BRPI0913389B1 - Preservative Formulations and Method of Reducing Bacterial and Fungal Loading of a Preparation - Google Patents

Description

"FORMULAÇÕES CONSERVANTES E MÉTODO DE REDUÇÃO DA CARGA BACTERIANA E FÚNGICA DE UMA PREPARAÇÃO" [001] A presente invenção divulga formulações conservantes sinérgicas compreendendo compostos bactericidas e fungicidas, um método de redução da carga bacteriana e fúngica de um preparo assim como o uso das formulações conservantes sinérgicas de acordo com a invenção para a redução da carga bacteriana e fúngica de preparações.

[002] Uma ampla variedade de produtos, formulações e preparações de uso pessoal, doméstico e industrial necessitam de proteção contra contaminação com bactérias e fungos* Isto é geralmente conseguido pela adição de liberadores de formaldeido e/ou parabenos por causa das boas propriedades bactericidas e fungicidas desses compostos.

[003] Entretanto, esses compostos da técnica sofrem de algumas desvantagens severas, ou seja, que sua capacidade de conservação é tão alta que seu efeito continua mesmo após, por exemplo, no caso de uma loção, ser aplicada sobre a pele, absorvida, distribuída através do sangue e depositada nos principais órgãos do corpo. Como o formaldeído e os parabenos prejudicam a função enzimãtica, existe a possibilidade de interferência com a célula humana normal e função celular.

[004] Portanto, o problema técnico a ser solucionado pela presente invenção é fornecer formulações conservantes que evitem as desvantagens daqueles de acordo com a técnica. Esse problema é solucionado pela redução da concentração necessária da formulação enquanto ainda mantém controle microbiano através da surpreendente e inesperada cooperação sinérgica de pelo menos dois compostos.

[005] É, portanto, um objeto da presente invenção fornecer uma formulação conservante compreendendo a combinação de pelo menos dois compostos com propriedades bactericidas e/ou fungicidas, onde a respectiva combinação é selecionada a partir do grupo que consiste em metilisotiazolinona/piroctona olamina; caprilil glicol/ãcido deidroacético; undecanol/ãcido deidroacêtico e álcool laurílíco/ácido sórbico* [006] 0 composto bactericida preferivelmente está presente em uma concentração de 1% ã 5%, quando o composto bactericida é uma metilisotiazolinona, e 25% a 75% quando é caprilil glicol, undecanol e álcool laurílico. Ainda mais preferido, o composto bactericida está presente em uma concentração de 1,5% a 3% quando é uma metilisotiazolinona, e 30% a 70% quando é caprilil glicol, undecanol e álcool laurílico.

[007] O composto fungicida preferivelmente está presente em uma concentração de 25% a 99%. Ainda mais preferivelmente, o composto fungicida de acordo com a invenção está presente em uma concentração de 30% a 95%.

[008] Todos os percentuais são percentuais em peso a menos que afirmado de outro modo.

[009] O isômero de metilisotiazolinona preferido ê 2-metilisotiazolinon-3-ona. Entretanto, outros isômeros estão também dentro do escopo da invenção.

[0010] Pode ser preferido que as formulações conservantes de acordo com a invenção são combinadas com solventes apropriados. Preferivelmente, os solventes referidos são selecionados da classe de glicõis, Mais preferivelmente, os referidos solventes são selecionados a partir do grupo que consiste em propileno glicol, butileno glicol e pentileno glicol, [0011] O método de redução da carga bacteriana e fúngica de um preparo de acordo com a presente invenção preferivelmente compreende a adição de uma formulação conservante compreendendo pelo menos dois compostos com propriedades bactericidas e/ou fungicidas à preparação a ser conservada. Os compostos bactericidas e fungicidas preferidos, suas concentrações e combinações preferidas são como afirmado acima.

[0012] Geralmente, as preparações de acordo com a invenção podem ser adicionadas a uma ampla variedade de produtos, formulações e preparações de uso pessoal, doméstico e industrial.

[0013] Preparações preferidas de acordo com a invenção são selecionadas a partir do grupo que consiste em preparações cosméticas tal como loções, cremes, emplastros e unguentos, limpadores, detergentes, produtos para a higiene feminina, lenços de limpeza, preparações para uso veterinário, preparações capilares tais como xampus, condicionadores, géis, fixadores e sprays.

[0014] Outro objeto da presente invenção é o uso das formulações conservantes sinérgicas de acordo com a invenção para a redução da carga bacteriana e fúngica de preparações, Todos os detalhes relacionados aos compostos bactericidas e fungicidas preferidos, suas concentrações e combinações preferidas assim como as preparações preferidas onde as formulações conservantes sinérgicas podem ser aplicadas são as mesmas que aquelas dadas acima.

[0015] A invenção será agora descrita por meio dos seguintes, exemplos não limitantes.

Exemplo 1 [0016] Teste de desafio do conservante foi realizado para avaliar o desempenho das misturas em preparações cosméticas terminadas. O teste foi conduzido em uma base de xampu e loção como descrito neste. Uma cultura mistura bacteriana padronizada foi preparada como em seguida. Três Ágar Tryptic Soy individuais inclinados de Staphylococcus aureus (ATCC 6538}, Escherichia coli (ATCC 8739) e Pseudomonas aeruginosa {ATCC 9027) foram incubados a aproximadamente 35°C por -24 horas. Cada meio inclinado foi então lavado com 5 mL de Água de Diluição com Tampão Fosfato estéril {PBDW). O volume de 5 mL foi transferido a mais 5 ml de BPDW até um total de 10 mL de suspensão individual bacteriana. A absorbância de cada suspensão individual foi medida espectrofotometricamente a 530nm após calibragem do instrumento com PBDW sozinha. Cada suspensão individual foi padronizada a ~10'9 CFU/mL. Cinco mL foram assepticamente transferidos de cada suspensão individual a um copo medida de espécime estéril para criar a "Mistura Bacteriana". Então 40g de cada amostra de xampu e loção foram inoculados com 0,2 mL da solução bacteriana padronizada e cada amostra foi bem mistura füngica.

[0017] Duas inclinações individuais de Ágar Sabouraud de Candida albicans {ATCC 10231}, e três placas de Ágar Sabouraud de Aspergillus niger (ATCC 16404) foram incubadas a aproximadamente 3 0°C por ~24 horas e 5 dias, respectivamente. 0 meio inclinado com Candida foi então lavado com S mL de Água de Diluição com Tampão Fosfato estéril {PBDW)- Os 5 mL foram transferidos a 5 mL adicionais de BPDW para um total de 10 mL de suspensão individual de Candida. Para o Aspergillus, um swab de algodão estéril foi imerso em um tubo com 10 mL de PBDW estéril e então mergulhado em um estéril tubo de Tween 80. 0 swab foi então movimentado para trás e para frente através de cada uma das placas de Aspergillus, transferindo os esporos ao tubo com 10 mL de PBDW entre cada processo de remoção de esporo. Um mL de cada uma das suspensões foi transferido a um tubo separado de 9 mL de PBDW. Cada uma dessas suspensões 1:9 foi medida em um hemacitômetro e as suspensões originais foram padronizadas a -IO7 cêlulas/mL. Sete mL foram assepticamente transferidos de cada suspensão individual a um copo medida estéril de espécime para criar o "Fungo Misturado". Então 40g de cada amostra de xampu e de loção foram inoculados com 0,4 mL da solução fúngica padronizada e cada amostra foi bem mistura fúngica.

[0018] Nos dias 0, 7, 14 e 28, amostras foram preparadas como em seguida. Um grama de cada amostra foi assepticamente transferido a um tubo com caldo neutralizante separado 9 mL D/E para formar a diluição 10' í. Diluições em série foram preparadas através de uma diluição a 10'6 em BPDW. As diluições em série para as culturas bacterianas foram plaqueadas vertendo-se a placa com Ágar Tryptic Soy e incubando a ~35°C por 48 horas. Diluições em série para as amostras fúngicas foram plaqueadas vertendo-se a placa com Ágar Sabouraud e incubando a ~30°C por 72 horas. As placas foram enumeradas após o período de incubação. Os resultados são demonstrados na Tabelas 1 e 2. As misturas foram eficazes na redução significativa das contagens bacteriana e füngica durante utn período de 28 dias.

Tabela 1 Dados do Desafio com o Conservante Contagens de Mistura Bacteriana (CFU/qraroa) Inóculo: Mistura Bacteriana - quantidades aproximadamente iguais de P. aeruginosa, S. aureus e E. coli. 9 x 105 a 5,5 x 106 Tabela 2 Dados de Desafio com Conservante Contagens de Mistura fúngica (CFU/qrama) Inóculo: Fungo Misturado - quantidade aproximadamente igual de C, albicans e A. niger. 6,9 x 104 to 1,2 x 105 Exemplo 2 [0019] Concentrações inibitórias mínimas (MIC) foram determinadas para componentes individuais e formulações binárias como em seguida. Suspensões bacterianas individuais de S, aureus (gram positiva), £. coli e P. aeruginosa (ambas gram negativas) e suspensões fúngicas individuais de C. albicans e A. niger foram preparadas como descrito no Exemplo 1. Cada suspensão individual foi padronizada com PBDW para render ~10e CFU/mL ou ~1G7 células/mL para a bactéria e fungo individual, respectivamente.

[0020] Os componentes individuais e formulações binárias foram diluídos em tanto água Dl ou propileno glicol (como apropriado para solubilidade) para render uma solução ativa de partida a um total de 10,000 ppm, Da solução a 10,000 ppm, um diluição 1;9 foi feita em Caldo Nutritivo estéril para render uma solução ativa a 1.000 ppm. Cinco mL da diluição a 1.000 ppm foram transferidos a cinco mL de estéril Caldo Nutritivo (NB) para render uma solução ativa a 500 ppm. Esse esquema de diluição foi repetido até que a solução ativa ficou em 3,90 ppm. As mesmas diluições foram feitas em estéril Caldo Sabouraud Dextrose (SDB) para o teste MIC fúngico. A série de nove soluções ativas (3,9 ppm - 1000 ppm) foi preparada para cada um dos cinco microorganismos a serem testados.

[0021] Da suspensão de E. coli, 0,1 mL foi adicionado a cada uma das nove soluções ativas com 5 mL em NB. Cada tubo foi misturado vigorosamente. Isso foi repetido para cada uma das suspensões bacterianas. De modo similar, 0,1 mL da suspensão de C. albicans foi adicionado a cada uma das nove soluções ativas com 5 mL em SDB. Isso foi repetido com A. niger em um conjunto separado de diluições. Cada tubo foi misturado vigorosamente. Os controles foram, preparados para cada organismo pela ínoculação de 5 mL de NB ou SDB, como apropriado. Todos os três conjuntos de tubos bacteríanos foram incubados a 35®C por 48 horas e os dois conjuntos de tubos fúngicos foram incubados a 3 0°C por 72 e 120 horas. Com o término do período de incubação, os tubos foram misturados e visualmente inspecionados para turbidez em uma comparação com o controle. A menor concentração com uma ausência de turbidez foi gravada como a Concentração Inibitória Mínima (MIC). Os resultados são demonstrados nas Tabelas 3 e 4.

[0022] 0 valor de sinergismo é [Qa/Qa + Qb/Qij) ■ Qa é a concentração de componente A na mistura, Qa é a concentração de componente A unicamente aplicado, QB é a concentração de componente B na mistura, Qb é a concentração de componente B unicamente aplicado. Quando o valor de sinergismo é menos do que um, a mistura é sinérgica. Valores para (QA/Qa + Qe/Qb) de 1 e maior do que 1 representam um efeito aditivo e um efeito antagonista, respectivamente.

Tabela 3 Valores de MIC (em ppm) para formulações conservantes versus bactérias Tabela 4 Valores de MIC Cem ppm) para formulações conservantes versus formulações de bactérias, leveduras e fungos com piroctona olamina REIVINDICAÇÕES

Claims (7)

1. Formulação conservante CARACTERIZADA pelo fato de que compreende a combinação de dois compostos tendo propriedades bactericidas e fungicidas, em que a respectiva combinação é álcool laurilico/ácido sórbico.

2. Formulação conservante, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADA pelo fato de que o álcool laurilico está presente em uma concentração de 25% a 75%.

3. Formulação conservante CARACTERIZADA pelo fato de que compreende a combinação de dois compostos tendo propriedades bactericidas e fungicidas, em que a respectiva combinação é metilisotiazolinona / piroctona olamina e em que a metilisotiazolinona está presente em uma concentração de 1 % a 5 % .

4. Formulação conservante, de acordo com a reivindicação 1 ou 3, CARACTERIZADA pelo fato de que o composto bactericida está presente em uma concentração de 1,5% a 3% quando é metilisotiazolinona, e 30% a 70% quando é álcool laurilico.

5. Método de redução da carga bacteriana e fúngica de uma preparação CARACTERIZADO pelo fato de que compreende a adição da formulação conservante como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 à preparação.

6. Método, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que a preparação é selecionada a partir do grupo que consiste em produtos, formulações e preparações de uso pessoal, doméstico e industrial.

7. Método, de acordo com a reivindicação 6, CARACTERIZADO pelo fato de que a preparação é selecionada a partir do grupo que consiste em preparações cosméticas tal como loções, cremes, emplastros e unguentos, limpadores, detergentes, preparações para a higiene feminina, lenços de limpeza, preparações de uso veterinário, e preparações capilares tais como xampus, condicionadores, géis, fixadores e sprays.