CS217939B1

CS217939B1 - Microorganism production strain Aspergillus niger CCF 1836

Info

Publication number: CS217939B1
Application number: CS564081A
Authority: CS
Inventors: Marie Musilkova; Ema Ujcova; Leopold Seichert; Bohumil Sikyta; Vladimir Krumphanzl
Original assignee: Marie Musilkova; Ema Ujcova; Leopold Seichert; Bohumil Sikyta; Vladimir Krumphanzl
Priority date: 1981-07-23
Filing date: 1981-07-23
Publication date: 1983-01-28

Abstract

Vynález se týká nového produkčního kmene Aspergillu· niger CCF, 1836 pro submersní výrobu kyseliny citrónové. Podstata vynálezu spočívá v tom, že nový kmen dosahuje při submersní fermentaci vysokých výtěžků kyseliny citrónové, které převySují výtěžky výchozího mateřského kmene a dosahují světových Špičkových parametrů. Výhodou kmene Aspergillus niger 1350 dále je, že tento kmen je schopen využít pro tvorbu kyseliny citrónové i další cukry, polysacharidy, vyšší alkoholy, případně jejich směsi, a to jak v čisté, tak ve formě hydrolyzátů.The invention relates to a new production strain of Aspergillus niger CCF, 1836 for submerged production of citric acid. The essence of the invention lies in the fact that the new strain achieves high yields of citric acid during submerged fermentation, which exceed the yields of the initial parent strain and reach world-class parameters. The advantage of the Aspergillus niger 1350 strain is also that this strain is able to use other sugars, polysaccharides, higher alcohols, or mixtures thereof, both in pure form and in the form of hydrolysates, for the production of citric acid.

Description

Vynález se týká vysokóprodukčního mikroorganismu Aspergillus niger CCF 1836 pro submersní výrobu kyseliny citrónové na živných médiích s různým zdrojem uhlíku.The present invention relates to the high-production microorganism Aspergillus niger CCF 1836 for the submersible production of citric acid on nutrient media with different carbon sources.

Submersní způsob přípravy kyseliny citrónové, který má řadu předností proti povrchovému způsobu (AO 202 709), vyžaduje speciální kmeny, vyšlechtěné pro hloubkový růst v provzduS ňovaných a promíchávaných živných médiích (AO 196 001, AO 196 003, AO 201 807). Zdrojem uhlíku, který potřebuje mikroorganismus pro růst, déle jako zdroj energie a pro tvorbu kyseliny citrónové, je obvykle sacharóza, používaná bu5 v čisté formé, nebo ve formS melasy.The submerged process for preparing citric acid, which has a number of advantages over the surface process (AO 202 709), requires special strains bred for deep growth in aerated and mixed nutrient media (AO 196 001, AO 196 003, AO 201 807). The carbon source needed by the microorganism for growth, longer as an energy source and for citric acid production, is usually sucrose, used either in pure form or in molasses form.

Předmětem vynálezu je kmen plísně Aspergillus niger 1350, pro submersní výrobu kyseliny citrónové, uložený v mezinárodní sbírce mikroorganismů katedry botaniky nižěích rostlin pod ě. CCF 1836.The subject of the invention is a strain of Aspergillus niger 1350, for the submersible production of citric acid, deposited in the International Collection of Microorganisms of the Department of Botany of the Lower Plants below. CCF 1836.

Dále je uvedena morfologická a fyziologické charakteristika mutantu plísně Aspergillus niger 1350 (Thom. Ch., Raper, Κ. B.: A manual of the Aspergilli, Baltimore, 1945).The morphological and physiological characteristics of the mutant Aspergillus niger 1350 (Thom. Ch., Raper, BB .: A manual of the Aspergilli, Baltimore, 1945) are presented below.

Mutant 1350 roste dobře na sladinovém agaru, ale vytváří kolonie o průměru 5 om tvořené vysokým vzdušným myceliem, ve středu kolonií se tvoří husté černé spory. Spodní strana kolonií je na okrajích zvřásněná. Na Raulinově agaru tvoří 2,5 cm kolonie s vyvýšenými středy, sporulace je hustá, spory černé. Na pivním agaru ae tvoří 4 cm kolonie, jejichž spodní strana je bílá, hladká, svrchní strana je porostlá řídkým vzdušným myceliem, sporulace je hustá ve středu kolonie a řídká po okrajích, spory černé. Na Czapkově agaru se tvoří kolonie o průměru 3,5 cm se spodní stranou nažloutlou a paprsčitě zvrásnělou, vrchní strana kolonií má bílé, 3 mm široké okraje, uprostřed je poměrně hustá, soustředěná sporulace.The mutant 1350 grows well on wort agar, but forms colonies with a diameter of 5 µm formed by high air mycelium, with dense black spores forming in the center of the colonies. The underside of the colonies is curled at the edges. On Raulin agar it forms 2.5 cm colonies with raised centers, sporulation is dense, black spores. On beer agar ae form 4 cm colonies, whose underside is white, smooth, the upper side is overgrown with sparse air mycelium, sporulation is dense in the middle of the colony and sparse along the edges, black spores. On Czapka's agar, colonies with a diameter of 3.5 cm are formed with yellowish and radially wrinkled underside, the upper side of the colonies has white, 3 mm wide edges, in the middle there is a relatively dense, concentrated sporulation.

Barva spor je černá.The color of the spores is black.

Mikroskopický vzhled: Spory jsou černé, chlupaté, o průměru 3 až 4)U| konidiofory až 1 mm vysoké, hlavice zakulacené o průměru 0,1 mm.Microscopic appearance: The spores are black, hairy, 3 to 4 U in diameter conidiophores up to 1 mm high, heads rounded with a diameter of 0.1 mm.

Při submersní fermentaci na 10 až 20% cukerných substrátech tvoří z 65 až 85 % vneseného cukru kyselinu citrónovou. Kupříkladu na syntetické půdě se sacharózou nebo glukózou se výtěžnost procesu (vztaženo na vnesený cukr) pohybuje v průměru kolem 80 %, u hydrolyzátů škrobu až 85 %· Mutant je schopen využít pro tvorbu kyseliny citrónové při určité redukci výtěžků i další cukry (např. fruktózu, xylózu, maltózu, galaktózu), polysacharidy (např. škrob) nebo vyšší alkoholy (např. sorbitol, manitol) nebo směsi těchto látek, a to jak v čisté formě, tak obsažených např. v hydrolyzátech škrobu, dřeva, ovocných šťávách a podobně.In submersible fermentation on 10 to 20% sugar substrates, 65 to 85% of the sugar introduced is citric acid. For example, on synthetic soil with sucrose or glucose, the process yield (based on sugar introduced) is about 80% on average, up to 85% for starch hydrolyzates. · The mutant is able to utilize other sugars (eg fructose) to produce citric acid , xylose, maltose, galactose), polysaccharides (eg starch) or higher alcohols (eg sorbitol, mannitol) or mixtures thereof, both in pure form and contained, for example, in hydrolysates of starch, wood, fruit juices and the like .

Mutant Aspergillus niger 1350 byl získán působením ultrafialového záření na spory plísně Aspergillus niger NG 233. Suspenze spor (koncentrace přibližně 10® v 1 ml) byle ozao řována UV světlem o intenzitě záření 5,9 J/m po dobu 4 minut, pak vhodně naředěna a rozlita na sporulační agarovou půdu. Jednotlivé izolátory byly hodnoceny podle schopnosti růstu, sporulace a tvorby kyseliny citrónové.The Aspergillus niger 1350 mutant was obtained by ultraviolet radiation on Aspergillus niger NG 233 spores. The spore suspension (approximately 10 ® in 1 ml) was irradiated with UV light at a radiation intensity of 5.9 J / m for 4 minutes, then appropriately diluted and spilled onto sporulated agar medium. Individual insulators were evaluated for their ability to grow, sporulate and produce citric acid.

Nejlepěí mutant 1350 byl vybrán na základě růstu a produkce kyseliny citrónové na různých uhlíkatých zdrojích a je předmětem tohoto vynálezu.The best mutant 1350 was selected based on the growth and production of citric acid on various carbon sources and is the subject of the present invention.

Claims

A production strain of Aspergillus niger CCF 1836 producing citric acid in submersive culture.