Verfahren zur Herstellung neuer Abkömmlinge des Cysteamins
Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung neuer Abkömmlinge des Cysteamins der Formel I
HS-CH2-CH2-NH-R-COA I in welcher R ein niedriges gerades oder verzweigtes Alkylenradikal mit vorzugsweise 1-2 Kohlenstoffatomen und-COA eine Carboxy-, Ester-oder Amidgruppe bedeutet.
Es wurde überraschend gefunden, dass diese Stoffe als aktive SH -Gruppenträger physiologisch bedeutende Aktivitäten besitzen, dass sie sich beispielsweise ähnlich als Entgiftungs-und Röntgenschutzmittel wie Cysteamin verwenden lassen, gegenüber diesem jedoch den Vorteil bedeutend grösserer Verträglichkeit aufweisen. Ausserdem treten bei chronischer Verabreichung nicht die beim Cysteamin beobachteten Ver änderungen des Blutbildes ein.
Die folgende Tabelle zei, die Ergebnisse einer vergleichenden pharmakologischen Prüfung einer nach der vorliegenden Erfindung hergestellten Verbindung mit der meist verwendeten ähnlich wirkenden Verbindung, dem Cysteamin.
(A) (B) (C) (D) (E)
Toxizität Minimale wirksame
Formel 12 Tage-DLso Anti-X-Dose Verhältnis Relative Beeinflussung (mg/kg Maus) (mg/kg Maus) B/A Wirksamkeit des Blutbildes [intraperitoneal] [i. p.] HS-CH2-CH2-NH-CH2-COOH 3070 200-220 ¯ 1/14,5 3 ¯ (Vergl. Beispiel) HS-CH2-CH2-NH2 225 40-50 ¯ 1/5 l + + + (Vergl. beispielsw. Hagen, Arznei mittelforschung 6 (1956) S. 384-388 Erliiuterwng : Die Untersuchungen wurden am Centro Studi Tumori di Novara (Italien) von Professor Pisani und
Dr. Tognacca durchgeführt.
(B) Bedeutet die nach Bestrahlung der Versuchstiere mit 600 Röntgen-Einheiten minimal lebensverlängernde wirkende
Dosis der betreffenden Substanz.
(C) Verhältnis von wirksamer zur toxischen Dose.
(D) Bedeutet die Wirksamkeit in Relation zur Toxizität und bezogen auf Cysteamin mit dem definierten Wert l.
(E) a) + Unbedeutende Beeinflussung : Cysteamin-N-essigsäure bewirkte nach 6 wöchiger Verabreichung (jeweils an 5 Tagen der Woche) von je 1600 mg/kg intraperitoneal (dem 7-8fachen der minimal wirksamen
Dosis) eine Herabsetzung des Hämoglobingehaltes um 10%. Das restliche Blutbild blieb unverändert. b) + + + Deutliche VerÏnderung des Blutbildes: Cysteamin bewirkte bei analoger Verabreichung von blo¯
60 mg/kg (dem 1,2-1,5fachen der minimal wirksamen Dosis) eine Herabsetzung des HÏmoglobin gehaltes und auch der Zahl der wei¯en Blutk¯rperchen um 20%.
Das erfindungsgemässe Verfahren zur Herstellung dieser neuen Verbindungen ist dadurch gekennzeichnet, dass man durch Umsetzung einer Verbindung der Formel
X-R-COA II mit einer Verbindung der Formel III B-S-CH2-CH2-NH2 III oder durch Umsetzung einer Verbindung der For meI IV H2N-R-COA IV mit einer Verbindung der Formel V B-S-CH2-CH2 X V wobei X eine reaktive veresterte Oxygruppe und B eine durch Reduktion leicht abspaltbare Gruppe bedeutet, eine Verbindung der Formel VI
B-S-CH2-CH2-NH-R-COA VI herstellt und diese anschliessend durch reduktive Spaltung in eine Verbindung der Formel I überführt.
Beispiel
167 Teile S-Benzyl-cysteamin (2-Benzylthio äthylamin), 101 Teile Triäthylamin und 122, 5 Teile Chloressigsäureäthylester werden in 1000 Volumteilen Benzol 6 Stunden unter Rühren am Rückfluss gekocht.
Das ausgeschiedene Triäthylaminchlorhydrat wird abgenutscht und mit wenig Benzol gewaschen. Das Filtrat wird eingedampft. Der ölige Eindampfrück- stand wird in 500 Teile konzentrierte Salzsäure eingerührt und die Mischung während 30 Minuten gekocht. Nach dem Abkühlen wird das ausgeschiedene Produkt abfiltriert und mit wenig verdünnter Salzsäure gewaschen. Man erhält auf diese Weise 187 bis 195 Teile (71-75% der Theorie) Benzylthio äthylaminoessigsäure-chlorhydrat vom Schmelzpunkt 189 bis 192 C.
Dieses Produkt lässt sich aus 95"/oigem Äthanol umkristallisieren, wobei der Schmelzpunkt auf 193 bis 195¯C ansteigt. Es ist leicht löslich in Wasser, Methanol und siedendem Äthanol, dagegen kaum löslich in Ather, Benzol, Chloroform Essigester und Aceton.
Für die Weiterverwendung erwies sich bereits das direkt anfallende Produkt vom Schmelzpunkt 189-192 C als rein genug.
78 Teile Benzylthioäthylaminoessigsäure-chlar- hydrat werden in etwa 1200 Volumteilen flüssigen Ammoniak gelöst. In die Lösung gibt man nach und nach 26 g Natriummetall, bis die Lösung dauernd blau bleibt. Man rührt während 1-2 Std., fügt hierauf so viel Amrnoniumchlorid zu, dass die blaue Farbe verschwindet (Zerstörung des überschüssigen Natriums) und dampft hierauf den Ammoniak ab. Der Ein dampfrückstand wird rasch in Wasser gelöst, die Lösung mit Salzsäure angesäuert und in eine 60 bis 70"C warme Lösung von 105 Teilen Quecksilber- (II)-chlorid in 1000 Volumteilen Wasser gegossen. Es entsteht ein Niederschlag, der sich beim Rühren rasch wieder löst.
Die warme Lösung wird sehr langsam abgekühlt und einige Zeit stehen gelassen. Das Quecksilbersalz von (A-Mercapto-äthylamino-)-essig- säure hat sich nun in kristalliner Form ausgeschieden.
Es wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und in frischem Wasser aufgeschlämmt. In diese Suspension wird unter Rühren während einiger Stunden zuerst bei Zimmertemperatur und schliesslich in der Wärme Schwefelwasserstoff eingeleitet. Das dabei gebildete Quecksilbersulfid wird abgenutscht und das Filtrat nach Zusatz von Salzsäure eingedampft. Man erhält auf diese Weise 32 bis 35 Teile (ss-Mercapto-äthyl- amino)-essigsäure-chlorhydrat, das sind 63-680/o der Theorie.
Nach Umkristallisation aus trockenem Athanol schmilzt dieses neue Cysteamin-Derivat bei 162 bis 1640 C. Es ist leicht löslich in Wasser, Methanol und warmem Äthanol. Dagegen kaum l¯slich in Ather, Benzol, Chloroform und Essigester.
Process for the production of new derivatives of cysteamine
The invention relates to a process for the production of new derivatives of cysteamine of the formula I.
HS-CH2-CH2-NH-R-COA I in which R is a lower straight or branched alkylene radical with preferably 1-2 carbon atoms and -COA is a carboxy, ester or amide group.
It has surprisingly been found that these substances, as active SH group carriers, have physiologically important activities, that they can be used, for example, as detoxification and X-ray protection agents like cysteamine, but have the advantage over this that they are significantly more tolerable. In addition, the changes in the blood count observed with cysteamine do not occur with chronic administration.
The following table shows the results of a comparative pharmacological test of a compound prepared according to the present invention with the most commonly used similarly acting compound, cysteamine.
(A) (B) (C) (D) (E)
Toxicity Minimal effective
Formula 12 day DLso Anti-X dose ratio Relative influence (mg / kg mouse) (mg / kg mouse) B / A Effectiveness of the blood count [intraperitoneal] [i.a. p.] HS-CH2-CH2-NH-CH2-COOH 3070 200-220 ¯ 1 / 14.5 3 ¯ (see example) HS-CH2-CH2-NH2 225 40-50 ¯ 1/5 l + + + (See for example Hagen, Arznei Mittelforschung 6 (1956) pp. 384-388 Explanations: The investigations were carried out at the Centro Studi Tumori di Novara (Italy) by Professor Pisani and
Dr. Tognacca performed.
(B) Means the minimal life-prolonging effect after irradiating the test animals with 600 X-ray units
Dose of the substance in question.
(C) Ratio of effective to toxic dose.
(D) Means the effectiveness in relation to the toxicity and based on cysteamine with the defined value l.
(E) a) + Insignificant influence: Cysteamine-N-acetic acid caused intraperitoneally 1600 mg / kg (7-8 times the minimally effective) administration after 6 weeks (5 days a week)
Dose) a 10% reduction in the hemoglobin content. The rest of the blood count remained unchanged. b) + + + Significant change in the blood count: Cysteamine caused an analogous administration of blō
60 mg / kg (1.2-1.5 times the minimum effective dose) a reduction in the hemoglobin content and also the number of white blood cells by 20%.
The inventive method for the preparation of these new compounds is characterized in that by reacting a compound of the formula
XR-COA II with a compound of the formula III BS-CH2-CH2-NH2 III or by reacting a compound of the formula IV H2N-R-COA IV with a compound of the formula V BS-CH2-CH2 XV where X is a reactive esterified Oxy group and B denotes a group which can easily be split off by reduction, a compound of the formula VI
B-S-CH2-CH2-NH-R-COA VI and then converts this into a compound of formula I by reductive cleavage.
example
167 parts of S-benzyl-cysteamine (2-benzylthio ethylamine), 101 parts of triethylamine and 122.5 parts of ethyl chloroacetate are refluxed in 1000 parts by volume of benzene for 6 hours with stirring.
The precipitated triethylamine chlorohydrate is filtered off with suction and washed with a little benzene. The filtrate is evaporated. The oily evaporation residue is stirred into 500 parts of concentrated hydrochloric acid and the mixture is boiled for 30 minutes. After cooling, the precipitated product is filtered off and washed with a little dilute hydrochloric acid. In this way, 187 to 195 parts (71-75% of theory) of benzylthioethylaminoacetic acid chlorohydrate with a melting point of 189 to 192 ° C. are obtained.
This product can be recrystallized from 95% ethanol, the melting point rising to 193 to 195 ° C. It is easily soluble in water, methanol and boiling ethanol, but hardly soluble in ether, benzene, chloroform, ethyl acetate and acetone.
The product immediately obtained with a melting point of 189-192 ° C was found to be pure enough for further use.
78 parts of benzylthioethylaminoacetic acid chlorohydrate are dissolved in about 1200 parts by volume of liquid ammonia. 26 g of sodium metal are gradually added to the solution until the solution remains permanently blue. The mixture is stirred for 1-2 hours, then so much ammonium chloride is added that the blue color disappears (destruction of the excess sodium) and the ammonia is then evaporated off. The vapor residue is quickly dissolved in water, the solution is acidified with hydrochloric acid and poured into a 60 to 70 ° C. solution of 105 parts of mercury (II) chloride in 1000 parts by volume of water. A precipitate is formed which is rapidly formed on stirring again solves.
The warm solution is cooled very slowly and left to stand for some time. The mercury salt of (A-mercapto-ethylamino) - acetic acid has now precipitated in crystalline form.
It is filtered off, washed with water and suspended in fresh water. Hydrogen sulfide is passed into this suspension with stirring for a few hours, first at room temperature and finally with warmth. The mercury sulfide formed is filtered off with suction and the filtrate is evaporated after adding hydrochloric acid. In this way 32 to 35 parts of (β-mercapto-ethyl-amino) -acetic acid chlorohydrate are obtained, which is 63-680 / o of theory.
After recrystallization from dry ethanol, this new cysteamine derivative melts at 162 to 1640 C. It is easily soluble in water, methanol and warm ethanol. In contrast, hardly soluble in ether, benzene, chloroform and ethyl acetate.