CN109221663A - 一种中华鳖体色增强剂及含该体色增强剂的中华鳖饲料 - Google Patents
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Abstract
一种中华鳖体色增强剂及含该体色增强剂的中华鳖饲料,该体色增强剂由螺旋藻和角黄素按重量比为(0.33‑3):1组成,将该体色增强剂作为饲料添加剂添加到中华鳖饲料中,能改善目前人工养殖中华鳖体色差异大的问题,使用10‑12周左右就能显著改善中华鳖的体色,促进体内类胡萝卜素的有效沉积,同时能提高中华鳖生长以及免疫力,且添加方式简单,效果显著。
Description
技术领域
本发明属于水产饲料添加剂领域,涉及一种用于增强中华鳖体色的饲料添加剂,具体涉及一种能有效改善中华鳖体色、促进中华鳖生长的体色增强剂,同时还涉及含有该体色增强剂的中华鳖饲料。
背景技术
水产动物一般都具有丰富的体色,大部分的水产动物特征性的体色归功于体内积累的类胡萝卜素的含量,而类胡萝卜素在水产动物体内不能合成,需依赖食物提供丰富的类胡萝卜素,水产动物在天然水域中,受天然饵料的影响,在特定的机体组织中沉积特定的色素,从而形成特有的体色。
中华鳖(Trionyx sinensis),又称甲鱼、团鱼、水鱼,是我国重要的名特水产养殖对象之一,在我国分布广泛,具有较高的营养价值和经济价值。中华鳖是我国重要的水产经济动物,黄色的体色备受消费者青睐。但,自20世纪90年代,中华鳖养殖产业迅速发展,其工厂化养殖规模不断扩大,中华鳖养殖中出现的体色差异大的问题也越来越严重,使得在集约化养殖过程中,随着这种黄色体色的丢失从而降低了其商品价值。目前有关中华鳖体色的研究报道较少,仅限于玉米蛋白粉对中华鳖色素含量影响的研究。因此,从营养角度改善中华鳖体色是一条有效的途径。
螺旋藻(Spirulina platensis)隶属蓝藻门、蓝藻纲、颤藻目、颤藻科、螺旋藻属,广泛分布在世界各地的海水、咸淡水和淡水中。螺旋藻富含蛋白质、多糖、亚油酸、维生素、色素及矿物质,具有抗菌、抗氧化、抗病毒等多种生理功能,营养、医疗和保健价值高。随着生产成本的降低,螺旋藻作为一种饲料原料或饲料添加剂开始被广泛使用。饲料中添加适量的螺旋藻可促进水产动物生长、摄食,同时可增强机体免疫力、改善体色。角黄素(Canthaxanthin)也叫斑螯黄素,是一种非维生素A源的酮式类胡萝卜素,显橙色,着色效果较强,天然存在于多种食物中,也可人工合成,可作为动物饲料添加剂,使禽肉和蛋黄颜色更加鲜明,同时也是一种很好的抗氧化剂。但至今未见将螺旋藻和角黄素同时应用于增强中华鳖体色的报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:针对目前中华鳖养殖中出现的体色差异大的现象,提供一种中华鳖体色增强剂,同时提供含该体色增强剂的中华鳖饲料,将天然的、安全无毒的色素源组成体色添加剂,并添加在中华鳖基础饲料中,能显著提高中华鳖的生长,提高中华鳖免疫力,有效促进中华鳖体内类胡萝卜素的沉积,调控中华鳖体色。
为解决上述技术问题,本发明所采用的技术方案是:一种中华鳖体色增强剂,所述体色增强剂由螺旋藻和角黄素组成,该螺旋藻和角黄素的重量比为(0.33-3):1。
优选的,该体色增强剂中螺旋藻和角黄素的重量比为(1-2.5):1,较好的,螺旋藻和角黄素的重量比为(1.5-2.0):1。
本发明同时提供一种中华鳖饲料,该饲料中含有上述的体色增强剂,该体色增强剂的添加量为每1kg饲料添加180-220mg体色增强剂。
本发明的饲料的制备方法为:按前述重量比取螺旋藻和角黄素,混匀后,加入到中华鳖基础饲料中,混匀即可。中华鳖基础饲料为现有常规中华鳖饲料,较好地,饲料中粗蛋白、粗脂肪和粗灰分的含量分别占基础饲料干重的40-50%、3-10%、15-20%。喂饲时,将饲料加水调成面团状,搓成长条形投喂。饲料的日投饵量为中华鳖体重的2-3%,日投喂2次。
本发明以天然的、安全无毒的色素源组成体色增强剂,将该体色增强剂作为饲料添加剂添加到中华鳖饲料中,使用10-12周左右就能显著改善中华鳖的体色,促进体内类胡萝卜素的有效沉积,同时能提高中华鳖生长以及免疫力,且添加方式简单,效果显著。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例,所述实施例的示例主要用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制,实施例中未注明具体的技术或条件,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或按照产品说明书进行,所用试剂或仪器未注明生产厂商的,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
按重量比0.33:1取螺旋藻和角黄素,混匀,得中华鳖体色增强剂;将该体色增强剂加入到中华鳖基础饲料中,添加量为每1kg饲料添加180mg体色增强剂,混匀,即得中华鳖饲料。
实施例2
按重量比1:1取螺旋藻和角黄素,混匀,得中华鳖体色增强剂;将该体色增强剂加入到中华鳖基础饲料中,添加量为每1kg饲料添加190mg体色增强剂,混匀,即得中华鳖饲料。
实施例3
按重量比1.5:1取螺旋藻和角黄素,混匀,得中华鳖体色增强剂;将该体色增强剂加入到中华鳖基础饲料中,添加量为每1kg饲料添加200mg体色增强剂,混匀,即得中华鳖饲料。
实施例4
按重量比2:1取螺旋藻和角黄素,混匀,得中华鳖体色增强剂;将该体色增强剂加入到中华鳖基础饲料中,添加量为每1kg饲料添加210mg体色增强剂,混匀,即得中华鳖饲料。
实施例5
按重量比2.5:1取螺旋藻和角黄素,混匀,得中华鳖体色增强剂;将该体色增强剂加入到中华鳖基础饲料中,添加量为每1kg饲料添加190mg体色增强剂,混匀,即得中华鳖饲料。
实施例6
按重量比3:1取螺旋藻和角黄素,混匀,得中华鳖体色增强剂;将该体色增强剂加入到中华鳖基础饲料中,添加量为每1kg饲料添加220mg体色增强剂,混匀,即得中华鳖饲料。
实施例7应用
1.单一体色增强剂对中华鳖生长、免疫及体色的影响。
1.1试验鱼
中华鳖,购买于湖南常德河州甲鱼合作社,选用同一批次中华鳖,饲养于水泥池(5m×4m×0.8m)中,保持水位0.6m,池子设有单独的进、排水口,用石棉瓦做晒背台和食台。驯养一段时间后,开始试验。
1.2试验饲料
使用市售中华鳖粉状饲料为基础饲料(其中,以所述基础饲料的干重计,所述基础饲料中粗蛋白的含量为45.0重量%,粗脂肪的含量为3.50重量%,粗灰分的含量为15.0重量%),分别在基础饲料中添加螺旋藻、叶黄素、角黄素,其添加的质量百分比为:螺旋藻(5%-L5、8%-L8、10%-L10);叶黄素(0.1%-Y0.1、0.2%-Y0.2、0.3%-Y0.3);角黄素(50mg/kg-J50、100mg/kg-J100,200mg/kg-J200)。以不添加本发明的体色增强剂的中华鳖基础饲料为对照组(C0)。
1.3试验过程和结果
中华鳖养殖:将初始体重为(37.44±0.18)g的幼鳖随机分成10组,每组设3个重复,每个重复放养40只,分别投喂10组试验饲料,每日投喂两次(8:00am、6:00pm),日投喂饲料量占体重的3%。每周换水一次,换水量约为总体积的1/5。养殖时间为12周。
生长性能的测定:饲养结束后饥饿处理24h,对各组试验鳖计数和称重,计算各组增重率、存活率、特定生长率。
背、腹部体色值检测:按照国际发光照明委员会CIE的规定,分别用L*、a*、b*代表亮度值、红色值和黄色值,用便携式色彩色差计CR-400(柯尼卡-美能达)检测背、腹部体色值。
组织类胡萝卜素含量的测定:取试验鳖背部皮肤、腹部皮肤、肌肉、肝脏四个组织,用鱼胡萝卜素酶联免疫分析试剂盒测定各组织胡萝卜素含量(上海酶联生物)。
血液生化指标测定:采集中华鳖血液于离心管中,于4℃冰箱静置,隔日以3500r/min转速15min后取上清液检测。所测血清指标:总蛋白(TP)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、白蛋白(ALB)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、谷丙转氨酶(ALT)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)酶活性。采用南京建成试剂盒进行检测。
1.3.1单一体色增强剂对中华鳖生长的影响
养殖结束后,各组生长情况如表1所示。L5组、L10组和Y0.1组的存活率与C0组无显著差异(P>0.05),其余各组存活率显著提高(P<0.05);增重率和特定生长率随着单一增强剂添加量的增加呈升高趋势,均以L8组最高,显著高于C0组(P<0.05),除角黄素添加组外,其余各组增重率与C0组相比无显著差异(P>0.05)。
表1单一体色增强剂对中华鳖生长的影响
| 初始体重/g | 终末体重/g | 增重率/100% | 特定生长率/(%/d) | 成活率/% | |
| C0 | 37.85±0.68 | 105.86±3.39<sup>bc</sup> | 188.63±11.15<sup>cd</sup> | 1.14±0.04<sup>a</sup> | 80.00±2.89<sup>a</sup> |
| L5 | 36.68±0.43 | 105.83±4.05<sup>bc</sup> | 188.73±12.76<sup>cd</sup> | 1.14±0.05<sup>a</sup> | 76.67±0.83<sup>a</sup> |
| L8 | 37.37±0.52 | 121.83±2.75<sup>e</sup> | 226.37±11.68<sup>e</sup> | 1.27±0.04<sup>b</sup> | 86.67±1.67<sup>bc</sup> |
| L10 | 37.27±0.52 | 106.26±2.57<sup>bc</sup> | 185.33±9.84<sup>bcd</sup> | 1.13±0.04<sup>a</sup> | 79.17±0.83<sup>a</sup> |
| Y0.1 | 36.94±0.12 | 103.59±0.59<sup>b</sup> | 178.67±1.82<sup>abcd</sup> | 1.10±0.01<sup>a</sup> | 76.67±0.83<sup>a</sup> |
| Y0.2 | 37.98±0.54 | 115.47±0.75<sup>de</sup> | 204.40±3.34<sup>de</sup> | 1.20±0.01<sup>ab</sup> | 86.67±0.85<sup>bc</sup> |
| Y0.3 | 37.95±0.16 | 111.57±0.49<sup>cd</sup> | 193.97±1.45<sup>cd</sup> | 1.16±0.01<sup>a</sup> | 89.99±0.91<sup>c</sup> |
| J50 | 36.63±0.63 | 95.71±1.76<sup>a</sup> | 161.40±6.17<sup>ab</sup> | 1.14±0.03<sup>a</sup> | 86.60±1.44<sup>bc</sup> |
| J100 | 37.66±0.63 | 102.89±1.08<sup>ab</sup> | 173.3±2.84<sup>ab</sup> | 1.20±0.01<sup>ab</sup> | 89.20±1.42<sup>bc</sup> |
| J200 | 37.53±0.43 | 95.59±3.21<sup>a</sup> | 154.57±6.51<sup>a</sup> | 1.11±0.03<sup>a</sup> | 86.13±3.76<sup>b</sup> |
注:同行数字肩标不同小写字母表示组间差异显著(P<0.05),下表同。
1.3.2单一体色增强剂对中华鳖部分血清指标的影响
各组中华鳖部分血清指标检测结果如表2所示。添加不同剂量的螺旋藻、叶黄素及角黄素对中华鳖血清甘油三酯含量和总超氧化物歧化酶活性无显著影响(P>0.05),Y0.2组胆固醇含量显著低于C0组(P<0.05),而J50组显著高于C0组(P<0.05),其余各组无显著差异(P>0.05)。L8和Y0.2组总蛋白含量显著低于C0组(P<0.05),Y0.3组显著高于C0组(P<0.05),其余各试验组总蛋白含量与C0组无显著差异(P>0.05),而白蛋白含量以L5组、Y0.1组和角黄素组显著高于C0组(P<0.05)。谷丙转氨酶活性随体色增强剂的增加先降低后增加,均低于C0组,Y0.2组显著低于C0组(P<0.05)。添加螺旋藻、叶黄素和角黄素能提高碱性磷酸酶和酸性磷酸酶活性,其中,L10组、Y0.1组和J200组碱性磷酸酶活性显著高于C0组(P<0.05),除L5组、Y0.2组和J50组外,其余各组酸性磷酸酶活性均显著高于C0组(P<0.05)。谷胱甘肽过氧化酶活性L5组最低,以J100组最高,其他各组之间无显著影响(P>0.05)。
表2单一体色增强剂对中华鳖部分血清指标的影响
1.3.3单一体色增强剂对中华鳖体表色差值的影响
中华鳖体表色差值见表3。螺旋藻、叶黄素和角黄素均降低了背部亮度值L*值,而提高了腹部L*值,除YO.3组和J100组背部L*值与C0组无显著差异外,其余各组均显著低于C0组(P<0.05),而L5组、L8组、Y0.2和Y0.3组腹部L*值则显著高于C0组(P<0.05);添加螺旋藻、叶黄素和角黄素素对背部红色值a*值的影响无一定的规律性,体色增强剂对腹部红色值a*值有降低作用,其中Y0.3组最低。添加螺旋藻、叶黄素和角黄素能增加中华鳖背、腹部黄色b*值,其中Y0.3组背、腹部黄色b*值均显著高于C0组(P<0.05)。
表3单一体色增强剂对中华鳖体表色差值的影响
中华鳖组织类胡萝卜素含量见表4。添加单一体色增强剂能增加肌肉、肝脏、背、腹部皮肤中类胡萝卜素的含量。螺旋藻组和Y0.2组肌肉类胡萝卜素含量显著高于C0组(P<0.05);随体色增强剂添加量的增加,肝脏中类胡萝卜素含量增加,除Y0.1外,其余试验组肝脏中类胡萝卜含量显著高于C0组(P<0.05);随螺旋藻和叶黄素添加量的增加,背部皮肤类胡萝卜含量逐渐增加,其中Y0.3组类胡萝卜含量显著高于C0组(P<0.05),而随角黄素添加量的增加,背部类胡萝卜素含量先增加后降低,J100组显著高于C0组(P<0.05);体色增强剂对中华鳖腹部皮肤类胡萝卜素含量无影响。在C0组中,肝脏类胡萝卜素含量最低,腹部类胡萝卜素含量最高;添加低剂量的螺旋藻(L5)能显著增加肌肉和肝脏中类胡萝卜素的含量,其中肌肉的增加量为13.62μg/g,肝脏为11.87μg/g;螺旋藻添加量为8%时,肌肉中类胡萝卜含量降低,肝脏和背、腹部皮肤含量增加,其顺序为腹部皮肤>背部皮肤>肌肉>肝脏;当螺旋藻添加为10%时,腹部皮肤类胡萝卜素含量最高,其次是背部皮肤、肝脏和肌肉。在0.1%的叶黄素添加组中,腹部皮肤类胡萝卜素含量显著高于肝脏含量,其顺序为腹部皮肤>背部皮肤>肌肉>肝脏;在0.2%的叶黄素添加组中,各组织间类胡萝卜素含量无显著差异,其中肌肉含量最多,肝脏含量最少;而在0.3%组中,背部和肝脏中类胡萝卜素含量显著高于肌肉的含量,与腹部皮肤含量无显著差异。在角黄素组中,J50组肌肉中类胡萝卜素含量显著低于肝脏,背、腹部,其顺序为腹部皮肤>肝脏>背部皮肤>肌肉,而J100组则是背部皮肤>腹部皮肤>肌肉>肝脏,以背部类胡萝卜素含量最高;同样在J200组中以背部最高,其次是肝脏、腹部和肌肉,但各组织间无显著差异。
表4单一体色增强剂对中华鳖组织类胡萝卜素含量的影响
注:同行数字肩标不同大写字母表示同组各组织间差异显著(P<0.05)。
2.本体色增强剂对中华鳖生长、免疫及体色的影响
2.1试验鱼:同前。
2.2试验饲料
使用市售中华鳖粉状饲料为基础饲料(其中,以所述基础饲料的干重计,所述基础饲料中粗蛋白的含量为45.0重量%,粗脂肪的含量为3.50重量%,粗灰分的含量为15.0重量%),分别在基础饲料中添加螺旋藻和角黄素,其添加量为200mg,(螺旋藻+角黄素)的添加比重分别为:P1组-(50mg/kg+150mg/kg)、P2组-(100mg/kg+100mg/kg)、P3组-(150mg/kg+50mg/kg)。以不添加本发明的体色增强剂的中华鳖基础饲料为空白对照组P0,添加叶黄素和角黄素(重量比1:1)混合体色增强剂200mg的中华鳖基础饲料为对比组P4。
2.3试验过程和结果
中华鳖养殖:挑选规格一致、健康无病和活力强的,初始体重为(30.34±0.16)g幼鳖随机分成5组,每组设3个重复,每个重复放养35只。分别投喂5组试验饲料,每日投喂两次(8:00am、6:00pm),日投喂饲料量占体重的3%。每周换水一次,换水量约为总体积的1/5。试验进行10周。
生长性能测定、血清指标的测定、体色值测定及组织类胡萝卜素含量测定同前。
2.3.1对中华鳖生长的影响
养殖结束后,各组中华鳖生长情况如表5所示。各组之间成活率无显著差异(P>0.05),P3组终末体重显著高于P0组(P<0.05),P1和P2组高于P0组,但无显著差异(P>0.05),P2组的增重率以及特定生长率均显著高于P0组(P<0.05)。P4组增重率、成活率及特定生长率高于P0组,但与P0组差异不显著(P>0.05)。
表5本体色增强剂对中华鳖生长的影响
| 编号 | 初始体重/g | 终末体重/g | 增重率/100% | 特定生长率/(%/d) | 成活率/% |
| P0 | 30.35±0.06 | 103.58±1.12<sup>a</sup> | 175.76±6.68<sup>a</sup> | 1.32±0.01<sup>a</sup> | 80.83±2.20 |
| P1 | 30.34±0.49 | 106.79±0.79<sup>ab</sup> | 184.55±6.04<sup>a</sup> | 1.36±0.01<sup>ab</sup> | 83.83±1.67 |
| P2 | 30.17±0.38 | 107.99±1.94<sup>ab</sup> | 204.21±4.50<sup>b</sup> | 1.37±0.02<sup>b</sup> | 85.00±1.44 |
| P3 | 30.52±0.34 | 108.90±1.13<sup>b</sup> | 191.41±1.11<sup>ab</sup> | 1.37±0.01<sup>b</sup> | 83.67±0.83 |
| P4 | 30.41±0.28 | 102.75±1.23<sup>a</sup> | 183.45±5.26<sup>a</sup> | 1.33±0.03<sup>a</sup> | 82.45±1.25 |
2.3.2本体色增强剂对中华鳖部分血清指标的影响
各组中华鳖部分血清指标检测结果如表6所示。添加(螺旋藻+角黄素)组合与(叶黄素+角黄素)组能降低中华鳖血清甘油三酯含量、增加总蛋白、白蛋白含量以及碱性磷酸酶活性,试验组与对照组相比无显著差异(P>0.05),(螺旋藻+角黄素)组能显著降低胆固醇含量和谷丙转氨酶活性(P<0.05),其中P1组胆固醇含量最低,P3组谷丙转氨酶最低,P4组对胆固醇和谷丙转氨酶活性无显著影响(P>0.05);随螺旋藻比例增加,碱性磷酸酶与酸性磷酸酶活性增加,试验组酸性磷酸酶活性显著高于P0组。添加(螺旋藻+角黄素)增强剂能显著增加总超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化酶活性,P1组和P2组总超氧化物歧化酶活性显著高于P0组(P<0.05);谷胱甘肽过氧化酶活性则以P3最高,显著高于P0组(P<0.05),其他各组与P0组差异不显著(P>0.05)。
表6本体色增强剂对中华鳖部分血清指标的影响
2.3.3本体色增强剂对中华鳖体表色差值的影响
中华鳖体表色差值见表7。添加混合体色增强剂提高了背部和腹部亮度L*值,P2、P3和P4组背部L*值显著高于P0组(P<0.05),试验组与P0组腹部L*值无显著差异(P>0.05),添加混合体色增强剂对可增强背部和腹部红色值,但P2组背、腹部a*值均小于P0组,P1组背部红色值最高,而腹部a*值以P3组最高,显著高于P0组(P<0.05)。混合体色增强剂能增加中华鳖背、腹部黄色b*值,其中P1、P2和P3组背部黄色b*值均显著高于P0组(P<0.05),P4组高于P0组,但无显著差异;试验组腹部黄色b*值均显著高于P0组(P<0.05),其中以P1组最高。
表7本体色增强剂对中华鳖体表色差值的影响
中华鳖组织类胡萝卜素含量见表8。添加本增强剂能增强各组织中类胡萝卜素含量,各组肌肉中类胡萝卜素含量无显著差异(P>0.05),当螺旋藻和角黄素配比为1:1时,即P2组肌肉中类胡萝卜素含量最高;除P1组,其余各组肝脏中类胡萝卜素含量显著高于P0组(P<0.05),以P1组最高,显著高于P4组(P<0.05);背部皮肤类胡萝卜素含量随螺旋藻比例的增加先增加后降低,以P2组最高,显著高于P0组(P<0.05),达到峰值后有所降低;腹部皮肤类胡萝卜含量以P3最高,显著高于P0组(P<0.05)。四个组织均以肌肉中类胡卜素含量最低,P0组和P1组肌肉显著低于肝脏、背部皮肤和腹部皮肤(P<0.05)。P2组类胡萝卜素含量大小为背部皮肤>腹部皮肤>肝脏>肌肉,P3组则以腹部类胡萝卜含量最高,显著高于背部皮肤、肝脏和肌肉(P<0.05),P4组类胡萝卜素含量大小为腹部皮肤>背部皮肤>肝脏>肌肉。
表8本体色增强剂对中华鳖组织类胡萝卜素含量的影响
| 编号 | 肌肉 | 肝脏 | 背部皮肤 | 腹部皮肤 |
| P0 | 38.23±1.09<sup>A</sup> | 43.36±0.91<sup>aB</sup> | 45.42±1.74<sup>aB</sup> | 45.82±0.59<sup>aB</sup> |
| P1 | 39.18±1.16<sup>A</sup> | 50.25±1.27<sup>cB</sup> | 49.87±1.15<sup>abB</sup> | 53.11±1.54<sup>bB</sup> |
| P2 | 40.84±0.99<sup>A</sup> | 45.42±1.04<sup>abAB</sup> | 53.79±0.57<sup>cB</sup> | 50.77±1.66<sup>abB</sup> |
| P3 | 40.66±0.79<sup>A</sup> | 49.56±1.47<sup>bcB</sup> | 53.19±0.63<sup>bcB</sup> | 59.18±2.51<sup>cC</sup> |
| P4 | 39.38±0.75<sup>A</sup> | 48.86±1.35<sup>bB</sup> | 50.34±2.98<sup>bB</sup> | 51.72±1.25<sup>abB</sup> |
综上所述,在中华鳖基础饲料中添加本发明提供的体色增强剂及叶黄素与角黄素的混合体色增强剂,使用10-12周左右能促进中华鳖的生长,提高免疫能力,同时能促进类胡萝卜素在中华鳖体内的沉积,提高组织类胡萝卜素的含量,能有效改善中华鳖体色,但,本发明的体色增强剂的效果要优于单一体色增强剂,且优于叶黄素与角黄素的混合体色增强剂。
Claims (3)
1.一种中华鳖体色增强剂,其特征在于,所述体色增强剂由螺旋藻和角黄素组成,该螺旋藻和角黄素的重量比为(0.33-3):1。
2.一种中华鳖饲料,其特征在于,该饲料中含有权利要求1所述的体色增强剂,该体色增强剂的添加量为每1kg饲料添加180-220mg体色增强剂。
3.如权利要求2所述的中华鳖饲料,其特征在于,所述饲料投喂中华鳖时,饲料的日投饵量为中华鳖体重的2-3%,日投喂2次。
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