CN1299694C - 一种解酒保肝的黄酮组合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本项发明公开一种具有显著减轻过量摄入乙醇所致机体伤害的黄酮组合物，该组合物由葛根黄酮和水飞蓟黄酮组成。研究发现葛根黄酮和水飞蓟黄酮在抗氧化、保肝、促进体内乙醇消除方面具有显著的协同作用，本项发明还公开了该组合物在保健食品和药品领域当中的应用。
Description
技术领域
本项发明公开一种应用于药品、保健食品领域的黄酮组合物，具体涉及该组合物以不同制剂载体应用于防治过量饮酒所致损伤。
背景技术
饮酒在中国是一种古老普遍，有悠久传统的社会习俗。我国是世界上最早开始酿酒的国家之一，在距今4000多年前的夏朝就有利用粮食为原料，酿造酒的记录。目前中国依旧是世界上酒精饮料产销量最大的国家。伴随着中国经济的强劲增长，每年酒精饮料的产销量增长超过25％。
适量的酒精摄入可以使大脑的抑制功能降低，从而达到身心放松的效果，现代医学研究也表明适量饮酒可以降低心脑血管疾病的发病率。但是过量饮酒目前是一个全球性的社会问题，危害性饮酒是疾病、伤害、暴力、特别是针对妇女和儿童的暴力、残疾、社会问题和早逝的最重要的根本原因之一。过量饮酒对健康产生严重的伤害性影响，研究表明过量饮酒可以导致肝硬化、肝癌、高血压、中风等疾病，同时还包括由于酒后驾驶导致交通事故中的伤害等，加大了家庭和社会的负担。
在中国由于社会文化等深层次的原因，以及目前所处经济高速的发展时期，酒文化在不同阶层人员的社会活动中都是必须面对的，减少酒精对健康的影响是不得以的权宜之计，在积极、主动的降低摄入酒精之前，采用药物保护饮酒者的健康，具有重要的社会意义，这并非是鼓励饮酒，而是可以有效减轻社会和家庭的负担。
发明内容
过量饮酒直接严重累及肝脏，由于肝脏为人体的化工厂，酒精在胃肠道吸收后，随血液转送到肝脏，在肝脏进行代谢和消除。口服进入体内的酒精超过80％在肝内由细胞色素P450系统代谢。先由胞质液及线粒体内的乙醇脱氢酶氧化成乙醛，继之由线粒体内乙醛脱氢酶氧化成乙酸，最后乙酸由肝释放入血，在外周组织氧化成二氧化碳和水。酒精在肝脏内代谢的过程中能够产生大量的自由基，同时产生的中间体乙醛能够对体内P450酶系以及谷胱甘肽结合，影响对自由基的消除作用；肝脏内堆积的自由基能够导致肝细胞膜脂质过氧化，破坏生物膜流动性、通透性和完整性，最终导致肝脏的病理学变化，引起酒精性脂肪肝、肝炎、肝硬化等。
在对天然抗氧化剂的研究过程当中，我们意外的发现葛根素与水飞蓟素在降低肝脏氧化性损伤方面具有强大的协同作用。系统研究表明由葛根素和水飞蓟素构成的黄酮组合物不但在抗肝脏氧化性损伤方面具有极其显著的协同作用，而且在促进体内乙醇消除方面也有一定的协同作用。
一、黄酮组合物在保肝抗氧化方面的试验数据
试验动物模型：
酒精性慢性肝损伤模型
采用Wistar大鼠，口服灌胃给予60％乙醇溶液，剂量为5ml/kg(动物体重)，连续给予75日，试验期间同时给予模型动物缺营养性饲料。受试药物采用预防性给药，试验结束后测定受试动物的血清学指标：AST，ALT；及其他一些肝脏指标：肝组织过氧化脂质(LPO)，谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等指标。
受试药物及其剂量：
| 比例水飞蓟素/葛根素 | 剂量mg/kg(动物体重) | |
| 水飞蓟素组1 | - | 50 |
| 水飞蓟素组2 | - | 100 |
| 葛根素组1 | - | 150 |
| 葛根素组2 | - | 300 |
| 组合物组1 | 1∶3 | 200 |
| 组合物组2 | 1∶3 | 300 |
试验数据：
| 动物数(n) | AST(u/L) | ALT(u/L) | 肝组织LPO(nmol/g) | 肝组织GSH(μg/g) | 肝细织GSH-Px(u/ml) | |
| 空白对照组 | 10 | 75.1±12.5 | 33.2±8.7 | 30.2±15.1 | 913.4±115.3 | 66.7±3.1 |
| 病理模型组 | 12 | 136.9±33.9 | 59.6±15.1 | 66.7±17.5 | 442.1±101.7 | 41.9±2.9 |
| 水飞蓟素组1 | 12 | 88.3±25.2** | 44.8±18.3* | 39.6±17.6** | 790.5±124.8** | 54.9±3.4* |
| 水飞蓟素组2 | 12 | 71.2±22.6** | 39.6±13.2** | 34.5±10.9** | 879.6±123.6** | 60.8±4.4** |
| 葛根素组1 | 12 | 128.7±38.2 | 60.3±18.5 | 44.9±19.0* | 456.3±89.9 | 50.2±5.1 |
| 葛根素组2 | 12 | 101.2±27.9* | 51.7±18.2 | 40.5±15.9* | 523.4±99.1* | 55.3±3.4* |
| 组合物组1 | 12 | 86.3±22.4** | 42.1±16.6* | 30.3±13.8** | 821.5±111.6** | 60.9±3.8** |
| 组合物组2 | 12 | 66.7±17.5*** | 35.8±9.8** | 25.4±11.9*** | 932.4±121.4*** | 667±4.0** |
与对照组相比：*示P＜0.05；**示P＜0.01；***示P＜0.001
根据上述试验数据，可以得知与单一黄酮类物质相比，葛根素与水飞蓟素的组合物在降低肝脏氧化性损伤方面具有一定的协同作用，如组合物2的AST值66.7±17.5显著低于水飞蓟素组2的对应值71.2±22.6(P＜0.05)和葛根素组2对应值101.2±27.9(P＜0.01)。
在抗氧化方面，则表现出了极为显著的协同作用，表现在肝脏由乙醇导致氧化性指标的变化：减少了过氧化物的产生，如LPO指标的下降；增强肝脏的解毒系统，即消除过氧化损伤的一些还原性指标的数据上升，如GSH、GSH-Px。组合物的上述指标数据与单一黄酮类物质的指标的显著性差异，表现出了不同物质之间在抗氧化方面的协同作用。
二、黄酮组合物在消除体内乙醇方面的试验数据
采用Wistar大鼠，禁食12h，口服灌胃给予60％乙醇溶液，剂量为10ml/kg，药物采用预防性给药，提前3d给药，bid，给药剂量依次为：葛根素150mg/kg；组合物组1 200mg/kg；组合物组2 300mg/kg；动物接受乙醇后1、2、3、5h后眼眶静脉采血，BAC法测定乙醇含量。
试验结果表明单独给予水飞蓟素对受试动物体内的乙醇消除基本没有影响(无数据)，葛根素可以影响乙醇的消除，但是意外的发现黄酮组合物在消除受试动物体内的乙醇方面具有显著的协同作用，同时具有一定的量效关系，具体试验数据参见下表。
| 血醇浓度(mg/L) | 0.5h | 1h | 2h | 3h | 5h | |
| 对照组 | 66.7±5.9 | 93.8±8.6 | 87.5±5.7 | 81.2±4.5 | 75.2±6.6 | |
| 葛根素组 | 60.7±3.9 | 88.7±6.7 | 80.5±4.4 | 70.5±3.5 | 61.2±2.9 | P＜0.05 |
| 组合物组1 | 48.9±3.1 | 75.7±4.6 | 70.4±3.3 | 62.3±2.2 | 50.2±1.9 | P＜0.01 |
| 组合物组2 | 41.2±2.3 | 69.8±5.9 | 63.7±4.2 | 55.8±3.1 | 45.1±2.1 | P＜0.001 |
各组受试动物接受乙醇后不同时间的血醇浓度图见说明书附图
上述试验数据显示了葛根黄酮、水飞蓟黄酮的组合物在抗氧化、保肝、解酒三个方面显著的协同作用；结合其他研究数据，可知该黄酮组合物间“意外”效应在消除过量饮酒方面具有积极的作用。综合文献和我们的研究资料，上述显著的协同作用获得可能是通过下述因素获得：
(1)促进乙醇脱氢酶作用，加速乙醇向乙醛的代谢。葛根黄酮不但是一种扩血管药物，目前的研究显示该类物质可能具有激活乙醇脱氢酶的效应；
(2)水飞蓟黄酮作为一种天然抗氧化剂，可以快速消除乙醇的代谢产物乙醛，间接的促进了乙醇向乙醛的转换代谢；
(3)通过上述环节减少了肝脏中自由基的产生，减轻了酒精对肝脏的损伤；
(4)水飞蓟所具备的肝细胞膜保护作用，经由葛根素得到加强。
三、黄酮组合物的制备
葛根黄酮
豆科植物野葛Pueraria lobata或甘葛藤Pueraria thomsonii的干燥根，是一味在中医当中有着长久应用历史的药材，现代研究表明葛根当中的黄酮类物质具有较强的扩血管作用，目前主要应用于治疗心脑血管疾病。在传统医学当中，葛根和葛花一直被视为解酒良药，中医应用葛根解酒毒有4000多年的历史了如在《千金方》中记载“葛根主解酒毒”。
目前的研究表明葛根黄酮系由一系列异黄酮类物质构成，主要为葛根素，其他包括大豆苷、大豆苷元等。本项发明所涉及的葛根黄酮可以选自葛根素、大豆苷、大豆苷元，以及含有超过20％葛根素的葛根黄酮提取物。葛根素以及葛根黄酮提取物的制备采用目前常规方法制备(主要为色谱法或是溶剂法)，由于葛根素是在临床上应用较多的心脑血管药物，因此葛根素或是葛根黄酮提取物的制备目前已有较多资料公开发表。
水飞蓟黄酮
水飞蓟是菊科蓟属植物水飞蓟Silybum marianum果实，其果实当中的黄酮类物质具有保肝作用，1755年Haller首次应用水飞蓟治疗肝脏疾患；我国于1972年自德国引进水飞蓟，在各地推广种植成功。
目前在临床上应用保肝的药物中，水飞蓟素、水飞蓟宾、水飞蓟宾衍生物均来源于水飞蓟的提取物，活性物质都为黄酮类。目前以水飞蓟素应用较广。水飞蓟素为一主要包括水飞蓟宾(silybin)、水飞蓟宁(silidianin)、水飞蓟丁(silichristin)以及异水飞蓟宾(isosilybin)等物质的混合物。在这些化合物当中水飞蓟宾的含量最高，活性亦最强。本项发明涉及的水飞蓟黄酮选自水飞蓟素、水飞蓟宾、水飞蓟宾葡甲胺盐以及其他含有超过20％水飞蓟宾的水飞蓟黄酮提取物。由于水飞蓟素、水飞蓟宾在临床上广有应用，因此其提取制备工艺采用目前常规方法制备(主要为溶剂法)。
葛根黄酮水飞蓟黄酮组合物的制备采用适当溶剂，将二种物质溶解后，挥去溶媒，干燥即得。由于葛根黄酮和水飞蓟黄酮晶格能均较高，溶解度差；在制成制剂前可以将该黄酮组合物与适当的载体制成固体分散体，以改善由该黄酮组合物制成的制剂的溶出度和生物利用度。也可采用将黄酮组合物先进行微粒化处理，改善制剂的溶出。
综上所述，本项发明要求如下：
1、一种用于解酒保肝的黄酮组合物，其特征在于所述组合物由葛根黄酮和水飞蓟黄酮组成。
2、根据权利要求1所述的组合物，其特征在于二种黄酮具有下述重量配比：
葛根黄酮50～600份 水飞蓟黄酮10～600份。
3、根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于所述水飞蓟黄酮选自水飞蓟素、水飞蓟宾，以及含有超过20％水飞蓟宾的水飞蓟黄酮提取物中的任一种。
4、根据权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的葛根指来自豆科葛属植物野葛或甘葛，所述葛根黄酮为葛根素、大豆苷，以及含有超过20％葛根素的葛根黄酮提取物中的任一种。
5、一种根据权利要求1所述的黄酮组合物在制备药品中的应用。
6、一种根据权利要求1所述黄酮组合物在制备保健食品中的应用。
7、根据权利要求5所述黄酮组合物在制备药品中的应用，其特征在于所述药品由该黄酮组合物与药学上可接受的赋形剂制成。
8、根据权利要求5所述的黄酮组合物在制备药品中的应用，其特征在于将黄酮组合物制成固体分散体或是进行微粒化处理，以改善由该黄酮组合物制成的口服固体制剂的溶出度；所述固体分散体为黄酮组合物与磷脂、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮任一种制成。
9、根据权利要求5所述的黄酮组合物在制备药品中的应用，其特征在于所述药品的剂型为普通片剂、分散片、泡腾片、软胶囊剂、滴丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂以及口服液中的任一种。
10、一种根据权利要求5所述的黄酮组合物在制备药品中的应用，其特征在于在所述药品当中添下述促进肝脏代谢的营养物质中的一种或几种：维生素、氨基酸、大豆磷脂、肌苷、辅酶、牛磺酸。
具体实施方式
实施例1、黄酮组合物磷脂固体分散体的制备
主药配比：
葛根素 100g
水飞蓟素 100g
大豆磷脂 20g
按照上述配比称取主药和辅料大豆磷脂，置于2000ml的圆底烧瓶当中，加入95％乙醇800ml，加热至全部物质溶解，减压挥去溶媒，干燥，即得黄酮组合物固体分散体。
实施例2、黄酮组合物片剂制备1
片剂处方：
葛根素 200g
水飞蓟素 100g
微晶纤维素 75g
乳糖 80g
羟丙纤维素 25g
95％乙醇 q.s.
交联羧甲基纤维素钠 25g
微粉硅胶 3g
制成1000片
制法：按照上述制剂处方，称取主药葛根素和水飞蓟素，加入微晶纤维素、乳糖以及15g羟丙基纤维素，以95％乙醇制粒，60℃干燥，整粒；加入其余辅料混合均匀后压片，制成1000片。
实施例3、黄酮组合物片剂制备2
片剂处方：
葛根素 240g
水飞蓟宾 60g
Vc 20g
肌苷 50g
微晶纤维素 75g
预胶化淀粉 75g
羟丙纤维素 25g
硫酸钙 50g
微粉硅胶 3g
制成1000片
制法：按照上述制剂处方，称取主药过100目筛，辅料亦过100目筛，将过筛后的主药和辅料充分混合，直接压片，制成1000片，包装，即得。
实施例4、黄酮组合物颗粒剂
制剂处方：
水飞蓟黄酮提取物 500g
葛根素 50g
猪肝脏提取物 300g
微晶纤维素 100g
苯甲酸钠 3.0g
交联羧甲基纤维素钠 30g
十二烷基硫酸钠 3g
陈皮酊 20ml
蔗糖 1600g
制成1000袋
制法：将主药、交联羧甲基纤维素钠分别过80筛后，置混合器当中与蔗糖混合，将苯甲酸钠、陈皮酊、十二烷基硫酸钠溶于水中制成润湿剂：将上述主药与润湿剂混匀，制粒，干燥，过30目筛整粒，分装，包装，即得颗粒剂。
实施例5、黄酮组合物胶囊剂
制剂处方：
水飞蓟素 90g
葛根素 100g
大豆磷脂 20g
预胶化淀粉 20g
羧甲基淀粉钠 10g
SDS 3.0g
甘露醇 30g
制成1000粒
制剂：首先按照实施例1中的方法将黄酮组合物与磷脂制成固体分散体；取固体分散体，过100目筛，其余辅料过筛后与主料混合均匀，装胶囊，包装，即得。
实施例6、黄酮组合物软胶囊剂
制剂处方：
水飞蓟宾 30g
葛根总黄酮(含有60％葛根素) 200g
PVP 20g
丙二醇 30g
水 10g
聚乙二醇400 210g
制成1000粒
制剂：首先按照实施例1中的方法将黄酮组合物与PVP(聚乙烯吡咯烷酮)制成固体分散体；取固体分散体，与基质混匀，压制成型，包装，即得。
实施例7、黄酮组合物分散片制备
制剂处方：
水飞蓟宾 70g
葛根素 200g
大豆磷脂 27g
甘露醇 100g
CMS-Na 25g
微晶纤维素 100g
L-HPC 25g
交联CMC-Na 25g
5％PVPK30 100g
硬脂酸镁 3g
微粉硅胶 6g
制成1000片
按照上述分散片制剂，取水飞蓟宾、葛根素和大豆磷脂按照实施例1中所述的方法制成固体分散体；取固体分散体进行微粒化处理，将上述固体分散体置于气流粉碎机当中，充分粉碎，过400目筛。
取上述微粒化黄酮组合物，加入微晶纤维素、交联CMC-Na、1/3处方量的CMS-Na置湿法混和制粒机中，混和2min，加入黏合剂(5％ PVP K30乙醇溶液)，30目筛制粒，50～80℃干燥；干颗粒过20目筛整粒，往干燥颗粒当中加入硬脂酸镁和微粉硅胶，以及剩余2/3的CMS-Na和剩余的甘露醇，混匀，压片，包装，即得组合物分散片。
按照上述制剂处方制得的组合物分散片崩解时限不超过10min；水飞蓟宾30min溶出度不低于80％，葛根素30min溶出度不低于90％。
实施例8、黄酮组合物泡腾片制备
制剂处方：
水飞蓟宾 35g
葛根素 70g
牛磺酸 30g
必须氨基酸 60g
辅酶 10g
甜蜜素 10g
糖精纳 1g
柠檬酸 175g
碳酸氢钠 125g
微粉硅胶 3g
制成1000片
制法：主、辅料分别过100目筛，主药50～60℃干燥3h，辅料80℃干燥3h，在相对湿度小于RH45％的条件下，各原辅料混匀，压片，检验，立即密封包装，即得。
实施例9、黄酮组合物滴丸剂制备
水飞蓟宾 10g
葛根素 20g
大豆磷脂 5g
PEG4000 9.0g
PEG6000 15g
制成1000粒
制法：将9.0g聚乙二醇4000与13.5g聚乙二醇6000置容器内，在85～90℃的油浴上加热熔融，随即加入水飞蓟宾和葛根素，搅拌均匀，然后移入滴丸机贮液瓶，密闭并保温在80～85℃，进行滴制，滴出的滴丸经10～15℃的液体石蜡冷却，沥尽石蜡，制成1000粒，即得。
实施例10、组合物口服液制备制备
水飞蓟宾邻苯二甲酸单酯钠盐 20g
葛根黄酮提取物(含有葛根素30％) 800g
尼泊金乙酯 0.5g
甜蜜素 10g
糖精纳 1g
薄荷醑 10ml
蒸馏水 加至 15000ml
制成1000瓶
制法：取蒸馏水1000ml，煮沸，加入甜蜜素、糖精钠与尼泊金乙酯，搅拌溶解后，滤过，滤液中加入主药，搅拌溶解，放冷，加薄荷醑与适量蒸馏水，使全量为15000ml，搅匀，灭菌，分装，即得。
Claims (10)
1、一种用于解酒保肝的黄酮组合物，其特征在于所述组合物由葛根黄酮和水飞蓟黄酮组成。
2、根据权利要求1所述的组合物，其特征在于二种黄酮具有下述重量配比：
葛根黄酮50～600份 水飞蓟黄酮10～600份。
3、根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于所述水飞蓟黄酮选自水飞蓟素、水飞蓟宾，以及含有超过20％水飞蓟宾的水飞蓟黄酮提取物中的任一种。
4、根据权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的葛根指来自豆科葛属植物野葛或甘葛，所述葛根黄酮为葛根素、大豆苷，以及含有超过20％葛根素的葛根黄酮提取物中的任一种。
5、一种根据权利要求1所述黄酮组合物在制备药品中的应用。
6、一种根据权利要求1所述黄酮组合物在制备保健食品中的应用。
7、根据权利要求5所述的黄酮组合物在制备药品中的应用，其特征在于所述药品由该黄酮组合物与药学上可接受的赋形剂制成。
8、根据权利要求5所述的黄酮组合物在制备药品中的应用，其特征在于将黄酮组合物制成固体分散体或是进行微粒化处理，以改善由该黄酮组合物制成的口服固体制剂的溶出度；固体分散体为黄酮组合物与磷脂、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮任一种制成。
9、根据权利要求5所述的黄酮组合物在制备药品中的应用，其特征在于所述药品的剂型为普通片剂、分散片、泡腾片、软胶囊剂、滴丸剂、硬胶囊剂、颗粒剂以及口服液中的任一种。
10、一种根据权利要求5所述的黄酮组合物在制备药品中的应用，其特征在于所述药品当中添加下述促进肝脏代谢的营养物质中的一种或几种：维生素、氨基酸、大豆磷脂、肌苷、辅酶、牛磺酸。
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