CS256710B1 - Method of albumin extraction from cohne fraction 4 - Google Patents

Method of albumin extraction from cohne fraction 4 Download PDF

Info

Publication number
CS256710B1
CS256710B1 CS855203A CS520385A CS256710B1 CS 256710 B1 CS256710 B1 CS 256710B1 CS 855203 A CS855203 A CS 855203A CS 520385 A CS520385 A CS 520385A CS 256710 B1 CS256710 B1 CS 256710B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
albumin
fraction
cohne
cohn fraction
solution
Prior art date
Application number
CS855203A
Other languages
Czech (cs)
Slovak (sk)
Other versions
CS520385A1 (en
Inventor
Jozef Bulik
Original Assignee
Jozef Bulik
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jozef Bulik filed Critical Jozef Bulik
Priority to CS855203A priority Critical patent/CS256710B1/en
Publication of CS520385A1 publication Critical patent/CS520385A1/en
Publication of CS256710B1 publication Critical patent/CS256710B1/en

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Vynález sa týká sposobu získavania albuminu z Cohnovej frakcie IV, vznikajúcej pri etanolovej frakcionácii ludskej plazmy, a to tým spůsobom, že plazmatické bielkoviny doprevádzajúce albumin sa oddelujú pri vhodnom pH, teplote a koncentráci etanolu vo formě precipitátu a albumin ostává v roztoku.The invention relates to a process for recovering albumin from Cohn Fraction IV resulting from ethanol fractionation of human plasma, in that the plasma proteins accompanying albumin are separated at a suitable pH, temperature and ethanol concentration in the form of a precipitate and the albumin remains in solution.

Jedna z možnosti zvýšenia výťažnosti albuminu pri frakcionácii ludskej plazmy je cesta zavádzania nových progresívnych technologických postupov, V poeledných rokoch na dosiahnutie maximálnej výtažnosti albuminu je evidentný trend, zavádzania technologických stupňov a operách znižuje, čím aj straty na bielkovine albuminu sú nižšie. Medzi takéto frakcionačné postupy možno zaradiť aj tepelno-denaturačné metódy izolácie albuminu (Hoch H., Chanutin A.: Arch. of biochem. and biophysic, 51, 27, 1954; Lundblad J. I.: Vox sang., 5, 122, 1960; Gabr Y., Soliman H. R.: Acta biol. et med. ger., 27, 341, 1971; Schneider W., Lefevre H., Friedler H., Mc Carty L. I.: Blut, 30, 121, rok 1975; Wye E. Y. and Kim Μ. K.: Vof Sang., 32,182 — 184,1977).One possibility of increasing albumin recovery in human plasma fractionation is the way to introduce new progressive technological processes. In recent years to achieve maximum albumin recovery, there is an evident trend, the introduction of technological steps and operations decreases, and even losses in albumin protein are lower. Such fractionation techniques include thermal denaturation methods for albumin isolation (Hoch H., Chanutin A .: Arch. Of Biochem. And Biophysic, 51, 27, 1954; Lundblad JI: Vox sang., 5, 122, 1960; Gabr). Y., Soliman HR: Acta Biol et Med., 27, 341, 1971, Schneider W., Lefevre H., Friedler H., Mc Carty LI: Blut, 30, 121, 1975; Wye EY and Kim K K .: Vof Sang., 32, 182-184, 1977).

Negatívom citovaných technologických postupov je skutočnosť, že tieto pracujú pri vysokých teplotách (+70°Cj, při ktorých napriek stabilizácii může albumin za určitých podmienok vykazovat nežiadúce inreverzibilné změny.A disadvantage of the cited technological processes is that they operate at high temperatures (+ 70 ° Cj), at which, despite stabilization, albumin may exhibit undesirable inversible changes under certain conditions.

Na základe uvedeného boli vyvíjané snahy čiastočné znížiť denaturačné teploty a tým predchádzať eventuálnej deštrukcii izolovaného albuminu (Libich M.: PV 74-57-79, Foukal Z.: PV 05-36-81, Bulík J.: AO 206 294).Accordingly, efforts have been made to partially reduce denaturation temperatures and thereby prevent eventual destruction of isolated albumin (Libich M .: PV 74-57-79, Foukal Z .: PV 05-36-81, Bulík J .: AO 206 294).

Napriek týmto pozitívam vo váčšine prípadov používané denaturačné teploty sú stále hraničně, pričom technologické postupy sú poměrně členité, pozostávajúce z viacerých technologických stupňov.Despite these positives, in most cases the denaturation temperatures used are still marginal, and the technological processes are quite rugged, consisting of several technological stages.

Novost navrhovaného technologického postupu získavania albuminu z Cohnovej frakcie IV je, že tento vdaka vhodnej koncentrácii stabilizátorov, organického činidla a hodnoty pH dovoluje podstatné znížiť reakčnú teplotu a skrátiť technologický postup pri garancii nativity izolovanej bielkoviny.The novelty of the proposed process for recovering albumin from Cohn Fraction IV is that due to the appropriate concentration of stabilizers, organic reagent and pH, it allows to substantially reduce the reaction temperature and shorten the process of guaranteeing the nativeity of the isolated protein.

Podstata získavania albuminu z Cohnovej frakcie IV spočívá v tom, že 2- až 4 %-ný roztok Cohnovej frakcie IV sa stabilizujeThe essence of recovering albumin from Cohn Fraction IV is that the 2-4% Cohn Fraction IV solution is stabilized

0,03 M Na-kaprylánom a 0,01 M acetyl-DL-tryptofánom a pri pH 5,0 až 5,5, koncentrácii etanolu 5,0 až 9,0 objemových % a teplote +40 až 45 °C po dobu 0,5: až 12 hodin sa vyprecipitujú albumin doprevádzajúce plazmatické bielkoviny a albumin ostává v roztoku. Koncentrácia a purifikácia roztoku albuminu sa dalej prevádza známými technologickými operáciami.0.03 M Na-caprylan and 0.01 M acetyl-DL-tryptophan and at pH 5.0-5.5, ethanol concentration 5.0-9.0% v / v and temperature +40-45 ° C for 0 5: 12 to 12 hours, the albumin accompanying the plasma proteins precipitates and the albumin remains in solution. The concentration and purification of the albumin solution is further carried out by known technological operations.

Výhoda popisaného technologického postupu získavania albuminu z Cohnovej frakcie IV oproti doteraz používanému spočívá v tom, že technologický proces sa skracuje na jeden technologický stupeň. Uvedeným izolačným postupom je garantovaná aj kvalita, najmá však nativita získaného albuminu s evidentnou úsporou energií.The advantage of the disclosed process for recovering albumin from Cohn Fraction IV over the prior art is that the process is shortened to one process stage. This isolation procedure also guarantees quality, but in particular the nativity of the albumin obtained with evident energy savings.

Příklad 1Example 1

300 g Cohnovej frakcie IV sa suspenduje v 35 000 ml apyrogénnej vody. K takto připravenému roztoku sa přidá 154 g Na-kaprylátu a 86,1 g acetyl-DL-tryptofánu. Hodnota pH sa upraví na 5,1, koncentrácia etanolu na 7 objemových % a teplota na +40 stupňov Celzia. Precipitácia plazmatických bielkovín doprevádzajúcich albumin prebieha po dobu 10 hodin. Vyprecipitované plazmatické bielkoviny sa separujú centrifugáciou a supernatant obsahujúci albumin sa dalej purifikuje a koncentruje lyofilizáciou. Hmotnost lyof ilizovaného produktu je 1120 gramu elektroforetická čistota 96,1 %. Příklad 2300 g of Cohn Fraction IV are suspended in 35,000 ml of pyrogen-free water. To this solution was added 154 g of Na-caprylate and 86.1 g of acetyl-DL-tryptophan. The pH is adjusted to 5.1, the ethanol concentration to 7% by volume and the temperature to +40 degrees Celsius. The precipitation of albumin accompanying albumin takes place for 10 hours. The precipitated plasma proteins are separated by centrifugation and the albumin-containing supernatant is further purified and concentrated by lyophilization. The weight of the lyophilized product is 1120 grams electrophoretic purity 96.1%. Example 2

650 g Cohnovej frakcie IV sa supenduje v 17 500 ml apyrogénnej vody. K takto připravenému roztoku sa potom přidá 77,0 g Na-kaprylánu a 43,0 g acetyl-DL-tryptofánu. Hodnota pH sa upraví na 5,2, koncentrácia etanolu 9 objemových % a teplota na +45 stupňov Celzia. Precipitácia plazmatických bielkovín doprevádzajúcich albumin prebieha po dobu 12 hodin. Vyprecipitované plazmatické bielkoviny sa separujú centrifugáciou a supernatant obsahujúci albumin sa dalej purifikuje a koncentruje lyofilizáciou. Hmotnosť lyofilizovaného produktu je 490 g, elektroforetická čistota 96,2 %.650 g of Cohn Fraction IV are suspended in 17,500 ml of pyrogen-free water. 77.0 g of Na-caprylane and 43.0 g of acetyl-DL-tryptophan are then added to the solution. The pH is adjusted to 5.2, the ethanol concentration is 9% by volume and the temperature to +45 degrees Celsius. The precipitation of albumin accompanying albumin takes place for 12 hours. The precipitated plasma proteins are separated by centrifugation and the albumin-containing supernatant is further purified and concentrated by lyophilization. The weight of the lyophilized product is 490 g, electrophoretic purity 96.2%.

Hodnotenie kvality přípravkuEvaluation of product quality

Požadované skúšky Kritéria Výsledky kontrolyRequired tests Criteria Results of inspection

PNY 31-07-79 přípravkuPNY 31-07-79 preparation

elektroforetická čistota electrophoretic purity 96,0 96.0 96,1 96.1 aktuálna acidita actual acidity 6,2 — 7,4 6.2 - 7.4 6,70 6.70 tepelná stabilita thermal stability max. 80 n. j. max. 80 n. j. 17,5 n. j. 17,5 n. j. obsah bielkovín protein content 18,0 — 22,0 °/o 18.0 - 22.0 ° / o 20,06 % 20,06% obsah sodíka sodium content max. 348 mmol/1 max. 348 mmol / l 141,4 mmol/1 141.4 mmol / l přítomnost liehu the presence of alcohol neg. neg. neg. neg. obsah hemoglobinu hemoglobin content max. 0,25 max. 0.25 0,060 0,060 obsah citrátových iónov content of citrate ions max. 0,35 max. 0.35 0,05 0.05 skúška na pyrogénne látky pyrogenic test apyr. pyr. apyr. pyr. neškodnost harmlessness vyhovuje suits vyhovuje suits sterilita sterility sterilné sterile sterilné sterile

Dosahovaná výťažnosť albuminu sa pohybuje pódia jeho obsahu v Cohnovej frakciiThe albumin recovery achieved is based on its content in the Cohn fraction

IV v rozmedzí 100 až 160 g lyofilizovaného produktu na 1 000 g frakcie IV.IV in the range of 100 to 160 g of lyophilized product per 1000 g of Fraction IV.

Claims (1)

PREDMETSUBJECT Sposob získavania albuminu z Cohnovej frakcie IV vyznačujúci sa tým, že k 1 000 ml roztoku Cohnovej frakcie IV o koncentrácii 2 až 4 hmot. °/o bielkovín sa přidává 4,30 až 4,40 g Na-kaprylánu a 2,40 až 2,50 g acetyl-DL-tryptofánu, pri pH 5,0 až 5,5, koncentrácii etanolu 5,0 až 9,0 objemových % a teplote +40 až +45 °C sa plazmatlcké bielkoviny doprevádzajúce albumin precipitujú po dobu 0,5 až 12 hodin, potom separujú a albumin ostává v roztoku.Process for recovering albumin from Cohn Fraction IV, characterized in that to 1000 ml of a Cohn Fraction IV solution having a concentration of 2-4 wt. 4.30 to 4.40 g of Na-caprylane and 2.40 to 2.50 g of acetyl DL-tryptophan, at a pH of 5.0 to 5.5, an ethanol concentration of 5.0 to 9, are added to the protein. At 0% by volume and at a temperature of +40 to +45 ° C, the plasma proteins accompanying albumin precipitate for 0.5 to 12 hours, then separate and the albumin remains in solution.
CS855203A 1985-07-12 1985-07-12 Method of albumin extraction from cohne fraction 4 CS256710B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS855203A CS256710B1 (en) 1985-07-12 1985-07-12 Method of albumin extraction from cohne fraction 4

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS855203A CS256710B1 (en) 1985-07-12 1985-07-12 Method of albumin extraction from cohne fraction 4

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS520385A1 CS520385A1 (en) 1987-09-17
CS256710B1 true CS256710B1 (en) 1988-04-15

Family

ID=5396475

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS855203A CS256710B1 (en) 1985-07-12 1985-07-12 Method of albumin extraction from cohne fraction 4

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS256710B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
CS520385A1 (en) 1987-09-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4327086A (en) Process for heat treatment of aqueous solution containing human blood coagulation factor XIII
US4370264A (en) Method for the cold sterilization of preparations containing blood coagulation factor VIII
AU2015202413B2 (en) Method for the preparation of human albumin with reduced level of dissolved oxygen
EP0077870A2 (en) Process for heat treatment of aqueous solution containing human blood coagulation factor VIII
US4670544A (en) Process for the manufacture of the cold insoluble globulin and pharmaceutical preparation containing it
US4650858A (en) Concentrate of the antihemophilic factor VIII and a process for producing it
US4754019A (en) Method of producing substantially pure albumin using carboxylic acids and ammonium sulfate
DK167900B1 (en) MEDICINE FOR TREATMENT AND PREVENTION OF HAEMOSTATIC DISORDERS CONTAINING TEXTILE PROTEIN PP4
EP0108115A1 (en) Heat stabilization of plasma proteins
US4814435A (en) Method of producing a factor VIII (AHF) containing fraction
JP2605102B2 (en) Stabilization of biological and pharmaceutical products during thermal inactivation of viral and bacterial contaminants
CN114787185A (en) Cryopreservation method of blood coagulation factor VIII intermediate product
CS256710B1 (en) Method of albumin extraction from cohne fraction 4
JPS61189228A (en) Production of blood coagulation factor viii
JP3143507B2 (en) Method for preparing pasteurized iron-free human transferrin and its use
US3361732A (en) Method for concentration of blood protein solutions employing methanol and flash evaporation
US4197238A (en) Method of preparation of human albumin using polyethylene glycol
EP0449897B1 (en) A pure factor i protein and a process for producing said protein
US3627642A (en) Lysozyme salts
Michon Preparation of Orosomucoid (α1-Acid Seromucoid)
JPH0525862B2 (en)
DK175644B1 (en) Process for stabilizing biological and pharmaceutical agents during inactivation of viral and bacterial contaminants
JPS61501510A (en) Hemoglobin with reduced virus risk and its production method
PL93587B1 (en)
SU467536A1 (en) The method of obtaining serum albumin