CH646054A5

CH646054A5 - Compositions d'agents anti-microbiens a liberation maitrisee.

Info

Publication number: CH646054A5
Application number: CH680580A
Authority: CH
Inventors: Nelson Henry Ludwig; Earl Eugene Ose
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1979-09-12
Filing date: 1980-09-10
Publication date: 1984-11-15
Also published as: GB2059764B; IE50197B1; AU6216180A; NZ194899A; BE885181A; ZA805631B; JPS5646822A; US4293539A; IE801899L; FR2464717A1; IL61027A; GB2059764A; EP0025698A2; PH15283A; EP0025698A3; CA1158553A; FR2464717B1; DE3068218D1; AU534769B2; EP0025698B1

Description

Cette invention concerne des compositions pouvant fournir une dose efficace d'un agent antimicrobien à un animal sur une période de temps prolongée, afin de prévenir et de traiter des maladies.

On connaît dans le domaine l'idée d'administrer un médicament à un animal sous une forme qui permet de fournir une dose efficace du médicament à l'animal sur une période de temps prolongée. Par exemple, Yolles décrit dans le brevet des E.U.A. N° 3887699 une composition comprenant un médicament intimement dispersé dans un matériau polymère biodégradable qui est sous la forme d'une pellicule pleine qui est implantée de façon sous-cutanée dans l'animal. Les brevets des E.U.A. Nos 3736646 et 3875937 décrivent des polymères et copolymères qui sont utilisables comme dispositifs chirurgicaux et dispositifs de distribution. Le brevet des E.U.A. N° 3773919 décrit des compositions qui comprennent un polymère de lactide et qui, selon ce brevet, permettent une libération prolongée de médicaments sur une période de temps maîtrisée.

L'utilisation de compositions polymères pour la libération lente de médicaments dans le traitement de diverses maladies chez l'animal présenté un certain nombre d'inconvénients. Les polymères couramment disponibles sont généralement préparés d'une façon telle que l'enlèvement du catalyseur de polymérisation à partir du polymère est impossible ou irréalisable. Par suite, quand le polymère est placé dans un animal et se dégrade pendant un certain temps, des quantités indésirables de catalyseur de polymérisation, comme les oxydes métalliques ou les acides forts, restent dans les tissus animaux. Cela est particulièrement indésirable quand les animaux ainsi traités sont utilisés pour la production de viande ou d'autres produits alimentaires. En outre, la plupart des polymères connus dans le domaine ont des caractéristiques physiques qui nécessitent leur administration par implantation; voir le brevet des E.U.A. N° 3887699. Cette implantation nécessite les services d'une personne

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

3

646 054

connaissant les méthodes chirurgicales. En outre, comme indiqué dans le brevet des E.U.A. N° 3535419, les compositions polymères à libération lente disponibles à l'heure actuelle ne présentent pas une vitesse de libération suffisamment maîtrisée pour être prévisible sur une période de temps utile. Cet aspect est particulièrement critique quand l'agent actif à administrer peut devenir létal à des doses élevées et inefficace à des doses insuffisantes.

Cette invention fournit des compositions comprenant un agent antimicrobien qui est efficace de façon prophylactique ou thérapeutique, en combinaison avec un copolymère pouvant libérer uniformément l'agent actif en quantités efficaces sur une période de temps prédéterminée. Ces compositions copolymères sont biodégradables en substances facilement métabolisées; on peut les administrer par injection et, une fois biodégradées, elles ne laissent pas de résidus indésirables dans les tissus animaux.

La composition selon l'invention à libération maîtrisée pouvant libérer une dose efficace d'un agent antimicrobien sur une période de temps prolongée, et biodégradable en substances facilement métabolisées et en produits métaboliques normaux de l'ingrédient actif, composition qui est utilisable dans le traitement prophylactique et thérapeutique de maladies provoquées par des micro-organismes chez les animaux, contient 5 à 85% en poids d'un agent antimicrobien intimement dispersé dans un copolymère constitué de 60 à 95% en poids de motifs d'acide lactique et de 40 à 5% en poids de motifs d'acide glycolique, ledit copolymère ayant une viscosité intrinsèque de 0,08 à 0,30 dl/g mesurée dans le chloroforme et un poids moléculaire moyen en poids de 6000 à 35000, ladite composition étant en combinaison avec des excipients et des supports appropriés.

Une composition préférée selon cette invention comprend une quantité efficace, sur le plan prophylactique ou thérapeutique, d'un agent pharmaceutique intimement dispersé dans un copolymère obtenu à partir d'environ 60 à environ 90% en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 10% en poids d'acide glycolique,

ayant une viscosité inhérente dans le chloroforme d'environ 0,10 à environ 0,25 dl/g et un poids moléculaire moyen en poids d'environ 15000 à environ 30000.

Une composition nettement préférée est une composition dans laquelle le copolymère contient d'environ 70 à environ 80% en poids d'unités lactiques et environ 30 à environ 20% en poids d'unités glycoliques et a une viscosité intrinsèque d'environ 0,13 à environ 0,23 dl/g.

Les agents pharmaceutiques particulièrement préférés utilisés dans les compositions sont les agents antimicrobiens comme les tétracyclines, les pénicillines, les céphalosporines, les antibiotiques de type macrolide, les médicaments de type sulfamide, les amino-glycosides et d'autres agents particulièrement utiles dans le traitement et la prévention des infections microbiennes.

Une application préférée consiste à administrer par voie sous-cutanée à un animal souffrant d'une infection microbienne, ou susceptible de souffrir d'une infection microbienne et nécessitant un traitement, une quantité efficace d'une composition copolymère à libération maîtrisée contenant un agent antimicrobien compatible.

Un matériau copolymère convenant idéalement pour la libération maîtrisée d'une quantité efficace d'un agent pharmaceutique à un animal, de sorte que l'animal puisse être efficacement traité avec un minimum d'administrations, a été découvert. On prépare ce matériau copolymère par un procédé qui permet l'élimination pratiquement totale du catalyseur de polymérisation, ce qui permet la dégradation totale de la matrice copolymère dans un système biologique, sans accumulation conséquente de résidus toxiques dans les tissus animaux. Cet aspect de l'invention est particulièrement intéressant pour le traitement d'animaux utilisés dans la production de viande destinée à la consommation humaine.

Les copolymères nécessités pour les compositions de cette invention sont préparés par condensation d'acide lactique et d'acide glycolique en présence d'un catalyseur de polymérisation facilement éli-minable. De tels catalyseurs comprennent les résines échangeuses d'ions fortement acides sous forme de billes, ou de structures dures similaires, qui sont facilement enlevées par filtration ou par des techniques similaires. Les catalyseurs de polymérisation particulièrement préférés comprennent les résines échangeuses d'ions fortement acides disponibles dans le commerce comme Amberlite IR-118(H), Dowex HCR-W (préalablement Dowex 50W), Duolite C-20, Am-berlyst 15, Dowex MSC-1, Duolite C-25D, Duolite ES-26 et les résines échangeuses d'ions fortement acides apparentées. Le catalyseur est ajouté à un mélange d'environ 60 à environ 95% en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 5% en poids d'acide glycolique. La quantité de catalyseur utilisée n'est pas critique pour la polymérisation, mais elle est typiquement d'environ 0,01 à environ 20,0 parties en poids par rapport au poids total d'acide lactique et d'acide glycolique combinés. La polymérisation est généralement effectuée en l'absence de solvants; on peut cependant utiliser si on le désire des solvants organiques comme le diméthylsulfoxyde ou le N,N-diméthylformamide. On effectue généralement la réaction de polymérisation dans un dispositif réactionnel équipé d'un dispositif de condensation, ce qui permet le recueil et l'enlèvement de l'eau qui se forme, et facilite l'enlèvement de tous sous-produits de type lactide et glycolide qui se forment. La réaction de polymérisation est généralement effectuée à une température élevée, d'environ 100 à environ 250° C, et à cette température elle est généralement pratiquement terminée en environ 48 à environ 96 h. Idéalement, la réaction peut être effectuée sous pression réduite, ce qui facilite encore l'enlèvement de l'eau et des sous-produits.

Le copolymère ainsi formé est facilement recueilli simplement en filtrant le mélange réactionnel fondu pour enlever pratiquement la totalité du catalyseur de polymérisation échangeur d'ions fortement acide. On peut également refroidir le mélange réactionnel à la température ambiante, puis le dissoudre dans un solvant organique approprié, comme le dichlorométhane ou l'acétone, et le filtrer par des moyens classiques, de façon à enlever la résine échangeuse d'ions fortement acide insoluble dans le solvant. Le copolymère est ensuite isolé par enlèvement du solvant du filtrat, par exemple par évapora-tion sous pression réduite. On peut effectuer si on le désire une purification plus poussée du copolymère en le dissolvant à nouveau dans un solvant organique approprié et en le filtrant à nouveau, avec éventuellement si on le désire l'utilisation d'adjuvants de filtration classiques.

Le copolymère ainsi formé est nécessaire dans les compositions et leur utilisation fournies par cette invention. Ces copolymères, bien qu'on n'ait pas encore déterminé leur structure exacte, sont caractérisés par un poids moléculaire moyen en poids d'environ 6000 à environ 35000, et de préférence d'environ 15000 à environ 30000. Les copolymères sont uniques en leur genre en ce qu'ils sont classés comme substances de poids moléculaire élevé ayant une viscosité inhérente (intrinsèque) de 0,08 à 0,30 dl/g, mesurée par des techniques classiques, en utilisant par exemple un viscosimètre Ubbelohde dans lequel le chloroforme a un temps de sortie d'environ 51 s à 25° C. La viscosité intrinsèque des copolymères est déterminée par les équations suivantes:

t Lu,

% = - Tlint = — (dl/g)

OÙ

i*|r est la viscosité relative;

t0 est le temps de sortie du solvant;

t est le temps de sortie de la solution;

T|int est la viscosité intrinsèque (ou inhérente);

C est la concentration en grammes pour 100 ml de solvant, et

L est le logarithme naturel.

Les copolymères utilisés dans les compositions de cette invention sont en outre uniques en ce qu'ils peuvent fournir une libération maîtrisée d'agents pharmaceutiques que l'on ne pouvait pas obtenir jusqu'à présent, en plus d'avoir des caractéristiques physiques qui permettent leur mise en suspension dans un véhicule approprié, en permettant ainsi une administration commode, par exemple par administration sous-cutanée. Les compositions peuvent également être administrées par voie orale ou par implantation.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

646 054

4

Les compositions envisagées par cette invention comprennent une quantité efficace d'un agent antimicrobien uniformément. mélangé et dispersé dans la matrice copolymère décrite précédemment. Les compositions contiennent d'environ 5 à environ 85% en poids d'ingrédient actif, idéalement d'environ 20 à environ 75% en poids, et de préférence encore d'environ 30 à environ 60% en poids. Les agents antimicrobiens pharmacologiques que l'on peut utiliser dans les compositions comprennent les agents couramment utilisés dans le traitement de la maladie particulière que l'on cherche à prévenir ou à traiter par la composition de l'invention. Les agents actifs couramment utilisés comprennent les antibiotiques comme les tétra-cyclines, en particulier la Chlortetracycline, l'oxytétracycline, la doxycycline et la tétracycline; le pénicilline comme l'ampicilline, la benzylpénicilline, la pénicilline V ; les acides céphalosporaniques comme les céphalosporinoximes; les sels de céphalosporine; les oxy-céphalosporines; les cloxacillines, etc. D'autres antibiotiques que l'on utilise de façon classique dans les compositions de l'invention comprennent la streptomycine, la novabiocine, la néomycine, les Sulfonamides, l'érythromycine, la Colistine, la lincomycine, l'acide nali-dixique, l'apramycine, la salinomycine, la nigéricine, la kanamycine, la kitsamycine, la tylosine, la furaltadone, la vancomycine, le thio-strepton, la gentamycine, la tobramycine, la spiramycine, la ristocé-tine, la soimycine, etc. Les compositions préférées contiennent un agent antimicrobien choisi parmi l'érythromycine, la spiramycine, la tylosine, le 5-O-mycaminosyltylonolide, les tétracyclines, l'oxytétracycline, la doxycycline, la néomycine, la lincomycine et les céphalo-sporines, en particulier les céphalosporinoximes. Une composition particulièrement préférée de l'invention est une composition comprenant le copolymère et environ 30 à environ 60% en poids de l'antibiotique de type macrolide qu'est la tylosine, en plus de diluants, excipients et supports pharmaceutiques couramment utilisés.

La plupart des antibiotiques mentionnés ci-dessus sont connus de l'homme du métier qui trouve leur composition et d'autres propriétés, par exemple, dans les registres de l'OMS ou dans le «Merck Index». On donnera cependant ci-après l'identification de certains antibiotiques probablement moins connus; dans la Uste qui suit, M.I. désigne le «Merck Index», 10e édition.

Salinomycine: OMS réf. 4256-3717, M.I. 8193 Nigéricine: M.I. 6390

Kitsamycine, kanamycine: M.I. 5294 et OMS réf. 1541-1305; OMS réf. 0870-1004 Apramycine: M.I. 775 Furaltadone: M.I. 4170 Thiostreptone: M.I. 9207 Ristocétine: M.I. 8120 Tylosine: M.I. 9631

5-O-mycaminosyltylonolide: un dérivé 5-O-mycaminosyle de la tylosine (M.I. 9631)

Soimycine: des antibiotiques peptidiques du type siomycine, produits par Streptomyces sioyaensis

Les compositions fournies par cette invention peuvent être préparées selon un certain nombre de façons. Un procédé préféré de préparation consiste à dissoudre une quantité appropriée du copolymère susmentionné dans un solvant organique qui est facilement éliminé par évaporation, puis à ajouter la quantité désirée d'agent actif sur le plan pharmacologique. Par exemple, on peut dissoudre environ 50 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 80% en poids d'acide lactique et d'environ 20% en poids d'acide glycolique, le copolymère ayant une viscosité intrinsèque d'environ 0,23 dl/g dans environ 200 à environ 400 ml d'un solvant organique approprié comme le dichlorométhane, l'acétone, l'éther diéthylique, le tétrahydrofuranne, le chloroforme, etc. On peut ajouter au copolymère dissous un agent pharmacologique comme la tylosine, à raison d'environ 30 g. La solution ainsi formée peut être séchée par pulvérisation par des procédés classiques, de façon à obtenir un produit solide composé comportant un mélange uniforme de copolymère et d'agent actif et ayant une granulométrie essentiellement uniforme. Une telle composition peut être utilisée dans le traitement de maladies microbiennes chez les animaux. Par exemple, la composition peut être utilisée dans le traitement de la pneumonie chez les jeunes veaux. Si on le désire, une quantité appropriée de la composition peut être mise en suspension dans un véhicule approprié comme 5 l'huile de sésame, le triacétate de glycérol ou la triacétine, et injectée par voie sous-cutanée. Un tel traitement fournit la libération lente de l'ingrédient actif dans l'animal, de sorte que la dose efficace de médicament actif est d'environ 8,8 à environ 22 mg/kg/d pendant une période d'environ 6 à 10 d.

io Les compositions de l'invention peuvent également être préparées en dissolvant le copolymère et l'agent antimicrobien dans un solvant organique approprié, puis en chassant le solvant par évaporation. La composition copolymère/agent microbien peut ensuite être fondue, et le produit fondu peut être extradé en bâtonnets ayant 15 un diamètre d'environ 2,0 à environ 7,0 mm. Les bâtonnets extradés peuvent être découpés à la longueur désirée, de façon à donner une quantité particulière d'agent actif. Par exemple, une composition qui contient environ 50 g de l'antibiotique tylosine et environ 100 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 70 à environ 80% en poids 20 d'acide lactique et d'environ 30 à environ 20% en poids d'acide glycolique, ledit copolymère ayant ime viscosité intrinsèque d'environ 0,13 à environ 0,23 dl/g peut être extradée avec fusion en bâtonnets ayant un diamètre d'environ 5,0 mm. Ces bâtonnets sont, une fois refroidis à la température ambiante, durs et translucides et ont donc 25 l'aspect d'un verre de couleur ambre. Ce verre peut être découpé à la longueur désirée, de façon à obtenir la dose désirée d'antibiotique. Le bâtonnet de verre d'environ 40 à 80 mm peut être implanté sous la peau de l'animal à traiter, ou bien le verre peut être broyé en petites particules et calibré sur un tamis métallique approprié, ayant 30 par exemple une ouverture de maille d'environ 95 à 250 |j.m, de façon à obtenir une composition copolymères/tylosine que l'on peut facilement mettre en suspension dans une huile comme l'huile de sésame ou un produit similaire. L'huile peut ensuite être injectée par voie sous-cutanée à un animal comme un veau pour permettre un 35 traitement thérapeutique ou prophylactique vis-à-vis d'une infection microbienne, comme la pneumonie.

Les compositions fournies par cette invention peuvent contenir, en plus de la matrice copolymère et de l'ingrédient antimicrobien, d'autres substances couramment utilisées dans les compositions mé-40 dicales. Des diluants, supports, liants, excipients et adjuvants utilisés de façon classique dans de telles compositions comprennent la gomme adragante, la gomme arabique, l'amidon de maïs, la gélatine, l'acide alginique, le stéarate de magnésium, le monostéarate d'aluminium, la cire d'abeille, le saccharose, le lactose, le méthyl-45 paraben, le propylparaben, le mannitol, le propylèneglycol, la cellulose microcristalline, le silicate de calcium, la silice, la polyvinyl-pyrrolidone, l'alcool cétostéarylique, le beurre de cacao, le mono-laurate de polyoxyéthylènesorbitanne, le lactate d'éthyle, le trioléate de sorbitanne, le stéarate de calcium, le talc, etc. Des supports cou-50 ramment utilisés pour administrer les compositions par injection comprennent l'huile minérale, l'huile d'arachide, l'huile de sésame, ainsi que des solutions aqueuses comme la solution physiologique de chlorure de sodium ou la solution de carboxyméthylcellulose sodique dans l'eau, ainsi que la polyvinylpyrrolidone aqueuse. 55 Les compositions envisagées ici peuvent, si on le désire, comprendre plus d'un ingrédient actif sur le plan pharmacologique. Certains agents antibactériens ont par exemple une action immédiate, tandis que d'autres ne peuvent être totalement efficaces que si le traitement normal a été effectué de façon répétée. Selon cette invention, 60 on peut combiner un agent pharmacologique à action rapide avec la matrice copolymère susmentionnée, ainsi qu'un agent actif d'action plus lente. L'administration d'une telle composition est alors efficace pour traiter et protéger l'animal hôte vis-à-vis d'une maladie particulière pendant plusieurs jours, semaines ou même mois. 65 Les compositions de cette invention sont prévues pour l'utilisation en vue d'un traitement d'une maladie et consistent à administrer à un animal souffrant d'une maladie microbienne infectieuse et nécessitant le traitement, ou à un animal suspecté de développer une

5

646 054

maladie et nécessitant un traitement prophylactique, une quantité appropriée d'une composition selon l'invention, ladite quantité de produit administré comprenant le copolymère et l'agent antimicrobien étant telle que l'animal reçoit une quantité efficace d'agent antimicrobien sur une période de temps prolongée et prédéterminée.

Un certain nombre d'animaux, en particulier les animaux producteurs de produits alimentaires comme les porcs, les ruminants, la volaille, etc., sont affligés de diverses maladies à la naissance et au cours des premiers stades de leur développement. Un grand nombre de ces maladies sont transmises par les parents directement aux jeunes. Une telle maladie, dont souffrent couramment les jeunes porcs, est la pneumonie mycoplasmique. De même, de nombreux jeunes veaux souffrent et meurent chaque année de pneumonie contractée par suite d'une exposition à des conditions atmosphériques nuisibles.

Des pertes économiques importantes résultent chaque année des morts provoquées par ces diverses maladies. Bien que l'on connaisse des agents thérapeutiques qui sont efficaces vis-à-vis de ces maladies, aucun moyen pratique et efficace n'a encore été mis au point pour l'administration de ces agents à de jeunes animaux. Par exemple, le propriétaire d'un troupeau de plusieurs centaines de jeunes veaux ne peut manifestement pas traiter ce troupeau par un agent thérapeutique qui nécessite des administrations quotidiennes multiples. Bien que certains agents thérapeutiques soient efficaces par voie orale et puissent être ajoutés aux aliments ou à l'eau, les très jeunes animaux, comme les porcs et les veaux nouveau-nés, ne consomment pas de quantités suffisantes de ces substances pour absorber une dose d'agent actif suffisamment importante pour traiter efficacement la maladie. En outre, des pertes substantielles pourraient être évitées si les animaux nouveau-nés pouvaient être protégés des maladies par traitement prophylactique jusqu'au moment où les animaux ont un système immunologique suffisamment développé pour combattre efficacement les maladies auxquelles ils sont exposés.

Une composition à libération maîtrisée telle que décrite précédemment est généralement administrée à un animal de sorte que l'animal reçoit, avec une seule administration, une dose efficace d'agent microbien continuellement pendant plusieurs jours. Par exemple, une composition à libération maîtrisée comprenant d'environ 2,0 à environ 12,0 g d'un antibiotique comme la tylosine ou l'oxytétracycline, et d'environ 1,0 à environ 12,0 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 80% en poids d'acide lactique et d'environ 20% en poids d'acide glycolique, peut être extradée en un bâtonnet vitreux, broyée, tamisée jusqu'à uniformité à travers un tamis d'une ouverture de maille de 177 à 105 |xm, et mise en suspension dans de l'huile de sésame, du triacétate de glycérol ou de la triacétine contenant environ 1 à environ 2% de monostéarate d'aluminium et environ 1 à environ 2% de cire d'abeille, pour une administration sous-cutanée commode à un jeune veau pesant environ 45 à environ 90 kg. Un tel traitement permet de libérer dans l'animal l'ingrédient actif à raison d'environ 2,2 à environ 33 mg/kg/d pendant environ 8 d. Ce traitement est particulièrement efficace pour le traitement thérapeutique et prophylactique de la pneumonie chez les veaux.

Bien que les compositions à libération maîtrisée soient de préférence administrées par injection sous-cutanée ou intramusculaire, un traitement par d'autres voies d'administration est également envisagé. Par exemple, l'agent antimicrobien peut être préparé avec le copolymère et des liants et supports supplémentaires, et moulé selon un bol approprié pour une administration par voie orale commode. Ou bien les compositions à libération maîtrisée peuvent être extradées en bâtonnets ou articles similaires et implantées sous la peau de l'animal, selon des techniques classiques. En outre, les compositions peuvent être enfermées ou encapsulées dans un dispositif convenant pour l'administration sous forme de suppositoires, ou sous la forme d'un dispositif intra-utérin ou intramammaire. De telles compositions sont ainsi efficaces pour un traitement prolongé de la mastite et des maladies similaires.

La quantité particulière de composition à libération maîtrisée nécessaire pour un traitement particulier variera selon l'espèce, l'âge et le poids de l'animal hôte à traiter, la maladie particulière envisagée ou traitée, ainsi que l'agent antimicrobien particulier choisi pour le traitement, la voie d'administration et la fréquence. En général, une quantité de médicament à libération maîtrisée sera administrée pour que l'administration quotidienne d'ingrédient antimicrobien soit comparable, ou quelque peu inférieure, à la dose quotidienne recommandée pour ce médicament actif particulier. Par exemple, on sait que la tylosine est efficace dans le traitement de la pneumonie contagieuse des veaux, la diphtérie, le fourchet, la métrite et la pneumonie chez le bétail, et l'érysipèle, la pneumonie, la dysenterie et l'arthrite due aux mycoplasmes chez les porcs. La dose efficace de tylosine dans le traitement de ces maladies est d'environ 2,2 à environ 44 mg/kg de poids corporel, quand on l'administre par voie intramusculaire. Selon le procédé de cette invention, on administre une composition à libération maîtrisée de copolymère et de tylosine de sorte que la dose quotidienne de tylosine soit d'environ 1,1 à environ 33 mg/kg de poids corporel. Cette composition est telle que la distribution globale d'ingrédient antimicrobien est effectuée en environ 5 à environ 10 d, généralement en environ 7 ou 8 d. On envisage que, dans un aspect de cette invention, de jeunes veaux (âgés de 2 à environ 25 d) peuvent être efficacement protégés et traités pour une maladie comme la pneumonie, par administration sous-cutanée d'une composition de cette invention contenant 2,0 à environ 10,0 g de tylosine une fois tous les 7 à 10 d, le nombre total de ces traitements étant de 1 à environ 4, ou comme nécessité par la sévérité de l'état à traiter ou vis-à-vis duquel on désire se prémunir.

Les compositions fournies par cette invention ont été essayées dans plusieurs essais conçus pour montrer leur utilité et leur efficacité. L'un de ces essais consiste à traiter des veaux en leur injectant des doses variables de tylosine dans des compositions à libération maîtrisée. La tylosine est préparée avec un copolymère dérivé d'environ 80% en poids d'acide lactique et d'environ 20% en poids d'acide glycolique, ayant une viscosité d'environ 0,20 dl/g. Les compositions sont extradées en bâtonnets de verre. Les bâtonnets de verre sont broyés, tamisés sur un tamis d'environ 100 à 200 um, puis mis en suspension dans 5 ml d'huile de sésame. On prépare trois compositions de sorte que les doses efficaces de tylosine sont de 5,5, 11 et 16,5 mg/kg/d respectivement. Les compositions contiennent également environ 1 à 2% en poids de cire d'abeille et environ 1,5 à environ 2,5% en poids de monostéarate d'aluminium, ingrédient qui améliore les caractéristiques d'injection en seringue. Les compositions ainsi préparées sont administrées par voie sous-cutanée dans le cou de jeunes veaux souffrant de pneumonie bactérienne naturelle. Quinze veaux sont conservés comme témoins et ne reçoivent pas de médicament. On traite trois groupes de quinze veaux chacun le premier jour et à nouveau le septième jour avec les trois compositions. On détermine la mortalité après 14 d. Les résultats de l'essai sont donnés dans le tableau I.

Tableau I

Dose de tylosine

Mortalité

(mg/kg/d)

(sur 15)

Témoin

10

5,5

4

11,0

6

16,5

3

Dans une étude similaire, vingt jeunes veaux souffrant de pneumonie naturelle sont traités par voie sous-cutanée le jour zéro, et à nouveau le septième jour, avec une composition de tylosine conçue pour libérer environ 8,8 mg/kg/d pendant environ 7 d. On conserve dix veaux infectés comme témoins et on ne les traite pas. Au cours de l'expérience, on effectue diverses observations cliniques, comprenant l'écoulement nasal, l'écoulement oculaire et la diarrhée. On note les températures rectales et la mortalité. Parmi le groupe

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

646054

6

témoin ne recevant pas de médicament, six des dix animaux infectés sont morts au vingt et unième jour (mortalité de 60%). Dans le groupe traité, seuls cinq des vingt animaux infectés sont morts (mortalité de 25%). Le tableau II donne la température rectale moyenne

Un traitement prophylactique particulièrement préféré consiste à administrer à de jeunes porcs une quantité efficace d'une composition de cette invention pour la prévention de la pneumonie myco-plasmique provoquée par Mycoplasma hyopneumoniae. On a estimé 20 que cette maladie particulière se produit sur plus de la moitié des porcs dans le monde et provoque une perte économique moyenne d'environ 1 dollar par tête. Cette maladie particulière est transmise de la truie à un ou plusieurs porcs nouveau-nés dans une portée dans les quelques jours qui suivent la naissance de la portée. En raison de 25 sa nature contagieuse, la maladie peut être rapidement transmise à la plupart des autres nouveau-nés de la portée. Bien que l'on ne connaisse aucun médicament qui soit efficace sur cette maladie une fois que l'animal a été infecté, certains médicaments, y compris la tylosine et la chlortétracycline, sont efficaces de façon prophylactique 30 quand ils sont administrés à l'animal avant le contact avec la maladie. Alors que des injections quotidiennes de ces agents actifs permettraient vraisemblablement de lutter contre la maladie, un tel traitement n'est pas réalisable en raison du travail nécessaire, du prix, de l'irritation du site d'injection et des facteurs apparentés. En outre, 35 les additifs alimentaires et l'addition de l'agent thérapeutique à de l'eau de boisson ne sont pas efficaces, simplement parce que les animaux nouveau-nés ne consomment pas des quantités suffisantes de ces substances pour ingérer une dose efficace de l'agent thérapeutique. 40

La présente invention fournit un moyen grâce auquel les animaux nouveau-nés et les jeunes animaux peuvent être efficacement protégés de l'infection par la pneumonie mycoplasmique. On traite donc de jeunes animaux par une composition d'agent antimycoplas-mique et de copolymère, comme celles décrites précédemment. Une 45 telle composition peut être administrée à la naissance et périodiquement, par la suite, comme le nécessite le sevrage, ce qui fournit un traitement prophylactique efficace vis-à-vis de la maladie. Des compositions types utilisées pour le traitement de la pneumonie mycoplasmique chez les jeunes animaux comprennent le copolymère sus- 50 mentionné, dérivé d'environ 60 à environ 95% en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 5% en poids d'acide glycolique, et un agent antimycoplasmique approprié comme la tylosine ou la chlortétracycline. Un traitement particulièrement préféré consiste à administrer une composition à libération maîtrisée du copolymère sus- 55 mentionné et de tylosine. Bien qu'il soit indiqué que la tylosine est inefficace dans le traitement de la pneumonie mycoplasmique, elle est de façon surprenante et significative efficace sur le plan prophylactique vis-à-vis de cette maladie. Par exemple, des compositions comprenant environ 100 à environ 1500 mg de tylosine, intimement 60 dispersées dans environ 100 à environ 1500 mg d'un copolymère dérivé d'environ 70 à environ 80% en poids d'acide lactique et d'environ 30 à environ 20% en poids d'acide glycolique, ayant une viscosité d'environ 0,13 à environ 0,23 dl/g, peuvent être administrées à un porc nouveau-né à raison d'environ 10 à environ 50 mg/kg à peu 65 près une fois tous les 7 à 14 d. Un tel traitement permet de protéger uniformément et continuellement le jeune animal de la pneumonie mycoplasmique.

quotidienne du groupe témoin et du groupe traité. Les résultats montrent que le groupe traité a des températures uniformément inférieures par rapport au groupe témoin, ce qui indique que le groupe traité présente une infection moins sévère que le groupe témoin.

Comme indiqué précédemment, les compositions peuvent être administrées selon l'une quelconque de plusieurs façons. Pour le traitement des jeunes porcs, les compositions sont idéalement extradées en bâtonnets et les bâtonnets sont découpés à la longueur appropriée, par exemple environ 20 mm, pour obtenir la dose désirée d'ingrédient actif. Un tel bâtonnet peut être implante de façon sous-cutanée dans l'animal. Les bâtonnets composés peuvent également être broyés jusqu'à uniformité et mis en suspension dans un support approprié pour une injection sous-cutanée ou intramusuclaire.

Les exemples détaillés suivants sont donnés à titre d'illustration de certains modes de réalisation spécifiques de l'invention.

Exemple 1:

Dans un ballon à fond rond à trois tubulures équipé d'un réfrigérant et d'un thermomètre, on place 864,0 g d'acide lactique, 201,0 g d'acide glycolique et 12,0 g d'une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2-H. On agite et on chauffe le mélange à 130°C pendant 3 h, période pendant laquelle 400 ml d'eau distillent et sont recueillis. Après avoir écarté l'eau ainsi produite, on poursuit l'agitation et le chauffage et on réduit progressivement la pression sous vide en 3 h, après quoi la température du mélange réactionnel augmente à 150°C à une pression finale de 6,65 mbar. On ajoute 12,0 g supplémentaires de catalyseur Dowex HCR-W2-H au mélange réactionnel, puis on chauffe le mélange à 170°C à 6,65 mbar pendant 24 h, puis à 185°C à 6,65 mbar pendant 48 h supplémentaires. Ensuite, on filtre le mélange réactionnel fondu pour enlever la majeure partie du catalyseur de polymérisation échangeur d'ions, et on laisse le filtrat refroidir jusqu'à la température ambiante pour obtenir 700 g d'un copolymère à 80% d'acide lactique et 20% d'acide glycolique. On analyse le copolymère par spectromêtrie de résonance magnétique nucléaire des protons et on montre qu'il contient 76% en poids de motifs acides lactiques.

On a déterminé la viscosité du copolymère dans un viscosimètre Ubbelohde dans lequel le chloroforme a un temps de sortie de 51 s à 25° C. On dissout le copolymère dans du chloroforme à une concentration de 0,50 g/100 ml de solvant. Puis on détermine la viscosité intrinsèque du copolymère selon les formules:

où:

î]rer = viscosité relative t„ = temps de sortie du solvant (CHC13)

t = temps de sortie de la solution ilint = viscosité intrinsèque C = concentration en grammes par 100 ml On détermine que la viscosité intrinsèque du copolymère ainsi préparé est 0,19 dl/g.

Exemple 2:

En suivant le mode opératoire général de l'exemple 1, on condense 432 g d'acide lactique et 101 g d'acide glycolique en présence

Tableau II:

Températures (°C) rectales quotidiennes moyennes

Jours d'expérience

1

2

5

7

8

9

12

13

14

Groupe témoin

39,1

39,5

39,2

39,3

39,9

39,7

39,4

39,5

39,65

Groupe traité

39,2

38,95

39,0

39,6

39,25

38,9

39,1

38,95

7

646054

d'un total de 12,0 g d'un catalyseur de polymérisation échangeur d'ions Amberlyst 15, et l'on obtient 350 g d'un copolymère comprenant environ 80% de motifs acides lactiques et environ 20% de motifs acides glycoliques. Le copolymère a une viscosité intrinsèque de 0,18 dl/g.

Exemple 3:

En suivant le mode opératoire général de l'exemple 1, on condense 422,0 g d'acide lactique avec 144,0 g d'acide glycolique, en présence d'un total de 12,0 g de catalyseur de polymérisation qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2-H. Après enlèvement du catalyseur par filtration du mélange réactionnel fondu, on obtient 350 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 75% en poids d'acide lactique et d'environ 25% en poids d'acide glycolique. Le copolymère présente une viscosité intrinsèque de 0,19 dl/g.

Exemple 4:

En suivant le mode opératoire général de l'exemple 1, on condense 1080 g d'acide lactique avec 252 g d'acide glycolique, en présence d'un total de 30,0 g de catalyseur de polymérisation qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2--H, pour obtenir, après enlèvement du catalyseur, 750 g d'un copolymère dont une RMN du proton montre qu'il contient environ 79% de motifs acides lactiques et environ 21% de motifs acides glycoliques. Le copolymère présente une viscosité intrinsèque de 0,20 dl/g.

Exemple 5:

En suivant le mode opératoire de l'exemple 1, on condense 1080 g d'acide lactique avec 120 g d'acide glycolique, en présence d'un total de 5,0 g de catalyseur de polymérisation qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2-H, et l'on obtient, après traitement, 630 g d'un copolymère contenant environ 90% en poids d'acide lactique et environ 10% en poids d'acide glycolique. Le copolymère a une viscosité intrinsèque de 0,20 dl/g.

Exemple 6:

En suivant le mode opératoire de l'exemple 1, on condense 710 g d'acide lactique avec 190 g d'acide glycolique, en présence d'un total de 12,0 g d'un catalyseur de polymérisation qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2-H, et l'on obtient 500 g d'un copolymère comprenant environ 70% de motifs acides lactiques et environ 30% de motifs acides glycoliques. Le copolymère a une viscosité intrinsèque de 0,12 dl/g après 24 h à 175° C.

Exemple 7:

On suit le mode opératoire de l'exemple 1 pour condenser 1080 g d'acide lactique avec 120 g d'acide glycolique, en présence d'un total de 30,0 g d'un catalyseur de polymérisation qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2-H. Après traitement, on recueille 750 g d'un copolymère contenant environ 89% en poids d'acide lactique et environ 11 % d'acide glycolique, et ayant une viscosité intrinsèque de 0,20 dl/g.

Les copolymères fournis par cette invention ont en outre été caractérisés par Chromatographie de perméabilité sur gel (Chromatographie liquide sous pression élevée) et détermination ultérieure du poids moléculaire. La Chromatographie de perméabilité sur gel sépare les molécules de l'échantillon en raison des différences de la dimension moléculaire effective en solution. La séparation est effectuée en raison de la répartition de la dimension des pores dans le matériau de garniture. Cette technique analytique permet la détermination du poids moléculaire moyen en poids, du poids moléculaire moyen en nombre, de la distribution du poids moléculaire et l'indice de dispersion des matériaux polymères.

Plusieurs expériences de ce type ont été effectuées sur les copolymères de cette invention. On a utilisé des colonnes chromatographi-ques de perméabilité sur gel classiques, et le support dans chaque cas est du Styragel du commerce. Tous les échantillons et références ont

été dissous dans une solution de 80 parties de tétrahydrofuranne et 20 parties de dichlorométhane. On a utilisé la méthode indirecte (c'est-à-dire la méthode du facteur Q) de calibrage des colonnes chromatographiques pour obtenir les moyennes des poids moléculaires pour les copolymères de l'invention. On utilise dans l'étalonnage du polystyrène commercial avec un facteur Q de 41,3. Le tableau suivant donne plusieurs déterminations du poids moléculaire par des techniques chromatographiques de perméabilité sur gel classiques, comme indiqué précédemment. On trouvera une discussion plus détaillée de la technique utilisée dans Slade, «Polymer Molecular Weights», Marcel Deckker, Inc., 1975.

Dans le tableau, la colonne I donne les proportions relatives de motifs acides lactiques et acides glycoliques constituant le copolymère analysé. La colonne II donne la viscosité intrinsèque de chaque copolymère analysé. La colonne III indique la résine échangeuse d'ions fortement acide utilisée pour préparer le copolymère qu'on analyse. La colonne IV donne la dimension moyenne en poids (en angströms) déterminée par la durée de rétention chromatographique de perméabilité sur gel pour le copolymère particulier. La colonne V donne les poids moléculaires moyens en poids pour les divers copolymères préparés par le procédé de cette invention. Les poids moléculaires moyens en poids sont déterminés en multipliant le facteur Q du polystyrène (41,3) par la dimension moyenne en poids en angströms du copolymère particulier analysé. La colonne VI donne le numéro de l'exemple en question.

Comme indiqué dans le tableau, les copolymères préférés de cette invention ont un poids moléculaire d'environ 15000 à environ 35000, et de préférence encore d'environ 15000 à environ 30000.

Tableau des poids moléculaires moyens en poids

Colonnes

I

II

III

IV

V

VI