BRPI0720924A2

BRPI0720924A2 - Métodos de tratamento

Info

Publication number: BRPI0720924A2
Application number: BRPI0720924-0A
Authority: BR
Inventors: Yang Wang; Mohamed H Ladha
Original assignee: Schering Corp
Priority date: 2006-12-13
Filing date: 2007-12-11
Publication date: 2014-03-25
Also published as: CL2007003615A1

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "MÉTODOS DE TRATAMENTO".

Este pedido reivindica o benefício do pedido de patente provisó- rio dos Estados Unidos N0 60/874.589, depositado em 13 de dezembro de 5 2006; pedido de patente provisório dos Estados Unidos 60/870.937, deposi- tado em 20 de dezembro de 2006; pedido de patente provisório dos Estados Unidos N0 60/946.011, depositado em 25 de junho de 2007, e pedido de pa- tente provisório dos Estados Unidos N0 60/979.274, depositado em 11 de outubro de 2007; cada um dos quais sendo aqui incorporado por referência 10 em sua totalidade.

Campo da Invenção

A presente invenção refere-se a composições e métodos para tratamento ou prevenção de câncer.

Antecedentes da Invenção Os fatores de crescimento similares à insulina, também conheci-

dos como somatomedins, incluem fator de crescimento similar à insulina-l (IGF-I) e fator de crescimento similar à insulina-ll (IGF-II) (Klapper, et al., (1983) Endocrinol. 112:2215 e Rinderknecht1 et al., (1978) Febs.Lett. 89:283). Estes fatores de crescimento exercem atividade mitogênica em vá- 20 rios tipos de células, incluindo células de tumor (Macaulay, (1992) Br. J. Cancer 65:311), pela ligação a um receptor comum denominado o receptor de fator de crescimento similar à insulina-1 (IGF1R ou IGFR1) (Sepp- Lorenzino, (1998) Breast Cancer Research e Tratamento 47:235). A intera- ção de IGFs com IGF1R ativa o receptor pelo disparo da autofosforilação do 25 receptor em resíduos de tirosina (Butler, et al., (1998) Comparative Bioche- mistry e Physiology 121:19). Uma vez ativado, IGF1R, por sua vez, fosforoli- ta alvos intracelulares para ativar trajetórias de sinalização celular. Esta ati- vação de receptor é crítica para estimulação de crescimento e sobrevivência de célula de tumor. Portanto, a inibição de atividade de IGF1R representa 30 um método potencial valioso para tratar ou prevenir crescimento de cânceres humanos e outras doenças proliferativas.

Consequentemente, terapias que inibem IGF1R são úteis para o tratamento ou prevenção de certos cânceres. Anticorpos anti-IGF1R são te- rapias úteis para tratamento ou prevenção de cânceres. Existem vários anti- corpos anti-IGF1R que são conhecidos na técnica (ver, por exemplo, WO 03/100008; WO 2002/53596; WO 04/71529; WO 03/106621;

5 US2003/235582; WO 04/83248; WO 03/59951; WO 04/87756 ou WO 2005/16970). Outros inibidores de IGF1R de molécula pequena são também conhecidos na técnica.

Embora existam inibidores de IGF1R conhecidos na técnica que podem ser usados para tratar ou prevenir alguns cânceres, permanece uma 10 necessidade na técnica de composições terapêuticas e métodos para trata- mento ou prevenção de outros cânceres, tais como câncer de cabeça e pes- coço, carcinoma de célula escamosa, plasmacitoma solitário, mieloma múlti- plo e câncer de célula renal.

Sumário da Invenção A presente invenção proporciona esta necessidade, em parte,

pela provisão de inibidores de IGF1R e combinações destes que são efeti- vos no tratamento ou prevenção de câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de célula escamosa, mieloma múltiplo, plasmacitoma solitário, câncer de célula renal, retinoblastoma, tumores de célula de germe, hepatoblastoma, 20 carcinoma hepatocelular, melanoma, tumor rabidoide do rim, Sarcoma de Ewing, condrossarcoma, qualquer malignidade hemotológica (por exemplo, leucemia linfoblástica crônica, leucemia mielomonocítica crônica, leucemia linfoblástica aguda (por exemplo, linhagem de célula-T, linhagem de precur- sor de célula-B), leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena aguda, Ieu- 25 cemia mieloblástica aguda, leucemia mieloblástica crônica, doença de Hod- gekin, Iinfoma de não-Hodgekin, leucemia linfocítica crônica, leucemia mie- lógena crônica, síndrome mielodisplástica, leucemia de célula capilar, leu- cemia de célula de mastro, neoplasma de célula de mastro, Iinfoma folicular, Iinfoma de célula grande difusa, Iinfoma de célula de revestimento, Iinfoma 30 de zona marginal, Linfoma de Burkitt, fungoides de micose, síndrome "se- ary", Iinfoma de célula-T cutânea, Iinfoma de célula-T periférica, distúrbios mieloproliferativos crônicos, mielofibrose, metaplasia mieloide, mastocitose sistêmica), e tumores do sistema nervoso central (por exemplo, câncer do cérebro, glioblastoma, não-glioblastoma de câncer do cérebro, meningioma, adenoma pituitário, schwanoma vestibular, um tumor neurotodermal primiti- vo, meduloblastoma, astrocitoma, astrocitoma anaplástico, oligodendroglio- 5 ma, ependimoma e papiloma de plexo coroide), distúrbios mieloproliferativos (por exemplo, policitemia vera, trombocitemia, mielfibrose idiopática), sarco- ma de tecido macio, câncer da tireoide, câncer endometrial, câncer carcinoi- de, tumores de célula de germe, ou câncer do fígado.

A presente invenção proporciona um método para tratamento ou prevenção de uma condição médica, em um indivíduo, selecionado a partir do grupo consistindo em câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de célula escamosa, mieloma múltiplo, plasmacitoma solitário, câncer de célula renal, retinoblastoma, tumores de célula de germe, hepatoblastoma, carcinoma hepatocelular, melanoma, tumor rabidoide do rim, Sarcoma de Ewing, con- drossarcoma, qualquer malignidade hemotológica (por exemplo, leucemia linfoblástica crônica, leucemia mielomonocítica crônica, leucemia linfoblásti- ca aguda (por exemplo, linhagem de célula-T, linhagem de precursor de cé- lula-B), leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia mie- loblástica aguda, leucemia mieloblástica crônica, doença de Hodgekin, Iin- foma de não-Hodgekin, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielógena crônica, síndrome mielodisplástica, leucemia de célula capilar, leucemia de célula de mastro, neoplasma de célula de mastro, Iinfoma folicular, Iinfoma de célula grande difusa, Iinfoma de célula de revestimento, Linfoma de Bur- kitt, fungoides de micose, síndrome "seary", Iinfoma de célula-T cutânea, distúrbios mieloproliferativos crônicos), e tumores do sistema nervoso central (por exemplo, câncer do cérebro, glioblastoma, não-glioblastoma de câncer do cérebro, meningioma, adenoma pituitário, schwanoma vestibular, um tu- mor neurotodermal primitivo, meduloblastoma, astrocitoma, astrocitoma a- naplástico, oligodendroglioma, ependimoma e papiloma de plexo coroide), distúrbios mieloproliferativos (por exemplo, policitemia vera, trombocitemia, mielfibrose idiopática), sarcoma de tecido macio, câncer da tireoide, câncer endometrial, câncer carcinoide, tumores de célula de germe, e câncer do fígado, compreendendo administrar uma quantidade terapeuticamente efeti- va de um ou mais inibidores de IGF1R, ou composições farmacêuticas des- tes, ao indivíduo. Em uma concretização da invenção, o inibidor de IGF1R é selecionado a partir do grupo consistindo em

5 e um anticorpo isolado que se liga especificamente a IGF1R (por exemplo, IGF1R humano), ou um fragmento de ligação de antígeno deste. Em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende: (a) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoácidos 20-128 de SEQ ID N°: 2 e uma região variável de cadeia pesada compreendendo aminoácidos 20-137 de 10 SEQ ID N0: 10 ou 12; (b) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoácidos 20-128 de SEQ ID N0: 4, e uma região variável de cadeia pe- sada compreendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N°: 10 ou 12; (c) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoácidos 20-128 de SEQ ID N0: 6 e uma região variável de cadeia pesada compreendendo aminoáci- 15 dos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12; (d) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoácidos 20-128 de SEQ ID N0: 8 e uma região variável de cadeia pesada compreendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12; ou qualquer outro inibidor de IGF1R aqui colocado, por exemplo, sob a seção "inibidores de IGF1R" abaixo. Em uma concretização da invenção, o 20 inibidor de IGF1R é administrado em associação com um ou mais agentes quimioterápicos anticâncer adicionais, ou uma composição farmacêutica destes. Em uma concretização da invenção, o agente quimioterápico anti- câncer adicional é um membro selecionado a partir do grupo consistindo em OH

H2N-

tin,

carboplatin >.

(

), qualquer formulação

tes, tais como Caelyx ou Doxil , „o

/Va OH2

I xN ,NH

Cl

),

ácido

NH,

I 2

Pt-Cl

I

Cl ), satrapla-

etoposide

doxorrubicin

Iipossomal des- ciclofosfamida

13-retinóico H0C CH, CH3

gemcitabina (

), ifosfamida (

OH F

), irinotecan (

HQ 'GH2CH-J

), vincristina ( ),

ο

dactinomicin

metotrexato ( 0Η ) e qualquer outro agente quimio- terápico aqui colocado, por exemplo, conforme colocado sob a seção "Qui- mioterápicos Adicionais" abaixo. Em uma concretização da invenção, a do- sagem de qualquer anticorpo anti-IGF1R aqui colocado está na faixa de cer- ca de 0,3-20 mg/kg de peso corpóreo, ou cerca de 40-1200 mg/m2. Em uma concretização da invenção, o inibidor de IGF1R e o agente terapêutico anti- câncer adicional são administrados simultaneamente. Em uma concretização da invenção, o inibidor de IGF1R e o agente terapêutico anticâncer adicional são administrados não - simultaneamente. Em uma concretização da inven- ção, o anticorpo compreende uma região constante de IgG. Em uma concre- tização da invenção, o indivíduo é um humano (por exemplo, uma criança). Em uma concretização da invenção, o inibidor de IGF1R é administrado em associação com um procedimento terapêutico anticâncer. Em uma concreti- zação da invenção, o procedimento terapêutico anticâncer é tumorectomia cirúrgica e/ou tratamento de radiação anticâncer.

Breve Descrição das Figuras

Figura 1. Expressão de IGF1R mRNA em amostras de tumor pri- mário de cabeça e pescoço conforme medida usando Taqman. Cada ponto representa o nível de expressão normalizado de IGF1R em uma amostra de tecido simples. O estágio de câncer de cabeça e pescoço no paciente do qual cada amostra foi obtida é marcado I, II, Ill ou IV. Valores correspondentes a amostras de tecido normais são marcados "normal", e valores correspondentes a tecido adjacente normal, localizado adjacente às células de tumor, mas, de outro modo, exibindo características normais, são marcados "NAT".

Figura 2. Análise de mancha de Western do nível de expressão de proteína de IGF1R, IGF-I e IGF-II total em várias linhas de célula (painel superior). A quantidade de IGF1 e IGF2 secretado de várias linhas de célula no meio de crescimento circundante (ng IGF1 ou IGF2 proteína/106 células) (painel inferior). Figuras 3(a)-3(c). Inibição de carcinoma de célula escamosa em linhas de célula in vitro em várias concentrações de anticorpo anti-IGF1R LCF/HCA. (a): linha de célula SCC 15; (b): linha de célula SCC 25; (c): linha de célula SCC 9.

Figura 4. Nível de expressão de IGF2 em tecido de tumor de a-

denocarcinoma de estômago primário conforme comparado àquele de tecido normal.

Figura 5. Níveis de expressão de várias proteínas em várias li- nhas de célula de câncer gástrico e ovariano conforme medidos por análise de mancha de western.

Figura 6. Inibição de crescimento in vitro de células de câncer de carcinoma de célula escamosa (linha de célula SNU-16) em várias concen- trações de anticorpo anti-IGF1R LCF/HCA.

Figura 7. Crescimento de tumor de carcinoma de célula renal em um modelo de xenoenxerto de camundongo sobre o tempo após exposição a anticorpo anti-IGF1R LCF/HCA ou a uma imunoglobulina de controle.

Figura 8. Inibição de crescimento in vitro de linha de célula de melanoma A375-SM quando exposta a várias concentrações de anticorpo anti-IGF1 R LCF/HCA.

Figura 9. Inibição de crescimento in vivo de linha de célula de

carcinoma de célula escamosa SCC15 em camundongos quando exposta a anticorpo anti-IGF1R LCF/HCA.

Figura 10. Avaliação de volume de tumor sobre o tempo em mo- delos de tumor de xenoenxerto de EW5 (sarcoma de Ewins), OS-1 (osteos- sarcoma) e OS-9 (osteossarcoma).

Descrição Detalhada da Invenção

A presente invenção compreende composições e métodos para tratamento ou prevenção de distúrbios médicos não-cancerosos e câncer incluindo câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de célula escamosa, mie- 30 Ioma múltiplo, plasmacitoma solitário, câncer de célula renal, retinoblastoma, tumores de célula de germe, hepatoblastoma, carcinoma hepatocelular, me- lanoma, tumor rabidoide do rim, Sarcoma de Ewing, condrossarcoma, qual- quer malignidade hemotológica (por exemplo, leucemia linfoblástica crônica, leucemia mielomonocítica crônica, leucemia linfoblástica aguda (por exem- plo, linhagem de célula T, linhagem de precursor de célula-B), leucemia lin- focítica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia mieloblástica aguda, 5 leucemia mieloblástica crônica, doença de Hodgekin, Iinfoma de não- Hodgekin, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielógena crônica, síndro- me mielodisplástica, leucemia de célula capilar, leucemia de célula de mas- tro, neoplasma de célula de mastro, Iinfoma folicular, Iinfoma de célula gran- de difusa, Iinfoma de célula de revestimento, Linfoma de Burkitt, fungoides 10 de micose, síndrome "seary", Iinfoma de célula-T cutânea, distúrbios mielo- proliferativos crônicos), e tumores do sistema nervoso central (por exemplo, câncer do cérebro, glioblastoma, não-glioblastoma de câncer do cérebro, meningioma, adenoma pituitário, schwanoma vestibular, um tumor neuroto- dermal primitivo, meduloblastoma, astrocitoma, astrocitoma anaplástico, oli- 15 godendroglioma, ependimoma e papiloma de plexo coroide), distúrbio mielo- proliferativos (por exemplo, policitemia vera, trombocitemia, mielfibrose idio- pática), sarcoma de tecido macio, câncer da tireoide, câncer endometrial, câncer carcinoide, tumores de célula de germe, câncer do fígado, câncer gástrico, gigantismo, adenoma pituitário, psoríase e tumor rabidoide do rim. 20 O câncer pode ser tratado ou prevenido por administrar um inibidor de IGF1R, tal como um anticorpo anti-IGF1R. O anticorpo pode star associado com um agente quimioterápico adicional, tal como um agente quimioterápico anticâncer, tais como qualquer daqueles aqui colocados.

Os termos IGF1R, IGFR1 e IGF-1R são sinônimos e se referem a receptor de fator de crescimento similar a insulina 1.

Inibidores de IGF1R

Os termos "inibidor de IGF1R" ou "antagonista de IGF1R", ou similar, incluem qualquer substância que aumenta a expressão, se liga a Iigante (por exemplo, se liga a IGF-1 e/ou IGF-2), atividade de quinase (por 30 exemplo, atividade de autofosforilação), ou qualquer outra atividade biológi- ca de IGF1R (por exemplo, mediação de crescimento celular independente da ancoragem) e o nível de fosfo-IRS-1 que induzirá uma resposta biológica ou médica de um tecido, sistema, indivíduo ou paciente que está sendo pro- curado pelo administrador (tal como um pesquisador, médico ou veterinário) que inclui qualquer alívio mensurável dos sinais, sintomas e/ou indício clínico de ambos distúrbios médicos não-cancerosos e de câncer (por exemplo, 5 crescimento de tumor) e/ou a prevenção, abaixamento ou parada da pro- gressão ou metástase de câncer (por exemplo, câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de célula escamosa, mieloma múltiplo, plasmacitoma solitário, câncer de célula renal, retinoblastoma, tumores de célula de germe, hepato- blastoma, carcinoma hepatocelular, melanoma, tumor rabidoide do rim, Sar- 10 coma de Ewing, condrossarcoma, qualquer malignidade hemotológica (por exemplo, leucemia linfoblástica crônica, leucemia mielomonocítica crônica, leucemia linfoblástica aguda (por exemplo, linhagem de célula-T, linhagem de precursor de célula-B), leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia mieloblástica aguda, leucemia mieloblástica crônica, doen- 15 ça de Hodgekin, Iinfoma de não-Hodgekin, leucemia linfocítica crônica, leu- cemia mielógena crônica, síndrome mielodisplástica, leucemia de célula ca- pilar, leucemia de célula de lastro, neoplasma de célula de mastro, Iinfoma folicular, Iinfoma de célula grande difusa, Iinfoma de célula de revestimento, Linfoma de Burkitt, fungoides de micose, síndrome de "seary", Iinfoma de 20 célula-T cutânea, distúrbios mieloproliferativos crônicos), e tumores do sis- tema nervoso central (por exemplo, câncer do cérebro, glioblastoma, não- glioblastoma de câncer do cérebro, meningioma, adenoma pituitário, schwa- noma vestibular, um tumor neuroctodermal primitivo, meduloblastoma, astro- citoma, astrocitoma anaplástico, oligodendroglioma, ependimoma e papiloma 25 de plexo coroide), distúrbios mieloproliferativos (por exemplo, policitemia vera, trombocitemia, mielfibrose idiopática), sarcoma de tecido macio, câncer da tireoide, câncer endometrial, câncer carcinoide, tumores de célula de germe, câncer do fígado, câncer gástrico, gigantismo, adenoma pituitário, psoríase e tumor rabidoide do rim para qualquer grau.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que é

administrado a um paciente em um método de acordo com a invenção é qualquer anticorpo isolado ou fragmento de ligação de antígeno deste que se liga especificamente a um receptor de fator de crescimento similar a insu- lina-1 (por exemplo, IGF1R humano) (por exemplo, anticorpos monoclonais (por exemplo, anticorpos monoclonais totalmente humanos), anticorpos poli- clonais, anticorpos biespecíficos, fragmentos de anticorpo de Fab, fragmen- 5 tos de anticorpo de F(ab)2, fragmentos de anticorpo de gFv (por exemplo, VH ou VL), fragmentos de anticorpo de Fv de cadeia simples, fragmentos de anticorpo de dsFv, anticorpos humanizados, anticorpos quiméricos ou anti- corpos anti-idiotípicos), tais como qualquer daqueles descritos em qualquer de Burtrum et. al Cancer Research 63:8912-8921(2003); nos Pedidos de 10 Patente Franceses FR2834990, FR2834991 e FR2834900, e nas Publica- ções de Pedido PCT Nos WO 03/100008; WO 03/59951; WO 2006/13472; WO 04/71529; WO 03/106621; WO 04/83248; WO 04/87756, WO 05/16970; e WO 02/53596.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que é administrado a um paciente em um método de acordo com a invenção é um anticorpo de receptor de fator de crescimento similar a anti-insulina-1 (IGF1R) isolado compreendendo uma Cadeia Leve-C, D, E ou F 19D12/15H12 matura (LCC, LCD, LCE ou LCF) e uma cadeia pesada-A ou B 19D12/15H12 matura (HCA ou HCB). Em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende a LCF matura e a HCA (LCF/HCA) matura. Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que é administrado a um paciente em um método de acordo com a invenção é um anticorpo isolado que se liga especificamente a IGF1R que compreende uma ou mais regiões de determinação de complementaridade (CDRs) de Cadeia Leve-C, D, E ou F 19D12/15H12 e/ou cadeia pesada-A ou B 19D12/15H12 (por exemplo, todas as 3 CDRs de cadeia leve e todas as 3 CDRs de cadeia pesada).

As seqüências de aminoácido e de nucleotídeo das cadeias de anticorpo da invenção são mostradas abaixo. Sublinhado tipo pontilhado in- dica o peptídeo de sinal. Sublinhado tipo cheio indica as CDRs. Tipo plano indica as regiões de estrutura. Os fragmentos maturos carecem de peptídeo de sinal. Cadeia Leve-C Modificada 19D12/15H12 (SEQ ID N0:1)

ATG TCG .CCA.TCA..Ç^..ÇTC _ATT GGG TTT CTG CTG CTC TGG GTT CCA GCC TCC AGG GGT GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GAC TCT CTG TCT GTG ACT CCA GGC GAG AGA GTC ACC ATC ACC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG TCT CCA AAG CTT CTC ATC AAG

TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG GTC CCC TCG AGG TTC AGT GGC AGT GGA TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGC CTC GAG GCT GAA GAT GCT GCA GCG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACG

(SEQ ID N0: 2)

MI S P S Q L I G FLLLWVPAS

R G E I V L T Q S P D S L S V T P G E R V T I T C R A S Q S I G S S L H W Y Q Q K P G Q S P K L L I K Y A S Q S L S G V P S R F S G S G S G T D F T L T I S S L E A E D A A A Y Y C H Q S S R L P H T F G Q G T K V E I K R T Cadeia Leve-D Modificada 19D12/15H12 (SEQ ID N0: 3)

ATG TCG CCA TCA CAA CTC ATT GGG TTT CTG CTG CTC TGG GTT CCA GCC TCC

AGG GGT GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GAC TCT CTG TCT GTG ACT CCA GGC GAG AGA GTC ACC ATC ACC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG TCT CCA AAG CTT CTC ATC AAG TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG GTC CCC TCG AGG TTC AGT GGC AGT GGA

TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGC CTC GAG GCT GAA GAT TTC

GCA GTG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACG

(SEQ ID N0: 4)

M s. P..S.Q.l.J..G..F.k.L.k.W.y.P.A.S

R .G EIVLTQSPDSLSVTP

G E R V T I T C RASQSIGSS LHWYQQKPGQSPKLLIK YASQSLS gvpsrfsgsg

SGTDFTLTISSLEAEDF AVYYC HQSSRLPHT FGQ GTKVEIKRT Cadeia Leve-E Modificada 19D12/15H12 (SEQ ID N0: 5)

ATG TCG..CCA TCA CAA CTC ATT GGG TTT CTG CTG CTC TGG GTT CCA GCC TCC AGG GGT GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GGT ACC CTG TCT GTG TCT CCA GGC GAG AGA GCC ACC CTC TCC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG GCT CCA AGG CTT CTC ATC AAG TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG ATC CCC GAT AGG TTC AGT GGC AGT GGA

TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGA CTG GAG CCT GAA GAT GCT GCA GCG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACA

(SEQ ID N0: 6)

M S P S Q L I G F L L L W V P A S R G E I V L T Q S P G T L S V S P G E R A T L S C R A S Q S I G S S L H W Y Q Q K P G Q A P R L L I K Y A S Q S L S G I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D A A A Y Y C H Q S S R L P H T F G Q G T K V E I K R T Cadeia Leve-F Modificada 19D12/15H12 (SEQ ID N0: 7)

AT?.J.CG.CCA.TCA CAA CTC ATT GGG TTT CTG CTG CTC TGG GTT CCA GCC TCC

AGG..GGT GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GGT ACC CTG TCT GTG TCT CCA

GGC GAG AGA GCC ACC CTC TCC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC

TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG GCT CCA AGG CTT CTC ATC AAG

TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG ATC CCC GAT AGG TTC AGT GGC AGT GGA

TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGA CTG GAG CCT GAA GAT TTC

GCA GTG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA

GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACA (SEQ ID N0: 8)

M S P S Q L I G F L L L W V P A S R G E I V L T Q S P G T L S V S P G E R A T L S C R A S Q S I G S S L H W Y Q Q K P G Q A P R L L I K Y A S Q S L S G I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D F A V Y Y C H Q S S R L P H T F G Q G T K V E I K R T Cadeia Pesada-A Modificada 19D12/15H12 (SEQ ID N0: 9)

AT?..GAG .TTT GGG . CTG_ AGC TGG GTT TTC CTT GTT GCT ATA TTA AAA GGT GTC CAG TGT GAG GTT CAG CTG GTG CAG TCT GGG GGA GGC TTG GTA AAG CCT GGG GGG TCC CTG AGA CTC TCC TGT GCA GCC TCT GGA TTC ACC TTC AGT AGC TTT GCT ATG CAC TGG GTT CGC CAG GCT CCA GGA AAA GGT CTG GAG TGG ATA TCA GTT ATT GAT ACT CGT GGT GCC ACA TAC TAT GCA GAC TCC GTG AAG GGC CGA

TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC AAG AAC TCC TTG TAT CTT CAA ATG AAC AGC CTG AGA GCC GAG GAC ACT GCT GTG TAT TAC TGT GCA AGA CTG GGG AAC TTC TAC TAC GGT ATG GAC GTC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA

(SEQ ID N0: 10)

Met.__Glju Phe _G1 y Leu SeÇ .Trp . Val Phe_ Leu Val Ala He Leu Lys Gly Val Gin. Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp He Ser Val He Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg

Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Cadeia pesada-B Modificada 19D12/15H12 (SEQ ID N0: 11) ATG GAG TTT GGG ÇTG.AGC TGG GTT TXC CTT GTT GCT ATA TTAAAfVGGTGTC CAG TGT GAG GTT CAG CTG GTG CAG TCT GGG GGA GGC TTG GTA CAG CCC GGG GGG TCC CTG AGA CTC TCC TGT GCA GCC TCT GGA TTC ACC TTC AGT AGCTTT GCT ATG CAC TGG GTT CGC CAG GCT CCA GGA AAA GGT CTG GAG TGG ATA TCA GTT ATT GAT ACT CGT GGT GCC ACA TAC TAT GCA GAC TCC GTG AAG GGC CGA TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC AAG AAC TCC TTG TAT CTT CAA ATG AAC AGC CTG AGA GCC GAG GAC ACT GCT GTG TAT TAC TGT GCA AGA CTG GGG AAC TTC TAC TAC GGT ATG GAC GTC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA

(SEQ ID N0: 12)

yal Phe Leu Val Ala He Leu Lys Gly Val Gln__Cy_s Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp He Ser Val He Asp Thr Arq Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

A presente invenção inclui concretizações nas quais as cadeias de anticorpo aqui colocadas são substituídas conservativamente com uma ou mais mutações que não afetam significantemente a atividade de ligação de anticorpo.

Plasmídeos compreendendo um promoter de CMV operavel- mente ligado às cadeias leves 15H12/19D12 e cadeias pesadas foram de- positados na American Type Culture Collection (ATCC); 10801 University Boulevard; Manassas, Virginia 20110-2209, em 21 de maio de 2003. O no- me de depósito e os números de acesso no ATCC para os plasmídeos são colocados abaixo:

(i) promotor de CMV-15H12/19D12 HCA (γ4)- Nome de depósito: "15H12/19D12 HCA (γ4)"; N0 de acesso no ATCC: PTA-5214;

(ii) promotor de CMV-15H12/19D12 HCB (γ4)-

Nome de depósito: "15H12/19D12 HCB (γ4)";

N0 de acesso no ATCC: PTA-5215;

(iii) promotor de CMV-15H12/19D12 HCA (γ1)-

Nome de depósito: "15H12/19D12 HCA (γ1)";

N0 de acesso no ATCC: PTA-5216;

(iv) promotor de CMV-15H12/19D12 LCC (k)-

Nome de depósito: "15H12/19D12 LCC (/c)";

N0 de acesso no ATCC: PTA-5217;

(v) promotor de CMV-15H12/19D12 LCD (k)-

Nome de depósito: "15H12/19D12 LCD (/c)";

N0 de acesso no ATCC: PTA-5218;

(vi) promotor de CMV-15H12/19D12 LCE (k)-

Nome de depósito: "15H12/19D12 LCE (/c)";

N0 de acesso no ATCC: PTA-5219; e

(vii) promotor de CMV-15H12/19D12 LCF (k)-

Nome de depósito: "15H12/19D12 LCF (/c)";

N0 de acesso no ATCC: PTA-5220.

A presente invenção inclui métodos e composições (por exem-

plo, qualquer aqui descrita) compreendendo anticorpos anti-IGF1R e frag- mentos de ligação de antígeno destes compreendendo qualquer das cadeias de imunoglobulina leve e/ou pesada ou fragmentos maturos destas localiza- das em qualquer dos plasmídeos precedentes depositados no ATCC.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo que se liga

"especificamente" a IGF1R humana se liga com um Kd de cerca de 10'8 M ou IO'7 M, ou um número menor; ou, em uma concretização da invenção, com um Kd de cerca de 1,28X10'10 M, ou um número menor por medição de Biacore, ou com um Kd de cerca de 2,05X10'12 M, ou um número inferior por

medição de KinExA. Em outra concretização, um anticorpo que se liga "es- pecificamente" a IGF1R humana se liga exclusivamente a IGF1R humana e a não outra proteína em qualquer quantidade específica. Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que é administrado a um paciente em um método de acordo com a invenção compre- ende qualquer imunoglobulina de cadeia leve e/ou um imunoglobulina de ca- deia pesada conforme colocado no Pedido Internacional Publicado N0 WO 5 2002/53596, que é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Por exemplo, em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma seqüência de aminoácido selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 47 e 51, conforme colocado em WO 2002/53596, e/ou uma região variável de 10 cadeia pesada compreendendo uma seqüência de aminoácido selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 4, 8, 12, 16, 20, 24, 45 e 49, con- forme colocado em WO 2002/53596. Em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende uma cadeia pesada e/ou leve selecionada daquela do anticorpo 2.12.1; 2.13.2; 2.14.3; 3.1.1; 4.9.2; e 4.17.3 em WO 2002/53596.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que

pode ser administrado a um paciente em um método de acordo com a in- venção compreende qualquer imunoglobulina de cadeia leve e/ou uma imu- noglobulina de cadeia pesada conforme colocado no Pedido Internacional Publicado N0 WO 2003/59951, que é aqui incorporado por referência em sua 20 totalidade. Por exemplo, em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma se- qüência de aminoácido selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID NoS: 54, 61 e 65, conforme colocado em WO 2003/59951, e/ou uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma seqüência de aminoácidos 25 selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 69, 75, 79 e 83, conforme colocado em WO 2003/59951.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que pode ser administrado a um paciente em um método de acordo com a in- venção compreende qualquer imunoglobulina de cadeia leve e/ou uma imu- 30 noglobulina de cadeia pesada, conforme colocado no Pedido Internacional Publicado N0 WO 2004/83248, que é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Por exemplo, em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma se- qüência de aminoácido selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141 e 143, conforme colocado em WO 2004/83248, e/ou uma re- 5 gião variável de cadeia pesada compreendendo uma seqüência de aminoá- cidos selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID NoS: 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140 e 142, conforme colocado em WO 2004/83248. Em uma concretização da in- venção, o anticorpo compreende uma cadeia leve e/ou pesada selecionada 10 daquela de PINT-6A1; PINT-7A2; PINT-7A4; PINT-7A5; PINT-7A6; PINT- 8A1; PINT-9A2; PINT-11A1; PINT-11A2; PINT-11A3; PINT-11A4; PINT- 11A5; PINT-11A7; PINT-12A1; PINT-12A2; PINT-12A3; PINT-12A4 e PINT- 12A5 em WO 2004/83248.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que pode ser administrado a um paciente em um método de acordo com a in- venção compreende qualquer imunoglobulina de cadeia leve e/ou uma imu- noglobulina de cadeia pesada, conforme colocado no Pedido Internacional Publicado N0 WO 2003/106621, que é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Por exemplo, em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma se- qüência de aminoácido selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 8-12, 58-69, 82-86, 90, 94, 96, 98, conforme colocado em WO 2003/106621 e/ou uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma seqüência de aminoácidos selecionada a partir do grupo consistindo em SEQ ID Nos: 7, 13, 70-81, 87, 88, 92, conforme colocado em WO 2003/106621.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que pode ser administrado a um paciente em um método de acordo com a in- venção compreende qualquer imunoglobulina de cadeia leve e/ou uma imu- 30 noglobulina de cadeia pesada, conforme colocado no Pedido Internacional Publicado N0 WO 2004/87756, que é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Por exemplo, em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma se- qüência de aminoácido de SEQ ID N0: 2, conforme colocado em WO 2004/87756, e/ou uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma seqüência de aminoácido de SEQ ID N0: 1, conforme colocado em WO 5 2004/87756.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R que pode ser administrado a um paciente em um método de acordo com a in- venção compreende qualquer imunoglobulina de cadeia leve e/ou uma imu- noglobulina de cadeia pesada, conforme colocado no Pedido Internacional 10 Publicado N0 WO 2005/16970, que é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Por exemplo, em uma concretização da invenção, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma se- qüência de aminoácido de SEQ ID N0: 6 ou 10, conforme colocado em WO 2005/16970, e/ou uma região variável de cadeia pesada compreendendo 15 uma seqüência de aminoácido de SEQ ID N0: 2, conforme colocado em WO 2005/16970.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende uma região variável de cadeia pesada de imunoglobulina compreendendo uma seqüência de aminoácido selecionada a partir do grupo consistindo em:

1 grlgqawrsl rlscaasgft fsdyymswir qapgkglewv syisssgstr 51 dyadsvkgrf tisrdnakns Iylqmnslra edtavyycvr dgvettfyyy 101 yygmdvwgqg ttvtvssast kgpsvfplap csrstsesta algclvkdyf 151 pepvtvswns galtsgvhtf psca (SEQ ID N0: 13)

1 vqllesgggl vqpggslrls ctasgftfss yamnwvrqap gkglewvsai 51 sgsggttfya dsvkgrftis rdnsrttlyl qmnslraedt avyycakdlg 101 wsdsyyyyyg mdvwgqgttv tvss (SEQ ID N0: 14)

1 gpglvkpset Isltctvsgg sisnyywswi rqpagkglew igriytsgsp

51 nynpslksrv tmsvdtsknq fslklnsvta adtavyycav tifgvviifd 101 ywgqgtlvtvss (SEQ ID N0: 15)

1 evqllesggg Ivqpggslrl scaasgftfs syamswvrqa pgkglewvsa 51 isgsggityy adsvkgrfti srdnskntly Iqmnslraed tavyycakdl 101 gygdfyyyyy gmdvwgqgtt vtvss (SEQ ID N0: 16)

1 pglvkpsetl sltctvsggs issyywswir qppgkglewi gyiyysgstn 51 ynpslksrvt isvdtsknqf slklssvtaa dtavyycart ysssfyyygm 101 dvwgqgttvt vss (SEQ ID N0: 17)

1 evqllesggg Ivqpggslrl scaasgftfs syamswvrqa pgkglewvsg

51 itgsggstyy adsvkgrfti srdnskntly Iqmnslraed tavyycakdp 101 gttvimswfd pwgqgtlvtv ss (SEQ IDN0: 18)

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende uma região variável de cadeia leve de imunoglobulina compreendendo uma se- qüência de aminoácido selecionada a partir do grupo consistindo em:

1 asvgdrvtft crasqdirrd Igwyqqkpgk apkrliyaas rlqsgvpsrf 51 sgsgsgteft Itisslqped fatyyclqhn nyprtfgqgt eveiirtvaa 101 psvfifppsd eqlksgtasv vcllnnfypr eakvqw

(SEQ ID N0: 19)

1 diqmtqfpss Isasvgdrvt itcrasqgir ndlgwyqqkp gkapkrliya 51 asrlhrgvps rfsgsgsgte ftltisslqp edfatyyclq hnsypcsfgq 101 gtkleik (SEQ ID N0: 20)

1 sslsasvgdr vtftcrasqd irrdlgwyqq kpgkapkrli yaasrlqsgv 51 psrfsgsgsg teftltissl qpedfatyyc Iqhnnyprtf gqgteveiir (SEQ ID N0: 21)

1 diqmtqspss Isasvgdrvt itcrasqgir sdlgwfqqkp gkapkrliya 51 asklhrgvps rfsgsgsgte ftltisrlqp edfatyyclq hnsypltfgg

101 gtkveik (SEQ ID N0: 22)

1 gdrvtitcra sqsistflnw yqqkpgkapk Ilihvasslq ggvpsrfsgs 51 gsgtdftlti sslqpedfat yycqqsynap Itfgggtkve ik (SEQ ID N0: 23)

1 ratlscrasq svrgrylawy qqkpgqaprl Iiygassrat gipdrfsgsg

51 sgtdftltis rlepedfavf ycqqygsspr tfgqgtkvei k (SEQ ID N0: 24)

Em uma concretização da invenção, o anticorpo anti-IGF1R compreende uma imunoglobulina de cadeia leve, ou um fragmento maturo deste (isto é, carecendo de seqüência de sinal), ou região variável desta, compreendendo a seqüência de aminoácido de:

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtasp sslsasvqdr vtitcrasgg 51 irndlawvQQ kpqkapkrli vaass/qsqv psrfsqsqsq teftltissl 101 qpedfatwc lahnsvpwtí qqqtkveikr tvaapsvfif ppsdeqlksg 151 taswcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst

201 Itlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec;

(SEQ ID N0: 25)

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtqsp sslsasvqdr vtftcrasad 51 irrdlawvQQ kpqkapkrli vaasr/gsqv psrfsqsqsq teftltissl 101 qpedfatwc Iahnnvprtf qqqteveiir tvaapsvfif ppsdeqlksg

151 taswcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst 201 Itlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec;

(SEQ ID N0: 26)

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtqsp sslsasvqdr vtitcrasqg 51 /md/qwyqq kpqkapkrli vaass/qsqv psrfsqsqsq teftltissl

101 qpedfatwc lahnsvpytf qqqtkleikr tvaapsvfif ppsdeqlksg 151 taswcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst 201 Itlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec;

(SEQ ID N0: 27)

ou

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtqfp sslsasvqdr vtitcrasqg 51 imdlamaa kpqkapkrli vaasrlhrav psrfsqsqsq teftltissl 101 qpedfatwc lahnsypcsf aaatkleikr tvaapsvfif ppsdeqlksg 151 taswcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst 201 Itlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec (SEQ ID N0: 28).

Em uma concretização da invenção, a seqüência de sinal é ami-

noácidos 1-22 de SEQ ID NoS: 25-28. Em uma concretização da invenção, a região variável matura é sublinhada. Em uma concretização da invenção, as CDRs são com fonte em negrito/itálico. Em uma concretização da invenção,

o anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da inven- ção compreende uma ou mais CDRs (por exemplo, 3 CDRS de cadeia leve), conforme colocado acima.

Em uma concretização da invenção, o anticorpo anti-IGF1R compreende uma imunoglobulina de cadeia pesada ou um fregmento maturo deste (isto é, carecendo de seqüência de sinal), ou uma região variável des- ta, compreendendo a seqüência de aminoácido de:

1 mefglswvfl vaiikgvqcq vqlvesggql vkpqqslrls caasaftfsd 51 yymswirgap gkgIewvsw sssastivva dsvkgrítis rdnaknslvl 101 gmnslraedt aWvcarWr fIewllvvvv vvamd\>wggg ttvtvssast 151 kgpsvfplap csrstsesta algclvkdyf pepvtvswns galtsgvhtf 201 pavlqssgly slsswtvps snfgtqtytc nvdhkpsntk vdktverkcc

251 vecppcpapp vagpsvflfp pkpkdtlmis rtpevtcvvv dvshedpevq 301 fnwyvdgvev hnaktkpree qfnstfrws vltwhqdwl ngkeykckvs 351 nkglpapiek tisktkgqpr epqvytlpps reemtknqvs Itclvkgfyp 401 sdiavewesn gqpennyktt ppmldsdgsf flyskltvdk srwqqgnvfs 451 csvmhealhn hytqkslsls pgk;

(SEQ ID N0: 29)

1 mefglswvfl vaiikgvgcg aglvesgggl vkpggslrls caas aftfsd 51 wmswirgap gkglewvsw sssastrdva dsvkarftis rdnaknslvl 101 gmnslraedt awvcvrdav ettfvvvvva mdvwgggttv tvssastkgp 151 svfplapcsr stsestaalg clvkdyfpep vtvswnsgal tsgvhtfpav

201 Iqssglyslssvvtvpssnfgtqtytcnvd hkpsntkvdk tverkccvec 251 ppcpappvag psvflfppkp kdtlmisrtp evtcvvvdvs hedpevqfnw 301 yvdgvevhna ktkpreeqfn stfrvvsvlt vvhqdwlngk eykckvsnkg 351 Ipapiektis ktkgqprepq vytlppsree mtknqvsltc Ivkgfypsdi 401 avewesngqp ennykttppm Idsdgsffly skltvdksrw qqgnvfscsv 451 mhealhnhyt qkslslspgk;

(SEQ ID N0: 30)

1 mefglswlfl vailkqvqce vqllesqqql vgpqqslrls caasqfffss 51 uamswvrqap qkqlewvsa/ sasaastvva dsvkgríüs rdnskntlvl 101 gmnslraedt avvvcakqys sgwvvvvvva mdvw qqqttv tvssastkqp 151 svfplapcsr stsestaalg clvkdyfpep vtvswnsgal tsgvhtfpav 201 Iqssglysls svvtvpssnf gtqtytcnvd hkpsntkvdk tverkccvec

251 ppcpappvag psvflfppkp kdtlmisrtp evtcvvvdvs hedpevqfnw 301 yvdgvevhna ktkpreeqfn stfrvvsvlt vvhqdwlngk eykckvsnkg 351 Ipapiektis ktkgqprepq vytlppsree mtknqvsltc Ivkgfypsdi 401 avewesngqp ennykttppm Idsdgsffly skltvdksrw qqgnvfscsv 451 mhealhnhyt qkslslspgk;

(SEQ ID N0: 31) ou

1 mefglswlfl vailkqvqce vqllesqqql vgpqqslrls ctasgftfss 51 yamnwvrqap qkqlewvsa/ sgsggttfva dsvkgrftis rdnsrttlvl 101 gmnslraedt awvcakdlg wsdsvwvvg md\>Wqqqttv tvssastkqp

151 svfplapcsr stsestaalg clvkdyfpep vtvswnsgal tsgvhtfpav 201 Iqssglyslssvvtvpssnfgtqtytcnvd hkpsntkvdk tverkccvec 251 ppcpappvag psvflfppkp kdtlmisrtp evtcvvvdvs hedpevqfnw 301 yvdgvevhna ktkpreeqfn stfrvvsvlt vvhqdwlngk eykckvsnkg 351 Ipapiektis ktkgqprepq vytlppsree mtknqvsltc Ivkgfypsdi

401 avewesngqp ennykttppm Idsdgsffly skltvdksrw qqgnvfscsv 451 mhealhnhyt qkslslspgk (SEQ ID N0: 32).

Em uma concretização da invenção, a seqüência de sinal é ami- noácidos 1-19 de SEQ ID NoS: 29-32. Em uma concretização da invenção, a região variável natura é sublinhada. Em uma concretização da invenção, a anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da inven- ção compreende uma ou mais CDRs (por exemplo, 3 CDRs de cadeia leve), conforme colocado acima.

Em uma concretização da invenção, o anticorpo anti-IGF1R com- preende uma região variável de cadeia leve compreendendo a seqüência de aminoácido de qualquer de SEQ ID Nos: 19-24 compartilhadas com uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma seqüência de aminoácido de qualquer de SEQ ID Nos: 13-18, respectivamente. Em uma concretização da invenção, o anticorpo anti-IGF1R compreende uma região variável de cadeia leve matura compreendendo uma seqüência de aminoácido de qualquer de SEQ ID Nos: 25 ou 26 compartilhada com uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma seqüência de aminoácido de qualquer de SEQ ID Nos: 29 ou 30. Em uma concretização da invenção, o anticorpo anti-IGF1 R compreende uma região variável de cadeia leve matura compreendendo uma seqüência de aminoácido de qualquer de SEQ ID Nos: 27 ou 28 compartilhadas com uma re- gião variável de cadeia pesada compreendendo uma seqüência de aminoácido de qualquer de SEQ ID Nos: 31 ou 32.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende uma cadeia pesada de imunoglobulina, ou fragmento ou região variável maturos 20 de 2.12.1 fx (SEQ ID N0: 33) (em uma concretização da invenção, a sequen- ce condutora é sublinhada; em uma concretização da invenção, as CDRs são fontes em negrito/itálicas):

1 mefglswvfl vaiikqvqcq vqlvesgggl vkpggslrls caasgftfsd 51 yymswirqap gkglewvsy/' sssgstrdya dsvkgrftis rdnaknslyl 101 qmnslraedt avyycardgv ettfyyyyyg mdvwgqgttv tvssastkgp

401 avewesngqp ennykttppm Idsdgsffly skltvdksrw qqgnvfscsv 451 mhealhnhyt qkslslspgk Em uma concretização da invenção, o anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende aminoáci- dos 20-470 de 2.12.1 fx (SEQ ID N0: 33).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende região variável de cadeia pesada de imunoglobulina matura 2.12.1 fx (aminoácidos 20-144 ou SEQ ID N0: 33; SEQ ID N0: 34):

q vqlvesgggl vkpggslrls caasgftfsd yymswirqap gkglewvsyi sssgstrd- ya dsvkgrftis rdnaknslyl qmnslraedt avyycardgv ettfyyyyyg mdvwgqgttv tvss Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R,

ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende uma cadeia leve de imunoglobulina, ou fragmento ou região variável maturos 2.12.1 fx (SEQ ID N0: 35) (em uma concretização da invenção, a seqüência condutora é sublinhada; em uma concretização da invenção, as CDRs estão em fontes em negrito/itálico):

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtqsp sslsasvgdr vtitcrasqd 51 /rrd/gwyqq kpgkapkrli yaasrlqsgv psrfsgsgsg teftltissl 101 qpedfatyyc Iqhnnyprtt gqgtkveikr tvaapsvfif ppsdeqlksg 151 taswcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst 201 Itlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende amino- ácidos 23-236 de 2.12.1 fx (SEQ ID N0: 35).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende região variável de cadeia leve de imunoglobulina matura 2.12.1 fx (aminoácidos 23- 130 de SEQ ID N0: 35; SEQ ID N0: 36):

diqmtqsp sslsasvgdr vtitcrasqd irrdlgwyqq kpgkapkrli yaasrlqsgv psrfsgsgsg teftltissl qpedfatyyc Iqhnnyprtf gqgtkveikr Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R,

ou fragmento de ligação de antígeno deste, compreende ou consiste em uma cadeia de imunoglobulina de cadeia leve compreendendo ou consistin- do em aminoácidos 23-236 de 2.12.1 fx (SEQ ID N0: 35) e uma cadeia de imunoglobulina de cadeia pesada compreendendo ou consistindo em ami- noácidos 20-470 de 2.12.1 fx (SEQ ID N0: 33).

Em uma concretização da invenção, o anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste, compreende uma ou mais 2.12.1 fx CDRs (por exemplo, 3 CDRs de cadeia leve e/ou 3 CDRs de cadeia pesa- da), conforme colocado acima.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção, ou fragmento de ligação de antígeno deste, compreende uma região variável de cadeia leve de imunoglobulina 7C10 humanizada; versão 1 (SEQ ID N0: 37):

1 dvvmtqspls Ipvtpgepas iscrssqsiv hsngntylqw ylqkpgqspq 51 Iliykvsnrl ygvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedvgv yycfqgshvp 101 wtfgqgtkve ik

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R,

ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende uma região variável de cadeia leve de imunoglobulina 7C10 humanizada; versão

2 (SEQ ID N0: 38):

1 divmtqspls Ipvtpgepas iscrssqsiv hsngntylqw ylqkpgqspq 51 Iliykvsnrl ygvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedvgv yycfqgshvp

101 wtfgqgtkve ik

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende uma região variável de cadeia pesada de imunoglobulina 7C10 humanizada; ver- são 1 (SEQ ID N0: 39):

1 qvqlqesgpg Ivkpsetlsl tctvsgysit ggylwnwirq ppgkglewmg 51 yisydgtnny kpslkdriti srdtsknqfs Iklssvtaad tavyycaryg 101 rvffdywgqg tlvtvss

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende a regi- ão variável de cadeia pesada de imunoglobulina 7C10 humanizada; versão 2 (SEQ ID N0: 40): 1 qvqlqesgpg Ivkpsetlsl tctvsgysit ggylwnwirq ppgkglewig 51 yisydgtnny kpslkdrvti srdtsknqfs Iklssvtaad tavyycaryg 101 rvffdywgqg tlvtvss

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende a regi- ão variável de cadeia pesada de imunoglobulina 7C10 humanizada; versão 3 (SEQ ID N0: 41):

1 qvqlqesgpg Ivkpsetlsl tctvsgysis ggylwnwirq ppgkglewig 51 yisydgtnny kpslkdrvti svdtsknqfs Iklssvtaad tavyycaryg 101 rvffdywgqg tlvtvss

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende região variável de cadeia pesada de imunoglobulina A12 (SEQ ID N0: 42):

1 evqlvqsgae vkkpgssvkv sckasggtfs syaiswvrqa pgqglewmgg 51 iipifgtany aqkfqgrvti tadkststay melsslrsed tavyycarap

101 Irflewstqd hyyyyymdvw gkgttvtvss

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende região variável de cadeia leve de imunoglobulina A12 (SEQ ID N0: 43):

1 sseltqdpav svalgqtvri tcqgdslrsy yaswyqqkpg qapvlviygk

51 nnrpsgipdr fsgsssgnta sltitgaqae deadyycnsr dnsdnrlifg 101 ggtkltvls ou

(SEQ ID N0: 105):

1 sseltqdpav svalgqtvri tcqgdslrsy yatwyqqkpg qapilviyge

51 nkrpsgipdr fsgsssgnta sltitgaqae deadyycksr dgsgqhlvfg 101 ggtkltvlg

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno destes da invenção compreende região variável de cadeia pesada de imunoglobulina 1A (SEQ ID N0: 44):

1 evqlvqsggg Ivhpggslrl scagsgftfr nyamywvrqa pgkglewvsa 51 igsgggtyya dsvkgrftis rdnaknslyl qmnslraedm avyycarapn 101 wgsdafdiwg qgtmvtvss

;opcionalmente incluindo uma ou mais das seguintes mutações: R30, S30, N31, S31, Y94, H94, D104, E104.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende região variável de cadeia leve de imunoglobulina 1A (SEQ ID N0: 45):

1 diqmtqspss Isasvgdrvt itcrasqgis swlawyqqkp ekapksliya 51 asslqsgvps rfsgsgsgtd ftltisslqp edfatyycqq ynsypptfgp 101 gtkvdik

;opcionalmente incluindo uma ou mais das seguintes mutações:

P96, I96, P100, Q100, R103, K103, V104, L104, D105, E105

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende anti- corpo de cadeia simples (fv) 8A1 (SEQ ID N0: 46):

1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgpgynff nywigwvrqm pgkglewmgi

51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay Iqwsslkasd tamyycarsi 101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtmvtvssgg ggsggggsgg ggs-

seltqdp

151 avsvalgqtv ritcqgdslr syyaswyqqk pgqapvlviy gknnrpsgip 201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhvv fgggtkltvl

251 g

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende anti- corpo de cadeia simples (fv) 9A2 (SEQ ID N0: 47):

1 qvqlvqsgae vrkpgasvkv scktsgytfr nydinwvrqa pgqglewmgr

51 isghygntdh aqkfqgrftm tkdtststay melrsltfdd tavyycarsq 101 wnvdywgrgt Ivtvssgggg sggggsgggg salnfmltqp hsvsespgkt 151 vtisctrssg siasnyvqwy qqrpgssptt vifednrrps gvpdrfsgsi 201 dtssnsaslt isglktedea dyycqsfdst nlwfgggtk vtvlg Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R,

ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende anti- corpo de cadeia simples (fv) 11A4 (SEQ ID N0: 48): 1 evqllesggg Ivqpggslrl scaasgftfs syamswvrqa pgkglewvsa 51 isgsggstyy adsvkgrfti srdnskntly Iqmnslraed tavyycassp 101 yssrwysfdp wgqgtmvtvs sggggsgggg sggggsalsy eltqppsvsv 151 spgqtatitc sgddlgnkyv swyqqkpgqs pvlviyqdtk rpsgiperfs 201 gsnsgniatl tisgtqavde adyycqvwdt gtvvfgggtk Itvlg

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende anti- corpo de cadeia simples (fv) 7A4 (SEQ ID N0: 49):

1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgsgynff nywigwvrqm pgkdlewmgi 51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay Iqwsslkasd tamyycarsi

101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtmvtvssgg gssggggsgg ggs-

seltqdp

151 avsvalgqtv ritcrgdslr nyyaswyqqk pgqapvlviy gknnrpsgip 201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhmv fgggtkltvl 251 g

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende anti- corpo de cadeia simples (fv) 11A1 (SEQ ID N0: 50):

1 evqlvesggg vvqpgrslrl scaasgftfs dfamhwvrqi pgkglewlsg 51 Irhdgstayy agsvkgrfti srdnsrntvy Iqmnslraed tatyycvtgs

101 gssgphafpv wgkgtlvtvs sggggsgggg sggggsalsy vltqppsasg 151 tpgqrvtisc sgsnsnigty tvnwfqqlpg tapklliysn nqrpsgvpdr 201 fsgsksgtsa slaisglqse deadyycaaw ddslngpvfg ggtkvtvlg Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende anti- corpo de cadeia simples (fv) 7A6 (SEQ ID N0: 51)

1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgsgynff nywigwvrqm pgkglewmgi 51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay Iqwsslkasd tamyycarsi 101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtlvtvssgg ggsggggsgg ggsseltqdp 151 avsvalgqtv ritcqgdslr syytnwfqqk pgqapllvvy aknkrpsgip

201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhw fgggtkltvl 251 g Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou um fragmento de ligação de antígeno deste (por exemplo, uma imunoglo- bulina de cadeia pesada ou de cadeia leve) da invenção compreende uma ou mais regiões de determinação de complementaridade (CDR) seleciona- das a partir do grupo consistindo em: sywmh (SEQ ID N0: 52); einpsngrtnynekfkr (SEQ ID N0: 53); grpdyygsskwyfdv (SEQ ID N0: 54); rssqsivhsnvntyle (SEQ ID N0: 55);

kvsnrfs (SEQ ID N0: 56); e

fqgshvppt (SEQ ID N0: 57).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo anti-IGF1R, ou um fragmento de ligação de antígeno deste da invenção compreende uma região variável de imunoglobulina de cadeia pesada selecionada a par- tir do grupo consistindo em:

1 qvqlvqsgae vvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige 51 inpsngrtny nqkfqgkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr 101 pdyygsskwy fdvwgqgttv tvs (SEQ ID N0: 58);

1 qvqfqqsgae Ivkpgasvkl sckasgytft sylmhwikqr pgrglewigr

51 idpnnwtkf nekfkskatl tvdkpsstay melssltsed savyycarya 101 ycrpmdywgq gttvtvss (SEQ ID N0: 59);

1 qvqlqqsgae Ivkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige 51 inpsngrtny nekfkrkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr

101 pdyygsskwy fdvwgagttv tvs (SEQ ID N0: 60);

1 qvqlqqsgae Imkpgasvki sckatgytfs sfwiewvkqr pghglewige 51 ilpgsggthy nekfkgkatf tadkssntay mqlssltsed savyycargh 101 syyfydgdyw gqgtsvtvss (SEQ ID N0: 61);

1 qvqlqqpgsv Ivrpgasvkl sckasgytft sswihwakqr pgqglewige 51 ihpnsgntny nekfkgkatl tvdtssstay vdlssltsed savyycarwr 101 ygspyyfdyw gqgttltvss (SEQ ID N0: 62);

1 qvqlqqpgae Ivkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgrglewigr 51 idpnsggtky nekfkskatl tvdkpsstay mqlssltsed savyycaryd 101 yygssyfdyw gqgttltvss (SEQ ID N0: 63);

1 qvqlvqsgae vvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige

51 inpsngrtny nqkfqgkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr 101 pdyygsskwy fdvwgqgttv tvs (SEQ ID N0: 64);

101 pdyygsskwy fdvwgagttv tvss (SEQ ID N0: 65);

1 qvqlvqsgae vvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige 51 inpsngrtny nqkfqgkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr 101 pdyygsskwy fdvwgqgttv tvss

(SEQ ID N0: 66);

1 qvqlqqsgae Ivkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgrglewigr 51 idpnsggtky nekfkskatl tvdkpsstay mqlssltsed savyycaryd 101 yygssyfdyw gqgttvtvss (SEQ ID N0: 67);

1 qiqlqqsgpe Ivrpgasvki sckasgytft dyyihwvkqr pgeglewigw 51 iypgsgntky nekfkgkatl tvdtssstay mqlssltsed savyfcargg 101 kfamdywgqg tsvtvss (SEQ ID N°: 68);

1 qvqlqqsgae Ivkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige

51 inpsngrtny nekfkrkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr 101 pdyygsskwy fdvwgagttv tvss (SEQ ID N0: 69);

1 qiqlqqsgpe Ivkpgasvki sckasgytft dyyinwmkqk pgqglewigw 51 idpgsgntky nekfkgkatl tvdtssstay mqlssltsed tavyfcarek 101 ttyyyamdyw gqgtsvtvsa (SEQ ID N0: 70);

1 vqlqqsgael mkpgasvkis ckasgytfsd ywiewvkqrp ghglewigei 51 Ipgsgstnyh erfkgkatft adtssstaym qlnsltseds gvyyclhgny 101 dfdgwgqgtt Itvss (SEQ ID N0: 71); e

1 qvqllesgae Imkpgasvki sckatgytfs sfwiewvkqr pghglewige

51 ilpgsggthy nekfkgkatf tadkssntay mqlssltsed savyycargh 101 syyfydgdyw gqgtsvtvss (SEQ ID N0: 72);

e/ou uma região variável de imunoglobolina de cadeia leve sele- cionada a partir do grupo consistindo em:

1 dvlmtqipvs Ipvslgdqas iscrssqiiv hnngntylew ylqkpgqspq 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp 101 ftfgsgtkle ikr (SEQ ID N0: 73);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 Iliykvsnrfsgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 74);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 75);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 76);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr 51 Iliykvsnrfsgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 77);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas iscrssqxiv hsngntylew ylqkpgqspk 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp 101 xtfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 78);

1 dwmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 79);

1 dwmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr 51 Iliykvsnrfsgvpdrfsgsgagtdftlrisrveaedlgiyycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 80);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID N0: 81);

1 dvlmtqipvs Ipvslgdqas iscrssqiiv hnngntylew ylqkpgqspq 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp 101 ftfgsgtkle ikr (SEQ ID N°: 82);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas iscrfsqsiv hsngntylew ylqksgqspk 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp 101 rtfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 83);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 84);

1 dwmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk 51 Iliykvsnrfsgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 85);

1 elvmtqtpls Ipvslgdqas iscrssqtiv hsngdtyldw flqkpgqspk 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 86);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 87);

1 dwmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 88);

1 dvlmtqtpvs Isvslgdqas iscrssqsiv hstgntylew ylqkpgqspk 51 Iliykisnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqashap 101 rtfgggtkle ikr

(SEQ ID N0: 89);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas isckssqsiv hssgntyfew ylqkpgqspk 51 Iliykvsnrfsgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgship 101 ftfgsgtkle ikr (SEQ ID N0: 90);

1 dieltqtpls Ipvslgdqas iscrssqsiv hsngntylew ylqkpgqspk 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp 101 ytfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 91);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 92);

1 dwmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 93);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk 51 Iliykvsnrfsgvpdrfsgs gsgtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 94);

1 dwmtqtpls Ipvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp 101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 95);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas iscrsnqtil Isdgdtylew ylqkpgqspk 51 Iliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 96);

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas iscrssqtiv hsngntylew ylqkpgqspk 51 Iliykvtnrfsgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgthap 101 ytfgggtkle ikr

(SEQ ID N0: 97); e

1 dvlmtqtpls Ipvslgdqas iscrssqsiv hsngntylew ylqkpgqspk 51 Iliysissrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srvqaedlgv yycfqgshvp 101 ytfgggtkle ikr (SEQ ID N0: 98).

O escopo da presente invenção inclui métodos nos quais a um paciente é administrado um anti-fator de crescimento similar a anticorpo de receptor (IGF1R) de insulina-1 no qual a região variável do anticorpo é ligada a uma região constante de imunoglobulina. Em uma concretização da inven- 30 ção, a região variável de cadeia leve é ligada a uma região constante de ca- deia k. Em uma concretização da invenção, a região variável de cadeia pe- sada é ligada a uma região constante γ1, γ2, γ3 ou γ4. Qualquer das regiões variáveis de imunoglobulina aqui colocadas, nas concretizações da inven- ção, podem ser ligadas a qualquer das regiões constantes precedentes.

Além disso, o escopo da presente invenção compreende qual- quer anticorpo ou fragmento de anticorpo compreendendo uma ou mais 5 CDRs (3 CDRs de cadeia leve e/ou 3 CDRs de cadeia pesada) e/ou regiões de estrutura de qualquer das imunoglobulina de cadeia leve ou imunoglobu- lina de cadeia pesada, conforme colocado aqui conforme identificado por qualquer dos métodos colocados em Chothia et ai, J. Mol. Biol. 186:651-663 (1985); Novotny e Haber, Proc. Natl. Acad. Sei. USA 82:4592-4596 (1985) 10 ou Kabat, E. A. et al., Sequences of Proteins of Immunoloaical Interest. Nati- onal Institutes of Health, Bethesda, Md., (1987)).

Em uma concretização da invenção, o termo "anticorpo mono- clonal", conforme aqui usado, se refere a um anticorpo obtido de uma popu- lação de anticorpos substancialmente homogêneos, isto é, os anticorpos 15 individuais compreendendo a população são idênticos, exceto para possíveis mutações que ocorrem naturalmente que podem estar presentes em quanti- dades menores. Conforme mencionado acima, os anticorpos monoclonais a serem usados de acordo com a presente invenção podem ser produzidos pelo primeiro método de hibridoma descrito por Kohler, et al., (1975) Nature 20 256:495.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo biespecífico ou bifuncional é um anticorpo artificial híbrido tendo dois pares diferentes de cadeia pesada/leve e dois locais de ligação diferentes. Os anticorpos bies- pecíficos podem ser produzidos por uma variedade de métodos, incluindo 25 fusão de hibridomas ou ligação de fragmentos de Fab'. Ver, por exemplo, Songsivilai, et al., (1990) Clin. Exp. Immunol. 79: 315-321, Kostelny, et al., (1992) J Immunol. 148:1547- 1553. Em adição, os anticorpos biespecíficos podem ser formados como "diacorpos" (Holliger, et al., (1993) PNAS USA 90:6444-6448), ou como "Janusins" (Traunecker, et al., (1991) EMBO J. 30 10:3655-3659 e Traunecker, et ai, (1992) Int. J. Cancer Suppl. 7:51-52).

Em uma concretização da invenção, o termo "anticorpo total- mente humano" se refere a um anticorpo que compreende seqüências de proteína de imunoglobulina humanas somente. Um anticorpo totalmente hu- mano pode conter não-humano, por exemplo, murina, cadeias de carboidra- to se produzidas em um camundongo, em uma célula de camundongo ou em um hibridoma derivado de uma célula de camundongo. Similarmente, 5 "anticorpo de camundongo" se refere a um anticorpo que compreende se- qüências de proteína de imunoglobulina de camundongo somente.

A presente invenção inclui "anticorpos quiméricos" um anticorpo que compreende uma região variável da presente invenção fundido ou qui- merizado com uma região de anticorpo (por exemplo, região constante) de 10 outra espécie humana ou não-humana (por exemplo, camundongo, cavalo, coelho, cão, vaca, galinha). Os anticorpos podem ser usados para modular a expressão ou atividade de IGF1R na espécie não-humana.

"Fv de cadeia simples" ou fragmentos de anticorpo de "sFv" têm os domínios Vh e Vl de um anticorpo, no qual estes domínios estão presen- 15 tes em uma cadeia de polipeptídeo simples. Geralmente, o polipeptídeo de sFv adicionalmente compreende um Iigador de polipeptídeo entre os domí- nios Vh e Vl que capacitam o sFv a formar a estrutura desejada para ligação de antígeno. Técnicas descritas para a produção de anticorpos de cadeia simples (Patentes dos Estados Unidos Nos 5.476.786; 5.132.405 e 20 4.946.778) podem ser adaptadas para produzir anticorpos de cadeia simples anti-IGF1R-específico. Para uma revisão de sFv ver Pluckthun em The Pharmacoloqy of Monoclonal Antibodies. vol. 113, Rosenburg e Moore eds. Springer-Verlag, N.Y., pp. 269-315 (1994).

Em uma concretização da invenção, "fragmentos de Fv estabili- zados por dissulfeto" e "dsFv" se referem a imunoglobulinas compreendendo uma cadeia variável pesada (Vh) e uma cadeia leve variável (Vl) que estão ligadas por uma ponte de dissulfeto.

Fragmentos de ligação de antígeno de anticorpos dentro do es- copo da presente invenção também incluem fragmentos de F(ab)2 que po- dem ser produzidos por clivagem enzimática de um IgG por, por exemplo, pepsina. Fragmentos de Fab podem ser produzidos por, por exemplo, redu- ção de F(ab)2 com ditiotreitol ou mercaptoetilamina. Um fragmento de Fab é uma cadeia de Vl-Cl anexada a uma cadeia de Vh-Chi por uma ponte de dissulfeto. Um fragmento de F(ab)2 é dois fragmentos de Fab que, por sua vez, são anexados por duas pontes de dissulfeto. A porção de Fab de uma molécula de F(ab>2 inclui uma porção da região de Fc entre a qual as pontes de dissulfeto estão localizadas.

Um fragmento de Fv é uma região de Vl ou Vh.

Dependendo das seqüências de aminoácidos do domínio cons- tante de suas cadeias pesadas, as imunoglobulinas podem ser transferidas para classes diferentes. Existem pelo menos cinco classes maiores de imu- 10 noglobulinas: IgA, IgD, IgE, IgG e IgM, e várias destas podem ser adicional- mente divididas em subclasses (isotipos), por exemplo, lgG-1, lgG-2, lgG-3 e lgG-4; lgA-1 e lgA-2. Conforme aqui discutido, qualquer tal anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste está dentro do escopo da presente invenção.

Os anticorpos anti-IGF1R e fragmentos da invenção podem

também estarem conjugados a uma porção química. A porção química pode ser, entre outras, um polímero, um radionuclídeo ou um fator citotóxico. Em uma concretização da invenção, a porção química é um polímero que au- menta a meia-vida da molécula de anticorpo no corpo de um indivíduo. Po- 20 límeros adequados incluem, mas não estão limitados a, polietileno glicol (PEG) (por exemplo, PEG com um peso molecular de 2kDa, 5 kDa, 10 kDa, 12kDa, 20 kDa, 30kDa ou 40kDa), dextran e monometoxipolietileno glicol (mPEG). Lee, et al., (1999) (Bioconj. Chem. 10:973-981) descrevem anticor- pos de cadeia simples conjugados de PEG. Wen, et al., (2001) (Bioconj. 25 Chem. 12:545-553) descrevem anticorpos de conjugação com PEG que é fixado a um quelatador radiometal (ácido dietilenotriaminpentaacático (DT- PA)).

Os anticorpos e fragmentos de anticorpo da invenção podem também serem conjugados com etiquetas tais como 99Tc190Y, 111In, 32P, 14C, 125I, 3H, 131I, 11C, 15O, 13N, 18F, 35S, 51Cr, 57To, 226Ra, 60Co, 59Fe, 57Se, 152Eu, 67CU, 217Ci, 211At, 212Pb, 47Sc, 109Pd, 234Th, e 40K, 157Gd, 55Mn, 52Tr e 56Fe.

Os anticorpos e fragmentos de anticorpo da invenção podem também serem conjugados com etiquetas fluorescentes ou quirniluminescen- tes,5 incluindo fluoróforos tais como quelatos de terra rara, fluoresceina e seus derivados, rodamina e seus derivados, isotiocianato, ficoeritrin, ficocia- nin, aloficocianin, o-ftalaldeído, fluorescamina, 152Eu, dansil, umbellferona, 5 luciferin, etiqueta luminal, etiqueta isoluminal, uma etiqueta de éster acridini- um aromático, uma etiqueta de imidazole, uma etiqueta de sal de acridimi- um, uma etiqueta de oxalato éster, uma etiqueta de aequorin, 2,3-di- hidroftalazinadionas, biotin/avidin, etiquetas de rotação e radicais livres está- veis.

Os anticorpos e fragmentos de anticorpo podem também serem

conjugados a um fator citotóxico, tais como dipteria toxin, cadeia A de Pseu- domonas aeruginosa exotoxin, cadeia A de ricin, cadeia A de abrin, cadeia A de modeccin, alfa-sarcin, proteínas de Aleurites fordii proteins e compostos (por exemplo, ácidos graxos), proteínas diantin, proteínas Phytoiacca ameri- 15 cana PAPI, PAPII, e PAP-S, inibidor de momordica charantia, curcin, crotin, inibidor de saponaria officinalis, mitogellin, restrictocin, fenomicin, e enomi- cin.

Qualquer método conhecido na técnica para conjugação das moléculas de anticorpo e fragmentos da invenção às várias porções pode 20 ser empregado, incluindo aqueles métodos descritos por Hunter, et al., (1962) Nature 144:945; David, et al., (1974) Biochemistry 13:1014; Pain, et al., (1981) J. Immunol. Meth. 40:219; e Nygren, J., (1982) Histochem. e Cy- tochem. 30:407. Métodos para conjugação de anticorpos são convencionais e muito conhecidos na técnica.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é

BMS-577098

H \—NH

HN HO'·"/

( W/ ) ou AEW-541 (

) ou

Métodos de tratamento ou prevenção de qualquer condição mé- dica aqui colocado pela administração destes agentes estão dentro do esco- po da presente invenção.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é qualquer dos derivados de pirimidina colocados em WO 03/48133, por e- xemplo, compreendendo a estrutura de núcleo:

HN K

Í4 H

N R

\Q

Métodos de tratamento ou prevenção de qualquer distúrbio mé- dico aqui colocado pela administração destes agentes estão dentro do esco- po da presente invenção.

Em uma -concretização da invenção, um inibidor de IGFTR é qualquer dos inibidores de tirosina quinase colocados em WO 03/35614, por exemplo, compreendendo a estrutura de núcleo:

H

(por exemplo, )■

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é qualquer dos inibidores de tirosina quinase colocados em WO 03/35615, por exemplo, compreendendo a estrutura de núcleo:

10

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é qualquer dos inibidores de tirosina quinase colocados em WO 03/35616, por exemplo, compreendendo a estrutura de núcleo:

B

(por

exemplo, ou

)·

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é qualquer dos inibidores de tirosina quinase colocados em WO 03/35619, por exemplo, compreendendo a estrutura de núcleo:

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é um

inibidor de quinase de multi-alvo que também inibe, por exemplo, VEGF-2R, Kit, FLT3 e/ou PDGFR, por exemplo, SU-11248 (por exemplo, sunitinib ma- lato) ou Bay43-9006 (sorafenib). Métodos de tratamento ou qualquer distúr- bio médico aqui colocado pela administração destes agentes estão dentro do escopo da presente invenção.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é qualquer dos compostos colocados em WO 03/24967, por exemplo, com- preendendo a estrutura de núcleo: Métodos de tratamento ou prevenção de qualquer distúrbio mé- dico aqui colocado pela administração destes agentes estão dentro do esco- po da presente invenção.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é qualquer dos compostos colocados em WO 04/30625, por exemplo, com- preendendo a estrutura de núcleo:

10

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é qualquer dos compostos colocados em WO 04/30627, por exemplo, com- preendendo a estrutura de núcleo:

R2 R R% t I JL .Rf* "N ÀS Métodos de tratamento ou prevenção de qualquer distúrbio mé- dico aqui colocado pela administração destes agentes estão dentro do esco- po da presente invenção.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R é qualquer dos heteroaril-aril ureias, conforme colocados em WO 00/35455, por exemplo, compreendendo a estrutura de núcleo: Métodos de tratamento ou prevenção de qualquer distúrbio mé- dico aqui colocado pela administração destes agentes estão dentro do esco- po da presente invenção.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de GF1R é qualquer dos peptídeos colocados no WO 03/27246. Métodos de tratamento ou prevenção de qualquer distúrbio médico aqui colocado pela administra- ção destes agentes estão dentro do escopo da presente invenção.

^ i^uai^uci ucnvauu Je 4-

amino-5-fenil-7-ciclobutil-pirrolo[2,3-d] pirimidina descrito na Publicação In- ternacional PCT N0 WO 02/92599. Métodos de tratamento ou prevenção de qualquer distúrbio médico aqui colocado pela administração destes agentes estão dentro do escopo da presente invenção.

Geração de Anticorpos Qualquer método adequado pode ser usado para induzir um an-

ticorpo com as propriedades biológicas desejadas para inibir IGF1R. É dese- jável preparar anticorpos monoclonais (mAbs) de vários hospedeiros mamí- feros, tais como camundongos, roedores, primatas, humanos, etc. A descri- ção de técnicas para preparação de tais anticorpos monoclonais pode ser 15 encontrada em, por exemplo, Stites, et al. (eds.) BASIC E CLINICAL IMMU- NOLOGY (4th ed.) Lange Medicai Publications, Los Altos, CA, e referências aqui citadas; Harlow e Lane (1988) ANTIBODIES: A LABORATORY MANU- AL CSH Press; Goding (1986) M0N0CL0NAL ANTIBODIES: PRINCIPLES AND PRACTICE (2d ed.) Academic Press, New York, NY. Desse modo, an- ticorpos monoclonais podem ser obtidos por uma variedade de técnicas fa- miliares aos pesquisadores técnicos no assunto. Tipicamente, células de baço de um animal imunizado com um antígeno desejado são imortalizadas, comumente por fusão com uma célula de mieloma. Ver, Kohler e Milstein (1976) Eur. J. Immunol. 6:511-519. Métodos alternativos de imortalização incluem transformação com Epstein Barr Virus, oncogenes, ou retrovírus, ou outros métodos conhecidos na técnica. Ver, por exemplo, Doyle, et ai (eds. 1994 e suplementos periódicos) CELL AND TISSUE CULTURE: LABORA- TORY PROCEDURES, John Wiley e Sons, New York, NY. As colônias de- correntes de células imortalizadas simples são classificadas para produção de anticorpos da especificidade e afinidade desejadas para o antígeno, e produção dos anticorpos monoclonais produzidos por tais células pode ser intensificada por várias técnicas, incluindo injeção na cavidade peritoneal de um hospedeiro vertebrado. Alternativamente, pode-se isolar seqüências de DNA que codificam um anticorpo monoclonal ou um fragmento de ligação por classificação de uma biblioteca de DNA de células B humanas de acordo com, por exemplo, o protocolo geral esboçado por Huse, et al. (1989) Scien- ce 246:1275-1281.

Outras técnicas adequadas envolvem seleção de bibliotecas de anticorpos em fago ou vetores similares. Ver, por exemplo, Huse et al., Sci- ence 246:1275-1281 (1989); e Ward et al., Nature 341:544-546 (1989). Os polipeptídeos e anticorpos da presente invenção podem ser usados com 25 ou sem modificação, incluindo anticorpos quiméricos ou humanizados. Fre- quentemente, os polipeptídeos serão etiquetados pela união, ou covalente- mente ou não-covalentemente, de uma substância que proporciona um sinal detectável. Uma ampla variedade de etiquetas e técnicas de conjugação são conhecidas e são reportadas extensivamente em ambas literatura científica 30 e de patente. Conforme discutido acima, etiquetas adequadas incluem ra- dionuclídeos, enzimas, substratos, co-fatores, inibidores, porções fluorescen- tes, porções quimiluminescentes, partículas magnéticas, e similares. Paten- tes ensinando o uso de tais etiquetas incluem Patentes dos Estados Unidos Nos 3.817.837; 3.850.752; 3.939.350; 3.996.345; 4.277.437; 4.275.149; e 4.366.241. Também, imunoglobulinas recombinantes podem ser produzidas, ver Cabilly Patente dos Estados Unidos N0 4.816.567; e Queen et al. (1989) 5 Proc. Nat'l Acad. Sei. USA 86:10029-10033; ou produzidas em camundon- gos transgênicos, ver Mendez et al. (1997) Nature Genetics 15:146-156. Mé- todos adicionais para produção de anticorpos quiméricos humanizados e anticorpos humanos são bem conhecidos na técnica. Ver, por exemplo, Pa- tente dos Estados Unidos N0 5.530.101, publicada para Queen et al, Patente 10 dos Estados Unidos N0 5.225.539, publicada para Winter et al, Patente dos Estados Unidos Nos 4.816.397, publicada para Boss et al, todas das quais sendo incorporadas por referência em sua totalidade.

Linhas de células de mamífero disponíveis como hospedeiros para expressão de anticorpos da invenção são bem conhecidas na técnica, e incluem muitas linhas de células imortalizadas disponíveis de American Type Culture Collection (ATCC). Estas incluem, entre outras, células de ovário de hamster chinês (CHO), NSO, células SP2, células HeLa, células de rim de hamster recém-nato (BHK), células de rim de macaco (COS), células hepa- tocelular de carcinoma humano (por exemplo, Hep G2), células A549, célu- Ias 3T3, células HEK-293, e um número de outras linhas de células. As célu- las de hospedeiro mamífero incluem células de humano, camundongo, rato, cão, macaco, porco, cabra, bovino, cavalo e hamster. As linhas de célula de preferência particular são selecionadas através da determinação de quais linhas de célula têm altos níveis de expressão. Outras linhas de células que podem ser usadas são linhas de células de inseto, tais como células Sf9, células de anfíbio, células bacteriais, células de planta e células fungais. Quando vetores de expressão recombinantes que codificam a cadeia pesa- da ou porção de ligação de antígeno desta, cadeia leve e/ou porção de liga- ção de antígeno desta, são introduzidos nas células de hospedeiro de mamí- fero, os anticorpos são produzidos pela cultura das células hospedeiras por um período de tempo suficiente para permitir expressão do anticorpo nas células hospedeiras, ou, mais preferivelmente, secreção do anticorpo no meio de cultura em que as células hospedeiras são crescidas.

Os anticorpos podem ser recuperados a partir do meio de cultura usando métodos de purificação de proteína padrão. Adicionalmente, a ex- pressão de anticorpos da invenção (ou outras porções desta) de linhas de 5 células de produção podem ser intensificadas usando-se um número de téc- nicas conhecidas. Por exemplo, o sistema de expressão de gene glutamina sintetase (o sistema GS) é uma aproximação comum para intensificar ex- pressão sob certas condições. O sistema GS é discutido no todo ou em par- te em conjunto com as Patentes Européias Nos O 216 846, O 256 055, e 0 10 323 997, e Pedido de Patente Europeu N0 89303964.4.

É, similarmente, que anticorpos expressos por linhas de células diferentes, ou em animais transgênicos, terão glicosilação diferente entre si. Contudo, todos os anticorpos codificados pelas moléculas de ácido nucleico aqui providas, ou compreendendo a seqüência de aminoácidos aqui provi- 15 das, são parte da presente invenção, indiferente da glicosilação dos anticor- pos.

Um sistema de plasmídeo conveniente útil para produção de um anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste, é colocado no pedido dos Estados Unidos publicado N0 US2005/0176099 (ver também W02005/47512).

Outros Quimioterápicos

A presente invenção proporciona métodos para tratamento ou prevenção de qualquer dos distúrbios médicos aqui colocados pela adminis- tração de uma dosagem terapeuticamente aceitável ou quantidade de um 25 anticorpo anti-IGF1R, ou fragmento de ligação de antígeno deste da inven- ção, por exemplo, conforme aqui colocado, em associação com um agente quimioterápico adicional (por exemplo, um agente quimioterápico anticâncer, e/ou um agente quimioterápico antiemético). Por exemplo, agentes quimiote- rápicos adicionais incluem erlotinib, dasatanib, nilotinib, decatanib, panitu- 30 mumab, amrubicin, oregovomab, Lep-etu ("paclitaxel preso em Iopossoma- Fácil de Usar"), nolatrexed, azd2171, batabulin, ofatumumab, zanolimumab, edotecarin, tetrandrina, rubitecan, tesmilifeno, oblimersen, ticilimumab, ipili- 10

15

mumab, gossipol, Bio 111, 131-Ι-ΤΜ-601, ALT-110, ΒΙΟ 140, CC 8490, ci- lengitide, gimatecan, IL13-PE38QQR, INO 1001, IPdR, KRX-0402, Iucanto- na, LY 317615, neuradiab, vitespan, Rta 744, Sdx 102, talampanel, atrasen- tan, Xr 311, everolimus, trabectedin, abraxane, TLK 286, AV-299, DN-101, pazopanib, GSK690693, RTA 744, ON 0910.Na, AZD 6244 (ARRY-142886), AMN-107, TKI-258, GSK461364, AZD 1152, enzastaurin, vandetanib, ARQ- 197, MK-0457, MLN8054, PHA-739358, R-763, ou AT-9263.

Abraxano é uma suspensão injetável de partículas de ligação de proteína de paclitaxel compreendendo uma forma ligada de albumina de pa- clitaxel com um tamanho de partícula médio de aproximadamente 130 na- nômetros. Abraxano é fornecido como um pó Iiofilizado branco a amarelo, estéril para reconstituição com 20 mL de Injeção de Cloreto de Sódio 0,9%, USP antes de infusão intravenosa. Cada frasco de uso simples contém 100 mg de paclitaxel e aproximadamente 900 mg de albumina humana. Cada mililitro (mL) de suspensão reconstituída contém 5 mg de paclitaxel. Abraxa- no é livre de solventes e é livre de cremóforo (óleo de rícino polioxietilatado).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com ro-

midepsin

(FK-228;

ADS-100380,

CG-781

CG-1521 SB-556629

JNJ-16241199 ) ou vorinostat (SAHA;

,OH

)■

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com eto- poside (VP-16;

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com qualquer composto descrito no pedido de patente dos Estados Unidos publi- cado N0 U.S. 2004/0209878A1 (por exemplo, compreendendo uma estrutura

de núcleo representada por

) ou doxorrubicin

‘Cm

H

(om o o ) incluindo Caelyx ou Doxil® (injeção

de Iipossoma doxorrubicin HC; Ortho Biotech Products L.P; Raritan, NJ). Do- xil® compreende doxorrubicin em transportadores de Iipossoma STEALTH® que são compostos de N-(carbonil-metoxipolietileno glicol 2000)-1,2- distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanoamina sal de sódio (MPEG-DSPE); soja fosfatidilcolina totalmente hidrogenada (HSPC), e colesterol.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com 5- deóxi-5-fluorouridina ( ).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com vin- cristina (

)·

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com te-

/

V N.

mozolomida (

) qualquer inibidor de CDK1 tais como ZK-

HN

304709, Seliciclib (R-roscovitina) de MEK, tais como PD0325901 ( p ), AZD-

6244 ; capecitabina (5'-deóxi-5-flúor-N-[(pentilóxi) carbonilj-citidina); ou ácido L-Glutâmico, N -[4-[2-(2-amino-4,7-di-hidro-4-oxo-1 H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-

5-il)etil]benzoil]-,

dissódio,

GÓ-r Na+

; Pemetrexed dissódio hepta-hidrato).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com

Stork et al., J. Am. Chem. Soc. 93(16): 4074-4075 (1971); Beisler et al., J. Med. Chem. 14(11): 1116-1117 (1962)), irinotecan (

Pharmacia & Upjohn Co.; Kalamazoo, Ml); uma combinação de irinotecan, 5- fluorouracil e leucovorin; ou irinotecan etiquetado de PEG.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com o regime FOLFOX (oxaliplatin (

O

xp,2V

‘y/ o '-.>0

H

), junto com fluorouracil

HN

de

H..N

infusão

ácido

folínico

"W-1 -

( u- un (Chaouche et al., Am. J. Clin.

Oncol. 23(3):288-289 (2000); de Gramont et al., J. Clin. Oncol. 18(16):2938- 2947 (2000)).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um

antiestrogênio tal como ^ (tamoxifen;

vendido como Nolvadex® por AstraZeneca Pharmaceuticals LP; Wilmington,

,CH3 OCH2CH2N

// \ / Í CH3

/G cN_

GH2

CH2CI

CH2COOH HO-C—COOH

I

CH2COOH

CH2CI \_/

DE), ou — (citrato de toremifeno; ven-

dido como Fareston® por Shire US, Inc.; Florence, KY).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um :Ν

inibidor de aromatase tal como

XH3 -CH3

(anastra-

zole; vendido como Arimidex® por AstraZeneca Pharmaceutieals LP; Wil-

CH3o

mington, DE),

Aromasin® por Pharmacia

(exemestano; vendido como Corporation; Kalamazoo, Ml), ou

(letrozole; vendido como Femara por Novartis Pharmaceuticals Corporation; East Hanover, NJ).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um estrogênio tal como DES(dietilstilbestrol),

Warner Chilcott, Inc.; Rockaway, NJ), ou estrogênios conjugados (vendidos 10

como Premarin® por Wyeth Pharmaceuticals Inc.; Philadelphia1 PA).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com a- gentes antiangiogênese incluindo bevacizumab (Avastin®; Genentech; San Francisco, CA), o anticorpo anti-VEGFR-2 IMC-1C11, outros inibidores de

VEGFR tal como: CHIR-258 ( ), qual-

quer dos inibidores colocados em W02004/13145 (por exemplo, compreen-

dendo a fórmula estrutural de núcleo: *' ),

W02004/09542 (por exemplo, compreendendo a fórmula estrutural de nú-

2 / -I *N

R X~^ Ju A ,

R1

cleo: ), WOOO/71129 (por exemplo, compreendendo

fórmula estrutural de núcleo: R ), W02004/09601

(por exemplo, compreendendo a fórmula estrutural de nú-

R2X-

cleo:

), W02004/01059 (por exemplo, compreen- dendo a fórmula estrutural de núcleo: B w )

W001/29025 (por exemplo, compreendendo a fórmula estrutural de nú-

Rf

10

cleo:

Z 'W á3

), W002/32861 (por exemplo, compreendendo a fórmu-

la estrutural de núcleo:

z h

A

) ou, conforme colocado

em W003/88900 (por exemplo, compreendendo a fórmula estrutural de nú-

M Qt N > HH

cleo (

); 3-[5-(metilsulfonilpiperadinametil)-

HN'

; PTK/ZK; CPG-79787;

); e a armadilha de VEGF (AVE-0005), um receptor de decoi solúvel compreendendo porções de receptores de VEGF 1 e 2.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um agonístico de LHRH (Hormônio de liberação de hormônio de Lutenização), tal como o sal de acetato de [D-Ser(Bu t) 6, Azgly 10] (piro-Glu-His-Trp-Ser- Tyr-D-Ser(Bu t)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2 acetato [CsgH84Ni8Oi4-(C2H4O2)x,

tato; vendido como Zoladex® por AstraZeneca UK Limited; Macclesfield, En-

vendido como Eligard® por Sanofi-Synthelabo Inc.; New York, NY) ou

" (triptorelin pamoato; vendido co-

mo Trelstar® por Pharmacia Company, Kalamazoo, Ml).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com su- nitinib ou sunitinib malato

onde x = 1 a 2,4];

(goserelin ace-

(leuprolide acetato; o.

ΓΛ F.

5

(medro-

xiprogesterona acetato; vendido como Provera® por Pharmacia & Upjohn

Co.; Kalamazoo1 Ml), v (hidroxipro-

gesterona caproato; 17-((1-Oxohexil)oxi)pregn-4-eno-3,2()-diona), megestrol acetato ou progestins.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de li- gação de antígeno deste da invenção é provido em associação com modu-

OH

(raloxifeno; vendido como Evista por Eli Lilly e Company; Indianapolis, IN).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um antiandrógeno incluindo, mas não limitado a: (bicalutamida; vendida como CA- SODEX® por AstraZeneca Pharmaceuticals LP; Wilmington, DE);

(flutamida; 2-metil-N-[4-nitro-3 (trifluorometil) fenil] propanamida; vendida como Eulexin® por Schering Corporation; Kenil-

worth, NJ); (nilutamida; vendida como

Nilandron® por Aventis Pharmaceuticals Inc.; Kansas City, MO) e

(Megestrol acetato; vendido como Megace® por Bristol-Myers Squibb).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um ou mais inibidores que antagonizam a ação do Receptor de EGF ou HER2, incluindo, mas não limitado a, CP-724714 TAK-165

272 (

); HKI-

); OSI-774 ("° ^Xi

erlotinib, Hidalgo et al., J. Clin. Oncol. 19(13): 3267-3279 (2001)), Lapatanib

HLC M

( ° . GVV2016; Rusnak et al., Molecu-

lar Cancer Therapeutics 1:85-94 (2001); N-{3-Cloro-4-[(3- fluorobenzil)óxi]fenil}-6-[5-({[2-(metilsulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4- quinazolinamina; Pedido PCT N0 W099/35146), Canertinib (CI-1033;

; Erliehman et al., Caneer Res. 61(2):739- 48 (2001); Smaill et al., J. Med. Chem. 43(7): 1380-97 (2000)), Anticorpo ABX-EGF (Abgenix, Inc.; Freemont, CA; Yang et al., Cancer Res. 59(6):1236-43 (1999); Yang et al., Crit Rev Oncol Hematol. 38(1): 17-23

(2001)), erbitux (Patente dos Estados Unidos N0 6.217.866; IMC-C225, cetu- ximab; Imclone; New York, NY), EKB-569 (

Wissner et al., J. Med. Chem. 46(1): 49-63 (2003)), PKI-166

( à ;CGP-75166), GW-572016, qualquer an-

ticorpo anti-EGFR e qualquer anticorpo anti-HER2.

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com:

(lonafarnib; Sarasar ; Schering- Plough; Kenilworth, NJ). Em outra concretização, um dos seguintes inibido- res de FPT é provido em associação com um anticorpo ou fragmento de li- gação de antígeno deste da invenção:

; ou Outros inibidores de FPT, que podem ser providos em associa- ção com um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da inven-

CN

43(20):3587-95 (2000); Dancey et al., Curr. Pharm. Des. 8:2259-2267 (2002); (R)-7-ciano-2,3,4,5-tetrahidro-1 -(1 H-imidazol-4-ilmetil)-3-(fenilmetil)- 4-(2-tienilsulfonil)-1 H-1,4-benzodiazepina)) e R155777 (tipifarnib; Garner et al., Drug Metab. Dispos. 30(7):823-30 (2002); Dancey et al., Curr. Pharm. Des. 8:2259-2267 (2002); (B)-6-[amino(4-clorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)- metil]-4-(3-clorofenil-1 )-1 -metil-2(1 H)-quinolinona];

vendida como Zarnestra®; Johnson & Johnson; New Brunswick, NJ).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento

ção, inclui BMS-214662

Chem.

Cl

N de ligaçao de antígeno deste da invenção é provido em associação com

OH O-

O L

H2N

'N'

H

>r

HO

,Kk

(Amifostina); m

(NVP-LAQ824; Atadja et al., Cancer Research 64: 689-695 (2004)),

(suberoil analida ácido hidroxâmico),

(Acido valpróico; Michaelis et al., Mol. Pharmacol. o o

.OH

65:520-527 (2004)),

H

(trichostatin

A),

(2002)),

(FK-228; Furumai et al., Cancer Research 62: 4916-4921

\

βτ J

- C . Ir0

N

H

(SU11248; Mendel et al., Clin. Cancer

Res. 9(1):327-37 (2003)), 9006; sorafenib),

(BAY43- (KRN951$? OvJ-^o

CHo

CH,

I 3

0

(Aminoglutetimida);

HN

Il

ν. O

(Amsacrina);

dex por AstraZeneea Pharmaceutieals LP; Wilmington1 DE); Asparaginase; vacina de Bacillus Calmette-Guerin (BCG) (Garrido et al., Cytobios.

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* = CH. HO- CHa τ* 8

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90(360):47-65 (1997));

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t.M Il T

(Bleomy-

IlK ^Mla

cin);

(Buserelin); HsC—Ο

(Busulfan; 1,4-butanodiol, dimetanossulfo- nato; vendido como Busulfex® por ESP Pharma, Inc.; Edison, New Jersey);

<

H3N O—k

(Carboplatin; vendido como Paraplatin® por Bristol-

Cl'

N"°

N. J.

Cl

Myers Squibb; Princeton, NJ); HO.

(Carmustina);

(Chlorambucil);

NH,

I 2

H7N-Pt-CI

I

Cl

(Cisplatin);

-tV'0

I xN ,NH

Xl

(Cladribina);

OH,

Cl

(Ciclofosfamida); (Ciproterona); HO OH

(Citarabina);

ιπ,

carbazina);

(Da-

(Dactinomicin);

(Daunorrubicin);

CH,

Η0Λ\

OH

Η,

(Dietilstilbestrol); OH

(Fludrocortisona);

(Fluoximesterona);

H_N N 2 H

(Hidroxiureia);

Xl

(Idarrubicin);

Cl

(Ifosfami- CH3SO3H

de);

Pharmaceuticals

H..N. .N

(Imatinib; vendido como Gleevec por Novartis Corporation; East Hanover, NJ);

(Leucovorin);

Oji κ.

V

His TrpSer TyrLeuLeuArg

.CH„

O

Il

N

H I ,N~ Jl.

(Leuprolida);

/CO

Xl

(Levamisole);

(Lomustina);

CH,

Cl

(CKX2CH8JiN-(Cy)-

(MecIoretamina);

NH2

I

CH2---C-*-COOH

η (Melpha-

lan; vendido como Alkeran® por Celgene Corporation; Warren1 NJ); HS.

Na

O

/

+0”

(Mesna);

(Metotrexato); (Mitomicin);

Ck .Cl

Cl

(Mitotano;

(Mitoxantrona;

OH

(Nilutamida;

octreotide

; Katz et al., Clin Pharm. 8(4):255- 73 (1989); vendido como LAR® Depot; por Novartis Pharm. Corp; E. Hanover, NJ); edotreotide (ítrio-90 etiquetado ou não-etiquetado); oxaliplatin (

Õ

Pt

/

.0—0

N

O-C

I

O ; vendido como Eloxatin® por Sa- PO3HNa

NH2-CHa-CH2-C-OH . 5Η20

nofi-Synthelabo Inc.; New York, NY); PO3HNa (Pami-

dronato; vendido como Aredia® por Novartis Pharmaceuticals Corporation;

HOCH2

Eãst Hanover, NJ); mo Nipent®

por

(Pentostatin; vendido co- Supergen; Dublin, CA);

(Plicamicin);

(Porfimer; vendido como Photofrin® por Axcan Scandipharm Inc.; Birmingham, AL);

CHo

A

H3Cn

CH,

(Procarbazina); HO ^ .0

HO

s Cfca-

(Raltitrexed); Rituximab (vendido

como Rituxan por Genentech1 Inc.; South San Francisco, CA);

OH

CH2OH

HO

OH

HO HN^

Ύ

N = O

XH,

(Teniposide);

o

(Streptozocin);

(Testosterona);

HN

-N

>

N

Hzn N' u

(Talidomida); (Tioguanina);

H,C CH:

N

(Tiotepa);

(Tretinoin);

(Vindesina) ou ácido 13-cis- Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um ou mais de qualquer de: fenilalanina mostarda, uracil mostarda, estramusti- na, altretamina, floxuridina, 5-deooxiuridina, citosina arabinoside, 6-mecapto- 5 purina, deoxicoformicin, calcitriol, valrubicin, mithramicin, vinblastina, vinorel- bina, topotecan, razoxin, marimastat, COL-3, neovastat, BMS-275291, es- qualamina, endostatin, SU5416, SU6668, EMD121974, interleukin-12, IM862, angiostatin, vitaxin, droloxifeno, idoxifeno, espironolactona, finasteri- da, cimitidina, trastuzumab, denileukin, diftitox, gefitinib, bortezimib, paclita- 10 xel, docetaxel, epitilona B, BMS-247550 (ver, por exemplo, Lee et al., Clin. Cancer Res. 7:1429-1437 (2001)), BMS-310705, droloxifeno (3- hidroxitamoxifen), 4-hidroxitamoxifen, pipendoxifeno, ERA-923, arzoxifeno, fulvestrant, acolbifeno, Iasofoxifeno (CP-336156), idoxifeno, TSE-424, HMR- 3339, ZK186619, topotecan, PTK787/ZK 222584 (Thomas et al., Semin On- 15 col. 30(3 Suppl 6):32-8 (2003)), o anticorpo humanizado anti-VEGF Bevaci- zumab, VX-745 (Haddad, Curr Opin. Investig. Drugs 2(8):1070-6 (2001)), PD 184352 (Sebolt-Leopold, et al. Nature Med. 5: 810-816 (1999)), qualquer ini- hidroxietil)-rapamicin, CCI-779 ( ; temsirolimus;

Sehgal et al., Med. Res. Rev., 14:1-22 (1994); Elit, Curr. Opin. Investig.

RAD001

(

);

BC-210 LY293646 (VIahos et al., J. Biol. Chem. 269(7): 5241-5248 (1994)), wort- mannin, BAY-43-9006, (Wilhelm et al., Curr. Pharm. Des. 8:2255-2257

(2002)), ZM336372, L-779,450, qualquer inibidor de Raf descrito em Lowin- ger et al., Curr. Pharm Des. 8:2269-2278 (2002); flavopiridol (L86-8275/HMR 1275; Senderowicz, Oncogene 19(56): 6600-6606 (2000)) ou UCN-01 (7- hidróxi staurosporina; Senderowicz, Oncogene 19(56): 6600-6606 (2000)).

Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um ou mais de qualquer dos compostos colocados na Patente dos Estados Uni- dos 5.656.655, que descreve inibidores de stiril substituído heteroaril EGFR; na Patente dos Estados Unidos 5.646.153, que descreve inibidores de bis mono e/ou bicíclico aril heteroaril carbocíclico e heterocarbocíclico EGFR e PDGFR; na Patente dos Estados Unidos 5.679.683, que descreve compos- tos de pirimidina tricíclicas que inibem a EGFR; na Patente dos Estados Uni- dos 5.616.582, que descreve derivados de quinazolina que têm atividade inibitória de tirosina quinase de receptor; em Fry et al., Science 265 1093- 1095 (1994), que descreve um composto tendo uma estrutura que inibe EG- FR (ver Figura 1 de Fry et al.)\ na Patente dos Estados Unidos 5.196.446, que descreve compostos de heteroariletenodiil ou heteroariletenodiilaril que inibem EGFR; em Panek, et al., Journal of Pharmacology e Experimental Therapeutics 283: 1433-1444 (1997), que descrevem um composto identifi- cado como PD166285 que inibe as famílias EGFR, PDGFR, e FGFR de re- ceptores-PD166285 é identificada como 6-(2,6-diclorofenil)-2-(4-(2- dietilaminoetóxi)fenilarnino)-8-metil-8H-pirido(2,3- d)pirimidin-7-ona. Em uma concretização da invenção, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção é provido em associação com um ou mais de qualquer de: interferon alfa-2a pegilatado ou não-pegilatado, in- terferon alfa-2c pegilatado ou não-pegilatado, interferon alfa n-1 pegilatado 5 ou não-pegilatado, interferon alfa n-3 pegilatado ou não-pegilatado, e interfe- ron de consenso pegilatado, não-pegilatado ou de albumina-alfa-interferon.

O termo "interferon alfa", conforme aqui usado, significa a família de proteínas de espécie específica altamente homóloga que inibe prolifera- ção celular e modula resposta imune. Interferon-alfas típicos adequados in- 10 cluem, mas não estão limitados a, interferon alfa-2b recombinante, interferon alfa-2a recombinante, interferon alfa-2c recombinante, alfa 2 interferon, inter- feron alfa-n1 (INS), uma mistura purificada de alfa interferons naturais, um alfa interferon de consenso, tais como aqueles descritos nas Patentes dos Estados Unidos Nos 4. 897.471 e 4.695.623 (especialmente Exemplos 7, 8 15 ou 9 destas), ou interferon alfa-n3, uma mistura de alfa interferons naturais.

Interferon afa-2a é vendido como ROFERON-A® por Hoffmann- La Roche (Nutley, N.J).

Interferon alfa-2b é vendido como INTRON-A® por Schering Cor- poration (Kenilworth, NJ). A manufatura de interferon alfa 2b é descrita, por exemplo, na Patente dos Estados Unidos N0 4.530.901.

Interferon alfa-n3 é uma mistura de interferons naturais vendidos como ALFERON N INJECTION® por Hemispherx Biopharma, Inc. (Philadel- phia, PA).

Interferon alfa-n1 (INS) é uma mistura de interferons naturais vendidos como WELLFERON® por Glaxo-Smith-Kline (Research Triangle Park, NC).

Interferon de consenso é vendido como INFERGEN® por Inter- mune, Inc. (Brisbane, CA).

Interferon alfa-2c é vendido como BEROFOR® por Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc. (Ridgefield, CT).

Uma mistura purificada de interferons naturais é vendida como SUMIFERON® por Sumitomo; Tokyo, Japan. O termo "interferon alfa pegilatado", conforme aqui usado, signi- fica conjugados modificados de polietileno glicol de interferon alfa, preferi- velmente interferon alfa-2a e alfa-2b. O conjugado polietileno-glicol-interferon alfa-2b preferido é PEG 12000-interferon alfa-2b. As frases "interferon alfa 5 conjugado a polietileno glicol de peso molecular de 12.000", e "PEG 12000- IFN alfa", conforme aqui usadas, incluem conjugados, tais como são prepa- rados de acordo com os métodos do Pedido Internacional N0 WO 95/13090 e EP1039922, e contendo ligações de uretano entre os grupos amino de in- terferon alfa-2a ou -2b e polietileno glicol tendo um peso molecular médio de 10 12000. O inteferon alfa pegilatado, PEG 12000-1 FN-alfa-2b, é disponível de Schering-Plough Research Institute, Kenilworth, N.J.

O PEG 12000-interferon alfa-2b preferido pode ser preparado pela fixação de um polímero de PEG ao resíduo de histidina na molécula de interferon alfa-2b. Uma molécula de PEG 12000 simples pode ser conjugada 15 a grupos amino livres em uma molécula de IFN alfa-2b, via uma ligação de uretano. Este conjugado é caracterizado pelo peso molecular de PEG 12000 fixado. O conjugado de PEG 12000-IFN alfa-2b pode ser formulado como um pó Iiofilizado para injeção.

Interferon alfa-2b pegilatado é vendido como PEG-INTRON® por Schering Corporation (Kenilworth, NJ).

lnterferon-alfa-2a pegilatado é vendido como PEGASYS® por Hoffmann-La Roche (Nutley, N.J).

Outros conjugados de interferon alfa podem ser preparados por acoplamento de um interferon alfa a um polímero solúvel em água. Uma lista 25 não-limitativa de tais polímeros inclui outros homopolímeros de óxido de po- lialquileno, tais como, polipropileno glicóis, polióis polioxietilenatados, copo- límeros destes e copolímeros de bloco destes. Como uma alternativa a polí- meros baseados em óxido de polialquileno, materiais efetivamente não- antigênicos, tais como dextran, polivinilpirrolidonas, poliacrilamidas, polivinil 30 álcoois, polímeros baseados em carboidrato, e similares, podem ser usados. Tais conjugados de interferon alfa-polímero são descritos, por exemplo, na Patente dos Estados Unidos N0 4.766.106, Patente dos Estados Unidos N0 4.917. 888, Pedido de Patente Europeu N0 0 236 987, ou 0 593 868, ou Pu- blicação Internacional N0 WO 95/13090. O PEG12000-IFN alfa 2b preferido pode ser preparado por fixação em um polímero de PEG a um resíduo de histidina na molécula de interferon alfa-2b.

Composições farmacêuticas de interferon alfa pegilatado ade-

quadas para administração parenteral podem ser formuladas com um tam- pão adequado, por exemplo, Tris-HCI, acetato ou fosfato, tal como tampão de sódio dibásico fosfato/sódio monobásico fosfato, e excipientes farmaceu- ticamente aceitáveis (por exemplo, sucrose), transportadores (por exemplo, albumina de plasma humano), agentes de toxicidade (por exemplo, NaCI), conservantes (por exemplo, timerosol, cresol ou benzil álcool), e surfactantes (por exemplo, tween ou polisorbatos) em água estéril para injeção. O interfe- ron alfa pegilatado pode ser armazenado como pó Iiofilizado sob refrigeração a 2°-8°C. As soluções aquosas reconstituídas são estáveis quando armaze- nadas entre 2o e 8°C, e usadas dentro de 24 horas de reconstituição. Ver, por exemplo, Patentes dos Estados Unidos Nos 4.492.537; 5.762.923 e 5.766.582. As soluções aquosas reconstituídas podem também serem ar- mazenadas em seringas de multidose pré-enchidas, conforme aquelas úteis para distribuição de fármacos tais como insulina. Seringas adequadas típicas incluem sistemas compreendendo um frasco pré-enchido fixado a uma se- ringa tipo caneta, tal como a NOVOLET® Novo Pen, disponível de Novo Nordisk, ou o REDIPEN®, disponível de Schering Corporation, Kenilworth, NJ. Outros sistemas de seringa incluem uma seringa tipo caneta compreen- dendo um cartucho de vidro contendo um diluente e pó de interferon alfa pegilatado iiofilizado em um compartimento separado.

O escopo da presente invenção também inclui métodos de tra- tamento ou prevenção de uma condição médica ou doença, conforme colo- cado aqui, pela administração de uma composição compreendendo um anti- corpo anti-IGF1R ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção 30 em associação com um ou mais outros agente quimioterápicos anticâncer (por exemplo, conforme aqui descrito), e/ou em associação com um ou mais antieméticos, incluindo, mas não limitado a, casopitant (GIaxoSmithKIine), Netupitant (MGI-HeIsinn) e outros antagonistas de receptor de NK-1, palono- setron (vendidos como Aloxi por MGI Pharma), aprepitant (vendido como Emend por Merck e Co.; Rahway, NJ), difenhidramina (vendida como Bena- dryl® por Pfizer; New York, NY), hidroxizina (vendida as Atarax® by Pfizer;

5 New York, NY), metoclopramida (vendida como Reglan® por AH Robins Co,; Richmond, VA), Iorazepam (vendido como Ativan® por Wyeth; Madison, NJ), alprazolam (vendido como Xanax® por Pfizer; New York, NY), haloperidol (vendido como Haldol® por Ortho-McNeiI; Raritan, NJ), droperidol (Inapsi- ne®), dronabinol (vendido como Marinol® por Solvay Pharmaceuticals, Inc.; 10 Marietta, GA), dexametasona (vendida como Decadron® por Merck e Co.; Rahway, NJ), metilprednisolona (vendida como Medrol® por Pfizer; New York, NY), proclorperazina (vendida como Compazine® por Glaxosmithkline; Research Triangle Park, NC), granisetron (vendido como Kytril® por Hoff- mann-La Roche Inc.; Nutley, NJ), ondansetron (vendido como Zofran® por 15 Glaxosmithkline; Research Triangle Park, NC), dolasetron (vendido como Anzemet® por Sanofi-Aventis; New York, NY), tropisetron (vendido como Na- voban® por Novartis; East Hanover, NJ).

Composições compreendendo um antiemético são úteis para prevenção ou tratamento de náusea; um efeito colateral comum de quimiote- 20 rapia anticâncer. Consequentemente, a presente invenção inclui métodos para tratamento ou prevenção de câncer em um indivíduo pela administra- ção de um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste da invenção opcionalmente em associação com um ou mais outros agentes quimioterápi- cos (por exemplo, conforme aqui descrito), e/ou opcionalmente em associa- 25 ção com um ou mais antieméticos.

Outros efeitos colaterais de tratamento de câncer incluem defici- ência de célula vermelha e branca. Consequentemente, a presente invenção inclui composições compreendendo um anticorpo anti-IGF1R ou fragmento de ligação de antígeno deste opcionalmente em associação com um agente 30 que trata ou previne tal deficiência, tais como, por exemplo, pegfilgrastim, eritropoietin, epoetin alfa, ou darbepoetin alfa.

Outro efeito colateral de terapia anticâncer é mucosite. Conse- quentemente, a presente invenção proporciona métodos e composições pa- ra tratamento ou prevenção de uma condição médica ou doença conforme colocado aqui pela administração de um anticorpo anti-IGF1R ou fragmento de ligação de antígeno deste em associação com um tratamento anti- 5 mucosite. Por exemplo, tratamentos de mucosite incluem gargarejo de gel anestésico viscoso Xylocaine® (lidocaína) 2%; ou lavagens bucais incluindo allopurinol, benzidamina hidrocloreto, corticosteroides e/ou camomila.

A presente invenção compreende adicionalmente um método para tratamento ou prevenção de qualquer estágio ou tipo de qualquer con- 10 dição médica aqui colocada pela administração de um anticorpo ou fragmen- to de ligação de antígeno deste da invenção em associação com um proce- dimento terapêutico tal como tumorectomia cirúrgica ou tratamento de radia- ção anticâncer; opcionalmente em associação com um agente quimioterápi- co adicional e/ou antiemético, por exemplo, conforme colocado acima.

O termo "em associação com" indica que os componentes de

uma composição da invenção (por exemplo, anticorpo anti-IGF1R ou frag- mento de ligação de antígeno deste, junto com docetaxel), podem ser formu- lados em uma composição simples para distribuição simultânea, ou formula- dos separadamente em duas ou mais composições (por exemplo, um kit). 20 Além disso, cada componente pode ser administrado a um indivíduo em um tempo diferente do que quando o outro componente é administrado; por e- xemplo, cada administração pode ser dada não-simultaneamente (por e- xemplo, separadamente ou seqüencialmente) em vários intervalos sobre um dado período de tempo. Além disso, os componentes separados podem ser 25 administrados a um indivíduo pela mesma ou por rota diferente (por exem- plo, no qual um anticorpo anti-IGF1R é administrado parenteralmente, e gefi- tinib é administrado oralmente).

Métodos Terapêuticos e Administração

A presente invenção inclui métodos para uso de um inibidor de IGF1R, que está opcionalmente em associação com um agente quimioterá- pico adicional, ou uma formulação farmacêutica deste, para tratamento ou prevenção de qualquer de câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de célula escamosa, mieloma múltiplo, plasmacitoma solitário, câncer de célula renal, retinoblastoma, tumores de célula de germe, hepatoblastoma, carcinoma hepatocelular, melanoma, tumor rabidoide do rim, Sarcoma de Ewing, con- drossarcoma, qualquer malignidade hemotológica (por exemplo, leucemia 5 linfoblástica crônica, leucemia mielomonocítica crônica, leucemia linfoblásti- ca aguda (por exemplo, linhagem de célula-T, linhagem de precursor de cé- lula-B), leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia mie- loblástica aguda, leucemia mieloblástica crônica, doença de Hodgekin, Iin- foma de não-Hodgekin, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielógena 10 crônica, síndrome mielodisplástica, leucemia de célula capilar, leucemia de célula de mastro, neoplasma de célula de mastro, Iinfoma folicular, Iinfoma de célula grande difusa, Iinfoma de célula de revestimento, Linfoma de Bur- kitt, fungoides de micose, síndrome "seary", Iinfoma de célula-T cutânea, distúrbios mieloproliferativos crônicos), e tumores do sistema nervoso central 15 (por exemplo, câncer do cérebro, glioblastoma, não-glioblastoma de câncer do cérebro, meningioma, adenoma pituitário, schwanoma vestibular, um tu- mor neuroctodermal primitivo, meduloblastoma, astrocitoma, astrocitoma anaplástico, oligodendroglioma, ependimoma e papiloma de plexo coroide), distúrbio mieloproliferativos (por exemplo, policitemia vera, trombocitemia, 20 mielfibrose idiopática), sarcoma de tecido macio, câncer da tireoide, câncer endometrial, câncer carcinoide, tumores de célula de germe, câncer do fíga- do, câncer gástrico, gigantismo, adenoma pituitário, psoríase e tumor rabi- doide do rim.

Composições farmacêuticas compreendendo um inibidor de 25 IGF1R em associação com um agente quimioterápico adicional (por exem- plo, conforme colocado acima), e um transportador farmaceuticamente acei- tável estão também dentro do escopo da presente invenção (por exemplo, em uma composição simples ou separadamente em um kit). As composi- ções farmacêuticas podem ser preparadas por quaisquer métodos bem co- 30 nhecidos na técnica de farmácia; ver, por exemplo, Gilman, et al., (eds.) (1990), The Pharmacoloqical Bases of Therapeutics. 8th Ed., Pergamon Press; A. Gennaro (ed.), Reminaton’s Pharmaceutical Sciences. 18th Editi- on, (1990), Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania.; Avis, et al., (eds.) (1993) Pharmaceutieal Dosaqe Forms: Parenteral Medieations Dekker. New York; Lieberman, et al., (eds.) (1990) Pharmaeeutieal Dosaae Forms: Tablets Dekker, New York; e Lieberman, et al., (eds.) (1990), Pharmaeeutieal Dosa- 5 qe Forms: Disperse Systems Dekker, New York. Em uma concretização da invenção, o anticorpo é administrado a um indivíduo como parte de uma composição farmacêutica compreendendo um anticorpo, tal como LCF/HCA (por exemplo, 1, 5, 10, 15, 20 ou 25 mg/ml), acetato de sódio tri-hidrato (por exemplo, 1,8, 2,3 ou 3,1 mg/ml), ácido acético glacial (por exemplo, 0,5, 0,18 10 ou 2,2 mg/ml); sucrose (por exemplo, 50 ou 70 mg/ml); e água a um pH de cerca de 5,5.

O termo "câncer de cabeça e pescoço" e similares inclui qual- quer câncer que ocorre na área da cabeça e pescoço do corpo, incluindo a cavidade oral, faringe, cavidades paranasais; cavidade nasal, laringe, e 15 glândulas salivares (por exemplo, glândulas parótidas, submandibular, sub- lingual). Um tipo comum de câncer de cabeça e pescoço é carcinoma de célula escamosa que ocorre na área da cabeça e pescoço. Outros tipos de cânceres de cabeça e pescoço incluem tumores de glândula salivar, mela- nomas, Iinfomas e sarcomas.

O termo "carcinoma de célula escamosa" (SCC) e similares in-

clui qualquer câncer envolvendo as células escamosas da pele. O termo in- clui qualquer subtipo de carcinoma de célula escamosa incluindo, por exem- plo, queratoacantoma, carcinoma cuniculatum, SCC invasivo, SCC in situ, ou SCC metastático.

O termo "mieloma múltiplo" e "plasmacitoma solitário" e similares

inclui câncer de célula de plasma. O plasmacitoma solitário é mieloma em um local único no corpo. O termo "mieloma múltiplo" inclui concretizações nas quais, por exemplo, células de mieloma ocorrem em locais múltiplos no corpo (por exemplo, locais de tutano de osso). O termo inclui qualquer subti- 30 po de mieloma múltiplo incluindo, por exemplo, mieloma de cadeia leve, mie- loma sem secreção.

O termo "carcinoma de célula renal" e similares é também de- nominado câncer do rim, ou adenocarcinoma renal, e inclui concretizações nas quais células de câncer são encontradas em quaisquer tecidos do rim. O termo inclui, por exemplo, qualquer subtipo de carcinoma de célula renal in- cluindo, por exemplo, carcinomas de célula limpos (misturados com células 5 granulares ou não), cânceres cromofílicos, tumores rabidoides do rim, cân- ceres cromofóbicos, cânceres oncocíticos, cânceres de duto de coleta, car- cinomas de célula transicionais e tumores sarcomatoides.

O termo "indivíduo" ou "paciente" inclui qualquer organismo, pre- ferivelmente um mamífero (por exemplo, primata, cão, cavalo, rato, camun- 10 dongo, gato, coelho) e, mais preferivelmente, um ser humano. Em uma con- cretização da invenção, um "indivíduo" ou "paciente" é um ser humano adul- to (por exemplo, 18 anos ou mais velho), ou um ser humano criança (por exemplo, abaixo de 18 anos de idade, por exemplo, menos do que 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7,8, 9 ou 10 anos de idade).

Uma composição farmacêutica contendo um inibidor de IGF1R,

que está opcionalmente em associação com um agente quimioterápico adi- cional, pode ser preparada usando-se excipientes e aditivos farmaceutica- mente aceitáveis e técnicas convencionais. Tais excipientes e aditivos far- maceuticamente aceitáveis incluem cargas compatíveis não-tóxicas, Iigan- 20 tes, desintegrantes, tampões, conservantes, anti-oxidantes, lubrificantes, aromatizantes, espessadores, agentes de coloração, emulsificantes e simila- res. Todas as rotas de administração são contempladas incluindo, mas não limitadas a, administração parenteral (por exemplo, subcutânea, intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, tópica, intraperitoneal, por inalação, intracrani- 25 al) e administração não-parenteral (por exemplo, oral, transdermal, intrana- sal, intraocular, sublingual, retal e tópica).

Injetáveis podem ser preparados em formas convencionais, ou como soluções líquidas ou suspensões, formas sólidas adequadas para so- lução ou suspensão no líquido antes da injeção, ou como emulsões. Os inje- 30 táveis, soluções e emulsões podem também conter um ou mais excipientes. Excipientes incluem, por exemplo, água, salina, dextrose, glicerol ou etanol. Em adição, se desejado, as composições farmacêuticas a serem administra- das podem também conterem quantidades menores de substâncias auxilia- res não-tóxicas, tais como agentes de umedecimento ou de emulsificação, agentes de tamponamento de pH, estabilizadores, intensificadores de solubi- lidade, e outros tais agentes, tais como, por exemplo, acetato de sódio, sor- bitan monolaurato, trietanolamina oleato e ciclodextrins.

Em uma concretização da invenção, transportadores farmaceuti- camente aceitáveis usados em preparações parenterais incluem veículos aquosos, veículos não-aquosos, agentes antimicrobiais, agentes isotônicos, tampões, anti-oxidantes, anestésicos locais, agentes de suspensão e de dis- 10 persão, agentes de emulsificação, agentes sequestrantes e de quelatação, e outras substâncias farmaceuticamente aceitáveis.

Exemplos de veículos aquosos incluem Injeção de Cloreto de Sódio, Injeção de Ringers, Injeção de Dextrose Isotônica, Injeção de Água Estéril, Injeção de Dextrose e Ringers Lactatada. Veículos parenterais não- aquosos incluem óleos fixos de origem vegetal, óleo de semente de algodão, óleo de milho, óleo de gergelim e óleo de amendoim. Agentes antimicrobiais em concentrações bacteriostáticas ou fungistáticas devem ser adicionados às preparações parenterais acondicionadas em recipientes de dose múltipla que incluem fenóis ou cresóis, mercuriais, álcool de benzila, clorobutanol, metil e propil p-ácido hidroxibenzóico ésteres, timerosal, cloreto de benzal- kômio e cloreto de benzetônio. Agentes isotônicos incluem cloreto de sódio e dextrose. Tampões incluem fosfato e citrato. Antioxidantes incluem bisulfato de sódio. Anestésicos locais incluem procaína hidrocloreto. Agentes de sus- pensão e de dispersão incluem sódio carboximetilceluose, hidroxipropil me- tilcelulose e polivinilpirrolidona. Agentes de emulsificação incluem Polisorba- to 80 (TWEEN- 80). Um agente sequestrante ou de quelatação de íons de metal incluem EDTA. Os transportadores farmacêuticos também incluem etil álcool, polietileno glicol e propileno glicol para veículos miscíveis em água; e hidróxido de sódio, ácido hidroclórico, ácido cítrico ou ácido láctico para ajus- te de pH.

Em uma concretização da invenção, preparações para adminis- tração parenteral podem incluir soluções estéreis prontas para injeção, pro- dutos solúveis secos estéreis, tais como pós-liofilizados, prontos para serem combinados com um solvente imediatamente antes de uso, incluindo com- primidos hipodérmicos, suspensões estéreis prontas para injeção, produtos insolúveis secos estéreis prontos para serem combinados com um veículo 5 imediatamente antes de uso, e emulsões estéreis. As soluções podem ser ou aquosas ou não-aquosas.

Implantação de um sistema de liberação vágarosa e de liberação sustentada, tal que um nível constante de dosagem é mantido é também contemplada aqui. Brevemente, um agente ativo (por exemplo, inibidor de 10 IGF1R, que está opcionalmente em associação com um agente quimioterá- pico adicional) é disperso em uma matriz interna sólida, por exemplo, poli- metilmetacrilato, polibutilmetacrilato, polivinilcloreto plastificado ou não- plastificado, náilon plastificado, polietilenotereftalato plastificado, borracha natural, poli-isopreno, poli-isobutileno, polibutadieno, polietileno, copolímeros 15 de etileno-vinilacetato, borrachas de silicone, polidimetilsiloxanos, copolíme- ros de carbonato de silicone, polímeros hidrofílicos, tais como hidrogéis de ésteres de ácido acrílico e metacrílico, colágeno, polivinilálcool reticulado e acetato de polivinil parcialmente reticulado hidrolisado, que é circundado por uma membrana polimérica externa, por exemplo, polietileno, polipropileno, 20 copolímeros de etileno/propileno, copolímeros de etileno/etil acrilato, copolí- meros de etileno/vinilacetato, borrachas de silicone, polidimetil siloxanos, borracha de neopreno, polietileno clorinatado, polivinilcloreto, copolímeros de vinilcloreto com vinil acetato, cloreto de vinilideno, etileno e propileno, ionômero polietileno tereftalatos, borracha de butil borrachas de epiclorohi- 25 drin, copolímero de etileno/vinil álcool, terpolímero de etileno/vini acetato/vinil álcool, e copolímero de etileno/viniloxietanol, que é insolúvel nos fluidos cor- póreos. O composto se difunde através da membrana polimérica externa em uma etapa de controle de taxa de liberação. A percentagem de composto ativo contido em tais composições parenterais é altamente dependente da 30 natureza específica deste, bem como da atividade do inibidor de IGF1R, que está opcionalmente em associação com um agente quimioterápico adicional, e as necessidades do indivíduo. A concentração do inibidor de IGF1R, que está opcionalmente em associação com um agente quimioterápico adicional, pode ser ajustada de modo que uma injeção proporciona uma quantidade efetiva para produzir o efeito farmacológico desejado. Conforme discutido abaixo, a dose exata 5 depende da idade, peso e condição do paciente ou animal como é conheci- do na técnica.

Em uma concretização da invenção, preparações parenterais de dose unitária são acondicionadas em uma ampola, um frasco ou uma serin- ga com uma agulha. Todas as preparações para administração parenteral devem ser estéreis, conforme é conhecido e praticado na técnica.

Em uma concretização da invenção, um inibidor de IGF1R, que está opcionalmente em associação com um agente quimioterápico adicional, é formulado em um pó liofilizado, que pode ser reconstituído para adminis- tração como soluções, emulsões e outras misturas. O pó pode também ser reconstituído e formulado como um sólido ou gel.

Em uma concretização da invenção, o pó liofilizado estéril é pre- parado por dissolução de um inibidor de IGF1R (por exemplo, um anticorpo anti-IGF1R), que está opcionalmente em associação com um agente quimio- terápico adicional, ou um derivado farmaceuticamente aceitável deste, em 20 um solvente adequado. O solvente pode conter um excipiente que aperfei- çoa a estabilidade, ou outros componentes farmacológicos do pó, ou solução reconstituída, preparada a partir do pó. Excipientes que podem ser usados incluem, mas não estão limitados a, dextrose, sorbitan, frutose, xarope de milho, xilitol, glicerina, glicose, sucrose, ou outro agente adequado. O sol- 25 vente pode também conter um tampão, tais como citrato, fosfato de sódio ou de potássio, ou outro tal tampão conhecido àqueles técnicos no assunto, em uma concretização, sobre pH neutro. Filtração estéril subsequente da solu- ção, seguida por liofilização sob condições padrões conhecidas àqueles téc- nicos no assunto, proporciona uma formulação desejada. Em uma concreti- 30 zação, a solução resultante será dividida em partes proporcionais em fracos para liofilização. Cada frasco pode conter uma dosagem simples ou dosa- gens múltiplas do inibidor de IGF1R opcionalmente em associação com o agente quimioterápico adicional. O enchimento de frascos com uma peque- na quantidade acima que necessita para uma dose ou conjunto de doses (por exemplo, cerca de 10%) é aceitável de modo a facilitar retirada de amostra precisa e dosagem precisa. O pó liofilizado pode ser armazenado 5 sob condições apropriadas, tais como a cerca de 4°C à temperatura ambien- te.

Reconstituição de um pó liofilizado com água para injeção pro- porciona uma formulação para uso na administração parenteral. Em uma concretização da invenção, para reconstituição, o pó liofilizado é adicionado 10 à água estéril, ou outro transportador adequado. A quantidade precisa de- pende da terapia desejada sendo dada. Tal quantidade pode ser empirica- mente determinada.

A administração por inalação pode ser provida pelo uso, por e- xemplo, de um aerossol contendo sorbitan trioleato ou ácido oleico, por e- 15 xemplo, junto com triclorofluorometano, diclorofluorometano, diclorotetrafluo- roetano, ou qualquer outro gás propelente biologicamente compatível; é também possível usar um sistema contendo um inibidor de IGF1R, que está opcionalmente em associação com um agente quimioterápico adicional, por si ou associado com um excipiente, na forma de pó.

Em uma concretização da invenção, inibidor de IGF1R, que está

opcionalmente em associação com um agente quimioterápico adicional, é formulado em uma forma de dosagem sólida para administração oral, em uma concretização, em uma cápsula ou comprimido. Comprimidos, pílulas, cápsulas e pastilhas, e similares, podem conter um ou mais dos seguintes 25 ingredientes, ou compostos de uma natureza similar: um ligante; um lubrifi- cante; um diluente; um deslizador; um agente de desintegração; um agente de coloração; um agente de adoçamento; um agente aromatizante; um a- gente de umedecimento; um revestimento emético; e um revestimento de película. Exemplos de Iigantes incluem celulose microcristalina, goma traga- 30 canto, solução de glicose, mucilagem de acácia, solução de gelatina, mela- ços, poli-inilpirrolidina, povidona, crospovidonas, sucrose e pasta de amido. Lubrificantes incluem talco, amido, estearato de magnésio ou de cálcio, Iico- podium e ácido esteárico. Diluentes incluem, por exemplo, lactose, sucrose, amido, caulim, sal, manitol e fosfato de dicálcio. Deslizadores incluem, mas não estão limitados a, dióxido de silício coloidal. Agentes de desintegração incluem sódio croscarmelose, sódio amido glicolato, ácido algínico, amido de 5 milho, amido de batata, bentonita, metilcelulose, ágar e carboximetilcelulose. Agentes de coloração incluem, por exemplo, qualquer dos corantes FD e C solúveis em água certificados aprovados, misturas deste; e corantes FD e C insolúveis em água suspensos em hidrato de alumina. Agentes de adoça- mento incluem sucrose, lactose, manitol e agentes de adoçamento artificiais 10 tais como sacarina, e qualquer número de aromatizantes senos de pulveri- zação. Agentes aromatizantes incluem aromatizantes naturais extraídos de plantas tais como frutos e misturas sintéticas de compostos que produzem uma sensação agradável, tal como, mas não limitada a, hortelã-pimenta e metil salicilato. Os agentes de umedecimento incluem propileno glicol mono- 15 estearato, sorbitan mono-oleato, dietileno glicol monolaurato e polioxietileno Iaural éter. Revestimentos eméticos incluem ácidos graxos, gorduras, ceras, goma-laca, goma-laca amoniatada e ftalatos de acetato de celulose. Reves- timentos de película incluem hidroxietilcelulose, sódio carboximetilcelulose, polietileno glicol 4000 e ftalato de acetato de celulose.

Qualquer dos agentes aqui colocados pode ser formulado em

uma formulação de liberação sustentada incluindo formulações lipossomais, tais como Iipossomas unilamelares vesiculares (ULV) e multilamelares vesi- culares (MLV), e partículas de DepoFoam® (Kim et al., Biochim. Biophys. Acta (1983) 728(3):339-348; Kim, Methods Neurosci. (1994) 21: 118-131; 25 Kim et al., Anesthesiology (1996) 85(2): 331-338; Katre et al., J. Pharm. Sei. (1998) 87(11): 1341-1346). Uma característica do sistema DepoFoam é que, dentro de cada partícula de DepoFoam, câmaras aquosas internas descontínuas, ligadas por uma rede não-concêntrica contínua de membra- nas de lipídio tornam uma proporção de volume para lipídio aquosa mais alta 30 e diâmetros de partícula maiores comparados com MLV.

Dosagem e Administração

Os métodos da presente invenção incluem administração de um inibidor de IGF1R, que está opcionalmente em associação com um agente quimioterápico adicional, ou uma composição farmacêutica deste. Tipica- mente, a administração e dosagem de tais agentes é, quando possível, feita de acordo com a tabela listada na folha de informação de produto dos agen- 5 tes aprovados, no Médicos' Desk Reference 2003 (Médicos1 Desk Referen- çe, 57th Ed); Medicai Economics Company; ISBN: 1563634457; 57th edition (November 2002), bem como protocolos terapêuticos bem conhecidos na técnica.

O termo "quantidade terapeuticamente efetiva" ou "dosagem terapeuticamente efetiva" significa que a quantidade ou dosagem de uma composição da invenção (por exemplo, inibidor de IGF1R, tal como anticorpo anti-IGF1R) que induzirá uma resposta biológica ou médica de um tecido, sistema, indivíduo ou hospedeiro que está sendo procurado pelo administra- dor (tal com um pesquisador, médico ou veterinário) que inclui qualquer alí- vio mensurável dos sinais, sintomas e/ou indícios clínicos de câncer (incluin- do, por exemplo, inibição de qualquer atividade de IGF1R, tal como ligação de IGF-I ou IGF-II ou atividade de quinase), tal como câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de célula escamosa, mieloma múltiplo, plasmacitoma solitário, câncer de célula renal, retinoblastoma, tumores de célula de germe, hepatoblastoma, carcinoma hepatocelular, melanoma, tumor rabidoide do rim, Sarcoma de Ewing, condrossarcoma, qualquer malignidade hemotológi- ca (por exemplo, leucemia linfoblástica crônica, leucemia mielomonocítica crônica, leucemia linfoblástica aguda (por exemplo, linhagem de célula-T, linhagem de precursor de célula-B), leucemia linfocítica aguda, leucemia mi- elógena aguda, leucemia mieloblástica aguda, leucemia mieloblástica crôni- ca, doença de Hodgekin, Iinfoma de não-Hodgekin, leucemia linfocítica crô- nica, leucemia mielógena crônica, síndrome mielodisplástica, leucemia de célula capilar, leucemia de célula de mastro, neoplasma de célula de mastro, Iinfoma folicular, Iinfoma de célula grande difusa, Iinfoma de célula de reves- timento, Linfoma de Burkitt, fungoides de micose, síndrome "seary", Iinfoma de célula-T cutânea, distúrbios mieloproliferativos crônicos), e tumores do sistema nervoso central (por exemplo, câncer do cérebro, glioblastoma, não- glioblastoma de câncer do cérebro, meningioma, adenoma pituitário, schwa- noma vestibular, um tumor neuroctodermal primitivo, meduloblastoma, astro- citoma, astrocitoma anaplástico, oligodendroglioma, ependimoma e papiloma de plexo coroide), distúrbios mieloproliferativos (por exemplo, policitemia 5 vera, trombocitemia, mielfibrose idiopática), sarcoma de tecido macio, câncer da tireoide, câncer endometrial, câncer carcinoide, tumores de célula de germe e câncer do fígado (por exemplo, crescimento de tumor ou a prolife- ração de células cancerosas) e/ou a prevenção, diminuição ou parada de progressão ou metástase do câncer a qualquer grau. Por exemplo, em uma 10 concretização, uma "dosagem terapeuticamente efetiva" de qualquer anti- corpo anti-IGF1R; por exemplo, um anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste compreendendo (a) uma região variável de cadeia leve com- preendendo aminoácidos 20-128 de SEQ ID N0: 2, e uma região variável de cadeia pesada compreendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 15 12; (b) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoácidos 20- 128 de SEQ ID N0: 4 e uma região variável de cadeia pesada compreenden- do aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12; (c) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoácidos 20-128 de SEQ ID N0: 6 e uma região variável de cadeia pesada compreendendo aminoácidos 20-137 de 20 SEQ ID N0: 10 ou 12; ou (d) uma região variável de cadeia leve compreen- dendo aminoácidos 20-128 de SEQ ID N0: 8 e uma região variável de cadeia pesada compreendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12; ou qualquer outro anticorpo anti-IGF1R aqui mencionado, é entre cerca de 0,3 e cerca de 20 mg/kg de peso corpóreo (por exemplo, cerca de 0,5 mg/kg peso 25 corpóreo, cerca de 1 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 2 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 3 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 4 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 5 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 6 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 7 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 8 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 9 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 10 mg/kg de peso 30 corpóreo, cerca de 11 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 12 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 13 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 14 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 15 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 16 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 17 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 18 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 19 mg/kg de peso corpóreo, cerca de 20 mg/kg de peso corpóreo), duas vezes por semana, uma vez por semana, uma vez de duas em duas semanas, uma vez de 3 em 3 semanas, ou uma vez por mês.

Os regimes de dosagem podem ser ajustados para proporcionar

a resposta desejada ótima (por exemplo, uma resposta terapêutica). Por e- xemplo, uma dose única pode ser administrada, ou várias doses divididas podem ser administradas com o tempo, ou a dose pode ser proporcional- mente reduzida ou aumentada conforme indicado pelas exigências da situa- 10 ção terapêutica. Por exemplo, a dosagem pode ser determinada ou ajustada, pelo técnico no assunto (por exemplo, um médico ou veterinário) de acordo com a idade do paciente, peso, altura, história médica passada, medicações atuais e o potencial para reação cruzada, alergias, sensibilidades e efeitos colaterais adversos. É especialmente vantajoso formular composições pa- 15 renterais na forma unitária de dosagem para facilidade de administração e uniformidade de dosagem.

Um médico (por exemplo, médico ou veterinário) tendo perícia no assunto pode determinar e prescrever prontamente a quantidade efetiva da composição farmacêutica requerida. Por exemplo, o médico ou veteriná- 20 rio pode iniciar com doses do anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno da invenção empregadas na composição farmacêutica em níveis mais bai- xos do que requeridos de modo a alcançar o efeito terapêutico desejado e aumentar gradualmente a dosagem até que o efeito desejado seja alcança- do. A eficiência de uma dada dose ou regime de tratamento de um anticorpo 25 ou combinação da invenção pode ser determinada, por exemplo, determi- nando-se se um tumor sendo tratado no indivíduo encolhe ou para de cres- cer. O tamanho do tumor pode ser facilmente determinado, por exemplo, por raios-X, imagem de ressonância magnética (MRI), visualmente em um pro- cedimento cirúrgico ou manualmente por palpação. O tamanho do tumor e 30 proliferação podem também serem medidos pelo uso de um escaneamento de PET timidina (ver, por exemplo, Wells et al., Clin. Oncol. 8: 7-14 (1996)). Geralmente, o escaneamento de PET timidina inclui a injeção de um traça- dor radioativo, tal como [2-11C]-timidina, seguido por um escaneamento de PET do corpo do paciente (Vander Borght et ai, Gastroenterology 101: 794- 799, 1991; Vander Borght et ai, J. Radiat. Appl. Instrum. Part A, 42: 103-104 (1991)). Outros traçadores que podem ser usados incluem [18F]-FDG (18- 5 fluorodeoxiglicose), [124IJIUdR (5-[124l]iodo-2'-deoxiuridina), [76BrJBrdUrd (Bromodeoxiuridina), [18F]FLT (3'-deóxi-3'fluorotimidina) ou [11C]FMAU (2*- fluoro-5-metil-1-B-D-arabinofuranosiluracil).

Por exemplo, o progresso de câncer de cabeça e pescoço pode ser monitorado, pelo médico ou veterinário por uma variedade de métodos, e 10 o regime de dosagem pode ser alterado consequentemente. Métodos pelos quais para monitorar câncer de cabeça e pescoço incluem, por exemplo, exame físico (por exemplo, exame visual ou tátil), endoscopia para observa- ção de áreas (por exemplo, nasofaringoscopia, faringoscopia, ou Iaringosco- pia), escaneamento tomográfico computado (CT), escaneamento de imagem 15 de ressonância magnética (MRI), exame ultrassom, escaneamentos de to- mografia de emissão de positron (PET), panorex (raios-X das mandíbulas), engolimento de bário, raio-X dental, raio-X do seio, e escaneamento de osso de radionuclídeo.

Por exemplo, o progresso de carcinoma de célula escamosa po- 20 de ser monitorado pelo médico ou veterinário por uma variedade de méto- dos, e o regime de dosagem pode ser alterado consequentemente. Métodos pelos quais para monitorar carcinoma de célula escamosa incluem, por exemplo, por entrevista com o paciente ou por exame físico (por exemplo, inspeção visual e documentação de qualquer do tamanho da lesão, forma ou 25 outras qualidades visuais).

Por exemplo, o progresso de mieloma múltiplo pode ser monito- rado pelo médico ou veterinário por uma variedade de métodos, e o regime de dosagem pode ser alterado consequentemente. Métodos pelos quais se monitora mieloma múltiplo incluem, por exemplo, com uma contagem de 30 sangue completa (CBC), por exemplo, para detectar baixo hematócrito (a- nemia), contagem de célula de sangue vermelha baixa, contagem de plaque- tas baixa, e/ou contagem de célula de sangue branca baixa, biópsia de tuta- no de osso, eletroforese de proteína de soro, raios-X do osso para identificar fraturas e lesões do osso, ou um perfil químico para detectar cálcio de soro aumentado, proteína total, ou função anormal do rim.

Por exemplo, o progresso de carcinoma de célula renal pode ser 5 monitorado pelo médico ou veterinário por uma variedade de métodos, e o regime de dosagem pode ser alterado consequentemente. Métodos pelos quais se monitora carcinoma de célula renal incluem, por exemplo, palpação do abdômen para detectar uma massa, contagem de sangue completa (CBC), teste de urina para detectar células de sangue vermelhas, ensaio de 10 níveis de cálcio de soro para detectar elevação, ensaio de Soro glutamato piruvato transaminase (SGPT) e fosfatase alcalina para detectar elevação, ensaio de citologia de urina, testes de função do fígado, um exame de ultra- som do abdômen e rim, raio-X do rim, pielograma intravenoso (IVP) ou arte- riografia renal.

As composições e métodos da invenção incluem um inibidor de

IGF1R opcionalmente "em associação" com um ou mais agentes quimiote- rápicos. O termo "em associação" indica que os componentes das combina- ções da invenção podem ser formulados em uma composição única para distribuição simultânea, ou formulados separadamente em duas ou mais 20 composições (por exemplo, um kit). Além disso, cada componente de uma combinação da invenção pode ser administrado a um indivíduo em um tem- po diferente do que quando o outro componente é administrado; por exem- plo, cada administração pode ser dada não-simultaneamente (por exemplo, separadamente ou seqüencialmente) em vários intervalos sobre um dado 25 período de tempo. Além disso, os componentes separados podem ser admi- nistrados a um indivíduo pela mesma ou por uma rota diferente (por exem- plo, oralmente, intravenosamente, subcutaneamente).

Exemplos

A presente invenção é pretendida para exemplificar a presente invenção e não para ser uma limitação desta. Qualquer método ou composi- ção descritos abaixo caem dentro do escopo da presente invenção. Exemplo 1: IGF1R e IGF-II são expressos em células de câncer de cabeça e pescoço.

Neste exemplo, células de câncer de cabeça e pescoço foram ensaiadas para determinar o nível de expressão de IGF1R ou IGF-2. Amos- 5 tras de tecido de tumor primário (cânceres de estágio 2, 3 ou 4), amostras de tecido adjacente normais e amostras de tecido normais foram analisadas para o nível de expressão de IGF1R RNA. Além disso, os níveis de IGF1R, IGF-1 e IGF-2, em várias linhas de células, foram analisados.

O RNA foi produzido de amostras de tumor e cDNAs foram sinte- 10 tizados a partir destas. A expressão de IGF1R foi analisada usando-se uma amostra de 20 ng de cDNA em um ensaio de Fluorogenic 5’-nuclease PCR com sondas específicas e iniciadores usando-se o Sistema de detecção de Seqüência 9 ABI Prism 7700 (Applied Biosystems; Foster City, CA). Os nú- meros CT foram normalizados contra expressão de ubiqitin ou actin mRNA 15 em todas as amostras.

Os iniciadores e sondas usados foram conforme segue:

IGF1R/iniciador de avanço:GAAAGTGACGTCCTGCATTTCA (SEQ ID N0: 106)

IGF1R/lniciador reverso: CCGGTGCCAGGTTATGATG (SEQ ID

N0: 107)

Seqüência de Sonda: CACCACCACGTCGAAGAATCGCA (SEQ

ID N0: 108)

H322 é uma linha de célula de câncer de pulmão não-pequena; CAL27, SCC25, SCC15, SCC9 e HS802 são linhas de célula de carcinoma de célula escamosa.

Os dados gerados nestes métodos são colocados nas Figuras 1 e 2. A Figura 1 demonstra que IGF1R foi expressa, em amostras de tumor de cabeça e pescoço primário, a um nível mais alto do que aquele de tecido normal. Além disso, tecido adjacente normal (NAT) exibiu um nível maior de 30 expressão de IGF1R do que aquele de tecido normal. O nível de expressão de IGF1R aumentou levemente conforme o estágio de tumor de cabeça e pescoço aumentou (de I para IV). Cada ponto representa o nível normaliza- do de IGF1R em uma amostra de tecido única.

A Figura 2 também demonstra que IGF1R, IGF-I e IGF-II foram expressos em várias linhas de célula de carcinoma de célula escamosa. O painel superior é uma análise mancha de western de várias linhas de células 5 demonstrando expressão de níveis de IGF1R totais (tlGF-1R) na célula. A expressão de actin é também mostrada como um controle interno. O painel inferior indica o nível de IGF1 e IGF2 secretado de células ensaiadas (ng de proteína secretada por 106 células).

Exemplo 2: Anti-IGFIR (LCF(/c)/HCA(y1)) inibe proliferação in vitro de linhas de células de carcinoma de célula escamosa

Este exemplo demonstra que o anticorpo anti-IGF1R LCF/HCA inibe proliferação de várias linhas de células de carcinoma de célula esca- mosa (SCC).

A proliferação de célula foi ensaiado usando-se um ensaio de Célula-Titulação Glo (Promega Corp.; Madison1 Wl). Um ensaio de célula- titulação glo gera um sinal Iuminescente "glow" na presença de ATP de célu- las viáveis, que podem ser detectadas com um luminômetro de leitora de placa ou dispositivo de imagem de CCD.

Neste ensaio, as células de carcinoma de célula escamosa, SCC9, SCC25 e SCC15, foram tripsinizadas, contadas e ressuspensas em 25.000 células/ml em 10% de HI-FBS RPMI contendo NEAA1 L-Glu, Vitami- nas MEM e PS. 100 ml de suspensão de célula (2500 células) foram adicio- nados a cada poço de placa tratada TC de fundo claro de 96 poços negros BD Falcon. As células foram permitidas fixarem e difundirem durante a noite a 37°C. Em seguida, 10% de meio de RPMI foi substituído com 100 ml de 2% de RPMI, contendo o anticorpo LCF/HCA na concentração apropriada no dia seguinte. As concentrações do anticorpo anti-IGF1R usadas em cada experimento foram 100 nM, 20 nM, 5 nM, 0,8 nM, 0,16 nM, 0,032 nM, 0,0064 nM, 0,00128 nM, e 0,000256 nM. Todos os tratamentos foram preparados em 2% de RPMI a concentração 20X e diluídos em série. Todo ponto de tes- te foi preparado em triplicata em placas de ensaio separadas. Conforme mencionado acima, a proliferação de célula foi medida usando-se o Ensaio de Viabilidade de Célula Luminescente CeIITiter-GIo (Promega) em 96 horas pós-tratamento. A luminescência foi detectada em Leitora de Placa Wallac 420 com empilhador.

Os resultados deste trabalho são colocados nas Figuras 3a-3c 5 que demonstram que proliferação de linhas de células de carcinoma de célu- la escamosa foi inibida por exposição a várias concentrações de LCF/HCA (indicadas nas Figuras como 19D12). Os dados nas Figuras (a), (b), e (c) correspondem às linhas de células acima discutidas acima conforme segue: (a): linha de célula SCC 15; (b): linha de célula SCC 25; (c): linha de célula 10 SCC 9.

Exemplo 3: IGF2 e IGF1R são altamente expressos em linhas de células de câncer gástrico e ovariano.

Neste exemplo, IGF2 mRNA foi demonstrado ser expresso em um alto nível em amostras de tumor gástrico primário e em linhas de células 15 de adenocarcinoma de estômago conforme comparado a amostras normais e linhas de células. Expressão alta de IGF2 em uma amostra de tumor é um marcador para estimulação de autocrina através da trajetória de crescimento de IGF1R, e indica que o crescimento do tumor será inibido por tratamento de anticorpo anti-IGF1R (LCF(/c)/HCA(y1)).

As linhas de células em que níveis de expressão eram para se-

rem determinados foram crescidas, preparadas ensaiadas essencialmente conforme colocado acima. Os níveis de proteína foram analisados por man- cha de western e os níveis de mRNA foram analisados por análise de Taq- man. Citometria de fluxo quantitativa foi conduzida usando-se células etique- 25 tadas com anti-IGF1R, IR (receptor de insulina), EGFR (receptor de fator de crescimento epidermal) ou anticorpos de HER2 usando-se o sistema Quanti- tative Simply Cellularde Bangs Laboratories, Inc. (Fishers, IN).

A2780 é uma linha de célula de câncer ovariano humano e NCI- N87, SNU-16, SNU-1 e Hs746T são linhas de células de câncer gástrico humano.

Os resultados deste trabalho são colocados nas Figuras 4 e 5. A Figura 4 demonstra que IGF2 foi expresso em níveis altos em células de tu- mor gástrico primário conforme comparados àqueles de células normais e células adjacentes normais. Cada ponto é o nível normalizado de IGF2 mR- NA expresso em uma amostra de tecido de tumor simples (normalizada con- tra os níveis de expressão de ubiquitin).

O painel superior da Figura 5 é dado de citometria de fluxo quan-

titativa, relacionado a várias linhas de células, indicando o número de recep- tores/célula para IGF1R, IR, EGFR e HER2. O painel inferior da Figura 5 é dado de mancha de western para várias linhas de células demonstrando o nível de expressão de plRS-1 (receptor de substrato-1 de insulina fosforila- 10 tada (IRS-1)), pAKT (AKT fosforilatado (também conhecida como proteína quinase-B) (específica não-isoforma)), tlRS-1 (IRS-1 total), pERK1, 2 (ERK1 fosforilatado (quinase-1 regulada de sinal extracelular) e ERK2 (quinase-2 regulada de sinal extracelular)), tIGRIR (IGFR1 total) e actin. A faixa sob a raia 3 de NCI N87 na fileira t IRS-1 migra levemente mais lenta do que espe- 15 rado, sugerindo que é HER2 que cruza reage com os anticorpos anti-IRS-1 usados neste experimento.

Exemplo 4: Anticorpo anti-IGF1R (LCF(/c)/HCA(y1)) inibe proliferação in vitro de carcinoma gástrico e linhas de células de mieloma.

Este exemplo demonstra que proliferação das células SNU-16 20 de linha de célula de câncer gástrico e a linha de célula de mieloma RP- MI8226 foi inibida pelo anticorpo anti-IGF1R LCF/HCA. As células foram crescidas, preparadas e ensaiadas usando-se ensaio Célula-Titulação Glo essencialmente conforme colocado acima. As concentrações de anticorpo anti-IGF1R usadas em cada experimento foram 100 nm, 20 nm, 5 nm, 0,8 25 nm, 0,16 nm, 0,032 nm, 0,0064 nm, 0,00128 nm, e 0,000256 nM.

Os resultados deste trabalho são colocados na Figura 6. A Figu- ra 6 demonstra inibição de crescimento in vitro da linha de célula SNU-16 em várias concentrações do anticorpo. Um nível de 40%-45% de inibição de crescimento da linha de célula de mieloma foi também observado in vitro.

Exemplo 5: Anticorpo anti-IGF1R (LCF(/c)/HCA(y1)) inibe carcinoma de célu- la renal in vivo e crescimento de célula de tumor de melanoma in vitro.

Este exemplo demonstra a eficiência de terapia de anti-IGF1R para o tratamento ou prevenção de câncer de célula renal ou melanoma.

Camundongos raspados atímicos foram inoculados com células de tumor de carcinoma de rim A498 humanas no flanco direito, subcutanea- mente, junto com Matrigel (1:1:células:gel). Nestes experimentos, 5 x 106 5 células/camundongo em uma mistura 1:1 com matrigel regular. O anticorpo LCF/HCA anti-IGF1R foi inoculado intraperitonealmente (ip) (0,1 mg/injeção). Os camundongos foram dosados com anticorpo duas vezes por semana, por injeção intraperitoneal, sete vezes iniciando no dia 12. O tamanho do tumor foi medido com compassos de calibre e os dados foram admitidos no pro- 10 grama de análise e coleta experimental de dados LABCAT (Innovative Pro- gramming Associates, Inc.; Princeton, NJ). Os camundongos foram agrupa- dos com tamanho médio de 100 mm3. O tamanho do tumor e peso corpóreo foram medidos duas vezes semanalmente.

As células de melanoma humano (A375-SM) foram também en- saiadas in vitro para receptividade a anticorpo anti-IGF1R a concentrações de 100 nM, 20 nM, 5 nM, 0,8 nM, 0,16 nM, 0,032 nM, 0,0064 nM, 0,00128 nM, e 0,000256 nM. Os ensaios foram conduzidos conforme colocado acima por ensaio de Célula-Titulação Glo.

Os resultados deste trabalho são colocados nas Figuras 7 e 8. A 20 Figura 7 demonstra inibição de crescimento in vivo da linha de célula de car- cinoma de célula renal sobre o tempo quando o anticorpo LCF/HCA foi ad- ministrado. A Figura 8 demonstra a inibição de crescimento in vitro da linha de célula de melanoma em várias concentrações de anticorpo LCF/HCA. Exemplo 6: Anticorpo anti-IGF1R (LCF(/c)/HCA(y1)) inibe crescimento de 25 célula de carcinoma de célula escamosa in vivo.

Este exemplo demonstra a eficiência de terapia de anti-IGF1R para o tratamento ou prevenção de cânceres de cabeça & pescoço tal como carcinoma de célula escamosa.

Camundongos SCID imuno-deficiente (cepa SCID) foram inocu- lados com células de tumor de carcinoma de célula escamosa humana SCC15 no flanco direito, subcutaneamente, junto com Matrigel (1:1 célu- las:gel). Nestes experimentos, 5 x 106 células/camundongo em uma mistura 1:1 com matrigel regular foram inoculadas. O anticorpo LCF/HCA anti-IGF1R foi inoculado intraperitonealmente (ip) (0.1 mg/injeção). Os camundongos foram dosados com o anticorpo duas vezes por semana, por injeção intrape- ritoneal, sete vezes iniciando no dia 10 com a última dose no dia 31. O ta- 5 manho do tumor foi medido com compassos de calibre e os dados foram admitidos no programa labcat. Os camundongos foram agrupados com ta- manho médio de 100 mm3. O tamanho do tumor e peso corpóreo foram me- didos duas vezes semanalmente.

Os dados gerados destes experimentos são colocados na Figura 9. O crescimento do tumor nos camundongos inoculados com o anticorpo LCF/HCA (indicado como "19D12" no gráfico) foi menor do que aquele ob- servado em camundongos somente recebendo uma injeção de controle sem o anticorpo.

Exemplo 7: Teste de painel de PPTP de anticorpo LCF(/c)/HCA(y1) anti- IGF1R.

LCF/HCA é um anticorpo totalmente humano direcionado contra o receptor de fator de crescimento 1 similar a insulina 1 (IGF1R), que é im- plicado no crescimento e fenótipo metastático de uma ampla faixa de malig- nidades. A sinalização de IGF1R é de importância particular no ajuste de 20 câncer de criança, por exemplo, em conjunto com cânceres pediátricos, tais como neuroblastoma, sarcoma de Ewing, rabdomiosarcoma, tumor de Wilms, e osteossarcoma. A atividade do anticorpo foi avaliada contra os pai- néis in vitro e in vivo do Programa de Teste Pré-Clínico Pediátrico (PPTP). O PPTP inclui um painel de linha de célula in vitro e painéis de xenoenxerto de 25 camundongo in vivo, estabelecidos e organizados pelo Instituto Nacional de Câncer (NCI), que permite teste de terapias nos cânceres pediátricos mais comuns (ver, por exemplo, Houghton et al., Pediatric Blood & Cancer (2007) 49(7):928-40).

O PPTP inclui um painel de linhas de células molecularmente caracterizado in vitro (n=27) e painel de xenoenxertos in vivo (n=61) repre- sentando muitos dos tipos comuns de tumores sólidos de criança e ALL de criança (leucemia linfoblástica aguda). O anticorpo LCF/HCA anti-IGF1R foi testado contra o painel de PPTP in vitro em concentrações variando de 0,01 nM a 100 nM; e foi testado contra o painel de PPTP in vivo em uma dose de 0,5 mg por camundongo administrado duas vezes semanalmente por quatro semanas via injeção intraperitoneal. Três medidas de atividade de antitumor 5 foram usadas: 1) critério de resposta modelado após o ajuste clínico; 2) vo- lume de tumor tratado por controle (T/C) no dia 21; e 3) um tempo para me- dida do evento (aumento de 4 vezes no volume do tumor) baseada no EFS médio de linhas tratadas e de controle (atividade intermediária requerida EFS (sobrevivência livre de evento) T/C > 2, e alta atividade adicionalmente 10 requer uma redução de rede no volume de tumor médio no final do experi- mento).

Métodos

Teste in vitro. O teste in vitro foi realizado usando-se DIMSCAN, um sistema de microscópio de imagem digital baseado em fluorescência 15 semiautomático que quantifica números de célula viáveis (usando-se diace- tato de fluoresceína [FDA]) em placas de multicavidade de cultura de tecido (Keshelava et ai., Methods Mol.Med. (2005) 110:139-153). O teste foi por 96 horas em concentrações de 0,01 nM a 0,1 mM com réplicas de 6 por ponto de dado. Os dados foram analisados usando-se software Kaleidagraph (Sy- 20 nergy Software; Reading, PA), ajustando-se uma regressão não-linear, mo- delo de resposta de dose sigmoidal para a resposta; valores de fluorescên- cia relativos vs. a concentração. O painel de PPTP in vitro contém linhas de célula para neuroblastoma (4), sarcoma de Ewing (4), rabdomiossarcoma (4), leucemia linfoblástica aguda (5), NHL (2), e outros.

O teste de estágio 1 envolveu teste de um agente através do

painel de PPTP total de linhas de xenoenxerto de câncer de criança em sua dose tolerada máxima (MTD), ou em uma dose selecionada baseada nos estudos de PK/PD (farmacocinéticos/farmacodinâmicos) usando-se modelos pré-clínicos adultos.

Teste de tumor sólido in vivo: Para cada linha de xenoenxerto,

10 camundongos suportando tratamento iniciado de tumores subcutâneos (SC) quando os tumores estavam entre 0,2-0,5 cm3 em volume. Dois diâme- tros de tumor perpendiculares foram medidos em intervalos de uma vez por semana com compassos de calibre vernier digital. Assumindo-se que os tu- mores sejam esféricos, os volumes foram calculados a partir da fórmula (7t/6)xd3, onde d representou o diâmetro médio.

Teste de leucemia linfoblástica aguda in vivo: Para cada linha de

xenoenxerto, 8 camundongos foram inoculados com 3-5 x 106 de células mononucleares purificadas a partir de baços de camundongos recipientes secundários. O enxerto foi monitorado semanalmente por citometria de fluxo, e tratamento foi iniciado quando a proporção de células CD45+ humanas no 10 sangue periférico alcançou 1%. A proporção de células CD45+ humanas no sangue periférico foi monitorada semanalmente através de todo o curso de tratamento.

Fármaco: LCF/HCA foi dissolvido em 20 mM de tampão de ace- tato de sódio pH 5 contendo 150 mM de cloreto de sódio, e administrado 15 intraperitonealmente duas vezes semanalmente por 4 semanas consecutivas a uma dose de 0,5 mg por animal. O anticorpo foi provido para cada local de teste em frascos codificados para teste cego de acordo com os procedimen- tos de operação padrões de PPTP.

Critérios de Resposta de Tumor Sólido:

Resposta Definição Classificação PD1 (Doença Progressi¬ >25% t em volume de tumor, valor TGD 0 va 1) <1.5 PD2 (Doença Progressi¬ >25% T em volume de tumor, valor TGD 2 va 2) >1.5 SD (Doença Estável) <25% t em volume de tumor, <50% de 4 regressão PR (Resposta Parcial) £50% de regressão, mas nenhuma CR 6 CR (Resposta Completa) <0,1 cm3 de volume de tumor 8 MCR (CR mantida) <0,1 cm3 de volume de tumor no final do 10 estudo Critérios de Resposta de Leucemia:

Resposta Definição Classificação PD1 (Doença Progressi¬ Nenhum valor de PR & TGD de <1,5 & eventos 0 va 1) em EOS PD2 (Doença Progressi¬ Nenhum valor de PR & TGD >1,5 & eventos em 2 va 2) EOS SD (Doença Estável) Nenhum PR e nenhum evento em EOS 4 PR (Resposta Parcial) CD45% <1% para somente 1 semana 6 CR (Resposta Completa) CD45% <1% para 2 semanas consecutivas 8 MCR (CR mantida) CD45% <1% para últimas 3 semanas de estudo 10 Resposta Média de Grupo: A cada camundongo individual em

cada grupo de tratamento foi designada uma classificação de resposta (ver Tabelas acima) e uma classificação média para o grupo de tratamento foi calculada e, em seguida, a cada grupo de tratamento foi designada uma resposta total de acordo com a tabela abaixo._

Se Classificação Média (MS) de (1): Resposta de Grupo Total 0 < MS <1 PD1 1 < MS <3 PD2 3 < MS <5 SD < MS <7 PR 7 < MS <9 CR 9 < MS MCR Métodos Estatísticos: As distribuições de sobrevivência livre de

evento (EFS) de cada grupo de tratamento foram comparadas à distribuição de EFS do respectivo grupo de controle usando-se o teste de classe de Iog exato. Os valores P foram de 2 lados & não foram ajustados para compara- ções múltiplas dadas à natureza exploratória deste estudo. Os valores P < 0,05 foram considerados serem significantes. Resultados Tabela 1. Resumo de atividade de LCF/HCA in vivo

Linhagem de Histologia Valor P EFS RTV final T/C Valor P Resposta xenoenxerto T/C mediano volume de grupo do tumor total BT-29 Rabidóide 0,066 1,4 >4 0,77 0,247 PD1 KT-16 Rabidóide 0,24 1,2 >4 0,5 0,130 PD1 KT-14 Rabidóide <0.001* >3.3# 1.6# 0,6 0.009* PD2 KT-10 Wilms 0.001* 1,3 >4 0,43 <0.001* PD1 KT-11 Wilms 0,547 1 >4 0,99 1,000 PD1 KT-13 Wilms 0,374 1,1 >4 0,84 0,236 PD1 SK-NEP-1 Ewings 0,428 0,9 >4 1,08 0,829 PD1 EW5 Ewings <0.001* >2.3! 0.4! 0,12 <0.001* CR* EW8 Ewings 0,579 1,5 >4 0,86 0,243 PD1 TC-71 Ewings 0,246 1,2 >4 0,88 0,579 PD1 CHLA258 Ewings <0.001* 4.2# >4# 0,29 <0.001* PD2 Rh28 ALV Rabidomiossarcoma <0.001* > 2.6# 2.9# 0,36 0.001* PD2 Rh30R ALV Rabidomiossarcoma <0.001* 1,8 >4 0,49 0.004* PD2 Rh41 ALV Rabidomiossarcoma <0.001* 1,1 >4 0,65 0,065 PD1 Rh18 BEM Rabidomiossarcoma 0,44 1 >4 0,74 0,353 PD1 BT-28 Meduloblastoma 0,121 1,2 >4 1,18 0,529 PD1 BT-46 Meduloblastoma 0.009* 1,2 >4 0,69 0.011* PD1 BT-50 Meduloblastoma 0,474 1,4 0,94 0,436 PD2 BT-44 Ependioma <0.001* 2.6# >4# 0,66 0.003* PD2 GBM2 Glioblastoma 0.005* 1,4 >4 0,73 0.007* PD1 BT-39 Glioblastoma 0,377 1,1 >4 0,87 0,631 PD1 D645 Glioblastoma 0.007* 2.2# >4# 0,58 <0.001* PD2 D456 Glioblastoma 0.008* 1,1 >4 0,77 0.008* PD1 NB-SD Neuroblastoma <0.001* > 1.8Λ 3.7Λ 0,41 0.006* PD2 NB-1771 Neuroblastoma 0,595 1,1 >4 0,64 0,063 PD1 NB-1691 Neuroblastoma 0.025* 0,9 >4 1,34 0,075 PD1 NB-EBcI Neuroblastoma 0.003* >2.0# 1.4# 0,8 0.043* PD2 CHLA-79 Neuroblastoma 0.003* 2.1# 3.9# 0,69 0,123 PD2 NB-1643 Neuroblastoma 0.005* 1,8 >4 0,53 0.005* PD2 OS-1 Osteossarcoma <0.001* > 1.3Λ 0.1a 0,16 <0.001* MCR* OS-2 Osteossarcoma <0.001* 2.3# >4# 0,5 <0.001* PD2 OS-17 Osteossarcoma <0.001* 2 >4 0,55 0,089 PD2 OS-9 Osteossarcoma 0.003* > 1.2Λ 0.4a 0,31 <0.001* MCR* OS-33 Osteossarcoma 0,587 0,9 >4 0,79 0,529 PD1 OS-31 Osteossarcoma 0,461 1,3 >4 0,88 0,274 PD1 ALL-2 Precursor B de ALL 0.095* 0,7 >25 PD1 ALL-3 Precursor B de ALL 0,743 0,4 >25 PD1 ALL-4 Precursor B de ALL 0,194 0,8 >25 PD1 ALL-7 Precursor B de ALL 0,544 1 >25 PD1 ALL-8 Célula T de ALL 0,408 1,5 >25 PD1 ALL-16 Célula T de ALL 0,588 1 >25 PD1 ALL-17 Precursor B de ALL <0.001* 3.1# >25# PD2 ALL-19 Precursor B de ALL 0.009* 1,5 >25 PD1 Um * nas colunas de valor p indica uma diferença estatistica- mente significante entre grupos tratados e de controle. As notações nas co- lunas EFS indicam xenografias que tem atividade ou alta (!), intermediária (#), ou indeterminada(A). RTV é um volume de tumor relativo.

Ver também Figura 10 que coloca uma análise gráfica do volume

de tumor in vivo de vários tipos de célula sobre o tempo.

A expressão de IGF-1R foi também avaliada usando-se Séries Affymetrix U133 Plus2.

Cinco xenografias com expressão de IGF1R muito baixa não 10 responderam (isto é, PD1) ao anticorpo. Por exemplo, OS-33 tinha expres- são muito baixa e foi uma das xenografias de osteossarcoma que não mos- traram resposta ao anticorpo. As 3 xenografias com respostas CR ou MCR tinham alta expressão de IGF1R. Algumas xenografias com expressão de IGF1R de moderada a alta não responderam ao anticorpo (por exemplo, 15 Rh41).

A inibição de crescimento máxima alcançada nos ensaios in vitro foi 30%, e foi observada para a linha de célula-T ALL, MOLT-4. A inibição de crescimento média para o painel in vitro, na concentração mais alta testada, foi 5%.

A presente invenção não é para estar limitada no escopo pelas

concretizações específicas aqui descritas. De fato, o escopo da presente invenção inclui concretizações especificamente aqui colocadas e outras con- cretizações não especificamente aqui colocadas; as concretizações especifi- camente aqui colocadas não são necessariamente pretendidas para serem 25 exaustivas. Várias modificações da invenção em adição àquelas descritas aqui tomar-se-ão aparentes àqueles técnicos no assunto a partir da descri- ção precedente. Tais modificações são pretendidas caírem dentro do escopo das reivindicações.

Patentes, pedidos de patente, publicações, descrições de produ- to, e protocolos são citados através de todo este pedido, as revelações dos quais sendo incorporadas aqui por referência em suas totalidades para todas as propostas. Seqüência de Listagem

<110> Schering Corporation

<120> Métodos de Tratamento

<130> JB06578

<150> 60/874,589

<151> 2006-12-13

<150> 60/870,937

<151> 2006-12-20

<150> 60/946,011

<151> 2007-06-25

<150> 60/979,274

<151> 2007-10-11

<160> 108

<170> Patente versão 3.3

<210> 1

<211> 384 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Cadeia Leve-C 19D12/15H12 modificada <220>

<221> CDS <222> (1)..(384)

<400> 1

atg tcg cca tca caa ctc att ggg ttt ctg ctg ctc tgg gtt cca gcc 48

Met Ser Pro Ser Gln Leu He Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala 15 10 15

tcc agg ggt gaa att gtg ctg act cag age cca gac tet ctg tet gtg 96

Ser Arg Gly Glu He Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val

20 25 30

act cca ggc gag aga gtc acc ate acc tgc egg gcc agt cag age att 14 4 Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile 35 40 45

ggt agt age tta cac tgg tac cag cag aaa cca ggt cag tet cca aag Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys 50 55 60

ctt ctc ate aag tat gea tcc cag tcc ctc tca ggg gtc ccc tcg agg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg 65 70 75 80

ttc agt ggc agt gga tet ggg aca gat ttc acc ctc acc ate agt age Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser

85 90 95

ctc gag gct gaa gat gct gea gcg tat tac tgt cat cag agt agt cgt Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg 100 105 110

tta cct cac act ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag ate aaa cgt acg Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 115 120 125

<210> 2 <211> 128 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Construto sintético <400> 2

Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala 15 10 15

Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val 20 25 30

Thr Pro Gly Glu Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile 35 40 45

Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys 50 55 60

192

240

288

336

384 Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg 65 70 75 80

Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser 85 90 95

Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg 100 105 110

Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 115 120 125

<210> 3 <211> 384 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Cadeia Leve-D 19D12/15H12 modificada

<220>

<221> CDS <222> (1) .. (384)

<400> 3

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ctt ctc ate aag tat gea tcc cag tcc ctc tca ggg gtc ccc tcg agg 240 Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Val Pro Ser Arg 65 70 75 80

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ctc gag gct gaa gat ttc gea gtg tat tac tgt cat cag agt agt cgt Leu Glu Ala Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg 100 105 110

<210> 4 <211> 128 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Construto sintético <4 00> 4

Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala

1 5 10 15

Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ser Val 20 25 30

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Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys 50 55 60

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85 90 95

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288

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<210> 5 <211> 384 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Cadeia Leve-E 19D12/15H12 modificada <220>

<221> CDS

<222> (1) .. (384)

<400> 5

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1 5 10 15

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<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Construto sintético <4 00> 6

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<213> Seqüência Artificial

384 <220>

<223> Cadeia Leve-F 19D12/15H12 <220>

<221> CDS <222> (1) .. (384)

<4 00> 7

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Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val 20 25 30

tet cca ggc gag aga gcc acc ctc tcc tgc cgg gcc agt cag age att 144

Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile 35 40 45

ggt agt age tta cac tgg tac cag cag aaa cca ggt cag gct cca agg 192

Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg 50 55 60

ctt ctc ate aag tat gea tcc cag tcc ctc tca ggg ate ccc gat agg 240

Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg 65 70 75 80

ttc agt ggc agt gga tet ggg aca gat ttc acc ctc acc ate agt aga 288

Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg 85 90 95

ctg gag cct gaa gat ttc gea gtg tat tac tgt cat cag agt agt cgt 336

Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg 100 105 110

tta cct cac act ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag ate aaa cgt aca 384

Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr

115 120 125

<210> 8 <211> 128 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Construto sintético

<400> 8

Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala 15 10 15

Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Val 20 25 30

Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile 35 40 45

Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg 50 55 60

Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Leu Ser Gly Ile Pro Asp Arg 65 70 75 80

Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg 85 90 95

Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Arg 100 105 110

Leu Pro His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 115 120 125

<210> 9 <211> 411 <212> DNA <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Cadeia pesada-A 19D12/15H12 <220>

<221> CDS

<222> (1)..(411)

<400> 9

atg gag ttt ggg ctg age tgg gtt ttc ctt gtt gct ata tta aaa ggt 48 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly 15 10 15

gtc cag tgt gag gtt cag ctg gtg cag tet ggg gga ggc ttg gta aag 96

Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys 20 25 30

cct ggg ggg tcc ctg aga ctc tcc tgt gea gcc tet gga ttc acc ttc 144

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

agt age ttt gct atg cac tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg 192

Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

gag tgg ata tca gtt att gat act cgt ggt gcc aca tac tat gea gac 240

Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp 65 70 75 80

tcc gtg aag ggc cga ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc 288

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 85 90 95

ttg tat ctt caa atg aac age ctg aga gcc gag gac act gct gtg tat 336

Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 100 105 110

tac tgt gea aga ctg ggg aac ttc tac tac ggt atg gac gtc tgg ggc 384

Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly 115 120 125

caa ggg acc acg gtc acc gtc tcc tca 411

Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135

<210> 10 <211> 137 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Construto sintético <4 00> 10

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val I

Val Gln Cys

‘ 5

Pro Gly

Ser Ser 50

Glu Trp 65

Ser Val Leu Tyr

15

Tyr Cys

Gln Gly 130

20

25

30

Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly 10 15

Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys 30

Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 45

Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 60

Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp 75 80

Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 90 95

Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 105 110

Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly 125

Ser

modificada

atg gag ttt ggg ctg age tgg gtt ttc ctt gtt gct ata tta aaa ggt 48

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly 10 15

5

Glu Val Gln Leu Val 20

Gly Ser Leu Arg Leu Ser 35 40

Phe Ala Met His Trp Val 55

Ile Ser Val Ile Asp Thr 70

Lys Gly Arg Phe Thr Ile 85

Leu Gln Met Asn Ser Leu 100

Ala Arg Leu Gly Asn Phe 115 120

Thr Thr Val Thr Val Ser 135

<210> 11 <211> 411 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Cadeia pesada-B 19D12/15H12 <220>

<221> CDS <222> (1)..(411)

<400> 11 gtc cag tgt gag gtt cag ctg gtg cag tet ggg gga ggc ttg gta cag 96

Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30

ccc ggg ggg tcc ctg aga ctc tcc tgt gea gcc tet gga ttc acc ttc 144

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

agt age ttt gct atg cac tgg gtt cgc cag gct cca gga aaa ggt ctg 192

Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

gag tgg ata tca gtt att gat act cgt ggt gcc aca tac tat gea gac 240

Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp 65 70 75 80

tcc gtg aag ggc cga ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc 288

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 85 90 95

ttg tat ctt caa atg aac age ctg aga gcc gag gac act gct gtg tat 336

Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 100 105 110

tac tgt gea aga ctg ggg aac ttc tac tac ggt atg gac gtc tgg ggc 384

Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly 115 120 125

caa ggg acc acg gtc acc gtc tcc tca 411

Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135

<210> 12 <211> 137 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Construto sintético <400> 12 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly I 5 10 ■ 15

Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

Ser Ser Phe Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

Glu Trp Ile Ser Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp 65 70 75 80

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 85 90 95

Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 100 105 110

Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly 115 120 125

Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135

<210> 13 <211> 174 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina <400> 13

Gly Arg Leu Gly Gln Ala Trp Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 15 10 15

Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala 20 25 30

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser 35 40 45 Thr Arg Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 50 55 60 Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 65 70 75 80

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr

85 90 95

Phe Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Cys Ala

165 170

<210> 14 <211> 124 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina <400> 14

Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser

1 5 10 15

Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala 20 25 30

Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 35 40 45

Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Thr Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Thr Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Lys Asp Leu Gly Trp Ser Asp Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp

*

100 105 110

Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 15 <211> 112 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina

<400> 15

Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr 15 10 15

Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Asn Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln 20 25 30

Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Arg Ile Tyr Thr Ser Gly 35 40 45

Ser Pro Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Met Ser Val 50 55 60

Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala 65 70 75 80

Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Thr Ile Phe Gly Val Val 85 90 95

Ile Ile Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 100 105 110

<210> 16

<211> 125 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina <4 00> 16

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Lys Asp Leu Gly Tyr Gly Asp Phe Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met 100 105 110

Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 125

<210> 17 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina <400> 17

Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val 15 10 15

Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro 20 25 30 Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser

40 45

Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp

50 55 60

Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala 65 70 75 80

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Tyr Ser Ser Ser Phe Tyr 85 90 95

Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

100 105 110

Ser <210> 18

<211> 122

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina

<400> 18

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 19 <211> 136 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável da cadeia leve de imunoglobulina <400> 19

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Phe Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp 15 10 15

Ile Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 20 25 30

Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser 35 40 45

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser 50 55 60

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn 65 70 75 80

Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Glu Val Glu Ile Ile Arg

85 90 95

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 100 105 110

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 115 120 125

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp 130 135

<210> 20 <211> 107

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220> <223> Região variável da cadeia leve de imunoglobulina <4 00> 20

Asp Ile Gln Met Thr Gln Phe Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Arg Leu His Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Cys 85 90 95

Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105

<210> 21 <211> 100 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável da cadeia leve de imunoglobulina <400> 21

Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Phe Thr Cys Arg

1 5 10 15

Ala Ser Gln Asp Ile Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 20 25 30

Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser 35 40 45

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr 50 55 60 Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 65 70 75 80

Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Glu Val 85 90 95

Glu Ile Ile Arg 100

<210> 22 <211> 107 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável da cadeia leve de imunoglobulina <400> 22

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Ser Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Lys Leu His Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Gln Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105

<210> 23 <211> 92

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220> <223> Região variável da cadeia leve de imunoglobulina <400> 23

Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr 15 10 15

Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu 20 25 30

Ile His Val Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 35 40 45

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln 50 55 60

Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Asn Ala Pro 65 70 75 80

Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 85 90

<210> 24 <211> 91 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável da cadeia leve de imunoglobulina <400> 24

Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr 15 10 15

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

20 25 30

Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly

40 45

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro 50 55 60

Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg 65 70 75 80 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 85 90

<210> 25 <211> 236 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Imunoglobulina de cadeia leve <400> 25

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1-5 10 15

Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30

Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45

Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60

Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr

85 90 95

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110

His Asn Ser Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235

<210> 26 <211> 236

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Imunoglobulina de cadeia leve

<400> 26

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 15 10 15

Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30

Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Phe Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45

Gln Asp Ile Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60

Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 85 90 95

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110

His Asn Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Glu Val Glu Ile 115 120 125 Ile Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

165 170 175

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235

<210> 27 <211> 236 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Imunoglobulina de cadeia leve <400> 27

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 15 10 15

Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30

Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45

Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60

Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 85 90 95

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110

His Asn Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile 115 120 125

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 28 <211> 236 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220> <223> Imunoglobulina de cadeia leve <400> 28 Met Asp ' Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu 1 5 10 15 Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Phe Pro Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45

Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60

Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu His Arg Gly Val 65 70 75 80

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 85 90 95

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110

His Asn Ser Tyr Pro Cys Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile 115 120 125

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe "Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235

<210> 29 <211> 473 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 29

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Ile Lys Gly 15 10 15

Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala 65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95

Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leü Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Leu Arg Phe Leu Glu Trp Leu Leu Tyr Tyr

115 120 125

Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr

130 135 140

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

145 150 155 160

Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

165 170 175 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

180 185 190

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 195 200 205

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly

210 215 220

Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

225 230 235 240 Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys 245 250 255

Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 260 265 270

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 275 280 285

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 290 295 300

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 305 310 315 320

Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His 325 330 335

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 340 345 350

Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln 355 360 365

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met 370 375 380

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 385 390 395 400

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 405 410 415

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 420 425 430

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val 435 440 445

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 450 455 460

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470

<210> 30 <211> 470 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 30

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Ile Lys Gly 15 10 15

Val Gln Cys Gln Ala Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Arg Asp Tyr Ala 65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95

Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110

Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr Phe Tyr Tyr Tyr Tyr 115 120 125

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135 140

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 145 150 155 160

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 165 170 175

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 180 185 190

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 195 200 205 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 210 215 220

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 225 230 235 240

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

245 250 255

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp

325 330 335

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 350

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

405 410 415

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470

<210> 31 <211> 470 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 31

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly 15 10 15

Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala 65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn

85 90 95

Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110

Tyr Tyr Cys Ala Lys Gly Tyr Ser Ser Gly Trp Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr 115 120 125

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135 140

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 145 150 155 160

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

165 170 175 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 180 185 190

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 195 200 205

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 210 215 220

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 225 230 235 240

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 325 330 335

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 350

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn HisTyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460

Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470

<210> 32 <211> 470 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 32

Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly

1 5 10 15

Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45

Ser Ser Tyr Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60

Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Thr Thr Phe Tyr Ala 65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Thr 85 90 95

Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110

Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Leu Gly Trp Ser Asp Ser Tyr Tyr Tyr Tyr 115 120 125

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135 140 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg

145 150 155 160

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

165 170 175

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

180 185 190

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

195 200 205

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr

210 215 220

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 225 230 235 240

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 325 330 335

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 350

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460

Ser Leu Ser Pro Gly Lys 4 65 470 <210> 33 <211> 470 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220> <223> Cadeia pesada de imunoglobulina de 2. ,12.1 . fx <400> 33 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Ile 1 5 10 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45 Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Arg 15

30

65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95

Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr Phe Tyr Tyr Tyr Tyr 115 120 125

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135 140

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 145 150 155 160

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 165 170 175

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 180 185 190

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 195 200 205

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 210 215 220

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 225 230 235 240

Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255

Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320

Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 325 330 335

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 350

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

405 410 415

Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460

Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470

<210> 34

<211> 125 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina matura de 2.12.1 fx <4 00> 34

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Arg Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr Phe Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met 100 105 HO

Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 125

<210> 35 <211> 236 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Cadeia leve de imunoglobulina de 2.12.1 fx <4 00> 35

Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp

1 5 10 15

Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30

Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45

Gln Asp Ile Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60

Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80

Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr a5 90 95

Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110

His Asn Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

180 185 190

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

195 200 205

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

210 215 220

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235

<210> 36 <211> 108 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia leve de imunoglobulina matura de 2.12.1 fx <400> 36

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Arg Arg Asp 20 25 30

Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Arg

85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105

<210> 37 <211> 112 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia leve de imunoglobulina 7C10 humanizada; versão 1 <4 00> 37

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Gln Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Leu Tyr Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110

<210> 38 <211> 112 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia leve de imunoglobulina 7C10 humanizada; versão 2 <4 00> 38 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 15 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Gln Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Leu Tyr Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110

<210> 39 <211> 117 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina 7C10 humanizada; versão 1 <4 00> 39

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 15 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Gly Gly 20 25 30

Tyr Leu Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45

Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Asn Tyr Lys Pro Ser Leu 50 55 60

Lys Asp Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser 65 70 75 80 Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr Gly Arg Val Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 40 <211> 117 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina 7C10 humanizada versão 2 <400> 40

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Gly Gly 20 25 30

Tyr Leu Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Asn Tyr Lys Pro Ser Leu 50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser 65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr Gly Arg Val Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 41 <211> 117 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina 7C10 humanizada; versão 3

<400> 41

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 15 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Ser Gly Gly

20 25 30

Tyr Leu Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Asn Tyr Lys Pro Ser Leu 50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr Gly Arg Val Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 42 <211> 130 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina A12 <400> 42

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser 15 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Ala Pro Leu Arg Phe Leu Glu Trp Ser Thr Gln Asp His Tyr 100 105 110

Tyr Tyr Tyr Tyr Met Asp Val Trp Gly Lys Gly Thr Thr Val Thr Val 115 120 125

Ser Ser 130 <210> 43 <211> 109 <212> PRT 20 <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia leve de imunoglobulina A12 <400> 43

Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln

1 5 10 15

Thr Val Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala 20 25 30

Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr

40 45

Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60 Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu 65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Asn Ser Asp Asn Arg 85 90 95

Leu Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Ser 100 105

<210> 44 <211> 119 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de cadeia pesada de imunoglobulina IA <220>

<221> região de interesse biológico <222> (1)..(119)

<223> Mutações possíveis: R30, S30, N31, S31, Y94, H94, D104, E104. <400> 44

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Arg Asn Tyr 20 25 30

Ala Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala Ile Gly Ser Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Ala Pro Asn Trp Gly Ser Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 45 <211> 107 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável da cadeia leve de imunoglobulina IA <220>

<221> região de interesse biológico <222> (1)..(107)

<223> mutações possíveis: P96, 196, P100, Q100, R103, K103, V104, L104, D105, E105 <4 00> 45

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp 20 . 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Lys Ala Pro Lys Ser Leu Ile 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys 100 105

<210> 46 <211> 251 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> cadeia simples fv 8A1 <400> 46

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Gly Pro Gly Tyr Asn Phe Phe Asn Tyr 20 25 30

Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Ile Ile Tyr Pro Thr Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60

Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Ser Ile Arg Tyr Cys Pro Gly Gly Arg Cys Tyr Ser Gly Tyr 100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 125

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser 130 135 140

Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val 145 150 155 160

Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala Ser Trp 165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Gly Lys 180 185 190

Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser 195 200 205

Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu 210 215 220 Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Val 225 230 235 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 245 250 <210> 47 <211> 245 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220> <223> cadeia simples fv 9Α2 <400> 47 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Arg Lys Pro Gly I 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Arg Asn 20 25 30 Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Gly Arg Ile Ser Gly His Tyr Gly Asn Thr Asp His Ala Gln Lys 50 55 60 Gln Gly Arg Phe Thr Met Thr Lys Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala 65 70 75 Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Ala Arg Ser Gln Trp Asn Val Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Leu 100 105 110 Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 115 120 125 Gly Gly Ser Ala Leu Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val 130 135 140 Glu Ser Pro Gly Lys Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser Ser 145 150 155 240

80

160 Ser Ile Ala Ser Asn Tyr Val Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser 165 170 175

Ser Pro Thr Thr Val Ile Phe Glu Asp Asn Arg Arg Pro Ser Gly Val 180 185 190

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ile Asp Thr Ser Ser Asn Ser Ala Ser 195 200 205

Leu Thr Ile Ser Gly Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 210 215 220

Gln Ser Phe Asp Ser Thr Asn Leu Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys 225 230 235 240

Val Thr Val Leu Gly 245

<210> 48 <211> 245 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> cadeia simples fv 11Α4 <4 00> 48

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly I 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95 Ala Ser Ser Pro Tyr Ser Ser Arg Trp Tyr Ser Phe Asp Pro Trp Gly 100 105 110

Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Leu Ser Tyr Glu Leu Thr Gln 130 135 140

Pro Pro Ser Val Ser Val Ser Pro Gly Gln Thr Ala Thr Ile Thr Cys 145 150 155 160

Ser Gly Asp Asp Leu Gly Asn Lys Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys 165 170 175

Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr Gln Asp Thr Lys Arg Pro 180 185 190

Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Ile Ala 195 200 205

Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Val Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr 210 215 220

Cys Gln Val Trp Asp Thr Gly Thr Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys 225 230 235 240

Leu Thr Val Leu Gly

245

<210> 49

<211> 251

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> cadeia simples fv 7Α4 <400> 49

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 15 10 15

Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asn Phe Phe Asn Tyr 20 25 30 Trp Xle Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Asp Leu Glu Trp Met 35 40 45

Gly Ile Ile Tyr Pro Thr Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe 50 55 60

Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Ser Ile Arg Tyr Cys Pro Gly Gly Arg Cys Tyr Ser Gly Tyr 100 105 110

Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 125

Gly Gly Gly Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ser 130 135 140

Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val 145 150 155 160

Arg Ile Thr Cys Arg Gly Asp Ser Leu Arg Asn Tyr Tyr Ala Ser Trp 165 170 175

Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr Gly Lys 180 185 190

Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser 195 200 205

Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu 210 215 220

Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Met Val 225 230 235 240

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 245 250

<210> 50 <211> 249 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> cadeia simples fv IlAl <4 00> 50

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe 20 25 30

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ile Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45

Ser Gly Leu Arg His Asp Gly Ser Thr Ala Tyr Tyr Ala Gly Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Val Tyr 65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Thr Gly Ser Gly Ser Ser Gly Pro His Ala Phe Pro Val Trp Gly 100 105 110

Lys Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 115 120 125

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Leu Ser Tyr Val Leu Thr Gln 130 135 140

Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys 145 150 155 160

Ser Gly Ser Asn Ser Asn Ile Gly Thr Tyr Thr Val Asn Trp Phe Gln 165 170 175

Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Asn Asn Gln 180 185 190

Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr 195 200 205

Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln Ser Glu Asp Glu Ala Asp 210 215 220 Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Pro Val Phe 225 '230 235 Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly 245 <210> 51 <211> 251 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220> <223> cadeia simples fv 7A6 <4 00> 51 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly 1 5 10 15 Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asn Phe Phe Asn 20 25 30 Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Gly Ile Ile Tyr Pro Thr Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser 50 55 60 Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala 65 70 75 Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr 85 90 95 Ala Arg Ser Ile Arg Tyr Cys Pro Gly Gly Arg Cys Tyr Ser Gly 100 105 110 Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 115 120 125 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 130 135 140 Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr 145 150 155 Arg Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Thr Asn Trp 165 170 175

Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Leu Leu Val Val Tyr Ala Lys 180 185 190

Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser 195 200 205

Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu 210 215 220

Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg Asp Ser Ser Gly Asn His Val Val 225 230 235 240

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 245 250

<210> 52 <211> 5 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> CDR <400> 52 Ser Tyr Trp Met His 1 5

<210> 53 <211> 17 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> CDR <400> 53

Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Arg

<210> 54 <211> 15 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> CDR <400> 54

Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp Val 15 10 15

<210> 55 <211> 16 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> CDR <4 00> 55

Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu 15 10 15

<210> 56 <211> 7 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> CDR <4 00> 56 Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser 1 5

<210> 57 <211> 9 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> CDR <400> 57

Phe Gln Gly Ser His Val Pro Pro Thr I 5

<210> 58 <211> 123 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220> <223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 58 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly 1 5 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Gln Lys 50 55 60 Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala 65 70 75 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe 100 105 110 Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 115 120 <210> 59

<211> 118

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 59

Gln Val Gln Phe Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Leu Met His Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Asn Val Val Thr Lys Phe Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Pro Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr Ala Tyr Cys Arg Pro Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110

Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 60 <211> 123 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 60

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Arg Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Phe 85 90 95

Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp 100 105 110

Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 115 120

<210> 61 <211> 120 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 61

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Gly Thr His Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Lys Ser Ser Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Gly His Ser Tyr Tyr Phe Tyr Asp Gly Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 62 <211> 120 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <4 00> 62

Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ser Val Leu Val Arg Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser

20 25 30

Trp Ile His Trp Ala Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile His Pro Asn Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Val Asp Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Trp Arg Tyr Gly Ser Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110

Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 63 <211> 120 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 63

Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 15 10 15 Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Pro Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110

Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 64

<211> 123 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 64

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60

Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Phe 85 90 95

Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp 100 105 110

Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 115 120

<210> 65 <211> 124 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <4 00> 65

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Arg Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Phe 85 90 95

Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp 100 105 110

Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 66

<211> 124 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 66

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60

Gln Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Phe

85 90 95

Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp 100 105 110

Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 67 <211> 120 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 67

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile

40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Pro Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Tyr Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 68 <211> 117 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 68

Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30

Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95 Ala Arg Gly Gly Lys Phe Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115

<210> 69

<211> 124 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 69

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Arg Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Phe 85 90 95

Ala Arg Gly Arg Pro Asp Tyr Tyr Gly Ser Ser Lys Trp Tyr Phe Asp 100 105 110

Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 70 <211> 120 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220> <223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 70

Gln Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr 20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Met Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Trp Ile Asp Pro Gly Ser Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95

Ala Arg Glu Lys Thr Thr Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ala 115 120

<210> 71 <211> 115 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 71

Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala Ser 15 10 15

Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Asp Tyr Trp 20 25 30

Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr Asn Tyr His Glu Arg Phe Lys 50 55 60

Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met 65 70 75 80

Gln Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Gly Val Tyr Tyr Cys Leu

85 90 95

His Gly Asn Tyr Asp Phe Asp Gly Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr 100 105 110

Val Ser Ser

115

<210> 72

<211> 120

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia pesada <400> 72

Gln Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala 15 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Phe 20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Gly Thr His Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Lys Ser Ser Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Ala Arg Gly His Ser Tyr Tyr Phe Tyr Asp Gly Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120

<210> 73 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 73

Asp Val Leu Met Thr Gln Ile Pro Val Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ile Ile Val His Asn 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 74 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 74 Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

5 Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 10 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

15 Arg

<210> 75 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial 20 <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 75

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

. 25 Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 76 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 76

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 77 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220> <223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 77

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 78 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <220>

<221> região de interesse biológico <222> (28) .. (28)

<223> Xaa pode ser qualquer aminoácido de ocorrência natural <220>

<221> região de interesse biológico

<222> (101).. (101)

<223> Xaa pode ser qualquer aminoácido de ocorrência natural <4 00> 78 Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Xaa Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Xaa Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 79 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 79

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 80 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <4 00> 80

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg <210> 81 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220> <223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 81

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg <210> 82 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 82

Asp Val Leu Met Thr Gln Ile Pro Val Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ile Ile Val His Asn 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 83 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 83

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Phe Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Ser Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 84 <211> 113 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 84

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 85 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <4 00> 85

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 86 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <4 00> 86

Glu Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Thr Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asp Thr Tyr Leu Asp Trp Phe Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

Arg

<210> 87 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 87

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg <210> 88 <211> 113 <212> PRT 25 <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 88

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30 Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 89 <211> 113 <212> PRT <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 89

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Val Ser Leu Ser Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Thr Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Ile Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Ala 85 90 95

Ser His Ala Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 Arg

<210> 90

<211> 113

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve

<400> 90

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Ser Gly Asn Thr Tyr Phe Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Ile Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 91 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 91

Asp Ile Glu Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15 Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 - 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 92 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 92

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 .55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95 Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 93 <211> 113

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 93

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 94

<211> 113

<212> PRT

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <4 00> 94 Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly .1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 95 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 95

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Val Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 96 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 96

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Asn Gln Thr Ile Leu Leu Ser 20 25 30

Asp Gly Asp Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 97 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220> <223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 97

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Thr Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Thr Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Thr His Ala Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 98 <211> 113 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável de Imunoglobulina de cadeia leve <400> 98

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 15 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser 20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ile Ser Ser Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80

Ser Arg Val Gln Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly 85 90 95

Ser His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr.Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110

Arg

<210> 99 <212> DNA <213> Seqüência Artificial <220>

<223> Iniciador <4 00> 99

ctccgcttcc tttc 14

<210> 100

<211> 18

<212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> anti-sentido

<400> 100

atctctccgc ttcctttc 18

<210> 101

<211> 18

<212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> anti-sentido

<400> 101

atctctccgc ttcctttc 18

<210> 102

<211> 19 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Iniciador

<400> 102

aggagctcga ggcgttcag 19

<210> 103

<211> 22

<212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Iniciador

<4 00> 103

gtcttgggtg ggtagagcaa tc 22

<210> 104 <211> 21 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Inieiador <400> 104

aggccaaacg tcaccgtccc c 21

<210> 105 <211> 109 <212> PRT

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Região variável da cadeia leve de imunoglobulina A12 <400> 105

Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gln 15 10 15 Thr Val Arg He Thr Cys Gln Gly Asp Ser Leu Arg Ser Tyr Tyr Ala 20 25 .30

Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Ile Leu Val Ile Tyr 35 40 45

Gly Glu Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60

Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Thr Gly Ala Gln Ala Glu 65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Lys Ser Arg Asp Gly Ser Gly Gln His 85 90 95

Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 100 105

<210> 106 <211> 22 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> IGFIR/Iniciador de avanço <400> 106

gaaagtgacg tcctgcattt ca 22

<210> 107 <211> 19 <212> DNA

<213> Seqüência Artificial

<220>

<223> IGFIR/Iniciador reverso <400> 107

ccggtgccag gttatgatg 19

<210> 108 <211> 23

<212> DNA

<213> Seqüência Artificial <220>

<223> Seqüência de sonda <400> 108

caccaccacg tcgaagaatc gca 23

Claims

1. Método para tratamento ou prevenção à condição médica, em um indivíduo mamífero, selecionado a partir do grupo consistindo em câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de célula escamosa, mieloma múltiplo, plasmacitoma solitário, câncer de célula renal, retinoblastoma, tumores de célula de germe, hepatoblastoma, carcinoma hepatocelular, melanoma, tu- mor rabidoide do rim, Sarcoma de Ewing, condrossarcoma, malignidade he- motológica, leucemia linfoblástica crônica, leucemia mielomonocítica crônica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfoblástica aguda da linhagem de célula T, leucemia linfoblástica aguda da linhagem de precursor de célula B, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia mieloblásti- ca aguda, leucemia mieloblástica crônica, doença de Hodgekin, Iinfoma de não-Hodgekin, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielógena crônica, sín- drome mielodisplástica, leucemia de célula capilar, leucemia de célula de mastro, neoplasma de célula de mastro, Iinfoma folicular, Iinfoma de célula grande difusa, Iinfoma de célula de revestimento, Linfoma de Burkitt, fungoi- des de micose, síndrome de "seary", Iinfoma de célula T cutânea, distúrbios mieloproliferativos crônicos, tumor do sistema nervoso central, câncer do cérebro, glioblastoma, câncer do cérebro de não-glioblastoma, meningioma, adenoma pituitário, schwanoma vestibular, um tumor neuroctodermal primiti- vo, meduloblastoma, astrocitoma, astrocitoma anaplástico, oligodendroglio- ma, ependimoma, papiloma de plexo coroidal, um distúrbio mieloproliferati- vo, policitemia vera, trombocitemia, mielfibrose idiopática, sarcoma de tecido macio, câncer da tireoide, câncer endometrial, câncer carcinoide, tumor de célula de germe e câncer do fígado compreendendo administrar uma quanti- dade terapeuticamente efetiva de um anticorpo isolado ou fragmento de liga- ção de antígeno deste, compreendendo CDR-H1, CDR-H2 e CDR-H3 de uma imunoglobulina de cadeia pesada compreendendo a seqüência de ami- noácido colocada em SEQ ID N0: 10; ou CDR-L1, CDR-L2 e CDRL3 a partir de uma imunoglobulina de cadeia leve compreendendo a seqüência de ami- noácido colocada em SEQ ID N0: 8; ou ambas ao indivíduo.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual a condição médica é um membro selecionado a partir do grupo consistindo em: leucemia linfoblástica aguda da linhagem de precursor de célula B; leucemia linfoblástica aguda da linhagem de célula T; leucemia linfocítica aguda; leucemia mieloblástica aguda; astrocitoma anaplástico; astrocitoma; Linfoma de Burkitt; câncer carcinoide; tumor do sistema nervoso central; Condrossarcoma; papiloma de plexo de coroide; leucemia linfoblástica crônica; leucemia linfocítica crônica; leucemia mieloblástica crônica; leucemia mielógena crônica; leucemia mielomonocítica crônica; distúrbios mieloproliferativos crônicos; Iinfoma de célula T cutânea; Iinfoma de célula grande difusa; câncer endometrial; ependimoma; Iinfoma folicular; tumor de célula de germe; tumores de célula de germe; glioblastoma; leucemia de célula capilar; câncer de cabeça e pescoço; hepatoblastoma; carcinoma hepatocelular; doença de Hodgekin; mielfibrose idiopática; Iinfoma de célula de revestimento; leucemia de célula de mastro; neoplasma de célula de mastro; meduloblastoma; melanoma; meningioma; fungoides de micose; distúrbio mieloproliferativo; câncer do cérebro de não-glioblastoma; Iinfoma de não-Hodgekin; oligodendroglioma; adenoma pituitário; policitemia vera; tumor neuroctodermal primitivo; tumor rabidoide do rim; síndrome de "seary"; sarcoma de tecido macio; plasmacitoma solitário; carcinoma de célula escamosa; trombocitemia; câncer da tireoide; e schwanoma vestibular.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual o anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste é um anticorpo compreendendo (i) CDR-L1 compreendendo a seqüência de aminoácido: RASQ- SIGSSLH; e CDR-L2 compreendendo a seqüência de aminoácido: YASQS- LS; e CDR-L3 compreendendo a seqüência de aminoácido: HQSSRLPHT; ou (ii) CDR-H1 compreendendo a seqüência de aminoácido: SFAMH; e CDR-H2 compreendendo a seqüência de aminoácido: VIDTRGATY- YADSVKG; e CDR-H3 compreendendo a seqüência de aminoácido: LGNFYYGMDV; ou ambos (i) e (ii).

4. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual o anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno deste é um anticorpo monoclonal com- preendendo uma região variável de imunoglobulina de cadeia leve compre- endendo aminoácidos 20-128 de SEQ ID N0: 8; e uma região variável de i- munoglobulina de cadeia pesada compreendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual o inibidor é um anticorpo no qual referido anticorpo compreende: (a) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoá- cidos 20-128 de SEQ ID N0: 2 e uma região variável de cadeia pesada com- preendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12; ou (b) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoá- cidos 20-128 de SEQ ID N0: 4 e uma região variável de cadeia pesada com- preendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12; ou (c) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoá- cidos 20-128 de SEQ ID N0: 6 e uma região variável de cadeia pesada com- preendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12; ou (d) uma região variável de cadeia leve compreendendo aminoá- cidos 20-128 de SEQ ID N0: 8 e uma região variável de cadeia pesada com- preendendo aminoácidos 20-137 de SEQ ID N0: 10 ou 12.

6. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual o anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno é administrado em associação com um ou mais agentes quimioterápicos adicionais, ou uma composição farmacêu- tica dos mesmos.

7. Método, de acordo com a reivindicação 6, no qual o agente quimioterápico adicional é um agente anticâncer, um agente antiemético, um agente anti-anêmico ou um agente anti-mucosite.

8. Método, de acordo com a reivindicação 6, no qual o agente quimioterápico adicional é um ou mais membros selecionados a partir do grupo consistindo em everolimus, trabectedin, abraxano, TLK 286, AV-299, DN-101, pazopanib, GSK690693, RTA 744, ON 0910.Na, AZD 6244 (ARRY- 142886), AMN-107, TKI-258, GSK461364, AZD 1152, enzastaurin, vandeta- nib, ARQ-197, MK-0457, MLN8054, PHA-739358, R-763, AT-9263, um inibi- dor de FLT-3, um inibidor de VEGFR, um inibidor de EGFR TK, um inibidor de aurora quinase, um modulador de PIK-1, um inibidor de Bcl-2, um inibidor de HDAC, um inibidor de c-MET, um inibidor de PARP, um inibidor de Cdk, um inibidor de TK, um inibidor de IGFR-TK, um anticorpo anti-HGF, inibido- res de PI3 quinase, um inibidor de AKT, um inibidor de JAK/STAT, um inibi- dor de checkpoint-1 ou 2, um inibidor de quinase de adesão focal, um inibi- dor de Map quinase (mek), um anticorpo de armadilha de VEGF, pemetre- xed, erlotinib, dasatanib, nilotinib, decatanib, panitumumab, amrubicin, ore- govomab, Lep-etu, nolatrexed, azd2171, batabulin, ofatumumab, zanolimu- mab, edotecarin, tetrandrina, rubitecan, tesmilifeno, oblimersen, ticilimumab, ipilimumab, gossypol, Bio 111, 131-I-TM-601, ALT-110, BIO 140, CC 8490, cilengitide, gimatecan, IL13-PE38QQR, INO 1001, IPdR, KRX-0402, Iucan- tona, LY 317615, neuradiab, vitespan, Rta 744, Sdx 102, talampanel, atra- sentan, Xr 311, romidepsin, ADS-100380, <formula>formula see original document page 197</formula> <formula>formula see original document page 198</formula> , vorinostat, etoposide, gemcita- bina, doxorrubicin, Iipossomal doxorrubicin, 5'-deóxi-5-fluorouridina, vincristi- na, temozolomida, ZK-304709, seliciclib; PD0325901, AZD-6244, capecitabi- na, ácido L-Glutâmico, N -[4-[2-(2-amino-4,7-di-hidro-4-oxo-1H -pirrolo[2,3- d]pirimidin-5-il)etil]benzoil]-, sal de disódio, heptahidrato, camptothecin, irino- tecan; uma combinação de irinotecan, 5-fluorouracil e leucovorin; irinitecan rotulado com PEG1 regime FOLFOX, tamoxifen, toremifeno citrato, anastra- zole, exemestano, Ietrozole1 DES(dietilstilbestrol), estradiol, estrogênio, es- trogênio conjugado, bevacizumab, IMC-1C11, CHIR-258, <formula>formula see original document page 198</formula> ); 3-[5-(metilsulfonilpiperadinametil)-indolil]- quinolona, vatalanib, AG-013736, AVE-0005, o sal de acetato de [D-Ser(Bu t) 6, Azgly 10] (piro-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bu t)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH2 acetato [C59H84N18O14 (C2H4O2) x onde x = 1 a 2,4], goserelin acetato, Ieu- prolida acetato, triptorelin pamoato, sunitinib, sunitinib malato, medroxipro- gesterona acetato, hidroxiprogesterona caproato, megestrol acetato, raloxi- feno, bicalutamida, flutamida, nilutamida, megestrol acetato, CP-724714; TAK-165, HKI-272, erlotinib, lapatanib, canertinib, anticorpo ABX-EGF, erbi- <formula>formula see original document page 199</formula> tux,EKB-569,PKI-166,GW-572016,lonafarnib, <formula>formula see original document page 199</formula> BMS-214662,tipifarnib;amifostina,NVP- LAQ824, suberoil analida ácido hidroxâmico, ácido valpróico, tricostatin A, FK-228, SU11248, sorafenib, KRN951, aminoglutetimida, amsacrina, ana- grelida, L-asparaginase, vacina de Bacillus Calmette-Guerin (BCG)1 bleomy- cin, buserelin, busulfan, carboplatin, carmustina, clorambucil, cisplatin, cla- dribina, clodronato, ciclofosfamida, ciproterona, citarabina, dacarbazina, dac- tinomicin, daunorrubicin, dietilstilbestrol, epirrubicin, fludarabina, fludrocorti- sona, fluoximesterona, flutamida, hidroxiureia, idarrubicin, ifosfamida, imati- nib, leucovorin, leuprolida, levamisole, lomustina, mecloretamina, melphalan, 6-mercaptopurine, mesna, metotrexato, mitomicin, mitotano, mitoxantrona, nilutamida, octreotida, oxaliplatin, satraplatin pamidronato, pentostatin, pli- camicin, porfimer, procarbazina, raltitrexed, rituximab, streptozocin, teniposi- da, testosterona, talidomida, tioguanina, tiotepa, tretinoin, vindesina, 13-cis- ácido retinóico, fenilalanina mostarda, uracil mostarda, estramustina, altre- tamina, floxuridina, 5-deooxiuridina, citosina arabinoside, 6-mecaptopurina, deoxicoformicin, calcitriol, valrubicin, mitramicin, vinblastina, vinorelbina, to- potecan, razoxin, marimastat, COL-3, neovastat, BMS-275291, esqualamina, endostatin, SU5416, SU6668, EMD121974, interleukin-12, IM862, angiosta- tin, vitaxin, droloxifeno, idoxifeno, espironolactona, finasterida, cimitidina, trastuzumab, denileukin diftitox, gefitinib, bortezimib, paclitaxel, cremofor- Iivre paclitaxel, docetaxel, epitilona B, BMS-247550, BMS-310705, droloxife- no, 4-hidroxitamoxifen, pipendoxifeno, ERA-923, arzoxifeno, fulvestrant, a- colbifeno, lasofoxifeno, idoxifeno, TSE-424, HMR-3339, ZK186619, topote- can, PTK787/ZK 222584, VX-745, PD 184352, rapamicin, 40-0-(2- hidroxietil)-rapamicin, temsirolimus, AP-23573, RAD001, ABT-578, BC-210, LY294002, LY292223, LY292696, LY293684, LY293646, wortmannin, ZM336372, L-779,450, PEG-filgrastim, darbepoetin, 5-fluorouracil, eritropoie- tin, fator de estimulação de colônia de granulócito, zolendronato, prednisona, cetuximab, fator de estimulação de colônia de macrófago granulócito, histre- lin, interferon alfa-2a pegilatado, interferon alfa-2a, interferon alfa-2b pegila- tado, interferon alfa-2b, azacitidina, PEG-L-asparaginase, lenalidomida, gem- tuzumab, hidrocortisona, interleukin-11, dexrazoxana, alemtuzumab, ácido transretinóico total, cetoconazole, interleukin-2, megestrol, globulina imune, nitrogênio mostarda, metilprednisolona, ibritgumomab tiuxetan, androgens, decitabina, hexametilmelamina, bexaroteno, tositumomab, trióxido de arsêni- co, cortisona, editronato, mitotano, ciclosporina, daunorrubicin lipossomal, Edwina-asparaginase, strontium 89, casopitant, netupitant, antagonistas de receptor de NK-1, palonosetron, aprepitant, difenhidramina, hidroxizina, me- toclopramida, lorazepam, alprazolam, haloperidol, droperidol, dronabinol, dexametasona, metilprednisolona, proclorperazina, granisetron, ondanse- tron, dolasetron, tropisetron, pegfilgrastim, eritropoietin, epoetin alfa e darbe- poetin alfa.

9. Método, de acordo com a reivindicação 6, no qual o anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno e o agente quimioterápico adicional são administrados simultaneamente.

10. Método, de acordo com a reivindicação 6, no qual o anticor- po ou fragmento de ligação de antígeno e o agente quimioterápico adicional são administrados não-simultaneamente.

11. Método, de acordo com a reivindicação 4, no qual a imuno- globulina de cadeia leve é ligada a uma região constante de imunoglobulina kappa; e a imunoglobulina de cadeia pesada é ligada a uma região constan- te de imunoglobulina gama-1.

12. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual o indivíduo é um ser humano.

13. Método, de acordo com a reivindicação 12, no qual o indiví- duo é uma criança.

14. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual o anticor- po ou fragmento de ligação de antígeno é administrado em associação com um procedimento terapêutico anticâncer.

15. Método, de acordo com a reivindicação 14, no qual o proce- dimento terapêutico anticâncer é tumorectomia cirurgia e/ou tratamento de radiação anticâncer.

16. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual ao indiví- duo é administrado o anticorpo ou fragmento em uma composição farmacêu- tica compreendendo 20 mg/ml de anticorpo ou fragmento, 2,3 mg/ml de ace- tato de sódio tri-hidrato, 0,18 mg/ml de ácido acético gIacia1, 70 mg/ml de sucrose, e água, pH 5,5.

17. Método, de acordo com a reivindicação 1, no qual ao indiví- duo é administrado anticorpo ou fragmento a uma dosagem de 10 mg/kg de peso corpóreo de duas em duas semanas.

18. Método, de acordo com a reivindicação 4, no qual o indivíduo é um ser humano que é administrado o anticorpo ou fragmento que é um anticorpo monoclonal em uma composição farmacêutica compreendendo 20 mg/ml de anticorpo, 2,3 mg/ml de acetato de sódio tri-hidrato, 0,18 mg/ml de ácido acético glacial, 70 mg/ml de sucrose, e água, pH 5,5; intravenosamen- te, a uma dosagem de 10 mg/kg de peso corpóreo de duas em duas sema- nas; no qual a condição médica é sarcoma de Ewing.