BRPI0814769B1 - Composição compreendendo timol, ácido sórbico e ácido cítrico e seu método de preparação - Google Patents

Composição compreendendo timol, ácido sórbico e ácido cítrico e seu método de preparação Download PDF

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Description

(54) Título: COMPOSIÇÃO COMPREENDENDO TIMOL, ÁCIDO SÓRBICO E ÁCIDO CÍTRICO E SEU MÉTODO DE PREPARAÇÃO (51) Int.CI.: A23K 10/00; A23K 20/00; A23K 30/00; A23L 3/3508; A61P 1/00 (30) Prioridade Unionista: 03/08/2007 IT Μ12007 A 001623 (73) Titular(es): VETAGRO INTERNATIONAL S.R.L.
(72) Inventor(es): ANDRÉA PIVA; MAURIZIO TEDESCHI
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Relatório Descritivo da Patente de Invenção para COMPOSIÇÃO COMPREENDENDO TIMOL, ÁCIDO SÓRBICO E ÁCIDO CÍTRICO E SEU MÉTODO DE PREPARAÇÃO.
CAMPO TÉCNICO [001] A presente invenção refere-se a uma composição compreendendo uma mistura sinérgica de aromatizantes ou agentes aromatizantes e ácidos orgânicos. Além disso, a presente invenção refere-se ao uso dessa composição como um conservante para produtos alimentícios para animais e aditivos destinados de preferência, a animais monogástricos.
TÉCNICA PRECEDENTE [002] Sabe-se que, o valor do pH no aparelho gástrico dos animais monogástricos é acido. O valor do pH varia de acordo com a parte específica do trato gastrointestinal. Por exemplo, o estômago possui um pH de 2 a 5, o duodeno possui um pH de 4 a 6, o jejuno possui um pH de 6 a 7, o ceco possui um pH de 6 a 6,5 e, por fim, o cólon possui um pH de 6,5 a 7.
[003] No sistema gastrointestinal, esse meio ácido fornece um efeito protetor contra a proliferação de patógenos.
[004] Sabe-se, contudo, que alguns organismos patogênicos são capazes de desenvolver um sistema de defesa complexo que permite que as células dos próprios patógenos sobrevivam, mesmo em situações os valores de pH são tão baixos quanto 3. Além disso, algumas bactérias tais como Salmonella typhimurium, podem desenvolver um sistema capaz de tolerar ácidos com um pH = 3 após exposição prévia a um ácido fraco com um pH = 5.
DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO [005] Na EP1391155, descreve-se uma composição compreendendo ácidos orgânicos e agentes aromatizantes. A composição é empregada para evitar infecções patogênicas no trato gastrointestinal
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2/24 de animais monogástricos.
[006] Contudo, permanece ainda um vívido interesse no desenvolvimento de novas composições com uma capacidade de prevenir ou controlar infecções devido à presença e/ou proliferação de patógenos no trato gastro-intestinal. Em particular, é importante desenvolver composições com uma eficácia antibacteriana incrementada.
[007] Neste ponto, o Depositante propõe uma composição dotada das características descritas na reivindicação independente apensa. [008] As modalidades preferidas da invenção estão de acordo com as características descritas nestas reivindicações dependentes apensas.
[009] Para fins da presente invenção, a composição significa uma composição na forma sólida, por exemplo, uma composição granular, ou uma composição em pó.
[0010] Para fins da presente invenção, aplica-se o Conselho Diretório 88/388 EEC de 22 de junho de 1988 de acordo com as leis dos Estados Associados referente a aromatizantes para emprego em produtos alimentícios e a matérias-primas para sua produção (publicado na Itália na Official Gazette n. L 184 de 15/07/1988). O Diretório em questão aplica-se a aromatizantes utilizados ou destinados ao uso em produtos alimentícios ou sobre os mesmos a fim de conferir-lhes aroma ou sabor e a matérias-primas usadas para a produção dos aromatizantes. Portanto, para finalidades da presente invenção:
a) aromatizante significa substâncias aromatizantes, preparações aromatizantes, aromatizantes para processamento, aromatizantes defumados ou suas misturas;
b) substâncias aromatizantes significa uma substância química definida com propriedades aromatizantes, obtidas por:
i) processos físicos adequados (incluindo destilação e extração com solvente) ou processos enzimáticos ou microbiológicos de
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3/24 material de origem vegetal ou animal sejam no estado bruto ou após processamento para consumo humano por processos de preparação alimentar tradicionais (incluindo secagem, torrefação e fermentação);
ii) por síntese química ou isolada por processos químicos os quais são quimicamente idênticos a uma substância que está naturalmente presente na origem da matéria vegetal ou animal conforme descrito em i);
iii) por síntese química, porém que não é quimicamente idêntica a uma substância que está presente naturalmente na origem de material vegetal ou animal conforme descrito em i);
c) preparação aromatizante significa um produto, diferente das substâncias indicadas em b) i), seja este concentrado ou não, com propriedades aromatizantes obtidas por processos físicos apropriados (incluindo destilação e extração com solvente) ou por processos enzimáticos ou microbiológicos de material de origem vegetal ou animal, seja no estado bruto ou após processamento para consumo humano por processos de preparação alimentar tradicional (incluindo secagem, torrefação e fermentação);
d) aromatizante de processo significa um produto obtido de acordo com boas práticas de fabricação, mediante aquecimento a uma temperatura que não excede 180°C durante um período que não excede 15 minutos de uma mistura de ingredientes, sendo que os mesmos não possuem necessariamente, propriedades aromatizantes, dos quais pelo menos um deles contém nitrogênio (amino) e um outro é um açúcar redutor;
e) aromatizante defumado significa um extrato fumigado usado em processos tradicionais de defumação de alimento.
[0011] Os aromatizantes podem conter produtos alimentícios bem como outras substâncias.
[0012] A composição à qual a presente invenção é pertinente,
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4/24 compreende uma mistura consistindo em pelo menos uma substância selecionada do grupo conforme citado em a), b), c), d) e e) em combinação com pelo menos um ácido orgânico e/ou pelo menos um ácido orgânico na forma de sal.
[0013] Em uma modalidade, a referida substância pode ser, por exemplo, um aromatizante ou substância aromatizante sem qualquer limitação. A referida substância é escolhida do grupo compreendendo timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido octanoico, ácido heptanoico, dissulfeto de dialila, cânfora, limoneno, ácido rosmarínico, paracimeno, γ-terpineno, a-pineno, a-tujona, 1,8-cineol.
[0014] Por exemplo, para-cimeno está presente em Thymus vulgaris e Origanum vulgare; γ-terpineno está presente em Thymus vulgaris e Origanum vulgare; a-tujona está presente em Salvia officinalis; apineno está presente em Rosmarinus officinalis e Salvia officinalis; 1,8 cineol está presente em Rosmarinus officinalis e Salvia officinalis. [0015] O ácido orgânico é escolhido do grupo compreendendo ácido láctico, málico, benzoico, fumárico e sórbico ou um sal destes. Para finalidades da presente invenção, o ácido orgânico pode estar presente na forma de sal, por exemplo, com um metal alcalino ou alcalinoterroso.
[0016] Em uma modalidade preferida, a composição compreende além disso, ácido cítrico ou um citrato de metal alcalino ou alcalinoterroso.
[0017] Por exemplo, a composição pode ser representada por ácido cítrico, ácido sórbico e timol.
[0018] A mistura pode estar na forma sólida ou na forma líquida, por exemplo, em solução aquosa.
[0019] Na mistura da presente invenção, a relação molar entre a pelo menos uma substância conforme citado acima em a), b), c), d), e) e o pelo menos um ácido orgânico fica dentro da faixa de 1:500 a
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500:1, preferivelmente 1:300 a 300:1, ainda mais preferivelmente, na faixa de 1:300 a 300:1, e ainda mais preferivelmente 1:200 a 200:1. Com vantagem, a relação molar fica na faixa de 1:150 a 150:1, por exemplo, 1:100 a 100:1 ou 1:50 a 50:1 ou 1:25 a 25:1.
[0020] A composição e/ou mistura da presente invenção também podem conter outros componentes nutricionais úteis e fisiologicamente aceitáveis para animais.
[0021] A mistura na forma líquida, por exemplo, na solução aquosa pode ter um pH de 6,5 a 7,5. A mistura pode ser convertida na forma sólida por meio de um processo de cristalização conhecido na técnica. [0022] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de pelo menos dois aromatizantes ou substâncias aromatizantes escolhidos do grupo compreendendo: timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido octanoico, ácido heptanoico, dissulfeto de dialila, cânfora, limoneno, ácido rosmarínico, para-cimeno, γ-terpineno, a-pineno, a-tujona, 1,8-cineol; e pelo menos dois ácidos orgânicos escolhidos do grupo compreendendo ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico, e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de três aromatizantes ou substâncias aromatizantes e de pelo menos três ácidos orgânicos. Ainda mais preferivelmente, a mistura é composta de quatro aromatizantes ou substâncias aromatizantes e de pelo menos quatro ácidos orgânicos.
[0023] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de carvacrol e pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico, e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de carvacrol e de pelo menos de dois ácidos orgânicos; ainda mais preferivelmente três ácidos orgânicos.
[0024] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de timol e pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreenPetição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 9/33
6/24 dendo ácido láctico, ácido málico ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de timol e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0025] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de cinamaldeído e pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de cinamaldeído e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0026] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de vanilina e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de vanilina e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0027] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta cânfora e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de cânfora e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0028] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de ácido heptanoico e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de ácido heptanoico e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0029] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de ácido octanoico e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do gruPetição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 10/33
7/24 po compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de ácido octanoico e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0030] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de limoneno e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de limoneno e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0031] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de dissulfeto de dialila e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de dissulfeto de dialila e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0032] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de ácido rosmarínico e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de ácido rosmarínico e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0033] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de apineno e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de a-pineno e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0034] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de atujona e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo comPetição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 11/33
8/24 preendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de a-tujona e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0035] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de cineol e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de cineol e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0036] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de gterpineno e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de g-terpineno e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0037] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de pcimeno e de pelo menos um ácido orgânico escolhido do grupo compreendendo ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido benzoico, ácido fumárico e ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de para-cimeno e de pelo menos dois ácidos orgânicos, ainda mais preferivelmente, três ácidos orgânicos.
[0038] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante escolhido do grupo compreendendo timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido octanoico, ácido heptanoico, dissulfeto de dialila, cânfora, limoneno, ácido rosmarínico, para-cimeno, g-terpineno, a-pineno, a-tujona e 1,8cineol, e de ácido cítrico. A mistura é preferivelmente composta de dois aromatizantes ou substâncias aromatizantes e ácido cítrico, ainda mais preferivelmente três aromatizantes ou substâncias aromatizantes.
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9/24 [0039] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante escolhido do grupo compreendendo timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido octanoico, ácido heptanoico, dissulfeto de dialila, cânfora, limoneno, ácido rosmarínico, para-cimeno, g-terpineno, a-pineno, a-tujona e 1,8cineol, e de ácido láctico. A mistura é preferivelmente composta de dois aromatizantes ou substâncias aromatizantes e ácido láctico, ainda mais preferivelmente três aromatizantes ou substâncias aromatizantes. [0040] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante escolhido do grupo compreendendo timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido octanoico, ácido heptanoico, dissulfeto de dialila, cânfora, limoneno, ácido rosmarínico, para-cimeno, g-terpineno, a-pineno, a-tujona e 1,8cineol, e de ácido málico. A mistura é preferivelmente composta de dois aromatizantes ou substâncias aromatizantes e ácido málico, ainda mais preferivelmente três aromatizantes ou substâncias aromatizantes. [0041] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante escolhido do grupo compreendendo timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido octanoico, ácido heptanoico, dissulfeto de dialila, cânfora, limoneno, ácido rosmarínico, para-cimeno, g-terpineno, a-pineno, a-tujona e 1,8cineol, e de ácido benzoico. A mistura é preferivelmente composta de dois aromatizantes ou substâncias aromatizantes e ácido benzoico, ainda mais preferivelmente três aromatizantes ou substâncias aromatizantes.
[0042] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante escolhido do grupo compreendendo timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido octanoico, ácido heptanoico, dissulfeto de dialila, cânfora, limoneno, ácido rosmarínico, para-cimeno, g-terpineno, a-pineno, a-tujona e 1,8Petição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 13/33
10/24 cineol, e de ácido fumárico. A mistura é preferivelmente composta de dois aromatizantes ou substâncias aromatizantes e ácido cítrico, ainda mais preferivelmente três aromatizantes ou substâncias aromatizantes. [0043] Em uma modalidade preferida, a mistura é composta de pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante escolhido do grupo compreendendo timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido octanoico, ácido heptanoico, dissulfeto de dialila, cânfora, limoneno, ácido rosmarínico, para-cimeno, g-terpineno, a-pineno, a-tujona e 1,8cineol, e de ácido sórbico. A mistura é preferivelmente composta de dois aromatizantes ou substâncias aromatizantes e ácido sórbico, ainda mais preferivelmente três aromatizantes ou substâncias aromatizantes.
[0044] Vantajosamente, a relação molar entre o referido pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante e o pelo menos um ácido orgânico fica na faixa de 1:300 a 1:5, para o ácido málico ou ácido láctico, respectivamente, preferivelmente de 1:100 a 1:10.
[0045] Vantajosamente, a relação molar entre o referido pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante e o pelo menos um ácido orgânico fica na faixa de 1:250 a 1:5, para o ácido benzoico ou ácido cítrico, respectivamente, preferivelmente de 1:100 a 1:10.
[0046] Vantajosamente, a relação molar entre o referido pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante e o pelo menos um ácido orgânico fica na faixa de 1:250 a 1:5, para o ácido fumárico, preferivelmente de 1:125 a 1:10.
[0047] Vantajosamente, a relação molar entre o referido pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante e o pelo menos um ácido orgânico fica na faixa de 1:100 a 1:5, para o ácido sórbico, preferivelmente de 1:50 a 1:10.
[0048] Vantajosamente, a mistura composta de timol, carvacrol e cinamaldeído proporciona uma ação antibacteriana digna de nota,
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11/24 permitindo que, qualquer patógeno presente seja consideravelmente reduzido/eliminado após um período de apenas 24 horas.
[0049] Constitui um objetivo da presente invenção proporcionar uma composição compreendendo uma mistura conforme acima, revestida por uma camada de um agente distribuidor. Esse agente distribuidor é escolhido dentre aqueles que podem fornecer e liberar os componentes da referida mistura no trato gastrointestinal. A liberação em diferentes partes do trato gastrointestinal é uma função do tempo, temperatura pH e da flora bacteriana, bem como dos microorganismos aí presentes.
[0050] Preferivelmente, a mistura da invenção possui um revestimento externo compreendendo duas distintas camadas. O revestimento pode liberar os componentes presentes na mistura como uma função do tempo, temperatura, pH e flora bacteriana e os microorganismos presentes em diferentes partes do trato gastrointestinal. [0051] A mistura pode ser revestida por uma ou duas camadas usando técnicas conhecidas dos versados na técnica.
[0052] Alternativamente, o agente distribuidor pode ser misturado com o referido pelo menos um aromatizante ou substância aromatizante e o referido pelo menos um ácido orgânico. A mistura dos componentes pode ser obtida mediante técnicas do conhecimento de pessoas habilitadas.
[0053] Um exemplo de um procedimento proporciona o agente distribuidor, por exemplo, um triglicerídeo vegetal, para introdução a um recipiente equipado com aquecimento e aparelho de misturação. A temperatura no recipiente é a seguir elevada a uma temperatura de 80 a 120°C e a matriz é mantida sob agitação até o agente distribuído liquefazer-se. Opcionalmente, aditivos podem ser adicionados por último para a matriz liquefeita. A agitação e temperatura são mantidas até ser formada uma mistura do agente distribuidor com uma distribuição
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12/24 homogênea de aditivos. Durante esta etapa podem ser adicionados emulsificantes para a referida massa.
[0054] A composição revestida ou não revestida pode ser convertida na forma granular usando técnicas conhecidas do pessoal habilitado.
[0055] O agente distribuidor pode compreender uma substância lipídica com capacidade de modular uma liberação lenta dos componentes da mistura.
[0056] É importante que os componentes da mistura sejam liberados gradualmente para as diferentes partes do trato gastrointestinal. Uma liberação gradual e específica para as diferentes partes do trato gastrointestinal presta-se a melhorar a atividade antibacteriana da composição da presente invenção, pelo fato de haver uma melhor sinergia entre os componentes da mistura.
[0057] A substância lipídica é escolhida entre triglicerídeos hidrogenados e/ou não hidrogenados. Os triglicerídeos são escolhidos entre os de origem vegetal e/ou animal.
[0058] Triglicerídeos vegetais hidrogenados são escolhidos do grupo compreendendo óleo de palma, óleo de girassol, óleo de milho, óleo de colza, óleo de amendoim, e óleo de soja.
[0059] Os triglicerídeos de origem animal são escolhidos dentre: sebo de boi e banha de porco.
[0060] Preferivelmente, a composição pode compreender o agente distribuidor em uma proporção de 40 a 70% em peso, por exemplo, em uma proporção de 45 a 55% em peso, e a mistura de acordo com a invenção em uma proporção de 1 a 50% em peso, por exemplo, em uma proporção de 5 a 40% em peso ou de 15 a 30% em peso, em proporção ao peso total da composição.
[0061] A matriz pode compreender ainda aditivos particulares. Os aditivos são escolhidos do grupo compreendendo: sílica fumegada,
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13/24 estearato de cálcio, estearato de magnésio, e sulfato de cálcio. Os aditivos usados prestam para aumentar a viscosidade da própria matriz e reduzir a permeabilidade. De preferência, o agente distribuidor compreende vários aditivos em uma proporção de 0,1 a 03% em peso, em proporção ao peso total do agente distribuidor, por exemplo, e 1 a 20% ou 5 a 10% em peso.
[0062] A composição da invenção pode ser empregada para evitar e/ou tratar infecções bacterianas. Para fins da presente invenção infecções bacterianas significam todas as situações onde a presença e/ou crescimento de organismos procariotos têm um efeito prejudicial sobre o hospedeiro, tal como ocasionando doenças.
[0063] Dentre os organismos procariotos faz-se menção aos pertencentes às espécies: Salmonella sp., S. aureus, E. faecalis, E. coli, K. Pneumoniae, P. mirabilis, P. aeruginosa, C. perfrigens, Cambylobacter sp., s.pneumoniae, B. cereus, C. albicans, A.oryzae, P. funiculosum e F. moniliforme.
[0064] Em uma modalidade mais preferida, os referidos organismos procariotos são C. perfrigens e Salmonella typhimurium. Em uma outra modalidade preferida, a referida mistura é empregada no preparo de um medicamento na prevenção e/ou tratamento de infecções bacterianas que além disso, incluem um agente distribuidor. Em uma modalidade mais preferida ainda o agente distribuidor é uma matriz lipídica conforme descrito acima.
[0065] A medicação nessa modalidade pode ser empregada para prevenção e/ou tratamento de infecções bacterianas no sistema gastrointestinal de animais monogástricos.
[0066] A composição da presente invenção encontra aplicação como conservantes para produtos alimentícios animais e aditivos.
Parte Experimental
Exemplo 1 - Avaliação da atividade antimicrobiana exerciPetição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 17/33
14/24 da pelos ácidos orgânicos e aromatizantes ou substâncias aromatizantes contra Clostridium perfringens após 24 horas de incubação em placas de microtitulação, usando o método de densidade óptica.
[0067] De um modo geral, o poder antibacteriano das misturas da presente invenção foi determinado pelo emprego de um método de diluição e medições de densidade óptica (Smith-Palmer et al., 1988)' [0068] A concentração mínima inibidora (MIC) de uma substância ou mistura pode ser definida como a menor concentração daquela substância ou mistura que irá inibir o crescimento de organismos usados em uma dada dose de infecção após um determinado período de tempo (Karapinar and Aktug, 1987; Onawunmi, 1989; Hammer et al., 1999; Delaquis et al., 2002).
[0069] C perfringens foi preservada em carne cozida à temperatura ambiente e inoculada em um caldo de cultura (Oxoid) contendo RCM (Meio Reforçado com Clostridia) sendo incubada a 37°C por 24 horas sob condições anaeróbicas.
[0070] Antes de serem empregadas as cepas conservadas de C. perfringens foram cultivadas duas vezes, com 24 horas de incubação a cada vez.
[0071] Os seguintes aromatizantes ou substâncias aromatizantes foram testados: timol, vanilina, carvacrol, cinamaldeído, ácido heptanoico, ácido octanoico, cânfora limoneno, dissulfeto de dialila, ácido rosmarínico, a-pineno, a-tujona, cineol, γ-terpineno e para-cimeno. [0072] Os seguintes ácidos orgânicos foram testados: ácido cítrico, ácido sórbico, ácido málico, ácido fumárico, ácido benzoico e ácido láctico.
[0073] As soluções de estoque de cada uma dessas substâncias denominadas supra (aromatizantes/ substâncias aromatizantes e ácidos orgânicos) foram preparadas dissolvendo-se as substâncias em água deionizada. O pH da solução foi corrigido em 6,5 e a solução foi
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15/24 a seguir submetida a filtração estéril (diâmetro de poro: 0,22 pm).
[0074] As soluções de emprego contendo o ácido orgânico foram preparadas realizando-se uma diluição serial dupla de cada solução de estoque usando um caldo de cultura preparado como descrito acima com um pH de 6,5, de modo a se obter as menores concentrações para teste, de acordo com o tipo de ácido.
[0075] As soluções de estoque aromatizantes foram obtidas diluindo-se as soluções em álcool etílico (75%) de modo a atingir 7,28 mM, porém as soluções de estoque para vanilina, limoneno, e cânfora foram obtidas usando-se água deionizada.
[0076] O pH de todas as soluções foi ajustado em torno de 6,5. Todas as soluções foram esterilizadas por filtração usando poros com um diâmetro de 0,22 pm.
[0077] As soluções de emprego contendo o caldo de cultura e aromatizantes ou substâncias aromatizantes foram preparadas diluindo-se as últimas com o caldo de cultura RMC a um pH de 6,5 (solução de estoque contendo aromatizantes ou substâncias aromatizantes: caldo RMC = 3:10. As outras concentrações, de até 1,96 mM foram obtidas do mesmo modo.
[0078] A inibição de Clostridium perfringens foi analisada a uma concentração de 1 x 104 CFU por poço. Cada um dos 96 poços foi enchido com 100 pl de inóculo bacteriano (1 x 105 CFU/ml) e 100 pl de cada solução. Os poços de controle negativo foram inoculados do mesmo modo com 100 pl de cultura (1 x 105 CFU/ml) e 100 pl de caldo de cultura (pH 6,5), sem adição de qualquer substância (ácido orgânico ou substâncias aromatizantes). Cada substância foi submetida a teste duas vezes por placa.
[0079] As placas de Clostridium perfringens foram incubadas a 37°C sob condições anaeróbicas.
[0080] A turbidez das culturas foi empregada como um indicador
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16/24 do crescimento bacteriano sendo avaliada por medição da absorbância a 630 nm (Tecan Spectra Classic). A absorbância foi medida após 24 horas de incubação.
Resultados
Foi feita uma análise dos gráficos ilustrando o crescimento de Clostridium perfringens, conforme determinado com base nas medições da absorbância, mostrando uma atividade antibacteriana aperfeiçoada/incrementada para as misturas relacionadas abaixo, comparado-se com a atividade de cada ácido orgânico ou substância aromatizante considerados separadamente.
[0081] As misturas apresentando um efeito sinérgico entre o ácido orgânico e a substância aromatizante usada, se comparado com a substância orgânica considerada individualmente ou substâncias aromatizantes consideradas individualmente, estão relacionadas a seguir:
1. carvacrol 0,98 - 0,49 + ácido cítrico 31,25 - 7,82.
[0082] Portanto, carvacrol e ácido cítrico são de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:65.
2. carvacrol 0,98 - 0,49 + ácido sórbico 50 - 3,13.
[0083] Portanto, carvacrol e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:3 a 1:110.
3. carvacrol 0,98 - 0,49 + ácido málico 125 - 15,63.
[0084] Portanto, carvacrol e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:260.
4. carvacrol 0,98 - 0,49 + ácido fumárico 62,5 - 7,82.
[0085] Portanto, carvacrol e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:65.
5. carvacrol 0,98 + ácido benzoico 62,5 - 31.25.
[0086] Portanto, carvacrol e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 to 1:75.
6. carvacrol 0,98 - 0,73 + ácido láctico 125 - 62,5.
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17/24 [0087] Portanto, carvacrol e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:60 to 1:180.
7. timol 1,46 - 0,49 + ácido cítrico 31,25 - 15,63.
[0088] Portanto, timol e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 to 1:75.
8. timol 0,98 + ácido sórbico 25 - 6,25.
[0089] Portanto, timol e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 to 1:30.
9. timol 0,98 - 0,73 + ácido málico 125 - 31,25.
[0090] Portanto, timol e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 to 1:180.
10. timol 1,82 - 0,98 + ácido fumárico 125 - 31,25. [0091] Portanto, timol e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 to 1:150.
11. timol 0,98 - 0,73 + ácido benzoico 62,5 - 15,63. [0092] Portanto, timol e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 to 1:90.
12. timol 0,98 + ácido láctico 500.
[0093] Portanto, timol e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:450 to 1:550.
13. cinamaldeído 0,98 - 0,49 + ácido cítrico 15,63 - 7,82. [0094] Portanto, cinamaldeído e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 to 1:35.
14. cinamaldeído 1,46 - 0,49 + ácido sórbico 50 - 3,13. [0095] Portanto, cinamaldeído e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:2 to 1:110.
15. cinamaldeído 0,49 + ácido málico 62,5 - 15,63. [0096] Portanto, cinamaldeído e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 to 1:135.
16. cinamaldeído 0,98 + ácido fumárico 62,5 - 15,63.
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18/24 [0097] Portanto, cinamaldeído e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 to 1:65.
17. cinamaldeído 0,98 - 0,73 + ácido benzoico 31,25 7,62.
[0098] Portanto, cinamaldeído e ácido cítrico benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 to 1:50.
18. cinamaldeído 1,46 - 0,98 + ácido láctico 125 - 62,5. [0099] Portanto, cinamaldeído e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:40 a 1:135.
19. vanilina 1,82 - 0,49 + ácido cítrico 31,25.
[00100] Portanto, vanilina e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:70.
20. vanilina 1,82 - 0,98 + ácido sórbico 50 - 25.
[00101] Portanto, vanilina e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:60.
21. vanilina 1,46 + ácido málico 125.
[00102] Portanto, vanilina e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:80 a 1:100.
22. vanilina 1,82 - 0,73 + ácido fumárico 31,25 - 3,91. [00103] Portanto, vanilina e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:2 a 1:50.
23. vanilina 0,73 - 0,49 + ácido benzoico 62,5.
[00104] Portanto, vanilina e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:80 a 1:130.
24. vanilina 1,82 - 0,98 + ácido láctico 500 - 250.
[00105] Portanto, vanilina e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:100 a 1:600.
25. cânfora 0,98 - 0,49 + ácido cítrico 31,25.
[00106] Portanto, cânfora e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:70.
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19/24
26. cânfora 0,98 + ácido sórbico 25.
[00107] Portanto, cânfora e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:20 a 1:40.
27. cânfora 1,46 + ácido málico 250.
[00108] Portanto, cânfora e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:150 a 1:200.
28. cânfora 1,82 a 1,46 + ácido fumárico 125 - 62,5. [00109] Portanto, cânfora e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:100.
29. cânfora 1,82 + ácido benzoico 62,5.
[00110] Portanto, cânfora e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:40.
30. cânfora 1,82 a 0,98 + ácido láctico 500.
[00111] Portanto, cânfora e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:250 a 1:600.
31. ácido heptanoico 1,82 - 0,49 + ácido cítrico 31,25 7,82.
[00112] Portanto, ácido heptanoico e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:70.
32. ácido heptanoico 1,82 - 0,73 + ácido sórbico 50 3,13.
[00113] Portanto, ácido heptanoico e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:1 a 1:70.
33. ácido heptanoico 1,82 - 0,73 + ácido benzoico 62,5 7,82.
[00114] Portanto, ácido heptanoico e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:100.
34. ácido heptanoico 1,82 - 0,73 + ácido láctico 250 31.25.
[00115] Portanto, ácido heptanoico e ácido láctico são, de preferênPetição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 23/33
20/24 cia, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:400.
35. ácido octanoico 1,82 - 0,49 + ácido cítrico 31,25. [00116] Portanto, ácido octanoico e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:70.
36. ácido octanoico 1,82 - 0,49 + ácido sórbico 50. [00117] Portanto, ácido octanoico e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:20 a 1:120.
37. ácido octanoico 1,82 - 1,46 + ácido málico 250. [00118] Portanto, ácido octanoico e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:100 a 1:200.
38. ácido octanoico 0,73 + ácido fumárico 7,82.
[00119] Portanto, ácido octanoico e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:15.
39. ácido octanoico 1,82 - 0,73 + ácido benzoico 62,5. [00120] Portanto, ácido octanoico e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:200.
40. ácido octanoico 1,82 + ácido láctico 250.
[00121] Portanto, ácido octanoico e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:100 a 1:150.
41. limoneno 1,82 - 0,73 + ácido cítrico 31,25.
[00122] Portanto, ácido limoneno e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:50.
42. limoneno 1,82-0,98 + ácido sórbico 50.
[00123] Portanto, ácido limoneno e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:20 a 1:60.
43. limoneno 1,82-0,49 + ácido málico 250.
[00124] Portanto, ácido limoneno e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:100 a 1:600.
44. limoneno 1,82-1,46 + ácido benzoico 62,5.
[00125] Portanto, ácido limoneno e ácido benzoico são, de prefePetição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 24/33
21/24 rência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:50.
45. limoneno 1,82 + ácido láctico 500.
[00126] Portanto, ácido limoneno e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:250 a 1:300.
46. dissulfeto de dialila 1,82 - 0,49 + ácido cítrico 31,25 7,82.
[00127] Portanto, dissulfeto de dialila e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:70.
47. dissulfeto de dialila 1,82-0,73 + ácido sórbico 50 3,13.
[00128] Portanto, dissulfeto de dialila e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:1 a 1:70.
48. dissulfeto de dialila 1,82 - 0,98 + ácido málico 250 62,5.
[00129] Portanto, dissulfeto de dialila e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:270.
49. dissulfeto de dialila 1,82 - 0,98 + ácido benzoico
62,5 - 15,63.
[00130] Portanto, dissulfeto de dialila e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:70.
50. dissulfeto de dialila 1,82 - 0,73 + ácido láctico 500 15,63.
[00131] Portanto, dissulfeto de dialila e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:700.
51. ácido rosmarínico 0,98 + ácido cítrico 31.25.
[00132] Portanto, ácido rosmarínico e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:40.
52. ácido rosmarínico 1,46 + ácido sórbico 12,5.
[00133] Portanto, ácido rosmarínico e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:15.
Petição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 25/33
22/24
53. ácido rosmarínico 0,98 + ácido málico 62,5.
[00134] Portanto, ácido rosmarínico e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:50 a 1:100.
54. ácido rosmarínico 1,82 - 0,98 + ácido fumárico 62,5. [00135] Portanto, ácido rosmarínico e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:80.
55. ácido rosmarínico 1,82 - 0,73 + ácido benzoico
15,63.
[00136] Portanto, ácido rosmarínico e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:30.
56. ácido rosmarínico 1,82 - 0,49 + ácido láctico 125 62,5.
[00137] Portanto, ácido rosmarínico e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:300.
57. a-pineno 1,46 - 0,73 + ácido cítrico 31,25 - 7,82. [00138] Portanto, a-pineno e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:50.
58. a-pineno 0,98 - 0,73 + ácido sórbico 50 - 1,56. [00139] Portanto, a-pineno e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:1 a 1:80.
59. a-pineno 1,46 - 0,49 + ácido málico 250 - 15,63. [00140] Portanto, a-pineno e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:600.
60. a-pineno 1,46 - 0,49 + ácido fumárico 125 - 3.91. [00141] Portanto, a-pineno e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:2 a 1:300.
61. a-pineno 1,46 - 0,49 + ácido benzoico 62,5 - 7,82. [00142] Portanto, a-pineno e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:150.
62. a-pineno 1,46 - 0,49 + ácido láctico 500 - 15,63.
Petição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 26/33
23/24 [00143] Portanto, a-pineno e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:1200.
63. a-tujona 1,82 - 0,73 + ácido cítrico 31,25 - 7,82. [00144] Portanto, a-tujona e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:50.
64. a-tujona 1,82 - 0,49 + ácido sórbico 50 - 3,13.
[00145] Portanto, a-tujona e cítrico sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:1 a 1:120.
65. a-tujona 1,82-0,73 + ácido málico 250-15,63.
[00146] Portanto, a-tujona e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:400.
66. a-tujona 1,82 - 0,98 + ácido fumárico 125 - 3,91. [00147] Portanto, a-tujona e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:2 a 1:150.
67. a-tujona 1,46 - 0,49 + ácido benzoico 62,5 - 15,63. [00148] Portanto, a-tujona e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:10 a 1:150.
68. a-tujona 1,46 - 0,49 + ácido láctico 500 - 31,25. [00149] Portanto, a-tujona e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:20 a 1:1200.
69. cineol 1,82 - 0,98 + ácido cítrico 31,25 - 7,82.
[00150] Portanto, cineol e ácido cítrico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:40.
70. cineol 1,82 - 0,73 + ácido sórbico 50 - 1.56.
[00151] Portanto, cineol e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:0,5 a 1:70.
71. cineol 1,82 - 0,98 + ácido málico 250 - 15.63.
[00152] Portanto, cineol e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:300.
72. cineol 1,82 - 1,46 + ácido fumárico 62,5 - 7,82.
Petição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 27/33
24/24 [00153] Portanto, cineol e ácido fumárico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:50.
73. cineol 1,82 - 0.49 + ácido benzoico 62,5 - 7,82. [00154] Portanto, cineol e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:150.
74. cineol 1,82 - 0,73 + ácido láctico 250 - 7,82.
[00155] Portanto, cineol e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:350.
75. γ-terpineno 1,82-0,49 + ácido sórbico 50 - .25. [00156] Portanto, g-terpineno e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:2 a 1:120.
76. γ-terpineno 1,82 - 1,46 + ácido málico 250 - 62,5. [00157] Portanto, γ-terpineno e ácido málico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:30 a 1:200.
77. γ-terpineno 1,82 - 0,49 + ácido benzoico 62,5 - 7,82. [00158] Portanto, γ-terpineno e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:150.
78. γ-terpineno 1,82 - 0,73 + ácido láctico 500 - 15,63. [00159] Portanto, γ-terpineno e ácido láctico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:700.
79. p-cimeno 1,82 - 0,49 + ácido sórbico 50 - 12,5. [00160] Portanto, p-cimeno e ácido sórbico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:120.
80. p-cimeno 1,82 - 0,49 + ácido benzoico 62,5 - 7,82. [00161] Portanto, p-cimeno e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:4 a 1:130.
81. p-cimeno 1,82 - 0,49 + ácido láctico 500 - 15,63.
[00162] Portanto, p-cimeno e ácido benzoico são, de preferência, empregados em uma relação molar de cerca de 1:5 a 1:1150.
Petição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 28/33
1/1

Claims (5)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende 40% a 70% em peso, em relação ao peso total da composição, de um agente distribuidor e 1% a 50% em peso, em relação ao peso total da composição, de uma mistura compreendendo os seguintes ingredientes:
    (i) timol, (ii) ácido sórbico ou um sal do mesmo com um metal alcalino ou alcalino terroso; e (iii) ácido cítrico ou um sal do mesmo, com um metal alcalino ou alcalino terroso.
  2. 2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o agente distribuidor compreende triglicerídeos hidrogenados e/ou não hidrogenados de origem animal e/ou vegetal.
  3. 3. Composição, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que a razão molar entre o ingrediente (i) e o ingrediente (ii) está dentro da faixa de 1:500 a 500:1, de preferência, 1:300 a 300:1, mais preferivelmente, 1:200 a 200:1, e ainda mais preferivelmente 1:100 a 100:1.
  4. 4. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que está sob a forma de composição granular ou em pó.
  5. 5. Método para preparar uma composição, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que compreende uma fase em que o ingrediente (i) e o ingrediente (ii) são adicionados ao agente distribuidor em um estado liquefeito.
    Petição 870170034705, de 24/05/2017, pág. 29/33
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