CS192791A3 - Biomolecules immobilization process - Google Patents
Biomolecules immobilization process Download PDFInfo
- Publication number
- CS192791A3 CS192791A3 CS911927A CS192791A CS192791A3 CS 192791 A3 CS192791 A3 CS 192791A3 CS 911927 A CS911927 A CS 911927A CS 192791 A CS192791 A CS 192791A CS 192791 A3 CS192791 A3 CS 192791A3
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- electrode
- biosensor
- solution
- biomolecules
- immersed
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 36
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 13
- 238000000151 deposition Methods 0.000 claims description 22
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims description 18
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 14
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 14
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 claims description 10
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 claims description 10
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 claims description 10
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims description 10
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 claims description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 8
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims description 6
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 230000005012 migration Effects 0.000 claims description 5
- 238000013508 migration Methods 0.000 claims description 5
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 claims description 3
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 claims description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims 5
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 15
- 239000004020 conductor Substances 0.000 description 13
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 9
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 7
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 6
- 238000004070 electrodeposition Methods 0.000 description 6
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 6
- -1 platinum ions Chemical class 0.000 description 6
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 5
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 3
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- YCLSOMLVSHPPFV-UHFFFAOYSA-N 3-(2-carboxyethyldisulfanyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)CCSSCCC(O)=O YCLSOMLVSHPPFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N Glycolaldehyde Chemical compound OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012811 non-conductive material Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QMXCRMQIVATQMR-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-pyridin-2-ylsulfanylpropanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSC1=CC=CC=N1 QMXCRMQIVATQMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMXHPSHLTSZXKH-RVBZMBCESA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoate Chemical compound C([C@H]1[C@H]2NC(=O)N[C@H]2CS1)CCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O YMXHPSHLTSZXKH-RVBZMBCESA-N 0.000 description 1
- VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IEUUDEWWMRQUDS-UHFFFAOYSA-N (6-azaniumylidene-1,6-dimethoxyhexylidene)azanium;dichloride Chemical compound Cl.Cl.COC(=N)CCCCC(=N)OC IEUUDEWWMRQUDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-triazine Chemical compound C1=CN=NN=C1 JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTTZISZSHSCFRH-UHFFFAOYSA-N 1,3-bis(isocyanatomethyl)benzene Chemical compound O=C=NCC1=CC=CC(CN=C=O)=C1 RTTZISZSHSCFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001140 1,4-phenylene group Chemical group [H]C1=C([H])C([*:2])=C([H])C([H])=C1[*:1] 0.000 description 1
- VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=C(F)C=C1F VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WJCPMQQLTJQIJK-UHFFFAOYSA-N 1,6-diisocyanohexane Chemical compound [C-]#[N+]CCCCCC[N+]#[C-] WJCPMQQLTJQIJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LZJPDRANSVSGOR-UHFFFAOYSA-N 1-(4-azidophenyl)-2-bromoethanone Chemical compound BrCC(=O)C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 LZJPDRANSVSGOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KHAWDEWNXJIVCJ-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-4-(4-fluoro-3-nitrophenyl)sulfonyl-2-nitrobenzene Chemical compound C1=C(F)C([N+](=O)[O-])=CC(S(=O)(=O)C=2C=C(C(F)=CC=2)[N+]([O-])=O)=C1 KHAWDEWNXJIVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNPGNTUTUMMTIN-UHFFFAOYSA-N 2-bromopyrrolidine-1-carboxylic acid Chemical compound C1CC(N(C1)C(=O)O)Br DNPGNTUTUMMTIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VCTBSHQJICJJFV-UHFFFAOYSA-N 4-azido-1-fluoro-2-nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC(N=[N+]=[N-])=CC=C1F VCTBSHQJICJJFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWYHFZWHUSLIDH-UHFFFAOYSA-N 5,5-diazido-2-(2-phenylethenyl)cyclohex-3-ene-1,1-disulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1(S(O)(=O)=O)CC(N=[N+]=[N-])(N=[N+]=[N-])C=CC1C=CC1=CC=CC=C1 ZWYHFZWHUSLIDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BNDRECGBDISUAI-UHFFFAOYSA-N 6-(2-phenylethenyl)cyclohexa-2,4-diene-1,1-disulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1(S(O)(=O)=O)C=CC=CC1C=CC1=CC=CC=C1 BNDRECGBDISUAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JSBWQIZQJOQPFN-UHFFFAOYSA-N 6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexylazanium;chloride Chemical compound Cl.CC(C)(C)OC(=O)NCCCCCCN JSBWQIZQJOQPFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHXGXXJEEHFHDK-UHFFFAOYSA-N 6-[(6-hydroxynaphthalen-2-yl)disulfanyl]naphthalen-2-ol Chemical compound C1=C(O)C=CC2=CC(SSC3=CC4=CC=C(C=C4C=C3)O)=CC=C21 AHXGXXJEEHFHDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006410 Apoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083590 Apoproteins Proteins 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 1
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 1
- 102000004366 Glucosidases Human genes 0.000 description 1
- 108010056771 Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000005057 Hexamethylene diisocyanate Substances 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021607 Silver chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- GTDPSWPPOUPBNX-UHFFFAOYSA-N ac1mqpva Chemical compound CC12C(=O)OC(=O)C1(C)C1(C)C2(C)C(=O)OC1=O GTDPSWPPOUPBNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000000429 assembly Methods 0.000 description 1
- 230000000712 assembly Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N cyanuric chloride Chemical compound ClC1=NC(Cl)=NC(Cl)=N1 MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- ILKCDNKCNSNFMP-UHFFFAOYSA-N dimethyl octanediimidate;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.COC(=N)CCCCCCC(=N)OC ILKCDNKCNSNFMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 238000001652 electrophoretic deposition Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- RRAMGCGOFNQTLD-UHFFFAOYSA-N hexamethylene diisocyanate Chemical compound O=C=NCCCCCCN=C=O RRAMGCGOFNQTLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- BXGTVNLGPMZLAZ-UHFFFAOYSA-N n'-ethylmethanediimine;hydrochloride Chemical compound Cl.CCN=C=N BXGTVNLGPMZLAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 1
- HKOOXMFOFWEVGF-UHFFFAOYSA-N phenylhydrazine Chemical compound NNC1=CC=CC=C1 HKOOXMFOFWEVGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940067157 phenylhydrazine Drugs 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M silver monochloride Chemical compound [Cl-].[Ag+] HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- FZQIQTXXAATZOS-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[(4-isothiocyanatophenyl)methyl]carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCC1=CC=C(N=C=S)C=C1 FZQIQTXXAATZOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N thiodiglycol Chemical compound OCCSCCO YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- DVKJHBMWWAPEIU-UHFFFAOYSA-N toluene 2,4-diisocyanate Chemical compound CC1=CC=C(N=C=O)C=C1N=C=O DVKJHBMWWAPEIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/001—Enzyme electrodes
- C12Q1/002—Electrode membranes
- C12Q1/003—Functionalisation
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/817—Enzyme or microbe electrode
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
^í’l ~c-,í 1
Způsob imobilizace biomolekul
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu imobilizsce biomolekul na vodivémsubstrátu. Především se vynález týká způsobu elektrodepozicebiomolekul, jako jsou enzymy a protilátky, na vodivém substrá-tu s následným chemickým sesítěním biomolekul za vytvoření vevodě nerozpustné hmoty.
Dosavadní stav techniky
Imobilizace biomolekul na substrátu je důležitá pro četnéběžné analytické nebo průmyslové účely využívající biomolekul.Imobilizací se převádějí typicky ve vodě rozpustné biomolekuly,jako jsou enzymy nebo protilátky, na komplexy ve vodě neroz-pustné vázáním alespoň nějakých molekul na fysikální nosičovymateriál, nerozpustný ve vodě. Takto imibilizovaných biomole-kul se často může používat pro četné účely beze změny jejichkoncentrace nebo účinnosti v závislosti na čase. Imobilizacemá tu přídavnou výhodu, že se biomolekuly mohou uchovávat to-liko ve specifických žádaných oblastech zařízení nebo čidla/=sensoru/ za minimalizace materiálových nákladů a za maxima-lizace zjistitelné biologické účinnosti. Důležité analytické použití imibilizovaných biomolekul,například enzymů, protilátek nebo glykoproteinů jako leciti-nů, je v biosenzorech, kterých se používá pro zjištovéní pří-tomnosti nebo koncentrace vybraných fysiologických molekul ja-kožto výsledek vzájemného působení fysiologického ligandu aimobilizovaných biomolekul. Dosud bylo však obtížné přizpůso-bit známé imobilizační techniky se zřetelem na použití ve spo-jení s miniaturními elektrochemickými biosenzory, vyráběnýmiběžnými způsoby výroby polovodičů. Současné techniky z oblas-ti polovodičů umožňují výrobu čidla s povrchem tak malým, ja-ko je 1,0 yUm . rento malý rozměr představuje pn konstrukcičidla obtíže, jelikož výroba biosenzorů obecně vyžaduje 2 ukládání biomolekuly jedině na povrchu pracovní elektrody, které se. používá k monitorování produktu enzymatické reakce. Bio-molekuly, uložené na jiném povrchu biosenzoru, by reagovalyza vzniku produktu, který by nemohl být stanoven, čímž při-cházejí nazmar často drahé biomolekuly.
Způsobem předcházení problémům při ukládání biomolekulje elektroforeza k podpoře migrace nabitých biomolekul, na-příklad proteinů, amfipatických lipidů nebo nukleinové kyse-liny. Ve vhodném prostředí mají takové biomolekuly positivněnebo negativně nabitý podíl, který je přitahován na pole s o-pačným nábojem ve vytvořeném elektrickém poli. Migrace bio-molekul· v prostředí směrem k elektrodě s opačným nábojem, než je podporována má biomolekula a její ukládání na takové elektroděj/vytvořenímpotenciálu v prostředí mezi dvěma elektrodami.
Způsoby elektroforetického ukládání popisuje napříkladIkariyama a kol., J. Electrochem. Soc., 136/6/, str. 702 až706, 1989/. Při tomto popisovaném způsobu se současně ukládá-jí platinové částice a glukosoxidasa jakožto enzym. Při hod-notě pH, při které dochází normálně k platinizaci, má glu-kosoxidasa čistě pozitivní náboj, jelikož hodnota pH je niž-ší než její isoelektrický bod 4,3. Glukosoxidasa je proto při-tahována k; elektrodě s opačným nábojem spolu s ionty platiny. K .podpoře stability uloženého enzymu se čidlo ponoří do roz-toků albuminu a glutaraldehydu k sesítění molekul. Tentozpůsob však může vést k desaktivaci enzymu, jelikož se propodporu současného ukládání enzymu používá poměrně nízké hod-noty pH.
Aizawa a kol., J. CJxem. Soc. Japan /Nippon Kagaku Kais-hi, 11, str. 2210 až 2213, 1987/ popisují vývoj způsobu elek-trolytického ukládání glukosoxidasy. Glukosoxidasa se absor-buje na povrchu platinové elektrody za řízeného potenciáluz vodného roztoku. Jakožto optimální podmínky pro ukládáníglukosoxidasy se uvádí 0,1 V, Ag/AgCl a pH 3. Maximálnítlouátka, dosahovaná tímto způsobem, jsou vrstvy tlusté 4 v molekuly glukosoxidasy, což je ekvivalentní tlouštce filmuglukosoxidasy přibližně maximálně 56 x 10 m. Způsob se zkoušel při hodnotách pH 3 až 9, přičemž se optimálního ukládá-ni dosáhlo při hodnotě pH 3. Mimořádně tenká vrstva, nanesenátímto způsobem, je nepřiměřená pro mnohé účely, kdy se vyža-duje vzájemné působení ligandu a biomolekuly nijak omezenoureakcí. Dalším nedostatkem je omezená životnost, a nová použi-telnost tenkých vrstvev imibilizovaných molekul. Úkolem vynálezu je proto vyvinout způsob ukládáni a imo-bilizace poměrně tlusté vrstvy molekul na vodivém substrátupro dosažení neomezeného působení ligendu a biomolekuly. úkolem vynálezu je také vyvinout způsob reprodukovatel-ného a přesného ukládání a imobilizace biomolekul na miniatur-ních elektronických čidlech. Rovněž je úkolem vynálezu vyvi-nout způsob současného ukládáni a imobilizace četných různýchbiomolekul na vodivém substrátu. Přídavně je úkolem vynálezu vyvinout způsob ukládání a imo-bilizace biomolekul způsobem, který by vedl k vrstvám o tloušt-ce 1t> “8 m.
Podstata vynálezu
Podstata způsobu imobilizace biomolekul a zvláště pří-pravy biosenzorové elektrody s biomolekulární složkou podle v % vynálezu spočívá v tom, že se připravuje roztok alespoň jed-noho druhu biomolekuly určené k nanášení, dostatečně pufrova-ný k předcházení denaturace biomolekul a na hodnotu, kdy všech-ny biomolekuly, určené k nanášení, mají stejné znaménko čis-tého elektrického náboje v důsledku svýoh. isoelektrických bo-dů, do roztoku se ponoří biosenzorová elektroda a elektrodas opačným nábojem, mezi biosenzorovou elektrodou a álektrodous opačným nábojem se vytvoří potenciální rozdíl menší než 1 V,přičemž se potenciál mění k vytvoření v podstatě konstantníhoproudu mezi elektrodami, dostatečného k vytvoření migracebiomolekul určených pro ukládání na biosenzorové elektroděa na hromadění na ní.
Mezi oběma elektrodami se vytváří potencionálový rozdíl100 minivoltů až 1 volt. Myž se na biosensorové elektrodě 4 dosáhne žádané tlouštky nánosu, může se stabilita nanesenéhofilmu biomolekul podpořit jeho sesítěním vhodným sesitujícímčinidlem. Při výhodných provedeních způsobu podle vynálezu je roz-tok, obsahující biomolekuly vodný a proud mezi biosensorovouelektrodou a elektrodou s cpačním nábojem se volí přibližně5 mA/cm^. Napětí se upravuje směrem .nahoru v průběhu procesuukládání k udržení konstantního proudu přesto, že vzrůstá e-lektrický odpor biosensorové elektrody v důsledku ukládáníbiomolekulárního filmu. Ukládání biomolekul pokračuje tak dlou-ho, až je střední tlouštka filmu na biosensorové elektroděvětší než 5 mikrometrů. Výhodou způsobu podle vynálezu je jeho široká použitelnostpro vodivé substráty s nejrůznější geometrií. Jelikož je uklá-dání biomolekul ne elektroforetickén základu, mohou se bio-molekuly ukládat skutečně na jakémkoliv vodiči nebo polovodi-či., nezávisle na jeho tvaru nebo topografii. Například se mo-hou rovnoměrně biomolekulérním filmem povlékat povrchy velmidrsného vodiče nebo se mohou velmi snadno biomolekuly ukládatuvnitř vodivého materiálu například v platinové trubce a mo-hou se vkládat dc systému pro analytické účely. Na rozdíl odmnohých jiných způsobů ukládání filmu je 'u takových elek-troforetických způsobů ukládání biomolekul lokalizováno,přičemž se žádaná biomolekula ukládá jen v blízkosti vodivéhosubstrátu.
Jinou výhodou způsobu podle vynálezu jsou poměrně tlus-té vrstvy biomolekul, které se mohou ukládat na biosensorovouelektrodu. Mnohá fysiologická použití zahrnují vzájemné pů-sobení mezi relativně velkým množstvím zvláštního fysiologické-ho ligandu, který se má zjistit, a biomolekulou, uloženou nabiosensorové elektrodě. Velmi tenké monomolekulární filmy ne-bo filmy mající tlouštku mnohem menší než 1 mikrometr, mo-hou způsobit reakci mezi fysiologickým ligandem a biomoleku-lou omezenou v důsledku malého množství biomolekul dostupných pro reakci, v důsledku klesající citlivosti senzoru a pro ne-lineární vztah vzájemného působení /mezi biomolekulou a li-gandem/, což vše může znesnadňovat stanovení množství ligen-du, obsaženého v roztoku.
Jiná výhoda způsobu podle vynálezu vyplývá z použitíkonstantního proudu v průběhu ukládání na biosensorovou elek-trodu. To vede ke stálému ukládání biomolekul na biosensorovéelektrodě i když biomolekulární nános blokuje povrch elektro-dy a nejzáže vzroste elektrický odpor. Jelikhž odpor bio-sensorové elektrody vzrůstá v průběhu procesu ukládání jakproud. tak. rychlost ukládání biomolekuly by zpravidla klesalypokud by se postupně nezvyšovalo napětí. Tento pokles rychlos-ti ukládání by pokračoval tak dlouho, až by již k žádnému uk-ládáni nedocházelo, i kdyby byl ukládaný film méně tlustý, nežje požadováno, ^a rozdíl od toho zůstává proud konstantní azpůsob podle vynálezu umožňuje zvyšování napětí se vzrůstají-cím odporem tak dlouho až se napětí přiblíží hodnotě, při kte-ré se voda bud oxiduje nebo redukuje za vzniku plynových bub- v linek, čímž se podporuje vytváření filmů o tlouŠtce větší než10 mikrometrů.
Jinou předností způsobu podle vynálezu je použitelnostpři hodnůtách pH srovnatelných s fysiologickými hodnotami pH,při kterých se biomolekula vytváří. Velmi tlusté filmy bílko-vinových biomolekul, například enzymů, se mohou ukládat přifysiologických hodnotách pH /7,4/ ve vodných roztocích, čímžse snižuje na minimum nebezpečí ztráty účinnosti nebo denatu-race enzymu, k čemuž může docházet při jiných způsobech uklá-dání enzymových filmů. Výhody a přednosti způsobu podle vynálezu vyplynou pracovníkůrn v oboru také z následujícího popisu příkladných prove-dení, která však vynález nijak neomezují.
Pro názornost je na obr. 1 schéma zařízení pro elektro-depozici biomolekul na biosensorovou elektrodu, ponořenou dokapaliny, bosahující nanášenou biomolekulu.
Na obr. 1 je zařízení 1_Q pro elektrodepozici, vhodné pro pro-vádění způsobu podle vynálezu. Zařízení 1 0 zahrnuje nádobu 1 2určenou pro kapalinu 30« Kapalinou 30 může být buď roztok ne-bo suspenze obsahující biomolekulu, určenou k nanášení. Záoj14 elektrické energie má -t-vodič 16, spojený s biosensorovouelektrodou 22 a -vodič 18, spojený s elektrodou 20 s opačnýmnábojem, který dodává v podstatě konstantní proud, mezi elek-trodou 20 a elektrodou 22. Biosensorová elektroda 22 vytváříčást biosensorové jednotky 2^, která zahrnuje biosensorovou elektrodu 22 a elektricky nevodivý substrát 24. +Vodič 16 a-vodič 18 jsou elektricky stíněny nevodivým materiálem, schopným vydržet ponořeni do kapaliny 30»
Směr toku proudu se může obrátit popřípadě přepnutímspojů +vodiče 16 a -feodiče 18 na zdroji 14 elektrické energiečímž získá +vodič 16 negativní náboj a -vodič 18 positivní náboj. Jelikož je jak +vodiČ 16 tak -vodič 18 stíněn a substrát24, obklopující biosensorovou elektrodu je konstruován z ne-vodivého materiálu, ukládání biomolekulárních látek, obsa-žených v kapalině JO., probíhá jen na elektrodě 20 nebo na e-lektrodě 22 s opačným nábojem než je náboj biomolekuly v ka-palině 30.
Jakožto biomolekuly, vhodné pro ukládání na elektrodě 20nebo na elektrodě 22 se uvádějí, nikoliv však jako nějaké omezení, nýbrž příkladně.následující třídy přírodně se vyskytujících nebo uměle syntetizovaných molekul nebo molekulových se-skupení, která mohou být složkami biologických systémů:peptidy, oligopeptidy, bílkoviny, apoproteiny, gykoproteiny,antigeny a jejich protilátky, fragmenty protilátek, haptenya jejich protilátky, receptory a jiné membránové proteiny, a-nalogy proteinů, ve kterých alespoň jedna nepeptfiová vazby nahrazuje peptidovou vazbu, enzymy a enzymové prekursory, koen-zymy, enzymové inhibitory, aminokyseliny a jejich deriváty,hormony, lipidy, fosfolipidy, glykolipidy, liposomy, nukleo-tidy, oligonukleotidy, polynukleotidy a jejich v oboru známéa biologicky účinné analogy a deriváty včetně například:methylovaných polynukleotidů a nukleotidových analogů mají- cích. fosforthioátové vazby; plasmidů, kosmidů, umělých chro-mosomů, jiných vektorů nukleinových kyselin; antisenspoly-nukleotidů včetně v podstatě komplementárních k alespoň jed-né endogenní nukleinové kyselině nebo majících sekvence opač-né se zřetelem k alespoň částem vybraných virálních nebo ret- ~rovirá-Lních genomu a jakýchkoliv jiných biologicky aktivníchmolekul. Všechny shora uvedené biomolekuly,mající slabou ne-bo neexistující polaritu nebo indukovatelnou polaritu za pod-mínek: v zařízení 1 0 se mohou kovalentně vázat na nosič sevhodným nábojem za vzniku komplexu s nábojem, který se můžeukládat na elektrodě 20 nebo na elektrodě 22.
Jednotlivé ze shora uvedených tříd biomolekul a jejichjakékoliv kombinace se mohou vnášet do roztoku nebo do suspen-ze jakožto koloidní Částice do kapaliny 30 způsobem závislýmna složení kapaliny 30 ť Obecně ja kapalinou 30 vodný roztok,jako je fysiologický roztok, schopný vést elektrický proud.Popřípadě se do kapaliny 30 mohou přidávat přísady, jako jsoupovrchově aktivní látky a protipěnicí přísady.
Směr, rychlost migrace a rychlost ukládání biomolekulpůvodně v roztoku nebo suspendovaných v kapalině 30 na elek-trodu 20 a na elektrodu 22 se může řídit velmi citlivě vhodnýmnastavením hodnoty pH kapaliny 30» Toto řízení je založeno napoužití běžných elektroforetických technik použitelných napermanentně nabité podíly, což poskytuje biomolekule čistý ná-boj, v. kapalině 30 v závislosti na hodnotě pH kapaliny 30» Hod-nota pH, při které má molekula nulový čistý negativní náboj aproto nemigruje působením elektrického pole, je definovánajakožto její isoelektrický bod. Při větší hodnotě pH, než jeisoelektrický bod, má molekula čistý negativní náboj; nao-pak při hodnotě pH menší, než je isoelektrický bod, má mole-kula čistý pozitivní náboj. Proto se v zařízení podle obr. 1hodnota pH kapaliny 30 nastavuje na hodnotu vyšší než iso-elektrický bod nebo na hodnotu nižší než isoelektrický bodpříslušné biomolekuly, která se má ukládat na elektrodu 20nebo 22. Toto nastavení hodnoty pH je možné použitím o so-bě známých kyselin nebo alkálií. ν’ v
Sesítující Činidla se do roztoku zavádějí bud současněs biomolekulou nebo po jejím uložení na elektrodě '20 nebo 22a jsou vhodné pro podporu vytvoření v podstatě ve vodě neroz-pustných nanesených hmot na elektrodách. Sesítující činidla zahrnují obecně polyfunkční můstkovací skupiny, schopné kovalentní vazby s žádanou biomolekulou, mohou však také zahrnovat o-záření nebo jiná činidla, která podporují vytvoření kovalent-ni vazby mezi biomolekulami bez skupin vytvářejících můstky.Druh používaného sesítujícího činidla závisí na případné naná-šené biomolekule; jakožto příklady sesítujících činidel se u-vádějí: silanová činidla, alkylaminová kopulační činidla, iso-thiokyanátová kopulační činidla, triazinová kopulační činidla,azokopulační činidla, fenylhydrazinová kopulační Činidla,karbodiimidová kopulační činidla a kopulační činidla na bázichloridu kyseliny. Při způsobu podle vynálezu je obzvláštěvhodné používání glutaraldehydu, jakkoliv se může používat ji-ných kopulačních činidel ze souboru zahrnujícího například 4-azidofenacylbromid, benzofenon-3,3z-4-4z-tetrakarboxylovoukyselinu ve formě dianhydridu, biotin-N-hydroxysukcinimides-ter, biotin-4-nitrofenylester, 2,2z-bichinolon-4,4z-dikarbo-xylovou kyselinu, bis/4-fluor-3-nitrofenyl/sulfon, 1,5-bis-/sukcinimidoxykarbonyloxy/pentan, 4-/BOC-aminomethyl/fenyl-isothiokyanát, N-BOC-1,6-diaminohexanhydrochlorid, brom-pyrohrožňovou kyselinu, kyanurchlorid, 4,4 -diazidostilben-2,2z-disulfonovou kyselinu ve formě dvojsodné soli, dianhyd-rid diethylentřiaminpentaoctové kyseliny, diethylenpyrokarbo-nát, 1,5-difluor-2,4-dinitrobenzen, 1,6-diisokyanohexan, 4,4z-diisothiokyanátstilben-2,2 -disulfonovou kyselinu ve for-mě dvojsodné soli, dimethyladipimidátdihydrochlorid, N-/di-methylaminopropyl·/-Ν’z-ethylkarbodiimidhydrochlorid, dimethyl— 3,3 z-dithiodipropionimidátdihydrochlorid, dimethylpumelin-diimidétdihydrochlorid, dimethylsuberimidátdihydrochlorid, 3,3'-dithiodipropionová kyselina ve formě bis/N-hydroxyšuk-cinimi.dester/u, 4-fluor-3-nitrofenylazid, formaldehyd, fu-maronitrii, glutaraldehyd, glutarcnitril, glykolaldehyd,hexamethylendiisokyanát, 6-hydroxy-2-naftyldisulfid, 3-/4-hydroxyfenyl/propionová kyselina ve formě N-hydroxysukcin- imidesteru, 2-iminothiolanhydrochlorid, 4-meleimidobutyramino-methylpolystyren, N,N*-/1,4-fenylen/dimaleimid, polyethylengly-kol-600-dikyselina, N-sukcinimidyl-3-/2-pyridylthio/propionát, .N-sukcinimič.yl-3-maleimidobenzoát, N-sukc inimidyl -4-maleimido-butyrát, N-sukcinimidyl-6-maleimidokaproát, N-sukcinimidyl-3-maleimidopropionát, thiodiethylenglykol, toluylen-2,4-diiso-kyanát a m-xylylendiisokyanát. Uvedených bivalentních sesíto-vacích činidel lze tedy používat.
Eiosensorových elektrod, vyrobených způsobem podle vyná-lezu, lze používat pro nejrůznější molekulární detekční sys-témy včetně amperometrických elektrochemických bbsensorů, ka-lorimetrických, akustických, potenciometrických a optickýchbiosenscrů a biosenzorů na bázi ISEET.
Vynález blíže objasňují, nijak však neomezují následují-cí příklady praktického provedení. Příklady provedení vynálezu Přiklad 1 Připraví se hmotnostně 5% roztok glukosoxidasy za pou-žití fosfátem pufrovaného solankového roztoku /hodnota pH7,4/ jakožto rozpouštědla. Glukosoxidasa se pečlivě rozpustív solankovém roztoku za mírného míchání, přičemž se míchánípečlivě provádí, aby se předešle pěnění roztoku, které bymohlo vést k denaturaci glukosoxidasy. Elektrodepoziční zaří-zení se naplní připraveným roztokem a do roztoku se ponoříbiosensorová elektroda, na kterou se má enzym ukládat, spolus elektrodou s opačným nábojem. Provede se elektrické propo-jení s galvanostatem a proud se udržuje na konstantní husto-tě 5 mA/cm^ na povrchu .elektrody. Tok proudu se řídí ve smě-ru, který vede k pozitivnímu čistému náboji na povrchu elek-trody k vázání negativně nabitých molekul glukosoxidasy. Proudje zapojen na dvě minuty. V průběhu ukládání nemá napětí pře-stoupit 0,5 V. Elektroda se pak vyjme z enzymového roztokua ponoří se do deionizované, destilované vody bez míchání 10 na dobu 5 sekund k odstranění zbytkové glukosoxidasy.
Elektroda se pak ponoří do roztoku obsahujícího objemově 2,5 % glutaraldehydu v solance pufrované fosfátem /hodnota pH7,4/ na dobu 30 minut ke kovalentnímu sesítění glukosovýchmolekul a k vytvoření hmoty nerozpustné ve vodě. Elektroda sepak. ponoří do deionizované, destilované vody na dobu 5 sekunda nechá se schnout na vzduchu po dobu 30 minut.
Zjištěno po zaschnutí, že vrstva glukosoxidasy, uloženána elektrodě, má tlouštku přibližně 1,5 ^um. Následující zkouškou zjištěno, že sesítění glutaraldehydem je účinné k předchá-zení převodu glukosoxidasy zpět do roztoku. Zjištuje se, žev tomto bodu je enzymatická složka biosensoru funkční. Příklad 2
Je také možné současné ukládání dvou nebo několika bio-molekul na povrchu elektrody za podmínky, že jejich isoelek-trické body jsou vždy vyšší nebo nižší než hodnota pH depo-zičního roztoku. V tomto případě se připraví solankový roz-tok pufrovaný fosfátem /hodnota pH 7,4/, obsahující hmot-nostně 5 % glukosoxidasy a 5 % albuminu. Glukosoxidasa a al-bumin mají hodnoty isoelektrického bodu 4,3 a 4,7, takže oběmolekuly mají negativní náboj při hodnotě pH roztoku 7,4. Naelektrodě se použije hustoty proudu 5 mA/cm^ po dobu dvou mi-nut při jejím ponoření do roztoku glukosoxidasy a albuminu.Molekuly se sesítí v glutaraldehydovém roztoku, jak je popsá-no v příkladu 1, načež se elektroda opláchne a vysuší. Vznik-lá vrstva glukosoxidasy a albuminu má tlouštku přibližně 5/Um. Při dlouhodobé zkoušce glukosoxidasové účinnosti sepozoruje, že vrstva glukosoxidasy a albuminu je výrazně stá-lejší než vrstva toliko glukosoxidasy, vytvořená způsobempodle příkladu 1. Příklad 3 Připraví se roztok 2,4 mg/ml králičí antifluoresceinové protilátky /afinita čištěno/ za použití borátového pufrové-ho roztoku /hodnota pH 9,0/. Hodnota pH se volí se zřetelemna udržení maximální pojící účinosti protilátky. Elektrodepo-ziční nádoba se naplní připraveným roztokem a vloží se bio-sensorová elektroda, na které se má ukládat protilátka ado roztoku se rovněž ponoří elektroda s opačným nábojem. Pro-vede se elektrické propojení s galvanostatem a proud se udr-žuje na konstantní hustotě 5 mA/cm na povrchu elektrody. Tokproudu se směřuje ve směru, který vede k negativnímu čistémunáboji na povrchu biosensorové elektrody k přitahování pozi-tivně nabitých molekul protilátky. Proud se aplikuje po dobu50 minut. Elektroda se pak vyjme z roztoku protilátky a po-noří se do deionizované, destilované vody bez jakéhokoliv mí-chání na dobu 5 sekund k odstranění zbytkové protilátky.
Elektroda se pak ponoří do roztoku obsahujícího objemo-vě 2,5 % glutaraldehydu v solance pufrované fosfátem /hodnotapH 7,4/ na dobu 30 minut ke kovalentnímu sesítění molekul pro-tilátky a k vytvoření hmoty nerozpustné ve vodě.Elektroda seopět ponoří do deionizované, destilované vody na dobu 5 se-kund a nechá se schnout na vzduchu po dobu 30 minut. Vyšetře-ný elektrody zjištěno,že elektrodepozicí vzniklá vrstva pro-tilátky má po zaschnutí tlouštku přibližně 5,5 /Um.
Jakkoliv je tedy vynález blíže objasněn shora uvedenýmipříklady praktického provedení, jsou pracovníkům v oboru jas-né možnosti jeho variací a modifikací v rámci vynálezu.
Průmyslová využitelnost
Zlepšený způsob výroby biosensorových elektrod, kterýchlze používat pro nejrůznější molekulární detekční systémy.
/
Claims (8)
- - 12 - PATENTOVÉ NÁROK - "ΐ1. Způsob imobilizece biomolekul a zvláště přípravy bio-sensorové elektrody s biomolekulární složkou, v y z n a č u v jící se t í m , že se připravuje roztok alespoň jed-noho druhy biomolekuly, určené k nanášení, dostatečně pufrova-ný k předcházení denaturace biomolekul a na hodnotu, kdy všechny biomolekuly, určené k nanášení, mají stejné znaménko čis-tého elektrického náboje v důsledku svých isoelektrických bo-dů, do roztoku se ponoří biosensorová elektroda a elektrodas opačným náhojem, mezi biosenzorovou elektrodou a elektrodous opačným nábojem se vytvoří potenciálový rozdíl menší než 1 Vpřičemž se potenciál mění k vytvoření v podstatě konstantníhoproudu mezi elektrodami, dostatečného k vytvoření migracebiomolekul, určených pro ukládání na biosensorové elektrodě,a na hromadění na ní.
- 2. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že se mezi elektrodami udržuje v podstatě konstantníelektrický proud po dostatečnou dobu k akumulaci na biosenso- v t rove elektrodě filmu molekul o tlouštce větší než 1,0 mikro-metrů.
- 3. Způsob podle nároku 2,vyznačující setím, že se biosensorová elektroda s povlakem biomolekul po-nořuje do roztoku sesítovacího činidla v dostatečném množstvía po dostatečnou dobu ke vzájemnému sesítění biomolekul za vy-tvoření ve vodě nerozpustné hmoty na biosensorové elektrodě.
- 4. Způsob podle nároku 1,vyznačující setím, že se pro nanášení připravuje roztok obsahující bíl-kovinu.
- 5. Způsob podle nároku 4,vyznačující set í m , že bílkovinou je enzym.
- 6. Způsob podle nároku 4, vyznačující setím, že bílkovinou je protilátka. 13
- 7. Způsob přípravy biosensorové elektrody s bílkovinovousložkou, vyznačující se tím, že se připravu-je roztok alespoň jednoho druhu bílkoviny, určené k nanášení,dostatečně pufrovený k předcházení denatursce bílkoviny, dotohoto roztoku se ponořuje biosensorová elektroda a elektroda *s opačným nábojem, mezi biosenzorovou elektrodou a elektrodou s opačným nábojem se vytvoří potenciálový rozdíl menší než 1 V,přičemž se potenciál mění k vytvoření v podstatě konstantníhoproudu mezi elektrodami, dostatečného k vytvoření migrace bio-molekuX, určených pro ukládání na biosensorové elektrodě anános, vytvořený na biosensorové elektrodě se sesítuje sesítu-jícím činidlem k vytvoření ve vodě nerozpustné hmoty na bio-sensorové elektrodě*
- 8. Způsob přípravy enzymatického biosensoru, vyznaču-jící se tím, že se připravuje roztok glukosoxidasyurčené na ukládání na biosensorové elektrodě, do tohoto roztokuse ponořuje biosensorová elektroda a elektroda s opačným nábo-jem, mezi biosensorovou elektrodou a elektrodou s opačným ná-bojem se vytváří potenciálový rozdíl menší než 1 V, přičemž sepotenciál mění k vytvářeni v podstatě konstantního proudu ψβ- zi elektrodami-, dostatečného k vytváření migrace glukosoxidasyurčené pro ukládání na biosensorové elektrodě a hromadění na níza vytvoření filmu o tlouštce větší než 10 mikrometrů. JUDr. oWšvoRčk advakát
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/546,101 US5166063A (en) | 1990-06-29 | 1990-06-29 | Immobolization of biomolecules by enhanced electrophoretic precipitation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS192791A3 true CS192791A3 (en) | 1992-02-19 |
| CZ280025B6 CZ280025B6 (cs) | 1995-09-13 |
Family
ID=24178870
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5166063A (cs) |
| EP (1) | EP0463859B1 (cs) |
| JP (1) | JP3100422B2 (cs) |
| KR (1) | KR920000921A (cs) |
| CN (1) | CN1057672A (cs) |
| AR (1) | AR243937A1 (cs) |
| AT (1) | ATE122724T1 (cs) |
| AU (1) | AU649686B2 (cs) |
| CA (1) | CA2045200C (cs) |
| CZ (1) | CZ280025B6 (cs) |
| DE (1) | DE69109754T2 (cs) |
| DK (1) | DK0463859T3 (cs) |
| ES (1) | ES2072544T3 (cs) |
| FI (1) | FI913174A7 (cs) |
| HU (1) | HUT60544A (cs) |
| IE (1) | IE67131B1 (cs) |
| IL (1) | IL98589A (cs) |
| MX (1) | MX173121B (cs) |
| MY (1) | MY106367A (cs) |
| NO (1) | NO912543L (cs) |
| NZ (1) | NZ238646A (cs) |
| PT (1) | PT98075B (cs) |
| RU (1) | RU2068181C1 (cs) |
| YU (1) | YU114891A (cs) |
| ZA (1) | ZA914807B (cs) |
Families Citing this family (62)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6051380A (en) * | 1993-11-01 | 2000-04-18 | Nanogen, Inc. | Methods and procedures for molecular biological analysis and diagnostics |
| US6652808B1 (en) * | 1991-11-07 | 2003-11-25 | Nanotronics, Inc. | Methods for the electronic assembly and fabrication of devices |
| US6017696A (en) * | 1993-11-01 | 2000-01-25 | Nanogen, Inc. | Methods for electronic stringency control for molecular biological analysis and diagnostics |
| US6048690A (en) * | 1991-11-07 | 2000-04-11 | Nanogen, Inc. | Methods for electronic fluorescent perturbation for analysis and electronic perturbation catalysis for synthesis |
| US5605662A (en) | 1993-11-01 | 1997-02-25 | Nanogen, Inc. | Active programmable electronic devices for molecular biological analysis and diagnostics |
| US6569382B1 (en) | 1991-11-07 | 2003-05-27 | Nanogen, Inc. | Methods apparatus for the electronic, homogeneous assembly and fabrication of devices |
| US5632957A (en) | 1993-11-01 | 1997-05-27 | Nanogen | Molecular biological diagnostic systems including electrodes |
| US5849486A (en) | 1993-11-01 | 1998-12-15 | Nanogen, Inc. | Methods for hybridization analysis utilizing electrically controlled hybridization |
| US6315953B1 (en) * | 1993-11-01 | 2001-11-13 | Nanogen, Inc. | Devices for molecular biological analysis and diagnostics including waveguides |
| US6287517B1 (en) | 1993-11-01 | 2001-09-11 | Nanogen, Inc. | Laminated assembly for active bioelectronic devices |
| US7582421B2 (en) * | 1993-11-01 | 2009-09-01 | Nanogen, Inc. | Methods for determination of single nucleic acid polymorphisms using a bioelectronic microchip |
| US6309602B1 (en) | 1993-11-01 | 2001-10-30 | Nanogen, Inc. | Stacked, reconfigurable system for electrophoretic transport of charged materials |
| US7101661B1 (en) | 1993-11-01 | 2006-09-05 | Nanogen, Inc. | Apparatus for active programmable matrix devices |
| US6331274B1 (en) | 1993-11-01 | 2001-12-18 | Nanogen, Inc. | Advanced active circuits and devices for molecular biological analysis and diagnostics |
| US7172864B1 (en) | 1993-11-01 | 2007-02-06 | Nanogen | Methods for electronically-controlled enzymatic reactions |
| US7314708B1 (en) | 1998-08-04 | 2008-01-01 | Nanogen, Inc. | Method and apparatus for electronic synthesis of molecular structures |
| US6225059B1 (en) | 1993-11-01 | 2001-05-01 | Nanogen, Inc. | Advanced active electronic devices including collection electrodes for molecular biological analysis and diagnostics |
| US6638482B1 (en) | 1993-11-01 | 2003-10-28 | Nanogen, Inc. | Reconfigurable detection and analysis apparatus and method |
| US6068818A (en) | 1993-11-01 | 2000-05-30 | Nanogen, Inc. | Multicomponent devices for molecular biological analysis and diagnostics |
| US6254827B1 (en) | 1993-11-01 | 2001-07-03 | Nanogen, Inc. | Methods for fabricating multi-component devices for molecular biological analysis and diagnostics |
| US6726880B1 (en) | 1993-11-01 | 2004-04-27 | Nanogen, Inc. | Electronic device for performing active biological operations and method of using same |
| US6375899B1 (en) | 1993-11-01 | 2002-04-23 | Nanogen, Inc. | Electrophoretic buss for transport of charged materials in a multi-chamber system |
| US6319472B1 (en) | 1993-11-01 | 2001-11-20 | Nanogen, Inc. | System including functionally separated regions in electrophoretic system |
| US6403367B1 (en) | 1994-07-07 | 2002-06-11 | Nanogen, Inc. | Integrated portable biological detection system |
| US6379897B1 (en) * | 2000-11-09 | 2002-04-30 | Nanogen, Inc. | Methods for gene expression monitoring on electronic microarrays |
| US7857957B2 (en) | 1994-07-07 | 2010-12-28 | Gamida For Life B.V. | Integrated portable biological detection system |
| US20040086917A1 (en) * | 1995-09-27 | 2004-05-06 | Nanogen, Inc. | Methods for electronic fluorescent perturbation for analysis and electronic perturbation catalysis for synthesis |
| US6706473B1 (en) | 1996-12-06 | 2004-03-16 | Nanogen, Inc. | Systems and devices for photoelectrophoretic transport and hybridization of oligonucleotides |
| US7220550B2 (en) * | 1997-05-14 | 2007-05-22 | Keensense, Inc. | Molecular wire injection sensors |
| US6699667B2 (en) | 1997-05-14 | 2004-03-02 | Keensense, Inc. | Molecular wire injection sensors |
| US6060327A (en) | 1997-05-14 | 2000-05-09 | Keensense, Inc. | Molecular wire injection sensors |
| WO1998058745A1 (en) * | 1997-06-20 | 1998-12-30 | New York University | Electrospraying solutions of substances for mass fabrication of chips and libraries |
| DE19741715A1 (de) * | 1997-09-22 | 1999-03-25 | Hoechst Ag | Pentopyranosyl-Nucleosid, seine Herstellung und Verwendung |
| DE19751658A1 (de) * | 1997-11-21 | 1999-07-29 | Wolfbeis Otto S Prof Dr | Verfahren zur Bildung lateral organisierter Strukturen auf Trägeroberflächen |
| RU2144563C1 (ru) * | 1998-10-01 | 2000-01-20 | Зубков Михаил Дмитриевич | Способ замедления биохимических и других процессов, идущих за счет электромагнитного взаимодействия |
| FI116099B (fi) | 1999-12-08 | 2005-09-15 | Valtion Teknillinen | Menetelmä prosessista saadun näytteen analysoimiseksi on-line kapillaarielektroforeesilaitteiston avulla |
| US7192445B2 (en) * | 2000-12-06 | 2007-03-20 | Astra Tech Ab | Medical prosthetic devices and implants having improved biocompatibility |
| US20030153024A1 (en) * | 2001-04-19 | 2003-08-14 | Sullivan Brian M | Charged bio-molecule/binding agent conjugate for biological capture |
| AT410805B (de) | 2001-05-29 | 2003-08-25 | Sleytr Uwe B | Verfahren zum erzeugen einer schicht funktioneller moleküle |
| US6814845B2 (en) | 2001-11-21 | 2004-11-09 | University Of Kansas | Method for depositing an enzyme on an electrically conductive substrate |
| US7601493B2 (en) * | 2002-07-26 | 2009-10-13 | Nanogen, Inc. | Methods and apparatus for screening and detecting multiple genetic mutations |
| US20040074785A1 (en) * | 2002-10-18 | 2004-04-22 | Holker James D. | Analyte sensors and methods for making them |
| US20050109622A1 (en) * | 2003-11-26 | 2005-05-26 | Peter Peumans | Method for controlling electrodeposition of an entity and devices incorporating the immobilized entity |
| US20050239184A1 (en) * | 2004-04-23 | 2005-10-27 | Reiko Ohara | Electric driven protein immobilizing module and method |
| US7828954B2 (en) * | 2004-09-21 | 2010-11-09 | Gamida For Life B.V. | Electrode based patterning of thin film self-assembled nanoparticles |
| US7314542B2 (en) * | 2004-09-23 | 2008-01-01 | Nanogen, Inc. | Methods and materials for optimization of electronic transportation and hybridization reactions |
| US20080142366A1 (en) * | 2006-12-13 | 2008-06-19 | Prabhakar Apparao Tamirisa | Incorporation of biomolecules in thin films |
| RU2367958C1 (ru) * | 2008-01-17 | 2009-09-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича РАМН (ИБМХ РАМН) | Электрохимический биосенсор для прямого определения миоглобина, способ его получения |
| GB0818403D0 (en) * | 2008-10-08 | 2008-11-12 | Univ Leuven Kath | Aqueous electrophoretic deposition |
| WO2010040648A2 (en) * | 2008-10-06 | 2010-04-15 | Katholieke Universiteit Leuven, K.U.Leuven R&D | Functional layers of biomolecules and living cells, and a novel system to produce such |
| WO2011066569A1 (en) * | 2009-11-30 | 2011-06-03 | Nanoscale Components, Inc. | Methods for producing textured electrode based energy storage device |
| JP2011137651A (ja) * | 2009-12-25 | 2011-07-14 | Sharp Corp | 標的認識分子および標的認識分子を固定化する方法 |
| TWI450967B (zh) | 2009-12-30 | 2014-09-01 | Univ Nat Taiwan Science Tech | 均勻之複合式觸媒／酵素結構及其製備方法與應用 |
| CN102192938B (zh) * | 2010-03-19 | 2015-10-21 | 黄炳照 | 均匀的复合式触媒/酶结构及其制备方法与应用 |
| US9748599B2 (en) | 2013-01-30 | 2017-08-29 | Nanoscale Components, Inc. | Phased introduction of lithium into the pre-lithiated anode of a lithium ion electrochemical cell |
| CN105831389A (zh) * | 2016-02-15 | 2016-08-10 | 林淑录 | 一种鲍鱼蛋白质制品及其制备方法 |
| US10092207B1 (en) | 2016-05-15 | 2018-10-09 | Biolinq, Inc. | Tissue-penetrating electrochemical sensor featuring a co-electrodeposited thin film comprised of polymer and bio-recognition element |
| EP3652795A4 (en) | 2017-07-10 | 2021-03-10 | Nanoscale Components, Inc. | PROCESS FOR FORMING A SEI LAYER ON AN ANODE |
| EP4256315A4 (en) | 2020-12-03 | 2024-11-06 | Biolinq Incorporated | SOLID-STATE SUBSTRATE-INTEGRATED REFERENCE ELECTRODE AND COUNTER ELECTRODE |
| US11359300B1 (en) * | 2021-02-26 | 2022-06-14 | Laxmi Therapeutic Devices, Inc. | Electrochemical method for enzyme immobilization on biosensor electrodes |
| EP4374789A1 (en) * | 2022-10-26 | 2024-05-29 | PKvitality | Close flow cell process for fabricating microneedles |
| CN117368289B (zh) * | 2023-12-07 | 2024-03-08 | 广州市赛特检测有限公司 | 在碳电极表面偶联蛋白适配体的方法、碳电极及电化学免疫传感器 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3758396A (en) * | 1971-08-31 | 1973-09-11 | Research Corp | Ition preparation of immobilized enzymemembrane complexes by electrocodepos |
| US3839175A (en) * | 1973-06-28 | 1974-10-01 | Owens Illinois Inc | Electrodeposition of enzymes |
| US4120759A (en) * | 1976-08-10 | 1978-10-17 | New Nippon Electric Company, Ltd. | Constant current density plating method |
| US4242096A (en) * | 1977-11-14 | 1980-12-30 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Immunoassay for antigens |
| US4245005A (en) * | 1979-02-28 | 1981-01-13 | Purdue Research Foundation | Pellicular coated support and method |
| DE3852122T2 (de) * | 1987-03-12 | 1995-04-27 | Japan Government | Immobilisierung von biofunktionellem material, daraus erzeugtes element und massnahme zu dessen verwendung. |
| DE3888767T2 (de) * | 1987-03-13 | 1994-08-04 | Japan Government | Methode zur Erzeugung einer Biomikroelektrode. |
| EP0353844A1 (en) * | 1988-07-06 | 1990-02-07 | Imperial Chemical Industries Plc | Coating process and composition |
| EP0350451A3 (de) * | 1988-07-08 | 1991-03-27 | Ciba-Geigy Ag | Verfahren zur Herstellung von elektroaktiven Langmuir-Blodgett Schichtsystemen |
-
1990
- 1990-06-29 US US07/546,101 patent/US5166063A/en not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-06-20 MY MYPI91001119A patent/MY106367A/en unknown
- 1991-06-21 NZ NZ238646A patent/NZ238646A/en unknown
- 1991-06-21 ZA ZA914807A patent/ZA914807B/xx unknown
- 1991-06-21 CA CA002045200A patent/CA2045200C/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-23 IL IL98589A patent/IL98589A/xx active IP Right Grant
- 1991-06-24 CZ CS911927A patent/CZ280025B6/cs unknown
- 1991-06-24 PT PT98075A patent/PT98075B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 ES ES91305739T patent/ES2072544T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-25 DE DE69109754T patent/DE69109754T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-25 AT AT91305739T patent/ATE122724T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-06-25 EP EP91305739A patent/EP0463859B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-25 DK DK91305739.4T patent/DK0463859T3/da active
- 1991-06-26 MX MX026388A patent/MX173121B/es unknown
- 1991-06-27 AR AR91320039A patent/AR243937A1/es active
- 1991-06-27 NO NO91912543A patent/NO912543L/no unknown
- 1991-06-27 KR KR1019910010790A patent/KR920000921A/ko not_active Withdrawn
- 1991-06-27 AU AU79391/91A patent/AU649686B2/en not_active Ceased
- 1991-06-28 YU YU114891A patent/YU114891A/sh unknown
- 1991-06-28 JP JP03158326A patent/JP3100422B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-28 FI FI913174A patent/FI913174A7/fi not_active Application Discontinuation
- 1991-06-28 IE IE228491A patent/IE67131B1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-06-28 RU SU914895851A patent/RU2068181C1/ru active
- 1991-06-28 CN CN91104527A patent/CN1057672A/zh active Pending
- 1991-06-28 HU HU912199A patent/HUT60544A/hu unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS192791A3 (en) | Biomolecules immobilization process | |
| Konno et al. | Photo-immobilization of a phospholipid polymer for surface modification | |
| Johnson | Reproducible electrodeposition of biomolecules for the fabrication of miniature electroenzymatic biosensors | |
| Yang et al. | Modification of hydrophilic and hydrophobic surfaces using an ionic-complementary peptide | |
| US5919576A (en) | Immobilized biological membranes | |
| US6815078B2 (en) | Substrate for protein microarray containing functionalized polymer | |
| Loidl‐Stahlhofen et al. | Solid‐Supported Biomolecules on Modified Silica Surfaces—A Tool for Fast Physicochemical Characterization and High‐Throughput Screening | |
| US7262281B2 (en) | Method of depositing S-layer proteins on a carrier to immobilize functional molecules | |
| US6797393B2 (en) | Method for making biochip substrate | |
| Anzai et al. | Quartz-crystal microbalance and cyclic voltammetric studies of the adsorption behaviour of serum albumin on self-assembled thiol monolayers possessing different hydrophobicity and polarity | |
| Lee et al. | Enzyme-modified Langmuir-Blodgett membranes in glucose electrodes based on avidin-biotin interaction | |
| JPH01240188A (ja) | 機能性有機薄膜 | |
| US20050019828A1 (en) | Gelatin coated receiver as protein microarray substrate | |
| MXPA06005996A (es) | Metodo para controlar la electrodeposicion de una entidad y dispositivos que incorporan la entidad inmovilizada. | |
| Swamy et al. | Enzyme immobilization methods and role of conductive polymers in fabrication of enzymatic biosensors | |
| JPH01235593A (ja) | 機能性有機薄膜 | |
| EP0773975A1 (en) | Conducting electroactive biomaterials | |
| Shastri et al. | Biomedical applications of electroactive polymers | |
| Meng et al. | Using electrophoretic deposition to identify protein charge in biological medium | |
| AU3105895A (en) | Conducting electroactive biomaterials | |
| Neff | Synthetic and Biological Polyelectrolytes: Detection and Characterization by a Silicon-on-insulator Based Thin Film Resistor | |
| ELENDER et al. | ROBERT TAMPÉ, CHRISTIAN DIETRICH, STEFAN GRITSCH |