BRPI0808822A2 - Composato, processo para preparar um composto, método para o tratamento ou profilaxia de uma doença ou condição, composição farmacêutica, e, uso de um composto. - Google Patents

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I “COMPOSTO, PROCESSO PARA PREPARAR UM COMPOSTO, MÉTODO PARA O TRATAMENTO OU PROFILAXIA DE UMA DOENÇA OU CONDIÇÃO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E, USO DE UM COMPOSTO”

5 CAMPO DA INVENÇÃO

Esta invenção diz respeito aos derivados de quinolina, às composições farmacêuticas que os compreendam, e ao uso de tais compostos no tratamento de doenças ou distúrbios do sistema nervoso central e periférico. Esta invenção também diz respeito ao uso de tais compostos em 10 combinação com um ou mais outros agentes do SNC para potencializar os efeitos de outros agentes do SNC. Os compostos desta invenção também são úteis como sondas para a localização dos receptores de superfície celular. FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

Os receptores de taquicinina são os alvos de uma família de 15 peptídeos estruturalmente relacionados os quais incluem substância P (SP), neurocinina A (NKA) e neurocinina B (NKB), coletivamente “taquicininas”.As taquicininas são sintetizadas no sistema nervoso central (SNC), e tecidos periféricos, onde manifestam uma variedade de atividades biológicas. Três receptores de taquicinina são conhecidos os quais são 20 chamados de receptores de neurocinina-1 (NK-1), neurocinina-2 (NK-2) e neurocinina-3 (NK-3). Os receptores NK-I e NK-2 são expressos em uma ampla variedade de tecidos periféricos e os receptores NK-I também são expressos no SNC considerando que os receptores NK-3 são principalmente expressados no SNC.

Os receptores de neurocinina servem de mediadores para uma

variedade de efeitos biológicos estimulados por taquicinina que incluem: transmissão de sinais neuronais excitatórios no SNC e periférico (por exemplo, sinais de dor), modulação of atividade contrátil do músculo liso, modulação das respostas imunológicas e inflamatórias, indução dos efeitos hipotensivos por intermédio da dilatação da vasculatura periférica, e do estímulo das secreções das glândulas endócrinas e exócrinas.

No SNC, a ativação dos receptores NK-3 foi mostrada modular a liberação de dopamina, acetilcolina e serotonina, sugerindo uma 5 utilidade terapêutica para os ligando de NK-3 para o tratamento de uma variedade de distúrbios incluindo ansiedade, depressão, esquizofrenia e obesidade. Estudos em cérebro de primatas apresentaram a presença de mRNA NK-3 em uma variedade de regiões relevantes para estes distúrbios. Estudos em ratos apresentaram receptores de NK-3 localizados em Neurônios 10 que contêm MCH no hipotálamo lateral e zona incerta, novamente sugerindo que uma utilidade terapêutica quanto os ligandos de NK-3 para obesidade.

Os ligandos não peptídicos foram desenvolvidos para cada um dos receptores de taquicinina, embora os antagonistas do receptor de NK-3 não peptídicos conhecidos sofrem de vários problemas tais como seletividade 15 de espécies o que limita o potencial de avaliar estes compostos em muitos modelos de doenças apropriados. Os novos ligandos do receptor de NK-3 não peptídicos são por esta razão desejáveis para o uso como agentes terapêuticos e como ferramentas para investigar as conseqüências biológicas da modulação do receptor de NK-3.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

São divulgados os diastereômeros particulares de compostos quinolinados com afinidade para os receptores de NK-3 (NK-3r). Estes compostos têm potencial para o tratamento de um amplo grupo de doenças, distúrbios e condições incluindo mas sem limitar a depressão, ansiedade, 25 esquizofrenia, distúrbios cognitivos, psicoses, obesidade, doenças inflamatórias incluindo síndrome do intestino irritável e distúrbio do intestino inflamatório, êmese, pré-eclâmpsia, doença pulmonar obstrutiva crônica, distúrbios associados com gonadotrofinas e/ou andrógenos excessivos incluindo dismenorréia, hiperplasia prostática benigna, câncer prostático, e 15

20

câncer nos testículos em que a modulação da atividade dos receptores de NK3 é benéfica.

Os ligandos para os receptores de NK-3 são divulgados, juntos com precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmos, os quais são diastereômeros particulares de compostos 3- substituídos da Fórmula I,

(R2)n

FT

ou halogênio;

ou 3:

I

em que:

R1 é selecionado de alquila Cm ou cicloalquila C3.7;

R2 em cada ocorrência é independentemente selecionado de H

n em cada ocorrência é independentemente selecionado de 1, 2

λ

R é selecionado de H, alquila Cj.4, cicloalquinila C3.6 e alquila

Cm OC(O)-;

e,

1 3

quando R ou R é uma porção alquila ou cicloalquila, as ditas porções não são substituídas ou têm 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes independentemente selecionados em cada ocorrência de -OH, -NH2, -CN, fenila e halogênio.

Também são divulgadas composições e formulações farmacêuticas contendo os compostos, métodos de usá-las para tratar doenças e condições sozinhas ou em combinação com outros compostos ou 10

substâncias terapeuticamente ativas, processos e intermediários usados para prepará-los, uso destes como medicamentos, uso destes na fabricação de medicamentos e uso destes para propósitos de diagnósticos e analíticos. Em particular, são divulgados compostos e composições que os contenham, e métodos usando-os para tratar ou prevenir condições e distúrbios associados com uma ampla faixa de doenças ou distúrbios em que os receptores de NK-3 são considerados ter um papel.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Os compostos da invenção são compostos da Fórmula I com uma diastereometria particular na posição 3 de um núcleo de quinolina. Mais particularmente, tais compostos têm uma porção -SO-R1 ligada à posição 3 onde o O ligado ao S e um par só de elétrons constituem um centro quiral.

(R2)n

,Rj

CK/NH ^ O

(R2)n

I

15

ou halogênio; ou 3;

Cj.4 OC(O)-;

em que:

R1 é selecionado de alquila Cm ou cicloalquila C3.7;

R2 em cada ocorrência é independentemente selecionado de H

n em cada ocorrência é independentemente selecionado de 1, 2

R3 é selecionado de H, alquila C 1.4, cicloalquinila C3.6 e alquila

e,

quando R1 ou R3 é uma porção alquila ou cicloalquila, as ditas porções não são substituídas ou têm 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes independentemente selecionados em cada ocorrência de -OH, -NH2, -CN, fenila e halogênio,

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Os compostos particulares são aqueles em que R1 é selecionado de alquila Cm;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Outros compostos particulares são aqueles em que R1 é

selecionado de cicloalquinila C3.6;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Outros compostos particulares são aqueles em que R é, em cada ocorrência independentemente selecionado de H, F, Cl, Br ou I;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Ainda outros compostos particulares são aqueles em que R é, em cada ocorrência independentemente selecionado de H ou F;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente

aceitáveis dos mesmos.

Ainda outros compostos particulares são aqueles em que R1 é selecionado de alquila Cm e R2 é, em cada ocorrência independentemente selecionado de H ou F;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente

aceitáveis dos mesmos.

Outros compostos particulares são aqueles em que R1 é selecionado de metila, etila, n-propila, iso-propila, ciclopropila ou ciclobutila;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Ainda outros compostos particulares são aqueles em que R1 é selecionado de cicloalquinila C3.6 e R2 é, em cada ocorrência independentemente selecionado de H ou F;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

Ainda outros compostos particulares são os enantiômeros de acordo com a Fórmula II

(R2)n

CK /NH

-(R2)n

II

12 3 ·

em que R , R , n e R são como definidos para a Fórmula I;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente

aceitáveis do mesmo.

Outros compostos particulares são aqueles das Fórmulas III ou

IV

(R2)n

CX /NH ^ O

-(R2)n

III

IV em que as ligações em cunha para baixo e em cunha para cima são ligações duplas e R15 R2, n e R3 são como definidos para a Fórmula I;

precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo. O fracionamento de um racemato em dois 5 diastereômeros revelará que um composto da Fórmula III ou Fórmula IV em geral tem substancialmente de 10 a 100 vezes mais atividade do que o composto correspondente da Fórmula IV ou Fórmula III. A configuração absoluta de um composto ativo não é conhecida, mas aqueles de habilidade na técnica podem prontamente obter o composto mais ativo e menos ativo sem 10 experimentação indevida em virtude da orientação aqui fornecida.

Os compostos particulares são selecionados daqueles descritos na Tabela 1, precursores hidrolisáveis in vivo e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

Os compostos da presente invenção têm a vantagem de que estes podem ser mais solúveis, ser mais facilmente absorvidos e mais eficazes in vivo, produzir menos efeitos colaterais, ser menos tóxicos, ser mais potentes, mais seletivos, ser mais ativos, ser menos metabolizados e/ou ter um melhor perfil farmacocinético do que, ou ter outras propriedades farmacológicas ou fisicoquímicas úteis sobre os compostos conhecidos. Usando os ensaios para a atividade funcional aqui descrita, os compostos diastereoméricos serão descobertos ter uma IC50 de menos do que cerca de 1 μΜ para os receptores de NK-3 e muitos compostos serão descobertos ter uma IC50 de menos do que cerca de 10 nM para os receptores de NK-3. ABREVIAÇÕES E DEFINIÇÕES Como aqui usado, a menos que de outro modo indicado,

alquila C1 -6 inclui, mas não é limitado a porções de metila, etila, n-propila, nbutila, i-propila, i-butila, t-butila, s-butila, sozinhas ou parte de outro grupo e grupos alquila podem ser de cadeia reta ou ramificada.

Como aqui usado, a menos que de outro modo indicado, alcóxi CI-6 inclui, mas não é limitado a porções de -O-metila, -O-etila, -O-npropila, -O-n-butila, -O-i-propila, -O-i-butila, -O-t-butila, -O-s-butila, sozinhas ou parte de outro grupo e os grupo alcóxi podem ser de cadeia reta ou ramificada.

Como aqui usado os grupos cicloalquila C3.6 incluem mas não são limitados às porções de alquila cíclicas ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e cicloexila.

Como aqui usado, a menos que de outro modo indicado, alquenila C2-6 inclui, mas não é limitado a 1-propenila, 2-propenila, 1- butenila, 2-butenila e 3-butenila.

Como aqui usado, a menos que de outro modo indicado, alquinila C2-6 inclui, mas não é limitado a etinila, 1-propinila, 2-propinila, 1- butinila, 2-butinila e 3-butinila.

Como aqui usado, a menos que de outro modo indicado, halo ou halogênio se refere a flúor, cloro, bromo, ou iodo;

Como aqui usado, arila inclui fenila e naftila;

Como aqui usado, os anéis heterocíclicos aromáticos ou não aromáticos incluem, mas não são limitados a furila, imidazolila, oxazolila, pirrolidinila, tiazolila, tiofenila, pirrolila, morfolinila, piperidinila, piperazinila, pirazinila, piridila, pirimidinila, indanila, indolila, quinolinila, isoquinolinila, quinazolinila, quinoxalinila, benzo[b]tiofenila, benzoxazolila, ou benztiazolila ligados a N- ou C-;

rt ou RT se referem à temperatura ambiente;

DCM se refere a diclorometano;

EtOAc se refere a acetato de etila;

EDC se refere a l-(3-dimetilaminopropil)-3-etil-carbodiimida;

EDTA se refere a ácido etilenodiaminotetracético;

HEPES se refere a ácido 4-(2-hidroxietil)-l-piperazino etanossulfônico, sal monossódico, e TEA se refere a trietilamina.

Nos processos aqui descritos, onde necessário, hidróxi, amino, ou outros grupos reativos podem ser protegidos usando um grupo de proteção como descritos no texto padrão “Protecting Groups in Organic Synthesis”, 3~ Edição (1999) por Greene e Wuts.

A menos que de outro modo estabelecido, as reações são conduzidas sob uma atmosfera inerte, preferivelmente sob uma atmosfera de nitrogênio e são usualmente conduzidos em um pressão de cerca de um a cerca de três atmosferas, preferivelmente em pressão ambiente (cerca de uma IO atmosfera).

Os compostos e intermediários da invenção podem ser isolados a partir de suas misturas de reação através de técnicas padrão.

Os sais de adição de ácido dos compostos da Fórmula I que podem ser mencionados incluem os sais de ácidos minerais, por exemplo, os sais de cloridreto e bromidreto; e os sais formados com ácidos orgânicos tais como os sais de formato, acetato, maleato, benzoato, tartarato, e fumarato.

Os sais de adição de ácido dos compostos da Fórmula I podem ser formados reagindo-se a base livre ou um sal, enantiômero ou derivado protegido destes, com um ou mais equivalentes do ácido apropriado. A reação 20 pode ser realizada em um solvente ou meio em que o sal é insolúvel ou em um solvente em que o sal é solúvel, por exemplo, água, dioxano, etanol, tetraidrofurano ou éter dietílico, ou uma mistura de solventes, que pode ser removida no vácuo ou secando-se por congelamento. A reação pode ser um processo metatético ou pode ser realizada em uma resina de troca de íons.

Os compostos da Fórmula I existem nas formas

diasterioméricas, todas as quais estão incluídas dentro do escopo da invenção. Os isômeros podem ser isolados peça separação de uma mistura racêmica dos compostos usando técnicas convencionais, por exemplo, cristalização fracional, ou HPLC quiral. Alternativamente, os enantiômeros individuais podem ser feitos através da reação dos materiais de partida opticamente ativos apropriados sob condições de reação as quais não causarão racemização. SÍNTESES E ESQUEMAS

Os compostos de Fórmula I com um enxofre diretamente ligado à quinolina podem ser preparados, como mostrados no Esquema A, pela reação de um ácido 3-alquilssulfanil-2-fenil-quinolina-4-carboxílico com uma amina apropriada na presença de um sistema adequado de agente de copulação tal como diciclocarbodiimida e hidroxibenzotraizol para resultar em (alquil)-amida do ácido 3-alquilssulfhil-2-fenil-quinolina-4-carboxílico, este composto pode ser oxidado com u magented e oxidação tal como periodato de sódio para resultar em sulfóxido correspondente, ou com um agente de oxidação tal como ácido met-cloroperoxibenzóico para resultar em uma sulfona correspondente.

Um processo exemplar para formar um composto descrito aqui mostrado no Esquema A.

Esquema A

Em outro aspecto, a invenção diz respeito aos compostos aqui escritos em que um ou mais dos átomos é um radioisótopo do mesmo elemento. Em uma forma particular deste aspecto da invenção o composto é rotulado com trítio. Tais compostos radio-rotulados são sintetizados incorporando-se os materiais de partida radio-rotulados ou, no caso de trítio, troca de hidrogênio por trítio através dos métodos. Os métodos conhecidos incluem (1) halogenação eletrofílica, seguido pela redução do halogênio na presença de uma fonte de trítio, por exemplo, através da hidrogenação com gás de trítio na presença de um catalisador de paládio, ou (2) troca de hidrogênio por trítio realizada na presença de gás de trítio e um catalisador organometálico adequado (por exemplo, paládio).

Os compostos da invenção rotulados com trítio são úteis para a

descoberta de novos compostos medicinais que ligam ao e modulam a atividade, através do agonismo, agonismo parcial, ou antagonismo, de um receptor de NK-3. Tais compostos rotulados com trítio podem ser usados em ensaios que medem o deslocamento de tais compostos para avaliar a ligação dos ligandos que ligam aos receptores de NK-3.

Em outro aspecto, a invenção diz respeito aos compostos aqui descritos adicionalmente compreendendo um ou mais átomos de um radioisótopo. Em uma forma particular deste aspecto da invenção o composto compreende um halogênio radioativo. Tais compostos radio-rotulados são 15 sintetizados incorporando-se os materiais de partida radio-rotulados através de métodos conhecidos. As formas de realização particulares deste aspecto da

18 123 125

invenção são aqueles em que o radioisótopo é selecionado de F, I, I, 131I, 75Br, 76Br, 77Br ou 82Br. Uma forma de realização mais particular deste

• r 18

aspecto da invenção é aquela em que o radioisótopo é F. Tais compostos que compreendem um ou mais átomos de um radioisótopo são úteis como ligandos tomografia de emissão de pósitrons (PET) e para outros usos técnicas para determinar o local dos receptores de NK3.

Usos terapêuticos dos compostos:

Em outro aspecto, a invenção diz respeito aos compostos de acordo com Fórmula I aqui descrita e ao uso de tais compostos na terapia e nas composições úteis para a terapia.

Em outro aspecto, a invenção abrange o uso dos compostos aqui descritos para a terapia de doenças mediadas através da ação dos receptores de NK-3. Um tal aspecto abrange os métodos de tratamento ou profílaxia de doenças ou condições em que a modulação do receptor de NK-3 é benéfica cujos métodos compreendem administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto antagonístico da invenção a um indivíduo que sofre da dita doença ou condição.

5 Uma forma de realização deste aspecto da invenção é um

método de tratamento ou profílaxia de distúrbios, em que o distúrbio é depressão, ansiedade, esquizofrenia, distúrbios cognitivos, psicoses, obesidade, doenças inflamatórias incluindo síndrome do intestino irritável e distúrbio do intestino inflamatório, êmese, pré-eclâmpsia, doença pulmonar 10 obstrutiva crônica, distúrbios associados com gonadotrofinas excessivas e/ou andrógenos incluindo dismenorréia, hiperplasia prostática benigna, câncer prostático, ou câncer nos testículos que compreende administrar uma quantidade farmacologicamente ativa de um composto da Fórmula I a um paciente em necessidade da mesma.

Um outro aspecto da invenção é o uso de um composto de

acordo com a invenção, um enantiômero deste ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, no tratamento ou profílaxia de uma doença ou condição em que a modulação do receptor de NK-3 é benéfica. As doenças e condições particulares que podem ser tratadas são depressão, ansiedade, esquizofrenia, 20 distúrbios cognitivos, psicoses, obesidade, doenças inflamatórias incluindo síndrome do intestino irritável e distúrbio do intestino inflamatório, êmese, pré-eclâmpsia, doença pulmonar obstrutiva crônica, distúrbios associados com gonadotrofinas excessivas e/ou andrógenos incluindo dismenorréia, hiperplasia prostática benigna, câncer prostático, e câncer nos testículos. As 25 formas de realização mais particulares abrangem os usos de um composto no tratamento ou profílaxia de ansiedade, depressão, esquizofrenia e obesidade.

Um outro aspecto da invenção é o uso de um composto de acordo com a invenção, um enantiômero deste ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para o tratamento ou profílaxia de doenças ou condições aqui mencionadas.

Uma forma de realização particular deste aspecto da invenção é o uso de um composto da invenção na fabricação de um medicamento para o tratamento ou profílaxia de depressão, ansiedade, esquizofrenia, distúrbios 5 cognitivos, psicoses, obesidade, doenças inflamatórias incluindo síndrome do intestino irritável e distúrbio do intestino inflamatório, êmese, pré-eclâmpsia, doença pulmonar obstrutiva crônica, distúrbios associados com gonadotrofinas excessivas e/ou andrógenos incluindo dismenorréia, hiperplasia prostática benigna, câncer prostático, e câncer nos testículos.

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS

Os compostos da invenção, enantiômeros destes, e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmos, podem ser usados por si ou na forma de preparações medicinais apropriadas para a administração enteral ou parenteral. De acordo com um outro aspecto da invenção, é fornecida uma 15 composição farmacêutica incluindo preferivelmente menos do que 80% e mais preferivelmente menos do que 50 % em peso de um composto da invenção em mistura com um diluente, lubrificante ou carreador inertes farmaceuticamente aceitáveis.

Os exemplos de diluentes, lubrificantes e carreadores são:

- para tabletes e drágeas: lactose, amido, talco, ácido esteárico;

- para cápsulas: ácido tartárico ou lactose;

- para soluções injetáveis: água, álcoois, glicerina, óleos

vegetais;

- para supositórios: óleos ou ceras naturais ou endurecidos.

Também é fornecido um processo para a preparação de uma

tal composição farmacêutica cujo processo compreende misturar ou combinar os ingredientes juntos e formar os ingredientes misturados em tabletes ou supositórios, encapsular os ingredientes em cápsulas ou dissolver os ingredientes para formar soluções injetáveis. Os derivados farmaceuticamente aceitáveis incluem os solvatos e sais. Por exemplo, os compostos da invenção podem formar sais de adição de ácido com ácidos, tais como ácidos convencionais farmaceuticamente aceitáveis incluindo o ácido maleico, clorídrico, 5 bromídrico, fosfórico, acético, fumárico, salicílico, cítrico, lático, mandélico, tartárico e metanossulfônico.

Os sais de adição de ácido dos compostos of Fórmula I que podem ser mencionados incluem os sais de ácidos minerais, por exemplo, os sais de cloridreto e bromidreto; e sais formados com ácidos orgânicos tais 10 como sais de formato, acetato, maleato, benzoato, tartarato, e fumarato. Os sais de adição de ácido dos compostos da Fórmula I podem ser formados reagindo-se a base livre ou um sal, enantiômero ou derivado protegido destes, com um ou mais equivalentes do ácido apropriado. A reação pode ser realizada em um solvente ou meio em que o sal é insolúvel ou em um 15 solvente em que o sal é solúvel, por exemplo, água, dioxano, etanol, tetraidrofurano ou éter dietílico, ou uma mistura de solventes, que pode ser removida no vácuo ou secando-se por congelamento. A reação pode ser um processo metatético ou pode ser realizada em uma resina de troca de íons.

Para os usos, métodos, medicamentos e composições aqui 20 mencionados, a quantidade de composto usado e a dosagem administrada, naturalmente, variará com o composto utilizado, o modo de administração e o tratamento desejado. Não obstante, em geral, os resultados satisfatórios são obtidos quando os compostos da invenção são administrados em uma dosagem diária de cerca de 0,1 mg a cerca de 20 mg/kg de peso corporal 25 animal. Tais doses podem ser dadas em doses divididas de 1 a 4 vezes por dia ou na forma de liberação sustentada. Para o ser humano, a dose total diária é na faixa de 5 mg a 1.400 mg, mais preferivelmente de 10 mg a 100 mg, e as formas de dosagem única adequadas para a administração oral compreendem de 2 mg a 1.400 mg do composto misturado com um carreadores, lubrificantes e diluentes farmacêuticos sólidos ou líquidos.

Um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável, solvato ou éster hidrolisável in vivo deste, ou uma composição ou formulação farmacêuticas que compreendem um composto da Fórmula I 5 podem ser administradas ao mesmo tempo, de modo simultâneo, seqüencial ou separadamente com outro composto ou compostos farmaceuticamente ativos selecionados dos seguintes:

(i) antidepressivos tais como amitriptilina, amoxapina, bupropiona, citalopram, clomipramina, desipramina, doxepin duloxetina, 10 elzasonan, escitalopram, fluvoxamina, fluoxetina, gepirona, imipramina, ipsapirona, maprotilina, nortriptilina, nefazodona, paroxetina, fenelzina, protriptilina, reboxetina, robalzotano, sertralina, sibutramina, tionisoxetina, tranilcipromaína, trazodona, trimipramina, venlafaxina e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(ii) antipsicóticos atípicos incluindo por exemplo quetiapina e

isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(iii) antipsicóticos incluindo por exemplo amisulpride, aripiprazol, asenapina, benzisoxidila, bifeprunox, carbamazepina, clozapina, clorpromazina, debenzapina, divalproex, duloxetina, eszopiclona, haloperidol,

iloperidona, lamotrigina, loxapina, mesoridazina, olanzapina, paliperidona, perlapina, perfenazina, fenotiazina, fenilbutilpiperidino, pimozida, proclorperazina, risperidona, sertindol, sulpirida, suproclona, suriclona, tioridazina, trifluoperazina, trimetozina, valproato, ácido valpróico, zopiclona, zotepina, ziprasidona e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) 25 farmaceuticamente ativo(s) destes;

(iv) ansiolíticos incluindo por exemplo alnespirona, azapironas, benzodiazepinas, barbituratos tais como adinazolam, alprazolam, balezepam, bentazepam, bromazepam, brotizolam, buspirona, clonazepam, clorazepato, clordiazepóxido, ciprazepam, diazepam, difenidramina, estazolam, fenobam, flunitrazepam, flurazepam, fosazepam, lorazepam, lormetazepam, meprobamato, midazolam, nitrazepam, oxazepam, prazepam, quazepam, reclazepam, tracazolato, trepipam, temazepam, triazolam, uldazepam, zolazepam e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(v) anticonvulsivos incluindo por exemplo carbamazepina, valproato, lamotrogina, gabapentina e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(vi) terapias de Alzheimer incluindo por exemplo donepezila, 10 memantina, tacrina e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s)

farmaceuticamente ativo(s) destes;

(vii) terapias de Parkinson incluindo por exemplo deprenila, Ldopa, Requip, Mirapex, inibidores de MAOB tais como selegina e rasagilina, inibidores de comP tais como Tasmar, inibidores de A-2, inibidores de

reabsorção de dopamina, antagonistas de NMDA, agonistas de Nicotina, agonistas de Dopamina e inibidores de sintase de óxido nítrico neuronal e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(viii) terapias de enxaqueca incluindo por exemplo almotriptan, amantadina, bromocriptina, butalbital, cabergolina,

20 dicloralfenazona, eletriptano, frovatriptano, lisurida, naratriptano, pergolida, pramipexol, rizatriptano, ropinirol, sumatriptano, zolmitriptano, zomitriptano, e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(ix) terapias de acidente vascular cerebral incluindo, por exemplo, abciximab, activase, citicolina, crobenetina, desmoteplase,

repinotano, traxoprodila e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(x) terapias de incontinência urinária incluindo, por exemplo, darafenacina, falvoxato, oxibutinina, propiverina, robalzotano, solifenacina, tolterodina e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(xi) terapias de dor neuropática incluindo, por exemplo, gabapentina, lidodermo, pregablina e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(xii) terapias de dor nociceptivas tais como celecoxib,

etoricoxib, lumiracoxib, rofecoxib, valdecoxib, diclofenaco, loxoprofeno, naproxeno, paracetamol e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes;

(xiii) terapias de insônia incluindo, por exemplo, alobarbital, alonimídeo, amobarbital, benzoctamina, butabarbital, capurida, cloral,

cloperidona, cloretato, dexclamol, etclorvinol, etomidato, glutetimida, halazepamo, hidroxizina, mecloqualona, melatonina, mefobarbital, metaqualona, midaflur, nisobamato, pentobarbital, fenobarbital, propofol, roletamida, triclofos, secobarbital, zaleplona, zolpidem e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes, ou

(xiv) estabilizadores de temperamento incluindo, por exemplo, carbamazepina, divalproex, gabapentina, lamotrigina, lítio, olanzapina, quetiapina, valproato, ácido valpróico, verapamila, e equivalentes e isômero(s) e metabólito(s) farmaceuticamente ativo(s) destes.

Tais produtos de combinação utilizam os compostos desta

invenção dentro da faixa de dosagem aqui descrita e o outro composto ou compostos farmaceuticamente ativos dentro das faixas de dosagem aprovadas e/ou a dosagem descrita na referência de publicação.

Alguns compostos da invenção podem existir nas formas 25 tautoméricas, enantioméricas, estereoisoméricas ou formas geométricas isoméricas, todas as quais são incluídas dentro do escopo da invenção. Os vários isômeros óticos podem ser isolados através da separação de uma mistura racêmica dos compostos usando técnicas convencionais, por exemplo cristalização fracional, ou HPLC quiral. Alternativamente os enantiômeros individuais podem 10

ser feitos através da reação dos materiais de partida opticamente ativos apropriados sob condições de reação as quais não causarão racemização.

Os compostos exemplares da invenção podem ser preparados através de processos análogos àqueles que são descritos no Esquema A e separação de dois diastereômeros. Aqueles habilitados na técnica prontamente apreciarão que muitas aminas, cloretos ácidos e ácidos carboxílicos adequados podem ser usados para formar os compostos dentro do escopo do assunto aqui descrito como Fórmula I.

COMPOSTOS EXEMPLARES

Os Exemplos 1 e 2 foram preparados de acordo com o

Esquema 1 Esquema 1:

NaSMe

THF

O

NaOH

1b

Exemplo

1:

3 -(metiltio)-2-fenil-N- Γ 0 S)-1 -fenilpropill-quinolino-4-

carboxamida (T) A uma solução de sal de cloridreto do ácido 3-(metiltio)-2- fenilquinolino-4-carboxílico (Ia) (1000 mg, 3,017 mmol), hidrato de HOBT (1220 mg, 4,525 mmol), 4-metilmorfolina (827 μΐ, 7,543 mmol) em DCM (40 ml) foi adicionado EDAC (1740 mg, 4,525 mmol) na temperatura ambiente 5 sob N2. (S)-I-Fenil propilamina (815,6 mg, 6,03 mmol) foi depois adicionado e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente por 12 horas. Todo o solvente foi removido no vácuo e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e 0,5 N de uma solução de HCl aquosa. A fase orgânica foi lavada com 10 % de uma solução de bicarbonato de sódio aquosa, salmoura e secada em sulfato 10 de sódio. A solução orgânica foi depois concentrada no vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia eluindo com de 15 a 25 % de acetato de etila/hexano para fornecer o composto do título (1150 mg, 92,5 %) como um sólido. 1H RMN (300 MHz, CDC13) δ 8,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,78 - 7,67 (m, 4H), 7,55 - 7,27 (m, 9H), 6,12 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,30 (q, J - 7,6 Hz, 15 1H), 2,16 - 1,91 (m, 5H), 1,06 (t, J = 7,4 Hz, 3H) APCI, m/z = 413 (M+l). LCMS: 2,45 min.

a) O ácido de partida, ácido 3-(metiltio)-2-fenilquinolino-4- carboxílico (la), foi preparado da seguinte maneira:

A isatina (3530 mg, 24 mmol) foi adicionada uma solução de 20 hidróxido de sódio (9,2 g, 230 mmol) em água (20,0 ml). O precipitado marrom resultante foi agitado vigorosamente na temperatura ambiente por 20 minutos após ser aquecido até 85° C. Uma solução de 2-(metiltio)-lfeniletanona (Ib) (4000 mg, 24,0 mmol) em etanol/THF/água (50 ml/10 ml/50 ml) foi depois adicionada às gotas por 30 minutos. A mistura de reação foi 25 agitada a 85° C por outras 4 horas antes de resfriar até a temperatura ambiente. Todos os solventes orgânicos foram removidos no vácuo e o resíduo aquoso reduzido a um volume de aproximadamente 20 ml. O resíduo aquoso foi acidificado com resfriamento até o pH 1,5 com 6 N de HCl. O precipitado formado foi coletado, lavado com água (2x10 ml), éter (3 x 10 ml) e secado sob vácuo para fornecer o composto do título como um sólido (5806 mg, 82 %). 1H RMN (300 MHz, (CD3)2SO) δ 2,05 (s, 3H), 7,52 (d, 1H), 7,53 (d, 2H), 7,74 (m, 1H), 7,86 (m, 1H), 7,99 (m, 2H), 8,29 (m, 1H), 9,11 (m, 1H), 14,13 (b, 1H). MS APCI,m/z = 296 (M+ I). LCMS: 1,16 min.

5 b) Preparação de 2-(metiltio)-l-feniletanona (lb). A uma

solução de 2-bromo-l-feniletanona (5000 mg, 25,12 mol) em THF (50 ml) foi adicionado NaSCH3 (2640 mg, 37,68 mmol) na temperatura ambiente sob N2. A mistura de reação foi agitada por 4 horas (a cor da solução muda para laranja). Foi removido todo o THF e diluída a mistura com 200 ml de acetato 10 de etila. Foi lavada a fase orgânica com 0,3 N de NaOH aquoso, água, salmoura e secada em sulfato de sódio. A solução orgânica foi depois concentrada no vácuo para fornecer o composto do título (4000 mg, 96,0 %) como um sólido. 1H RMN (300 MHz, CDC13) δ 2,13 (s, 3H), 3,75 (s, 2H), 7,47 (m, 2H), 7,57 (m, 1H), 7,97 (d, 2H). APCI, m/z = 167 (M + 1). LCMS: 15 1,79 min.

Exemplo 2. 3-(metilsulfínil)-2-fenil-N-IY 1 S)-l-fenilpropill-quinolino-4- carboxamida (2)

2

A uma solução de 3-(metiltio)-2-fenil-N-[(lS)-l-fenil20 propil]quinolin-4-carboxamida (1) (412 mg, 1,0 mmol) em EtOH (25 ml) foi adicionada uma solução de NaI04 (900 mg, 4,2 mmol) em água (14 ml) a 25° C. A mistura de reação foi aquecida até o refluxo (85° C) por 20 horas. Todo o etanol foi removido e esta foi depois diluída com EtOAc, lavada com salmoura, secada em Na2S04, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (10 a 35 % EtOAc/ CH2Cl2) para fornecer o produto desejado (dois diastereômeros) como um sólido (355 mg, 83,0 %). SFC separou os 2 diastereômeros com 15 % de IPOH em uma coluna OJ-H.

Para o isômero A. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 0,97 (t, 3H),

1,91 (m, IH), 2,15 (m, IH), 2,88 (s, 3H), 4,0 (q, IH), 5,23 (m, IH), 6,6 (d, IH), 7,41 (d, IH), 7,43 (d, IH), 7,45-7,51 (m, 6H), 7,75 (m, 2H), 7,81 (m, 2H), 8,15 (d, IH). MS APCI, m/z = 429 (M+1). LCMS: 2,06 min.

Para o isômero B. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 1,00 (t, 3H), 2,00 (m, IH), 2,25 (m, IH), 2,66 (s, 3H), 4,02 (q, IH), 5,21 (m, IH), 6,95 (d, IH), 7,37 (d, IH), 7,40 (d, IH), 7,48-7,55 (m, 6H), 7,83 (m, 2H), 8,10 (m, 2H), 8,17 (d, IH). MS APCI, m/z = 429 (M+1). LCMS: 2,07 min.

Separação dos diastereômeros

a = mistura desconhecida de diastereômeros A separação preparativa de dois diastereômeros que resultam

da formação de uma mistura de isômeros no centro de enxofre (a) foi obtida usando cromatografia fluida supercrítica de fase estacionária quiral. Uma coluna ChiralCel OJ-H contendo 5 partículas de mícrons (21 x 250 mm) foi usada com um eluente isocrático de 15 % de isopropanol, 20 contendo 0,5 % de dimetiletil amina, em 85 % de dióxido de carbono a 37° C. A taxa de fluxo deste eluente foi de 50 ml/min e os picos foram detectados por uv a 254 nm. Uma solução de 20 mg da mistura isomérica 10

15

dissolvida em 2 ml de isopropanol foi depois injetada em um arco de 5 ml por curso de separação. Os dois picos separados foram depois coletados com o primeiro pico eluindo a 5,1 minutos e o segundo pico eluindo a 6,7 minutos. As frações isoladas foram obtidas em > 99 % de ee como determinado pela medição analítica SFC das frações isoladas em uma coluna ChiralCel OJ-H (4,6 x 250 mm) em uma taxa de fluxo de 2,2 ml/min usando um eluente isocrático composto de 15 % de isopropanol, contendo 0,3 % de isopropil amina, e 85 % de CO2. A detecção analítica foi feita por APCI MS e pela espectometria uv de matriz de diodo. O ee em % foi calculado aplicando-se os dados de medição das áreas integradas relativas dos dois picos a 254 nm. Sob estas condições, o fracionamento deste composto revelou que o primeiro composto eluente tinha substancialmente mais atividade biológica quando testado no ensaio para atividade funcional de NK-3 do que o segundo composto eluente.

Os exemplos 3 e 4 foram preparados de acordo com o

Esquema 2.

Esquema 2:

.O

NaOH

EDC/HOBT °^N

NaIO. Exemplo 3. 3-fctiltio)-2-fenil-N-F(S>l-femlpropil]quinolin-4-carboxainida (4)

Uma solução de ácido 3-(etiltio)-2-fenilquinolino-4-carboxílico (3) (269 mg, 0,87 mmol), hidrato de HOBT (230 mg, 1,5 mmol), 4- metilmorfolina (164 μι, 1,5 mmol) em DCM (30 ml) foi adicionado EDC (289 mg, 1,5 mmol) na temperatura ambiente sob N2. (S)-I-Fenil propilamina (202 mg, 1,5 mmol) foi depois adicionado e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 12 horas. Todo o solvente foi removido no vácuo e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e solução aquosa 0,5 N de HCl. A fase orgânica foi lavada com 10 % solução de bicarbonato de sódio aquosa, salmoura, e secada em sulfato de sódio. A solução orgânica foi depois concentrada no vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia eluindo com de 15 a 25 % acetato de etila/hexano para fornecer o composto do título (315 mg, 85 % de rendimento) como um sólido. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 0,96 (t, 3H), 1,22 (t, 3H), 2,0 (m, 2H), 2,40 (m, 2H), 5,28 (q, IH), 7,20 (d, 2H), 7,34 (d, 2H), 7,39 (m, 2H), 7,78 (m, 2H), 7,84 (m, 2H), 8,00 (m, IH), 8,11 (m, 2H), 8,15 (m, 2H). MS APCI, m/z = 427 (M+1). LCMS: 2,82 minutos.

O ácido de partida, ácido 3-(etiltio)-2-fenilquinolino-4- carboxílico (3), foi preparado da seguinte maneira:

20

3 À isatina (882 mg, 6 mmol) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (2,30 g, 57,5 mmol) em água (5,0 ml). O precipitado marrom resultante foi vigorosamente agitado na temperatura ambiente por 20 minutos após ser aquecido até 85° C. Uma solução de 2-(etiltio)-l5 feniletanona (1080 mg, 6,0 mmol) em etanol/THF/água (13 ml/2,5 ml/13 ml) foi depois adicionada às gotas durante 30 minutos. A mistura de reação foi agitada a 85° C ou mais 4 horas antes de resfriar até a temperatura ambiente. Todos os solventes orgânicos foram removidos no vácuo e o resíduo aquoso reduzido a um volume de aproximadamente 12 ml. O resíduo aquoso foi 10 lavado com éter (3x10 ml) e depois o resíduo aquoso foi acidificado com resfriamento até o pH 4 com ácido acético concentrado. O precipitado formado foi coletado, lavado com água e secado para fornecer o composto do título como um sólido (1580 mg, 85,2 %). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 1,22 (t, 3H), 2,97 (q, 2H), 7,28 (d, IH), 7,35 (d, 2H), 7,77 (m, IH), 7,86 (m, IH), 15 7,99 (m, 2H), 8,29 (m, IH), 9,11 (m, IH), 10,33 (b, 2H). MS APCI, m/z = 310 (M+1). LCMS: 1,73 minutos.

Exemplo_4._3-fetilsulfini)-2-fenil-N-IYS)-l-fenilpropill-quinolino-4-

carboxamida (5)

A uma solução de 3-(etiltio)-2-fenil-N-[(S)-l-fenil

propil]quinolin-4-carboxamida (4) (300 mg, 0,70 mmol) em MeOH (25 ml) foi adicionada uma solução de NaI04 (300 mg, 1,4 mmol) em água (15 ml) enquanto foi resfriada até 0o C. O banho de resfriamento foi removido, e a reação deixada agitar por 12 horas. O LCMS indicou que nenhuma reação ocorreu. Foram adicionadas outras 2 eq de NaIO4 e a mistura de reação foi aquecida até o refluxo por 8 horas. Foi depois diluída com EtOAc, lavada com salmoura, secada em Na2SO^ filtrada, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia em gel de sílica 5 (10a35%de EtOAc/ CH2Cl2) para fornecer o produto desejado (dois diastereômeros) como um sólido (88 mg, 28,4 %). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 0,97 (t, 3H), 1,21 (t, 3H), 2,01 (m, 2H), 2,71 (m, 2H), 5,21 (q, IH), 7,21 (d, 2H), 7,34 (d, 2H), 7,39 (m, 2H), 7,78 (m, 2H), 7,84 (m, 2H), 8,00 (m, IH), 8,11 (m, 2H), 8,14 (m, IH), 8,16 (m, IH). MS APCI, m/z = 443 (M+1). 10 LCMS: 2,15 min.

Os compostos exemplares na Tabela 1 e os processos descrevem a invenção por via de ilustração e exemplo para clareza de entendimento. Não obstante, àqueles habilitados na técnica, no estudo dos ensinamentos dos compostos, processos e métodos desta invenção, 15 modificações e mudanças serão evidentes as quais podem ser feitas sem romper com o espírito ou escopo da invenção.

Tabela 1

Exemplo Estrutura Nome intermediário 5 CV ((S)-l-fenil-propil)-amida do ácido 3- <WNH metanossulfanil-2-fenil-quinolino-4- carboxílico 5 cv ((S)-l-fenil-propil)-amida do ácido 3- O^/NH metanossulfmil-2-fenil-quinolino-4- O carboxílico ΓΥί ^ Intermediário 6 o,..... ((S)-l-fenil-etil)-amida do ácido 3- CK/ NH metilsulfanil-2-fenil-quinolino-4- ΓΥί carboxílico 6 O .NH 3-(Metilsulílnil)-2-fenil-N-[(S)-lCX K o feniletil]quinolino-4-carboxamida Il jU intermediário 7 oi O Metil éster do ácido (R)-[(3- Vv metilsulfanil-2-fenil-quinolino-4- NH carbonil)-amino] -fenil-acético aO 7 Cl O 2-(3-(metilsulfinil)-2-fenil-quinolino-4- Ί-V carboxamido)-2-feniletanoato de (R).NH metila ^ O Il Vs^ J T j intermediário 8

((S)-ciclopropil-fenil-metil)-amida do ácido 3 -metilsulfanil-2-fenil-quinolino4-carboxílico

((S)-ciclopropil-fenil-metil)-amida do ácido 3-metanossulfmil-2-fenil

quinolino-4-carboxílico

intermediário 9

((S)-l-cicloexil-etil)-amida do ácido 3-

metilsulfanil-2-fenil-quinolino-4-

carboxílico

CK .NH

O

((S)-l-cicloexil-etil)-amida do ácido 3-

metanossulfmil-2-fenil-quinolino-4-

carboxílico O composto do Exemplo 8 foi preparado de acordo com o seguinte Esquema: ο

ο

ο

Br

NaSMe

THF

O

NaOH

1b

4

3

Exemplo intermediário 8. N-r(S)-ciclopropil(fenil)metil1-3-(metiltio)-2- fenilquinolino-4-carboxamida (3)

fenilquinolino-4-carboxílico (Ia) (10,0 g, 34,0 mmol), hidrato de HOBT (6,87 g, 51,0 mmol), 4-metilmorfolina (8,5 ml, 85,0 mmol) em DCM (500 ml) foi adicionado EDAC (9,75 g, 51,0 mmol) na temperatura ambiente sob N2.

Cloridreto de (S)-l-ciclopropil-l-fenilmetanamina (9,9 g, 53,9 mmol) foi depois adicionado e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente por 12 horas. Todo o solvente foi removido no vácuo e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e uma solução 0,5 N de HCl aquoso. A fase orgânica foi lavada com 10 % de solução de bicarbonato de sódio aquoso, salmoura e 10 secada em sulfato de sódio. A solução orgânica foi depois concentrada no vácuo. O resíduo foi purificado através de cromatografia eluindo com de 15 a 25 % de acetato de etila/hexano para fornecer o composto do título (12,0 g,

3

A uma solução de sal de cloridreto do ácido 3-(metiltio)-2- 83,0 %) como um sólido. 1H RMN (300 MHz, CDC13) δ 8,11 (d, J - 8,4 Hz, IH), 7,78 - 7,67 (m, 4H), 7,55 - 7,27 (m, 9H), 6,31 (d, J = 8,5 Hz, IH), 5,12 (m, IH), 2,48 (s, 3H), 0,61 (m, 3H), 0,44 (m, 3H) APCI, m/z = 424 (M+1). LCMS: 2,45 min.

5 Exemplo 8. N-IYS)-ciclopropil(Tenil)metiri-3-(metilsulfíniD-2-fenilquinolino4-carboxamida (4)

A uma solução de N-[(lS)-ciclopropil(fenil)metil]-3- (metiltio)-2-fenilquinolino-4-carboxamida (3) (1000 mg, 2,36 mmol) em 10 MeOH (50 ml) foi adicionado uma solução de NaIO4 (2,02 g, 9,43 mmol) em água (35 ml) a 25° C. A mistura de reação foi aquecida até o refluxo (85 c) por 4,0 horas. Todo o etanol foi removido e depois foi diluído com EtOAc, lavado com salmoura, secado em Na2SO4, filtrado, e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (10 a 35 15 % EtOAc/CH2Cl2) para fornecer o produto desejado (dois diastereômeros) como um sólido (642 mg, 62,0 %). SFC separou os 2 diastereômeros com 60 % de EtOH na coluna AD.

Para o isômero A. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 0,51 (m, 2H), 0,65 (m, 2H), 1,49 (m, IH), 2,75 (s, 3H), 4,80 (q, IH), 6,87 (d, IH), 7,41 (d, IH), 7,43 (d, IH), 7,45 - 7,51 (m, 6H), 7,75 (m, 2H), 7,81 (m, 2H), 8,18 (d, IH). MS APCI, m/z = 441 (M+1). LCMS: 2,05 min.

Para o isômero B. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 0,46 (m, 2H), 0,56 (m, 2H), 1,40 (m, IH), 2,85 (s, 3H), 4,70 (q, IH), 6,95 (d, IH), 7,40 (d, I Η), 7,44 (d, IH), 7,48 - 7,55 (m, 6H), 7,83 (m, 2H), 8,10 (m, 2H), 8,17 (d, IH). MS APCI, m/z = 441 (M+1). LCMS: 2,05 min.

Separação dos diastereômeros do Exemplo 8:

A separação preparativa de dois diastereômeros resultante da formação de uma mistura de isômeros no centro de enxofre foi obtida usando cromatografia fluida supercrítica de fase estacionária quiral. Uma coluna ChiralPak AD contendo 10 partículas de mícrons (21 x 250 mm) foi usada com um eluente isocrático de 60 % de etanol, contendo 0,5 % de dimetiletil amina, em 40 % de dióxido de carbono a 37° C. A taxa de fluxo deste eluente foi de 60 ml/min e os picos foram detectados por uv a 254 nm. Uma solução de 20 mg da mistura isomérica dissolvida em 2 ml de isopropanol foi depois injetada em um círculo de 5 ml por desenvolvimento de separação. Os dois picos separados foram depois coletados com o primeiro pico eluindo a 2,8 minutos e o segundo pico eluindo a 5,9 minutos. As duas frações isoladas foram ambas obtidas em > 99 % de ee como determinado pela medição de SFC analítica das frações isoladas em uma coluna ChiralPak AD-H (4,6 x 250 mm) em uma taxa de fluxo de 2,2 ml/min usando um eluente de 45 % de isopropanol, contendo 0,3 % de isopropil amina, e 55 % de CO2. O primeiro pico eluiu a 6,4 min e o segundo pico eluiu a 7,6 minutos sob estas condições. A detecção analítica foi feita por APCI MS e por espectometria uv de matriz de diodo. O ee em % foi calculado aplicando-se os dados da medição das áreas relativas integras dos dois picos a 254 nm. Sob estas condições, o fracionamento deste composto revelou que o segundo composto eluente tinha substancialmente mais do que atividade biológica quando testado no ensaio para atividade de NK-3 funcional do que o primeiro composto eluente.

Aqueles habilitados na técnica reconhecerão que os compostos aqui descritos podem ser fracionados seguindo a orientação fornecida para os 5 compostos dos Exemplos 2 e 9 sem experimentação indevida para obter e purificar o diastereômero tendo atividade biológica favorável.

TESTES BIOLÓGICOS

Atividade de Ligação do Receptor de NK-3:

Em geral, a atividade de ligação de NK-3r pode ser avaliada 10 usando os ensaios realizados como descrito em Krause et al., (Proc. Natl. Acad. Sei. USA 94: 310-315, 1997). O DNA NK-3r complementar é clonado a partir de um RNA hipotalâmico humano usando procedimentos padrão. O receptor de cDNA é inserido em um vetor de expressão adequado transfectado em uma linha celular de ovários de hamster chineses, e uma linha 15 celular clonal que se expressa de modo estável pode ser isolada, caracterizada e usada para os experimentos.

As células podem ser desenvolvidas em um meio de cultura de tecidos através de técnicas conhecidas por aqueles habilitados na técnica e recuperadas por centrifugação de baixa velocidade. As pelotas celulares 20 podem ser homogeneizadas, as membrana celulares totais isoladas por centrifugação de alta velocidade e submetidas à suspensão em uma solução salina tamponada. Em geral, os ensaios de ligação do receptor podem ser realizados incubando-se quantidades adequadas de preparações de membrana purificadas com 125I-metilPhe7-neurocinina B, na presença ou ausência de 25 compostos de teste. As proteínas de membranas podem ser coletadas pela filtração rápida e a radioatividade pode ser quantificada em um contador de placa β de cintilação. A ligação não específica pode ser distinguida a partir de uma ligação específica pelo uso de controles adequados e a afinidade dos compostos para o receptor expressado podem ser determinadas usando-se concentrações diferentes dos compostos.

Preparação de membranas a partir das células CHO transfectadas com receptores de NK-3 clonados:

Um gene receptor de NK-3 humano foi clonado usando métodos similares àqueles descritos para outros receptores NK humanos (Aharony et al., Mol. Pharmacol. 45:9-19, 1994; Caccese et al., Neuropeptides 33, 239-243, 1999). A seqüência de DNA do receptor de NK-3 clonado diferente da seqüência publicada (Buell et al., FEBS Letts. 299,90- 95, 1992; Huang et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 184,966-972, 1992) tendo um mudança de base T>C única calma no nucleotídeo 1320 da seqüência codificadora. Visto que a mudança é calma, o gene clonado fornece uma seqüência de aminoácido primária para proteína do receptor de NK-3 codificado idêntica à seqüência publicada. O cDNA receptor foi usado para transferir as células CHO-Kl usando métodos padrão e um clone que expressa de modo estável o receptor foi isolado e caracterizado. As membranas plasmáticas destas células foram preparadas como publicado (Aharony et al., 1994).

As células foram coletadas e centrifugadas para remover o meio. As células pelotizadas foram homogeneizadas (Brinkman Polytron, três 20 eupções de 15 s em gelo) em um tampão que consiste de 50 mM de Tris-HCl (pH 7,4), 120 mM NaCl, 5 mM KCl, 10 mM EDTA e inibidores de protease (0,1 mg/ml de inibidor de tripsina de feijão-soja, e 1 mM de iodoacetamida). O homogenado foi centrifugado a 1000 xg por 10 minutos a 4o C para remover fragmentos celulares. As pelotas foram lavadas uma vez com tampão 25 de homogeneização. Os sobrenadantes foram combinados e centrifugados a

40.000 xg por 20 minutos a 4o C. A pelota que contem membrana foi homogeneizada com um Polytron como anteriormente. A suspensão foi centrifugada a 40.000 xg por 20 minutos a 4o C, a pelota submetida à suspensão em um tampão (20 mM de HEPES, pH 7,4 contendo 3 mM de IngCl2, 30 mM de KCl, e 100 μΜ de tiorfano) e a concentração protéica foi determinada. A suspensão de membranas foi depois diluída a 3 mg/ml com um tampão contendo 0,02 % de BSA, e congelamento instantâneo. As amostras foram estocadas a -80 0C até o uso.

Ensaio quanto a Atividade de Ligação do Receptor de NK-3:

125

Um método do ensaio de ligação do receptor com [ I]MePhe7-NKB foi modificado a partir daquele descrito por Aharony et al., J. Pharmacol. Exper. Ther., 274:1216-1221, 1995.

As experiências de competição foram realizadas em 0,2 ml de tampão de ensaio (50 mM Tris-HCl, 4 mM MnCl2, 10 μΜ tiorfano, pH 7,4)

125

contendo membranas (2 μg proteína/reação), competidores testados, e [ I]MePhe7NKB (0,2 nM). O ligando homólogo não rotulado (0,5 μΜ) foi usado para definir a ligação não específica. As incubações foram realizadas a 25° C por 90 min. O ligando que liga ao receptor foi isolado através de filtração a vácuo em um Packard Harvester em placas GF/C previamente embebidas em

0,5 % de BSA. As placas foram lavadas com 0,02 M de Tris, pH 7,4. O cálculo das constantes do equilíbrio de ligação (Kd e Ki), densidade do receptor (Bmax), e a análise estatística foram realizados como previamente publicado (Aharony et al., 1995) usando os softwares GraphPad Prism ou IDBS XLfit.

Atividade Funcional de NK-3:

Em geral, a atividade funcional de NK-3 pode ser avaliada usando-se os ensaios de mobilização de cálcio em linhas celulares estáveis que expressam NK-3 r. A mobilização do cálcio induzida pelo agonista de 25 metilPhe7-neurocinina B pode ser monitorada usando um instrumento FLIPR (Molecular Devices) na maneira descrita pelo fabricante. Os agonistas podem ser adicionados às células e as respostas de fluorescência continuamente registradas por até 5 minutos. As ações dos antagonistas podem ser avaliadas pré incubando-se as células antes da aplicação do agonista de metilPhe7- neurocinina B. A ação dos agonistas pode ser avaliada observando-se sua atividade extrínseca em um tal sistema.

Ensaio para a Atividade Funciona de NK-3:

O receptor de NK-3 que expressa as célula de CHO foi mantido em um meio de crescimento (meio de Ham F12, 10 % de FBS, 2mM de L-glutamina, e 50 mg/ml de Higromicina B). Um dia antes do ensaio as células foram distribuídas em placas de 384 reservatórios em meio Ultraculture (Cambrex Bio Science) com 2 mM de L-glutamina para obter de 70 a 90 % de confluência, para quantificar a mobilização de cálcio induzida pelo receptor de NK-3, as células foram primeiro lavadas com um tampão de ensaio que consiste de uma Solução Salina de Hanks Balanceada, 15 mM de HEPES, e 2,5 mM de probenecid, pH 7,4. As células foram depois carregadas com um corante Fluo4/AM (4,4 μΜ) em tampão de ensaio. As células foram incubadas por uma hora e depois lavadas com um tampão de ensaio, expostas de 0,02 a 300 nM de senktide e a resposta de fluorescência foi registrada usando um instrumento de FLIPR (Molecular Devices Corporation). Para quantificar o antagonismo da resposta agonista, as células foram préincubadas com concentrações variadas de composto de teste por de 2 a 20 minutos e depois expostas a 2 nM de senktide, uma concentração que sozinha produz cerca de 70 % de uma resposta de cálcio máxima. Os dados resultantes foram analisado usando o software XLfit (IDBS manufacturer) para determinar os valores EC50 e IC50.

Claims (20)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que está de acordo com Fórmula I: <formula>formula see original document page 38</formula> em que: R1 é selecionado de alquila C 1.4 ou cicloalquila C3.7; R2 em cada ocorrência é independentemente selecionado de H n em cada ocorrência é independentemente selecionado de 1, 2 ou3 R é selecionado de H, alquila Ci_4, cicloalquinila C3.6 e alquila quando R1 ou R3 é uma porção alquila ou cicloalquila, as ditas porções não são substituídas ou têm 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes independentemente selecionados em cada ocorrência de -OH, -NH2, -CN, fenila e halogênio, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é selecionado de alquila C 1.4 ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é selecionado de cicloalquinila C3.6 ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R2 é, em cada ocorrência independentemente selecionado de H, F, Cl, Br ou I, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que R é, em cada ocorrência independentemente selecionado de H ou F, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R é selecionado de alquila Cm e R é, em cada ocorrência independentemente selecionado de H ou F, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

7. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R1 é selecionado de metila, etila, n-propila, iso-propila, ciclopropila ou ciclobutila, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R é selecionado de cicloalquinila C3.6 e R é, em cada ocorrência independentemente selecionado de H ou F, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Composto de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo fato de que está de acordo com as Fórmulas III ou IV: <formula>formula see original document page 39</formula> em que as ligações em cunha para baixo e em cunha para cima são ligações duplas e R15 R2, n e R3 são como definidos para a Fórmula I, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

10. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado de: ((S)-l-fenil-propil)-amida do ácido 3-metanossulfanil-2-fenilquinolino-4-carboxílico; ((S)-l-fenil-propil)-amida do ácido 3-metanossulfinil-2-fenilquinolino-4-carboxílico; ((S)-l-fenil-etil)-amida do ácido 3-metilsulfanil-2-fenilquinolino-4-carboxílico; 3-(metilsulfinil)-2-fenil-N-[(S)-l-feniletil]quinolino-4- carboxamida; Metil éster do ácido (R)-[(3-metilsulfanil-2-fenil-quinolino-4- carbonil)-amino]-fenil-acético; 2-(3-(metilsulfinil)-2-fenilquinolino-4-carboxamido)-2- feniletanoato de (R)-metila; ((S)-ciclopropil-fenil-metil)-amida do ácido 3-metilsulfanil-2- fenil-quinolino-4-carboxílico; ((S)-ciclopropil-fenil-metil)-amida do ácido 3-metanossulfmil2-fenil-quinolino-4-carboxílico; ((S)-l-cicloexil-etil)-amida do ácido 3-metilsulfanil-2-fenilquinolino-4-carboxílico; ((S)-l-cicloexil-etil)-amida do ácido 3-metanossulfinil-2-fenilquinolino-4-carboxílico; [(S)-l-(3-fluoro-fenil)-propil]-amida do ácido 3-metilsulfanil2-fenil-quinolino-4-carboxílico; [(S)-l-(3-fluoro-fenil)-propil]-amida do ácido 3-metilsulfinil.2-fenil-quinolino-4-carboxílico; [(S)-ciclopropil-(3-fluoro-fenil)-metil]-amida do ácido 3- metilsulfanil-2-fenil-quinolino-4-carboxílico; [(S)-ciclopropil-(3-fluoro-fenil)-metil]-amida do ácido 3- metilsulfinil-2-fenil-quinolino-4-carboxílico; ((S)-2-ciano-l-fenil-etil)-amida do ácido 3-metilsulfanil-2- fenil-quinolino-4-carboxílico, ou ((S)-2-ciano-l-fenil-etil)-amida do ácido 3-metilsulfmil-2- fenil-quinolino-4-carboxílico ou um estereoisômero, enantiômero, precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

11. Processo para preparar um composto da Fórmula I, <formula>formula see original document page 41</formula> em que: R1 é selecionado de alquila Cn4 ou cicloalquila C3.7; R em cada ocorrência é independentemente selecionado de H n em cada ocorrência é independentemente selecionado de 1, 2 R 3é selecionado de H, alquila Cn4, cicloalquinila C3.6 e alquila quando R ou R é uma porção alquila ou cicloalquila, as ditas porções não são substituídas ou têm 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes independentemente selecionados em cada ocorrência de -OH, -NH2, -CN, fenila e halogênio, o dito processo caracterizado pelo fato de compreender: reagir um ácido 3-alquilsulfanil-2-fenil-quinolino-4- carboxílico com uma amina apropriada na presença de um sistema de agente de copulação adequado tal como dicicloexilcarbodiimida e hidroxibenzotriazol para produzir um ácido 3-alquilsulfanil-2-fenil-quinolino4-carboxílico (alquil)-amida, oxidar a amida com um agente oxidante tal como periodato de sódio para produzir um sulfóxido correspondente, ou oxidar a amida com um agente oxidante tal como ácido meta-cloroperoxibenzóico para produzir uma sulfona correspondente da Fórmula I.

12. Método para o tratamento ou profilaxia de uma doença ou condição em que a modulação do receptor de NK-3 é benéfica, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um paciente sofrendo da dita doença ou condição uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a Fórmula I: <formula>formula see original document page 42</formula> em que: R1 é selecionado de alquila C1.4 ou cicloalquila C3.7; R2 em cada ocorrência é independentemente selecionado de H ou halogênio; n em cada ocorrência é independentemente selecionado de 1, 2 ou 3; R é selecionado de H, alquila CN4, cicloalquinila C3_6 e alquila Ci-4 OC(O)-; quando R ou R é uma porção alquila ou cicloalquila, as ditas porções não são substituídas ou têm 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes independentemente selecionados em cada ocorrência de -OH, -NH2, -CN, fenila e halogênio, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

13. Método de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que a dita doença ou condição são selecionadas de depressão, ansiedade, esquizofrenia, distúrbios cognitivos, psicoses, obesidade, doenças inflamatórias, síndrome do intestino irritável, distúrbio do intestino inflamatório, êmese, pré-eclâmpsia, doença pulmonar obstrutiva crônica, distúrbios associados com gonadotrofmas excessivas e/ou andrógenos incluindo dismenorréia, hiperplasia prostática benigna, câncer prostático, e câncer nos testículos.

14. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um diluente, lubrificante ou carreador farmaceuticamente aceitáveis e um composto de acordo com Fórmula I: em que: R1 é selecionado de alquila Cn4 ou cicloalquila C3.7; R em cada ocorrência é independentemente selecionado de H ou halogênio; n em cada ocorrência é independentemente selecionado de 1, 2 ou 3; e ^ R é selecionado de H, alquila Cn4, cicloalquinila C3_6 e alquila CN4 OC(O)-; quando R ou R é uma porção alquila ou cicloalquila, as ditas porções não são substituídas ou têm 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes independentemente selecionados em cada ocorrência de -OH, -NH2, -CN, fenila e halogênio, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

15. Método para o tratamento ou profilaxia de uma doença ou condição em que modulação do receptor de NK-3 é benéfica, caracterizado pelo fato de compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica como definida na reivindicação 14 a um indivíduo sofrendo da dita doença ou condição.

16. Método de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que a dita doença ou condição é selecionada de depressão, ansiedade, esquizofrenia, distúrbios cognitivos, psicoses, obesidade, doenças inflamatórias, síndrome do intestino irritável, distúrbio do intestino inflamatório, êmese, pré-eclâmpsia, doença pulmonar obstrutiva crônica, distúrbios associados com gonadotrofinas excessivas e/ou andrógenos incluindo dismenorréia, hiperplasia prostática benigna, câncer prostático, e câncer nos testículos.

17. Composto, caracterizado pelo fato de que é de acordo com <formula>formula see original document page 45</formula> em que: R1 é selecionado de alquila Cn4 ou cicloalquila C3.7; R em cada ocorrência é independentemente selecionado de H ou halogênio; n em cada ocorrência é independentemente selecionado de 1, 2 ou 3; R é selecionado de H, alquila Cn4, cicloalquinila C3.6 e alquila CN4 OC(O)-; quando R ou R é uma porção alquila ou cicloalquila, as ditas porções não são substituídas ou têm 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes independentemente selecionados em cada ocorrência de -OH, -NH2? -CN, fenila e halogênio, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o uso no tratamento ou profilaxia de uma doença ou condição em que a modulação do receptor de NK-3 é benéfica.

18. Uso de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que a dita doença ou condição é selecionada de depressão, ansiedade, esquizofrenia, distúrbios cognitivos, psicoses, obesidade, doenças inflamatórias, síndrome do intestino irritável, distúrbio do intestino inflamatório, êmese, pré-eclâmpsia, doença pulmonar obstrutiva crônica, distúrbios associados com gonadotrofmas excessivas e/ou andrógenos incluindo dismenorréia, hiperplasia prostática benigna, câncer prostático, e câncer nos testículos.

19. Uso de um composto, caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de uma doença ou condição, em que a modulação do receptor de NK-3 é benéfica, o composto sendo de acordo com Fórmula I: <formula>formula see original document page 46</formula> em que: R1 é selecionado de alquila Cm ou cicloalquila C3-7; R2 em cada ocorrência é independentemente selecionado de H n em cada ocorrência é independentemente selecionado de 1, 2 R3 é selecionado de H, alquila C 1.4, cicloalquinila C3.6 e alquila e, quando R1 ou R3 é uma porção alquila ou cicloalquila, as ditas porções não são substituídas ou têm 1, 2, 3, 4 ou 5 substituintes independentemente selecionados em cada ocorrência de -OH, -NH2, -CN, fenila e halogênio, ou um precursor hidrolisável in vivo ou sal farmaceuticamente ou halogênio; ou 3; aceitável do mesmo.

20. Uso de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que a dita doença ou condição é selecionada de depressão, ansiedade, esquizofrenia, distúrbios cognitivos, psicoses, obesidade, doenças inflamatórias, síndrome do intestino irritável, distúrbio do intestino inflamatório, êmese, pré-eclâmpsia, doença pulmonar obstrutiva crônica, distúrbios associados com gonadotrofinas excessivas e/ou andrógenos incluindo dismenorréia, hiperplasia prostática benigna, câncer prostático, e câncer nos testículos.