BRPI1003058A2 - composições farmacêuticas à base de extratos de espécies da famìlia phytolaccaceae - Google Patents
composições farmacêuticas à base de extratos de espécies da famìlia phytolaccaceae Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI1003058A2 BRPI1003058A2 BRPI1003058A BRPI1003058A2 BR PI1003058 A2 BRPI1003058 A2 BR PI1003058A2 BR PI1003058 A BRPI1003058 A BR PI1003058A BR PI1003058 A2 BRPI1003058 A2 BR PI1003058A2
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- extracts
- phytolaccaceae
- pharmaceutical compositions
- compositions based
- image
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 77
- 241000894007 species Species 0.000 title claims abstract description 20
- 241000219505 Phytolaccaceae Species 0.000 title claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 230000036407 pain Effects 0.000 claims abstract description 23
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 claims abstract description 20
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 241000427352 Gallesia Species 0.000 claims description 15
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 6
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 5
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims description 5
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000004650 C1-C8 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 claims 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 36
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 4
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 abstract description 3
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 abstract description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 abstract description 3
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 abstract description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 abstract description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 11
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 9
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 241001672739 Artemia salina Species 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 6
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 5
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 4
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 description 3
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 3
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238426 Anostraca Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N Carbon-13 Chemical compound [13C] OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 2
- 231100000111 LD50 Toxicity 0.000 description 2
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000002027 dichloromethane extract Substances 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- -1 methoxyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000005325 percolation Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241001081440 Annonaceae Species 0.000 description 1
- 241000238582 Artemia Species 0.000 description 1
- 241000132007 Bahia Species 0.000 description 1
- 229930194845 Bahia Natural products 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 1
- 206010073931 Genital herpes simplex Diseases 0.000 description 1
- 208000001688 Herpes Genitalis Diseases 0.000 description 1
- 235000017858 Laurus nobilis Nutrition 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 241001466077 Salina Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000497386 Silveira Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001189780 Unonopsis Species 0.000 description 1
- 206010000269 abscess Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001760 anti-analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002141 anti-parasite Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000002832 anti-viral assay Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000003096 antiparasitic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- VILAVOFMIJHSJA-UHFFFAOYSA-N dicarbon monoxide Chemical compound [C]=C=O VILAVOFMIJHSJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 229940124600 folk medicine Drugs 0.000 description 1
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 201000004946 genital herpes Diseases 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000001640 nerve ending Anatomy 0.000 description 1
- 230000001272 neurogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 231100001083 no cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000028 nontoxic concentration Toxicity 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 235000017807 phytochemicals Nutrition 0.000 description 1
- 238000009160 phytotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 229930000223 plant secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 150000003464 sulfur compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000654 trypanocidal effect Effects 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
COMPOSIçõES FARMACEUTICAS à BASE DE EXTRATOS DE ESPECIES DA FAMILIA PHYTOLACCACEAE A presente invenção trata da obtenção de extratos vegetais de espécies da familia Phytolaccaceae, em especial extratos de espécies pertencentes ao género Galiesia, mais particularmente extratos de Galiesia gorazema, assim como ao uso de composições farmacêuticas contendo tais extratos para o tratamento e profilaxia de inflamações, dores e doenças virais. Extratos das raízes e das folhas de G. gorazema (Phytolaccaceae) apresentaram atividade analgésica e antiinflamatõria (via intraperitoneal) em modelos de contorção abdominal de ratos provocado por formalina. Além disso, o extrato das raízes apresentou atividade antiviral especifica contra o vírus HSV, agente causador da Herpes.
Description
COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE Campo da invenção
A presente invenção trata da obtenção de extratos vegetais de 5 espécies da família Phytolaccaceae, em especial extratos de espécies pertencentes ao gênero Gallesia, mais particularmente extratos de Gallesia gorazema, e de composições farmacêuticas contendo tais extratos para o tratamento e profilaxia de inflamações, dores e doenças virais. Fundamentos da invenção 10 Com o desenvolvimento da tecnologia aliado ao interesse em se
confirmar o conhecimento em medicina popular, as plantas medicinais têm tido seu valor terapêutico pesquisado mais intensamente pela ciência.
Segundo a Resolução Diretoria Colegiada no 48/2004 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária-ANVISA, fitoterápicos são medicamentos 15 preparados exclusivamente com plantas ou partes de plantas medicinais, a saber: raízes, cascas, folhas, flores, frutos ou sementes, que possuem propriedades reconhecidas de cura, prevenção, diagnóstico ou tratamento sintomático de doenças.
A Fitoquímica estabeleceu-se como a ciência que faz o levantamento 20 e o estudo dos componentes químicos das plantas, a fim de usá-los em diversas aplicações como princípios ativos, agentes odoríferos e pigmentos.
A exploração da biodiversidade de forma sustentável (bioprospecção) é decorrente da crescente valorização dos recursos naturais e tem como objetivo principal a busca de recursos genéticos e bioquímicos para fins 25 comerciais fhttp://www.ccuec.unicamp.br/revista/infotec/artigos/silveira.html - SANTOS, A.S.R. - Biodiversidade, Bioprospecção e Conhecimento tradicional e o Futuro da Vida - Março, 2001].
A indústria farmacêutica moderna busca, de maneira cada vez mais crescente, o desenvolvimento de produtos a partir de bases, extratos e 30 produtos naturais. Fármacos e medicamentos com propriedades analgésicas, antiinflamatórias, citotóxicas e antivirais assumem uma grande importância no mercado farmacêutico, uma vez que estão entre os produtos de maior volume de comercialização em todo o mundo. Técnicas relacionadas
Gallesia gorazema, uma espécie vegetal da família Phytolaccaceae encontrada no Brasil nas imediações do município de Itapetinga, no estado 5 da Bahia, é um arbusto de folhas elípticas e lustrosas, com flores em cachos, frutos oblongos, contendo um caroço no interior. Suas folhas são empregadas no tratamento de abscessos e para o alívio das dores reumáticas. Ocorre preferencialmente em terrenos profundos, úmidos e de alta fertilidade, sendo considerada padrão de terra boa. Exala, enquanto 10 verde, forte cheiro aliáceo peculiar a todas as partes da planta. O óleo essencial de suas folhas frescas foi analisado por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas (GC/MS), cujo cromatograma revelou a presença de mais de 80 compostos, sendo que a vitamina Έ" e outros sete constituintes químicos, de baixo peso molecular e de estrutura 15 molecular simples, foram identificados.
BARBOSA e colaboradores [Fitoterapia, vol. 70, p. 152-156, 1999] analisaram a composição química do óleo essencial da casca da G. gorazema por CG/MS, levando à identificação de seis compostos não- sulfurados e 19 sulfurados. 20 O bioensaio de toxidade contra Artemia salina tem sido usado como
um teste preliminar rápido, barato e eficiente para a detecção de extratos e compostos bioativos [MEYER e colaboradores, Planta Medica vol. 45, p. 31- 34, 1982]. A literatura mostra que a toxidade contra A. salina se correlaciona muito bem com as atividades citotóxica [SOLIS e colaboradores, Planta 25 Medica vol. 59, p. 250-252, 1993] e tripanosomicida [ZANI e colaboradores, Phytomedicine vol. 2, p. 47-50, 1995], de maneira que, se uma dada amostra mostrar-se tóxica contra A. salina, ela também apresentará, muito provavelmente, propriedades citotóxica (antitumoral) e antiparasitária (tripanosomicida). Ainda não há trabalhos na literatura que comprovem a 30 correlação da toxidade em A. salina com outras atividades biológicas, mas acredita-se que, ao ser observada tal toxidade em um dado extrato, fração ou substância, este terá uma chance maior de apresentar diversas outras atividades biológicas tais como antioxidante, antiinflamatória, analgésica e antiviral, dentre outras, além das atividades citotóxica e tripanosomicida já comprovadamente correlacionadas.
Artemia salina é um crustáceo da ordem Anostraca (sem carapaça) 5 que vive em lagos de água salgada e em salinas de todo o mundo. Está adaptado para sobrevivência em corpos de água que sofrem grandes variações sazonais e pode tolerar salinidades que flutuam de 3,5 a 70%o. Seus óvulos podem ser desenvolvidos em laboratório, pois eclodem rápida e facilmente. Seu uso rotineiro em bioensaios de toxicidade decorre da 10 simplicidade do teste, visto não necessitar de métodos assépticos nem de equipamentos especiais [SIQUEIRA e colaboradores - Estudo fitoquímico de Unonopsis Iindmanii - Annonaceae, biomonitorado pelo ensaio de toxicidade sobre Artemia salina Leach - Revista Química Nova, 21(5), 1998].
15 A atividade citotóxica do extrato etanólico bruto das folhas [PEREIRA
e colaboradores - Avaliação de atividade citotóxica de Gallesia gorazema (PhytoIacaeeae) - Vitória da Conquista, BA, UESB, X CONPEX, Livro de Resumos, 2007] e dos galhos e raízes de G. gorazema [SILVA JÚNIOR e colaboradores - Atividade citotóxica de extratos de Gallesia gorazema 20 (PhytoIacaceae) - Fortaleza, CE, 32a Reunião Anual da Sociedade Brasileira de Química], já foi descrita anteriormente.
A partir da bioatividade apresentada pelos extratos de Gallesia gorazema contra A. salina, tais extratos foram submetidos a outros ensaios biológicos específicos a fim de se avaliar a presença das atividades 25 antiinflamatória, analgésica e antiviral. Sumário da invenção
A presente invenção trata da obtenção de extratos vegetais de espécies da família Phytolaccaceae, em especial extratos de espécies pertencentes ao gênero Gallesia, mais particularmente extratos de Gallesia 30 gorazema, e de composições farmacêuticas contendo tais extratos para o tratamento e profilaxia de inflamações, dores e doenças virais.
Em um primeiro aspecto a presente invenção destina o uso de 4/11
extratos de Gallesia gorazema para o tratamento e profilaxia de inflamações, dores e infecções virais. Extratos das raízes e das folhas de G. gorazema (PhytoIaccaceae) apresentaram atividade analgésica e antiinflamatória (via intraperitoneal) em modelos de contorção abdominal de ratos provocado por formalina. Além disso, o extrato das raízes apresentou atividade antiviral específica contra o vírus HSV, agente causador da Herpes. Esses resultados indicam o emprego destes extratos em produtos fitoterápicos com ação antiinflamatória, analgésica e antiviral de uso tópico.
Em um segundo aspecto, a presente invenção indica composições farmacêuticas contendo tais extratos para o tratamento e/ou prevenção de processos inflamatórios, dores e infecções virais.
Finalmente, em um terceiro aspecto, a invenção objetiva identificar os componentes ativos presentes nesses extratos, assim como avaliar os efeitos biológicos a eles atribuídos. Breve descrição das figuras
A Figura 1 apresenta em gráfico o resultado dos ensaios de modelo de contorções abdominais induzidos pela aplicação intraperitoneal de ácido acético a 0,6% empregando-se extratos das folhas (DM-26 e DM-27).
A Figura 2 apresenta em gráfico o efeito analgésico e antiinflamatório dos extratos das folhas DM-26 e DM-27, administrados a 10 mg/Kg via intraperitoneal, contra dor induzida pela formalina (2,5 %) em camundongos.
A Figura 3 apresenta em gráfico o efeito analgésico dos extratos das folhas DM-26 e DM-27, administrados a 10 mg/Kg via intraperitoneal, contra dor induzida pelo glutamato em camundongos.
A Figuras 4 mostra a ação analgésica e antiinflamatória obtida a partir do ensaio do extrato da raiz (DM-R) em modelo de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético 0,6%, via intraperitoneal
A Figura 5 mostra a ação analgésica e antiinflamatória obtida a partir do ensaio do extrato da raiz (DM-R) em modelo de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético 0,6%, via oral.
A Figura 6 mostra a ação analgésica e antiinflamatória obtida a partir do ensaio do extrato da raiz (DM-R) em modelo de dor induzida pela formalina 2,5%.
A Figura 7 mostra a ação analgésica e antiinflamatória obtida a partir do ensaio do extrato da raiz (DM-R) em modelo de edema induzido pela formalina 2,5%.
As Figuras 8a e 8b apresentam os espectros de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) de hidrogênio e de carbono-13, respectivamente, que caracterizam a substância obtida a partir do fracionamento de DM-R. Descrição detalhada da invenção
Para que a invenção possa ser mais bem compreendida e avaliada, sua descrição detalhada será apresentada a seguir. Entretanto, deve ficar claro que os exemplos também aqui apresentados visam apenas ilustrar o invento, não podendo ser atribuído aos mesmos qualquer caráter restritivo à invenção.
Foi feita inicialmente a coleta do material vegetal (folhas, galhos e raízes), cada parte sendo tratada separadamente.
As folhas foram extraídas com etanol por percolação, e o extrato foi concentrado em rotavapor, obtendo-se um extrato que denominamos DM-27. O extrato DM-27, por sua vez, foi suspenso em água, e extraído por partição com clorofórmio. A camada clorofórmica foi concentrada em rotavapor, gerando o extrato DM-26.
As raízes da planta foram secas, pulverizadas e extraídas com diclorometano, obtendo-se o extrato DM-R.
Extratos das raízes (DM-R) e das folhas (DM-26 e DM-27) de Gallesia gorazema (PhytoIaccaceae) apresentaram atividade analgésica e antiinflamatória (via intraperitoneal) em modelos de contorção abdominal de ratos provocado por formalina. Por via oral, não houve atividade significativa para estes três extratos.
Os Exemplos apresentados a seguir descrevem os procedimentos adotados e apresentam os resultados obtidos. Exemplol: Coleta do material vegetal e preparo dos extratos
Realizou-se a coleta das raízes de G. gorazema (PhytoIaccaceae) que foram secas imediatamente em estufa à temperatura de aproximadamente 60°C por 72 horas e, em seguida, pulverizadas em moinho de facas. O pó resultante (250 g) foi submetido a uma percolação exaustiva com diclorometano sendo concentrado com o uso do rotavapor sob vácuo, obtendo-se o extrato diclorometânico (DM-R: 1,3 g). A torta restante da extração foi submetida a uma nova extração, agora com etanol, e o extrato etanólico foi concentrado em evaporador rotativo (60 0C) obtendo-se o Extrato Etanólico de G. gorazema (EEGG; 0,51 g). O extrato etanólico (EEGG) foi submetido à coluna pequena em sílica gel, obtendo-se quatro frações: hexânica, diclorometânica, acetato de etila e metanólica.
O extrato diclorometânico DM-R (1,3 g) foi submetido a um fracionamento preliminar em cromatografia em coluna de sílica-gel, utilizando-se, como eluentes, misturas de hexano e acetato de etila com polaridades crescentes, originando noventa frações. Destas, pelo menos uma mostrou-se corresponder a uma substância pura sob Cromatografia em Camada Delgada (CCD), a qual foi então, submetida às análises espectrométricas. A estrutura foi elucidada por técnicas de Ressonância Magnética Nuclear de hidrogênio (RMN de 1H) e de carbono-13 (RMN de .13C), e pode ser representada pela fórmula geral: <formula>formula see original document page 7</formula> onde:
R = H, OH, OCH3, SH, SCH3, O-R', S-R';
R' = Alquila Ci-C8, alquenila Ci-C8, alquinila Ci-C8, fenila ou
arila C3-C33;
X = O, S, NH, N-R1 N-R'; e η varia de 1 a 50. O componente ativo identificado, aqui denominado GGER 44, apresentou a fórmula geral: <image>image see original document page 8</image>
As Figuras 8a e 8b apresentam os espectros que caracterizam a substância por RMN.
A Figura 8a apresenta o espectro de RMN de hidrogênio que evidencia os seguintes sinais: um singleto (3H) em 3,9 ppm, característico 5 de um grupo metoxila; dois tripletos (2H cada), um em 3,6 e outro em 4,2 ppm, característicos de dois metilenos oxigenados; dois dupletos (1H cada, J = 10 Hz), um em 7,6 e outro em 6,3 ppm, característicos de hidrogênios olefínicos de dupla ligação conjugada com carbonila e anel aromático; sinais na faixa de 6,8 a 7,1 ppm (3H), atribuídos a hidrogênios ligados a anel 10 aromático; e um singleto alto em 1,25 ppm, característico de uma cadeia carbônica longa formada por grupos metilênicos ligados entre si.
A Figura 8b apresenta o espectro de RMN de carbono-13, mostrando sinais característicos de carbono carbonílico de éster conjugado (167,4 ppm), dois metilenos oxigenados (64,6 e 63,0 ppm), um grupo metoxila (55,9 15 ppm) e carbonos olefínicos e aromáticos (sinais na faixa de 109,3 a 147,9 ppm).
Exemplo 2: Avaliação da citotoxidade em Artemia salina
Os cistos de A. salina foram incubados num recipiente contendo uma solução de sal marinho (36g de sal marinho em 1000 mL de água) mantida 8/11
sob iluminação artificial em aproximadamente 28°C por 48 horas.
A solução do extrato bruto EDGG (50mg de extrato em 1mL de DMSO) foi preparada e distribuída entre os tubos de ensaio adotando-se triplicata para cada uma das cinco concentrações utilizadas, conforme 5 apresentado na Tabela 1.
TABELA 1
<table>table see original document page 9</column></row><table>
O branco foi preparado como a concentração de 500 pg/mL, substituindo os 50 pL da solução do extrato pela mesma quantidade de DMSO puro. Após 24 horas foi feita a leitura dos sobreviventes e mortos em placas de Petri.
Análises estatísticas dos dados obtidos feitas no software SAEG através do delineamento Probit determinaram a CL50 (Concentração Letal para 50% da população de A. salina). A literatura estabelece que extratos com valores de CL5O < 1000 pg/mL podem ser considerados como citotóxicos (MEYER, et al, 1982; ZANI et al, 1995). As amostras EDGG e EEGG mostraram-se bastante citotóxicas, com valores de CL5O < 70 pg/mL para ambos os extratos.
Exemplo 3: Avaliação da atividade analgésica / antiinflamatória
Para efeito de comparação, foram realizados ensaios em modelos de contorção abdominal de camundongos, provocado por ácido acético 0,6%, e de dor induzida por formalina e glutamato, para os extratos que denominamos DM-26, DM-27 e DM-R.
Ensaio de contorção abdominal. Camundongos diferentes foram pré- tratados intraperitonealmente com cada um dos extratos (10 mg/Kg, 30 minutos antes), simultameamente ao tratamento de animais controle com solução salina. O número de constrições abdominais foi cumulativamente contado até um período de 20 minutos. A ação analgésica foi expressa como a redução no número de constrições abdominais dos animais tratados em relação aos animais controle.
Ensaio de dor induzida pela formalina. A câmara de observação foi um cilindro de 20 cm de diâmetro equipado com um espelho num ângulo de .45° a fim de permitir a observação clara das patas dos animais. Camundongos foram tratados com uma solução dos extratos (10 mg/Kg) ou solução salina (animais controle), por via intraperitoneal, 30 minutos antes de receberem a injeção de formalina. Cada animal foi colocado na câmara 5 minutos antes do tratamento, para permitir sua aclimatização ao novo ambiente. O volume de 20 μΙ_ de solução de 2,5% de formalina em salina .0,9% foi injetado intraplantarmente à pata direita traseira do animal. O animal foi, então, retornado à câmara e a quantidade de tempo gasto para lamber a pata que recebeu a injeção foi considerada como indicativo de dor. Duas fases distintas de deste indicativo foram identificadas: uma fase aguda, de 0 a 5 minutos, e uma fase crônica, de 15 a 30 minutos após a injeção de formalina.
Ensaio de dor induzida pelo glutamato. Essencialmente o mesmo ensaio descrito para aquele que utiliza a formalina, diferindo-se apenas no uso de uma solução de glutamato no lugar de formalina para a indução da dor.
As Figuras 1-3 mostram, em gráfico, os resultados obtidos para os extratos DM-26 e DM-27 nos ensaios de contorções abdominais produzidas por ácido acético 0,6% e por dor induzida pela formalina e glutamato. Como pode ser observado, ambos os extratos foram efetivos em todos os modelos, sendo que DM-26 foi o mais ativo. Observa-se, ainda, na Figura 2, o efeito analgésico e antiinflamatório dos extratos das folhas DM-26 e DM-27, administrados a 10 mg/Kg via intraperitoneal, contra dor induzida pela formalina (2,5"%) em camundongos nas fases I (agudo, 0-5 min, fase neurogênica caracterizada principalmente pela estimulação da formalina nos terminais nervosos e subseqüente liberação da substância P, que é um neurotransmissor peptídico de 11 aminoácidos encontrada em elevadas concentrações nas raízes nervosas dorsais da medula espinhal rhttp://www.asmabronquica.com.br/medical/resposta tardia nanes taquicini nas, htm Π e Il (crônico, 15-30 min, fase caracterizada pela subseqüente inflamação do tecido periférico).
Para efeito de comparação, no modelo de dor induzido pelo ácido
acético, enquanto DM-26 e DM-27 inibiram a constricção abdominal em .57,8% e 37,4%, respectivamente, o ácido acetilsalicílico (Aspirina) e o Paracetamol (acetaminofeno) inibiram cerca de 35% na mesma dose e rota de administração.
As Figuras 4 a 7 mostram, em gráfico, os resultados obtidos para o
extrato DM-R nos ensaios de contorções abdominais produzidas por ácido acético 0,6% e por dor induzida pela formalina e glutamato. Nelas, observamos que o extrato DM-R foi bastante ativo, bem mais que os extratos DM-26 e DM-27 anteriores. Por conta disso, o ensaio foi repetido em concentrações de extrato diferentes, a fim de se determinar a dose inibitória de 50% da dor (DI50), que foi de 5,7 mg/kg (Figura 4). Para efeito de comparação, no mesmo modelo, o ácido acetilsalicílico (aspirina) e o paracetamol apresentaram Dl50 de aproximadamente 25 mg/kg. Estes resultados foram obtidos por via intraperitoneal, pois por via oral o extrato não foi ativo até a dose de 100 mg/kg. No modelo da formalina, via intraperitoneal, o extrato também foi bem ativo na segunda-fase de dor, e inibiu o edema formado, dando indicativas de analgésico e antiinflamatório (Figura 7).
Exemplo 4: Avaliação da atividade antiviral
O extrato DM-R foi solubilizado em pequena quantidade de DMSO e,
em seguida, essa solução foi diluída em água sob leve aquecimento (50°C) até completa dissolução, atingindo a concentração final de 100 pg/mL (ou .200 pg/mL). Essa solução foi esterilizada por filtração usando-se uma membrana 0,22 pm Milipore. Para a avaliação da atividade antiviral, os extratos foram ensaiados na concentração máxima não-tóxica, o que corresponde à concentração máxima que não produz nenhuma alteração morfológica nas células ensaiadas. As células Vero (células dos rins de macacos verdes africanos) foram cultivadas no meio essencial mínimo de Eagle (MEM), suplementado com 10% de soro bovino fetal (FBS) e mantido a 37°C em atmosfera de 5% de CO2. A atividade antiviral foi determinada pela redução observada na contagem dos vírus. Diluições logarítmicas das suspensões de vírus foram adicionadas às culturas tratadas e não-tratadas de culturas de células, e então incubadas a 37°C em atmosfera de 5% de CO2. Os resultados foram expressos como porcentagem de inibição [GONÇALVES e colaboradores, Phytomedicine vol. 8, p. 477-480, 2001].
O extrato diclorometânico das raízes (DM-R) apresentou atividade antiviral contra Herpes simplex tipo 1 (labial, HSV-1), inibindo este vírus em .93% na concentração de 100 pg/mL. No teste de toxicidade para as células Vero, o extrato DM-R alterou morfologicamente as células na concentração de 200 pg/mL, mas 74% das células permaneceram viáveis. O extrato etanólico EEGG não apresentou nenhuma atividade significativa quando ensaiado a 200 pg/mL.
A substância GGER 44 também foi avaliada neste ensaio antiviral. Houve tanto inibição para o HSV-1, como ocorrido com DM-R, como para o HSV-2 (Herpes simplex tipo 2, genital). Para o HSV-2 houve inibição de .97,8% na concentração de 200 pg/mL, mas caiu rapidamente na concentração de 100 pg/mL com inibição de 68,4%. Esse resultado parece contraditório devido aos resultados iniciais com as frações, mas isso muitas vezes acontece pois as frações podem conter substâncias antagônicas e também pelo fato de trabalharmos com substâncias mais puras e menos diluídas. Quanto ao HSV-1, as percentagens de inibição foram de 99,8%, .92% e 87,4% nas concentrações de 200, 100 e 50 pg/mL, respectivamente. Usando 25 pg/mL baixou para 68,4%. Não houve citotoxicidade contra as células Vero na maior concentração testada (200 pg/mL).
Claims (9)
1.COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE caracterizadas por conter extratos de espécies da família Phytolaccaceae1 em especial extratos de espécies pertencentes ao gênero Gallesia, os quais são dotados de atividade analgésica, antiinflamatória e antiviral, com indicação para o tratamento e prevenção de processos inflamatórios, dores e infecções virais.
1/3 REIVINDICAÇÕES
2.COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por conter extratos de Gallesia gorazema. os quais são dotados de atividade analgésica, antiinflamatória e antiviral, com indicação para o tratamento e prevenção de processos inflamatórios, dores e infecções virais.
3.COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por o efeito analgésico e antiinflamatório dos extratos das folhas de Gallesia gorazema, administrados a 10 mg/Kg via intraperitoneal, inibir a constricção abdominal em cerca de 60%.
4.COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por o efeito analgésico e antiinflamatório dos extratos das raízes de Gallesia gorazema, administrados a 10 mg/Kg via intraperitoneal, inibir a constricção abdominal em cerca de 76%.
5.COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por o extrato das raízes de Gallesia gorazema apresentar atividade antiviral contra Herpes simplex , com inibição superior a 68%.
6.COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por conter pelo menos um componente ativo de fórmula geral onde: <image>image see original document page 14</image> R' = Alquila Ci-C8, alquenila CrC8, alquinila Ci-C8, fenila ou arila C3-C33; X = O, S, NH1 N-R1 N-R'; e η varia de 1 a 50.
7. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE de acordo com a reivindicação 6, caracterizadas por conter o componente ativo de fórmula geral abaixo: <image>image see original document page 0</image>
8. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA PHYTOLACCACEAE de acordo com a reivindicação 6, caracterizadas por conter o componente ativo de fórmula geral abaixo: <image>image see original document page 0</image>
9. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS À BASE DE EXTRATOS DE ESPÉCIES DA FAMÍLIA P HYTO LACCAC EAE de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por serem utilizadas para o tratamento e prevenção de processos inflamatórios, dores e infecções virais.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BRPI1003058 BRPI1003058A2 (pt) | 2010-08-10 | 2010-08-10 | composições farmacêuticas à base de extratos de espécies da famìlia phytolaccaceae |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BRPI1003058 BRPI1003058A2 (pt) | 2010-08-10 | 2010-08-10 | composições farmacêuticas à base de extratos de espécies da famìlia phytolaccaceae |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI1003058A2 true BRPI1003058A2 (pt) | 2012-10-02 |
Family
ID=46934296
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI1003058 BRPI1003058A2 (pt) | 2010-08-10 | 2010-08-10 | composições farmacêuticas à base de extratos de espécies da famìlia phytolaccaceae |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| BR (1) | BRPI1003058A2 (pt) |
-
2010
- 2010-08-10 BR BRPI1003058 patent/BRPI1003058A2/pt not_active IP Right Cessation
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2873449T3 (es) | Composición rica en hidroxitirosol a partir de agua de vegetación de aceitunas y método de uso del mismo | |
| Adedapo et al. | Phytochemistry, anti-inflammatory and analgesic activities of the aqueous leaf extract of Lagenaria breviflora (Cucurbitaceae) in laboratory animals | |
| Sulima et al. | Variations in the chemical composition and content of salicylic glycosides in the bark of Salix purpurea from natural locations and their significance for breeding | |
| Akram et al. | Mentha arvensis Linn.: A review article | |
| AKBAR et al. | Evaluation of phytochemical composition and metabolite profiling of macroalgae Caulerpa taxifolia and C. peltata from the Banda Aceh coast, Indonesia. | |
| Ahmad et al. | Pharmacological profile of Salvadora persica. | |
| Shawa et al. | Brine shrimp lethality and phytochemical determination of aqueous extracts of Senna singueana, Musa paradisiaca, and Ziziphus mucronata in Malawi. | |
| Rodiani et al. | Avicennia marina: a natural resource for male anti-fertility in family planning | |
| Awe et al. | Antibacterial, phytochemical and proximate analysis of Pteridium aquilinum | |
| Rout et al. | Antioxidant properties in leaf and root extracts of some medicinally important mangrove species of Odisha coast | |
| Ebeye et al. | The histological effect of Cnidoscolus aconitifolius aqueous leaf extracts on the archetecture of the ovary, testis and sperm cells of adult wistar rats | |
| Kanadi et al. | Acute toxicity studies and Phytochemical constituents of different solvents extracts of Carica papaya seeds | |
| Oladimeji et al. | In-vitro anti-microbial and brine-shrimp lethality potential of the leaves and stem of Calotropis procera (ait). | |
| Jäger et al. | Cyclooxygenase inhibitory activity of South African plants used against inflammation | |
| Rajesh et al. | Antiproliferative effects of the methanolic petiole extract of Eichhornia crassipes against sloan kettering melanoma 5 cell Line: an in vitro study | |
| Rahman et al. | The Effect Of Dosage Of Mangrove Leaf Extract Avicennia Marina On The Viability Of Hela Cells | |
| Teja et al. | Phytochemical and In vitro Anti-inflammatory Activity on Abrus precatorius | |
| Sakthivel et al. | Pharmacological activities of Neolamarckia cadamba–a review | |
| Sodhi et al. | A Review on Phytopharmacological Properties of Caesalpinia Crista. | |
| Ikezu et al. | Computational insights into leaf compounds of Pterocarpus santalinoides against FabH protein receptor | |
| Ali et al. | Study of the chemical composition of Syzygium cumini (L.) Skeels | |
| Daniel et al. | Preliminary phytochemical screening and toxic effect of Melanthera scandens leaf extracts using brine shrimp (Artemia salina) test | |
| Ghazali et al. | Anti-Inflammatory Effect of Ixora coccinea Linn On Stem Cells of Human Exfoliated Deciduous Teeth Cells.(2023) | |
| Ahmad et al. | Pharmacological and biological evaluation of extracts from Gratiola officinalis L.(Scrophulariaceae). | |
| Sharmin et al. | Investigation of biological activities of Jasminum matthewii |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B06G | Technical and formal requirements: other requirements |
Free format text: APRESENTE DOCUMENTO QUE ESCLARECA A DIVERGENCIA ENTRE O NOME DO PROCURADOR CONSTITUIDO NO ATO DO DEPOSITO E AQUELE APRESENTADO NO DOCUMENTO DE PROCURACAO. |
|
| B03A | Publication of an application: publication of a patent application or of a certificate of addition of invention | ||
| B08F | Application fees: dismissal - article 86 of industrial property law |
Free format text: REFERENTE A 6A ANUIDADE. |
|
| B08K | Lapse as no evidence of payment of the annual fee has been furnished to inpi (acc. art. 87) |
Free format text: EM VIRTUDE DO ARQUIVAMENTO PUBLICADO NA RPI 2384 DE 13-09-2016 E CONSIDERANDO AUSENCIA DE MANIFESTACAO DENTRO DOS PRAZOS LEGAIS, INFORMO QUE CABE SER MANTIDO O ARQUIVAMENTO DO PEDIDO DE PATENTE, CONFORME O DISPOSTO NO ARTIGO 12, DA RESOLUCAO 113/2013. |