CH619929A5 - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- CH619929A5 CH619929A5 CH257876A CH257876A CH619929A5 CH 619929 A5 CH619929 A5 CH 619929A5 CH 257876 A CH257876 A CH 257876A CH 257876 A CH257876 A CH 257876A CH 619929 A5 CH619929 A5 CH 619929A5
- Authority
- CH
- Switzerland
- Prior art keywords
- methionine
- acyl
- ester
- acetyl
- mixture
- Prior art date
Links
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 claims description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 23
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 claims description 22
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 claims description 22
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 13
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 13
- XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N N-acetyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(C)=O XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 10
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 claims description 8
- 108010056079 Subtilisins Proteins 0.000 claims description 8
- 102000005158 Subtilisins Human genes 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 3
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- YVMKSJIMTATAAS-ZETCQYMHSA-N methyl (2s)-2-acetamido-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound COC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC YVMKSJIMTATAAS-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims 1
- UIHPNZDZCOEZEN-YFKPBYRVSA-N methyl (2s)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CCSC UIHPNZDZCOEZEN-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims 1
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- -1 L-amino acid esters Chemical class 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 7
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 6
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 6
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 5
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- YVMKSJIMTATAAS-UHFFFAOYSA-N methyl 2-acetamido-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound COC(=O)C(NC(C)=O)CCSC YVMKSJIMTATAAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- YVMKSJIMTATAAS-SSDOTTSWSA-N methyl (2r)-2-acetamido-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound COC(=O)[C@H](NC(C)=O)CCSC YVMKSJIMTATAAS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XUYPXLNMDZIRQH-UHFFFAOYSA-N N-acetylmethionine Chemical compound CSCCC(C(O)=O)NC(C)=O XUYPXLNMDZIRQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 2
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 2
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 2
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 2
- PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N N-formyl-L-methionine Chemical group CSCC[C@@H](C(O)=O)NC=O PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- RBAAEQRITQHPJM-LURJTMIESA-N N-propanoyl-L-methionine Chemical compound CCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCSC RBAAEQRITQHPJM-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 125000001501 propionyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 description 2
- RBAAEQRITQHPJM-UHFFFAOYSA-N 4-methylsulfanyl-2-(propanoylamino)butanoic acid Chemical compound CCC(=O)NC(C(O)=O)CCSC RBAAEQRITQHPJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000223600 Alternaria Species 0.000 description 1
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- PYUSHNKNPOHWEZ-UHFFFAOYSA-N N-Formyl-DL-methionine Chemical compound CSCCC(C(O)=O)NC=O PYUSHNKNPOHWEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059712 Pronase Proteins 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000187392 Streptomyces griseus Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- RRKTZKIUPZVBMF-IBTVXLQLSA-N brucine Chemical compound O([C@@H]1[C@H]([C@H]2C3)[C@@H]4N(C(C1)=O)C=1C=C(C(=CC=11)OC)OC)CC=C2CN2[C@@H]3[C@]41CC2 RRKTZKIUPZVBMF-IBTVXLQLSA-N 0.000 description 1
- RRKTZKIUPZVBMF-UHFFFAOYSA-N brucine Natural products C1=2C=C(OC)C(OC)=CC=2N(C(C2)=O)C3C(C4C5)C2OCC=C4CN2C5C31CC2 RRKTZKIUPZVBMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N cycloheximide Chemical compound C1[C@@H](C)C[C@H](C)C(=O)[C@@H]1[C@H](O)CC1CC(=O)NC(=O)C1 YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001402 nonanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000002801 octanoyl group Chemical group C(CCCCCCC)(=O)* 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- WLUAUPQSKOQURS-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl 2-amino-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound CSCCC(N)C(=O)OC(C)C WLUAUPQSKOQURS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
- Y10S435/839—Bacillus subtilis
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von 45 optisch reinem N-Acyl-L-methionin, aus dem durch chemische Entfernung der N-Acylgruppe L-Methionin erhalten werden kann.
Es ist bekannt, dass N-Acyl-D, L-methionin in seine optischen Antipoden getrennt werden kann, indem man es mit 50 bestimmten optisch aktiven Basen, z.B. Threo-2-amino-(p-methylsulfonylphenyl)-l,3-propandiol, Brucin, Fenchylamin oder Lysin, umsetzt und die diastereomeren Salze aufgrund ihrer verschiedenen physikalischen Eigenschaften, insbesondere ihrer verschiedenen Löslichkeiten, voneinander trennt ss (Vergleiche US-PS 3.845.110). Diese optisch aktiven Basen sind jedoch selbst nur schwierig erhältlich. Darüber hinaus ergeben die genannten Verfahren im allgemeinen keine guten Ausbeuten an N-Acyl-L-methionin mit hoher Reinheit.
Man hat auch schon Enzyme verwendet, die selektiv auf 60 bestimmte Aminosäurederivate einwirken und so optisch aktive Aminosäuren liefern. In der U.S.-PS 3.386.888 ist beispielsweise beschrieben, dass L-Methionin durch Einwirkung von Acylase auf N-Acyl-D, L-methionin erhalten werden kann. Diese enzymatische Methode befriedigt jedoch nicht 65 vollständig. Die verwendete Acylase ist teuer; die Reaktion läuft nur verhältnismässig langsam ab, und das Acylase-Enzym ist instabil.
Durch Einwirkung von Pancreasextrakt (welcher eine von Säugetieren stammende Serinproteinase enthält) auf D, L-Methioninisopropylester kann eine wenigstens teilweise Trennung von Methionin in die Antipoden erreicht werden. In diesem letztgenannten Zusammenhang wird auf Arbeiten von Brenner et al. in Helv. Chim. Acta, Bd. 32, Seiten 333—337
(1949) und Wretlind in Acta Physiol. Scan., Bd. 20, Seite 1
(1950) hingewiesen. Aus Säugetieren gewonnene Enzyme sind jedoch teuer, und aus den genannten Veröffentlichungen geht hervor, dass eine zufriedenstellende optische Reinheit nicht erreicht werden kann. Aus den Veröffentlichungen geht infolgedessen kein kommerziell brauchbares Verfahren zu Herstellung von L-Methionin hervor.
Es ist bekannt, dass mikrobiell gewonnene Serinproteinasen, z. B. Subtilisin Novo und Subtilisin Carlsberg, eine Esterase-Wirkung unterschiedlichen Ausmasses auf verschiedene N-Acyl-L-aminosäureester ausüben. In diesem Zusammenhang wird beispielsweise auf die Arbeiten von Barel et al. in The Jour, of Biolog. Chem., Bd. 243, Seiten 1344—1348 (1968) und Morihara et al. in Arch. Biochem. and Biophy., Bd. 129, Seiten 620-633 (1969) hingewiesen. Diese Veröffentlichungen zeigen, dass Serinproteinasen auf einige der genannten Aminosäurederivate eine hohe Esterase-Wirkung, auf andere jedoch nur eine geringe oder gar keine Esterase-Wirkung ausüben, je nach der besonderen Aminosäure. Aus den genannten Veröffentlichungen ergibt sich kein Hinweis auf die Wirkung von Serinproteinasen auf N-Acyl-L-methioninester oder auf eine Wirkung von Serinproteinasen auf racemische N-Acyl-D, L-aminosäureester.
Sowohl L-Methionin als auch N-Ci-9-Acyl-L-methionin sind wertvolle Nahrungsmittel-Ergänzungsstoffe, so dass ein wirksames Verfahren zu ihrer Herstellung besonders erstrebenswert erscheint. Ein solches hochwirksames Verfahren müsste von der Verwendung leicht zugänglicher und billiger Materialien (z.B. Enzyme) ausgehen und das gewünschte Material in hoher Reinheit, in hoher Ausbeute und mit ausreichender Geschwindigkeit liefern.
Das Verfahren gemäss vorliegender Erfindung ist besonders geeignet zur Herstellung von N-Ci-y-Acyl-L-methionin. Das erfindungsgemässe Verfahren zur Herstellung von optisch reinem N-Acyl-L-methionin ist dadurch gekennzeichnet, dass man (1) eine Mischung aus N-Acyl-L-methioninester und N-Acyl-D-methioninester der Wirkung eines proteolytischen Enzyms aus der Gruppe der mikrobiell erzeugten Serinproteinasen aussetzt und (2) das gebildete N-Acyl-L-methionin von dem nicht umgesetzten N-Acyl-D-methioninester abtrennt.
Unter der Bezeichnung «optisch reines N-Acyl-L-methionin» wird ein N-Acyl-L-methionin verstanden, welches im wesentlichen frei von dem D-Isomer ist.
Wie jetzt festgestellt werden konnte, üben bestimmte, leicht erhältliche Proteinasen, nämlich mikrobiell erzeugte Serinproteinasen, eine hohe Esterasewirkung auf N-Acyl-L-methionin-ester, jedoch nur eine sehr geringe Esterasewirkung auf N-Acyl-D-methioninester aus. Weiterhin konnte festgestellt werden, dass die hohe Esterasewirkung gegen das L-Isomer durch die Anwesenheit des D-Isomeren nicht aufgehoben wird. Unterwirft man eine Mischung aus N-Acyl-L-methionin-ester und N-Acyl-D-methioninester der Wirkung einer solchen Proteinase, so erhält man eine Mischung aus N-Acyl-D-methioninester und N-Acyl-L-methionin. Das N-Acyl-L-methionin kann aus dem Gemisch leicht mit Hilfe üblicher Methoden abgetrennt werden, z.B. durch Einstellen des pH-Wertes der wässrigen Mischung und Extrahieren derselben mit einem organischen Lösungsmittel wie Chloroform, Äthylacetat oder Butylacetat.
Für die Zwecke der Erfindung lassen sich verschiedene spezifische N-Acyl-D, L-methioninesterderivate heranziehen.
A
3
619 929
Vorzugsweise sollen die Verbindungen die nachfolgend erwähnten Acyl- und Estergruppen enthalten.
Die Acylgruppe soll sich vorzugsweise von Fettsäuren mit 1 bis 9 Kohlenstoffatomen ableiten. Insbesondere kann es sich bei der N-Acylgruppe um eine Formyl-, Acetyl-, Propionyl-, Butyroyl-, Valeroyl-, Caproyl-, Önanthoyl-, Caprylyl- oder Pelargonoylgruppe handeln. Die Estergruppe kann sich von verschiedenen Alkoholen mit 1—10 vorzugsweise 1-6 Kohlenstoffatomen ableiten. Beispiele für geeignete Estergruppen sind Methyl. Äthyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, sek.-Butyl und Isobutyl. Beispiele für besonders günstige Acylgruppen sind Formyl, Acetyl und Propionyl. Racemischer N-Acetyl-D, L-methioninmethylester wird für das erfindungsgemässe Verfahren am meisten bevorzugt.
Man verwendet für das erfindungsgemässe Verfahren Serinproteinasen, die mikrobiell, d.h. mit Hilfe von Mikroorganismen wie Bakterien, Fungi oder Schimmelpilzen, gewonnen worden sind. Diese Proteinasen sind verhältnismässig billig und als Handelsprodukte erhätlich.
Ein Beispiel für Serinproteinasen, die für die Zwecke der Erfindung brauchbar sind, sind die von dem Mikroorganismus Bacillus subtilis gebildeten Subtilisine.
Für die Zwecke der Erfindung wird insbesondere das von Bacillus subtilis Carlsberg gebildete Subtilisin verwendet.
Dieser Stamm ist ein bekannter Subtilisin bildender Stamm, dessen Aminosäuresequenz von Smith et al. in «The Complete Amino Acid Sequence of Two Types of Subtilisin, BPN' and Carlsberg», J. of Biol. Chem. Bd. 241,25. Dezember 1966, Seite 5974, beschrieben worden ist. Dieses Subtilisin ist durch ein Tyrosin:Tryptophan-Verhältnis von etwa 13:1 gekennzeichnet.
Ein von einer durch Röntgenstrahlung gebildeten Mutanten von Bacillus subtilis erzeugtes Subtilisin ist ebenfalls für die Zwecke der Erfindung geeignet. Die Mutante kann nach dem in der US-PS 3.031.380 beschriebenen Verfahren zur Bestrahlung von Bacillus subtilis mit Röntgenstrahlen gewonnen werden. Das erwähnte Enzympräparat kann in üblicher Weise hergestellt werden. In der genannten Patentschrift ist ein Verfahren beschrieben, gemäss welchem man Bacillus subtilis wenigstens eine halbe Stunde lang der Einwirkung von Röntgenstrahlen mit einer Bestrahlungsdosis von etwa 24 bis 50 Röntgen aussetzt, danach aus der bestrahlten Kolonie einen Stamm selektiert, der nicht begeisselte Zellen aufweist, die rauhe, gezackte, gefleckte und mattweisse Kolonien bilden, den Stamm abtrennt und in ein Kulturmedium überimpft, welches aus Weizenkleie und Maismehl besteht, die Kultur wenigstens 40 Stunden unter praktisch ständiger Belüftung inkubiert und schliesslich die Kultur trocknet.
Im folgenden werden noch weitere Beispiele für brauchbare Serinproteinasen aufgeführt: von Aspergillus oryzae erzeugte Serinproteinasen [Verfahren zur Herstellung und Abtrennung dieser Enzyme sind dem Fachmann bekannt; vergleiche z.B. Subramamian et al., Biochemistry, Bd. 3, No. 12, Seiten 1861-1874 (1964) und Misaki et al., Agr. Biol. Chem., Bd. 34, No. 9, Seiten 1383-1392 (1970)]; von Streptomyces griseus (ATCC 3463) erzeugte Serinproteinasen. [Diese Serinproteinasen sind im Handel unter der Bezeichnung «Pronase» von der Firma Kaken Chemical Co., Japan, erhältlich. Verfahren zur Herstellung und Abtrennung der Proteinasen sind bekannt; vergleiche in diesem Zusammenhang Narahashi et al., The Journal of Biochemistry, Bd. 62, No. 6, Seiten 633-641 (1967)] und von Aspergillus sydowi erzeugte Serinproteinasen [Methoden zur Herstellung und Abtrennung dieser Serinproteinasen sind bekannt; vergleiche beispielsweise Danno et al., Agr. Biol. Chem., Bd. 31, No. 10, Seiten 1151— 1158(1967)].
Weitere Beispiele für brauchbare, mikrobiell erzeugte Serinproteinasen sind eine von Aspergillus gebildete alkalische
Proteinase (E.C. 3.4.21.15), Alternaria-Endopeptidase (E.C. 3.4.21.16) und Arthrobacter-Serinproteinase (E.C. 3.4.21.17). Diese speziellen Enzyme sind mit Hilfe der systematischen E.C.-Nomenklatur definiert (siehe «Enzyme Nomenclature», Commission of Biochemical Nomenclature, Elsevier Publishing Company, Amsterdam 1973, U.S. Library of Congress Card No. 73-78247).
Die Einwirkung des proteolytischen Enzyms auf die Mischung aus N-Acyl-D-methioninester und N-Acyl-L-methioninester erfolgt am besten in einem wässrigen Medium, dessen pH-Wert auf etwa 5 bis etwa 10, vorzugsweise etwa 7 bis 8, gehalten wird, bei einer Temperatur von etwa 10 bis etwa 60°C. Vorzugsweise wird die Temperatur im Bereich von etwa 20 bis 40°C gehalten.
Wegen der hochselektiven Esteraseaktivität der erfindungs-gemäss eingesetzten proteolytischen Enzyme in bezug auf N-Acyl-L-methioninester in Mischungen von N-Acyl-D-methio-ninester und N-Acyl-L-methioninester sind nur sehr kleine Mengen des proteolytischen Enzyms erforderlich, um rasch N-Acyl-L-methionin zu erzeugen. Beispielsweise werden wäss-rige Lösungen verwendet, die das Enzym in Mengen von etwa 0,0005 bis 1,0 Gew.-%, vorzugsweise etwa 0,005 bis 0,5 Gew.-%, enthalten (die genannten Enzymmengen beziehen sich auf reines kristallines Enzym).
Die verwendete Menge der Mischung von N-Acyl-D-methioninester und N-Acyl-L-methioninester in der wässrigen Lösung beträgt im allgemeinen wenigstens etwa 5 Gew.-%. Vorzugsweise setzt man grössere Mengen ein, beispielsweise Mengen bis zum Maximum der Löslichkeit der Mischung aus D- und L-Ester in dem wässrigen Medium und mehr (Mengen, die die maximale Löslichkeit übersteigen, können verwendet werden, weil der L-Ester durch die Einwirkung des Enzyms verbraucht wird und dadurch weiterer L-Ester in Lösung gehen kann).
Die Geschwindigkeit der Einwirkung des Enzyms auf das Material hängt von der Konzentration sowohl des Enzyms als auch des Esters in der Lösung ab. In dieser Hinsicht sind die Verhältnisse bei dem Gemisch der Methylester ziemlich günstig, weil dieses eine gute Löslichkeit in Wasser hat (etwa 20 Gew.-% bei pH 7,5 und 25°C).
Da das Gemisch der Methylester das bevorzugte Ausgangsmaterial für das erfindungsgemässe Verfahren ist, wird im folgenden im Beispiel 1 eine detaillierte Beschreibung der Erfindung unter Verwendung dieses Materials gegeben.
Beispiel 1
Teil. A. Herstellung von N-Acetyl-D,L-methioninmethylester
100 g D,L-Methionin wurden mit 500 ml Methanol, welche 30 g NaOH enthielten, vermischt, so dass sich eine rührbare Auf schlämmung ergab. Zu dieser Mischung wurden dann langsam unter Rühren 1,5 Moläquivalente (bezogen auf D,L-Methionin) Essigsäureanhydrid gegeben. Die Mischung wurde kontinuierlich gerührt, bis sich eine klare Lösung gebildet hatte. Es handelte sich dabei um eine klare Lösung von N-Acetyl-D,L-methionin in Methanol.
Zu dieser Lösung wurde unter weiterem Rühren so viel wasserfreie H2SO4 gegeben, dass das NaOH neutralisiert und die Lösung schwach angesäuert wurde. Unter diesen Bedingungen wurde das N-Acetyl-D,L-methionin in N-Acetyl-D,L-methioninmethylester übergeführt. Das verbleibende Methanol und das Methylacetat, das durch Umsetzung der restlichen Essigsäure bzw. des restlichen Essigsäureanhydrids mit Methanol gebildet wurde, wurden entfernt, indem man die Mischung im Vakuum erwärmte. Der Rückstand wurde mit Chloroform aufgeschlämmt und filtriert, um das Natriumsulfat zu entfernen. Die Ester-Chloroform-Lösung wurde dann mit Wasser gewaschen, um etwa noch vorhandene Salze zu entfernen. Die salzfreie Ester-Chloroform-Lösung wurde im Vakuum
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
619 929
4
erwärmt, um das Chloroform zu entfernen. Das verbleibende Material war N-Acetyl-D,L-methioninmethylester.
Teil B. Herstellung von N-Acetyl-L-methionin
Es wurde eine wässrige Lösung hergestellt, die 20 Gew.-% N-Acetyl-D,L-methioninmethylester enthielt. Der pH-Wert wurde durch Zugabe von einnormalem NaOH auf etwa 7,5 eingestellt. Zu dieser Lösung wurden langsam 0,04 Gew.-% kristallines Subtilisin Carlsberg, bezogen auf die wässrige Lösung, gegeben; Subtilisin Carlsberg ist im Handel unter der Bezeichnung «Alcalase» erhältlich. Während der Zugabe dieser Proteinase wurde die Lösung kontinuierlich gerührt, und der pH-Wert wurde durch automatische Zugabe von einnormalem NaOH mit Hilfe eines automatischen Titriergeräts konstant gehalten (das Titriergerät war ein üblicher Radiometer - «pH-Stat»), Wenn keine weitere Zugabe von NaOH mehr erforderlich ist, um den pH-Wert konstant zu halten, ist die Reaktion beendet. Im vorliegenden Fall war dies nach etwa 30 Minuten der Fall.
Die erhaltene Mischung aus N-Acetyl-D-methioninmethyl-ester und N-Acetyl-L-methionin wurde wie folgt getrennt. Die wässrige Mischung wurde durch Zugabe von NaOH auf einen pH-Wert von 10 bis 11 eingestellt. Danach wurde die wässrige Mischung mit Chloroform extrahiert. Zu diesem Zweck wurde die Mischung mit dem gleichen Volumen Chloroform versetzt. Die entstandene Mischung wurde kurz geschüttelt. Das mit Wasser nicht mischbare Chloroform setzte sich beim Stehen als separate Schicht ab. Die Wasser- und Chloroformschichten wurden getrennt. Die beschriebene Chloroformextraktion wurde noch zweimal wiederholt.
Die abgetrennten Chloroformschichten, die den N-Acetyl-D-methioninmethylester enthielten, wurden vereinigt. Das Chloroform wurde durch Erwärmen der Lösung im Vakuum entfernt. Der verbleibende N-Acetyl-D-methioninmethylester kann zu Wasser oder Methanol, die NaOH enthalten, gegeben und so lange erhitzt werden, dass der D-Methylester racemi-siert wird. Der entstandene D,L-Methylester kann in den Prozess zurückgeführt werden.
Die wässrige Schicht, die das N-Acetyl-L-methionin enthielt, wurde durch Zugabe von H2SO4 auf einen pH-Wert von 2 oder darunter angesäuert. Die angesäuerte wässrige Schicht wurde mit Chloroform extrahiert, indem man sie mit der gleichen Volumenmenge Chloroform versetzte und kurz schüttelte. Danach liess man das Chloroform und das Wasser sich in zwei Schichten trennen. Die Chloroformschicht wurde von der wässrigen Schicht getrennt. Diese Chloroformextraktion wurde noch zweimal wiederholt.
Die abgetrennten Chloroformschichten wurden vereinigt.
Die Chloroformlösung wurde unter Vakuum gelinde erwärmt, um das Chloroform zu entfernen. Das auf diese Weise gewonnene N-Acetyl-L-methionin wies eine optische Reinheit von über 95 % auf.
s Das vorstehend beschriebene Beispiel erläutert eine mögliche Arbeitsweise zur Herstellung von N-Acetyl-L-methionin; es ist für den Fachmann ohne weiteres ersichtlich, dass auch andere Methoden zur Herstellung von N-Acyl-D,L-methionin-estern und zur Trennung von Mischungen aus N-Acyl-D-10 methioninester und N-Acyl-L-methionin angewandt werden können.
Beispiel 2
Wird in Beispiel 1, Teil B, als Serinproteinase Subtilisin ls BPN, BPN' oder eine durch Aspergillus oryzae gebildete Serinproteinase verwendet, so werden gleiche oder entsprechende Ergebnisse erzielt, d.h. N-Acetyl-L-methionin wird schnell gebildet, der N-Acetyl-D-methioninmethylester bleibt unbeeinflusst, und die beiden Verbindungen können rasch 20 getrennt werden, so dass man optisch reines N-Acetyl-L-methionin erhält.
Beispiel 3
Wird in Beispiel 1, Teil B, als D,L-Ester der Methyl-, 25 Äthyl-, Propyl- oder Isopropylester von N-Formyl-D,L-methionin, der Äthyl-, Propyl- oder Isopropylester von N-Acetyl-D,L-methionin oder der Methyl-, Äthyl-, Propyl- oder Isopropylester von N-Propionyl-D,L-methionin verwendet, so lassen sich gleiche oder ähnliche Resultate erzielen, d.h. man 30 gewinnt ein optisch reines N-Formyl-, N-Acetyl- oder N-Propionyl-L-methionin, welches von dem N-Formyl-, N-Acetyl- bzw. N-Propionyl-D-methioninester abgetrennt werden kann.
Das mit Hilfe des erfindungsgemässen Verfahrens gewon-35 nene N-Acyl-L-methionin kann in einfacher Weise in L-Methionin übergeführt werden. Beispielsweise kann man es bei erhöhten Temperaturen mit verdünnter Salzsäure behandeln; man kann es zu diesem Zweck in zweinormaler Salzsäure lösen und die Lösung eine Zeitlang auf etwa 80 bis 100°C 40 erwärmen.
Das L-Methionin ist ein bekanntes Handelsprodukt. NC1-9-Acyl-L-methionine sind besonders geeignet, um proteinhaltige Nahrungsmittel, die zu wenig schwefelhaltige Aminosäuren enthalten, zu ergänzen; hierzu wird auf die US-PS 3 878 305 45 verwiesen. Aus diesem Grunde werden erfindungsgemäss vorzugsweise N-Ci-9-Acyl-L-methionine, insbesondere N-Formyl-L-methionin, N-Acetyl-L-methionin und N-Propionyl-L-methionin, hergestellt.
B
Claims (9)
- (1) eine wässrige Lösung einer Mischung aus N-Acetyl-D- 25 methioninmethylester und N-Acetyl-L-methioninmethylester der Einwirkung eines proteolytischen Enzyms aus der Gruppe der mikrobiell erzeugten Serinproteinasen bei einem pH-Wert in Bereich von 5 bis 10 aussetzt und(1) eine Mischung aus N-Acyl-L-methioninester und N-Acyl-D-methioninester der Wirkung eines proteolytischen Enzyms aus s der Gruppe der mikrobiell erzeugten Serinproteinasen aussetzt und1. Verfahren zur Herstellung von optisch reinem N-Acyl-L-methionin, dadurch gekennzeichnet, dass man
- 2) das gebildete N-Acetyl-L-methionin abtrennt. 302. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, io dass die Acylgruppe 1 bis 9 Kohlenstoffatome enthält.(2) das gebildete N-Acyl-L-methionin von dem nicht umgesetzten N-Acyl-D-methioninester abtrennt.2PATENTANSPRÜCHE
- 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass die Estergruppe sich von einem Alkohol mit 1 bis 10 Kohlenstoff atomen ableitet.
- 4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch is gekennzeichnet, dass man als proteolytisches Enzym Subtilisin Carlsberg oder Subtilisin BPN verwendet.
- 5. Verfahren nach Anspruch 1 oder 4, dadurch gekennzeichnet, dass man als Mischung aus N-Acyl-L-methioninester und N-Acyl-D-methioninester N-Acetyl-D,L-methionin- 20 methylester verwendet.
- 6. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von optisch reinem N-Acetyl-L-methionin, dadurch gekennzeichnet,dass man
- 7. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet,dass man die Umsetzung bei einem pH-Wert im Bereich von 7 bis 8 und bei einer Temperatur im Bereich von 10 bis 60 °C durchführt.
- 8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, 35 dass man als Serinproteinase Subtilisin Carlsberg oder Subtilisin BPN verwendet.
- 9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet,dass man als Proteinase Subtilisin Carlsberg verwendet und eine Temperatur im Bereich von 20 bis 40°C anwendet. 40
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/554,947 US3963573A (en) | 1975-03-03 | 1975-03-03 | Process for producing N-acyl-L-methionine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CH619929A5 true CH619929A5 (de) | 1980-10-31 |
Family
ID=24215362
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CH257876A CH619929A5 (de) | 1975-03-03 | 1976-03-02 |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3963573A (de) |
| JP (1) | JPS5849160B2 (de) |
| AT (1) | AT352061B (de) |
| AU (1) | AU507231B2 (de) |
| BE (1) | BE839140A (de) |
| CA (1) | CA1061268A (de) |
| CH (1) | CH619929A5 (de) |
| DE (1) | DE2608255C2 (de) |
| DK (1) | DK87876A (de) |
| ES (1) | ES445716A1 (de) |
| FR (1) | FR2302983A1 (de) |
| GB (1) | GB1529633A (de) |
| IE (1) | IE42500B1 (de) |
| IT (1) | IT1057921B (de) |
| LU (1) | LU74468A1 (de) |
| NL (1) | NL7602187A (de) |
| PH (1) | PH11580A (de) |
| SE (1) | SE435067B (de) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS52125692A (en) * | 1976-02-04 | 1977-10-21 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | Preparation of l-methionine |
| JPS5332194A (en) * | 1976-09-08 | 1978-03-27 | Sumitomo Chem Co Ltd | Resolution of dl-lysine |
| DE2804892A1 (de) * | 1977-02-09 | 1978-08-10 | Procter & Gamble | Verfahren zur herstellung von l-threonin und dessen n-acylderivat |
| DE2807286A1 (de) * | 1978-02-21 | 1979-08-23 | Bayer Ag | Stereoselektive spaltung von phenylglycinderivaten und 4-hydroxyphenylglycinderivaten mit enzymharzen |
| US4236021A (en) * | 1979-05-07 | 1980-11-25 | The B. F. Goodrich Company | Process for the manufacture of levulinic acid and esters |
| US4262092A (en) * | 1979-05-08 | 1981-04-14 | Ethyl Corporation | Process for producing N-acyl-D-phenylalanine ester |
| DE2927534A1 (de) * | 1979-07-07 | 1981-01-08 | Bayer Ag | Optisch reine heterocyclische aminosaeuren, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
| US4259441A (en) * | 1979-09-17 | 1981-03-31 | Ethyl Corporation | Process for resolving D, L-leucine |
| US4226941A (en) * | 1979-09-27 | 1980-10-07 | Meiji Seika Kaisha, Ltd. | Process for the optical resolution of d,l-2-amino-4-methylphosphinobutyric acid |
| US4414404A (en) * | 1982-03-11 | 1983-11-08 | Ethyl Corporation | Process for producing N-acyl-D,L-phenylalanine ester |
| US4670395A (en) * | 1984-11-13 | 1987-06-02 | The Standard Oil Company | Enantioselective hydrolysis of N-acylamino acid esters using a combined enzyme system |
| US5248609A (en) * | 1986-11-13 | 1993-09-28 | Schering Aktiengesellschaft | Racemic separation of 7α-acyloxy-6β-hydroxymethyl-2-oxabicyclo[3.]-octan-3-ones by stereospecific enzymatic acylate hydrolysis |
| JPH01228488A (ja) * | 1988-03-09 | 1989-09-12 | Fuji Yakuhin Kogyo Kk | パントテン酸またはその塩の製造法 |
| US5081024A (en) * | 1988-09-05 | 1992-01-14 | Nissan Chemical Industries, Ltd. | Process for producing optically active amino acids |
| EP0475255A3 (en) * | 1990-09-12 | 1993-04-14 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Process for the preparation of optically pure (s)-alpha-((tert-butylsulfonyl)methyl)hydro cinnamic acid |
| WO1993025667A1 (en) * | 1992-06-05 | 1993-12-23 | The Scripps Research Institute | D-enzyme compositions and methods of their use |
| JP2008260755A (ja) * | 2007-03-20 | 2008-10-30 | Sumitomo Chemical Co Ltd | Ｌ−ビフェニルアラニン化合物の塩の回収方法、およびそれを用いたビフェニルアラニンエステル化合物の回収方法 |
| WO2014030106A2 (en) | 2012-08-18 | 2014-02-27 | Unimark Remedies Ltd. | Process for preparation of optically active (2r,3s)-3-(4- methoxyphenyl)glycidic acid methyl ester and cis lactam and uses thereof |
| CN110963954A (zh) * | 2019-12-16 | 2020-04-07 | 武汉轻工大学 | 一种硒代蛋氨酸衍生物的合成方法及硒代蛋氨酸制品 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2511867A (en) * | 1949-12-19 | 1950-06-20 | Method fob separating enantiomers |
-
1975
- 1975-03-03 US US05/554,947 patent/US3963573A/en not_active Expired - Lifetime
-
1976
- 1976-02-27 SE SE7602751A patent/SE435067B/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-02-28 DE DE2608255A patent/DE2608255C2/de not_active Expired
- 1976-03-01 PH PH18151A patent/PH11580A/en unknown
- 1976-03-01 CA CA246,838A patent/CA1061268A/en not_active Expired
- 1976-03-02 AT AT153176A patent/AT352061B/de not_active IP Right Cessation
- 1976-03-02 CH CH257876A patent/CH619929A5/de not_active IP Right Cessation
- 1976-03-02 AU AU11583/76A patent/AU507231B2/en not_active Expired
- 1976-03-02 GB GB8293/76A patent/GB1529633A/en not_active Expired
- 1976-03-02 DK DK87876*#A patent/DK87876A/da not_active Application Discontinuation
- 1976-03-02 FR FR7605869A patent/FR2302983A1/fr active Granted
- 1976-03-03 BE BE164813A patent/BE839140A/xx not_active IP Right Cessation
- 1976-03-03 IT IT48381/76A patent/IT1057921B/it active
- 1976-03-03 JP JP51023038A patent/JPS5849160B2/ja not_active Expired
- 1976-03-03 NL NL7602187A patent/NL7602187A/xx not_active Application Discontinuation
- 1976-03-03 IE IE431/76A patent/IE42500B1/en unknown
- 1976-03-03 ES ES445716A patent/ES445716A1/es not_active Expired
- 1976-03-03 LU LU74468A patent/LU74468A1/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SE435067B (sv) | 1984-09-03 |
| ATA153176A (de) | 1979-02-15 |
| AU507231B2 (en) | 1980-02-07 |
| PH11580A (en) | 1978-03-31 |
| DE2608255C2 (de) | 1984-11-22 |
| IE42500B1 (en) | 1980-08-27 |
| JPS5849160B2 (ja) | 1983-11-02 |
| FR2302983A1 (fr) | 1976-10-01 |
| US3963573A (en) | 1976-06-15 |
| DK87876A (da) | 1976-09-04 |
| CA1061268A (en) | 1979-08-28 |
| IE42500L (en) | 1976-09-03 |
| SE7602751L (sv) | 1976-09-06 |
| FR2302983B1 (de) | 1979-06-01 |
| BE839140A (fr) | 1976-09-03 |
| JPS51142595A (en) | 1976-12-08 |
| GB1529633A (en) | 1978-10-25 |
| IT1057921B (it) | 1982-03-30 |
| LU74468A1 (de) | 1977-01-10 |
| ES445716A1 (es) | 1977-09-16 |
| NL7602187A (nl) | 1976-09-07 |
| AU1158376A (en) | 1977-09-08 |
| DE2608255A1 (de) | 1976-09-23 |
| AT352061B (de) | 1979-08-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CH619929A5 (de) | ||
| DE102011088151B4 (de) | Mikroorganismus mit erhöhter L-Valin Produktivität und Verfahren zur Herstellung von L-Valin unter Verwendung desselben | |
| EP0012278B1 (de) | Herstellung von N-substituierten Derivaten des 1-Desoxy-nojirimycins | |
| DE3424440C2 (de) | ||
| DE2163791C2 (de) | Verfahren zur Herstellung von 7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure und ihrer Ester | |
| CH657373A5 (de) | Enzymatische synthese von l-serin. | |
| DE3217908C2 (de) | ||
| DE3613388C2 (de) | ||
| DE102005056667A1 (de) | Fermentative Herstellung organischer Verbindungen | |
| DE2527068A1 (de) | Verfahren zur herstellung von cholesterinesterase | |
| EP0233570A2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Coniferylaldehyd und Mikroorganismus dafür | |
| EP0377083B1 (de) | Verfahren zur Herstellung von L-alpha-Aminosäuren | |
| DE2445581C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von D-Gluconsäure-dlactam | |
| DE2528984C3 (de) | Bestatin, dessen Verwendung und Verfahren zu dessen Herstellung | |
| DE1945607C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von p-Amino benzylpenicillin | |
| DE3247703A1 (de) | Verfahren zur herstellung von l-threonin | |
| EP0477829A2 (de) | Mikrobiologisches Verfahren zur Herstellung von hydroxylierten Heterocyclen | |
| DE2631047C3 (de) | Verfahren zum Herstellen von biologischen Proteinen Mikroorganismen der Art Prototheca | |
| DE2740348A1 (de) | Verfahren zur optischen trennung von dl-lysin-verbindungen | |
| DE2704212A1 (de) | Verfahren zur herstellung von l-methionin | |
| DE68912504T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von optisch aktiver beta-Halomilchsäure oder Glycidsäure. | |
| DE2441637C2 (de) | Verfahren zur Herstellung von 6- Aminopenicillansäure-1-oxid | |
| DE2843567C2 (de) | Herstellung von Hefe auf Äthanol | |
| DE2804892A1 (de) | Verfahren zur herstellung von l-threonin und dessen n-acylderivat | |
| DE3523082A1 (de) | Verfahren zur herstellung von 2-(substituylphenyl)-propionsaeure durch mikroorganismen |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PL | Patent ceased | ||
| PL | Patent ceased |