CN103242517A - 多功能线性-树状嵌段共聚物的制备及其在药剂学中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及高分子化学领域和药物制剂领域，具体涉及一种多功能的线性-树状嵌段共聚物的制备及其在药剂学中的应用。本发明多功能线性-树状嵌段共聚物具有两亲性，能显著增溶难溶性药物，提高药物稳定性和体内生物利用度，尤其能包载难溶性或水溶性药物，自组装形成纳米胶束的优势。修饰的聚酰胺胺结构具有环境响应的电荷反转性质，使胶束在体内循环中表面携带负电荷，到达肿瘤区域后响应弱酸性环境而发生电荷反转为正电荷，更有利于纳米胶束的细胞摄取和胞内递药，提高抗肿瘤药物的被动靶向性，降低药物毒副作用，为新型药物靶向给药研究提供了新思路。

Description

多功能线性-树状嵌段共聚物的制备及其在药剂学中的应用

技术领域

本发明涉及高分子化学领域和药物制剂领域，具体涉及一种两亲性线性半聚酰胺胺树状与聚酯嵌段共聚物的制备方法及在药剂学中的应用。本发明还涉及该线性-树状嵌段共聚物作为难溶性药物增溶剂的新用途，尤其多功能线性-树状嵌段共聚物及其组合物在抗癌药物靶向纳米递药系统的应用。

背景技术

功能性药用高分子材料已成为药物传递系统研究的热点领域。过去几十年，大量功能聚合物被开发和研究，包括各类表面活性剂、线性聚合物、接枝聚合物等。然而功能性聚合物仍存在临界胶束浓度偏高、形成胶束化能力弱和细胞毒性高等诸多弊端；对难溶性药物增溶范围和能力有限，载药胶束的稳定性、靶向性和生物相容性差等问题。

树状聚合物是一类高度对称的多支化高分子材料，具有精确可控的分子量，良好的单分散性和独特的“空穴”结构，能够通过非共价作用吸附或包裹药物、siRNA或诊断剂等活性分子。树状聚合物表面含有丰富的官能团残基，有利结构修饰而赋予其长循环和靶向作用，因此，期望开发多功能性或智能型药物高分子载体材料(Esfand，R.，Tomalia，D.A.，Drug Discov.Today，2001，6(8)：427-436)。由于树状聚合物本身也存在一些缺陷，如聚合物内部空腔尺寸有限，对客体结构和分子量选择性高；整代聚酰胺胺树状分子具有较大溶血性和细胞毒性，不能用于注射给药(Jansen，J.F.G.A.，Meijer，E.W.，de Brabander-van Den Berg，E.M.M.，J.Am.Chem.Soc.，1995，117(15)：4417-4418.Jevprasesphant，R.，Penny，J.，Jalal，R.，et al，Int.J.Pharm.，2003，252(1-2)：263-266.)；聚合物形成的单分子胶束粒径小于10nm，很容易被肾脏代谢而引起肾脏毒性等(Kukowska-Latallo，J.F.，Candido，K.A.，Cao，Z.，Cancer Res.，2005，65(12)：5317-5324)。为解决上述问题，需对现有树状聚合物进行结构修饰和改造。

目前报道的线性-树状嵌段共聚物多是由亲水性线性材料(如聚氧丙烯，PPO)和相对疏水的树状材料(如聚酰胺胺，PAMAM)组成(Nguyen，P.M.，Hammond，P.T.，Langmuir，2006，22(18)：7825-7832)。由于树状材料本身具有亲水性，整个材料疏水性弱，形成胶束的所需浓度高，不适于包载疏水性药物分子。而将树状材料作为疏水链段，使其位于胶束内层，也不利于发挥树状材料在功能化和细胞摄取方面的优势(Kitchens，K.M.，Foraker，A.B.，Kolhatkar，R.B.，Pharm.Res，2007，24(11)，2138-2145)。

线性-树状聚合物是近年来开发的一类新型聚合物。该聚合物包括线性聚合物链段和树状聚合物两部分。该类聚合物整合了线性和树状聚合物各自的优势，使其表现出独特的辅料功能化性质(Poon，Z.，Lee，J.A.，Huang，S.，Nanomed.Nanotechnol.Biol.Med.，2011，7(2)：201-209)。研究发现线性-树状聚合物具有两亲性，可自组装成核-壳结构的胶束；树状大分子“空穴”和胶束结构为药物提供多种包载方式，可以满足不同性质药物的需要；纳米级的胶束粒子，减少网状内皮系统的吞噬，同时减少肾清除率，提高药物的生物利用度；树状聚合物末端大量的活性氨基或羟基等残基，便于进行结构修饰而赋予其多样的功能性，将树状大材料与聚酯材料通过共价键结合，合成线性-树状嵌段聚合物，具有生物可降解材料和生物相容性优势，达到特定的诊断和治疗作用，在新型药物传递系统中提供了新思路(Goldberg，D.S.，Vijayalakshmi，N.，Swaan，P.W.，J.Control.Release，2011，150(3)，318-325)。

发明内容

本发明目的是提供一种多功能两亲性线性-树状嵌段共聚物，该嵌段共聚物兼具线性和树状聚合物的双重优势，其中树状聚合物部分为亲水段，线性聚合物部分为疏水段。以乙醇胺为内核，经迈克尔加成和氨基化迭代反应，合成具有单端羟基的半树状聚酰胺胺聚合物，再以其为大分子引发剂使疏水性聚合单体发生开环聚合，制备两亲性线性-树状嵌段共聚物。利用自组装新技术，包载疏水性或亲水性药物，组装具有核-壳结构的纳米胶束，聚合物外层聚酰胺胺冠具有pH响应的构象变化和电位反转性质，可以实现药物在肿瘤酸性微区的定位递送及胞内释药，通过EPR效应被动靶向于肿瘤组织，提高抗肿瘤药物的细胞靶向作用，降低药物毒副作用。

本发明提供的多功能线性-树状嵌段共聚物通式为(I)：

其中：

n是聚酰胺胺树状聚合物代数；monomer是线性聚合单体；m是线性聚合单体的聚合度，m为10～50；

所述线性-树状嵌段共聚物(I)，其中包括(A)含有端位羟基亲水性聚酰胺胺sPA；(B)疏水性聚酯，组成线性AB型嵌段共聚物，该线性-树状嵌段共聚物半树枝sPA与聚酯B的重量比为15∶1～1∶20，较优重量比为8∶1～1∶10；

本发明所述(A)含有端位羟基的聚酰胺胺为半代树枝产物，包括n＝0.5、1.5、2.5、3.5、4.5、5.5代。

本发明所提供的一种线性-树状嵌段共聚物，其半代树枝产物(sPA)的制备步骤如下：

(1)将乙醇胺和无水甲醇加入反应器中，搅拌中缓慢加入丙烯酸甲酯，氮气保护下于20-30℃反应12-24h，薄膜减压蒸发，即得0.5代聚酰胺胺树状大分子；

(2)将所述步骤(1)得到的0.5代聚酰胺胺树状大分子溶于无水甲醇，滴加乙二胺，在20-30℃下反应12-24h，薄膜减压蒸发，即得1.0代聚酰胺胺树状大分子；

(3)将步骤(2)得到的1.0代聚酰胺胺树状大分子中，缓慢滴加丙烯酸甲酯的无水甲醇溶液，在20-30℃下，反应12-24h，薄膜减压蒸发，即得1.5代聚酰胺胺树状大分子；

(4)将步骤(3)得到的1.5代聚酰胺胺树状大分子依次按照步骤(2)和(3)操作即得2.5代聚酰胺胺树状大分子；

(5)将步骤(4)得到的2.5代聚酰胺胺树状大分子依次按照步骤(2)和(3)操作得到3.5代聚酰胺胺树状大分子，产物溶于甲醇，纯化3～5次，薄膜减压蒸发；

(6)将步骤(5)得到的3.5代聚酰胺胺树状大分子依次按照步骤(2)和(3)操作即得4.5代聚酰胺胺树状大分子，产物用甲醇纯化3次，蒸馏水溶解置透析袋(分子量为3500)中透析3天，冷冻干燥；

(7)将步骤(6)得到的4.5代聚酰胺胺树状大分子依次按照步骤(2)和(3)操作得到5.5代聚酰胺胺树状大分子，甲醇纯化3次，蒸馏水溶解后置于透析袋中透析(3500分子量)3天，冷冻干燥。

所述(B)疏水性聚酯，其聚合单体为丙交酯、乙交酯、ε-己内酯、吗啉二酮中的至少一种或混合物，所述线性-树状嵌段共聚物为sPA-PDLA、sPA-PLLA、sPA-PLGA、sPA-PCL等。

本发明提供的线性-树状嵌段共聚物，其制备方法包括：

(1)按重量份比称取1份取干燥的0.5～5.5代的半代数聚酰胺胺树状聚合物和0.01～100份B聚合单体混合，加0.1～1.0％辛酸亚锡，加热温度为20～200℃，油浴反应0.5～100h，停止反应，得粗产物；

(2)粗产物加入到1～100重量份a溶剂中溶解，再倾入1～1000倍体积b溶剂中沉淀，沉淀复溶于溶剂a后，以透析袋透析1～100h，冷冻干燥10～25h，即得线性-树状嵌段共聚物；

其中所述溶剂a为氯仿、二氯甲烷一种或混合物；所述溶剂b为甲醇、乙醇、石油醚、乙醚、乙酸乙酯的一种或混合物。

具体合成反应方程式如下(以丙交酯作为聚合单体为例)：

在聚酰胺胺树状化学结构修饰、聚合物胶束包裹难溶性药物和增溶作用，选择溶剂和用量十分关键。本发明提供的线性-树状嵌段共聚物，其特征在于，由亲水性的半聚酰胺胺树状聚合物和疏水的线性聚合物组成，溶剂选自水、氯仿、二氯甲烷、丙酮、二甲亚砜(DMSO)、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)；可以包载疏水性和亲水性药物，本发明的线性-树状嵌段聚合物具有两亲性和低表面张力，能在水中自组装形成纳米胶束，可用于难溶药物的增溶和包裹，延长体内循环、减少网状内皮系统的吞噬。而且亲水的聚酰胺胺外壳内含有大量“空穴”，能同时包裹亲水性药物分子实现协同载释药和联合用药目的，拓宽了聚合物胶束的载药适用范围。

本发明的线性-树状嵌段共聚物适用与药物组配或作为药物载体，具有细胞毒性小，不会产生溶血反应，可作为静脉注射给药的药物优良载体。该线性-树状嵌段共聚物具有包载疏水性药物增溶作用，作为口服药物增溶剂的用途，还可包载水溶性药物，其中药物与线性-树状嵌段聚合物的重量比为1∶1～1∶100，载药量可达到5～20％。

所述药物选自紫杉醇、多西紫杉醇、喜树碱、羟基喜树碱、长春酰胺、依托泊甙、藤黄酸、环孢素A、足叶乙苷、替尼泊甙、尼莫地平、硝苯地平、尼群地平、阿霉素、柔红霉素、丝裂霉素、姜黄素、甲氨喋呤、冬凌草素、三尖杉酯碱、高三尖杉酯碱、灯盏花素、银杏内酯、水飞蓟素、靛玉红、氟尿嘧啶或顺铂，药物与线性-树状嵌段共聚物重量比为1∶2～50。

本发明的线性-树状嵌段共聚物的药物组合物，其特征是，包载药物自组装形成聚合物纳米胶束，平均粒径为20～120nm，载药量大于8％，包封率大于87％，其中药物优选紫杉醇、多烯紫杉醇、阿霉素、氟尿嘧啶、羟基喜树碱，药物与线性-树状嵌段共聚物的重量比为1∶5～200。

本发明的线性-树状嵌段共聚物的药物组合物，其制备方法如下：

(1)称取线性-树状嵌段共聚物适量溶解在纯净水中，将药物溶解在有机溶剂，磁力搅拌4～8h，薄膜蒸发减压除去溶剂，探针超声5～30min，用0.22μm微孔滤膜过滤，即得到药物聚合物纳米胶束混悬液；

(2)将药物聚合物纳米胶束混悬液，加冻干保护剂，无菌过滤，冷冻干燥，即得载药聚合物纳米胶束冻干粉；或加入填充剂，采用喷雾干燥法，即得载药聚合物纳米胶束粉末；

所述冻干保护剂选自乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、右旋糖酐、海藻糖中的一种或几种；冻干保护剂用量按载药聚合物胶束混悬液重量计，1份载药聚合物胶束混悬液加入冻干保护剂0.01～0.1份。

临床使用时可以用注射用水，生理盐水或葡萄糖重新复溶，本冻干制剂溶解迅速，且溶解后溶液澄清。

所述填充剂选择乳糖、喷雾干燥乳糖、颗粒乳糖、研磨乳糖、无水乳糖、干粉吸入用乳糖、微晶纤维素、可压性淀粉、淀粉、糊精、甘露醇、糖粉、聚维酮、聚乙二醇、羟丙甲纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、硫酸钙、磷酸氢钙、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、上述两种预混辅料中的一种或几种；1份载药聚合物胶束混悬液加入填充剂0.02～0.20份。

本发明的两亲性线性-树状嵌段共聚物具有pH响应的电荷反转性质。在体内长循环中表面携带负电荷，而到达肿瘤细胞外或者溶酶体内以后响应所处环境弱酸性条件而电荷反转为正电荷，有利于制剂在体内运行过程中保持稳定，而在肿瘤区域被细胞摄取和胞内快速释药。

本发明的聚酰胺胺-聚丙交酯嵌段共聚物，适宜用作抗肿瘤药物静脉注射的优良载体，在临床可以注射给药，还可作为口服制剂或粘膜给药制剂的修饰剂，以促进药物吸收，提高药效。

附图说明：

图1.pH对聚合物粒径(A)和电位(B)的影响(n＝3)

图2.聚合物及多西紫杉醇胶束制剂的体外溶血实验(n＝3)

具体实施方式

实施例1

(1)0.5代聚酰胺胺树状大分子的合成：将10mL乙醇胺和30mL无水甲醇加入250mL反应器中，搅拌中缓慢加入35mL丙烯酸甲酯，氮气保护下于30℃反应12h，薄膜减压蒸发，即得0.5代聚酰胺胺树状大分子(39.2g，100％)；

(2)1.5代聚酰胺胺树状大分子的合成：将20.0g0.5代聚酰胺胺树状大分子溶于30mL无水甲醇，滴加60mL乙二胺，在30℃下反应12h，薄膜减压蒸发。将产物25.0g溶于甲醇，缓慢滴加65mL丙烯酸甲酯的无水甲醇溶液，在30℃下，反应24h，薄膜减压蒸发，即得1.5代聚酰胺胺树状大分子(54.1g，99％)；

(3)2.5代聚酰胺胺树状大分子的合成：将45.0g1.5代聚酰胺胺树状大分子溶于甲醇中，缓缓滴入110mL乙二胺中反应24h，减压蒸馏，产物取26.8g溶于甲醇中，与50mL丙烯酸甲酯反应24h，薄膜减压蒸发，甲醇纯化，即得2.5代聚酰胺胺树状大分子(53.4g，103％)；

(4)3.5代聚酰胺胺树状大分子的合成：取40.0g2.5代聚酰胺胺树状大分子溶解在甲醇中，逐滴加入到90mL乙二胺中反应48h，浓硫酸吸附减压蒸馏，除去过量乙二胺，产物取25.8g与87mL丙烯酸甲酯反应，甲醇纯化减压蒸馏，即得3.5代聚酰胺胺树状大分子(48.2g，102％)。

(5)4.5代聚酰胺胺树状大分子的合成：取21.5g3.5代聚酰胺胺树状大分子与45mL乙二胺反应，产物取21.1g与70mL丙烯酸甲酯反应，甲醇纯化减压蒸馏3次，然后蒸馏水溶解置于透析袋(分子量3500)中透析3天，冷冻干燥，即得4.5代聚酰胺胺树状大分子(39.5g，105％)。

(6)5.5代聚酰胺胺树状大分子的合成：取20.5g4.5代聚酰胺胺树状大分子与50mL乙二胺反应，产物取20.0g与60mL丙烯酸甲酯反应，甲醇纯化减压蒸馏3次，然后蒸馏水溶解置于透析袋(分子量3500)中透析3天，冷冻干燥，即得到5.5代聚酰胺胺树状大分子(33.5g，105％)。

实施例24.5代聚酰胺胺-聚丙交酯嵌段共聚物(PALA4.5)的合成

取干燥的5.5g4.5代聚酰胺胺树状聚合物、4.5g丙交酯和0.05g辛酸亚锡混合，加热到150℃反应12h，产物用氯仿溶解，石油醚沉淀，纯化2次后沉淀淀复溶，以3500分子量透析袋透析50h，冷冻干燥48h，即得。

PALA4.5：FT-IR：3449，2994，2955，2847，1752，1644，1556，1451，1381，1271，1199cm^-1；

¹HNMR(500MHz，CDCl₃，δin ppm)：1.57(m，O-CH-CH ₃)，2.33～2.35(m，-CH₂CH ₂CO)，2.42～2.46(m，-CH ₂COOCH₃)，2.37～2.42(m，-CH₂CH ₂N)，2.74～2.79(m，-CH ₂CH₂CO)，3.27～3.29(m，-CH ₂CH₂N)，3.68(s，-OCH ₃)，4.89(m，O＝C-CH-OH)，5.22(m，O＝C-CH-O)，7.18～8.02(m，-CONH-)；

采用凝胶排阻色谱测得聚合物的PI为1.12；根据¹HNMR峰位置积分计算聚合度为76。

实施例34.5代聚酰胺胺-聚甘氨酸嵌段共聚物(PAG4.5)的合成

取干燥的6.6g4.5代聚酰胺胺树状聚合物、3.4g吗啉-2，5-二酮和0.01g辛酸亚锡混合，加热到160℃反应10h，产物用氯仿溶解，乙醚沉淀，纯化2次，沉淀复溶，以3500分子量透析袋透析50h，冷冻干燥48h，即得。

PAG4.5：FT-IR：3440，3218，2994，2955，2880，1766，1691，1548，1112cm^-1；

¹HNMR(500MHz，CDCl₃，δin ppm)：2.32～2.33(m，-CH₂CH ₂CO)，2.41～2.46(m，-CH ₂COOCH₃)，2.35～2.41(m，-CH₂CH ₂N)，2.72～2.78(m，-CH ₂CH₂CO)，3.31～3.33(m，-CH ₂CH₂N)，3.67(s，-OCH ₃)，4.42(m，NH-CH-CH₃)，4.8-4.9(m，O＝C-CH ₂-O)，7.28～8.14(m，-CONH-)。

采用凝胶排阻色谱测得聚合物的PI为1.13；根据¹HNMR峰位置积分计算聚合度为52。

实施例44.5代聚酰胺胺-聚乳酸-乙醇酸嵌段共聚物(PALGA4.5)的合成

取干燥的6.6g4.5代聚酰胺胺树状聚合物、1.7g丙交酯、1.7g乙交酯和0.02g辛酸亚锡混合，加热到145℃反应8h，产物用二氯甲烷溶解，石油醚沉淀，纯化2次，沉淀复溶，以3500分子量透析袋透析50h，冷冻干燥48h后即得。

PALGA4.5：

FT-IR：3450，2960，2870，1760，1480，1271，1197cm^-1；

¹HNMR(500MHz，CDCl₃，δin ppm)：1.57(m，O-CH-CH ₃)，2.32～2.37(m，-CH₂CH ₂CO)，2.43～2.45(m，-CH ₂COOCH₃)，2.33～2.40(m，-CH₂CH ₂N)，2.76～2.79(m，-CH ₂CH₂CO)，3.27～3.29(m，-CH ₂CH₂N)，3.68(s，-OCH ₃)，4.68-4.91(m，O＝C-CH ₂-O)，5.13(m，O＝C-CH-O)，7.10～8.12(m，-CONH-)；

采用凝胶排阻色谱测得聚合物的PI为1.20；根据¹HNMR峰位置积分计算聚合度为56。

实施例5线性-树状嵌段共聚物界面张力的测定

称取10.2mg线性-树状嵌段共聚物(实施例2～4制备)溶于10mL水中，室温搅拌1h，得到1.02mg/mL聚合物储备液，用蒸馏水稀释成100、10、1、0.1、0.01μg/mL聚合物溶液，置于DCAT-21表面张力仪测定聚合物的表面张力，至数值下降并稳定时即聚合物的最低界面张力值，所得数据见表1：

表1线性-树状嵌段共聚物的界面张力

实施例6pH响应性实验

配制浓度为10mg/mL实施例2制备的PALA4.5水溶液，取1mL分别滴加入9mLpH为7.4、6.8、6.0、5.5、5.0的磷酸盐缓冲溶液中，采用Zetasizer3000HSA粒径仪测定空白胶束粒径和电位。绘制电位和粒径随pH的变化图，见图1。

PALA4.5的粒径在pH5-6.8范围没有明显变化，在生理pH条件时(pH7.4)粒径略有增加，可能由于中性条件下电荷斥力减弱引起粒子聚集所致。通过调pH可将粒径降至50nm，可见这种聚集并未改变胶体本质。空白胶束的电位随pH降低有明显升高趋势，pH从生理条件(pH7.4)降至6.8，电位则从-6.1mV升高至+14.4mV，pH降低为5.5和5.0，电位分别升至+26.2mV和+31.3mV。结果表明，聚合物中存在大量二级和三级胺，pH降低引起胺基质子化，导致电位的变化。文献报道肿瘤微区呈弱酸性环境(pH6.5)，而细胞内涵体和溶酶体的pH则更低(pH5.0～5.5)。本发明的聚合物具有pH响应性，可使胶束更易摄入细胞并在细胞内加速释药，从而提高治疗作用。

实施例7线性-树状嵌段共聚物载多西紫杉醇胶束(DTX胶束)的制备

将150mg线性-树状嵌段共聚物(实施例2-4中所制备)溶解在12mL蒸馏水中，将30mg多西紫杉醇溶解在10mL乙醇中，将药物溶液加入载体溶液中，搅拌6h，减压除去溶剂，0.22μm微孔滤膜无菌过滤，加210mg冻干保护剂，冷冻干燥，即得多西紫杉醇聚合物胶束冻干粉。采用HPLC法测定胶束的包封率和载药量。用Zetasizer3000HS粒度分析仪测定粒径以及电位。结果见表2。

表2多西紫杉醇线性-树状嵌段共聚物胶束的粒径和电位

实施例8线性-树状嵌段共聚物载氟尿嘧啶复合物的制备

将50mg嵌段共聚物PALA4.5(实施例2中所制备)、50mg5-氟尿嘧啶于烧杯中，加入10mL N，N-二甲基甲酰胺-水混合溶液(10∶1)，40℃温浴10min，溶解后置透析袋中透析，于2、4、6、8、12h换蒸馏水，24h用0.22μm滤膜过滤，即得载氟尿嘧啶PALA4.5复合物，加入110mg乳糖，冷冻干燥。用马尔文粒径测定仪测得复合物的平均粒径为58.3nm，多分散系数为0.25，采用HPLC法测定复合物的载药量为10.8％，包封率为92.7％。

实施例9线性-树状嵌段共聚物体外溶血实验

取新鲜人全血收集于含有7.5％(w/v)EDTA的真空管中，3000rpm离心10min。用血细胞等张生理盐水洗三次，弃去上层清液。将血细胞用盐水稀释成2％(v/v)，取细胞悬液2.5mL加到样品中，PALA4.5(实施例2制备)、DTX胶束(实施例7制备)、吐温-80、PAMAM4.0(市售)浓度分别为0.2，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.5，5mg/mL。37℃孵育30min后，样品于3000rpm离心10min，收集上层清液，置570nm波长测吸光度值。分别以Triton X-100和PBS作为溶血100％和0％对照组。以下列公式计算溶血率：溶血率＝(样品吸光度值-0％溶血吸光度值)/(100％溶血吸光度值-样品吸光度值)×100，溶血结果见图2。

结果可见，PALA4.5、DTX胶束均无明显溶血现象发生，吐温-80组和PAMAM4.0(市售)组有较明显的溶血现象，5mg/mL时溶血率分别达到66％和100％。市售多西紫杉醇注射剂

中以吐温-80作为增溶剂，临床治疗中存在溶血和过敏毒副作用，而本发明的嵌段共聚物材料溶血发生率低，适用于静脉注射给药。

实施例10多西紫杉醇线性-树状嵌段共聚物胶束(DTX胶束)体内药动学实验

SD大鼠12只随机分为两组，每组6只，分别于尾静脉注射多西紫杉醇市售注射剂和DTX胶束(实施例7制备)，给药剂量均为2.5mg/kg，于给药5，10，15，30，45，60，120，180，240，360，480，600，720min后大鼠眼眶后静脉丛取血0.5mL，置于肝素化离心管中，于10000r/min高速离心后取血浆200μl，HPLC测定血药浓度。Kinetic4.4药动学软件处理血药数据，药动学参数如表3所示：

结果表明，载药胶束(实施例7制备)较市售注射液消除半衰期延长1.5倍，血药经时曲线下面积增加了61％，具有较好的长循环作用。结果表明，本发明的线性-树状嵌段聚合物可以减少体内网状内皮系统摄取，避免药物在体内循环中被降解，有助于更好地发挥药效。

表3多西紫杉醇共聚物胶束的体内药动学参数(n＝3)

Claims (10)

1.通式I的线性-树状嵌段共聚物： 

其中： 

n是聚酰胺胺树状聚合物代数；monomer是线性聚合单体；m是线性聚合单体的聚合度，m为10～50； 

所述线性-树状嵌段共聚物I，其中包括(A)含有端位羟基亲水性聚酰胺胺sPA；(B)疏水性聚酯，组成线性AB型嵌段共聚物，该线性-树状嵌段共聚物半树枝sPA与聚酯B的重量比为15∶1～1∶20，较优重量比为8∶1～1∶10。 

2.根据权利要求1所述线性-树状嵌段共聚物I，其特征是，所述(A)含有端位羟基的聚酰胺胺为半代树枝产物，包括n＝0.5、1.5、2.5、3.5、4.5、5.5代。 

3.根据权利要求1～2所述的线性-树状嵌段共聚物I，其特征是，所述(B)疏水性聚酯，其聚合单体为丙交酯、乙交酯、ε-己内酯、吗啉二酮中的至少一种或混合物，所述线性-树状嵌段共聚物为sPA-PDLA、sPA-PLLA、sPA-PLGA、sPA-PCL。 

4.根据权利要求1～3所述的线性-树状嵌段共聚物I，其制备方法包括： 

(1)按重量份比称取1份含有端位羟基的聚酰胺胺和0.01～100份B的聚合单体混合，加0.1～1.0％辛酸亚锡，加热温度为20～200℃，油浴反应0.5～100h，停止反应，得粗产物； 

(2)粗产物加入到1～100重量份a溶剂中溶解，再倾入1～1000倍体积b溶剂中沉淀，沉淀复溶于溶剂a后，以透析袋透析1～100h，冷冻干燥10～25h，即得线性-树状嵌段共聚物； 

其中所述溶剂a为氯仿、二氯甲烷一种或混合物；所述溶剂b为甲醇、乙醇、石油醚、乙醚、乙酸乙酯的一种或混合物。 

5.根据权利要求1～4所述的线性-树状嵌段共聚物，其特征在于，可以包载疏水性和亲水性药物，其中药物与线性-树状嵌段聚合物的重量比为1∶1～1∶100。 

6.根据权利要求1～5所述线性-树状嵌段共聚物及其药物组合物，其特征在于，所述药物 为亲水性和疏水性，其中药物选自紫杉醇、多西紫杉醇、喜树碱、羟基喜树碱、长春酰胺、依托泊甙、氟尿嘧啶、藤黄酸、环孢素A、足叶乙苷、替尼泊甙、尼莫地平、硝苯地平、尼群地平、阿霉素、柔红霉素、丝裂霉素、姜黄素、甲氨喋呤、冬凌草素、三尖杉酯碱、高三尖杉酯碱、灯盏花素、银杏内酯、水飞蓟素或靛玉红。 

7.根据权利要求6所述线性-树状嵌段共聚物及其药物组合物，该线性-树状嵌段共聚物具有包载疏水性药物增溶作用，作为药物增溶剂的用途，药物与线性-树状嵌段共聚物重量比为1∶2～50。 

8.根据权利要求6所述线性-树状嵌段共聚物的药物组合物，其特征是，包载药物自组装形成聚合物纳米胶束，平均粒径为20～120nm，其中药物选自紫杉醇、多烯紫杉醇、阿霉素、氟尿嘧啶、羟基喜树碱，药物与线性-树状嵌段共聚物的重量比为1∶5～200。 

9.根据权利要求8所述线性-树状嵌段共聚物的药物组合物，其制备方法如下： 

(1)称取线性-树状嵌段共聚物适量溶解在纯净水中，将药物溶解在有机溶剂，磁力搅拌4～8h，薄膜蒸发减压除去溶剂，探针超声5～30min，用0.22μm微孔滤膜过滤，即得到药物聚合物纳米胶束混悬液； 

(2)将药物聚合物纳米胶束混悬液，加冻干保护剂，无菌过滤，冷冻干燥，即得载药聚合物纳米胶束冻干粉；或加入填充剂，采用喷雾干燥法，即得载药聚合物纳米胶束粉末； 

所述冻干保护剂选自乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、右旋糖酐、海藻糖中的一种或几种；冻干保护剂用量按载药聚合物胶束混悬液重量计，1份载药聚合物胶束混悬液加入冻干保护剂0.01～0.1份。 

所述填充剂选择乳糖、喷雾干燥乳糖、颗粒乳糖、研磨乳糖、无水乳糖、干粉吸入用乳糖、微晶纤维素、可压性淀粉、淀粉、糊精、甘露醇、糖粉、聚维酮、聚乙二醇、羟丙甲纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、硫酸钙、磷酸氢钙、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、上述两种预混辅料中的一种或几种；1份载药聚合物胶束混悬液加入填充剂0.02～0.20份。 

10.根据权利要求9所述线性-树状嵌段共聚物的药物组合物，其可制成临床使用剂型，包括注射剂、口服固体制剂、粉雾剂或经皮吸收制剂。 

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