BRPI0817478B1 - Composição oralmente biodisponível, método para produzir uma composição oralmente biodisponível, e, kit - Google Patents

Abstract

COMPOSIÇÃO ORALMENTE BIODISPONÍVEL, MÉTODOS PARA PRODUZIR UMA COMPOSIÇÃO ORALMENTE BIODISPONÍVEL, E PARA TRATAR UMA DOENÇA EM UM SER HUMANO, E, KIT A presente invenção é configurada por uma composição capaz de acompanhar um agente terapêutico ou de diagnóstico tipicamente de forma não-oral disponível através do ambiente do trato digestivo tal que o agente terapêutico ou de diagnóstico é biodisponível. A composição pode ou não ser direcionada aos receptores celulares específicos, tais como hepatócitos. Os agentes terapêuticos incluem, mas não são limitados a eles, insulina, calcitonina, serotonina e outras proteínas. O alvejamento é executado com agentes de alvejamento com base em biotina ou metal.

Description

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[001] Um dos meios mais preferidos de liberar um produtofarmacêutico em um indivíduo é em uma formulação oral. No entanto, as formulações orais de muitos compostos farmacêuticos são muitas vezes indisponíveis devido à incompatibilidade do farmacêutico com o ambiente hostil do aparelho digestivo. Isto é particularmente verdade no caso de compostos farmacêuticos tais como peptídeos, proteínas, certas moléculas pequenas, e ácidos nucléicos.

[002] Uma formulação oral de uma proteína tal como a insulina seriaaltamente desejável. Apresentar estratégias para normalizar os níveis de glicose no sangue em pacientes diabéticos do Tipo I e Tipo II que utilizam a administração subcutânea de insulina em várias formulações liberadas de acordo com o tempo, tais como insulina ultralenta e humulina NPH. A utilização destas formulações retarda e subseqüentemente controla bio- distribuição de insulina mediante a regulação da liberação do medicamento nos tecidos. O manejo sustentado de insulina leva ao melhor controle da glicose e a necessidade de menos injeções durante o curso da doença. Infelizmente, múltiplas injeções dolorosas ainda são necessárias porque estas formulações deixam de fornecer níveis sustentados de insulina no indivíduo que sofre do diabetes.

[003] Muitos outros medicamentos importantes também não sãoatualmente disponíveis em formulações orais. Exemplos incluem a calcitonina, serotonina, hormônio da paratireóide, o GLP-1, a eritropoietina, interferon de vários tipos, hormônio do crescimento humano, anticorpos monoclonais, e muitos outros, as utilidades dos quais foram amplamente comentadas na literatura.

[004] O que é necessário no campo da liberação oral demedicamentos é uma composição que permite a liberação oral de uma ampla faixa de produtos farmacêuticos e outros agentes terapêuticos. A presente invenção alcança e se dirige a esta necessidade.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[005] A presente invenção inclui composições que facilitam e/oupermitem a absorção de produtos terapêuticos que tipicamente não são oralmente biodisponíveis. Em uma forma de realização, uma composição da invenção funciona mediante a associação com um agente terapêutico e o acompanhamento do agente terapêutico através do lúmen do intestino para dentro do fluxo de sangue portal e, finalmente, para a circulação sistêmica. Em certas formas de realização, a composição da invenção possui muitas propriedades únicas e vantajosas. Uma destas propriedades é a capacidade de inserção em espaços intercelulares e passagem através do intestino de mamíferos para dentro da circulação porta. Em certas formas de realização, uma composição da invenção pode ser direcionada aos receptores celulares ou extracelulares específicos através de um ou mais agentes de alvejamento.

[006] Em uma forma de realização típica, uma composiçãooralmente biodisponível da invenção compreende gelatina e constituintes adicionais. Os constituintes adicionais compreendem uma lipossoma dinamicamente feita sob medida, fragmento de lipossoma e partículas de lipídeo, em que a partícula de lipídeo compreende pelo menos um componente lipídico e o lipossoma ou fragmento lipossoma compreende pelo menos dois componentes lipídicos. A composição ainda compreende pelo menos um agente terapêutico ou de diagnóstico e, opcionalmente, pelo menos um agente de alvejamento. A gelatina de forma ativa reversivelmente interage com um ou mais dos constituintes na composição da invenção.

[007] Em certas formas de realização, os componentes lipídicos sãoselecionados do grupo consistindo de MPB-PE, 1,2-distearoil-sn-glicero-3- fosfocolina, l,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 1,2-dimiristoil-sn- glicero-3-fosfocolina, colesterol, oleato de colesterol, fosfato de diexadecil, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2- dimiristoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina-N-(succinil), 1,2-dipalmitoil- sn-glicero-3-[fosfo-rac-(1-glicerol)] (sal de sódio), e 2,3-diacetoxipropil 2-(5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido)etil fosfato de trietilamônio.

[008] Em certas formas de realização, o agente terapêutico éselecionado do grupo consistindo de insulina, interferon, eritropoietina, hormônio da paratireóide, calcitonina, serotonina, rituximab, trastuzumab, uricase, ativador de plasminogênio tecidual, timoglobina, uma vacina, heparina ou um análogo da heparina, anitrombina III , filgrastin, acetato de pramilitide, exanatide, epifibatide, antivenenos, IgG, IgM, HGH, tiroxina, GLP-1, Fatores de coagulação sangüínea VII e VIII, um anticorpo monoclonal, e glicolipídeos que atuam como agentes terapêuticos.

[009] Em uma forma de realização preferida, o agente terapêutico éinsulina.

[0010] Em certas formas de realização, o agente de alvejamento compreende um agente de alvejamento derivado de metal ou um agente de alvejamento derivado de biotina.

[0011] Em uma sub-forma de realização, o agente de alvejamento derivado de metal compreende um metal e pelo menos um agente complexante. Preferivelmente, o metal no agente de alvejamento derivado de metal é selecionado do grupo consistindo de um metal de transição, um metal de transição interno e um adjacente do metal de transição, e, pelo menos um agente complexante é selecionado do grupo consistindo de:Ácido N-(2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,6-dietilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético; Ácido N-(2,6-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(4-isopropilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(4-butilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,3-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,4-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,5-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(3,4-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(3,5-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(3-butilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2-butilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(4-terciária butilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(3-butoxifenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2-hexiloxifenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(4-hexiloxifenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido aminopirrol iminodiacético;Ácido N-(3 -bromo-2,4,6-trimetilfenilcarbamoilmetil)iminodiacético;Ácido benzimidazol metil iminodiacético;Ácido N-(3-ciano-4,5-dimetil-2-pirrilcarbamoilmetil)iminodiacético;Ácido N - (3-ciano-4-metil-5-benzil-2-pirrilcarbamoilmetil)iminodiacético;eÁcido N-(3-ciano-4-metil-2-pirrilcarbamoilmetil)iminodiacético.

[0012] Em uma forma de realização, o metal é cromo.

[0013] Em uma outra forma de realização da invenção, o agente dealvejamento derivado de metal é poli [Cr-bis (ácido N-2,6- diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)].

[0014] Em mais outra forma de realização, o agente de alvejamento é um agente de alvejamento derivado de biotina selecionado do grupo consistindo de N-hidroxissuccinimida (NHS) biotina; sulfo-NHS-biotina; biotina de cadeia longa de N-hidroxissuccinimida; biotina de cadeia longa de sulfo-N-hidroxissuccinimida; D-biotina; biocitina; sulfo-N- hidroxissuccinimida-S-S-biotina; biotina-BMCC; biotina-HPDP; iodoacetil- LC-biotina; biotina-hidrazida; biotina-LC-hidrazida; hidrazida de biocitina; biotina cadaverina; carboxibiotina; fotobiotina; trifluoroacetato de p- aminobenzoil biocitina; p-diazobenzoil biocitina DHPE biotina; biotina-X- DHPE; ácido 12-((biotinil)amino)dodecanóico; éster succinimidílico de ácido 12-((biotinil)amino)dodecanóico; S-biotinil homocisteína; biocitina-X; biocitina x-hidrazida; biotrimetilenodiamina; biotina-XL; biotina-X- etilenodiamina; biotina-XX hidrazida; biotina-XX-SE; biotina-XX, SSE; biotina-X-cadaverina; α-(t-BOC)biocitina; N-(biotinil)-N'-(iodoacetil) etilenodiamina; DNP-X-biocitina-X-SE; biotina-X-hidrazida; cloridreto de norbiotinamina; 3-(N-maleimidilpropionil)biocitina; ARP; biotin-1-sulfóxido; éster biotina metílico; biotina-maleimida; biotina-poli(etilenoglicol)amina; sal de sódio de ácido (+) biotina 4-amidobenzóico; Biotina 2-N-acetilamino-2- de0xi-β-D-glucopiranoside; Biotina-α-D-N-acetilneuraminida; Biotina-α-L- fucosídeo; Biotina lacto-N-biosídeo; Biotina-Lewis-A trissacarídeo; Biotina- Lewis-Y tetrassacarídeo; Biotina-a-D-manopiranosídeo; biotina 6-O-fosfo-α- D-manopiranosídeo; e 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina-N- (biotinil), derivados de iminobiotina dos compostos anteriormente mencionados, e misturas destes.

[0015] Em outra sub-forma de realização da invenção, o agente de alvejamento é poli[Cr-bis(ácido N-2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)] e o agente terapêutico é insulina.

[0016] Em mais uma outra sub-forma de realização, o agente de segmentação é biotina DHPE ou biotina-X-DHPE e o agente terapêutico é insulina.

[0017] A presente invenção também descreve um método de produção de uma composição oralmente biodisponível compreendendo gelatina e constituintes adicionais, onde os constituintes compreendem um lipossoma dinamicamente dimensionado, fragmento de lipossoma, e uma partícula, em que o lipossoma, fragmento de lipossoma e a partícula são gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos, a composição ainda compreendendo pelo menos um agente terapêutico ou de diagnóstico e, opcionalmente, pelo menos um agente de alvejamento, em que a gelatina ativamente de forma reversível interage com um ou mais dos constituintes. O método compreende as etapas de mistura dos componentes lipídicos e, opcionalmente, o pelo menos um agente de alvejamento em meio aquoso para formar uma primeira mistura, adicionando o agente terapêutico ou de diagnóstico na primeira mistura para formar uma segunda mistura; adicionando a segunda mistura na gelatina para formar uma mistura associada com gelatina; e secagem da mistura associada com a gelatina.

[0018] Em uma sub-forma de realização do método, os componentes lipídicos são selecionados do grupo consistindo de MPB-PE, 1,2-distearoil- sn-glicero-3-fosfocolina, l,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 1,2- dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina, colesterol, oleato de colesterol, fosfato de diexadecila, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3- fosfato, 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-distearoil-sn-glicero-3- fosfoetanolamina, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina-N-(succinil), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-[fosfo-rac-(1-glicerol)] (sal de sódio), e 2,3- diacetoxipropil 2-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido)etil fosfato de trietilamônio; e quando presente, o agente de alvejamento opcional é um agente de alvejamento derivado de metal ou um agente de alvejamento derivado de biotina, e o agente terapêutico é selecionado do grupo consistindo de insulina, interferon, eritropoietina, hormônio da paratireóide, calcitonina, serotonina, rituximab, trastuzumab, uricase, ativador de plasminogênio tecidual, timoglobina, uma vacina, heparina ou um análogo da heparina, anitrombina III, filgrastin, acetato de pramilitide, exanatide, epifibatide, antivenenos, IgG, IgM, HGH, tiroxina, GLP-1, Fatores de coagulação sangüínea VII e VIII, um anticorpo monoclonal, e glicolipídeos que atuam como agentes terapêuticos.

[0019] Em outra sub-forma de realização do método de produção da composição oralmente biodisponível da invenção, o agente de alvejamento derivado de metal é poli[Cr-bis(ácido N-2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)].

[0020] Em outra sub-forma de realização do método de produção da composição oralmente biodisponível da invenção, o agente de alvejamento derivado de biotina é selecionado do grupo consistindo de biotina DHPE e biotina-X-DHPE.

[0021] De acordo com uma outra sub-forma de realização da invenção, o agente terapêutico é insulina.

[0022] A presente invenção contempla também um método de tratar uma doença em um ser humano, o método compreendendo a administração ao ser humano de uma composição oralmente biodisponível que compreende gelatina e constituintes adicionais, onde os constituintes compreendem um lipossoma dinamicamente dimensionado, fragmento de lipossoma e partícula de lipídeo, e onde a partícula de lipídeo compreende pelo menos um componente lipídico e o lipossoma ou fragmento de lipossoma compreende pelo menos dois componentes lipídicos, e onde a composição ainda compreende pelo menos um agente terapêutico e, opcionalmente, pelo menos um agente de alvejamento, em que a gelatina ativamente de forma reversível interage com um ou mais dos constituintes.

[0023] Em uma sub-forma de realização do método para o tratamento da doença, a doença é o diabetes.

[0024] Em mais uma sub-forma de realização, os componentes lipídicos são selecionados a partir do grupo consistindo de MPB-PE, 1,2- distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, l,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina, colesterol, oleato de colesterol, fosfato de diexadecila, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-dipalmitoil-sn- glicero-3-fosfato, 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-distearoil-sn- glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina-N- (succinil), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-[fosfo-rac-(1-glicerol)] (sal de sódio), e 2,3-diacetoxipropil 2-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol- 4-il) pentanamido)etil fosfato de trietilamônio; e o pelo menos um ou mais agentes terapêuticos é insulina, e quando presente, o agente de alvejamento opcional é um agente de alvejamento derivado de metal ou um agente de alvejamento derivado de biotina.

[0025] Em mais outra sub-forma de realização, em que o agente de alvejamento não é opcional, o agente de alvejamento é poli[Cr-bis(ácido N- 2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)], biotina DHPE e biotina- X-DHPE.

[0026] Em uma forma de realização preferida da composição, os componentes lipídicos são 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, fosfato de diexadecila, e colesterol, o agente de alvejamento não é opcional e é poli[Cr- bis(ácido N-2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)]; e o agente terapêutico é insulina.

[0027] Em outra forma de realização preferida, os componentes lipídicos são 1,2 distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, fosfato de diexadecila, e colesterol; o agente de alvejamento não é opcional e é biotina-X-DHPE ou biotina DHPE, e o agente terapêutico é insulina.

[0028] Em uma forma de realização preferida de um método da invenção, os componentes lipídicos são 1,2 distearoil-sn-glicero-3- fosfocolina, fosfato de diexadecila, e colesterol, o agente de alvejamento não é opcional e é poli[Cr-bis(ácido N-2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)], e o agente terapêutico é a insulina.

[0029] Em outra forma de realização preferida da invenção, os componentes lipídicos são 1,2 distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, fosfato de diexadecila, e colesterol; o agente de alvejamento não é opcional e é biotina- X-DHPE ou Biotina DHPE; e o agente terapêutico é insulina.

[0030] Em um outro aspecto da invenção, uma composição da invenção pode ser feita por um método compreendendo as etapas de a) misturar pelo menos três componentes lipídicos e, opcionalmente, pelo menos um agente de alvejamento em meio aquoso para formar uma primeira mistura em que os componentes lipídicos são selecionados do grupo consistindo de MPB-PE, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, l,2-dipalmitoil-sn-glicero-3- fosfocolina, 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina, colesterol, oleato de colesterol, fosfato de diexadecila, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2- dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2- distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3- fosfoetanolamina-N-(succinil), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-[fosfo-rac-(1- glicerol)] (sal de sódio), e 2,3-diacetoxipropil 2-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro- 1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido)etil fosfato de trietilamônio; b) submeter a mistura a homogeneização para formar uma mistura de lipossomas, fragmentos de lipossoma, e partículas; c) adicionar um agente terapêutico ou de diagnóstico à mistura de lipossomas, fragmentos de lipossoma, e partículas para criar uma segunda mistura; c) adicionar a segunda mistura em gelatina para formar uma mistura associada com a gelatina, e; d) secar dita mistura associada com a gelatina.

[0031] A invenção ainda inclui um método de tratamento de diabetes em um ser humano. Este método compreende a administração a dito ser humano de uma composição oralmente biodisponível compreendendo gelatina e constituintes adicionais, ditos constituintes compreendendo um lipossoma dinamicamente dimensionado, fragmento de lipossoma e partícula de lipídeo, em que dita partícula de lipídeo compreende pelo menos um componente lipídico e dito lipossoma ou fragmento de lipossoma compreende pelo menos dois componentes lipídicos, dita composição ainda compreendendo insulina e, opcionalmente, pelo menos, um agente de alvejamento, em que dita gelatina ativamente de forma reversível interage com um ou mais de ditos constituintes. O método ainda compreende a co- administração de insulina em dito ser humano.

[0032] A presente invenção também inclui um kit compreendendo uma composição oralmente biodisponível que compreende gelatina e constituintes adicionais, ditos constituintes compreendendo um lipossoma dinamicamente dimensionado, fragmento de lipossoma e partícula de lipídeo, em que dita partícula de lipídeo compreende pelo menos um componente lipídico e dito lipossoma ou fragmento de lipossoma compreende pelo menos dois componentes lipídicos, dita composição ainda compreendendo pelo menos um agente terapêutico ou de diagnóstico e, opcionalmente, pelo menos um agente de alvejamento, em que dita gelatina ativamente de forma reversível interage com um ou mais de ditos constituintes. O kit ainda inclui material instrucional para a administração de dita composição a um ser humano.

[0033] Em uma sub-forma de realização do kit da invenção, o kit ainda inclui insulina para a co-administração com a referida composição em dito ser humano.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0034] O sumário anterior, assim como a seguinte descrição detalhada das formas de realização preferidas da invenção, será melhor compreendido quando lido em conjunto com os desenhos anexos. Para o propósito de ilustrar a invenção, é mostrado nos desenhos as formas de realização que são atualmente preferidas. Deve ficar entendido, no entanto, que a invenção não se limita às disposições precisas e instrumentos apresentados.

[0035] A Figura 1 é uma representação esquemática de uma composição da invenção.

[0036] A Figura 2 é um gráfico que descreve a contagem de fosfolipídeo rotulado com 14C rádio encontrado na veia femoral e portal, 15 e 30 minutos após a injeção da composição rotulada com rádio no duodeno de um rato de 230 gramas em jejum e anestesiado.

[0037] A Figura 3 é um gráfico de barras que descreve a distribuição de fosfolipídeo rotulado com 14C rádio entre o sangue, fígado e baço nos ratos da Figura 2, pós-sacrifício.

[0038] Figura 4 é um gráfico que descreve a absorção de composição rotulada com rádio da água potável em 15, 30 e 45 minutos após a dosagem.

[0039] A Figura 5 é um gráfico de barras que descreve a distribuição da composição rotulada entre o sangue, fígado e baço nos ratos da Figura 4, pós-sacrifício.

[0040] A Figura 6 é um gráfico que descreve a eficácia de insulina administrada por via oral na forma de uma composição da invenção.

[0041] A Figura 7 é um gráfico de barras que descreve a eficácia de uma composição da invenção (em baixas doses) na conversão de um cão diabético tipo 2 a partir da produção de glicose hepática para captar durante uma carga de glicose portal.

[0042] A Figura 8 é um gráfico dos níveis de cálcio no sangue após a administração de calcitonina associada com uma composição não direcionada da invenção.

[0043] A Figura 9 é um gráfico da distribuição de tamanho dos membros constituintes de uma composição da invenção.

[0044] A Figura 10 é um gráfico da eficácia de uma composição da invenção compreendendo um agente de alvejamento de biotina e insulina na redução dos efeitos do diabetes tipo 2 em seres humanos.

[0045] A Figura 11 é um cromatograma de uma composição da invenção que mostra a eficácia da carga de insulina.

[0046] A Figura 12 é um gráfico que descreve a eficácia de liberação oral de anticorpos IgG covalentemente ligados a uma composição da invenção versus a absorção oral de anticorpos IgG não associados (livres).

[0047] A Figura 13 é um gráfico que descreve o efeito da administração oral de tiroxina associada com uma composição da invenção no colesterol e triglicérides (“TG”) no soro em camundongos.

[0048] A Figura 14 é um gráfico que descreve o efeito da administração oral de interferon associado com uma composição da invenção sobre a redução da carga viral em seres humanos que sofrem de hepatite-C.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0049] A presente invenção inclui composições que facilitam e/ou permitem a absorção de produtos terapêuticos que não são tipicamente biodisponíveis por via oral. Em uma forma de realização, uma composição da invenção funciona mediante a associação com um agente terapêutico e o acompanhamento do agente terapêutico através do lúmen do intestino para dentro do fluxo de sangue portal e, finalmente, para a circulação sistêmica. Em certas formas de realização, a composição da invenção possui muitas propriedades únicas e vantajosas. Uma destas propriedades é a capacidade de inserir em espaços intercelulares e passar através do intestino de mamíferos para a circulação portal. Em certas formas de realização, uma composição da invenção pode ser direcionada aos receptores celulares ou extracelulares específicos através de um ou mais agentes de alvejamento.

[0050] Em uma forma de realização típica, uma composição oralmente biodisponível da invenção compreende gelatina e constituintes adicionais. Os constituintes adicionais compreendem um lipossoma dinamicamente dimensionado, fragmento de lipossoma e partícula de lipídeo, em que a partícula de lipídeo compreende pelo menos um componente lipídico e o lipossoma ou fragmento de lipossoma compreende pelo menos dois componentes lipídicos. A composição ainda compreende pelo menos um agente terapêutico ou de diagnóstico e, opcionalmente, pelo menos, um agente de alvejamento. A gelatina ativamente de forma reversível interage com um ou mais dos constituintes na composição da invenção.

Definições

[0051] A não ser que definido de outra maneira, todos os termos técnicos e científicos utilizados aqui geralmente possuem o mesmo significado como normalmente compreendido por uma pessoa de habilidade usual na técnica a qual a invenção pertence. Geralmente, a nomenclatura aqui utilizada e os procedimentos de laboratório em química orgânica e química das proteínas são aqueles bem conhecidos e comumente empregados na técnica.

[0052] Os artigos “um” e “uma” são aqui utilizados para se referir a um ou a mais do que um (isto é, pelo menos um) do objeto gramatical do artigo. Por meio de exemplo, “um elemento” significa um elemento ou mais do que um elemento.

[0053] Como aqui utilizado, os aminoácidos são representados pelo seu nome completo, pelo código de três letras, assim como pelo código de uma letra a ele correspondente, conforme indicado na tabela a seguir:

[0054] O termo “inferior”, quando usado com referência a uma estrutura química, descreve um grupo de contendo de 1 a 6 átomos de carbono.

[0055] O termo “alquila”, por si só ou como parte de outro substituinte significa, a não ser que de outra maneira mencionada, um hidrocarboneto reto, ramificado ou cíclico tendo o número de átomos de carbono designado (isto é, C1-C6 significa um a seis carbonos). Exemplos incluem: metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, terc-butila, pentila, neopentila, hexila, cicloexila e ciclopropilmetila. O mais preferível é (C1-C3) alquila, particularmente etila, metila e isopropila.

[0056] O termo “alquileno”, por si só ou como parte de outro substituinte significa, a não ser que de outra maneira mencionada, um hidrocarboneto de cadeia reta, ramificada ou cíclica tendo dois sítios de substituição, por exemplo, metileno (-CH2-), etileno (-CH2CH2-), isopropileno (-C(CH3)=CH-), etc.

[0057] O termo “arila”, empregado isoladamente ou em combinação com outros termos, significa, a não ser que de outra maneira mencionada, uma estrutura carbocíclica, com ou sem saturação, contendo um ou mais anéis (tipicamente um, dois ou três anéis) em que os ditos anéis podem ligados entre si em uma maneira pendente, tal como uma bifenila, ou podem ser fundidos, tal como o naftaleno. Exemplos incluem fenila, antracila e naftila. A estrutura pode ser opcionalmente substituída com um ou mais substituintes, independentemente selecionados de halogênio, (C1-C6) alquila; (C1-C6) alquenila; (C1-C6) alcóxi; OH; NO2; C N; C(=O)O(Ci-C3) alquila; (C2-C6) alquileno-OR2; fosfonato; NR22; NHC(=O)(C1-C6) alquila; sulfamila; carbamila; OC(=O)(C1-C3) alquila; O(C2-C6) alquileno-N((C1-C6)alquil)2; e (C1-C3) perfluoroalquila.

[0058] O termo “arilalquila inferior” significa um grupo funcional em que um grupo de arila é ligado a um grupo de alquileno inferior, por exemplo, -CH2CH2-fenila.

[0059] O termo “alcóxi” empregado isoladamente ou em combinação com outros termos significa, a não ser que de outra maneira mencionada, um grupo de alquila ou um grupo de alquila contendo um substituinte tal como um grupo de hidroxila, tendo o número designado de átomos de carbono conectados ao resto da molécula através de um átomo de oxigênio, tal como, por exemplo, -OCH(OH)-, -OCH2OH, metóxi (-OCH3), etóxi (-OCH2CH3), 1-propóxi (-OCH2CH2CH3), 2-propóxi (isopropóxi), butóxi(-OCH2CH2CH2CH3), pentóxi (-OCH2CH2CH2CH2CH3), e os homólogos e isômeros superiores.

[0060] O termo “acila” significa um grupo funcional da fórmula geral -C(=O)-R, em que -R é hidrogênio, alquila, amino ou alcóxi. Exemplos incluem acetil (-C(=O)CH3), propionil -C(=O)CH2CH3), benzoil (-C(=O)C6H5), fenilacetil (C(=O)CH2C6H5), carboetóxi (-CO2CH2CH3), e dimetilcarbamoil (C(=O)N(CH3)2).

[0061] Os termos “halo” ou “halogênio” por si só ou como parte de outro substituinte significam, a não ser que de outra maneira mencionada, um átomo de flúor, cloro, bromo ou iodo.

[0062] O termo “heterociclo” ou “heterociclila” ou “heterocíclico” por si mesmo ou como parte de outro substituinte significa, a não ser que de outra maneira mencionada, um sistema de anel mono ou multicíclico saturado ou insaturado estável compreendendo átomos de carbono e pelo menos um heteroátomo selecionado do grupo compreendendo N, O e S, e em que os heteroátomos de nitrogênio e enxofre podem ser opcionalmente oxidados, e o átomo de nitrogênio pode ser opcionalmente quaternizado. Exemplos incluem piridina, pirrol, imidazol, benzimidazol, ftaleína, piridenila, piranila, furanila, tiazol, tiofeno, oxazol, pirazol, 3-pirrolina, pirrolideno, pirimidina, purina, quinolina, isoquinolina, carbazol, etc. Onde a substituição irá resultar em um composto estável, a estrutura pode ser opcionalmente substituída com um ou mais substituintes, independentemente selecionados de halogênio; (C1-C6) alquila; (C1-C6) alquenila; (C1-C6) alcóxi; OH; NO2; C N; C(=O)O(Ci-C3) alquila; (C2-C6) alquileno-OR2; fosfonato; NR22; NHC(=O)(C1-C6) alquila; sulfamila; carbamila; OC(=O)(C1-C3) alquila; O(C2-C6) alquileno-N((C1-C6) alquil)2; e (C1-C3) perfluoroalquila.

[0063] O termo “lipídeo anfipático” significa uma molécula de lipídeo tendo uma extremidade polar e uma extremidade não polar.

[0064] Um “agente complexante” é um composto capaz de formar um complexo de coordenação insolúvel em água com um metal, por exemplo, um sal de cromo, zircônio, etc, que é substancialmente insolúvel em água e solúvel em solventes orgânicos.

[0065] “Meio aquoso” significa os meios compreendendo água ou meios compreendendo água contendo pelo menos um tampão ou sal.

[0066] Os termos “associados”, ou “associados com” quando usados com referência a uma composição ou constituinte de uma composição da invenção, significa que o material de referência é incorporado (ou intercalado) dentro ou na superfície, ou dentro de uma composição ou um constituinte de uma composição da presente invenção.

[0067] O termo “insulina” refere-se às formas naturais ou recombinantes de insulina, insulina sintética, e derivados das insulinas anteriormente mencionadas. Exemplos de insulina incluem, mas não são limitados a elas, insulina lispro, insulina aspart, insulina regular, insulina glargina, insulina zinco, insulina zinco humana prolongada, insulina isofano, insulina humana regular tamponada, insulina glutisina, insulina regular humana recombinante, insulina ultralenta, humulina, insulina NPH, Levemir, Novolog e insulina humana recombinante isofano. Também estão incluídas as insulinas de origem animal, tais como insulina bovina e suína.

[0068] Os termos “glargina” e “insulina glargina” ambos se referem a um análogo de insulina humana recombinante que difere da insulina humana em que o aminoácido asparagina na posição A21 é substituído pela glicina e duas argininas são adicionadas ao C-terminal da cadeia B. Quimicamente, é insulina humana 21A-Gly-30Ba-L-Arg-30Bb-L-Arg- e possui a fórmula empírica C267H404N72O78S6 e um peso molecular de 6063.

[0069] O termo “insulina isofano humana recombinante” se refere a uma insulina humana que foi tratada com protamina.

[0070] O termo “biodisponibilidade” se refere a uma medida da taxa e extensão que um agente farmacêutico, tal como, mas não limitando a ele, insulina, atinge a circulação sistêmica e está disponível em seu sítio de ação.

[0071] Como aqui utilizado, “tratar” significa reduzir a freqüência com que os sintomas de uma doença, distúrbio, ou condição adversa, e outros mais, são experimentados por um paciente.

[0072] Como aqui utilizado, o termo “carreador farmaceuticamente aceitável” significa uma composição química com a qual o ingrediente ativo pode ser combinado e que, seguinte a combinação, pode ser usado para administrar o ingrediente ativo a um indivíduo.

[0073] O termo “lipídeo” ou “lipídeos” significa um composto orgânico caracterizado pela sua preferência por solventes orgânicos apróticos não polares. Um lipídeo pode ou não possuir um final de alquila. Os lipídeos de acordo com a presente invenção incluem, mas não são limitados a estes, a classe de compostos conhecidos na técnica como fosfolipídeos, colesteróis, e fosfatos de dialquila.

[0074] Como usado aqui, “colesterol” significa o composto e todos os derivados e análogos do composto:

[0075] Como usado aqui, “partícula” compreende uma aglomeração de múltiplas unidades de um ou mais lipídeos.

[0076] Como aqui usado, “tiroxina” refere-se aos composto:em que o grupo de amino pode estar na configuração “D” ou “L”.

[0077] Como usado neste documento, “co-administração” ou “co- administrar” assim como suas variações, significa administrar um segundo agente terapêutico antes, durante ou após a administração de um primeiro agente terapêutico. Os primeiros e segundos agentes terapêuticos podem ser os mesmos ou diferentes.

[0078] Como aqui usado, “interferon” refere-se a todas as formas de interferon, incluindo, mas não limitados a eles, interferon-α, interferon-beta, interferon-gama, assim como as suas sub-unidades.Descrição

[0079] Uma composição da presente invenção é compreendida de gelatina e um ou mais constituintes em que ditos constituintes incluem lipossomas, fragmentos de lipossoma, e partículas de lipídeo.

[0080] Tradicionalmente, o lipossoma, fragmentos de lipossoma e partículas de lipídeo compreendidas de materiais anfipáticos foram limitados a uma menor distribuição de tamanho de cerca de 40 nanômetros. Este limite acredita-se de ser uma função dos tamanhos coletivos dos lipídeos constituintes (fosfolipídios, colesteróis, dialquilfosfatos, etc) que constituíram a estrutura da membrana.

[0081] Os constituintes de uma composição da presente invenção, no entanto, demonstram até agora dimensionamento dinâmico não observado e elasticidade de tamanho. Especificamente, os constituintes das composições da presente invenção, existem em um equilíbrio dinâmico em meio aquoso em que os constituintes, na média, variam em tamanho de cerca de 6 nanômetros a cerca de 60 nanômetros de diâmetro. Em dado momento, em qualquer lugar de cerca de 5 % a cerca de 50 % dos constituintes apresentam um diâmetro médio de cerca de 20 nanômetros ou menos. Devido às flutuações quase constantes nos tamanhos, os constituintes das composições da presente invenção não podem ser fisicamente separados por meios tradicionais de fracionamento para formar populações distintas de tamanhos diferentemente feitos sob medida. Os constituintes de uma composição da invenção podem ser, mas não são limitados a eles, um lipossoma, um fragmento de lipossoma, e uma partícula de lipídeo.

[0082] Os constituintes da composição da presente invenção podem se associar com um ou mais agentes terapêuticos e/ou agentes de diagnóstico. Sem desejar ser limitado por qualquer teoria particular, acredita-se que os constituintes tendo diâmetros de 20 nanômetros ou menos são suficientemente pequenos para passar através de espaços intercelulares, permitindo assim o transporte do agente terapêutico ou agente de diagnóstico associado a partir do lúmen do intestino para o sangue portal.

[0083] Os agentes terapêuticos associados e/ou agentes de diagnóstico podem ser ligados covalente ou não covalentemente a um ou mais constituintes da composição da presente invenção. Nas formas de realização da invenção em que os agentes terapêuticos ou de diagnóstico associados são covalentemente ligados, o agente terapêutico ou agente de diagnóstico associado pode ser ligado a um grupo químico que pode ser funcionalizado. Exemplos de grupos funcionalizáveis incluem, mas não estão limitados a eles, grupos de hidróxi, amino, carbóxi e amido.

[0084] Exemplos de agentes terapêuticos que podem ser covalentemente ligados a um constituinte de uma composição da presente invenção incluem poli-peptídeos e/ou proteínas, tais como, mas não se limitado a estes, GLP-1, insulina, calcitonina, interferon, uricase, ativador de plasminogênio tecidual, timoglobina, várias vacinas, heparina, análogos de heparina, antitrombina III, filgrastina, acetato de pramilitide, exenatida, epifibatide, e antivenenos, fatores de coagulação do sangue, incluindo, mas não limitado a eles, Fatores VII e VIII, várias moléculas pequenas, tais como, por exemplo, tiroxina D ou L ou serotonina, ácidos nucléicos, seqüências de DNA ou RNA, imunoglobulinas, tais como, mas não limitadas a elas, IgG e IgM, e uma variedade de anticorpos monoclonais, tais como, mas não limitados a estes, rituximab, trastuzumab e glicolipídeos que atuam como agentes terapêuticos e, além disso, outras proteínas maiores, tais como, por exemplo, hormônio de crescimento humano (“HGH”), eritropoietina e hormônio da paratireóide.

[0085] Exemplos de agentes de diagnóstico que podem ser covalentemente ligados a um constituinte de uma composição da presente invenção incluem agentes de contraste de diagnóstico tais como, mas não limitados a estes, ouro e um gadolínio. Outros agentes de diagnóstico incluem materiais radioativos tais como isótopos radioativos de átomos comuns incluindo, mas não limitados a eles, 13C, 68Ge, 18F e 125I. Estes agentes de contraste e radioativos podem ser covalentemente ligados a um constituinte da composição diretamente através da ligação covalente a um componente lipídico ou agente de alvejamento. Alternativamente, e onde quimicamente apropriado, o agente de diagnóstico pode ser ligado a um ligando tal como DADO (2’-desoxiadenosina), que é em si covalentemente ligado a um componente lipídico ou agente de alvejamento.

[0086] Alternativamente, e onde quimicamente apropriado, um constituinte de uma composição da invenção pode se associar com os agentes de diagnóstico ou terapêuticos anteriormente mencionados através das interações não covalentes. As interações não covalentes permitem a compatibilidade de um constituinte da composição da presente invenção com uma ampla variedade de agentes de diagnóstico e terapêuticos.

Lipídeos

[0087] Um constituinte de uma composição da presente invenção compreende um ou mais componentes lipídicos e um agente de alvejamento opcional. Uma forma de realização compreendendo uma única unidade ou múltiplas unidades de um único componente lipídico é aqui referida como uma “partícula de lipídeo”. Uma forma de realização compreendendo dois ou mais componentes lipídicos e um agente de alvejamento opcional, é classificada como um lipossoma ou fragmento de lipossoma, dependendo da natureza da estrutura resultante.

[0088] Os componentes lipídicos da presente invenção são selecionados do grupo consistindo de 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina, colesterol, oleato de colesterol, fosfato de diexadecila, 1,2- distearoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2- dimiristoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina-N-(succinil), 1,2-dipalmitoil- sn-glicero-3-[fosfo-rac-(1-glicerol)] (sal de sódio), e 2,3-diacetoxipropil 2-(5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido)etil fosfato de trietilamônio, MPB-PE e derivados destes. As estruturasrepresentativas são apresentadas na Tabela 1.Tabela 1

[0089] Por meio de exemplos não limitativos, os constituintes de uma composição da presente invenção podem ser formados a partir de componentes lipídicos misturados de acordo com o seguinte:

[0090] aproximadamente 61 por cento molar de 1,2-distearoil-sn- glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, e aproximadamente 16 por cento molar de colesterol. Nas formas de realização em que um constituinte incorpora um agente de alvejamento, a mistura observada acima pode ainda incluir de cerca de 1 a cerca de 2 por cento molar de pelo menos um agente de alvejamento, com as quantidades de outros componentes lipídicos reduzidos para manter a relação dos componentes apresentados acima.

[0091] Em outra forma de realização, uma composição da presente invenção pode ser formada de componentes lipídicos misturados de acordo com o que segue: aproximadamente 68 por cento molar de 1,2-dipalmitoil-sn- glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 18 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 9 por cento molar de colesterol, e aproximadamente 3 por cento de MPB-PE. Nas formas de realização em que um constituinte incorpora um agente de alvejamento, a mistura observada acima pode ainda incluir de cerca de 1 a cerca de 2 por cento molar de pelo menos um agente de alvejamento, com as quantidades de outros componentes lipídicos reduzidas para manter a relação dos componentes apresentados acima.

Preparação

[0092] Geralmente, os constituintes de uma composição da presente invenção são formados quando pelo menos um componente lipídico e o agente de alvejamento opcional são homogeneizados em um meio aquoso através da microfluidificação ou outro processo que envolve a cavitação.

[0093] Em uma forma de realização da invenção, o(s) componente(s) lipídico(s) e agente(s) de alvejamento opcional(is) pode(m) ser homogeneizado(s) em 18 mM tampão de fosfato em um pH de cerca de 6,0 a um pH de cerca de 8,0. A concentração de componente lipídico no tampão de fosfato pode variar de cerca de 10 a cerca de 200 mg/ml e qualquer um e todos os números inteiros integrais e parciais entre estes. Em uma forma de realização, a concentração de componente lipídico é de cerca de 30 a cerca de 150 mg/ml. Na forma de realização mais preferida, a concentração de componente lipídico é de cerca de 15 a cerca de 50 mg/ml. Em uma forma de realização mais preferida, a concentração de componente lipídico é de cerca de 28 a 30 mg/ml.

[0094] A homogeneização do meio aquoso, componentes lipídicos, e agente de alvejamento opcional pode ser executada através do tratamento em um dispositivo adequado para a homogeneização. Exemplos de dispositivos adequados incluem, mas não são limitados a estes, um Polytron® System PT 6100, um M-110-EH Microfluidizer, uma sonicador de ultra-som, um mecanismo de filtração por membranas de alta pressão, e uma extrusora homogeneizadora.

[0095] Nos exemplos onde um microfluidificador é usado, o microfluidificador é preferivelmente operado em uma temperatura que é maior do que a temperatura de transição mais elevada de um componente lipídico e mais preferivelmente em uma temperatura maior do que cerca de 75 °C. Assim, a temperatura elevada permite quaisquer cadeias de acila e alquila presentes nos componentes lipídicos para movimentar fluidamente assim como adaptar e associar com os componentes de hidrocarboneto adjacentes. Estas associações não covalentes diretamente resultam na formação de um constituinte de uma composição da presente invenção.

[0096] Para o processo de microfluidificação, até cerca de cinco passagens independentes são requeridas em 9000 psig (62 MPa) para alcançar o dimensionamento do constituinte dinâmico com alguns constituintes que possuem um raio de menos do que 20 nanômetros. Os dados de análise de constituinte gerados por um Coulter N-4 Plus Sub-Micron Particle Size Analyzer são mostrados na Figura 9 e representam 10 análises de tamanho repetidas na mesma amostra quando ela ficou imobilizada no Coulter N-4 Plus Sub-Micron Particle Size Analyzer. Estes dados demonstram a natureza dinâmica do dimensionamento de constituintes e a natureza fluida das interações entre os constituintes da composição da presente invenção em meio aquoso.

[0097] Após a microfluidificação, os constituintes resultantes podem ser filtrados estéreis através de uma membrana Supor™ de grupo de 0,8 mícron a 0,2 mícron.

[0098] Durante o processo de formação de partícula sub-mícron, ligação de hidrogênio, ligação iônica, interações de van der Waal, interações dipolares, interações de íon-dipolo e associações hidrofóbicas ditam a maneira pela qual os componentes de uma composição da presente invenção são agrupados. Embora não desejando ser limitado por qualquer teoria particular, acredita-se que a interação de todas estas forças, em extensões variáveis, sob as condições acima observadas, leva aos constituintes dinamicamente feitos sob medida da presente invenção.

Incorporação de um Agente de alvejamento

[0099] Em certas formas de realização, um constituinte da presente invenção pode opcionalmente compreender um agente de alvejamento. Os agentes de alvejamento alteram uma bio-distribuição do constituinte e ainda intensificam a eficácia de um agente terapêutico associado. Por exemplo, um constituinte de uma composição da presente invenção pode incorporar um ou mais agentes de alvejamento que atuam para direcionar o constituinte a um receptor celular ou extracelular específico. Alternativamente, por meio de um exemplo não limitativo, o agente de alvejamento pode mascarar o constituinte do reconhecimento reticuloendotelial (macrófago).

[00100] Em uma forma de realização, um agente de alvejamento facilita a liberação de insulina no fígado para controlar o armazenamento de glicogênio pós-prandial e abrange uma classe de moléculas referidas como “molécula alvo dos hepatócitos” (HTM). Exemplos de HTM incluem agentes de alvejamento derivados de biotina tais como 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3- fosfoetanolamina-N-(biotinila) e agentes de alvejamento derivados de metal tais poli[Cr-bis(ácido N-2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)]. Os agentes de alvejamento derivados de metal e os agentes de alvejamento derivados de biotina são debatidos abaixo e são completamente descritos nas Patentes US nos 7.169.410 e 4.603.044; pedido PCT PCT/US06/19119; e Pedidos de Patente U.S 11/384.728 e 11/384.659. Exemplos adicionais de agentes de alvejamento derivados de biotina são divulgados na Tabela 2.

[00101] Quando o agente de alvejamento compreende biotina, iminobiotina, carboxibiotina, biocitina ou iminobiocitina, as moléculas de biotina, iminobiotina, carboxibiotina, biocitina ou iminobiocitina podem ser ligadas através de uma ligação de amida ao nitrogênio de uma molécula de fosfolipídeo tal como 1,2-dipalmitato-sn-glicero-3-fosfoetanolamina. Os compostos podem ser da mesma maneira ligados a uma molécula tal como colesterol através de uma ligação de éster. No caso da biocitina e iminobiocitina, os compostos podem ser ligados à benzoil tioacetil triglicina através de uma ligação amida entre o nitrogênio terminal de iminiobiocitina e a carbonila terminal de benzoil tioacetil triglicina. As conectividades de ligação alternativas daqueles descritos acima são possíveis e consideradas de estarem dentro do escopo da presente invenção. Tabela 2 Nomes dos Compostos de 48 a 50:48. ((2R,5S)-3-acetamido-5-hidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,6-tetrametil-4-((((2S,5R)-3,4,5-triidróxi-6- (hidroximetil)-2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi)metil) tetraidro-2H-piran-2-il)metil 5-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato ((2R,5S)-3-acetamido-5-hidróxi-6-(hidroximetil)-2, 3,4,6- tetrametil-4- ((((2S,5R)-3,4,5-triidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi)metil) tetraidro-2H-piran-2- il)metil 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato49. (2R,3R,5S)-5-((((2S,3S,5S)-3-acetamido-5-hidróxi-6-(hidroximetil)-2,4,6-trimetil-4-((((2S,5R)-3,4,5-triidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi) metil)tetraidro-2H-piran-2- il)metóxi)metil)-3,4-diidróxi-2,4,5,6,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4- d]imidazol-4- il)pentanoato50. (2S,5S)-3-acetamido-4-((((2R,5S)-5-((((2R,5S)-4,5-diidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,5,6-pentametil- 3-((((2S,5S)-3,4,5-triidróxi-2,3,4,5,6,6-hexametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi)metil)tetraidro-2H-piran-2- il)metóxi)metil)-3,4-diidróxi-2,3,4,5,6,6-hexametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi)metil)-5-hidróxi-6-(hidroximetil)- 2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato.As estruturas de compostos de iminobiotina não são mostradas na Tabela 2. No entanto, as estruturas de iminobiotina são análogas da estrutura de biotina, onde o grupo de biotina é substituído por um grupo de iminobiotina. Um exemplo é mostrado abaixo.

[00102] Em uma forma de realização da invenção, os agentes de alvejamento derivados de metal podem ser poliméricos ou monoméricos. Os agentes de alvejamento derivados de metal poliméricos são completamente descritos na U.S. 7.169.410. Os agentes de alvejamento derivados de metal monoméricos são descritos na U.S. 4.603.044. Quer poliméricos quer monoméricos, os compostos geralmente compreendem um metal (tipicamente adquirido como um sal inorgânico) que pode ser selecionado dos metais de transição e transição interna ou adjacentes dos metais de transição. Os metais de transição e transição interna dos quais o metal é selecionado incluem: Sc (escândio), Y (ítrio), La (lantânio), Ac (actínio), a série dos actinídeos; Ti (titânio), Zr (zircônio), Hf (háfnio), V (vanádio), Nb (nióbio), Ta (tântalo), Cr (cromo), Mo (molibdênio), W (tungstênio), Mn (manganês), Tc (tecnécio), Re (rênio), Fe (ferro), Co (cobalto), Ni (níquel), Ru (rutênio), Rh (ródio), Pd (paládio), Os (ósmio), Ir (irídio) e Pt (platina). Os adjacentes dos metais de transição em que o metal pode ser selecionado são: Cu (cobre), Ag (prata), Au (ouro), Zn (zinco), Cd (cádmio), Hg (mercúrio), Al (alumínio), Ga (gálio), In (índio), Tl (tálio), Ge (germânio), Sn (estanho), Pb (chumbo), Sb (antimônio) e Bi (bismuto), e Po (polônio). Preferivelmente, o metal é cromo.

[00103] Exemplos não limitativos de sais úteis incluem cloreto de cromo (III) hexaidratado; fluoreto tetraidrato de cromo (III); brometo hexaidrato de cromo (III); complexo de citrato amônio de zircônio (IV); cloreto de zircônio (IV); fluoreto hidrato de zircônio (IV); iodeto de zircônio (IV); brometo de molibdênio (III); cloreto de molibdênio (III); sulfeto de molibdênio (IV); hidrato de ferro (III); fosfato tetraidrato de ferro (III); sulfato pentaidrato de ferro (III), e outros mais.

[00104] Além de um metal, o agente de alvejamento de metal compreende um ou mais agentes complexantes. Um agente complexante é um composto capaz de formar um complexo de coordenação insolúvel em água com o metal preferido. Existem várias famílias de agentes complexantes adequados.

[00105] Um agente complexante pode ser selecionado da família de ácidos iminodiacéticos de fórmula (1) em que R1 é alquila inferior, arila, aril alquila inferior, ou um substituinte heterocíclico.

[00106] Os compostos adequados de fórmula (1) incluem: Ácido N-(2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,6-dietilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,6-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(4-isopropilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(4-butilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,3-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,4-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2,5-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(3,4-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(3,5-dimetilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(3-butilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2-butilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(4-terciário butilfenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(3-butoxifenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(2-hexiloxifenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido N-(4-hexiloxifenilcarbamoilmetil) iminodiacético;Ácido aminopirrol iminodiacético;Ácido N-(3 -bromo-2,4,6-trimetilfenilcarbamoilmetil)iminodiacético; Ácido benzimidazol metil iminodiacético;Ácido N-(3-ciano-4,5-dimetil-2-pirrilcarbamoilmetil)iminodiacético;Ácido N - (3-ciano-4-metil-5-benzil-2-pirrilcarbamoilmetil)iminodiacético;eÁcido N-(3-ciano-4-metil-2-pirrilcarbamoilmetil)iminodiacético e outros derivados de ácido N-(3-ciano-4-metil-2-pirrilcarbamoilmetil) iminodiacético de fórmula (2),em que R2 e R3 são os seguintes:R2 R3H iso-C4H9H CH2CH2SCH3H CH2C6H4-P-OHCH3 CH3CH3 iso-C4H9CH3 CH2CH2SCH3CH3 C6H5CH3 CH2C6H5CH3 CH2C6H4-P-OCH3

[00107] Alternativamente, o agente complexante pode ser selecionadoda família de derivados de imino diácido de fórmula (3), em que R4, R5 e R6 são independentemente selecionados em cada ocorrência e podem ser hidrogênio, alquila inferior, arila, aril alquila inferior, alcóxi alquila inferior e heterocíclico.

[00108] Os compostos adequados de fórmula (3) incluem: ácido N’-(2- acetilnaftil) iminodiacético; (NAIDA); ácido N’-(2-naftilmetil) iminodiacético (NMIDA); complexo de iminodicarboximetil-2-naftilcetona ftaleína; 3 (ácido 3: 7a: 12a: triidróxi-24-norchol anil-23-iminodiacético; ácido benzimidazol metil iminodiacético; e ácido N-(5, pregneno-3-p-ol-2-oil carbamoilmetil) iminodiacético.

[00109] O agente complexante também pode ser selecionado da família de aminoácidos de fórmula (4),em que R7 é uma cadeia lateral de aminoácido; em que R8 pode ser alquila inferior, arila e aril alquila inferior e em que R9 é piridoxilideno.

[00110] Os aminoácidos adequados da fórmula (4) são aminoácidos alifáticos, incluindo, mas não limitado a eles: glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina; ácidos de hidroxiamino, incluindo serina e treonina; aminoácidos dicarboxílicos e suas amidas, incluindo ácido aspártico, asparagina, ácido glutâmico, glutamina, aminoácidos tendo funções básicas, incluindo lisina, hidroxilisina, histidina, arginina; aminoácidos aromáticos, incluindo fenilalanina, tirosina, triptofano, tiroxina; e aminoácidos contendo enxofre, incluindo cistina e metionina.

[00111] O agente complexante também podem ser selecionado de derivados de aminoácido incluindo mas não limitados a eles, ácido (3-alanina- y-amino) butírico, O-diazoacetilserina (azaserina), homosserina, ornitina, citrulina, penicilamina e membros da classe de piridoxilideno dos compostos. Os compostos de piridoxilideno incluem, mas não são limitados a eles: glutamato de piridoxilideno; isoleucina de piridoxilideno; fenilalanina de piridoxilideno; triptofano de piridoxilideno; triptofano de piridoxilideno-5- metila; piridoxilideno-5-hidroxitriptamina; e piridoxilideno-5-butiltriptamina.

[00112] O agente complexante pode da mesma maneira ser selecionado da família de diaminas de fórmula (6):em que R10 é hidrogênio, alquila inferior, ou arila; R11 é alquileno inferior ou aril alquila inferior; R12 e R13 são independentemente selecionados em cada ocorrência e podem ser hidrogênio, alquila inferior, alquila, arila, aril alquila inferior, acileterocíclico, tolueno, sulfonila ou tosilato.

[00113] Exemplos de diaminas adequadas de fórmula (6) incluem, mas não são limitados a estes, ácido etilenodiamina-N,N diacético; acetato de etilenodiamina-N,N-bis(-2-hidróxi-5-bromofenil); ácido N’-acetiletilenodiamina-N,N diacético; ácido N’-benzoil etilenodiamina-N,N diacético; ácido N’-(p-toluenossulfonil) etilenodiamina-N,N diacético; ácido N’-(p-t-butilbenzoil) etilenodiamina-N,N diacético; ácido N’- (benzenossulfonil) etilenodiamina-N,N diacético; ácido N’-(p- clorobenzenossulfonil) etilenodiamina-N,N diacético; ácido N’-(p- etilbenzenossulfonil etilenodiamina-N,N diacético; ácido N’-acil e N’-sulfonil etilenodiamina-N,N diacético; ácido N’-(p-n-propilbenzenossulfonil) etilenodiamina-N,N diacético; ácido N’-(naftaleno-2-sulfonil) etilenodiamina- N,N diacético; e ácido N’-(2,5-dimetilbenzenossulfonil) etilenodiamina-N,N diacético.

[00114] Outros exemplos não limitativos de compostos ou agentes complexantes incluem penicilamina, ácido p-mercaptoisobutírico; ácido diidrotióctico; 6-mercaptopurina; cetoxal-bis(tiossemicarbazona); Complexos de Amina Hepatobiliares, 1-hidrazinoftalazina (hidralazina); sulfonil uréia; Complexos de Base de Schiff de Aminoácido Hepatobiliares; glutamato de piridoxilideno; isoleucina de piridoxilideno; fenilalanina de piridoxilideno, triptofano de piridoxilideno; 5-metil triptofano de piridoxilideno; piridoxilideno-5-hidroxitriptamina; piridoxilideno-5-butiltriptamina;tetraciclina; 7-carbóxi-p-hidroxiquinolina; fenolftaleína; coloração azulada de eosina I; coloração amarelada de eosina I; verografina; ácido 3-hidróxi-4- formil-pirideno; ácido iminodiacético substituído por Azo; complexos de tintura hepatobiliares, tais como rosa de bengala; vermelho congo; bromossulfoftaleína; azul de bromofenol, azul de toluidina e verde de indocianina; agentes de contraste hepatobiliares, tais como iodipamida; e ácido ioglicâmico; sais biliares, tais como a bilirrubina; colgiciliodoistamina e tiroxina; complexos tio hepatobiliares, tais como penicilamina, ácido p- mercaptoisobutírico; ácido diidrotiocítico; 6-mercaptopurina e cetoxal-bis (thiosemicarbazona); complexos de amina hepatobiliares, tais como 1- hidrazinoftalazina (hidralazina) e sulfonil uréia; complexos de base de Schiff de aminoácido hepatobiliares, incluindo piridoxilideno-5-hidroxitriptamina; e piridoxilideno-5-butiltriptamina; complexos de proteína hepatobiliares, tais como protamina; ferritina; e asialo-orossomucóide; complexos de asialo, tais como albumina lactosaminada; imunoglobulinas, G, IgG e hemoglobina.

Adição de Agentes Terapêuticos

[00115] Como observado anteriormente, em certas formas de realização, um ou mais agentes terapêuticos podem ser associados com um constituinte de uma composição da presente invenção. Exemplos de agentes terapêuticos incluem, mas não são limitados a eles, insulina, interferon, rituximab, trastuzumab, uricase, ativador de plasminogênio tecidual, timoglobina, diversas vacinas, heparina, análogos de heparina, anitrombina III, filgrastina, acetato de pramilitide, exanatide, epifibatide, antivenenos, IgG, IgM, Fatores de coagulação sangüínea VII e VIII, HGH, GLP-I, eritropoietina, hormônio da paratireóide, serotonina, D- ou L-tiroxina, calcitonina, anticorpos monoclonais, assim como outros peptídeos terapêuticos.

[00116] Em certas formas de realização, um agente terapêutico tal como a insulina é associado com um constituinte de uma composição da presente invenção. Em uma forma de realização, a associação é alcançada através de adição de uma solução de molaridade baixa de insulina a uma suspensão aquosa de constituintes. Nesta forma de realização, o número de moléculas lipídicas envolvidos na montagem dos constituintes de longe supera o número de moléculas de insulina entrelaçadas e/ou combinadas sobre ou dentro das matrizes de constituinte. Esta relação elevada de constituintes para insulina minimiza as interações moleculares entre a insulina e os constituintes, garantindo que o processo de auto-montagem e auto- organização dos constituintes da composição da presente invenção não seja rompido. Esta relação elevada facilita a formação de uma associação estável de constituinte/insulina.

[00117] Sem desejar ser limitado por uma teoria particular, acredita-se que a quantidade de agente(s) terapêutico(s) associada com um constituinte de uma composição da presente invenção parece ser uma função do tempo de carregamento e concentração de lipídeos. Como a concentração de componente de lipídeo em meio aquoso é aumentada, agentes terapêuticos adicionais se associam com um constituinte de uma composição da presente invenção. O tempo requerido para carregar o agente terapêutico pode ser em qualquer parte de várias horas a cerca de uma semana.

[00118] A baixa concentração de agente terapêutico em relação à concentração dos constituintes da composição da presente invenção é única entre os sistemas de liberação de partículas de lipídeos. Tipicamente, os sistemas de liberação de lipossoma ou como lipossoma, têm empregado uma quantidade muito maior de agente terapêutico. A eficácia desta forma de realização da presente combinação mostra que é possível utilizar menos agentes terapêuticos enquanto ainda se obtém um resultado farmacologicamente desejável no paciente. Esta forma de realização da invenção, portanto, fornece uma opção terapêutica vantajosa.

[00119] Em outras formas de realização a adição de uma concentração mais elevada de agente terapêutico pode ser tanto desejável quanto vantajosa. Os membros constituintes de uma composição da presente invenção são capazes de se associar, e tolerar, com soluções de molaridade mais elevada de qualquer agente terapêutico fornecido.

[00120] Um exemplo diagramático de uma forma de realização de um constituinte de uma composição da presente invenção é apresentado na Figura 1. A figura 1 ilustra uma construção de constituinte/HTM/insulina. As moléculas de insulina se ligam na superfície do constituinte através de interações eletrostáticas não covalentes.

[00121] A serotonina, como a insulina, também pode ser liberada no fígado, utilizando um complexo de constituinte/HTM de acordo com a invenção. A serotonina atua em conjunto com a insulina no nível do fígado para ativar o armazenamento de glicose hepática durante uma carga de glicose portal (oral). A fim de alcançar o efeito desejado, a serotonina deve ser liberada no fígado. A serotonina não direcionada, introduzida através de injeção ou liberação oral em doses farmacologicamente aceitáveis não pode efetivamente induzir a atividade desejada. Portanto, uma forma de realização da invenção compreendendo uma construção de constituinte/HTM/serotonina fornece um mecanismo de liberação altamente desejável para este importante hormônio gluco-regulador. Em uma forma de realização da invenção designada para a liberação de serotonina, os componentes lipídicos selecionados para formar os constituintes da composição incluem aproximadamente 62 por cento molar de 1,2-distearoil-sn-glicero-3- fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol e cerca de 1 por cento molar de um agente de alvejamento.

[00122] A calcitonina é um hormônio que regula o metabolismo ósseo. Devido à alta prevalência de doenças tais como a osteoporose, uma formulação oral deste hormônio é altamente desejável. Atualmente a calcitonina é apenas liberada através de injeção. Em uma forma de realização da invenção designada para a liberação de calcitonina, os componentes lipídicos selecionados para formar os constituintes da composição incluindo a calcitonina incluem aproximadamente 62 por cento molar de 1,2-distearoil- sn-glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, e aproximadamente 16 por cento molar de colesterol.

[00123] GLP-1 é um peptídeo que atua tanto no fígado quanto no pâncreas. No fígado, o GLP-1 atua para estimular o acúmulo de glicogênio durante uma refeição. No entanto, os métodos de administração da técnica anterior onde o GLP-I é administrado por via oral mostram a biodisponibilidade fraca e eficácia reduzida após a dosagem oral. Em uma forma de realização da presente invenção, o GLP-I se associa com um constituinte de uma composição da invenção para formar uma construção de constituinte/GLP-1. A construção de constituinte/GLP pode ainda incluir um agente de alvejamento. Preferivelmente, os componentes lipídicos selecionados para formar os constituintes da composição incluindo o GLP-1 incluem aproximadamente 62 por cento molar de 1,2-distearoil-sn-glicero-3- fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, e aproximadamente 16 por cento molar de colesterol.

[00124] Tiroxina, como a insulina, também não é geralmente biodisponível por via oral. Em uma forma de realização da invenção, todavia, a tiroxina pode associar-se com um constituinte de uma composição da invenção formando uma construção de constituinte/tiroxina. Preferivelmente, os componentes lipídicos selecionados para formar os constituintes da composição incluindo tiroxina incluem aproximadamente 62 por cento molar de 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol, e aproximadamente 1 por cento molar de Biotina DHPE.

[00125] Embora a invenção tenha sido descrita em termos de construções específicas de agente terapêutico/constituinte, qualquer um dos agentes terapêuticos descritos neste documento pode se associar com um constituinte da invenção para formar uma construção de agente terapêutico/constituinte.

Agentes Terapêuticos Covalentemente Ligados

[00126] Em certas formas de realização da invenção, o agente terapêutico pode ser covalentemente ligado a um componente lipídico da invenção. Tipicamente, no entanto, a ligação covalente do agente terapêutico ao componente lipídico não é direta, mas é mediada por um articulador da fórmula -C(O)(CH2)nSR, em que uma ligação de amida, éster ou tioamida é formada entre o agente terapêutico e o articulador. Preferivelmente, n é um inteiro entre 1 e 10. Ainda mais preferivelmente, n é 1, 2 ou 3. Quando o articulador está sendo ligado ao agente terapêutico, R é tipicamente um grupo de proteção tal como -C(O)CH3. Outros grupos de proteção de tiol apropriados podem ser observados em Green's Protective Groups in Organic Sintesis, Wuts, et al, 4th edition, 2007.

[00127] Após o articulador ser ligado ao agente terapêutico, o grupo de proteção, R, é removido do articulador para revelar um grupo de tiol livre. Preferivelmente, o grupo de proteção é removido sob condições que não perturbem o agente terapêutico agora anexado. Este tiol pode então passar por uma reação de Michael com uma componente lipídico tal como MPB-PE para formar um tio éter. Preferivelmente, o componente lipídico MPB-PE já está incorporada em um constituinte de um composto da invenção, no entanto, o articulador pode ser ligado ao MPB-PE antes de sua incorporação a um constituinte da invenção. A ordem das reações dependerá da capacidade do agente terapêutico em tolerar certas condições de reação. No caso das proteínas complexas que podem desnaturar em altas temperaturas, é preferível executar a reação de Michael após o MPB-PE ter sido incorporado em um constituinte do composto da invenção.

[00128] Em um exemplo de uma interação covalente, IgG foi covalentemente ligado a um componente lipídico de um constituinte da invenção para formar uma construção de constituinte/IgG. O IgG é um anticorpo que não é normalmente biodisponível por via oral. Nesta forma de realização da invenção, os componentes lipídicos selecionados para formar os constituintes da construção de constituinte/IgG incluem aproximadamente 68 por cento molar de 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 18 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 9 por cento molar de colesterol, e aproximadamente 3 por cento molar de MPB-PE.

[00129] A fim de formar os constituintes da invenção, 1,2-dipalmitoil- sn-glicero-3-fosfocolina, fosfato de diexadecila, e colesterol foram microfluidificados como apresentado mais no início neste documento para formar constituintes com um limite de tamanho superior entre 50 e 60 nanômetros. Esta suspensão de constituintes foi depois transferida para um frasco de fundo redondo que foi revestido com uma fina película de MPB-PE. A suspensão foi aquecida para cerca de 62 oC, com a temperatura não caindo abaixo de 60 oC ou excedendo a 65 °C. A suspensão aquecida foi subseqüentemente agitada durante 15 minutos até que todo o MPB-PE tenha sido incorporado nos constituintes da invenção.

[00130] Separadamente, IgG foi reagido com um excesso de 10 vezes precursor de articulador I (R=CH3C(O), n = 1), abaixo, para formar II. O composto II foi então purificado utilizando uma coluna 2,5 x 25 cm Sephadex G-25 equilibrada com tampão de tampão de fosfato 18 mM acrescido de tampão de EDTA 1,0 mM em pH 7,4.

[00131] Em seguida, o grupo de proteção de acetila no composto II foi removido mediante a agitação do composto II com cloridreto de hidroxilamina 50 mM em tampão de fosfato de sódio 18 mM contendo EDTA 1,0 mM (pH 7,4) durante 2 horas na temperatura ambiente. O tiol livre resultante, III, foi purificado na coluna 2,5 x 25 cm Sephadex G-25, comoexposto para o composto II.

[00132] Imediatamente após a purificação, 200 μ-moles de composto III foram misturados com 10 ml da solução de constituinte preparada mais no início. A mistura de reação foi agitada por 15 minutos, durante cujo tempo o composto III sofreria uma reação de Michael com a funcionalidade de maleimida do MBP-PE incorporado nos componentes da invenção. A reação de conjugação foi interrompida, e o excesso de III removido pela adição de um excesso molar de 50x de N-etilmaleimida.

[00133] Embora o exemplo acima tenha sido descrito em relação ao IgG, é igualmente aplicável a qualquer agente terapêutico com nitrogênio básico ou um grupo de hidroxila livre, ou outro grupo funcionalizável, capazes de se ligar ao articulador ou precursor de articulador.

Estabilidade

[00134] Embora os membros constituintes de uma composição da presente invenção sejam formulados em meio aquoso, os membros constituintes da composição não apresentam estabilidade a longo prazo em água. Especificamente, a água auxilia na hidrólise de quaisquer cadeias de acila presentes em qualquer um dos componentes lipídicos dos constituintes da composição. O ambiente aquoso também leva em conta a pronta oxidação de qualquer cadeia de acila insaturada presente em qualquer um dos componentes lipídicos. Em uma forma de realização preferida da presente invenção, os constituintes da composição da presente invenção podem ser protegidos durante o armazenamento de longo prazo através da interação com um proteoglicano tal como um colágeno modificado, conhecido genericamente como gelatina granulada seca. A gelatina granulada seca, quando colocada em contato com uma suspensão aquosa de constituintes, reage com a água, estabiliza os constituintes e forma uma composição da presente invenção.

[00135] A reação da gelatina granulada seca com uma suspensão aquosa de constituintes de uma composição da presente invenção resulta em um gel coloidal semi-sólido que protege os constituintes da interação direta com água. Qualquer água não associada com a gelatina é lentamente evaporada através do armazenamento refrigerado em cerca de 2 ° a cerca de 8 °C. A água pode, entretanto, ser removida através de técnicas incluindo, mas não limitado a elas, secagem por congelamento e secagem por pulverização.

[00136] Isto resulta em um complexo de constituinte/gelatina “seco” como grânulo que é a composição da invenção. Na composição, os elementos constituintes são parcialmente desidratados de uma maneira reversível e seqüestrados pela treliça protéica da gelatina seca. Este seqüestro facilitado pela água estruturada, lipídeo estruturado e gelatina estruturada totalmente interagindo através da ligação de hidrogênio, ligação iônica, interações de van der Waal, e ligação hidrofóbica entre os componentes lipídicos, água e estruturas de proteína, isto é, a insulina. Isto evidencia que a gelatina não atua como um emulsificante ou agente de suspensão. Como um resultado, o grânulo “seco” é estável durante o armazenamento de longo prazo porque a atividade da água foi mitigada. Estes grânulos podem ser ainda processados em um pó granulado ou de circulação livre para o enchimento e formação de tablete da cápsula final, enquanto mantém a sua estabilidade.

[00137] Após a administração oral a um paciente, o grânulo “seco” torna-se hidratado e mais uma vez assume um estado de gel coloidal semi- sólido. Após outra exposição ao ambiente gástrico, o gel se torna líquido quando a gelatina é solubilizada. Assim que a gelatina é completamente solubilizada, os membros constituintes da composição da invenção se hidratam novamente, resultando na formação de uma nova suspensão de constituintes dentro do ambiente gástrico. Os constituintes reconstituídos podem ser então absorvidos pelo fluxo de sangue portal.

[00138] É importante perceber que o papel da gelatina neste aspecto da invenção é como um estabilizante ativo da composição e não uma carga inerte como é comumente observado nas formulações orais de muitas outras composições farmacêuticas. Dito isto, a utilização adicional da gelatina como uma carga além do uso anteriormente mencionado também é contemplada.

[00139] Embora a gelatina seja usada em uma forma de realização preferida da invenção, outros compostos semelhantes a gelatina podem ser usados igualmente. Exemplos de agentes que irão atuar como estabilizantes ativos incluem, mas não são limitados a estes, acácia (goma arábica), ágar (ágar-ágar, gelatina vegetal; gelosa; gelatina chinesa ou japonesa), ácido algínico, alginato de sódio (ácido algínico; sal de sódio; algina; Manucol; Norgine; Kelgin), carbômero (carboxipolimetileno), carragenano, carboximetilcelulose sódico (carbose D; carboximetocel S; CMC; goma de celulose), celulose em pó (Degussa), celulose de hidroxietila (celulose; éter 2- hidroxietílico; Cellosize; Natrosol), hidroxipropil celulose (celulose, éter 2- hidroxipropílico; Klucel) hidroxipropil metilcelulose (celulose; éter 2- hidroxipropil metílico), metilcelulose (celulose, éter metílico Methocel), povidona (2-pirrolidinona; 1-etenil-; homopolímero; polivinilpirrolidona), tragacanto (goma tragacanto; Hog Gum; Goat’s Thorn) e goma xantana (Keltrol). Como a gelatina, e onde apropriado, estes compostos também podem ser utilizados como cargas inertes.

Formulações

[00140] Uma formulação de uma composição da invenção e agente terapêutico (com ou sem o agente de alvejamento) - a seguir “composição” - para a administração oral pode ser preparada, acondicionada ou vendida na forma de uma unidade de dose sólida discreta incluindo, mas não limitado a elas, um tablete, uma cápsula sólida ou macia, um selo, um comprimido, ou uma pastilha, cada uma contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo. Outras formulações adequadas para a administração oral incluem, mas não estão limitadas a elas, uma formulação em pó ou granular, suspensões aquosas ou emulsões.

[00141] Um tablete compreendendo a composição da presente invenção, por exemplo, pode ser produzido mediante a compressão ou moldagem da composição, opcionalmente com um ou mais ingredientes adicionais. Os tabletes comprimidos podem ser preparados por compressão, em um dispositivo adequado, a composição em uma forma de circulação livre tal como um pó ou preparação granular, opcionalmente misturada com uma ou mais de um aglutinante, um lubrificante, um excipiente, um agente tensoativo, e um agente de dispersão. Os tabletes moldados podem ser produzidos pela moldagem, em um dispositivo adequado, a composição, um carreador farmaceuticamente aceitável, e pelo menos líquido suficiente para umedecer a mistura.

[00142] Os excipientes farmaceuticamente aceitável utilizados na fabricação de tabletes incluem, mas não são limitados a eles, diluentes inertes, agentes de granulação e desintegração, agentes de ligação e agentes de lubrificação. Os agentes dispersantes conhecidos incluem, mas não são limitados a eles, fécula de batata e glicolato de amido sódico. Os agentes tensoativos conhecidos incluem, mas não são limitados a eles, lauril sulfato de sódio. Os diluentes conhecidos incluem, mas não são limitados a eles, carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, celulose microcristalina, fosfato de cálcio, fosfato de cálcio hidrogênio e fosfato de sódio. Os agentes de granulação e desintegração conhecidos incluem, mas não são limitados a eles, amido de milho e ácido algínico. Os agentes de ligação conhecidos incluem, mas não são limitados a eles, gelatina, acácia, amido pré- gelatinizado de milho, polivinilpirrolidona e hidroxipropil metilcelulose. Os agentes lubrificantes conhecidos incluem, mas não são limitados a eles, estearato de magnésio, ácido esteárico, sílica e talco.

[00143] Os tabletes podem ser não revestidos ou eles podem ser revestidos usando os métodos conhecidos para atingir a desintegração retardada no trato gastrointestinal de um indivíduo, fornecendo assim liberação sustentada e a absorção da composição. Por meio de exemplo, um material tal como monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila pode ser usado para revestir os tabletes. Ainda por meio de exemplo, os tabletes podem ser revestidos usando os métodos descritos nas Patentes US nos 4.256.108, 4.160.452 e 4.265.874 para formar tabletes de liberação osmoticamente controlada. Os tabletes podem ainda compreender um agente adoçante, um agente flavorizante, um agente colorante, um conservante, ou alguma combinação destes de modo a fornecer uma preparação farmaceuticamente elegante e saborosa.

[00144] As cápsulas sólidas compreendendo a composição podem ser produzidas usando uma composição fisiologicamente degradável, tal como a gelatina. Tais cápsulas sólidas compreendem o ingrediente ativo, e podem ainda compreender ingredientes adicionais incluindo, por exemplo, um diluente sólido inerte tal como carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, caulim ou acetato hidrogênio ftalato de celulose.

[00145] As cápsulas macias de gelatina compreendendo a composição podem ser produzidas usando uma composição fisiologicamente degradável, tal como a gelatina.

[00146] As formulações líquidas da composição que são adequadas para administração oral podem ser preparadas, acondicionadas e vendidas na forma líquida ou na forma de um produto seco destinado para reconstituição com água ou outro veículo adequado antes da utilização, sujeita às limitações de estabilidade divulgadas mais no início.

[00147] As suspensões líquidas podem ser preparadas usando métodos convencionais para obter a suspensão dos constituintes em um veículo aquoso. Os veículos aquosos incluem, por exemplo, água e salina isotônica. Os veículos oleosos podem ser apenas utilizados na medida em que tais solventes não sejam incompatíveis com os constituintes da composição da presente invenção. Na medida em que uma suspensão oleosa não é incompatível com os constituintes da composição da presente invenção, uma suspensão oleosa pode ainda compreender um agente espessante.

[00148] As suspensões líquidas podem ainda compreender um ou mais ingredientes adicionais na medida em que ditos ingredientes não quebrem as estruturas dos constituintes da composição da invenção. Exemplos de ingredientes adicionais incluem, mas não são limitados a eles, agentes de suspensão, agentes de dispersão ou umectantes, agentes emulsificantes, demulcentes, conservantes, tampões, sais, flavorizantes, agentes corantes e agentes adoçantes.

[00149] Os agentes de suspensão conhecidos incluem, mas não são limitados a eles, xarope de sorbitol, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto, goma acácia, e derivados de celulose tais como carboximetilcelulose, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose de sódio.

[00150] Os agentes emulsificantes conhecidos incluem, mas não são limitados a acácia. Os conservantes conhecidos incluem, mas não são limitados a eles, para-hidroxibenzoatos de metila, etila, ou n-propila, ácido ascórbico e ácido sórbico. Os agentes adoçantes conhecidos incluem, por exemplo, glicerol, propileno glicol, sorbitol, sacarose e sacarina.

[00151] As formulações em pó e granulares de uma preparação farmacêutica da invenção podem ser preparadas usando métodos conhecidos. Tais formulações podem ser administradas diretamente a um indivíduo, usadas, por exemplo, para formar tabletes, para encher cápsulas, ou para preparar uma suspensão ou solução aquosa mediante a adição de um veículo aquoso. Cada uma destas formulações pode ainda compreender uma ou mais agentes de dispersão ou umectantes, um agente de suspensão, e um conservante. Os excipientes adicionais, tais como cargas e adoçantes, flavorizantes ou agentes corantes, também podem ser incluídos nestas formulações.

Métodos de Tratamento de Doenças

[00152] Doenças, tais como diabetes, podem ser tratadas pela administração oral de um composto da invenção em que a insulina é o agente terapêutico associado. Similarmente, o diabetes pode ser tratado pela administração oral de um composto da invenção em que a insulina é o produto terapêutico associado e em que outra forma de insulina é co- administrada. As vias de co-administração incluem, mas não são limitadas a elas, a administração oral, injeção intramuscular, inalação, injeção intravenosa, injeção intra-arterial, assim como qualquer outra forma de administração.

[00153] Embora um médico será capaz de selecionar a dose apropriada para um determinado paciente, a faixa de doses que podem ser liberadas em uma mesma formulação de um composto da invenção é de cerca de 1 a cerca de 40 unidades, mas pode ser 5, 10, 15, 20, 25, 30 ou 35 unidades. Uma dada formulação pode, no entanto, conter qualquer número inteiro integral ou parcial entre estes e pode exceder a 40 unidades.

Kits

[00154] A invenção também inclui um kit que compreende uma composição da invenção e um material instrucional que descreve a administração da composição em um mamífero. Em outra forma de realização, este kit compreende uma composição da invenção, insulina para a co-administração, assim como material instrucional que descreve o processo de co-administração.

[00155] Conforme aqui utilizado, um “material instrucional” inclui uma publicação, uma gravação, um diagrama, ou qualquer outro meio de expressão que possa ser utilizado para comunicar a utilidade da composição da invenção no kit para efetuar o alívio das várias doenças ou distúrbios aqui relacionados.

[00156] Opcionalmente, ou alternativamente, o material instrucional pode descrever um ou mais métodos de alívio das doenças ou distúrbios em uma célula ou um tecido de um mamífero. O material instrucional do kit pode, por exemplo, ser afixado a um recipiente que contém a invenção ou ser expedido juntamente com um recipiente que contém a invenção. Alternativamente, o material instrucional pode ser expedido separadamente do recipiente com a intenção de que o material instrucional e o composto sejam usados de forma cooperativa pelo recebedor.

Exemplos Experimentais

[00157] A invenção será agora descrita com referência aos exemplos que seguem. Estes exemplos são fornecidos apenas para o propósito de ilustração e a invenção não deve de nenhuma maneira ser interpretada como sendo limitada por estes exemplos, mas de preferência deve ser interpretada de forma a abranger toda e qualquer variação que se torne evidente como um resultado dos ensinamentos aqui fornecidos.

Experimento 1 - Administração das Composições não Contendo um Agente de alvejamento

[00158] Uma composição cujos membros constituintes foram criados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo cerca de 62 por cento molar de 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol, e nenhum agente de alvejamento foi preparado de acordo com o procedimento de microfluidificação descrito aqui de uma forma geral. Uma parte conhecida do componente lipídico compreendeu fosfolipídeo rotulado 14C. Depois da filtração através de um filtro de 0,2 mícron, o tamanho médio do constituinte era menor do que 100 nm como medido com um Analisador do Tamanho de Partícula Sub-mícron.

[00159] Uma amostra de peso corporal 10 mg/kg da composição (contendo 85.000 cpm de 14C rádio rotulado) foi depois injetada no duodeno de um rato anestesiado de 230 gramas em jejum, mas de outra maneira normal. O sangue foi colhido das veias portal e femoral em 15 e 30 minutos após a dosagem para contagem (Figura 2). Aos 30 minutos após a dosagem, o rato foi sacrificado e amostras representativas de sangue, fígado e baço foram removidas para análise (Figura 3).

[00160] Os constituintes rotulados, como medidos por 14C, foram observados no sangue tanto portal quanto femoral do rato. Os níveis no sangue portal de constituintes rotulados 14C foram mais elevados do que os níveis no sangue femoral (Figura 2). Em 30 minutos após a dosagem, aproximadamente 15 % dos constituintes que foram injetados no intestino foram encontrados no sangue. Aproximadamente 4 % das contagens foram encontradas no fígado e cerca de 1 % foram encontradas no baço. Considerando os tamanhos relativos do fígado e do baço, a captação esplênica foi muito mais elevada do que a captação do fígado em uma base de peso.

Experimento 2 - Alvejamento de Hepatócito

[00161] Para demonstrar a absorção da composição do intestino, uma composição compreendendo insulina e constituintes gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo aproximadamente 61 por cento molar de 1,2 distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol, e aproximadamente 1 por cento molar de poli[Cr- bis(ácido N-2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)] (em que uma parte conhecida do componente fosfolipídico compreendia fosfolipídeo rotulado 14C) foi preparada como declarado formalmente na preparação geral aqui divulgada. Antes da dosagem, da composição rotulada nos ratos, os ratos foram submetidos a jejum de alimentos por 24 horas e de água por 4 horas. Os ratos em jejum foram então autorizados a beber água de uma garrafa de água graduada contendo a composição. A garrafa de água potável foi removida da gaiola após 15 minutos, a quantidade de água ingerida da garrafa de bebida foi medida, e a quantidade de composição ingerida foi calculada. O sangue dos ratos foi experimentado em 15, 30 e 45 minutos e o radiorrótulo em cada amostra foi contado (Figura 4). Em 45 minutos os ratos foram sacrificados e os fígados foram contados com relação ao rádio-rótulo (Figura 5).

[00162] Como é mostrado na Figura 4, aproximadamente 8 % da dose ingerida foi encontrado no sangue dos ratos 15 minutos após a água ter sido removida da gaiola. A quantidade de constituintes no sangue dos ratos permaneceu constante entre 15 e 45 minutos. A captação pelo fígado foi de aproximadamente 8 % em 45 minutos. A captação esplênica em 45 minutos foi de aproximadamente 1 % da dose ingerida (Figura 5). A absorção total foi de aproximadamente 17 % (incluindo o sangue, fígado e baço).

Experimento 3 - Alvejamento de Hepatócito com uma Composição em Camundongos Tratados com Aloxano-Estreptozotocina

[00163] Os camundongos utilizados no presente experimento tornaram-se diabéticos mediante a administração de estreptozotocina e aloxano. Os animais diabéticos foram então divididos em dois grupos. O grupo controle (11 camundongos) foi administrado em doses por via oral com insulina regular. O grupo experimental (7 camundongos) foi administrado em doses por via oral com uma composição compreendendo insulina e constituintes produzidos a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo aproximadamente 61 por cento molar de 1,2-distearoil-sn- glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol, e aproximadamente 1 por cento molar de poli[Cr-bis(ácido N-2,6- diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)] (em que uma parte conhecida do componente fosfolipídico compreendia fosfolipídeo rotulado 14C). A dosagem foi executada utilizando o método de dosagem de garrafa de água descrito no Experimento 2.

[00164] Após tornarem-se diabéticos, os ratos de ambos os grupos foram tratados de forma idêntica durante um período de 7 dias e alimentados com ração comum e água. Após este período de 7 dias, os ratos do grupo controle foram tratados durante um período experimental adicional de 7 dias com alimentos e insulina regular na água potável disponível em 0,1 U/ml. Durante o mesmo período experimental de 7 dias, o grupo experimental foi alimentado com alimento regular com a composição da invenção disponível na água potável em 0,1 U/ml. No final de cada período de 7 dias, a glicose no sangue foi medida em uma amostra de sangue da veia do rabo por um Beckman Blood Glucose Analyzer.

[00165] A eficácia farmacológica da insulina administrada por via oral no grupo dosado com a composição acima descrita é mostrada na Figura 6. Os camundongos que receberam a composição tiveram uma redução estatisticamente significativa na glicemia em sete dias (p < 0,01) em comparação com os camundongos que receberam a insulina regular, cuja glicemia não foi alterada de modo algum.

Exemplo 4 - Administração In vivo de Serotonina

[00166] A ação hepática de uma composição compreendendo serotonina e constituintes gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo aproximadamente 61 por cento molar de 1,2- distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol, e 1 por cento molar de poli[Cr-bis(ácido N-2,6-diisopropilfenilcarbamoilmetil iminodiacético)] foi demonstrada em um cão diabético tipo 2 (vagotomia troncular). O cão estava em jejum, e em seguida anestesiado. Cateteres de amostras do sangue foram colocados nas veias hepáticas e portais para permitir a colheita de amostra de sangue simultânea. A glicose foi infundida no sistema porta em uma taxa de 0,5 g/kg/hora. Em seguida, a composição acima descrita foi administrada por via intraduodeno em uma dose única de 30 μg/kg de peso corporal. Os resultados são representados na Figura 7 e demonstram que a serotonina (também referida como 5-hidroxitriptamina ou 5-HT), administrada por via intraduodeno como uma composição da invenção, é eficaz em doses baixas na conversão de um cão diabético tipo 2 da produção de glicose hepática para a captação durante uma carga de glicose portal.

Exemplo 5 - Administração In vivo de Calcitonina

[00167] Ratos normais, em jejum, de controle receberam uma dose de calcitonina de salmão através de injeção subcutânea tal que uma redução inicial de 10 % no cálcio do sangue foi observada. Níveis de cálcio no sangue foram então medidos durante seis horas após a injeção. Um grupo experimental de ratos recebeu a mesma dose eficaz de calcitonina por sonda oral, na forma de uma composição compreendendo calcitonina e constituintes gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo aproximadamente 61 por cento molar de 1,2-distearoil-sn-glicero-3- fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, e aproximadamente 16 por cento molar de colesterol. Os níveis de cálcio no sangue foram seguidos durante seis horas (Figura 8). Uma redução de cálcio no sangue de até 20 % foi observada nos ratos de não controle. Esta diferença foi estatisticamente significativa (Figura 8).

Exemplo 6 - Prova Clínica com Insulina Rotulada em Indivíduos com Diabetes Melito Tipo 2

[00168] Cápsulas contendo uma composição da invenção foram preparadas. A composição compreendia insulina como o agente terapêutico, gelatina, e constituintes gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo aproximadamente 61 por cento molar de 1,2- distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol, e cerca de 1 por cento molar do sal de sódio de Biotina-HDPE. Cada cápsula continha 2U de insulina.

[00169] Seis pacientes bem caracterizados com diabetes tipo 2 se participaram no estudo controlado. Os pacientes foram mantidos em sua terapia anti-diabetes Tipo 2 costumeira. Os participantes do estudo também receberam cápsulas de placebo ou as cápsulas descritas acima 30 minutos antes de uma refeição de carboidratos de 60 gramas no café da manhã, almoço e jantar. As amostras de sangue foram tiradas em intervalos freqüentes durante um período de 13 horas e a Área Incremental sob a Curva para os valores de glicose no sangue foi calculada para cada indivíduo.

[00170] Em 0,1 U/kg de peso corporal/refeição, a mesma dose que é frequentemente utilizada com a injeção subcutânea de insulina em uma dada refeição, uma redução estatisticamente significativa na AUC para cada uma das três refeições foi observada. A Figura 10 apresenta os resultados da prova em formato gráfico.

Exemplo 7 - Concentração de Insulina

[00171] Insulina U-500 contém 500 unidades de insulina/ml = 0,5 unidades/1 μl

[00172] - Adicionar 3,36 ml de U-500 insulina em 70 ml de suspensãoconstituinte com tampão de fosfato 18 mM @ pH 7,01.

[00173] - (3.360 μl) * (0,5 unidades de insulina/μl) = 1.680 unidades deinsulina total em 73,36 ml.

[00174] - (1.680 unidades de insulina) / (73,36 ml) = 22,9 unidades de insulina/ml - ou - 34,35 unidades de insulina/1,5 ml.

[00175] - Insulina carregada durante 21 horas.

[00176] - Pós-carregamento, cromatógrafo de 1,5 ml da amostra sobreuma coluna de 1,5 cm x 25 cm com gel Sepharose CL-6B equilibrado com tampão de fosfato 18 mM @ pH 7,01.

[00177] - 0 % de insulina livre recuperada da coluna; A recuperação de0 % do total de insulina carregada implica que 100 % da insulina “carregada” total está associada com um constituinte da composição.

[00178] - 34,35 unidades de insulina x 100 % = 34,35 unidades deinsulina ligadas ou associadas com os constituintes da invenção.

[00179] A Figura 11 apresenta a cromatografia acima descrita. Um rastreamento indicando o tempo de eluição de insulina livre é incluído para propósitos de comparação. Como pode ser visto a partir do cromatograma, a insulina é associada com os constituintes da invenção e nenhuma insulina livre está em solução. Um conservante incluído com a insulina não associa os constituintes da composição da invenção e é visível no cromatograma.

Exemplo 8 - Liberação Oral de GLP-1

[00180] Ratos foram mantidos em jejum durante a noite. Subseqüentemente, 800 mg cada de aloxano e estreptozotocina foram dissolvidos em 40 ml de PBS (pH 7, 0,01 M). Os ratos em jejum foram então tratados imediatamente com uma dose de 0,5 mL IP para induzir a deficiência de insulina. Os animais foram depois estabilizados durante a noite com água e alimento. Após a estabilização, os ratos foram mantidos em jejum durante a noite para esgotar o glicogênio hepático.

[00181] Subseqüentemente, 1,5 g de glicose/kg de peso corporal e GLP-1 na forma de uma construção de GLP-1/constituinte foram simultaneamente administrados através de gavagem oral. Os constituintes foram preparados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo aproximadamente 61 por cento molar de 1,2-distearoil-sn- glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, e aproximadamente 16 por cento molar de colesterol (“GLP-1 associado”). Nas experiências separadas, a quantidade de GLP-1 associado foi variada. O glicogênio hepático foi medido quimicamente em 2 horas após a dosagem.

[00182] Como um controle, GLP-1 não associado foi tratado por gavagem em vez de GLP-1 associado. Em um controle separado, o GLP-1, em uma dose similar àquela oralmente tratada por gavagem, foi injetado por via intraperitoneal. Como é mostrado na Tabela 3, abaixo, a eficácia oral substancialmente intensificada foi observada para o GLP-1 associado versus GLP-1 não associado.Tabela 3* p = 0,05 comparado com o GLP-1 oral de controle.

Exemplo 9 - IgG Oral

[00183] Anticorpos de IgG humanos foram covalentemente ligados a um constituinte da invenção, como descrito anteriormente neste documento (“IgG covalente”). Subseqüentemente, oito ratos de laboratório de 250 gramas foram preparados com cateteres intra-duodenais para a administração de IgG covalente. Após um jejum durante a noite, 5 ug de IgG covalente foram infundidos no cateter duodenal. O cateter foi subseqüentemente lavado com 0,5 ml de tampão. As amostras de sangue foram coletadas em 15, 30, 60 e 120 minutos para experimentar a concentração plasmática de anticorpos IgG humanos pela reação ELISA.

[00184] Em uma experiência de controle, 5 ug de IgG livre foram infundidos no cateter duodenal. O cateter foi subseqüentemente lavado com 0,5 ml de tampão. As amostras de sangue foram coletadas em 15, 30, 60 e 120 minutos para experimentar a concentração plasmática de anticorpos IgG humanos pela reação ELISA. Os resultados de ambos os estudos são apresentados na Figura 12.

[00185] Como pode ser visto na Figura 12, IgG covalente forneceu concentração plasmática intensificada de IgG humano (AUC) em comparação com IgG livre. Da mesma maneira, o IgG covalente intensificou Tmax - o tempo para a concentração máxima, e Cmax - a concentração plasmática máxima observada após a administração em doses. A eficácia acentuada de IgG covalente, em comparação com IgG livre, assim demonstra a capacidade de um composto da invenção em intensificar a absorção oral de proteínas muito grandes na circulação sistêmica.

Exemplo 10 - Tiroxina Oral

[00186] A tiroxina é conhecida de diminuir os níveis de colesterol e triglicerídeos. No entanto, nas doses necessárias para tratar o colesterol e triglicerídeos elevados, a tiroxina causa hipertireoidismo como um efeito colateral indesejado. O objetivo deste estudo foi demonstrar que a tiroxina rotulada oralmente administrada associada com um composto da invenção atuaria no fígado com o resultado de diminuir os lipídeos no sangue sem induzir o hipertireoidismo indesejado.

[00187] Camundongos de laboratório normais, em dietas altamente calóricas, foram administrados com doses orais baixas (0,2 a 1,0 mg) de tiroxina na forma de uma composição compreendendo tiroxina e constituintes gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo aproximadamente 61 por cento molar de 1,2-distearoil-sn-glicero-3- fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol e aproximadamente 1 por cento molar do sal de sódio de Biotina-HDPE, um agente de alvejamento do fígado.

[00188] Os camundongos, em grupos de 4, foram dosados diariamente por gavagem oral durante uma semana em um estudo de resposta de dose. O colesterol e os triglicerídeos no sangue foram medidos após uma semana de tratamento. Os valores básicos para o colesterol e os triglicerídeos para todos os grupos foram similares. As respostas de dose, mostradas na Figura 13, demonstram a eficácia da tiroxina rotulada hepática oralmente administrada associada com uma composição da invenção. Os níveis sangüíneos de hormônio da tireóide não aumentaram com a dosagem de tiroxina oral rotulada hepática, demonstrando a segurança do produto.

[00189] Outros estudos publicados (Erion, M., et al., PNAS Sept 25, 2007 vol 104, #39, pp 15490- 15495) com análogos de tiroxina rotulada hepática requereram doses pelo menos 10 vezes mais elevadas do que aquelas aqui descritas para extrair reduções similares no colesterol e triglicerídeos no sangue.

Exemplo 11 - Interferon Oral

[00190] Uma composição foi preparada compreendendo interferon-a como o agente terapêutico e constituintes gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo aproximadamente 61 por cento molar de 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, aproximadamente 22 por cento molar de fosfato de diexadecila, aproximadamente 16 por cento molar de colesterol, e cerca de 1 por cento molar do sal de sódio de Biotina-HDPE.

[00191] Seis pacientes com hepatite C, genótipo 3, foram tratados com uma suspensão aquosa da composição acima descrita e ribavirina diariamente durante 8 semanas. A dose de interferon-a na suspensão aquosa da composição foi de 60.000 unidades/dia.

[00192] Cargas virais da hepatite C foram medidas no início do estudo, depois nas semanas 1, 2, 4 e 8. Ver a Figura 14. Os dados demonstram a capacidade da suspensão aquosa de uma composição da invenção em diminuir a carga viral com uma dose mínima de interferon. Os efeitos colaterais também foram minimizados.

[00193] As divulgações de cada uma e todas as patentes, pedidos de patente e publicações aqui citadas, são aqui por meio desta incorporadas por referência em sua totalidade.

[00194] Embora esta invenção tenha sido divulgada com referência às formas de realização específicas, fica evidente que outras formas de realização e variações desta invenção podem ser elaboradas por outras pessoas versadas na técnica sem se afastar do verdadeiro espírito e escopo da invenção. As reivindicações anexas se destinam a ser interpretadas de modo a incluir todas as tais formas de realização e variações equivalentes.

Claims (12)

1. Composição oralmente biodisponível, caracterizada pelo fato de que compreende gelatina e constituintes adicionais,ditos constituintes compreendendo um lipossoma dinamicamente dimensionado, fragmento de lipossoma, e partícula de lipídeo, em que dito lipossoma, fragmento de lipossoma, e partícula de lipídeo são gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo fosfato de diexadecil, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, e colesterol,dita composição ainda compreendendo um agente terapêutico ou de diagnóstico e um agente de alvejamento derivado de biotina,em que o um agente de alvejamento derivado de biotina é biotina-X-DHPE (fosfato de 2,3-diacetoxipropil 2-(6-(5-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido) hexanamido)etila) ou biotina DHPE (fosfato de 2,3-diacetoxipropil 2-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro- 1H-tieno[3,4-d] imidazol-4-il) pentanamido)etil,em que dita gelatina ativamente de forma reversível interage com um ou mais dos ditos constituintes,em que de 5% a 50% dos ditos constituintes adicionais exibe um diâmetro médio igual a ou menos que 20 nanômetros.

2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que ditos componentes lipídicos são ainda selecionados do grupo consistindo de l,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 1,2-dimiristoil-sn- glicero-3-fosfocolina, oleato de colesterol, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2- distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3- fosfoetanolamina-N-(succinil), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-[fosfo-rac-(1- glicerol)] (sal de sódio), e 2,3-diacetoxipropil 2-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro- 1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido)etil fosfato de trietilamônio.

3. Composição de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que dito agente terapêutico é selecionado do grupo consistindo de insulina, interferon, eritropoietina, hormônio da paratireóide, calcitonina, serotonina, rituximab, trastuzumab, uricase, ativador de plasminogênio tecidual, timoglobina, uma vacina, heparina ou um análogo da heparina, anitrombina III, filgrastin, acetato de pramilitide, exanatide, epifibatide, antivenenos, IgG, IgM, HGH, tiroxina, GLP-1, Fatores de coagulação sangüínea VII e VIII, um anticorpo monoclonal, e glicolipídeos que atuam como agentes terapêuticos.

4. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que dito agente terapêutico é insulina.

5. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende um agente de alvejamento derivado de biotina adicional selecionado do grupo consistindo de N-hidroxissuccinimida (NHS) biotina (2,5-dioxopirrolidin-1-il 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4- d]imidazol-4-il) pentanoato); sulfo-NHS-biotina (2,5-dioxo- 3(trioxidaniltio)pirrolidin-1-ila de sódio 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H- tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanoato); biotina de cadeia longa de N- hidroxissuccinimida (2,5-dioxopirrolidin-1-il 6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro- 1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) hexanoato); biotina de cadeia longa de sulfo-N- hidroxissuccinimida (2,5-dioxo-3-(trioxidaniltio) pirrolidin-1-ila de sódio 6- (5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentamido) hexanoato); D-biotina (ácido 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4- d]imidazol-4-il) pentanóico); Biocitina (ácido 2-amino-6-(5-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentamido) hexanóico); sulfo-N- hidroxissuccinimida-S-S-biotina (2,5-dioxo-3-(trioxidaniltio) pirrolidin-1-ila 3-((2-(4-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)butilamino) etil)dissulfanil) propanoato); biotina-BMCC (4-((2,5-dioxi-2,5-diidro-1H- pirrol-1-il)metil)-N-(4-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol- 4-il) pentanamida)butil) cicloexanocarboxamida); biotina-HPDP (5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)-N-(6-(3-(piridin-2- ildissulfanil)propanamido) hexil)pentanamida); iodoacetil-LC-biotina (N-(6- (2-iodoacetamida)hexil)-5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol- 4-il)pentanamida); biotina-hidrazida (5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H- tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoidrazida); biotina-LC-hidrazida (N-(6- hidrazinil-6-oxoexil)-5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4- il)pentanamida); biocitina hidrazida (N-(5-amino-6-hidrazinil-6-oxoexil)-5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida); biotina cadaverina (N-(5-aminopentil)-5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4- d]imidazol-4-il)pentanamida); Carboxibiotina (ácido (3aS,6aR)-4-(4- carboxibutil)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-1-carboxílico);fotobiotina (N-(3-((3-(4-azido-2-nitrofenilamino)propil)(metil)amino)propil)- 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida);trifluoroacetato de p-aminobenzoil biotina (2,2,2-trifluoroacetato de ácido 2- (4-aminobenzamido)-6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol- 4-il)pentanamido)hexanóico); p-diazobenzoil biocitina (cloreto de 4-(1- carbóxi-5-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamido) pentilcarbamoil) benzenodiazônio); ácido 12- ((biotinil)amino)dodecanóico (ácido 12-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H- tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido) dodecanóico); éster succinimidílico de ácido 12-((biotinil)amino)dodecanóico (2,5-dioxopirrolidin-1-il 12-(5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamido)dodecanoato); S-biotinil homocisteína (ácido 4-mercapto-2-(5-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamido)butanoico); biocitin-X (ácido 2-amino-6-(6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4- il)pentanamido)hexamida)hexanóico; biocitin x-hidrazina (N-(5-amino-6- hidrazinil-6-oxoexil)-6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol- 4-il)pentanamido) hexamida); biotinaetilenodiamina (N-(2-aminoetil)-5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida); biotina- XL (ácido 6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido) hexanóico); biotina-X-etilenodiamina (N-(2-aminoetil)-6-(5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamido)hexanamida); biotina-XX hidrazida (N-(6-hidrazinil-6-oxoexil)-6-(5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamido)hexanamida); biotina-XX-SE (2,5-dioxopirrolidin-1-il 6-(6- (5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamido)hexanamido) hexanoato); biotina-XX, SSE (2,5-dioxo-1-(6-(6-(5-((3aS, 6aR) -2-oxohexa-hidro-1H-tieno [3,4-d] imidazol-4-il) pentanamido) hexanamido) hexanoiloxi) pirrolidina-3-sulfonato de sódio; biotina-X-cadaverina (2,2,2- trifluoroacetato de 5-(6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol- 4-il)pentanamido) hexanamido)pentan-1-amínio); α-(t-BOC)biocitina (ácido 2-(terc-butoxicarbonilamino)-6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4- d]imidazol-4-il) pentanamido)hexanóico); N-(biotinil)-N’-(iodoacetil) etilenodiamina (N-(2-(2-iodoacetamido)etil-5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H- tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida); DNP-X-biocitin-X-SE (2,5- dioxopirrolidin-1-il 2-(6-(6-(2,4-dinitrofenilamino)hexanamido)hexanamido)- 6-(6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamido)hexanamido) hexanoato); biotina-X-hidrazida (N-(6- hidrazinil-6-oxoexil)-5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4- il)pentanamida); cloridreto de norbiotinamina (cloreto de 4-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) butan-1-amínio); 3-(N- maleimidilpropionil) biocitina (ácido 2-(3-(2,5-dioxo-2,5-diidro-1H-pirrol-1- il)propanamida)-6-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4- il)pentanamido)hexanóico); ARP (N’-(2-(aminoóxi)acetil)-5-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoidrazida); biotina-1- sulfóxido (sulfóxido de ácido 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4- d]imidazol-4-il)pentanóico); éster biotina metílico (5-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato de metila); biotina- maleimida (6-(2,5-dioxi-2,5-diidro-1H-pirrol-1-il)-N’-(5-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoil) hexanoidrazida); biotina- poli(etilenoglicol) amina - aminometil polietileno (5-((3aS,6aR)-2- oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato); (+) sal de sódio de ácido biotina 4-amidobenzóico (4-(5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4- d]imidazol-4-il)pentanamido) benzoato de sódio); Biotina 2-N-acetilamino-2- de0xi-β-D-glicopiranosideo (((2R,5S)-3-acetamido-4,5-diidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il)metil 5-((3aS,6aR)- 2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato); Biotina α-D-N- acetilneuraminida (ácido (2S,5R)-5-acetamido-4-hidroxi-3,3,4,5,6-pentametil- 2-((5-((3aS,6aR)-2-oxohexahidro-1H-tieno [3,4-d]imidazol-4-il) pentanoiloxi) metil)-6-(1,2,3-trihidroxipropil) tetrahidro-2H-piran-2-carboxílico; Biotina-α- L-fucosídeo (((2R,5S)-3,4,5-triidróxi-2,3,4,5,6,6-hexametiltetraidro-2H-piran- 2-il)metil 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato); Biotina lacto-N-biosida; ((2R,5S)-3-acetamido-5-hidróxi-6- (hidroximetil)-2,3,4,6-tetrametil-4-((((2S,5R)-3,4,5-triidróxi-6-(hidroximetil)- 2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi)metil) tetraidro-2H-piran- 2-il)metil 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato ((2R,5S)-3-acetamido-5-hidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,6-tetrametil-4-((((2S,5R)-3,4,5-triidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi)metil) tetraidro-2H-piran-2-il)metil 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato; Biotina- Lewis-A trissacarídeo (2R,3R,5S)-5-((((2S,3S,5S)-3-acetamido-5-hidróxi-6- (hidroximetil)-2,4,6-trimetil-4-((((2S,5R)-3,4,5-triidróxi-6-(hidroximetil)- 2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi) metil)tetraidro-2H-piran- 2-il)metóxi)metil)-3,4-diidróxi-2,4,5,6,6-pentametiltetraidro-2H-piran-2-il 5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4- il)pentanoato; Biotina- Lewis-Y tetrassacarídeo; ((2S,5S)-3-acetamido-4-((((2R,5S)-5-((((2R,5S)-4,5- diidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,5,6-pentametil-3-((((2S,5S)-3,4,5-triidróxi- 2,3,4,5,6,6-hexametiltetraidro-2H-piran-2-il)metóxi)metil)tetraidro-2H-piran- 2-il)metóxi)metil)-3,4-diidróxi-2,3,4,5,6,6-hexametiltetraidro-2H-piran-2- il)metóxi)metil)-5-hidróxi-6-(hidroximetil)-2,3,4,5,6-pentametiltetraidro-2H- piran-2-il 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato); Biotina-α-D-manopiranosideo (((1R,4R)-2,3,4-triidróxi-5-(hidroximetil)-1,2,3,4,5-pentametilcicloexil)metil 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro- 1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato); biotina 6-O-fosfo-α-D- manopiranosídeo (((2R,5S)-3,4,5-triidróxi-2,3,4,5,6-pentametil-6-(fosfonooximetil) tetraidro-2H-piran-2-il)metil 5-((3aS,6aR)-2-oxoexaidro- 1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanoato; e 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3- fosfoetanolamina-N-(biotinil), derivados de iminobiotina dos compostos anteriormente mencionados, e misturas destes.

6. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que dito agente de alvejamento derivado de biotina é biotina DHPE ou biotina-X-DHPE e dito agente terapêutico é insulina.

7. Método para produzir uma composição oralmente biodisponível compreendendo gelatina e constituintes adicionais,ditos constituintes compreendendo um lipossoma dinamicamente dimensionado, fragmento de lipossoma, e uma partícula,em que dito lipossoma, fragmento de lipossoma, e partícula são gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo fosfato de diexadecil, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, e colesterol, dita composição ainda compreendendo um agente terapêutico ou de diagnóstico e um agente de alvejamento derivado de biotina,em que dito agente de alvejamento derivado de biotina é biotina-X-DHPE ou biotina DHPE,em que de 5% a 50% dos ditos constituintes adicionais exibe um diâmetro médio igual a ou menos que 20 nanômetros, em que dita gelatina ativamente de forma reversível interage com um ou mais de ditos constituintes,caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de:a. misturar ditos componentes lipídicos e dito agente de alvejamento em meio aquoso para formar uma primeira mistura através de um processo de microfluidização;b. adicionar dito agente terapêutico ou de diagnóstico em dita primeira mistura para formar uma segunda mistura;c. adicionar dita segunda mistura em gelatina para formar uma mistura associada de gelatina; ed. secar dita mistura associada de gelatina.

8. Método de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de quea. ditos componentes lipídicos são adicionalmente selecionados do grupo consistindo de 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3- fosfocolina, 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina, oleato de colesterol, 1,2- distearoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2- dimiristoil-sn-glicero-3-fosfato, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina-N-(succinil), 1,2-dipalmitoil- sn-glicero-3-[fosfo-rac-(1-glicerol)] (sal de sódio), e 2,3-diacetoxipropil 2-(5- ((3aS,6aR)-2-oxoexaidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il) pentanamido)etil fosfato de trietilamônio; eb. dito agente terapêutico é selecionado do grupo consistindo de insulina, interferon, eritropoietina, hormônio da paratireóide, calcitonina, serotonina, rituximab, trastuzumab, uricase, ativador de plasminogênio tecidual, timoglobina, uma vacina, heparina ou um análogo da heparina, anitrombina III, filgrastin, acetato de pramilitide, exanatide, epifibatide, antivenenos, IgG, IgM, HGH, tiroxina, GLP-1, Fatores de coagulação sangüínea VII e VIII, um anticorpo monoclonal, e glicolipídeos que atuam como agentes terapêuticos.

9. Método de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que dito agente terapêutico é insulina.

10. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que ditos componentes lipídicos são 1,2-distearoil- sn-glicero-3-fosfocolina, fosfato de diexadecila, e colesterol; e dito agente terapêutico é insulina.

11. Kit, caracterizado pelo fato de que compreende:a. uma composição oralmente biodisponível compreendendo gelatina e constituintes adicionais, ditos constituintes compreendendo um lipossoma dinamicamente dimensionado, fragmento de lipossoma, e partícula de lipídeo,em que dito lipossoma, fragmento de lipossoma, e partícula de lipídeo são gerados a partir de uma mistura de componentes lipídicos compreendendo fosfato de diexadecil, 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina, e colesterol,dita composição ainda compreendendo um agente terapêutico ou de diagnóstico e, opcionalmente, um agente de alvejamento,em que dito agente de alvejamento derivado de biotina é biotina-X-DHPE ou biotina DHPE,em que de 5% a 50% dos ditos constituintes adicionais exibe um diâmetro médio igual a ou menos que 20 nanômetros,em que dita gelatina ativamente de forma reversível interage com um ou mais de ditos constituintes; eb. material instrucional para a administração de dita composição a um ser humano.

12. Kit de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que ainda compreende insulina para a coadministração com dita composição em dito ser humano.