CS220409B1 - Method of separating l-tryptophan out of solution - Google Patents
Method of separating l-tryptophan out of solution Download PDFInfo
- Publication number
- CS220409B1 CS220409B1 CS73678A CS73678A CS220409B1 CS 220409 B1 CS220409 B1 CS 220409B1 CS 73678 A CS73678 A CS 73678A CS 73678 A CS73678 A CS 73678A CS 220409 B1 CS220409 B1 CS 220409B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- tryptophan
- solution
- sorption
- elution
- eluate
- Prior art date
Links
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 title claims description 191
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 51
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 claims description 106
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 47
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 35
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 25
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000003795 desorption Methods 0.000 claims description 21
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 15
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 15
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 10
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 7
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 5
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 5
- 238000006068 polycondensation reaction Methods 0.000 claims description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 241000208202 Linaceae Species 0.000 claims 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 claims 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 claims 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 15
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 15
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 14
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 12
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 11
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 9
- 239000002585 base Substances 0.000 description 9
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- IFGCUJZIWBUILZ-UHFFFAOYSA-N sodium 2-[[2-[[hydroxy-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyphosphoryl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound [Na+].C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NP(O)(=O)OC1OC(C)C(O)C(O)C1O IFGCUJZIWBUILZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 5
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 4
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 4
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 4
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- -1 aromatic indole nucleus Chemical class 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N benzene Substances C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-M (E,E)-sorbate Chemical compound C\C=C\C=C\C([O-])=O WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-M 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002030 1,2-phenylene group Chemical group [H]C1=C([H])C([*:1])=C([*:2])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- WZCQRUWWHSTZEM-UHFFFAOYSA-N 1,3-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC(N)=C1 WZCQRUWWHSTZEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101100022176 Mus musculus Gstz1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000005054 agglomeration Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910001422 barium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L barium sulfate Chemical compound [Ba+2].[O-]S([O-])(=O)=O TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000010428 baryte Substances 0.000 description 1
- 229910052601 baryte Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Chemical class 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000002655 kraft paper Substances 0.000 description 1
- 229940018564 m-phenylenediamine Drugs 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910001463 metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000005204 segregation Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 229940075554 sorbate Drugs 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical class [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
- C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
- C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
- C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
- C07D209/20—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals substituted additionally by nitrogen atoms, e.g. tryptophane
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
(54) Způsob oddělování L-tryptofanu z roztoků
L-tryptofan se z roztoku odděěí sorpcí na iontoměniče na lázi prystyřic, s následujícími desorpcemi a krystalizací.
Způsob podle vynálezu spočívá v tom, že se L-tryptofan sorlbje na slabě bazický aniontoměnič a po desorpci z aniontoměniče se L-tryptofan ze získaného elbátb sorlbje na sblfokatinnooéám měnnči v H-formě s následující dej^<^zrp<^:í L-tryptofanu z kat.íť^no^mě^iče.
Desorpce L-tryptofanu z aniontoměniče se provádí odseknou vodou nebo vodným roztokem 0,1 až 0,5 N mineeální kyseliny při teplotě 10 až 25 °C a desorpce L-tryptofanb z kationioměničd se provádí 1,5 až 3,0%' rozookem amoolaku ve vodném roztoku ethanolu při tdplitě_40 až 70 °C. _____
K?ystalizaid L-tryptofanu z arnooiak-alkoholových eluátů se provádí okyselením eluátů kyselinou octovou a současným ochlazením na teplotu 0 až 5 °C.
Způsobem podle vyrálezu se získá' L-tryptofan ve 70% výtěžcích, s obsahem základní látky 99 %.
Vynález se týká způsobu oddělování L-tiyptoOrnu z rozotků. L-tryptofen je jednou z hlavních oninokyseein a hraje důležitou úlohu v procesech metabolismu lidí a zvířat.
Nyní se L-tryptofan používá v meddcíně jako složka směsi pro pja^ennerální výživu, jakož i v potravnnásském průmslu a v zeměědlství k vyrovnání aminokyselinového složení potravin a krmiv. Potřeba L-tryptofanu k meedcinálním účelům jako součást potravin a krmiv každým rokem neustále roste.
Převážná větSina známých způsobů oddělování L-tryptofanu z fermentačního prostředí a bílkovnnných hydrol^át.ů spoěívá na sorpci шěinokystdioy bu3 áttivním uW-ím, nebo syntetidými iuotuiěsCδi, které maaí skupiny s vysokým disociačním stupněm (US patentové' spisy 2 700 672, 3 456 712, čs. autorské osvědčení č. 154 425). *
K hlavním nevýhodám způsobu oddělování L-tryptofanu pomoci aktivního uilí náleží nízká seeeettvita jmenovaného sorpčního prostředku vůči tryptofanu a nemoonost účinné desorpce tryptofanu z aktivního uhí, jakož i vážné obtíže spojené s provozem a regenerací jmenovaného sorpčníh^o prostředku.
Z^láSt podstatnými nevýhodami způsobu oddělování L-tryptofanu pomocí syntetických., silně bazických a silně kyselých iontoměničů jsou nízká tedeetivith jmenovaných sorpčních prostředků vůči tryptofanu pří jeho sorpci z roztoků obsahujících mlnex^iáXnX sooi, cizí шěinokyssdioy a barevné sloučeniny, nedostatečná desorpce tryptkfhou, způsobená blokováním sorbovaných mooekul ěoOekulhmi jCrých organických sloučenin, pracovně náročná regenerace iontoměničů použitých za jmenovaných sorpčních podmínek, ztráta sorpční sch^pnos! iontoměniče v důsledku ireversibilního přijímání organických příměsí.
Uvedené nevýhody jsou v plné míře vlastní jednomu ' ' ze způsobů oddělování L-typtofacu za pouuití synCdtictýcU iontoměničů. Podle jmenovaného způsobu se oddělování ' tryptofEnu z roztoků obsa^uuící^ sm^ aminotys^io a z ferientaČnícu. roztok uskute^uje ^ovád^ím těchto silně bazickým hnionOoiSniδei nebo silně kyselým УatOonUoiěnieei a následiým působením na iuotuěSnič roztoky anorganických toU:í k odstranění ostatcích a^ii^c^^sseio z pryskySice, načež se pryskyřice' promývá vodou a L-tryp^^n se eluuje v případě УationUoiěoiČe vodným rozookem hmokihУu a v případě aniontoiSniče kyselinou chlurovodíУuvuu. Podstata posuzovaného způsobu spočívá v oddělování L-tryptofaou pouze od híinokysseio, které jej a to podstatně kmieujd io0nousi jmenovaného a jemu podobných způsobů k oddělování L-tryptofaou.
Je znám způsob oddělování L-tryptofanu, který spočívá na sorpci ^^t^j^s^p^o^i^E^ou slabě bazickým hniknUoiěniδem a následné desorpci vodou. Vodný eluát se odppaí, působí se na oěj barytovou vodou a filtuuje se.
Se získprým f^zlt^se popsaný technologický cyklus opakuje tím, že se pkuužje kolona se sterým s^pčním prostdsdkei. K odstranění baryových iontů se pouužje sulfuУhtiuotuvý m^r^č-č v H-formě. Z vodného roztoku se tryptofao extrahuje ^ι^^ΙεΙ^ holém, extrakt se odpí^í a potom se odáděl krystalický L-trsptufhO. Jmenovaný způsob oe velmi zdlouhavý a vícestupňový, což značně snižuje výtěžek krystalcktého produktu.
Společnou nevýhodou vSdch známých způsobů oddělování L-tryptofacu je nutnost vícestupňového odpařování roztoků tryp^í^o, což je spojeno se značnými energetickými náklady. Dále vede delSÍ var k částečnému rozkladu, tryptofeou a ke vzniku příměsí.
Účelem vynálezu je odstranění jmenovaných nevýhod.
Úkolem vynálezu je vyvinout ^ιηΐήηθοί vlastností sorpčního prostředku selektivního pro L-tryp^í^ a vlastností turpčníhu prostředku, vykahzjícíUu po L-tryptofaou větší kapsa^u, způsob, který by umo0noкal oddělování УrysthlCtkéUu L-tryptofaou za technických podmínek, bez odpařování, s vysokou čistotou a s vysokým výtěžkem.
Nevýhody odstraňuje způsob oddělování L-tryptofanu z vodných roztoků sorpcí L-tryptofanu na pryskyřičných iontoměničích a jeho desorpcí a krystalizací podle vynálezu, jehož podstatou je, že se sorpce L-tryptofanu provádí ve dvou stupních, přičemž se v prvním stupni L-tryptofan sorbuje na slabě basickém měniči aniontů polykondenzačního typu a potom se L-tryptofan eluuje a ve druhém stupni se L-tryptofan ze získaného eluátu sorbuje na sulfokationtoměniči v H-formě.
Provádění způsobu podle vynálezu umožňuje získávat krystalický L-tryptofan s obsahem základní látky 99 % 8 výtěžkem 50 až 70 %.
Eluace L-tryptofanu ze slabě basického aniontoměniče polykondenzačního typu se účelně provádí tfodou zbavenou solí nebo vodným roztokem 0,1 až 0,5 N minerálních kyselin.
Použití tohoto elučního prostředku umožňuje desorbování L-tryptofanu prakticky beze zbytku, přičemž se získaný eluát přivádí do následných stupňů, aniž by jej bylo nutno nějak navíc zpracovávat.
Desorpce L-tryptofanu ze silně kyselého kationtoměniče se účelně provádí 1,5 až 3,0% roztokem amoniaku ve 30 až 50% vodném roztoku ethanolu při teplotě 50 až 70 °C. Získají se amoniak-alkoholové eluáty, které obsahují L-tryptofan.
Taková eluace umožňuje desorbovat L-tryptofan prakticky beze zbytku, zabránit jeho krystalizací v koloně se sorpčním prostředkem a současně dosáhnotu velmi vysoké koncentrace L-tryptofanu v eluátu.
V případě desorpce L-tryptofanu roztokem amoniaku ve vodném roztoku ethanolu se krystalizace účelně provádí okyselením eluátu, obsahujícího L-tryptofan, kyselinou pctovou na hodnotu pH 3,5 až 4,5 za současného ochlazení na teplotu 0 až 5 °C.
Krystálizасе provedená tímto způsobem umožňuje získání čistého krystalického produktu, aniž by se muselo použít několikanásobného odpařování. Použití kyseliny octové vede к úplné krystalizací. Kyselinu octovou je dále možno z krystalického produktu snadno odstranit při sušení.
Způsob podle vynálezu dovoluje oddělovat L-tryptofan z různorodých roztoků, mezi nimi, i z tak komplikovaně složených roztoků, jako je kapalina pro kultury, které vedle L-tryptofanu obsahují zpravidla jiné aminokyseliny, složky živných roztoků nespotřebované při biosyntéze (například cukry, růstové faktory, minerální sole) a zabarvené látky.
Způsob oddělování L-tryptofanu podle vynálezu se provádí následovně.
Kulturová kapalina obsahující L-tryptofan se vede kolonou se slabě bazickým aniontoměničem polykondenzačního typu na bázi m-fenylendiaminu a formaldehydu s přísadou fenolu nebo resorcinu.
L-tryptofan se na pryskyřici jmenovaného typu podle molekulárního mechanismu sorbuje následkem existence aromatického, a to indolového jádra ve své molekule, zatímco minerální sole, jiné aminokyseliny a neionogenní složky živného prostředí, které nemají aromatickou strukturu a neukazují tedy sklon к disperznímu vzájemnému působení, se sorpčním prostředkem nesorbují.
lýp zvoleného sorpčního prostředku umožňuje provádění sorpce L-tryptofanu z roztoků jak po oddělení biomasy, tak také bez předchozího oddělení mikrobních buněk a jiných suspendovaných částic. V posledním případě se mikrobní buňky a jiné suspendované částice pryskyřicí rovněž nesorbují. К zabránění zabahnění sorpčního prostředku a sedimentace mikrobních buněk v koloně vede se roztok do kolony ve směru zdola nahoru. Tímto postupem přivádění roztoku se zabrání shlukování pryskyřice a dynamika sorpce L-tryptofanu se zlepší.
220409 4
Zkoušky sorpce L-tryptofanu na sorpčních prostředcích jmenovaného typu z modelových roztoků obsaahjících sacharozu, močovinu a anorganické sole ukázaly, že jmenované sloučeniny sorpci L-tryptofanu ovlivňují nepodetatně.
L-tryptofan se jmenovaným typem sorpčního prostředku dobře sorbuje v širokém rozsahu hodnoty pH na rozddl od silně bazických a silné kyselých iontoměničů, což je jednou z výhod způsobu podle vynálezu. Pro sorpci L-tryptofanu je optimální rozsah hodnoty pH 7,0 až 1,0.
Sorpční prostředky uvedeného typu se mohou ve·stupni sorpce tryptofanu ' z kulturové kapaliny používat v různých iontových formách (hydrologové, chloridové, sulfátové formě). Lepší výsledky při sorpci L-tryptofanu se však získaaí na fdsfoleδnanové formě pryskyřice. K převedení pryskyřice na fosfolčδnanoldu formu se na pryskyřici musí půsooit roztokem moouзubtijuováného fosforečnanu alУaliУkéhd kovu nebo fosforečnanu amonného.
Po ukončení sorpce se kolona se sorpčním prosteddkem promývá vodou. V případě výskytu L-tryptofanu v Huátu, vede se roztok· vystupuuící z kolony na druhou kolonu se stejým sorpčním prostředkem.
Eluace L-tryptofanu z aniontoméniče jmenovaného typu se provádí odsolenou vodou nebo vodným roztokem 0,1 až 0,5 N minerální kyseliny chlorovodíkové, sírové, fosforečné H-^PO^. Při příoomnooti zbarvených příměsí se lepších výsledků dosáhne eluací vodou. V tomto případě se L-tiyptofan descr^je méně intenzívně, ale prakticky úplné, zatímco zbarvené příměsi pry silicí sorbované se vyi^vv^í mnohem méně než v případě vymývání kyselinami. Detrducl L-tryptofanu se může provádět jak při teplotě mís^oU, tak i při zvýšené teplotě. V · posledním případě vzrůstá deso^^í rychlost L-tryptofanu, vzrůstá však přloom ve větším stupni deso^ce zbarvených příměsí. V důsledku toho je provádění eluace optimální při t^eplotách 10 až 25 °C.
Proto se podle způsobu podle vynálezu ve stupni deso^ce vytvářej mírnější podmínky provádění procesu, což hraje důležitou roli v případě oddělováni L-tryptofanu vzhledem k jeho labilitě. 'Jím klesají ztráty L-tryptofanu v těchto a následnících stupních a zabraňuje se tím vzniku veddejších produktů L-tryptofanu.
Eluát z aniontoměniče obsahuje L-tryptofan v končennraci až 3,0 g/1 a nepodstatné mnnossví zbarvených a jniých příměsí.
Aby se dosáhlo vysokokoncentrovaného roztoku L-tryptofanu, provádí se sorpce L-tryptofanu z eluátu na sulfokationooměnnči v H-formě za následné desorpce.
Pi nepřítomnoo^ solných kationů so^ní sorpční prostředky uvedeného typu L-tryptofan · s vysokou účinností. Současně s koncentrováním dochází k dalšímu čištění L-tryptefanu, poněvadž část zbarvených příměsí prochází kolonou, aniž by byly so^ovány. Jako kationtoměnič pii.cházeeí v úvahu polřttřrnosulfokat0jn0ooéničn s různým stupněm zesstění. Nelepších výsledků se dosáhne v případě iontoměničů, které obsaahuí 4 až 8 hrnoonnotních procent zesilovacího prostředku. Pi sorpci L-tryptofanu na těchto Уationtooěnjčích jsou zajištěny optimální podmínky pro oddělování L-tryptofanu od zbarvených příměsí a příznivé kinetické podmínky pro sorpci L—trypto^enu.
Ke zkrácení trvání procesu podle vynálezu se eluát z ajiontoměničn ihned přivádí do kolony s kat0on0ooénineo bez pouužtí oenináádží. Jo sebou přináší určitá omezení vzhledem k poměrům objemu kolony s katoonooměničem a r^aiosl! provádění roztoku touto kolonou. Vyšší sorpění m^o^r^0£^lt ka^o^cměm^ opuo0i aniun.tuoíějδi jmenovaného typu umooňuje pouužlvat pro kationooměnič kolonu o menším objemu než pro aniuntoíёnjč. V tomto případě se 'však ukazuje, ře rychlost eluace L-tryptofanu, která je pro aniont (měnič optimální, pro Уatiootuměnič je příliš vysoká. Ochranný účinek posledního klesá a tím klesá i účinnost provozu kationtoměniče. Při poměru sorpční schopnosti aniontoměniče к sorpční schopnosti kationtoměniče 1 : 10 je optimální poměr objemu kolony s pryskyřicemi 3 : I.
Pro zvýšení Čistoty konečného produktu se kationtóměnič v koloně promývá horkou vodou při teplotě 50 až 90 °C. Tímto opatřením se odstraní podstatná část zbarvených příměsí sorbovaných na kationtoměniči, zatímco L-tryptofan se prakticky nesorbuje.
Konvenční metodou eluce tryptofanu ze silně kyselého kationměniče je dosorpce vodným roztokem amoniaku při teplotě místnosti. Znám je též způsob, podle něhož se tryptofan desorbuje ze sulfokationtoměničů vodné-alkoholickým roztokem amoniaku při teplotě místnosti (čs. autorské osvědčení č. 154 425)· Avšak v popsie tohoto způsobu není uveden účel přítomnosti ethanolu v elučním roztoku. Z tohoto důvodu nejsou přednosti při použití vodně-alkoholického roztoku vůči čistě vodnému roztoku amoniaku zcela zřejmé.
Podstatný rozdíl mezi způsobem podle vynálezu a známými způsoby je v tom, že sulfokationtoměnič je relativně méně znečištěn tryptofanem, barvivý a jinými přimíšeninaml, protože byl v předcházejících stupních tryptofan důkladně čištěn.
Desorpce tryptofanu bazickým roztokem může být současně provázena krystalizací tryptofanu přímo v odebíraných frakcích. U známých způsobů však přítomnost zpravidla značného množství příměsí na sulfokationtoměniči silně omezuje účinnost bazické eluce, a to zne* možňuje krystalizací tryptofanu po jeho desorpci ze sorbentu.
nby se zabránilo krystalizací tryptofanu ve sloupci a současně aby se zajistila dostatečné krystalizace v odebíraných frakcích, elu^je se podle vynálezu tryptofan ze sulfokar* tiontoměniče vodně-alkoholickým roztokem amoniaku za zvýěené teploty, přičemž složení a teplota elučního roztoku jsou vzájemně upravené a podmíněné. Ethanol se do elučního roztoku přidává proto, aby byla umožněna dostatečná krystalizace tryptofanu v odebíraných frakcích, aniž se musí eluát odpařovat (z vodně-amoniakálního eluátu krystalizuje tryptofan po ochlazení roztoku buď špatně nebo vůbec ne). Aby se zabránilo krystalizací ve sloupci, provádí se eluce tryptofanu ze sulfokationtoměniče při zvýšené teplotě. Tím se též vysvětluje relativně malá koncnetrace amoniaku v elučním roztoku.
Způsobem podle vynálezu se tedy eluce L-tryptofanu ze sulfokationtoměniče provádí 1,5 až 3% roztokem amoniaku v 30 až 50% vodném roztoku ethanolu při teplotě 50 až 70 °C. Vedle výše vyjmenovaných výhod má tato eluční varianta řadu dalších výhod proti známým způsobům. Dosáhne se totiž vyšší koncentrace L-tryptofanu v eluátu, zvýšenou teplotou stoupá rychlost desorpce a klesá přiměřeně objem eluátu obsahujícího L-tryptofan, doba elučního procesu a spotřeba reagencií pro eluci.
Eluát obsahující tryptofan se sbírá po frakcích. Ve frakcích s obsahem L-tryptofanu větším než 10 g/1 po ochlazení na teplotu 0 až 5 °C dochází zpravidla ke krystalizací L-tryptofanu. Dodatečná krystalizace nastává okyselením těchto frakcí ledovou kyselinou octovou na hodnotu pH 3,5 až 4,5. Po neutralizaci roztoku amoniaku kyselinou octovou vypadnou krystaly L-tryptofanu jakož i charakteristické krystaly, které obsahují L-tryptofan, kyselinu octovou a vodu (US patentový spis 27 79 684, 1957). Při sušení jmenovaných krystalů ve vakuu se kyselina octová a voda, jakož i příměsi octěnu amonného, odstraní sublimací a získá se krystalický L-tryptofan. Již v tomto stupni umožňuje způsob získat produkt s obsahem základní látky 99 % hmot, ve výtěžku 50 %.
Tím se oddělí podstatná část krystalického L-tryptofanu bez předchozího odpařování amoniakálního eluátu, což výhodně působí na čistotu krystalického produktu. To je důležitou výhodou způsobu podle vynálezu a současně je navrhovaný způsob získání krystalického tryptofanu z bazického eluátu ve srovnání se známými způsoby zásadně nový.
Roztoky, které vedle L-tryptofanu obsahuj ·octan amonný (matečný louh a promývací voda), se vrací do stupně sorpce anionooméničem v nejblíže následujícím technologickém cyklu.· Frakce amniaaklního eluátu s obsahem L-tryptofanu menším než 10 g/1 se rovněž mohou vracet · do stupně sorpce, nebo se mohou zpracovat známým způsobem a tím se může získat krystalický prodat.
Krystaly L-tryptofanu získané tímto způsobem obsahtuí 90 až 95 % hmot, základní látky. Přioom stoupl celkový výtěžek produktu na 60 až 70 %.
V případě potřeby se může, krystalický produkt poddoObt dodatečnému čištění známými metodami, působením aktivního uh.í a překrystaOováním z vodně-ethanonickýcU roztoků.
Při oddělování L-tryptofanu z kult ořové kapaliny umoOnuje způsob podle vynálezu ve spojení s dodatečným čištěním uvedenou metodou, získávat L-tryptofan s· hodnotami: obsah základní ldky nejméně 99 · · specifická oplti.ckré stáčení (+3°) až (+3D° (C = 1,.H^2°); vlhkost nejvýše 1 %· U^oo.; obsah popele (obsah sulfátového popele) nejvýše 0,1 % UnoO.; obsah příměsí: sulfáty nejvýše 0,01 % U^oO., cU-oridy nejvýše 0, 01 56 U^oO., železo nejvýše 0,001 % U^oO., těžké kovy (olovo) nejvýše 0,001 % hmot. Prodat neobsahuje žádné příměsi jiných aoinonyseein, není toxický ani pyrogenní.
Způsob podle vynálezu dělení L-tryptofanu má určité technické výhody, pro které je účelné jeho používání ve velkém technickém měřítku. Způsob je jednoduchý a technologicky na výši. Vyznačuje se vysokou účinností oddělování krystal^kého L-tryptofanu z pramenů různého druhu, včetně kulturovýcU CippIíí. Způsob um^O^r^u;je oddělování krystal^kého produktu bez odpařování. Způsob umoOnuje vícenásobné poožiií sorpčnícU prostředků bez podssat- * néUo zhoršení jejich vlastnost. Oddděování krystal^kého produktu způsobem podle vynálezu se provádí s vysokým výtěžkem (kolem 70 %, získaný produkt má vysokou čistotu a může obsahovat přes 99 % hm^O, základní látky.
K· lepšímu porozumění vynálezu se dále uvádět konkrétní příklady, které způsob podle vynálezu ilustrují.
Příklad 1 litry roztoku, který obsahuje 16 g L-ttrypttflnU) 8,4 g L-iIiíííu, 5,6 g glycinu, 7,0 g L-valinu, 10·g lysiiliUltrUyírltž a 4 g kyseliny gluaiminové se přivádí do kolony se slabě bazickým makroporézním lniontoměniδem poly/kondenzačního typu na bázi m-fen^lendiaminu a formaH eUydu s přídavkem resorcinu (objem pryskyřice 0,45 1) ve · směru zdola nahoru, rychlostí 0,5 1/U. Po důkazu L-tryptofanu ve fittrátu (provedeno 1,85 1) se filtrát vede do druhé kolony se starým sorpčnim prnttřídkem (objem pryskyřice činí 0,1 1).
Kolony se promyyí 0,85 1 vody (až do důkazu L-trypttfliu u východu z druhé kolony) a eluace obou kolon se provádí 0,2 N roztokem kysedny chlorovodíkové tím, že se roztok vede shora dolů rychlostí 0,35 1/U. Současně se eluát vede do kolony se sulfokationOoměničem polyttyéinovéUt typu v H-formě s obsahem íivinybeenzcnu 8 % (objem prystyřice 110 ο.) ve směru zdola nahoru, Po průtoku 7,0 1·roztoku se eluace kyselinou přeruší. Pak se siufokatiO^nOMiěnčeem vedou 2 li.tn^y vody při teplo.ě 50 °C. Eluace ^t-rypitofanu ze sul^kati^to měnde se provádí 256 roztokem lmonilku v 5°% vodném rozt.du eWanolu při teplot 63 °C> tím že se roztok vede shora dolů rychlostí 80 Ol^U. První frakce eluátu objemu 90 ml se vyhodí; na druhou frakci objemu 250 ml o konceenraci L-tryptofanu více než 70 g/1 se působí 20 ml ledové kyseliny · octové, až se dosáhne hodnoty pH 4,5 a 20 hodin se cUladí při teplotě 3 až 5 °C. Vypadlé krystaly se oOdfltrují, proimJi ochlazeným ethanolem a suší se při teplotě 40 °C.
Získá se 11,9 g cUttmalooгrficky čistého krystal^kého L-tryptofanu s obsahem základní látky přes 99 % hmot.
Příklad 2
Výchozí roztok obsahující L-tryptofan má složení, podobné složení uvedenému v příkladu
1. Odddlování L-tryptofanu se provádí analogicky příkladu 1 s výjimkou, že se při desorpci L-tryptofanu z aniontoměniče pouuije 0,42 N kyselina sírová, při desorpci z kationtoméniče 2,6% roztok amoniaku v 30% vodném roztoku ethanolu, eluace z katoonooměniče se provádí při topLot-é 66 °C ďkyselování letovou kyselinou octovou se provádí to hodnoty pH 3,7 a okyselený eluát se odladí na tepltou 2 °C.
Získaný krystalický produkt obsahuje přes 99 % Umoo. L-tryptofanu. Výtěžek krystalCkkéUo produktu je 68 %.
Příklad 3 * Jako výchozí maateiH pro oddělování L-tryptofanu slouží fermentační m^<d:i^um získané í kultivací kmene Bac. subtilis Wllgenetika 3 557 na živném mOéiu, které obsahuje cukr, kukuřičný extrakt, močoovnu, sole fosforečnanu draselného, síran Uořeěnatý, chlorid sodný. Koncenerhce L-tryptofsnu je 6,20 g/1. 1 Litr kulturo vé kapsa-iny se vede kolonou se slabě bazickým makriporeseím heiie0oměeičem polykoedeezhčeíUo typu na bázi o-feny^^! aminu a firmhldeUydu s přídavkem, resor^nu objemu 0,25 1 zdola nahoru, rychlostí 0,3 1/U. Potom se kolona proplácíme 0,5 Litru vody ve stenném směru a stejnou rychlostí. Po průtoku prvnícU 0,2 1'vody a průkazu L-tiyrptofanu ve stopové kinceeerhci ve vystupujícím roztoku se vystuppuící roztok přivádí do druUé kolony se ste^rým sorpčním pristnddkeo (objem pryskyřice 0,25 litru).
Desorpce L-tryptifteb z první kolony se provádí 3,0 1 odsolené vody, která se přivádí . rycU-ostí 0,2 1/U ve směru sUora dolů. Eluát · L-tryptifhe se vede stejnou iycUlittí kolonou, která obsahuje 80 ml polyttyrtetblfokhtieniooěeičt v K-formě, zdola nahoru. potom se kolona propUk^e 0,5 1 vody při teplotě 70 °C, rycMosto 0,2 1^.
Eluace L-tryptofenu ze suLfikhtieniooěeičt se provádí 0,5 liru 1,5% roztoku amooehku v 50% vodném roztoku ^^οΐα při teplotě 58 °C. Eluít se sUrimažďujt po frakcícU. První frakce o objemu 100 ml obsahuje tryptofan v 0,15 g/1. Tato frakce se vede do stupně deso^ce na slabě bazickém hniietooěneči v následujícím cyklu. DruUá frakce o objemu 70 ml obsahuje trypsin v kincenerhci 48 g/1. Tato frakce se okysel ledovou kyselinou octovou (5,0 Oi) na Uodnotu pH 4,10 a ochladí se na teplotu 5 °C. VypiadLé krystaly se odpromj ttUhnileo a suší se ve vakuu. Získá se 3,02 g cUrooaaoigaficCy čiť^^^U^o kiytthlCckéUi tгyptc>faeb s ibshUnm základní látky 99 % Umot. Výtěžek trypti>faeb v krystalCkééo produktu je 48,4 %.
V matečném louUu je koncentrace L-tryptohaeb 5,2 g/1, objem matečném louUu je 65 ml a spolu s promývací vodou 80 ml. Tenno roztok se po idddttiliv1eí alkoUolu vede do stupně desorpce na sl^a^bě bazickém v násLeduJício cyklu.
’ Třetí frakce objemu 350 ml obsahuje L-tryptofan v 4,2 g/1. Tato frakce se ve vakuu odpaří na objem 18 ml a ochlad se na teplotu 5 °C. Vypadlé krystoly L-tryptofanu se to^diJ-trují, promj ttUanolem a suší se. Získá se 1,15 g L-tryptifaeb s obsaUem 95 % Umoi. základní látky. Celkový výtěžek L-tryptofanu v krystalčckém produktu je 66 %.
Příklad 4
Kulturová kapalina má složení analogické složení popsanému v příkladu 2. Objem kulturové ^pea-iny je 2,0 1, objem slabé bazickém aeiontcměϊnLČe 0,5 1. PK^t^iínky sorpce, poppípadě des^^pce na aniintimёneči jsou analogické příkladu 2, s tím rozd^em, že se priplácUnutí kolony po sorpci provádí 1,0 1 vody a eluace tryptiιfaeb ze sirpčníUi prostředku 0,6 1 odsolené vody. Eluát se vede do kolony se 70 ml sulfokationtoměniče v H-formě, který obsahuje 4 % diviryieenzenu, rychlostí 0,2 1/h zdola nehoru. Po ukončené sorpci se kolonou se sulfokattontomёnieem vede 0,5 1 vody při teplotě 75 °C zdola nahoru stejnou rychlosti. 1 Eluace L-tryptofaou se provádí 1,7% roz^kem amoniaku v 50% vodném roztoku ethanolu, při tepot.é 63 °C. První frakce o o^emu 70 ml obsahhjící ^-tryptoffin v koncern^ci 0,2 g/1 ' se vede do stupně sorpce na slabě bazickém anitntomёn0či v následujícím cyklu. Druhá frakce eluátu o objemu 90 ml, obsah^jcí L-tryptofao v koncenOraci 80,5 g/1 se okysslí 4 až 5,5 ml ledové kyseliny octové na hodnotu pH 4,15 a ochladí se na teplotu 5 °C.
VypedXé krystaly se zpracují analogicky příkladu 1. Získá se 6,50 g clro□atttgafiiCy čistého krystaicckého L-tryptofaou s obsahem základní látky 99 % hmot. Výtěžek L-tryptofanu v kryst^aliké^m produktu je 51,2 %· Matečný louh s koncern^cí L-tryptofaou 5,1 g/1 a ' promý“ vací voda se po oddeesilování alkoholu vedou do stupně sorpce na v následujícím cyklu.
Třetí frakce eluátu objemu 315 ml s ^ocern^cí L-tryptofaou 6,5 g/1 se odpař*! na objem 30 ml, po . ochlazení se tteiltrují vypadlé krystaly, prolijí se ethanolem a suěí se.
Získá se 1,98 g Crysthlického L-tryptofaou s obsahem základní látky 96 % hmo^ Celkový výtěžek L-tryptofanu v CrystalCckém produktu je 67,2 %.
Krystaly L-tryptofaou s obsahem 96 % hrnco. základní látky se přelcrsttlují. K tomu se 2,25 g získaného produktu za zadívání rozpussí ve 25 ml 50% ethanolu. K roztoku se přidá 0,4 g aktivního uhlí, horký roztok se filtruje, filtrát se ochladí a vypadlé krystaly L-tryptofanu se odstru jí, pro^yí ethantlem a suěí se. Získá se 1,56 g chttmettt;raficky čistého krystal^kého L-tryptofaou s obsahem základní látky 99 % hmot. Po překrystalování je výtěžek 72 %.
Claims (4)
1.5 až 3,0% roztakem a^c^^oaku v 3° až 50% vodorém rozt^u ettanolu při teplotě 5° až 70 °C za vzniku emnOi^a:-alktholtvýil eluátů s obsahem L-tryptofErnu, ze kterých se L-trypttfεn získá krystO-izacc.
1. Způsob oddělování L-tryptofaru z roztoků sorpcí L-tryptofaou na aniontoměnOčích a silně kyselých kationtoměnOčích a jeho následnou deso^cí pouUitím roztoku amonOhku ve vodném roztoku ethanolu v případě silně kyselého кationtoшěniδl, vyznačující se tím, že se sorpce L-tryptofaou provádí ve dvou stupních, přUemž se v prvním stupni sotIuíi L-tryp4 tofao na slabě. bazickém anitntoměnOči ptl·yktodlOzhUoíht typu na bázi ftrmhldlhydu s následnou elucí a ve druhém stupni se L-tryptofeo ze získaného eluátu sor^je na aιULfokhttontOéém měriOči iontů polystyrénového typu v H-formě, následnici eluce se provádí
2. Způsob podle bodu 1, vyzцočurjií se tím, že se eluce L-tryptofaou ze slabě bazického anitotoměoiUe polykondenzačního typu na bázi formaldehydu provádí od^lenou vodou nebo vodným roz^kem 0,1 - až 0,5 N minerálních kyselin. '
3· Způsob podle bodu 1, vyzno^^jc! se tím, že se v případě deso^ce L-tryptofaou roztokem hmonOhku ve vodném roztoku ethanolu provádí krysthlizhcl L-tryptofaou okyselením amoolαk-αlkoholovélo eluátu obsah^Uícího L-trypttfho kyselinou . octovou na hodnotu pH . 3,5 až
4.5 a lnuuhlΌým - ochlazením na teplotu 0 až 5 °C.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU772450067A SU749889A1 (ru) | 1977-02-03 | 1977-02-03 | Способ выделени -триптофана |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS220409B1 true CS220409B1 (en) | 1983-04-29 |
Family
ID=20694621
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS73678A CS220409B1 (en) | 1977-02-03 | 1978-02-03 | Method of separating l-tryptophan out of solution |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS53111061A (cs) |
| CS (1) | CS220409B1 (cs) |
| FR (1) | FR2379512A1 (cs) |
| HU (1) | HU180541B (cs) |
| PT (1) | PT67542B (cs) |
| SU (1) | SU749889A1 (cs) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0623198B2 (ja) * | 1985-04-26 | 1994-03-30 | 味の素株式会社 | トリプトフアンの精製法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR962631A (cs) * | 1947-03-04 | 1950-06-16 | ||
| US2700672A (en) * | 1950-04-24 | 1955-01-25 | Food Chemical And Res Lab Inc | Method for the preparation or removal of tryptophane and other substances from theirsolutions |
| GB1145512A (en) * | 1965-09-21 | 1969-03-19 | Kyowa Hakko Kogyo Company Ltd | Method for isolating tryptophan |
-
1977
- 1977-02-03 SU SU772450067A patent/SU749889A1/ru active
-
1978
- 1978-01-18 PT PT6754278A patent/PT67542B/pt unknown
- 1978-01-20 JP JP511078A patent/JPS53111061A/ja active Pending
- 1978-02-02 FR FR7802895A patent/FR2379512A1/fr active Granted
- 1978-02-03 HU HUVE000860 patent/HU180541B/hu unknown
- 1978-02-03 CS CS73678A patent/CS220409B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2379512B1 (cs) | 1980-04-11 |
| SU749889A1 (ru) | 1980-07-23 |
| HU180541B (en) | 1983-03-28 |
| PT67542A (en) | 1978-02-01 |
| JPS53111061A (en) | 1978-09-28 |
| FR2379512A1 (fr) | 1978-09-01 |
| PT67542B (en) | 1979-06-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1964767B (zh) | 木质纤维素原料处理过程中无机盐的回收 | |
| JPS60199390A (ja) | クエン酸の取得法 | |
| NO834765L (no) | Fremgangsmaate for rensing av antra-cyclinon-glukosider ved adsorpsjon paa harpikser | |
| JP2012500822A (ja) | ブロッコリー種子からグルコシノレートを抽出するための方法 | |
| SK64496A3 (en) | A method of recovering a desired amino acid and method of recovering l-lysine from an aqueous solution | |
| JPS60139656A (ja) | リジン製造法 | |
| CN101020649A (zh) | 一种天然茶氨酸的分离纯化方法 | |
| CN113135581B (zh) | 从玉米浸泡液中提取钾制备硫酸钾镁和硫酸钾的工艺方法 | |
| CA1228601A (en) | Purification of l-phenylalanine | |
| CN102775334B (zh) | L-赖氨酸-s-羧甲基-l-半胱氨酸盐的生产工艺 | |
| CN101585548A (zh) | 用糖蜜发酵废液制备结晶无机钾盐与饲料添加剂的方法 | |
| CN101139321A (zh) | 一种采用阳离子交换树脂分离纯化荷叶碱的方法 | |
| CS220409B1 (en) | Method of separating l-tryptophan out of solution | |
| CN1125037C (zh) | 生产谷氨酸的方法 | |
| DE2906034A1 (de) | Verfahren zur gewinnung von aminosaeuren aus proteinhydrolysaten | |
| CN100509757C (zh) | 15n-l-精氨酸的分离提纯方法 | |
| JPS624399B2 (cs) | ||
| CN106279197A (zh) | 异山梨醇反应溶液的纯化及结晶工艺 | |
| CN111487342B (zh) | 一种葡萄糖醛酸—莱克多巴胺的制备与纯化方法 | |
| CN107032983B (zh) | 一种利用大孔吸附树脂从发酵液中提取分离琥珀酸的方法 | |
| Robinson | Two Compounds Isolated from Peat Soils. | |
| CN113511967B (zh) | 一种从银杏叶提取物层析废水中提取奎宁酸的方法 | |
| Przybylska et al. | Identification of γ-methylglutamic acid in Lathyrus maritimus | |
| CA1169735A (en) | Process for the production of an anion exchanger, and a use of same | |
| JPS6337635B2 (cs) |