CA2061101C - Utilisation du tba a titre de medicament contre le stress en aquaculture - Google Patents

Utilisation du tba a titre de medicament contre le stress en aquaculture Download PDF

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Abstract

La présente invention concerne une composition médicamenteuse poux lutter contre le stress chez le poisson, caractérisée en ce qu'elle comporte en association avec un excipient physiologiquement acceptable pour le poisson, un ou plusieurs composés de formule (I): dans laquelle R représente un radicaxl alkyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone et X représente un radical acyle obtenu à partir d'un acide carboxylique contenant de 1 à 18 atomes de carbone. L'invention concerna également l'usage de cette composition pour lutter contre le stress chez le poisson et pour accroître, chez le poisson, la résistance aux champignons, aux virus, aux bactéries et à d'autres agents pathogènes.

Description

20s1101 UTILISATION DU TBA A TITRE DE MEDICAMENT
CONTRE LE STRESS EN AQUACULTURE
La présente invention concerne une nouvelle utilisation des stéroides 4, 9, 11-triénique pour accroître la résistance des poissons au stress en cours d'élevage.
Un objet de l'invention est l'utilisation des composés de formule (I):
R
X
II) O
dans laquelle R représente un radical alkyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone et X représente un radical acyle obtenu à partir d'un acide carboxylique contenant de 1 à 18 atomes de carbone, pour la fabrication de médicaments, la réalisation de compositions médicamenteuses, pour lutter contre le stress chez les poissons et pour accroître, chez les poissons, la résistance aux champignons, aux virus, aux bactéries et à d'autres agents pathogènes.
R représente de préférence un radical méthyle.
OX représente de préférence un radical acétoxy, amyloxy ou hexabenzyloxycarbonyle.
Le poisson est un animal dont l'élevage est difficile; sont état de santé est directement lié au milieu dans lequel il évolue. Par conséquent, toute variation du milieu peut être un facteur de stress pour le poisson.
Parmi les facteurs du stress, on peut citer:
- Les facteurs physiques tels que les variations de la température de l'eau, les variations de gaz dissous dans l'eau, - Les facteurs mécaniques dds au transport, au surpeuplement de poissons dans un endroit donné, - Les facteurs chimiques ou biologiques dûs aux bactéries, aux virus et aux parasites.
Le poisson est un animal très sensible au stress. On crée d'importantes réactions de stress chaque fois qu'on le transfère de réservoir en réservoir, de réservoir en étang ou au cours de calibrage à l'aide de filets.
La réaction de stress induit des modifications importantes:
1) Internes: La libération des catécholamines et des corticostéroïdes qui modifient considérablement les paramètres sanguins, le métabolisme et l'excrétion.
2) Externes: L'épiderme des poissons et bien moins épais que celui des vertébrés supérieurs et ne contient pas de 2osmo~
kératine, l'épiderme recouvre les écailles et il est très facilement endommagé et égratigné au cours de manipulations.
Très souvent, à la suite de manipulations, il s'est produit des maladies et des morts avec une intensité variable selon les espëces et l'âge des poissons et la connaissance du pisciculteur.
La réduction de cette mortalité dtie aux manipulations représenterait une percée en aquaculture.
Avantageusement, l'invention concerne une composition médicamenteuse pour lutter contre le stress chez le poisson, caractérisée en ce qu'elle comporte en association avec un excipient physiologiquement acceptable pour le poisson, un ou plusieurs composés de formule (I):
R
X
(I) dans laquelle R représente un radical alkyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone et X représente un radical acyle obtenu à partir d'un acide carboxylique contenant de 1 à 18 atomes de carbone.
De préférence, cette composition est destinée à être -2a-administrée par voie orale et, avantageusement, l'excipient peut être un aliment pour poisson.
-2b-T. ~ i nzrcnf i nn rnnnaYnP PQa~ PTllPrit l'utilisation de l'acétate de trenbolone (TBA) pour la fabr~~-~.
tion d'aliments médicamenteux (i. e. composition médicamenteuse) destinés 'à l'administration aux poissons.
On vient de découvrir qu'il est possible d'obtenir d'excellents résultats chez le poisson d'eau douce, le poisson d'eau de mer et le poisson d'eau saumâtre.
D'excellents résultats ont été obtenus à l'aide des médicaments de l'invention chez des Salmonidés tels que la truite ou le saumon, chez des Anguillidés tels que l'anguille, chez des Cypranidés tels que la carpe, chez le poisson cycloïde tel que le tilapie et chez le poisson de mer tel que le serran ou la daurade.
Les résultats histologiques suivants ont été obtenus à
partir des travaux présentés ci-après.
Le gancréas : Moins de dégénérescence graisseuse dans le groupe traité au TBA que dans le contrôle.
--. Meilleure irrigation d'organe - Meilleure sécrétion d'insuline à partir des îlots de Langerhans.
- Meilleure production d'enzymes digestives ce qui améliore l'utilisation des aliments.
Le foie : Moins de dépôts graisseux dans le groupe traité
a conduit à une amélioration de l' irrigation et donc à une amélioration des fonctions hépati-ques - Dépuration - Synthèse La peau Épaississement de l'épiderme.
Baisse de la dégénérescence graisseuse du muscle sous-cutané.
- 3 -Dans un mode de réalisation préféré, l'utilisation de la compo-"~' sition peut s'effectuer par voie orale, le produit étant susc~p~
tible par exemple d'être incorporé dans un aliment pour poisson.
A titre d'aliment pour poisson, on peut utiliser des mélanges commerciaux contenant des farines de poissons, des protéines, des levures, de la farine de soja et des vitamines, qui se présentent sous forme de poudres ou de granulés.
Plus particulièrement, un objet de l'invention est l'utilisation caractérisée en ce qu'on effectue l'admi-nistration pour le saumon, la truite ou l'anguille.
En particulier, un ob jet de l' invention est l' utilisation caractérisée en ce que le produit de formule (I) est incorporé dans un aliment pour poisson à raison de 1 à
ppm en poids de principe actif par poids d'aliment pour poisson, par exemple, à raison de 5 à 15 ppm.
Plus particulièrement, un objet de l'invention est l'utilisation caractérisée en ce que le produit de 20 formule (I) est utilisé pour accroître la résistance des poissons au stress en cours d'élevage.
En particulier, l' ob jet de l' invention est d' accroître la résistance aux champignons, aux virus, aux bactéries et à d'autres agents pathogènes.
Plus particulièrement, un objet de l'invention est l'invention caractérisée en ce que l'agent pathogène est la Saprolégnie. Ceci est assez remarquable car il s'agit d'un agent pathogène difficile à traiter.
De très bons résultats ont été obtenus en utilisant le médicament de l'invention comme traitement de 20 à 30 jours avant le facteur provoquant le stress, par exemple avant le changement de réservoir.
- 4 -La posologie journalière peut varier de 0,1 à 0,5 mg p ~ ~ ~ ~ 0 1 °" kg de poids corporel de poisson par jour.
Exemples a) On a préparé une poudre destinée à être administrée au poisson, contenant le produit au TBA à raison de 10 mg de produit au TBA pour 1000 g de mélange.
b) On a préparé un aliment pour poisson contenant - 1000 g de farine, 700 g d'eau, 70 g d'huile d'arachide, 17,7 mg de TBA.
Le mélange a été homogénéisé par agitation mécanique.
L'aliment préparé contient 10 mg de principe actif THA
par kg.
- 5 -COMPTE-RENDU BIOLOGIQUE
1) Méthode d'essai Les poissons, Oncorhynchus kisutch (Saumon Coho) levs dans un tang d'aquaculture ont t relchs dans les rservoirs d'levage au jour 0, de telle sorte que chaque groupe se compose de 70 poissons.

Tous les poissons taient apparemment normaux et similaires entre eux en taille corporelle (les poissons extrmement grands ou petits tant exclus), le poids corporel moyen tant de 22,2-22,4 g dans chaque rservoir. Les poissons ont t amorcs en cours d'acclimatation. Les poissons ont t nourris de faon ce qu' ils consomment de l' aliment corres-pondant au total 1,8 % (en poids) du poids corpo-rel total des poissons dans chaque rservoir. La consommation alimentaire par les poissons s'est compltement stabilise au jour 6, et par cons-quent, l'administration du TBA a dmarr ce jour-l.

L'administration a pris fin au jour 25. Au cours de ces 25 jours, l'aliment a t fourni pendant 21 jours (sauf les dimanches). L'aliment a t fourni en quantit correspondant 1,8 % de poids corporel de poisson tant pour les groupes traits que pour les groupes de contr8le. L'aliment a t prpar de la manire suivante s De l'eau correspondant à la moitié de la poudre alimentaire (en volume) et une quantité déterminée d'huile de table ont été ajoutées à l'aliment pour truite (poudre). Le mélange a été mis dans un sac en polyéthylène, puis broyé pour donner un mélange homogène . Ensuite, le mélange a été passé dans un presse-aiI pour la mise en forme puis séché à l'air.
Au cours de la préparation de l'aliment pour le groupe traité au TBA, le TBA a d'abord été dissous dans l'huile de table à un taux précis de sorte que
- 6 -20â 1101 la teneur finale en TBA soit de "10 mg/100~ 0 '" d'aliment (10 ppm)". I1 varie entre 0,2 à 0,5 mg de TBA par 1000 g de poids corporel.
Les conditions d'élevage Les poissons ont été relâchés dans des réservoirs de "30 cm x 70 cm x 29 cm" (profondeur d'eau : 25cm) chacun, à raison de 70 poissons par réservoir. La température de l'eau a été maintenue à 8,8 - 10,2°C
et le débit d'eau a été maintenu à 3 - 5 litres/minute.
Méthode de test de la Saprolégniase Conformément à la Méthode "AMIMOMI" du Dr. Hoshiai ( test de stress mcanique ou de stress par agitation de filet) on a soumis les poissons au stress et ils ont subit des dommages pithlisux. Pour augmenter la fiabilit de l'tude, "l'AMIMOMI" a t ralise dans diverses conditions : le nombre de poissons par "AMIMOMI" a t de 5 ou 10, et le temps "AMIMOMI" a t de 30 secondes, de 1 minute ou de 2 minutes.

Pour soumettre les poissons l'attaque par les zoospores de Saprolgnie, les poissons ont t relchs dans de l'eau contenant "2 x 10 zoospores/

litre d'eau". Pendant la dure du test, toute l'eau dans les rservoirs de "60 cm x 30 cm x 45 cm (pro-fondeur d'eau : 40 cm)" a t change tous les 3 jours. L'attaque par les zoospores et l'observation des poissons a dur pendant 14 jours, du 22 septem-bre au 6 octobre. Pendant cette priode, l'alimenta-tion en eau a t arrte ; l'aration a t pour-suivie ; et la temprature de l'eau a t maintenue 12 - 13 C. Pendant la priode d'levage, l'alimentation en eau a t assure par 2 tuyaux pour tenir compte du risque d'un possible endommage-ment accidentel d'un tuyau, par exemple par une forte chute de pluie, etc.
- 7 -~~6 11'0 1 2) Résultats et Discussion Concernant le r d'Infection.
Les résultats du test sont présentés dans les figures 1 à 6 comme suit:
Chaque figure montre le nombre de poissons infectés dans le groupe de contr8le et le groupe traité au TBA, et le nombre de poissons morts ( seulement parmi les poissons du contr8le, aucune mortalité n'ayant été enregistrée dans le groupe traité au TBA).
Le jour 0 est le jour pour le test du stress.
Figure 1 i test du stress : 30s sur 5 poissons.
Figure 2 : test du stress : 30s sur 10 poissons.
Figure 3 : test du stress s 60s sur 5 poissons.
Figure 4 . test du stress s 60s sur 10 poissons.
Figure 5 : test du stress : 120s sur 5 poissons.
Figure 6 s test du stress : 120s sur 10 poissons.
a) Tendance observée dans les groupes de contr8le .
Pour le mème nombre de poissons par "AMIMOMI", plus le temps d "'AMIMOMI" a t long, plus lev a t le taux d' infection, plus t8t les sympt8mes se sont dvelopps, plus leve a t la mortalit, et plus rapidement ils sont morts.

Ceci e~ parce que plus le temps "d'AMIMOMI" a t lonJg, plus lev a t le stress et plus srieux a t le trauma. Pour le mme temps "d'AMIMOMI", plus le nombre de poissons par "AMIMOMI" a t petit, plus rapidement se sont dvelopps les sympt8mes et plus leve a t l'incidence d'infection. La mme tendance a t observe en ce qui concerne les paramtres suivants, les conditions du milieu telles que la dimensions des rservoirs, le nombre de zoospores par rservoir, la temprature de l' eau d' levage, etc. ; plus le nombre de poissons par "AMIMOMI"

_ g _ 2061101 c~
est petit, plus élevé est le nombre de zoospo~~6, ~"' attaquantes par poisson.
b) Tendance observée dans les groupes traités au TBA
La tendance est gnralement similaire celle observe dans les groupes de contr8le. Toutefois, les groupes traits au TBA ont prsent des grandes diffrences par rapport aux groupes de contr8le sur les points suivants. Parmi les poissons ayant subit "l'AMIMOMI" en un groupe de 5, l' infection a d' abord t confirme au Sme jour et elle a disparu au 6me, quelle que soit la dure de "l'AMIMOMI". Toutefois, plus "l'AMIMOMI" a t longue, plus lev a t le taux d'infection. Dans le cas des poissons ayant subit "l'AMIMOMI" en groupe de 10 et o "l'AMIMOMI" a dur pendant 30 secondes, l'infection a t confirme au 4me jour et a disparu au Sme jour. Pour les poissons ayant subit " 1 minute d' AMIMOMI " en un groupe de 10 , l'infection a t confirme 1 jour plus t8t, c'est--dire au Sme jour, mais ils sont redevenus normaux au Sme jour. Dans ce dernier groupe, le taux d'infection a t plus lev que celui du groupe de "30 secondes d'AMIMOMI". Le groupe de "2 minutes d'AMIMOMI" a prsent pratiquement la mme tendance que celle prsente par le groupe de "1 minute d'AMIMOMI", tous les poissons se rtablissant de la Saprolgniase sauf celui chez lequel la maladie a encore t confirme le dernier jour. De plus, le taux d'infection a t plus faible que dans le groupe de "1 minute d'AMIMOMI".

Selon l'analyse comparant les conditions d'infec-tion entre les poissons du méme groupe de temps d'AMIMOMI :
_ g _ Dans le "groupe de 2 minutes d'AMIMOMI" le taux d'infection a été beaucoup plus élevé que les autres dans Ie groupe "d'AMIMOMI à 5 poissons".
Dans le groupe de 30 secondes et de 1 minute d'AMIMOMI, il n'y a eu aucune différence sauf qu'un rétablissement à 100 % a été réalisé plus tard que dans le groupe de 2 minutes.
Se basant sur ce qui précède, l'auteur a conclu que lorsqu' ils sont attaqués par des zoospores, les poissons traités au THA sont aussitôt infectés mais se débarrassent rapidement de l'hyphe, puis se rétablissent. Ainsi, une prophylaxie contre la Saprolégniase est obtenue par traitement au TBA.
c) Différences entre les groupes : tant dans le groupe d'AMIMOMI à 5 poissons que dans le groupe d'AMIMOMI à 10 poissons, l'infection a été obser-vée 1 - 2 jours plus tard et le degré d'infection a été remarquablement plus faible comparé aux groupes de contr8le quelle que soit la durée d'AMIMOMI. Si l'on compare les deux groupes dans les mêmes conditions, le taux d'infection a êté
plus faible, le rétablissement est apparu plus t8t et il n'y a eu aucun mort dans le groupe tramé au TBA. Dans le groupe TBA (10 poissons), de 2 minutes d'AMIMOMI, seulement 1 poisson ne s'est pas rétabli au terme de l'étude.

Claims (15)

1. Composition médicamenteuse pour lutter contre le stress chez le poisson, caractérisée en ce qu'elle comporte en association avec un excipient physiologiquement acceptable pour le poisson, un ou plusieurs composés de formule (I):

dans laquelle R représente un radical alkyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone et X représente un radical acyle obtenu à partir d'un acide carboxylique contenant de 1 à 18 atomes de carbone.
2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle est destinée à être administrée par voie orale.
3. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'excipient est un aliment pour poisson,
4. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'excipient est un aliment pour poisson.
5. Composition selon la revendication 1, 2 ou 3, caractérisée en ce qu'elle est destinée à être administrée à un poisson appartenant au groupe des Salmonidés, des Anguillidés, des Cypranidés, aux poissons cycloïdes et aux poissons de mer.
6. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce qu'elle est destinée à être administrée à un poisson choisi parmi la truite, le saumon, l'anguille, la carpe, le tilapie, le sarrau et la daurade.
7. Composition selon la revendication 1, 2, 3 ou 4, caractérisée en ce que le produit de formule (I) est incorporé dans un excipient constitué par un aliment pour poisson à raison de 1 à 20 ppm en poids de principe actif par poids d'aliment pour poisson.
8. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que le produit de formule (I) est incorporé dans un excipient constitué par un aliment pour poisson à raison de 1 à 20 ppm en poids de principe actif par poids d'aliment pour poisson.
9. Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que le produit de formule (I) est incorporé dans un excipient constitué par un aliment pour poisson à raison de 1 à 20 ppm en poids de principe actif par poids d'aliment pour poisson.
10. Usage d'une composition médicamenteuse telle que définie à la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8 ou 9, pour la lutte contre le stress chez le poisson en cours d'élevage.
11. Usage d'une composition médicamenteuse telle que définie à la revendication 5, poux la lutte contre 1e stress chez le poisson en cours d'élevage.
12. Usage d'une composition médicamenteuse telle que définie à la revendication 7, pour la lutte contra le stress chez le poisson en cours d'élevage.
13. Usage d'une composition médicamenteuse telle que définie à la revendication 1, 2, 3, 4, 6, 8 ou 9, pour accroître chez le poisson la résistance aux champignons, aux virus, aux bactéries et à d'autres agents pathogènes.
14. Usage d'une composition médicamenteuse telle que définie à la revendication 5, pour accroître chez le poisson la résistance aux champignons, aux virus, aux bactéries et à
d'autres agents pathogènes.
15. Usage d'une composition médicamenteuse telle que définie à la revendication 7, pour accroître chez le poisson la résistance aux champignons, aux virus, aux bactéries et à
d'autres agents pathogènes.
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