 e 13 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 50 mpk;
Figura 1-3: distribuição do colesterol nas diferentes frações lipoprotéicas plasmáticas após 13 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 50 mpk;
Figura 1-4: distribuição dos triglicerídeos nas diferentes frações lipoprotéicas plasmáticas após 13 dias de tratamento com o composto
2, administrado a 50 mpk.
A eficácia dos compostos de acordo com a invenção também foi avaliada pela medida, nos tecidos hepáticos e musculares (esqueléticos), da expressão de genes implicadas no metabolismo lipídico, glicídico e a dissipação de energia. Os níveis de expressão de cada gene foram normalizados por relação ao nível de expressão de genes de referência 36B4 para o tecido hepático ou 18S para o músculo esquelético gastrocnêmio. O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo (induzido pelo 5 composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle foi em seguida calculado. Mais este fator é elevado, mais o composto tem um caráter ativador de expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Figura 1-5: expressão de PDK4 (Piruvate Desidrogenase IO Quinase, isoforma 4) para o tecido hepático, em camundongos E2/E2, após 13 dias de tratamento com o composto 2 (50 mpk);
Figura 1-6: expressão do Acoxl para o tecido hepático, em camundongos E2/E2, após 13 dias de tratamento com o composto 2 (50 mpk);
Figura 1-7: expressão do ApoCIII para o tecido hepático, em camundongos E2/E2, após 13 dias de tratamento com o composto 2 (50 mpk);
Figura 1-8: expressão de PDK4 (Piruvate Desidrogenase Quinase, isoforma 4) para o músculo esquelético, em camundongos E2/E2, após 13 dias de tratamento com o composto 2 (50 mpk);
- Figura 1-9: expressão de UCP2 (uncoupling protein 2 para
o músculo esquelético, em camundongos E2/E2, após 13 dias de tratamento com o composto 2 (50 mpk).
Figuras 2-1 a 2-6: Avaliação in vivo, em camundongos C57B16, de propriedades hipolipemiantes e estimuladoras da síntese de HDL- colesterol dos compostos de acordo com a invenção pelas dosagens lipídicas e medida da expressão de genes implicadas no metabolismo lipídico, glicídico e a dissipação de energia.
O efeito do composto 2 de acordo com a invenção, administrado com efeito de dose, foi avaliado in vivo em camundongos C57B16 após 14 dias de tratamento por via oral. Depois do tratamento, o efeito hipolipemiante do composto 2 de acordo com a invenção foi avaliado pela medida das taxas de colesterol total, de HDL-colesterol, de triglicerídeo e do ácidos graxos livres plasmáticos.
- Figura 2-1: taxas de colesterol total plasmático após 14
dias de tratamento com o composto 2 de acordo com a invenção, administrado a 1,5, 10e50 mpk, em camundongos C57B16;
Figura 2-2: taxas de HDL-colesterol plasmático após 14 dias de tratamento com o composto 2 de acordo com a invenção, administrado a 1, 5, 10 e 50 mpk, em camundongos C57BL6;
Figura 2-3: taxas de triglicerídeos plasmáticos após 14 dias de tratamento com o composto 2 de acordo com a invenção, administrado a 1, 5, 10 e 50 mpk, em camundongos C57B16;
Figura 2-4: taxas do ácidos graxos livres plasmáticos após 14 dias de tratamento com o composto 2 de acordo com a invenção, administrado a 1, 5, 10 e 50 mpk, em camundongos C57B16.
A eficácia dos compostos de acordo com a invenção também foi avaliada pela medida, para o tecido muscular (esquelético), da expressão de genes implicadas no metabolismo glicídico e a dissipação de energia. Os 20 níveis de expressão de cada gene foram normalizados por relação ao nível de expressão do gene de referência 18S. O fator de indução, foi então calculado. Mais esse fator é elevado, mais os compostos têm um caráter ativador de expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
- Figura 2-5: expressão de PDK4 para o músculo
esquelético, em camundongos C57B16, após 14 dias de tratamento por via oral com o composto 2 (50 mpk);
Figura 2-6: expressão de UCP2 para o músculo esquelético, em camundongos C57B16, após 14 dias de tratamento por via oral com o composto 2 (50mpk).
Figuras 3-1 a 3-7: Avaliação in vivo, em camundongos C57BI6, de propriedades estimuladoras da síntese de HDL-colesterol dos compostos de acordo com a invenção pelas dosagens lipídicas e medida da expressão de genes implicadas no metabolismo lipídico, glicídico e a dissipação de energia.
O efeito dos compostos de acordo com a invenção foi avaliado in vivo em camundongos C57B16 após 14 dias de tratamento por via oral. Depois do tratamento, a distribuição do colesterol nas diferentes frações 10 lipoprotéicas plasmáticas foi determinada. Isto foi comparado ao perfil obtido para os controles de animais (não tratados pelos compostos de acordo com a invenção). O efeito dos compostos de acordo com a invenção também foi avaliado in vivo em camundongos C57B16 pela medida das taxas plasmáticas de colesterol total e de HDL-colesterol após 14 dias de tratamento por via 15 oral. Essas taxas foram comparadas às obtidas para os controles de animais (não tratados pelos compostos de acordo com a invenção). A diferença medida testemunha o efeito hipolipemiante aos compostos de acordo com a invenção.
Figura 3-1: taxas de colesterol total plasmático após 14 dias de tratamento com os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção, administrados a 50 mpk;
Figura 3-2: taxas de HDL colesterol plasmático após 14 dias de tratamento com os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção, administrados a 50 mpk;
- Figura 3-3: distribuição do colesterol nas diferentes
frações lipoprotéicas plasmáticas após 14 dias de tratamento com os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção, administrados a 50 mpk.
A eficácia aos compostos de acordo com a invenção também foi avaliada pela medida, para o tecido muscular (esquelético), da expressão de genes implicadas no metabolismo lipídico, glicídico e a dissipação de energia. Os níveis de expressão de cada gene foram normalizados por relação ao nível de expressão do gene de referência 18S. O fator de indução foi então calculado. Mais este fator é elevado, mais os compostos têm um caráter 5 ativador de expressão gênica. 0 resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Figura 3-4: expressão de PDK4 para o tecido muscular, em camundongos C57B16, após 14 dias de tratamento com o composto 7 (50 mpk);
- Figura 3-5: expressão de CPTlb para o tecido muscular,
em camundongos C57B16, após 14 dias de tratamento com os compostos 4 e 7 (50 mpk);
Figura 3-6: expressão de UCP2 para o tecido muscular, em camundongos C57B16, após 14 dias de tratamento com os compostos 4 e 7 (50 mpk);
Figura 3-7: expressão de UCP3 para o tecido muscular, em camundongos C57B16, após 14 dias de tratamento com os compostos 4 e 7 (50 mpk).
Figuras 4-1 a 4-7: Avaliação in v/vo, em camundongos db/db, de propriedades hipolipemiantes, antidiabéticas e ativadoras dos PPAR dos compostos de acordo com a invenção.
O efeito dos compostos de acordo com a invenção foi avaliado in vivo em camundongos db/db pela medida dos triglicerídeos plasmáticos e insulinemia após 28 dias de tratamento por via oral com o composto 2. Essas 25 taxas foram comparadas às obtidas com os controles de animais (não tratados pelo composto de acordo com a invenção). A diferença medida testemunha o efeito hipolipemiante e insulino-resistência do composto de acordo com a invenção.
Figura 4-1: taxas de triglicerídeo plasmático após 28 dias de tratamento pelo composto 2, administrado a 50 mpk em camundongos db/db;
Figura 4-2: taxas de insulina plasmática após 28 dias de tratamento pelo composto 2, administrado a 50 mpk em camundongos db/db.
A eficácia do composto 2 também foi avaliada pela medida,
nos tecidos hepáticos e musculares, da expressão de genes implicadas no metabolismo glicídico, lipídico, e a dissipação de energia. Os níveis de expressão de cada gene foram normalizados por relação ao nível de expressão de genes de referência 36B4 para o fígado e 18S para o músculo esquelético. 10 O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo (induzido pelo composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle, foi então calculado. Mais este fator é elevado, mais o composto tem um caráter_ativador de expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
- Figura 4-3: expressão de PDK4 para o tecido hepático, em
camundongos db/db, após 28 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 50 mpk;
Figura 4-4: expressão de ACOXl para o tecido hepático, em camundongos db/db, após 28 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 50 mpk;
Figura 4-5: expressão de CPTlb para o tecido hepático, em camundongos db/db, após 28 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 50 mpk;
Figura 4-6: expressão de PDK4 para o tecido muscular, em camundongos db/db, após 28 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 50 mpk;
Figura 4-7: expressão de UCP3 para o tecido muscular, em camundongos db/db, após 28 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 50 mpk. Figura 5: Avaliação in vitro de propriedades metabólicas dos compostos de acordo com a invenção por medida da β-oxidação dos ácidos graxos em miócitos murinos
Os efeitos estimuladores aos compostos de acordo com a 5 invenção foram avaliados pela medida da β -oxidação dos ácidos graxos em miócitos murinos pré-tratados durante 24 horas com os compostos de acordo com a invenção. Mais a indução da β-oxidação dos ácidos graxos é aumentada, mais os compostos de acordo com a invenção são estimuladores da degradação dos ácidos graxos nas células musculares.
Figuras 6-1 e 6-2: Avaliação in vitro de propriedades ativadoras do transporte inverso do colesterol dos compostos de acordo com a invenção por medida da expressão do gene ABCAl nos macrófagos.
O efeito dos compostos de acordo com a invenção sobre o transporte inverso do colesterol foi avaliado pela medida da expressão do 15 gene ABCAl (ATP-binding cassette, sub-family A, member 1; transportador da membrana implicado em fluxo de colesterol) em macrófagos humanos. Mais a expressão de ABCAl é aumentada, mais o composto de acordo com a invenção estimula o transporte inverso do colesterol.
Figura 6-1: expressão de ABCAl nos macrófagos humanos, após 24 horas de tratamento com o composto 2, a ΙμΜ;
Figura 6-2: expressão de ABCAl nos macrófagos humanos, após 24 horas de tratamento com os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção, a ΙμΜ e 300nM, respectivamente.
Figuras 7-1 a 7-4: Avaliação in vitro de propriedades anti-inflamatórias dos compostos de acordo com a invenção por medida da secreção e da expressão de MCPl e MMP9 pelos monócitos humanos tratados com os
compostos de acordo com a invenção e estimulados com PMA
Os efeitos anti-inflamatórios aos compostos de acordo com a invenção foram avaliados pela medida da secreção e da expressão de Monocyte Chemoattractant Protein-I (MCPl) assim como pela medida da expressão da matrix metalloproteinase 9 (MMP9) pelos monócitos humanos tratados durante 24 horas com os compostos de acordo com a invenção e estimulados com PMA (forbol 12-miristato 13-acetato, que provoca uma 5 resposta inflamatória das células). Mais a quantidade de MCPl secretada é diminuída, mais o composto de acordo com a invenção inibe a resposta inflamatória. Da mesma maneira, mais a expressão de genes MCP1 e MMP9 é inibida, mais o composto de acordo com a invenção é anti-inflamatório.
Figura 7-1: secreção de MCPl (Monocyte Chemoattractant Protein-1) em monócitos humanos, tratados com os compostos 7 e 11 de acordo com a invenção a 1 μΜ;
Figura 7-2: expressão de MCPl (Monocyte Chemoattractant Protein - 1) em monócitos humanos, tratados com os compostos 7 e 11 de acordo com a invenção a 1 μΜ;
- Figura 7-3: expressão de MMP9 (matrix metalloproteinase
9) em monócitos humanos, tratados com os compostos 7 e 11 de acordo com a invenção a 1 μΜ;
Figura 7-4: expressão de MCPl (Monocyte Chemoattractant Protein -1) em monócitos humanos, tratados com o composto 2 a 0,1 e 0,3 μΜ.
Outras vantagens e aspectos da invenção aparecerão na leitura dos exemplos que seguem, que devem ser considerados como ilustrativos e não limitativos.
ANÁLISES ESTATÍSTICAS Os estudos estatísticos realizados consistem em um teste T de
Student e/ou uma Análise da Variante univariada em um fator (ANOVA), seguida de um teste de Tukey. Os resultados são comparados por relação ao grupo controle de acordo com o valor do parâmetro p:
*: p<0,05; **: p<0,01; ***: p<0,001. EXEMPLOS
Os reativos e catalisadores usuais são disponíveis comercialmente (Aldrich, Alfa Aesar, Acros, Fluka ou Lancaster de acordo com o caso).
Nesses exemplos, diferentes análises são realizadas para a
identificação aos compostos.
Os pontos de fusão (F) são dados em graus Celsius.
A pureza dos produtos é verificada por Cromatografia sobre Camada fina (CCM) e/ou por HPLC (cromatografia líquida de alto
desempenho).
Os espectros de massa são realizados por ESI-MS (Electrospray Ionisation - Mass Spectroscopy), Q-TOF (Quadripol - Time of Flight) ou MALDI-TOF (Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization - Time of Flight).
Os espectros de ressonância magnética nuclear do Proton
(RMN 1H) foram registrados sobre um espectrômetro Bruker AC300P. Os deslocamentos químicos são expressos em ppm (parte por milhão) e são registrados a 300 MHz em que um solvente deuterado é indicado para cada análise: DMSO-^5 MeOD ou CDCl3.
Para a interpretação dos espectros, são utilizadas as
abreviações a seguir: s para singleto, sl para singleto amplo, d para secundário, dd para secundário desdobrado, ddd para secundário desdobrado desdobrado, t para terciário, td para terciário desdobrado, q para quadrupleto, quint para quintupleto, sext para sextupleto m para multipleto ou maciço.
Exemplo 1: Descrição dos protocolos gerais de síntese de acordo com a invenção
Procedimento geral A:
O derivado bromado (0,5 a 75 g, 0,05 a 0,5 mol/mL), o carbonato de potássio (3 eq.) e a água (11 eq.) são solubilizados em Ν,Ν-dimetilformamida sob atmosfera inerte. O acetato de paládio (0,1 eq.) é adicionado, depois a solução do ácido borônico N,N-dimetilformamida (1,5 eq., 0,25g/mL) é acrescentada gota a gota. O meio é deixado sob agitação, sob atmosfera inerte em temperatura ambiente.
Procedimento geral B:
A cetona (1 eq.) e o aldeído (1 eq.) são solubilizados em uma solução de etanol saturada do ácido clorídrico gasoso (0,2 g a 38 g, 0,2 a 0,5 mol/L). Após 16 horas de agitação em temperatura ambiente o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida.
Procedimento geral C:
A propenona é solubilizada em uma mistura 2:1 clorofórmio/metanol (0,2 a 14 g, 0,01 a 0,2 mol/L) depois, uma quantidade catalítica de paládio sobre carvão é acrescentada. O conjunto é colocado sob atmosfera de hidrogênio em pressão atmosférica.
Procedimento geral D:
O fenol ou o tiofenol é solubilizado em N,N-dimetilformamida (0,3 a 12 g, 0,06 a 0,2 mol/L), depois o derivado de halogênio (5 eq.) e o carbonato de potássio (5 eq.) são acrescentados. O meio reacional é mantido sob agitação forte a 70°C.
Procedimento geral E:
O éster de terciobutila é solubilizado em diclorometano (0,2 a 15 g, 0,1 a 1 mol/L) depois, o ácido trifluoroacético (10 a 17 eq.) é adicionado. A agitação é mantida em temperatura ambiente.
Procedimento geral F:
O éster é solubilizado em etanol (0,2 a 0,4 g, 0,1 a 0,2 mol/L)
depois uma solução de soda 2N é adicionada.
Procedimento geral G:
A propanona é solubilizada no etanol (0,2 a 4 g, 0,1 a 0,5 mol/L). O boroidreto de sódio (3 eq.) é adicionado. O conjunto é mantido 3 horas sob agitação em temperatura ambiente. O solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida, o resíduo de evaporação é retomado por uma solução aquosa diluída do ácido clorídrico e extraído do diclorometano. Procedimento geral H:
O álcool é solubilizado em N,N-dimetilformamida (0,2 a 3 g,
0,1 a 0,5 mol/L), a solução é resfriado a 0°C depois o hidreto de sódio é adicionado. Após 20 minutos de agitação, o halogeneto de alquila apropriado é adicionado. O meio é deixado 4 horas sob agitação em temperatura ambiente. Os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. Procedimento geral I:
A propanona é solubilizado na piridina (0,3 g, 0,1 mol/L). O cloridrato de O-alquilhidróxilamina (5 a 10 equivalentes) é adicionado. Após 18 h de refluxo, o meio é evaporado sob pressão reduzida, retomados por acetato de etila e lavado por uma solução do ácido clorídrico diluída. A fase 15 orgânica é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Exemplo 2: Síntese das matérias primas intervindo na síntese dos compostos de acordo com a invenção:
2,3-dicloro-4-hidróxi benzaldeído
Cl
ci^A^oh
o
O carbonato de sódio (3,5 eq.), o hidróxido de cálcio (4,5 eq.)
e o 2,3-diclorofenol (0,15 g/L) são acrescentados em água, a suspensão é aquecida a 70°C durante 4 horas. O clorofórmio (2 eq.) é adicionado gota a gota e o conjunto é deixado sob agitação a 70°C durante 16 horas.
O meio reacional é resfriado a 0°C, acidulado (pH=2) por uma solução do ácido clorídrico concentrada. O conjunto é extraído por acetato de etila; as fases orgânicas são lavadas com a água, secadas sobre sulfato de magnésio e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica. O sólido obtido é recristalizado em isopropanol.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: gradiente 9/1 a 7/3. sílica 40-63 μηι. RMN 1H (300MHz, DMSOd6, δ em ppm): 7,20 (d, 1H, J=8,8Hz); 7,70 (d, 1H, J=8,8Hz); 10,13 (s, 1H).
4-hidróxi-3,5-dimetilbenzaldeído
.OH
o
O 2,6-dimetilfenol (0,34 g/mL) e o hexametilenotetramina (2 eq.) são solubilizados em uma mistura ácido acético/água: 2/1.0 conjunto é aquecido a IOO0C durante 4 horas. O meio reacional é resfriado em temperatura ambiente vertido sobre uma mistura água/gelo. O precipitado é secado.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,33 (s, 6H); 5,90 (s, 1H); 7,55 (s, 2H); 9,81 (s, 1H).
l-(5-(4-ftrifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona
A l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona é preparada a
partir do ácido 5-acetil-2-tiofenoborônico e 4-bromobenzotrifluoreto de acordo com o procedimento geral A.
Após 2 horas de agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,60 (s, 3H); 7,40 (d, 1H, J=3,8Hz); 7,66-7,70 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
l-(4-(4-(trifluorometinfenil)tien-2-il)etanona ο
A l-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona é preparada a partir da (4-bromotien-2-il)etanona e do ácido 4-trifluorometilfenilborónico de acordo com o procedimento geral A.
Após 18 horas de agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,63 (s, 3H); 7,70 (m, 4H); 7,82 (d, 1H, J=I,5Hz); 7,97 (d, 1H, J=I,5Hz).
l-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)etanona
o
A l-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)etanona é preparada a partir do ácido 5-acetil-2-tiofenoborônico e de l-bromo-4- (trifluorometóxi)benzeno de acordo com o procedimento geral A.
Após 1 hora de agitação, o meio reacional é diluído com água, filtrado sobre celite depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é recristalizado em ciclo-hexano.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 2,56 (s, 3H); 7,47 (d, 2H, J=8,4Hz); 7,71 (d, 1H, J=3,9Hz); 7,91 (d, 2H, J=8,4Hz); 7,98 (d, 1H, J=3,9Hz).
1 -(5 -(4-bromofenil)tien-2-il)etanona
ò
A l-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)etanona é preparada a partir do ácido 5-acetil-2-tiofenoborônico e de 1-bromo-4-iodobenzeno de acordo com o procedimento geral A.
Após 12 horas de agitação, o meio reacional é diluído com água, filtrado sobre celite depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1 a 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,57 (s, 3H); 7,31 (d, IH, J=3,9Hz); 7,51 (d, 2H, J=9,0Hz); 7,55 (d, 2H, J=9,0Hz); 7,65 (d, IH, J=3,9Hz).
5-bromo-2-acetilfurano Br--/ 1 „
- 0
O
O 2-acetilfurano é solubilizado em N5N^dimetilformamida (5 g, 1,1 mol/L) e o N-bromo succinimida (1 eq.) é adicionado.
Após 5 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio
reacional é vertido sobre a água gelada e o precipitado formado é secado. RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,47 (s, 3H); 6,49 (d, IH, J=3,6Hz); 7,12 (d, IH, J=3,6Hz).
l-(5-(4-(trifhiorometil)fenil)fur-2-il)etanona
F
u
A l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2-il)etanona é preparada a
partir do ácido 4-trifluorometilbenzenoborônico e de 5-bromo-2-acetilfurano de acordo com o procedimento geral A.
Após 18 horas de agitação, o meio reacional é diluído com água depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica. Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 95/5 a 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,55 (s, 3H); 6,89 (d, IH, J=3,7Hz); 7,28 (d, IH, J=3,7Hz); 7,68 (d, IH, J=8,lHz); 7,89 (d, IH, J=8,lHz).
l-(5-(4-(metiltio)feniQtien-2-il)etanona
o
A l-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)etanona é preparada a partir do ácido 5-acetil-2-tiofenoborônico e 1-bromo-4-(metiltio)benzeno de acordo com o procedimento geral A.
Após 18 horas de agitação a 100°C, o meio reacional é diluído com água, filtrado sobre celite depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1 a 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 2,54 (s, 3H); 7,34 (d, 2H, J=8,7Hz); 7,63 (d, IH, J=3,9Hz); 7,75 (d, 2H, J=8,7Hz); 7,94 (d, IH, J=3,9Hz).
l-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona
F3C
o
A l-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona é preparada a partir do ácido 2-acetil-5-bromotiofeno e do ácido 3- trifluorometilbenzenoborônico de acordo com o procedimento geral A.
Após 4 horas de agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63 μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,59 (s, 3H); 7,39 (d, IH, J=3,9Hz); 7,53-7,65 (m, 2H); 7,69 (d, IH, J=3,9Hz); 7,83 (d, IH, J=7,6Hz); 7,90 (s, IH). Exemplo 3: Síntese dos compostos intermediários intervindo na síntese dos compostos de acordo com a invenção: Composto intermediário 1: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)
fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona e 2,3-dicloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é cristalizado no acetonitrila.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 6,02 (sl, IH); 7,06 (d, IH, J=8,8Hz); 7,34 (d, IH, J=15,5Hz); 7,48 (d, IH, J=3,8Hz); 7,67-7,72 (m, 3H); 7,81 (d, 2H, J=8,2Hz); 7,86 (d, IH, J=3,8Hz); 8,22 (d, IH, J=15,5Hz).
Composto intermediário 2: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
Cl
CkAxOH
O
A 3 -(2,3 -dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(5 -(4-(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)- l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 1 hora 30 de agitação a 42°C, o catalisador é eliminado por filtração e o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 7/3. sílica 40-63μπι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,14-3,27 (m, 4H); 5,64 (sl, IH); 6,92 (d, IH, J=8,5Hz); 7,18 (d, IH, J=8,5Hz); 7,39 (d, IH, J=3,8Hz); 7,67-7,71 (m, 3H); 7,77 (d, 2H, J=8,2Hz). Composto intermediário 3: 3 -(2,3 -dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(4-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3 -(2,3 -dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(4-(4-(trifluorometil)
fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(4-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona e de 2,3-dicloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 7,08 (d, IH, J=8,8Hz); 7,82-8,10 (m, 7H); 8,58 (s, IH); 8,86 (s, IH).
Composto intermediário 4: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(4-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
OH
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(4-(4-(trifluorometil)
fenil)tien-2-il)propano-l-ona é preparada a partir de 3-(2,3-dicloro-4- hidróxifenil)-l-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 6 horas em temperatura ambiente, o catalisador é eliminado por filtração e o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,15-3,21 (m, 2H); 3,25-3,30 (m, 2H); 5,60 (s, IH); 6,91 (d, IH, J=8,5Hz); 7,17 (d, IH, J=8,5Hz); 7,67 (m, 4H); 7,81 (d, IH, J=I,3 Hz); 7,95 (d, IH, J=I,3Hz).
Composto intermediário 5: 3-(3-cloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)- fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3-(3-cloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-
2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)etanona e de 3-cloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 6/4. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 7,03 (d, IH, J=8,5Hz); 7,62-7,67 (m, 2H); 7,77-7,84 (m, 3H); 7,9 (d, IH, J=4,lHz); 8,03 (m, 3H); 8,39 (d, IH, J=4,lHz).
Composto intermediário 6: 3-(3-cloro-4-hidróxifenil)-l -(5-(4-(trifluorometil)- fenil)tien-2-il)propano-l-ona
Cl
A 3-(3-cloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil) fenil) tien- 2-il)propano-1-ona é preparada a partir da 3-(3-cloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 3 horas de agitação em temperatura ambiente, o
catalisador é eliminado por filtração e o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica. Eluição: cloreto de metileno. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,01 (t, 2H, J=7,7Hz); 3,21 (t, 2H, J=7,7Hz); 5,58 (s, IH); 6,95 (d, IH, J=8,2Hz); 7,07 (dd, IH, J=2,lHz, J=8,2Hz); 7,22 (d, IH, J=2,lHz); 7,38 (d, IH, J=4,2Hz); 7,63-7,68 (m, 3H); 7,75 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto intermediário 7: 3-(2-cloro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)- fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3-(2-cloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-
2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)etanona e de 2-cloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 6/4. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 6,86 (dd, IH, J=2,3Hz, J=8,5Hz); 6,94 (d, IH, J=2,3Hz); 7,78-7,84 (m, 3H); 7,90 (d, IH, J=4,lHz); 7,97-8,05 (m, 3H); 8,12 (d, IH, J=8,8Hz); 8,37 (d, IH, J=4,lHz).
Composto intermediário 8: 3-(2-cloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)- fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
A 3-(2-cloro-4-hidróxifenil)- l-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien- 2-il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(2-cloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 3 horas de agitação em temperatura ambiente, o catalisador é eliminado por filtração e o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: cloreto de metileno. sílica 40-63μπι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,09-3,15 (m, 2H); 3,19-3,25 (m, 2H); 6,69 (dd, 1, J=2,5Hz, J=8,2Hz); 6,9 (d, IH, J=2,5Hz); 7,16 (d, IH); 7,38 (d, IH, J=3,8Hz); 7,66-7,71 (m, 3H); 7,76 (d, IH, J=8,5Hz).
Composto_intermediário_9: 3 -(3 -fluoro-4-hidróxifenil)-1 -(5 -(4-
(trifluorometil)-fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3-(3-fluoro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil) fenil) tien-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona e de 3-fluoro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo é cristalizado no acetonitrila.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 5,51 (s, IH); 7,08 (d, IH, J=8,5Hz); 7,33-7,48 (m, 3H); 7,71 (m, IH); 7,77-7,82 (m, 3H); 7,86 (d, 2H,J=8,5Hz).
Composto intermediário 10: 3-(3-fluoro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
A 3-(3-fluoro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(3-fluoro-4-hidróxifenil)-l- (5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 2 horas 30 a 42°C, o catalisador é eliminado por fíltração e o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 7/3. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,02 (t, 2, J=7,5Hz); 3,21 (t, 2, J=7,5Hz); 5,01 (d, IH, J=3,8Hz); 6,97 (m, 3H); 7,39 (d, IH, J=3,9Hz); 7,68 (m, 3H); 7,75 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto intermediário 11: 3-(3-bromo-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3-(3-bromo-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona e de 3-bromo-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é cristalizado no etanol.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 7,01 (d, IH, J=8,2Hz); 7,65 (d, IH, J=15,5Hz); 7,71 (dd, IH, J=I,9Hz, J=8,6Hz); 7,77-7,84 (m, 3H); 7,89 (d, IH, J=4,lHz); 8,03 (d, 2H, J=8,2Hz); 8,19 (d, IH, J=l,7Hz); 8,40 (d, IH, J=4,lHz).
Composto intermediário 12: 3-(3-bromo-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
Br
A 3-(3-bromo-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(3-bromo-4-hidróxifenil)-l- (5-(4-(trifluorometil)-fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 4 horas de agitação em temperatura ambiente, o catalisador é eliminado por filtração, o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida, o resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 85/15. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,99-3,05 (m, 2H); 3,18-3,23 (m, 2H); 6,96 (d, IH, J=8,2Hz); 7,10-7,14 (m, IH); 7,36-7,41 (m, 2H); 7,66-7,69 (m, 3H); 7,75 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto intermediário 13: 3-(2,3 -dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(trifluoro- metil)fenil)fur-2-il)prop-2-en-1 -ona
Cl
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)
fur-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4- (trifluorometil)fenil)fur-2-il)etanona e de 2,3-dicloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é lavado pelo diclorometano.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 7,07 (d, IH, J=8,8Hz); 7,51 (d, IH, J=3,8Hz); 7,71 (d, IH, J=15,5Hz); 7,88 (d, 2H, J=8,3Hz); 7,93 (d, IH, J=3,8Hz); 8,03 (d, IH, J=15,5Hz); 8,06 (d, IH, J=8,8Hz); 8,14 (d, 2H, J=8,3Hz).
Composto intermediário 14: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluoro- metil)fenil)fur-2-il)propano-1 -ona
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil) fur-2-il)propano-1 -ona é preparada a partir da 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-
l-(5-(4-(trifluoro-metil)fenil)fiir-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 24 horas de agitação a 40°C sob 5 bars de pressão de hidrogênio, o catalisador é eliminado por filtração e os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μπι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,19 (m, 4H); 6,88 (d, IH, J=4,lHz); 6,90 (d, IH, J=8,9Hz); 7,17 (d, IH, J=8,9Hz); 7,29 (d, IH, J=4,lHz); 7,69 (d, 2H, J=8,2Hz); 7,88 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto intermediário 15: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifiuoro- metóxi)fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifiuorometóxi) fenil) tien-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4- (trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)-etanona e de 2,3-dicloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é cristalizado no acetonitrila.
RMN 1H (300MHz, DMSO-Ji, δ em ppm): 7,07 (d, IH, J=9,0Hz); 7,49 (d, 2H, J=8,4Hz); 7,80-7,86 (m, 3H); 7,93-7,98 (m, 2H); 8,09 (d, IH, J=9,0Hz); 8,36 (d, IH, J=4,2Hz).
Composto intermediário 16: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluoro- metóxi)fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometóxi) fenil)tien-2-il)-propano-l-ona é preparada a partir da 3-(2,3-dicloro-4- hidróxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona de
acordo com o procedimento geral C.
Após 24 horas de agitação em temperatura ambiente sob 10 bars de pressão de hidrogênio, o catalisador é eliminado por filtração e os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,13-3,23 (m, 4H); 5,61 (s, IH); 6,90 (d, IH, J=8,6Hz); 7,16 (d, IH, J=8,6Hz); 7,25-7,29 (m, 3H); 7,64-7,69 (m, 3H).
Composto intermediário 17: 3 -(2,3 ■-difluoro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3-(2,3-difluoro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil) fenil) tien-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4- (trifiuorometil)fenil)tien-2-il)etanona e de 2,3-difluoro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é cristalizado no acetonitrila.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J5, δ em ppm): 6,88 (t, IH, J=8,3Hz); 7,79 (m, 5H); 7,88 (d, IH, J=3,5Hz); 8,04 (d, 2H, J=7,9Hz); 8,31 (d, IH, J=3,5Hz).
Composto intermediário 18: 3-(2,3-difluoro-4-hidróxifenil)-l-(5-(4- (trifiuorometil)-fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
A 3 -(2,3 -difluoro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(2,3-difluoro-4- hidróxifenil)-1 -(5-(4-(trifluoro-metil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 1 hora de agitação a 45 °C, o catalisador é eliminado por filtração e os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica. Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 7/3. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 2,89 (t, 2H, J=7,3Hz); 3,27 (t, 2H, J=7,3Hz); 6,69 (t, IH, J=8,5Hz); 6,93 (t, IH, J=8,5Hz); 7,80 (m, 3H); 8,01 (m, 3H).
Composto intermediário 19: 3-(4-hidróxi-3,5-dimetilfenil)-l-(5-(4-(trifluoro- metil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
A 3-(4-hidróxi-3,5-dimetilfenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)
fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona e de 4-hidróxi-3,5-dimetilbenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é lavado pelo diclorometano.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,22 (s, 6H); 7,52 (s, 2H); 7,62 (d, IH, J=15,5Hz); 7,71 (d, IH, J=15,5Hz); 7,83 (d, 2H, J=8,3Hz); 7,90 (d, IH, J=4,lHz); 8,03 (d, 2H, J=8,3Hz); 8,36 (d, IH, J=4,lHz); 9,01 (s, IH).
Composto intermediário 20: 3-(4-hidróxi-3,5-dimetilfenil)-l-(5-(4-(trifluoro- metil)fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
A 3-(4-hidróxi-3,5-dimetilfenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)
fenil)tien-2-il)-propano-1 -ona é preparada a partir da 3-(4-hidróxi-3,5- dimetilfenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 24 horas de agitação em temperatura ambiente sob 5 bars de pressão de hidrogênio, o catalisador é eliminado por filtração e os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J5, δ em ppm): 2,11 (s, 6H); 2,71-2,87 (m, 2H); 3,18-3,27 (m, 2H); 6,80 (s, 2H); 7,75-8,12 (m, 6H).
Composto intermediário 21: 1 -(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-(2,3-dicloro-4- hidróxifenil)prop-2-en-1 -ona
A l-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-(2,3-dicloro-4-
hidróxifenil)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4-bromofenil)tien-
2-il)etanona e de 2,3-dicloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é lavado pelo diclorometano. RMN 1H (300MHz, DMSO-J5, δ em ppm): 7,08 (d, IH, J=8,7Hz); 7,68 (d, 2H, J=8,7Hz); 7,77-7,82 (m, 4H); 7,99 (d, IH, J=15,5Hz); 8,09 (d, IH, J=9,0Hz); 8,35 (d, IH, J=4,2Hz); 11,42 (s, IH).
Composto intermediário 22: l-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-(2,3-dicloro-4- hidróxifenil)propano-1 -ona
A l-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-(2,3-dicloro-4-
hidróxifenil)prop-2-en-l-ona é solubilizada no diclorometano (0,7 g, 1,5 mol/L). O trietilsilano (2,1 eq.) e o ácido trifluoroacético (8 eq.) são sucessivamente adicionados gota a gota. Após 16 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1 a 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,15-3,20 (m, 4H); 6,90 (d, IH, J=8,6Hz); 7,16 (d, IH, J=8,6Hz); 7,29 (d, IH, J=4,2Hz); 7,50 (d, 2H, J=9,0Hz); 7,55 (d, 2H, J=9,0Hz); 7,65 (d, IH, J=4,2Hz).
Composto intermediário 23: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(metiltio)- fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona
Cl
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2- il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2- il)etanona e de 2,3-dicloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 2,53 (s, 3H); 7,07 (d, IH, J=8,8Hz); 7,35 (d, 2H, J=8,7Hz); 7,32-7,78 (m, 3H); 7,83 (d, IH, J=15,3Hz); 7,99 (d, IH, J=15,3Hz); 8,09 (d, IH, J=8,8Hz); 8,33 (d, IH, J=3,9Hz). Composto intermediário 24: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(metiltio)- fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
Cl
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2- il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(2,3-dicIoro-4-hidróxifenil)-l-(5- (4-(metiltio)fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C em solução no tetraidrofurano.
Após 24 horas de agitação a 50 0C sob 10 bars de pressão de hidrogênio, o catalisador é eliminado por fíltração e o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,52 (s, 3H); 3,11-3,24 (m, 4H); 5,61 (sl, IH); 6,91 (d, IH, J=8,6Hz); 7,17 (d, IH, J=8,6Hz); 7,23-7,29 (m, 3H); 7,56 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,64 (d, IH, J=4,lHz).
Composto intermediário 25: 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-feniltien-2-il)- propano-1 -ona
/
J
O
A 3-(2,3-dicloro-4-hidróxifenil)-l-(5-feniltien-2-il)propano-l-
ona é preparada a partir da l-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-(2,3-dicloro-4- hidróxifenil)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 24 horas de agitação a 40 0C sob 10 bars de pressão de hidrogênio, o catalisador é eliminado por fíltração e o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1 a 8/2. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,16-3,21 (m, 4H); 6,91 (d, IH, J=8,6Hz); 7,17 (d, IH, J=8,6Hz); 7,31 (d, IH, J=3,9Hz); 7,39-7,42 (m, 3H); 7,64-7,67 (m, 3H).
Composto_intermediário_26: 3-(4-hidróxi-3-metilfenil)-l-(5-(4-
(trifluorometil)-fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona
A 3-(4-hidróxi-3-metilfenil)-l-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien- 2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-
2-il)etanona e de 4-hidróxi-3-metilbenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é lavado pelo diclorometano.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 2,18 (s, 3H); 6,86 (d, IH, J=8,3Hz); 7,55 (dd, IH, J=2,4Hz, J=8,3Hz); 7,65 (d, IH, J=15,6Hz); 7,71 (d, IH, J=15,6Hz); 7,72 (d, IH, J=2,4Hz); 7,84 (d, 2H, J=8,2Hz); 7,91 (d, IH, J=4,lHz); 8,04 (d, 2H, J=8,2Hz); 8,35 (d, IH, J=4,lHz); 10,10 (sl, IH).
Composto_intermediário 27: 3 -(4-hidróxi-3 -metilfenil)-1-(5-(4-
(trifluorometil)-fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
A 3-(4-hidróxi-3-metilfenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-
2-il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(4-hidróxi-3-metilfenil)-l-(5-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 40 horas de agitação a 40°C sob 5 bars de pressão de hidrogênio, o catalisador é eliminado por fíltração e os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1 a 8/2. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,24 (s, 3H); 2,96-3,01 (m, 2H); 3,17-3,22 (m, 2H); 4,68 (s, IH); 6,71 (d, IH, J=8,lHz); 6,96 (dd, IH, J=2,3Hz, J=8,lHz); 7,01 (d, IH, J=2,3Hz); 7,38 (d, IH, J=3,9Hz); 7,66-7,68 (m, 3H); 7,75 (d, 2H, J=8,4Hz).
Composto intermediário 28: 3-(4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)- tien-2-il)prop-2-en-1 -ona A 3-(4-hidróxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)etanona e de 4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica. Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 6/4. sílica 40-63μιτι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 6,91 (d, 1H, J=8,4Hz); 7,32 (d, 1H, J=15,4Hz); 7,46 (d, 1H, J=4,lHz); 7,59 (d, 2H, J=8,4Hz); 7,79-7,88 (m, 4H). Composto intermediário 29: 3-(4-hidróxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)- tien-2-il)propano-1 -ona
o
A 3-(4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(4-hidroxifenil)-l-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-1-ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 1,5 horas de agitação em temperatura ambiente, o catalisador é eliminado por filtração e os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,01-3,06 (m, 2H); 3,19-3,24 (m, 2H); 4,72 (sl, 1H); 6,78 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,13 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,38 (d, 1H, J=4,lHz); 7,67-7,68 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto intermediário 30: 3-(2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(3-(trifluoro- metil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona
F3C
v_
O
3-(2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(3-(trifiuorometil) fenil)tien-2-il)prop-2-en-l-ona é preparada a partir de l-(5-(3- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)etanona e de 2,3-dicloro-4-hidróxibenzaldeído de acordo com o procedimento geral B, a 50°C durante 30 horas. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 7/3. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 5,95 (s, 1H); 7,06 (d, 1H, J=8,8Hz); 7,33 (d, 1H, J=15,5Hz); 7,46 (d, 1H, J=4,lHz); 7,55-7,70 (m, 3H); 7,85 (d, 1H, J=4,lHz); 7,88-7,93 (m, 2H); 8,21 (d, 1H, J=15,5Hz).
Composto intermediário 31: 3-(2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-1 -(5-(3-(trifluoro- metil)fenil)tien-2-il)propano-1 -ona
F3Cs
O
A 3-(2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(3-(trifluorometil)
fenil)tien-2-il)propano-l-ona é preparada a partir da 3-(2,3-dicloro-4- hidroxifenil)-1 -(5-(3-(trifluoro-metil)fenil)tien-2-il)prop-2-en-1 -ona de acordo com o procedimento geral C.
Após 3 horas de agitação a 40°C, o catalisador é eliminado por
fíltração e os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica. Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,15-3,25 (m, 4H); 5,57 (s, 1H); 6,92 (d, 1H, J=8,4Hz); 7,17 (d, 1H, J=8,4Hz); 7,38 (d, 1H, J=4,lHz); 7,56 (m, 1H); 7,63 (d, 1H, J=7,9Hz); 7,69 (d, 1H, J=4,lHz); 7,82 (d, 1H, J=7,9Hz); 7,89 (s, 1H).
Exemplo 4: Síntese dos compostos de acordo com a invenção;
Composto 1: 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila O 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l- ona e bromo isobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 16 horas de agitação, o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 95/5. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,46 (s, 9H); 1,61 (s, 6H); 3,16-3,26 (m, 4H); 6,81 (d, 1H, J=8,5Hz); 7,11 (d, 1H, J=8,5Hz); 7,39 (d, 1H, J=3,8Hz); 7,66-7,69 (m, 3H); 7,77 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto 2: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
CU
o
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(2,3 -dicloro-4-(3 -oxo-3 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de tercio-butila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 16 horas em temperatura ambiente, o meio reacional é
lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é recristalizado em cloreto de metileno. RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,64 (s, 6H); 3,19-3,28 (m, 4H); 6,96 (d, IH, J=8,5Hz); 7,21 (d, IH, J=8,5Hz); 7,39 (d, IH, J=4,lHz); 7,67-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 531 / 533 (M+l).
F= 153-154°C.
Composto 3: 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
o
Ck
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)
fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir do 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral G.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,46 (s, 9H); 1,60 (s, 6H); 2,15-2,22 (m, 2H); 2,79-3,01 (m, 2H); 4,95 (t, IH, J=6,6Hz); 6,83 (d, IH, J=8,5Hz); 7,01 (d, IH, J=3,8Hz); 7,05 (d, IH, J=8,5Hz); 7,28 (m, IH); 7,63 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,69 (d, 2H, J=8,5Hz).
Composto_4: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico de acordo com o procedimento geral G.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 95/5. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, 5 em ppm): 1,65 (s, 6H); 2,17-2,24 (m, 2H); 2,82-3,04 (m, 2H); 4,98 (t, IH, J=6,6Hz); 6,97 (d, IH, J=8,5Hz); 7,02 (d, IH, J=3,8Hz); 7,14 (d, IH, J=8,5Hz); 7,28 (m, IH); 7,64 (d, 2H, J=8,3Hz); 7,69 (d, 2H, J=8,3Hz).
Massa (ES+): 515 / 517 (M-OH); 550 (M+NH4)+; 555 / 557 (M+Na)+.
F = 54-56°C.
Composto 5: 2-(4-(3-(4-iodobenzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
O 2-(4-(3-(4-iodobenzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir do 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila através de 1,1 equivalentes 15 de hidreto de sódio e de 1,1 equivalentes de brometo de 4-iodobenzila de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre
gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 95/5. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,46 (s, 9H); 1,58 (s, 6H); 2,05-2,31 (m, 2H); 2,71-2,97 (m, 2H); 4,33 (d, IH, J=ll,7Hz); 4,53-4,59 (m, 2H); 6,79 (d, IH, J=8,6Hz); 6,95 (d, IH, J=8,6Hz); 6,99 (d, IH, J=3,5Hz); 7,11 (d, 2H, J=7,9Hz); 7,28 (m, IH); 7,64 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,70 (m, 4H).
Composto_6: Ácido 2-(4-(3-(4-iodobenzilóxi)—3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(4-(3-(4-iodobenzilóxi)—3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(4-(3-(4-iodobenzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 16 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: cloreto de metileno/metanol: 9/1. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,61 (s, 6H); 2,02-2,25 (m, 2H); 2,70-2,95 (m, 2H); 4,32 (d, IH, J=ll,9Hz); 4,52-4,58 (m, 2H); 6,91 (d, IH, J=8,6Hz); 6,87 (d, IH, J=8,6Hz); 6,98 (d, IH, J=3,5Hz); 7,09 (d, 2H, J=8,2Hz); 7,27 (m, IH); 7,61-7,72 (m, 6H).
Massa (ES'): 747 / 748 / 749 (M-l).
Aspecto: óleo viscoso
Composto 7: Ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)~3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico
Cl 9
0^OH O ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)--3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)-2,3-di-clorofenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)-2-metil-propanóico através de 2,2 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,2 equivalentes de brometo de benzila de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (20 eq.). Após 16 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado 10 com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído pelo diclorometano. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μηι 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 22/78 a 0/100.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,64 (s, 6H); 2,31-2,08 (m, 2H);
3,01-2,74 (m, 2H); 4,39 (d, IH, J=ll,7Hz); 4,57-4,66 (m, 2H); 6,91 (d, IH, J=8,5Hz); 6,99 (d, IH, J=8,5Hz); 7,01 (d, IH, J=3,5Hz); 7,27-7,38 (m, 6H); 7,63 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,70 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 640 / 642 (M+NH^, 645 / 647 (M+Na)+.
F = 46-48°C.
Compostos 7a e 7b:
Os dois enantiômeros do composto 7 são separados por HPLC semi-preparativo sobre coluna quiral Chiralpak®AD-H (250*20mm, 5μηι, Chiral Technologies Europe) em temperatura ambiente. A eluição é realizada em modo isocrático com uma fase móvel n-heptano-etanol (95-5) adicionada e 0,1 % do ácido trifluoroacético na vazão de 18 ml/min.
A pureza enantiomérica de cada um dos dois enantiômeros assim obtidos é controlada por HPLC analítica: coluna Chiralpak®AD-H (250*46mm, 5μηι, Daicel Chemical Industries, LTD) a 30°C; eluição isocrática com fase móvel n-heptano-etanol (92-8) adicionada e de 0.1% do ácido trifluoroacético; fluxo 1 ml/min; detecção UV a 298 nm.
Composto 7a: tR = 11,85 min, ee = 100%)
Composto 7b: tR = 16,28 min, ee = 99,6%
Composto 8: 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)butanoato de terciobutila
o
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-butanoato de terciobutila é preparado a partir da 3-(2,3- dicloro-4-hidroxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-1 -ona e do 2-bromobutanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 2 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,11 (t, 3H, J=7,6Hz); 1,43 (s, 9H); 1,97-2,07 (m, 2H); 3,14-3,26 (m, 4H); 4,45 (t, IH, J=5,8Hz); 6,66 (d, IH, J=8,8Hz); 7,13 (d, IH, J=8,8Hz); 7,38 (d, IH, J=4,lHz); 7,66-7,69 (m, 3H);
7,75 (d, 2H, J=8,2Hz). Composto 9: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)butanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)butanóico é preparado a partir do 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)
fenóxi)butanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 4 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μηι 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 30/70 a 10/90.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 1,01 (t, 3H, J=7,3Hz); 1,84-1,98 (m, 2H); 3,03 (t, 2H, J=7,5Hz); 3,31 (t, 2H, J=7,5Hz); 4,82 (t, IH, J=6,4Hz); 6,92 (d, IH, J=8,8Hz); 7,32 (d, IH, J=8,8Hz); 7,79-7,83 (m, 3H); 7,99 (d, 2H, J=8,2Hz); 8,05 (d, IH, J=4,2Hz); 13,15 (s, IH).
Massa (ES+): 531 (M+l).
F = 169-171 °C.
Composto 10: 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila O 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-l-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l- ona e do bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 18 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,45 (s, 9H); 1,57 (s, 6H); 3,16-3,21 (m, 2H); 3,25-3,30 (m, 2H); 6,79 (d, IH, J=8,5Hz); 7,09 (d, IH, J=8,5Hz);
7,68 (m, 4H); 7,8 (d, IH, J=I,5); 7,95 (d, IH, J=I,5Hz).
Composto_IJk Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóíco
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2- (2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2- metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 4 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica. Eluição: cloreto de metileno/metanol: 9/1. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, DMSO-Jtf, δ em ppm): 1,52 (s, 6H); 3,03 (t, 2H, J=7,9Hz); 3,38 (t, 2H, J=7,9Hz); 6,88 (d, IH, J=8,6Hz); 7,32 (d, IH, J=8,6Hz); 7,78 (d, 2H, J=8,3Hz); 8,03 (d, 2H, J=8,3Hz); 8,51 (s, IH); 8,57 (s, IH).
Massa (ES’): 529 (M-l).
F=99-101°C.
Composto 12: 5-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2,2-dimetilpentanoato de metila
O 5-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)-2,2-dimetilpentanoato de metila é preparado a partir da 3- (2,3 -dicloro-4-hidroxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-1 - ona e do 5-iodo-2,2-dimetilpentanoato de metila de acordo com o procedimento geral D.
Após 2 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de
uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm: 1,22 (s, 6H); 1,72-1,81 (m, 6H); 3,16-
3,25 (m, 4H); 3,67 (s, 3H); 6,76 (d, IH, J=8,5Hz); 7,18 (d, IH, J=8,5Hz); 7,39 (d, IH, J=4,lHz); 7,66-7,69 (m, 3H); 7,75 (d, 2H, J=8,5Hz).
Composto_13i Ácido 5-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2,2-dimetilpentanóico F O O ácido 5-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2,2-dimetilpentanóico é preparado a partir do 5- (2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2,2- dimetilpentanoato de metila de acordo com o procedimento geral F através de 10 equivalentes de uma solução de soda 2N.
Após 18 horas de agitação a 50°C, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é retomado por uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído pelo cloreto de metileno. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtradas depois 10 concentradas sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: cloreto de metileno/metanol: 95/5. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, DMSO-d6,ò em ppm): 1,10 (s, 6H); 1,58-1,70 (m, 4H);
3,03 (t, 2H, J=7,6Hz); 3,31 (t, 2H, J=5,9Hz); 4,03 (t, 2H, J=5,6Hz); 7,08 (d, IH, J=8,8Hz); 7,33 (d, IH, J=8,8Hz); 7,79-7,82 (m, 3H); 7,99 (d, 2H, J=8,2Hz); 8,04 (d, IH, J=4,lHz); 12,12 (s, IH).
Massa (ES'): 571 (M-l).
F=167-169°C.
Composto 14: 2-(2,3 -dicloro-4-(3 -oxo-3 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)acetato de terciobutila
F o
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-acetato de terciobutila é preparado a partir da 3-(2,3-dicloro- 4-hidroxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-1 -ona e do bromoacetato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 2 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica combinadas é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,45 (s, 9H); 3,16-3,26 (m, 4H); 4,60 (s, 2H); 6,68 (d, IH, J=8,4Hz); 7,18 (d, IH, J=8,4Hz); 7,39 (d, IH, J=3,8Hz); 7,66-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto_15: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)acético
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)acético é preparado a partir do 2- (2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)acetato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 4 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μιη 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 14/86 a 10/90.
RMN 1H (300MHz, DMSO-Jtf, δ em ppm): 3,04 (t, 2H, J=7,5Hz); 3,31 (t, 2H, J=7,5Hz); 4,83 (s, 2H); 7,01 (d, IH, J=8,6Hz); 7,33 (d, IH, J=8,6Hz); 7,79- 7,83 (m, 3H); 7,99 (d, 2H, J=8,2Hz); 8,06 (d, IH, J=4,lHz); 13,13 (s, IH). Massa (ES'): 501 (M-l).
F=217-219°C.
Composto 16: 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-fenilacetato de etila
O 2-(2,3-dicloro-4-(3 -oxo-3-(5 -(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-fenilacetato de etila é preparado a partir da 3-(2,3-dicloro- 4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e do 2- bromofenilacetato de etila de acordo com o procedimento geral D.
Após 16 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de
uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,24 (t, 3H, J=7,6Hz); 3,17-3,22 (m, 4H); 4,15 (q, 2H, J=7,6Hz); 5,64 (s, IH); 6,75 (d, IH, J=8,7Hz); 7,13 (d, IH, J=8,7Hz); 7,32-7,46 (m, 6H); 7,62-7,67 (m, 3H); 7,72-7,77 (m, 2H).
Composto_17: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-fenilacético
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-fenilacético é preparado a partir do 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-fenilacetato de etila de acordo com o procedimento geral F através de 20 equivalentes de uma solução de soda 2N.
Após 16 horas a 40°C, o meio é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase 5 orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μιη 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 14/86 a 10/90.
RMN 1H (300MHz, DMSO-Jd, δ em ppm): 3,03 (t, 2H, J=7,6Hz); 3,31 (t, 2H, J=7,6Hz); 6,02 (s, IH); 7,07 (d, IH, J=8,8Hz); 7,35 (d, IH, J=8,8Hz); 7,38-
7,47 (m, 3H); 7,58 (d, 2H, J=6,5Hz); 7,79-7,82 (m, 3H); 7,99 (d, 2H, J=8,2Hz); 8,06 (d, IH, J=4,lHz); 13,35 (s, IH).
Massa (ES'): 577 (M-l).
F=189-191°C.
Composto 18: 2-(2-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
O 2-(2-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (3-cloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e do bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 2 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido cítrico IN depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/diclorometano: 5/5. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,46 (s, 9H); 1,57 (s, 6H); 3,01 (t, 2H, J=7,3Hz); 3,2 (t, 2H, J=7,3Hz); 6,88 (d, IH, J=8,5Hz); 7,01 (dd, IH, J=2,lHz, J=8,5Hz); 7,26 (m, IH); 7,39 (d, IH, J=3,8Hz); 7,66-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto 19: Ácido 2-(2-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(2-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 1 hora em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é cristalizado em uma mistura cloreto de metileno/heptano: 5/5.
RMN 1H (300MHz, DMSO-J6, δ em ppm): 1,49 (s, 6H); 2,87 (t, 2H, J=7,7Hz); 3,32 (t, 2H, J=7,7Hz); 6,84 (d, IH, J=8,3Hz); 7,15 (dd, IH, J=2,3Hz, J=8,3Hz); 7,39 (d, IHs J=2,3Hz); 7,79-7,82 (m, 3H); 7,99 (d, 2H, J=8,2Hz); 8,05 (d, IH, J=4,lHz).
Massa (ES'): 495 (M-l).
F=136-137°C.
Composto 20: 2-(3-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila O 2-(3-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (2-cloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e do bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 2 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de
uma solução diluída do ácido cítrico IN depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/diclorometano: 5/5. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,50 (s, 9H); 1,55 (s, 6H); 3,09-3,14 (m, 2H); 3,18-3,24 (m, 2H); 6,7 (dd, 1, J=2,4Hz, J=8,5Hz); 6,91 (d, IH, J=2,6Hz); 7,15 (d, IH, J=8,5Hz); 7,38 (d, IH, J=3,8Hz); 7,66-7,69 (m, 3H);
7,75 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto 21: Ácido 2-(3-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(3-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)~2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 1 hora em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é cristalizado em uma mistura cloreto de metileno/heptano: 5/5.
RMN 1H (300MHz, DMSO-4, δ em ppm): 1,49 (s, 6H); 2,97 (t, 2H, J=8,2Hz); 3,28 (t, 2H, J=8,2Hz); 6,76 (dd, 1, J=2,6Hz, J=8,6Hz); 6,88 (d, IH, J=2,6Hz); 7,32 (d, IH, J=8,6Hz); 7,79-7,83 (m, 3H); 7,99 (d, 2H, J=8,2Hz);
8,04 (d, IH, J=4,lHz).
Massa (ES'): 495 (M-l).
F=104-106°C.
Composto 22: 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
F o
,OiA0
O 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (3-fluoro-4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e do bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 16 horas de agitação, o solvente é eliminado por
evaporação sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação é retomado com diclorometano. A fase orgânica é lavada por uma solução saturada de cloreto de amônio, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia
sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: gradiente 97/3 a 9/1. sílica 40-63μηι. RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,46 (s, 9H); 1,54 (s, 6H); 3,02 (m, 2H); 3,21 (m, 2H); 6,9 (m, 3H); 7,36 (d, IH, J=4,lHz); 7,67 (m, 3H); 7,76 (d, 2H J=8,lHz).
Composto 23: Ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico O ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trífluorometil) fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(2- fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propiI)fenóxi)-2- metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 4 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: cloreto de metileno/metanol: 95/5. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,57 (s, 6H); 3,07 (m, 2H); 3,24 (m, 2H); 6,99 (m, 3H); 7,39 (d, IH, J=4,lHz); 7,68 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Massa (ES+): 481 (M+l); 498 (M+NH^; 503 (M+Na)+.
F=150-151°C.
Composto 24: 2-(2-fluoro-4-(3 -oxo-3 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)acetato de terciobutila
o
O 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-acetato de terciobutila é preparado a partir da 3-(3-fluoro-4- hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e do bromoacetato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 18 horas de agitação, o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação é retomado por acetato de etila. A fase orgânica é lavada por uma solução saturada de cloreto de amônio, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 95/5. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,46 (s, 9H); 3,01-3,06 (m, 2H); 3,21 (m, 2H); 4,56 (s, 2H); 6,79-6,98 (m, 3H); 7,39 (d, IH, J=4,lHz); 7,65-7,69 (m, 3H); 7,75 (m, 2H).
Composto 25: Ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)acético
OH
O ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propil)-fenóxi)acético é preparado a partir do 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3 - (5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)acetato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 18 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: cloreto de metileno/metanol: gradiente 95/5 a 9/1. sílica 40-63μιη. RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,04 (t, 2H, J=4,5Hz); 3,22 (t, 2H, J=4,5Hz); 4,72 (s, 2H); 6,89-7,06 (m, 3H); 7,39 (d, IH, J=3,8Hz); 7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Massa (ES+): 453 (M+l); 470 (M^NH4)+; 475 (M+Na)+.
F=170-171°C.
Composto_26: Ácido 2-(2-fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)acético
O ácido 2-(2-fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)acético é preparado a partir do ácido 2-(2-fluoro- 4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)acético de acordo 5 com o procedimento geral G.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 2,11-2,22 (m, 2H); 2,67-2,76 (m, 2H); 4,69 (s, 2H); 4,91 (m, IH); 6,86-6,99 (m, 4H); 7,25 (d, IH, J=3,8Hz); 7,62 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,68 (d, 2H, J=8,5Hz).
Composto 27: Ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)-2-fluorofenóxi)acético
O ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)-2-fluoro-fenóxi)acético é preparado a partir do ácido 2-(2-fluoro- 4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi) acético através de 2,2 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,2 equivalentes de brometo de benzila de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (20 eq.). Após 16 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído pelo 20 cloreto de metileno. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μηι 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 22/78 a 10/90.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,99-2,11 (m, IH); 2,23-2,35 (m, IH); 2,58-2,80 (m, 2H); 4,35 (d, IH, J=ll,4Hz); 4,53 (m, IH); 4,61 (d, IH, J=I 1,4Hz); 4,71 (s, 2H); 6,82-6,93 (m, 3H); 6,97 (d, IH, J=3,5Hz); 7,27-7,39 (m, 6H); 7,63 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,71 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (MALDI-TOF): 566 (M+Na)\
Composto 28: 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)butanoato de terciobutila
F o
r o
O 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-butanoato de terciobutila é preparado a partir da 3-(3-fluoro- 4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e de 2- bromobutanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 16 horas de agitação, o solvente é eliminado por
evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é retomados por acetato de etila. A fase orgânica é lavada por uma solução saturada de cloreto de amônio, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: gradiente 95/5 a 9/1. sílica 40-63μιη. RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,09 (t, 3H, J=7,3Hz); 1,43 (s, 9H); 1,98 (m, 2H); 3,02 (t, 2H, J=4,5Hz); 3,23 (t, 2H, J=4,5Hz); 4,42 (t, IH, J=6,lHz); 6,81-7,01 (m, 3H); 7,38 (d, IH, J=4,lHz); 7,66-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto 29: Ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)butanóico
O ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)-fenóxi)butanóico é preparado a partir do 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3- (5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)butanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 6 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica. O óleo obtido é cristalizada no diclorometano.
Eluição: cloreto de metileno/metanol: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,11 (t, 3H, J=7,3Hz); 2,03 (m, 2H);
3,01 (t, 2H, J=7,4Hz); 3,19 (t, 2H, J=7,4Hz); 4,58 (t, IH, J=5,7Hz); 6,86-7,01 (m, 3H); 7,37 (d, IH, J=3,8Hz); 7,66 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=7,9Hz).
Massa (MALDI-TOF): 481 (M+l).
F=I 19-120°C.
Composto_30: Ácido 2-(2-fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)butanóico
O ácido 2-(2-fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)butanóico é preparado a partir do ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)butanóico de acordo com o procedimento geral G. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre
gel de sílica.
Eluição: cloreto de metileno/metanol: 95/5. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,12 (t, 3H, J=7,6Hz); 1,98-2,25 (m, 4H); 2,69 (m, 2H); 4,59 (t, IH, J=6,6Hz); 4,9 (t, IH, J=5,8Hz); 6,83-6,96 (m, 4H); 7,23 (d, IH, J=3,8Hz); 7,61 (d, 2H, J=8,7Hz); 7,66 (d, 2H, J=8,7Hz). Massa (ES+): 483 (M+l).
Aspecto: óleo viscoso incolor.
Composto 31: 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)butanoato de terciobutila
o
o
o
O 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifiuorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-butanoato de terciobutila é preparado a partir da 3-(3-bromo-
4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifiuorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e do 2- bromobutanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 2 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de
uma solução diluída do ácido cítrico IN depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 0,95-1,25 (m, 3H); 1,45 (s, 9H)
1,84-2,06 (m, 2H); 3,01 (m, 2H); 3,2 (t, 2H, J=7,3Hz); 4,45 (t, IH, J=6,lHz)
6,69 (d, IH, J=8,5Hz); 7,09 (dd, IH, J=2,lHz, J=8,5Hz); 7,37-7,39 (m, IH) 7,45 (d, IH, J=2,lHz); 7,65-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,5Hz).
Composto 32: Ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)butanóico O ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)butanóico é preparado a partir do 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)butanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 1 hora em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μηι 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 30/70 a 0/100.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,13 (t, 3H, J=7,3Hz); 2,11 (m, 2H);
3,02 (t, 2H, J=7,4Hz); 3,21 (t, 2H, J=7,4Hz); 4,68 (t, IH, J=5,6Hz); 6,78 (d, IH, J=8,5Hz); 7,14 (dd, IH, J=2,lHz, J=8,5Hz); 7,39 (d, IH, J=4,lHz); 7,48 (d, IH, J=2,lHz); 7,67-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 541 / 543 (M+l).
F=126-128°C.
Composto 33: 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)acetato de terciobutila
O 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-acetato de terciobutila é preparado a partir da 3-(3-bromo-4- hidroxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-1 -ona e do bromoacetato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 12 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido cítrico IN depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografiaflash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 85/15. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,48 (s, 9H); 2,98-3,05 (m, 2H); 3,2 (t, 2H, J=7,lHz); 4,57 (s, 2H); 6,72 (d, IH, J=8,2Hz); 7,12 (dd, IH, J=2,lHz, J=8,2Hz); 7,38 (d, IH, J=3,8Hz); 7,46 (d, IH, J=2,lHz); 7,64-7,68 (m, 3H); 7,74 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto 34: Ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)acético
O ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)acético é preparado a partir do 2-(2-bromo-4-(3- oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)acetato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 1 hora em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μιη 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 30/70 a 0/100.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,04 (t, 2H, J=7,6Hz); 3,22 (t, 2H, J=7,6Hz); 4,7 (s, 2H); 6,82 (d, IH, J=8,2Hz); 7,19 (dd, 1, J=2,lHz, J=8,2Hz); 7,39 (d, IH, J=4,lHz); 7,49 (d, IH, J=2,lHz); 7,67-7,70 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 513/515 (M+l).
F=180-182°C.
Composto 35: 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
O 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)ti en-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (3-bromo-4-hidroxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-1 -ona e de bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 2 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido cítrico IN depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63 μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,46 (s, 9H); 1,58 (s, 6H); 2,98-3,05 (m, 2H); 3,2 (t, 2H, J=7,lHz); 6,86 (d, IH, J=8,5Hz); 7,05 (dd, IH, J=2,lHz, J=8,5Hz); 7,39 (d, IH, J=4,lHz); 7,44 (d, IH, J=2,lHz); 7,65-7,69 (m, 3H);
7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto 36: Ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
Br o O ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 17 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 1 hora de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μιη 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 30/70 a 0/100.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,64 (s, 6H); 3,05 (t, 2H, J=7,6Hz);
3,23 (t, 2H, J=7,6Hz); 7,01 (d, IH, J=8,3Hz); 7,15 (dd, IH, J=2,lHz, J=8,3Hz); 7,39 (d, IH, J=4,lHz); 7,5 (d, IH, J=2,lHz); 7,67-7,70 (m, 3H);
7,76 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 541 / 543 (M+l).
F=102-104°C.
Composto 37: 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2-
il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
Cl o
α.Χ,ογ.0
O
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir de 3- (2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2-il)propano-l- ona e do bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 16 horas de agitação, o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é retomados por acetato de etila. A fase orgânica é lavada por uma solução saturada de cloreto de amônio, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: gradiente 95/5 a 8/2. sílica 40-63μιη. RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,45 (s, 9H); 1,57 (s, 6H); 3,19 (m, 4H); 6,79 (d, IH, J=8,6Hz); 6,87 (d, IH, J=3,7Hz); 7,10 (d, IH, J=8,6Hz);
7,27 (d, IH, J=3,7Hz); 7,69 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,88 (d, 2H, J=8,5Hz).
Composto 38: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fiir- 2-il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)fur-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(2,3- dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2-il)propil)fenóxi)-2- metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 2 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,63 (s, 6H); 3,19 (m, 4H); 6,86 (d, IH, J=3,7Hz); 6,92 (d, IH, J=8,5Hz); 7,13 (d, IH, J=8,5Hz); 7,29 (d, IH, J=3,7Hz); 7,65 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,84 (d, 2H, J=8,5Hz); 11,07 (s, IH).
Massa (ES’): 513/515 (M-l).
F=85°C. Composto 39: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(piridin-3-ilmetóxi)-3-(5-(4- (trifluoro-metil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(piridin-3-ilmetóxi)-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a 5 partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico através de 8 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,1 equivalentes de bromoidrato de 3-(bromometil)piridina de acordo com o procedimento geral H.
Após 12 horas de agitação a 70 °C, o meio reacional é diluído 10 com água, acidulado por uma solução do ácido clorídrico IN e, extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida depois, tratada por uma solução de soda 2N, e extraída com diclorometano. Após acidificação por uma solução do ácido cítrico IN, o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação 15 purificado por cromatografiaflash sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 100/0 a 95/5. sílica 40-63 μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,73 (s, 6H); 2,22-2,35 (m, 2H);
2,85-2,97 (m, 2H); 4,35 (d, IH, J=12,5Hz); 4,55 (d, IH, J=12,5Hz); 4,59-4,67 (m, IH); 6,86 (d, IH, J=7,6Hz); 6,96 (d, IH, J=3,5Hz); 7,01 (d, IH, J=7,6Hz); 7,27-7,36 (m, IH); 7,61-7,64 (m, 3H); 7,68 (d, 2H, J=8,4Hz); 8,06 (sl, IH); 8,52 (d, 2H, J=4,lHz).
Massa (ES'): 622 / 624 / 623 (M-l).
F=75-77°C.
Compostos 39a e 39b: Os dois enantiômeros do composto 39 são separados por HPLC semi-preparativo sobre coluna quiral Chiralpak®AD-H (250*20mm, 5μιη, Chiral Technologies Europe) em temperatura ambiente. A eluição é realizada em modo isocrático com uma fase móvel n-heptano-etanol (87-13) na vazão de 12 ml/min.
A pureza enantiomérica de cada um dos dois enantiômeros assim obtidos é controlada por HPLC analítica: coluna Chiralpak®AD-H (250*46mm, 5μιη, Daicel Chemical Industries, LTD) a 30°C; eluição isocrática com fase móvel n-heptano-isopropanool (87-13); fluxo 1 ml/min; detecção UV a 205 nm.
Composto 39a: tR = 16,2 min, ee = 96%
Composto 39b: tR = 19,3 min, ee = 99,1%
Composto 40: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)- tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico através de 2,2 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,2 equivalentes de iodometano de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μηι.). O óleo isolado é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (20 eq.). Após
16 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído pelo diclorometano. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,65 (s, 6H); 2,03-2,29 (m, 2H); 2,75-2,97 (m, 2H); 3,34 (s, 3H); 4,38 (dd, IH, J=5,7Hz J=7,7Hz); 6,95 (d, IH, J=8,6Hz); 6,99 (d, IH, J=3,6Hz); 7,07 (d, IH, J=8,6Hz); 7,27 (d, IH, J=3,6Hz); 7,62 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,68 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 564 / 566 (M+NH^, 569 / 571 (M+Na)+, 585 / 587 (M+K)+. F=46-48°C.
Compostos 40a e 40b:
Os dois enantiômeros do composto 40 são separados por HPLC semi-preparativo sobre coluna quiral Chiralpak®AD-H (250*20mm, μιη, Chiral Technologies Europe) em temperatura ambiente. A eluição é realizada em modo isocrático com uma fase móvel n-heptano-etanol (93-7) adicionado e de 0,1% do ácido trifluoroacético na vazão de 16 a 18 ml/min.
A pureza enantiomérica de cada um dos dois enantiômeros assim obtidos é controlada por HPLC analítica: coluna Chiralpak®AD-H (250*46mm, 5μηι, Daicel Chemical Industries, LTD) a 30°C; eluição isocrática com fase móvel n-heptano-etanol (93-7) adicionado e de 0.1% do ácido trifluoroacético; fluxo 1 ml/min; detecção UY a 292 nm.
Composto 40a: tR = 13,4 min, ee = 100%
Composto 40b: tR = 18,3 min, ee = 99,4%
Composto_4L Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-etóxi-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-Íl)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-etóxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico através de 8 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,1 equivalentes de iodoetano de acordo com o procedimento geral H.
Após 20 minutos de agitação a 70 °C, o meio reacional é levado a temperatura ambiente, tratado por uma solução de soda 2N, depois, acidulado por uma solução do ácido clorídrico IN e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação purificado por cromatografiay/as/* sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 100/0 a 95/5. sílica 40-63μπι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,24 (t, 3H, J=7,0Hz); 1,64 (s, 6H); 2,03-2,28 (m, 2H); 2,78-2,99 (m, 2H); 3,37-3,47 (m, IH); 3,53-3,63 (m, IH);
4,48 (dd, IH, J=5,5Hz, J=7,6Hz); 6,92-6,97 (m, 2H); 7,10 (d, IH, J=8,5Hz);
7,25 (d, IH, J=3,9Hz); 7,27 (d, IH, J=3,8Hz); 7,62 (d, 2H, J=8,3Hz); 7,69 (d, 2H, J=8,3Hz).
Massa (ES'): 559 / 561 (M-l).
Aspecto: óleo amarelo viscoso.
Composto 42: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(ciclo-hexilmetóxi)-3-(5-(4- (trifluoro-metil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(ciclo-hexilmetóxi)-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico através de 8 equivalentes de hidreto de 5 sódio e de 2,5 equivalentes de bromometilciclo-hexano de acordo com o procedimento geral H.
Após 18 horas de agitação a 70 °C, o meio reacional é acidulado por uma solução do ácido clorídrico IN e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 100/0 a 9/1. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 0,89-0,99 (m, 3H); 1,14-1,28 (m, 4H); 1,55-1,84 (m, 10H); 2,03-2,27 (m,2H); 2,78-3,01 (m, 2H); 3,14 (dd, IH, J=6,4Hz, J=9,0Hz); 3,22 (dd, IH, J=6,7Hz, J=8,7Hz); 4,43 (dd, IH, J=4,9Hz, J=7,8Hz); 6,94-6,97 (m, 2H); 7,11 (d, IH, J=8,4Hz); 7,25 (d, IH, J=3,9Hz);
7,27 (d, IH, J=3,8Hz); 7,62 (d, 2H, J=8,3Hz); 7,69 (d, 2H, J=8,3Hz).
Massa (ES'): 627 / 629 (M-l).
Aspecto: óleo amarelo viscoso.
Composto 43: 2-(2,3-dicloro-4-(3 -oxo-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
9' 9
fTo-C
ò
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-
2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3-(2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2- il)propano-1-ona e do bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 6 horas de agitação, o meio é diluído por uma solução de cloreto de amônio saturada e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,44 (s, 9H); 1,58 (s, 6H); 3,14-3,24 (m, 4H); 6,79 (d, IH, J=8,6Hz); 7,09 (d, IH, J=8,6Hz); 7,25-7,29 (m, 3H);
7,64-7,68 (m, 3H).
Composto 44: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometóxi)
fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
Cl o
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 48 horas de agitação em temperatura ambiente, os
solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1 a 0/100. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,63 (s, 6H); 3,17-3,26 (m, 4H); 6,93 (d, IH, J=8,4Hz); 7,18 (d, IH, J=8,4Hz); 7,17-7,29 (m, 3H); 7,64-7,68 (m, 3H). Massa (ES'): 545 / 547 (Μ-1).
F=135-136°C.
Composto_45: 2-(2,3 -difluoro-4-(3 -oxo-3 -(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de
terciobutila
O 2-(2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil) fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (2,3-difluoro-4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l- ona e do bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 4 horas de agitação, o meio é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido cítrico IN depois extraído pelo diclorometano. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 92/8. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,46 (s, 9H); 1,56 (s, 6H); 3,08 (t, 2H, J=7,0Hz); 3,22 (t, 2H, J=7,0Hz); 6,70 (m, IH); 6,86 (m, IH); 7,38 (d, IH, J=4,lHz); 7,67 (m, 3H); 7,75 (d, 2H, J=8,2Hz).
Composto_46: Ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2- (2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2- metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 15 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 18 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,59 (s, 6H); 3,11 (t, 2H, J=7,6Hz); 3,25 (t, 2H, J=7,6Hz); 6,80 (t, IH, J=8,2Hz); 6,96 (t, IH, J=8,2Hz); 7,39 (d, IH, J=3,8Hz); 7,68 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Massa (MALDI-TOF): 499 (M+l),.516 (M+NH4+), 521 (M+Na+). F=165-166°C.
Composto 47: 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
O 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (4-hidróxi-3,5-dimetilfenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l- ona de acordo com o procedimento geral D, através de 15 equivalentes de 20 bromoisobutirato de terciobutila e de 15 equivalentes de carbonato de potássio acrescentados por porções de 3 equivalentes durante a reação.
Após 4 dias de agitação a 100°C, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é retomados à o acetato de etila e lavado por uma solução de cloreto de amônio saturada. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica. Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 95/5 a 9/1. sílica 40-63μιη. RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,41 (s, 9H); 1,51 (s, 6H); 2,20 (s, 6H); 2,92-2,97 (m, 2H); 3,15-3,21 (m, 2H); 6,83 (s, 2H); 7,37 (d, IH, J=3,9Hz); 7,65 (d, IH, J=3,9Hz); 7,67 (d, 2H, J=8,4Hz); 7,75 (d, 2H, J=8,4Hz).
Composto 48: Ácido 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do -(2,6-dimetil-4-(3 -oxo-3 -(5 -(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 48 horas de agitação em temperatura ambiente, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 97/3 a 0/100. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,51 (s, 6H); 2,22 (s, 6H); 2,96 (t, 2H, J=7,5Hz); 3,19 (t, 2H, J=7,5Hz); 6,88 (s, 2H); 7,37 (d, IH, J=3,9Hz);
7,65-7,67 (m, 3H); 7,74 (d, 2H, J=8,4Hz).
Massa (ES'): 489 (M-l).
F=157-158°C.
Composto 49: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(hidróxiimino)-3-(5-(4- (trifluorometil)-fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(hidróxiimino)-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metil propanóico e de cloridrato de hidroxilamina de acordo com o procedimento geral I.
Eluição: diclorometano/metanol: 98/2 a 95/5. sílica 40-63μιη.
Conformação majoritária:
RMN 1H (300MHz, MeOD, δ em ppm): 1,39 (s, 6H); 2,92-2,97 (m, 4H); 6,7
(d, IH, J=8,4Hz); 6,99 (d, IH, J=8,4Hz); 7,03 (d, IH, J=3,9Hz); 7,28 (d, IH,
J=3,9Hz); 7,57 (d, 2H, J=8,4Hz); 7,69 (d, 2H, J=8,4Hz).
Conformação minoritária:
RMN 1H (300MHz, MeOD, δ em ppm): 1,47 (s, 6H); 2,82-3,01 (m, 4H); 6,81
(d, IH, J=8,4Hz); 7,03 (d, IH, J=8,4Hz); 7,43 (d, IH, J=4,2Hz); 7,48 (d, IH,
J=4,2Hz); 7,60 (d, 2H, J=8,2Hz); 7,78 (d, 2H, J=8,2Hz).
Massa (ES'): 544 / 546 (M-l).
F=135-136°C.
Composto 50: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(metóxiimino)-3-(5-(4-
(trifluorometil)-fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
Cl o
0^OH
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(metóxiimino)-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metil propanóico e de cloridrato de O-metilhidroxilamina de acordo com o procedimento geral I.
Eluição: diclorometano/metanol: 98/2. sílica 40-63μιη.
Conformação majoritária:
RMN 1H (300MHz, MeOD, δ em ppm): 1,58 (s, 6H); 2,91-3,17 (m, 4H); 3,96 (s, 3H); 6,91 (d, IH, J=8,4Hz); 7,11 (d, IH, J=8,4Hz); 7,12 (d, IH, J=3,9Hz); 7,24 (d, IH, J=3,9Hz); 7,61 (d, 2H, J=8,4Hz); 7,67 (d, 2H, J=8,4Hz). Conformação minoritária:
RMN 1H (300MHz, MeOD, δ em ppm): 1,64 (s, 6H); 2,95-3,15 (m, 4H); 4,07 (s, 3H); 6,94 (d, IH, J=8,4Hz); 7,05 (d, IH, J=8,4Hz); 7,36 (d, IH, J=4,2Hz); 7,51 (d, IH, J=4,2Hz); 7,64 (d, 2H, J=8,2Hz); 7,76 (d, 2H, J=8,2Hz).
Massa (ES'): 558 / 560 (M-l).
F=68-69°C.
Composto 51: 2-(4-(3-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3-dicloro- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
Cl o
T°7<
O
O 2-(4-(3-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3-
diclorofenóxi)-2-metil-propanoato de terciobutila é preparado a partir da l-(5- (4-bromofenil)tien-2-il)-3-(2,3-dicloro-4-hidroxifenil)propano-l-ona de
acordo com o procedimento geral D, através de 4 equivalentes de bromoisobutirato de terciobutila e de 5 equivalentes de carbonato de potássio.
Após 16 horas de agitação a 80°C, o meio é diluído por uma
solução de cloreto de amônio saturada e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 95/5. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,44 (s, 9H); 1,58 (s, 6H); 3,12-3,25 (m, 4H); 6,79 (d, IH, J=8,6Hz); 7,08 (d, IH, J=8,6Hz); 7,28 (d, IH, J=4,lHz);
7,49 (d, 2H, J=9,lHz); 7,54 (d, 2H, J=9,lHz); 7,64 (d, IH, J=4,2Hz). Composto 52: Ácido 2-(4-(3-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3-
dicloro-fenóxi)-2-metilpropanóico O O ácido 2-(4-(3-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3- diclorofenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(4-(3-(5-(4- bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 38 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 1 hora de agitação em temperatura ambiente, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 97/3 a 0/100. sílica 40-63μπι.
RMN 1H (300MHz, MeOD, δ em ppm): 1,58 (s, 6H); 3,11-3,19 (m, 2H); 3,23-3,30 (m, 2H); 6,93 (d, IH, J=8,7Hz); 7,21 (d, IH, J=8,7Hz); 7,49 (d, IH, J=4,lHz); 7,61 (d, 2H, J=8,7Hz); 7,66 (d, 2H, J=8,7Hz); 7,81 (d, IH, J=4,lHz).
Massa (ES'): 539 / 541 / 542 / 543 (M-l).
F=155-157°C.
Composto 53: 2-(2,3-dicloro-4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-oxopropil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-
oxopropil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (2,3-dicloro-4-hidroxifenil)-l-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)propano-l-ona solubilizado em tetraidrofurano, de acordo com o procedimento geral D.
Após 20 horas de agitação a 70°C, o meio é diluído por uma solução de cloreto de amônio saturada e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,44 (s, 9H); 1,59 (s, 6H); 2,52 (s, 3H); 3,16-3,23 (m, 4H); 6,95 (d, IH, J=8,5Hz); 7,21 (d, IH, J=8,5Hz); 7,27- 7,30 (m, 3H); 7,56 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,66 (d, IH, J=4,lHz).
Composto 54: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-oxo- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-
oxopropil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(2,3-dicloro-
4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-oxopropil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 18 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio
reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,63 (s, 6H); 2,53 (s, 3H); 3,18-3,25 (m, 4H); 6,95 (d, IH, J=8,5Hz); 7,20 (d, IH, J=8,5Hz); 7,26-7,29 (m, 3H); 7,57 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,65 (d, IH, J=4,lHz).
Massa (ES’): 507 / 508 (M-l).
F=171-172°C.
Composto 55: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-isopropoxi-3-(5-(4-(trifluorometil)- fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-isopropoxi-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico através de 5 equivalentes de hidreto de sódio e de 4 equivalentes de 2-bromopropano de acordo com o procedimento geral H.
Após 12 horas de agitação a 70 °C, o meio reacional é diluído com água, acidulado por uma solução do ácido clorídrico 0,5N e, extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica. Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μπι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,24 (d, 6H, J=6,3Hz); 1,59 (s, 6H); 2,12-2,23 (m, 2H); 2,76-2,97 (m, 2H); 4,91-4,95 (m, IH); 5,09 (sep, IH, J=6,3); 6,78 (d, IH, J=8,6Hz); 6,98 (d, IH, J=3,7Hz); 7,02 (d, IH, J=8,6Hz); 7,24 (d, IH, J=3,7Hz); 7,61 (d, 2H, J=8,6Hz); 7,66 (d, 2H, J=8,6Hz).
Massa (ES+): 557 / 559 (M+l), 592 / 594 (NH4)+, 597 / 599 (M+Na)+. F=88-90°C.
Composto 56: 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-feniltien-2-il)propil)fenóxi)-2- metilpropanoato de terciobutila
ClO I
0M
O
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-feniltien-2-il)propil)fenóxi)-2-
metil-propanoato de terciobutila é preparado a partir da 3-(2,3-dicloro-4- hidroxifenil)-l-(5-feniltien-2-il)propano-l-ona solubilizado em
tetraidrofurano, de acordo com o procedimento geral D. Após 12 horas de agitação a 80°C, o meio é diluído por uma solução de cloreto de amônio saturada e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é lavado pelo ciclo-hexano.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, d em ppm): 1,44 (s, 9H); 1,57 (s, 6H); 3,11-3,25 (m, 4H); 6,79 (d, IH, J=8,4Hz); 7,09 (d, IH, J=8,4Hz); 7,31 (d, IH, J=3,9Hz); 7,34-7,44 (m, 3H); 7,63-7,66 (m, 3H).
Composto_57: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-feniltien-2-
il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
Cl o
ckA.,o.
OH
O
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-feniltien-2-
il)propil)fenóxi)-2-metil-propanóico é preparado a partir do 2-(2,3-dicloro-4- (3-oxo-3-(5-feniltien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 12 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 12 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio
reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,63 (s, 6H); 3,13-3,28 (m, 4H); 6,94 (d, IH, J=8,6Hz); 7,18 (d, IH, J=8,6Hz); 7,31 (d, IH, J=4,2Hz); 7,35-7,46 (m, 3H); 7,61-7,67 (m,3H).
Massa (ES'): 461 / 463 (M-l).
F=179-180°C.
Composto 58: 2-metil-2-(2-metil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi) propanoato de terciobutila O 2-metil-2-(2-metil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propil)-fenóxi) propanoato de terciobutila é preparado a partir da 3- (4-hidróxi-3-metilfenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona solubilizado em tetraidrofurano, de acordo com o procedimento geral D.
Após 12 horas de agitação a 70°C, o meio é diluído por uma
solução de cloreto de amônio saturada e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação purificado por cromatografia flash sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 8/2. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,45 (s, 9H); 1,55 (s, 6H); 2,23 (s, 3H); 2,93-2,98 (m, 2H); 3,17-3,22 (m, 2H); 6,79 (d, IH, J=8,4Hz); 6,98-7,01 (m, IH); 7,08 (m, IH); 7,39 (d, IH, J=3,9Hz); 7,66-7,72 (m, 3H); 7,75 (d, 2H, J=8,4Hz).
Composto_59: Ácido 2-metil-2-(2-metil-4-(3-oxo-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)propanóico
o
FV -0V1OH
F
O ácido 2-metil-2-(2-metil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)-propil)fenóxi)propanóico é preparado a partir do 2-metil-2-(2- metil-4-(3 -oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi) propanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de
10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 25 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,60 (s, 6H); 2,24 (s, 3H); 3,02 (t, 2H, J=8,2Hz); 3,21 (t, 2H, J=8,2Hz); 6,79 (d, IH, J=8,4Hz); 6,98-7,01 (m, IH); 7,08 (s, IH); 7,39 (d, 1H, J=4,0Hz); 7,67-7,70 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,4Hz).
Massa (ES'): 475 (M-l).
F=130-131°C.
Composto_60: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(4-(4-
(trifluorometil)fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
OH
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(4-(4-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico de acordo com o procedimento geral G. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir. RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,64 (s, 6H); 2,14-2,22 (m, 2H);
3,01-2,78 (m, 2H); 4,99 (t, IH, J=6,5Hz); 6,92 (d, IH, J=8,6Hz); 7,07 (d, IH, J=8,6Hz); 7,29 (d, IH, J=l,2Hz); 7,45 (d, IH, J=l,2Hz); 7,61-7,67 (m, 4H).
Composto 61: Ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico
o
°;>^oh
O ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico através de 2,2 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,2 equivalentes de brometo de benzila de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (20 eq.). Após 16 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado 5 com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído pelo diclorometano. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila 7/3 depois diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63 μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,62 (s, 6H); 2,08-2,18 (m, IH); 2,21-2,29 (m, IH); 2,75-2,85 (m, IH); 3,01-2,92 (m, IH); 4,40 (t, IH, J=I 1,7Hz); 4,62-4,65 (m, 2H); 6,90 (d, IH, J=8,5Hz); 7,01 (d, IH, J=8,5Hz); 7,29-7,37 (m, 6H); 7,51 (d, IH, J=I,2Hz); 7,67-7,70 (m, 4H).
Massa (ES'): 621 / 623 (M-l).
F=58-59°C.
Composto_62: Ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
F o
OH
O ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) fenóxi)- 2-metilpropanóico de acordo com o procedimento geral G. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,56 (s, 6H); 2,14-2,23 (m, 2H); 2,74-2,87 (m, 2H); 4,95 (t, IH, J=7,4Hz); 6,79 (m, 2H); 6,99 (d, IH, J=3,8Hz); 7,25 (d, IH, J=3,7Hz); 7,62 (d, 2H, J=8,6Hz); 7,64 (d, 2H, J=8,6Hz).
Composto 63: Ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)~3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)-2,3-difluorofenóxi)-2-metilpropanóico
2-il)propil)-2,3-difluorofenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-2,3- difluorofenóxi)-2-metilpropanóico através de 2,2 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,2 equivalentes de brometo de benzila de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre
gel de sílica (Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μηι.). O óleo isolado é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (20 eq.). Após
16 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído pelo diclorometano. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila 7/3 depois diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63 μιη.
Massa (ES'): 589 (M-l).
Aspecto: óleo viscoso.
Composto 64: 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)
F
O
O ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil) fenil)tien-
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,59 (s, 6H); 2,03-2,33 (m, 2H); 2,63-2,82 (m, 2H); 4,37 (d, IH, J=ll,7Hz); 4,58 (m, 2H); 6,77 (m, 2H); 6,98 (d, IH, J=3,5Hz); 7,30 (m, 6H); 7,63 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,70 (d, 2H, J=8,5Hz). fenóxi)-butanoato de terciobutila
o
M
F
O
0'
O
2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)butanoato de terciobutila é preparado a partir da 3-(4- hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)-fenil)tien-2-il)propano-l-ona e de 2- bromobutanoato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é retomados por
de amônio, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir.
Composto 65: Ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)butanóico
O ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-butanóico é preparado a partir do 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)butanoato de terciobutila de
reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μιη 100A, coluna: 25*250 mm).
Após 16 horas de agitação, o solvente é eliminado por
acetato de etila. A fase orgânica é lavada por uma solução saturada de cloreto
o
acordo com o procedimento gerai E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 12 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 30/70 a 0/100.
Eluição: diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,10 (t, 3H, J=7,3Hz); 1,98-2,08 (m, 2H); 3,03 (t, 2H, J=7,5Hz); 3,18-3,24 (m, 2H); 4,61 (t, IH, J=6,0Hz); 6,86 (d, 2H, J=8,8Hz); 7,18 (d, 2H, J=8,8Hz); 7,38 (d, IH, J=3,8Hz); 7,65-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 461 (M+l).
F=I 16-117°C.
Composto 66: 2-metil-2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)propanoato de terciobutila
o
oJA
o
F
O 2-metil-2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-propanoato de terciobutila é preparado a partir da 3-(4- hidroxifenil)-l-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e de 2- bromoisobutirato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 16 horas de agitação, o solvente é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é retomados por acetato de etila. A fase orgânica é lavada por uma solução saturada de cloreto de amônio, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob 20 pressão reduzida. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir.
Composto 67: Ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico O ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-metil-2-(4-(3- oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)propanoato de
terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 12 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografía sobre gel de sílica (HPLC preparativo, lichrospher (Merck) RP18 12μιη 100A, coluna: 25*250 mm).
Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 30/70 a 0/100.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,57 (s, 6H); 3,06 (t, 2H, J=7,9Hz); 3,23 (t, 2H, J=6,7Hz); 6,89 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,18 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,38 (d, 1H, J=4,lHz); 7,66-7,69 (m, 3H); 7,75 (d, 2H, J=8,2Hz).
Massa (ES+): 463 (M+l).
F=154-155°C.
Composto 68: 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) fenóxi)-acetato de terciobutila
o
O 2-metil-2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)-propanoato de terciobutila é preparado a partir da 3-(4- hidroxifenil)-1 -(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano- 1-ona e de bromoacetato de terciobutila de acordo com o procedimento geral D.
Após 18 horas de agitação, o meio é acidulado por uma solução do ácido cítrico e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é lavada por uma solução saturada de cloreto de amônio, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 85/15.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,49 (s, 9H); 3,01-3,06 (m, 2H); 3,18-3,23 (m, 2H); 4,50 (s, 2H); 6,85 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,17 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,39 (d, 1H, J=4,lHz); 7,65-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,4Hz). Composto 69: Ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)acético
OH
o
O ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi) acético é preparado a partir do 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)acetato de terciobutila de acordo com o procedimento geral E através de 10 equivalentes do ácido trifluoroacético.
Após 12 horas de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é lavado com água depois o diclorometano é eliminado por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63μιη.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 3,03-3,08 (m, 2H); 3,19-3,24 (m, 2H); 4,66 (s, 2H); 6,89 (d, 2H, J=8,8Hz); 7,22 (d, 2H, J=8,8Hz); 7,38 (d, IH J=4,lHz); 7,66-7,69 (m, 3H); 7,76 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 435 (M+l).
F=182-183°C.
Composto 70: Ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)--3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2-fluorofenóxi)butanóico F O ο.
OH
O ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien- 2-il)propil)-2-fluoro-fenóxi)butanóico é preparado a partir do ácido 2-(2- fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)butanóico através de 2,1 equivalentes de hidreto de sódio e de 5 2,1 equivalentes de brometo de benziIa de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 95/5 a 8/2. sílica 40- 63μιη.). O óleo isolado é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (20 10 eq.). Após 18 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído pelo diclorometano. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (HPLC preparativo, 15 lichrospher (Merck) RP18 12μιη 100A, coluna: 25*250 mm). Eluição: gradiente água, metanol + 0,1% ácido trifluoroacético: 28/72 a 10/90.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,13 (t, 3H, J=7,3Hz); 2,01-2,11 (m, 3H); 2,23-2,34 (m, IH); 2,58-2,98 (m, 2H); 4,32 (d, IH, J=ll,7Hz); 4,52 (dd, IH, J=5,6Hz, J=7,6Hz); 4,59-4,63 (m, 2H); 6,79-6,92 (m, 3H); 6,97 (d, IH, J=3,5Hz); 7,26-7,27 (m, IH); 7,29-7,39 (m, 5H); 7,62 (d, 2H, J=8,5Hz); 7,70 (d, 2H, J=8,5Hz).
Massa (ES+): 573 (M+l).
Aspecto: óleo viscoso.
Composto_7h Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)fur-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)fur-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico de acordo com o procedimento geral G. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir. Composto 72: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil) fenil) fur-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
Cl o
OH
/O
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-
(trifluorometil)fenil)fur-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico através de 2,1 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,1 equivalentes de iodometano de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre 15 gel de sílica (Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μηι.). O óleo isolado é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (5 eq.). Após 18 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase 20 orgânica é concentrada sob pressão reduzida.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,63 (s, 6H); 2,11-2,32 (m, 2H); 2,75-2,97 (m, 2H); 3,34 (s, 3H); 4,25 (dd, IH, J=5,8Hz J=7,6Hz); 6,42 (d, IH, J=3,4Hz); 6,73 (d, IH, J=3,4Hz); 6,93 (d, IH, J=8,5Hz); 7,05 (d, IH, J=8,5Hz); 7,62 (d, 2H, J=8,3Hz); 7,75 (d, 2H, J=8,3Hz).
Massa (ES'): 529 / 531 (M-l).
Aspecto: óleo viscoso.
Composto 73: Ácido 2-(4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)-2,6-dimetilfenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,6-dimetil-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil) fenóxi)- 2-metilpropanóico de acordo com o procedimento geral G. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,51 (s, 6H); 2,07-2,28 (m, 8H); 2,56-2,76 (m, 2H); 4,90-4,95 (m, IH); 6,84 (s, 2H); 6,97 (d, IH, J=3,7Hz); 7,25 (d, IH, J=3,7Hz); 7,61 (d, 2H, J=8,6Hz); 7,66 (d, 2H, J=8,6Hz). Composto 74: Ácido 2-(4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,6-dimetilfenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,6-dimetilfenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-2,6- dimetilfenóxi)-2-metilpropanóico através de 2,1 equivalentes de hidreto de 20 sódio e de 2,1 equivalentes de iodometano de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica (Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μιη.). O óleo isolado é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (5 eq.). Após 18 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida.
RMN 1H (300MHz, MeOD, δ em ppm): 1,43 (s, 6H); 1,91-2,06 (m, IH); 2,11-2,23 (m, 7H); 2,48-2,68 (m, 2H); 3,28 (s, 3H); 4,37 (t, IH, J=6,7Hz);
6,81 (s, 2H); 7,01 (d, IH, J=3,8Hz); 7,41 (d, IH, J=3,8Hz); 7,67 (d, 2H, J=8,2Hz); 7,80 (d, 2H, J=8,2Hz).
Massa (ES+): 524 (M+NH4+), 530 (M+Na+), 545 (M+K+).
Aspecto: óleo viscoso.
Composto 75: 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila é preparado a partir da 3-(2,3- dicloro-4-hidróxi-fenil)-l-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propano-l-ona e de bromo-isobutirato de etila de acordo com o procedimento geral D.
Após 16 horas de agitação, o meio é acidulado por uma solução do ácido cítrico e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é lavada por uma solução saturada de cloreto de amônio, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 100/0 a 8/2.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,27 (t, 3H, J=7,0Hz); 1,61 (s, 6H); 3,18-3,24 (m, 4H); 4,25 (q, 2H, J=7,0Hz); 6,77 (d, IH, J=8,4Hz); 7,11 (d, IH, J=8,4Hz); 7,38 (d, IH, J=3,9Hz); 7,56 (m, IH); 7,63 (d, IH, J=8,2Hz); 7,68 (d, IH, J=3,9Hz); 7,82 (d, IH, J=7,6Hz); 7,88 (s, IH).
Composto 76: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil) fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
Cl o
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-
(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila de acordo com o procedimento geral F através de 10 equivalentes de uma solução de soda 2N.
Após 16 horas em temperatura ambiente, o meio reacional é
concentrado sob pressão reduzida, acidulado com a ajuda de uma solução diluída do ácido clorídrico depois extraído pelo diclorometano. A fase orgânica é secada sobre sulfato de magnésio, filtrada depois concentrada sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: diclorometano/metanol: 9/1. sílica 40-63μπι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,64 (s, 6H); 3,18-3,28 (m, 4H); 6,95 (d, IH, J=8,4Hz); 7,19 (d, IH, J=8,4Hz); 7,37 (d, IH, J=3,9Hz); 7,56 (m, IH); 7,63 (d, IH, J=7,6Hz); 7,69 (d, IH, J=3,9Hz); 7,82 (d, IH, J=7,6Hz); 7,88 (s, IH).
Composto 77: 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila
Cl o
O 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de etila é preparado a partir do 2- (2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2- metilpropanoato de etila de acordo com o procedimento geral G. O resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,28 (t, 3H, J=7,lHz); 1,62 (s, 6H); 2,14-2,22 (m, 2H); 2,81-2,97 (m, 2H); 4,27 (q, 2H, J=7,lHz); 4,95 (t, IH, J=6,4Hz); 6,78 (d, IH, J=8,6Hz); 7,00 (d, IH, J=3,5Hz); 7,05 (d, IH, J=8,6Hz); 7,24 (d, IH, J=3,5Hz); 7,47-7,55 (m, 2H); 7,75 (d, IH, J=7,lHz);
7,82 (s, IH).
Composto 78: 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(3 -(trifluorometil)fenil) tien-2-
il)propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila
Cl o ci>^^o4Ar
F3C
O 2-(2,3 -dicloro-4-(3 -metóxi-3 -(5-(3 -(trifluorometil)fenil) tien-2-il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de etila é preparado a partir do 2- (2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-
2-metilpropanoato de etila através de 1,1 equivalentes de hidreto de sódio e de 1,1 equivalentes de iodometano de acordo com o procedimento geral H.
Após 1 hora de agitação em temperatura ambiente, o meio reacional é hidrolisado e extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida e o resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre gel de sílica.
Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63μηι.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,28 (t, 3H, J=7,lHz); 1,61 (s, 6H); 2,02-2,23 (m, 2H); 2,71-2,94 (m, 2H); 4,25 (q, 2H, J=7,lHz); 3,32 (s, 3H); 4,32-4,36 (m, IH); 6,73 (d, IH, J=8,5Hz); 6,96 (d, IH, J=3,5Hz); 7,01 (d, IH, J=8,5Hz); 7,24 (d, IH, J=3,5Hz); 7,48-7,50 (m, 2H); 7,74 (d, IH, J=7,3Hz); 7,81 (s, IH).
Composto_79: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4- (trifluorometóxi)fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-
(trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado
a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2-
il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico de acordo com o procedimento geral G. O
resíduo de evaporação é utilizado como tal para a realização da etapa a seguir.
Composto_80: Ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-
(trifluorometóxi)fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico
Cl o
ciVyToh
S'
O ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-
(trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)-propil)fenóxi)-2-metilpropanóico é preparado a partir do ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4- (trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico através de 2,1 equivalentes de hidreto de sódio e de 2,1 equivalentes de iodometano de acordo com o procedimento geral H.
O resíduo de evaporação é purificado por cromatografia sobre
gel de sílica (Eluição: ciclo-hexano/acetato de etila: 9/1. sílica 40-63 μηι.). O óleo isolado é solubilizado em etanol em presença de soda 2N (6 eq.). Após 18 horas sob agitação, os solventes são eliminados por evaporação sob pressão reduzida. O resíduo de evaporação é acidulado com a ajuda de uma 20 solução diluída do ácido clorídrico depois extraído por acetato de etila. A fase orgânica é concentrada sob pressão reduzida.
RMN 1H (300MHz, CDCl3, δ em ppm): 1,60 (s, 6H); 1,98- 2,29 (m, 2H); 2,72-2,97 (m, 2H); 3,32 (s, 3H); 4,35 (t, IH, J=6,5Hz); 6,89- 6,97 (m, 2H); 7,01-7,08 (m, IH); 7,16 (d, 1H, J=3,5Hz); 7,22 (d, 2H, J=8,6Hz); 7,59 (d, 2H, J=8,6Hz).
Massa (ES+): 563 / 565 (M+l).
Aspecto: óleo viscoso.
Exemplo 5: Avaliação in viíro de propriedades ativadoras de PPAR dos compostos de acordo com a invenção - Método 1 Princípio
A ativação de PPAR foi avaliada in vitro sobre uma linhagem de fibroblastos de rim de macaco (COS-7) pela medida da atividade 10 transcripcional de quimeras constituídas pelo domínio de ligação onde o DNA do fator de transcrição Gal4 da levedura e pelo domínio de ligação ao ligando dos diferentes PPARs. Os compostos foram testados em doses compreendidas entre 10‘5 e ΙΟΟμΜ sobre as quimeras Gal4-PPARa, γ ou δ, e os EC50 correspondentes foram determinados.
Protocolo
Cultura das células
As células COS-7 provenientes do ATCC foram cultivadas em um meio DMEM suplementado com 10% (vol/vol) de soro de bezerro fetal, 100 U/ml de penicilina (Gibco, Paisley, UK) e 2 mM de L-Glutamina (Gibco, Paisley, UK). As células foram incubadas a 37°C em uma atmosfera úmida contendo 5% de CO2.
Descrição dos plasmídeos utilizados em transfecção
Os plasmídeos Gal4(RE)_TkpGL3, pGal4-hPPARa, pGal4- hPPARy, pGal4-hPPARô e pGal4-(j) foram descritos na literatura (Raspe E et 25 al., 1999). As construções pGal4-hPPARa, pGal4-hPPARy e pGal4-hPPARÔ foram obtidas por clonagem para o vetor pGal4-(|) de fragmentos de DNA amplificados por PCR correspondendo aos domínios DEF de receptores nucleares PPARa, PPARy e PPARÔ humanos.
Transfecção As células COS-7 em suspensão foram transfectadas com 150 ng de DNA por cavidades, com uma relação pGal4-PPAR / Gal4(RE)_TkpGL3 de 1/10, em presença de 10% soro de bezerro fetal. As células foram em seguida semeadas em placas de 96 cavidades (4x104 5 células/cavidades) depois incubadas durante 24 horas a 37°C. A ativação com os compostos a testar é efetuada durante 24h a 37°C no meio sem soro. Depois da experiência, as células foram lisadas e a atividade luciférase foi determinada com a ajuda do Steady-Lite™ HTS (Perkin Elmer) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Resultados
De maneira inesperada, os inventores evidenciaram um aumento significativo e dependente de dose da atividade luciférase nas células transfectadas com os plasmídeos pGal4-hPPAR e tratadas com os compostos de acordo com a invenção. Os dados experimentais são resumidos na tabela 1 15 abaixo, que indica os EC50 medidos para cada isoforma de PPAR, assim como a porcentagem de resposta máxima atingida por cada composto com relação à referência (Ácido fenofíbrico para PPAR a, Rosiglitazona para PPARy e GW501516 para PPAR5).
As atividades medidas diferem de acordo com o composto testado e observa-se também entre os compostos da invenção maior ou menor seletividade frente às isoformas de PPAR:
certos compostos de acordo com a invenção são seletivos por relação à um sub-tipo de PPAR,
outros compostos de acordo com a invenção são simultaneamente ativadores de dois ou três sub- tipos. Tabela I
hPPARalfa hPPARgama h PPARdelta Composto n° % max EC50 μΜ % max EC50 μΜ % max EC50 μΜ 2 43 0,053 11 0,06 91 0,007 4 50 0,125 38 ND 107 0,034 9 54 0,006 41 0,28 84 0,019 11 39 0,288 55 1,17 105 0,003 13 20 0,977 58 0,49 1 ND 15 46 0,163 32 5,66 88 0,253 17 5 0,228 27 0,19 0 ND 19 47 0,001 27 0,18 85 0,015 21 50 0,017 63 0,08 97 0,008 23 48 0,000 49 0,40 95 0,016 27 47 1,314 30 2,82 77 0,589 29 56 0,002 65 1,27 88 0,037 32 52 0,008 67 0,21 75 0,036 34 61 0,060 37 ND 95 0,114 36 47 0,005 63 ND 85 0,009 44 54 0,016 46 0,10 109 0,027 46 58 0,011 30 ND 105 0,018 48 49 0,000 85 0,56 86 0,006 49 46 0,043 24 0,66 93 0,045 61 42 0,591 78 0,03 101 0,006 65 52 0,004 73 ND 79 0,109 69 61 0,033 15 3,53 90 0,292 70 47 0,227 56 0,97 67 0,216 Conclusão:
Esses resultados mostram que os compostos de acordo com a invenção ligam e ativam os receptores hPPARa, hPPARy, e/ou hPPARÔ de maneira significativa. A atividades aos compostos de acordo com a invenção é variável em função da estrutura química do composto testado e de acordo com o sub- tipo de PPAR estudado.
Exemplo 6: Avaliação in vitro de propriedades ativadoras de PPAR de compostos de acordo com a invenção - Método 2
Neste exemplo, o Princípio, as células e os plasmídeos
utilizados para o exemplo 5 foram retomados. Somente a realização da etapa de transfecção difere um pouco. Ela é detalhada abaixo.
As células COS-7 aderentes são transfectadas com 40μg de DNA por caixa de 225 cm2, com uma relação de pGal4-PPAR / Gal4(RE) TkpGL3 de 1/10, em presença de 10% de soro de bezerro fetal. As células são em seguida destacadas e semeadas em ausência de soro em placas de 384 cavidades (2x104 células/cavidades) e incubadas durante 4 horas a 37°C. Os compostos são em seguida diluídos em uma placa 96 cavidades e 5 transferidos na placa 384 cavidades. Ativação com os compostos a testar é efetuada durante 24h suplementares a 37°C em presença de 1% de soro sintético Ultroser™ (Biosepra) desprovido de lipídios. Estas 2 últimas etapas são automatizadas com a ajuda de um posto Genesis Freedom 200™ (Tecan). Depois da experiência, as células são lisadas e a atividade luciférase é 10 determinada com a ajuda do Steady-Lite™ HTS (Perkin Elmer) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Resultados
De maneira inesperada, os inventores evidenciaram um aumento significativo e dependente de dose da atividade luciférase em células 15 transfectadas com os plasmídeos pGal4-hPPAR e tratadas com os compostos de acordo com a invenção. Os dados experimentais são resumidos para a tabela 2 abaixo que indica os EC50 medidos para cada isoforma de PPAR, assim como a porcentagem de resposta máxima atingida por cada composto com relação à referência (Ácido fenofíbrico PPAR a, Rosiglitazona para 20 PPARy e GW501516 para PPARÔ).
As atividades medidas diferiram de acordo com o composto testado e observa-se também entre os compostos da invenção maior ou menor seletividade frente as isoformas PPAR:
certos compostos de acordo com a invenção são seletivos por relação à um sub- tipo de PPAR,
outros compostos de acordo com a invenção são simultaneamente ativadores de dois ou três sub- tipos. Tabela 2
hPP ARalfa hPP ARgama hPP ARdelta Composto % max EC50 μΜ % max EC50 μΜ % max EC50 μΜ n° 6 41 7,86 55 4,11 92 0,53 7 20 5,46 40 1,70 92 0,03 25 55 1,68 27 36,47 75 7,45 30 51 0,05 45 3,93 80 1,53 38 44 0,20 37 1,84 89 0,014 38 40 0,32 39 0,81 94 0,009 39 36 1,01 52 0,55 90 0,006 40 35 0,59 32 0,99 78,29 0,005 41 49 0,61 36 1,49 76 0,01 42 28 2,00 47 0,89 82,12 0,26 50 38 0,26 32 0,27 78 0,05 52 53 0,21 57 1,02 104 0,05 54 43 0,15 62 0,86 107 0,07 55 25 2,80 2 ND 34 4,71 57 44 1,00 39 1,52 88 0,35 59 47 0,00 57 0,23 107 0,03 63 46 4,21 44 7,91 97 0,18 67 45 0,01 37 4,82 75 0,36 72 59 0,27 70 0,16 97 ND Conclusão:
Esses resultados mostram que os compostos de acordo com a invenção ligam e ativam os receptores hPPARa, hPPARy, e/ou hPPARô de maneira significativa. A atividade dos compostos de acordo com a invenção é variável em função da estrutura química do composto testado e de acordo com o sub- tipo de PPAR estudado.
Exemplo 7: Avaliação in vitro de propriedades ativadoras de PPAR5 dos compostos de acordo com a invenção por medida da expressão de genes alvos de PPAR5 em miócitos murinos Princípio
Os efeitos estimuladores do metabolismo lipídico, glicídico e do gasto energético dos compostos de acordo com a invenção foram avaliados pela medida da expressão da Piruvate Dehidrogenase Quinase 4 (PDK4), da 15 CRNAitine Palmotoyl Transferase Ib (CPTlb), de Uncoupling Protein 2 (UCP2) e Uncoupling Protein 3 (UCP3) pelos miócitos murinos tratados durante 24 horas com os compostos de acordo com a invenção. Foi estabelecido que a regulação da expressão destes genes é diretamente controlada por PPARô neste tipo celular. Mais a expressão de genes é aumentada, mais o composto de acordo com a invenção é estimulador do metabolismo nas células musculares.
Protocolo
Diferenciação das células C2C12 em miócitos
As células provenientes da linhagem celular murino C2C12 (proveniente de ECACC) são cultivadas no meio DMEM (Gibco; 41965-039) adicionado de 1% de L-Glutamina (Gibco; 25030), de 1% de penicilina/estreptomicina (VWR; BWSTL0022/100) e 10% de soro de bezerro fetal descomplementado (SVF. Gibco; 10270-106).
As células são semeadas sobre placas de 24 cavidades com densidade de 50.IO3 células/cavidades. Em confluência, o meio é substituído por um meio de diferenciação (meio de cultura de base adicionado de 2% de soro de cavalo (Gibco; 26050-088)) depois incubadas a 37°C e 5% de CO2 durante 4 dias a fim de diferenciar as mesmas em miócitos.
Tratamento
Após 5 dias de diferenciação, as células são colocadas em um meio de deprivação (meio de cultura de base sem soro) durante 6 horas. As 20 células são em seguida tratadas com os compostos de acordo com a invenção para o meio de cultura de deprivação. Os compostos 2, 4, 7, 11, 39, 40, 46, 49 e 72 foram testados com efeito dose, correspondendo a lx, IOx e 100x de seu EC50 PPAR5. Os compostos de acordo com a invenção foram dissolvidos no sulfóxido de dimetila (DMSO, Sigma; D5879). As células foram tratadas 25 durante 24h a 37°C, 5% C02. O efeito dos compostos de acordo com a invenção foi comparado ao efeito do DMSO sozinho.
Extração de RNA, transcrição inversa e PCR quantitativo.
Após tratamento, o RNA total é extraído das células utilizando o kit NucleoSpin® 96 RNA (Macherey Nagel, Hoerdt, França) de acordo com as instruções do fabricante.
\μg de RNA total (quantificado por leitura do espectrofotômetro UV) foi em seguida retro-transcrito em DNA complementar por uma reação de 1 hora a 37°C em um volume total de 30 μΐ 5 contendo tampão IX (Invitrogen), l,5mM de DTT, 0,18mM de dNTPs (Promega), 200ng de pdN6 (Amersham), 3 OU de inibidor de RNase (Promega) e Ιμΐ de MMLV-RT (Invitrogen).
As experiências de PCR quantitativo foram efetuadas utilizando o MyiQ Single-Color Real-Time PCR Detection System (Biorad, 10 MRNAes-la-Coquette, França) e foram realizadas utilizando o kit iQ SYBR Green Supermix de acordo com as recomendações do fornecedor, em placas 96 cavidades, sobre 5μ1 de reações de retro-transcrição diluídas com uma temperatura de hidridização de 60°C. Os pares de iniciadores específicos de genes PDK4, CPTlb, UCP2 e UCP3 estudados foram usados:
· mPDK4: iniciador sentido: 5’-
TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID n°ll) e iniciador anti- sentido 5 ’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3’ (SEQ ID n°12)
• mCPTlb: iniciador sentido: 5’- GGACTGAGACTGTGCGTTCCTG-3 ’ (SEQ ID n°7) e iniciador anti-
sentido: 5’-AGTGCTTGGCGGATGTGGTT-3’ (SEQ ID n°8)
• mUCP2: iniciador sentido: 5’- GT CGG AG AT ACC AG AGC ACT GTCG- 3 ’ (SEQ ID n°13) e iniciador anti- sentido: 5’- CACATCAACAGGGGAGGCGA-3’ (SEQ ID n°14)
• mUCP3: iniciador sentido: 5’- GCACCGCCAGATGAGTTTTG-3’ (SEQ ID n°15) e iniciador anti-sentido:
5’- GACGCTGGAGTGGTCCGCTC-3’ (SEQ ID n°16)
A quantidade de fluorescência emitida é diretamente proporcional à quantidade de DNA complementar presente no começo da reação e amplificada no curso da PCR. Para cada alvo estudado, uma gama é realizada pelas diluições sucessivas de uma poça constituída por alguns microlitros de diferentes reações de retro-transcrição. Os níveis de expressão relativos de cada triagem são assim determinados utilizando as curvas de eficácia obtidas com os pontos de gama.
5 Os níveis de expressão de genes de interesse foram em seguida
normalizados por relação ao nível de expressão do gene de referência 36B4 (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5’- CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3 ’ (SEQ ID n°19) e iniciador anti- sentido: 5 ’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3 ’ (SEQ ID n°20)). O 10 fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo (induzido pelo composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle, foi então calculado. Mais este fator é elevado, mais os compostos de acordo com a invenção têm um caráter ativador da expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada 15 grupo experimental.
Resultados
Os inventores também evidenciaram, sobre miócitos murinos in vitro, que os compostos 2, 4, 7, 11, 39, 40, 46, 48, 63 e 72 possuem efeitos estimuladores da expressão de genes implicadas no metabolismo glicídico, 20 lipídico e na termo-regulação. Os resultados obtidos são apresentados para a tabela 3 abaixo. Esses resultados mostram que os compostos de acordo com a invenção, desde Ix o EC50 PPAR6, induzem um aumento significativo e dependente da dose da expressão de PDK4, CPT lb, UCP2 e UCP3 nos miócitos.
25 Tabela 3
PDK4 CPTlb UCP2 UCP3 Co Dose (μΜ) InduçSo SD Teste-t Indução SD Teste-t InduçSo SD Teste-t Indução SD Teste-t mp 2 Ix EC50 0,006 1,62 0,24 *** 1,81 0,40 * 3,46 0,34 *** 4,29 0,43 *** IOx EC50 0,06 2,11 0,02 *** 1,66 0,91 3,98 0,47 *** 4,62 1,31 *** IOOx 0,6 2,39 0,41 *** 2,97 0,62 *** 4,67 1,34 *** 6,95 1,82 *** EC50 4 Ix EC50 0,02 2,19 0,08 *** 1,78 0,34 *** 2,79 0,27 *** 2.45 0,25 ** IOx EC50 0,2 2,35 0,13 *** 1,93 0,27 *** 2,41 0,13 *** 2,34 0,36 ** IOOx 2 2,13 0,11 *** 1,98 0,38 *** 2,92 0,22 *** 2,37 0,36 ** EC50 7 Ix EC50 0,01 3,45 0,41 *** 1,71 0,34 ** 3,41 1,16 *** 4,30 0,32 *** IOx EC50 0,1 5,30 0,56 *** 2,14 0,41 *** 3,95 0,88 *** 5,09 1,32 *** 100x 1 5,14 0,57 *** 2,50 0,62 *** 2,14 0,27 *** 5,24 1,45 *** EC50 11 Ix EC50 0,003 1,32 0,04 0,96 0,25 2,15 0,49 *** 1,45 0,53 IOx EC50 0,03 2,85 0,42 *** 1,42 0,29 1,68 1,16 2,56 0,81 *** 100x 0,3 4,58 0,47 *** 1,51 0,08 * 3,85 1,06 *** 4,96 1,02 *** ECSO 39 IxECSO 0,007 3,66 0,27 *** 2,46 0,85 *** 4,38 0,75 *** 3,39 0,82 *** I Ox EC50 0,07 6,22 0,63 *** 2,16 0,39 ** 4,56 2,07 *** 3,85 0,87 *** 100x 0,7 5,17 0,50 *** 3,81 0,21 *** 5,63 1,28 *** 5,24 0.63 *** EC 50 40 1 x EC50 0,006 3,79 0,14 *** 1,94 0,55 ** 4,86 0,36 *** 4,12 0,41 *** IOx EC50 0,06 4,05 0,12 *** 2,13 0,31 *** 3,47 0,73 *** 2,97 0,74 *** 100x 0,6 3,88 0,81 *** 1,91 0,77 ** 2,99 1,60 ** 2,72 0,39 *** EC50 46 Ix EC50 0,01 1,81 0,04 *** 2,03 0,36 *** 3,27 0,64 *** 3,38 0,92 *** I Ox EC50 0,1 2,68 0,21 *** 2,63 0,59 *** 5,37 0,82 *** 5,60 0,36 *** IOOx 1 2,67 0,21 *** 2,91 0,40 *** 4,58 0,34 *** 5,61 1,63 *** EC50 48 IxECSO 0,006 0,84 0,08 1,32 0,42 1,13 0,18 1,42 0,08 * I Ox EC50 0,06 1,01 0,04 1,95 0,39 *** 2,04 0,33 *** 1,82 0,53 ** 100x 0,6 1,78 0,16 *** 2,17 0,50 *** 4,64 0,18 *** 3,83 1,19 *** EC50 63 Ix EC50 0,06 1,86 0,14 *** 1,84 0,65 ** 3,36 0,41 *** 4,60 0,29 *** IOx EC50 0,60 2,04 0,21 *** 2,04 0,32 *** 4,44 0,47 *** 5,44 0,43 IOOx 1,6 2,63 0,86 *** 2,61 0,63 *** 4,23 0,44 *** 5,52 1,45 *** EC50 72 Ix EC50 0,01 4,01 0,30 *** 2,24 0,25 *** 3,09 0,87 *** 3,17 0,68 *** IOx EC50 0,1 5,05 0,20 *** 2,96 0,43 *** 4,25 0,97 *** 3,79 0,73 *** IOOx 1 5,64 0,52 *** 3,67 0,64 *** 4,31 1,10 *** 4,48 0,25 *** EC50 Conclusão
De maneira inesperada, os dados experimentais apresentados mostram que os compostos de acordo com a invenção têm uma ação metabólica nos miócitos murinos por ativação de PPARÔ. Exemplo 8: Avaliação in vivo em camundongos E2/E2, das propriedades hipolipemiantes e estimuladoras da síntese de HDL-colesterol dos compostos de acordo com a invenção pelas dosagens lipídicas e medida da expressão de genes implicadas no metabolismo lipídico e glicídico e a 5 dissipação de energia Princípio
As propriedades hipolipemiantes e estimuladoras da síntese do HDL-colesterol dos compostos de acordo com a invenção foram avaliadas in vivo pela dosagem dos lipídios plasmáticos, a análise da distribuição do 10 colesterol e dos triglicerídeos nas diferentes frações lipoprotéicas plasmáticas e pela medida da expressão de genes alvos dos PPAR para o fígado e o músculo esquelético após tratamento, com o composto 2 de camundongos E2/E2 dislipidêmicos.
O modelo murino utilizado é de camundongos de tipo 15 ApoE2/E2, camundongos transgênicos para a isoforma E2 da apolipoprotéina E humana (Sullivan PM et al, 1998). No homem, esta apolipoprotéina, constituindo lipoprotéinas de fraca a muito fraca densidade (LDL-VLDL), está presente sob três isoformas E2, E3 e E4. A forma E2 apresenta uma mutação sobre um aminoácido na posição 158, o que enfraquece 20 consideravelmente a afinidade desta proteína para o receptor de LDL. A depuração das VLDL é, deste fato, quase nula. Produz-se então um acúmulo de lipoprotéinas de fraca densidade e uma hiperlipidemia mista dita de tipo III (colesterol e triglicerídeos elevados).
PPARa regula a expressão de genes envolvidas no transporte 25 dos lipídios (apolipoprotéinas tais como Apo AI, Apo AU e Apo CIII, transportadores da membranas tais como FAT) ou o catabolismo dos lipídios (ACOX1, CPT-I ou CPT-II, enzimas da β-oxidação dos ácidos graxos). Um tratamento pelos ativadores de PPAR α se traduz portanto, junto ao homem como junto ao roedor, por uma diminuição das taxas circulantes de triglicerídeos e ácidos graxos livres. A medida dos lipídios e ácidos graxos livres plasmática após tratamento pelos compostos de acordo com a invenção é então um indicador do caráter agonista dos PPAR e então do caráter hipolipemiante aos compostos de acordo com a invenção.
As propriedades agonistas de PPAR α das moléculas de acordo
com a invenção previamente medidas in vitro devem se traduzir ao nível hepático por uma modulação da expressão de genes alvos diretamente sob o controle do receptor PPAR a. Os genes que foram estudados nesta experiência são os genes codificando para PDK4 (Piruvate Desidrogénase 10 Quinase isoforma 4, enzima do metabolismo glicídico), o Acoxl (o Acoxl presente em camundongos corresponde ao gene do ACO junto ao homem (Acil Co-enzimaA Oxydase, uma enzima chave para o mecanismo da β- oxidação dos ácidos graxos)) e para Apo CIII (uma apolipoprotéina implicada para o metabolismo lipídico).
Um tratamento pelos ativadores de PPAR6 se traduz junto ao
homem como junto ao roedor, por um aumento do taxas de HDL-colesterol plasmático.
A análise da distribuição do colesterol após tratamento pelos compostos de acordo com a invenção permite então evidenciar o caráter estimulador da síntese do HDL-colesterol dos compostos de acordo com a invenção.
As propriedades agonistas de PPARÔ das moléculas de acordo com a invenção previamente medidas in vitro devem também se traduzir ao nível do músculo esquelético por uma sobre- expressão de genes alvos 25 diretamente sob o controle do receptor PPARô. Os genes que foram estudados nesta experiência são os genes codificando para PDK4 (Piruvate Desidrogénase Quinase isoforma 4, enzima do metabolismo glicídico) e UCP2 (Uncoupling Protein 2, transportador mitocondrial implicado na termo- regulação). A medida da atividade transcripcional de genes alvos dos PPAR após tratamento pelos compostos de acordo com a invenção é então também um indicador do caráter hipolipemiante dos compostos de acordo com a invenção.
Protocolo
Tratamento dos animais
Camundongos transgênicos Apo E2/E2 foram mantidos sob um ciclo luz/obscuridade de 12/12 horas a uma temperatura constante de 20 ± 3°C. Após uma aclimatação de uma semana, os camundongos foram pesados e reunidos por grupos de 6 animais selecionados de tal modo que Ia distribuição de seus pesos corporais e de suas taxas de lipídios plasmáticos determinados uma primeira vez antes da experiência sejam uniformes. Os compostos testados foram colocados em suspensão em carboximetilcelulose (Sigma C4888) e administrados por sonda intra-gástrica, à razão de uma vez por dia durante 13 dias na dose escolhida. Os animais tiveram acesso livre à água e a ração (regime padrão). Depois da experiência, os animais foram anestesiados após um jejum de 4 horas, um retirada de sangue foi efetuada sobre anticoagulante (EDTA) depois os camundongos foram pesados e submetidos a eutanásia. O plasma foi separado por centrifugação a 3000 rpm durante 20 minutos, os amostras foram conservadas à + 4°C.
As amostras de fígado e de tecido muscular esquelético foram retiradas e congeladas logo em nitrogênio líquido depois conservadas à -80°C para as análises posteriores.
Análise da distribuição do colesterol em frações lipoprotéicas plasmáticas.
As diferentes frações lipídicas (VLDL, LDL, HDL) do plasma
foram separadas por uma cromatografia Gel - Filtração. As concentrações de colesterol e de triglicerídeos foram em seguida medidas em cada fração pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon-França) de acordo com as recomendações do fornecedor. Medida do colesterol total plasmático
As concentrações plasmáticas de colesterol total foram medidas pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon-França) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Medida do HDL-colesterol
As lipoprotéinas de baixa densidade (VLDL e LDL) foram precipitadas por Fosfotungstato. O precipitado foi eliminado por centrifugação. O HDL-colesterol presente no sobrenadante foi quantificado pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon-França) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Análise de expressão gênica por RT-PCR quantitativo Tecido hepático
O RNA total foi extraído a partir de fragmentos de fígado utilizando o kit NucleoSpin® 96 RNA (Macherey Nagel, Hoerdt, França) de acordo com as instruções do fabricante.
Tecido esquelético
O RNA total foi extraído a partir de fragmentos de músculo esquelético gastrocnêmio utilizando o kit RNeasy® Fibrous tissue kit (Qiagen) de acordo com as instruções do fabricante.
1 μg de RNA total (quantificado por espectrofotometria) foi em
seguida transcrito reverso em DNA complementar por uma reação de 1 hora a 37°C em um volume total de 30μ1 contendo tampão IX (Invitrogen), l,5mM de DTT, 0,18mM de dNTPs (Promega), 200ng de pdN6 (Amersham), 30U de inibidor de RNase (Promega) e Ιμΐ de MMLV-RT (Invitrogen).
As experiências de PCR quantitativo foram efetuadas
utilizando o MyiQ Single-Color Real-Time PCR Detection System (Biorad, MRNAes-la-Coquette, França) e foram realizados utilizando o kit iQ SYBR Green Supermix de acordo com as recomendações do fornecedor, em placas 96 cavidades, sobre 5μ1 de reação de transcrição reversa diluída com uma temperatura de hidridização de 60°C. Pares de iniciadores específicos de genes PDK4, Acoxl, ApoCIII e UCP2 estudados foram usados:
• mPDK4: iniciador sentido: 5’- TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID n°ll) e iniciador anti-
sentido 5 ’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3 ’ (SEQ ID n°12)
• mACOXl: iniciador sentido: 5’- GAAGCCAGCGTTACGAGGTG-3 ’ (SEQ ID n°3) e iniciador anti-sentido: 5’- TGGAGTTCTTGGGACGGGTG-3’ (SEQ ID n°4)
• mApoCIII: iniciador sentido: 5’- CTCTTGGCTCTCCTGGCATC-3’ (SEQ ID n°5) e iniciador anti-sentido 5’-
GCATCCTGGACCGTCTTGGA-3 ’ (SEQ ID n°6)
• mUCP2: iniciador sentido: 5’- GTCGGAGATACCAGAGCACTGTCG-3’ (SEQ ID n°13) e iniciador anti- sentido: 5 ’-CAC ATCAAC AGGGG AGGCGA-3 ’ (SEQ ID n°14)
Nos dois casos (tecido hepático e tecido muscular esquelético),
a quantidade de fluorescência emitida é diretamente proporcional á quantidade de DNA complementar presente no começo da reação e amplificada no curso da PCR. Para cada alvo estudado, uma gama é realizada pelas diluições sucessivas de uma poça constituída por alguns microlitros de 20 diferentes reações de retro-transcrição. Os níveis de expressão relativos de cada triagem são assim determinados utilizando as curvas de eficácia obtidas com os pontos de gama.
Os níveis de expressão de genes de interesse foram em seguida normalizados, para o tecido hepático por relação ao nível de expressão do 25 gene de referência 36B4 (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5’-CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3’ (SEQ ID n°19) e iniciador anti-sentido: 5’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3’ (SEQ ID n°20)) e, para o tecido muscular esquelético por relação ao nível de expressão do gene de referência 18S (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5'-CGGACACGGACAGGATTGACAG-3’ (SEQ ID n°21) e o iniciador anti-sentido: 5'-AATCTCGGGTGGCTGAACGC-3' (SEQ ID n°22).
O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo 5 (induzido pelo composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle, foi então calculado para cada amostra. Mais este fator é elevado, mais o composto tem um caráter ativador de expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Resultados
A figura 1-1 compara as taxas de colesterol total plasmático após 7 e 13 dias de tratamento com o composto 2 a 50 mpk às taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, as taxas de colesterol total plasmático foram significativamente diminuídas pelo tratamento desde 7 dias.
A figura 1-2 compara as taxas de HDL-colesterol plasmático após 7 e 13 dias de tratamento com o composto 2 a 50 mpk às taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, as taxas de HDL- colesterol plasmático foram significativamente aumentadas pelo tratamento desde 7 dias.
A figura 1-3 apresenta a distribuição do colesterol nas diferentes frações lipoprotéicas plasmáticas dos camundongos E2/E2 controles ou tratados durante 13 dias com o composto 2 a 50 mpk. De maneira inesperada, as taxas de HDL-colesterol plasmático foram aumentadas 25 pelo tratamento com o composto 2, administrado a dose de 50 mpk. Observa- se igualmente uma diminuição significativa das taxas de LDL e VLDL plasmáticas pelo tratamento com o composto 2, administrado a dose de 50 mpk.
A figura 1-4 apresenta a distribuição dos triglicerídeos nas diferentes frações lipoprotéicas plasmáticas dos camundongos E2/E2 controles ou tratados durante 13 dias com o composto 2 a 50 mpk. De maneira inesperada, as taxas de triglicerídeos presentes em VLDL foram diminuídos pelo tratamento com o composto 2, administrado a dose de 50 5 mpk.
Análise da expressão gênica por RT-PCR quantitativo
Os inventores também evidenciaram in vivo que os compostos de acordo com a invenção são reguladores da expressão de genes alvos dos PPAR. Os resultados apresentados sobre as figuras 1-5 a 1-9 mostram que o composto 2, administrado a 50 mpk durante 13 dias à camundongos E2/E2, induziram um aumento significativo da expressão hepática de genes codificando para PDK4 (figura 1-5), o Acoxl (figura 1-6), uma diminuição da expressão hepática do gene codificando para ApoCIII (figura 1-7) assim como um aumento significativo para o músculo esquelético de genes codificando para PDK4 (figura 1-8) e UCP2 (figura 1-9). Estes genes codificam para enzimas implicadas para metabolismo dos lipídios e dos glicídios assim como a dissipação de energia e o fato de que sua expressão seja modulada pelos compostos de acordo com a invenção reforça a idéia de que esses compostos apresentam um interesse principal para o quadro das patologias metabólicas. Conclusão
Os dados experimentais apresentados mostram que os compostos de acordo com a invenção estimulam in vivo a síntese de HDL- colesterol ao mesmo tempo tendo um efeito hipolipemiante (diminuição das taxas plasmáticas de colesterol e de triglicerídeos). Além disso, os dados 25 experimentais apresentados mostram que os compostos de acordo com a invenção modulam a expressão de genes regulados pela ativação dos PPAR que codificam para enzimas implicadas para o metabolismo dos lipídios e dos glicídios e na dissipação de energia.
Exemplo 9: Avaliação in vivo, em camundongos C57B16, de propriedades hipolipemiantes e estimuladoras da síntese de HDL colesterol dos
compostos de acordo com a invenção
Princípio
O efeito do composto 2, administrado com efeito em doses, é avaliado in vivo em camundongos C57B16 após 14 dias de tratamento por via oral. Depois do tratamento, o efeito hipolipemiante do composto 2 é avaliado pela medida das taxas de colesterol total, de HDL-colesterol, de triglicerídeos e do ácidos graxos livres plasmáticos.
Demonstrou-se que um tratamento pelos ativadores de PPARÔ se traduz junto ao homem assim como junto ao roedor, por um aumento das taxas de HDL-colesterol plasmático.
As propriedades agonistas de PPARô das moléculas de acordo com a invenção previamente medidas in vitro devem se traduzir ao nível do músculo esquelético por uma sobre-expressão de genes alvos diretamente sob 15 o controle do receptor PPARô: os genes que foram estudados nesta experiência são os genes codificando para UCP2 (Uncoupling Protein 2, transportador mitocondrial implicado na termo-regulação) e PDK4 (Piruvate Desidrogénase Quinase isoforma 4, enzima do metabolismo glicídico).
A medida da atividade transcripcional de genes alvos dos PPAR após tratamento pelos compostos de acordo com a invenção é então também um indicador do caráter hipolipemiante dos compostos de acordo com a invenção.
Protocolo
Tratamento dos animais Os camundongos C57B16 fêmeas foram mantidos sob um ciclo
luz/obscuridade de 12/12 horas a uma temperatura constante de 20 ± 3°C. Após uma aclimatação de uma semana, os camundongos foram pesados e reunidos por grupos de 6 animais selecionados de tal modo que a distribuição de seu peso corporal, de suas taxas de lipídios plasmáticos e de colesterol total determinados uma primeira vez antes da experiência seja uniforme. Os compostos testados foram colocados em suspensão em carboximetilcelulose (Sigma C4888) e administrados por sonda intra-gástrica, à razão de uma vez por dia durante 14 dias na dose escolhida. Os animais tiveram acesso livre à 5 água e a ração (regime padrão). Depois da experiência, os animais foram anestesiados após um jejum de 4 horas. Uma retirada de sangue foi efetuada sobre anticoagulante (EDTA) depois os camundongos foram pesados e submetidos a eutanásia. O plasma foi separado por centrifugação a 3000 rpm durante 20 minutos, os amostras foram conservadas à +4°C.
As amostras de tecido muscular esquelético foram retiradas e
congeladas logo em nitrogênio líquido depois conservadas à -80°C para os análises posteriores.
Medida do colesterol total e dos triglicerídeos plasmáticos
As concentrações plasmáticas de colesterol total e dos triglicerídeos foram medidas pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon- França) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Medida do HDL-colesterol
As lipoprotéinas de baixa densidade (VLDL e LDL) foram precipitadas por Fosfotungstato. O precipitado foi eliminado por centrifugação. O HDL-colesterol presente no sobrenadante foi quantificado pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon-França) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Medida dos ácidos graxos livres plasmáticos
As concentrações plasmáticas do ácidos graxos livres foram medidas pelas dosagens enzimáticas (WACO chemicals) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Análise de expressão gênica por RT-PCR quantitativo Tecido esquelético
O RNA total foi extraído a partir de fragmentos de músculo esquelético gastrocnêmio utilizando o kit RNeasy® Fibrous tissue kit (Qiagen) de acordo com as instruções do fabricante.
1 μg de RNA total (quantificado por leitura do espectrofotômetro) foi em seguida transcrito reverso em DNA complementar 5 por uma reação de 1 hora a 37°C em um volume total de 30μ1 contendo tampão IX (Invitrogen), l,5mM de DTT, 0,18mM de dNTPs (Promega), 200ng de pdN6 (Amersham), 30U de inibidor de RNase (Promega) e Ιμΐ de MMLV-RT (Invitrogen).
As experiências de PCR quantitativo foram efetuadas 10 utilizando o MyiQ Single-Color Real-Time PCR Detection System (Biorad, MRNAes-la-Coquette, França) e foram realizados utilizando o kit iQ SYBR Green Supermix de acordo com as recomendações do fornecedor, em placas 96 cavidades, sobre 5μ1 de reação de transcrição reversa diluída com uma temperatura de hidridização de 60°C. Pares de iniciadores específicos de 15 genes estudados foram usados:
• mPDK4: iniciador sentido: 5’- TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID n°ll) e iniciador anti- sentido 5 ’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3 ’ (SEQ ID n°12)
• mUCP2: iniciador sentido: 5’- GTCGGAGATACCAGAGCACTGTCG-3 ’ (SEQ ID n°13) e iniciador anti-
sentido: 5 ’ -CACATCAACAGGGGAGGCGA-3 ’ (SEQ ID n°14)
A quantidade de fluorescência emitida é diretamente proporcional à quantidade de DNA complementar presente no começo da reação e amplificada no curso da PCR. Para cada alvo estudado, uma gama é 25 realizada pelas diluições sucessivas de uma poça constituída por alguns microlitros de diferentes reações de transcrição reversa. Os níveis de expressão relativos de cada triagem são assim determinados utilizando as curvas de eficácia obtidas com os pontos de gama.
Os níveis de expressão de genes de interesse foram em seguida normalizados por relação ao nível de expressão do gene de referência 18S (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5'- CGGACACGGACAGGATTGACAG-3' (SEQ ID n°21) e iniciador anti- sentido: 5AATCTCGGGTGGCTGAACGC-3' (SEQ ID n°22)).
O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo
(induzido pelo composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle, foi então calculado para cada amostra. Mais este fator é elevado, mais o composto tem um caráter ativador de expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução
em cada grupo experimental.
Resultados
De maneira geral, os resultados obtidos mostram que o composto 2 melhora o perfil lipídico dos camundongos C57B16 tratados durante 14 dias.
A figura 2-1 compara as taxas de colesterol total plasmáticos
após 14 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 1, 5, 10 e 50 mpk às taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, as taxas de colesterol total plasmático foram significativamente aumentadas a 5 e 50mpk.
A figura 2-2 compara as taxas de HDL-colesterol plasmático
após 14 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 1, 5, 10 e 50 mpk às taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, as taxas de HDL-colesterol plasmático foram significativamente aumentadas pelo tratamento de maneira dependente da dose desde lmpk.
A figura 2-3 compara as taxas de triglicerídeos plasmáticos
após 14 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 1, 5, 10 e 50 mpk às taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, as taxas de triglicerídeos plasmáticos foram diminuídas de maneira dependente da dose, com um efeito significativo em 50 mpk. A figura 2-4 compara as taxas do ácidos graxos livres plasmáticos após 14 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 1, 5, 10 e 50 mpk às taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, as taxas do ácidos graxos livres plasmáticos foram diminuídas 5 significativamente desde 10 mpk.
Análise da expressão gênica por RT-PCR quantitativo
Os inventores também evidenciaram que os compostos de acordo com a invenção são, in vivo, reguladores da expressão de genes alvos dos PPAR. Os resultados apresentados sobre as figuras 2-5 e 2-6 mostram que 10 o composto 2, administrado a 50 mpk durante 14 dias aos camundongos C57B16, induziu para o músculo esquelético um aumento significativo da expressão de genes codificando para PDK4 (figura 2-5) e UCP2 (figura 2-6). Estes genes codificam para proteínas implicadas no metabolismo dos glicídios e a dissipação de energia e faz com que sua expressão seja modulada pelos 15 compostos de acordo com a invenção e reforce a idéia de que estes compostos apresentam um interesse principal para o quadro das patologias metabólicas. Conclusão
De maneira inesperada, os dados experimentais mostram que os compostos de acordo com a invenção estimulam in vivo a síntese de HDL- 20 colesterol ao mesmo tempo tendo um efeito hipolipemiante (diminuição da taxa plasmática de triglicerídeos e do ácidos graxos livres). Além disso, os dados experimentais mostram que os compostos de acordo com a invenção modulam para o músculo esquelético a expressão de genes regulados pela ativação de PPAR, genes que codificam para enzimas implicadas no 25 metabolismo dos glicídios e na dissipação de energia.
Exemplo 10: Avaliação in vivo, em camundongos C57B16, das propriedades estimuladoras da síntese de HDL colesterol dos compostos de acordo com a invenção pelas dosagens lipídicas e medida da expressão de genes implicadas no metabolismo lipídico, glicídico e a dissipação de energia
Princípio
O efeito dos compostos de acordo com a invenção foi avaliado in vivo em camundongos C57B16 após 14 dias de tratamento por via oral.
Depois do tratamento, a distribuição do colesterol nas diferentes frações lipoprotéicas plasmáticas foi determinada. Esta foi comparada ao perfil obtido junto aos controles de animais (não tratados pelos compostos de acordo com a invenção). O efeito dos compostos de acordo com a invenção foram avaliados em camundongos C57B16 pela medida das taxas plasmáticas de colesterol 10 total e de HDL-colesterol após 14 dias de tratamento por via oral. Essas taxas foram comparadas às obtidas com os controles de animais (não tratados pelos compostos de acordo com a invenção). A diferença medida testemunha o efeito hipolipemiante aos compostos de acordo com a invenção.
Demonstrou-se que um tratamento pelos ativadores de PPARô se traduz junto ao homem como junto ao roedor, por um aumento das taxas de HDL-colesterol plasmático.
As propriedades agonistas de PPARÔ das moléculas de acordo com a invenção previamente medidas in vitro devem se traduzir ao nível do músculo esquelético por uma sobre-expressão de genes alvos diretamente sob 20 o controle do receptor PPARô: os genes que foram estudados nesta experiência são os genes codificando para PDK4 (enzima do metabolismo glicídico), CPTlb (enzima do metabolismo lipídico), UCP2 e UCP3 (transportadores mitocondriais envolvidos na termo-regulação).
A medida da atividade transcripcional de genes alvos dos PPAR após tratamento pelos compostos de acordo com a invenção é então também um indicador do caráter hipolipemiante aos compostos de acordo com a invenção.
Protocolo
Tratamento dos animais Os camundongos C57B16 fêmeas foram mantidos sob um ciclo luz/obscuridade de 12/12 horas a uma temperatura constante de 20 ± 3 °C. Após uma aclimatação de uma semana, os camundongos foram pesados e reunidos por grupos de 6 animais selecionados de tal modo que a distribuição 5 de seu peso corporal, de suas taxas de lipídios plasmáticos e de colesterol total determinados uma primeira vez antes da experiência seja uniforme. Os compostos testados foram colocados em suspensão em carboximetilcelulose (Sigma C4888) e administrados por sonda intra-gástrica, à razão de uma vez por dia durante 14 dias na dose escolhida. Os animais tiveram acesso livre à 10 água e a ração (regime padrão). Depois da experiência, os animais foram anestesiados após um jejum de 4 horas, um retirada de sangue foi efetuada sobre anticoagulante (EDTA) depois os camundongos foram pesados e submetidos a eutanásia. O plasma foi separado por centrifugação a 3000 rpm durante 20 minutos, os amostras foram conservadas à + 4°C.
As amostras de tecido muscular esquelético foram retiradas e
congeladas logo em nitrogênio líquido depois conservadas à -80°C para os análises posteriores.
Medida do colesterol total plasmático
As concentrações plasmáticas de colesterol total foram medidas pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon-França) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Medida do HDL-colesterol
As lipoprotéinas de baixa densidade (VLDL e LDL) foram precipitadas por Fosfotungstato. O precipitado foi eliminado por centrifugação. O HDL-colesterol presente no sobrenadante foi quantificado pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon-França) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Análise da distribuição do colesterol em frações lipoprotéicas plasmáticas
As diferentes frações lipídicas (VLDL, LDL, HDL) do plasma foram separadas por uma cromatografia Gel - Filtração. As concentrações de colesterol foram em seguida medidas em cada fração pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon-França) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Análise de expressão gênica por RT-PCR quantitativo
O RNA total foi extraído a partir de fragmentos de músculo esquelético gastrocnêmio utilizando o kit RNeasy® Fibrous tissue kit (Qiagen) de acordo com as instruções do fabricante.
I^g de RNA total (quantificado por leitura do IO espectrofotômetro) foi em seguida transcrito reverso em DNA complementar por uma reação de 1 hora a 37°C em um volume total de 30μ1 contendo tampão IX (Invitrogen), l,5mM de DTT, 0,18mM de dNTPs (Promega), 200ng de pdN6 (Amersham), 30U de inibidor de RNase (Promega) e Ιμΐ de MMLV-RT (Invitrogen).
As experiências de PCR quantitativo foram efetuadas
utilizando o MyiQ Single-Color Real-Time PCR Detection System (Biorad, MRNAes-la-Coquette, França) e foram realizadas utilizando o kit iQ SYBR Green Supermix de acordo com as recomendações do fornecedor, em placas 96 cavidades, sobre 5μ1 de reação de transcrição reversa diluída com uma 20 temperatura de hidridização de 60°C. Pares de iniciadores específicos de genes estudados foram usados:
• mPDK4: iniciador sentido: 5’- TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID n°ll) e iniciador anti- sentido 5 ’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3 ’ (SEQ ID n°12)
· mCPTlb: iniciador sentido: 5’-
GGACTGAGACTGTGCGTTCCTG-3 ’ (SEQ ID n°7) e iniciador anti- sentido: 5’-AGTGCTTGGCGGATGTGGTT-3’ (SEQ ID n°8)
• mUCP2: iniciador sentido: 5’- GTCGGAGATACCAGAGCACTGTCG-3’ (SEQ ID n°13) e iniciador anti- sentido: 5’- CACATCAACAGGGGAGGCGA-3’ (SEQ ID n°14)
• mUCP3: iniciador sentido: 5’-
GCACCGCCAGATGAGTTTTG-3 ’ (SEQ ID n°15) e iniciador anti-sentido: 5’- GACGCTGGAGTGGTCCGCTC-3’ (SEQ ID n°16)
A quantidade de fluorescência emitida é diretamente
proporcional à quantidade de DNA complementar presente no começo da reação e amplificada no curso da PCR. Para cada alvo estudado, uma gama é realizada pelas diluições sucessivas de uma poça constituída por alguns microlitros de diferentes reações de transcrição reversa. Os níveis de 10 expressão relativos de cada triagem são assim determinados utilizando as curvas de eficácia obtidas com os pontos de gama.
Os níveis de expressão de genes de interesse foram em seguida normalizados por relação ao nível de expressão do gene de referência 18S (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5'- CGGACACGGACAGGATTGACAG-3' (SEQ ID n°21) e iniciador anti- sentido: 5'-AATCTCGGGTGGCTGAACGC-3' (SEQ ID n°22)).
O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo (induzido pelo composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle, foi então calculado para cada amostra. Mais este 20 fator é elevado, mais o composto tem um caráter ativador da expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Resultados
De maneira geral, os resultados obtidos mostram que os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção melhoram o perfil lipídico dos camundongos C57B16 tratados durante 14 dias.
A figura 3-1 compara as taxas de colesterol total plasmático após 14 dias de tratamento com os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção, administrados a 50 mpk às taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, as taxas de colesterol total plasmático foram significativamente aumentadas pelo tratamento com os compostos 4 e 7 a 50mpk.
A figura 3-2 compara as taxas de HDL-colesterol plasmático 5 após 14 dias de tratamento com os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção, administradas a 50 mpk às taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, as taxas de HDL-colesterol plasmático foram significativamente aumentadas pelo tratamento com o composto 4 a 50mpk. O tratamento pelo composto 7 de acordo com a invenção a 50 mpk a 10 igualmente induzido um aumento, não significativa, do taxas de HDL- colesterol.
A figura 3-3 apresenta a distribuição do colesterol nas frações lipoprotéicas plasmáticas dos camundongos C57B16 controles ou tratados durante 14 dias com os compostos 4 e 7 a 50 mpk. De maneira inesperada, as taxas de HDL-colesterol plasmático foram aumentadas pelos tratamentos com os compostos 4 e 7.
Análise da expressão gênica por RT-PCR quantitativo
Os inventores também evidenciaram que os compostos de acordo com a invenção são, in vivo, reguladores da expressão de genes alvos 20 dos PPAR. Os resultados apresentados sobre as figuras 3-4 a 3-7 mostram que os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção, administrados a 50 mpk durante 14 dias aos camundongos C57B16, induzem para o músculo esquelético um aumento significativo de genes codificando para PDK4 (figura
3-4), CPTlb (figura 3-5), UCP2 (figura 3-6) e UCP3 (figura 3-7). Estes genes 25 codificam para enzimas fortemente implicadas nos metabolismos lipídico, glicídico e a dissipação de energia, e o fato de que sua expressão seja modulada pelos compostos de acordo com a invenção reforça a idéia de que estes compostos apresentam um interesse potencial principal para o quadro das patologias metabólicas. Conclusão
De maneira inesperada, os dados experimentais apresentados mostram que os compostos de acordo com a invenção estimulam in vivo a síntese de HDL-colesterol. Além disso, os dados experimentais apresentados 5 mostram que os compostos de acordo com a invenção modulam para o músculo esquelético a expressão de genes regulados pela ativação dos PPAR que codificam para enzimas fortemente implicadas para o metabolismo dos glicídios e na dissipação de energia.
Exemplo 11: Avaliação in vivo, em camundongos db/db, das propriedades hipolipemiantes, antidiabéticas e ativadoras dos PPAR dos compostos de acordo com a invenção Princípio
O efeito dos compostos de acordo com a invenção é avaliado in vivo em camundongos db/db pela medida dos triglicerídeos plasmáticos e 15 da insulinemia após 28 dias de tratamento por via oral com o composto 2. Essas taxas são comparadas às obtidas com os controles de animais (não tratados pelo composto de acordo com a invenção). A diferença medida testemunha o efeito hipolipemiante e sobre a insulino-resistência do composto de acordo com a invenção.
A eficácia do composto de acordo com a invenção é também
avaliada pela medida, nos tecidos hepáticos e musculares, da expressão de genes envolvidos no metabolismo glicídico, lipídico, e na dissipação de energia. Os níveis de expressão de cada gene são normalizados por relação ao nível de expressão de genes de referência 36B4 para o fígado e 18S para o 25 músculo esquelético. O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo (induzido pelo composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle, é em seguida calculado. Mais este fator é elevado, mais o composto tem um caráter ativador de expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Protocolo
Tratamento dos animais
Os camundongos db/db fêmeas foram mantidos sob um ciclo luz/obscuridade de 12/12 horas a uma temperatura constante de 20 ± 3°C. Após uma aclimatação de uma semana, os camundongos foram pesados e reunidos por grupo de 8 animais selecionados de tal modo que a distribuição de seus pesos corporais e de suas taxas de lipídios plasmáticos determinadas uma primeira vez antes da experiência sejam uniformes. Os compostos testados foram colocados em suspensão em carboximetilcelulose (Sigma C4888) e administrados por sonda intra-gástrica, à razão de uma vez por dia durante 28 dias na dose escolhida. Os animais tiveram acesso livre à água e a ração (regime padrão). A ingestão de ração e o aumento de peso são registrados durante toda a experiência. Depois da experiência, os animais foram anestesiados após um jejum de 4 horas, uma retirada de sangue foi efetuada sobre anticoagulante(EDTA) depois os camundongos foram pesados e submetidos a eutanásia. O plasma foi separado por centrifugação a 3000 rpm durante 20 minutos, os amostras foram conservadas à + 4°C.
As amostras de tecidos hepático e muscular foram retiradas e congeladas logo em nitrogênio líquido depois conservadas à -80°C para análises posteriores.
Medida das taxas de triglicerídeos plasmáticos
As concentrações plasmáticas dos triglicerídeos foram medidas pelas dosagens enzimáticas (bioMérieux-Lyon-França) de acordo com as recomendações do fornecedor.
Medida do insulinemia plasmática
A dosagem de insulina de murinos é efetuada pela método Elisa (usando o kit INSKR020 do fornecedor Crystal chem). Um anticorpo anti-insulina de camundongos é fixado sobre uma microplaca. O soro a dosar para insulina é em seguida depositado sobre esta placa. Um anticorpo anti- insulina de cobaia irá reconhecer o complexo insulina/anticorpo monoclonal anti-insulina de camundongos e se fixar no mesmo. Por fim, um anticorpo anti-cobaia marcado com peroxidase é adicionado se fixando ao anticorpo 5 anti-insulina de cobaia. A reação colorimétrica é realizada por adição do substrato da enzima OPD (Orto Fenil Diamina). A intensidade da coloração é proporcional à quantidade de insulina presente na amostra.
Análise de expressão gênica por RT-PCR quantitativo Tecido hepático
O RNA total foi extraído a partir de fragmentos de fígado
utilizando o kit NucleoSpin® 96 RNA (Macherey Nagel, Hoerdt, França) de acordo com as instruções do fabricante.
Tecido muscular
O RNA total foi extraído a partir de fragmentos de músculo utilizando o kit RNeasy® Fibrous tissue kit (Qiagen) de acordo com as instruções do fabricante.
^g de RNA total (quantificado por espectrofotometria UV) foi em seguida retro- transcrito em DNA complementar por uma reação de 1 hora a 37°C em um volume total de 30μ1 contendo tampão IX (Invitrogen), l,5mM de DTT, 0,18mM de dNTPs (Promega), 200ng de pdN6 (Amersham), 3 OU de inibidor de RNase (Promega) e Ιμΐ de MMLV-RT (Invitrogen).
As experiências de PCR quantitativo foram efetuadas utilizando o MyiQ Single-CoIor Real-Time PCR Detection System (Biorad, MRNAes-la-Coquette, França) e foram realizados utilizando o kit iQ SYBR 25 Green Supermix de acordo com as recomendações do fornecedor, em placas 96 cavidades, sobre 5μΤ de reação de retro-transcrição diluída com uma temperatura de hidridização de 60°C. Os paires de iniciadores específicos de genes estudados são os a seguir.
• mPDK4: iniciador sentido: 5’- TACTCCACTGCTCCAACACCTG-3’ (SEQ ID n°ll) e iniciador anti- sentido 5 ’-GTTCTTCGGTTCCCTGCTTG-3 ’ (SEQ ID n°12)
• mACOXl: iniciador sentido: 5’- GAAGCCAGCGTTACGAGGTG-3’ (SEQ ID n°3) e iniciador anti-sentido:
5’- TGGAGTTCTTGGGACGGGTG-3’ (SEQ ID n°4)
• mCPTlb: iniciador sentido: 5’- GGACTGAGACTGTGCGTTCCTG-3 ’ (SEQ ID n°7) e iniciador anti- sentido: 5 ’-AGTGCTTGGCGGATGTGGTT-3 ’ (SEQ ID n°8)
• mUCP3: iniciador sentido: 5’- GCACCGCCAGATGAGTTTTG-3 ’ (SEQ ID n°15) e iniciador anti-sentido:
5’- GACGCTGGAGTGGTCCGCTC-3’ (SEQ ID n°16)
A quantidade de fluorescência emitida é diretamente proporcional à quantidade de DNA complementar presente no começo da reação e amplificada no curso da PCR. Para cada alvo estudado, uma gama é 15 realizada pelos diluições sucessivas de uma poça constituída por alguns microlitros de diferentes reações de retro-transcrição. Os níveis de expressão relativos de cada triagem são assim determinados utilizando as curvas de eficácia obtidas com os pontos de gama.
Os níveis de expressão de genes de interesse foram em seguida 20 normalizados, para o tecido hepático por relação ao nível de expressão do gene de referência 36B4 (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5’-CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3’ (SEQ ID n°19) e iniciador anti-sentido: 5’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3’ (SEQ ID n°20)) e, para o tecido muscular por relação ao nível de expressão do gene 25 de referência 18S (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5'-CGGACACGGACAGGATTGACAG-3' (SEQ ID n°21) e o iniciador anti- sentido: 5'-AATCTCGGGTGGCTGAACGC-3' (SEQ ID n°22)). O fator de indução foi calculado para cada amostra. Mais este fator é elevado, mais o composto tem um caráter ativador de expressão gênica. O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Resultados
Medida das taxas triglicerídeos plasmáticos A figura 4-1 compara a taxa plasmática de triglicerídeos após
28 dias de tratamento com o composto 2, administrados a 50mpk em taxas obtidas para os controles de animais. De maneira inesperada, a taxa de triglicerídeos é significativamente diminuída pelo tratamento com o composto de acordo com a invenção.
Medida do insulinemia
A figura 4-2 compara a taxa plasmática de insulina após 28 dias de tratamento com o composto 2, administrado a 5 Ompk em taxas obtidas com os controles de animais. De maneira inesperada, a insulinemia é significativamente diminuída após 28 dias de tratamento dos animais com o composto 2.
Análise da expressão gênica por RT-PCR quantitativo
Os inventores também evidenciaram in vivo que os compostos de acordo com a invenção são reguladores da expressão de genes alvos dos PPAR. Os resultados apresentados sobre as figuras 4-3 e 4-4 mostram que o 20 composto 2, administrado a 50 mpk durante 28 dias junto aos camundongos db/db, induziu para o fígado um aumento significativa da expressão de genes codificando para PDK4 (figura 4-3) e para o ACOXl (figura 4-4).
Estes genes codificam para enzimas implicadas no metabolismo dos lipídios e dos glicídios, e são reconhecidos como sendo genes alvos de PPAR α para o fígado. O fato de que sua expressão seja modulada pelo composto 2 reforça a idéia de que esse composto apresenta um interesse principal para o quadro das patologias metabólicas.
Por outro lado, os inventores também evidenciaram in vivo que o composto 2 é um regulador da expressão de genes alvos de PPARô para o músculo esquelético. Os resultados apresentados sobre as figuras 4-5 a 4-7 mostram que o composto 2 administrado a 50 mpk durante 28 dias junto aos camundongos db/db, induziu para o músculo esquelético um aumento significativo da expressão de genes codificando para CPTlb (figura 4-5), 5 PDK4 (figura 4-6) e UCP2 (figura 4-7).
Estes genes codificam para proteínas implicadas no metabolismo dos lipídios, dos glicídios e da termo-regulação, e são conhecidos como sendo genes alvos de PPARô para o músculo. O fato de que sua expressão seja modulada pelo composto 2 reforça a idéia de que esse 10 composto apresenta um interesse principal para o quadro das patologias metabólicas.
Conclusão
De maneira inesperada, os dados experimentais apresentados mostram que o composto 2 possui propriedades hipolipemiantes e 15 antidiabéticas em camundongos db/db. Além disso, os dados experimentais mostram que os compostos de acordo com a invenção modulam a expressão de genes regulados pela ativação dos PPAR que codificam para enzimas implicadas para o metabolismo dos lipídios, dos glicídios e da termo- regulação.
Exemplo 12: Avaliação in vitro das propriedades metabólicas dos compostos de acordo com a invenção em um modelo de miócitos murinos Princípio
Os efeitos estimuladores dos compostos de acordo com a invenção foram avaliados pela medida da β-oxidação dos ácidos graxos pelos 25 miócitos murinos pré-tratados durante 24 horas com os compostos de acordo com a invenção, mais a indução da β-oxidação dos ácidos graxos é aumentada, mais o composto de acordo com a invenção é estimulador do metabolismo nas células musculares.
O objetivo é de medir a quantidade de água tritiada formada durante a oxidação mitocondrial dos ácidos graxos marcados em 3H. Protocolo
Diferenciação das células C2C12 em miócitos
As linhagens celulares de murinos C2C12 (proveniente de ECACC) são cultivadas no meio DMEM (Gibco; 41965-039) adicionadas de 1% L-Glutamina (Gibco; 25030), de 1% penicilina/estreptomicina (VWR; BWSTL0022/100) e 10% soro de bezerro fetal descomplementado (SVF. Gibco; 10270-106).
As células são semeadas sobre placas de 48 cavidades a 10 densidade de 25.IO3 células/cavidades. Depois da confluência, o meio é substituído por um meio de diferenciação (meio de cultura de base adicionado de 2% de soro de cavalo (Gibco; 26050-088)) depois incubado a 37°C e 5% de CO2 durante 4 dias a fim de diferenciar as mesmas em miócitos. Tratamento
Após 4 dias de diferenciação, as células são tratadas com os
compostos de acordo com a invenção adicionado ao meio de cultura de diferenciação. O composto 2 foi testado com efeito de dose de 0,01 a ΙμΜ, e as outras foram testadas a uma dose de 1 μΜ. Os compostos de acordo com a invenção são dissolvidos no sulfóxido de dimetila (DMSO, Sigma; D5879). 20 As células são tratadas durante 24h a 37°C, 5% CO2. O efeito dos compostos de acordo com a invenção é comparado ao efeito do DMSO sozinho.
Medida da β -oxidação
Após 24 horas de tratamento, o meio de cultura é substituído por um meio DMEM lg/L glicose (Gibco; 21885-025) adicionado de 1% L- 25 Glutamina (Gibco; 25030), 1% penicilina/estreptomicina (VWR; BWSTL0022/100) e ImM L-cRNAitina (Alfa Aefar; A 17618). As células são em seguida incubadas com o complexo de palmitato tritiado / BSA (0,lmM) a 37°C em presença de 5% CO2. A reação é parada após 1, 2 e 3 horas e as proteínas são precipitadas com distribuição de TCA 10%. Em um primeiro tempo, a contagem de trítio é realizada sobre 100 μ L de sobrenadante da cultura precipitada.
Em um segundo tempo, 50μί de sobrenadante precipitado são colocados em evaporação durante 2 dias depois o trítio residual medido para avaliar a quantidade de palmitato tritiado não convertido em água.
Uma gama padrão é realizada por diluição sucessivas do complexo palmitato tritiado /BSA para determinar a quantidade de palmitato transformado em água.
Para cada tempo da cinética, lh, 2h e 3h, a quantidade em nanomoles de palmitato oxidado é calculada por regressão linear. As áreas sob a curva são determinadas para cada condição e os resultados são normalizados com DMSO.
O resultado final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Resultados
Os inventores também evidenciaram in vitro, sobre miócitos, que os compostos de acordo com a invenção apresentam efeitos estimuladores da β-oxidação dos ácidos graxos. Os resultados apresentados sobre a figura 5 mostram que o composto 2, com efeito dose desde 0,0 ΙμΜ e os compostos 4 20 e 11 de acordo com a invenção, a 1 μΜ, induzem um aumento significativo da β-oxidação dos ácidos graxos nos miócitos murinos.
Conclusão
De maneira inesperada, os dados experimentais apresentados mostram que os compostos de acordo com a invenção têm uma ação metabólica nos miócitos murinos ao induzirem o catabolismo dos ácidos graxos.
Exemplo 13: Avaliação in vitro das propriedades ativadoras do transporte inverso do colesterol dos compostos de acordo com a invenção. Princípio O efeito dos compostos de acordo com a invenção sobre o transporte inverso de colesterol foi avaliado pela medida da expressão do gene ABCAl (ATP-binding cassette, sub-family A, member 1; transportador da membrana implicado no fluxo de colesterol) em macrófagos humanos. 5 Mais a expressão de ABCAl é aumentada, mais o composto de acordo com a invenção estimula o transporte inverso do colesterol.
Protocolo
Diferenciação das células THP-I em macrófagos.
A linhagem de monócitos humanos THPl (proveniente de ATCC) é cultivada no meio RPMI1640 adicionado de 25mM Hepes (Gibco; 42401-018), 1% glutamina (Gibco; 25030-24), 1% penicilina/estreptomicina (Biochrom AG; A 2213) e 10% de soro de bezerro fetal descomplementado (SVF. Gibco; 26050-088).
As células são semeadas sobre placas de 24 cavidades (Primaria BD Falcon) a densidade de 3.IO5 células/cavidades e incubadas a 37°C e 5% de CO2 durante 72h em presença de 30 ng/ml de forbol 12- miristato 13-acetato (PMA) a fim de diferenciar as mesmas em macrófagos. Tratamento
O meio de diferenciação é aspirado e substituído pelo meio de tratamento (mesma composição que o meio de cultura mas sem soro de bezerro fetal e com 1% de ultroser (Pall Life Science; P/N267051)).
Os compostos de acordo com a invenção são dissolvidos no sulfóxido de dimetila (DMSO, Fluka; 41640). O composto 2 foi testado a dose de ΙμΜ. As células são tratados durante 24h a 37°C, 5% C02. O efeito dos compostos de acordo com a invenção é comparado ao efeito do DMSO sozinho.
Extração de RNA, transcrição inversa e PCR quantitativo.
Após tratamento, o RNA total é extraído das células utilizando o kit NucleoSpin® 96 RNA (Macherey Nagel, Hoerdt, França) de acordo com as instruções do fabricante.
I^g de RNA total (quantificado por leitura do espectrofotômetro) foi em seguida transcrito reverso em DNA complementar por uma reação de 1 hora a 370C em um volume total de 30μ1 contendo 5 tampão IX (Invitrogen), l,5mM de DTT, 0,18mM de dNTPs (Promega), 200ng de pdN6 (Amersham), 30U de inibidor de RNase (Promega) e Ιμΐ de MMLV-RT (Invitrogen).
As experiências de PCR quantitativo foram efetuadas utilizando o MyiQ Single-Color Real-Time PCR Detection System (Biorad, 10 MRNAes-la-Coquette, França) e foram realizados utilizando o kit iQ SYBR Green Supermix de acordo com as recomendações do fornecedor, em placas 96 cavidades, sobre 5μ1 de reações de transcrição reversa diluídas com uma temperatura de hidridização de 60°C. Pares de iniciadores específicos do gene estudado foram usados:
· hABCAl: iniciador sentido: 5’-
CTGAGGTTGCTGCTGTGGAAG-3’ (SEQ ID n°l) iniciador anti-sentido: 5 ’-CATCTGAGAACAGGCGAGCC-3 ’ (SEQ ID n°2)
A quantidade de fluorescência emitida é diretamente proporcional à quantidade de DNA complementar presente no começo da 20 reação e amplificada no curso da PCR. Para cada alvo estudado, uma gama é realizada pelas diluições sucessivas de uma poça constituída por alguns μΐ de diferentes reações de transcrição reversa. Os níveis de expressão relativos de cada triagem são assim determinados utilizando as curvas de eficácia obtidas com os pontos de gama.
Os níveis de expressão de genes de interesse foram em seguida
normalizados, por relação ao nível de expressão do gene de referência 36B4 (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5’- CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3 ’ (SEQ ID n°19) e iniciador anti- sentido: 5’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG -3’ (SEQ ID n°20)). O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo (induzido pelo composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle, foi então calculado. Mais este fator é elevado, mais o composto tem um caráter ativador de expressão gênica. O resultado 5 final é representado como média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Resultados
Os inventores evidenciaram que os compostos de acordo com a invenção são, in vitro nos macrófagos humanos, estimuladores do transporte 10 inverso do colesterol. Os resultados apresentados sobre a figura 6-1 mostram que o composto 2, a 1 μΜ, induziu um aumento significativo da expressão do gene codificando para ABCAl nos macrófagos humanos. Os resultados apresentados sobre a figura 6-2 mostram que os compostos 4 e 7 de acordo com a invenção, a ΙμΜ e 3 OOnM respectivamente, induzem um aumento 15 significativa da expressão do gene codificando para ABCAl nos macrófagos humanos.
Conclusão
De maneira inesperada, os dados experimentais apresentados mostram que os compostos de acordo com a invenção estimulam o transporte inverso do colesterol.
Exemplo 14: Avaliação in vitro das propriedades anti-inflamatórias dos compostos de acordo com a invenção em um modelo de monócitos humanos Princípio
Os efeitos anti-inflamatórios dos compostos de acordo com a
invenção foram avaliados pela medida da secreção e da expressão de Macrophages Chemoattractant Protein (MCP1) e da Matrix metalloproteínase
9 (MMP9) pelos monócitos tratados durante 24 horas com os compostos de acordo com a invenção e estimulados com PMA (forbol 12-miristato 13- acetato, provocam uma resposta inflamatória das células). Mais a quantidade de MCPl secretada é diminuída, mais os compostos de acordo com a invenção inibem a reação inflamatória. Da mesma maneira, mais a expressão de genes codificando para MCPl e MMP9 é inibida, mais os compostos de acordo com a invenção são anti-inflamatórios.
Protocolo
Cultura das células THP-I
A linhagem de monócitos humanos THPl (proveniente de ATCC) é cultivada no meio RPMI1640 adicionado de 25mM Hepes (Gibco; 42401-018), 1% glutamina (Gibco; 25030-24) 1% penicilina/estreptomicina (Biochrom AG; A 2213) e 10% soro de bezerro fetal descomplementado (SVF. Gibco; 10270-106).
Tratamento
As células são semeadas sobre placas de 24 cavidades (Primaria BD Falcon) na densidade de 8,70. IO5 células/cavidades no meio de tratamento (mesma composição que o meio de cultura mas com 0,2% de soro de bezerro fetal descomplementado) e em presença de 5 ng/mL de forbol 12- miristato 13-acetato (PMA) para induzir uma resposta inflamatória.
Os compostos de acordo com a invenção foram testados a 0,1, 0,3 e/ou a ΙμΜ, e dissolvidos no sulfóxido de dimetila (DMSO, Fluka; 41640). As células são tratados durante 24h a 37°C, 5% CO2. O efeito do composto de acordo com a invenção é comparado ao efeito do DMSO sozinho.
Medida da secreção de MCPl O meio de tratamento é recuperado e a concentração de MCPl
é medida utilizando o kit Elisa « Human MCPl Elisa set » (BD OptEIA; 555179) de acordo com as recomendações do fabricante.
Um anticorpo monoclonal anti-MCPl humano é fixado sobre uma placa, depois os sobrenadantes, contendo os MCPl secretados pelas células são distribuídos. Um anticorpo anti-MCPl biotinilado irá em seguida se fixar ao complexo. Um terceiro anticorpo conjugado e copulado a uma enzima peroxidase permite em presença de substrato iniciar uma reação enzimática cujo resultado é uma coloração proporcional a quantidade de 5 MCPl fixada e pode ser medida por espectrofotometria. Uma gama é realizada a partir de um ponto de concentração conhecido e permite calcular a concentração em MCP1 de cada amostra.
O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal induzido pelo composto de acordo com a invenção e o sinal do grupo controle, foi
então calculado. Mais este fator é fraco, mais o composto tem um caráter inibidor da secreção de MCPI. O resultado final é representado como a média dos valores de indução de cada grupo experimental.
Extração dos RNA, transcrição inversa e PCR quantitativo.
Após tratamento, o RNA total é extraído das células utilizando o kit NucleoSpin® 96 RNA (Macherey Nagel, Hoerdt, França) de acordo com as instruções do fabricante.
^g de RNA total (quantificado por leitura do espectrofotômetro UV) foi em seguida retro-transcrito em DNA complementar por uma reação de 1 hora a 37°C em um volume total de 30μ1 20 contendo tampão IX (Invitrogen), l,5mM de DTT, 0,18mM de dNTPs (Promega), 200ng de pdN6 (Amersham), 3 OU de inibidor de RNase (Promega) e 1 μΐ de MMLV-RT (Invitrogen).
As experiências de PCR quantitativo foram efetuadas utilizando o MyiQ Single-Color Real-Time PCR Detection System (Biorad, 25 MRNAes-la-Coquette, França) e foram realizados utilizando o kit iQ SYBR Green Supermix de acordo com as recomendações do fornecedor, em placas 96 cavidades, sobre 5μ1 de reação de retro-transcrição diluídas com uma temperatura de hidridização de 60°C. Pares de iniciadores específicos de genes MCPl e MMP9 estudados foram usados: • hMCPl: iniciador sentido: 5’- AGGAAGATCTCAGTGCAGAGG-3’ (SEQ ID n°9) e iniciador anti-sentido: 5 ’-AGTCTTCGGAGTTTGGGTTTG-3 ’ (SEQ ID n°10)
• hMMP9: iniciador sentido: 5’- TGGC ACC ACCACAAC ATC AC-3’ (SEQ ID n°17) e iniciador anti-sentido:
5 ’-ACCACAACTCGTCATCGTCG-3 ’ (SEQ ID n°18)
A quantidade de fluorescência emitida é diretamente proporcional à quantidade de DNA complementar presente no começo da reação e amplificada no curso da PCR. Para cada alvo estudado, uma gama é 10 realizada pelas diluições sucessivas de uma poça constituída por alguns microlitros de diferentes reações de retro-transcrição. Os níveis de expressão relativos de cada triagem são assim determinados utilizando as curvas de eficácia obtidas com os pontos de gama.
Os níveis de expressão de genes de interesse foram em seguida 15 normalizados, para o tecido hepático por relação ao nível de expressão do gene de referência 36B4 (dos quais os iniciadores específicos são: iniciador sentido: 5’-CATGCTCAACATCTCCCCCTTCTCC-3’ (SEQ ID n°19) e iniciador anti-sentido: 5 ’-GGGAAGGTGTAATCCGTCTCCACAG-3 ’ (SEQ ID n°20)). O fator de indução, quer dizer a relação entre o sinal relativo 20 (induzido pelo composto de acordo com a invenção) e a média dos valores relativos do grupo controle, foi então calculado. Mais este fator é fraco, mais o composto tem um caráter inibidor da expressão gênica. O resultado final é representado como a média dos valores de indução em cada grupo experimental.
Resultados
Os inventores também evidenciaram, sobre monócitos in vitro, que os compostos de acordo com a invenção têm efeitos anti-inflamatórios. Os resultados apresentados sobre a figura 7-1 mostram que os compostos 7 e
11 de acordo com a invenção, a 1 μΜ, induzem uma diminuição significativa da secreção de MCPl nos monócitos humanos. Os resultados apresentados sobre as figuras 7-2 e 7-3 mostram que os compostos 7 e 11 de acordo com a invenção, a ΙμΜ, induzem uma diminuição significativa da expressão de MCPl e MMP9 nos monócitos humanos. Os resultados apresentados sobre a 5 figura 7-4 mostram que o composto 2, a 0,1 e 0,3 μΜ, induziu uma diminuição significativa da expressão de MCPl nos monócitos humanos.
Conclusão
De maneira inesperada, os dados experimentais apresentados mostram que os compostos de acordo com a invenção tem uma ação anti- inflamatória em os monócitos estimulados com PMA.
Conclusão geral
Os inventores evidenciaram que os compostos de acordo com a invenção tem propriedades estimuladoras da síntese de HDL-colesterol, de propriedades hipolipemiantes (reduzindo a taxa plasmática de triglicerídeos e 15 do ácidos graxos livres) assim que propriedades anti-diabéticas. Além disso, os inventores evidenciaram que os compostos de acordo com a invenção são reguladores da expressão de genes codificando para enzimas implicadas no metabolismo dos lipídios, dos glicídios e na dissipação de energia. Esses resultados, obtidos in vivo, testemunham o potencial terapêutico dos 20 compostos de acordo com a invenção frente às patologias associadas à síndrome metabólica tais como as dislipidemias, obesidade, aterosclerose etc.
Por outro lado, os inventores evidenciaram o caráter ativador dos PPAR em diferentes modelos celulares se traduzindo notadamente pela regulação da expressão de genes codificando para enzimas implicadas no 25 metabolismo dos lipídios, dos glicídios, da termo-regulação, e por um aumento do catabolismo dos ácidos graxos, assim como por uma ação anti- inflamatória. BIBLIOGRAFIA
de Ia Monte SM, et al, Therapeutic rescue of neurodegeneration in experimental type 3 diabetes: Relevance to Alzheimer's disease, J Alzheimers Dis, 2006, 10(1), 89-109 Fox-Tucker J, The Cardiovasular Market Outlook to 2010,
BUSINESS INSIGHTS REPORTS, 2005, 1-174
Gross B, et al., Peroxisome Proliferator-Activated Receptor b/d: A novel target for the reduction of atherosclerosis, DRUG DISCOVERY TODAY: THERAPEUTIC STRATEGIES, 2005,2 (3), 237-243 International Atherosclerosis Society, Harmonized Clinicai
Guidelines on
Prevention of Atherosclerotic Vascular Disease, 2003,
Kota BP, et al., An overview on biological mechanisms of PPARs, Pharmacol Res, 2005, 51 (2), 85-94 Lefebvre P, et alSorting out the roles of PPARalpha in energy
metabolism and vascular homeostasis, J Clin Invest, 2006, 116 (3), 571-580
Lehrke M and Lazar MA, The many faces of PPARgamma, Cell, 2005,123 (6), 993-9
Liu Y and Miller A, Ligands to peroxisome proliferator-activated receptors as therapeutic options for metabolic syndrome, DRUG DISCOVERY TODAY: THERAPEUTIC STRATEGIES, 2005,2 (3), 165-169
Mensah M, The Atlas of Heart Disease and Stroke, 2004,
Polak, Oral administration of the selective PPARd agonist GW0742 reduced clinicai symptoms and reduces astroglial and microglial inflammatory activation in a model of EAE, J Neuroimmunol, 2005,
Raspe E, et al., Modulation of rat Iiver apolipoprotein gene expression and serum lipid leveis by tetradecylthioacetic acid (TTA) via PPARalpha activation, J Lipid Res, 1999,40 (11), 2099-110

Claims (24)

1. Compostos caracterizados pelo fato de serem derivados de 3-fenil-l-(feniltienil)propano-l-ona e de 3-fenil-l-(fenilfuranil)propano-l-ona substituídos de fórmula geral (I): na qual: Xl representa um halogênio, um grupamento Rl5 -SRl ou -OR1; X2 representa um átomo de enxofre ou de oxigênio; X3 representa um halogênio, um grupamento R3, -SR3 ou -OR3; X4 representa um halogênio, um grupamento R4, -SR4 ou -OR4; X5 representa um grupamento R5, -SR5 ou -OR5; X6 representa um halogênio, um grupamento R6, -SR6 ou -OR6; X7 representa um halogênio, um grupamento R7, -SR7 ou -OR7; X8 representa um grupamento R8; Rl representando um hidrogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono, o referido grupamento alquila sendo eventualmente halogenado; R3, R4, R6, R7 e R8 idênticos ou diferentes, escolhidos entre um hidrogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono; R5 representando um radical alquila formado de uma cadeia carbonada linear e saturada, tendo 1 a 4 átomos de carbono, a referida cadeia carbonada sendo: - ligada, por sua extremidade oposta ao grupamento fenila (III), a um substituinte escolhido entre -COOR12 e -CONR12R13, R12 e Rl 3, idênticos ou diferentes, representando um hidrogênio ou um grupamento alquila tendo 1 a 4 átomos de carbono; - não ramificada ou ramificada com pelo menos um grupamento alquila ou alcenila tendo 1 a 4 átomos de carbono, ou substituída por um grupamento fenila; A representa: um grupamento carbonila (CO), um grupamento oxima (C=N-O-H) ou éter de oxima (C=N-O- Rl 1), com Rll escolhido entre um átomo de hidrogênio, um grupamento alquila (linear ou ramificado) tendo 1 a 7 átomos de carbono, substituído ou não por um grupamento arila, notadamente um grupamento fenila, os referidos grupamentos alquila e arila sendo eventualmente halogenados, ou um grupamento -CR9R10, R9 representando um átomo de hidrogênio e RlO representando um grupamento -ORl I, Rl 1 sendo escolhido entre um átomo de hidrogênio ou um grupamento alquila (linear ou ramificado) tendo 1 a 7 átomos de carbono, o referido grupamento alquila sendo não substituído ou substituído por um grupamento cicloalquila, notadamente ciclo-hexila, um grupamento arila, notadamente fenila ou um grupamento heteroarila, notadamente piridinila, os referidos grupamentos alquila, cicloalquila, arila ou heteroarila sendo eventualmente halogenados; B representa: (i)um grupamento alquila não substituído, saturado apresentando dois átomos de carbono (CH2-CH2), ou (ii)um grupamento alceno não substituído, apresentando dois átomos de carbono (CH=CH), seus estereoisômeros (diastereoisômeros, enantiômeros), puros ou em mistura, misturas racêmicas, isômeros geométricos, tautômeros, sais, hidratos, solvatos, formas sólidas assim como suas misturas.
2. Compostos de acordo com a reivindicação 1, caracterizados pelo fato de que X5 representa um grupamento -OR5, com R5 designando um radical alquila cuja referida cadeia carbonada é ligada a um substituinte -COORl 2.
3. Compostos de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizados pelo fato de que X5 é escolhido entre os grupamentos: -OC(Ch3)2COORI2, -OCH(CH2CH3)COOR12, -O(CH2)3C(CH3)2COORi2, - OCH(C6H5)COORi2 e -OCH2COOR12.
4. Composto de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que A representa um grupamento carbonila C=O.
5. Composto de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que A representa um grupamento -CHORl 1, com Rl 1 escolhido entre um átomo de hidrogênio, um grupamento metila, etila, isopropila, ciclo-hexilmetila, benzila, iodobenzila e piridinilmetila.
6. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, caracterizados pelo fato de que A representa um grupamento C=N-O-Rll, com Rl 1 escolhido entre um átomo de hidrogênio e um grupamento metila.
7. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizados pelo fato de que o ciclo II é substituído pelo ciclo I na posição C4.
8. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizados pelo fato de que o ciclo II é substituído pelo ciclo I na posição C5-
9. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 8, caracterizados pelo fato de que Xl se encontra em para em relação à posição do ciclo II.
10. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 9, caracterizados pelo fato de que Xl é escolhido entre um grupamento trifluorometila, um átomo de bromo, um grupamento metilóxi, um grupamento metiltio e um grupamento trifluorometóxi e um átomo de hidrogênio.
11. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 10, caracterizados pelo fato de que pelo menos um dos grupamentos X3, X4, X6 e X7 designa um átomo de halogênio.
12. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 11, caracterizados pelo fato de que X3 e X4 são idênticos e correspondem aos átomos de halogênio.
13. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 12, caracterizados pelo fato de que X3 e X4 são idênticos e correspondem aos átomos de cloro ou de flúor.
14. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 13, caracterizados pelo fato de que pelo menos um dos grupamentos X3, X4, X6 e X7 designa um átomo de halogênio, e o(s) grupamento(s) permanecendo entre X3, X4, X6 e X7 designa(m) um(dos) átomo(s) de hidrogênio.
15. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 10, caracterizados pelo fato de que X4 e/ou X6 designa(m) um grupamento alquila.
16. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 10, caracterizados pelo fato de que X4 e X6 são dois grupamentos metila, e X3, X7 são átomos de hidrogênio.
17. Compostos de acordo com uma das reivindicações 1 a 16, caracterizados pelo fato de que eles são escolhidos entre: o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(4-(3 -(4-iodobenzilóxi)—3 -(5 -(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila o ácido 2-(4-(3-(4-iodobenzilóxi)~3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)-propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico; - o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)butanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)feml)tien-2-il)- propil)fenóxi)butanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 5-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2,2-dimetilpentanoato de metila; o ácido 5-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2,2-dimetilpentanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)acetato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)acético; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-fenilacetato de etila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-fenilacético; o 2-(2-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; - o ácido 2-(2-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(3-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(3-cloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanóico; - o 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)acetato de terciobutila; o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)acético; o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)acético; o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- i l)propil)-2-fluorofenóxi)acético; o 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)butanoato de terciobutila; - o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)butanóico; o ácido 2-(2-fluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)butanóico; o 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)butanoato de terciobutila; o ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)butanóico; o 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)acetato de terciobutila; o ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)acético; o 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; - o ácido 2-(2-bromo-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(piridin-3-ilmetóxi)-3-(5-(4-(trifluorometil)- fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; - o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-etóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(ciclo-hexilmetóxi)-3-(5-(4-(trifluorometil)- fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,3 -dicloro-4-(3 -oxo-3 -(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien-2- il)-propil)fenóxi)-2-; o 2-(2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,6-dimetil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(hidróxiimino)-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(metóxiimino)-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)-tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(4-(3-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3-diclorofenóxi)-2- metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(4-(3-(5-(4-bromofenil)tien-2-il)-3-oxopropil)-2,3-dicloro- fenóxi)-2-metilpropanóico; - o 2-(2,3-dicloro-4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-oxopropil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de tercio-butila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-(5-(4-(metiltio)fenil)tien-2-il)-3-oxo- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-isopropoxi-3-(5-(4- (trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-feniltiofeno-2-il)propil)fenóxi)-2- metilpropanoato de terciobutila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-feniltien-2-il)propil)fenóxi)-2- metilpropanóico; o 2-metil-2-(2-metil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tiofeno-2- il)propil)fenóxi) propanoato de terciobutila; o ácido 2-metil-2-(2-metil-4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)- tiofeno-2-il)propil)fenóxi)propanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(4-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,3-diclorofenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-difluoro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)—3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2,3-difluorofenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)- butanoato de terciobutila; - o ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-butanóico; o 2-metil-2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)propanoato de terciobutila; o ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)fenóxi)- acetato de terciobutila; o ácido 2-(4-(3-oxo-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)acético; o ácido 2-(4-(3-(benzilóxi)--3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2- il)propil)-2-fluorofenóxi)butanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)furan- 2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)fur-2- il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- 2.6-dimetilfenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- 2.6-dimetilfenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)propil)- fenóxi)-2-metilpropanoato de etila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-oxo-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila; o 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(3-(trifluorometil)fenil)tien-2-il)- propil)fenóxi)-2-metilpropanoato de etila; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-hidróxi-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico; o ácido 2-(2,3-dicloro-4-(3-metóxi-3-(5-(4-(trifluorometóxi)fenil)tien- 2-il)propil)fenóxi)-2-metilpropanóico.
18. Compostos de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizados pelo fato de serem a título de medicamentos.
19. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de compreender, em um suporte aceitável sobre o plano farmacêutico, pelo menos um composto tal como foi definido nas reivindicações 1 a 17, eventualmente em associação com um ou vários outros princípios ativos terapêuticos e/ou cosméticos.
20. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de compreender, em um suporte aceitável sobre o plano farmacêutico, pelo menos um composto tal como foi definido em uma das reivindicações 1 a 17 em associação com um ou vários compostos selecionados na lista abaixo: um anti-diabético, a insulina, uma molécula hipolipemiante e/ou hipocolesterolemiante, um agente anti-hipertensor ou hipotensor, um agente anti-plaquetário, um agente anti-obesidade, um agente anti-inflamatório, um agente anti-oxidante, um agente utilizado para o tratamento de insuficiência cardíaca, um agente utilizado para o tratamento de insuficiência coronana, um agente anticanceroso, um anti-asmático, um corticóide utilizado para o tratamento das patologias da pele um vasodilatador e/ou um agente antiisquêmico.
21. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação19 ou 20, caracterizada pelo fato de ser para o tratamento de complicações associadas à síndrome metabólica, da insulino-resistência, dislipidemias, aterosclerose, doenças cardiovasculares, obesidade, hipertensão, doenças inflamatórias, isquemia cerebral, doenças auto-imunes, patologias neurodegenerativas ou cânceres.
22. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação19 ou 20, caracterizada pelo fato de ser para tratar os fatores de risco cardiovascular ligados às desregulações do metabolismo lipídico e/ou glicídico.
23. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação19 ou 20, caracterizada pelo fato de ser para o tratamento da diabete.
24. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação19 ou 20, caracterizada pelo fato de ser para o tratamento das dislipidemias.
BRPI0720633A 2006-12-29 2007-12-28 compostos derivados de 3-fenil-1-(feniltienil)propano-1-ona e de 3-fenil-1-(fenilfuranil)propano-1-ona substituídos e composição farmacêutica BRPI0720633B8 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0656067A FR2910894A1 (fr) 2006-12-29 2006-12-29 Derives de 3-phenyl-1-(phenylthienyl)propan-1-one et de 3-phenyl-1-(phenylfuranyl)propan-1-one substitues, preparation et utilisation.
FR0656067 2006-12-29
PCT/FR2007/052634 WO2008087366A2 (fr) 2006-12-29 2007-12-28 Derives de 3-phenyl-1-(phenylthienyl)propan-1-one et de 3-phenyl-1-(phenylfuranyl)propan-1-one substitues, preparation et utilisation

Publications (3)

Publication Number Publication Date
BRPI0720633A2 true BRPI0720633A2 (pt) 2014-03-25
BRPI0720633B1 BRPI0720633B1 (pt) 2019-11-26
BRPI0720633B8 BRPI0720633B8 (pt) 2021-05-25

Family

ID=38255443

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BRPI0720633A BRPI0720633B8 (pt) 2006-12-29 2007-12-28 compostos derivados de 3-fenil-1-(feniltienil)propano-1-ona e de 3-fenil-1-(fenilfuranil)propano-1-ona substituídos e composição farmacêutica

Country Status (14)

Country Link
US (1) US8088819B2 (pt)
EP (1) EP2079722B1 (pt)
JP (1) JP5371776B2 (pt)
KR (1) KR101505577B1 (pt)
CN (1) CN101605775B (pt)
AU (1) AU2007344310B2 (pt)
BR (1) BRPI0720633B8 (pt)
CA (1) CA2673761C (pt)
EA (1) EA017449B1 (pt)
ES (1) ES2544959T3 (pt)
FR (1) FR2910894A1 (pt)
IL (1) IL199488A (pt)
NZ (1) NZ577909A (pt)
WO (1) WO2008087366A2 (pt)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
EP2582709B1 (de) 2010-06-18 2018-01-24 Sanofi Azolopyridin-3-on-derivate als inhibitoren von lipasen und phospholipasen
US8530413B2 (en) 2010-06-21 2013-09-10 Sanofi Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
TW201215387A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Aventis Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215388A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Sa (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
TW201221505A (en) 2010-07-05 2012-06-01 Sanofi Sa Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
EP2760862B1 (en) 2011-09-27 2015-10-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
RU2014119220A (ru) * 2011-10-26 2015-12-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг 1-циклоалкил-или 1-гетероциклил-гидроксиимино-3-фенилпропаны
US12053445B2 (en) 2016-03-31 2024-08-06 Genfit Methods of treatment of cholestatic diseases
CN114901641B (zh) * 2020-02-28 2025-06-17 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 芳香族化合物及其药物组合物和用途
JP2024519337A (ja) 2021-05-11 2024-05-10 ジェンフィット 敗血症の治療において使用するためのｐｐａｒのエラフィブラノール誘導体アゴニスト
US20240216312A1 (en) 2021-05-11 2024-07-04 Genfit Ppar-agonists for use in the treatment of liver failure

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0111523D0 (en) * 2001-05-11 2001-07-04 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
US7186725B2 (en) 2003-01-03 2007-03-06 Genzyme Corporation Anti-inflammatory compositions and methods
EP1583754A1 (en) * 2003-01-06 2005-10-12 Eli Lilly And Company Thiophene derivative ppar modulators
KR20060132903A (ko) * 2004-01-08 2006-12-22 장피트 1,3-디페닐프로프-2-엔-1-온 유도체 화합물, 그 제조방법및 용도
RU2007135745A (ru) * 2005-02-28 2009-04-10 Ниппон Кемифар Ко., Лтд. (JP) АКТИВАТОР δ- РЕЦЕПТОРА, АКТИВИРУЕМОГО ПРОЛИФЕРАТОРОМ ПЕРОКСИСОМЫ

Also Published As

Publication number Publication date
JP5371776B2 (ja) 2013-12-18
US8088819B2 (en) 2012-01-03
KR20090102843A (ko) 2009-09-30
CA2673761C (fr) 2016-02-23
NZ577909A (en) 2012-03-30
CN101605775A (zh) 2009-12-16
WO2008087366A2 (fr) 2008-07-24
KR101505577B1 (ko) 2015-03-30
EA017449B1 (ru) 2012-12-28
IL199488A (en) 2013-10-31
EP2079722B1 (fr) 2015-06-17
BRPI0720633B8 (pt) 2021-05-25
JP2010514745A (ja) 2010-05-06
CA2673761A1 (fr) 2008-07-24
EA200900900A1 (ru) 2010-02-26
ES2544959T3 (es) 2015-09-07
CN101605775B (zh) 2014-11-12
WO2008087366A3 (fr) 2008-10-23
AU2007344310B2 (en) 2013-08-15
AU2007344310A1 (en) 2008-07-24
EP2079722A2 (fr) 2009-07-22
US20100029745A1 (en) 2010-02-04
FR2910894A1 (fr) 2008-07-04
BRPI0720633B1 (pt) 2019-11-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BRPI0720633A2 (pt) Composto e composições farmacêutica
ES2434071T3 (es) Derivados sustituidos de 1,3-difenilpropano, preparados y utilizaciones
FI87922C (fi) Foerfarande foer framstaellning 5-lipoxygenas inhiberande fenoltioetrar
WO2008087367A2 (fr) Derives de (phenylthiazolyl)-phenyl-propan-1-one et de (phenyloxazodyl)-phenyl-propan-1-one substitues, preparations et utilisations
CN101616892A (zh) 用于治疗铁失调的三环化合物
FR2898894A1 (fr) Composes derives de n-(phenethyl)benzamide substitues, preparation et utilisations
FR2910892A1 (fr) Derives de 1,3-diphenylpropane substitues, preparations et utilisations.

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]

Free format text: NOTIFICACAO DE ANUENCIA RELACIONADA COM O ART 229 DA LPI

B07A Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 26/11/2019, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. (CO) 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 26/11/2019, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS

B16C Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 28/12/2007 OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. PATENTE CONCEDIDA CONFORME ADI 5.529/DF

B21F Lapse acc. art. 78, item iv - on non-payment of the annual fees in time

Free format text: REFERENTE A 16A ANUIDADE.

B24J Lapse because of non-payment of annual fees (definitively: art 78 iv lpi, resolution 113/2013 art. 12)

Free format text: EM VIRTUDE DA EXTINCAO PUBLICADA NA RPI 2755 DE 24-10-2023 E CONSIDERANDO AUSENCIA DE MANIFESTACAO DENTRO DOS PRAZOS LEGAIS, INFORMO QUE CABE SER MANTIDA A EXTINCAO DA PATENTE E SEUS CERTIFICADOS, CONFORME O DISPOSTO NO ARTIGO 12, DA RESOLUCAO 113/2013.