CS253971B1 - Production method of high active biological effective compounds immobilized on carrier - Google Patents
Production method of high active biological effective compounds immobilized on carrier Download PDFInfo
- Publication number
- CS253971B1 CS253971B1 CS849621A CS962184A CS253971B1 CS 253971 B1 CS253971 B1 CS 253971B1 CS 849621 A CS849621 A CS 849621A CS 962184 A CS962184 A CS 962184A CS 253971 B1 CS253971 B1 CS 253971B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- carrier
- biologically active
- compounds
- active compounds
- alkylene
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 33
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 9
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims abstract 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 14
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 12
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 8
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical class N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 6
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 6
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 5
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical class [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 claims description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 4
- -1 hydroxyalkyl methacrylates Chemical class 0.000 claims description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000005373 porous glass Substances 0.000 claims description 3
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 claims description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 claims description 2
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 claims 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims 1
- ZRIUUUJAJJNDSS-UHFFFAOYSA-N ammonium phosphates Chemical class [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]P([O-])([O-])=O ZRIUUUJAJJNDSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 claims 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims 1
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 claims 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 claims 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical class [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- 238000007039 two-step reaction Methods 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 abstract description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 abstract description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 abstract 1
- 238000011281 clinical therapy Methods 0.000 abstract 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 abstract 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 abstract 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 8
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 5
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 238000001994 activation Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol dimethacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCOC(=O)C(C)=C STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N hexane-1,6-diamine Chemical compound NCCCCCCN NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N monobenzene Natural products C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002924 oxiranes Chemical class 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- YBQZXXMEJHZYMB-UHFFFAOYSA-N 1,2-diphenylhydrazine Chemical compound C=1C=CC=CC=1NNC1=CC=CC=C1 YBQZXXMEJHZYMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N Hydroxyethyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCO WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 101100439251 Petunia hybrida CHI2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 238000012305 analytical separation technique Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000388 diammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019838 diammonium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- VOZRXNHHFUQHIL-UHFFFAOYSA-N glycidyl methacrylate Chemical group CC(=C)C(=O)OCC1CO1 VOZRXNHHFUQHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 238000004801 process automation Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M sodium bisulfate Chemical compound [Na+].OS([O-])(=O)=O WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000342 sodium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- MHQHHBYRYFICDV-UHFFFAOYSA-M sodium;pyrimidin-3-ide-2,4,6-trione Chemical compound [Na+].O=C1CC(=O)[N-]C(=O)N1 MHQHHBYRYFICDV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000383 tetramethylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 108010031354 thermitase Proteins 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6427—Chymotrypsins (3.4.21.1; 3.4.21.2); Trypsin (3.4.21.4)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
- C12N11/087—Acrylic polymers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/14—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
- Y10S530/811—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an inorganic carrier
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
- Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- General Factory Administration (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Description
Vyiález se týká universálního způsobu výroby vysoce aktivních biologicky účinných sloučenin imooilisací kovalentní vazbou na mkroporewních polymertních nosičích v přítomnoosi vyšších koncentrací anorganických solí.
Výzkum a vyižití imobilisovaných biologicky účinných sloučenin představuje·v . dnešní době rozsáhlý obor vývojových i aplikačních projektů se značným prakticýýrn využitím.
Příprava a aplikace nerozpustných enzymů vazbou rozpustného enzymu na nosič dovoluje opakované použití katalytického systému ve vsádkovém nebo průtokovém uspořádání reakce,při níž má nerozpustný enzym funkci specifického heterogenního katalysát oiu..Toto uspořádání katalytické enzymatické reakce usnadňuje následné oddělení enzymu od substrátu a reakčních produktů a při násobném nebo kontinuálním provedení snižuje náklady a usnadňuje automatisaci procesu.
Při interakcích substrátu s kovalentně iaobiliovvanýa enzymem je rychlost enzym^^y katalysované reakce závislá nejen na typu a aktivitě enzymu ale i na charakteru vazby enzymu na nosič/na fysikálně chemických vlastnostech nosiče (velikost a distribuce pórů,hydroCilocst povrchu αtd.)Hydrodynlaaiiké parametry soustavy,rychlost průtoku subitrátu,těplcta atd. rovněž významně ovlivňují konečný výtěžek reakce.Podrobné poznatky o faktorech ovlivňujících ěozymaticCy katalysované reakce s využitím iaoЪilisovaolých enzymů byly získány i při studiu procesů v preparatiOzám měřítku (pei^i^(^:i^:Li^a^cyl^^sa) (I.CHIB.ATA,IImaЪilizěd Enzymes, J.Wiley and Sons.New York, 1970).
Velmi rozsáhlé použití nacházeei imooblisované biologicky aktivní látky v afinitní ihromatoggafii.Tato metoda využívá schopnc^si celé řady biologicky účinných sloučenin vytvářet sorpční kommlexy s ji^ný^mi sloučeninaai,př‘iěeaž charakter interakce· je velmi specifický a rěveгsibiloí.Jě -li jedna ze složek soípčního komplexu vázána na pevný nosič^ak za vhodných podmínek dochází z roztoku k selektivní sorpci pouze těch sloučěnin,Ctěré se vyznač^í specifickou afinitou k vázané látce.Pomocí nosiče lze sorpční kommlex snadno oddeěit od ostatních komponent v roztolm.Změnou podmínek (pH.iontová síla, teplota,přídavek komaPtiiivoích sorbátů a pod. ^čoclnáax
253 971 k disociaci sorpčního komplexu a k oddělení rozpustné komponenty od složky,která zůstává chemicky vázána na nosiči. Tento postup nachází uplatnění při isolaci a čištění enzymů, inhibitorů enszym,protilátek, antigenů,rozpustných bílkovin atd.Imobilisace bioaktivních sloučenin se s výhodou využívá v biochemické analyse při aplikaci radioaktivně značených sloučenin nebo při optickém značkování.
Jako nosiče biologicky účinných sloučenin se používá celé řady mattriálújjako na příklad poresního skLa,silikagelu, aktivního uhlí,celulosy a jejích derivátů,škroiu,tgtIOsy, sírovaných polydextranůsyitetických polymerů a kopolymerů (akrylamid, styren, polyamii,pol;yiiallernnnhddid,pplyakryláty, polymethh.akry.áty atd.).Některé typy jsou nevýhodné,protože nesou donogenní funkční skuppny,jiné se vyznačují silnými nespecifickými sorpčními vlastnostmi pro bílkoviny^i-né pak mají nedostatečnou aetChnidCil,hhdnoOyУickou,aikroЪiální nebo temickou stabilitu či nevhodnou distribuci velikosti pórů.Tím se značně zužuje okruh jejich použití.Homogenní hydro filní nosiče poly9tcharidovéhl typu většinou nesmějí vyschnout, což ztěžuje jejich skladování a dopravu.
Věěšinu uvedených nedostatků nemma! nosiče připravené klpolynatisací 2-hydrlxyalkylaethaakydátů s'alkylendiatthakryláty^teié jsou pio daeliiistční reakci aktivovány subbtitucí na hydroxylové skupině (J.OOUPEK,J.TUOOVVÁ,O.HUB.BOKOVB a M.KKIVVK0VÁ,(Á.A.0.č. 167530).
Další podrobné studie mechanismů daoOilistce biologicky účinných sloučenin ukázaly,že kovaa-eiitní vazba musí .být hydrolyticky co nej stabilnější,což nemůže zaručit na příklad aktivace brlmakynemmmtaonl, sutUlddckk,esttrlvá a další vazebné skupiny^a^ ntjvýhodnější se ukazuje iaaOiiistce vyιžžvatící reaktivních epoxidových skupin podle následujícího schématu:
—CHO- C — CHO + HON - Prot,—— CHO-C—-CHO—NH--Prot.
2\/22 2 i 2 . ,c _ . 0 OH kdffe Pnt-biag-í bílkovinný zbytek.
Pokusy s daoOiiittcí na ^polymeru gldcindlaethakrylátu s tthylenddaethakrylátea (J.OUJ0OVB,K.bUHA,M.PABANÍ0OVÁ,
253 971
- .>
D.VAJCNEROVÁ,F.SVEC and. J.K^:L^LJ3b3ch^en^^BBophys.J^cta,5424 (1978)162) ukázaly.že reaktivní glycidyl rneethkrylátcvé skupiny uzavřené v hustě zesilované matrici kcpclymeru nelze plně využít prc imoCiiisaci a jejich následná desaktivace je cbtížná.Pictc iyl s výhodou užit jakc ncsič mmkroppresní kcpolymer 2-hydrcxyethylmmehyykylátu s ethylendimethakiyláeem aktivcivaný epichlcichydrinem,který cisahuje epcx;y?rcpylcvé funkční skupiny pcee na vnitřním pcvrchu pórů (J.TUKTOVÁ, KbBLÁHA,J.OOIÁČ!EK,JvAAJCNER,A.FF.TPRYCHOVÁ and J.COTPEK.Jb Chucnatocr., 215(1981 )l65-179i?a na pcvrchu částic.
Při přímé vaziě iílkcviny na epcxy^rcpylcvý derivát hydrcxyethylmmehhkiryl-átcvéhc kcpclymeru je však v některých případech výtěžek imociliscvané aktivity příliš nízký.Tentc nedocsatek^který se vyskytuje i u řady jiných známých aktivací syntetických pclymeraích eosičů,cdstIaňujz předmět tchctc vynálezu.
Jehc pcdstatcu je způscb výrciy vyscce aktivních imoiiiiscvaných iiclcgicky aktivních slcučenin prc chemickcu přeměnu látek enzymmaickcu katalyscu a prc preparativní a analytické separační techniky pcmocí vyscce stabilní kovalentní vazby iiclcgicky účinných slcučenin na mmkrocpresní pclymerní ncsič, charakterisováný tím,že se iiclcgicky účinné slcučeniny váží na aktivcvaný ncsič v přítomnocti ancrganických socí,přidaných v koncentraci 0,5 až 3,0 mocllitB,Udaná koncentrace ancrganických sclí při vazeiné reakci vyvolává cmezení nehc eliminaci sclvatační cbálky iílkc>vinných mocekul.V prvním stupni pak dochází k hydrcfciní adscrpci iiclcgicky účinných slcučenin na ncsič a ve druhém stupni pak účinné slcučeniny reagují s funkčními skupinami nosiče za vzniku kovaleniní vazhy.
Mkn^cpc^e^í^ixí pclymerní nosiče jscu vyirány ze skupiny syntetických kcpclymerů hydгcxyalkylmeZhakrylátů (alkyl C£až C^) s alkyl end.imethakryláZem (alkylen C^až C^jkcpclymerů styrenu s divinylbenzenem neic s alkylendimzthaIryláeem (alkylen (jaž C4), kcpclymerů glycidylmethakrylátu s ethylendimethakrylátem, pcresníhc skla neic silikkgzlu.
- 4 253 971
Polyoeemí nosič pe před imobilisačni reakcí muaí akti- * vovat.Reaktivní funkční skupiny jsou vybrány ze skupiny epoxidů, aldehydů,prlmárních nebo sekundárních aminů,karboxylu a thiolů.S výhodou má mmkkoooresní polymermí nosič rigidní strukturu a sférický tvar. Pro ověření účinku vynálezu byly vybrány sloučeniny ze skupiny enzym, iiúiibitorů enzynm,případně imunoaativiních bílkovin.
Soli,jejioiž příoomnost při vazbě bioaktivníci sloučenin podstatně zvyšuje výtěžek navázané bílkoviny i výtěžek aktivity, jsou vybrány ze skupiny síranů a fosforečnanů amonných, a sodných.Teplota reakce je určena reaktivitou funkčních skupin nosiče i bioaktivní sloučeniny určené k imoHiisaci a leží v oboru -5° až 30°C.Reakce probíhá při pH 3-10 po dobu 0,5 až 40 hodin.
Způsob imoHlisace biologicky účinných sloučenin v přítomno oti vyšších k(lncenOгací anorganických solí podle vynálezu má velmi universální charakter a jeho οθ^^οΙ^^ byl podrobně studován a . ověřen na řadě vzájemně se.lišících biologicky účinných sloučenin.V dalším je předmět vynálezu vysvětlen a doložen na řadě příkladů,které však jeho rozsah nijak neomeeují.
Příklad 1.
mg enzymu aoinoacylasy (3·5·1·14·) bylo rozpuštěno v 5 ml 0,2M roztoku fosfátového tlumiče pH 7.Po úplném rozpuštění bílkoviny byl přidán síran amonný tak,aby konečná koncentrace soli činila 1,75 irno/l rautlku.Plté bylo přidáno 100 mg kopo^me^ 2-hydroxyethylmethakiry.átu s ethylendimethakrylátem (SEPARON 1000 E,vylučovací limit 2.106daltlO o velikosti částic 40-80/Um s kapacitou povrchově vázaných epoxidových skupin 1,77 mmol/gg.Pro urychlení penetrace roztoku do mkTOppresní struktury nosiče byla suspense udržována po 5 minut ve vakuu . vodní pumpy (15 mm Hg slljOce).Iooaillsace acylasy probíhala po dobu 30 hodin za mírného třepání suspense při teplotě 4°C.Po skončené im^oii^isační reakci byl nosič promyt tluoivýo roztokem (fosfát pH 7) a 1 M roztokem NaCl.
- 5 253 971
Následně byl stanoven obsah vázané bílkoviny a její enzymtická aktivita.Výtěžek vázané předložené bílkovině a 20% aktivity činil 10% vzhledem k vzhledem k vázané bílkovině.
Příklad 2.
analogicky jako v příkladu 1 s tím
Reakce byla provedena rozdílem,že probíhala v přítomnooti optimálního mnnossví monohydrogenfosfátu amonného (1,5 moO/1).Výtěžky aktivity byly stejné jako v příkladu 1.
Příklad 3.
mg enzymu th^ermitasy (3.4,21.14) bylo rozpuštěno v ml 0,2 M fosfátového tlumiče pH 8,0,Byl přidán roztok síranu amonného tak,že celková koncentrace soli činila 2,0moo/l, Stejně jako v příkladu 1 bylo přidáno 100 mg nosiče obsahujícího epoxiskupiny na kopolymeru 2-hydroxyethylmeehakir/látu s ethylendimethakrylátem (1,77 mnoo/g) a suspense byla po dobu 5 minut evakuována na vodní pum^^.R^^kce trvala v tomto případě 40 hodin při teplotě 20°C za mírného aktivity čin.l 10%.
třepání.Výtěžek
Příklad 4· v příkladu 3 s tím soli (síranu sodného) byla pro-vedena analogicky jako optimální koncentrace přidané mol/1.Reakční podmínky a výtěžek aktivity imob
Reakce rozdíl em,že činila 1,25 lioo varného enzymu byly shodné jako u příkladu 3.
Příklad 5.
mg enzymu peniciliiacylasy (3·5·1·11) v 5 ml fosfátlumiče (0,2M,pH 8) bylo přidáno 100 mg aktivovaného o velikosti částic 100 - 200^um a pak po částech naroztok síranu amonného tak,že konečná koncentrace soli 2,5 moo/1.Reakce'trvala 40 hodin při 4°C za mírného
K tového nosiče sycený činila třepání. Zpracování reakční směsi bylo provedeno stejně jako v příkladu 1„Výtěžek aktivity činil 45%·
- 6 Příklad. 6. 253 971
Κ 5 mg enzymu elastasy (3.4.21.36.) v 5ml 0,2 M fosfátového tlumiče pH 8,0 bylo přidáno 100 mg kopolymeiu 2-hydroxy?ropyl mmehakrylátu sírovaného butylendimethakrylátmm (vyltoovací l.imto 8. lO^ddLtonjVeliítos^t částic 80-10°/Um) aktivovaného epoxiskupinami (kapacCta 1,25 mml/g).Byl přidán roztok hydrogensÍránu sodného na konečnou koncentraci 1,5 molll.Při 4°C trvala reakce za mírného třepání 20 hodin. Výtěžek aktivity 17%.
Příklad 7.
mg cystathion-^-syithetasy (4.2.1.22.) bylo rozpuštěno v 5 ml 0,2 M TRIS HC1 pufru pH 8,7,přidáno 100 mg nosiče stejného složení jako v příkladu 1 a roztok síranu amonntho,jehož optimální koncentrace činí 2,5 mo1/1.Reakce trvala 40 hodin při teplotě-4°C.Zpracování reakční směsi bylo provedeno dle příkladu ^Výtěžek aktivity činil 35%.
Příklad 8. .
K 1 mg karboxyoeptidasy A (3.4.17.1.) rozpuštěné v 5 ml
0,2 M fosfátového tlumiče bylo přidáno 100 mg nosiče připraveného kopolyneeisaci glycidylmetbakrylátu s ethylendimethakrylátm 1:2 (vylučovací limit 110°ddlton,velikost částic 100200/um).Vazebná reakce probíhala v přá^-^om^<^£^i^:i 2,0 mml/1 síranu amonného při 4°C po dobu 20 hodin.Po zpracování produktu dle příkladu 1 byl stanoven výtěžek aktivity na předloženou bítkovitu,ktpiý činil 11,5 %·
Příklad 9.
mg lnti-clthptsit D-IgG bylo rozpuštěno v 5 ml 0,2 M fosfátového tlumiče JH 8,0 a bylo vázáno na 100 mg nosiče stejného jako v příkladu 1 v přítomiosti 1,5 mml/1 síranu amonného po dobu 2< hodin při 25°C za mírného třepání.Po skončení reakce byl nosič s vázanou bílkovinou odsát,promyt výchozím tlumičem,tlpltěn do kolony a testován pro aplikaci v afinitní chromettggilii d^epsi-nu D-IgG.
- 7 Příklad 10.
253 971
250 mg nosiče podle příkladu 1 bylo při 50°C ponecháno reagovat s 1 g hexamehylendiaminu v 5 ml vody při mírném promíchávání po dobu 3 hodin.Reakční směs byla promyta vodou. Vlhký nosič po promyyí byl rozmíchán ve 2 ml 5% vodného roztoku glutaiaildehydu,třepán 20 hodin,promyt vodou na negativní reakci s difenylhydrazínem.Vlhký aktivovaný nosič byl smíchán s roztokem trypsin-inhibitoiu isolovaného z brambor (1 mgrnll.bylly přidány 2 ml 1,25M NagSO^ a po 5 hodinách mírného třepání při 25°C byla reakční směs odssáta a nosič byl promyt vodou.Tllbilisová'iý inhibitor byl použit pro afinitní chromát grafii trypsinu.
Příklad 11.
mg chyB^Ty^i^ (3*4í21«1*) bylo rozpuštěno v 5 ml 0,2 M fosfátového pufru pH 8 a ke siisí bylo přidáno 100 mg nosiče na basi epox;y?ropylového derivátu silikagelu (vylučovací temte 5· 10k Mal;on tkapacita 0,5 mml/.g).Po ^ídav^ síranu amonného (2,5 moo/1) byla vazebná reakce provedena po dobu 20 hodin při teplotě 30°C.Po promytí podle příkladu 1 byl stanoven výtěžek aktivity vázaného činil 8,5%. '
Příklad 12.
Pokus byl proveden analogicky jako v příkladu 11 s tím rozdílem,že jako nosiče bylo . použito poresního skla se středním průměrem pórů 500 Ž . Nosič byl aktivován reakcí s triethoxyepooάy)ropylsílanel.Výtěžek aktivity vázaného chynmorypsinu činil 9,7%.
Příklad 13.
mg trypsinu (3.4.21.4«) bylo rozpuštěno v 5 ml 0,2 M fosfátového tlumiče pH 8 a přidáno 100 mg nosiče dle příkladu PPři konieniraci síranu amonného 2,5 moo/1 trvala reakce po dobu 20 hodin při pokojové teplotě.
Příklad 14»
253 971 mg pepsinu (3·4·23·1·) ' v 5 ml O1 M acetátového tlimíče pH 4,0 bylo smícháno analogicky jako v příkladu 1 se 100 mg nosiče. Při optimální koncentraci síaanu amonného 1,25 mol/1 probíhala reakce 24 ho (din při teplotě 25OC.Pl promytí podLe příkladu 1 byl nalezen výtěžek imooiiisace aktivity 15%.
Příklad 15.
K 10 mg insulinu v 5 ml 0,05 M fosfátového tlimiče pH 8 bylo přidáno 100 mg epoxy-aktivovaného nosiče podle příkladu 1. Vazebná reakce probíhala v přítomnosti monthhУrolentosfátu sodného 1,75 md/l při 25°C po dobu 50 hodin.Vázaný insulin byl použit pro afinithí chrsmaáosrrafi protilátek proti insulinu z attiinsultlovéhs sera v 0,1 M barbiturátu sodném pH 8,8 s obsahem 3% albuminu.Desorpce protilátek byla provedena roztokem 3 M HCI·
Claims (7)
1.Způsob výroby vysoce aktivních imobilisovaných biologicky účinných sloučenin pro chemickou přeměnu, lát ek,nnz patičkou katalysu a pro amlytické a prepar^t^vní separační techniky hydrolyticky stabilní ko^vilentní vazbou b&ogicky účinných sloučenin na makroopresní polymerní nosiče, vyznačený tím,že se biologicky účinné sloučeniny váží na aktivovaný makroopresní polymerní nosič v přítomnooti roztoků anorganických solí přidaných v koncennracích 0,5-3 moo/1,přičmž udaná koncentrace anorganické soli příoomné při vazebné reakci vyvolává dvoustupňovou reakci, v jejímž prvním stupni doelhází k hydrofobní adsorpci biologicky účinné sloučeniny na nosič a ve druhém stupni pak biologicky účinná látka reaguje s nosičem za vzniku kovalentni vazby,
2. Způsob podle bodu 1} vyznačený tím,že mmaroppresní polymerní nosiče jsou vybrány ze skupiny kopolymerú hydroxyalkylmethakrylátů (alkyl C^až ) s alkylendimethakryláeem (alkylen ^^až C^^kopolymerů styrenu s divinylbenzenem nebo s alkylendimethakrylátem (alkylen C^až C^^kopolymerů gLycidylmeehakr^látu s alkyl^endim^e^l^í^l^i^r^y^i^^ty (alkylen C^iaž C^), poresního skla nebo silikagtlu.
3. Způsob podle bodů 1 a 2^ vyznačený tím,že m.aroppresní polym mírní nosiče obsahují funkční skupiny vybrané ze skupiny epoxidů,aldehydů,primárních nebo sekundárních aminú,karboiylu nebo thiolů.
4. Způsob podle bodů 1až3,vyznačený tm m,že makroporesní polymerní nosiče mj. rigidní strukturu a sférickou fornu.
5. Způsob podle bodu 1 vyznačený tím,že kovalentně vázané biologicky účinné sloučeniny jsou vybrány ze skupiny enzymů, inhibitoru enzymů a imunoaktivních bílkovin. 2g3 971
6. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že soli jsou vybrány ze skupiny natřiumfosfátů, amoniumfosfátů,natrium~ sulfátů a amoniumsulfátů.
7. Způsob podle bodu 1 vyznačený tím,že vazebná reakce probíhá v teplotním oboru -5 až 30°C,v oboru pH 3 až 10 a po dobu 0,5 až 50 hodin.
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS849621A CS253971B1 (en) | 1984-12-11 | 1984-12-11 | Production method of high active biological effective compounds immobilized on carrier |
| DK544085A DK544085A (da) | 1984-12-11 | 1985-11-25 | Fremgangsmaade til fremstilling af paa en baerer immobiliserede, hoejaktive, biologisk virksomme forbindelser |
| AT85308832T ATE61404T1 (de) | 1984-12-11 | 1985-12-04 | Verfahren zur herstellung von auf einem traeger immobilisierten hochaktiven biologischen verbindungen. |
| EP85308832A EP0186347B1 (en) | 1984-12-11 | 1985-12-04 | Method for producing high-active biologically efficient compounds immobilized on a carrier |
| DE8585308832T DE3582032D1 (de) | 1984-12-11 | 1985-12-04 | Verfahren zur herstellung von auf einem traeger immobilisierten hochaktiven biologischen verbindungen. |
| JP60275223A JPS61181376A (ja) | 1984-12-11 | 1985-12-09 | 固定化された生物学的活性化合物の製造方法 |
| US06/807,339 US4775714A (en) | 1984-12-11 | 1985-12-10 | Method for producing highly-active biologically active compounds immobilized on a carrier |
| AU51074/85A AU597568B2 (en) | 1984-12-11 | 1985-12-10 | Method for producing high-active biologically efficient compounds immobilized on a carrier |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS849621A CS253971B1 (en) | 1984-12-11 | 1984-12-11 | Production method of high active biological effective compounds immobilized on carrier |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS962184A1 CS962184A1 (en) | 1987-05-14 |
| CS253971B1 true CS253971B1 (en) | 1987-12-17 |
Family
ID=5445756
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS849621A CS253971B1 (en) | 1984-12-11 | 1984-12-11 | Production method of high active biological effective compounds immobilized on carrier |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4775714A (cs) |
| EP (1) | EP0186347B1 (cs) |
| JP (1) | JPS61181376A (cs) |
| AT (1) | ATE61404T1 (cs) |
| AU (1) | AU597568B2 (cs) |
| CS (1) | CS253971B1 (cs) |
| DE (1) | DE3582032D1 (cs) |
| DK (1) | DK544085A (cs) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE68928907T2 (de) * | 1988-10-17 | 1999-09-16 | Hemasure,Inc. | Verfahren zur kovalenten oberflächen-modifikation hydrophober polymere und erzeugnisse daraus |
| US5166319A (en) * | 1989-10-10 | 1992-11-24 | Brunswick Corporation | Interfacial condensation of bioactive compounds and the site-specific compounds and conjugates thereof |
| US5200471A (en) * | 1990-11-05 | 1993-04-06 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Biomolecules covalently immobilized with a high bound specific biological activity and method of preparing same |
| DE4238389A1 (de) * | 1992-11-13 | 1994-05-19 | Bayer Ag | Verfahren zur Durchführung immundiagnostischer Nachweise |
| WO1994022918A1 (en) * | 1993-03-29 | 1994-10-13 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Method of coupling ligands within porous supports (p.e. azlactone) and uses thereof |
| CN115646466A (zh) * | 2022-11-11 | 2023-01-31 | 南通裕弘分析仪器有限公司 | 核壳结构的有机无机杂化颗粒的制备方法 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CS179184B1 (en) * | 1975-07-25 | 1977-10-31 | Stanislav Vozka | Method for preparation of precisely spherical particles of silica gel with controlled size and controled size pores. |
| US4440903A (en) * | 1978-06-30 | 1984-04-03 | Ramot University Authority For Applied Research And Industrial Development Ltd. | Dihaloisocyanide derivatives of polymers for coupling nucleophiles |
| CS216992B1 (en) * | 1980-07-21 | 1982-12-31 | Miroslav Stol | Composite polymere material for the biological and medicinal utilitation and method of preparation thereof |
| DE3106456A1 (de) * | 1981-02-21 | 1982-10-07 | Röhm GmbH, 6100 Darmstadt | Verfahren zur herstellung von perlfoermigen, hydrophilen, gegenueber proteinen bindungsaktiven traegerpolymeren |
| DE3112336A1 (de) * | 1981-03-28 | 1982-10-07 | Röhm GmbH, 6100 Darmstadt | "verfahren zur spaltung von milchzucker" |
| US4451568A (en) * | 1981-07-13 | 1984-05-29 | Battelle Memorial Institute | Composition for binding bioactive substances |
| DE3243591A1 (de) * | 1982-11-25 | 1984-05-30 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Vinylencarbonat-polymerysate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre anwendung |
-
1984
- 1984-12-11 CS CS849621A patent/CS253971B1/cs unknown
-
1985
- 1985-11-25 DK DK544085A patent/DK544085A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-12-04 AT AT85308832T patent/ATE61404T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-12-04 EP EP85308832A patent/EP0186347B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-12-04 DE DE8585308832T patent/DE3582032D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1985-12-09 JP JP60275223A patent/JPS61181376A/ja active Pending
- 1985-12-10 AU AU51074/85A patent/AU597568B2/en not_active Ceased
- 1985-12-10 US US06/807,339 patent/US4775714A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU5107485A (en) | 1986-06-19 |
| CS962184A1 (en) | 1987-05-14 |
| EP0186347A3 (en) | 1987-08-19 |
| ATE61404T1 (de) | 1991-03-15 |
| EP0186347B1 (en) | 1991-03-06 |
| JPS61181376A (ja) | 1986-08-14 |
| US4775714A (en) | 1988-10-04 |
| AU597568B2 (en) | 1990-06-07 |
| DK544085A (da) | 1986-06-12 |
| DK544085D0 (da) | 1985-11-25 |
| EP0186347A2 (en) | 1986-07-02 |
| DE3582032D1 (de) | 1991-04-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5092992A (en) | Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography | |
| EP0012751B1 (en) | Preparation of trichloro-s-triazine activated supports | |
| CA1334042C (en) | Process for the preparation of a material for affinity chromatography | |
| US4352884A (en) | Carrier having acrylate copolymer coating for immobilization of bioactive materials | |
| US4332694A (en) | Three-dimensional carrier of inorganic porous material-reactive polymer and a method for its preparation | |
| US5085779A (en) | Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography | |
| JP2528486B2 (ja) | アフィニティ―クロマトグラフィ―・マトリックスの製造方法 | |
| AU2007278481A1 (en) | Solid support | |
| JPH0144725B2 (cs) | ||
| JPH06509509A (ja) | 活性化支持体材料、それらの調製および使用 | |
| CS253971B1 (en) | Production method of high active biological effective compounds immobilized on carrier | |
| EP0153763B1 (en) | Affinity chromatography matrix with built-in reaction indicator | |
| EP0403700B1 (en) | Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography | |
| JP2010014716A (ja) | 電気的中性の親水性外側表面を有する化学的に変性された多孔質材料 | |
| JPS61191700A (ja) | エポキシ−ポリアルキレンイミン共重合体による生体物質の固定 | |
| CA1239357A (en) | Method of activating polymeric carrier | |
| JPS6155415B2 (cs) | ||
| GB2230010A (en) | Purifying proteins by adsorption thereof on a carrier | |
| RU2029564C1 (ru) | Адсорбент для извлечения атерогенных липопротеинов из биологических жидкостей | |
| Ayhan et al. | Protein A immobilized poly (methylmethacrylate-co-hydroxyethylmethacrylate) microbeads for IgG adsorption | |
| Ghadge | Synthetic polymer based affinity matrices: separation of penicillin g acylase and penicillinase | |
| DK171394B1 (da) | Understøtning eller bærer i fast fase, immobiliseret enzym i fast fase på en sådan understøtning, ligandbundet chromatografiaffinitetsmatrix samt fremgangsmåde til adskillelse eller rensning af et stof fra opløsning under anvendelse af understøtningen | |
| CA1298578C (en) | Polymeric matrix for affinity chromatography and immobilizaton of ligands | |
| JPH0126709B2 (cs) | ||
| JPH0359080B2 (cs) |