CS252994B1 - Kmen mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 - Google Patents
Kmen mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 Download PDFInfo
- Publication number
- CS252994B1 CS252994B1 CS27886A CS27886A CS252994B1 CS 252994 B1 CS252994 B1 CS 252994B1 CS 27886 A CS27886 A CS 27886A CS 27886 A CS27886 A CS 27886A CS 252994 B1 CS252994 B1 CS 252994B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- strain
- ccy
- variabilis
- formula
- compound
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Riešenie sa týká kmeňa Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2, ktorý Je mutantom kmeňa Trigonopsis variabilis CCY 15-1-1 a ktorý sa vyznačuje induktívnou syntézou D-amínoacid: Ož-oxidoreduktázy deaminujúcej EC 1-4-3-3, katalyzujúce] oxidatívnu deamináciu zlúčenín všeobecného vzorca Z (najmá cefalosporín C) na zlúčeniny všeobecného vzorca 1 (najmá kyseliny 7-|3-(4-karboxybutánamido)cefalosporánovej. Buňky produkčnébo kmeňa je možné v natívnej alebo imobilizovanej formě použit na transformáciu najma cefalosporínu C za vzniku 7-acyIamíno zlúčenín, ktoré sú vhodným substrátom pre enzýmovú přípravu kyseliny 7-amíno-cefalosporánovej.
Description
(54) Kmen mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2
2
Riešenie sa týká kmeňa Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2, ktorý Je mutantom kmeňa Trigonopsis variabilis CCY 15-1-1 a ktorý sa vyznačuje induktívnou syntézou D-amínoacid: Ož-oxidoreduktázy deaminujúcej EC 1-4-3-3, katalyzujúce] oxidatívnu deamináciu zlúčenín všeobecného vzorca Z (najmá cefalosporín C) na zlúčeniny všeobecného vzorca 1 (najmá kyseliny 7-|3-(4-karboxybutánamido)cefalosporánovej. Buňky produkčnébo kmeňa je možné v natívnej alebo imobilizovanej formě použit na transformáciu najma cefalosporínu C za vzniku 7-acyIamíno zlúčenín, ktoré sú vhodným substrátom pre enzýmovú přípravu kyseliny 7-amíno-cefalosporánovej.
Vynález Kmen mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 s aktivitou D-amínoacid: Oz-oxidoreduktázy deaminujúcej EC 1-4-3-3 sa týká kmeňa mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2, použitelného pre enzýmovú přípravu 7-acyl-amínocefém zlúčenín, najma pre přípravu kyseliny 7-β-(4-karboxybutánamido j cef alosporánovej, ďalej GLT-7ACK.
Zlúčeniny všeobecného vzorca 1
CH2X kde X je —H, —OH, —OCOCH3 alebo nukleofilná skupina a Ri je (CH2)3—CHNH, — (CH2)3—CO—COOH, možno připravit zo zlúčenín všeobecného vzorca 2
COOH kde R2 ie — ÍCH2I3—CH
NHž—COOH, působením enzýmov, katalyzujúcich oxidačnú deamináciu zlúčenín všeobecného vzorca 2. Na enzýmovú reakciu je možné využit bud izolovaný enzým alebo celé buňky niektorých dru hov mikroorganizmov.
Priama hydrolýza zlúčenín všeobecného vzorca 2, kde X je —OCOCH3 a R je — (CH2j3CHNHzCOOH tzn. cefalosporín C za vzniku kyseliny 7-amínocefalosporánovej (7ACK) je možná, no značné zložitá a pre praktické využitie málo eíektívna a často je vznik hlavného produktu sprevádzaný tvorbou sprievodných derivátov najmá kyseliny
3-deacetyl-7-amíno-cefalosporánovej. Je opísaná celá rada různých mikroorganizmov, produkujúcich acylázy vhodné na konverziu CFS-C na 7AGK- Aspergilus, Penicillium, Alternaria, Gibercella Aspergilus, Glioclaudium (JP 77 143 289, Brit patent, spis 1566830, US pat. 3 239 394, JP 77 038 092) maximálna udávaná konverzia na 7ACK je 15—18 %. V tejto situácii sa javí dalekoperspektívnejšie dvojstupňová enzýmová transformácia 7-acylamíno zlúčenín všeobecného vzorca 2 kde R je — (CH2]3— CNHN2COOH na 7-acylamíno zlúčeniny všeobecného vzorca 1 kde R je — (CHz)3—COOH. Tňto reakciu za použitia různých kmeňov napr. Aspergilus, Neurospóra, Aerobacter, Candida, Trigonopsis, Fusarium, Penicillium opisujú japonské pat.
spisy číslo 80 23 966, 75 038 092, 55 35119, 54 154 592, 50 71 58 alebo britský pat. spis 1 272 769. Chemickú konverziu CFS-C na zlúčeniny všeobecného vzorca č. 1 opisuje jap. pat. spis 78 114 871 alebo 77 77 078. Zlúčeniny všeob. vzorca č. 1 možno transformovat na kyselinu 7-amíno-cefalosporánovú enzýmovou hydrolýzou za použitia enzýmov alebo buniek kmeňov Pseudomonas ovalis, Commamonas, Arthobacter, Bacillus a i. podlá jap. pat. spisov č. 53 940 93., 76 70 884., 81 85 298., 52 128 293 a iných.
Vynález sa týká kmeňa Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2, ktorý je mutantom původného kmeňa Trigonopsis variabilis CCY 15-1-1 a ktorý sa vyznačuje induktívnou syntézou D-amínoacid: Oz-oxidoreduktázy, deaminujúcej EC 1-4-3-3 (D-amínoacid oxidázy, DAAox), katalyzujúcej premenu CFS-C (látky všeobecného vzorca č. 2 na látky všeobec. vzorca č. 1, alebo katalyzujúcej premenu D-amínokyselín za vzniku příslušných ketokyselín. Kmeň bol získaný z původného zbierkového kmeňa T. variabilis CCY 15-1-1 mutagenézou fyzikálnymi faktormi. Suspenzia buniek kmeňa, získaná sterom zo šikmej agarovej půdy, bola po nariedení nanesená na Petriho misky so Saburaudovou půdou a podrobená mutagénnemu zásahu UV svetlom zo vzdialenosti 50 cm po dobu 1 min. Bol vybraný monokolóniový izolát vykazujúci vysokú aktivitu enzýmu DAAox.
Kmeň je uchovávaný na šikmej agarovej půdě podl'a Saburauda a pomnožovaný na půdě zloženia glukóza (2 % j, kukuřičný extrakt 100 %-ný (2%J a induktor (0,25%), ktorým može byť DL-metionín, D-valín, pH půdy 5,0. Kultivácia v inokulačnom aj produkčnom stupni je 72-hodinová.
Biochemické charakteristiky kmeňa:
1) Fermentácia cukrov galaktóza -Jmaltóza — laktóza — sacharóza — glukóza + fruktóza -jsorbóza -jxylóza — dulcit — arabinóza — ribóza — manóza -{2) tvorba lyzíndekarboxylázy —
3) tvorba katalázy +
4) stekucovanie želatiny —
5) redukcia citrátov — j (S-laktamázy —
Množstvo DDA oxidázy v buňkách bolo sledované nepriamo na základe bilancie 0xidačnej deaminácie cefalosporínu C za vzniku glutaryl-7ACK metodou vysokotlako25 2 vej kvapalinovej chromatografie alebo chromatografiou na tenkej vrstvě.
Použitie kmeňa Trigonopsis variabilis pre přípravu GLT-7ACK je dokumentované v nasledovnom praktickom příklade bez toho, že by sa ním jeho použitie obmedzovalo.
Příklad 1
Kmeň Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 je naočkovaný do 60 ml živnej pódy o obsahu 2 % glukózy, 2 % 100%-ného kukuřičného extraktu a 0,25 % induktora (D-valínu), pH 5,0 v 500 ml kultivačných baničkách. Po 72-hodinovej kultivácii na rotačnom trepacom stroji pri teplote 27 °C je 5 mililitrov inokula naočkované do pódy rovnakého zloženia ako inokulačná, len induk94 tor D-valín je nahradený D alebo DL metionínom o koncentrácii 0,3 %. Kultivácia za rovnakých podmienok ako v inokulačnom stupni sa ukončí po 72 hodinách a buňky sa separujú centrifugáciou pri 4 000 ot/min., za chladenia (-j-5 °C) 20 minút. Specifická aktivita takto připravených buniek je určená na základe bilancie oxidačnej deaminácie cefalosporínu C (zlúčenina všeobecného vzorca č. 2) o koncentrácii 10 mg/ml v 0,1 M fosfátovom pufri pH 8,0 pri 34 °C počas 2-hodinovej konverzie za vzniku GLT-7ACK (látka všeobecného vzorca č. lj, aktivita buniek je 15 nmol min'1 mg-1 suchej hmoty. V porovnaní s póvodným kmeňom T. variabilis CCY 15-1-1 za rovnakých podmienok je špecifická aktivita kmeňa T. variabilis CCY 15-1-2 vyššia o 30 %.
Claims (1)
- PREDMETKmeň mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 s aktivitou D-amínoacld: O2-oxidoreduktázy deaminujúcej EC 1-4-3-3,YNÁLEZU katalyzujúci oxidačnú deamináciu zlúčenín všeobecného vzorca kde X je —H, —OH, —OCOCH3 alebo nukleofilná skupina a Ri je — (CH2)?— —CHNH2—COOH. za vzniku zodpovedajúcich 7-acylamínocefém zlúčenín.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS27886A CS252994B1 (sk) | 1986-01-13 | 1986-01-13 | Kmen mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS27886A CS252994B1 (sk) | 1986-01-13 | 1986-01-13 | Kmen mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS252994B1 true CS252994B1 (sk) | 1987-10-15 |
Family
ID=5334631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS27886A CS252994B1 (sk) | 1986-01-13 | 1986-01-13 | Kmen mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS252994B1 (sk) |
-
1986
- 1986-01-13 CS CS27886A patent/CS252994B1/sk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6432688B1 (en) | Amino alcohol dehydrogenase converts keto alcohol to amino alcohol and amino alcohol to keto alcohol | |
| SU1512488A3 (ru) | Способ получени амида | |
| US5474924A (en) | Method for producing 2-keto-L-gulonic acid | |
| KR0173124B1 (ko) | 7-아미노 세팔로스포란산의 효소적 제조방법 | |
| US4774179A (en) | Process for preparing a 7-aminocephalosporanic acid compound | |
| EP0206460B1 (en) | L-phenylalanine dehydrogenase and use thereof | |
| US5298411A (en) | Glucose dehydrogenase from pseudomonas | |
| US5166061A (en) | Process for the production of 4-halo-3-hydroxybutyronitrile with Corynebacterium or Microbacterium | |
| JP3694065B2 (ja) | 環状Ｓ−α−アミノカルボン酸およびＲ−α−アミノカルボキサミドの生物工学的製造方法 | |
| Yoshida et al. | Isolation and identification of a pyrogallol producing bacterium from soil | |
| CZ84497A3 (en) | Process for preparing racemic alpha-substituted 4-methylthiobutyric acids | |
| IE57594B1 (en) | 2,5-diketo-d-gluconic acid reductase | |
| EP0848065B1 (en) | Method for improving optical purity of an amine compound | |
| US4006057A (en) | Method of producing L-cysteine and L-cystine | |
| CS252994B1 (sk) | Kmen mikroorganizmu Trigonopsis variabilis CCY 15-1-2 | |
| EP0309310B1 (fr) | Nouveau système enzymatique, son procédé de préparation et son application notamment dans la préparation de la D-parahydroxyphénylglycine | |
| US3980520A (en) | Process for the production of l-malic acid by microbiological fermentation and means suitable for carrying out the same | |
| JPS58201985A (ja) | グルコ−ス脱水素酵素の生産方法 | |
| US4496655A (en) | Process for the production of tyramine oxidase | |
| CH679401A5 (sk) | ||
| FR2702493A1 (fr) | Procédé pour convertir de la Céphalosporine C en acide glutaryl-7-aminocéphalosporanique. | |
| JP3156832B2 (ja) | アンモニア測定用試薬組成物 | |
| US20010036660A1 (en) | Method of producing optically active N-methylamino acids | |
| JPH0659227B2 (ja) | Ｄ−α−アミノ酸の製造方法 | |
| JPH0716428B2 (ja) | Ｌ−アミノ酸の製造法 |