CS267400B1 - Myší lymfocytámy hybridom RG-12 - Google Patents
Myší lymfocytámy hybridom RG-12 Download PDFInfo
- Publication number
- CS267400B1 CS267400B1 CS887047A CS704788A CS267400B1 CS 267400 B1 CS267400 B1 CS 267400B1 CS 887047 A CS887047 A CS 887047A CS 704788 A CS704788 A CS 704788A CS 267400 B1 CS267400 B1 CS 267400B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- monoclonal antibody
- malignant melanoma
- cells
- tumors
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Riešenie sa týká myšieho lymfocytárneho hybridomu, produkujúceho monoklonálnu protilátku proti nádorovému antigénu, združenému s buňkami 1’udského malígneho melanómu, ktorý je uložený v zbierke hybridómov Ústavu experimentálnej onkológie SAV v Bratislavě pod označením RG-12. Monoklonálna protilátka hybridómu RG-12 je vhodná na použitie pri diagnostike malígneho melanómu a monitoro- * vání priebehu tohto zhubného ochorenia stanovením hladin cirkulujúcich protinádorových ' protilátok metodou kompetitívného rádioimunotestu a pri diferenciálnej diagnostike melígnych melanómov, benígnych kožných nádorov a nádorov neuroektodermálneho póvodu metodou imunohistochemických vyšetření parafínových rezov tkaniv.
Description
Vynález sa týká nového buňkového hybridómu, zostrojeného buňkovou fúziou myšej myelóniovcj linie Sp2/0 a myšej slczinovej lymfoídnej buňky, produkujúcej protilátku proti membránovému antigénu buniek linie 1’udského malígncho melanómu IIMB 2.
Zavedením hybridómovcj technologic sa otvorila cesta k přípravě monoklonálnych protilátok, namierených proti antigénnym dcterminantom buniek nižších i vyšších organizmov včítane buniek nádorových. Protinádorové monoklonálne protilátky našli široké uplatnenie v imunohistochemickej, rádioimunologickej a lokalizačnej diagnostike primárných nádorov a ich metastáz a v kontrole progresie nádorové] choroby po terapii. Převážná váčšina dosial připravených protinádorových monoklonálnych protilátok je namierená proti antigénom transplantačného typu, antigénom cytoskeletu, diferenciačným antigénom a antigénom embryonálneho póvodu. V súčasnosti jestvuje vo svete iba niekoFko monoklonálnych protilátok reagujúcich s neoantigénrni združenými s nádormi rovnakej histogenezy.
V ostatných rokoch sa podařilo vyvinúť monoklonálne protilátky proti antigénom združeným s buňkami 1’udského kožného maiígneho melanómu [Ziai, M. R., Imberti, L., Nicotra, M. R., Badaracco, G., Segatto, O., Natali, P. G., Ferrone, S.: Analysis with monoclonal antibodies of the molecular and cellular heterogeneity of human high molecular weight melanoma associated antigen. Cancer Research 47, (1987), 2474; Hotta H., Ross, A. H., Huebner, K., Isobe, M., Wendeborn, S., Chao, Μ, V., Risciardi, R. P., Tsujimoto, Y., Croce, C. M., Koprowski, H.: Molecular cloning and characterization of an antigen associated with early stages of melanoma tumor progression. Cancer Research, 48, (1988), 2955]. Žiadna z nich však nie je prisne specifická pre buňky maiígneho melanómu. Dokázala sa ich súčasná reaktivita s tkanivami a nádormi neuroektodermálneho póvodu ako i s nádormi inej histogenezy [Steplewski, Z., Herlyn, D., Clark, W. H., Ross, A. H., Blaszcyk, M., Pak, K. Y., Koprowski, H.: Production and characterization of monoclonal antibodies against human malignant melanoma. Cancer Investigation, 1, (1983), 215; Hotta a spol., Cancer Research, 48, (1988), 2955). Váčšina dosiaF vyvinutých antimelanómových protilátok reaguje s antigénmi, ktoré sa denaturujú formolom (fixatívum, rutinně používané na fixáciu tkaniv pre histologické vyšetrenie) a preto nie sú vhodné pre imunohistochemické testy. Pre tieto testy je komerčně připravovaných niekoFko antimelanómových monoklonálnych protilátok s róznym stupňom Specificity firmou Dakopatts A. S. (Santa Barbara, California, USA;) firmou Hybritech Company (San Diego, California, USA) a i. V súčasnosti nie sú komerčně dostupné antimelanómové monoklonálne protilátky v súpravách pre rádioimunodiagnostické vyšetrenie cirkulujúcich antimelanómových protilátok v sérach pacientov s malignym melanómom.
Uvedené nedostatky do značnej miery od2 straňuje hybridóm, produkujúci monoklonálnu protilátku proti antigénu združenému s buňkami 1’udského maiígneho melanómu, ktorý je uložený v zbierke hybridómov Ústavu expcrimentálnej onkológie SAV v Bratislavě, ul. Čsl. armády 21, pod označením RG (2.
Hybridóm RG-12 bol získaný fúziou slezino vej buňky myši kmeňa Balb/c, umunizovanej buňkami linie ludského maiígneho melanómu HMB-2, s buňkou myšieho plazmocytómu Sp2/O sposobom, popísaným v odbornej literature [Kóhler, G., Milstein, C.: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity. Nature, 256, (1975), 495] a následným klonováním súboru hybridných buniek štandardnou technikou.
Získaný hybridóm produkuje monoklonálnu protilátku, ktorá sa Specificky viaže na nádorový antigén, přítomný v buňkách 1’udského malígneho melanómu a v buňkách nádorov epitelového póvodu (karcinomy) nie však v buňkách zdravých tkaniv.
Buňky hybridómu RG-12 možno pomnožovať v podmienkach in vitro v štandardných médiách pre živočišné buňkové kultúry, alebo in vivo v peritoneálnej dutině myší kmeňa Balb/c. Viabilné buňky hybridómu móžu byť uchovávané v ampulkách pri -180 °C v kvapalnom dusíku. Ich rozmražením sa získavajú životaschopné kultúry, ktoré sa používajú ako zdroj monoklonálnej protilátky.
Příklad
Hybridómové buňky sa pomnožovali in vivo aplikáciou 1 x 107 buniek intraperitoneálne myšiam kmeňa Balb/c bez predchádzajúcej premedikácie. Na 21. deň rastu hybridómu v ascitovej forme bola myš utratená a ascitová tekutina bola odobraná punkciou brušnej dutiny. Získalo sa 5,6 ml ascitovej tekutiny s obsahom 6,9 mg/ml imunoglobulínu. Tento bol z ascitovej tekutiny izolovaný vyzrážaním v 2 M sírane amónnom a purifikovaný chromatografiou na koloně dietylamínoetyl-celulózy. Ascitová tekutina obsahujúca monoklonálnu protilátku i purifikovaná protilátka vykazovala v imunohistochemickom teste na parafínových rezoch tkaniv špecifickú vazbu na buňky ludského malígneho melanómu a buňky karcinómov, nie však na buňky zdravých tkaniv a nádorov inej histogenezy. V kompetitívnom rádioimunoteste monoklonálna protilátka odhaFuje cirkulujúce protinádorové protilátky v 85 % sér pacientov s malignym melanómom.
V podmienkach in vitro rastie hybridóm RG-12 ako suspenzná kultúra. Buňky hybridómu majú veFkosť a tvar charakteristický pre myelómové buňky. Obsahujú fúzované buňkové jadrá s aneuploídnym karyotypom. Ako rastové médium sa používá minimálně esenciálně médium MEM (Ustav sér a očkovacích látek, Praha) obohatené 10% fetálneho telacieho séra (Bioveta, Ivanovice na Hané), gentamycínom a nárazníkovým roztokom bikarbonátu sodného. Kultúry sú udržiavané v termostate pri 37 °C v humidifikovanej atmosféře v přítomnosti 5% CO2.
CS 267 400 Bl
Za týchto podmienok je středná generačná do ba buniek hybridómu 22,5 hod. Hybridóm produkuje monoklonálny imunoglobulín triedy IgG.' '
Hybridóm RG-12 móže byť priemyslovo využívány ako zdroj moiioklonálnej protilátky proti malígnemu melanómu. v kompetitívnom rádioimunotestc s použitím membránových bielkovín melanómových buniek HMB-2 móže byť monoklonáhia protilátka použitá pre kvantitativné i kvalitativně stanovenie cirkulujúcich protinádorových protilátek u pacientov s ma lígnym melanómom pri diagnostike, diferenciálnej diagnostike a monitorovaní priebehu ochorenia po radikálnej liečbe. V imunohistochcmickom vyšetření parafínových rezov tkaniv sa monoklonálna protilátka uplatní pri defcrcnciálnej diagnostike malígnych melanómov a ich metastáz od benígnyeh pigmentovaných nádorov kože a iných nádorov neuroektodermálneho póvodu. Potenciálně možné využitie možno očakávať pri imunoscintigrafickej lokalizačně] diagnostike metastáz malígneho melanómu in vivo.
Claims (1)
- Myší lymfocytárny hybridóm RG-12, produ- proti nádorovému antigénu, združenému s bunkujúci monoklonálnu protilátku triedy IgG kami 1’udského malígneho melanómu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS887047A CS267400B1 (sk) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | Myší lymfocytámy hybridom RG-12 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS887047A CS267400B1 (sk) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | Myší lymfocytámy hybridom RG-12 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS704788A1 CS704788A1 (en) | 1989-06-13 |
| CS267400B1 true CS267400B1 (sk) | 1990-02-12 |
Family
ID=5418874
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS887047A CS267400B1 (sk) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | Myší lymfocytámy hybridom RG-12 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS267400B1 (sk) |
-
1988
- 1988-10-25 CS CS887047A patent/CS267400B1/sk unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS704788A1 (en) | 1989-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1208576A (en) | Monoclonal antibodies specific to cea, a process for producing such antibodies and the use of such antibodies | |
| FI86077B (fi) | Monoklonala antikroppar och metod att producera dessa. | |
| EP0201509B1 (en) | Monoclonal antibody to a human carcinoma tumor associated antigen | |
| Irie et al. | Human antibody to OFA-I, a tumor antigen, produced in vitro by Epstein-Barr virus-transformed human B-lymphoid cell lines. | |
| Kennel et al. | Analysis of surface proteins of mouse lung carcinomas using monoclonal antibodies | |
| AU661816B2 (en) | Urinary tumor associated antigen, antigenic subunits uses and methods of detection | |
| JPS63157977A (ja) | ヒト腫瘍壊死因子に対するモノクローナル抗体を含有する敗血症治療薬及びリューマチ性疾患治療薬 | |
| US20040001789A1 (en) | Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of gp96 or precursors thereof | |
| US4678747A (en) | Monoclonal antibodies for detection of an H (O) blood group antigen | |
| US5654408A (en) | Melanoma-associated antigens identified by monoclonal antibodies | |
| US4725538A (en) | Method of assaying the presence of cancer cells | |
| Aida et al. | Topographical analysis of tumor-associated antigens on bovine leukemia virus-induced bovine lymphosarcoma | |
| JPS61282096A (ja) | 新規な腫瘍関連抗原 | |
| US5639622A (en) | Monoclonal antibodies against tumor-associated antigens, a process for the preparation thereof and the use thereof | |
| EP0245520B1 (en) | Monoclonal antibody against glutathione s-transferase and its use in the diagnosis of cancer | |
| Furukawa et al. | A unique antigenic epitope of human melanoma is carried on the common melanoma glycoprotein gp95/p97. | |
| JPWO1987003377A1 (ja) | グルタチオンｓ−トランスフェラ−ゼに対するモノクロ−ナル抗体及びその製造法 | |
| CS267400B1 (sk) | Myší lymfocytámy hybridom RG-12 | |
| EP0184906A1 (en) | Monoclonal antibodies specific for human squamous lung carninoma cells, their preparation and use | |
| Liao et al. | Identification of Immunoglobulin Class and Subclass of House Monoclonal Antibodies to Human Cell Surface Antigens by Mixed Hemadsorption Assay | |
| CA1315220C (en) | Preparation of monoclonal antibodies capable of reacting with human breast carcinoma cells | |
| EP0287012A2 (en) | Anti-R-binder monoclonal antibody, process for preparing the same and application of the same | |
| JPH08208698A (ja) | モノクローナル抗体 | |
| JPH0343078A (ja) | 新規ハイブリドーマ，モノクローナル抗体および用途 | |
| JPS61249999A (ja) | モノクロ−ナル抗体 |