CA2381954C - Methodes de detection de sequences cibles d'acide nucleique impliquant la transcription in vitro d'un promoteur d'arn polymerase - Google Patents

Methodes de detection de sequences cibles d'acide nucleique impliquant la transcription in vitro d'un promoteur d'arn polymerase Download PDF

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Abstract

L'invention concerne un complexe formé par hybridation et constitué de quatre molécules d'acide nucléique. Ce complexe comprend une molécule d'acide nucléique cible ainsi qu'une première, une deuxième et une troisième molécule sonde d'acide nucléique, la première sonde comprenant une zone de pied complémentaire d'une première partie de la cible, au niveau de laquelle elle est hybridée, et une zone de bras sensiblement non complémentaire de la cible. La deuxième sonde comprend une zone de pied complémentaire d'une seconde partie de la cible. Ainsi, la zone de pied de la deuxième sonde s'hybride avec la cible adjacente ou sensiblement adjacente à la zone de pied de la première sonde, la deuxième sonde comprenant également une zone de bras sensiblement non complémentaire de la cible, mais complémentaire de la zone de bras de la première sonde et hybridée avec cette dernière. La troisième sonde est au moins partiellement complémentaire d'une partie de la zone de bras de manière à s'hybrider avec la zone de bras de la première sonde adjacente ou sensiblement adjacente à la deuxième sonde, la formation dudit complexe permettant de produire un promoteur d'ARN polymérase bicaténaire dont un brin est produit par la première sonde, l'autre brin étant conjointement produit par la deuxième sonde et la troisième sonde. L'invention concerne également une méthode de détection d'une séquence d'acide nucléique d'intérêt impliquant la formation dudit complexe.
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