CA3025849C - Composition et methode pour ameliorer le developpement des plantes - Google Patents

Composition et methode pour ameliorer le developpement des plantes

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Abstract

La présente invention concerne un procédé pour augmenter l'efficacité biostimulante d'une souche de bactérie vivante ou d'une composition la contenant, caractérisée en ce que le procédé comprend une étape d'inactivation de la souche de bactérie vivante, la souche de bactérie inactivée ainsi obtenue ayant une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieure à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant. La présente invention concerne également une souche de bactérie inactivée ainsi qu'une composition la comprenant, pour améliorer le développement d'une plante.

Description

5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 1 COMPOSITION ET MÉTHODE POUR AMÉLIORER LE DÉVELOPPEMENT DES PLANTES DOMAINE TECHNIQUE La présente demande concerne de nouvelles compositions de souches de bactéries inactivées, leur procédé de préparation et leur utilisation pour améliorer le développement des plantes. DESCRIPTION DE LA TECHNIQUE ANTÉRIEURE La recherche de nouvelles stratégies, visant à maintenir ou accroître la productivité des systèmes agricoles tout en diminuant les apports d’intrants chimiques, ont mis en évidence l’importance cruciale des microorganismes dans le fonctionnement biologique des agrosystèmes. Ces recherches ont conduit à l'émergence de la notion de «biofertilisants» et de «biostimulants», pouvant être définis comme des produits contenant par exemple des microorganismes vivants, inactivés et/ou extraits de microorganismes qui, lorsqu’ils sont appliqués au sol ou sur les plantes, occupent la rhizosphère, voire colonisent les tissus végétaux, et stimulent le développement de la plante en augmentant par exemple l'assimilation des nutriments et la production des phytohormones. Le brevet US 5,589,381 décrit l'isolement d'un élément de contrôle biologique comprenant une souche de Bacillus licheniformis, qui contrôle la brûlure des semis due à Fusarium dans le maïs. Le brevet US 5,503,652 décrit l'isolement de souches capables de promouvoir l'élongation des racines chez les plantes. Le brevet US 5,935,839 décrit l'utilisation d’Arthrobacter sp. et de Pseudomonas fluorescens pour promouvoir la croissance des semis de conifères, dans lequel les rhizobactéries favorisant la croissance des plantes (Plant Growth Promoting Rhizobacteria PGPR) sont sélectionnées selon leur capacité à pousser dans des sols acides et froids typiques de conifères. 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 2 Le brevet US 5,503,651 décrit l'utilisation de souches PGPR qui favorisent la croissance des céréales, d’oléagineuses et de maïs en fonction des capacités chimiotactiques et en colonisant les racines des souches. Le brevet US 5,496,547 enseigne,l’isolement des mutants de Pseudomonas qui sont des agents de lutte biologique efficace contre Rhizoctonia solani. Le brevet US 4,849,008 enseigne l’application de Pseudomonas sur les racines, les plantes, les graines, les fragments de pommes ou du sol, de plantes-racines pour améliorer le rendement des cultures racines. Le brevet US 4,584,274 décrit des souches de Pseudomonas résistant aux bactériophages utiles pour promouvoir la croissance des plantes-racines. La demande internationale WO2003057861 décrit l'isolement et l'identification d'un certain nombre de rhizobactéries favorisant la croissance des plantes (PGPR), qui oxydent le soufre en sulfate utile pour promouvoir la croissance des plantes, telles que RAY12, identifié comme Achromobacter piechaudii ; RAY28, identifié comme Agrobacterium tumefaciens, RAY132, identifié comme Stenotrophomonas maltophilia ; et RAY209, identifié comme Delftia acidovorans. Le brevet US 6,194,193 décrit l'utilisation d'une formulation pour renforcer la croissance de la plante, qui comprend un mélange de souches de Bacillus et Paenibacillus, qui produisent des phytohormones. Un autre exemple d'effet hormonal connu est celui des Azospirillum spp (voir en particulier, Kucey (1988), Plant growth-altering effects of Azospirillum brasilense and Bacillus C-11-25 on two wheat cultivars. Journal of Applied Microbiology, volume 64, Issue 3, pages 187-196). Certains biofertilisants sont composés d’organismes vivants, ils doivent donc être produits, formulés, et vendus de manière à ce que leur viabilité et leur activité biologique soient maintenues. Par ailleurs, le succès de l'inoculation microbienne pour la production agricole est grandement influencé par le nombre de cellules viables introduit dans le sol (Duquenne et al., 1999, FEMS Microbiology Ecology 29 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 : 331-339). La viabilité de l’inoculum est un facteur important pour le succès et la colonisation adéquate de la rhizosphere afin d’obtenir l’effet positif désiré sur la croissance des plantes. Un inconvénient majeur de l’utilisation des biofertilisants est que les conditions spécifiques de sol, de températures et d’humidité peuvent varier grandement d’un site à l’autre et que ces variations peuvent influencer la viabilité microbienne et par conséquent, le rendement et la croissance des plantes. Il existe donc un besoin pour une composition permettant de stimuler le développement des plantes avec une efficacité améliorée sans avoir les inconvénients liés au maintien de la viabilité de ce type de biofertilisants/biostimulants. SOMMAIRE La présente invention concerne un procédépour augmenter l'efficacité biostimulante d’une souche de bactérie vivante ou une composition la contenant, caractérisée en ce que le procédé comprend une étape d’inactivation de la souche de bactérie vivante, la souche de bactérie inactivée ainsi obtenue ayant une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieure à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant. La présente invention concerne également une souche de bactérie inactivée pour améliorer le développement des plantes ou une composition la contenant, caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée permet une amélioration du développement des plantes par rapport à la même souche de bactérie vivante ou de la composition la contenant. La présente invention concerne également une souche de bactérie inactivée pour améliorer le développement des plantes ou une composition la contenant, caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée possède une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieures à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant. 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 4 La présente invention concerne également une méthode d’utilisation ou l’usage d’une souche de bactérie inactivée, ou une composition la contenant, pour améliorer le développement des plantes, caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée permet une amélioration du développement des plantes par rapport à la même souche de bactérie vivante ou de la composition la contenant. La présente invention concerne également une méthode d’utilisation ou l’usage d’une souche de bactérie inactivée, ouune composition la contenant, pour améliorer le développement des plantes, caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée possède une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieure à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant. Avantageusement, la souche de bactérie inactivée ou la composition la contenant, obtenue selon le procédé de la présente invention ont une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieures à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant. Avantageusement, la composition et la méthode selon la présente invention permettent d’améliorer le développement des plantes sans avoir à considérer la viabilité d’un inoculum bactérien. BRÈVE DESCRIPTION DES FIGURES La Figure 1 illustre l’évaluation de la croissance de la surface foliaire d'Arabidopsis thaliana selon les modalités suivantes : M est le milieu de culture isolé de Delftia acidovorans RAY209; Eau est de l’eau sans bactéries actives ou inactives ou milieu de culture; B+M est Delftia acidovorans RAY209 dans son milieu de culture; Mp est le milieu de culture isolé de Delftia acidovorans RAY209 pasteurisé; S est une suspension de soufre; B + eau est Delftia acidovorans RAY209 dans l’eau; IT45 est un témoin positif (Bacillus amyloliquefaciens IT45); (B+eau)p est une solution pasteurisée de Delftia acidovorans RAY209 dans l’eau conforme à l’invention. 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 5 La Figure 2 illustre les poils absorbants racinaires des plants de canola (Brassica napus cultivar 5525CL) 36 jours après le traitement avec de l'eau stérile. La Figure 3 illustre les poils absorbants racinaires des plants de canola (Brassica napus cultivar 5525CL) 36 jours après le traitement avec le milieu de culture de la souche de Delftia acidovorans RAY209. La Figure 4 illustre les poils absorbants racinaires des plants de canola (Brassica napus cultivar 5525CL) 36 jours après le traitement avec la souche de Delftia acidovorans RAY209 inactivée par traitement à la presse de French (haute pression suivi d’une décompression rapide). La Figure 5 illustre les poils absorbants racinaires des plants de canola (Brassica napus cultivar 5525CL) 36 jours après le traitement avec une souche de Lactobacillus rhamnosus inactivée par traitement à la presse de French (haute pression suivi d’une décompression rapide). La Figure 6 illustre les poils absorbants racinaires des plants de canola (Brassica napus cultivar 5525CL) 36 jours après le traitement avec la souche de Delftia acidovorans RAY209 vivante. La Figure 7 illustre les poils absorbants racinaires des plants de canola (Brassica napus cultivar 5525CL) 36 jours après le traitement avec une souche de Lactobacillus rhamnosus vivante. La Figure 8 illustre les poils absorbants racinaires des plants de canola (Brassica napus cultivar 5525CL) 36 jours après le traitement avec la souche de Delftia acidovorans RAY209 inactivée par pasteurisation. La Figure 9 illustre les poils absorbants racinaires des plants de canola (Brassica napus cultivar 5525CL) 36 jours après le traitement avec une souche de Lactobacillus rhamnosus inactivée par pasteurisation. 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 6 DESCRIPTION DÉTAILLÉE Le terme « bactéries vivantes » ou « souches de bactéries vivantes » correspond à des bactéries ou préparations de bactéries présentant une viabilité supérieure à 70 %. Le terme « bactéries inactivées » ou « souches de bactéries inactivées » correspond à des bactéries ou préparations de bactéries tuées, par procédés physiques, biochimiques, chimiques ou physico-chimiques et présentant une viabilité inférieure à 50 %. Le terme « biomasse » correspond à l’ensemble de la matière, organique et minérale, constituant un organisme. Le terme « biostimulant(e) » correspond à la stimulation du développement des plantes. Par exemple, le développement des plantes peut inclure un des paramètres suivants : l’enracinement, la surface foliaire, la floraison, la fructification, la hauteur des plantes, la biomasse, la germination, le rendement de la récolte. Le terme « rhizobactéries favorisant la croissance des plantes » ou « PGPR» correspond aux bactéries de la rhizosphère bénéfiques à la croissance et à la santé des plantes. Le terme « milieu de culture » correspond à un support contenant les éléments nécessaires à la croissance bactérienne, qui permet la culture des bactéries selon l’invention. Selon un mode de réalisation, le milieu de culture peut contenir les bactéries selon l’invention durant leur croissance ou être un milieu de culture exempt des bactéries de la présente invention, si celles-ci sont séparées de leur milieu par un procédé, mettant en œuvre notamment mais non exclusivement une étape de filtration ou une étape de centrifugation. Selon un mode réalisation, le milieu de culture est de préférence un milieu liquide. Tous ces milieux ainsi que les procédés de fermentation usuels sont bien connus de l’homme du métier. Le terme « support de culture » correspond à un ensemble de produits destiné à servir de milieu de culture à certains végétaux. Leur mise en œuvre aboutit à la 5 10 15 20 25 30 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 formation de milieux possédant une porosité en air et en eau, telle qu’ils sont capables à la fois d’ancrer les organes absorbants des plantes et de leur permettre d’être en contact avec les solutions nécessaires à leur croissance. Ils sont généralement composés de matières organiques et/ou de matières inorganiques. Ils sont généralement composés de tourbe, d’autres matériaux organiques (notamment fibres de coco, écorces, fibres de bois, composts) et de matériaux inorganiques (notamment terres, sables, pouzzolane, argiles, laines minérales, perlite, vermiculite). La présente invention concerne un procédé pour augmenter l’efficacité biostimulante d’une souche de bactérie vivante ou d’une composition la contenant, caractérisée en ce que le procédé comprend une étape d’inactivation de la souche de bactérie vivante, la souche de bactérie inactivée ainsi obtenue ayant une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieure à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant. Dans un mode de réalisation avantageux, l’étape d’inactivation mise en œuvre dans le procédé selon l’invention est réalisée par des procédés physiques, biochimiques, chimiques ou physico-chimiques. Dans un mode de réalisation plus avantageux, la souche de bactérie vivante est inactivée par traitement thermique ou par traitement à hautes pressions. Avantageusement, la souche de bactérie vivante est inactivée par pasteurisation. Encore plus avantageusement, la souche de bactérie vivante est inactivée sans son milieu de culture. Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux, la souche de bactérie utilisée dans le procédé selon l’invention est du genre Delftia, Achromobacter, Agrobacterium, ou Stenotrophomonas. Avantageusement, la souche de bactérie est du genre Delftia. Plus avantageusement, la souche de bactérie est la souche Delftia acidovorans RAY209 déposée à l’ATCC le 25 avril 2002 sous le n° PTA-4249, Achromobacter piechaudii RAY12 déposée au « American Type Culture Collection (ATCC) le 16 avril 2002 sous le n° PTA-4231, Agrobacterium tumefaciens RAY28 déposée au « American Type Culture Collection (ATCC) le 16 avril 2002 sous le n° PTA-4232, ou Stenotrophomonas maltophilia RAY 132 déposé au « American Type 5 10 15 20 25 30 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 8 Culture Collection (ATCC) Ie 16 avril 2002 sous Ie n° PTA-4233. Dans un mode de réalisation encore plus avantageux, la souche de bactérie inactivée est la souche de Delftia acidovorans RAY209 déposée à l’ATCC le 25 avril 2002 sous le n° PTA- 4249. La présente invention concerne une souche de bactérie inactivée, ou une composition pour améliorer le développement des plantes, caractérisée en ce qu’elle comprend au moins une souche de bactérie inactivée. Avantageusement, la présente invention concerne une souche de bactérie inactivée pour améliorer le développement des plantes caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée permet une amélioration du développement des plantes par rapport à la même souche de bactérie vivante. La présente invention concerne une souche de bactérie inactivée ou une composition pour améliorer le développement des plantes, caractérisée en ce qu’elle comprend au moins une souche de bactérie inactivée. Avantageusement, la présente invention concerne une souche de bactérie inactivée pour améliorer le développement des plantes caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée possède une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieure à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant. La souche de bactérie utilisée selon l’invention peut provenir de toutes les espèces de bactéries, en particulier des bactéries du genre Delftia, Achromobacter, Agrobacterium, et Stenotrophomonas. Selon un mode de réalisation avantageux, les bactéries utilisées selon l’invention peuvent provenir de l’espèce Delftia acidovorans, Achromobacter piechaudii, Agrobacterium tumefaciens, et Stenotrophomonas maltophilia. Plus avantageusement, la souche de bactérie utilisée est choisie parmi le groupe consistant en la souche Achromobacter piechaudii RAY12 déposé au « American Type Culture Collection (ATCC) le 16 avril 2002 sous le n° PTA-4231, Agrobacterium tumefaciens RAY28 déposée au « American Type Culture Collection (ATCC) le 16 avril 2002 sous le n° PTA-4232, Stenotrophomonas maltophilia RAY 132 déposée au « American Type Culture 5 10 15 20 25 30 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 9 Collection (ATCC) Ie 16 avril 2002 sous Ie n’ PTA-4233 et/ou Delftia acidovorans RAY209 déposé au « American Type Culture Collection (ATCC) Ie 25 avril 2002 sous Ie n° PTA-4249 en accord avec le traité de Budapest sur la reconnaissance internationale du dépôt des micro-organismes aux fins de la procédure en matière de brevets. Selon un mode de réalisation, la souche de bactérie utilisée dans le cadre de la présente invention est une rhizobactérie favorisant le développement des plantes ou « PGPR ». Selon un autre mode de réalisation avantageux, la souche de bactérie inactivée utilisée selon l’invention est du genre Delftia. Plus particulièrement, la souche de bactérie utilisée selon l’invention est de la souche Delftia acidovorans RAY209 déposée au « American Type Culture Collection (ATCC) le 25 avril 2002 sous le n° PTA-4249 en accord avec le traité de Budapest sur la reconnaissance internationale du dépôt des micro-organismes aux fins de la procédure en matière de brevets. Selon un mode de réalisation avantageux, lesbactéries de l’invention sont inactivées notamment par procédé physique, chimique, biochimique ou physico-chimique. Selon un mode de réalisation, les bactéries de la présente invention sont inactivées par traitement par hautes pressions (par exemple au moyen d’une presse de French ou autres méthodes connues dans l’art). Dans un autre mode de réalisation, les bactéries de la présente demande sont inactivées par traitement thermique. Plus avantageusement, les bactéries selon l’invention sont inactivées par pasteurisation. Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux, la pasteurisation est effectuée en chauffant les bactéries vivantes à une température entre 60°C et 90°C, 62°C et 88°C, 65°C et 85°C, 75°C et 85°C, ou 80°C et 85°C. Selon un autre mode de réalisation, les bactéries selon l’invention sont pasteurisées sans leur milieu de culture. Selon un autre mode de réalisation, les bactéries de la présente invention sont inactivées avec leur milieu de culture. Selon un autre mode de réalisation, les bactéries de la présente invention sont inactivées sans leur milieu de culture. Selon un mode de réalisation, l’amélioration du développement et/ou de la croissance et de la productivité des plantes et/ou l’augmentation de l’efficacité 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 10 biostimulante sur le développement des plantes inclut notamment mais non exclusivement d’améliorer un des paramètres suivants : l’enracinement, la surface foliaire, le développement racinaire, la floraison, la fructification, la hauteur des plantes, la biomasse, la germination, le rendement de la récolte notamment en quantité, en qualité ou en précocité. Selon un mode de réalisation, l’augmentation de l’efficacité biostimulante sur le développement des plantes inclut la surface foliaire, le nombre des poils absorbants racinaires et/ou la hauteur des plantes. Selon un mode de réalisation, la présente invention est applicable à tout type de plantes, notamment mais non exclusivement aux cultures céréalières (blé, orge, avoine, seigle, triticale), aux plantes sarclées (betterave sucrière, pomme de terre, mais), aux légumineuses (luzerne, trèfle, sainfoin), aux culture fourragères (raygrass, fétuque, dactyle, festulolium, luzerne, vesce, navette, radis fourragés), aux oléoprotéagineuses (soja, canola, colza, pois, féverole, lupin blanc, tournesol), aux cultures légumières et maraîchères, à l’arboriculture fruitière, à la viticulture et aux cultures ornementales (production florales, gazons, pépinières de jeune plants). Selon un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne une composition pour améliorer le développement des plantes, caractérisée en ce qu’elle comprend au moins une souche de bactérie inactivée, la souche de bactérie inactivée possédant une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieure à celle de la même souche de bactérie vivante Selon un mode de réalisation avantageux, la composition selon l’invention comprend de 104 UFC/ml à 1012 UFC/ml, de 105 UFC/ml à 1012 UFC/ml de 106 UFC/ml à 1012 UFC/ml, de 107 UFC/ml à 1012 UFC/ml, de 106 UFC/ml à 1011 UFC/ml, de 106 UFC/ml à 1010 UFC/ml, de 106 UFC/ml à 109 UFC/ml, ou de 106 UFC/ml à 108 UFC/ml de bactéries avant inactivation. Selon un mode de réalisation, la composition selon l’invention comprend au moins une souche de bactérie inactivée à 100%, à 99 % (avec 1% d’au moins une souche de bactérie active), à 98% (avec 2% d’au moins une souche de bactérie active), à 97% (avec 3% d’au moins une souche de bactérie active), à 96% (avec 4% d’au 5 10 15 20 25 30 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 11 moins une souche de bactérie active), à 95% (avec 5% d’au moins une souche de bactérie active), à 94% (avec 6% d’au moins une souche de bactérie active), à 93% (avec 7% d’au moins une souche de bactérie active), à 92% (avec 8% d’au moins une souche de bactérie active), à 91% (avec 9% d’au moins une souche de bactérie active), entre 90% et 85% (avec entre 10 et 15% d’au moins une souche de bactérie active), entre 85% et 80% (avec entre 15 et 20% d'au moins une souche de bactérie active), entre 80% et 75% (avec entre 20 et 25% d’au moins une souche de bactérie active), entre 75% et 70% (avec entre 25 et 30% d’au moins une souche de bactérie active), entre 70% et 65% (avec entre 30 et 35% d’au moins une souche de bactérie active), entre 65% et 60% (avec entre 35% et 40% d’au moins une souche de bactérie active), entre 60% et 55% (avec entre 40 et 45% d'au moins une souche de bactérie active) ou entre 55% et 50 % (avec entre 45% et 50% d’au moins une souche de bactérie active). Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux, la composition selon l’invention comprend au moins une souche de bactérie inactivée et un véhicule compatible pour l’agriculture. Plus particulièrement, le véhicule compatible pour l’agriculture est approprié pour l’administration de la bactérie inactivée sur la plante et/ou sur le sol. Selon un mode de réalisation, le véhicule est sous forme solide et/ou liquide. Selon un autre mode de réalisation, le véhicule est de l’eau. Selon un autre mode de réalisation, le véhicule est un mélange eau-herbicide. Selon un autre mode de réalisation, le véhicule est un mélange eau-fertilisant. Selon un autre mode de réalisation, le véhicule est un milieu de culture. Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux, la composition selon l’invention comprend une souche de bactérie inactivée isolée de son milieu de culture. Selon un mode de réalisation avantageux, la composition comprenant au moins une souche de bactérie inactivée pourra se présenter sous forme de poudre, de granules, de micro-granules, de traitement de semences, de formulations liquides, d’encapsulation des bactéries ou de suspensions liquides. Plus particulièrement, la composition selon l’invention est sous forme liquide. 5 10 15 20 25 30 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 12 Selon un mode de réalisation avantageux, la composition selon l’invention est en combinaison avec une formulation appropriée comprenant des poudres, notamment des poudres mouillables, des granulés, des micro-granulés, des traitements de semences, des encapsulations de bactéries, des formulations liquides, notamment mais non exclusivement des suspensions, dans l’eau, dans un solvant ou dans un milieu de culture. Selon un mode de réalisation avantageux, la composition selon l’invention est sous une forme appropriée pour le traitement au sol, le traitement de la partie racinaire de la plante, le traitement foliaire de la plante, le traitement de la partie florale de la plante, le traitement de la partie fructifère de plante et/ou le traitement de la graine. Selon un autre mode de réalisation avantageux, la composition selon l’invention est administrée simultanément ou successivement, par application au sol, par trempage de racine, par traitement de semences ou par incorporation et/ou enrobage à un support de cultures, pelliculage avec des produits phytosanitaires ou d’engrais ou tout autre véhicule ou par tout moyen permettant la mise en contact immédiate ou future de la composition avec les semences ou les plantes à inoculer. Plus particulièrement l’application au sol est réalisée notamment mais non exclusivement par pulvérisation, épandage, arrosage, traitement au sol, ferti-irrigation, goutte à goutte, dans la raie de semis ou en plein. Selon un mode de réalisation avantageux, la composition selon l’invention comprend la souche de bactérie inactivée en combinaison avec d'autres microorganismes vivants, inactivés ou en extraits, tels que les bactéries, les champignons et/ ou les levures. Plus particulièrement, la composition selon l’invention comprend la souche de bactérie inactivée en combinaison avec d’autres souches de bactéries inactivées, lesdites bactéries favorisant le développement, la nutrition et la protection des plantes. Selon un mode de réalisation avantageux, la composition selon l’invention comporte en outre des engrais, herbicides, insecticides, fongicides, bactéricides, solutions minérales et/ou supports de culture. Selon un autre mode de réalisation avantageux, la composition selon l’invention comporte en outre un substrat. Plus 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 13 particulièrement, le substrat comprend des matières organiques, notamment mais non exclusivement de la tourbe, des matières inorganiques, notamment mais non exclusivement de la terre et/ou du sable et/ou de l’argile et/ou d’autres composants du sol et/ou des substances synthétiques. Plus particulièrement, la substance synthétique peut être un matériau absorbant comme par exemple un matériau granulé. Selon un mode de réalisation, la composition contenant une souche de bactérie inactivée ou la souche de bactérie inactivée de la présente invention permet une amélioration du développement des plantes supérieure à celle obtenue avec la même composition contenant la même souche de bactérie vivante ou la même souche de bactérie vivante. Selon un autre aspect, la présente invention concerne l’utilisation d’une souche de bactérie inactivée ou d’une composition la comprenant pour améliorer le développement d’une plante. Selon un mode de réalisation, l’utilisation d’une composition ou d’une souche de bactérie inactivée de la présente invention permet une amélioration du développement des plantes supérieure à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant. Selon un autre aspect, la présente invention concerne une méthode pour améliorer le développement d’une plante comprenant l’administration d’une composition ou d’une souche de bactérie inactivée selon l’invention. Selon un mode de réalisation, la méthode comprenant l’administration d’une composition ou d’une souche de bactérie inactivée selon l’invention permet une amélioration du développement des plantes supérieure à celle de la même composition contenant la même souche de bactérie vivante ou de la même souche de bactérie vivante. Selon un autre aspect, la présente invention concerne une plante obtenue en utilisant la composition selon l’invention ou la souche de bactérie inactivée selon l’invention pour améliorer le développement d’une plante. Selon un autre aspect, la présente invention concerne une plante obtenue en utilisant une méthode pour améliorer le développement d’une plante comprenant 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 14 l’administration d’une composition ou d’une souche de bactérie inactivée selon l’invention. EXEMPLES La présente demande se comprendra mieux à la lecture des exemples suivants qui sont donnés pour illustrer la demande et non à limiter la portée. Des essais ont été effectués pour vérifier l’impact de certaines souches et essentiellement Delftia acidovorans, vivantes ou tuées, en présence ou non de leur milieu de culture, sur le développement d’une plante modèle. Exemple 1 1-1/ Préparation des inocula de la souche bactérienne : Delftia acidovorans La concentration bactérienne souhaitée dans chaque inocula a été estimé à un équivalent de 4.1011 UFC/m3avec une souche commerciale de Delftia acidovorans, référencée LPC8. Les pots utilisés lors des essais ayant un volume de 0,0003 m3, il a été déterminé qu’il faudrait introduire 1,2.108 UFC par pot. 1-2/ Technique de dénombrement des suspensions bactériennes : La souche bactérienne Delftia acidovorans RAY209 est commercialisée dans une formule liquide contenant la suspension de bactéries dans son milieu de culture (BioBoost Liquid ou BBL). Afin de connaître la concentration bactérienne du BBL, un dénombrement des bactéries dans le produit a été effectué. À la suspension bactérienne (BBL) du Bag-in-Box™ initial a été prélevé 1 ml de solution afin d’être placé dans un tube à essai. De l’eau peptonée (9 mL) a été ajoutée dans le tube à essai contenant 1 ml de suspension bactérienne afin de faire une dilution au W1. Un second prélèvement de 1 ml de cette dilution a été mis dans un tube à essai et auquel a été ajouté 9 ml d’eau peptonée afin de faire une dilution au 10‘2. Le procédé a été ensuite répété de façon identique jusqu’à obtenir une dilution au 10-4 et 10'5. À chacune de ces dilutions 10"4 et 10’5 a été prélevé 100 pl afin d’ensemencer la 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 15 surface d’une boite de Pétri (milieu TSA : trypto-caséine soja). Un total de 6 boîtes de Pétri ont été ensemencées par dilution et l’incubation a été réalisée durant 48h à 30°C (ATCC., 2015 ; Larcher., 2015). Les colonies à la surface des boîtes ont été comptées et la concentration dans le BBL (produit commercial) a été estimée à 2.107 UFC/ml. 1-3 Technique de dénombrement des suspensions bactériennes : La souche bactérienne Delftia acidovorans RAY209 est commercialisée dans une formule liquide contenant la suspension de bactéries dans son milieu de culture Préparation de l’inoculum bactérie dans milieu de culture : « bactérie + surnageant » (B+M): La suspension bactérienne BBL a été utilisée telle quelle pour la modalité « bactérie + surnageant » (B+M). 1-4/ Préparation de l’inoculum : « bactérie +eau » : 1400 ml de suspension bactérienne BBL ont été centrifugés à 8500 rotations par minutes (13000 g) pendant 15 minutes. Le culot bactérien a été dissout dans 700 ml d’eau et a été centrifugé à nouveau. Cette étape a été répétée 3 fois afin d’éliminer tout reste de surnageant de culture. Le culot a ensuite été re-suspendu dans de l’eau du robinet (environ 700ml). La concentration bactérienne a été à nouveau mesurée dans cette solution selon le protocole décrit à l’exemple 1-2. Après comptage des colonies à la surface des boîtes, la concentration des bactéries a été estimée à 4.107 UFC/ml. Cette suspension en l’état correspond à la modalité « bactérie +eau » ; 1-5/ Préparation de la modalité « bactérie + eau, pasteurisé » ((B+eau)p) : Environ 200 ml de la suspension « bactérie + eau » décrite à l’exemple 1-2 a été chauffée au bain marie pendant 20 minutes à 80°C afin d’obtenir la suspension « bactérie + eau, Pasteurisée » ((B+eau)p). 1-6/ Préparation de la modalité « surnageant de culture » (M) : La suspension bactérienne BBL a été centrifugée à 8500 rotations par minutes (13000 g) pendant 15 minutes et environ 600 ml de surnageant a été prélevé pour 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 16 l’inoculation des plantes. Ce prélèvement correspond à la modalité « milieu de culture » (M). 1-7/ Préparation de la modalité « Surnageant de culture pasteurisé » (Mp) : La suspension bactérienne BBL a été centrifugée et 200 ml de surnageant de culture ont été récupérés après la centrifugation afin d’être chauffés au bain-marie pendant 20 minutes à 80°C. La solution résultante correspond à la modalité « Surnageant de culture pasteurisé » (Mp) 1-8/ Préparation de la modalité « soufre » (S) : Dans un contenant a été mélangé 1g de soufre dans 100 mL d’eau pour obtenir la modalité « soufre » (S). 1-9/ Préparation de la modalité du témoin positif Bacillus amyloliquefaciens IT45 (IT45) : Une préparation microbienne atomisée de Bacillus amyloliquefaciensJT45, sous forme de poudre et concentrée à 2.1010 UFC/g, a été re-suspendue dans de l’eau pour obtenir la concentration cible de 4.107 UFC/ml. Exemple 2 2-1/ Préparation des plantes (Arabidopsis thaliana) La croissance des plantes a été réalisée sur un milieu solide dans des conditions non-stériles afin de se rapprocher des conditions naturelles au champ selon les répétitions suivantes : Répétition biologique = 8 modalités x 3 répétitions x 6 itérations = 144 plantes 2-2/ Préparation du semis Les graines ont été conservées à 4°C afin d’assurer leur préservation ainsi qu’une germination correcte et synchronisée (ABRC, 2015). Environ 300-400 graines ont été placées de façon très clairsemée dans 3 boites de Pétri (14 cm de diamètre) sur du papier à germination. L’équivalent de 5 ml d’eau a été ajouté de façon à 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 17 simplement imbiber le papier à germination. Les boîtes de Pétri ont été placées 3 jours au réfrigérateur (4°C) pour assurer la stratification des graines. 2-3/ Préparation des micro-serres et des pots La croissance des plantes a été réalisée dans des pots (6x6x7 cm) placés dans des micro-serres (22 x 16 x 18 cm) par nombre de 6. Les pots ont été remplis de 150 g d’un mélange terreau-sable (2/3 de terreau et 1/3 de sable, m/m). Les micro-serres ont été recouvertes d’irrinappe à l’intérieur afin de maintenir un environnement humide pour les plantes. Les graines ont été ensuite prélevées des boîtes de Pétri et ont été placés sur les pots de terre (5-6 graines par pot) à l’aide d’une pince. Une seule pousse par pot a été gardée une fois que les graines ont germé. 2-4/ Inoculation et croissance des plantes Chaque plantule a été inoculée au moment du semis avec les solutions/suspensions décrites à l’exemple 1 et comme ci-après. Les plantules ont été soumises à un cycle nycthéméral de 16h de jour à 23°C suivi de 8h de nuit à 18°C. Les pots ont été arrosés une à deux fois par jour durant la partie diurne du cycle. L’hygrométrie n’a pas été régulée et a été d’environ 70-80%. Chaque modalité a été inoculée selon les doses suivantes : - A) Delftia acidovorans RAY209 dans son milieu de culture (B+M): 6ml/pot (18 pots) - B) « bactérie + eau » (B+eau): 3ml/pot (18 pots) - C) « (bactérie + eau) pasteurisée » (B+eau)p: 3ml/pot (18 pots) - D) « surnageant de culture pasteurisé » (Mp): 6ml/pot (18 pots) - E) eau : 3ml/pot (18 pots) - F) « surnageant de culture » (M): 6ml/pot (18 pots) G) Suspension de Bacillus amyloliquefaciens IT45 : 1 ml/pot (18 pots) - H) Soufre (S): 0,01g/pot (18 pots) (1 mL par plante d'une solution à 1% (m/v)). CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 18 PCT/EP2017/063438 Les différents lots de pots ont été randomisés de manière à ce que les essais soient répartis de façon plus homogène dans la zone utilisée afin de s'affranchir au maximum des disparités des variables (température, luminosité, aération, humidité...) présentes dans la serre et la chambre de culture. 3 blocs de 8 mini- 5 serres ont été mis en place dans la chambre de culture, avec une rotation intra-bloc. 2-5/ Mesures et analyses La croissance des plantes a été évaluée par le développement de la surface des feuilles au cours du temps. Les plantes ont été prises en photos de haut tous les 2 jours et chaque photo a été analysée grâce au logiciel Fiji afin de pouvoir calculer la 10 surface foliaire de chaque plante tout au long du cycle. Les données des mesures ont été répertoriées dans un fichier Excel (surface foliaire, masse sèche, masse fraîche) et ces données ont été analysées grâce au logiciel Xlstat. Le test de Tukey (test post-hoc de comparaisons multiples) a été utilisé afin de conclure sur les différences significatives entre les moyennes des modalités (voir 15 figure 1). Tableau 1. Moyennes des surfaces foliaires pour chaque modalité et par jour J7 J9 0,302 a J11 0,398 a J14 0,742 ab 0,837 a J16 J20 J24 (B+eau)p 0,179 a 2,166 ab 4,960 a 8,339 a IT45 B+eau S Mp B+M eau M Pr> F Significatif (>95%) 0,126 ab 0,242 ab 0,314 a 0,070 bc 0,149 abc 0,254 ab 2,998 a 5,263 a 7,961 a 0,498 abc 1,167 ab 2,917 a 4,975 a0,360 abc 0,964 ab 2,021 a 3,326 a0,315 abc 0,859 ab 1,932 a 3,809 a0,296 abc 0,890 ab 1,913a 3,538 a 0,044 c 0,050 c 0,056 c 0,053 c 0,018 c 0,000 0,125 bc 0,226 ab 0,120 bc 0,164 ab 0,106 bc 0,158 ab 0,101 bc 0,173 ab 0,252 bc 0,098 c 0,004 0,553 ab 1,312 a 2,646 a 0,033 c 0,001 0,050 b 0,010 0,218 b 0,025 0,624 a 1,414 a 0,033 0,036 Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 19 a, b et c correspondant à des groupes homogènes de plantes traitées, utilisés pour la réalisation du test statistique de Tukey. Pr>F : valeur seuil du degré de significativité Les différences constatées sur les mesures des surfaces foliaires de chaque modalité sont significatives (voir Tableau 1). Une différence significative entre le témoin positif (Bacillus amyloliquefaciens IT45) et le témoin négatif (eau) a été observée. De plus, la modalité (B+eau)p a montré les meilleurs résultats en terme de surface foliaire des plantes (supérieur au témoin positif) en comparaison des autres modalités. Le surnageant de culture M a présenté quant à lui la croissance foliaire la plus faible. Exemple 3 Étude portant sur l’effet de l’inactivation de souches de Delftia et Lactobacillus sur les paramètres de croissance de plantules de canola L’objectif de cette étude est de déterminer l’effet d’un traitement de pasteurisation de souches de Delftia acidovorans et Lactobacillus rhamnosus sur la croissance de plantules de canola (Brassica napus cultivar 5525CL). Plus particulièrement, cette étude vise à comparer l’effet de la pasteurisation et de la non-pasteurisation (c’est- à-dire d’une culture bactérienne vivante) d’une souche bactérienne sur les paramètres de croissance de plantules de canola. 3-1/ Cultivar de canola Des semences de canola Brassica napus appartenant au cultivar 5525CL (Brett Young) ont été désinfectées selon le protocole décrit dans Asaduzzaman et al. ("Metabolomics Differentiation of Canola Genotypes: Toward an Understanding of Canola Allelochemicals." Frontiers in Plant Science, vol. 5, 2015.doi:10.3389/fpls.2014.00765). Après séchage, les graines ont été mises à germer dans des boîtes de Pétri contenant de l’agar (15 g/l). Les graines germées sont transférées dans des poches de germination (Mega International), à raison de 2 graines/poche, contenant un mélange de terreau supplémenté d’une demi-dose d’une solution d’Hoagland No. 2 (Sigma, H2395). CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 20 3-2/ Modalités à l’étude Tableau 2. Description des différentes modalités étudiées dans cet exemple. Modalité no. 1 ModalitésSuspension de Delftia acidovorans RAY 209 vivante (cellules lavées dans eau distillée stérile) 2 Suspension de Delftia acidovorans RAY 209 (cellules lavées dans eau distillée stérile) inactivée par pasteurisation 3 Suspension de Delftia acidovorans RAY 209 (cellules lavées dans eau distillée stérile) inactivée par traitement à la presse de French (haute pression suivi d'une décompression rapide) 4 Suspension de Lactobacillus rhamnosus R0011 vivante (cellules lavées dans eau distillée stérile) 5 Suspension de Lactobacillus rhamnosus R0011 (cellules lavées dans eau distillée stérile) ) inactivée par pasteurisation 6 Suspension de Lactobacillus rhamnosus R0011 (cellules lavées dans eau distillée stérile) inactivée par traitement à la presse de French (haute pression suivi d’une décompression rapide) 7 Surnageant de culture de Delftia acidovorans RAY 209 (traitement sans bactéries) 8 Eau distillée stérile 3-3/ Préparation des inoculants non-pasteurisés 5 Les souches bactériennes utilisées pour l’inoculation des semences de canola sont Delftia acidovorans RAY 209 (BBL) et Lactobacillus rhamnosus RO011 (Institut Rosell-Lallemand. Montréal, Qc, Canada). Les concentrations des solutions mères de bactéries sont, respectivement, de 3,71E+08 cfu/ml et 2,21E+11 cfu/ml. Les solutions mères (1 ml) sont centrifugées à 8500 rpm pendant 15 minutes. Le io culot est resuspendu dans 1 ml d’eau distillée stérile. Cette étape de lavage des cellules bactériennes est répétée 2 fois. Suite à la première centrifugation de la 5 10 15 20 25 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 21 solution mère de Delftia acidovorans RAY 209, le surnageant est conservé pour le traitement futur des semences de canola (modalité 3). Les suspensions bactériennes dans l’eau distillée stérile sont conservées pour l’inoculation des semences de canola germées (modalités 1 et 4). 3-4/ Préparation des inoculants inactivés Deux techniques d’inactivation ont été testées : (1) pasteurisation ou traitement par la chaleur et (2) traitement à la presse de French (haute pression suivi d’une décompression rapide). (1) Traitement par la chaleur Pour chacune des 2 souches bactériennes étudiées, 1 ml de suspension bactérienne à une concentration de 3,71E+08 cfu/ml dans l’eau distillée stérile est transférée dans un tube Eppendorf (de 1,5 ml) et incubée à 80°C dans un bain-marie pendant 20 minutes. Les suspensions bactériennes pasteurisées sont conservées pour l’inoculation des semences de canola germées (modalités 2 et 5). (2) Traitement à la presse de French (haute pression suivi d’une décompression rapide) Pour chacune des 2 souches bactériennes étudiées, 5 ml de suspension bactérienne à une concentration de 2,21E+11 cfu/ml dans l’eau distillée stérile sont soumis à un passage à la presse de French (American Instrument CO Inc.) à la pression de 18000 psi à 4°C suivi d’une détente instantanée. Les cellules bactériennes lysées sont récupérées pour l’inoculation des semences de canola germées (modalités 3 et 6). 3-5/ Inoculation bactérienne des semences de canola L’inoculation des semences de canola germées a été effectuée à l’aide d’une pipette et 10 pl des préparations obtenues (voir Tableau 2 pour la description des 8 modalités étudiées) ont été appliquées sur chaque semence de canola. Le Tableau 3 présente les concentrations bactériennes appliquées sur les semences de canola. 5 10 15 20 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 22 Les semences traitées ont été maintenues sous atmosphère contrôlée dans une chambre de croissance avec 16 heures de lumière à 22 °C et 8 heures d’obscurité à 18°C. Le dispositif expérimental comportait, pour chacune des modalités, 10 répétitions de 2 semences germées/poche de germination. Un total de 20 semences germées a donc été traité par modalité. Tableau 3. Calculs des concentrations bactériennes appliquées par semence de canola Inoculant Concentration de la solution mère Dilution de la solution mère à 108 CFU/mL Titre requis (CFU/ml) Quantité appliquée/ semence (ni) Titre finale (CFU/ semence (10 pl)) Quantité d’inoculant dans le volume total (pL) Quantité d’eau dans le volume total (pL) D. acidovorans RAY 209 3,71E+08 3,71E+08 l,00E+08 10 L00E+06 2,694 7,31 L. rhamnosus R0011 2,21E+11 2.21E+08 L00E+08 10 • l,00E+06 4,525 5,48 3-6/ Notation des résultats La prise de données a été effectuée après 8 jours, 22 jours et 36 jours suivant l’inoculation des semences de canola. Après 8 jours d’incubation, les racines latérales sont dénombrées. Après 22 jours d’incubation, 10 plantules par modalité sont récoltées. Dix plantules par modalité sont aussi récoltées après 36 jours d’incubation. Suite à la récolte des plantules de canola, la hauteur des pousses a été mesurée du collet à la plus haute feuille. Les racines ont été séparées du sol et mesurées. La biomasse végétale ainsi que la biomasse racinaire (pousses et racines séparément) ont aussi été mesurées à l'aide d’une balance de précision. Les poids secs des pousses et des racines ont été déterminées après séchage à 35°C pendant 48 heures. De plus, pour chacune des modalités, des observations microscopiques des poils absorbants racinaires ont été effectuées afin d’évaluer leur présence sur les racines CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 23 des plantules de canola. Pour ce faire, pour chacune des modalités, 1 cm de racine primaire est placée dans une boîte de Pétri. La racine a été immergée d’eau afin que les poils absorbants racinaires soient en suspension. Les observations microscopiques ont été réalisées à un grossissement de 100X. Les poils racinaires 5 ont été dénombrés sur une superficie de 0,75 mm2. Les Figures 2 à 9 montrent les images des observations microscopiques des poils absorbants racinaires selon les modalités. Des analyses de variance (ANOVA) à un facteur ont été réalisées ainsi que des tests de comparaison de variance de Bartlett afin de conclure quelles modalités io présentent une variance différente des autres pour la hauteur des pousses (à l’aide du logiciel KyPlot). Le résultat de l’analyse sur la hauteur des pousses est présenté dans le Tableau 4. Les résultats présentés démontrent que la souche de Delftia acidovorans est capable de stimuler le développement de la partie racinaire des plantes en 15 augmentant le nombre de poils absorbants racinaires. Ceci aura, entre autres, comme effet d'améliorer l'assimilation des nutriments par les plantes.Tableau 4. Comparaison de la hauteur des pousses de canola 36 jours après traitement.Traitement Eau Stérile Delftia vivante Eau stérile X X Milieu de culture de Déifia + X Lactobacillus inactivée par pression - X Lactobacillus pasteurisé + X Lactobacillus vivant - X Delftia vivante X Delftia inactivée par pression + ++ Delftia pasteurisé +++ +++ 5 10 15 20 CA 03025849 2018-11-28 WO 2017/207752 PCT/EP2017/063438 24 Les symboles représentent la significativité des résultats issus de la comparaison des traitements indiqués en colonne par rapport aux traitements indiqués en ligne (test statistique d’analyse de variance ANOVA). Legend symbole meaning "+" not significative positive difference not significative negative difference no differences "=" "++" significative positive difference at P=0,1 significative negative difference at P=0,1 "+++" significative positive difference at P=0,05 "—" significative negative difference at P=0,05 Bien que la présente invention ait été décrite à l’aide de mises en œuvre spécifiques, il est entendu que plusieurs variations et modifications peuvent se greffer aux dites mises en œuvre, et la présente demande vise à couvrir de telles modifications, usages ou adaptations de la présente demande suivant en général, les principes de l’invention et incluant toute variation de la présente description qui deviendra connue ou conventionnelle dans le champ d’activité dans lequel se retrouve la présente demande, et qui peut s’appliquer aux éléments essentiels mentionnées ci-haut, en accord avec la portée des revendications.

Claims (7)

  1. 5 10 15 20 25 Date reçue/Date received 2024-04-22 25 REVENDICATIONS 1. Procédé pour augmenter l’efficacité biostimulante sur le développement des plantes d’une souche de bactérie vivante du genre Delftia, ou d’une composition la contenant, caractérisée en ce que le procédé comprend une étape d’inactivation de la souche de bactérie vivante par des procédés physiques, biochimiques, chimiques ou physico-chimiques, la souche de bactérie inactivée ainsi obtenue présentant une viabilité inférieure à 50% et ayant une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieure à celle obtenue avec la même souche de bactérie vivante ou avec une composition la contenant.
  2. 2. Procédé selon la revendication 1 , caractérisé en que la souche de bactérie vivante est inactivée par traitement thermique ou par haute pression.
  3. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en que la souche de bactérie vivante est inactivée par pasteurisation.
  4. 4. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en que la souche de bactérie vivante est inactivée sans son milieu de culture.
  5. 5. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la souche de bactérie est Delftia acidovorans.
  6. 6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la souche de bactérie est la souche Delftia acidovorans RAY209 déposée à l’ATCC le 25 avril 2002 sous le n° PTA-4249.
  7. 7. Souche de bactérie du genre Delftia inactivée par un procédé physique, chimique, biochimique ou physico-chimique pour améliorer le développement des plantes caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée a une efficacité biostimulante sur le développement des plantes supérieure à celle de la même souche de bactérie vivante. 5 10 15 20 25 Date reçue/Date received 2024-04-22 26 8. Souche de bactérie inactivée pour améliorer le développement des plantes selon la revendication 7 , caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée est Delftia acidovorans. 9. Souche de bactérie inactivée pour améliorer le développement des plantes selon la revendication 8, caractérisée en ce que la souche de bactérie inactivée est la souche de Delftia acidovorans RAY209 déposée à l’ATCC le 25 avril 2002 sous le n° PTA-4249. 10.Souche de bactérie inactivée pour améliorer le développement des plantes selon l’une quelconque des revendications 7 à 9, caractérisée en ce qu'elle est inactivée par traitement thermique ou par traitement à hautes pressions. 11. Souche de bactérie inactivée pour améliorer le développement des plantes selon l’une quelconque des revendications 7 à 10, caractérisée en ce qu'elle est inactivée par pasteurisation. 12.Composition pour améliorer le développement des plantes, caractérisée en ce qu’elle comprend au moins une souche de bactérie inactivée selon l’une quelconque des revendications 7 à 11, et un véhicule compatible pour l’agriculture. 13.Composition pour améliorer le développement des plantes selon la revendication 12, caractérisée en ce qu'elle comprend ladite souche de bactérie inactivée isolée de son milieu de culture. 14.Composition pour améliorer le développement des plantes selon la revendication 12 ou 13, caractérisée en ce qu'elle comprend la souche de bactérie inactivée en combinaison avec d'autres microorganismes vivants, inactivés ou en extraits. 15.Composition pour améliorer le développement des plantes selon la revendication 14, caractérisée en ce que les autres microorganismes vivants, 5 10 15 20 25 Date reçue/Date received 2024-04-22 27 inactivés ou en extraits sont des bactéries, des champignons et/ou des levures. 16. Composition pour améliorer le développement des plantes selon la revendication 15, caractérisée en ce que lesdits autres microorganismes vivants, inactivés ou en extraits sont d’autres souches de bactéries inactivées. 17. Composition pour améliorer le développement des plantes selon l'une quelconque des revendications 12 à 16, caractérisée en ce qu'elle comporte en outre des engrais, herbicides, insecticides, fongicides, solutions minérales et/ou supports de culture. 18.Composition pour améliorer le développement des plantes selon l’une quelconque des revendications 12 à 17, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme appropriée pour le traitement au sol, le traitement de la partie racinaire de la plante, le traitement foliaire de la plante, le traitement des parties florales, le traitement des parties fructifères et/ou le traitement des graines. 19. Composition pour améliorer le développement des plantes selon l’une quelconque des revendications 12 à 18, caractérisée en ce qu’elle se présente sous forme de poudre, de granules, de micro-granules, de traitement de semences, de formulations liquides, d’encapsulation d’une population de bactéries ou de suspensions liquides. 20.Utilisation d’une composition selon l’une quelconque des revendications 12 à 19, ou d’une souche de bactérie inactivée selon l’une quelconque des revendications 7 à 11, ou d’une souche de bactérie inactivée et/ou d’une composition obtenue selon le procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 5 pour améliorer le développement d’une plante. 21.Méthode pour améliorer le développement d’une plante comprenant l’administration d’une composition selon l’une quelconque des revendications 28 12 à 19, ou d’une souche de bactérie inactivée selon l’une quelconque des revendications 7 à 11, ou d’une souche de bactérie inactivée et/ou d’une composition obtenue selon le procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 6. Date reçue/Date received 2024-04-22
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