Procédé de stabilisation de solutions de variotine
La présente invention se rapporte à un procédé de stabilisation de solutions de variotine.
La variotine est un nouvel et utile antibiotique découvert par Sumiki et d'autres chercheurs en 1951.
Elle est produite par la culture du Paccilomyces varioti Bainier var. antibioticus et est principalement active comme fongicide.
La présente invention nous a permis de produire des préparations stables de variotine pour l'usage pharmaceutique et d'autres usages.
La variotine est généralement instable et, si on la laisse seule, elle se décompose graduellement, suivant le laps de temps écoulé. Les degrés de décomposition sont indiqués dans le tableau suivant:
Gaz en contact Azote Air
Conditions de
conservation Température 5 C 370 C 5o C 370 C
de conservation
Décomposition après une 32 /o 73%51% 80 /o
conservation de 30 jours
Cependant, la variotine, lorsqu'elle est conservée dans un solvant organique, est relativement stable.
En d'autres termes, la variotine qui est dissoute dans divers solvants organiques montre une plus grande stabilité dans ces solvants que si elle est laissée seule, et l'on a trouvé que la stabilité de la variotine dans l'eau ou dans de l'eau contenant un solvant organique dépend du pH de ladite solution de variotine. Nous avons trouvé que la variotine, bien qu'elle se décompose dans une solution alcaline, est stabilisée plus ou moins à un pH compris entre 4 et 7 ou dans une solution faiblement acide à neutre.
Le procédé selon l'invention est caractérisé en ce qu'on ajoute à une solution de variotine un agent antioxydant et/ou un agent chélatant.
En général, on a trouvé que la quantité d'agent stabilisant qui est pratiquement suffisante pour la stabilisation est comprise entre 0,001 et 0,1% en poids, basé sur le volume de la préparation.
Comme agents antioxydants convenant à cet effet, on peut citer par exemple l'hydroquinone, la résorcine, le butylhydroxyanisol et le butyl-hydroxytoluène, et comme agents chélatants l'acide éthylènediamine-tétraacétique et ses sels, la 8-hydroxyquinoléine et le 2,3 -dimercapto-propanol.
Exemple 1
En préparant une solution de variotine à 8000 u/ml, on employa comme solvants respectivement de l'acétate de butyle, du méthanol, du tétrachlorure de carbone et de l'alcool aqueux à 75 /o.
La stabilité améliorée de la variotine dans ces solvants, comparée à la stabilité de la variotine seule, est montrée dans le tableau suivant:
Tétrachlorure Alcool aqueux
Solvant Acétate de butyle Méthanol Témoin de carbone à 75%
Décomposition après conservation pendant 30 jours à 37 C... . 9 o/o 12 27 O/o 29 % 80%
De la variotine à 8000 u/ml fut dissoute dans de l'alcool aqueux à 75 0/o, puis l'on ajouta à cette solution 0,1 0/o d'hydroquinone. En comparaison avec le témoin non additionné d'hydroquinone, la solution ci-dessus fut conservée pendant 30 jours à une température de 370 C. A la fin de cette période, la solution ne montra aucune décomposition de la variotine, mais le témoin montra une décomposition de 29 /o de la variotine.
Exemple 2
Une solution de variotine à 8000u/ml dans de l'acétate de butyle fut additionnée de 0,05 to/o de résorcine et la solution résultante fut conservée pendant 60 jours à 370 C. A la fin de cette période, cette solution montre une décomposition de seulement 7 9/o de la variotine disponible, tandis que le témoin qui n'avait pas été additionné de résorcine montra une décomposition de la moitié de la variotine.
Exemple 3
On prépara une solution de variotine à 800 u/ml dans de l'alcool aqueux à 75 O/o. Comme agent stabilisant, on ajouta 0, 01 /o de sel disodique d'acide éthylènediamine-tétraacétique. On laisse reposer la solution résultante pendant 60 jours à 37O C. A la fin de cette période, la solution ne montra aucune décomposition, tandis que le témoin qui n'avait pas été additionné de sel disodique d'acide éthylènediamine-tétraacétique montra une décomposition de 55 /o de la variotine disponible.
Exemple 4
Une solution de variotine à 8000 ulml dans le méthanol fut additionnée de 0,05 0/o de butyl-hydroxyanisol et la solution résultante fut conservée pendant 30 jours à 37O C. A la fin de cette période, la présente solution ne montra aucune décomposition, mais le témoin qui n'avait pas été additionné de butyl-hydroxyanisol montra une décomposition de 12 /o de la variotine disponible.
Exemple 5
Une solution de variotine à 800 u/ml fut préparée en employant comme solvant du méthanol. Comme agent stabilisant, on ajoute 0,01 0/o de 8-hydroxyquinoléine. On laissa reposer la solution résultante pendant une période de 60 jours à une température de 370 C. A la fin de cette période, la présente solution ne montra aucune décomposition, tandis que le témoin qui n'avait pas été additionné de 8-hydroxyquinoléine montra une décomposition de 25 o/o de la variotine disponible.
Exemple 6
Une solution de variotine à 800 u/ml dans de l'alcool à 75 to/o fut additionnée de 0,01 0/o de sel disodique d'acide éthylènediamine-tétraacétique et de 0,01 0/o de butyl-hydroxyanisol, comme agents stabilisants. La solution résultante fut conservée pendant une période de 100 jours à une température de 37O C. A la fin de cette période, la présente solution ne montra aucune décomposition de la variotine disponible, tandis que le témoin qui n'avait pas été additionné des agents stabilisants ci-dessus montra à peine son activité.