CS224881B1 - Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroiďú z biologického materiálu na bázi sorbentů - Google Patents
Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroiďú z biologického materiálu na bázi sorbentů Download PDFInfo
- Publication number
- CS224881B1 CS224881B1 CS770181A CS770181A CS224881B1 CS 224881 B1 CS224881 B1 CS 224881B1 CS 770181 A CS770181 A CS 770181A CS 770181 A CS770181 A CS 770181A CS 224881 B1 CS224881 B1 CS 224881B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- oxosteroids
- isolation
- sorbents
- total
- biological material
- Prior art date
Links
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 title claims description 10
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title claims description 9
- 239000012620 biological material Substances 0.000 title claims description 5
- 229920002818 (Hydroxyethyl)methacrylate Polymers 0.000 claims description 9
- WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N Hydroxyethyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCO WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 claims description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 8
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- -1 ethylene dimethyl methacrylate Chemical compound 0.000 claims description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 8
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 8
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol dimethacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCOC(=O)C(C)=C STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 5
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 2
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WDCYWAQPCXBPJA-UHFFFAOYSA-N 1,3-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 WDCYWAQPCXBPJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000020576 Adrenal disease Diseases 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006113 Zimmermann reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000008280 chlorinated hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Předmětem vynálezu je prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroidů z biologického materiálu na bázi sorbentů.
Skupina látek, označovaná hromadně jako 17-oxosteroidy, je tvořena jednak sloučeninami, které jsou součástí skupiny steroidních hormonů, produkovaných nadledvinami a gonádami, jednak sloučeninami, které vznikají při jejich metabolismu.
Přebytek těchto hormonů je z organismu vylučován močí buS ve volná formě nebo jako konjugáty a kyselinou glukuronovou. Stanovení těchto látek má značný význam pro diagnostiku chorob nadledvin a je běžnou součástí palety endokrinologických vyšetření.
Obvykle se provádí stanovení celkových 17-oxosteroidů v moči po jejich hydrolýze a separaci tak zvanou Zimmermannovou reakcí, kterou poskytují některé oxosloučeniny s 1,3-dinitrobenzenem. Izolace volných steroidů po hydrolýze moči je nutná zejména ze dvou důvodů. Moč obsahuje jen asi 5.10 až 5.10 % hmot. těchto látek spolu s velkým množstvím interferujících složek, které je nutné oddělit a volné steroidy zkoncentrovat.
Běžná je izolace volných 17-oxosteroidů extrakcí do organických rozpouštědel, například do benzenu, diethyletheru a do chlorovaných uhlovodíků. Jedná se vždy o pracný postup, vyžadující práci s hořlavinami nebo jedy v poměrně značných objemech. Jednodušší
224 881
224 881 je ieolece těchto látek pomocí sorbentů na bázi polystyrénových gelů, která byla kupříkladu popsána Bradlowem (Bradlow, H.L.: Sterolds 11, 256, 1968). Nevýhodou izolace na těchto sorbentech jsou zejména velké změny ve zbotnéní vlivem rozdílných dielektrickýoh konstant vodného roztoku vzorku a používaných eluentů, projevující se obvykle trháním sloupce polystyrénového gelu v izolačních kolonách. Další nevýhody spočívají v tom, že polystyrénové gely vykazují poměrně vysokou zádrž vody, což opět ztěžuje eluci volných 17-oxosteroidů. Polystyrénové gely se kromě toho obtížně regenerují a výsledky analýz celkových 17-oxosteroidů po izolaci na regenerovaných sorbentech tohoto typu vykazují značné rozdíly, a to až o - 10 %. Polystyrénové gely vhodné kvality nejsou kromě toho v tuzemsku dostupné.
Výše uvedené nedostatky odstraňuje prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroidů » z biologického materiálu na bázi sorbentů typu polymerů podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že je tvořen makroporesním kopolymerem s 90 až 10 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 10 až 90 % hmot. ethylendlmethakrylátu o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 1,7 . IO’23 až 1,6 . 10-^ kg a velikosti čésti 20 až 600 s výhodou 61 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 39 % hmot. ethylendlmethakrylátu o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 5 · IO“22 kg a velikosti částic 100 až 200^um.
Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroidů z biologického materiálu podle vynálezu má proti dosavadním prostředkům používaným k těmto účelům řadu předností.
Vylučuje nebezpečnou a zdlouhavou extrakci do organických rozpouštědel založenou na použití hořlavin nebo jedů a podstatně zkracuje dobu potřebnou na jednu analýzu, a to asi o dvě hodiny. Na rozdíl od dosud známých polystyrénových sorbentů lze prostředek podle vynálezu snadno regenerovat a opakovaně použít, aniž by bylo pozorováno zhoršení přesnosti nebo správnosti analýz. Regenerace je snadná a provádí se pronytím methanolem a vodou. Materiál lze takto použít až dvacetkrát. Prostředek podle vynálezu vykazuje ve srovnání s polystyrénovými sorbenty podstatně vyšší přesnosti při analýze, nebol nedochází k trhání sloupce a zádrž vody je také minimální. Při srovnání analýz pomocí prostředku podle vynálezu ee třemi postupy využívajícími extrakci do diethyletheru a dichlormethanu byly nalezeny prakticky totožné výsledky při stanovení celkových 17-oxosteroidů v moči s koeficienty korelace v rozmezí 0,98 až 0,99. Přesnost stanovení při opakované regeneraci a použití prostředku podle vynálezu se přitom pohybovala v oboru - 4 % a pravděpodobnost 95 %·
Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroidů podle vynálezu je na rozdíl od polystyrénových sorbentů dostupný v tuzemsku ve vhodné kvalitě a čistotě a jeho snadná regenerace se projevuje slevněním stanovení. Také jeho použití k izolaci aanalýze celkových 17-oxosteroidů je jednoduché. Moč po kyselé hydrolýze se prolije kolonkou obsahující prostředek podle vynálezu v množství 10 ml hydrolyzátu na 1 g prostředku, kolonka se promyje roztokem hydroxidu alkalického kovu a potom vodou do neutrální reakce eluátu
224 881 a 17-oxosteroldy se z kolonky vymyjí 10 ml metanolu, přičemž se jímá posledních 6 ml eluátu. Dále se stanovení provádí například fotometricky po reakci s 1,3-dinitrobenzenam
Příklad 1
Prostředek k izolaci celkových 17-oxosteroidů je tvořen kopolymerem o 71 % hmot. ethylendimethakrylátu a 29 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a vylučovací mezí molekulová hmotnosti 1,7 . 10-20 až 1,6 . 10-1^ kg a velikostí částic 25 až 40^.
Přiklad 2
Jako prostředek k izolaci celkových 17-oxosteroidů se použije makroporézní kopolymer s 39 % hmot. ethylendimethakrylátu a 61 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu o vylučo—23 vací mezi molekulové hmotnosti 6,6 .10 kg a velikosti částic 200 až 600<um.
Příklad 3
K izolaci celkových 17-oxosteroidů ae použije kopoiymer s 61 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 39 % hmot. ethylendimethakrylátu o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 5 . 10“22 kg a velikosti části 100 až 200 Rim.
Příklad 4
Prostředkem pro izolaci celkových 17-oxosteroidů je kopoiymer 14 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 86 % hmot. ethylendimethakrylátu o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 4 · 1O~19 tg a velikosti částic 100 až 300 ^am.
Příklad 5
Jako prostředek k izolaci celkových 17-oxosteroidů se použije makroporesní kopolymer s 83 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 17 % hmot. ethylendimethakrylátu o vylu-23 čovací mezi molekulové hmotnosti 3,3 . 10 kg a velikosti částic 150 až 400^um.
Claims (1)
- 224 081PŘEDMĚT VYNXLEZUProstředek pro izolaci celkových 17-oxosteroldů z biologického materiálu na bázi sorbentů typu polymerů, vyznačený tím, Se je tvořen mekroporézním kopolymerem β 90 až10 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 10 až 90 % hmot· ethylendlmethakrylátu o vylučova —23 —IQ cí mezi molekulovéhmotnosti 1,7 . 10 až 1,6 . 10 7 kg a velikosti částic 20 až600 ^m, s výhodou 61 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 39 % hmot. ethylendlmethakrylátu —22 o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 5 . 10 kg a velikosti částic 100 až 200 ^um.Cena: 2,40 KCsVytiskly Moravské tiskařské závody, provoz 12, Leninova 21, Olomouc
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS770181A CS224881B1 (cs) | 1981-10-21 | 1981-10-21 | Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroiďú z biologického materiálu na bázi sorbentů |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS770181A CS224881B1 (cs) | 1981-10-21 | 1981-10-21 | Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroiďú z biologického materiálu na bázi sorbentů |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS224881B1 true CS224881B1 (cs) | 1984-01-16 |
Family
ID=5426600
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS770181A CS224881B1 (cs) | 1981-10-21 | 1981-10-21 | Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroiďú z biologického materiálu na bázi sorbentů |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS224881B1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ298761B6 (cs) * | 1996-08-30 | 2008-01-23 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Postup získávání estrogenů z moči klisen |
-
1981
- 1981-10-21 CS CS770181A patent/CS224881B1/cs unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ298761B6 (cs) * | 1996-08-30 | 2008-01-23 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Postup získávání estrogenů z moči klisen |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hardy et al. | Separation of positional isomers of oligosaccharides and glycopeptides by high-performance anion-exchange chromatography with pulsed amperometric detection. | |
| Cohn | [107] Methods of isolation and characterization of mono-and polynucleotides by ion exchange chromatography | |
| EP2282209B1 (en) | Method for labelling sugar chains | |
| Engel et al. | The estimation of urinary metabolites of administered estradiol-17 β-16-C14 | |
| Sharon et al. | Isolation and study of the chemical structure of a disaccharide from Micrococcus lysodeikticus cell walls | |
| Harris et al. | QUANTITATIVE CHROMATOGRAPHIC METHODS: PART 7. ISOLATION OF AMINO ACIDS FROM SERUM AND OTHER FLUIDS | |
| Axelson et al. | Selective liquid chromatographic isolation procedure for gas chromatographic-mass spectrometric analysis of 3-ketosteroids in biological materials | |
| CORTÉS et al. | Secretion of 18-hydroxydeoxycorticosterone by the rat adrenal gland | |
| Resnik et al. | Chromatography of organic acids in cured tobacco | |
| Axelson et al. | Strong non-polar cation exchangers for the separationof steroids in mixed chromatographic systems | |
| CS224881B1 (cs) | Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroiďú z biologického materiálu na bázi sorbentů | |
| Spiro et al. | Monosaccharide determination of glycoconjugates by reverse-phase high-performance liquid chromatography of their phenylthiocarbamyl derivatives | |
| Sjövall et al. | General and selective isolation procedures for GC/MS analysis of steroids in tissues and body fluids | |
| Sṕencer | Ion exchange chromatograhy of polyols | |
| Oka et al. | Extraction-monitoring and rapid flow fractionation for determination of serum corticosteroids | |
| Tetsuo et al. | Selective isolation procedures for GC/MS analysis of ethynyl steroids in biological material | |
| Eneroth et al. | Quantification of cholesteryl sulfate and neutral sterol derivatives in human feces after purification on lipophilic sephadex gels: Bile acids and steroids 188 | |
| Sjövall et al. | Estimation of dehydroepiandrosterone sulfate in human serum by gas-liquid chromatography | |
| Phillips et al. | Interaction of omeprazole with DNA in rat tissues | |
| Linford | Experiments on the use of silicic acid for steroid chromatography | |
| Axelson | Exchange of oxime functions: A useful reaction in GC-MS analysis of steroids | |
| Stabenfeldt et al. | GAS—LIQUID CHROMATOGRAPHY FOR ESTIMATION OF PERIPHERAL PLASMA PROGESTERONE IN DOMESTIC ANIMALS | |
| Tetsuo et al. | Gas chromatographic-mass spectrometric analysis of endogenous levels of estradiol in plasma and in cytosol from rat uterus | |
| CN112625119B (zh) | 一种雌酮抗原及其制备方法 | |
| Hobkirk et al. | Separation of monoglucosiduronate conjugates of estrone and 17β-estradiol by DEAE-Sephadex chromatography |