BRPI1001814A2 - composição cosmética, uso cosmético de uma combinação, uso de pelo menos um lisado de pelo menos um microorganismo, e, método de tratamento cosmético - Google Patents
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Abstract
COMPOSIçãO COSMETICA, USO COSMETICO DE UMA COMIBIINAçãO, USO DE PELO MENOS UM LISADO DE PELO MENOSUM MICROORGANISMO, E, METODO DE TRATAMENTO COSMETICO A presente invenção refere-se a uma composição cosmética que é de uso para o cuidado de e/ou maquilagem de materiais de queratina,compreendendo, em um meio fisiologicamente aceitável, pelo menos umderivado de salicilato de fitoesfingosina e pelo menos um usado de pelo menos um microorganismo do gênero Bifidobacterium speeies. Também se refere ao uso, a saber ao uso cosmético, de uma combinação compreendendo pelo menos um lisado de pelo menos um microorganismo do gênero Bifidobaeterium speeies e pelo menos um derivado de salicilato de fitoesfingosina, para reforçar a capacidade de reparo e de regeneração de um epitélio, especialmente de uma epiderme, em particular uma epidermeenvelhecida. A presente invenção adicionalmente se refere a um método de tratamento cosmético, compreendendo pelo menos a administração, a um individuo sujeito ao envelhecimento de pele, de pelo menos a dita citada combinação.
Description
"COMPOSIÇÃO COSMÉTICA, USO COSMÉTICO DE UMACOMBINAÇÃO, USO DE PELO MENOS UM LISADO DE PELO MENOSUM MICROORGANISMO, E, MÉTODO DE TRATAMENTO COSMÉTICO"
A presente invenção almeja obter uma combinaçãoparticularmente vantajosa para prevenir e/ou tratar envelhecimento da pele.
A epiderme é um epitélio, convencionalmente dividido emuma camada basal de queratinócitos contendo, em particular, células-troncode pele e constituindo da camada germinativa da epiderme, uma camada"espinhosa" constituída de várias camadas de células poliédricas posicionadassobre a camada basal, uma camada "granular" compreendendo uma a trêscamadas das chamadas células achatadas contendo inclusões citoplásmicasdistintas, grânulos de queratoialina, e finalmente, um conjunto de camadassuperiores, chamadas de camada córnea (ou estrato córneoj constituída dequeratinócitos no estágio terminal de sua diferenciação, chamados decorneócitos.
O estrato córneo, ou a camada córnea, é a camada superficialda epiderme localizada na interface entre o organismo e seu ambiente. Ecomposto de corneócitos, que são células anucleadas resultantes dadiferenciação de queratinócitos epidérmicos. Os corneócitos são ricos emqueratinas e são circundados por uma matriz lipídica impermeável. Emvirtude de sua composição protéica e lipídica, o estrato córneo desempenhaum papel essencial de barreira da pele. Previne a intrusão de agentesmicrobiológicos e torna possível a hidratação da pele e portanto do corpo emgeral.
Durante o envelhecimento da pele, e exceto as conseqüênciasde envelhecimento bem conhecidas sobre a reparação da pele, muitas formasde desconforto são relatadas por indivíduos idosos. Estas formas dedesconforto são causadas por um enfraquecimento da função de barreira e dahomeostasia epidérmica na pele deles. Assim, o estrato córneo da peleenvelhecida tem um teor de lipídeo intercelular reduzido comparado com apele jovem, particularmente durante o período de inverno. Esta mudança emcomposição do estrato córneo desorganiza suas propriedades físico-químicasde barreira da pele. Finalmente, a velocidade de recuperação da função debarreira após o enfraquecimento do estrato córneo torna-se mais lenta com aidade, implicando em uma disfunção da função homeostática da epiderme(Denda, M., 2002; Ghadially, R. et al, 1995; Leveque, J.L., 2001). Acompanhia Requerente tem, em adição, observado, sob estas mesmascircunstâncias, que, em resposta a um ataque físico ou químico sobre o estratocórneo, genes particulares mostram cinética de modulação de acordo com aidade do indivíduo. Mais especificamente, é verificado que a indução daexpressão de certos genes torna-se lenta em pele envelhecida, em comparaçãocom pele jovem.
Dentre estes genes cuja expressão é particularmente lenta emindivíduos idosos expostos a um estresse é em particular o gene de queratina6B (KRT6B) que tem, além disso, sido caracterizado como particularmentevantajoso do ponto de vista de seu envolvimento em processos de regeneraçãoe reparo epidérmicos.
Além disso, a homeostasia da pele, e em particular daepiderme, resulta de um equilíbrio finamente regulado entre os processos deproliferação e diferenciação das células da pele. Estes processos deproliferação e diferenciação são preferivelmente regulados: participam narenovação e/ou na regeneração da pele e acarretam a manutenção de umaespessura de pele constante, e em particular de uma espessura epidérmicaconstante. Esta homeostasia da pele também está envolvida na manutençãodas propriedades mecânicas da pele.
Contudo, esta homeostasia da pele pode ser enfraquecida porcertos fatores fisiológicos (idade, menopausa, hormônios, etc.) ou fatoresambientais (estresse de UY, poluição, estresse oxidativo, estresse irritante,etc.). O potencial regenerativo da epiderme torna-se menor: as células dacamada basal se dividem menos ativamente, o que acarreta em particular umadesaceleração e/ou diminuição na renovação epidérmica. Consequentemente,renovação celular não mais compensa a perda de células removidas nasuperfície, causando a atrofia da epiderme e/ou um decréscimo na espessurada pele e/ou uma perda de elasticidade e/ou de firmeza da pele.
As alterações em homeostasia epidérmica também sãorefletidas por uma aparência desluzida e/ou insatisfatoriamente definida paraa complexão da pele.
Este fenômeno pode ser acentuado pela menopausa: mulheresreclamam que sua pele torna-se enrijecida e seca, ou mesmo com aparência dexerose. Os déficits hormonais associados com a menopausa sãoacompanhados em particular por uma queda em atividade metabólica, quepoderia resultar em um decréscimo na proliferação dos queratinócitos e umaumento em diferenciação epidérmica.
Portanto é vantajoso que existam composições disponíveiscapazes de promoverem a homeostasia da pele com o propósito de mantere/ou aumentar a espessura da pele e deste modo para manter e/ou melhorar aspropriedades mecânicas da pele e/ou promover o esplendor da complexão.
A presente invenção emerge mais particularmente daobservação, pelos inventores, de que uma combinação específica éprecisamente verificada como eficaz na satisfação destas exigências, e emparticular via uma ação estimulante sobre a expressão de certos genes.Vantajosamente, possibilita compensar a diminuição da velocidade daexpressão de certos genes, em particular observados durante oenvelhecimento da pele, quanto a KRT6B.
Consequentemente, de acordo com um primeiro de seusaspectos, a presente invenção refere-se a uma composição cosmética que é deuso para o cuidado de e/ou maquilagem de materiais de queratina,compreendendo, em um meio fisiologicamente aceitável, pelo menos umderivado de salicilato de fitoesfmgosina e pelo menos um lisado de pelomenos um microorganismo do gênero Bifidobacterium species.
De acordo com outro de seus aspectos, também se refere aouso, em particular ao uso cosmético, de uma combinação compreendendopelo menos um lisado de pelo menos um microorganismo do gêneroBifidobacterium species e pelo menos um derivado de salicilato defitoesfmgosina, para estimular a expressão de pelo menos um geneselecionado dos genes de involucrina e KRT6B ou KRTl0.
Mais particularmente, a presente invenção refere-se ao uso, asaber ao uso cosmético, de uma combinação compreendendo pelo menos umlisado de pelo menos um microorganismo do gênero Bifidobacterium speciese pelo menos um derivado de salicilato de fitoesfmgosina, para estimular aexpressão de pelo menos um gene selecionado dos genes KRTB6, KRTlO einvolucrina, em um indivíduo submetido ao envelhecimento da pele.
A combinação sob consideração de acordo com a invenção éverificada deste modo em ser particularmente vantajosa para prevenir e/oucompensar o decréscimo em expressão observada com a idade do geneKRT6B.
O uso de um lisado de microorganismos do gêneroBifidobacterium species, tal como o lisado Repair Complex CLR, éadmitidamente conhecido de EP 0.043.128, mas apenas para os propósitos dereparo de DNA de célula de pele.
Por sua parte, os seguintes documentos propõem o uso demicroorganismos, em particular de microorganismos probióticos,essencialmente para os propósitos de tratamento de pele seca e/ou sensível econdições associadas, mas em uma formam distinta da de um lisado.
Deste modo, o documento WO 02/28402 indica quemicroorganismos probióticos podem ter um efeito benéfico na regulação dasreações de hipersensibilidade da pele tais como reações inflamatórias ealérgicas que são o resultado de um processo imunológico Documentos EP1.609.463, EP 1.642.570, EP 1.731.137 e FR2.876 029 descrevemcomposições combinando um ou mais microorganismo(s) probiótico(s) comum cátion inorgânico para o tratamento de pele sensível. Quanto aodocumento PCT/FR2006/G50768, ele propõe, para o tratamento de pelesensível associada com pele seca, uma combinação de um microorganismoprobiótico com um ácido graxo poli-insaturado e/ou éster de ácido graxo poli-insaturado. Consequentemente, nenhum destes documentos descreve o uso deum lisado de um microorganismo do gênero Bifidobacterium species, e menosainda na forma combinada sob consideração de acordo com a invenção.
Com relação à fitoesfingosina e seus sais, e maisparticularmente o seu cloridrato, já têm sido propostos no campo dadermatologia. De fato, fitoesfingosina é primeiro de tudo conhecida por suaatividade antimicrobiana. Deste modo, fitoesfingosina já é usadavantajosamente, em termos deste atividade, no tratamento de acne e emtermos de sua atividade inibitória sobre o crescimento de microorganismossobre a pele (US 5.326.565 e EP 0.919.226). Mais recentemente, tem sidodescrito que derivados de esfingolipídeo, e em particular derivados do tipo desalicilato de fitoesfingosina, mostram uma capacidade para modularem adiferenciação de queratinócito (G. Paragh et al.; Exp PermatoJ. 2008Dec; 17(12): 1004-16). Documento US 5.882.665, por sua parte, propõe novosderivados de salicilato de fitoesfingosina descritos como sendo de uso comoagentes anti-acne, agentes antibacterianos, agentes anti-rugas, e tambémagentes de clareamento da pele.
Contudo, para o conhecimento dos inventores, o efeitobenéfico ou mesmo sinérgico mostrado por uma combinação de um derivadode salicilato de fitoesfingosina e de um lisado de um microorganismo dogênero Bifidobaeterium species, sobre a expressão de certos genes, nunca temsido observado.
Como mostrado pelos exemplos aqui adiante, uma combinaçãode acordo com a invenção claramente estimula a expressão do gene KRT6B,mas também dos genes KRTlO e involucrina. Esta ação tem em particularsido verificada por qRT-PCR usando um modelo de pele reconstruídaEpiskin®.
Para o propósito da invenção, o efeito mostrado pelacombinação é definido como sinérgico porque se mostra maior do que oesperado da simples superposição dos respectivos efeitos do derivado desalicilato de fitoesfingosina e do lisado de um microorganismo do gêneroBifidobacterium species.
De acordo com outro de seus aspectos, a presente invençãorefere-se ao uso da combinação considerada acima, para reforçar a capacidadede reparo e de regeneração de um epitélio, especialmente de uma epiderme,em particular uma epiderme envelhecida.
De acordo com outro de seu aspecto, a presente invençãorefere-se ao uso de pelo menos um lisado de pelo menos um microorganismodo gênero Bifidobaeterium species em combinação com pelo menos umderivado de salicilato de fitoesfingosina, para a preparação de umacomposição para reforçar a capacidade de reparo e de regeneração de umepitélio, especialmente de uma epiderme, em particular uma epidermeenvelhecida.
Como emerge do discutido acima, este efeito é em particularobtido via estimulação de um gene ou de genes naturalmente de velocidade deação lenta durante o processo de envelhecimento, e mais particularmente viaestimulação da expressão de KRT6B.
De acordo com um seu aspecto, a presente invenção refere-seao uso, a saber ao uso cosmético de uma combinação compreendendo pelomenos um lisado de pelo menos um microorganismo do gêneroBifidobacterium species e pelo menos um derivado de salicilato defitoesfingosina, para estimular a expressão de pelo menos um geneselecionado dos genes KRTB6, KRTlO e de involucrina para reforçar acapacidade de reparo e de regeneração de um epitélio, especialmente de umaepiderme, em particular uma epiderme envelhecida.
De acordo com ainda outro seu aspecto, a presente invençãorefere-se a um método de tratamento, em particular tratamento cosmético,compreendendo pelo menos a administração, a um indivíduo sujeito aoenvelhecimento de pele, da combinação considerada acima.
Esta administração pode ser realizada em particular oral outopicamente.
A invenção também se refere ao uso cosmético, em particularem uma composição contendo um meio fisiologicamente aceitável e devotadopara aplicação tópica na pele, de uma combinação de acordo com a invenção,para aumentar a espessura da pele, promover o esplendor da complexão,promover e/ou melhorar as propriedades mecânicas da pele, e/ou promovere/ou melhorar a elasticidade e/ou a firmeza da pele.
Microorganismos do gênero Bifidobaeterium species
Como descrito acima, os microorganismos do gêneroBifidobacterium species utilizados como agentes ativos de acordo com ainvenção são usados na forma de um lisado.
Um lisado comumente denota um material obtido no final dadestruição ou dissolução de células biológicas por meio de um fenômenochamado de Iise celular, causando assim liberação dos constituintesbiológicos intracelulares contidos nas células do microorganismo sobconsideração.
Para o propósito da presente invenção, o "lisado" é usado semdistinção para denotar o lisado inteiro obtido por Iise do microorganismo deinteresse, ou apenas uma sua fração.Assim, a invenção refere-se ao uso de um lisado deBifidobacterium species e/ou de uma sua fração.
O lisado usado é portanto inteira ou parcialmente formado dosconstituintes biológicos intracelulares e dos constituintes das membranas eparedes celulares.
Mais especificamente, contém a fração celular citoplásmicacontendo as enzimas tais como ácido lático desidrogenase, fosfatases,fosfocetolases, e transaldolases, e os metabólitos. Por meio de ilustração, osconstituintes de parede celular são em particular, peptidoglicano, mureína oumucopeptídeo e ácido teicóico, e os constituintes de membrana celular sãocompostos de glicerofosfolipídeo.
Esta Iise celular pode ser realizada por meio de váriastecnologias, tais como, por exemplo, choque osmótico, choque térmico, porultra-som, se não sob estresse mecânico do tipo de centrifugação.
Mais particularmente, este lisado pode ser obtido de acordocom a tecnologia descrita em patente US 4.464.362, e em particular de acordocom o seguinte protocolo.
Um microorganismo de tipo Bifidobacterium species sobconsideração é cultivado anaerobicamente em um meio de cultura adequado,por exemplo de acordo com as condições descritas em documentos US4.464.362 e EP 0.043.128. Quando a fase estacionária de desenvolvimentotem sido alcançada, o meio de cultura pode ser inativado por pasteurização,por exemplo em uma temperatura de 60 a 650C por 30 min. Osmicroorganismos são então recuperados por meio de uma técnica deseparação convencional, por exemplo filtração por membrana, centrifugados,e recolocados em suspensão em uma solução estéril de NaCl em umaconcentração fisiológica. O lisado pode ser obtido por desintegração de um talmeio com ultra-som, com o propósito de liberar do mesmo as fraçõescitoplásmicas, os fragmentos de parede celular e os produtos derivados demetabolismo. A seguir, todos os componentes em sua distribuição natural sãosubseqüentemente estabilizados em uma solução aquosa fracamente ácida.
O lisado tendo uma concentração da ordem de 0,1% a 50%,em particular de 1% a 20%, e especialmente aproximadamente 5% em pesode material(ais) ativo(s), relativa ao seu peso total, é assim geralmente obtido.
O lisado pode ser usado em várias formas, na forma de umasolução ou na forma pulverulenta.
Um microorganismo mais particularmente adequado para ainvenção, pertence ao gênero Bifidobacterium species selecionado dasespécies: Bifidobaeterium longum, Bifidobaeterium bifidum, Bifidobaeteriumbreve, Bifidobaeterium animalis, Bifidobaeterium laetis, Bifidobaeteriuminfantis, Bifidobaeterium adoleseentis ou Bifidobaeteriumpseudoeatenulatum, e misturas dos mesmos.
A espécie Bifidobaeterium longum é mais particularmenteadequada para a invenção.
O lisado pode ser vantajosamente o lisado registrado sob onome INCI: Bifidat ferment Lysate, sob o nome EINECS: Bifidobaeteriumlongum, sob EINECS No.: 306-168-4 e sob CAS No.: 96507-89-0.
O produto vendido sob o nome Repair Complex CLR® pelacompanhia K. Richter GmbH e que é formado de um lisado inativado daespécie Bifidobaeterium longum, cai dentro do contexto da invenção.
Um lisado útil de acordo com a presente invenção é tal comodefinido acima.
Derivado de salicilato de fitoesfingosina
Naturalmente, fitoesfingosina, que está presente no estratocórneo, corresponde a uma das três bases esfingóides naturalmente presentesna pele.
No contexto da presente invenção, os derivados defitoesfingosina mais particularmente considerados são os derivados do tipo desalicilato de fitoesfingosina, i.e. compostos derivados da ligação covalente depelo menos uma molécula de fitoesfingosina em pelo menos uma molécula deácido salicílico. Esta ligação pode ser do tipo éster ou amida, epreferivelmente é do tipo amida.
Para o propósito da invenção, estes derivados de salicilato defitoesfingosina incluem as várias formas iônicas dos compostoscorrespondentes.
Um tal derivado vantajosamente corresponde à seguinteformula estrutural:
<formula>formula see original document page 11</formula>
na qual:
- R representa:
- um átomo de hidrogênio,
- um radical alifático Ci a C49 linear ou ramificado, saturadoou insaturado, onde apropriado substituído com um radical hidroxila, ou
- um grupo Y-O(CaHb)m-,com a sendo um número inteiro de 7 a 50, b um número inteirode 10 a 100, m é 0 ou 1 e Y representa H ou um ácido graxo Ch-C22 tendo aseguinte fórmula: -CO-(CxHyZz)CH3,
com Z sendo -OH ou um oxigênio de epóxido, χ um númerointeiro de 12 a 20, y um número inteiro de 20 a 40, e ζ é 0 ou um númerointeiro de 1 a 4;
- R1 representa um radical alifático saturado ou insaturado,linear ou ramificado C8 a C28, em particular Cjo a C20, especialmente C]2 aCi8, onde apropriado substituído com um radical hidroxila; e- R representa Η, um radical fosfato, um radical sulfato ou umaçúcar. Tais derivados são mais particularmente descritos em documento EP919.226. O derivado de fórmula I na qual R e R2 representa, respectivamente,um átomo de hidrogênio e R1 um radical linear e saturado, em particular Cj4 émais particularmente adequado para a invenção.
Este derivativo corresponde à seguinte fórmula:
<formula>formula see original document page 12</formula>
Um tal derivado é em particular vendido pela companhiaEvonick Goldschmidt sob o nome Phytosphingosine SLC.
Um derivado de salicilato de fitoesfingosina útil de acordocom a presente invenção é tal como definido acima.
As respectivas quantidades d salicilato de fitoesfingosina e delisado formando a combinação de acordo com a invenção, que podem serusadas, também chamadas de "quantidades eficazes", dependem,naturalmente, do efeito desejado e podem portanto variar em uma grandeextensão.
Para o propósito da presente invenção, a expressão"quantidade eficaz" é intencionada para denotar a quantidade mínimanecessária com o propósito de observar o efeito esperado, a saber um efeitocosmético ou um efeito terapêutico, sendo entendido que as quantidadeseficazes necessárias para obter um efeito cosmético ou um efeito terapêuticopodem, como apropriado, ser idênticas ou diferentes.
Para dar uma ordem de magnitude, cada um dos doiscompostos formadores da invenção podem estar presentes em uma quantidaderepresentando de 0,0001% a 50% do peso total da composição, em particularem uma quantidade representando de 0,001% a 10% do peso total dacomposição.
Mais particularmente, na composição de acordo com apresente invenção, o agente ativo formador do lisado e pertencendo ao gêneroBifidobacterium species pode ser usado em uma proporção de pelo menos0,001% (expressada em peso seco), em particular em uma proporção de0,01% a 20%, e mais particularmente em uma proporção de 0,01% a 15% empeso seco de material ativo, relativo ao peso total do suporte ou dacomposição contendo o mesmo.
O derivado de salicilato de fitoesfmgosina, por sua parte, na10 composição de acordo com a presente invenção pode ser formulado em umacomposição em uma proporção de pelo menos 0,0001% (expressada comopeso seco), em particular em uma proporção de 0,001% a 20%, e maisparticularmente em uma proporção de 0,05% a 2% em peso seco de materialativo, relativa ao peso total do suporte ou da composição contendo o mesmo.
Composição de acordo com a invenção
As composições sob consideração de acordo com a invençãopodem ser cosméticas ou farmacêuticas, em particular dermatológicas.
Para o propósito da invenção, a expressão "prevenção de umacondição" é intencionada para significar tornar mais lenta a ocorrência decondições associadas com o envelhecimento da pele, em particular as
definidas acima.
É entendido que todas as composições sob consideração deacordo com a invenção usam um meio fisiologicamente aceitável.
Para o propósito da presente invenção, o termo "meiofisiologicamente aceitável" é intencionado para denotar um meio que éadequado para a aplicação de uma composição para um material de queratina,em particular a pele.
De acordo com uma modalidade particular, uma composiçãode acordo com a invenção também pode compreender pelo menos um agentesuplementar que é ativo sobre a pele.
As quantidades dos vários constituintes que podemsuplementar a combinação de acordo com a invenção são aquelasconvencionalmente usadas nos campos sob consideração.
- Agentes ativos suplementares
Como exemplos de agentes ativos suplementares que podemser usados no contexto da presente invenção, menção pode ser feita deagentes ativos para melhorar a condição da pele, tais como agentes ativosumectantes ou hidratantes, ou agentes ativos para melhorar a barreira lipídicanatural, tais como ceramidas, sulfatos de colesterol e/ou ácidos graxos, emisturas dos mesmos.
Também pode ser possível usar enzimas que têm umaatividade sobre a pele, tais como proteases, lipases, cerebrosidases, amidasese/ou melanases, e misturas dos mesmos.
Também é possível o uso de agentes ativos domicroorganismo, em particular microorganismo probiótico, tais como aquelesdescritos em pedidos WO 2006/000992 e WO 2006/037922.
Para o propósito da presente invenção, o termo"microorganismo probiótico" é intencionado para significar ummicroorganismo vivo que, quando é consumido em quantidade adequada, temum efeito positivo sobre a saúde de seu hospedeiro de acordo com a nJointFAO/WHO Expert Consultation on Evaluation of Health and NutritionalProperties of Probiotic in Food Including Powder Milk with Live Lactic AeidBactéria, 6 de Outubro de 2001", e que pode em particular melhorar oequilíbrio microbiano intestinal.
Os microorganismos adequados para a invenção podem serselecionados em particular de ascomicetos tais como Saccharomyces,Yarrowia, Kluyveromyces, Torulaspora, Schizosaccharomyces pombe,Debaromyces, Candida, Pichia, Aspergillus e Penicillium, bactérias dosgêneros Bifidobacterium, Bacteroides, Fusobacterium, Melissococcus,Propionibacterium, Enterococcus, Lactococcus, Staphylococcus,Peptostrepococcus, Bacillus, Pediococcus, Micrococcus, Leuconostoc,Weissella, Aerococcus, Oenococcus e Lactobaeillus, e misturas dos mesmos.
Como ascomicetos mais particularmente adequados para apresente invenção, menção pode ser feita em particular de Yarrowia lipoliticae Kluyveromyces laetis, e igualmente Saeeharomyees eereviseae,Torulaspora, Schizosaceharamyees pombe, Candida e Piehia.
Exemplos específicos de microorganismos probióticos sãoBifidobaeterium bifidum, Bifidobaeterium infantis, Lactobaeillus aeidophilus,Lactobaeillus alimentarius, Lactobaeillus curvatus, Lactobaeillus delbruckiisubsp. Lactis, Lactobaeillus gasseri, Lactobaeillus johnsonii, Lactobaeillusreuteri, Lactobaeillus rhamnosus (Lactobaeillus GG), Lactobaeillus sake,Lactococcus laetis, Streptococcus thermophilus, Staphylococccus carnosus eStaphylococcus xylosus, e misturas dos mesmos.
Mais particularmente, são microorganismos probióticosderivados do grupo de bactérias do ácido lático, tais como em particularLactobaeillus e/ou Bifidobacterium. Por meio de ilustração destas bactérias doácido lático, menção pode ser particularmente feita a Lactobaeillus johnsonii,Lactobaeillus reuteri, Lactobaeillus rhamnosus, Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium laetis,Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis, Bifidobacteriumadolescentis ou Bifidobacterium pseudocatenulatum, e misturas dos mesmos.
Uma cepa de Bifidobacterium laetis pode ser obtida de Hansen(Chr. Hansen A/S, 10-12 Boege Alie, P.O. Box 407, DK-2970 Hoefsholm,Dinamarca) sob o nome Bb 12.
Os microorganismo(s) podem ser incluídos na composição deacordo com a invenção em uma forma viva, semi-ativa ou inativada, morta.
Também pode(m) ser incluído(s) na forma de frações decomponentes celulares ou na forma de metabólitos. Os microorganismo (s),metabolito(s) ou fração(ões) também podem ser introduzidos na forma de umpó liofilizado, de um sobrenadante de cultura e/ou, se conveniente, em umaforma concentrada.
No caso particular das composições tópicas, pode servantajoso o uso destes microorganismos em forma inativada, ou mesmomorta.
Com relação aos microorganismos probióticos, os seguintesgêneros de levedura e de bactéria são geralmente usados:
-Bactérias do ácido lático: que produzem açúcar a partir deácido lático, por fermentação. São divididas em dois grupos de acordo comsuas morfologias:
• Lactobacillus species: acidophilus (LC1, NCFB 1748);amylovorus, casei (Shirota), rhamnosus (cepa GG), brevis, crispatus,delbrueckii (subsp bulgaricus, lactis), fermemtum, helveticus, gallinarum,gasseri, lohnsonii, paracasei, plantarum, reuteri, rhamnosus, salivarius),
• Gocci: Enterocossus (faecalis, faeciul), Lactococcus lactis(subspp lactis ou cremoris), Leuconstoc mesenteroides subsp dextranicum,Pediococcus acidilaciici (alimento animal), Sporolactobacillus inulinus,
Streptococcus salvarius subsp. Thermophilus,
-Bifidobactérias ou bifidobacterium species: Bifidobacteriumadoleseentis; animalis, bifidum, breve, lactis, longum, infantis,
-Leveduras: Saccharomyces (cerevisiae ou boulardii),
-Outras bactérias esporuladas: Bacillus (cereus var toyo ousubtilis), Bacillus coagulans, B licheniformis, Escherichia eoli cepa nissle,Propionibacterium freudenreichii.
Bactérias do ácido lático e bifidobactérias são os probióticosmais comumente usados. Exemplos específicos de microorganismosprobióticos mais particularmente adequados para a invenção sãoBifidobacterium bifidum, Bifidobacterium infantis, Bifidobaeterium longum,Lactobacillus aeidophilus, Lactobacillus alimentarius, Laetobaeillus caseisubsp. Casei, Laetobaeillus casei Shirota, Laetobaeillus paracasei,Laetobaeillus curvatus, Laetobaeillus delbruekii subsp. Laetis, Laetobaeillusgasseri, Laetobaeillus johnsonii, Laetobaeillus reuteri, Laetobaeillusrhamnosus (Laetobaeillus GG), Laetobaeillus sake, Lactoeoceus laetis,Streptoeoeeus thermophilus, Staphylococeeus earnosus e Staphyloeoeeusxylosus, e misturas dos mesmos.
Mais particularmente, são microorganismos probióticosderivados do grupo das bactérias do ácido lático, tais como em particularLaetobaeillus e/ou Bifidobaeterium. Por meio de ilustração destas bactérias doácido lático, menção pode ser feita mais particularmente a Laetobaeillusjohnsonii, Laetobaeillus reuteri, Laetobaeillus rhamnosus, Laetobaeillusparacasei, Laetobaeillus casei ou Bifidobaeterium bifidum, Bifidobaeteriumbreve, Bifidobaeterium longum, Bifidobaeterium animalis, Bifidobaeteriumlaetis, Bifidobaeterium infantis, Bifidobaeterium adolescentis ouBifidobaeterium pseudocatenulatum, e misturas dos mesmos.
As espécies mais particularmente adequadas são Laetobaeillusjohnsonii, Laetobaeillus paracasei, Bifidobaeterium adolescentis,Bifidobaeterium longum e Bifidobacterum Laetis NCC 2818 (tambémdenotada Bd 12 ATCC 27536) respectivamente depositada de acordo com otratado de Budapeste com o Instituí Pasteur (28 rue du Docteur Roux, F-75024 Paris cedex 15) aos 30/06/92, 12/01/99, 15/04/99, 15/04/99 e 07/06/05sob as seguintes referências CNCM 1-1225, CNCM 1-2116, CNCM 1-2168 eCNCM 1-2170 e CNCM 1-3446, e o gênero Bifidobaeterium longum(BB536). A Bifidobaeterium laetis cepa CNCM 1-3446 pode ser obtida deHansen (Chr. Hansen A/S, 10-12 Boege Alie, P.O. Box 407, DK-2970Hoersholm, Dinamarca).
Outros exemplos de agentes ativos adequados para o uso dapresente invenção incluem: agentes ativos analgésicos, agentes ativos anti-levedura, agentes ativos antibacterianos, agentes ativos antiparasíticos,agentes ativos antifungicos, agentes ativos antivirais, agentes ativosantiinflamatórios esteroidais, agentes ativos analgésicos, agentes ativosantipruríticos, agentes ativos queratolíticos agentes ativos eliminadores deradicais livres, agentes ativos anti-seborréicos, agentes ativos anti-caspa,agentes ativos almejados para prevenir envelhecimento de pele e/ou paramelhorar a condição da pele, agentes ativos anti-envelhecimento, agentesativos antidermatite, agentes ativos anti-irritantes, agentes ativosimunomodulatórios, agentes ativos para tratar pele seca, agentes ativosantiperspirantes, agentes ativos antipsoriáticos, agentes ativos anti-histamínicos, agentes ativos cicatrizantes, agentes ativos auto-bronzeadores,antioxidantes tais como chá verde ou suas frações ativas, glicerol, laponita,cafeína, óleos essenciais aromáticos, agentes ativos despigmentadores,despigmentadores esfoliantes, liporreguladores, amaciantes, refrescantes,desodorizantes, dessensibilizadores, alvejantes ou nutritivos, e agentes ativospara reduzir diferenciação e/ou proliferação e/ou pigmentação cutânea, emisturas dos mesmos.
Os agentes ativos suplementares também podem serselecionados de agentes para melhorar a função de barreira, agentesdermodecontraentes, agentes antiglicação, agentes para estimular a síntese demacromoléculas dérmicas e/ou epidérmicas e/ou para prevenir suadegradação, agentes para estimular proliferação de fibroblasto ou dequeratinócito e/ou diferenciação de queratinócito, agentes para promovermaturação do envelope córneo, inibidores de NO-sintase, antagonistasperiféricos de receptor de benzodiazepina (PBR), agentes para aumentar aatividade da glândula sebácea, agentes para estimular o metabolismoenergético de células, agentes tracionantes, agentes de reestruturação degordura, agentes de emagrecimento, agentes para promover circulação capilarcutânea, calmantes, agentes anti-seborréicos ou reguladores de sebo,adstringentes, antiinflamatórios e agentes anti-acne.
Dentre os agentes ativos e em particular os agentes de anti-envelhecimento que podem ser usados no contexto da presente invenção,menção pode ser feita, por meio de exemplos não limitantes, de: extratos deproteínas de feijão-soja, tal como o produto vendido pela companhia Silab sobo nome comercial Raffermine®, adenosina ou adenosina sintética tal como oproduto vendido por Pharma Waldoff, pro-xilano, extratos de semente decenteio tais como aqueles vendidos por Silab sob o nome Coheliss, extratosde alfafa (Iuzerne) tais como aqueles vendidos por Silab sob o nome Vitanol,o tetrapeptídeo (N-acetil-Gln-ASP-VAL-fflS) tal como o produto vendido porCognis sob a referência Dermican LS 9745, dipeptídeos e tripeptídeos dearroz tais como aqueles disponíveis na companhia Silab sob a referênciaNutriskin, extratos de semente de Vigna aconitifolia tais como aquelesvendidos pela companhia Cognis sob as referências Vitoptine LS 9529 e Vit-A-Like LS9737, extratos de Euglena gracilis tais como aqueles disponíveisna Sederma sob a referência Chronodyn, aminoácidos de trigo copulados emácido palmítico, vendidos sob a referência Deepline PVB (Lipacide PVB) porSeppic, extratos de mirtilo tal como Herbasol Myrtille Extract da companhiaCosmetochem, extratos de raiz de gengibre, extratos aquosos de Shiitake(Lentinus edodes) tal como Fermiskin de Silab, e antarcticina vendidos porLipotec, extratos de Punica granatum, argireline SC36 (hexapeptídeo ( Acetil-Glu-Glu-Meth-Glu-Arg-Arg-Amide)) da companhia Lipotec, um extrato deaveia, tal como o produto vendido por Silab sob a referência Reductine, umextrato de arroz púrpura tal como extrato de arroz púrpura da companhiaOryza, dispersões de célula de flor de videira tal como flor Fiber BoosterSequoia vitis da companhia Naolys, ácido ferúlico, tal como Oryzaferulix dacompanhia Oryza Oil e Fat, extratos de Voandzeia subterranea (Bambara), talcomo Filadyn LS 9397 da companhia Cognis, extratos de feijão-soja, talcomo o produto Elhibin vendido pela companhia Pentapharm, um extrato defruta Prunus domestica hidrolisado, tal como a referência Clairju dacompanhia Ichimaru Pharco.
Em particular, dentre os outros agentes que são ativos sobre apele e adequados para a invenção, menção pode ser feita aos agentes ativoshidratantes e/ou descamantes tais como glicol, uréia ou seus derivados,HEPES, agentes quelantes, detergentes e derivados de ácido jasmônico, emisturas dos mesmos.
Aquelas pessoas experientes na técnica selecionarão dito(s)agente(s) ativo(s) de acordo com o efeito desejado sobre os materiais dequeratina.
Formas galênicas
Para administração oral, uma composição da a invenção podeestar em qualquer uma das formas adequadas, particularmente na forma deuma solução oral, um xarope, um tablete, um tablete revestido de açúcar, umacápsula de gel, uma cápsula se não um alimento nutricional ou umsuplemento nutricional.
Uma composição de acordo com a invenção também podemcompreender pelo menos um excipiente apropriado adequado paraadministração oral.
A combinação sob consideração de acordo com a invenção, namesma maneira como qualquer composição contendo-a, pode servantajosamente administrada topicamente.
Uma composição devotada para administração tópica pode emparticular estar na forma de uma solução oleosa ou aquosa, aquosa-alcoólica,uma dispersão do tipo solução ou dispersão do tipo loção ou soro, umaemulsão com uma consistência líquida ou semi-líquida do tipo lácteo, obtidapor dispersão de uma fase graxa em uma fase aquosa (O/W) ou vice-versa(W/O), ou uma suspensão ou emulsão de consistência mole, semi-sólida ousólida do tipo cremoso, um gel aquoso ou anidro, se não uma microemulsão,microcápsulas, micropartícuias, ou dispersões vesiculares do tipo iônico e/ounão-iônico.
O pH de uma composição de acordo com a invenção, quandoela compreende pelo menos uma fase aquosa (por exemplo: soluções,emulsões aquosas, etc.), está preferivelmente entre 4 e 9, preferivelmenteentre 4 e 7, vantajosamente entre 5 e 6, e em particular um pH de 5,5.
A composição de acordo com a invenção pode ser mais oumenos fluida e ter a aparência de um creme branco ou colorido, um leite, umaloção, um soro, uma pasta ou uma espuma. Pode opcionalmente ser aplicadana pele na forma de um aerossol. Também pode estar na forma sólida, e porexemplo na forma de um bastão. Pode ser usada como um produto para ocuidado, mas também um produto de cosmética e/ou um produto demaquilagem.
Esta composição pode constituir uma máscara, um creme delimpeza, de proteção, de tratamento ou de cuidado para a face, para as mãos,para os pés ou para o corpo (por exemplo, cremes diários, cremes noturnos,cremes removedores de maquilagem, cremes de fundação, cremes anti-sol),um leite removedor de maquilagem, ou uma loção, um gel ou uma espumapara o cuidado da pele, tal como uma loção de limpeza.
Em geral, qualquer composição da invenção pode ser aplicadana pele (sobre qualquer área da pele do corpo) ou nas membranas mucosais(oral, jugal, gengival, genital, conjuntival, etc.).
Em uma maneira conhecida, uma composição cosméticatambém pode conter adjuvantes que são costumeiros no campo de cosmética,tais como agentes geleificantes hidrofílicos ou lipofílicos, aditivos hidrofílicosou lipofílicos, conservantes, antioxidantes, solventes, fragrâncias, cargas,filtros (solares) UV, absorvedores de odor e corantes. O teor e a natureza dosingredientes usados nas composições da invenção são ajustados por aquelaspessoas experientes na técnica de modo a não afetar substancialmente o efeitoda combinação sob consideração de acordo com a invenção.
Uma combinação de acordo com a invenção pode mostrar-separticularmente vantajosa para melhorar a hidratação, a homeostasia da pele,e em particular da epiderme, a função de barreira da pele, prevenir e/ou tratarsinais epidérmicos de envelhecimento, por exemplo rugas, linhas finas, perdade firmeza, de elasticidade, de densidade e/ou de tonicidade de uma epiderme.
As condições da pele mais particularmente selecionadas pelapresente invenção podem ser portanto pele seca e pele muito seca, e emindivíduos cuja pele tem uma aparência envelhecida, em particular emmulheres de idade acima de 45 anos e/ou pós-menopausais, ou mulheres aindamais idosas.
Como descrito acima, a presente invenção também se refere aum método, em particular um método cosmético, compreendendo pelo menosa administração, a um indivíduo sujeito ao envelhecimento de pele, de pelomenos uma combinação de acordo com a invenção.
Um tal método de tratamento pode ser realizado em particularpor administração tópica ou oral, por exemplo diariamente, da combinaçãosob consideração de acordo com a invenção.
Um método de acordo com a invenção pode compreender umaadministração única. De acordo com outra modalidade, a administração érepetida, por exemplo, 2 a 3 vezes ao dia durante um dia ou mais, egeralmente durante um período prolongado de pelo menos 4 semanas, oumesmo 4 a 15 semanas, com, se apropriado, um ou mais períodos deinterrupção.
Na descrição e nos exemplos seguintes, a não ser que sejaindicadas de outra maneira, as percentagens são percentagens em peso e asfaixas dos valores expressadas na forma de " "entre ... e ..." incluem os limitesinferior e superior especificados.Os exemplos seguintes e a Figura 1 são dados por meio deilustração não limitante do campo da invenção, onde a Figura 1 representa umaumento percentual em expressão relativo ao controle (100%).
Exemplo 1
Neste exemplo, o lisado usado é o produto vendido sob o nomeRepair Complex CLR® pela companhia K. RICHTER GmbH e que é formadode um lisado inativado da espécie Bifidobacterium longum, e o derivado desalicilato de fitoesfingosina é o produto vendido pela companhia EvonickGoldschmidt sob o nome Phytosphingosine SLC.
Os efeitos das quatro composições seguintes foram testadossobre a diferenciação de epiderme reconstruída com Episkin®.
-A: suporte de formulação (etil-álcool (3%) e água (97%)),
-B: lisado (etil-álcool (3%), água (87%), lisado (10%)),
-C: salicilato de fitoesfingosina (etil-álcool (3%), água (96,998%),salicilato de fitoesfingosina (0,002%)), e
-D: combinação de acordo com a invenção = (0,002% de salicilatode fitoesfingosina + 10% de lisado + etil-álcool (3%) + água (86,998%)).
Epidermes reconstruídas com J6 Episkin® foram posicionadasem placas de 12 cavidades contendo 2 ml de um meio de manutenção bem comocultivadas a 37°C e 5% de CO2 por 24 horas. Após incubação, as epidermesforam tratadas topicamente com as composições de teste (50 μΐ/epidermereconstruída) e incubadas por 6 horas.
Estes efeitos foram caracterizados por análise da expressão dosgenes de citoqueratina 6B (K6B), de citoqueratina 10 (KlO) e de involucrina(INV) usando um método de PCR em tempo real (PCR quantitativa, qPCR) 6horas após o tratamento.
1- Protocolos conservados
a) Análise de expressão diferencial
A expressão dos marcadores selecionados foi avaliada por RT-qPCR sobre RNA mensageiro extraído da epiderme reconstruída porEpiskin® de cada tratamento (os duplicados foram reunidos antes da extraçãode RNA) 6, 24 e 48 horas após o tratamento.
b) Transcrição reversa
- RNA total extraída de cada amostra usando tri-reagente.
- Traços de DNA potencialmente contaminantes foramremovidos pelo tratamento com o sistema livre de DNA(Ambion ref. 1906).RNA quantificado usando Nanovue (Amersham).
- reação de transcrição reversa de mRNA foi realizada com apresença do iniciador oligo(dT) e a enzima Superscript II (Gibco).
- cDNA resultante foi quantificado usando Nanovue(Amersham) e cDNAs foram ajustados para 10 ng/μΐ.
c) PCR quantitativa
As reações PCR (reações em cadeia da polimerase) foramrealizadas por PCR quantitativa com o sistema "Light Cycler" (RocheMolecular Systems Inc.) Este sistema analítico torna possível conduzirreações PCR rápidas e eficazes, no lugar de configuração anterior dascondições analíticas para os vários iniciadores. É composta de doiscomponentes principais:
-um termociclador otimizado: permitindo transferências de
calor extremamente rápidas;
-a fluorímetro: permitindo medição contínua da intensidade defluorescência incorporada no DNA (detecção a 521 nm).
Pares de sondas específicas para os genes estudados foram
<table>table see original document page 24</column></row><table>A mistura reacional (10 μΐ final) para cada amostra é aseguinte:
- 2,5 μg de DNA.
- Iniciadores para vários marcadores usados.
- Mistura reacional (Roche) contendo a enzima taq DNApolimerase, o marcador SR Green I (fluoróforo que intercala em DNA de fitadupla durante etapa de alongamento) e MgCl2.
d) Processamento dos dados de PCR quantitativa
A incorporação no DNA amplificado é medida continuamentedurante o ciclos de PCR. Este sistema torna possível obter curvas da mediçãode fluorescência como uma função dos ciclos de PCR e assim avaliar umvalor de expressão relativa para cada marcador.
O número de ciclos é determinado tendo por base os pontos de"saída" das curvas de fluorescência. Para um único marcador analisado,quanto mais tarde uma amostra sai (número alto de ciclos), menor será onúmero de cópias do mRNA.
O valor de expressão relativa é expressado em unidadesarbitrárias de acordo com a seguinte fórmula:
<formula>formula see original document page 25</formula>
e) Padronização dos efeitos observados sobre a expressãode gene
Para uma interpretação padronizada, a seguinte tabela declassificação foi conservada:
<table>table see original document page 25</column></row><table>2- RESULTADOS
A cinética de expressão dos três estudos relacionados aosmarcadores é mostrada em Tabela 1 e ilustrada em Figura 1.
Os resultados estão relacionados com a quantidade de mensageiroG3PDH(gene de referência) e expressada como % do controle não tratado.
<table>table see original document page 26</column></row><table>
Sob as condições experimentais deste teste, parece que apenasa combinação de acordo com a invenção aumenta, após 6 horas, a expressãodos genes codificadores de citoqueratina 6B, citoqueratina 10 e involucrina.
Exemplo 2
Os compostos são, dependendo do caso, citados como nomesquímicos ou como nomes de CTFA ("International Cosmetic IngredientDictionary and Handbook").
Composição para o cuidado da face na forma de um gelaquoso
<table>table see original document page 26</column></row><table>
Claims (16)
1. Composição cosmética que é para uso no cuidado de e/ou namaquilagem de materiais de queratina, caracterizada pelo fato decompreender, em um meio fisiologicamente aceitável, pelo menos umderivado de salicilato de fitoesfingosina e pelo menos um lisado de pelomenos um microorganismo do gênero Bifidobacterium species.
2. Composição de acordo com a reivindicação precedente,caracterizada pelo fato de que dito microorganismo do gêneroBifidobacterium species é selecionado de Bifidobacterium longum,Bifidobaeterium bifidum, Bifidobaeterium breve, Bifidobaeterium animalis,Bifidobaeterium laetis, Bifidobaeterium infantis, Bifidobaeterium adoleseentise Bifidobaeterium pseudoeatenulatum, e misturas dos mesmos.
3. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que o microorganismodo gênero Bifidobaeterium species é Bifidobacterium longum.
4. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que dito lisado é usadoem uma proporção de pelo menos 0,001% (expressada como peso seco), emparticular em uma proporção de 0,01% a 20%, e mais particularmente emuma proporção de 0,1% a 15% em peso seco de material ativo, relativa aopeso total da composição.
5. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que dito derivado desalicilato de fitoesfingosina corresponde à seguinte fórmula:<formula>formula see original document page 27</formula>na qual:R representa:- um átomo de hidrogênio,- um radical alifático Ci a C49 linear ou ramificado, saturadoou insaturado, onde apropriado substituído com um radical hidroxila, ou- um grupo Y-O(CaHb)m-,com a sendo um número inteiro de 7 a 50, b um número inteirode 10 a 100, m é 0 ou 1 e Y representa H ou um ácido graxo Cu-C22 tendo afórmula: -CO-(CxHyZz)CH3,com Z sendo -OH ou um oxigênio de epóxido, χ um númerointeiro de 12 a 20, y um número inteiro de 20 a 40, e ζ é 0 ou um númerointeiro de 1 a 4;- R1 representa um radical alifático C8 a C28 linear ouramificado, saturado ou insaturado, onde apropriado substituído com umradical hidroxila, e- R2 representa H, um radical fosfato, um radical sulfato ou umaçúcar.
6. Composição de acordo com a reivindicação precedente,caracterizada pelo fato de que R e R2 são, respectivamente, um átomo dehidrogênio e R1 um radical alquila linear, saturado.
7. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, na qual o derivado de salicilato de fitoesfmgosina e: <formula>formula see original document page 28</formula>
8. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que o derivado desalicilato de fitoesfingosina é usado em uma proporção de pelo menos-0,0001% (expressada como peso seco), em particular em uma proporção de-0,001% a 20%, e mais particularmente em uma proporção de 0,05% a 2% empeso seco de material ativo, relativa ao peso total da composição.
9. Composição de acordo com qualquer uma dasreivindicações precedentes, caracterizada pelo fato de que dita composição édevotada para administração tópica.
10. Composição de acordo com a reivindicação precedente,caracterizada pelo fato de que está na forma de uma solução aquosa, aquosa-alcoólica ou oleosa, uma dispersão do tipo solução ou uma dispersão do tipoloção ou soro, uma emulsão de consistência líquida ou semi-líquida do tipoleitoso, obtida por dispersão de uma fase graxa em uma fase aquosa (O/W) ouvice-versa (W/O), ou uma suspensão ou emulsão de consistência mole, semi-sólida ou sólida do tipo cremoso, um gel aquoso ou anidro, se não umamicroemulsão, microcápsulas, micropartículas, ou dispersões vesiculares dotipo iônico e/ou não-iônico.
11. Uso cosmético de uma combinação compreendendo pelomenos um lisado de pelo menos um microorganismo do gêneroBifidobacterium species e pelo menos um derivado de salicilato defitoesfingosina, caracterizado pelo fato de ser para estimular a expressão depelo menos um gene selecionado dos genes KRTB6, KRTlO e de involucrina,e um indivíduo submetido ao envelhecimento da pele.
12. Uso cosmético de uma combinação compreendendo pelomenos um lisado de pelo menos um microorganismo do gêneroBifidobacterium species e pelo menos um derivado de salicilato defitoesfingosina, caracterizado pelo fato de ser para reforçar a capacidade dereparo e de regeneração de um epitélio, especialmente de uma epiderme, emparticular uma epiderme envelhecida.
13. Uso de pelo menos um lisado de pelo menos ummicroorganismo do gênero Bifidobacterium species em combinação com pelomenos um derivado de salicilato de fitoesfingosina, caracterizado pelo fato deser para a preparação de uma composição para reforçar a capacidade dereparo e de regeneração de um epitélio, especialmente de uma epiderme, emparticular uma epiderme envelhecida.
14. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 e-12, caracterizado pelo fato de que dito lisado é como definido nasreivindicações 2 a 4.
15. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 a-13, caracterizado pelo fato de que dito derivado de salicilato defitoesfingosina é como definido nas reivindicações 5 a 8.
16. Método de tratamento cosmético, caracterizado pelo fatode compreender pelo menos a administração, a um indivíduo sujeito aoenvelhecimento de pele, de pelo menos uma combinação compreendendo pelomenos um lisado de pelo menos um microorganismo do gêneroBifidobacterium species e pelo menos um derivado de salicilato defitoesfingosina.
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