CN101700367B - 治疗泌尿系统疾病的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗泌尿系统疾病的药物组合物及其组份的检测方法，其中药物组合物的成份为广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根，所述检测方法包括：取药物组合物制成供试品溶液；另取鸡骨草对照药材作为对照药材溶液；吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，加热至斑点清晰。本发明的药物组合物，可用于膀肤湿热，热淋石淋，淋沥涩痛，尿路感染，尿路结石及肾绞痛，且制备工艺及检测工艺成本低，加工容易，减少药物受热时间，适于广泛应用临床治疗中。

Description

治疗泌尿系统疾病的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种治疗泌尿系统疾病的药物组合物及其组份的检测方法。

背景技术

泌尿系统疾病是人类常见疾病，其主要症状有尿频短赤、尿涩灼痛，严重的可出现发热、口渴、腹部疼痛，腰部酸痛，血尿、流脓、大便干结或稀烂。泌尿系统结石属中医学淋证中的石淋。中医学认为由湿热下注，化火灼阴，煎熬尿液，结为砂石，淤积水道而成。辨证以下焦湿热瘀阻的实证为主。治宜清热利湿，通淋排石。故排除水道砂石将成为治疗泌尿系结石的关键。目前对肾、尿路、膀肤结石的西医疗法是手术取石和体外仪器震荡碎石排石法，开刀手术法费用高，病人痛苦且术后复发率高；仪器震荡冲击排石法虽然速度快，疗程短，但设备造价高，不适合小城镇或农村的广大患者。中医则是采用各种排石方剂，其成本较低，但多数民间方剂未经过严格药效学实验和毒性试验，治疗效果也各有差异；对急性肾盂肾炎、膀肤炎、尿道炎及性病引起的疾病目前西医的治疗方法大多采用抗菌素疗法，抗菌素的治疗效果明显，速度快，但对慢性病治疗效果不显著，有的用药太久还会产生对细菌的耐药作用，所以目前中医研究了一些制剂，用以治疗泌尿系统结石和尿路感染疾病，如三金片(胶囊)、金钱通淋口服药、八正合剂、济生肾气丸、复方石韦片等，这些中药制剂对治疗泌尿系统结石和尿路感染等病症有一定的治疗作用，但仍未获得让人满意的效果。

发明内容

本发明正是从现有技术存在的缺陷出发，提供了一种疗效更理想的药物组合物，并且成本低，加工容易，适于广泛应用临床治疗中。

本发明提供的治疗泌尿系统疾病的药物组合物，其中成份为广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根，各成份重量百分比如下：

广金钱草    21～24％

玉米须      12～18％

石韦        9～13％

鸡骨草      8～13％

茯苓        8～12％；

车前草      7～10％

海金沙草    7～10％

白茅根      8～13％

且所述石韦中绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量，不得少于总重量的0.3％，将上述药材按如下制法获得所述药物组合物：

步骤1：取所述茯苓分成两份，其中一份占茯苓总重量百分比为80～90％，另一份占茯苓总重量百分比为10～20％；

步骤2：将占茯苓总重量百分比为80～90％的一份粉碎成细粉；

步骤3：将剩余茯苓及其余七味药材加水煎煮1～3次，每次2～4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.19～1.20(90℃)的清膏；

步骤4：加茯苓细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒。

优选的，其中各成份的最佳重量百分比为：

广金钱草    22.8％

玉米须      15.1％

石韦        11.4％

鸡骨草      11.4％

茯苓        11.4％

车前草      8.25％

海金沙草    8.25％

白茅根      11.4％

且所述石韦中绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量，不得少于总重量的1％。

优选的，其中所述广金钱草主要成分为大豆皂苷I，新西兰牡荆苷-1，新西兰牡荆苷-3，夏弗塔雪轮苷，所述玉米须主要成分为脂肪油，挥发油，生物碱，抗坏血酸，谷甾醇，所述石韦主要成分为绵马三萜，β-谷甾醇，山奈酚，槲皮素，异槲皮苷，三叶豆苷，所述鸡骨草主要成分为三萜类：槐二醇、鸡骨草苷元 A-G.甘草素，所述茯苓主要成分为β-茯苓聚糖，乙酰茯苓酸，茯苓酸，甲壳质，蛋白质，胆碱，所述车前草主要成分为桃叶珊瑚苷、高车前苷、乌苏酸、β-谷甾醇，所述海金沙草主要成分为氨基酸、糖类、黄酮苷和酚类，所述白茅根主要成分为芦竹素、印白毛素、异山柑子萜醇。

优选的，步骤3中加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20(90℃)的清膏。

优选的，步骤3中加水量为药材重量的10～12倍量。

更优选的，步骤3中加水量为药材重量的10倍量。

另外，所述检测方法包括：

取药物组合物10～20g，加乙醚30～70ml，回流提取50～70分钟，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇30～70ml，加热回流1～3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10～30ml，搅拌1～2分钟，滤液浓缩至0.3～0.7ml，作为供试品溶液；

另取鸡骨草对照药材5～15g，加水80～120ml，煎煮50～70分钟，滤过，滤液浓缩至稠膏，加乙醚30～70ml，加热回流0.5～1.5小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇30～70ml，加热回流1～3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10～30ml，加活性炭0.3～0.7g，水浴温热1～3分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮0.3～0.7ml使溶解，作为对照药材溶液；

吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，加热至斑点清晰。

优选的，其中：

取药物组合物15g，加乙醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇50ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮20ml，搅拌1～2分钟，滤液浓缩至0.5ml，作为供试品溶液；

另取鸡骨草对照药材10g，加水100ml，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至稠膏，加乙醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇50ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮20ml，加活性炭0.5g，水浴温热2分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮0.5ml使溶解，作为对照药 材溶液；

吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以1∶1的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点清晰。

另一方面，所述检测方法还包括绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)含量测定的步骤，所述含量测定采用高效液相色谱法测定，测定条件如下：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.5％磷酸溶液(11∶89)为流动相；检测波长为326nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物约1.0g，精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加50ml甲醇回流2小时，滤过，用甲醇约20ml分次洗涤药渣及滤器，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

为充分说明本发明药物组合的疗效原理，现将各组成成份的作用介绍如下：

一、广金钱草：

甘，淡，性凉。归肝、肾、膀胱经。有清热利湿，通淋排石之功效。用于治疗泌尿系志染，泌尿系结石，肾炎水肿，胆囊炎，胆结石。

抗泌尿系结石作用：广金钱草及多种以广金钱草为主药的中成药有显著的防治泌尿系结石作用。如报道金钱草冲剂15g/kg，30g/kg对喂结石形成剂大白鼠肾及膀胱结石的形成有显著预防效果，对已形成结石的大鼠还有显著的治疗作用。

二、玉米须：

甘、平。有利尿泄热，平肝利胆之功效。用于肾炎水肿，高血压，胆结石，糖尿病，吐血衄血的治疗。

1、利尿作用：

玉米须有中等程度的利尿作用，与咖啡碱片用，可增强并延长其利尿作用， 初步认为，其利尿作用的作用部位不在肾脏。

2、其他作用：

玉米须尚有利胆和止血作用。

三、石韦：

甘，苦，微寒。归肺、膀胱经。具有利尿通淋，清热止血之功效。用于热淋、血淋、石淋、小便不通，淋沥涩痛，吐血，衄血，尿血，崩漏，肺热喘咳。

石韦对慢性肾小球肾炎和肾炎具有较好的治疗作用。有实验证实有柄石韦、庐山石韦、石韦对小白鼠和大白鼠均无明显的利尿作用，但在大白鼠实验中发现钠、钾量增加，进一步实验证实，三种石韦对电解质中的钾、钠量有影响。

其他：石韦治疗慢性肾炎有良效。

四、鸡骨草：

甘、凉。有清热解毒，舒肝散瘀之功效。用于黄疸肝炎，胃痛，乳痈，跌打伤瘀疼痛的治疗。

五、茯苓

甘，淡，平。入脾、心、肺经。有渗湿利水，益脾和胃之功效。用于水肿胀满，痰饮咳逆，呕哕，泄泻。

预防胃溃疡：茯苓水浸膏给大鼠口服，可预防轻度胃溃疡的发生，对小鼠也有预防水侵袭所致应激性胃溃疡的效果。

六、车前草

味甘，性寒。归肝、肾、膀胱经。具有清热利尿，凉血，解毒之功，用于治疗热结膀胱，小便不利，淋浊带下，暑湿泻痢，衄血，尿血，肝热目赤。咽喉肿痛，痈肿疮毒。

1.对泌尿系统的影响车前草有一定的利尿作用，可使犬、家兔及人的水分排出增多，并增加尿素、尿酸及氯化钠的排出。车前草乙醇提取物可抑制马肾脏Na⁺、K⁺-ATP酶的活性，并呈剂量依赖性，50％抑制Na⁺、K⁺-ATP酶活性的量IC₅₀为16.0μg/ml^[2]。车前草水提醇沉液以0.5g(生药)/kg给犬静注，显著引起尿量增多，并使输尿管蠕动频率增强，输尿管上段腔内压力升高。压力变化表现为蠕动性、短时(15～70秒)紧张性和长时间(70秒以上)紧张性压力升高。这几方面作用协同，利于输尿管结石的下移，可能为车前草利尿排石的机制之一。

2.另外还用于治疗慢性气管炎、急性扁桃体炎、急性黄疸型肝炎等。

七、海金沙草

甘、寒。清热解毒，利水通淋。治尿路感染，尿路结石，白浊带下，小便不利，肾炎水肿，湿热黄疸，感冒发热，咳嗽，咽喉肿痛，肠炎、痢疾，烫伤，丹毒。

八、白茅根

甘、寒。入肺，胃，小肠经。有凉血，止血，清热，利尿的功效。用于热病烦渴、吐血，小便不利，水肿，黄疸的治疗。

1、利尿作用：实验证明，白茅根水浸剂可使家兔尿量增加。家兔口服白茅根煎剂也有利尿作用，服药5～10天时作用最明显。

2、抗炎作用：实验用小鼠30只，雄性，给药组分别灌胃不同剂量的白茅根煎剂，对照组灌胃等量的生理盐水。每天1次，连续7天，结果表明，白茅根煎剂能明显降低小鼠腹腔毛细血管通透性。

综上所述，广金钱草，性平，味甘淡，微寒，其功效为利水通淋，清热消石，为主药；鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、玉米须清热利湿，通淋排石；石韦、白茅根利水通淋，镇痛止血。

采用本发明的药物组合物，具有广谱抗菌、抑菌作用，有显著的利尿和调节输尿管平滑肌作用。并且还具有清热祛湿、消炎止痛、利尿排石之功效，可用于治疗泌尿系统结石和尿路感染等病症，同时具有利尿作用，使尿液稀释，可以减少晶体形成。对于膀肤湿热、尿路感染、尿路结石、肾绞痛等有良好的辅助治疗作用。

同时，本发明的药物组合物，可用于膀肤湿热，热淋石淋，淋沥涩痛，尿路感染，尿路结石及肾绞痛。对己形成的尿路结石有较好的排石作用，可辅助体外碎石：可做为体外超声波碎石辅助用药，具有明显的镇痛、消炎、利尿、排石作用。尿路感染：抗菌抗炎，对尿路感染之尿频、尿急、尿痛有较好的疗效。

本发明的中药制剂具有抗菌消炎、排石、镇痛、预防结石形成的作用，其作用优于结石通、消石素等对照药，且几乎无毒性。由于该药既可阻止结石形成，又可排石，同时又具镇痛作用。自觉症状及体征明显改善，未见有副作用，且不易复发。

本发明的制备工艺及检测工艺成本低，加工容易，减少药物受热时间，适于广泛应用临床治疗中。

附图说明

图1绿原酸测定的标准曲线图

具体实施方式

下面，给出本发明治疗泌尿系统疾病的药物组合物制备的一些具体实施例。

实施例1

广金钱草 285g      玉米须 188.8g    石韦   142.5g

鸡骨草   142.5g    茯苓   142.5g    车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量15g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例2

广金钱草  285g      玉米须 188.8g    石  韦 187.5g

鸡 骨 草  97.5g     茯  苓 142.5g    车前草 103.1g

海金沙草  103.1g    白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量20g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例3

广金钱草 285g      玉米须 188.8g  石  韦 100g

鸡 骨 草 260g      茯  苓 142.5g  车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量10g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例4

广金钱草 285g      玉米须 188.8g  石  韦 222.5g

鸡 骨 草 62.5g     茯  苓 142.5g  车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量23g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例5

广金钱草 285g      玉米须 188.8g  石  韦 135g

鸡 骨 草 142.5g    茯  苓 150g    车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量14g

[制法]以上八味药，取茯苓130g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、 玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例6

广金钱草 312.5g    玉米须 188.8g    石  韦 115g

鸡 骨 草 142.5g    茯  苓 142.5g    车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量12g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例7

广金钱草 312.5g    玉米须 62.5g   石  韦 268.8g

鸡 骨 草 142.5g    茯  苓 142.5g  车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量28g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例8

广金钱草 162.5g   玉米须 188.8g    石  韦 158.8g

鸡 骨 草 142.5g   茯  苓 142.5g    车前草 125g

海金沙草 87.5g    白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量16g

[制法]以上八味药，取茯苓133g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例9

广金钱草 300g     玉米须 150g    石  韦 142.5g

鸡 骨 草 142.5g   茯  苓 142.5g  车前草 105g

海金沙草 125g     白茅根 142.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量15g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例10

广金钱草 291.3g    玉米须 225g      石  韦 142.5g

鸡 骨 草 100g      茯  苓 142.5g    车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 142.5g

石韦绿原(C₁₆H₁₈O₉)的含量15g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制 粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例11

广金钱草 300g      玉米须 218.8g  石  韦 162.5g

鸡 骨 草 162.5g    茯  苓 100g    车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 100g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含17g

[制法]以上八味药，取茯苓90g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例12

广金钱草 285g      玉米须 223.8g  石  韦 142.5g

鸡 骨 草 142.5g    茯  苓 150g    车前草 103.1g

海金沙草 103.1g    白茅根 100g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量15g

[制法]以上八味药，取茯苓120g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

实施例13

广金钱草 285g      玉米须 188.8g    石  韦 112.5g

鸡 骨 草 142.5g    茯  苓 142.5g    车前草 103.1g

海金沙草 113.1g    白茅根 162.5g

石韦绿原酸(C₁₆H₁₈O₉)的含量11g

[制法]以上八味药，取茯苓95g粉碎成细粉，备用；剩余茯苓与广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、车前草、海金沙草及白茅根七味药合并加水煎煮两次，每次3小时，合并滤液，滤过，滤液浓缩至1.19-1.20(90℃)的浸膏，加茯苓细粉，混合均匀，干燥至干膏，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，制成1000粒，即得。

本发明治疗泌尿系统疾病的药物组合物优选实施方式各组成成份的重量百分比可以如下附表1所示：

附表1：

广金钱草

22.80％

21.00％

24.00％

23.30％

24.00％

22.80％

22.80％

玉米须

15.10％

15.10％

12.00％

18.00％

17.50％

17.90％

15.10％

石韦

11.40％

12.70％

11.40％

11.40％

13.00％

11.40％

11.40％

鸡骨草

11.40％

11.40％

11.40％

8.00％

13.00％

11.40％

11.40％

茯苓

11.40％

11.40％

11.40％

11.40％

8.00％

12.00％

11.40％

车前草

8.25％

10.00％

8.40％

8.25％

8.25％

8.25％

7.00％

海金沙草

8.25％

7.00％

10.00％

8.25％

8.25％

8.25％

7.90％

白茅根

11.40％

11.40％

11.40％

11.40％

8.00％

8.00％

13.00％

另外，结合本发明的治疗泌尿系统疾病的药物组合物，本发明人给出其组份的检测方法，下面给出一些具体实施例，如下：

实施例14

取本品内容物15g，加乙醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇50ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮20ml，搅拌1～2分钟，滤液浓缩至0.5ml，作为供试品溶液。另取鸡骨草对照药材10g，加水100ml，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至稠膏，加乙醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇50ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮20ml，加活性炭0.5g，水浴温热2分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药 典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例15

取药物组合物10g，加乙醚30ml，加热回流50分钟，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10ml，搅拌1～2分钟，滤液浓缩至0.3ml，作为供试品溶液。另取鸡骨草对照药材5g，加水80ml，煎煮50分钟，滤过，滤液浓缩至稠膏，加乙醚30ml，加热回流30分钟，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10ml，加活性炭0.3g，水浴温热1分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮0.3ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例16

取药物组合物20g，加乙醚70ml，加热回流70分钟，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇70ml，加热回流3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮30ml，搅拌1～2分钟，滤液浓缩至0.7ml，作为供试品溶液。另取鸡骨草对照药材15g，加水120ml，煎煮70分钟，滤过，滤液浓缩至稠膏，加乙醚70ml，加热回流1.5小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇70ml，加热回流3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮30ml，加活性炭0.7g，水浴温热3分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮0.7ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点清晰， 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

实施例17

取药物组合物12g，加乙醚40ml，加热回流55分钟，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇40ml，加热回流1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮12ml，搅拌1～2分钟，滤液浓缩至0.4ml，作为供试品溶液。另取鸡骨草对照药材7g，加水90ml，煎煮55分钟，滤过，滤液浓缩至稠膏，加乙醚40ml，加热回流40分钟，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇40ml，加热回流1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮15ml，加活性炭0.4g，水浴温热1.5分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮0.4ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

同时，本发明还提供了一种石韦药材绿原酸含量测定的方法及其测定结果，实施例如下：

1、仪器与试药

美国SSI PC2000型高效液相色谱仪，500型紫外可见检测器；ShimpackC18柱(6.0×150mm)，Anastar色谱工作站；

德国BP211D Sartorius电子天平(十万分之一)；

JL-120型超声波清器；

绿原酸对照品：由中国药品生物制品检定所提供，批号：110753-200212

所用试剂均为分析纯或色谱纯。

2、提取分离方法的选择

根据绿原酸的理化性质，分别采用甲醇超声法和甲醇回流法制备供试品溶液，经注入液相色谱仪测定，结果甲醇超声法所测含量为0.148％，回流法为0.265％，故选择甲醇回流法制备供试液，同时进行了回流时间的跟踪，结果见下 表。

表1  回流提取时间的跟踪

由上述实验结果可知，回流提取4小时即可将绿原酸基本提取完全。

3、供试品溶液的制备

取本品粗粉约0.5g，精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加50ml甲醇回流4小时，滤过，甲醇液水浴挥干，残渣加甲醇溶解并定容于25ml量瓶中，摇匀，即得。

4、对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品2.95mg，置50ml量瓶中，加甲醇超声溶解并定容于刻度，摇匀，即得。

5、色谱条件的选择

采用乙腈-0.5％磷酸溶液(11∶89)为流动相；检测波长为326nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，在此色谱条件下，供试品色谱中绿原酸峰能与其他峰达到基线分离，且峰形较好，与绿原酸对照品峰保留时间一致，相关HPLC色谱图见图5。

6、色谱条件与系统适用性试验

色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.5％磷酸溶液(11∶89)为流动相；检测波长为326nm，流速：1.0ml/min，柱温：30℃

系统适用性试验 精密吸取供试液10μl，注入液相色谱仪，测定，按绿原酸峰计算，理论板数n＝3014，拖尾因子T＝1.037，分离度R＝5.329。

重复性试验 精密吸取绿原酸对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，连续进样5次，计算RSD，结果见下表。

表2  重复性试验

7、标准曲线的制备及线性关系的考察

精密吸取对照品溶液(59μg/ml)2.5、5.0、7.5、10.0、12.5和15μl注入液相色谱仪，测定，以绿原酸量为横坐标，绿原酸峰面积为纵坐标，绘制标准曲线(见图1)，实验数据经线性回归，标准曲线方程为：Y＝2048948.184X-28108.333r＝0.99997(n＝6)，绿原酸对照品量在0.1475μg～0.8850μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系，结果见下表。

表3  标准曲线的制备

8、精密度试验

精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，重复进样5次，结果见下表。

表4  精密度试验

9、稳定性试验

取供试品溶液，在室温下每间隔1小时进样一次，测定峰面积，计算RSD，实验表明绿原酸在所测的4小时内基本稳定，结果见下表。

表5  稳定性试验

10、重现性试验

取同批药材5份，按正文含量测定项下的方法进行测定，结果见下表。

表6  重现性试验

11、加样回收率试验

取已知含量的本品粗粉(含量为0.274％)5份，精密称定，分别精密加入绿原酸对照品适量，按正文含量测定项下的方法测定，结果见下表。

表7  加样回收率试验结果

临床观察疗效：

结石通胶囊是广金钱草、石韦、茯苓、车前草、海金沙等制成的一种中成药，其治疗泌尿系统结石的临床观察疗效；

治疗方案：180例随机分为治疗组130例，口服结石通胶囊(由江西红星药业有限公司生产)，批号：(20060701)，每次5粒，每日3次，口服。对照组50例，口服石淋通片(湛江中承制药有限公司生产)每次5片，每日3次，口服。

疗程及其他。20日为1个疗程，病情无变化，继续观察第二个疗程。治疗期间嘱患者饮水每日1500ml以上，多做跳跃运动。

观察方法：所有观察对象均在治疗前后检查血常规，尿常规、肝、肾功能、B超、腹部平片，观察药物副作用如纳呆、腹胀痛、恶心呕吐、眩晕、头痛等，以及肝、肾功能损害。

疗效标准，治愈：结石排出，症状消失。B超或KUB复查结石消失；好转：症状改善，B超或KUB复查结石缩小或部位下移；无效：症状及复查B超或KUB结石无改变。

结果：

1  2组疗效比较

组别	n	治愈	无效	总有效率％
					治疗组	130	81	35	89.2
对照组	50	26	12	76.0

组效比较，P＜0.05

2  2组症状比较

与对照组比较P＜0.05

2组各部位结石疗效比较

与对照组相比P＜0.05

通过2组临床试验结果比较，结石通胶囊治疗组治愈率62.3％，总有效率89.2％，对照组分别为52.0％、76.0％，2组比较均有显著性差异(P＜0.05)，结石通胶囊，有清热除湿，通淋排石，镇痛止血的显著疗效，同时在抗感染和改善肾功能方面也有显著的疗效。

结石通胶囊毒理学实验如下：

样品来自江西红星药业有限公司，为胶囊，内容物为棕褐色的粉未，每粒0.35g，人体口服推荐量为每日12粒，成人体重按60kg计算，折合剂量0.07g/kg。

小鼠急性毒性试验，采用最大耐受量试验。选用体重为18g～22g的昆明种小鼠20只，雌雄各半。设剂量为40000mg/kg。取结石通胶囊100g加蒸馏水至100ml，取此液24小时内间隔4小时给小鼠经口灌胃2次，每次灌胃体积为0.2ml/10g。首次灌胃前禁食16小时。灌胃后连续观察两周，记录中毒表现及死亡情况。

急性毒性实验结果

结石通胶囊对小鼠急性毒性

根据以上结果，以40000mg/kg剂量的江西红星药业生产的结石通胶囊给两种性别的昆明种小鼠灌胃后未见明显中毒症状，观察14天无死亡。第15天将受试动物处死进行解剖检查、肝、脾、肾、胃、肠、心、肺等主要脏器，未见明显异常改变。对雌、雄昆明种小鼠最大耐受量(MTD)大于40000mg/kg。根据急性毒性分级标准，属无毒。

小鼠精子畸形试验：取体重25g～35g的雄性昆明种小鼠25只，随机分为5组，每组5只，以40mg/kg剂量的环磷酰胺为阳性对照，蒸馏水为阴性对照。试验组3个剂量分别为10000mg/kg、5000mg/kg、2500mg/kg、分别取结石通胶囊50.0g、25g、12.5g加蒸馏水至100ml，配制相应剂量的受试液给小鼠灌胃(0.20ml/10g)，每日灌胃一次，连续3天，于未次灌胃后的第30天处死动物，取副睾涂片，伊红染色，每只动物计数1000个结构完整的精子，计算畸变精子发生率，按x²检验统计处理。

小鼠精子畸形试验结果

结石通胶囊对小鼠精子畸形发生率的影响

组别	动物数(只)	受检精子数  (个)	精子畸形数  (个)	精子畸形率  (％)
					高剂量	5	5000	101	2.02
中剂量	5	5000	98	1.96
					低剂量	5	5000	108	2.16
阴性对照	5	5000	94	1.88
					阳性对照	5	5000	504	10.08

由表可见，样品对小鼠精子畸形发生率未产生明显改变，样品各剂量组与阴性对照组比较差异无显著性(P＞0.05)而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组比较差异有显著性(P＜0.05)结石通胶囊对小鼠精子不产生畸变作用。

30天喂养试验：剂量组选择与受试物给予方式：取SD大鼠80只，雌雄各半，雄鼠体重为85.31±6.95g，雌鼠83.04±6.83g。将实验动物随机分为四组，即对照组及三个受试物组，每组20只，雌雄各半。设结石通胶囊低、中、高剂量分别为3.00g/kg、4.50g/kg、6.00g/kg，低、中、高剂量受试物配制时分别取结石通胶囊60g、90g、120g加蒸馏水定容至200ml，对照组给予等体积蒸馏水每日灌胃一次，灌胃体积为1.0ml/100g，连续30天。

实验方法，实验期所有动物给予普通饲料，单笼饲养，自由摄食饮水，每天观察动物活动和生长情况，记录给食量和剩食量，每周称一次体重，计算每周进食量，食物利用率及总的食物利用率，实验未，禁食14小时，采血测定血红蛋白，红细胞压积，进行红细胞、白细胞、血小板计数及白细胞分类，分离血清后测定总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肝酐、胆固醇、甘油三脂、血糖、采血后处死动物解剖，取肝、肾、脾、胃、十二指肠、卵巢作病切片。

实验结果，30天喂养期间，各组动物生长发育良好，无异常行为和中毒症状无死亡对大鼠各项指标未产生明显毒副作用。

结石通胶囊的药学试验如下

现代药理研究发现，广金钱草可使尿中的结石溶解，其多糖组分可抑制水-草酸钙结晶增长，减少晶体聚集的程度，在清醒家兔的慢性实验表明，茯苓具利尿作用，以灰分作为对照，证明其利尿作用是钾盐以外的其他成分的作用，与影响肾小管对Na⁺的重吸收有关，车前草的乙醇提取液具有剂量依赖性地抑制肾脏Na⁺-K⁺-ATP酶活性而产生利尿作用，海金沙可通过使输尿管蠕动增加和使输尿管上段腔内压力增高，有利于结石下移而产生排石作用，动物实验表明海金沙也有利尿作用，由此提示由上药物作为主要成份的结石通胶囊具有排石利尿作用。

通过药效实验观察结石通胶囊的利尿和排石作用

利尿实验

药品：结石通胶囊(江西红星药业有限公司)，氢氯噻嗪片(江西丹阳市药业有限公司)，乙二醇，氯化铵，均系广州化学试剂厂生产

方法：筛选利尿实验合格大鼠28只，体重150～200g，禁食给水一天后，随机分成4组，各组鼠均按2ml/100g体重腹腔注射生理盐水，并轻压腹部使膀胱排空，阳性对照组给予0.05％的氢氯噻嗪水溶液，阴性对照组给予等容量的生理盐水，高剂量组低剂量组分别给予9％和3％的结石通水溶液，各组均按2ml/100灌胃，给药后立即将大鼠放在代谢笼内。1小时后收集各组动物尿量和总尿量进行组间比较，并作统计学处理。

结石通胶囊对小鼠的利尿作用(X±S，n＝7)

与生理盐水组比较1)P＜0.05  2)P＜0.01

抑制肾结石形成试验

动物模型制备及用药：大鼠54只，随机分为3组，每天给大鼠自由饮用含乙二醇和氨化铵的水液(每1000ml水溶液中含有1.6g乙二醇和0.8g氯化铵)连续喂养30天，以形成结石。每天给大鼠灌胃1次，灌胃量为2ml/100g体重，实验分组如下：(1)对照组：生理盐水组；(2)低浓度药物组：2％结石通水溶液；(3)高浓度药物组：6％结石通水溶液

检测指标及方法：颈椎脱臼处死大鼠，剖腹取出双肾，称重，纵向剖开肾脏，在解剖显微镜下观察有无明显结晶沉淀物及游离结石或钙化斑作为判断结石标准。根据结石形成的多少及肾状损伤程度分在5级“(-)”，肾皮质、髓质及肾乳头均可见结石和结晶沉淀物，肾脏外形无异常变化“(+)”肾皮质、髓质及肾盂可见少量散在结晶沉淀物；肾皮质、髓质及肾盂可见结晶沉淀物或有小的游离结晶“(+++)”；肾部而可见较多结晶、并有游离结石形成，肾乳头可见钙化斑，肾乳头扩张积水；“++++”；肾皮质、髓质可见大量结晶，有游离结石形成，肾乳头可见钙化斑，肾盂明显扩张积水，所得计数资料采用卡方检验进行统计分析。

结石通对大鼠肾结石形成的影响

结果发现给药组大鼠肾结石的形成率均显著降低，而且随着药物浓度的升高效果更为明显。

实验表明：3％结石通水溶液(相当于临床用量)有明显的利尿作用，可使大鼠总尿量增加约50％，且作用持续时间较长，增加结石通的用量(3倍量)只在用药后1～2小时间出现利尿高峰，总尿量与3％浓度组比较并无显著性差异， 可能是体液量有限，当排尿达到一定程度时仅仅通过增加结石通的用量即又可以增强利尿效果。与氢氯噻嗪对照组比较，结石通的利尿作用呈现温和、持久的特点，在排石实验中给药组大鼠肾结石的形成率均显著降低，且随着药物的浓度的升高效果更为明显。

对大鼠异性膀胱结石的影响试验

取雄性大鼠60只，体重为200～250g，随机分成3组，每只鼠均作异物性膀胱结石造型：IP注射戍巴比妥麻醉，剖腹将称重后的消毒木棒置入膀胱内并缝合膀胱切口，关腹时腹腔注射青霉素钠8万U抗感染，术后正常喂养。选型后4周开始ig给药：实验分组如下，三个组给受试药物(江西红星药业生产)，阴性对照组给结石通片(广西梧州制药股份有限公司生产)，模型对照组给蒸馏水，每天一次，剂量受试三组为0.60g/kg，1.2g/kg，2.4g/kg，阴性对照组为1.2g/kg，给药体积均为10ml/kg，连续30天。未次给药后次日处死大鼠，取出置入的木棒，经60℃24小时烘干后称重，减去原来棒重即为膀胱异物性结石重量与常水组比较，作组间七检验，见表。

对大鼠异性膀胱结石的影响

组别	剂量(g/kg)	N	结石重量(mg.x±  s)
				常水	10ml	12	2.52±0.67
结石通	1.2	12	1.66±0.41*
				受试药	0.6	12	2.44±0.71

受试药	1.2	12	1.69±0.81
				受试药	2.4	12	1.57±0.32*

实验结果发现：大剂量受试药物组形成结石的重量明显小于常水组，差异有显著意义，提示本品对异物诱发大鼠膀胱结石有一定的抑制作用。

人体尿路结石(体外溶石)试验

将已称重大小基本一致的人体尿路结石1粒分装具塞试管中，共40管，将受试药物配制成二种浓度的药液，别配制结石通片对照液，并设去离子水对照组，每种浓度的药液各设10管，受试药液浓度为88.0％，20.0％，结石通浓度迷100％，每管按结石重量加入一定量的药液(g∶ml＝1∶30)置37℃恒温水溶中，每次振摇1次(颠倒数回)。浸泡7天后取出结石，经60℃5h烘干后称重，计算溶石率，浸泡液经离心后取上清液于半自动生化测定仪测定钙含量，与无离子水组比较作组间七检验：

组别	浓度(％)	浸泡前重量  (mg)	浸泡后钙含量  (mg)	溶石率
					受试药物	88	79	1.172	2.5
受试药物	20	81	0.645	2.1
					结石通	100	84	1.204	1.9
水	-	82	0.533	3.7

实验结果表明低浓度受试药物的溶石率与去离子水相近，差异无显著意义，但高浓度浸泡液的钙含量大于去离子水，差异有显著意义，本品在高浓度时对人体尿路结石有一定的溶石作用。

结石通胶囊对醋酸所致小鼠疼痛的影响

取小鼠50只，随机分成5组。给药组分别按2.4g/kg、1.2g/kg、0.6g/kg剂量ig给药，阳性对照组给罗通定，空白对照组给常水，每日ig给药1次，给药体积为20ml/kg，连续给药3天，末次给药后1n各小鼠均ip注射0.7％醋酸10ml/kg，并记录各小鼠ip注射醋酸后15min内的扭体数，与常水组比较作组间t检验。

对小鼠醋酸致痛的影响结果

组别	n	剂量g/kg	15分钟物体况  数(x±s)	抑制率(％)
					对照组	10	-	42.9±8.9

罗通定组	10	80mg	21.6±6.9xxx	49.7
					受药组	10	2.4	27.0±5.9xxx	37.0
受药组	10	1.2	30.7±7.7xx	28.4
					受药组	10	0.6	35.9±5.3x	15.5

结果可见，结石通对醋酸所致小鼠酸痛有明显反应。

对小鼠热板块致痛的影响。

小鼠50只均为雄性，随机分为5组，第一组给予ig注射常水，第二组给罗通定，其余三组均分别按2.4g/kg、1.2g/kg、0.6g/kgig注射，给药体积均为20ml/kg，分别给药后1、2、3小时同法测定各鼠的痛阀值，以药后值减去基础值之差作为药后痛阀增值，与常水组比较，做组间t检验

对小鼠热所致痛的影响结果

实验结果表明：受试药物大剂量组给药3小时痛阀增值大于常水组，差异有显著意义，提示本品对小鼠热所致痛有一定的镇痛阀作用。

对二甲基引起小鼠的耳肿胀的作用。

取小鼠40只，体重20g～25g，雌雄各半，随机分4组，每组10只，第一组为受试药2.4g/kg，第二组试药1.2g/kg，第三组为阳性对照阿斯匹林，每天灌胃给药1次，连续3d，最后1次给药后1小时，在每只小鼠左耳均匀涂二甲基0.04ml致炎，30min后处死动物，沿耳廓剪下小鼠双耳，用6mm打孔器分别在左右耳廓相同部位打孔，打下的两侧耳片分别称重，计算肿胀值和肿胀抑制率，将肿胀值用t值和t’值法检验，并进行组间比较。

肿胀抑制率：1(％)＝(EC-EC)/EC×100％Et：给药组平均肿胀值，Ec对照组平均肿胀率

对二甲基引起小鼠耳肿胀作用的结果

组别	剂量g/kg	肿膜值(mg)	肿胀抑制率(％)
				对照组		20.4±4.7
受药组	2.4	14.8±5.3*	27.5
				受药组	1.2	17.6±3.9	13.7
阿斯匹林	0.2	14.5±5.5*	28.9

经与对照组比较，受试药物大剂量2.4g/kg和阿斯匹林0.2g/kg均能明显抑制由二甲基引起的小鼠耳肿胀。

对小鼠琼脂肉芽肿作用

取200g±20g大鼠40只，雌雄各半，随机分4组，每组10只，在无菌操作下，进行背中线皮下注射，每鼠2％琼脂溶液2ml，然后分组灌胃给药，第一组为生理盐水，第2、3组为受试药2.4g/kg，1.2g/kg，第四组为阿斯匹林0.2g/kg，各组均每日灌胃给药1次，连续给药8天后，处死动物，剥离肉芽肿，用电子秤称取肉芽肿湿重。结果用t值法和t’值法检验并建行组间比较。

对小鼠琼脂肉芽作用试验结果

组别	剂量(g/kg)	琼脂肉芽肿湿重(g)
			对照组		1.99±0.32
受试药组	2.4	1.45±0.56x

受试药组	1.2	1.59±0.43x
			受试药组	0.2	14.2±0.50xx

与对照组比较p＜0.05，p＜0.01

体外抑菌试验，本试验采用试管稀释法，实验结果受试药物对乙型溶血性链球菌，肺炎双球菌的最低抑菌浓度(MIC)为25mg/ml，对金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌的最低抑菌浓度(MIC)为50mg/ml。

Claims (7)

1.一种治疗泌尿系统疾病的药物组合物，其中所述治疗泌尿系统疾病的药物组合物的原料药材为广金钱草、玉米须、石韦、鸡骨草、茯苓、车前草、海金沙草、白茅根，各成份重量百分比如下：

广金钱草   21～24％

玉米须     12～18％

石韦       9～13％

鸡骨草     8～13％

茯苓       8～12％；

车前草     7～10％

海金沙草   7～10％

白茅根     8～13％

且所述石韦中绿原酸的含量，不得少于总重量的1％，将上述药材按如下制法获得所述药物组合物：

步骤1：取所述茯苓分成两份，其中一份占茯苓总重量百分比为80～90％，另一份占茯苓总重量百分比为10～20％；

步骤2：将占茯苓总重量百分比为80～90％的一份粉碎成细粉；

步骤3：将剩余茯苓及其余七味药材加水煎煮1～3次，每次2～4小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成90℃的相对密度为1.19～1.20的清膏；

步骤4：加茯苓细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，加适量辅料，混匀，制粒，干燥，整粒；

所述治疗泌尿系统疾病的药物组合物组份的检测方法包括：

取药物组合物10～20g，加乙醚30～70ml，回流提取50～70分钟，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇30～70ml，加热回流1～3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10～30ml，搅拌1～2分钟，滤液浓缩至0.3～0.7ml，作为供试品溶液；

另取鸡骨草对照药材5～15g，加水80～120ml，煎煮50～70分钟，滤过，滤液浓缩至稠膏，加乙醚30～70ml，加热回流0.5～1.5小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇30～70ml，加热回流1～3小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮10～30ml，加活性炭0.3～0.7g，水浴温热1～3分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮0.3～0.7ml使溶解，作为对照药材溶液；

吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，加热至斑点清晰，

所述检测方法还包括绿原酸含量测定的步骤，所述含量测定采用高效液相色谱法测定，测定条件如下：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；11∶89的乙腈-0.5％磷酸溶液为流动相；检测波长为326nm，理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物约1.0g，精密称定，置100ml圆底烧瓶中，加50ml甲醇回流2小时，滤过，用甲醇约20ml分次洗涤药渣及滤器，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解并转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中各药材的重量百分比为：

广金钱草  22.8％

玉米须    15.1％

石韦      11.4％

鸡骨草    11.4％

茯苓      11.4％

车前草    8.25％

海金沙草  8.25％

白茅根    11.4％。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述广金钱草主要成分为大豆皂苷I，新西兰牡荆苷-1，新西兰牡荆苷-3，夏弗塔雪轮苷，所述玉米须主要成分为脂肪油，挥发油，生物碱，抗坏血酸，谷甾醇，所述石韦主要成分为绵马三萜，β-谷甾醇，山奈酚，槲皮素，异槲皮苷，三叶豆苷，所述鸡骨草主要成分为三萜类：槐二醇、鸡骨草苷元A-G.甘草素，所述茯苓主要成分为β-茯苓聚糖，乙酰茯苓酸，茯苓酸，甲壳质，蛋白质，胆碱，所述车前草主要成分为桃叶珊瑚苷、高车前苷、乌苏酸、β-谷甾醇，所述海金沙草主要成分为氨基酸、糖类、黄酮苷和酚类，所述白茅根主要成分为芦竹素、印白毛素、异山柑子萜醇。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，步骤3中加水煎煮二次，每次3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成90℃的相对密度为1.20的清膏。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，步骤3中加水量为药材重量的10～12倍量。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，步骤3中加水量为药材重量的10倍量。

7.如权利要求1所述的药物组合物，其中：

取药物组合物15g，加乙醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇50ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮20ml，搅拌1～2分钟，滤液浓缩至0.5ml，作为供试品溶液；

另取鸡骨草对照药材10g，加水100ml，煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至稠膏，加乙醚50ml，加热回流1小时，滤过，滤液弃去，药渣挥尽乙醚，加甲醇50ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮20ml，加活性炭0.5g，水浴温热2分钟，趁热滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮0.5ml使溶解，作为对照药材溶液；

吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以1∶1的正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点清晰。

Images