CA3030340C - Cellules souches pluripotentes induites humaines pour un genie genetique a haut rendement - Google Patents

Cellules souches pluripotentes induites humaines pour un genie genetique a haut rendement

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CA3030340C
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Alejandro Soto-Gutierrez
Alexandra Sylvie Collin de l'Hortet
Kan HANDA
Jorge Guzman LEPE
Yang Wang
Kazuki Takeishi
Ira Jacob Fox
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University of Pittsburgh
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Abstract

L'invention concerne des procédés pour générer d'une manière efficace des cellules souches pluripotentes induites (iPSC) humaines contenant un acide nucléique comprenant un promoteur de doxycycline fonctionnellement lié à un acide nucléique codant pour une Cas9. Ces procédés comprennent la transfection d'une cellule somatique humaine avec une molécule d'acide nucléique comprenant un promoteur de doxycycline fonctionnellement lié à un acide nucléique codant pour une Cas9, et un promoteur constitutif fonctionnellement lié à un élément sensible à la tétracycline, et induisant une cellule somatique pour former une iPSC, en produisant de ce fait une iPSC qui peut subir une recombinaison, médiée par CRISPR/Cas9, avec un rendement élevé. L'iPSC humaine, ou une cellule différenciée obtenue à partir de cette dernière, est cultivée en présence de doxycycline pour induire l'expression de la Cas9. Ces cellules peuvent ensuite être utilisées pour cibler tout gène d'intérêt, par introduction d'acides nucléiques codant pour des petits ARN guides (sgRNA). La présente invention concerne en outre les cellules souches pluripotentes induites produites par ces procédés.
CA3030340A 2016-08-01 2017-07-31 Cellules souches pluripotentes induites humaines pour un genie genetique a haut rendement Active CA3030340C (fr)

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