CS208866B1 - Method of removal of low-molecular compound from bloo albumin solution - Google Patents

Method of removal of low-molecular compound from bloo albumin solution Download PDF

Info

Publication number
CS208866B1
CS208866B1 CS305779A CS305779A CS208866B1 CS 208866 B1 CS208866 B1 CS 208866B1 CS 305779 A CS305779 A CS 305779A CS 305779 A CS305779 A CS 305779A CS 208866 B1 CS208866 B1 CS 208866B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
albumin solution
albumin
solution
free water
removal
Prior art date
Application number
CS305779A
Other languages
Czech (cs)
Inventor
Ivan Stepanek
Julius Uhrik
Original Assignee
Ivan Stepanek
Julius Uhrik
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ivan Stepanek, Julius Uhrik filed Critical Ivan Stepanek
Priority to CS305779A priority Critical patent/CS208866B1/en
Publication of CS208866B1 publication Critical patent/CS208866B1/en

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

(54)(54)

Způsob odstraňováni n1 zkomo leku lárn 1 ch sloučenin z roztoku krevního albuminu.A method for removing n-drug compounds from blood albumin solution.

Způsob odstraňováni n 1 zkomolekulárnich sloučenin z roztoku krevního albuminu se týká protiíokové a nutritivni terapie. Nizkomolárnl sloučeniny se dostávají do a Ibuini nového roztoku v rámci technologického procesu,dále zásluhou mikrobiálního růstu a nastává koncentrační obohaceni sloučenin s fysio log icko-biochemickou aktivitou jako důsledek purifikace vzhledem k výchozímu materiálu.Je jich přítomnost vytváří předpoklady pro vznik nežádoucích interakci s molekulami albuminu,což omezuje kvalitu a rozsah indikace preparátu v terapii.Purifikovaný albumin se rozpouští v destilované apyrogenni vodě na koncentraci bílkovin v rozmezí 2 až 15% s optimem 8* 2X a separace n1 zkomolekulárnich látek se provádí průtokovou dialyzou proti destilované apyrogenni vodě o teplotě 0 až 6°CA method of removing n 1 molecular compounds from a blood albumin solution relates to anti-drug and nutritional therapy. Low molecular compounds are introduced into a new solution within the process, due to microbial growth, and there is a concentration enrichment of compounds with physio logic-biochemical activity as a result of purification with respect to the starting material. Purified albumin dissolves in distilled pyrogen-free water to a protein concentration ranging from 2 to 15% with an optimum of 8 * 2X and separation of n1 of the molecular substances is carried out by flow dialysis against distilled pyrogen-free water at 0 to Low: 14 ° C

208 866 * hodnotou pH v rozmezí 4,0 až 7,0 při průtoku 300 až 2000 ml za minutu po dobu až 72 hodin při objemovém množství přeteklého roztoku,které musí býti minimélné 200 násobkem objemu bílkovinného roztoku.208 866 * a pH in the range of 4.0 to 7.0 at a flow rate of 300 to 2000 ml per minute for up to 72 hours at a volume by volume of the overflow solution, which must be at least 200 times the volume of the protein solution.

Vynélez se týká odstraňováni n1zkomolekulérn1ch sloučenin z roztoku krevního albuminu V poslední dobé se ředa výrobců,kteří izoluji z lidské nebo zvířecí krve albumin,zaměříla na co nejefektlvněj11 využiti albuminu.Až dosud se při výrobě albuminu kladl důraz na jeho výtižnost e e lektroforetickou čistotu*The invention relates to the removal of low molecular weight compounds from a blood albumin solution Recently, a number of manufacturers that isolate albumin from human or animal blood have focused on the most efficient use of albumin. Up to now, the production of albumin has emphasized its yield and electrophoretic purity.

Na precipitaci albuminu ze směsi plaamatických nebo sérových krevních bílkovin byl použit síran amonný ZSchultze H.,Schdnenberger M.,Hatheka H.D.:Behr1ngwerke Nitt. 43,1 29, 1952; Dletzel E.,Ge1ger H.:Behringwerke Nitt. 43,129,1964Z,polymetafosfét ZNitschman H.S., Rlckli E.,K1stler P.:Vox Sang. 5,232,1960Z,trichloroctové kyselina ZNichael S.E.: Blochem. j.82,212,1962 Z,kaprylét Z Hoch H.,Chanut1n A.:Arch.B1ochem.8jophys. 51,271,1954 Z,aceton ZSchwart G.U.: J.Amer.Chem.Soc. 79,139,1957Z,etérZKefcwick R.A.,Mc Kay H.E.,Nance M.H., Record B.R. :B1ochem.J. 60,671,1955Z,etanol ZCohn E.J.,Strong L.E.,Hughes U.L.,Hulford D.J. Ashworth J.N.,Hel1n M.,Taylor H.L.: J.Amer.Chem.Soc. 68,459,1946; Taylor H.L.,Bloom F.C., Mc Call K.B.,Hyndman L.A.: J.Amer.Chem.Soc. 78,1353,1956Z,etanol spolu s Zn + + a Ba + + Ammonium sulphate ZSchultze H., Schdnenberger M., Hatheka HD: Behrngwerke Nitt was used to precipitate albumin from a mixture of plasma or serum blood proteins. 43, 29, 1952; Dletzel E., Ge1ger H.: Behringwerke Nitt. 43,129, 1964Z, Znitschman HS polymetaphosphate, Rlckli E., Kstler P.:Vox Sang. 5,232,1960Z, trichloroacetic acid ZNichael SE: Blochem. j.82,212,1962 Z, caprylet Z Hoch H., Chanut1n A.:Arch.B1ochem.8jophys. 51,271,1954 Z, acetone ZSchwart GU: J.Amer.Chem.Soc. 79,139,1957Z, etherZKefcwick RA, McKay HE, Nance MH, Record BR: B1ochem.J. 60,671, 1955Z, ZCohn EJ ethanol, Strong LE, Hughes UL, Hulford DJ Ashworth JN, Hel1n M., Taylor HL: J.Amer.Chem.Soc. 68,459,1946; Taylor HL, Bloom FC, Mc Call KB, and Hyndman LA: J.Amer.Chem.Soc. 78.1353.1956Z, ethanol together with Zn + + and Ba ++

ZCohn E.J.,Gurd F.N.R.,Surgenor D.M.,8arnes B.A.,Broun R.K.,Derounaux G.,Gillespie J.M., Kahnt F.W.,Lewer U.F.,L1u C.H.,Mitte Iman D.,Nouton R.F.,Schmid K.,Uroma E.s J.Amer.Chem. Soc. 72,465,1950Z a ionty Zn++ZCohn E.J.,Tullis J.L.,Surgenor D.M.,DHont M.:Science 114,479,1951 Z.ZCohn EJ, Gurd FNR, Surgenor DM, 8arnes BA, Broun RK, Derounaux G, Gillespie JM, Kahnt FW, Lewer UF, L1u CH, Mitte Iman D., Nouton RF, Schmid K., Uroma Es J. . Soc. 72,465,1950Z and Zn ++ ions ZCohn EJ, Tullis JL, Surgenor DM, DHont M.:Science 114,479,1951 Z.

Současné technologické praxe vSak na jedné straně sice odděluje albumin od směsi jiných krevních bílkovin,ale na druhé straně zanáSI do albuminového roztoku nizkomolekulérnl anorganické nebo organické s loučeniny.Techno logický postup může taktéž část některých nízkomolekulárních sloučenin s biochemicko-fysiologickou aktivitou v roztoku koncentračně obohacovat vzhledem k jejich koncentraci ve výchozí surovině,ze které byl albumin Izolován.However, current technological practice, on the one hand, separates albumin from a mixture of other blood proteins, but on the other hand, it is incorporated into the albumin solution of low molecular weight inorganic or organic compounds. to their concentration in the starting material from which albumin was isolated.

Přítomnost netěkavých anorganických soli snižuje v injekčním roztoku albuminu jeho osmotickou kapacitu.Přítomnost netěkavých nízkomolekulárních organických molekul v roztoku albuminu vytváří předpoklady pro vznik nežádoucích interakci těchto látek s molekulami albuminu, a to zejména při lyofilizaei nebo pasteurizac1,po případě v průběhu skladováni v podobě terapeutického preparátu.The presence of non-volatile inorganic salts in the albumin solution for injection reduces its osmotic capacity. The presence of non-volatile low molecular weight organic molecules in the albumin solution creates the potential for undesirable interaction of these substances with albumin molecules, particularly during lyophilization or pasteurization1. .

Nedostatkem dosud užívané technologie je skutečnost,že takto připravené lyofi lisované preparáty obsahuji 2,5 _+ 0/5% sodíku,který citelně snižuje klinický efekt preparátu zejména při odčerpáváni tekutin z tělesných tkáni za patologických podmínek.A disadvantage of the technology used so far is the fact that the lyophilized preparations thus prepared contain 2.5 + 0/5% sodium, which significantly reduces the clinical effect of the preparation, especially when draining fluids from body tissues under pathological conditions.

U nově navrhované technologie se tyto potíže nevyskytovaly v tak výrazné intenzitě, což lze dokumentovat údajem,že z 10 připravených experimentálních Serži podle předloženého vynálezu bylo dosaženo sníženi obsahu sodíku u lyof1 lizovaného preparátu o 95X až 99,9X ve «rovnáni s týni materiálem,který byl lyofilizován bez předcházející separace nízkomolekulárních sloučenin.With the newly proposed technology, these problems did not occur at such a high intensity, as evidenced by the indication that, out of the 10 experimental lotions prepared according to the present invention, the sodium content of the lyophilized preparation was reduced by 95X to 99.9X compared to that of was lyophilized without prior separation of low molecular weight compounds.

Podstata odstraňováni nizkomolekulárnich sloučenin z roztoku krevního albuminu spočívá podle předloženého vynálezu v tom,že bílkovinný materiál,obsahující puriíi kovaný albůmin,se suspenduje za aseptíckých podmínek v takovém množství apyrogenni vody,před tim předčetl lovené,o teplotě 0 °C až +6 °C,aby hodnota koncentrace bílkovin se nacházela v rozmezí 2X až 15% s optimem 8% _+ 2X.albuminový roztok se vyčeři,například filtraci a separace nizkomolekulárnich sloučenin z albuminového roztoku se provádí průtokovou dialyzou proti destilované apyrogenni vodé o teplotě 0 °C až +6 °C s hodnotou pH 4,0 až 7,0 při průtoku 300 ml až 2000 ml za minutu,po dobu 24 až 72 hodin.According to the present invention, the principle of removing low molecular weight compounds from a blood albumin solution is that the proteinaceous material containing purified albumin is suspended under aseptic conditions in an amount of pyrogen-free water previously pretreated at a temperature of 0 ° C to + 6 ° C. The albumin solution is clarified, for example, filtration and separation of low molecular weight compounds from the albumin solution is accomplished by flow dialysis against distilled pyrogen-free water at 0 ° C to + +. 6 ° C with a pH of 4.0 to 7.0 at a flow rate of 300 ml to 2000 ml per minute, for 24 to 72 hours.

Po ukončeni dlalyzy se z dialyzačniho celofánového potrubí vyteklý albuminový roztok podrobí steří lizaci,například filtraci nebo radiační sterilizaci a potom dalšímu zpracováni, např. lyof1lizaci nebo zakoncentrováni pomoci vakuové destilace popřípadě pomoci membrán.Upon completion of the pallyysis, the spilled albumin solution from the dialysis cellophane tubing is subjected to sterilization, for example filtration or radiation sterilization, and then further processing, for example, lyophilization or concentration by vacuum distillation or by means of membranes.

Vynález je dále objasněn ne příkladech provedeni,jimiž jeho rozsah není ani omezen, ani vyčerpán.The invention is further elucidated by way of non-limiting and exhaustive examples.

Přiklad 1.Example 1.

Výchozí surovinou je pasta frakce V,izolovaná podle Cohna.BiIkovinný materiál se rozpouští v takovém množství destilované vody,odzkoušené na apyrogenitu o teplotě 0 °C at +t> °C,aby hodnota koncentrace bílkovin se nacházela v rozmezí 2% až 1 5 X, s optimem 8X < 2X.Rozpuštěni se urychluje mícháním.Po rozpuštěni se albuminový roztok vyčeři, například filtraci.The starting material is a Cohn-isolated Fraction V paste. The proteinaceous material is dissolved in an amount of distilled water, tested for pyrogen-free at 0 ° C and at + t> ° C, so that the protein concentration is between 2% and 15%. The dissolution is accelerated by stirring. After dissolution, the albumin solution becomes clear, for example by filtration.

V technologických poměrech jsou výše uvedené podmínky zpravidla zachovány,když rozpouštíme 1 kg albuminové pasty ve 2 000 ml destilované apyrogenni vody o teplotě Q °C až +6 °C.Hodnota pH takto vzniklého albuminového roztoku bývá zpravidla mezi pH 4,0 až 6,0 a koncentrace bílkovin bývá v rozmez! 8% ♦ 2X.Takto připravený roztok purifi kovaného albuminu se vyčeři,napřiklad filtrací a nlzkomolekulárni sloušeniny se z albuminového roztoku odstraní dialyzou,napřiklad přes dialyzačni celofánové potrubí/pod komerčním označením Dia lysierschlauch,Viskoranebo na jiných celofánových materiálech.In technological conditions, the above-mentioned conditions are generally maintained when dissolving 1 kg of albumin paste in 2000 ml of distilled pyrogen-free water at a temperature of Q ° C to + 6 ° C. The pH value of the resulting albumin solution is usually between pH 4.0 and 6. 0 and protein concentration is in the range! The purified albumin solution thus prepared is clarified, for example by filtration, and the low molecular weight compound is removed from the albumin solution by dialysis, for example through a dialysis cellophane tubing / under the commercial designation Dia lysierschlauch, Viskorane or on other cellophane materials.

Namočené celofánové potrubí v apyrogenni destilované vodě se náplni apyrogenni vodou za účelem stanoveni ceListvosti.Průměr celofánového potrubí by se měl pohybovat od 2 cm do 10 cm s optimem 5 cm.Spodni část celofánového potrubí se uzavře uz lem.A Ibuminový roztok se nalije do celofánového potrubí,uzavřeného ve spodni části uzlem se smyčkou,za kterou se zavěs! na vrchní víko dialyzačně průtokové kolony.The soaked cellophane pipe in pyrogen-free distilled water is filled with pyrogen-free water to determine the list. The diameter of the cellophane pipe should range from 2 cm to 10 cm with an optimum of 5 cm. The bottom of the cellophane pipe is closed. piping, closed at the bottom by a knot with a loop behind which it hangs! on top of the dialysis flow column.

Za optimální rozměry technologické dialyzačně průtokové kolony se považuji takové, kde průměr kruhové nebo úhlopříčka čtvercové nebo obdélníkové základní plochy kolony k výšce kolony se pohybuji v poměru 1:5 až 1:10.Množství albuminového roztoku,naneseného . dovnitř celofánového potrubi,nemá překročit 25X až 30X objemu prázdné kolony.The optimum dimensions of a technological dialysis flow column are those wherein the diameter of the circular or diagonal square or rectangular base area of the column to the column height is in the ratio of 1: 5 to 1: 10. The amount of albumin solution applied. inside the cellophane pipe, should not exceed 25X to 30X the volume of the empty column.

Po naneseni zvoleného objemu albuminového roztoku se dialyzačně průtoková kolona nechá protékat destilovanou apyrogenni vodou o teplotě 0 °C až +6 °C při průtoku 300 ml až 2 000 ml za minutu po dobu 24 až 72 hodin,s výhodou při průtoku 1 000 mt/min. po dobu 48 hodin.Množství celkově proteklé destilované apyrogenni vody musi býti minimálněAfter loading the selected volume of albumin solution, the dialysis flow column is run through distilled pyrogen-free water at 0 ° C to + 6 ° C at a flow rate of 300 ml to 2000 ml per minute for 24 to 72 hours, preferably at a flow rate of 1000 mt. min. The amount of totally flowed distilled pyrogen-free water must be at least

200 násobkem objemu bílkovinného roztoku,který byl umístěn do celofánového potrubil.Hodnota pH protékající destilované apyrogenní vody má bytí mezi 4,0 až 7,0.The pH value flowing through distilled pyrogen-free water is between 4.0 and 7.0.

Albuminový roztok,umístěný v celofánovém dialyzačním potrubí,se po ukončeni dialyzy sejme ze závěsného háčku na vrchním víku dialyzačně průtokové ko Iony,opatrně se vyjme z kolóny a přenese nad sběrnou nádobu.Po rozstřihnuti celofánu se albuminový roztok, vyteklý z dialyzačního potrubí podrobí steri l i zaci,naprík l ad filtraci nebo radiační sterilizaci a potom dalšímu zpracován1,napřik lad lyofilizací nebo zakoncentrován i pomoci vakuové desti lace,popřipadě pomoci membrán.The albumin solution, placed in the cellophane dialysis line, is removed from the suspension hook on the top lid of the dialysis flow column after dialysis, carefully removed from the column and transferred over the collection vessel. After cutting the cellophane, the albumin solution leaked from the dialysis line is sterile. filtration or radiation sterilization and then further processed, for example by ice lyophilization or concentrated by vacuum distillation or by means of membranes.

Numerické hodnoty,uváděné jako optima,jsou vhodné pro technologické provedeni ,The numerical values, referred to as optimum, are suitable for the technological implementation,

Přik lad 2.Example 2.

Výchozí surovinou může býti bílkovinná pasta a lbům i nu,izolováná i pomoci jiných meťoď,kterých seznam je uveden v literárním přehledu.Bi Ikovinná pasta se zpracovává vdalšim postupu jako v příkladě 1.The starting material can be a protein paste and lime, isolated also by other methods, which are listed in the literature. Bi protein paste is processed according to a further procedure as in Example 1.

Claims (1)

PŘEDMĚT VYNÁLEZUSUBJECT OF THE INVENTION Způsob odstraňováni n1 zkomoleku lárnich sloučenin z roztoku krevního albuminu, vyznačující se 11 m, že. b 1 Ikovi nný mateřiál,obsahuj1c1 purifikovaný albumin,se suspenduje za aseptických podmínek v takovém množství destilované apyrogenní vody o teplotě 0 °C až +6 °C,aby hodnota koncentrace bílkovin se nacházela v rozmezí 2% až 15% a hodnota pH mezi 4,0 až 6,0,a Ibuminový roztok se vyčeři například filtraci a separace nizkomo leku lárnich sloučenin z albuminového roztoku se provádi průtokovou dialyzou proti destilované apyrogenni vodě o teplotě 0 °C až +6 °C s hodnotou pH v rozmezi 4,0 až 7,0 při průtoku 300 ml až 2 000 ml za minutu po dobu 24 až 72 hodin při objemovém množství celkově proteklé destilované apyrogenní vody,které musí býti minimálně 200 násobkem objemu bílkovinného roztoku,který byl umístěn do celofánového potrubi,při čemž oddia lyžovaný albuminový roztok se podrobi steri l i zaci,např1k lad filtraci nebo radiační sterilizaci a potom dalšímu' zpracován1,napřik lad lyofilizaci nebo zakoncentrován i pomoci vakuové .desti láce nebo pomoci membrán».A process for the removal of n1 molecules of linear compounds from a blood albumin solution, characterized in that:. b) The proteinaceous material containing purified albumin is suspended under aseptic conditions in an amount of distilled pyrogen-free water at a temperature of 0 ° C to + 6 ° C such that the protein concentration is between 2% and 15% and the pH is between 4 , 0-6.0, and the albumin solution is clarified, for example, by filtration and separation of low molecular weight compounds from the albumin solution by flow dialysis against distilled pyrogen-free water at a temperature of 0 ° C to + 6 ° C with a pH in the range of 4.0 to 7.0 at a flow rate of 300 ml to 2,000 ml per minute for 24 to 72 hours at a volume flow of total distilled pyrogen-free water, which must be at least 200 times the volume of the protein solution that has been placed in the cellophane pipeline, the solution is subjected to sterilization, e.g. ice filtration or radiation sterilization, and then further processed, e.g. ice lyophilization or concentrated with the aid of vacuum scrubbing or with the aid of membranes ».
CS305779A 1979-05-04 1979-05-04 Method of removal of low-molecular compound from bloo albumin solution CS208866B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS305779A CS208866B1 (en) 1979-05-04 1979-05-04 Method of removal of low-molecular compound from bloo albumin solution

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS305779A CS208866B1 (en) 1979-05-04 1979-05-04 Method of removal of low-molecular compound from bloo albumin solution

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS208866B1 true CS208866B1 (en) 1981-10-30

Family

ID=5369518

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS305779A CS208866B1 (en) 1979-05-04 1979-05-04 Method of removal of low-molecular compound from bloo albumin solution

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS208866B1 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Lever et al. Renin and angiotensin-like activity in renal lymph
AU621148B2 (en) Removal of process chemicals from labile biological mixtures by hydrophobic interaction chromatography
KR100609262B1 (en) Process for preparing blood products stabilized by diafiltration
JPS6428562A (en) Hematologic control containing highly stable blood cell and caribrator
US4064006A (en) Method for the continuous mass in vitro suspension culture of cells
SE445148B (en) PROCEDURE FOR PREPARING A BIOLOGICAL COMPOSITION FOR USE AS A REFERENCE COMPOSITION FOR BLOOD SERIES BY DIAGNOSTIC ANALYSIS
Schumm et al. Cytosol-modulated transport of messenger RNA from isolated nuclei
JP5178518B2 (en) Ultra high yield intravenous immunoglobulin preparation
PT94674B (en) PROCESS FOR THE PURIFICATION OF ANNEXES
PL99599B1 (en) THE METHOD OF OBTAINING EXTREMELY TOLERATED GAMMAGLOBULIN
Lipton et al. Serum requirements for survival of 3T3 and SV3T3 fibroblasts
Ledent et al. Growth factor release during preparation and storage of platelet concentrates
EP0077119A2 (en) Collection of antihemophilic factor VIII
Baker et al. Effect of the amino acids and dialyzable constituents of embryonic tissue juice on the growth of fibroblasts
WO1993017776A9 (en) Method of preparing fibrinogen
Bier et al. Selective plasmapheresis in dogs for delay of heterograft response
HECHTER et al. Chemical transformation of steroids by adrenal perfusion: perfusion methods
CS208866B1 (en) Method of removal of low-molecular compound from bloo albumin solution
Poincelot Uptake of bicarbonate ion in darkness by isolated chloroplast envelope membranes and intact chloroplasts of spinach
Johnson et al. Enhanced Yield of Antihemophilic Factor and von Willebrand Factor by Cryoprecipitation with Polyethylene Glycol1
KR860001562B1 (en) Method for preparing human parathyroid hormone
JPH05504960A (en) Endothelial cell proliferation inhibitor
Edman et al. Preparation and some properties of hypertensin (angiotonin)
RU2460786C1 (en) Method for preparing blood serum of grown cattle for animal and human cell culture
Mohammed et al. Immunity of bee keepers to some constituents of bee venom: phospholipase-A antibodies