CH510259A

CH510259A - Trockene, reaktionsfähige Testsubstanz und deren Verwendung

Info

Publication number: CH510259A
Application number: CH355067A
Authority: CH
Inventors: John Shand Aeneas
Original assignee: Miles Lab
Priority date: 1966-03-11
Filing date: 1967-03-10
Publication date: 1971-07-15
Also published as: NL137566C; SE328428B; US3446599A; DE1598829B2; US3447905A; DE1598829A1; ES337747A1; GB1182604A; NL6703685A; BE695319A; FR1515372A; AT284065B

Description

Trockene, reaktionsfähige Testsubstanz und deren Verwendung
Die Erfindung betrifft eine trockene, reaktionsfähige Testsubstanz zur Ausführung von Analysen in sauren pH-Bereich, um Substanzen in wässrigen Flüssigkeiten nachzuweisen. Die neue Testsubstanz ist dadurch gekennzeichnet, dass sie ein festes Addukt eine Friedel Crafts-Verbindung und einer organischen Lewis-Base in Mischung mit einer Nachweis substanz enthält, wobei das genannte Addukt die Fähigkeit aufweist bei Berührung mit wässrigen Flüssigkeiten zu einer Mineralsäure zu hydrolysieren. Die Testsubstanz kann vorzugsweise zusätzlich einen Träger enthalten.

Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemässen Testsubstanz in einem Testsystem zum Nachweis von Substanzen, die mindestens eine Aminogruppe aufweisen in wässerigen Flüssigkeiten. Beispielsweise können die erfindungsgemässen Testsubstanzen in einem Testsystem zum Nachweis von Eiweiss-Stoffen oder Pyrrolderivaten, beispielsweise Urobilinogen, Bilirubin oder Mesobilirubinogen, in wässrigen Flüssigkeiten dienen, wobei in den zuletzt genannten Fällen der Nachweis zweckmässigerweise in Anwesenheit von p-Dimethylaminobenzoldehyd durch geführt wird.

In den letzten Jahren wurden zahlreiche, einfache Testverfahren zur schnellen und genauen Bestimmung bestimmter Substanzen in wässrigen biologischen, industriellen und anderen Flüssigkeiten entwickelt. Diese Verfahren verwenden im allgemeinen eine einheitliche Testreagenzzusammensetzung, welche bei Berührung mit einem bestimmten Bestandteil in der untersuchten Flüssigkeit eine Farbreaktion ergeben.

Diese Verfahren, welche colorimetrische Analysen-Verfahren genannt werden, da sie auf dem Auftreten oder dem Verschwinden einer Farbe beruhen, können quantitativ, halbquantitativ oder qualitativ sein, je nach der Empfindlichkeit der Methode, der Konzentration der zu prüfenden Substanz usw. Üblicherweise ist die Menge der gebildeten Farbe der Konzentration der zu prüfenden Substanz proportional, wodurch eine quantitative Bestimmung aufgrund der Messung der gebildeten Farbe oder des Vergleichs der gebildeten Farbe mit einer Standardfarbe ermöglicht wird.

Andere vereinfachte Testverfahren und Zusammensetzungen, welche chemische Reaktionen, die keine Farbreaktionen sind, zum Nachweis der zu untersuchenden Substanzen verwenden, wurden ebenfalls entwickelt.

Diese Verfahren beruhen auf solchen chemischen Phänomenen, wie Ausfällung und enzymkatalysierten Reaktionen, Gasbildung, Koagulierung, Agglutinierung, Bildung von Molekülen, die ultraviolettes oder infrarotes Licht absorbieren und fluoreszieren, um nur einige aufzuzählen.

Der Ausdruck Nachweis bedeutet, wenn er in dieser Beschreibung verwendet wird, sowohl die qualitative als auch die quantitative Analyse einer Substanz in wässriger Flüssigkeit.

Es wurden noch einfachere Methoden zum Nachweis von Substanzen in wässriger Flüssigkeit entwickelt, die einen Trägerstoff für die oben beschriebene vereinfachte Testsubstanz verwenden. Bei solch einem Verfahren wird im allgemeinen die Testsubstanz, die in den Trägerstoff eingearbeitet ist, mit der zu untersuchenden Flüssigkeit zusammengebracht und dann davon abgetrennt, wobei eine kleine Menge der wässrigen Flüssigkeit auf oder in dem Trägerstoff zurückbleibt. Die Reaktion, die durch irgend eine in der Flüssigkeit vorhandene mit der Testsubstanz reaktionsfähige Substanz verursacht wird, kann dann mit einem Standard verglichen werden, der üblicherweise direkt in Konzentration der nachzuweisenden Substanz geeicht wird.

Gewöhnlich ist der Trägerstoff ein saugfähiges Material, wie z. B. Papier, Holz, Stoff usw., welches mit der Testsubstanz imprägniert ist, es kann aber ebenso gut ein Kunststoffstreifen sein, an dem die Testsubstanz oder ein damit getränktes saugfähiges Material haftet.

Falls die Reaktion eine Farbreaktion ist, dann ist in einem solchen Testmittel die Nachweisreaktion ein Oberflächenphänomen, wenn die Testsubstanz auf einem Plastik-Trägerstoff haftet; jedoch ist die Farbe oder der Mangel an Farbe in dem gesamten Trägerstoff vorhanden, wenn in dem Mittel ein saugfähiger Trägerstoff verwendet wird.

In den oben erwähnten Testsystemen ist die Testsubstanz in trockenem Zustand vorhanden und wird in der Regel sofortigen Gebrauch in Bereitschaft gehalten. In solch einem Zustand befindet sich die Testsubstanz gewöhnlich in der Form von Tabletten, Pulvern, Körnchen oder Kügelchen, oder, wenn sie auf einen Trägerstoff aufgetragen ist, befindet sie sich üblicherweise aus Stabilitätsgründen in einem verschlossenen Behälter, wie z. B. einer Flasche, einer Folienpackung oder einem Plastikumschlag.

Viele der zahlreichen vereinfachten bekannten Testzusammensetzungen, die für den Nachweis gewisser Bestandteile in wässrigen Flüssigkeiten spezifisch sind, erfordern einen sauren pH-Wert und einige einen sehr sauren pH-Wert. Andere Methoden machen es erforderlich, dass der saure pH-Wert innerhalb eines gewissen, begrenzten sauren pH-Bereichs im wesentlichen konstant bleibt. Es wird anerkannt, dass in der Vergangenheit, die in diesen Systemen verwendeten Testzusammensetzungen ernsthafte Probleme ergeben haben, da der saure pH-Wert entweder die Zersetzung der chemischen Reagenzien verursachte, oder, falls dieses Hindernis überwunden wurde, und die Zusammensetzung mit einem Trägerstoff verwendet wurde, der sehr saure pH Wert die Zersetzung des Trägerstoffs verursachte.

Die Entfärbung und Inaktivierung des Testsystems begrenzte die allgemeine Anwendbarkeit dieser Systeme ernstlich, und die Zersetzung des Trägerstoffs verursachte einen Grad der Unzuverlässigkeit, der nicht toleriert werden konnte.

Beispiele für die vielen Tests, die einen sauren pH Wert erforderlich machen, sind die folgenden:
Urobilinogen- und Indolverbindungen in biologischen Flüssigkeiten unter Anwendung von Ehrlich's Reagenz; Eiweiss in Urin und Spinalflüssigkeiten unter Anwendung des Proteinfehlers der Indikatormethode, Eiweiss in biologischen Flüssigkeiten unter Anwendung der Ausfällungsmethoden; Phenylbrenztraubensäure unter Anwendung der Ferrichloridmethode und Eisen unter Anwendung der Ferrocyanidreaktion.

Die neue Testsubstanz ist im wesentlichen chemisch neutral bis sie mit einer wässrigen Flüssigkeit, die untersucht werden soll, in Berührung gebracht wird. Die Erfindungsgemässe Testsubstanz ist stabil und ihre chemischen Bestandteile sind miteinander verträglich.

In einer bevorzugten Ausführungsform enthält die neue Testsubstanz einen Trägerstoff, der saurer Zersetzung unterliegt, und mit der Puffersubstanz imprägniert ist. Ausserdem können neutrale oder schwachsaure Salze vorhanden sein, um die Pufferkapazität der aus dem Addukt bei Berührung mit einer wässrigen Lösung gebildeten Mineralsäure zu erhöhen.

Das in der neuen Testsubstanz enthaltene feste Addukt einer Friedel-Crafts-Verbindung und einer organischen Lewis-Base verursacht den sauren pH-Wert.

Diese Addukte werden bei Berührung mit der zu untersuchenden wässrigen Flüssigkeit hydrolysiert unter Freisetzung einer Mineralsäure, die den erforderlichen pH-Wert ergibt. Die Verwendung dieser Art von Reagenzien macht es möglich, eine Mineral- (Eher als eine organische) Säure für das Testsystem zu verwenden unter Verwendung ausschliesslich fester Reagenzien. Es macht es ausserdem möglich, solche Säure nur zur Zeit der Verwendung der Testsubstanz zu liefern.

Die bevorzugt verwendeten Firedel-Crafts-Verbindungen sind diejenigen Halogenverbindungen, die als Katalysatoren bei der klassischen Friedel-Crafts-Alkylierungsreaktion verwendet werden. Solche Verbindungen sind unter anderen Zinn(IV)-chlorid, Bortrichlorid, Aluminiumchlorid, Bortrifluorid, Zinkchlorid und Eisen(III)-chlorid. Diese Verbindungen sind aussergewöhnlich reaktionsfähige Stoffe und können, wenn sie der feuchten Luft ausgesetzt werden, rauchen.

Die oben erwähnten Friedel-Crafts-Verbindungen können mit einer organischen Lewis-Base zu den festen Addukten umgesetzt werden. Die bevorzugten Lewis Basen sind unter anderen Pyridin und substituierte Pyridine, wie z. B. cu-, ss-, y-Picolin, N,N-Dialkylalkanolamide, z. B. Dimethylformamid und Dimethylacetamid, andere Amide, und Imide, z. B. Benzamid und Succinimid, Harnstoffverbindungen, wie z.B. sym. Dimethylharnstoff, Aether z. B. Dioxan und Tetrahydrofuran, Nitrile, z. B. Acetonitril, sowie Amine, z. B.

Morpholin.

Wegen der Reaktionsfähigkeit der Friedel-Crafts Verbindungen erfordert die Herstellung der in der erfindungsgemässen Testsubstanz enthaltenen Addukte üblicherweise Vermischen der Bestandteile unter Beobachtung der erforderlichen Vorsichtsmassnahmen für eine exotherme Reaktion und Gewinnung der so gebildeten Addukte. Falls erforderlich, können die Reak tionspartner gelinde erwärmt werden, um die Bildung des festen Adduktes zu beschleunigen.

Das molare Verhältnis der Friedel-Crafts-Verbindung, zu der Lewis-Base bei der Herstellung der verwendeten Addukte hängt weitgehend von der verwendeten Friedel-Crafts-Verbindung, ab. Bor beispielsweise, das eine Koordinationszahl von 4 hat, bildet 1 :1 Addukte mit der Lewis-Base, während Zinn, das eine Koordinationszahl von 6 hat, insbesondere 1 : 2 Addukte mit der Lewis-Base bildet. Dieses Verhältnis kann jedoch in Abhängigkeit von der verwendeten organischen Lewis-Base und der Veränderlichkeit der Koordinationszahl des elektropositiven Elementes in der verwendeten Friedel-Crafts-Verbindung variiert werden. Diese Variablen liegen jedoch innerhalb des Gesichtskreises und der experimentellen Erfahrung eines in der Technik der Komplexbildung vertrauten Fachmanns.

Diese Addukte können z.B. zusammen mit einem neutralen oder schwach-sauren Salz zur Ausbildung der Testsubstanz verwendet werden. Solch ein System hält den pH-Wert im wesentlichen bei vorher bestimmten sauren pH-Bedingungen konstant. Geeignete Salze, wie z. B. Kaliumchlorid oder Kaliumhydrogenphthalat, können zu der Testsubstanz hinzugefügt werden, um die Ionenstärke und Wirksamkeit der freigesetzen Säure als Puffersystem zu erhöhen. Wenn z.B. die freigesetzte Säure Chlorwasserstoffsäure ist, und das in Verbindung damit verwendete Salz Kaliumchlorid darstellt, dann stellt diese Mischung das bekannte Clark and Lubs Puffersystem dar, das in situ in der erfindungsgemässen Testsubstanz durch eine trockene, feste Mischung gebildet wird.

Solch eine Testsubstanz ist aussergewöhn lich wirksam, um auf einen pH-Wert von ca. 1-2 zu puffern.

Die in der Testsubstanz vorhandene Menge an Addukt hängt vor allem von dem gewünschten pH-Wert und dem Neutralisationseffekt der zu untersuchenden Lösung ab, und kann von einem Fachmann auf dem Gebiet der analytischen Chemie leicht berechnet werden.

Solch eine Berechnung beruht auf der Zersetzung des Adduktes nach dem folgenden Reaktionsschema, welches lediglich als Beispiel gegeben wird, und von dem verwendeten, individuellen Addukt abhängt: A-BCl3 + 3H30 zu 3HC1 + HABE3 + A worin A die zur Herstellung des Adduktes verwendete organische Lewis-Base ist. Es werden demnach bei der obigen Reaktion drei Mole Chlorwasserstoffsäure pro Mol Addukt in Freiheit gesetzt.

Die Addukte können in der Testsubstanz verwendet werden, indem sie einfach mit den anderen Bestandteilen vermischt werden, wobei sie ein Pulver ergeben, welches seinerseits verwendet werden kann, indem es der zu untersuchenden wässrigen Flüssigkeit zugesetzt wird, um den sauren pH-Wert und damit die chemische Nachweisreaktion auf die Anwesenheit der nachzuweisenden Substanz zu bewirken. Das gemischte Pulver kann auch zur Erleichterung der Anwendung granuliert oder zu Tabletten verarbeitet werden.

Eine andere Ausführungsform der neuen Testsubstanz besteht in der Verarbeitung des Adduktes in ein oder auf ein Trägermaterial. Dieses kann durch Mischen des Adduktes mit den anderen Bestandteilen und Auflösen der Mischung in einem geeigneten nichtwässrigen Lösungsmittelsystem erfolgen. Ein absorbierender Trägerstoff kann dann in die entstandene Lösung getaucht und anschliessend getrocknet werden. Falls die Testsubstanz derartig ist, dass sich die Bestandteile in einem gewöhnlichen Lösungsmittel nicht lösen, dann kann eine aufeinanderfolgende Imprägnierungsmethode angewendet werden. Diese Arbeitsweise besteht gewöhnlich in der Anwendung einer Reihe von Lösungen, von denen jede bestimmte Bestandteile der Testsubstanz enthält.

Der Trägerstoff wird im allgemeinen nacheinander in die Lösungen getaucht und zwischen den einzelnen Imprägnierungen zur Entfernung des Lösungsmittels getrocknet. Das Lösungsmittel für die Testsubstanz die das Addukt enthält, sollte vor allem wasserfrei sein, so dass bei Berührung des Adduktes mit dem Lösungsmittel die Hydrolyse und nachfolgende Bildung der Mineralsäure nicht stattfindet. Geeignete Lösungsmittel sind beispielsweise, Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff, Dimethylsulfoxyd, wasserfreie Alkohole und Aceton. Da die Löslichkeit der Addukte variiert, variiert in gleicher Weise die Anwendbarkeit der oben erwähnten Lösungsmittel und jedes Lösungsmittel für das Addukt muss insbesondere nach seinen individuellen physikalischen und chemischen Eigenschaften ausgewählt werden.

Eine andere Ausführungsform der vorliegenden erfindungsgemässen Testsubstanz in Verbindung mit einem Trägerstoff besteht darin, einen Bereich eines saugfähigen Streifens mit dem Addukt und einen anderen Bereich davon mit den restlichen Bestandteilen der Testsubstanz zu tränken. Das Ende eines saugfähigen Streifens wird beispielsweise mit dem Addukt und ein nach innen anschliessender Bereich mit dem Rest der Testsubstanz getränkt. Wenn das imprägnierte Ende des Streifens in eine wässrige Flüssigkeit getaucht und dann wieder entfernt wird, kann das Addukt in diesem Teil des Streifens zu einer Mineralsäure hydrolysieren, welche zusammen mit der absorbierten Flüssigkeit in den angrenzenden Bereich fliesst, wo es mit dem Rest der Testsubstanz reagiert.

Wird die Testsubstanz in dieser Weise aufgebaut, dann kann . die zu -untersuchende Flüssigkeit vor der Reaktion der Testsubstanz angesäuert werden.

Zusätzlich zu den oben angeführten Bestandteilen der Testsubstanz, d. h. dem wirksamen Test-Reagenz System unter Einschluss des Adduktes, können andere Hilfsmittel verwendet werden, um die Reaktionsfähigkeit, das Aussehen und die Fähigkeit zur Formulierung und Herstellung der physikalischen Form der Testsubstanz zu verbessern. Die folgenden Beispiele betreffen bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung.

Beispiele 1-15
In den folgenden Beispielen 1-15 werden die Addukte der Tabelle 1 hergestellt und 25 Teile davon werden mit einem Teil p-Dimethylaminobenzaldehyd unter Ausbildung einer trockenen, pulverförmigen Mischung vereinigt. Etwa 0,5 g dieser Mischung wurden zu 2 ml einer 1 mg/ml wässrigen Lösung von Mesobilirubinogen* gegeben. In allen Beispielen bildete sich in der Lösung unmittelbar eine rosa Farbe.

Tabelle 1 Beispiel Fridel-Crafts- organische Lewis- Verhältnis der Verbindung
Verbindung Base zur Base
1 Bortrichlorid Pyridin 1:1
2 Bortrichlorid cr-Picolin 1:1
3 Bortrichlorid tS-Picolin 1:1
4 Bortrichlorid N,N-Dimethylformamid 1:1
5 Bortrichlorid N,N-Dimethylacetamid 1:1
6 Bortrichlorid sym.-Dimethylharnstoff 1:1
7 Bortrichlorid Benzamid 1:1
8 Bortrichlorid Succinimid 1:1
9 Bortrichlorid Dioxan 1:1 10 Bortrichlorid Tetrahydrofuran 1:1
Fridel-Crafts- organische Lewis- Verhältnis der Verbindung
Verbindung Base zur Base 11 Bortrichlorid Acetonitril 1:1 12 Zinn(IV)-chlorid Pyridin 1:2 13 Zinn(IV)-chlorid Morpholin 1:2 14 Zinn(IV)-chlorid Dioxan 1:2 15 Zinn(IV)-chlorid Tetrahydrofuran 1:

:2 *Mesobilirubinogen und Urobilinogen sind dafür bekannt, dass sie mit dem oben beschriebenen Testsystem in gleicher Weise reagieren. Beispiele 1-15 sind daher sowohl auf einen Urobilinogen- als auch auf einen Mesobilirubinogen-Test anwendbar.

Beispiel 16
Die Lösungen wurden wie folgt hergestellt:
1. Lösung: Natriumdihydrogenphosphat (NaH2PO.H2O) 5,0 g Wasser 150,0 ml
2. Lösung: Zinn(IV)-chlorid-Dioxan-Addukt* 5,0 g Dimethylsulfoxyd 17,5 ml Chloroform 2,5 ml p-Dimethylaminobenzaldehyd 100,0 mg * Hergestellt durch Vermischen von ungefähr einem Mol Dioxan mit zwei Mol Zinn(IV)-chlorid.

Filterpapier der Firma Eaton und Dikeman No. 641 wurde dann in die 1. Lösung getaucht, daraus entfernt, abtropfen gelassen und 10 bis 11 Minuten bei 100 0C getrocknet. Das getrocknete Papier wurde dann in die 2.

Lösung getaucht und wiederum 10 bis 12 Minuten lang bei 100 0C getrocknet. Das getränkte Papier wurde dann in kleine Rechtecke geschnitten, die an die Enden von Streifen von biegsamem, durchsichtigem Polystyrolfilm von zirka 0,5 x 8 cm befestigt wurden.

Das so hergestellten Testsystem wurde in einen Urin, der 5 mg0/o Urobilinogen enthielt, getaucht und dann entfernt. Das imprägnierte Filterpapier entwickelte unmittelbar eine rosa Farbe.

Beispiel 17
Wie in Beispiel 16 wurde ein Addukt aus Zinn (IV)-chlorid und Dioxan hergestellt und 100 g davon wurden in 10 ml einer 0,1 0/o (Gew./Vol.) Lösung von Tetrabromphenolblau in Aethylalkohol gelöst. Die Enden von Filtrierpapierstreifen wurden in diese Lösung getaucht, wieder daraus entfernt, abtropfen gelassen und bei Zimmertemperatur getrocknet. Die getrockneten, imprägnierten Teile der Filtrierpapierstreifen hatten eine rötlich-lederfarbene Farbe. Die Streifen wurden dann getrennt in wässrige Lösungen von Albumin mit Konzentrationen, die zwischen 0 und 1000 mg-0/o aufwiesen, getaucht und unmittelbar darauf daraus entfernt.

Der Streifen, der in Wasser, das kein Albumin enthielt, getaucht worden war, zeigte eine geringfügige grüne Farbe, während der Streifen, der in die 1000 mg- /o Albumin-Lösung getaucht worden war, dunkelblau wurde. Die Streifen, die in 30, 100 bzw. 300 mg-0/o Lösungen von Albumin getaucht worden waren, zeigten Zwischenschattierungen von blau-grün, wobei die Streifen, die in die Albumin-Lösungen mit höherer Konzentration getaucht worden waren, mehr blau als grün wurden.

Beispiel 18
Beispiel 17 wurde wiederholt, wobei anstelle des Aethylalkohols Dimethylsulfoxyd als Lösungsmittel für das Test-Reagenz-System verwendet wurde. Die Ergebnisse waren im wesentlichen gleich, wie die in Beispiel 17, ausser dass der Farbwechsel bei Zusammenbringen mit Protein (Albumin) von gelb nach grün erfolgte.

Beispiel 19
Beispiel 17 wurde wiederholt, wobei als Lösungsmittel für das Test-Reagenz-System Aceton verwendet wurde. Die hergestellten Teststreifen waren weiss, und der Farbwechsel beim Zusammenbringen mit Albuminlösungen erfolgte von weiss über verschiedene Schattierungen von gelb-grün nach grün.

Beispiel 20
Die Enden von Filterpapierstreifen wurden in eine Lösung von 1 g Ferrammoniumsulfat, FeNH4(SO4)2 12H2O, und 1,5 g Magnesiumsulfat MgSO4, in 15 ml destilliertem Wasser getaucht, daraus entfernt und 10 Minuten lang bei 105 "C getrocknet. Die imprägnierten Enden der getrockneten Streifen wurden dann in eine 1 /o (Gew./Vol.) Lösung von Zinn(IV)-chlorid-Dioxan Addukt in Dimethylsulfoxyd getaucht. Das Addukt wurde wie in Beispiel 16 hergestellt. Die Streifen wurden wiederum 10 Minuten lang bei 105 "C getrocknet. Die Enden der getrockneten Streifen wurden getrennt in eine Reihe von wässrigen Lösungen, die 0, 15, 40 bzw.

100mg Natriumphenylpyruvat enthielten, getaucht. Je nach der Menge des in der Lösung vorhandenen Phenylpyruvats änderten die Streifen ihre Farbe von gelb in ein Gräulich-Grün, wobei der Streifen, der in die Lösung ohne Phenylpyruvat getaucht wurde, gelb blieb.

Claims

PATENTANSPRUCH 1

Trockene, reaktionsfähige Testsubstanz zur Ausführung von Analysen im sauren pH-Bereich, um Substanzen in wässrigen Flüssigkeiten nachzuweisen, dadurch gekennzeichnet, dass sie ein festes Addukt einer Friedel Crafts-Verbindung und einer organischen Lewis-Base in Mischung mit einer Nachweis substanz enthält, wobei das genannte Addukt die Fähigkeit aufweist, bei Berührung mit wässrigen Flüssigkeiten zu einer Mineralsäure zu hydrolysieren.

UNTERANSPRÜCHE 1. Testsubstanz nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass die Friedel-Crafts-Verbindung des Addukts Zinn(IV)-chlorid, Bortrichlorid, Aluminiumchlorid, Bortrifluorid, Eisen(III)-chlorid oder Zinkchlorid ist.

2. Testsubstanz nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass die organische Lewis-Base des Addukts ein Amin, Amid, Imid, Harnstoff, cyclischer Aether oder ein Nitril ist.

3. Testsubstanz nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass die Lewis-Base des Addukts Pyridin, orPicolin, B-Picolin, y-Picolin, N,N-Dimethylformamid, N,N-Dimethylacetamid, sym.-Dimethylharnstoff, Benzamid, Succinimid, Dioxan, Tetrahydrofuran, Acetonitril oder Morpholin ist.

4. Testsubstanz nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass sie zusätzlich einen Träger enthält.

5. Testsubstanz nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass sie zusätzlich ein neutrales oder schwachsaures Salz zur Erhöhung der Pufferkapazität der gebildeten Mineralsäure enthält.

PATENTANSPRUCH II Verwendung der Testsubstanz gemäss Patentanspruch I in einem Testsystem zum Nachweis von Substanzen, die mindestens eine Aminogruppe aufweisen in wässrigen Flüssigkeiten.