BRPI0911004B1 - Método de preparação de um artigo antimicrobiano e artigo antimicrobiano - Google Patents

Abstract

artigo antimicrobiano, líquido de tratamento e métodos de preparação dos mesmos. polieletrólitos aniônicos são usados como agentes de ligação para reduzir a solubilidade de polieletrólitos antimicrobianos catiônicos. a atração iônica entre os polieletrólitos aniônicos estabilizantes e os polieletrólitos catiônicos antimicrobianos resulta na formação de um complexo de polieletrólito (pec). um líquido de tratamento compreendendo um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado, ou emulsão estável de pec em um carreador aquoso são usados para tratar um substrato absorvente e, dessa forma, revestir, infiltrar ou infundir o pec sobre ou no substrato. os resultados da secagem subsequente em um substrato que é ligado ao substrato e é significativamente menos inclinado em relação a um dos polieletrólitos componentes a ser lavado, lixiviado, vazado, extraído ou migrado a partir do substrato durante o uso, ou quando exposto a fluidos ou solventes aquosos. o substrato modificado pode ser ainda tratado com óxido de etileno que melhora a eficácia antimicrobiana, sua biocompatibilidade, e sua utilidade em curativos, dispositivos médicos, tecidos, etc.

Description

CAMPO TÉCNICO

A presente invenção refere-se à preparação de materiais antimicrobianos, ao fixar polímeros antimicrobianos à superfície de um substrato, tais como um curativo, um dispositivo médico ou um tecido.

ESTADO DA TÉCNICA

Complexos de polieletrólitos (PEC) são conhecidos na literatura e têm sido usados para uma variedade de propósitos incluindo atividade antimicrobiana de superfície, atividade antiestática de superfície, liberação controlada de drogas, dispositivos de amortecimento, revestimentos de papel, e produtos de cuidados pessoais.

As seguintes patentes são citadas como anterioridades para este pedido. Patentes ou Pedidos de Patentes: US4.504.541 de Yasuda et al., emitida em 12 de março de 1985. US5.678.915 de Abe, emitida em 19 de agosto de 1997. US6.060.410 de Gillberg-LaForce et al. emitida em 9 de maio de 2000. Petição 870180047372, de 04/06/2018, pág. 15/19 US2004/0034156 de Song, publicado em 19 de fevereiro de 2004 . « US2005/0261419 de Song, publicado em 27 de julho de 2005. US6.936.746 de Effing et al. emitida em 30 de agosto de 2005.

US2006/0021150 de Hu et al. publicado em 2 de fevereiro de 2006. US2006/183822 de Nguyen-Kim et al. publicado em 10 17 de agosto de 2006. US App. 2006/0204533 de Hsu et al. publicado em 14 de setembro-de 2006. US 7.205.369 de Song, emitida em 17 de abril de 2007. 15 ' US 7.238.752 de Song, emitida em 3 de julho de . 2007. US App. 2007/0154513 de Atanasoska et al. publicado em 5 de julho de 2007.

US App. 2007/0243237 de Khaled et al. 20 publicado em 18 de outubro de 2007. US App. 2008/0005852 de Hu et al. publicado em 10 de janeiro de 2008. Patentes Estrangeiras ou Pedidos de Patentes: WIPO PCT 06/015080 de Nanotex, LLC. publicada em 9 de fevereiro de 2006. WIPO PCT 06/099514 de Biotegra, Inc. publicada em 21 de setembro de 2006, WIPO PCT 07/024972 de Quick-Med Technologies, Inc. e University of Florida Research Foundation, Inc. publicada em Io de março de 2007. WIPO PCT 07/078516 de-Boston Scientific Scimed, Inc. publicada em 12 de julho de 2007. WIPO PCT 08/027989 de Florida State University Research Foundation, Inc. publicada em 6 de março de 2008.

RESUMO DA INVENÇÃO APLICAÇÃO INDUSTRIAL

A presente -invenção— refere-se ao- use -de 1.5 polímeros estabilizantes aniônicos como agentes de ligação para reduzir a solubilidade de polímeros antimicrobianos catiônicos. A atração iônica entre os polímeros resulta na formação de um complexo de polieletrólito (PEC). Baixos níveis, menos do que 1%, do PEC resultante, podem ser usados para conferir 20 propriedades antimicrobianas aos substratos tais como curativos, dispositivos médicos, tecidos, vestimenta, produtos de cuidado pessoal -e outros materiais que podem se beneficiar de proteção antimicrobiana.

Esta invenção refere-se ao uso de 25 polieletrólitos aniônicos como agentes de ligação para reduzir a solubilidade de polieletrólitos antimicrobianos catiônicos.

A atração iônica entre os polieletrólitos estabilizantes aniônicos positivamente carregados e os polieletrólitos catiônicos antimicrobianos resulta na formação de um complexo de polieletrólito (PEC). Um liquido de tratamento compreendendo um colóide estável, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão do PEC em um carreador aquoso é usado para tratar um substrato absorvente, dessa forma revestindo, infiltrando ou infundido o PEC em ou sobre o substrato. A secagem subsequente resulta em um substrato modificado que é revestido/infundido com o PEC. O PEC é então ligado ao substrato e é significativamente menos propicio em relação aos polieletrólitos componentes, a ser lavado, lixiviado, vazado, extraido ou migrado do substrato durante o uso, ou quando exposto a fluidos ou solventes aquosos. O substrato modificado preparado desta maneira exibe propriedades antimicrobianas, é- biocompativel— e- pode -ser— utilizado—em~ curativos, dispositivos médicos, roupas, etc.

Uma realização dessa _invenção provê_ um_método para formar um substrato modificado que tem um complexo polieletrólito antimicrobiano ligado ao mesmo. Esses materiais são úteis como curativos, dispositivos médicos e roupas antimicrobianos, etc.

Outra realização dessa invenção provê um método de preparo de um substrato modificado que compreende o tratamento de um substrato com um liquido de tratamento compreendendo um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de um PEC em um meio aquoso, onde dito PEC é formado pela mistura de uma solução aquosa de um polieletrólito aniônico com um excesso estequiométrico de uma solução aquosa de um polieletrólito catiônico, seguido pela secagem do substrato tratado, onde a razão do polieletrólito catiônico em relação ao polieletrólito aniônico é suficiente para conferir propriedades antimicrobianas ao substrato e onde o PEC é ligado de forma não lixiviada ao substrato e é menos ’** 5 susceptível/ em relação aos polieletrólitos componentes, a ser lavado, lixiviado, vazado, extraido ou migrado do substrato durante o uso, ou quando exposto a fluidos ou solventes aquosos.

Em uma realização a quantidade total do polieletrólito catiônico no liquido de tratamento que compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de PEC em um carreador aquoso no material tratado final é controlado ou otimizada de forma que maximize a eficácia antimicrobiana do material, enquanto 15 ~minimiza—os efeitos ou propriedades indese j áveis Por_ exemplo, um conteúdo muito alto de polieletrólito catiônico poderia causar toxicidade devido a uma concentração mais alta de .polieletrólito catiônico_extraivel, ou afetar_de .forma adversa. as propriedades físicas ou estéticas do substrato modificado.

Uma realização preferencial dessa invenção é um substrato modificado que compreende um substrato, um polieletrólito catiônico, e um polieletrólito aniônico, onde o polieletrólito catiônico, estando presente em um excesso molar em relação ao polieletrólito aniônico, confere propriedades 25 antimicrobianas ao material, e onde a complexação entre os polieletrólitos aniônico e catiônico torna o polieletrólito catiônico menos susceptível em relação a outros polieletrólitos ‘ componentes, de ser lavado, lixiviado, vazado, extraído ou migrado do substrato durante o uso ou quanto exposto a fluidos 30 ou solventes aquosos.

Em uma realização preferencial dessa invenção, o polieletrólito catiônico é um polimero de amónio quaternário ou um copolimero de amónio quaternário. Em uma realização mais preferencial, o polieletrólito catiônico é poli(cloreto de t 5 dialildimetilamônio) , também conhecido como poliDADMAC.

Outra realização do método inventivo consiste em usar qualquer combinação de temperatura e tempo que resulte na secagem de dito material. Como utilizado aqui, seco significa, por exemplo, que um substrato exposto a uma solução 10 de polieletrólitos catiônicos antimicrobianos é, portanto, seco até um peso constante.

É um aspecto do atual método inventivo poder estabelecer uma conexão não-lixiviável de polieletrólitos catiônicos antimicrobianos ou complexos de polieletrólitos 15 antimicrobiano para uma variedade de substratos.

As realizações preferenciais da presente invenção- incluem- um- método -para- preparar o— complexo de po-li-eLe-tróli-t-O-, um_método_para preparar o substrato-_modifi.cado_ antimicrobiano e o substrato modificado antimicrobiano, que 20 compreende o todo ou parte de um curativo, curativo para queimadura, bandagem, almofada sanitária, tampão, curativo absorvente antimicrobiano intrinsecamente ou inerentemente, fralda, papel higiênico, um lenço sanitário, esponja, cotonete, vestimenta cirúrgica, vestimenta de isolamento, jaleco, luva, 25 escova cirúrgica, touca, cobertura de cabelos, máscara facial, proteção de maca, molde de revestimento, tala de revestimento, ,, acolchoamento, gaze, embalagem estéril, cobertura de colchão, leito, toalha, vestimenta, roupa intima, meia, protetor de sapato, adesivo sensivel a pressão, filtro de ar de automóvel, 30 filtro de ar de aeronave, filtro de ar de sistema HVAC, vestimenta de proteção militar, aparato para proteção contra risco biológico ou agente de guerra biológica, madeira, material de embalagem de alimentos, material de embalagem de carne, material de embalagem de peixe, vestuário para manipulação de alimentos, uma superficie para preparação de ■ alimentos, carpete, madeira, papel ou papel moeda.

Em uma realização preferencial da invenção, um substrato modificado por ligação de um PEC antimicrobiano ou polimero catiônico antimicrobiano é submetido ao tratamento com 10 óxido de etileno para melhorar o pó antimicrobiano dos substratos modificados.

DEFINIÇÕES

Como aqui utilizado, os termos abaixo têm os seguintes’ significadosT "Antimicrobiano" refere-se às propriedades bactericidas ou- bacteriostáticas de- um composto, composição,- artigo ou material que permite matar, destruir, inativar ou neutralizar um microorganismo tipo micróbio; ou para prevenir ou reduzir o crescimento, capacidade de sobrevivência ou propagação de um microorganismo. Como usado aqui, "micróbio" ou "microorganismo" refere-se a qualquer organismo ou combinação de organismos capaz de causar infecção, tal como uma bactéria, virus, protozoário, leveduras, fungos, bolor ou esporos formados por quaisquer um destes. "Substrato" refere-se a uma superficie ou meio no qual um polieletrólito antimicrobiano é ligado. "Polieletrólito catiônico" significa uma molécula de polimero com múltiplos sítios ou frações catiônicos que são covalentemente ligados ao polimero ou ligados à estrutura molecular do polimero antimicrobiaho por ligações i quimicas covalentes e são parte da estrutura molecular do polimero e que ditos sitios ou frações catiônicos estão localizados na cadeia principal do polimero ou nos grupos laterais do polimero. "Polieletrólito aniônico" significa uma 10 molécula de polimero com múltiplos sitios ou frações aniônicos que são covalentemente ligados ao polimero ou ligados à estrutura molecular do polimero antimicrobiano por ligações quimicas covalentes e são parte da estrutura molecular do polimero e que ditos sitios ou frações aniônicos estão 15 _ localizados na cadeia principal do polimero ou nos grupos laterais do polimero.

"Cadeia principal" e "grupos laterais" são termos geralmente usados para descrever estrutura molecular de polimero e será famiITãr aos especTalisTaíT na técnica. O termo "amónio quaternário" é uma nomenclatura química comum e seu significado será entendido por um especialista na técnica. Há dois tipos de compostos de amónio: ácidos e não-ácidos. Compostos de amónio ácidos são sais ácidos de aminas e são caracterizados por terem uma ligação N-H covalente onde a ligação N-H é reativa com e pode protonar bases. Não-ácido ou compostos de amónio "quaternário" não têm esta ligação N-H e não são reativos com bases da mesma forma. Compostos de amónio quaternário são geralmente caracterizados por terem quatro ligações covalentes, geralmente quatro 30 ligações de carbono-nitrogênio ligadas a um nitrogênio central carregado positivamente. Polimeros de amónio quaternário são também conhecidos como "poliquats" ou "poliquaternios" Compostos de amónio quaternário não-ácidos são preferenciais na prática dessa invenção.

Por "antimicrobiano inerentemente" ou "intrinsecamente antimicrobiano" entende-se uma propriedade de um material em que dito material poderia exibir uma atividade ou propriedades antimicrobianas na ausência de qualquer atividade ou propriedades antimicrobianas contribuídas por agentes, compostos ou aditivos que não são integral ao material, não quimicamente ligados ao material ou detectável a partir do material. Materiais "inerentemente antimicrobianos" ou "intrinsecamente antimicrobianos" exibem uma atividade antimicrobiana mesmo após a remoção ou depleção de tais ; agentes, , compostos^ ou, aditivos __a partir do material. "Inerentemente antimicrobiano" ou "intrinsecamente antimicrobiano" não significa que o material contenha agentes _ hão, lixiviáveis—combatividade, antimicrobiana. _

Por "ligação nãõ Tixivi áve 1"~ entendesse quê õs 20 polieletrólitos catiônicos antimicrobianos da presente invenção, uma vez ligados ao material ou substrato através do método da invenção atual, não se separam, migram para fora ou para longe do material ou substrato de maneira considerável, penetram em uma ferida ou, de outra forma, se tornam não- integral com o material ou substrato sob usos padrões. Por "não se separar de forma considerável" entende-se que não mais do que uma quantidade não substancial de polieletrólito € catiônico antimicrobiano se separa, por exemplo, menos do que um por cento, preferencialmente menos do que 0,1 por cento, 30 mais preferencialmente menos do que 0,01 por cento e mesmo mais preferencialmente menos do que 0,001 por cento da quantidade total do polieletrólito catiônico antimicrobiano. Alternativamente, "não se separa de forma considerável" significa que a concentração da solução de polieletrólito 5 catiônico “■ antimicrobiano resultante da separação de polieletrólito catiônico antimicrobiano ligado a partir do substrato tratado, em um liquido em contato com o material ou substrato, quando extraído por métodos descritos aqui, não excede um nivel predeterminado, por exemplo, menos do que 200ppm, preferencialmente menos do que lOOppm, e mais preferencialmente menos do que ou igual a 60ppm. Alternativamente, dependendo da aplicação, "não se separa de forma considerável" pode significar que nenhum efeito adverso na cicatrização de feridas ou a saúde de um tecido adjacente de 15 interesse devido à lixiviação do polieletrólito catiônico — antimicrobiano é- mensurável - •— Deve- ser -entendido que -uma definição particular pode depender da aplicação na qual a invenção é usada. Por exemplo, em aplicações têxteis, o desejo é“manter a-eficácia~por um período“prolongado de tempo de úso/ assim., somente uma perda-—muito gradual de ma-terial- antimicrobiàno sobre um.tempo estendido, poderia ser aceitável, independente da quantidade lixiviada em certo ponto no tempo. Para aplicações médicas, como curativos, a preocupação poderia ser para garantir a concentração localizada do material lixiviável que permanece abaixo de um nível específica em certo ponto no tempo, ou leva a nenhum efeito adverso pelo período de tempo de uso. Alternativamente, "ligação não-lixiviável" significa resistência aumentada ao PEC imobilizado contra ser t lavado, lixiviado, vazado, extraído ou migrado a partir do 30 substrato modificado durante o uso, ou quando exposto a fluidos ou solventes aquosos, em relação ao comportamento do polieletrólito catiônico isolado (ou seja, na ausência do componente aniônico usado para formar o PEC) .

Por "substancialmente não lixiviável" entende- se que, quando os polieletrólitos catiônicos antimicrobianos da presente invenção são ligados ao material ou substrato através do método da invenção atual, menos do que cinquenta por cento (50%) da quantidade total de polieletrólito catiônico antimicrobiano se separa de, ou migra para fora ou para longe do material ou substrato, penetra uma ferida ou, de outra forma, se torna não-integral ao material ou substrato sob condições padrões. Preferencialmente, substancialmente não lixiviável significa menos do que trinta por cento (30%) da quantidade total de polieletrólito antimicrobiano se separa ou migra para fora do substrato. Mais preferencialmente, menos do que quinze' por cento ,(15%)_. do polieletrólito catiônico antimicrobiano se' separa ou migra para fora do substrato. Ainda mais preferencialmente menos do que dez por cento (10%) se ; .separa _ ou_ migra para. fora_ do ^substrato._ _ Mais _ preferencialmente, menos do que cinco por cento (5%) do polieletrólito catiônico antimicrobiano se separa ou migra para fora do substrato.

Em relação à definição acima, deve ser notado que "ligação não-lixiviável" refere-se à ligação entre PEC e o substrato. Em certas realizações da presente invenção, uma ligação entre a estrutura do polimero de PEC e um ou mais tipo de grupo antimicrobiano podem ser intencionalmente feitos para serem mais suscetíveis à liberação e, portanto, mais lixiviáveis. Isto pode prover um beneficio onde isto é desejável para um percentual de grupos antimicrobianos para serem liberados seletivamente sob certas condições. No entanto, deve ser observado que a ligação típica entre a cadeia de polímero e os grupos antimicrobianos imaginados e, possibilitados aqui são ligações covalentes que não se rompem sob condições de exposição padrões. Por "biocompatível" entende-se que o material é compatível com células, tecidos, órgãos ou sistemas vivos e não possui risco de dano, toxicidade ou rejeição pelo sistema imune ou que o material não causa irritação, citotoxicidade ou i sensibilização excessiva. "Nenhum efeito no organismo" significa que o material não interfere com a cicatrização de feridas ou processos corporais normais e que não causa dano, toxicidade, irritação, citotoxicidade, sensibilização ou rejeição excessiva pelo sistema imune.

Por "grau de polimerização" entende-se que o • número de monômeros que estão juntos em uma única cadeia de polímerõ. ~ Por ^exempio; “em“umã realização' preferencial' dã invenção-, o grau médio de—polimerização—do—polieie-trólita catiônico está na. faixa de. cerca de 10 a 10.000. - Em .outra 20 realização, o grau médio de polimerização está na faixa de cerca de 100 a 5.000 e ainda em outra realização, o grau médio preferencial de polimerização está na faixa de 1.000 a 3.000.

Como usado aqui, o termo "polieletrólito" denota uma classe de compostos macromoleculares que, quando 25 dissolvidos em um solvente apropriado, como água, adquire espontaneamente ou pode ser feito para, adquirir um grande número de cargas elementares distribuídas junto com a cadeia macromolecular. Quando o polieletrólito adquire espontaneamente seu número máximo de cargas, é referenciado aqui como um "polieletrólito forte". Quando o polieletrólito está somente parcialmente carregado quando dissolvido em um solvente puro, é referenciado aqui como um "polieletrólito fraco". Ambos os polieletrólitos fraco e forte podem ter 5 cargas aniônicas e catiônicas. 0 termo tem a intenção' de englobar um único polieletrólito ou uma mistura de dois ou mais polieletrólitos do mesmo tipo (ou seja, polieletrólitos aniônicos ou catiônicos).

Deve ser observado que o termo "polieletrólito" 10 também tem a intenção de englobar um polieletrólito contendo ambos os grupos catiônico e aniônico, desde que um tipo de tais grupos esteja presente em uma quantidade suficiente para permitir a formação de um complexo de polieletrólito não estequiométrico como descrito aqui; ou seja, um tipo de grupo 15 - ionizável deve ser predominante. Dito polieletrólito pode_ser, por meio de ilustração, um bloco, enxerto ou copolimero aleatório. Por exemplo, a fração do número de grupos _ predominantes ionizáveis ^contendo ^uma, carga, oposta pode-, ser pelo menos 2. Além disso, ó termo tem a intenção de- incluir um 20 único polieletrólito contendo ambos os tipos de grupos ionizáveis, uma mistura de dois ou mais polieletrólitos contendo os mesmo tipo de grupos predominantes ionizáveis, e uma mistura de dois ou mais polieletrólitos no qual pelo menos um polieletrólito contém ambos os tipos de grupos ionizáveis, e 25 pelo menos um polieletrólito contém somente um tipo de grupos ionizáveis, desde que os grupos predominantes ionizáveis e um tipo de grupos ionizáveis, respectivamente, sejam o mesmo tipo (ou seja, aniônico ou catiônico). Embora estando no escopo da presente invenção, polieletrólitos contendo ambos os tipos de 30 grupos não são desejados, uma vez que podem formar complexos internos ou intra-moleculares e/ou interferem com a formação do complexo com o outro polieletrólito requerido pela presente invenção.

O termo "carga latente" é usado aqui em referência à carga que um polieletrólito exibe em uma solução quosa. No estado seco, os grupos ionizáveis são neutros, consequentemente, o polieletrólito por si só não tem uma carga. Por esta razão, os grupos ionizáveis do polieletrólito são referenciados como tendo uma "carga latente". Um polieletrólito particular, quando colocado em um meio aquoso, tipicamente, 10 contém um número de grupos ionizados contendo a mesma carga. Ou seja, tais grupos são ou positivo ou negativo. O termo "oposto" em referência a tal carga (a "carga latente" no estado seco ou não hidratado) , simplesmente significa que se um do primeiro ou segundo polieletrólito tem uma carga positiva em 15 solução Jpu_uM carga latente positiva) , o jputro deve ter_uma= carga que é oposta, ou seja, umá carga negativa (ou uma carga latente negativa). Grupos ionizados carregados positivamente e .carregados _negativamente. são_ referenciados—aqui—como -grupos. catiônicos e grupos aniônicos, respectivamente, ou variações 20 dos mesmos.

Os termos "material tratado", "material modificado", "substrato tratado" e "substrato modificado" são usados aqui de forma intercambiável e referem-se ao material substrato que foi exposto ao liquido de tratamento compreendendo um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de PEC, de acordo com os métodos descritos aqui. € "Estável", como usado para descrever um liquido de tratamento compreendendo um colóide, suspensão, dispersão, 30 solução, coacervado ou emulsão estável de PEC em um carreador aquoso, significa que a separação de fase, coagulação ou formação de sólidos, precipitados, flocos, aglomerados ou partículas de PEC significativos ou não reversíveis não ocorrem durante o armazenamento ou uso normal do liquido de tratamento. "Separação de fase" refere-se à separação macroscópica do liquido em camadas distintas e não se refere à separação de fase microscópica que é evidenciada por uma aparência turva ou leitosa do liquido de tratamento. Neste contexto, "não reversível" significa que o estado original desejável do liquido de tratamento não pode ser restabelecido por simples mistura ou agitação do liquido de tratamento.

O termo "meio aquoso" é usado aqui para significar qualquer meio liquido do qual a água é o principal componente. Assim, o termo inclui água per se e soluções aquosas _ e dispersões. Por exemplo, meio aquoso pode ser um escoamento de liquido corporal, como urina, menstruação e saliva.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

A invenção refere-se ao uso de- polieletrólitos aniônicos como agentes de ligação para reduzir a solubilidade de polieletrólitos antimicrobianos catiônicos após aplicação a um substrato. A atração iônica entre os polieletrólitos estabilizantes aniônicos carregados de forma oposta e os polieletrólitos catiônicos antimicrobianos resulta na formação de um complexo de polieletrólito (PEC). Ambos os polieletrólitos aniônico e catiônico estão inicialmente solúveis em água ou soluções aquosas, quando o polimero carregado de forma oposta não está presente. Quando as soluções dos dois tipos de polieletrólitos são misturadas, um PEC se forma espontaneamente. O PEC é solúvel em água ou soluções aquosas, ou' ainda a solubilidade está substancialmente reduzida em relação aos dois polieletrólitos individuais. Em uma realização preferencial, um liquido de tratamento ^compreendendo um colóide, suspensão, dispersão, solução, “ 5 coacervado ou emulsão estável do PEC em um carreador aquoso é usado para tratar um substrato absorvente, dessa forma revestindo, infiltrando ou infundido total ou parcialmente o PEC em ou sobre o substrato. A secagem subsequente resulta em um substrato modificado que é revestido/infundido com o PEC. O 10 PEC é então ligado ao substrato e é significativamente menos susceptível, em relação aos polieletrólitos componentes, a ser lavado, lixiviado, vazado, extraído ou migrado do substrato durante o uso, ou quando exposto a fluidos ou solventes aquosos-. Isto acontece primariamente porque a solubilidade do 15 PEC é menor do que a do componente polimero. O substrato - — - modi ficado — preparado -desta maneira - exibe- -propriedades antimicrobianas, é biocompativel e pode ser utilizado, em uma realização preferencial, como material de curativo.

A observação não esperada tem sido feita de que 20 o tratamento subseqüente do substrato modificado seco usando óxido de etileno (EtO) resulta em propriedades de desempenho melhoradas do substrato modificado.

É conhecido na técnica o uso de polieletrólitos catiônicos como agentes antimicrobianos. Uma classe de ditos 25 polieletrólitos é a dos polímeros de amónio quaternário (também conhecida como poliquats ou poliquaternios). Em geral, os polieletrólitos catiônicos são solúveis em água na ausência de * um agente de complexação como um polieletrólito . aniônico.

Assim, a aplicação direta de uma solução de polieletrólito 30 catiônico a um substrato, seguida pela secagem resultará em um substrato tratado em que o polieletrólito catiônico pode ser facilmente removido por exposição subsequente à água ou soluções aquosas. Isto é indesejado por duas razões. Primeiro, o agente ativo (polieletrólito catiônico) é depletado e assim, 5 a eficácia ficará reduzida. Segundo, o agente ativo pode migrar para um local em que não é desejável. Por exemplo, se o substrato tratado é usado como um curativo, o agente antimicrobiano pode migrar para a ferida e interferir com a cicatrização ou ter efeitos tóxicos ou de outra forma 10 indesejáveis. Dessa forma, é desejável ter um substrato tratado em que todo ou parte do agente ativo polieletrólito catiônico está ligado ao substrato tratado de forma permanente ou não lixiviável e onde o substrato tratado é biocompativel.

É um objetivo dessa invenção prover um método .15 para formar um substrato _ que tem um complexo . polieletrólito antimicrobiano ligado ao mesmo. Estes materiais são úteis como curativos, dispositivos médicos e roupas antimicrobianos, etc.

É conhecido na técnica que os polieletrólitos catiônicos sê ligam covalelrtêmente ã superfIciés para ~conferiF 20 atividade antimicrobiana não lixiviante; no entanto,' estes métodos geralmente requerem condições dificeis de processamento como uma atmosfera inerte, irradiação ou uso de solventes tóxicos ou inflamáveis. De forma alternativa, um excesso de material é aplicado e o material não ligado deve ser removido.

Isto é desperdício de matéria-prima e requer etapas extras de processamento, como lavagem/rinsagem, que pode romper a integridade física do substrato. A presente invenção requer ‘ combinação simples de soluções aquosas de dois polieletrólitos para formar um líquido de tratamento que compreende um colóide, 30 suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de um PEC em um carreador aquoso, aplicando o liquido de tratamento que compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de PEC em um carreador aquoso ao substrato e em seguida a secagem do substrato 5 tratado. Não há excesso de material aplicado, portanto a lavagem ou rinsagem não é necessária. Ainda, o processo é eficiente e econômico do ponto de vista de utilização de materiais. 0 processo é ainda simples, rápido e compatível com processos e equipamentos comuns usados nas indústrias têxteis e 10 de não-tecido.

É conhecido na técnica que o polieletrólito catiônico e aniônico em solução reagirá de forma espontânea para formar um PEC. Tem o objetivo de ser útil na prática dessa invenção; no entanto, os dois polieletrólitos devem ser 15 misturados de maneira^contro_lada. _ A^ forma _ física do EEC é afetada por vários fatores incluindo peso molecular de cada componente, concentração da solução de cada componente, . densidade— de- carga., de cada—. componente, _ ordenu e—. fração de "mistura, temperatura, pH, e força iônica da solução. Com. o 20 objetivo de ser "útil para tratar um substrato, o PEC deve permanecer uniformemente disperso no carreador aquoso como uma dispersão, suspensão ou emulsão estável. Se o processo não é feito corretamente, sólidos, precipitados, flocos, aglomerados ou partículas de PEC podem se formar e causar uma cobertura não 25 uniforme do substrato e pode ainda interferir na operação adequada do equipamento de processamento, ou em alguns casos o PEC pode até mesmo se separar do carreador como uma segunda fase líquida distinta, que pode depositar como um resíduo pegajoso insolúvel que pode ser muito difícil de ser removido a 30 partir do equipamento devido à baixa solubilidade do PEC. Ditas manifestações também irão alterar a concentração do agente ativo sendo aplicado ao substrato, que é indesejável. A falta de controle na formação do PEC pode ainda resultar em propriedades indesejáveis no produto final tais como uma rigidez excessiva ou uma distribuição desigual do material « 5 aplicado.

O efeito antimicrobiano de um polieletrólito catiônico é alcançado por interações eletrostáticas dos átomos carregados positivamente presentes na estrutura do polímero catiônico e o exterior de um microorganismo, como uma célula 10 bacteriana. Uma vez que o mesmo tipo de interação eletrostática é responsável pela formação do PEC, a fração de cargas de polieletrólito aniônicos em relação a cargas de polieletrólito aniônico deve ser controlada de forma muito cuidadosa. Colocado de outra forma, se todos os sítios 15 carregados positiyamente no . polieletrólito catiônico antimicrobiano forem complexadòs com sítios no polímero estabilizante aniônico, então não haverá sítios positivos .remanescentes, para—. funcionar como, agentes- antimicrobianos.

Portanto, a fração de sítios de polieletrólito catiônico em 20 relação a aniônico deve ser maior do que 1 para 1. Por outro lado, se a fração é muito alta, então o PEC tende a aumentar em solubilidade. Assim, é um aspecto dessa invenção que a fração de carga de policatiônica para carga polianiônica seja controlada de forma cuidadosa e que dita fração é maior do que 25 1 para 1 e preferencialmente maior do que 1,3 para 1, mas menos do que aproximadamente 2 para 1. Em um exemplo descrito abaixo (Tabela 1, Amostra BB) , o polieletrólito catiônico (PD) é usado em 0,30% em peso, e o polieletrólito aniônico (PAASS) é usado em 0,10% em peso. O peso da fórmula do monômero PD é 162 e o 30 peso da fórmula do PAASS é 94. Desta forma, a fração molar de sítios catiônicos para aniônicos neste aproximadamente (0,30/168)/(0,10/94) = 1,67.

É um aspecto dessa invenção que a quantidade geral de polieletrólito catiônico em um liquido de tratamento 5 que compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado, ou emulsão estável do PEC em um carreador aquoso e no material final tratado é controlada de forma que maximize a eficácia antimicrobiana do material; no entanto, um conteúdo muito alto de polieletrólito catiônico poderia causar propriedades indesejáveis, como toxicidade devido à uma concentração maior de polieletrólito catiônico extraível. Portanto, é um aspecto dessa invenção que a quantidade de polieletrólito catiônico no material final seja controlada de forma que forneça eficácia antimicrobiana alta, mas apresente 15 baixa toxicidade _ ou_ citotoxicidade. . Em uma realização preferencial dessa invenção, a concentração de polieletrólito catiônico no material final tratado é entre 0,01 e 1,0 w/o. Em _ uma ...realização .mais _preferencial,. ..a concentração. de polieletrólito catiônico no material final tratado é entre 0,10 20 e 0,50 w/o e em uma realização mais preferencial a concentração do polieletrólito catiônico no material final tratado é entre 0,2 e 0,35 w/o.

Em uma realização preferencial dessa invenção, o material final tratado é antimicrobiano e não suporta o 25 crescimento de microorganismos dentro do material e quando utilizado como um curativo, este é biocompatível (ou seja, "não tem efeito no organismo").

Exemplos de polieletrólitos úteis na prática dessa invenção incluem, de forma ilustrativa somente, , 30 poli(ácido etilenesulfônico), poli(ácido vinilsulfúrico), poli(ácido estirenosulfônico) , poli(ácido vinilfenilsulfúrico), poli(sal de vinil-N-alquilpiridinio), sal de poli(metileno)- N, N-dimetilpiperidinio, poli(sal de vinilbenziltrimetil amónio), poli(cloreto de dimetil dialil amónioj, poli(cloreto 5 de N,N,N',N'-tetrametil-N-P-xililenepropileno diamônio), copolimero quaternizado de N-vinilpirrolidona/dimetilaminoetil metacrilato, poli(brometo de N-etil-4-vinilpiridinio), poli(brometo de vinil-butilpiridinio), poli(brometo de metacriloxietil trimetil amónio), poli(brometo de butil 10 acrilato-metacril oxietil trimetil amónio), e poli(brometo de vinil-N-metilpiridinio), poli(ácido acrilico), poli(ácido metacrilico), poli(ácido-co-alqueno maléico), poli(éter alquil ácido co-vinil maléico), poli(ácido glutâmico), poli(vinilamina) , polietilenoimina, quitosana, quitosana 15 glicol, polilisina, carboximetilcelulose de sódio, carboximeti1-hidroxietiIcellulose -de -sódio,— sulfatos- dextranay ácido hialurônico, heparina, sulfato de condroitina, poli(ácido galacturônico) , e poli(ácido glutâmico), e copolimeros, “ combinações "ou misturas de ou'mais-destes'. - — - — - —

Em uma realização preferencial dessa invenção, o polieletrólito catiônico é um polimero de amónio quaternário ou um copolimero de amónio quaternário. Em uma realização mais preferencial, o polieletrólito catiônico é poli(cloreto de . dialildimetilamônio) (também conhecido como poliDADMAC). Em 25 uma realização preferencial, o polieletrólito aniônico é um ou mais selecionados do grupo que consiste de sais de poli (ácido acrilico) e seus derivados ou copolimeros e sulfonato de poliestireno ou seus 'derivados ou copolimeros. Em uma realização mais preferencial, o polieletrólito catiônico é um 30 poli(cloreto de dialildimetilamônio) (também conhecido como poliDADMAC) e o polieletrólito aniônico é um ou mais selecionados do grupo que consiste de sais de poli (ácido acrilico) e seus derivados ou copolimeros e sulfonato de poliestireno ou seus derivados ou copolimeros. Em uma realização mais preferencial, o polieletrólito catiônico é um poli(cloreto de dialildimetilamônio) (também conhecido como poliDADMAC) e o polieletrólito aniônico é um ou mais selecionados do grupo que consiste de sais de poli (ácido acrilico) e seus derivados ou copolimeros.

Quando poliDADMAC é usado como o polieletrólito catiônico na prática dessa invenção o peso molecular médio de mais do que 50.000 é preferencial. Um peso molecular médio de mais do que 100.000 é mais preferencial, e um peso molecular médio de mais do que 200.000 é o mais preferencial.

É um aspecto dessa invenção que os polieletrólitos antimicrobianos compreendem compostos poliméricos de fosfônio. Compostos poliméricos de fosfônio são conhecidos por terem propriedades antimicrobianas. Vários relatos na literatura.química referem-se à síntese de vários polímeros sírftéticos ãht~ímicrõ5ian"os. Por exemplo, a síntese de derivados poliméricos de fosfônio de estireno tem sido relatada por Endo, T., et al in "Novel Polycationic Biocides: Synthesis and Antibacterial Activity of Polymeric Phosphonium Salts" (Journal of Polymer Science Part A: Polymer Chemistry, 31, pp. 335-342, 1993). Polímeros quaternários de fosfônio demonstraram ter até 4 ordens de magnitude mais eficiente como agentes antimicrobianos do que os polímeros quaternários de nitrogênio correspondentes.

Quando o sal de sódio de poli(ácido acrílico) (abreviado como PAASS) é usado como o polieletrólito aniônico na prática dessa invenção, um peso molecular médio de pelo menos 20.000 é preferencial. Em um exemplo comparativo, PAASS com um peso molecular médio de 2.000 não resultou na formação de um PEC com propriedades úteis de solubilidade.

Quando. o sal de sódio .de poli (ácido 4 estirenosulfônico) (abreviado como PSSA) é usado como o polieletrólito aniônico na prática dessa invenção, um peso molecular médio de pelo menos 50.000 é preferencial. Um peso molecular médio de pelo menos 75.000 é mais preferencial.

Em uma realização preferencial dessa invenção, 10 o polieletrólito catiônico é poliDADMAC e o polieletrólito aniônico é PAASS e a concentração de poliDADMAC no liquido de tratamento que compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de PEC é pelo menos 0,10 w/o, mas menos do que 0,50 w/o e a concentração de PAASSS no 15 liquido de tratamento que compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável do PEC é pelo menos 0,025 w/o, mas menos do que 0,20 w/o. Em uma realização mais preferencial dessa invenção, o polieletrólito catiônico é poliDADMAC e o polieletrólito aniônico é PAASS e a concentração de poliDADMAC no liquido de" tratamento que compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de PEC é pelo menos 0,20 w/o, mas menos do que 0,30 w/o e a concentração de PAASSS no liquido de tratamento que compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, 25 coacervado ou emulsão estável do PEC é pelo menos 0,07 w/o, mas menos do que 0,14 w/o.

É um aspecto dessa invenção que uma solução de um polieletrólito catiônico é misturada com uma solução de um polieletrólito aniônico. A mistura pode ser conseguida pela 30 combinação de duas soluções seguida por mistura ou agitação.

As concentrações da solução do polieletrólito aniônico e do polieletrólito catiônico devem ser próximas da (ou seja, não mais do que aproximadamente 5 vezes desta) concentração final desejada no colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado • 5 ou emulsão estável do PEC. Em uma realização preferencial, a concentração de cada um dos polieletrólitos aniônico e catiônico é exatamente duas vezes a desejada para cada um no colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão final estável de PEC e volumes iguais de cada solução são 10 combinados para produzir colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão final estável de PEC.

É um aspecto dessa invenção que o pH do colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável do PEC pode ser mantido básico para garantir que o 15 polieletrólito aniônico seja mantido em sua forma totalmente ionizável. O pH pode ser ajustado pela adição de ácidos ou bases apropriados. O pH pode ser ajustado antes da mistura das . .soluções de polieletrólito catiônico e aniônico, ou pode ser ajustado após serem misturadas. Em uma realização preferencial 20 dessa invenção, o pH do colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de PEC é de 8 a 10. O liquido de tratamento que compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável de PEC em um carreador aquoso pode ser aplicado ao substrato usando os métodos 25 conhecidos na técnica, incluindo, entre outros, espalhamento, gotejamento, infusão, escovação ou laminação.

O liquido de tratamento em excesso pode ser ‘ removido por métodos apropriados, conhecidos na técnica como • laminação, acolchoamento, centrifugação, torção ou blotting e semelhantes, para controlar a quantidade de polieletrólito catiônico no material final tratado. Qualquer ação mecânica ou força pode ser aplicada; no entanto, é preferencial que tal ação ou força seja uniforme para prover uma distribuição homogênea da solução remanescente dentro do substrato carregado 5 uma vez que a solução é forçada para fora. Deve ser observado que a aplicação de uma força mecânica para remover o excesso de solução antes da secagem é distinta do procedimento de secagem onde a força mecânica remove ambas a solução antimicrobiana e a carreadora, enquanto que o procedimento de secagem remove 10 somente a solução carreadora, por evaporação, mas deixa o antimicrobiano no substrato carregado.

É um aspecto do método inventivo usar qualquer combinação de temperatura e tempo que resulte na secagem de dito material. Como usado aqui, seco significa, por exemplo, 15 que - um substrato exposto a uma solução de polieletrólitos catiônicos antimicrobianos é, portanto, seco até peso constante. Como usado aqui, seco até um peso constante significa_ secar. até_o ponto em que__a aplicação^ continuada do processo de secagem escolhido não resultará mais em uma perda 20 mensurável adicional considerável de peso devido a evaporação de água ou outro solvente. A obtenção de peso constante é uma ferramenta útil para medir a extensão da secagem; no entanto, a obtenção de peso constante não é o fator real que permite a ligação não lixiviável do antimicrobiano ao substrato. As 25 temperaturas e tempos de secagem particulares necessárias para alcançar a secagem dependem, entre outras coisas, do material substrato particular, a quantidade inicial da mistura no artigo, o peso e tamanho do artigo, a quantidade de fluxo de ar fornecido ao artigo durante a secagem e a umidade do ar ou 30 outro meio que entra em contato com o artigo. Qualquer combinação de aparato de secagem, método de secagem e temperatura e tempo de secagem que seque o substrato tratado é suficiente. Para os propósitos de ilustração, dependendo das características particulares de uma aplicação particular, a etapa de secagem pode ser realizada em um forno (por exemplo, 5 80°C por 2 horas) em uma fornalha de alto rendimento (por exemplo, 140°C por 30 segundos) , em um secador de roupa, em um dissecador, em uma câmara de vácuo, em um desumidificador, em um desidratador, ou um liofilizador (secagem por congelamento) . Calor infravermelho, calor radiante, microonda, e ar quente são 10 todos métodos de secagem apropriados para o substrato que foi exposto a uma solução de polieletrólitos catiônicos antimicrobianos. O limite superior de temperatura de secagem para uma aplicação particular geralmente será determinado pela temperatura de degradação do substrato particular ou 15 polieletrólito catiônico antimicrobiano sendo tratado.

É um aspecto do presente método inventivo que uma etapa de rinsagem pode ser opcionalmente executada no jnaterial seco. , É possível, que quando se _utilize uma realização preferencial do método da invenção atual que somente uma parte 20 dos polieletrólitos catiônicos antimicrobianos totais aplicados ao substrato de fato se tornará ligada de forma não lixiviável ao substrato, ou é considerada como sendo substancialmente não lixiviada do substrato. Em tais exemplos, o material inerentemente antimicrobiano pode ainda conter alguns 25 polieletrólitos catiônicos antimicrobianos lixiviáveis. A decisão de rinsar ou não o material tratado dependerá se uma propriedade antimicrobiana de lixiviação, em adição à propriedade antimicrobiana inerentemente não lixiviada, é ’ desejada no produto final. Para algumas aplicações (por 30 exemplo, aplicações têxteis), pode ser desejável reter alguma ou toda a parte lixiviável dos polieletrólitos catiônicos antimicrobianos no produto final, em combinação com a parte não lixiviável porque a parte lixiviável pode contribuir para a atividade antimicrobiana geral, pelo menos inicialmente, antes que a parte lixiviável se torne depletáda. Portanto, por 5 exemplo, onde uma aplicação particular requer a retenção da parte lixiviável, é apropriado utilizar o material inerentemente antimicrobiano após ter sido vigorosamente seco (sem rinsagem). Para outras aplicações, pode ser desejável remover a parte totalmente lixiviável e reter somente a parte 10 não lixiviável. Por exemplo, onde uma aplicação particular requer a remoção da parte lixiviável, o material tratado vigorosamente seco pode ser repetidamente rinsado no fluido para remover a parte lixiviável dos polieletrólitos catiônicos antimicrobianos que não se ligam ao substrato durante a etapa 15 de secagem vigorosa. Em uma realização exemplar, a etapa de ■ ■ rinsagem—pode ser considerada completa quando as—leituras de condutividade do rinsado são iguais à leitura do fluido de rinsagem de entrada indicando que o rinsado está livre de _ant imicrobianos. “' Em “ou t ra r ea 1 i zação _exemp 1 ar7 a ’r insagem ~ pode1 20 se r acompanhada pelo. _u so de_.uma_.solução de sal, seguida . pela rinsagem em água potável para remover ambos o antimicrobiano lixiviável e o sal para obter o menor nivel possível de antimicrobiano lixiviável. É um aspecto dessa invenção que a etapa de secagem seja repetida após a rinsagem.

É um aspecto dessa invenção que o material substrato seco modificado ("tratado") dessa invenção pode ser esterilizado por métodos conhecidos na técnica, incluindo esterilização a vapor (autoclavação), irradiação gama, e por esterilização por óxido de etileno (EtO). A observação não 30 esperada foi feita de que a esterilização dos substratos tratados usando EtO resulta em eficácia antimicrobiana aumentada dos substratos tratados quando testados por métodos descritos aqui. Além disso, a eficácia antimicrobiana aumentada do substrato tratado e a resistência aumentada para o PEC imobilizado contra ser lavado, lixiviado, vazado, extraído ou migrado para fora do substrato modificado durante o uso ou quando exposto a fluidos aquosos ou solventes são obtidos após submissão do substrato tratado por esterilização de EtO. Portanto, é um aspecto dessa invenção que o substrato tratado é exposto a EtO para melhorar as propriedades antimicrobianas do substrato tratado. Termos como "tratamento por EtO", "esterilizado por EtO", "exposto a EtO" e caracterizações semelhantes podem ser usados de forma intercambiáveis na descrição da invenção. Métodos para expor o substrato tratado a EtO serão familiares aos especialistas na técnica. Óxido de etileno é tóxico e inflamável e precauções devem ser tomadas. Métodos- e— procedimentos— padronizados - são— usados -para- esterilização por EtO de dispositivos médicos e de fato são requeridos por regulamentações governamentais e qualquer um destes métodos 'e procedimentos’podé”ser apropriado~para uso na~ prática—dessa—in-venção Através—de_ exemp.lo_, somente, o_s. _.mét o_do s descritos nas seguintes citações podem ser úteis: Requisitos para validação e controle de rotina — Esterilização por Radiação, AAMI/ISO 11137; Esterilização de produtos para saúde — Esterilização por Radiação — Seleção de uma dose de esterilização para lotes únicos de produção, AAMI/ISO TIR No. 15844; Dispositivos médicos— Validação e controles de rotina de esterilização de óxido de etileno, AAMI/ISO 11135; Esterilização de dispositivos médicos - Validação e controle de rotina de esterilização por óxido de etileno, EN550 (Padrão Europeu) ; Avaliação biológica de dispositivos médicos— Parte 7: Resíduos de esterilização por óxido de etileno, AAMI/ISO 10993- 7; Esterilização de dispositivos médicos — Métodos microbiológicos, Parte 1: Estimativa de população dè microorganismos em produtos, AAMI/ISO 11737-1; Esterilização de dispositivos médicos — Métodos microbiológicos, Parte 2: Testes de esterilidade realizados na validação de um processo de esterilização, AAMI/ISO 11737-2; Avaliação Biológica de Dispositivos Médicos — Parte 7: Esterilização por Óxido de Etileno; Resíduos de ETO, ANSI/AAMI/ISO 10993-7. A prática padrão de esterilização por EtO envolve desgaseificação de materiais esterilizados pare remover o EtO residual; portanto, 10 acredita-se que o EtO residual não é responsável pela eficácia antimicrobiana melhorada observada na prática dessa invenção. O mecanismo atual para a melhora das propriedades dos materiais da invenção atual por esterilização de EtO é desconhecido até o momento. Enquanto os Requerentes não desejam se comprometer a 15 qualquer teoria de invenção, parece que a melhora pode ser devido'a alguns tipos- de rearranjo do-PEC ou—redistribuição-do- PEC na superficie do substrato causado pela exposição ao EtO. Uma vez que o processo de esterilização de EtO envolve ’ ' múltiplos ciclos de~ calorr~ pressão; umidade, e—vácuo,— é 20 p-laus-i-vel—que—um fator ou___uma combinação destes fatores seja responsável para a melhora observada das propriedades ao invés da exposição atual do material ao EtO.

É um aspecto do método inventivo atual que pode estabelecer uma ligação não-lixiviável de polieletrólitos 25 catiônicos antimicrobianos ou complexos de polieletrólitos antimicrobiano para uma variedade de substratos incluindo substratos naturais, sintéticos e combinados e têxteis de tecido ou não-tecido. Materiais substrato sintético e natural passiveis do método inventivo atual incluem, entre outros, 30 celulose, derivados de celulose, papel, madeira, pasta de madeira, celulose de origem microbiana, celulose microcristalina, hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose, metilcelulose, raiom, algodão, pasta de madeira, linho, polissacarideo, proteina, lã, colágeno, gelatina, quitina, quitosana, alginato, amido, seda, poliolefina, poliamida, ‘ 5 fluoropolimero, cloreto de polivinila (PVC), vinil, borracha, polilactida, poliglicolida, acrilico, polistireno, polietileno, polipropileno, náilon, poliéster, poliuretano, e silicone, todos os quais podem ser verificados por experimentação de rotina baseado na presente revelação.

É um aspecto dessa invenção que o processo de produzir o substrato tratado com PEC não requer o uso de uma atmosfera inerte, vácuo, alta pressão, irradiação, solventes orgânicos, catalisadores, temperaturas excessivamente alta e/ou reagentes voláteis, caros, inflamáveis ou tóxicos para produzir _£5 o material antimicrobiano. dsto vai de encontro a muitos métodos anteriores que requerem tais medidas.

É um aspecto do método inventivo atual que a atividade antimicrobiana exibida pelos materiais fabricados pelei método é muito robust a~ Por “outro 1 adõ, ai guitars formulações concorrentes, como as comercializadas por AEGIS Enviroments, demonstraram ser inativas após a exposição ao sangue (vide EP 0136900) ou soro bovino fetal 10%. Em uma realização exemplar do método inventivo atual, a atividade antimicrobiana de moléculas poliméricas ligadas de forma não 25 lixiviável do composto de amónio quaternário cloreto de dialildimetilamônio permanece robusto na presença de soro bovino fetal 10%, como descrito nos exemplos abaixo. Este ‘ aspecto do método inventivo atual permitirá que a atividade antimicrobiana persista na presença de fluidos corporais, que é uma propriedade útil e de grande valia para muitas aplicações na indústria de saúde.

É um aspecto dessa invenção que polieletrólitos «catiônicos antimicrobianos de silano, silicone ou siloxano não 5 são aplicados ao substrato ou incorporados ao material antimicrobiano, uma vez que os compostos de silano, silicone ou siloxano geralmente conferirão caráter repulsivo à água a um substrato de composição, reduzindo assim a absorção do material.

É um aspecto dessa invenção que o material substrato tratado ou modificado apresentará uma concentração baixa de polieletrólito catiônico extraivel (ou lixiviável) quando testado como descrito aqui. Em uma realização preferencial dessa invenção, um extrato do material substrato tratado ou modificado preparado de acordo-” com o método ISO padrão 10993-12 contém menos do que 100 ppm de polieletrólito catiônico. Emuma realização mais preferencial dessa invenção, um extrato do material substrato tratado ou modificado preparado de acordo com cr ^método padrão ISO 10993-12 contém menos do que 60 ppm de polieletrólito catiônico e em uma realização mais preferencial, um extrato do material substrato tratado ou modificado preparado de acordo com o método padrão ISO 10993-12 contém menos do que 50 ppm de polieletrólito catiônico.

Além disso, em uma realização preferencial da invenção o material preparado pelo método dessa invenção será biocompativel e exibe citotoxicidade zero ou baixa quando testado pelos métodos padrões descritos aqui.

É um aspecto dessa invenção que os materiais antimicrobianos preparados pelo método dessa invenção terão atividade antimicrobiana significativa contra organismos bacterianos. Preferencialmente, a composição antimicrobiana 5 da invenção atual é efetiva contra bactérias Gram+. Mais preferencialmente, o antimicrobiano da composição atual é efetivo contra bactérias Gram+ e bactérias Gram-. Mais preferencialmente, o antimicrobiano da composição atual é efetivo contra bactérias Gram+ e bactérias Gram- e ainda 10 organismos tipo fungos e/ou vírus.

A eficácia antimicrobiana pode ser medida por métodos apropriados que são familiares aos especialistas na técnica. Em particular, uma versão modificada do Método de Teste 100 da American Association of Textile Chemists and 15 Colorists (AATCC) - ("Antibacterial Finishes on Textiles: Assessment of, urn teste projetado para testar acabamentos antibacterianos de materiais têxteis é útil e é descrito nos _seguintes exemplos. __Um especialista na técnica reconhecerá que uma redução significativa no número de bactérias viáveis deve 20 ser observada quando o material antimicrobiano é testado de acordo com este método, que utiliza um material não antimicrobiano (não tratado) com propriedades físicas semelhantes como um "controle negativo". Preferencialmente, a redução nos níveis bacterianos de ambas as espécies comuns de 25 Staph, aureus e E. coli (testadas separadamente vs. controle negativo: ou seja, substrato não tratado) deve ser um fator de 1000 (uma "morte, de 3 logs" ou redução em 99,9%). Mais preferencialmente, a redução nos níveis bacterianos de ambas as espécies comuns de Staph. aureus e E. coli (testadas 30 separadamente vs. controle negativo: ou seja, substrato não tratado) deve ser um fator de 10.000 (uma "morte de 4 logs" ou redução em 99,99%). Ainda mais preferencialmente, a redução nos niveis bacterianos de ambas as espécies comuns de Staph, aureus e E. coli (testadas separadamente vs. controle negativo: ou seja, substrato não tratado) deve ser um fator de 100.000 (uma 5 ’ "morte de 5 logs" ou redução em 99, 999%) . Mais preferencialmente, a redução nos niveis bacterianos de ambas as espécies comuns de Staph. aureus e E. coli (testadas separadamente vs. controle negativo: ou seja, substrato não tratado) deve ser um fator de 1.000.000 (uma "morte de 6 logs" ou redução em 99, 9999%). Deve ser observado que as limitações do método do teste podem resultar em reduções numéricas menores de niveis bacterianos se o número de bactérias viáveis no controle negativo for baixo. Por exemplo, se o controle negativo contém somente 500 bactérias viáveis (unidades 15 formadoras de colônia) , um fator de redução de 500 (uma morte de--2 - 7 1ogs)—é- o r e s u 1tad o máx imo _p os s í ve 1; .no e n t a n t o ,_n este caso o resultado representa uma redução de 100% na população bacteriana e é perfeitamente aceitável. Geralmente, quando o método padrão- é seguido usando—artigos de ■ teste -têxteis 20 _abs ar-v_ent.es.,o crescimento das bactérias mais c omumente encontradas no controle negativo será na faixa de 100.000 a 10.000.000 unidades formadoras de colônia.

A solução do polieletrólito catiônico e a solução do polieletrólito aniônico são misturadas sob condições 25 adaptadas para resultar na formação de um complexo de polieletrólito. Tais condições incluem tipicamente a mistura em temperatura ambiente embora não seja necessário. Tais condições incluem ainda a mistura intensa, como sonicação, ' misturador de alto cisalhamento e semelhantes. As quantidades 30 das duas soluções a serem misturadas dependem da concentração do polieletrólito em cada solução e a fração molar desejada de polieletrólito catiônico para polieletrólito aniônico.

O colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável do PEC em um carreador aquoso que 5 resulte da etapa de mistura pode ser usado para ’revestir o substrato. Ou seja, não é necessário isolar o complexo de polieletrólito em uma condição isenta de solvente e dissolvê-lo novamente. A superficie do substrato está em contato com o colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão 10 estável do PEC em um carreador aquoso sob condições suficientes para resultar em um revestimento da superficie do substrato com o complexo de polieletrólito. Novamente, tais condições envolvem tipicamente temperatura ambiente e um grau de força de espalhamento suficiente para espalhar a solução do complexo de 15 . polieletrólito não . estequiométrico pela superficie do substrato. Quando o substrato é um filme, o grau de- requisito da força de espalhamento pode ser alcançado, por exemplo, ao - espalhar- a solução do complexo de polieletrólito nas superficies do filme por meio de uma lâmina médica ou uma haste 20 de Meyer. A imersão do filme em um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável do PEC em um carreador aquoso com agitação ultrassónica também pode ser empregada. Quando o substrato é uma trama fibrosa, a força de espalhamento suficiente pode ser alcançada por agitação do 25 substrato em uma solução de complexo de polieletrólito não estequiométrico, forçando a solução ou uma espuma da mesma através da trama fibrosa por meio de sucção ou pressão, e passando a trama saturada com uma solução de . complexo de polieletrólito não estequiométrico através de uma pressão 30 formada por um par de rolos de compressão.

Para o tratamento de têxteis tecido e não- tecido de acordo com a prática dessa invenção, a taxa de melhora da umidade (peso de vapor) de um tecido seco exposto ao liquido de tratamento seguido pela expulsão do liquido em ’ 5 excesso usando métodos descritos aqui irão geralmente ser de aproximadamente 75% e 125%; embora valores maiores e menores podem ainda ser úteis. Em outras palavras, uma libra de um substrato têxtil inicialmente seco geralmente pesará entre 1,75 e 2,25 libras após o tratamento com o liquido de tratamento que 10 compreende um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável do PEC, antes de ser seco. Deve ser entendido pelos especialistas na técnica que usando uma taxa de absorção de umidade maior/menor resultará em um conteúdo maior/menor de antimicrobiano adicionado ao substrato 15 tratado e que é possivel compensar ao usar um liquido de — ■ ■ - tratamento- com- uma • concentração., maior/menor ,♦ de PEC, para alcançar um nivel desejado de antimicrobiano no substrato tratado. Assim, os niveis e concentrações dos polimeros ■' citados nos exemplos ■ e—real-izações descritos aqui podem_ser 20 ajustados por sua vez. Por exemplo, pode ser desejável utilizar uma taxa de absorção de umidade para uma aplicação particular, uma vez que permitirá uma secagem mais econômica do substrato tratado. Em tal caso, um liquido de tratamento concentrado poderia ser desejável.

É um aspecto dessa invenção que aditivos como inibidores de UV, auxiliares de processamento, amaciantes, agentes antiestáticos, colorantes, corantes, indicadores, drogas, óleos, lubrificantes, microesferas, indicadores visuais temporários, nutrientes, fatores de crescimento, vitaminas, 30 emolientes, hidratantes, aromas, perfumes, emulsificantes e semelhantes podem ser adicionados ao substrato em combinação com o PEC, ou ser incorporados ao líquido de tratamento um colóide, suspensão, dispersão, solução, coacervado ou emulsão estável do PEC em um carreador aquoso.

À luz da revelação geral fornecida acima, com relação à maneira de praticar esse método inventivo, os especialistas na técnica apreciarão que a revelação permite a prática do método inventivo como definido nas reivindicações anexadas. No entanto, os seguintes detalhes experimentais são fornecidos para garantir uma descrição escrita completa dessa 10 invenção, incluindo o melhor modo do mesmo. Entretanto, será apreciado que o escopo da invenção não deve ser interpretado em termos dos exemplos específicos fornecidos. Ao invés, o escopo dessa invenção deve ser apreendido com relação às reivindicações anexadas ao mesmo, à luz da descrição completa 15 deste método inventivo ■constituído pela totalidade desta revelação. Deve ser entendido que a presente invenção pode ter várias outras realizações. Além disso, enquanto a forma da invenção aqui mostrada—e descrita—constitui—uma realização 20 preferencial da invenção, não tem a intenção de ilustrar todas as possíveis formas da mesma. Deve ser entendido ainda que as palavras usadas aqui são palavras de descrição em vez de restrição e que várias alterações podem ser feitas sem se afastar do espírito e escopo da invenção revelada. O escopo da 25 invenção não deve ser limitado unicamente aos exemplos fornecidos.

EXEMPLOS

Materiais Os seguintes materiais foram usados na preparação das amostras descritas nos seguintes Exemplos. Substratos: "240 gsm": Uma agulha puncionou o composto não- 5 tecido que consiste de uma camada de contato com a ferida a base de poliolefina e um centro absorvente a base de viscose, contendo a seguinte composição: fibras de viscose (raiom) a base de EEC ou polpa de TEC [CAS no 68442-85-3; aprox. : 90%] e fibras bi-componentes de poliolefina [CAS no 9003-07-0(PP) / 10 9002-88-4 (PE); aprox.:10%], com uma densidade aproximada -de 240 gramas por metro quadrado (gsm), e uma espessura de 1,7 a 2,3 mm. "115 gsm": Um composto não tecido de ligação térmica, puncionado—por uma—agulha, _que consiste de__uma camada 15 de contato com a ferida a base de poliolefina e um centro absorvente a base de viscose, contendo a seguinte composição: 43%_de fibras'de viscose (raiom) (CAS- No. 68442-85—3) e 57%-de polipropi 1 eno (CAS No. 9003-07-0) ,com uma espessura de 0,95 a 1,25 mm, e uma densidade de aproximadamente 115 gramas por 20 metro quadrado (gsm). "CG": Gaze de algodão Dutex® (produzida por Dumex Medicai, Canada, Inc.).

Polímeros: "PD": Poli(cloreto de dialildimetilamônio), 25 também abreviado como "polyDADMAC", fornecido por MV Products, Inc. (St. Louis, MO), SNF, Inc., Axchem # AF-6545, 40t% em peso de solução aquosa, "alta viscosidade", MW de aproximadamente 250.0000 g/mol. "PAAl": Poli(ácido acrilico)-sal sódico, fornecido por Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI) , catálogo # 41, 604-5, CAS# [9003-04-7], 40% em peso de solução aquosá, MW ii de aproximadamente 30.000. '$5 "PAA2": Poli(ácido acrilico)-sal sódico, fornecido por Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI) , catálogo # 420344, CAS# [9003-04-7], pó, MW de aproximadamente 2.100. "PAA3": Poli(ácido acrilico)-sal sódico, fornecido por MV Products, Inc. (St. Louis, MO), SNF "Flosperse 10 FS 10,000", CAS# [9003-04-7], 29% em peso de solução aquosa, MW de aproximadamente 50.000. "PSSA": Poli(ácido 4-estirenosulfônico), 18% em peso dé solução aquosa, fornecido por Aldrich Chemical ' (Milwaukee, WI), catálogo # 561223, CAS# [28210-41-5], MW de 15 aproximadamente 70.000. .7.... - - Nota: Nos seguintes exemplos, o pH das soluções foi ajustado usando ou hidróxido de potássio 3M (KOH) ou ácido clorídrico 3M (HC1) e o pH foi determinado usando um phmetro modelo de Corning 320 calibrado com soluções de tampão 20 apropriadas.

Exemplo 1. Tratamento de substratos com polieletrólito catiônico (exemplo comparativo).

Este exemplo mostra a preparação de curativos usando polimero catiônico antimicrobiano e sem polimero 25 estabilizante aniônico. Cem gramas de uma solução de 0,3% de PD foram preparadas e o pH foi ajustado para 9,5. Uma amostra de 240gsm de substrato pesando 18,91 gramas foi imersa na solução e em seguida passada por uma prensa de rolo manual para expelir o liquido em excesso. 0 peso úmido do material foi 45,51 (absorção de liquido de 141%). O material foi colocado horizontalmente e seco em um forno a 80°C por aproximadamente 2 horas, e designado como Amostra XI. Medidas colorimétricas ? v 5"’ indicaram uma concentração de polimero catiônico média de 130 ppm para um extrato deste material que foi preparado e testado usando métodos descritos aqui. Usando os métodos de testagem de citotixicidade descritos aqui, esta amostra demonstrou ter propriedades citototóxicas (vide Tabela 7, abaixo).

Exemplo 2. Tratamento de substratos com PEC de poliDADMAC e sal sódico de poli(ácido acrílico).

O seguinte é um exemplo tipico do tratamento de substrato não-tecido usando um PEC. Uma mistura de 15g PD (40%) e 585g de água foi agitada até totalmente misturada. "Separadamente^ üma mistura dé’ 5g PAA1 ('4 0%') é~ 195g dé água foi’ agitada até totalmente misturada. O pH desta segunda mistura foi ajustado para 10,3 usando KOH 3M. Estas soluções foram misturadas em seguida juntas com agitação rápida para produzir ünTTÍquiciõ-BFranco-lettoso com um pH-de- 9, 0, ~uma—concentrarçãor-der PD de 0,30% e uma concentração de PAA de 0,13%. Uma amostra de material substrato de 240gsm pesando 184,7g foi imerso neste liquido por vários minutos e em seguido passado por uma prensa de rolo manual para expelir o excesso de liquido. O peso úmido do substrato após a prensagem foi de 489,lg (absorção de liquido de 165%) . Esta amostra foi então seca em um forno a 80°C e designada como Amostra BB. Outras amostras foram . preparadas usando o mesmo processo com ligeiras variações. Em v % alguns casos, um rolo manual foi usado e, em outros, uma prensa de rolo motorizada foi utilizada. O substrato e o percentual 30- de liquido absorvido também foram variados. Polímeros catiônico e aniônico foram variados na composição, fração e concentração. Em todos os casos, o pH da solução final de tratamento foi ajustado para estar entre 9,0 e 10,0. Em alguns casos o pH foi ajustado antes das soluções serem combinadas,•e ♦ em outros casos, o pH foi ajustado após as soluções terem sido combinadas. Em geral, é preferivel ajustar cada solução separadamente, antes da combinação. Os volumes relativos das duas soluções também variaram, mas em geral é preferível misturar volumes iguais das soluções, com cada um estando duas vezes na concentração final desejada de ingredientes. Um resumo dos vários exemplos e condições de ’processamento é dado na Tabela 1 abaixo, junto com códigos de amostras e a concentração média de polieletrólito catiônico em um extrato da amostra determinado pelos métodos descritos aqui: Tabela 1: Exemplos e Condições de Processamento

Foi observado que usando um PAA para fração de peso PD maior do que cerca de 0,5 (ou seja, 0,15% de PAA e 0,30% de PD, como na amostra EE) gerou menos do que os resultados desejáveis, uma vez que a solução de tratamento para v5 a amostra EE deixou um residue pegajoso nos recipientes de mistura e nas prensas de rolo - indicando que alguma separação de fase ocorreu. O resíduo insolúvel foi difícil de ser removido, mesmo por escovação. Além disso, o substrato tratado com esta composição demonstrou ser firme, como um toque 10 "irregular" após a secagem. Tais propriedades são indesejáveis em um curativo; no entanto, poderiam ser benéficos em outras aplicações. A fração na qual estes efeitos indesejáveis ocorrem depende de alguma forma da composição exata dos componentes poliméricos individuais.1 Por exemplo, a amostra MW 15 (usando PSSA ao invés de. PAASS) foi também preparada usando uma - fração- aniônica —para—catiônica— de -0, 5, —mas ...nenhum . efeito indesejável foi observado. Por outro lado, efeitos indesejáveis semelhantes foram observados em uma fração de PAASS/PD de somente 0,43' (Amostra *X5) quando-o MW -PAASS-maior- foi-usado.- A 20 fração d.e__piolímero aniônico para catiônico na qual os efeitos indesejáveis ocorreram é dependente da identidade química do polímero, e ainda seus pesos moleculares. Enquanto é conveniente caracterizar estas frações em termos de peso, eles poderiam ainda ser caracterizados por seu equilíbrio de carga 25 eletrostática. É um aspecto dessa invenção que a fração dos polímeros aniônicos para os catiônicos seja tão alta quanto possível (para promover uma boa ligação do antimicrobiano catiônico) , mas abaixo da qual causa precipitação do PEC, menor eficácia antimicrobiana, ou que cause efeitos indesejáveis. Os conteúdos em nitrogênio (N) das várias amostras descritas acima foram determinados por métodos descritos aqui (N-Kjeldahl). A quantidade de PD nas amostras tratadas foi calculada com base no % de aspiração de liquido e 5 a concentração de PD na solução de tratamento (Calc. %PD) . A quantidade de nitrogênio esperada nas amostras tratadas (Calc. ppm N) foi calculada com base no conteúdo inerente de nitrogênio de PD (8,6%). 0 conteúdo de nitrogênio de um substrato de 240gsm não tratado foi medido e subtraido dos 10 valores medidos (N-Kjedahl), para fornecer a quantidade real de nitrogênio adicionado durante o processamento (N-corrigido). O erro entre o valor calculado e o valor medido foi calculado (erro N). Os resultados são mostrados na Tabela 2. Tabela 2: Determinação do conteúdo de Nitrogênio de Várias Amostras de PD

(Valores de N são fornecidos em ppm,com base no peso seco de material)

Várias amostras descritas acima foram submetidas- ao teste de eficácia antimicrobiana como descrito 20 aqui. Além disso, amostras selecionadas esterilizadas por t esterilização por EtO utilizando métodos descritos aqui, foram avaliadas para eficácia antimicrobiana. De forma surpreendente, descobriu-se que a maior parte dos materiais aumentou de forma significativa em eficácia antimicrobiana após ser submetida à esterilização por EtO. Este efeito foi mais aparente- quanto testado contra pseudomonas (PA). Os resultados estão resumidos na Tabela 3, e o efeito do tratamento de EtO é indicado para .5 algumas amostras. Tabela 3: Resultados de Eficácia Antimicrobiana

Os dados de eficácia antimicrobiana são apresentados na Tabela 4. Tabela 4. Eficácia Antimicrobiana para amostra CC (após Esterilização por EtO) contra vários organismos, testados de acordo com os métodos descritos aqui.

Exemplo 3. Demonstração de insolubilidade de filme de PEC seco

Uma dispersão estável de PEC em um carreador » aquoso foi preparada como descrito para a solução de tratamento fornecida no Exemplo 2. Aproximadamente 10 mL desta solução 15 foram colocadas em uma placa de petri de vidro e em seguida secas em um forno a 80°C durante a noite. No momento da secagem,um filme rigido e claro se formou na superficie da placa de petri de vidro. Quando submerso em água, este filme ficou turvo e macio; no entanto, não se dissolveu, quebrou ou 5 se descolou da superficie de vidro. Isto demonstra a natureza insolúvel do PEC.

Métodos de Teste para Caracterização de Materials Antimicrobianos: Os materiais produzidos como descrito nos 10 exemplos acima foram caracterizados e testados para eficácia antimicrobiana e biocompatibilidade, de acordo com os seguintes métodos. Note que estes métodos padrões podem ser escritos nos tempos passado, presente ou futuro; no entanto, deve ser entendido que estes foram os métodos seguidos durante o 15 p foces sõ~inven=tivo’.

A. Método mlcroblológlco para verificar a propriedade antimicrobiana' dos materiais do substrato tratado na presença de soro

Foi avaliada a atividade antimicrobiana de ' 20 materiais preparados usando os vários métodos e realizações dessa invenção usando uma versão modificada do Método de Teste 100 da American Association of Textile Chemists and Colorists (AATTCC) ("Antibacterial Finishes on Textiles: Assessment of"), urn teste projetado para testar acabamentos antibacterianos de materiais têxteis. Culturas durante a noite (ONC) de microorganismos de testes foram geradas em meio de cultura * apropriado usando métodos padrões. Usando o ONC, uma solução de inóculo foi preparada contendo o microorganismo de teste diluido para ~106 UFC/ml em salina de tampão fosfato (PBS) e soro fetal bovino (FBS) a 10% v/v. Os materiais de substrato tratados (amostras) e materiais de controle de substrato não tratado (controles) foram cortados em quadrados de 2,5 cm e autoclavados a 121°C por 30 minutos para eliminar a *■ 5 contaminação microbiana pré-existente. Após a autoclavação, as amostras e os controles foram deixados para resfriar por 15 minutos em temperatura ambiente. As amostras e os controles foram cada um inoculados com 500μL do inóculo e incubados a 37°C em placas de petri estéreis cobertas. Após 18 a 24 horas 10 de incubação, as amostras e os controles foram colhidos com fórceps estéril, colocados em tubos separados de 15 mL contendo 15mL de PBS, e submetidos a vortex por 30 segundos para suspender qualquer microorganismo viável remanescente na solução. Diluições de dez vezes apropriadas destas suspensões 15 foram feitas usando solução de PBS e espalhadas sobre as placas - de^cultura de bactérias-contendo-meio de crescimento apropriado para os organismos desejados e em seguida incubadas durante a noite a 37°C. Após a cultura durante a noite, as colônias que " “ cresceram em "cada “placa " são "enumeradas para 'determinar a 20 eficácia—antimicrobiana^ _0s —dados s.ão_. reportado s_ como % —de morte ou redução de log como comparado aos controles não tratados com a mesma carga bacteriana e incubadas pelo mesmo periodo de tempo. É conveniente expressar a eficácia de uma formulação particular contra espécies bacterianas particulares 25 como "log de morte", "redução de log" ou simplesmente "LR".

Nas seguintes discussões, uma morte completa (ou seja, 100% de redução de bactérias viáveis) será denotada ao usar um asterisco após o número LR (6,0*, por exemplo). Os valores individuais de LR para cada replicada de uma dada amostra são * calculados em relação à contagem média de colônia para a amostra controle. Os valores LR individuais para aquela amostra são então ponderados e o LR médio é reportado como o resultado. A diluição, espalhamento, plaqueamento e enumeração foram conduzidos usando técnicas microbiológicas padrões.

Com base em experiência anterior dos • inventores, sabe-se que a eficácia antimicrobiana de polieletrólitos catiônicos imobilizados em superficies absorventes varia contra diferentes espécies de bactérias e que os polieletrólitos catiônicos são geralmente menos eficientes contra espécies de bactérias Gram positivas do que contra bactérias Gram negativas. Além disso, sabe-se que Staph, aureus ou SA (uma espécie Gram positiva) é talvez o organismo mais susceptivel comumente encontrado. Da mesma forma, Pseudomonas aeruginosa, ou "PA" (uma espécie Gram negativa) é uma das menos susceptíveis a polieletrólitos catiônicos imobilizados em superficies absorventes. Em geral, a maioria dos organismos comumente encontradojs, como_ E^ coli _ou_EC Juma espécie Gram negativa) ficará entre estes dois extremos em termos de susceptibilidade a polieletrólitos catiônicos imobilizados em superficies absorventes.. _Em_outras palavras, se o material preparado pelo método dessa invenção demonstrar ter eficácia alta contra PA (ou LR de 6, por exemplo) , então é muito provável que tenha eficácia maior contra SA (um LR de 8, por exemplo) , salvo se a eficácia contra PA é "morte total", o que representa 100% de desativação e, assim, não pode ser excedido. Por outro lado, não é realmente possível tirar conclusões quanto à eficácia contra organismos menos susceptíveis com base no desempenho contra organismos mais susceptíveis. Assim, é possível conservar tempo e recursos ao testar primeiramente as formulações contra organismos menos susceptíveis como PA, porque em condições menores do que "morte total", uma eficácia relativa pode ser determinada entre várias composições.

B. Métodos de Teste de Biocompatibilidade: Três tipos de experimentos foram realizados para auxiliar no teste de biocompatibilidade dos materiais ’produzidos pelo método dessa invenção para provar, que as 5 amostras não têm um efeito no corpo. Estes experimentos foram os seguintes: 1. ASTM F895-84, "Método de Teste Padrão para Triagem de Cultura de Célula em Difusão de Agar para Citotoxicidade. " Este ensaio 10 é ainda comparável a métodos delineados na ISO-10993-5, "Avaliação Biológica de Dispositivos Médicos". Estes ensaios foram realizados por Biological Consulting Services, Inc. em Gainesville, Florida. 2. ASTM F813-83, "Prática Padrão para Avaliação de jCuftura de Célula em Contato Direto de Materiais para Dispositivos Médicõs~. " Este ensaio foi realizado para determinar os dados de biocompatibilidade qualitativos produzidos pelo método dessa invenção. 0 ensaio é realizado ao colocar os substratos 20 tratados diretamente nas células de teste e medindo as zonas de células afetadas. "Ensaio de Proliferação Celular em CellTiter 96 Aqueous One Solution" foi adicionalmente usado como suplemento para ASTM F813-83 como uma maneira quantitativa de medir a viabilidade celular. 3. "Teste de Contato".

Estes testes foram desenhados para mostrar nenhuma atividade antimicrobiana em bactérias pela camada de contato dos materiais produzidos pelo método dessa invenção. A camada de contato dos materiais é posicionada em uma cobertura espalhada de bactérias, saturada com PBS até o nível de saturação e avaliada para crescimento no material. Estes ensaios foram realizados em Quick-Med Technologies. C. Métodos de Teste de Extractabilxdade,

Lixiviação e Caracterização. 1. Método de Extração para Teste de Lixiviabilidade (QMT Método EX-1): Este método deve ser usado para preparar extratos para determinação de componentes lixiviáveis de materiais de curativos. É baseado nas condições padrões de tempo, temperatura e fração da amostra ao líquido extrator que •. é. especificado-para - teste de citotoxicidade pela ISO 10993-12 e" 15 é representativo das condições esperadas durante o uso real do curativo. 0 material deve ser seco e equilibrado com temperatura ambiente e_ umidade ’por" uma “hora antes do teste. Uma fração equivalente a 1,0 grama de material para 20 mL de meio de extração deve ser usado. O meio de extração deve ser 20 lx solução salina fosfato tamponada (PBS, pH = 7,4). A extração deve ser conduzida em tubos de cultura PE ou PP estéreis e vedados. Tubos de 15 mL devem ser usados para volumes de extração de até 10 mL. Tubos de 50 mL devem ser usados para volumes de extração de até 4 0 mL. A amostra de 25 teste deve ser pesada em cerca de 0,01 grama e colocada no tubo de extração contendo a quantidade apropriada de PBS. Uma espátula de aço inoxidável ou haste de vidro limpa deve ser usada para garantir que a amostra seja completamente imersa no líquido PBS. Os tubos de extração vedados são colocados em um 30 conjunto de incubadores a 37°C (+/- 2°C) por 24 horas ( + /- 1 hora) . A amostra é decantada em uma seringa limpa e filtrada por um filtro de 0,22 μm para garantir a esterilidade e em seguida armazenada em um tubo de cultura estéril e vedado. 5 2. Método colorimétrico para Determinação de Polimero Catiônico em um Extrato (QMT Método COL-1) :

Este método deve ser usado para determinar a concentração do polimero catiônico em soluções aquosas. Este método é baseado em um método padrão fornecido por Protech 10 General Contracting Services, "DETERMINAÇÃO DE COAGULANTE DE POLÍMERO DISSOLVIDO - DADMAC", que utiliza um "kit" analitico padrão disponível da GE Betz (DR2010/DR2000) . O método anexado (descrito aqui) deve ser usado com as seguintes modificações: Um espectrofotômetro Spectronic-20 deve ser 15 usado no lugar de um instrumento especificado para medida da ’absorbância. a .57 5 _nm._, Cubetas de poliestireno de um centímetro de largura devem ser usadas rio lugar da amostra celular de 25 mL especificada. As amostras de teste e padrões devem ser misturados com reagentes em tubos de cultura cônicos de PP de 20 50 mL e uma quantidade apropriada da solução transferida para a cubeta de poliestireno para medição.

Uma curva de calibração foi construída usando soluções padrões de poliDADMAC (PD) preparadas por diluição apropriada de solução Axchem AF6545 40% de poliDADMAC com 25 solução salina de fosfato tamponada IX (PBS, pH = 7,4). Foi determinado que a faixa útil deste método se estende de aproximadamente 0,5 a 10 ppm de PD (vide anexo), com uma faixa linear que cobre aproximadamente 0,5 a 5,0 ppm de PD.

Soluções padrões devem ser preparadas por diluição apropriada de solução Axchem AF6545 40% de poliDADMAC com solução salina de fosfato tamponada 1 X(PBS, pH = 7,4) . Sugere-se que as soluções padrões de 0, 1, 2 e 4 ppm [PD] sejam ,, 5 preparadas. De acordo com o procedimento, a solução a 0 ppm terá um valor de absorbância de .zero.

Soluções de amostras (como extratos preparados usando o método QMT EX-1) devem ser analisadas de acordo com o procedimento descrito acima. Soluções de amostras com valores 10 de absorbância maiores do que 0,40 unidades de absorbância serão rejeitadas. Novas aliquotas destas amostras devem ser diluidas de forma apropriada usando solução de PBS e a medida repetida, incluindo a adição de novos reagentes. NÃO DILUIR A SOLUÇÃO COLORIDA. 0 fator de diluição será registrado e usado 15 para calcular o real [ PD] com base na coir.paração dos valores, de. absorbância para soluções padrões. Todas as amostras devem ser exatamente de 25 mL (incluindo qualquer diluição) antes da adiçãq_ dos reagentes., J?or_ exemplo,= uma solução de 50 ppm-de- poliDADMAC deveria ser diluida ao misturar 1,0 mL da solução com 24 mL de PBS antes da adição dos reagentes. Isto gera um fator de diluição de 25X e um [PD] de 2 ppm. A absorbância aproximada de tal solução deve ser de 0,15 unidades de absorbância.

A concentração de PD na amostra deve ser 25 determinada por interpolação linear numérica das leituras de absorbância de duas soluções padrões que tenham leituras de absorbância mais próximas da leitura da amostra, de modo que um padrão apresente absorbância maior e um apresente absorbância menor. Um dos padrões usados deve estar dentro de 0,1 unidade de absorbância da amostra; caso contrário, um padrão adicional deve ser usado.

3. Determinação do Conteúdo de Nitrogênio 5 (Método de Kjeldahl) : Em uma realização preferencial, os polieletrólitos catiônicos antimicrobianos usados na prática dessa invenção são compostos de amónio quaternário e, portanto, contêm nitrogênio. Amostras dos materiais substrato tratados e 10 das soluções de extração preparadas pelos métodos descritos aqui foram enviadas para Galbraith Laboratories (Knoxville, TN) para Análise de Nitrogênio pelo Método de Kjeldahl (E-7 Rev 10) . Este método gera o resultado em partes por milhão (ppm) de - nitrogênio.— O conteúdo do nitrogênio- de ' base- dós substratos 15 não tratados deve ser subtraído do valor medido para determinar a concentração de nitrogênio na amostra. Em uma realização ’ preferencial, dessa “drivençaó,- poliDADMAC- é utilizado como o polieletrólito catiônico ——antimicrobiano. —O conteúdo de nitrogênio de poliDADMAC é 8,6% por -peso, com base na fórmula 20 molecular. A concentração de poliDADMAC na amostra pode, assim, ser calculada ao dividir o resultado de N medido em ppm por 0,086. Resultados de teste de eficácia antimicrobiana e biocompatibilidade: 1. ASTM F895-84 •t

Método de Teste Padrão para Triagem de Cultura 5 de Célula em Difusão de Agar para Citotoxicidade. Abaixo estão dispostos dois conjuntos de tabelas, ,a Tabela 5 mostra as zonas atuais de lise de célula e a Tabela 6 mostra os resultados de difusão/sobreposição em agar. Tabela 5. Quadro de Lise (Critério de 10 Pontuação)

Tabela 6. Quadro de Sobreposigao em Agar (Criterio de Pontuagao)

2. Resultados de Ensaio de Contato Direto/Prolifexação de Célula:

De acordo com os requisitos de ASTM F813-83, os • artigos em teste foram posicionados diretamente sobre a monocamada celular. A análise microscópica das células ao redor e sob as amostras testadas após a remoção demonstra a extensão da biocompatibilidade. Os resultados são sumarizados abaixo na Tabela 7. Fenol foi usado como um controle positivo (+) enquanto o material substrato não tratado foi usado como um controle negativo (-) . A monocamada celular não deformada foi usada como um controle em branco. A descrição do ' tamanho da zona de lise celular ao redor do material de curativo ou localizado diretamente sob as amostras tem as seguintes designações: Tabela 7. Resultados de Ensaio de Contato Direto/Prolifexação de Célula:

Os resultados mostraram boa compatibilidade.

Os valores "1" para a zona sob as amostras de controle negativo foram provavelmente devido aos mecanismos fisicos devido à alta absorção do material. Os dados qualitativos, microscopicamente obtidos apresentados acima foram complementados pelo uso de um sistema de ensaio comercialmente disponivel para detecção de citotoxicidade e proliferação de célula (Promega Corporation, Madison WI, CellTiter96® Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay, G3580). A viabilidade celular quantitativa é medida através de redução de tetrazólio _MTS medido^ pela produção de formazano. Os resultados são normalizados para os controles em branco com uma monocamada não comprometida. As colunas LC(50) _ind_icam o valor critico. que _mostra, uma concentração de 50% de morte celular. Para este teste particular, se os valores médios absolutos normalizados das células é acima de LC (50), este é considerado aprovado. Os resultados são apresentados abaixo na Tabela 8. Tabela 8. Valores Absolutos Normalizados Médios de Células.

* Média de oito replicadas.

3 . Sumário de Teste de Contato:

Vide a Tabela 9 abaixo para os resultados do teste de contato para a amostra CC. Note que ( + ) indica crescimento na camada de contato do material enquanto que (-) indica nenhum crescimento na camada de contato do material. Estes resultados demonstram biocompatibilidade, e que os 10 materiais tratados com PEC não terão efeito adverso no corpo, como evidenciado pelo fato de que nenhum antimicrobiano é transferido ao tecido —que- está -em—contato com - o -substrato., tratado. Tabela 9. Resultados de Testede Contato para Amostra CC após Esterilização por EtO:

Exemplo 4. Tratamento de pasta de madeira com

PEC de poliDADMAC e sal sódico de poli (ácido acrilico) . Uma dispersão estável de PEC em um carreador ° aquoso foi preparada como descrito para a solução de tratamento fornecida no Exemplo 2. Para 1,5 litro desta solução foram adicionados 50 g de pasta de madeira. A mistura foi misturada por 10 minutos e em seguida vertida em uma prensa de queijo. O excesso de liquido foi pressionado da pasta. O peso final da pasta úmida foi 118,6 gramas (137% de absorção de liquido). A pasta foi espalhada em uma tela e seca em um forno a 80°C por 18 horas. A pasta de madeira antimicrobiana resultante é útil como um componente de fraldas, lenços sanitários, curativos, e em outras aplicações onde um material antimicrobiano absorvente é desejável.

Exemplo 5. Trãtamentõde ’ pó de celulose microcristalina com PEC de poliDADMAC e sal sódico de poli(ácido acrilico).

Uma dispers_ã_o estável de PEC em um carreador aquoso foi preparada como descrito para a solução de tratamento 20 fornecida no Exemplo 2. Para 0,5 litro desta solução foram adicionados 25 g de pó de celulose microcristalina (gel de celulose Avicel pH-101, tamanho médio de particula de 50 micron) . A mistura foi agitada por 10 minutos e em seguida filtrada por sucção através de filtro de papel em um funil de Buchner. A torta resultante de material úmido (48,5g) foi coletada e grosseiramente fundamentada antes da secagem em um forno a 80°C por 18 horas. O pó de celulose microcristalina antimicrobiana resultante é útil como um componente de fraldas, lenços sanitários, curativos, e em outras aplicações onde um 30 material antimicrobiano absorvente é desejável.

Exemplo 6. Tratamento de escala Piloto de substrato de raiom (240gsm) com PEC de poliDADMAC e sal sódico de poli(ácido acrilico).

Uma corrida de escala piloto foi feita usando os seguintes materiais e parâmetros: Fórmula do liquido para tratamento (em % de peso): PD (Floquat FL 4540; 40% em sólidos): 0.625% P7XA3 (Flosperse 10.000; 30% em sólidos): 0, 307% 10 KOH 3 M (13,1% em sólidos): 0,0205% Água Deionizada 99,05% Observações: _ _ Valor de pH [9,3] Quantidade Preparada [100 kg] 15 Dispersão estável com aparência leitosa Parâmetros Operacionais: Substrato: 240 gsm (vide descrição acima) Par de rolos mecanicamente adaptável Foulard. Secador de correia de forno sem borda de .20 fixação à trama. Largura Antes de Revestimento [550 mm] Largura Após o Revestimento [540 mm] Comprimento do Revestimento [140 m] Umidade Alvo Adicionada [125%] Peso Seco Alvo Adicionado [1,04 g/m2] Umidade Adicional Inicial [125,3%] Umidade Adicional Final [122,0%] Resultados do Teste: Peso 253,7g/m2 (252,5 não tratado) Espessura 2,18mm (2,00 mm não tratado) ‘ ““ ' Absorção' de Água 2185-g/m2 —(238 9 não tratado) — Desempenho Antimicrobiano:

O substrato tratado foi testado de acordo com os métodos descritos aqui. Ò substrato trátãcfó’ fõi re-testado após o tratamento por EtO de acordo com os métodos descritos aqui. Espécies Bacterianas Redução de log PA 6,4 Log (antes do tratamento com EtO) PA 7,4 Log (após o tratamento com EtO) EC > 6.0 Log ("morte total" antes e após o tratamento com EtO) SA >6.0 Log ("morte total" antes e após o tratamento com EtO) Os dados indicam claramente que o tratamento com EtO tem um efeito positivo significativo na eficácia 5 antimicrobiana. 0 teste do extrato foi realizado nos substrato tratados de acordo com o Método de Extração para Teste de Lixiviabilidade (QMT Método EX-1), descrito aqui. O nivel 10 médio de PD no extrato de uma amostra como preparada demonstrou ser de 41 ( + /- 10 ppm) e o nivel médio de PD no extrato de uma amostra submetida ao tratamento com EtO, como descrito aqui, demonstrou ser 57 (+/- 1 ppir.) . Em geral, os niveis de PD de menos do que aproximadamente 60 ppm não contribuem para a 15 citotoxicidade e "não tem efeito no corpo". Exemplo 7. Tratamento de escala Piloto de substrato de raiom (240gsm) com PEC dê poliDADMAC e sal sódico de poli(ácido acrilico). Uma corrida de escala piloto foi feita usando 20 os seguintes materiais e parâmetros: Fórmula do liquido para tratamento (em % de peso): PD (Floquat FL 4540; 40% em sólidos): 0.625% c PAA3 (Flosperse 10.000; 30% em sólidos): 0.307% 25 KOH 3 M (13,1% em sólidos): 0.0205%

Água Deionizada 99,05% Observações; Valor de pH [9,3] Quantidade Preparada [100 kg] 5 Dispersão estável com aparência leitosa Parâmetros Operacionais: Substrato: 115 gsm (vide descrição acima) Par de rolos mecanicamente adaptável Foulard. Secador de correia de forno sem borda de 10 fixação à trama. Largura Antes de Revestimento [550 mm] Largura Após o Revestimento [530--mm] — — Comprimento do Revestimento [190 m] Umidade Alvo Adicionada [125%] 15 Peso Seco Alvo Adicionado [0,49 g/m2] Umidade Adicional Inicial [125,4%] Umidade Adicional Final [128,9%] Resultados do Teste: Peso 117,3g/m2 (115,0 não tratado) Espessura 1,05mm (1,11 mm não tratado) Absorção de Água 774 g/m2 (794 não tratado) Desempenho Antimicrobiano:

O substrato tratado foi testado de acordo com os métodos descritos aqui. O substrato tratado foi re-testado após o tratamento por EtO de acordo com os métodos descritos aqui. Espécies Bacterianas Redução de log - - -■ Π PA 2,8 Log (antes._.do tratamento_.com EtO) . PA 7,2 Log (após o tratamento com EtO) EC >6,0 Log ("morte total" antes e após o tratamento com EtO) 15 SA >6,0 Log ("morte total" antes e após o tratamento com EtO)

Os dados indicam claramente que o tratamento com EtO tem um efeito positivo significativo na eficácia antimicrobiana. O teste do extrato foi realizado nos substrato tratados de acordo com o Método de Extração para Teste de Lixiviabilidade (QMT Método EX-1), descrito aqui. O nivel médio de PD no extrato de uma amostra como preparada demonstrou ser de 34 (+/- 3 ppm) e o nível médio de PD no extrato de uma amostra submetida ao tratamento com EtO, como descrito aqui, demonstrou ser 39 (+/- 9 ppm) . Em geral, os níveis de PD de 5 'menos do que aproximadamente 60 ppm não contribuem para a citotoxicidade e "não tem efeito no corpo".

Exemplo 8. Tratamento de escala Piloto de um substrato de gaze de algodão com PEC de poliDADMAC e sal sódico de poli(ácido acrilico).

Os materiais para todos os testes foram rolos de gaze de algodão importados da China e cortados do tamanho do , rolo principal para o tamanho necessário. Os polímeros catiônico e aniônico foram PD e PAA3 respectivamente (como descrito aqui). Toda a mistura foi realizada em esponja de 15 banho, e o material substrato foi gaze de 100% algodão "trançado 14 x 6" que foi dobrada em uma tentativa de molde para fornecer material =de duas dobras. A largura do material de duas dobras usado na corrida foi aproximadamente 9. Aproximadaméhte 3.000 a 10.000 jardas lineares de gaze foram 20 processadas durante cada corrida. * Um banho de acolchoamento foi um tanque de 50 galões com tiras de aquecimento dentro. Este banho tinha um lastro posicionado dentro para permitir um volume de trabalho de 15 galões a ser usado. A mistura foi realizada diretamente no banho de acolchoamento ou um tanque de 25 mistura separado. O equipamento foi ajustado para gerar uma absorção de umidade de 120%, e as concentrações de PD e PAA3 no líquido de tratamento foram ajustadas para gerar conteúdos de polímero no tecido final descritos na Tabela 10. Assim, os níveis de cada polímero no líquido de tratamento são 30 aproximadamente 20% menores do que nos pesos finais dos tecidos secos. Os líquidos de tratamento foram preparados por adição de ingredientes pré-diluídos seguidos por ajuste de pH para o pH 10,5 (± 0,5) usando hidróxido de sódio.

A gaze de algodão foi girada para passar do 5 rolo principal, através da moldura de dobra (tentativa) e no banho de acolchoamento. Após passar pelo banho de acolchoamento preenchido com a solução, a gaze passou entre os rolos de laminagem para alcançar um conteúdo líquido reprodutível de 120% em relação ao seu peso seco. Após os 10 rolos de laminação, a gaze passou por um 'rimpler', essencialmente um rolo de rotação que tem uma lâmina cirúrgica que se move para frente e para trás por ele. Isso produziu o tecido crespo que é dobrado regularmente para fornecer elasticidade.

Àpós o rimpler, a gaze caiu em uma esteira de transporte que a conduziu através de um secador. O secador passou o tecido através de uma forma em Z, passando o comprimento do secado para três vezes antes do inicial, com cada passagem sucessiva (a gaze cai em uma esteira de 20 transporte após cada passagem, com cada estágio sucessivo se movimentando ligeiramente mais rápida do que uma anterior para esticar as pregas da gaze para fora para melhor secagem. A adesão da gaze ao fundo esteira de transporte foi resolvida pela instalação de um dispositivo pneumático para ajudar a 25 retirar gaze da transportadora. Uma unidade de calor infravermelho foi instalada na saída do secador, que removeu de forma eficiente qualquer umidade residual da gaze. O substrato de gaze de algodão tratado foi submetido ao tratamento com EtO usando métodos descritos aqui. Tabela. 10: Química de Lote

A eficácia antimicrobiana foi testada usando 5 métodos descritos aqui. Os resultados são apresentados nas Tabelas 11 e 12. Os dados na Tabela 12 demonstram que o tratamento com EtO tem um efeito positivo significativo na eficácia antimicrobiana. 10 Tabela 11. Eficácia antimicrobiana de substrato de gaze de algodão tratado.

Tabela 12. Efeito do tratamento com EtO na 5 eficácia antimicrobiana.

O teste do extrato foi realizado nos substrato tratados “de acordo- com o—"Método—de Ext-ração para- Teste—de L ix iv_i_ab i 1 i da de " ... (QMT Mét o do EX-1) , de s c rito aqui. Múltiplos conjuntos de testes de extração (cada um com n=6) foram realizados em cada lote. Os resultados estão apresentados na Tabela 13. O conteúdo médio de PD em um extrato do substrato tratado (após tratamento com EtO) demonstrou ser de 44 ppm. Em geral, os niveis de PD de menos do que aproximadamente 60 ppm 15 não contribuem para a citotoxicidade e "não tem efeito no corpo". Tabela 13. Valores médios de concentração de PD em diferentes conjuntos de extratos (em ppm) .

As amostras dos materiais substrato de gaze de algodão preparados de acordo com o processo descrito foram — testadas para— citoti-x-icidade--pelo --Método -ISO 10993-5. Este método é comparável com ASTM F813-07 "Prática Padrão para 10 Avaliação de Cultura de Célula em Contato Direto de Materiais para Dispositivos Médicos." Não houve reatividade biológica encontrada para as amostras testadas (todos os testes foram em triplicata) . Todos os poços avaliados mostraram um grau de 0 (grau 2 ou menor é considerado aprovado no método) . A resposta 15 celular observada a partir do artigo controle positivo (graus 3 e 4 em 24h e 48h, respectivamente) e o artigo controle negativo (grau 0) confirmam a função adequada do sistema de teste. Os artigos de teste (substratos tratados) são portanto < considerados não-citotóxicos por esta avaliação. A amostra do material de gaze de algodão foi testada para irritação primária de pele por um teste laboratorial comercial. Foi determinado 1 que o material era "não irritante".

Claims (11)

1. MÉTODO DE PREPARAÇÃO DE UM ARTIGO ANTIMICROBIANO, caracterizado por compreender as etapas de: (a) preparação de um líquido de tratamento compreendendo uma solução aquosa estável, colóide, suspensão, dispersão, coacervato, ou emulsão de um complexo de polieletrólitos, PEC, de um polieletrólito aniônico que consiste de um derivado ou copolímero de poli(ácido acrílico) ou sulfonato de poliestireno, contendo uma concentração de 0,025 a 0,20 em peso percentual em dito líquido de tratamento, e um excesso estequiométrico de uma solução aquosa de um polieletrólito catiônico antimicrobiano que consiste de um polímero de amônio quaternário ou um copolímero de amônio quaternário contendo uma concentração de 0,10 a 0,50 em peso percentual em dito líquido de tratamento, e em que a fração molar dos sítios de carga em dito polieletrólito catiônico antimicrobiano em relação aos sítios de carga em dito polieletrólito aniônico está na faixa compreendida entre 1,3:1 e 2:1, dita preparação compreendendo os passos de: (a1) provimento em separado de uma solução aquosa de polieletrólito catiônico e de uma solução de polieletrólito aniônico; (a2) combinação das duas soluções e mistura das mesmas por meio de agitação, homogeneização, formação de mistura, sonicação, ou mistura por alto cisalhamento, a temperatura ambiente, produzindo dito líquido de tratamento onde o PEC que permanece disperso no líquido de forma estável e uniforme; (b) aplicação de dito líquido de tratamento a um artigo; (c) secagem do artigo tratado, pelo qual dito PEC fica ligado de forma não lixiviante ao artigo antimicrobiano resultante.

2. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ainda compreender a etapa de enxaguar o artigo antimicrobiano após a etapa (c) de secagem, seguida de nova secagem.

3. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de compreender a melhora da eficácia antimicrobiana do artigo antimicrobiano mediante uma etapa de tratamento do artigo antimicrobiano seco com óxido de etileno.

4. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que no passo (a2) o pH do líquido de tratamento é mantido na faixa de 8 a 10.

5. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que dito polieletrólito catiônico antimicrobiano é cloreto de poli(dialildimetilamônio), também conhecido como poliDADMAC.

6. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 5, caracterizado pelo fato de que o polieletrólito aniônico é um sal de poli(ácido acrílico) ou um sal de poli(ácido 4- estirenosulfônico).

7. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que dito sal é um sal de sódio de poli(ácido acrílico) ou um sal de sódio de poli(ácido 4-estirenosulfônico).

8. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que dito artigo antimicrobiano é compreendido de materiais selecionados do grupo que consiste de celulose, derivados de celulose, papel, madeira, pasta de madeira, celulose de origem microbiana, celulose microcristalina, hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose, metilcelulose, raiom, algodão, linho, polissacarídeo, proteína, lã, colágeno, gelatina, quitina, quitosana, alginato, amido, seda, poliolefina, poliamida, fluoropolímero, cloreto de polivinila, vinil, borracha, poliactida, poliglicolida, acrílico, poliestireno, polietileno, polipropileno, náilon, poliéster, poliuretano e silicone.

9. ARTIGO ANTIMICROBIANO caracterizado por compreender um artigo, um polieletrólito catiônico antimicrobiano, e um polieletrólito aniônico antimicrobiano, submetidos ao método definido por qualquer uma das reivindicações 1 a 7.

10. ARTIGO de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o artigo antimicrobiano compreende algodão ou raion.

11. ARTIGO de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 ou 10, caracterizado pelo fato de que dito artigo antimicrobiano é um curativo, um dispositivo médico ou um tecido.