CN120550005A - 一种基于接骨木莓的组合物及其在消除肺结节中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种基于接骨木莓的组合物及其在消除肺结节中的应用，所述组合物由接骨木莓提取物、丹参提取物、槐米提取物、β‑葡聚糖、薄荷醇和姜黄素组成。本发明所述的组合物是搭载多成分、多靶点、多调控通路相互作用于制剂中。本组合物一方面可以通过调控氧化应激，抑制炎症因子产生和释放，另一方面，可通过阻断血管紧张素Ⅱ生成，抑制血管增生与炎症反应，调节免疫抑制炎症，从而来实现预防和消除肺结节。本发明所描述的口服制剂可以是胶囊、片剂、颗粒剂、混悬液或乳液等载药系统。

Description

一种基于接骨木莓的组合物及其在消除肺结节中的应用

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种基于接骨木莓的组合物及其在消除肺结节中的应用，是接骨木莓组合物在制备消除肺结节药物中的应用。

技术背景

结节病是一种全身性疾病，特征为受累器官中的无菌肉芽肿性炎症。其病因尚不清楚，但该疾病具有典型的临床和免疫学特征。虽然结节病几乎可以影响身体的任何器官，但肺和淋巴结受累最常见。虽然肺结节病的炎症浸润可以缓解，但持续的疾病活动十分常见，严重时可导致肺纤维化。

随着人口老龄化的加速、环境污染、生活方式的变化、CT分辨率的提高、低剂量CT筛查的普及和人们体检意识的增强，被检出的无症状肺内结节的数目越来越多、结节的体积越来越小、密度越来越淡，检出率已上升至22％～51％。

总体而言，除年龄因素外，导致肺结节的主要原因如下：

吸烟、二手烟：香烟/雪茄中多种致癌物质长期刺激导致慢性支气管炎、肺气肿、慢阻肺等问题。这些最终会导致肺结节或肺癌；

各种工业化和汽车尾气：等导致的空气污染刺激呼吸系统，导致肺结节或肺癌；

室内污染：例如装修涂料、厨房油烟、各种刺激性的厨卫清洁用品等，都会刺激气管和肺等器官；

炎性反应：纤维化、肉芽肿、钙化结节等炎症；

免疫力低下导致的肺部感染：例如结核、肺炎、霉菌感染等。

肺结节根据数量可以是孤立性和多发性的，临床上根据结节的性质可分为炎性结节和病毒性结节，大多数为炎性肺结节。肺结节早期常见无明显症状和体征，可出现咳嗽、少量痰液、偶尔是少量咳血，可有乏力、发热、盗汗、食欲减退体重减轻等症状。可因合并感染肺气肿、支气管扩张、肺源性心脏病等加重病情。现有的炎性肺结节治疗主要是使用抗生素消炎，长期大量使用抗生素治疗小结节炎性病灶有滥用抗生素风险，疗效也不佳。

中医认为肺结节为有型之邪，主要由痰、瘀、毒相互博结而成，结节增大当发展到合并感染表现出一些证型特征，可有中医的气滞痰阻证，寒痰凝滞证，湿热痰瘀证阳虚内热等证候。虽然中医药防治肺部疾病具有独特优势，但其具体作用机制仍未明确。现代医学研究研究肺结节机制如下：

炎症介质的激活：肺结节的形成与肺部的炎症反应密切相关。炎症介质如细胞因子(如IL-1β、IL-6、TNF-α等)和趋化因子(如CCL2、CCL5、CXCL10等)被激活和释放，这些介质可以吸引免疫细胞到肺部，导致局部炎症和组织损伤，进而促进肺结节的形成。

免疫细胞的浸润：在炎症反应中，T细胞、巨噬细胞等免疫细胞被招募到肺部。这些细胞通过释放炎症介质和直接的细胞间相互作用，参与肺结节的形成和发展。

肉芽肿形成：在肺结节的形成过程中，巨噬细胞和淋巴细胞聚集形成肉芽肿，这是肺结节的典型特征之一。肉芽肿的形成可能是机体对某些抗原或病原体的一种防御反应，但过度或持续的肉芽肿形成会导致肺组织的损伤和纤维化。结节本质为炎性免疫性肉芽肿，其形成与血管紧张素转化酶活性呈正相关。可以通过阻断血管紧张素Ⅱ(ACE-2)生成，抑制血管增生与炎症反应。

氧化应激的作用：活性氧(ROS)在炎症反应和肺结节形成中扮演了重要角色。ROS可以由炎症细胞产生，如巨噬细胞和中性粒细胞，它们可以氧化细胞内的生物分子，如脂质、蛋白质和DNA，导致细胞损伤和死亡。此外，ROS还可以激活转录因子，如NF-κB，进一步促进炎症介质的产生和释放，加剧炎症反应和肺结节的形成。

天然植物提取物或者天然植物活性组分可通过调控炎症介质、减少炎症因子释放、调控活性氧等发挥抑制炎症反应、消散肺结节的作用。针对肺部疾病的发生机制，开发功效成分的提取物组合物，从多靶点、多机制实现肺结节的消散和消除成为需要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种基于接骨木莓的组合物，是一种基于接骨木莓的天然植物提取物组合物，所述组合物用于防治和消除肺结节的应用。

本发明提供的基于接骨木莓的防治和消除肺结节的组合物，由接骨木莓提取物、丹参提取物、槐米提取物、姜黄素、薄荷醇和β-葡聚糖组成。

通过采用上述技术方案，所述的接骨木莓提取物含有丰富的生物类黄酮、花青素、维生素、Omega-3的植物油、矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-桑布双糖苷。已经被证实接骨木(Sambucus nigra L.)提取物能够促进抗炎和细胞抗氧化活性，在预先暴露于接骨木提取物的脂多糖刺激的RAW 264.7细胞表现出对一氧化氮释放的剂量依赖性抑制，证明了抗炎活性。在细胞抗氧化保护方面，HepG2和Caco-2细胞预先暴露于接骨木提取物(50μg/mL)可防止高达90％的叔丁基过氧化氢(t-BOOH)诱导的毒性。在Caco-2细胞中，接骨木提取物可防止谷胱甘肽消耗、活性氧物质产生、异常形态变化和DNA断裂，以响应t-BOOH氧化损伤。结果表明，接骨木浆果在减少细胞氧化应激以及预防炎症过程方面具有很高的潜力。

通过采用上述技术方案，所述的槐米提取物主要指从槐树花蕾中提取的物质，特别是一种名为槲皮素的化合物。槲皮素具有抗炎、抗氧化和细胞凋亡促进作用，这些特性意味着能对肺结节的形成和发展产生积极影响。例如，槲皮素可通过抑制结节反应、消退炎症和养护肺部健康来发挥作用。

通过采用上述技术方案，所述的丹参提取物的主要活性成分包括木犀草素、丹酚酸、丹参素和丹参酮等，具备抗炎、抗氧化、抗凝血及改善血液循环的多重功效，并能通过多成分、多靶点、多途径发挥其在防治肺纤维化中的作用。在肺纤维化的治疗中，丹参主要通过干预氧化应激、炎症损伤、上皮间质转化、成纤维细胞活化、细胞外基质积累及代谢调节等关键环节，其作用机制涉及NF-κB、TGF-β1/Smad、PI3K/Akt、MAPK、Nrf2和AMPK等信号通路。相关因子包括TGF-β、ACE-2、ANG-(1-7)、TNF-α和IL-6等，如丹参酮IIA可以通过调节MAPK信号通路抑制血管紧张素II，进而抑制血管增生与炎症反应，调节免疫抑制炎症，从而来实现预防和消除肺结节。

通过采用上述技术方案，所述的姜黄素是从姜黄中提取的一种天然多酚类化合物，姜黄素能够调控各种炎症因子，如环氧化酶(COX-2)、白介素(IL-1、IL-6、IL-12)、TNF-α、IFN-γ和NF-κB等，减轻肺部炎症反应。通过降低炎症水平，姜黄素对肺部结节的治疗产生积极影响。姜黄素还可以与细胞内的谷胱甘肽(GSH)反应生成新的抗氧化剂，以清除过氧化物，保护细胞免受损伤。肺部结节的形成与氧化应激密切相关，因此姜黄素强大的抗氧化活性有助于抑制结节的发展。

在一些实施例中，组合物中各组分以重量份数计，接骨木莓提取物、丹参提取物、槐米提取物、姜黄素、薄荷醇和β-葡聚糖的重量份比为20～30：4～10：10～18：14～18：0.1～1：5～15。

在一些实施例中，以重量份数计，所述接骨木莓提取物的重量份为20～30份，作为优选，如23～27份。

在一些实施例中，以重量份数计，所述丹参提取物的重量份为4～10份，作为优选，如6～8份。

在一些实施例中，以重量份数计，所述槐米提取物的重量份为10～18份，作为优选，如12～16份。

在一些实施例中，以重量份数计，所述姜黄素的重量份为14～18份，作为优选，如15～17份。

在一些实施例中，以重量份数计，所述薄荷醇的重量份为0.1～1份，作为优选，如0.2～0.8份。

在一些实施例中，以重量份数计，所述β-葡聚糖的重量份为5～15份，作为优选，如8～12份。

所述的丹参提取物含有脂溶性丹参酮类和水溶性酚酸类成分。脂溶性成分有：丹参酮ⅡA、丹参酮I、隐丹参酮、二氢丹参酮等；水溶性成分有：丹参素、丹酚酸B、原儿茶醛、迷迭香酸等。其中脂溶性成分口服吸收利用度低。所述的槐米提取物来源于槐米，槐米作为传统中药材，具有清热凉血、止血抗炎等功效，但其提取物中有益成分芦丁以及槲皮素等成分难溶于水，在制备口服制剂时同样存在吸收比较低。所述的姜黄素是一类提取自姜黄(Curcuma longa L.)的疏水性酸性化合物，具有抗炎、抗氧化等多种生物活性，但由于姜黄素水溶性差、化学性质不稳定、在生理条件下降解速度快等多种原因，也存在生物利用率极低。因此本发明采用脂质微囊化技术，可显著促进脂溶性成分膜透过性，有效提高了生物利用度，增强了其抗炎、消炎作用。

本发明的另一个目的是提供所述组合物在制备消除肺结节药物中的应用。

所述药物由组合物与药学上可接受的赋形剂制成。

所述药物通过调控氧化应激，抑制炎症因子产生和释放，另一方面，可通过阻断血管紧张素Ⅱ生成，抑制血管增生与炎症反应，调节免疫抑制炎症，从而来实现预防和消除肺结节。

所述的药物主要用于防治和消除肺结节，对于其他仍有防治作用，其他肺部疾病包括防治肺损伤、防治肺纤维化、防治肺水肿、防治哮喘、防治慢性肺阻塞；所述肺损伤为急性肺损伤和/或肺纤维化。

所述的赋形剂包括粘合剂、助悬或增稠剂、崩解剂、填充剂、增溶剂、稳定剂、润滑剂、润湿剂、矫味剂等。

所述的组合物还可以包括粘合剂。粘合剂包括但不限于聚维酮k30、聚维酮k29/32、羟丙甲基纤维素、羟丙基纤维素、淀粉、麦芽糊精、蔗糖中的一种或多种。

所述的组合物还可以包括崩解剂。崩解剂有助于物质的分解或分解。术语“崩解”包括剂型与胃肠道液接触时的溶解和分散。崩解剂的例子包括但不限于淀粉，例如预胶化淀粉、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚合物中的一种或多种。

在一些实施例中，如本文所述的组合物还可以包括填充剂。填充剂包括但不限于乳糖、磷酸钙、微晶纤维素、淀粉、麦芽糊精、甘露醇中的一种或多种。

在一些实施例中，如本文所述的组合物可以进一步包括润滑剂。润滑剂包括但不限于硬脂酸、滑石粉、微粉硅胶、硬脂富马酸钠、氢化植物油、硬脂酸镁、山嵛酸甘油酯中的一种或多种。

在一些实施例中，如本文所述的组合物还可以包括增塑剂。增塑剂包括但不限于用于软化微胶囊材料或薄膜涂层以使其不那么脆的化合物。合适的增塑剂包括PEG 300、PEG 400、PEG 2000、PEG 3350、丙二醇、油酸和三乙酸甘油酯。增塑剂还可以用作润湿剂。

在一些实施例中，如本文所述的组合物还可以包括增溶剂。增溶剂包括但不限于中链甘油三酯、橄榄油、三乙酸甘油酯、辛酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮、羟丙基环糊精、乙醇、异丙醇、聚乙二醇300、聚乙二醇400和丙二醇中的一种或多种。

在一些实施例中，如本文所述的组合物还可以包括稳定剂。稳定剂包括但不限于任何抗氧化剂、缓冲剂、防腐剂等化合物。典型的稳定剂包括L-精氨酸、柠檬酸、苯甲醇、苯酚、丙二醇、间甲酚和氨丁三醇中的一种或多种。

在一些实施例中，如本文所述的组合物还可以包括助悬剂或增稠剂。助悬剂或增稠剂包括但不限于聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、海藻酸钠、壳聚糖、阿拉伯树胶、瓜尔豆胶、黄原胶中的一种或多种。

在一些实施例中，如本文所述的组合物还可以包括矫味剂。矫味剂包括但不限于水果香精、安赛蜜、葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉糖和乳糖，以及甜菊苷、甘草甜素、单糖浆和芳香糖浆、糖精钠、三氯蔗糖、阿斯巴甜、纽甜、甘油、山梨醇、甘露醇、枸橼酸中的一种或多种。

所述药物的剂型为口服制剂。

作为可选方式，所述的口服剂型，其可以包括本文中描述的接骨木莓提取物、β-葡聚糖和微囊颗粒(含丹参提取物、槐米提取物、姜黄素和薄荷醇)和可接受的(例如，生理上可接受的)其他赋形剂。

所述的微囊颗粒是将丹参提取物、槐米提取物、薄荷醇和姜黄素采用脂质微囊化技术，制成微囊颗粒，以提高膜渗透性，从而提供生物利用度。

如本文所述的组合物作为一种或多种胶囊施用。在一些实施方案中，剂量为单粒胶囊、两粒胶囊、三粒胶囊或更多。在一些实施方案中，胶囊包含如本文所述的组合物量至少或约100mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、850mg、850mg、900mg、950mg、1000mg，或包括和/或跨越上述值的范围。例如，胶囊可以包含量为300mg至400mg、250mg至500mg、350mg至400mg等的组合物。在一些实施方案中，胶囊包含如本文所述的约400mg的组合物。

所述药物是采用下步骤实现：

(1)将丹参提取物、槐米提取物、薄荷醇和姜黄素采用脂质微囊化技术，制成微囊颗粒；

(2)微囊颗粒与接骨木莓提取物、β-葡聚糖等活性成分混合；

(3)再与其他赋形剂混合，并且至少提供一种赋形剂。

(4)压片制成片剂、填充胶囊制成胶囊剂或颗粒分装制成颗粒剂。

因此，本发明提供的组合物可以为适合口服给药的离散单元，例如胶囊或片剂，每个单元都含有预定量的一种或多种活性成分。这些组合物可以通过任何药学方法制备。通常，此类方法包括将活性成分与构成一种或多种必要成分的赋形剂相关联的步骤。通常，组合物是通过将活性成分与液体赋形剂或细碎的固体赋形剂或两者均匀紧密混合来制备的。然后可以方便地将产品塑造成所需的外观。

所述的微囊颗粒，由以下步骤制得：

a.将丹参提取物、槐米提取物、薄荷醇、姜黄素和油相溶剂在30-50℃以5000-20000r/min剪切5-20min，得到油相物料；

b.将乳化剂和分散剂加水中，在30-50℃下以8000-20000r/min剪切10-30min，得到水相物料；

c.油相物料和水相物料混合后得料液，在8000-20000r/min剪切15-30min，然后进行喷雾干燥，得到微囊颗粒。其中，喷雾干燥的进风口温度为170-200℃，出风口温度为70-80℃，压力为15-30bar。

所述的油相溶剂可以包括但不限于中链甘油三酸酯、橄榄油、大豆油、芝麻油中的一种或多种。

所述的乳化剂可以包括但不限于辛烯基琥珀酸淀粉钠、卵磷脂、十二烷基硫酸钠、吐温60或80、维生素E聚乙二醇琥珀酯(TPGS)、山梨醇单油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、泊洛沙姆、聚氧乙烯氢化蓖麻油和聚乙二醇(15)-羟基硬脂酸酯中的一种或多种。

所述的分散剂可以包括但不限于甘露醇、乳糖、海藻糖、磷酸三钙中的一种或多种。

本发明的基于接骨木莓的组合物，通过脂质微囊化技术有效的解决了天然来源植物提取物中脂溶性活性成分的吸收生物利用度，提高了有效性；同时与接骨木莓提取物协同发挥作用。组合物中各成分相辅相成，相互作用，实现调控氧化应激，调节免疫抑制炎症反应、调控上皮间充质转化相关信号通路等多成分、多靶点多途径发挥防治和消除肺结节的作用，抗组织炎症研究实验也证实了本发明相对于常规技术，凸显出更优的疗效。

附图说明

图1：炎症因子TNF-α水平变化图

图2：炎症因子TGF-β1水平变化图

图3：炎症因子IL-1β水平变化图

具体实施方式

本发明结合附图和实施例对本发明做进一步说明，但本发明并不限于以下实施例等。需要说明的是，在各实施例中，对于处方中的各组成成分的用量，若无特殊说明，则均为“按重量比计算”。

以下实施例所使用的原料来源如下：

接骨木莓提取物购自宁陕国圣生物科技有限公司，规格为花青素10％；

丹参提取物购自宁陕国圣生物科技有限公司，规格为丹参酮IIA5％；

槐米提取物购自浙江天草生物科技股份有限公司，规格为槲皮素90％。

实施例1

名称	用量g
		接骨木莓提取物	25
丹参提取物	8
		姜黄素	16
薄荷醇	0.5
		β-葡聚糖	10
槐米提取物	14
		磷酸钙	20
葡萄糖浆粉	10
		微晶纤维素	56
微粉硅胶	0.5
		辛烯基琥珀酸淀粉钠	10
中链甘油三酸酯	60
			200粒

本实施例提供了一种含接骨木莓组合物胶囊，其制备方法包括如下步骤：

(1)将姜黄素、丹参提取物、槐米提取物、薄荷醇和中链甘油三酸在35℃以5000r/min剪切5min，得到油相物料；

(2)将辛烯基琥珀酸淀粉钠、磷酸三钙、葡萄糖浆粉加水至固形物含量为20％，在35℃下以10000r/min剪切15min，得到水相物料；

(3)油相物料和水相物料混合后得料液，在12000r/min剪切20min，然后进行喷雾干燥，得到微囊颗粒。其中，喷雾干燥的进风口温度为180℃，出风口温度为75℃，压力为20bar。

(4)将(3)所得的微囊颗粒与接骨木莓提取物、β-葡聚糖、微晶纤维素、微粉硅胶混合。

(5)将4)所得的混合粉填充胶囊，即得接骨木莓组合物胶囊。

实施例2

名称	用量/g
		接骨木莓提取物	20
姜黄素	18
		薄荷醇	0.2
槐米提取物	10
		磷酸钙	20
葡萄糖浆粉	10
		甘露醇	81.3
辛烯基琥珀酸淀粉钠	10
		中链甘油三酸酯	60
硬脂酸镁	0.5
			200袋

本实施例提供了一种含接骨木莓组合物胶囊，其制备方法包括如下步骤：

(1)将丹参提取物、槐米提取物、姜黄素和中链甘油三酸酯在35℃以8000r/min剪切10min，得到油相物料；

(2)将辛烯基琥珀酸淀粉钠和葡萄糖浆粉、磷酸钙加水中，在35℃下以15000r/min剪切10min，得到水相物料；

(3)油相物料和水相物料混合后得料液，在15000r/min剪切20min，然后进行喷雾干燥，得到微囊颗粒。其中，喷雾干燥的进风口温度为180℃，出风口温度为75℃，压力为15bar；

(4)将(3)所得的微囊颗粒与接骨木莓提取物、β-葡聚糖、甘露醇、硬脂酸镁混合；

(5)将4)所得的混合粉填充胶囊，即得接骨木莓组合物胶囊。

实施例3

本实施例提供了一种含接骨木莓组合物组合物片，其制备方法包括如下步骤：

(1)将丹参提取物、槐米提取物、姜黄素和橄榄油在50℃以10000r/min剪切20min，得到油相物料；

(2)将TPGS和乳糖加水中，在40℃下以12000r/min剪切20min，得到水相物料；

(3)油相物料和水相物料混合后得料液，在15000r/min剪切20min，然后进行喷雾干燥，得到微囊颗粒。其中，喷雾干燥的进风口温度为190℃，出风口温度为80℃，压力为30bar；

(4)将(3)所得的微囊颗粒与接骨木莓提取物、β-葡聚糖、微晶纤维素、交联聚维酮、硬脂酸镁混合；

(5)将(4)所得的压片，即得接骨木莓组合物片。

实施例4

名称	用量/g
		接骨木莓提取物	23
丹参提取物	6
		姜黄素	15
薄荷醇	0.2
		β-葡聚糖	8
槐米提取物	12
		磷酸钙	10
乳糖	10
		麦芽糊精	10
大豆卵磷脂	8
		中链甘油三酸酯	50
微晶纤维素	66.6
		硬脂富马酸钠	1.2
	200片

本实施例提供了一种含接骨木莓组合物片，其制备方法包括如下步骤：

(1)将丹参提取物、槐米提取物、姜黄素和中链甘油三酸酯在40℃以15000r/min剪切20min，得到油相物料；

(2)将大豆卵磷脂和乳糖、磷酸钙加水中，在50℃下以18000r/min剪切20min，得到水相物料；

(3)油相物料和水相物料混合后得料液，在15000r/min剪切20min，然后进行喷雾干燥，得到微囊颗粒。其中，喷雾干燥的进风口温度为185℃，出风口温度为75℃，压力为20bar；

(4)将3)所得的微囊颗粒、接骨木莓提取物、β-葡聚糖、微晶纤维素、麦芽糊精和硬脂富马酸钠混合后；

(5)将(4)所得的压片，即得接骨木莓组合物片。

实施例5

名称	用量/g
		接骨木莓提取物	27
丹参提取物	8
		姜黄素	17
薄荷醇	0.8
		β-葡聚糖	12
槐米提取物	16
		磷酸钙	10
葡萄糖浆粉	10
		辛烯基琥珀酸淀粉钠	10
中链甘油三酸酯	80
		麦芽糊精	53
微粉硅胶	2.2
		黄原胶	2
阿斯巴甜	2
			200袋

本实施例提供了一种还基于接骨木莓组合物颗粒剂，其制备方法包括如下步骤：

(1)将丹参提取物、槐米提取物、姜黄素和中链甘油三酸酯在45℃以10000r/min剪切15min，得到油相物料；

(2)将辛烯基琥珀酸淀粉钠和磷酸钙、葡萄糖浆粉加水中，在45℃下以10000r/min剪切20min，得到水相物料；

(3)油相物料和水相物料混合后得料液，在15000r/min剪切20min，然后进行喷雾干燥，得到微囊颗粒。其中，喷雾干燥的进风口温度为180℃，出风口温度为75℃，压力为120bar；

(4)将3)所得的微囊颗粒、接骨木莓提取物、β-葡聚糖、麦芽糊精、黄原胶、阿斯巴甜和微粉硅胶混合后；

(5)进行颗粒分装，即得组合物颗粒剂。

对比例1

名称	用量g
		接骨木莓提取物	25
丹参提取物	8
		姜黄素	16
薄荷醇	0.5
		β-葡聚糖	10
槐米提取物	14
		磷酸钙	20
葡萄糖浆粉	10
		微晶纤维素	90.5
预胶化淀粉	5
		微粉硅胶	1
	200粒

本实施例提供了一种含接骨木莓组合物胶囊，其制备方法包括如下步骤：

(1)将丹参提取物、姜黄素、槐米提取物、薄荷醇、磷酸钙、葡萄糖粉和微晶纤维素混合后，加入纯化水，湿法制粒，24目筛整粒后，在50℃热风循环烘箱干燥4h，等到混合颗粒；

(2)将接骨木莓提取物、混合颗粒和微粉硅胶混合；

(3)将(2)所得的混合粉填充胶囊，即得未经微囊化的对比胶囊剂。

实施例6抗肺组织炎性实验

(1)实验动物

物种：SPF级SD大鼠，雄性，9周龄，体重(200±20)g；

数量：36只，随机分为6组(每组6只)，分别为：对照组、模型组、实验组1、实验组2、实验组3、对比组。

(2)实验动物造模

每组6只，先适应性喂养1周后，逐一称重，按5ml/kg剂量腹腔注射20％乌拉坦，待大鼠麻醉后，用1ml注射器，模型组按5mg/kg剂量一次性缓慢注入博莱霉素溶液，对照组用同法注入等量的0.9％氯化钠注射液。

(3)实验周期

大鼠造模完成后的第三天，各组分别予以不同药物灌胃进行干预治疗，剂量：200mg/kg·d，灌胃，每天一次，持续4周。

对照组：正常饮食，给予生理盐水灌胃，

模型组：正常饮食，给予生理盐水灌胃，

实验组1：给予实施例1组合物，

实验组2：给予实施例2组合物，

实验组3：给予实施例5组合物，

对比组：给予对比例1组合物。

(4)检测指标与方法

细胞因子TGF-β1为一种重要的炎性细胞因子，是公认的最重要的组织纤维化的调控因子和启动枢纽；TNF-α是一种诱导炎症反应的细胞因子，对多种炎症细胞有趋化作用，并诱导细胞因子的产生，激活和促进其他炎性因子合成及分泌，与肉芽肿和纤维化形成密切相关，是反映机体炎症与组织损伤严重程度的重要而敏感的指标。

选择TGF-β1、TNF-α和IL-1β细胞因子作为炎症相关指标，考察其肺组织中的水平。

给药28天后处死大鼠，取出肺组织，水洗，滤纸吸干，称定重量，左侧肺叶固定于4％多聚甲醛，备用。右侧肺按照质量(g)：体积(ml)＝1：9的比例加入生理盐水，置于冰上进行组织匀浆，低温离心机4℃下12000r/min离心20分钟，提取上清液，检测肺组织中TGF-β1、TNF-α、IL-1β、IL-10、和IFN-γ含量，根据ELISA试剂盒说明书操作，酶标仪测定波长450nm处吸光度值，通过标准曲线计算各细胞因子的浓度，结果如表1和图1-3所示。

(5)数据分析

数据以均值±标准差表示，采用单因素方差分析(ANOVA)及T检验比较，P<0.05为显著差异，结果见表1和图1-3，其中*代表，与模型组存在显著性差异(P<0.05)，#代表与对比组存在显著性差异(P<0.05)。

表1各组大鼠肺组织细胞因子检测结果(ng/g)

(6)结果

由表1和图1-3中数据对比可以看出，模型组大鼠肺组织TGF-β1、TNF-α和IL-1β水平显著高于正常组，药物干预后，各组间大鼠肺组织中TGF-β1、TNF-α、IL-1β水平较模型组均出现不同程度的降低，差异均有统计学意义(P<0.05)；提示实验组制剂1-3、对比组方均有不同程度的抗炎作用，减轻肺结节炎症反应，从而治疗肺结节。其中以实验组作用最强。进一步说明本发明采用脂质微囊化技术制备的基于接骨木莓提取物的组合物相对常规技术具有更显著的效果。

本发明可以更好地抑制炎症因子，并减轻肺结节炎症反应，实施例显示本发明用于防治和消除肺结节能够发挥更好的作用。

Claims (10)

1.一种基于接骨木莓的组合物，其特征在于，由接骨木莓提取物、丹参提取物、槐米提取物、姜黄素、薄荷醇和β-葡聚糖组成，各组分按重量份比计，接骨木莓提取物、丹参提取物、槐米提取物、姜黄素、薄荷醇和β-葡聚糖的比例为20～30：4～10：10～18：14～18：0.1～1：5～15。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，各组分按重量份比计，接骨木莓提取物、丹参提取物、槐米提取物、姜黄素、薄荷醇和β-葡聚糖的比例为23～27：6～8：12～16：15～17：0.2～0.8：8～12。

3.根据权利要求1或2所述的组合物在制备消除肺结节药物中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药物由组合物与药学上可接受的赋形剂制成。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药物通过如下方法制备：

(1)将丹参提取物、槐米提取物、薄荷醇和姜黄素采用脂质微囊化技术，制成微囊颗粒；

(2)微囊颗粒与接骨木莓提取物、β-葡聚糖活性成分混合；

(3)再与赋形剂混合；

(4)压片制成片剂、填充胶囊制成胶囊剂或颗粒分装制成颗粒剂。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的微囊颗粒，由以下步骤制得：

a.将丹参提取物、槐米提取物、薄荷醇、姜黄素和油相溶剂在30-50℃以5000-20000r/min剪切5-20min，得到油相物料；

b.将乳化剂和分散剂加水中，在30-50℃下以8000-20000r/min剪切10-30min，得到水相物料；

c.油相物料和水相物料混合后得料液，在8000-20000r/min剪切15-30min，然后进行喷雾干燥，得到微囊颗粒，其中，喷雾干燥的进风口温度为170-200℃，出风口温度为70-80℃，压力为15-30bar。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的油相溶剂选用中链甘油三酸酯、橄榄油、大豆油或芝麻油中的一种或多种。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的乳化剂选用辛烯基琥珀酸淀粉钠、卵磷脂、十二烷基硫酸钠、吐温60或80、维生素E聚乙二醇琥珀酯、山梨醇单油酸酯、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、泊洛沙姆、聚氧乙烯氢化蓖麻油或聚乙二醇(15)-羟基硬脂酸酯中的一种或多种。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的分散剂选用甘露醇、乳糖、海藻糖或磷酸三钙中的一种或多种。

10.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的药物剂型为口服制剂，选为软胶囊、胶囊、片剂、颗粒剂、混悬液或乳液。