CA1341607C - Fabrication de l'erythropoietine - Google Patents

Abstract

L'invention concerne de nouveaux polypeptides possédant tout ou partie de la conformation structurelle primaire et une ou plusieurs des propriétés biologiques de l'érythropoïétine chez les mammifères (« EPO ») qui sont caractérisées dans des formes préférées comme étant le produit d'expression de l'hôte procaryote ou eucaryote d'une séquence d'ADN exogène. À titre d'illustration, l'ADN génomique, de l'ADNc et des séquences d'ADN fabriquées codant pour tout ou partie de la séquence de résidus d'acides aminés de l'EPO ou des analogues de ceux-ci sont incorporés de façon autonome dans des vecteurs plasmidiques ou viraux de réplication utilisés pour transformer ou transfecter des cellules hôtes procaryotes ou eucaryotes appropriés tels que des bactéries, des levures ou des cellules de vertébrés en culture. Après isolement des milieux de culture ou de lysats ou des fragments cellulaires, des produits d'expression de l'affichage des séquences d'ADN, par exemple, les propriétés immunologiques et in vitro et in vivo l'activité biologique de l'EPO d'espèces origines humaines ou de singes. La présente invention concerne également des polypeptides synthétisés chimiquement qui partagent les propriétés biochimiques et immunologiques de l'EPO. Elle décrit également des procédés améliorés pour la détection de polynucléotides simple brin spécifiques dans un échantillon cellulaire ou viral hétérologue préparé à partir de, par exemple, l'ADN présent dans une « bibliothèque » d'ADN génomique ou d'ADNc plasmidique ou viral.