CH523322A - Utilisation de variants bactériens pour la préparation de réactifs pour sérodiagnostics - Google Patents

Utilisation de variants bactériens pour la préparation de réactifs pour sérodiagnostics

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CH523322A
CH523322A CH1575471A CH1575471A CH523322A CH 523322 A CH523322 A CH 523322A CH 1575471 A CH1575471 A CH 1575471A CH 1575471 A CH1575471 A CH 1575471A CH 523322 A CH523322 A CH 523322A
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CH
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variants
mutants
bacterial
polysaccharide
reagents
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CH1575471A
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Thuillier Yvonne
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Rolland Sa A
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/01Preparation of mutants without inserting foreign genetic material therein; Screening processes therefor

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Description


      Utilisation    de variants bactériens pour la     préparation    de     réactifs    pour     sérodiagnostics            Il        est        connu,    selon le brevet No 523321 (demande  No 4239/70) de préparer, à     partir    de     bactéries        suscepti-          bles    d'être pathogènes, des variants bactériens stables       reproductibles    par un cycle évolutif hétéromorphe.

   Le       procédé    de préparation desdits variants     bactériens,    dé  crit     dans    le brevet précité, est     caractérisé    en     ce    que l'on  soumet en milieu     salin    aqueux, lors de la     scissiparité,          lesdites        bactéries    à l'action d'un agent inducteur apte à  éliminer la     paroi    bactérienne par voie chimique, bio  chimique ou physicochimique,

   et en ce que les variants       ainsi    obtenus     sont        cultivés    et repiqués à une température       comprise    entre 22 et 370 C sur un milieu nutritif liquide  apte à favoriser la multiplication dudit variant et     osmo-          tiquement    équilibré par des éléments régularisant la  perméabilité     cellulaire    dudit variant, la pression osmoti  que -de l'ensemble desdits éléments régularisateurs étant  comprise entre 20 et 30 atm.  



  En plus du procédé d'obtention des variants     bac-          tériens,    le brevet précité a également pour objet l'utili  sation de ces variants     pour    la préparation de vaccins  stables.  



  Du fait de la facilité de mise en ouvre de ce procédé  d'obtention de variants, on a obtenu des souches pures  de variants     bactériens    doués de pouvoir pathogène et  des extraits antigéniques, exempts de cellules.  



  L'invention a pour objet l'utilisation des variants  bactériens     ainsi    obtenus, pour la préparation de réactifs  pour     sérodiagnostics    des germes infectieux des maladies  atypiques. Cette     utilisation    est     caractérisée    en ce qu'on  prépare par voie chimique un extrait antigénique     des-          dits    variants et qu'on isole de cet exrait un polysac  charide responsable     des    réactions sérologiques.  



  L'extraction des principes antigéniques est effectuée  en faisant agir sur une suspension de germes lavés pré  alablement une solution aqueuse d'acide trichloracétique  demi-normale, à un pH de 1 à 2 à une température de       0o    C.    L'extrait antigénique se présente sous la forme d'une  solution opalescente absolument non dialysable. Des  séché, il est     thermostable    ; par contre, il est     thermo-          labile    en     milieux        aqueux.     



       Injecté    à     l'animal,    il provoque l'apparition d'anti  corps     -spécifiques    ; ainsi     ses    fortes dilutions sont préci  pitées spécifiquement par un antisérum correspondant  antigénique. Enfin, il se     comporte        comme    une endo  toxine active;     injecté    à     l'animal,    il déclenche en effet  l'apparition     d'antitoxine.     



  Ce     composé        acidosoluble    antigénique isolé apparaît  fortement     polydispersé    en solution     aqueuse.     



  Très soluble dans l'eau, sous l'action de la chaleur  ou d'une     diastase,        il        se    clive; la fraction polysaccharide  se     détache    du reste du complexe antigénique, rompant  ainsi un     lien    moins     fort    que     celui    qui emprisonnait les  antigènes. du corps bactérien.  



  On peut     ainsi    isoler les constituants de l'extrait anti  génique     des        variants    de     Proteus    : un     polysaccharide    spé  cifique des     variants    obtenus, qui est responsable des ré  actions sérologiques typiques de la souche. Ce poly  saccharide libéré peut être précipité par adjonction de       plusieurs    volumes d'alcool ou d'acétone.  



  Le     polysaccharide        donne    à l'élément protéique     anti-          génique    sa spécificité et     est    responsable des réactions  sérologiques typiques de la souche.  



  On     utilise        ces        variants    stables obtenus par le pro  cédé     selon   <B>le</B> brevet No 523321 (demande No 4239/70)  pour la fabrication de réactifs pour     sérodiagnostics    et  identification des     agents    infectieux de maladies aty  piques.  



       Ces        réactifs        sérologiques    permettent la     recherche     d'un traitement     spécifique        (sensibilité    aux     antibiotiques     ou à     d'autres    thérapeutiques).  



  Ils ont aussi un     intérêt        certain    dans la recherche de  l'étiologie des     mycoplasmes    isolés en pathologie infec  tieuse.           Il        est    évident que la mosaïque     d'antigènes    telle  qu'elle existe dans la     cellule    des variants stables intacts  contient des     substances    autres que les     composants    phos  pholipides,     polysaccharides    et     protéines,

      mais on peut  penser que seuls les composants     polysaccharides    et pro  téiques sont les éléments     essentiels    de la manifestation  antigénique.

Claims (1)

  1. REVENDICATION Utilisation de variants bactériens pour la prépara tion de réactifs pour sérodiagnostics, lesdits variants étant obtenus, à partir de bactéries susceptibles d'être pathogènes,.
    en soumettant en milieux salins aqueux, lors de la scissiparité, lesdites bactéries à l'action d'un agent inducteur apte à éliminer la paroi bactérienne par voie chimique, biochimique ou physicochimique, les variants ainsi obtenus étant cultivés et repiqués à une température comprisse entre 22 et 370 C sur un milieu nutritif liquide,
    caractérisée en ce qu'on prépare par voie chimique un extrait antigénique desdits variants. et qu'on isole de cet extrait un polysaccharide responsa ble des réactions sérologiques. SOUS-REVENDICATION Utilisation selon la revendication, caractérisée en ce qu'on précipite ledit polysaccharide à l'alcool ou à l'acétone.
CH1575471A 1969-03-25 1970-03-20 Utilisation de variants bactériens pour la préparation de réactifs pour sérodiagnostics CH523322A (fr)

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GB05672/69A GB1298668A (en) 1969-03-25 1969-03-25 Process for obtaining and preserving stable bacterial variants
CH423970A CH523321A (fr) 1969-03-25 1970-03-20 Procédé d'obtention et de conservation de variants bactériens stables

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CH523322A true CH523322A (fr) 1972-05-31

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