CH674149A5 - - Google Patents

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CH674149A5
CH674149A5 CH4117/88A CH411788A CH674149A5 CH 674149 A5 CH674149 A5 CH 674149A5 CH 4117/88 A CH4117/88 A CH 4117/88A CH 411788 A CH411788 A CH 411788A CH 674149 A5 CH674149 A5 CH 674149A5
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CH
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tsmpm
biomass
strain
cattle
medicament according
Prior art date
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CH4117/88A
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Valery Veniaminovich Smirnov
Svetlana Nikolaevna Kharchenko
Semen Rafailovich Reznik
Vladimir Petrovich Litvin
Valentina Alexeevn Vjunitskaya
Original Assignee
Inst Mikrobiologii Virusologii
Uk Selskokhoz Akademia
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    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
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Description

BESCHREIBUNG Technisches Gebiet
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf die Veterinärmedizin und betrifft insbesondere ein Arzneimittel zur Prophylaxe und Behandlung von gastrointestinalen Erkrankungen des Landwirtschaftsviehs.
Stand der Technik In den modernen Viehzuchtkomplexen, wo eine bedeutende Menge vom landwirtschaftlichen Vieh konzentriert ist, entstehen sogar beim Beachten befriedigender hygienischer Bedingungen bei einem wesentlichen Teil der Neugeborenen akute Magen- und Darmerkrankungen.
Die Hauptgründe solcher Erkrankungen bestehen darin, dass in den ersten Stunden und Tagen nach der Geburt die Tiere noch keine normale Mikroflora haben, die eine wichtige Rolle im Schutz gegen die Infektionen spielt. Zu dieser Periode können in den Organismen der Tiere aus der Umgebung (aus der Luft, aus Pflegegegenständen, von den kranken Tieren, vom Personal und von anderen Quellen) verschiedene pathogene und fakultativ pathogene Mikroorganismen (enteropathogenes Kolibakterium, Staphylokokkus, Proteus, Klebsiella, Salmonella u. a.) gelangen, die sich im Darm der Neugeborenen praktisch ungehindert vermehren, indem sie bei den Tieren gastrointestinale Erkrankungen von verschiedener Schwere hervorrufen. Die Entwicklung solcher Erkrankungen im früheren Lebensalter führt zur Ab-schwächung der Neugeborenen und zur Herabsetzung des Prozents deren Erhaltung (zum Tod eines Teils der Tiere).
Es ist die Anwendung von Antibiotika, Sulfamid- und Nitrofuranpräparaten sowie von Gräserdekokten und anderen Mitteln zur Behandlung akuter gastrointestinaler Erkrankungen breit bekannt. Alle diese Mittel sind jedoch nicht effektiv genug, weil eine Reihe von pathogenen und fakultativ pathogenen Mikroorganismen gegen diese Mittel resistent ist.
Zur Zeit sind die Präparate aus lebendigen Mikrobenkulturen zur Prophylaxe und Behandlung der Magen- und Darmerkrankungen der Tiere aussichtsreicher. Diese Präparate tragen zu einer künstlichen Formung in der früheren 5 Lebensperiode der Tiere in ihrem Magendarmkanal von der Mikroflora bei, die fähig ist, die Vermehrung von pathogenen und fakultativ pathogenen Mikroorganismen darin zu unterdrücken. So ist beispielswiese ein Präparat aus lebendigen Kulturen des Mikroorganismus Streptococcus faecium io Cernelle 68 bekannt (GB, B 1 300 446).
Das genannte Präparat sieht nur eine Art des Mikroorganismus vor, was kein breites antagonistisches Wirkungsspektrum bewirkt. Ausserdem übt das genannte Präparat keine stimulierende Wirkung auf die Schutzreaktionen des 15 tierischen Organismus aus (induziert das endogene Interferon nicht, erhöht die Phagozytenaktivität der Blutleukozyten nicht), was dessen Anwendungsgebiet auch begrenzt.
Darstellung der Erfindung 20 Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, durch die Veränderung der Bakterienbiomasse und die Verwendung von neuen Mikroorganismenstämmen ein Arzneimittel zur Prophylaxe und Behandlung von gastrointestinalen Erkrankungen des Landwirtschaftsviehs zu entwickeln, dass eine 25 hohe Wirkungseffektivität besitzt, durch ein breites Wirkungsspektrum in bezug auf die Wachstumshemmung von pathogenen und fakultativ pathogenen Mikroorganismen gekennzeichnet wird, Schutzreaktionen des tierischen Organismus stimuliert, keine Komplikationen hervorruft, keine 30 Nebenwirkung ausübt, in der Anwendung einfach ist, lange aufbewahrt werden kann.
Die Aufgabe wurde durch das erfmdungsgemässe Arzneimittel zur Prophylaxe und Behandlung der gastrointestinalen Erkrankungen des Landwirtschaftsviehs, das die Bak-35 terienbiomasse vorsieht, gelöst, das erfindungsgemäss als Bakterienbiomasse die Biomasse des Stammes Bacillus subtilis TsMPM- Nr. V-2335 und die Biomasse des Stammes Bacillus licheniformis TsMPM Nr. V-2336 enthält. Diese Stämme wurden aus wilden Kulturen durch die natürliche Aus-40 wähl nach den Merkmalen der höchsten und stabilen antagonistischen Aktivität beim Kultivieren auf künstlichen Nährmedien selektioniert.
Ausserdem sind sie im Zentralmuseum für Industriemikroorganismen des Allunions-Forschungsinstituts für Gene-45 tik und Selektion der Industriemikroorganismen VSESOJUZNYNAUCHNO-ISSLEDOVATELSKY INSTITUT GENETIKIISELEKTSIIPROMYSHLEN-NYKH MIKROORGANIZMOV (VNIIGENETIKA) USSR, Moscow, Dorozhny prozed, 1 hinterlegt. Das Hinter-50 legungsdatum ist der 22. Mai 1981. Das Arzneimittel enthält auch einen Füllstoff beim folgenden Verhältnis der Ausgangskomponenten in Masse%:
Biomasse des Stammes Bacillus subtilis TsMPM Nr. V-2335, die 150 bis 55 200 Milliarden Mikrobenzellen je 1 ml enthält, 45—60
Biomasse des Stammes Bacillus licheniformis TsMPM Nr. V-2336, die 150 bis 200 Milliarden Mikrobenzellen je 6o 1 ml enthält, 15—20
Füllstoff alles übrige.
Die Effektivität der Wirkung des erfindungsgemässen Arzneimittels wird durch die Verwendung der genannten Stämme gesichert.
65 Der Stamm Bacillus subtilis TsMPM Nr. V-2335 wird durch die Eigenschaft gekennzeichnet, eine bestimmte Zeit in verschiedenen Abschnitten des Verdauungskanals der Tiere aufrechterhalten zu werden, besitzt eine antagonistische Wir
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kung in bezug auf pathogene und faktultativ pathogene Bakterien (Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei, Salmonella Weslaco, Salmonella typhimurium, Salmonella stenley, Salmonella newport, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris und andere), stimuliert Phagozytenaktivität der Blutleukozyten, erhöht die Induktion des endogenen Interferons im tierischen Organismus, beeinflusst die normale Mikroflora nicht.
Der Stamm Bacillus licheniformis TsMPM Nr. V-2336 wird durch die Eigenschaft gekennzeichnet, eine bestimmte Zeit in verschiedenen Abschnitten des Verdauungskanals der Tiere aufrechterhalten zu werden, besitzt eine antagonistische Wirkung in bezug auf pathogene Bakterien und Pilze (Staphylococcus aureus, Staphylococcus albus, Candida albicans, Aspergillus flânes und andere), stimuliert Phagozytenaktivität der Blutleukozyten der Tiere, beeinflusst die normale Mikroflora nicht, wird durch die fermentative Aktivität gekennzeichnet, die zu den Verdauungsprozessen beiträgt.
Als Füllstoff enthält das erfmdungsgemässe Arzneimittel vorzugsweise ein Gemisch aus dem Blutserum des Rindviehs oder Gelatine mit Saccharose oder Glukose.
Die Verwendung des Blutserums vom Rindvieh oder der Gelatine trägt zur Stabilisierung biologischer Eigenschaften der Kulturen bei, die zum Arzneimittel gehören. Die Verwendung von Saccharose oder Glukose bewirkt optimale Bedingungen der Lyophilisierung bei der Herstellung des Arzneimittels, indem diese biologische und physikalische Eigenschaften bei der Aufbewahrung und eine gute Mischbarkeit mit dem Lösungsmittel des Präparats während seiner Anwendung aufrechterhält.
Bester Weg zur Ausführung der Erfindung
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel besteht aus der Biomasse der genannten neuen Stämme. Die Stämme Bacillus subtilis TsMPM Nr. V-2335 und Bacillus licheniformis TsMPM Nr. V-2336 sind im Zentralmuseum für Industriemikroorganismen des Allunions-Forschungsinstituts für Genetik und Selektion der Industriemikroorganismen hinterlegt worden. Der Stamm Bacillus subtilis TsMPM Nr. V-2335 wurde aus wilden Kulturen isoliert und im Pro-zess der Untersuchung seiner natürlichen Veränderlichkeit bei der Kultivierung auf künstlichen Nährmedien durch die Auswahl der Varianten selektioniert, die durch die höchste und gleichzeitig stabile (im Laufe von mindestens 50 Passagen) antagonistische Aktivität gekennzeichnet werden.
Der Stamm hat folgende kulturell-morphologische und physiologisch-biochemische Besonderheiten: die Zellen sind von stäbchenartiger Form, im Präparat der «zerdrückte»
oder «hängende» Tropfen beweglich, grampositiv, produzieren Katalase; unter aeroben Bedingungen bildet der Stamm Sporen, die in der Zelle zentral angeordnet sind. Die Kultur wächst reichlich auf den üblich gebräuchlichen Nährmedien (Fleisch-Peptonagar, Würzeagar, Medium nach Gromyko, Kartoffelagar). Auf dem Fleisch-Petonagar bildet Kolonien, die eine unregelmässige Form mit faltiger matter Oberfläche von weissem oder weisslich-cremefarbenem Ton mit zerschnittenen zackigen Rändern haben. Die Kolonien können auch rund, glatt mit glänzender Oberfläche und ebenen Rändern sein. Die beiden Kolonienarten lassen sich vom Agar mit der Öse abnehmen. Beim Wachstum auf der Fleisch-Peptonbouillon bildet die Kultur einen Film. In den Abstrichen der 18 Stunden alten Kultur werden gerade grampositive Zellen von stäbchenartiger Form, von 2,0—2,2 x 0,7—0,85 pm Grösse nachgewiesen, die einzeln oder in Form von Ketten angeordnet sind. Bei der Sporenbildung schwellen die Zellen nicht an, nach dem Wachstum auf dem Glukoseagar werden im Protoplasma keine Einschlüsse von Poly-ß-oxybuttersäure nachgewiesen. Die Kultur fermentiert Glukose, Arabinose, Mannit, Xylose unter Säurebildung ohne Gas. Die Reaktion nach Foges-Prosko-wer ist positiv. Die Kultur bildet kein Gas aus NO3 unter 5 anaeroben Bedingungen, produziert Arginindihydrolase nicht. Die Kultur wächst auf dem Nährmedium, das 7% NaCl enthält, hydrolysiert Stärke, Gelatine, verwertet Zitrat, nutzt Propionat nicht aus, besitzt keine Lezithinasenaktivi-tät, ist für Warmblüter nicht pathogen.
10 Der Stamm Bacillus licheniformis TsMPM Nr. V-2336 wurde aus wilden Kulturen isoliert und im Prozess der Untersuchung dessen natürlicher Veränderlichkeit bei der Kultivierung auf künstlichen Nährmedien durch die Auswahl der Varianten selektioniert, die durch die höchste und zu-15 gleich stabile (im Laufe von mehr als 45 Passagen) antagonistische Aktivität gekennzeichnet werden.
Der Stamm hat folgende kulturell-morphologische und physiologisch-biochemische Besonderheiten: die Zellen sind von stäbchenartiger Form, im Präparat der «zerdrückte» 20 oder «hängende» Tropfen beweglich, von 2,4 — 2,7 x 0,5 —0,75 um Grösse, hauptsächlich in Form von Ketten angeordnet. Die Sporen sind oval, in der Zelle zentral angeordnet, quellen die Zelle nicht auf. Nach dem Wachstum auf dem Glukoseagar werden im Protoplasma 25 keine Globula nachgewiesen.
Auf dem Fleisch-Peptonagar haben die Kolonien eine trübe grobe Oberfläche, sind undurchsichtig. Sie können auch eine glänzende glatte Oberfläche aufweisen. Die beiden Kolonienarten haften an Agar dicht an und lassen sich mit 30 der Öse schwer abnehmen. Nicht selten wird auf der Oberfläche Schleim nachgewiesen.
Die Kolonien alter Kulturen können eine dunkelbraune Farbe bekommen. Auf dem Fleisch-Peptonagar wird ein faltiger Film manchmal mit cremefarbener Schattierung gebil-35 det. Die Kultur bildet Katalase. Wird durch Fähigkeit gekennzeichnet, auf dem Agar unter anaeroben Bedingungen zu wachsen. Weist eine positive Reaktion nach Foges-Proskower auf, wächst auf einem Nährmedium, das 7%
NaCl enthält, hydrolysiert Stärke, Kasein, hydrolysiert 40 Harnstoff nicht. Verdünnt Gelatine langsam. Beim Wachstum auf der Fleisch-Peptonbouillon bildet Ammoniak, bildet kein Indol, keinen Schwefelwasserstoff. Fermentiert Glukose, Laktose, Mannit unter Säurebildung. Reduziert Nitrate, bildet unter anaeroben Bedingungen Gas aus Nitraten. 45 Die Kultur besitzt keine Koagulasen-, Hyaluronidasen- und Lezithinasenaktivität, ist für Warmblüter nicht pathogen.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel stellt eine poröse kristallisierte trockene wasserunlösliche Masse von hellbraunem Ton dar, bildet in Wasser und Milch eine homogene be-50 ständige Suspension. Der Masseanteil von Wasser beträgt höchstens 5%. Das Präparat wird in Glasampullen mit einem Gehalt an Trockensubstanz von 250 mg (300 bis 400 Mrd Mikrobenzellen) oder in Glasflaschen mit einem Gehalt an Trockensubstanz von 500 mg (600 bis 800 Mrd. 55 Mikrobenzellen) hergestellt.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel kann als Mittel zur Prophylaxe oder Behandlung von akuten gatrointestinalen Erkrankungen des landwirtschaftlichen Jungviehs angewendet werden (Dysbakteriosis, Kollbakteriosis, Salmonellosis, 60 verschiedene andere aktive gastrointestinale Erkrankungen des landwirtschaftlichen Viehs, die durch pathogene und fakultativ pathogene Mikroorganismen hervorgerufen werden).
Das Verfahren zur Anwendung des Arzneimittels zwecks 65 Prophylaxe besteht in folgendem: der Ampulleninhalt, in welchen 300 bis 400 Mrd. lebensfähige Mikrobenzellen enthalten sind, wird in 11 gekochter und auf eine Temperatur von 25 bis 30 "C abgekühlter Milch oder gekochtem und auf
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eine Temperatur von 25 bis 30 °C abgekühltem Wasser vermischt und 200 ml Gemisch werden dem neugeborenen Vieh vor der Fütterung mit Kolostralmilch, jedoch spätestens 1 bis 2 Stunden nach der Geburt gegeben; nachher wiederholt man die Prozedur nach 24 und 48 Stunden.
Das Verfahren zur Anwendung des Arzneimittels zum therapeutischen Zweck besteht in folgendem: der Ampulleninhalt, in welchem 300 bis 400 Mrd. lebensfähige Mikrobenzellen enthalten sind, wird in 11 gekochter und auf eine Temperatur von 25 bis 30 °C abgekühlter Milch oder gekochtem und auf eine Temperatur von 20 bis 30 °C abgekühltem Wasser vermischt und je 200 ml Gemisch werden dem kranken Vieh 2 bis 3mal täglich bis zur Genesung gegeben.
Die Anwendung des erfindungsgemässen Arzneimittels zum therapeutischen Ziel schliesst die Verordnung den Tieren anderer Mittel der pathogenetischen Therapie ausser der peroralen Einführung von Antibiotika nicht aus. In den empfohlenen Dosen ruft es keine Komplikationen hervor und übt keine Nebenwirkungen aus. Es gibt keine Kontraindikationen zur Anwendung des erfindungsgemässen Arzneimittels. Die Verwendung des Arzneimittels in der Veterinären Praxis verlangt keine Sicherheitsmassnahmen.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel wurde zwecks Prophylaxe und Behandlung der gastrointestinalen Erkrankungen des landwirtschaftlichen Jungviehs untersucht. Zum prophylaktischen Ziel wurde das Arzneimittel bei 328 neugeborenen Kälbern verwendet. Die Verwendung des erfindungsgemässen Arzneimittels wurde folgenderweise verwirklicht. Der Ampulleninhalt (300 bis 400 Mrd. Mikrobenzellen) wurde in 11 gekochter und auf eine Temperatur von 25 bis 30 °C abgekühlter Milch oder gekochtem und auf eine Temperatur von 20 bis 30 °C abgekühltem Wasser vermischt und den Tieren individuelll in den ersten 2 bis 3 Stunden nach der Geburt zu je 200 ml, nachher wiederholt am zweiten und dritten Tag ebenso zu je 200 ml gegeben. In einzelnen Fällen wurde das Arzneimittel auch am 4. bis zum 7. Tag gegeben. Parallel wurde der Versuch an Kontrollgruppe der Tiere (185 Köpfe) durchgeführt, wo allgemein übliche prophylaktische Massnahmen getroffen wurden. Die Kälber wurden innerhalb von einem Monat beobachtet. Die Tiere wurden am Geburtstag und 30 Tage nach der Geburt gewogen.
Die Ergebnisse der Untersuchung des erfindungsgemässen Arzneimittels zeigten, dass aus 328 neugeborenen Kälbern, die das angebotene Arzneimittel erhielten, 19 davon die Störungen des Magendarmkanals aufwiesen. In der Kontrollgruppe erkrankten von 185 123 Tiere, 4 davon starben. Auf diese Weise wurde die Morbidität dank der Anwendung des angebotenen Arzneimittels um das lOfache herabgesetzt.
Zum therapeutischen Ziel wurde das erfmdungsgemässe Arzneimittel an 284 Kälbern mit verschiedenen gastrointestinalen Erkrankungen angewendet, die durch enteropathoge-ne Stämme von Kolibakterium, durch Staphylokokkus, Proteus, Klebsiella, Salmonella induziert wurden. Das erfmdungsgemässe Arzneimittel wurde folgenderweise verwendet. Der Ampulleninhalt (300 bis 400 Mrd. Mikrobenzellen) wurde in 11 gekochter und auf eine Temperatur von 25 bis 30 °C abgekühlter Milch oder gekochtem und auf eine Temperatur von 25 bis 30 °C abgekühltem Wasser vermischt und den Tieren bis zur Genesung (gewöhnlich innerhalb von 4 bis 5 Tagen) gegeben. Im Ergebnis der Anwendung des angebotenen Arzneimittels zum therapeutischen Ziel überlebten 279 von 284 Tieren. In den Kontrollgruppen aus 134 Tieren, die mit Antibiotika, Chemotherapeutika, Gräserdekokten und anderen Methoden behandelt wurden, gingen 18 Tiere zugrunde.
Somit ist das Überleben der Tiere unter Ausnutzung des
Arzneimittels um 12% höher, als unter Ausnutzung der allgemein üblichen Massnahmen.
Auf Grund der durchgeführten Untersuchungen wies das erfmdungsgemässe Arzneimittel eine hohe therapeutisch-s prophylaktische Effektivität auf. Das Arzneimittel wird durch ein hohes antagonistisches Wirkungsspektrum in bezug auf verschiedene Arten der Mikroorganismen — der Erreger von gastrointestinalen Erkrankungen des Viehs gekennzeichnet. Das Arzneimittel trägt zur Erhöhung der io Schutzreaktionen des tierischen Organismus bei (die Induktion des endogenen Interferons, die Erhöhung der Phagozy-tenaktivität der Blutleukozyten). Die Anwendung des Arzneimittels ist einfach, es ist unschädlich und ungefährlich, verlangt keine Veränderung der Technologie der Fütterung 15 und Aufzucht des neugeborenen Viehs.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel wird folgenderweise hergestellt.
Die Kulturen des Stammes Bac. subtilis TsMPM Nr. V-2335 und Bac. licheniformis TsMPM Nr. V-2336 wer-20 den vereinzelt innerhalb von 18 Stunden und 12 Tagen auf dem Würzeagar bei einer Temperatur von 28 °C gezüchtet. Die gewachsenen Biomassen der Kulturen werden mit sterilem Leitungswasser abgewaschen und es werden Suspensionen bereitgestellt, die 150 bis 200 Mrd. Mikrobenzellen in 25 1 ml enthalten. Es werden gleiche Volumina der 12 Tage alten und der 18 Stunden alten Kultur Bac. subtilis TsMPM Nr. V-2335 und besonders gleiche Volumina der 12 Tage alten und 18 Stunden alten Kultur Bac. licheniformis TsMPM Nr. V-2336 vereinigt.
30 Nachher wird das Präparat bei folgenden Komponentenverhältnissen in Gew.% hergestellt: die Biomasse des Stammes Bac. subtilis TsMPM Nr. V-2335 45 bis 60; die Biomasse des Stammes Bac. licheniformis TsMPM Nr. V-2336 15 bis 20; der Füllstoff — alles übrige.
35 Als Füllstoff wird ein Gemisch aus Blutserum des Rindviehs oder Gelatine mit Saccharose oder Glukose ausgenutzt.
Das erhaltene Gemisch wird in sterile Ampullen abgefüllt und im Kühlschrank für 24 Stunden bei einer Temperatur 40 von höchstens —20 °C untergebracht. Die Lyophilisierung des Arzneimittels wird innerhalb von mindestens 44 Stunden bei einer Temperatur von —20 °C bis +20 °C durchgeführt. Nach der Lyophilisierung werden die Ampullen zugeschmolzen.
45 Das angebotene Arzneimittel hält die Aktivität bei einer längeren Aufbewahrung innerhalb von mindestens 2 Jahren aufrecht.
Zum besseren Verständnis der vorliegenden Erfindung werden folgende konkrete Varianten der Zusammensetzung so des angebotenen Arzneimittels, die Prüfung dessen Unschädlichkeit und spezifischer Aktivität angeführt.
Beispiel 1.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel folgender Zusam-55 mensetzung in Ma.%:
Biomasse des Stammes Bac. subtilis TsMPMP Nr. V-2335 45
Biomasse des Stammes Bac. licheniformis TsMpM Nr. V-2336 20 60 Blutserum des Rindviehs 32 Saccharose 3
Alle Komponenten werden vermischt, in sterile Ampullen zu je 2 ml abgefüllt, für 24 Stunden bei einer Temperatur von höchstens —20 °C untergebracht und dann innerhalb 65 von mindestens 44 Stunden bei einer Temperatur von —20 bis +20 °C lyophilisiert. Nach der Lyophilisierung werden die Ampullen zugeschmolzen. Es werden die Unschädlichkeit und die spezifische Aktivität des Arzneimittels geprüft.
5
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Die Unschädlichkeitsprüfung wird nach folgendem Test durchgeführt: bei der peroralen Einführung der 10%igen wässrigen Arzneimittellösung mindestens 5 Mäusen von 18 bis 22 g Körpergewicht in einer Menge von 5000 mg pro 1 kg lebendige Masse müssen alle Mäuse am Leben und klinisch gesund während 3 Beobachtungstage bleiben.
Die Prüfung der spezifischen Aktivität wird folgenderweise durchgeführt. Es werden antagonistische Eigenschaften der Assoziation der Mikrobenzellen, die dem Arzneimittel angehören, in bezug auf eine Reihe von Test-Mikroorganismen untersucht (Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, Candida tropicalis).
Um die antagonistische Aktivität zu prüfen, wird die Assoziation der Kulturen, die dem Arzneimittel angehören, auf die Petrischale mit dem Nährmedium Nr. 2 nach Gause strichartig dem Durchmesser entlang ausgesäet und nach 48 Stunden langem Wachstum wird bei einer Temperatur von 37 °C parallel zu der aufgewachsenen Assoziation die Suspension der Test-Mikroorganismen, die 200 Millionen Mi-kronemzellen enthält, strichweise aufgetragen. Nach 18 Stunden langem Wachstum bei einer Temperatur von 37 °C müssen die Hemmungszonen des Wachstums der Test-Kultur mindestens 10 bis 15 mm betragen.
Die Prüfungsergebnisse sind in der Tabelle dargestellt.
Beispiel 2.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel folgender Zusammensetzung in Ma. % :
Biomasse des Stammes Bac. subtilis TsMPM Nr. V-2335 60
Biomasse des Stammes Bac. licheniformis TsMPMP Nr. V-2336 20 5%ige Gelatinelösung 15 Glukose 5
Die Herstellung und die Prüfung des Arzneimittels werden ähnlich mit dem Beispiel 1 durchgeführt. Die Prüfungsergebnisse sind in der Tabelle dargestellt.
Beispiel 3.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel folgender Zusammensetzung in Ma.%:
Biomasse des Stammes Bac. subtilis TsMPM Nr. V-2335 50
Biomasse des Stammes Bac. licheniformis TsMPM Nr. V-2336 15 Blutserum des Rindviehs 32 Saccharose 3
Die Herstellung und die Prüfung des Arzneimittels werden ähnlich mit dem Beispiel 1 durchgeführt. Die Prüfungsergebnisse sind in der Tabelle dargestellt.
Beispiel 4.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel folgender Zusammensetzung in Ma.%:
Biomasse des Stammes Bac. subtilis s TsMPM Nr. V-2335 55 Biomasse des Stammes Bac. licheniformis TsMPM Nr. V-2336 20 5%ige Gelatinelösung 21 Saccharose 4
io Die Herstellung und die Prüfung des Arzneimittels werden ähnlich mit dem Beispiel 1 durchgeführt. Die Prüfungsergebnisse sind in der Tabelle dargestellt.
Beispiel 5.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel folgender Zusam-
ls mensetzung in Ma.%:
Biomasse des Stammes Bac. subtilis TsMPM Nr. V-2335 52 Biomasse des Stammes Bac. licheniformis TsMPM Nr. V-2336 18 20 Blutserum des Rindviehs 25 Glukose 5
Die Herstellung und die Prüfung des Arzneimittels werden ähnlich mit dem Beispiel 1 durchgeführt. Die Prüfungs-ergebnisse sind in der Tabelle dargestellt.
Beispiel 6.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel folgender Zusammensetzung in Ma.%:
Biomasse des Stammes Bac. subtilis
TsMPM Nr. V-2335 58
30
Biomasse des Stammes Bac. licheniformis TsMPM Nr. V-2336 17 Blutserum des Rindviehs 22 Saccharose 3
3S Die Herstellung und die Prüfung des Arzneimittels werden ähnlich mit dem Beispiel 1 durchgeführt. Die Prüfungsergebnisse sind in der Tabelle dargestellt.
Beispiel 7.
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel folgender Zusam-
4o mensetzung in Ma.%:
Biomasse des Stammes Bac. subtilis TsMPM Nr. V-2335 45
Biomasse des Stammes Bac. licheniformis TsMPM Nr. V-2336 15 45 Blutserum des Rindviehs 37 Glukose 3
Die Herstellung und die Prüfung des Arzneimittels werden ähnlich mit dem Beispiel 1 durchgeführt. Die Prüfungsergebnisse sind in der Tabelle dargestellt.
Tabelle. Ergebnisse der Prüfung des erfindungsgemässen Arzneimittels
Präparate des erfindungsgemässen Unschädlichkeit des Antagonistische Aktivität (Ausmass der Hemmungs-
Arzneimittels gemäss Beispielen Arzneimittels Zonen in bezug auf Test-Kulturen in mm)
Salmonella typhimurium
Staphylococcus aureus
Candida tropicalis
1
unschädlich
10
15
12
2
unschädlich
11
16
13
3
unschädlich
11
16
13
4
unschädlich
11
16
13
5
unschädlich
11
16
13
6
unschädlich
11
16
12
7
unschädlich
10
15
12
65
Gewerbliche Verwertbarkeit Erkrankungen des landwirtschaftlichen Jungviehs Verwen-
Das erfmdungsgemässe Arzneimittel kann als Mittel zur dung finden.
Prophylaxe und Behandlung der akuten gastrointestinalen s

Claims (3)

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1. Arzneimittel zur Prophylaxe und Behandlung der ga-strointestinalen Erkrankungen des landwirtschaftlichen Viehs, das die Bakterienbiomasse vorsieht, dadurch gekennzeichnet, dass es als Bakterienbiomasse die Biomasse des Stammes Bacillus subtilis TsMPM Nr. V-2335 und die Biomasse des Stammes Bacillus licheniformis TsMPM
Nr. V-2336 enthält und im Zentralmuseum für Industriemikroorganismen des Allunions-Forschungsinstituts für Genetik und Selektion der Industriemikroorganismen hinterlegt worden sind und einen Füllstoff beim folgenden Verhältnis der Ausgangskomponenten in Masse-% enthält: Biomasse des Stammes Bacillus subtilis TsMPM Nr. V-2335, die 150 bis 200 Mrd.
Mikrobenzellen je 1 ml enthält, 45—60
Biomasse des Stammes Bacillus licheniformis TsMPM Nr. V-2336, die 150 bis 200 Mrd. Mikrobenzellen je 1 ml enthält, 15-20 Füllstoff alles übrige
2. Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass es als Füllstoff ein Gemisch aus dem Blutserum des Rindviehs oder Gelatine mit Saccharose oder Glukose enthält.
2
PATENTANSPRÜCHE
3. Verfahren zur Selektionierung der Stämme Bacillus subtilis TsMPM Nr. V-2335 und Bacillus licheniformis TsMPM Nr. V-2336 für das Arzneimittel nach Anspruch 1 oder 2 durch natürliche Auswahl nach den Merkmalen der höchsten und stabilen antagonistischen Aktivität beim Kultivieren auf künstlichen Nährmedien.
CH4117/88A 1987-02-24 1988-02-24 CH674149A5 (de)

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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69225454T2 (de) * 1991-07-01 1998-10-01 Ahc Inc Bacillus Bakterium und dessen Verwendung
WO1995004539A1 (en) * 1993-08-11 1995-02-16 Ahc Inc. Immunopotentiator and method of immunopotentiating animal with the same
FR2754709B1 (fr) * 1996-10-23 1999-03-05 Sanofi Sa Composition cosmetique contenant un antagoniste des recepteurs du neuropeptide gamma et alpha 2 antagonistes susceptibles d'etre incorpores dans une telle composition
FR2758051B1 (fr) * 1997-01-06 1999-12-17 Cobiotex Procedes d'eradication systematique du portage d'agents pathogenes par des animaux et compositions mises en oeuvre dans ces procedes
WO2012009712A2 (en) 2010-07-16 2012-01-19 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Methods and compositions including spore-forming bacteria for increasing the health of animals
US9107938B2 (en) 2010-09-30 2015-08-18 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Methods of selecting and using therapeutic and prophylactic probiotic cultures to reduce bacterial pathogen loads
WO2014022572A1 (en) 2012-08-01 2014-02-06 Pacific Vet Group-Usa, Inc. Probiotic for amelioration of coccidiosis vaccine reaction

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4138498A (en) * 1976-12-07 1979-02-06 W. R. Grace & Co. Ruminant feed additive
GB2138023A (en) * 1983-03-29 1984-10-17 Mitsui Toatsu Chemicals Bacillus licheniformis used in animal feeds
EP0145798B1 (de) * 1983-12-09 1987-04-01 Miles Kali-Chemie GmbH & Co. KG Biochemisches Werk Bacillus subtilis DSM 2704 und Verfahren zur Herstellung von Alpha-Amylase

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