BRPI0911827A2 - compostos moleculares formados a partir no nanoencapsulamento de toxinas botulìnicas-a e b, puras ou não, e/ou com a sua estrutura modificada, e/ou composta com qualquer outra substáncia - Google Patents

Abstract

COMPOSTOS MOLECULARES FORMADOS A PARTIR DO NANOENCAPSULAMENTO DE TOXINAS BUTOLINICAS-A e B, PURAS OU NãO, E/OU COM A SUA ESTRUTURA MODIFICADA, E/OU COMPOSTA COM QUALQUER OUTRA SUBSTáNCIA, abrangendo compostos contendo (a) qualquer um dos tipos de toxinas butoljínicas, pura ou não, (b) composta e ou conjugada com qualquer outro elementos (c) com qualquer modificação da estrutura molecular da toxina butulínica, formando outras moléculas formando complexos de incIusão e/ou nanoencapsulados em (1) ciclodextrinas conhecidas como ciclodextrinas LARGE RINGS, modificadas ou não, (II) lipossomos compostos de fosfatilcolina, (III) ácidos graxos e seus derivados, (IV) colesterol, modificado ou não artificialmente, (V) polímeros biodegradáveis e absorvíveis, (VI) dendrímeros, (VII) nanoesferas, (VIII) talosferas, (IX) nano-emulsões e (X) micro-emulsões preparadas com base nas substâncias supracitadas,podendo estas moleculas formadas com o nanoencapsulamente formando novas moléculas ativas ou pró-drogas. Podendo estas mesmas estarem compostas com inúmeros outros compostos ativos, que poderâo exercer funções sinérgicas e amplas no sitio do efeito aguardado.

Description

COMPOSTOS MOLECULARES FORMADOS A PARTIR DO NANOENCAPSULAMENTO DE TOXINAS BUTOLÍNICAS-A e B, PURAS OU NÃO, E/OU COM A SUA ESTRUTURA MODIFICADA, E/OU COMPOSTA COM QUALQUER OUTRA SUBSTÂNCIA

1. DESCRIÇÃO INICIAL DA INVENÇÃO - CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção abrange compostos contendo (a) qualquer um dos tipos de toxinas butoliínicas, pura ou não, (b) composta e ou conjugada com qualquer outro elemento, (c) com qualquer modificação da estrutura molecular da toxina butulínica, formando outras moléculas formando complexos de inclusão e/ou nanoencapsulados em (I) ciclodextrinas conhecidas como ciclodextrinas LARGE RINGS, modificadas ou não, (II) lipossomos compostos de fosfatil-colina, (III) ácidos graxos e seus derivados, (IV) colesterol, modificado ou não artificialmente, (V) polímeros biodegradáveis e absorvíveis, (VI) dendrímeros, (VII) nanoesferas, (VIII) talosferas, (IX) nano-emulsões e (X) micro-emulsões preparadas com base nas substâncias supracitadas, podendo estas moléculas formadas com o nanoencapsulamente—formando novas ..moléculas ativas ou pró-drogas uma vez combinadas para uso como agentes (1) antitumorais, em uma grande variedade de cânceres em indivíduos mamíferos e não mamíferos, (2) antivirais, (3) antibacterianos, (4) fungicidas, (5) antiparasitários, (6) analgésicos, (7) antiinflamatórios, (8) imuno-moduladores, (9) anticoagulantes, (10) cicatrizantes, (11) tensioreguladores, (12) cosméticos e cosmético- dermatológico, (13) de suplementação alimentar, (14) terapêutico-vascular, (15) hematomoduladores, (16) pro-angiogênicos e anti-angiogênicos, (17) moduladores de ereção e Iibido sexual, (18) antidegeneradores do sistema nervoso central (SNC) e (19) agentes antienvelhecimento.

Os compostos abrangidos pelo presente pedido de patenteamento de invenção se caracterizam pela eficiência na entrega dos ativos nas terminações nervosas, como efeito reparatório ou efeito paliativo a inúmeras desordens. A entrega desta droga, via mecânica de nanoparticulação, absolve a possibilidade do uso de seringas e do uso das mesmas para promover a difusão da droga, para os fins que a mesma confere. O nanoencapsulamente permite que o efeito do principio ativo chegue ao alvo pretendido, sem a degradação prévia desses mesmos ativos pelo metabolismo fisiológico corpóreo, apresentando baixa ou nenhuma toxicidade sistêmica.

Todos as compostos, ora objeto do presente pedido de patente de invenção, se caracterizam por envolverem o conceito de nanoencapsulamento ou complexação na sua formação, resultando em produtos de eficiente uso terapêutico. O nanoecapsulamento e/ou complexação, os caracteres de transporte de seus princípios ativos com integridade estrutural e com ganho de solubilidade e a funcionalidade terapêutica desses compostos configuram a unidade de conceito inventivo.

Passa-se adiante a uma descrição do estado da técnica, a fim de render a compreensão do contexto em que se inscreve a presente invenção, ora objeto de pedido de patente.

2. ESTADO DA TÉCNICA

2.1 - A dificuldade enfrentada no estado da técnica

Existe uma necessidade da administração dos compostos relacionados à toxina botulínica hoje, produzidos comercialmente para inúmeros fins, de que seja injetado via intra, trans ou subdérmica, a fim de atingir a musculatura e por fim, possibilite as ações das toxinas botulínicas nas terminações nervosas. Com isso, tem se observado inúmeros efeitos adversos do sistema invasivo do uso da droga botulínica, tais como edemas e processos infecciosos, dado as perfurações cutâneas feitas pela agulha, alem da dor durante a aplicação e pós período do tratamento.

Os compostos ora objeto de pedido de patente de invenção visam justamente a superar tais dificuldades vivenciadas no estado da técnica. Para compreender a inovação e ganhos terapêuticos que referidas compostos trazem, é oportuna uma breve digressão sobre o§ princípios ativos presentes em tais compostos, bem como os nano- encapsulamentos nelas empregados, permitindo que a droga seja aplicada sob a forma tópica, dérmica, epitelial e ou mucosa, sem que haja a necessidade do uso de seringas para a sua aplicação, evitando as complicações e ainda conseqüente efeito esperado.

2.2. Sobre os elementos formadores dos compostos objeto da presente reivindicação de patente de invenção

2.2.1. Compostos ativos

2.2.1.1. Toxina Butolinica

A toxina botulínica é um medicamento e uma proteína neurotóxica produzido pela bactéria Clostridium botulinum, e é considerada a substância mais tóxica conhecida para a humanidade com uma DL50 de cerca de 0,005-0,05 G / kg. Apesar do seu efeito tóxico mortal,-às vezes é-usado era*, doses muito, pequenas para o tratamento de espasmos musculares Popularmente conhecidos pelo seu nome comercial Botox®, a toxina botulínica é atualmente utilizada em várias configurações para procedimentos estéticos

Entre 1817 e 1822, o médico e poeta alemão Justino Kerner descreve a toxina botulínica como um "veneno salsicha" e "veneno gordos", pois esta bactéria freqüentemente causa um crescente envenenamento em produtos inadequadamente manipulados de produção de chucrutes. Kerner foi o primeiro pesquisador a apresentar um possível uso terapêutico da toxina botulínica. Em 1870, Müller, outro médico alemão, cunhou o nome do botulismo. (Em latim, botulus significa "salsicha"). Em 1897, Emile van Ermengem identifica a bactéria Clostridium botulinum como sendo a produtora da toxina botulínica. Em 1928, P. Tessmer Snipe e Hermann Sommer, pela primeira vez, realizam a purificação da toxina Em 1949, o grupo Burgen descobriu que a toxina botulínica bloqueia a transmissão neuromuscular. No final dos anos 1960 Allan Scott e Edward Schantz foram os primeiros a trabalhar em uma preparação padronizada de toxina botulínica para fins terapêuticos. Outras bactérias que produzem a toxina botulínica são o Clostridium botulinum butyricum, C.baratii e C.argentinense A toxina botulínica é neutralizada em temperaturas superiores a 60 5 C. Em 1973, Alan Scott B, MD, com o Smith-Kettlewell Institute utilizouou a toxina botulínica tipo A (BTX-A) em experiências com macacos. Em 1980, foi oficialmente usada a toxina BTX-A pela primeira vez em humanos para o tratamento do estrabismo, uma condição em que os olhos não estão devidamente alinhados. Em dezembro de 1989, a BTX-A (BOTOX) foi aprovada pelo FDA para o tratamento de estrabismo, blefaroespasmo, espasmo hemifacial e em pacientes acima de 12 anos. O efeito cosmético da BTX-A foi inicialmente descrito pelo oftalmologista Jean Carruthers e também pela dermatologista Alastair Carruthers, casados e em equipe trabalhando em Vancouver, no Canadá, embora o efeito tivesse sido observado por um número de grupos independentes. Em 15 de abril de 2002, a FDA anunciou a aprovação de toxina botulínica tipo A (BOTOX) para melhorar temporariamente a aparência de moderada às graves linhas de expressões entre as sobrancelhas (conhecidas como linhas de rugas glabelares). A BTX-A também foi aprovado para o tratamento da sudorese excessiva nas axilas. A aceitação da BTX-A e sua utilização para o tratamento da espasticidade e transtornos de dor muscular é crescente, com as aprovações pendentes.em muitos países europeus e estudos sobre as dores de cabeça (incluindo enxaqueca), os sintomas da próstata, asma, obesidade e muitas outras possíveis indicações estão em curso. Em junho de 2009, sua utilização no tratamento da espasticidade levou um médico do Reino Unido a tratar com sucesso um homem brasileiro que tinha sido confinado a uma cadeira de rodas após um acidente vascular cerebral há 20 anos. O Botox® é fabricado pela Allergan Inc (E.U.) para as duas terapêuticas, bem como o uso cosmético. Dysport é uma formulação terapêutico da toxina tipo A, desenvolvida e fabricada na Irlanda e está licenciada para o tratamento das distonias focais e algumas utilizações cosméticas em muitos territórios no mundo inteiro. Lanzhou Institute (China), fabricante de BTXA utilizou sua tecnologia avançada para produzir 50U e 100U toxina tipo A como prestação de serviços de uma decisão médica. Neuronox é um novo tipo de toxina fabricada pela Medy-Tox Inc (Coréia do Sul). Toxina Botulínica tipo B (BTX-B) recebeu aprovação do FDA para o tratamento da distonia cervical em 21 de dezembro de 2000. Marcas de BTX-B são Myobloc® nos Estados Unidos, e Neurobloc® na União Européia 2.2.2. Os nanoencapsuladores

2.2.2.1. Algumas informações preliminares sobre nanoencapsulamento

É importante neste momento definirmos alguns termos relacionados ao nanoencapsulamento. Estas estruturas variam grandemente e vários tipos são possíveis. O termo nanopartículas é genérico, sendo usado de acordo com o tamanho da partícula a que se está referindo. Partículas com tamanho igual ou maior que 1 nm (um nanômetro) são consideradas nanopartículas, enquanto que as partículas maiores de 999 nm (novecentos e noventa e nove nanômetros) são denominadas micropartículas.

O termo nanopartículas aplicado à liberação controlada de fármacós é amplo e refere-se a dois tipos de estruturas diferentes, nanoesferas e nanocápsulas. Denominam- se nanoesferas aqueles sistemas em que o fármaco encontra-se homogeneamente disperso ou solubilizado no interior da matriz polimérica. Desta forma obtém-se um sistema monolítico, onde não é possível identificar um núcleo diferenciado. Nanocápsulas, ao contrário ,constituem os chamados sistemas do tipo reservatórios, onde_ é. possível identificar um núcleo diferenciado, que pode ser sólido ou líquido. Neste caso, a substância encontra-se envolvida por uma membrana, geralmente polimérica, isolando o núcleo do meio externo.

Os métodos de obtenção são semelhantes, com diferenças no mecanismo de polimerização.

As pesquisas em torno do nanoencapsulamento foram embasadas no trabalho de Würster, que na década de 1950 descreve o processo patenteado de encapsulamento de finas partículas sólidas em leito fluidizado. Em seguida vieram os processos de coacervação (inicialmente para encapsulamento de líquidos e tempos mais tarde como técnica preparativa de nanopartículas), implantes (primeiramente introduzidos nos anos 70) e aplicações transdérmicas (1980). Em trabalhos anteriores, os sistemas que se mostraram particularmente interessantes foram os de nanopartículas de polímeros biodegradáveis. Trata-se de um sistema em que o direcionamento do fármaco a sítios-alvo específicos do organismo é claramente identificável, sendo também bastante estável, não sendo reconhecido por macrófagos do sistema retículo endotelial de defesa. Trata-se, portanto, do melhor sistema ora disponível para se investigar o comportamento de carregadores coloidais em organismos vivos, estritamente ligados à liberação controlada de fármacos.

Passa-se adiante a uma breve explanação sobre cada um dos principais elementos nanocapsuladores e complexadores envolvidos na obtenção dos compostos objeto do presente pedido de patente de invenção.

2.2.2.2. Ciclodextrinas

As Ciclodextrinas (CD's) são oligossacarídeos cíclicos formados por moléculas de D - glicose, unidas através de ligações glicosídicas, obtidas a partir da degradação enzimática (enzima ciclodextrina-glucosil-transferase CGT) do amido. As CDls. mais, conhecidas são as α, β e γ-ciclodextrinas, constituídas por 6, 7 e 8 unidades de glicose, respectivamente, que adotam a conformação de cadeira. Do ponto de vista estrutural, as CD's apresentam-se na forma de "cones truncados" com o lado mais largo formado pelas hidroxilas. secundárias em C-2 e C-3 e a face mais estreita constituída pelas hidroxilas primárias ligadas em C-6. A dimensão da cavidade é determinada pelo número de unidades de glicose constituintes da CD. Os átomos de oxigênio envolvidos nas ligações glicosídicas (em C-1 e C-4) e os átomos de hidrogênio ligados em C-3 e C-5 determinam o caráter hidrofóbico do interior da cavidade das CD's.

A presença das hidroxilas livres na parte externa das CD's confere a essas moléculas um caráter hidrofílico. Esse arranjo estrutural das moléculas de glicose nas CD's possibilita a utilização desses compostos como hospedeiros na formação de complexos de inclusão. A presença de uma cavidade hidrofóbica e de grupos hidroxilas livres na parte externa da molécula permite a "dissolução" em meio aquoso de compostos (hóspedes) de baixa solubilidade. Esse aspecto molecular tem possibilitado a utilização de ciclodextrinas em diferentes áreas da ciência e tecnologia, sendo o principal domínio de aplicação a indústria farmacêutica, em função da possibilidade de obtenção de novos fármacos com propriedades físicas e químicas diferentes e o mesmo princípio ativo.

A estrutura particular das suas moléculas assegura que as ciclodextrinas podem formar complexos de inclusão, isto quer dizer, moléculas que resultam da soma de dois compostos, um dos quais (a molécula hóspede) está situado na cavidade da molécula sem significantemente modificar sua estrutura.

As ciclodextrinas podem formar complexos de inclusão com uma variedade notável de espécies iônicas e moleculares, dentre as quais muitos princípios ativos de importância fundamental nos cosméticos. Encapsular o princípio ativo nas ciclodextrinas apresenta várias vantagens que sugerem o seu uso também em dermo-cosméticos. Os complexos de ciclodextrinas podem ter uma estrutura cristalina, eles não são sensíveis à força da pressão, eles protegem a molécula hóspede, prevenindo a degradação natural dos princípios ativos, de fato intensificando os seus efeitos. As ciclodextrinas também possuem oütra-característica que as tornam extremamente interessantes para aplicações cosméticas.

Elas podem formar um sistema de liberação da droga. Ao encapsular temporariamente os princípios ativos, as ciclodextrinas permitem a "liberação controlada" de seu conteúdo, desta forma contribuindo para a melhora da biodisponibilidade. Vários trabalhos têm mostrado uma melhor ou uma maior atividade da molécula ativa complexada, comparada à sua forma livre.

As ciclodextrinas são em todos os aspectos, substâncias de origem natural e, como tal, apresentam uma situação toxicológica favorável. A sua capacidade de "hospedar" uma ampla variedade de substâncias ativas e de formar complexos de inclusão para liberação controlada faz deles substâncias particularmente interessantes. Alguma utilização bioterápica pode ser acessada (http://www.gerbras.com.br/produtos/cycloazelon.asp em 13-07-08). Contudo já se sabe que as ciclodextrinas, normalmente encontradas, não possuem.sua cavidade grande suficientemente para poder encapsular a proteína que compõem as classes das toxinas botulínicas.

É objeto de requerimento desta patente a complexação de tais elementos da família das toxinas botulínicas nas demais nano carreadores, principalmente as ciclodextrinas conhecidas como ciclodextrinas de anéis largos, criadas e modificadas. O grande anel ciclodextrinas (LR-CDs) tem atraído atenção nos últimos anos, e os avanços foram marcados no estudo de suas propriedades físico-químicas, apesar das dificuldades existentes na sua síntese, isolamento e purificação. O raio χ e análises feitas das estruturas dos CDs composta por 19 unidades de glicose forneceu informações preciosas sobre as conformações dessas moléculas no cristal lattice.

Novos motivos estruturais foram detectados. A caracterização térmica e estrutural da δ-CD, CD-ε, e ι-CD foram realizadas, e as referências às CDs com mais de 60, e várias centenas de unidades de glicose foram feitas. CDs com mais de 100 glicoses no anel foram preparados pela ação de enzima desproporcionada erruamilase. De forma semelhante ao caso de CDs de nativos (a-CD, CD-β, γ-CD), o estudo da complexação e observação das propriedades da LR-CDs também começaram. Desde CDs consistem D opticamente ativas unidades de glicose, que formarão com um composto racêmico um par de complexos diastereoisomérica, geralmente de diferentes estabilidades. Portanto, tanto as LR-CDs, como as CDs nativas, são reagentes potenciais para a resolução quiral que é de importância prática para a ciência de separação (reconhecimento molecular e separação de intimamente relacionado compostos, incluindo os isômeros geométricos e estruturais) e para a indústria farmacêutica (atividade farmacológica de diferentes enantiômeros de um quirais formação de compostos). Além disso, a inclusão complexacional não parece ser um pré-requisito para os reconhecimentos, quirais

As CDs são capazes de formar complexos externos e também, suficientemente fortes com enantioseletividade em alguns hóspedes como éxemplo as moléculas quirais. As LR-CDs podem ser moléculas consideradas como boas anfitriãs para hóspedes de tamanhos relativamente grandes, e é por isto que esta ciclodextrinas são as principais nano-carreadoras para o carreamento das moléculas de TOXINA BUTOLINICA, e outras moléculas ou componentes considerados relativamente grandes. A microanálise nas técnicas de separação de enantiômeros como eletroforese capilar pode servir como uma fonte útil de dados experimentais (estrutura, dinâmica populações dos complexos) para avaliar a confiabilidade dos protocolos da modelagem molecular. Ueda et al, resumiram em uma mini revisão sobre os resultados LR-CDs com relação ao potencial de carreador/carreado, suas interações e as possíveis aplicações correspondentes (disponível no CD-misturas contendo LR-CDs com um grau de polimerização de 9-21 foram examinadas como alimento aditivos no Japão; as LR-CDs misturas com grau de polimerização de 22-45, e maior de 50 exibiram efeito artificial eficiente acompanhante para "refolding" da proteína (a primeira prática aplicação do LR-CDs). Os complexos de inclusão de CDs de até 17 unidades de glicose com benzoatos diversos, salicilato ânion ibuprofeno e 1-carboxilato adamantano têm sido estudados e constantes de sua formação ter sido determinada, constantes de associaçãp para os CDs ter mais de 10 glicoses são geralmente pequenos (<40 M-l·)·. No entanto, a LR-CDs com 21-33 unidades de glicose formam complexos de inclusões estáveis com iodo em solução aquosa, como demonstrado por calorimetria de titulação isotérmica constante (formação de cerca de 1-7 103 M-l). A 29 δ-CD demonstrada para formar um complexo estável com o C70, que permite a sua solubilização na água tem se provado que η- CD (12 glicoses) é eficaz na separação parcial de LR-CDs, principalmente nas análises, estruturais de raios-X, foram pesquisadas em estudos computacionais e também foram quotadas. Críticas foram especialmente dedicadas às aplicações de técnicas de modelagem molecular para o estudo da estática e as características dinâmicas dos CDs, bem como a sua participação no complexo formado entre carreador e carreado. No entanto, eles são principalmente centrados em CDs nativa. Diversos estudos têm utilizado dinâmica molecular (MD) e simulações (com comprimentos de 100-400 PS) para examinar a conformação de macro anéis LR-CDs contendo 10, 14, 18, 21, 24 e de 48 unidades de glicose tanto no vácuo ou em solução de água. A circularização três, pode virar uma estrutura helicoidal única proposta para CD21 em espalhamento de raios-X pequeno e o ângulo foi mostrado, com simulações bastante curtas na MD (100 PS), a persistir na água a 300 K.34. Recentemente, foram relatados resultados de estudo sobre CDs com um grau de polimerização de 26, 30, 35, 40, 55, 70, 85 e 100, usando muito mais simulações de dinâmica molecular (5,0 ns para todos, exceto para o de 26 para que o MD foi de 10,0 ns). Embora os resultados tenham sido mais tarde publicados, o último estudo de 43 foi acompanhado de analisar a dependência do campo de força do modelagem de LR-CDs através da realização de simulações de 5,0 ns da CDN (η =Λ4, 21, 26, 28), bem como os CDs nativas, como moléculas isoladas em fase gasosa () e em solução aquosa, utilizando quatro diferentes campos de força - MM3 *, (dentro de macromodelo) e ou parm94, 47 parm99, 48 e glycam2000a parametrizações de AMBER. Dois estudos de dinâmica molecular focados em LR várias CDs CD26 acompanhamento, a maior do CD para que dados de raios-X está disponível, usando diferentes pontos de partida geometrias: (i) 5,0 ns simulações de CDN (n = 24, 25, 26, 27, 28, 29) com CD30-derivadas a partir geometrias e do campo de força AMBER parm99 como um modelo de mecânica molecular, e (ii) 10,0 ns simulações de CDN (n = 24, 25, 27, 28, 29, 30) com CD26-derivadas a partir geometriese Glycam o novo campo de força-04 para carboidratos.

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Figura 1- Ciclodextrina de anéis largos contendo 26 moléculas de glucose. Tanto o controle dos fundos estruturais, variações durante as simulações, bem como as análises de balanços energéticos foram indicativos para alta flexibilidade do macro anéis. Diferentes locais e motivos estruturais foram detectados. Os resultados fornecidos deram maiores apoios para a hipótese da existência de mais de uma cavidade no grande anel ciclodextrinas e sugeriu conformações preferenciais em solução de água para a LR-CDs com grau de polimerização de 24-30. .As simulações estas não foram tempo suficiente para analisar na íntegra a dinâmica conformacional destas moléculas flexíveis, mas não forneceu informações úteis sobre a conformação dinâmica e energética da LR-CDs.

Utilizando raios-X geometrias de partida, o período de simulação muito mais tempo (20,0 ns), e os novos Glycam-04 no campo de força AMBER para carboidratos, de pequenas variações no número anterior ao protocolo de simulação os quais também foram feitos, e elas parecem ser de importância para as análises dos algumas propriedades, como a distribuição de ligações de hidrogênio.

As CDs normalmente são nomeadas usando Ietras^gregas como prefixos para uma melhor compreensão. A seguir a nomenclatura utilizada será baseada na que foi adaptada para o cicloamiloses: um número aditado CD designa o número de unidades no macrociclo (por exemplo, o CD24 é ciclodextrina com 24 resíduos de glicose).

Contudo, a continuidade das pesquisas feitas por este inventor apontou a eficiência ainda mais intensa no uso de ciclodextrinas modificadas, tais como hidroxipropil Beta Ciclodextrina, e todas as demais ciclodextrinas modificadas com qualquer tipo de substituição do grupo hidroxila, ciclodextrinas metiladas, como exemplo a DIMEB e a TRIMEB, ciclodextrinas ramificadas, ciclodextrinas com cargas e por fim polímeros de ciclodextrinas. Essas ciclodextrinas estão abrangidas nos compostos objeto do presente pedido de patente de invenção. A preparação de tais nanocápsulas é conhecida na literatura, valendo como referência Cunha Filho e Sá Barreto. 2.2.2.3. Lipossomos e micro e nano emulsões

Micro e nano emulsões também apresentam grande potencial como veículos de liberação de fármacos lipofílicos via intravaginal e retal, tais como, microbicidas, esteróides e hormônios, porque aumentam a capacidade de solubilização de fármacos, aumentam absorção e melhoram a eficiência clínica. Entretanto, o uso desse sistema para administração intravaginal e intraretal impôs rigorosas exigências no que diz respeito à toxicidade e a biodisponibilidade da formulação.

As microemulsões são freqüentemente compostas por misturas de quatro componentes, tais como tensoativo, óleo, co-tensoativo e água. Quando uma mistura de tensoativos e co-tensoativos é adicionada a um sistema bifásico do tipo água-óleo, um sistema isotrópico, opticamente transparente ou translúcido e termodinamicamente estável é formado espontaneamente. A natureza e a estrutura do tensoativo, do co-tensoativo, e do óleo são características essenciais para formulação desse sistema. E o domínio da existência de sistemas microemulsionados podem ser identificados através do diagrama de fases pseudoternário (CRUZ et. al., 2001).

Recentemente muita atenção tem sido dada à utilização de fosfolipídios em microemulsões, pois estes contornam problemas de toxicidade e essa característica faz com que sejam excipientes de primeira escolha, especialmente ao preparar-se microemulsões para uso parenteral (PARK et al., 1999).

As nano emulsões podem ser feitas a partir de:

a- Fosfatidilcolinas

As fosfatidücolinas (Lecitinas) em particular são bem conhecidas por formarem sistemas microemulsionados com baixas quantidades de água e como resultado 30 tem-se a obtenção de organogéis que funcionam como matrizes para liberação de drogas via transdérmica, ou seja, uso tópico (WILLIMANN et al., 1992). A lecitina é uma mistura complexa de fosfatides insolúvel em acetona, os quais consistem principalmente de fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina e fosfatidilinusitol, combinados com várias quantidades de outras substâncias tais como triglicerídeos, ácidos graxos e carboidratos (HANDBOOK, 2000).

A composição da lecitina e as propriedades físicas são dependentes da origem e do grau de purificação. A sua categoria funcional é emoliente, agente emulsificante e agente solubilizante e podem ser utilizadas em preparações farmacêuticas injetáveis (intramuscular e intravenosa), formulações para nutrição parenteral e produtos tópicos tais como cremes e pomadas, além de ser usada em produtos alimentícios (HANDBOOK, 2000).

As características da fosfatidilcolina (FS) em solução devem ser consideradas ao preparar microemulsões baseadas em fosfolipídios para uso parenteral. A FS apresenta características fortementehidrofóbicas devido às duas longas cadeias de hidrocarbonetos e apresentam também características fortemente hidrofílicas devido à cabeça de grupos zioteriônicos polares, os quais têm momentos dipolo. Há uma proximidade de balanço entre as propriedades hidrofílicas e lipofílicas.

A fosfatidilcolina é lipofílica demais para formar espontaneamente a camada lipídica de tensão interfacial zero necessária para a formação de uma microemulsão. Então, um co-tensoativo, tal como álcool de cadeia curta, é necessário para formar esse sistema (PARKetal., 1999).

A fosfatidilcolina é um tensoativo natural, e devido a esta característica é rapidamente difundido na interface óleo-água. Microemulsões compostas de fosfolípidio têm mostrado melhorar as lesões gástricas induzidas por fármacos antiinflamátorios não esteroidals (LEYCK et al., 1985; CRUZ et al., 2001).

A lecitina apresenta em diversas formas físicas desde semilíquidos viscosos a pós, dependendo do conteúdo de ácidos graxos livres. Estas podem apresentar várias colorações desde marrom a amarelo claro, dependendo do seu grau de pureza. Quando expostas ao ar, rapidamente sofrem oxidação, resultando em uma coloração amarela escura ou marrom. São praticamente inodoras. As derivadas de origem vegetal apresentam um sabor agradável, similar ao óleo de soja. Apresentam densidade de 0,97g/cm3, a Iecitina líquida, e 0,5 g/cm3 a composição em pó. O número de saturação é para 95-100 e 82-88 para líquida e pó, respectivamente. O ponto isoelétrico é 3,5 e o índice de saponificação é de 196. As Iecitinas são solúveis em hidrocarbonetos alifáticos, aromáticos e halogenados, óleos minerais e ácidos graxos. Elas são praticamente insolúveis em óleos animais e vegetais frios, solventes polares e água. Quando misturadas em água estas são hidratadas para formar as emulsões (HANDBOOK, 2000).

As Iecitinas decompõem-se em pHs extremos. Elas são higroscópicas e estão sujeitas a degradações microbianas. Quando aquecidas, oxidam, escurecem e se decompõem. As temperaturas de 160-1809 C, irão causar degradação com 24 horas. Lecitinas fluídas*bu"céras deveriam ser estocadas a temperatura ambiente ou acima.

As Iecitinas são biocompátiveis, contornam problemas de toxicidade e sensibilidade, portanto podem ser usadas como adjuvantes farmacotécnicos em comprimidos, preparações tópicas, vaginai e retal, suspensões, cápsulas, injeções intravenosa e intramuscular e preparações para uso inalatório (HANDBOOK, 2000).

b - Óleo de Rícino Polioxil-40-Hidrogenado

O Óleo de Rícino Polioxil-40-Hidrogenado ocorre naturalmente, é um óxido etileno derivado do óleo castor e aproximadamente 75% da mistura de seus componentes são hidrofóbicas. Estes incluem principalmente ésteres de ácidos graxos de glicerol polietilienoglicol e ésteres de ácidos graxos de polietilenoglicol. A porção hidrofílica consiste de polietilenoglicóis e etoxilatos de glicerol. Como é um tensoativo do tipo não-iônico, é utilizado em formulações farmacêuticas de uso oral, tópico e parenteral e também tem sido utilizado èm formulações cosméticas e alimentícias. É amplamente utilizado como agente emulsificante, solubilizante, molhante e adjunto de formulações farmacêuticas (HANDBOOK, 2000).

Quando utilizado em soluções hidroalcoólicas e aquosas, o óleo de castor polioxil-40- hidrogenado, pode ser usado para solubilizar vitaminas, óleos essenciais e certos fármacos (HANDBOOK, 2000).

O óleo de castor polioxil-40-hidrogenado é encontrado na forma de uma pasta branca semi-sólida, a qual se liqüefaz a 309 C. Apresenta fraco sabor e odor característico em soluções aquosas. Quando em soluções aquosas, se aquecido por tempo prolongado, pode separar em fases líquidas e sólidas quando resfriada. Entretanto, o produto pode ser restituído na forma original por homogeneização. Essas soluções aquosas podem ser esterilizadas por autoclave a 121e C, mas podem causar pequena diminuição do pH. Estas soluções podem sofrer contaminação microbiana na estocagem e devem ser estocados em frascos hermeticamente fechados, protegidos de luz em ambiente fresco e seco (HANDBOOK, 2000).

O óleo de castor polioxil-40- Iridrogenado produzido pela reação de 1 mol de óleo castor hidrogenado com 40-45 moles de óxido de etileno. Testes de toxicidade crônica e aguda em animais têm mostrado que derivados de óleo castor polioxietileno contornam problemas de toxicidade e irritação (HANDBOOK, 2000).

O polioxil-40-hidrogenado apresenta propriedades físicas tais como equilíbrio lipófilo-hidrófilo igual a 14-16, ponto de fusão igual a 30, ponto de solidificação = 21-23, pH 6-7, índice de refração 1,453-1,457, Viscosidade a 255 C é de 20-40 mPa.s e concentração micelar crítica (%) igual a 0,039.

É solúvel em óleo castor, clorofórmio, etanol, ácidos graxos, óleo de oliva, álcoois graxos e água (HANDBOOK, 2000). c - Colesterol

0 colesterol é de origem animal e também pode ser produzido de acordo com a regulação da alimentação humana. É um material estável, não irritante e que contorna problemas de toxicidade quando empregado como excipiente. A sua categoria funcional é de emoliente e agente emulsificante e este pode ser utilizado para preparações farmacêuticas injetáveis, oftálmicas, tópicas e vaginais (HANDBOOK, 2000).

O nome químico do colesterol é colest-5en-3p-ol. O seu peso molecular é de 386,7. Este apresenta ponto de ebulição de 3609 C; densidade de l,052g/cm3 para a forma anidra; constante dielétrica D20:5,41 e ponto de fusão de 147-150°C. É solúvel em acetona, óleos vegetais, benzeno, clorofórmio, éter, pouco solúvel em etanol e metanol e praticamente insolúvel em água (HANDBOOK, 2000).

Pó branco ou ligeiramente amarelo, inodoro, é encontrado na forma de pequenas folhas peroladas, agulhas, pó ou grânulos. É higroscópico e uma pequena exposição à luz e ao ar, este adquire coloração amarela,, portanto o frasco contendo esta substância deve ser hermeticamente fechado e protegido da luz (HANDBOOK, 2000).

d- Oleato de Sódio

O oleato de sódio apresenta peso molecular de 304,45, ponto de fusão de 232-235 e fórmula estrutural de CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7C02Na (ALDRICH, 2000-2001). É um sal do ácido oléico sódico, eunatrol. Geralmente contém pequenas quantidades de sal de sódio esteárico, ácido e etc. (MERCK INDEX, 2001).

e-LDE

O LDE é uma molécula artificial, resultante da manipulação do LDL, caracterizando-se pelo tamanho nanométrico e grande afinidade a substâncias hidrofóbicas, permitindo assim que essa mesma molécula seja uma carreadora de fármacos hidrofóbicos. Cuida-se o LDE de uma nano molécula artificial, sendo estas nano moléculas ricas em colesterol em pacientes com neoplasias malignas do trato genital e da mama. Desta feita, poder-se-á comprovar se que a emulsão lipídica artificial, LDE, atua como veículo útil na incorporação de agentes citotóxicos e sua possível utilização no tratamento quimioterápico.

2.2.2.4. DENDRÍMEROS

Dendrímeros são macromoléculas monodispersas, altamente ramificadas, apresentando estruturas bem definidas e um peso molecular uniforme. Esta classe de compostos tem recebido grande atenção dos pesquisadores nestes últimos anos devido à particularidade de suas propriedades físicas e químicas. Atualmente alguns estudos têm sido realizados.utilizando-se dendrímeros com núcleos dendríticos porfirínicos. Os dendrímeros são sistemas de dimensões nanoscópicas, que possuem uma estrutura altamente organizada. Este tipo de molécula possui superfícies e interfaces altamente controladas e= apresenta vazios internos, o que permite, por exemplo, o encapsulamento de moléculas hóspedes, à semelhança de uma micela, ou seja, atuando como uma micela monomolecular (Nelson Massaki Hiramatsua, Ivan Pérsio de Arruda Campos e Daisy de Brito Rezende).

Os dendrímeros aptos ao emprego na presente patente podem ser do tipo (i) carbossilanos, (ii) carboxilanos, (iii) polifenilenos, (iv) políesteres e (ν) PAMAM.

A colocação dos membros da família dos elementos da família da droga botulínica poderá ser complexada entre os espaços vazios encontrados nos complexos formados de dendrímeros. Tal é possível devido a este tipo de molécula possuir diversas superfícies e interfaces altamente controladas e apresentar vazios internos, o que permite, por exemplo, o encapsulamento de moléculas hóspedes, à semelhança de uma micela, ou seja, atuando como uma micela monomolecular. 2.2.2.5. Os polímeros encapsuladores para fármacos

A preparação de nano e microesferas através de polimerização em micelas reversas ou mesmo novas formulações de comprimidos com resistência gástrica, utilizando como componentes polivinilpirrolidona reticulado, alginato de sódio, goma xantana e bicarbonato de sódio, dirigindo-se a absorção ao trato gastrointestinal. Os polímeros podem ser:

i. Polímeros naturais: são sempre biodegradáveis como, por exemplo, o colágeno, a celulose e a quitosana e são muito utilizados como matrizes em liberação de fármacos. Um exemplo é a aplicação de quitosana enxertada com poli (ácido acrílico), formando um copolímero, na confecção de nanoesferas para se estudar a liberação controlada em função do tempo, utilizando-se eosina, um corante solúvel em água, como marcador.

ii. Polímeros naturais modificados: um problema encontrado em polímeros naturais é que eles freqüentemente levam muito tempo para degradar. Isto pode ser resolvido adicionando-se grupos polares às cadeias, que, por serem mais lábeis, podem diminuir o tempo de degradação. Exemplos destas modificações podem ser a reticulação de gelatina utilizando-se formaldeído, a reticulação de quitosana utilizando-se glutaraldeído, levar celulose a acetato de celulose. Modificações enzimáticas também são utilizadas, como a modificação de quitosana por tirosinase.

iii. Polímeros sintéticos: são também largamente utilizados, como, por exemplo, poli(etileno), poli(álcool vinílico), poli(ácido acrílico), poli(acrilamidas), poli(etilenoglicol), poliésteres. No caso dos poliésteres, estes são mais utilizados pelo químico e têm no poli(glicolato) o polímero alifático linear mais simples. 0 monômero glicolato é sintetizado a partir da dimerização do ácido glicólico e a polimerização por abertura de anel leva a materiais de alta massa molar, com aproximadamente 1-3% do monômero residual. Na prática, copolímeros de glicolato com I-lactato e dl-lactato são os mais utilizados em sistemas de liberação controlada, com vantagens. Uma delas é o menor tempo de degradação. Este menor tempo de degradação se explica devido à amorfização provocada pela quebra da regularidade entre as cadeias na presença do monômero em copolímeros de I-lactato com 25— 70% em glicolato. Uma estrutura típica de um polímero biodegradável é a do poli(ácido láctico).

São também preparados copolímeros-bloco compostos de PEO-PPO-PEO (Pluronic, um copolímero-bloco relativamente hidrofílico) e poli (0-caprolactona) (hidrofóbico) obtido a partir da abertura de anel de Θ-caprolactona na presença de PEO-PPO- PEO e catalisador octoato estanoso. (Drumond W. S.; Wang, S. H. - "Síntese e Caracterização do copolímero Poli ácido lático-B-Glicol Etilênico" Polímeros: Ciência e Tecnologia, 14, η 2, ρ. 74-79, 2004).

2.2.2.6. Técnicas de elaboração das çomplexações e nanocápsulas listadas supro Ciclodextrinas

A complexação de elementos da família dos elementos da familia da droga botulínica, salicilatos, sulfasalazina, doadores de NO, tal como a patente José Emílio Fehr Pereira Lopes, em ciclodextrinas, alfa, beta e gama, hidroxipropil Beta ciclodextrina, ciclodextrinas modificadas com qualquer tipo de substituição do grupo hidroxila (1), ciclodextrinas metiladas, como exemplo a DIMEB e a TRIMEB, ciclodextrinas ramificadas, ciclodextrinas com cargas e por fim polímeros de ciclodextrinas (Figura 1).

Métodos de preparação das Ciclodextrinas baseados na descrição de Cunha Filho e Sá Barreto

Em solução aguosa A obtenção de complexos de elementos da família dos elementos da família da droga botulínica, elementos da família dos salicilatos e doadores de oxido nítrico, denominados nesta patente como denominação fantasia de fármacos, F-CD (F-CD) em solução é relativamente simples e rápida. O procedimento de preparação mais habitual consiste na solubilização da CD em água ou solução tampão e posterior adição do composto ativo em excesso. A suspensão resultante permanece a temperatura constante, sob agitação, por um intervalo de tempo suficiente para atingir o equilíbrio termodinâmico de encapsulação (Rajewski & Stella, 1996).

Alguns produtos necessitam vários dias, enquanto que outros requerem apenas algumas horas. Técnicas auxiliares, como a utilização de ultrasom, conseguem acelerar o processo de equilíbrio e são comumente utilizadas.

A formação de complexos é um processo exotérmico e a redução da temperatura normalmente favorece a sua formação (Loftsson & Brewster, 1996). A adição de cosolventes, na maioria das ocasiões, diminui a capacidade de encapsulação de fármacos devido a uma competição que se estabelece pela cavidade hidrofóbica da CD (Pitha et al. 1992).

Em estado sólido

A estrutura sólida de misturas binárias entre fármaco e CD pode ser bastante diferente das encontradas em soluções aquosas. Nestas, há um equilíbrio dinâmico entre as moléculas em um meio polar, enquanto que os sistemas Ciclodextrina Sólidos são estáticos e sofrem limitada influência do seu conteúdo aquoso residual. A maioria dos métodos de preparação de complexos sólidos inclui diferentes graus de solubilização como etapa intermediária do seu processo de obtenção. A presença da água solubiliza os componentes e favorece a interação hidrofóbica entre a molécula hóspede e a CD. Em alguns casos, a água fomenta a formação de pontes de hidrogênio entre os grupos hidroxílicos e auxilia a captação e manutenção do fármaco na cavidade da CD, fazendo parte da estrutura cristalina do complexo no estado sólido (Hedges, 1998).

Os sistemas farmacêuticos sólidos contendo fármaco e CD são estruturas heterogêneas que podem estar constituídas pelos seus componentes individuais não complexados, e/ou por diferentes tipos de associações entre eles, como na forma de complexos de inclusão de diferentes estequiometrias e níveis de inclusão ou como agregados com variável estado cristalino ou amorfo. Por esta razão, a eficiência de complexação (relação entre fármaco livre e complexado) destes sistemas é completamente dependente do processo de preparação. Devido às características particulares inerentes a cada sistema binário F-CD, não existe uma técnica geral de preparação. As condições devem ser definidas para cada molécula hóspede. Nesta seção, serão discutidos os métodos mais comumente utilizados na obtenção de complexos sólidos, avaliando os diferentes aspectos envolvidos.

Mistura física

Este método baseia-se na simples mistura dos componentes sem adição de água. Em alguns casos são necessários vários dias para detectar-se a formação de complexos de inclusão. Em geral é um método de complexação pouco eficiente, restrito a princípios ativos líquidos, como a essência de limão, que atua como solvente, propiciando a encapsulação dos óleos essenciais em escassos minutos (Hedges, 1998).

Malaxagem

Consiste em formar uma pasta a partir da adição da mínima quantidade de líquido (água ou misturas etano-aquosas) suficiente para umedecer a mistura em pó de fármaco e CD. Em escala laboratorial, é realizada em um almofariz com auxílio de um pistilo (Fernandes & Veiga, 2002; Cirri et al., 2005b; Cunha-Filho et al., 2007). Industrialmente, a mistura de componentes é efetuada em uma malaxadora. A secagem do material pode ser feita em estufa ou diretamente na malaxadora acompanhada de pulverização para uniformizar o tamanho de partícula.

Variações desta técnica utilizando extrusores de calor ou granuladores de leito fluidizado são reportadas (Suzuki et al., 1993; Zema et al., 2001; Mura et al., 2005).

Devido à simplicidade, ao elevado rendimento e à facilidade de transposição de escala, este método é um dos mais utilizados na indústria farmacêutica, ainda que sua eficiência de complexação seja inferior à conseguida com outras técnicas.

Atomizacão

Representa um dos métodos mais empregados para produzir complexos de inclusão a partir de uma solução. A mistura parcial do sistema e a rápida eliminação de água propiciam uma eficiência de complexação elevada. Além disso, esta técnica permite controlar o tamanho de pjartículas,obtido em intervalos bastante estreitos, fundamental, por exemplo, para obtenção de pós de administração pulmonar (Vozone & Marques, 2003).

O baixo rendimento e o estresse térmico são algumas das limitações desta técnica (Fernandes & Veiga, 2002).

Liofilizacdo

Consiste na eliminação de solvente dos sistemas em solução, através de um prévio congelamento e posterior secagem a pressões reduzidas. Esta técnica permite a obtenção de complexos de inclusão com elevado rendimento e um baixo estresse térmico. Geralmente se obtêm pós secos, amorfos e com elevado grau de interação fármaco-CD (Cao et al., 2005; Ventura et al., 2005; Rodriguez-Perez et al., 2006).

Apresenta como desvantagens, o longo tempo de processamento e as más características de fluxo do material obtido. Coprecioitacão

Esta técnica parte de uma solução de fármaco e CD em condições muito próximas à saturação e através de mudanças bruscas de temperatura ou adição de solventes orgânicos, se obtém a precipitação do aterial em forma de complexo de inclusão. Os cristais obtidos são coletados por centrifugação ou filtração (Miro et ai., 2000).

Este método é bastante utilizado em escala laboratorial, sendo freqüentemente empregado na obtenção de complexos de inclusão cristalinos com a CD. No entanto, o baixo rendimento conseguido em escalas maiores, o risco de formação de complexos de inclusão com solventes orgânicos e o longo tempo do processamento (um a três dias) torna-o pouco atrativo em escala industrial (Hedges, 1998).

Fluidizacão supercrítica

Constitui um dos métodos mais inovadores de obtenção de complexos ém estado sótido. O desenho de partículas empregando CO em estado supercrítico confere aos materiais obtidos por esta técnica, características únicas quanto à interação (Palakodaty & York, 1999).

Apesar de ser um método atóxico (não utiliza solventes orgânicos), rápido, quimicamente estável (utiliza temperaturas moderadas), de baixo custo de manutenção e com promissores resultados descritos na literatura, ainda é uma técnica experimental e que apresenta um custo inicial bastante elevado (Junco et al., 2002; Al-Marzouqi et al., 2007).

Dendrimeros

Para gerar o dendrímero, baseado em estudo prévio feito por Nelson Massaki Hiramatsua (IC), Ivan Pérsio de Arruda Campos (PQ) e Daisy de Brito Rezende (PQ), é necessário primeiramente sintetizar o precursor zero A preparação envolve quatro etapas, duas das quais encontram-se otimizadas.

A partir de 1, foi gerado seu enolato por adição de sódio metálico.

Adicionando-se I2, a refluxo, obtém-se 2,.caracterizado (IV e RMN de 1H) como sendo um dímero do éster malônico3. Na segunda etapa da síntese de 5, que consiste na metilação de 2, gera-se o sal sódico seguida de adição de iodeto de metila a refluxo, obtendo-se o composto 3, identificado por RMN de 1H e micro-análise. (Figura 2)

As próximas etapas da síntese de 5 consistem na reação de redução dos grupos éster do di-metil-b/s-malonato de tetraetila (3) e bromação dos grupos álcool assim formados, obtendo-se 5. Com 5 sintetizado, será feita a síntese das primeiras gerações do dendrímero (Figura 3). De uma maneira geral, a síntese do dendrímero seguirá praticamente o mesmo esquema da síntese do precursor 5, consistindo numa substituição do bromo pelo enolato do éster malônico; redução dos grupos éster e uma nova etapa de bromação dos grupos álcool assim formados.

Podendo estes dendrímeros ser CARBOSSILANOS E CARBOSSILOXANOS POLIFENILENOS, POLI ESTERES.

A colocação dos membros da família dos elementos da família da droga butolínica poderá ser complexada entre os espaços vazios encontrados nos complexos formados de dendrímeros. Devido a este tipo de molécula possuir diversas superfícies e interfaces altamente controladas e apresentar vazios internos, o que permite, por exemplo, o encapsulamento de moléculas hóspedes, à semelhança de uma micela, ou seja, atuando como uma micela monomolecular.

Dendrímeros PAMAM

Fórmula: Os elementos da família dos elementos da família da droga butolínica, inclusos nas modalidades acima descritas dos mesmos. MÉTODO DE PREPARO:

As drogas usadas, sendo as revindicadas nesta patente: elementos da família da droga botulínica, podem ser encapsuladas, primeiramente com a escolha do dendrímero estrutural adequado aos usos que se propõem (os dendrímeros que poderão ser usados no produto final, objeto de reivindicação desta patente, estão nela citada). Uma vez escolhido o dendrímero, a micela procede-se de maneira geral do seguinte modo: Em recipiente, deve ser colocada a molécula e o tamanho do mesmo definido, forma simples ou composta, e adicionado ao mesmo recinto o dendrímero selecionado, e portador do tamanho adequado ao encapsulamento. Coloca-se a solução em agitamento, por tempo que pode variar entre 15 minutos a 24 horas, dependendo do tamanho da molécula que se deseja atingir.

Uma vez iniciado o processo de mistura, mantida por agitação^a.soluçãoxom os dendrímeros em presença da substancia a ser encapsulada, sempre na proporção molar (dendrímeros: substância desejada) adequada. Para que esta mistura seja feita de forma efetiva e homogênea, usasse um solvente que solubilize tanto os dendrímeros quanto a molécula desejada (pode ser metanol, água ou misturas dos dois solventes ou de outros solventes), a temperatura ambiente, por 24 horas e, se necessário, em atmosfera inerte. Após este período o solvente é destilado à pressão reduzida.

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2.3. Resumo do estado da técnica e avanço da técnica trazida pela invenção

De um lado, é já conhecido no estado da técnica o variado emprego bioterapêutico das substâncias ativas acima referidas (cf. tópico 2.2.1 supra). Também é conhecido na ampla literatura técnica os vários tipos de nanoencapsulamento referidos também nos subtópicos acima (cf. tópico 2.2.2 supra).

O estado da técnica justamente debate-se com a dificuldade em transportar tais elemèntos ativos em sua integridade estrutural ao sítio específico a ser alvo da terapia, sem que ocorra a necessidade do uso de agulhas ou pistolas de pressão, usada na aplicação de vacinas, citada aqui como exemplo. No percurso trilhado pelas substâncias ativas acima identificadas, segundo conhecimento do estado da técnica, as mesmas sofrem degradação precoce provocada pelo metabolismo corpóreo e ainda têm dificuldade de concentração da droga butolínica no local esperado, o seu sítio de efeito.

O estado da técnica não produziu compostos mediante o nanoencapsulamento das substâncias ativas acima citadas, nem muito menos a complexação das mesmas com ciclodextrina feitas com as estruturas de anéis largos.

Os compostos ora objeto do presente pedido de patente de invenção caracterizam-se justamente por tais inovações. Isto é, são formadas pelo nanoencapsulamento dos princípios ativos acima identificados e complexação, ou também denominadas de inclusões nas ciclodextrinas de anéis largos, bem como pelo emprego da mesma droga botulínica em todos os possíveis nanocarreadores-

3. A INVENÇÃO: SEUS OBJETIVOS E SOLUÇÕES TRAZIDAS PELA MESMA

A presente invenção abrange compostos contendo (a) elementos da família das toxinas butolínicas, puras ou não, modificadas ou não, (b) sozinhas ou tendo estas mesmas moléculas fazendo parte da constituição de outras inúmeras moléculas, todos esses compostos opcionalmente em complexos de inclusão e/ou nanoencapsulados em (I) ciclodextrinas de anéis largos, modificadas ou não, acrescidas de um maior numero de moléculas de glucose, e ainda com as possíveis mudanças das ciclodextrinas hidroxipropil beta ciclodextrina, randomly metilada beta ciclodextrina, e sulphobutylether beta ciclodextrinas, (II) Iipossomos compostos de fosfatil-colina, e/ou qualquer outro carreados lipidico, naturais ou sintéticos, puros e/ou coligados a quaisquer outros elementos (III) ácidos graxos e seus derivados, (IV) colesterol, modificado e ou não artificialmente, (v)ab~c~d~ e-f-g-h-i Polimeros biodegradáveis e absorvíveis,Jeitos.de.materiais puros ou não, simples"e/ou compostos, naturais e ou sintéticos, constituídos por: a- elementos carbonicos, b- sílica, c- cristais, d- materiais orgânicos, tais como: proteínas, virus, fungos, bactérias e/ou seus derivados e/ou seus substratos, derivados celulares e sangüíneos, e- com funções e/ou f- ativações magnéticas, g- termolabeis, h- fotosensiveis, modificados quimicamente, i- roboticos, (VI) dendrímeros, (VII) nanoesferas, (VIII) talosferas, (IX) nano-emulsões e (X) micro-emulsões preparadas com base nas substâncias supracitadas, combinadas para uso como agentes (1) antitumorais, em uma grande variedade de cânceres em indivíduos mamíferos e não mamíferos, (2) antivirais, (3) antibacterianos, (4) fungicidas, (5). antiparasitários, (6) analgésicos, (7) antiinflamatórios, (8) imuno-moduladores, (9) anticoagulantes, (10) cicatrizantes, (11) tensioreguladores, (12) cosméticos e cosmético- dermatológico, (13) de suplementação alimentar, (14) terapêutico-vascular, (15) hematomoduladores, (16) pro-angiogênicos e anti-angiogênicos, (17) moduladores de ereção e Iibido sexual, (18) antidegeneradores do sistema nervoso central (SNC) e (19) agentes antienvelhecimento. 3.1 - A superação das dificuldades do estado da técnica - Benefícios/ganhos alcançados pelos compostos ora objeto de requerimento de patente de invenção

Para solucionar as dificuldades vivenciadas no estado da técnica conforme acima descrito, opta-se pelo encapsulamento, que, de um lado, evita a degradação prévia do composto encapsulado, e, de outro, favorece a solubilidade em meios variados para uso farmacêutico. Principalmente a aplicabilidade da Toxina Botulínica, feita por meio trans- dérmico, sem o uso de seringas ou aplicações traumáticas evitando que haja os efeitos colaterais decorrentes do processo após aplicativo, tais como edema, dores, e possíveis processos compliticativos como infecções, e em graus mais elevados; ulcerações e abscessos.

Os compostos cuja patente de invenção ora se requer, obtidas da conjugação dos compostos ativos acima descritos nas nanocápsulas acima arroladas, resolvem o problema vivenciado no estado da técnica.

Com efeito, no estado da técnica dá-se ,,que os compostos ativos acima referidos - com potencialidades terapêuticas já identificadas - não conseguem alcançar de forma estruturalmente íntegra o alvo desejado para fins terapêuticos, justamente porque (a) ou são objeto de dificuladade de aplicacao, para o devido alcance da droga no alvo desejado, corpóreo, (b) ou ofertam possibilidades de sintomas indevidos depois da aplicação, (c) ou ainda, apresentam eficácia colateral negativa devido à toxicidade sobre tecidos e órgãos sãos.

Os compostos obtidos ao ensejo do nanoencapsulamento - nas nanocápsulas acima aludidas e consoante as medidas objeto deste requerimento de patente (de um nanômetro a 999 nanômetros) - ensejam soluções para todas essas dificuldades: (i) impedem a biodegração precoce do composto ativo, pois o encaminham íntegro ao alvo terapêutico desejado; (ii) proporcionam ou aumentam a solubilidade aquosa, facilitando a administração futura de novos fármacos; principalmente o uso da Toxina Butolinica transdérmica com a aplicação da mesma via tópica e, (iii) uma vez obtido o transporte íntegro do composto ativo ao alvo terapêutico desejado, evitam-se ou diminuem-se drasticamente efeitos tóxicos colaterais que decorreriam do metabolismo precoce da referida substância durante o percurso do fármaco até o sítio a ser objeto da terapia.

Os compostos objeto do presente requerimento de patente de invenção, devido ao nanoecapsulamento empregado, facilitam a entrada dos princípios ativos carreados junto à terminações nervosas atingindo o local e assim detendo a patologia em andamento, ou diminuindo os efeitos degradativos que podem ser diminuídos e ou atenuados. Outrossim, justamente por proporcionar o ingresso da estrutura íntegra de seu princípio ativo, os compostos que ora são objeto de requerimento de patente de invenção demandam menor quantidade do fármaco para alcançar resultados terapêuticos satisfatórios, resultando assim uma diminuição drástica da posologia tradicionalmente administrada. Nesse mesmo caminho, reforça-se a diminuição da toxicidade oriunda dos subprodutos do metabolismo dos princípios ativos.

Outro problema também resolvido pelos compostos ora objeto de patente de invenção está em impedir a formação de complexos de ativação.imunológica*desativadorés do fluxo da droga, via corrente sárrgcrrnea. Tar efeito é obtido pelas mudanças morfológicas dos vários invólucros abrangidos no presente pedido de patente de invenção. Mediante mudanças nas estruturas das compostos ora objeto de requerimento de patente de invenção burla-se o reconhecimento imunológico corpóreo, resultando em menor resistência ao fármaco.

3.2 - Descrição detalhada da invenção

A presente invenção abrange compostos contendo (a) elementos da família das toxinas botulínicas, puros ou não (b) compostas ou não, (c) da formação de novos compostos a partir das moléculas formadas por este processo tais como, combinadas para uso potencial como agentes (1) antitumorais, em uma grande variedade de cânceres em indivíduos mamíferos e não mamíferos, (2) antivirais, (3) antibacterianos, (4) fungicidas, (5) antiparasitários, (6) analgésicos, (7) antiinflamatórios, (8) imuno-moduladores, (9) anticoagulantes, (10) cicatrizantes, (11) tensioreguladores, (12) cosméticos e cosmético- dermatológico, (13) de suplementação alimentar, (14) terapêutico-vascular, (15) hematomoduladores, (16) pro-angiogênicos e anti-angiogênicos, (17) moduladores de ereção e Iibido sexual, (18) antidegeneradores do sistema nervoso central (SNC) e (19) agentes antienvelhecimento.

Todos os compostos, ora objeto do presente pedido de patente de invenção, caracterizam-se por envolverem o conceito de nanoencapsulamento ou complexação na sua formação, resultando em produtos de eficiente uso terapêutico. O nanoecapsulamento e/ou complexação, os caracteres de transporte de seus princípios ativos com integridade estrutural e com ganho de solubilidade e a funcionalidade terapêutica transdérmica, sem que haja a necessidade de perfuração da pele e a administração injetável de tal molécula configuram assim: unidade de conceito inventivo.

Em comparação a um simples ato físico de mistura, de uma mesma relação molar, um complexo de inclusão terá que ser levado em consideração pois os mesmos, por sua vez, tem propriedades características de solubilidade e de ponto de estabilidade, comc também o seu ponto de dissolução, e finalmente a sua característica espectral. Estamos considerando, nesta invenção, o grande número de complexos de inclusão dentre as várias ciclodextrinas compatíveis com o tamanho das moléculas a serem carreada, no caso deste requerimento, as ciclodextrinas de anéis largos, e ou ciclodextrinas modificadas, com o possível aumento de moléculas de glucose nos anéis. Nao podemos descartar a possibilidade de modificações de estruturas, nas ciclodextrinas já conhecidas tais como hidroxipropil ciclodextrinas metiladas, como exemplo a DIMEB e a TRIMEB, ciclodextrinas ramificadas, ciclodextrinas com cargas e por fim polímeros de ciclodextrinas.

Envolvendo várias substâncias ativas, de propriedades farmacêuticas diversas, nestas complexações, tem se obtido valiosos aumentos, tanto do efeito da droga como também obtendo um aumento, significativo, de sua penetrabilidade na pele, sem que haja a necessidade de infiltração da mesma, por meios e formas invasivas como injetáveis e ou traumáticas. (Τ. Loftsson et al., J.Pham. Sci., 85 (1996) 1017; W. SAENGER, ANGEW. Clzenz., Int. Ed. Engl., 19 (1980) 344; Um. R. Restringe, Clgenz. Acelere., 98 (1998) 20351).

Outro exemplo, para mera elucidação: Um conhecido agente de analgésico é várias ve-zes mais solúveis dentro água, quando ligado a uma ciclodextrina. Por estas vantagens, estas inclusões a estes complexos têm sido amplamente usados em indústrias farmacêuticas (D. N. Reddy et al., J índio. Pharrfz. Sei. (1991) 1521).

Os compostos objeto do presente pedido de patente de invenção poderão ser protegidos da degradação por vários agentes metabólicos, que estão em grande quantidade no plasma sangüíneo, a droga poderá chegar íntegra aos seus alvos destinados. Fazendo com que seu efeito seja eficaz, no objetivo que se espera. E podendo diminuir drasticamente a quantidade da mesma que devera ser aplicada para se obter os efeitos acimas ja descritos.

Sendo estas drogas complexadas ou nanocapsuladas, solução ora proposta no presente pedido de patente de invenção, as mesmas poderão ser administradas de forma tópica

O presente invento pode ser adicionado em conjugação ou não a polímeros gelificantes, de caráter não iônico; a hidroxietilcelulose, hidroetilcelulose, gelatinas, resinas, resinas hidrofílicas, géis de colágeno, géis de colágeno com elementos sólidos ou semi- sólidos, quitosana, liguinina, lipossomas, géis de micro e macro-esferas, nanopartículas, nanoesferas, talosferas, em aminoácidos simples ou em cadeias, vitaminas, substratos de plantas (aloe Vera, papaína, bálsamo, boldo, cobaíba, guaco, a guaçatonga (Casearia sylvestris), canela, plantas que possuem compostos taxóis, como os arbustos da família das taxáceas, ervas e raízes em geral, flores, produtos derivados de apicultura, etc..), para uso de géis, pomadas, pós soluções, suspensões, xampus, ungüentos, xaropes e gliceróleo, para cicatrizações, analgesia, bio-estimulação, anti-inflamatório, anti-séptico, cosmético e principalmente para uso de complemento e suplemento alimentar. O invento em questão prevê quanto à conjugação da família dos elementos da familia da droga butolínica, em:

- micro e nano emulsoes, e ou conjugados ou não com todos os tipos possíveis de ciclodextrinas.

- Suspensões de micro e ou nano partículas lipidicas, fosfo-lipidicas, de todas as derivações de fosfatil colina, isoladamente ou em associação com fosfolípides naturais ou sintéticos citados como exemplo: Fosfatidil etanolamina., Fosfatidil serina, Fosfatidil inositol. Ácido fosfatídico.

- Dissolvidos em micro e ou nano emulsões com Omega 3, Omega 6 e Omega 9, Acido Linonênico e suas variações.

- conjugados e ou complexados com aminoácidos, mineirais, oligo elementos e co-enzimas, complexados ou naõ com todos os tipos possíveis de ciclodextrinas.

- conjugados com antitumorais e ou antiinflamatórios, complexados ou não por ciclodextrinas de anéjs largos, como meio de liberação e ação em terapia alvo em câncer, viroses, doenças e demais patologias.

- Composição com óleos minerais e ou vegetais e ou de origem animal, em forma de nano ou micro lipossomos, complexados opcionalmente ou não por ciclodextrinas de anéis largos, ou substância simples, podendo ou não constituir conjugados com elementos minerais simples ou não, aminoácidos e outros oligoelementos adicionados ao óleo ou aos oleos juntamente com elementos da família dos elementos da familia da droga butolínica.

- A inclusão dos elementos da familia da droga butolínica com vitaminas K3 e ácido ascorbico, bem como outras vitaminas, complexados ou não em ciclodextrinas. - Inclusão de membros da família dos elementos da família da droga butolínica com violaceina compelxados ou não, em ciclodextrinas.

Inclusão dos membros das famílias dos elementos da familia da droga butolínica em carregadores Iipidicos LDL, ou carreadores similares que mimetizam o primeiro.

Conjugação de membros da família das drogas butolinicas, com gluco- oxidase, livre ou encontrada em mel ou outros alimentos.

Conjugação de membros da família das drogas butolinicas, com elementos presentes em alimentos, como mel, propolis.

- Conjugação de membros da família dos elementos da familia da droga butolínica, em ovos, via administração do mesmo na albumina, ou indução de postura artificial com a presença do mesmo,. via.'alimentacao> ou inalicação ou administração de qualquer via do produto.

0 uso complexados dos membros da família dos elementos da familia da droga butolínica, para que o mesmo seja ligado, conjugado ou re- arranjado com produtos fungicos que interajam diretamente com a enzima produzida pelas bactérias (a beta-cetoacil-ACP sintase) envolvida na síntese de ácidos graxos.

0 uso conjugado de membros da família dos elementos da familia da droga butolínica, complexados ou não, com a crisoterapia, ou terapia áurica, como também o uso deourotiomalato de sódio ou a ourotioglucose.

O uso conjugado de membros da família dos elementos da familia da droga butolínica, complexados ou não com revesratrol, complexados em ciclo dextrinas ou não. O uso conjugado de membros da família dos elementos da família da droga butolínica, complexados ou não com ciclodextrinas, como também com agentes anti-cox-1 anti cox-2.

Membros da família dos elementos da familia da droga butolínica, complexados com albumina.

O uso de elementos da familia dos elementos da familia da droga butolínica, com rapamicina, em nano partículas ou complexados ou não em ciclodextrinas.

A complexação de membros da família dos elementos da familia da droga butolínica em qualquer tipo de formação de nano elementos, dentre os quais:

Lipossomos puros e ou compostos, naturais e„ou sintéticos.=

Nanopartículas de origem poliméricas, puras e ou compostas.

Nano tubos eou qualquer nanocarreador elaborados com cristais, agentes térmicos, e ou magnéticos, e ou fotossensível, e ou termo- sensivel e ou, químico-sensível e ou com carbono, e ou silício e ou sílica e ou robótico e ou elétrico, e ou formados por agentes biológicos de qualquer origem, e ou mineral.

Nano carreadores, formados por vírus, e ou fungos e ou bactérias, e ou seus derivados.

- ciclodextrinas modificadas e ou de anéis largos.

Dendrímeros, puros e ou compostos.

Nanoesferas puros e ou compostos e talosferas, puras e ou compostas - A conjugação de membros da família dos elementos da família da droga butolínica, com antibióticos, sintéticos ou naturais, anfotericina B, complexados ou não com ciclodextrina.

A conjugação de membros da família dos elementos da família da droga butolínica, com metais, como zinco, cobre e selenio. Complexados ou não em ciclodextrinas.

A conjugação ou o uso de membros da família dos elementos da família da droga butolínica em matrizes sintéticas destinadas a implantes biológicos, substituição de tecido ósseo, cartilaginoso ou vascular, controle de regeneração de pele e mucosas, controle de angiogênese em tecido renal, "stents" e válvulas artificiais.

Géis e outros coloides contendo membros da família dos elementos da familia da droga butolínica para uso em soluções oftálmicas, fluidos de perfusão é preservação de tecidos para transplante.

3.3 - Os componentes formados pelos compostos ora objeto do pedido de patente são previstos em:

•Formulação em creme para aplicação tópica, pomada, loções, spray, colírio, creme, esmalte, tônicos, colutórios, pastas de dentes, emulsões e pastas de uso diário, xampu e condicionadores e qualquer outro derivado para higiene pessoal.

• Formulação de ação inalatória

• Formulação entérica

• Formulação drágeas, pílulas, partilhas, spray.

• Formulação de uso transdérmico. 3.4 - Dosagem

As doses reivindicadas nesta patente, dentro dos carreadores mencionados, vão de 1 nano molar a 1 milimolar, complexadas ou puras, inclusas ou não, ligadas e/ou encapsuladas a qualquer um destes carreadores descritos.

Claims (1)

1. COMPOSTOS MOLECULARES FORMADOS A PARTIR DO NANOENCAPSULAMENTO DE TOXINAS BUTOLÍNICAS-A e B, PURAS OU NÃO, E/OU COM A SUA ESTRUTURA MODIFICADA, E/OU COMPOSTA COM QUALQUER OUTRA SUBSTÂNCIA, nano carreadas com emprego de ciclodextrinas modificadas, denominadas como ciclodextrinas de anéis largos, e possíveis outras ciclodextrinas sintéticas e ou modificadas tais como hidroxipropil Beta Ciclodextrina, que possuam a capacidade de carrear moléculas maiores que as ciclodextrinas mais ordinariamente encontradas cujo diâmetro é pequeno demais para que a mesma receba dentro de sua cavidade as moléculas maiores, caso requerida nesta patente Também todas as demais ciclodextrinas modificadas sinteticamente que venham obter efeitos possíveis de carreamento de moléculas maiores, ciclodextrinas metiladas, como exemplo a DIMEB e a TRIMEB, ciclodextrinas ramificadas, ciclodextrinas com cargas e por fim polímeros de ciclodextrinas. Essas ciclodextrinas estão abrangidas nas moléculas objeto do presente pedido de patente de invenção, pelo que se reivindica a presente patente quanto a compostos formados pela família dos elementos da Toxina Botuínica A e ou B, puros ou não, conjugados ou não, nanoencapsulados^e/oü complexados em (i)-ciclodextrinas modificadas ou não, denominadas de ciclodextrinas de anéis largos e ou qualquer outra que venha ser sinteticamente aumentada com moléculas de glicose, ampliando assim, a sua cavidade para que a mesma receba a molécula que deverá ser nanoencapsulada, (ii) lipossomos compostos de fosfatil-colina, (iii) ácidos graxos e seus derivados, (iv) colesterol, modificado ou não artificialmente, (v) polímeros biodegradáveis e absorvíveis, (vi) dendrímeros, (vii) nanoesferas, (viii) talosferas, (ix) nano-emulsões e (x) micro-emulsões.