Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung eines pharmazeutisch annehmbaren Metallsalzes der 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinsäure der Formel in welcher M(Glyc.)x(OR) > x
M ein Metall,
Glyc. den 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinatrest,
OR em Alkoxyrest, m die Wertigkeit des Metalles und x eine positive ganze Zahl, die kleiner oder gleich wie m ist, darstellt, welches dadurch gekennzeichnet ist, dass man 3-Acetyl-18ss- glycyrrhetinsäure mit einem entsprechenden Alkoholat des Metalles umsetzt.
Es wurde gefunden, dass 3 -Acetyl-18,3 -glycyahetinsaure und ihre Salze mit gewissen Metallen optimale Heilwirkung und entzündungswidrige Eigenschaften aufweisen, welche sehr wertvoll sind in der Behandlung von Störungen der Verdauungswege, wie z. B. Magen- und Zwölffingerdarmge- schwiire, Gastritis und Gastroduodenitis, insbesondere, wenn derartige Stdrungen durch Medikamente hervorgerufen wurden.
Diese Substanzen kÏnnen ferner in der Therapie von Pharyngitis, Pharyngotracheitis, Geschwüren der Cornea, Colitis (insbesondere ulcerative Colitis), Dermatis, Dormatosia, Decubitus-Geschwiiren, latenten Geschwüren, Krampf adergeschwuren, Rhagaden, Haemorrhoiden und Erosionen des Epithels der weiblichen Geschlechtswege verwendet werden
Die neuen Metallsalze der 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinsäure, welche hier beschrieben werden, besitzen nicht nur die heilende geschwurwidrigen und entzundungswidrigen Eigenschaften derfreien Sauce, sondern auch die pharmakologischen Eigenschaften der betreffenden Metalle, insbesondere die Antisäurewirkung.
Die Erfindung bezieht sich insbesondere auf die Herstellung der Metallsalze von 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinsäure mit Wismuth, Alkalimetallen, Erdalkalimetallen und Metallen der Gruppe III des Periodischen Systems.
Die erhaltenen Verbindungen lassen sich auf jibliche Weise zu pharmazeutischen Priparaten verarbeften, welche neben der aktiven Verbindung im allgemeinen einen Verdiinner oder Trigger fir den aktiven Bestandteil und gegebenenfalls zusitzlich andere Arzneimittel enthalten. Nützliche Excipienten sind z. B. Stärke, Talk, Natriumalginat und Magnesiumstearat. Die Priparate können in Form von Tabletten oder Suppositorien, wie auch als Pulver oder Salben verabreicht werden. Die pharmazeutischen Präparate können ferner Mittel zum Binden freier Siren enthalten, wie Aluminiumhydroxyd, Glycin und Aluminiumsilikat.
Die bevorzugten Metallsalze der 3-Acetyl-18P-glycyrrhe- tinsäure sind jene mit Calium, Magnesium, Calcium, Aluminium und Wismuth.
Die neuen Salze der 3-Acetyl-18P-glycyrrhetinsiure werden durch Umsetzung von 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinsäure mit einem entsprechenden Alkoholat des betreffenden Metalles hergestellt. Vorzugsweise werden niedere Alkoholate verwendet, d. h. Alkoholate, in welchen die Alkoxygruppe oder -gruppen 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweisen. Die Versalzungsreaktion kann bei Zimmertemperatur oder bei er höhter Temperatur auf übliche Weise durchgeiuhrt werden, vorzugsweise in Gegenwart von organischen Lösungsmitteln.
Als organische Ldsungsmittel können Alkohole, anther, Ketone, chlorierte Lösungsmittel (Methylenchlorid, Chloroform), Athylacetat, usw. verwendet werden.
Wenn das Metall eine grössere Valenz als 1 besitzt, ist es möglich ein neutrales Salz oder ein basisches Salz zu erhalten, je nach dem Verhiltnis der Reaktionsteilnehmer.
Die erhaltenen basischen Salze können durch die Formel M(Glyc.X (OR)m-x dargestellt werden, in welcher M das Metall, m die Valenz des Metalles, x eine positive ganze Zahl, die kleiner als m in, R Wasserstoff oder eine Alkylgruppe, welche der Alkoxygruppe des zur Herstellung des Salzes verwendeten Alkoholates entspricht, und Glyc. eine 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinatgruppe bedeuten. Die basischen Salze, welche Alkoxygruppen enthalten, können erhalten werden, indem man die Versalzung in Abwesenheit von Wasser durchführt. Falls erforderlich, können basische Saize, welche Hydroxylgruppen enthalten (d. h.
R = H in der obigen Formel) umgewandelt werden, indem man die Salze mit der stöchiometrisch erforderlichen Menge Wasser in Berührung bringt. Anderseits können basische Salze, welche Hydroxylgruppen enthalten, erhalten werden, indem man die Versalzung in Gegenwart von Wasser durchftihrt.
So ist es beispielsweise mit Aluminium möglich, Aluminium-mono-, -di- und -tri-3-acetyl-18P -glycyrrhethinat zu erhalten, wobei im Fall der Mono- und Disalze die verbleibenden Valenzen des Aluminiums durch Hydroxyl- und/oder Alkoxygruppen gesdttigt sein können.
In vielen Fallen ist die Löslichkeit dieser neuen Salze in organischen Lösungsmitteln sehr hoch, während die Löslich- keit in Wasser im allgemeinen sehr gering ist.
Als allgemeine Regel steigt die Lislichkeit der Salze von 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinsäure mit mehrwertigen Metallen in organischen Lösungsmitteln von den basischen Salzen zu den neutralen S aizen: Aluminium -tri-3 -acetyl -18ss -glycyrrhetinat ist viel besser l5slich in Chloroform als Aluminium-mono-3 acetyl-1 8,3 -glycyrrhetinat.
Pharmakologische D aten
In den folgenden Versuchen wird auf die folgenden Veriffentlichungen mit Hilfe der Nummern Bezug genommen: (1) Litchfield J. T. und Wilcoxon F. J. Pharmacol. exp.
Ther. 96, 99, 1949.
(2) Shay H., Kamarov S. A., Fels S. S., Moranzo D., Gruenstein M. und Spilet M.; Gastroenterology 5, 43, 1945.
(3) Keyrilainen T. 0. und Passenen M. K.; Acta Pharmacol. et toxicol. 13, 22, 1957.
(4) Winter C. A., Risley M. A. und Nuss G. W.; Proc.
Exp. Biol. Med. 3, 544, 1962.
(5) Van Arman C. G., Beguny A. J., Miller L. M. und Pless H. H.; J. Pharm. Exp. Ther., 150, 328, 1965.
(6) Cahen R., Pessonier A.; C. R. Soc. Biol. 157, 477, 1963.
(7) Bonfils S., Lefesghe S., Ressi C. und Lambling A.; C. R. Soc. Bil. 151, 1149, 1957.
Toxizitit
Diese wurde an minnlichen Ratten des Stammes Sprague Dawley von 220 bis 290 g Gewicht durch orale und interaperitoneale Verabreichung untersucht, wobei die Beobachtung 10 Tage dauerte.
Die LD-50 wurde nach der Methode von Litchfield und Wilcoxen (1) bestimmt.
Die Tabellen 1 und 2 zeigen die Werte der LD-50, welche bei Ratten nach oraler bzw. intraperitonealer Verabreichung erhalten wurden.
Tabelle 1 Produkt behandelte LD-50
Tiere mg/kg 3-Acetyl-18,3 -glycyrrhetinsiure 20 > 3300 Aluminium-tri-3 -acetyl-18,3 glycyrrhetinat 20 > 3300
Tabelle 2 Produkt behandelte LD-50
Tiere mg/kg 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinsäure 40 > 3300 Aluminium-tri-3 -acetyl-18,3 glycyrrhetinat 40 > 3300 Geschwiirhemmende Wlrksamkeit
Diese wurde untersucht durch Vergleich experimenteller Geschwiire, welche durch Ligatur des Pylorus nach Shay (2) erzeugt worden waren.
Die Ligatur des Pylorus wurde unter leichter Äthernar- kose an Ratten durchgeftihrt, welche wahrend 48 Stunden in Einzelkäfigen mit Wasser nach Belieben, ohne Nahrung gehalten worden waren. Die Ratten wurden sodann wieder in ihre KBfige verbracht und ohne Nahrung und ohne Wasser gehalten und nach 17 Stunden getötet. Der Magen wurde entlang des unteren Bogens (bend) geöffnet und untersucht, um die Bildung von Geschwiiren darin zu bestimmen nach der folgenden Standard-Klassifizierung, welche von Keyrilainon und Paasonen (3) vorgeschlagen wurde.
Klasse I kleine Geschwüre 0,2 mm = Wert 1.
Klasse II mittlere Geschwure 2 bis 5 mm = Wert 5.
Klasse III grosse Geschwüre 5 bis 10 mm = Wert 10.
Klasse IV sehr grosse Geschwiire > 10 mm = Wert 20.
Perforation Wert 20.
Daraus wurde sodann berechnet: Geschwiir-Index = Summe der Werte aller Klassen
Anzahl Tiere sowie die prozentuale Variation des Geschwtir-Indexes der behandelten Ratten in bezug auf die Kontrolltiere und die Anzahl MBgen, welche von der Geschwürbildung geschützt wurden, d. h. solchen, welche nicht mehr als zwei kleine Ge schwtire aufwiesen.
Die Verabreichung der Wirkstoffe erfolgte durch eine Magensonde und wurde dreimal wiederholt, nämlich 48 und 24 Stunden vor der Ligatur des Pylorus, sowie unmittelbar nach der Operation.
Jede der geprüften Substanzen, suspendiert in Gummiarabicum, wurde an Gruppen von 10 bis 13 Ratten verabreicht.
Die erhaltenen Resultate sind in Tabelle 3 zusammengestellt.
Tabelle 3 Behandlung Dosis/kg Anzahl Anzahl Geschwtire fir die verschiedenen Klassen (2) Ge- Anderung Anzahl (1) Ratten I II III IV V schwtir- des Ge- Mlgen ohne index schwtir- Geschwiir indexes % Kontrollen (10Wowäss- riger Gummiarabicum) 20 ml 13 138 43 19 23 1 78,6 - (138) (215) (190) (460) (20) 3 -Acetyl-1 8,3 - glycyrrhetinsäure 436 mg 10 37 16 3 1 0 16,7 -78 30 (37) (80) (30) (20) Aluminium-tri-3 -acetyl 18,3-glycyrrhetinat 436 mg 13 72 9 0 0 0 9 -88 23 (72) (45) Bemerkungen (1) Dosis dreimal oral verabreicht: 48 und 24 Stunden Vor der Ligatur des Pylorus und unmittelbar nach der Operation.
(2) In Klammern ist die Anzahl der Geschwüre multipliziert mit dem Wert der verschiedenen Klassen gemäss dem beschriebenen Standard angegeben.
Wirksamkeit fir die Heilung von Magengeschwtiren
Die Methode nach Cahen und Pessonier (6) wurde verwendet.
Miinnliche Ratten mit einem Gewicht zwischen 180 und 230 g, welche während 16 Stunden ohne Futter waren, wurden während 24 Stunden nach der Methode von Bonfils et al. (7) im Käfig gehalten (subjected to restraint).
Die Substanzen wurden oral verabreicht, wobei die festgesetzten Dosen in zweimal im Laufe des Tages verabreicht wurden: Die Hälfte am Morgen und die andere Hälfte am Abend.
Ratten, welchen der Träger der untersuchten Substanzen, welcher aus Gummiarabicum in einer Konzentration von 10% in Wasser bestand, verabreicht wurde, wurden als Kontrolltiere ghaften.
Die Behandlung wurde wlihrend 1 bis 8 Tagen fortgesetzt.
Die Tiere wurden sodann in Gruppen von acht Stück durch Enthauptung 24 Stunden bzw. 3, 6 und 9 Tage nach Aufhören der Immobilisierung bzw. 12 Stunden nach der letzten Verabreichung des Heilmittels getötet.
Die Mägen wurden von den unmittelbar nach der Immobilisationszeit getöteten Tieren entfernt (Untersuchung der ulcerogenen Wirksamkeit dieser Zeit) oder zu den oben angegebenen Zeiten nach Aufhören der Gefangenschaft, wurden gewaschen mit physiologischer Kochsalzlösung und die Schleimhaut sodann untersucht.
Die Anzahl ungeheilter Geschwtire (U), sowie die Anzahl geheilter Geschwtire oder in Heilung befindlicher Geschwiire (UH) wurde festgestellt.
Ein Geschwtirindex wurde sodann berechnet, welcher aus dem Verhältnis zwischen der Anzahl der in den untersuchten Migen vorhandenen Geschwtiren und der Anzahl getöteter Tiere nach jeder der oben angegebenen Zeiten basierte.
Tabelle 4
Wirkung von 3 -Acetyl-18 -glycyrrhetinsäure und von Aluminium-tri-3 -acetyl-18 -glycyrrhetinat auf die spontane Regression von durch Immobilisierung induzierten Geschwtiren.
Behandlung Orale Anzahl Geschwürindex am Ende der lmmobilisierung nach der folgenden Anzahl Tage (2)
Dosen Tiere 0 1 3 6 9 mg/kg (1) U UH U UH U UH U UH U UH Kontrollen (Gummiarabicum in Konzentration von 10% in Wasser) 2 ml/100 g 8 6,5 0 1,7 0,3 1,7 0,5 0,2 1,1 0 1,6 3 -Acetyl-1 8 -glycyrrhetin - sabre 436 8 6,8 0 0,6 4,2 0,2 1,2 0 1,6 0 1,7 Aluminium-tri-3 -acetyl18-glycyrrhetinat 436 8 6,0 0 0,1 3,0 0 1,6 0 1,5 0 2,3 U = nicht geheilte Geschwtire UH = geheilte Geschwtire (1) Dosis in zwei Portionen verabreicht: Die Hälfte am Morgen und die andere Hälfte am Abend.
(2) Anzahl vorhandener Geschwtire geteilt durch die Anzahl getöteter Tiere.
Entxilndungswidrige Wirksamkeit
Die Untersuchung der entziindungswidrigen Wirksamkeit wurde an Ratten durchgefihrt, indem man das Oedem an der Pfote testete, welches sowohl durch Carrageenin gemass Winter et al. (4), sowie durch Bierhefe, gemass Van Arman et al. (5) induziert worden war. Die untersuchten Substanzen wurden intraperitoneal verabreicht.
Die erhaltenen Resultate sind in den folgenden Tabellen zusammengestellt.
Inhibition von durch Carrageenin hervorgerufenen Ödemen Behandlung Dosen Anzahl modem Inhibition des Behandlung mg/kg (1) Tiere (ml + E.S.) (2) modems % (3) Kontrollen - 8 0,31 + 0,007 - 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetin- saure 33 8 0,17 + 0,001 45 P < 0,001
109 8 0,04+0,003 87 P < 0,001 Kontrolle - 8 0,28 + 0,007 - Aluminium-tri-3 -acetyl-18 ,3-glycyrrhetinat 33 8 0,17 + 0,007 39 P > 0,001
109 8 0,14 + 0,01 50 P > 0,001 (1) Dosis intraperitoneal zweimal verabreicht: 30 Minuten vor und eine Stunde nach der subplantaren Injektion von Carrageen in (0,1 ml einer 1%igen Suspension).
(2) Durchschnittliches Volumen des modems, gemessen 3 Stunden nach der Injektion des Carrageenins, der Zeit, in welcher das maximale Volumen des modems in den Kontrolltieren auftrat.
(3) Bedeutung, abgeleitet von Student's t , berechnet mit Bezug auf den mit den Kontrolltieren erhaltenen Durchschnitt.
Inhibition von durch Bierhefe hervorgerufenen Ödemen Behandlung Dosen Anzahl Odem Inhibition des Behandlung mg/kg (1) Tiere (ml + E.S.) (2) Modems % (3) Kontrollen - 8 0,31 + 0,003 - 3-Acetyl-18,3-glycyrrhetin- 33 8 0,16 1 0,01 48 P < 0,001 sabre 109 8 0,07 1 0,003 77 P < 0,001 Kontrollen - 8 0,29 + 0,003 - Aluminium-tri-3 -acetyl-18 ,3-glycyrrhetinat 33 8 0,13 t 0,003 55 P < 0,001
109 8 0,10 + 0,003 65 P < 0,001 (1) Dosis intraperitoneal 30 Minuten vor der subplanaren Injektion von Bierhefe (0,1 ml einer 2%igen Suspension) verabreicht.
(2) Durchschnittliches Volumen des Ödems, 1 Stunde nach der Injektion von Bierhefe gemessen, in welcher Zeit das maximale Volumen des modems in den Kontrolltieren auftrat.
(3) Bedeutung abgeleitet von Student' t berechnet mit Bezug auf den mit den Kontrolltieren erhaltenen Durchschnitt.
Die erfindungsgemasse Herstellung der Salze wird durch folgende Beispiele illustriert:
Beispiel 1
Herstellung von Aluminium-tri-3-acetyl-18ss-glycyrrhetinat
15,38 g 3-Acetyl-18/3-glycyrrhetinslure, gelds in 500 ml Chloroform, wurden zu einer LBsung von 2,04 g Aluminium- isopropylat in 50 ml Chloroform zugesetzt.
Nach einer Stunde wurde die Chloroformlösung zur Trockene verdampft, und Aluminium-tri-3 -acetyl-18-glycyr- rhetinat wurde als weisses Pulver mit einem Schmelzpunkt von 286 bis 2900C, aD20 = 126" + 2" (e = 1CHCl3)er- halten.
Beispiel 2
Herstellung von Aluminium-tri-3 -acetyl-glycyrrhetinat: 4,08 g Aluminiumisopropylat, gelöst in 50 ml Methylenchlorid, wurden zu 30,76 g 3-Acetyl-18ss-glycyrrhetinsäure, suspendiert in 200 ml Methylenchlorid, zugesetzt. Es wurde bei Zimmertemperatur bis zur vollstindigen Auflösung gerührt, dann auf etwa 50 ml eingedampft und in 200 ml Hexan eingegossen. D as Aluminium-tri-3-acetyl-18ss-glycyrrhetinat wird in Form eines amorphen, leichten Pulvers abfiltriert.
Beispiel 3
Herstellung von Magnesium-mono-methoxy-mono-3 -3 acetyl-l 8P -glycyrrhetinat
Eine Lösung von 0,48 g Magnesiumspänen in 100 ml Methanol wurde zu 103 g 3-Acetyl-18,3-glycyrrhetinsiiure in 500 ml Methanol zugesetzt.
Nach dem Erhitzen am Riickfluss während 30 Minuten wurde das Lösungsmittel zur Trockene abgedampft und man erhielt Magnesium-mono-methoxy-mono-3-acetyl-18ss-gly- cyrrhetinat als weisses Pulver mit einem Schmelzpunkt von 308 bis 313"C, aD20 = + 129" # 2" (c = 1 CHCl3).
Beispiel 4
Herstellung von Magnesium-mono-hydroxy-mono-3 acetyl-18ss-glycyrrhetinat
Eine Lösung von 0,48 g Magnesiumspänen in 100 ml Methanol wurde zu 103 g 3-Acetyl-18,3-glycyrrhetinsiure in 500 ml Methanol zugesetzt.
Nach dem Erhitzen am Rtickfluss während 30 Minuten wurden 100 ml Methanol, welche 4 ml Wasser enthielten, zugesetzt, und die Lösung wurde unter Rtickfluss wihrend
15 Minuten erhitzt; die Lisung wurde zur Trockene verdampft und Magnesium-monohydroxy-mono-3-acetyl-18ss- glycyrrhetinat in Form eines weissen Pulvers mit einem Schmelzpunkt von 320 bis 325 C (Zersetzung), erhalten, aD20 = + 129" +2" (c = 1 CHCl3).
PATENTANSPRUCH I
Verfahren zur Herstellung eines pharmazeutisch annehmbaren Metallsalzes der 3-Acetyl-18,3-glycyrrhetinsiure der Formel
M(Glyc.)x(OR)m-x in welcher
M ein Metall,
Glyc. den 3 -Acetyl-18B -glycyrrhetinatrest,
OR ein Alkoxyrest, m die Wertigkeit des Metalles und x eine positive ganze Zahl, die kleiner oder gleich wie m ist, darstellt, dadurch gekennzeichnet, dass man 3-Acetyl-18,3-glycyrrhe- tinsäure mit einem entsprechenden Alkoholat des Metalles umsetzt.
UNTERANSPRÜCHE
1. Verfahren nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass das Alkoholat ein niederes Alkoholat ist.
2. Verfahren nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass die Umsetzung in Gegenwart eines organischen Lösungsmittels erfolgt.
3. Verfahren nach Patentanspruch I oder Unteranspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass das Metall eine grössere Wertigkeit als 1 aufweist und ein Salz, das eine oder mehrere Alkoxygruppen im Molekol enthilt, erhalten wird durch Umsetzung des Alkoholates und der Siure in einem Aquivalent verhiltnis von tiber 1.
4. Verfahren nach Unteranspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass die Umsetzung unter wasserfreien Bedingungen erfolgt.
5. Verfahren nach Unteranspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass das erhaltene Produkt mit Wasser in Bertihrung gebrachtwird, um die Alkoxygruppen durch Hydroxylgruppen zu ersetzen.
6. Verfahren nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass die Umsetzung in Gegenwart von Wasser erfolgt, wobei die bei der Umsetzung gebildeten Alkoxygruppen ganz oder teilweise zu Hydroxygruppen hydrolisiert werden.
7. Verfahren nach Patentanspruch I, dadurch gekennzeichnet, dass das Metall Kalium, Magnesium, Calcium, Aluminium oder Wismuth ist.
8. Verfahren nach Patentanspruch I oder Unteranspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass das Metall Aluminium ist und x = 3.
9. Verfahren nach Patentanspruch I oder Unteranspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass das Metall Magnesium ist und x = 2.
10. Verfahren nach Patentanspruch-I oder einem der Unteransprüche 3 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass das Metall Magnesium ist und x = 2.
11. Verfahren nach Patentanspruch I oder einem der Un teranspriiche 3 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass das Metall Aluminium ist und x = 1.
12. Verfahren nach Patentanspruch I oder einem der Un teransprtiche 3 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass das Metall Magnesium ist und x = 1.
13. Verfahren nach Unteranspruch 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, dass das Metall Magnesium ist.
PATENTANSPRUCH II
Metallsalz der 3 -Acetyl-1 8,3 -glycyrrhetinsiure hergestellt nach dem Verfahren remiss Patentanspruch I.
UNTERANSPRÜCHE
14. Aluminium-tri-3-acetyl-18ss-glycyrrhetinat nach Patentanspruch II, hergestellt nach dem Verfahren remiss Un
The present invention relates to a process for the preparation of a pharmaceutically acceptable metal salt of 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinic acid of the formula in which M (Glyc.) X (OR)> x
M a metal,
Glyc. the 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinatrest,
OR em alkoxy radical, m the valence of the metal and x a positive integer which is less than or equal to m, which is characterized in that 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinic acid is reacted with a corresponding alcoholate of the metal.
It has been found that 3-acetyl-18,3-glycyahetic acid and its salts with certain metals have optimal healing properties and anti-inflammatory properties, which are very valuable in the treatment of disorders of the digestive tract, such as e.g. B. gastric and duodenal ulcers, gastritis and gastroduodenitis, especially if such disturbances were caused by drugs.
These substances can also be used in the therapy of pharyngitis, pharyngotracheitis, ulcers of the cornea, colitis (in particular ulcerative colitis), dermatoses, dormatosia, decubitus ulcers, latent ulcers, varicose veins, rhagades, hemorrhoids and erosions of the epithelium of the female sex canals
The new metal salts of 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinic acid, which are described here, not only have the healing anti-ulcer and anti-inflammatory properties of the free sauce, but also the pharmacological properties of the metals in question, especially the anti-acid effect.
The invention relates in particular to the preparation of the metal salts of 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinic acid with bismuth, alkali metals, alkaline earth metals and metals of group III of the periodic table.
The compounds obtained can be processed in the usual way to give pharmaceutical preparations which, in addition to the active compound, generally contain a thinner or trigger for the active ingredient and optionally also other medicaments. Useful excipients are e.g. B. starch, talc, sodium alginate and magnesium stearate. The preparations can be administered in the form of tablets or suppositories, as well as powders or ointments. The pharmaceutical preparations can also contain agents for binding free sirens, such as aluminum hydroxide, glycine and aluminum silicate.
The preferred metal salts of 3-acetyl-18P-glycyrrhe- thetic acid are those with potassium, magnesium, calcium, aluminum and bismuth.
The new salts of 3-acetyl-18P-glycyrrhetinsic acid are produced by reacting 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinic acid with a corresponding alcoholate of the metal in question. Preferably, lower alcoholates are used; H. Alcoholates in which the alkoxy group or groups have 1 to 4 carbon atoms. The salinization reaction can be carried out in the customary manner at room temperature or at elevated temperature, preferably in the presence of organic solvents.
Alcohols, ethers, ketones, chlorinated solvents (methylene chloride, chloroform), ethyl acetate, etc. can be used as organic solvents.
If the metal has a valence greater than 1, it is possible to obtain a neutral salt or a basic salt, depending on the proportions of the reactants.
The basic salts obtained can be represented by the formula M (Glyc.X (OR) mx, in which M the metal, m the valence of the metal, x a positive integer that is smaller than m in, R is hydrogen or an alkyl group, which corresponds to the alkoxy group of the alcoholate used for the preparation of the salt, and Glyc. denotes a 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinate group. The basic salts which contain alkoxy groups can be obtained by carrying out the salification in the absence of water. If necessary, basic salts which contain hydroxyl groups (ie
R = H in the above formula) can be converted by bringing the salts into contact with the stoichiometrically required amount of water. On the other hand, basic salts which contain hydroxyl groups can be obtained by carrying out the salification in the presence of water.
For example, with aluminum it is possible to obtain aluminum mono-, di- and tri-3-acetyl-18P -glycyrrhethinate, with the remaining valences of the aluminum in the case of the mono- and disalts through hydroxyl and / or alkoxy groups can be saturated.
In many cases the solubility of these new salts in organic solvents is very high, while the solubility in water is generally very low.
As a general rule, the solubility of the salts of 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinic acid with polyvalent metals in organic solvents increases from the basic salts to the neutral salts: aluminum -tri-3-acetyl-18ss -glycyrrhetinate is much more soluble in chloroform than Aluminum mono-3 acetyl-1 8,3 -glycyrrhetinate.
Pharmacological data
In the following experiments, the following publications will be referred to by number: (1) Litchfield J. T. and Wilcoxon F. J. Pharmacol. exp.
Ther. 96, 99, 1949.
(2) Shay H., Kamarov S. A., Fels S. S., Moranzo D., Gruenstein M. and Spilet M .; Gastroenterology 5, 43, 1945.
(3) Keyrilainen T. 0. and Passenen M. K .; Acta Pharmacol. et toxicol. 13, 22, 1957.
(4) Winter C.A., Risley M.A., and Nuss G. W .; Proc.
Exp. Biol. Med. 3, 544, 1962.
(5) Van Arman C. G., Beguny A. J., Miller L. M., and Pless H. H .; J. Pharm. Exp. Ther., 150, 328, 1965.
(6) Cahen R., Pessonier A .; C. R. Soc. Biol. 157, 477, 1963.
(7) Bonfils S., Lefesghe S., Ressi C., and Lambling A .; C. R. Soc. Bil. 151, 1149, 1957.
Toxicity
This was examined in male rats of the Sprague Dawley strain of 220 to 290 g in weight by oral and interaperitoneal administration, the observation lasting 10 days.
The LD-50 was determined by the method of Litchfield and Wilcoxen (1).
Tables 1 and 2 show the values of the LD-50 which were obtained in rats after oral and intraperitoneal administration.
Table 1 Product treated LD-50
Animals mg / kg 3-acetyl-18,3-glycyrrhetinic acid 20> 3300 aluminum tri-3-acetyl-18.3 glycyrrhetinate 20> 3300
Table 2 Product treated LD-50
Animals mg / kg 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinic acid 40> 3300 aluminum tri-3 -acetyl-18.3 glycyrrhetinate 40> 3300 anti-inflammatory activity
This was investigated by comparing experimental ulcers produced by ligature of the pylorus according to Shay (2).
The ligation of the pylorus was carried out under light ether anesthesia on rats which had been kept for 48 hours in individual cages with water ad libitum and without food. The rats were then returned to their cages and kept without food or water and sacrificed after 17 hours. The stomach was opened along the lower arch (bend) and examined to determine the formation of ulcers therein according to the following standard classification suggested by Keyrilainon and Paasonen (3).
Class I small ulcers 0.2 mm = value 1.
Class II medium ulcers 2 to 5 mm = value 5.
Class III large ulcers 5 to 10 mm = value 10.
Class IV very large ulcers> 10 mm = value 20.
Perforation value 20.
From this the following was calculated: Geschwiir-Index = sum of the values of all classes
The number of animals and the percentage variation in the ulcer index of the treated rats in relation to the control animals and the number of MBgen protected from ulcer formation, i.e. H. those that had no more than two small swatters.
The active ingredients were administered through a nasogastric tube and repeated three times, namely 48 and 24 hours before the ligation of the pylorus and immediately after the operation.
Each of the tested substances suspended in gum arabic was administered to groups of 10 to 13 rats.
The results obtained are shown in Table 3.
Table 3 Treatment dose / kg Number of tumors for the different classes (2) Change in number (1) rats I II III IV V swerving genes without index swirling ulcer indexes% controls (10 aqueous gum arabic) 20 ml 13 138 43 19 23 1 78.6 - (138) (215) (190) (460) (20) 3 -acetyl-1 8.3 - glycyrrhetinic acid 436 mg 10 37 16 3 1 0 16.7 -78 30 (37) (80) (30) (20) Aluminum tri-3 -acetyl 18,3-glycyrrhetinate 436 mg 13 72 9 0 0 0 9 -88 23 (72) (45) Comments (1) Dose administered orally three times : 48 and 24 hours before the pyloric ligature and immediately after the operation.
(2) The number of ulcers multiplied by the value of the various classes according to the standard described is given in brackets.
Efficacy for the healing of gastric ulcers
The method of Cahen and Pessonier (6) was used.
Male rats weighing between 180 and 230 g, which were without food for 16 hours, were given the method of Bonfils et al. For 24 hours. (7) kept in a cage (subjected to restraint).
The substances were administered orally with the fixed doses being administered twice during the day: half in the morning and half in the evening.
Rats to which the vehicle of the examined substances, which consisted of gum arabic at a concentration of 10% in water, was administered were given as control animals.
Treatment was continued for 1 to 8 days.
The animals were then sacrificed in groups of eight by decapitation 24 hours, 3, 6, and 9 days after immobilization ceased and 12 hours after the last drug administration, respectively.
The stomachs were removed from the animals killed immediately after the immobilization time (investigation of the ulcerogenic effectiveness of this time) or at the times indicated above after the captivity had ceased, were washed with physiological saline solution and the mucous membrane was then examined.
The number of unhealed ulcers (U) and the number of healed or healing ulcers (UH) were determined.
An ulcer index was then calculated based on the ratio between the number of ulcers present in the pigs examined and the number of animals killed after each of the times given above.
Table 4
Effect of 3-acetyl-18 -glycyrrhetinic acid and of aluminum tri-3-acetyl-18 -glycyrrhetinate on the spontaneous regression of ulcers induced by immobilization.
Treatment Oral number of ulcer index at the end of immobilization after the following number of days (2)
Doses animals 0 1 3 6 9 mg / kg (1) U UH U UH U UH U UH U UH controls (gum arabic in a concentration of 10% in water) 2 ml / 100 g 8 6.5 0 1.7 0.3 1.7 0.5 0.2 1.1 0 1.6 3 -Acetyl-1 8 -glycyrrhetine - saber 436 8 6.8 0 0.6 4.2 0.2 1.2 0 1.6 0 1 , 7 aluminum tri-3 -acetyl18-glycyrrhetinate 436 8 6.0 0 0.1 3.0 0 1.6 0 1.5 0 2.3 U = unhealed ulcers UH = healed ulcers (1) dose in two Servings given: Half in the morning and the other half in the evening.
(2) Number of existing siblings divided by the number of animals killed.
Effectiveness against de-growth
The anti-inflammatory activity was investigated on rats by testing the edema on the paw, which was caused by carrageenin according to Winter et al. (4), as well as brewer's yeast, according to Van Arman et al. (5) had been induced. The substances examined were administered intraperitoneally.
The results obtained are summarized in the following tables.
Inhibition of edema caused by carrageenin treatment doses number modem inhibition of treatment mg / kg (1) animals (ml + ES) (2) modems% (3) controls - 8 0.31 + 0.007 - 3-acetyl-18ss-glycyrrhetin- acidic 33 8 0.17 + 0.001 45 P <0.001
109 8 0.04 + 0.003 87 P <0.001 control - 8 0.28 + 0.007 - aluminum tri-3 -acetyl-18, 3-glycyrrhetinate 33 8 0.17 + 0.007 39 P> 0.001
109 8 0.14 + 0.01 50 P> 0.001 (1) dose intraperitoneally administered twice: 30 minutes before and one hour after the subplantar injection of carrageenan in (0.1 ml of a 1% suspension).
(2) Average volume of the modem, measured 3 hours after the injection of the carrageenin, the time at which the maximum volume of the modem occurred in the control animals.
(3) Meaning derived from Student's t calculated with reference to the mean obtained with the control animals.
Inhibition of edema caused by brewer's yeast treatment doses number of edema inhibition of treatment mg / kg (1) animals (ml + ES) (2) modems% (3) controls - 8 0.31 + 0.003 - 3-acetyl-18.3- glycyrrhetin- 33 8 0.16 1 0.01 48 P <0.001 saber 109 8 0.07 1 0.003 77 P <0.001 controls - 8 0.29 + 0.003 - aluminum tri-3-acetyl-18, 3-glycyrrhetinate 33 8 0.13 t 0.003 55 P <0.001
109 8 0.10 + 0.003 65 P <0.001 (1) dose administered intraperitoneally 30 minutes prior to subplanar injection of brewer's yeast (0.1 ml of a 2% suspension).
(2) Average volume of edema, measured 1 hour after injection of brewer's yeast, at which time the maximum volume of the modem occurred in the control animals.
(3) Meaning derived from Student 't calculated with reference to the mean obtained with the control animals.
The preparation of the salts according to the invention is illustrated by the following examples:
example 1
Manufacture of aluminum tri-3-acetyl-18ss-glycyrrhetinate
15.38 g of 3-acetyl-18/3-glycyrrhetinic acid, in 500 ml of chloroform, were added to a solution of 2.04 g of aluminum isopropoxide in 50 ml of chloroform.
After one hour the chloroform solution was evaporated to dryness and aluminum tri-3-acetyl-18-glycyrrhetinate was produced as a white powder with a melting point of 286 to 2900C, aD20 = 126 "+ 2" (e = 1CHCl3) hold.
Example 2
Preparation of aluminum tri-3-acetyl-glycyrrhetinate: 4.08 g of aluminum isopropylate, dissolved in 50 ml of methylene chloride, were added to 30.76 g of 3-acetyl-18ss-glycyrrhetinic acid, suspended in 200 ml of methylene chloride. It was stirred at room temperature until completely dissolved, then evaporated to about 50 ml and poured into 200 ml of hexane. The aluminum tri-3-acetyl-18ss-glycyrrhetinate is filtered off in the form of an amorphous, light powder.
Example 3
Production of magnesium mono-methoxy-mono-3 -3 acetyl-l 8P -glycyrrhetinat
A solution of 0.48 g of magnesium turnings in 100 ml of methanol was added to 103 g of 3-acetyl-18,3-glycyrrhetinic acid in 500 ml of methanol.
After refluxing for 30 minutes, the solvent was evaporated to dryness and magnesium mono-methoxy-mono-3-acetyl-18ss-glycyrrhetinate was obtained as a white powder with a melting point of 308 to 313 ° C., aD20 = + 129 "# 2" (c = 1 CHCl3).
Example 4
Production of magnesium mono-hydroxy-mono-3 acetyl-18ss-glycyrrhetinate
A solution of 0.48 g of magnesium turnings in 100 ml of methanol was added to 103 g of 3-acetyl-18,3-glycyrrhetinic acid in 500 ml of methanol.
After refluxing for 30 minutes, 100 ml of methanol containing 4 ml of water was added and the solution was refluxed while under reflux
Heated for 15 minutes; the solution was evaporated to dryness and magnesium monohydroxy-mono-3-acetyl-18ss-glycyrrhetinate was obtained in the form of a white powder with a melting point of 320 to 325 C (decomposition), aD20 = + 129 "+2" (c = 1 CHCl3).
PATENT CLAIM I
Process for the preparation of a pharmaceutically acceptable metal salt of 3-acetyl-18,3-glycyrrhetinic acid of the formula
M (Glyc.) X (OR) m-x in which
M a metal,
Glyc. the 3 -acetyl-18B -glycyrrhetinatrest,
OR is an alkoxy radical, m is the valence of the metal and x is a positive whole number that is less than or equal to m, characterized in that 3-acetyl-18,3-glycyrrhetinic acid is reacted with a corresponding alcoholate of the metal.
SUBCLAIMS
1. The method according to claim I, characterized in that the alcoholate is a lower alcoholate.
2. The method according to claim I, characterized in that the reaction takes place in the presence of an organic solvent.
3. The method according to claim I or dependent claim 1 or 2, characterized in that the metal has a valence greater than 1 and a salt which contains one or more alkoxy groups in the molecule is obtained by reacting the alcoholate and the acid in an equivalent ratio from over 1.
4. The method according to dependent claim 3, characterized in that the reaction takes place under anhydrous conditions.
Process according to dependent claim 4, characterized in that the product obtained is brought into contact with water in order to replace the alkoxy groups with hydroxyl groups.
6. The method according to claim I, characterized in that the reaction takes place in the presence of water, the alkoxy groups formed during the reaction being wholly or partially hydrolyzed to hydroxyl groups.
7. The method according to claim I, characterized in that the metal is potassium, magnesium, calcium, aluminum or bismuth.
8. The method according to claim I or dependent claim 1 or 2, characterized in that the metal is aluminum and x = 3.
9. The method according to claim I or dependent claim 1 or 2, characterized in that the metal is magnesium and x = 2.
10. The method according to claim 1 or one of the dependent claims 3 to 6, characterized in that the metal is magnesium and x = 2.
11. The method according to claim I or one of the claims 3 to 6, characterized in that the metal is aluminum and x = 1.
12. The method according to claim I or one of the un teransprtiche 3 to 6, characterized in that the metal is magnesium and x = 1.
13. The method according to dependent claim 5 or 6, characterized in that the metal is magnesium.
PATENT CLAIM II
Metal salt of 3-acetyl-1 8,3 -glycyrrhetinsiure produced by the method remiss claim I.
SUBCLAIMS
14. Aluminum tri-3-acetyl-18ss-glycyrrhetinate according to claim II, produced by the method remiss Un