CS268022B1

CS268022B1 - 4- [N-acetyl-3,5-diiodo-L--tyrosyl] -aminobenzoic acid and process for its preparation

Info

Publication number: CS268022B1
Application number: CS875242A
Authority: CS
Inventors: Jiri Prof Ing Drsc Jary; Alena Ing Csc Zobacova; Frantisek Ing Budsky; Vojtech Prof Mudr Grossmann
Original assignee: Jary Jiri; Alena Ing Csc Zobacova; Budsky Frantisek; Vojtech Prof Mudr Grossmann
Priority date: 1987-07-10
Filing date: 1987-07-10
Publication date: 1990-03-14
Also published as: CS524287A1

Abstract

<yselina 4-/N-acetyl-3,5-dijod-L- -tyrosyl/-aminobenzoová vzorce I, kde J značí jód nebo jeho radioaktivní izotop Je vhodná k diagnostice exokrinní funkce pankreatu. Způsob její přípravy spočívá v tom, že se na kyselinu 4-/N-axetyl-L-tyrosyl/-aminobenzoovou působí Jodem ve vodné nebo vodně alkoholickém prostředí při současné neutralizací vznikající kyseliny jodovodíkové roztokem hydroxidu, uhličitanu nebo hydrogenuhllčitanu alkalického kovu na pH>6 při teplotě 0 až 50 °C, po ukončení reakce se z reakční směsi při pH <6 odfiltruje vyloučená kyselina vzorce I.<4-(N-acetyl-3,5-diiodo-L-tyrosyl)-aminobenzoic acid of formula I, where J denotes iodine or its radioactive isotope, is suitable for diagnosing the exocrine function of the pancreas. The method of its preparation consists in treating 4-(N-acetyl-L-tyrosyl)-aminobenzoic acid with iodine in an aqueous or aqueous-alcoholic medium while neutralizing the resulting hydroiodic acid with a solution of alkali metal hydroxide, carbonate or bicarbonate to pH>6 at a temperature of 0 to 50 °C, after the reaction is completed, the acid of formula I that has separated is filtered from the reaction mixture at pH <6.

Description

Vynález se týká kyseliny 4-/N-acetyl-3,5-diJod-L-tyrosyl/-aminobenzoové a způsobu její přípravy.The invention relates to 4- (N-acetyl-3,5-diiodo-L-tyrosyl) aminobenzoic acid and to a process for its preparation.

Součástí přípravku určeného k vyšetřování exokrinní funkce pankreatu je kyselina 4-/N-acetyl-L-tyrosyl/-aminobenzoová. Vyšetřování exokrinní funkce pankreatu spočívá v perorálním podání zmíněné kyseliny v dávce cca 2 g pacientovi a v následném stanovení produktů štěpení této látky v moči pacienta běžnými chemickými metodami.4- (N-acetyl-L-tyrosyl) -aminobenzoic acid is part of the product intended for the examination of exocrine function of the pancreas. Examination of the exocrine function of the pancreas consists in the oral administration of the mentioned acid in a dose of about 2 g to the patient and in the subsequent determination of the cleavage products of this substance in the patient's urine by conventional chemical methods.

Předmětem vynálezu je kyselina 4-/N-acetyl-3,5-dijod-L-tyrosyl/-aminobenzoová vzorce I, kde J značí jód nebo jeho radioaktivní izotop. Tato látka, zejména označená radioaktivním jódem, je mnohem vhodnější k diagnostickým účelům než nejodovaný, dosud používaný derivát. Látku vzorce I i její štěpné produkty lze kvantitativné stanovit ve velmi nízkých koncentracích vzhledem k citlivým detekčním metodám. Dávku potřebnou k vyšetření lze snížit cca na 1 mg na pacienta. Látka vzorce I není toxická v koncentracích o několik řádů vyšších, než jsou uvažované diagnostické dávky, a zatížení organismu zářením Je při těchto dávkách zanedbatelné.The present invention provides 4- (N-acetyl-3,5-diiodo-L-tyrosyl) -aminobenzoic acid of formula I, wherein J is iodine or a radioactive isotope thereof. This substance, especially labeled with radioactive iodine, is much more suitable for diagnostic purposes than the non-iodinated derivative used so far. The compound of formula I and its cleavage products can be quantified at very low concentrations due to sensitive detection methods. The dose needed for the test can be reduced to about 1 mg per patient. The compound of formula I is non-toxic at concentrations several orders of magnitude higher than the intended diagnostic doses, and the radiation exposure of the organism is negligible at these doses.

Způsob přípravy kyseliny vzorce I podle vynálezu spočívá v tom, že se na kyselinu 4-/N-acetyl-L-tyrosyl/-aminobenzoovou působí jódem. Reakce probíhá už za teploty laboratoře ve vodném nebo vodně alkoholickém prostředí při pH>6. Vznikající kyselina Jodovodíková se neutralizuje vhodnou alkalií, např. přebytečným hydrogenuhličitanem sodným. Po skončené reakci se reakční směs okyselí na pH<6 a vyloučený produkt se odfiltruje. Pro kontrolu průběhu reakce je možno použít chromatografie na tenkých vrstvách silikagelu.The process for the preparation of the acid of the formula I according to the invention consists in treating 4- (N-acetyl-L-tyrosyl) -aminobenzoic acid with iodine. The reaction takes place at room temperature in an aqueous or aqueous-alcoholic medium at pH> 6. The resulting hydroiodic acid is neutralized with a suitable alkali, such as excess sodium bicarbonate. After completion of the reaction, the reaction mixture was acidified to pH <6 and the precipitated product was filtered off. Silica gel thin layer chromatography can be used to monitor the progress of the reaction.

Takto připravený produkt Je možno přečistit rozpuštěním v alkoholu nebo v acetonu a sražením vodou; tímto způsobem se nejlépe zbaví zbytku matečných louhů, které se Jinak z objemné sraženiny obtížně odstraňují. Získaný vlhký gel se pak nejlépe vysuší azeotropickou destilací acetonového nebo alkoholického roztoku s benzenem za sníženého tlaku a dosušením ve vakuu.The product thus prepared can be purified by dissolving in alcohol or acetone and precipitating with water; in this way it is best to get rid of the remainder of the mother liquors, which are otherwise difficult to remove from the bulky precipitate. The wet gel obtained is then best dried by azeotropic distillation of an acetone or alcoholic solution with benzene under reduced pressure and drying in vacuo.

Struktura jodovaného derivátu plyne naprosto jednoznačně ze srovnání H-NMR a Č-NMR spekter jodované a výchozí nejodované kyseliny a z jeho elementární analýzy. Podle očekávání jód vstupuje za použitých podmínek výhradně do aromatického Jádra L-tyrosinu, a to do obou ortho poloh vůči fenolickému hydroxylu; v produktu nebyly nalezeny žádné jiné izomerní jodované látky.The structure of the iodinated derivative follows unambiguously from the comparison of the H-NMR and C-NMR spectra of the iodinated and starting non-iodinated acid and from its elemental analysis. As expected, iodine enters exclusively the aromatic L-tyrosine nucleus under the conditions used, in both ortho positions to the phenolic hydroxyl; no other isomeric iodinated substances were found in the product.

Značení látky I radionuklidy jódu, zejména ¹²^l /t. = 13 h./, /v 57,4 d./ a ⁷ I /T. /_ = 8,1 d./, je možno provést metodou přímé jodace, to Je za použití stejné 12 3 1οε reakce, jako je popsána v předmětu vynálezu s použitím dostupného -, resp. ’i resp. ^J I - Jodidu sodného. Příprava většího množství radioaktivní sloučeniny tímto, postupem není však vhodná, nebot dochází jak k přeměně radionuklidů, tak i k rozkladu sloučeniny při emisi záření beta. ’Labeling of substance I with iodine radionuclides, in particular ¹² .mu.l / t. = 13 h /, / v 57.4 d / / ⁷ I / T. (_ = 8.1 d.), Can be performed by the direct iodination method, i.e. using the same reaction as described in the present invention using the available - or. 'i resp. ^J I - Sodium iodide. However, the preparation of a larger amount of a radioactive compound by this procedure is not suitable, since both the conversion of radionuclides and the decomposition of the compound occur during the emission of beta radiation. '

Způsobem podle vynálezu lze však s výhodou připravit větší množství stabilní sloučeniny s neradioaktivním jódem a vlastní značení provádět periodicky vždy jen v potřebném množství určeném k rychlé spotřebě. Ke značení lze s výhodou použít výměnné reakce /bimolekulámí substituce/s radioaktivním jódem, která probíhá velmi snadno (viz např. P. Hradílek, L.Konrád, K.Kopička : Příprava _ thyroxinu izotopovou výměnnou reakcí, Radioizotopy 22 /4/, 553-562 /1981/. Tento postup umožňuje rychlou přípravu preparátu s vysokou radiochemickou čistotou, neobsahující žádné produkty bočních reakcí a s vysokou specifickou radioaktivitou, vhodného pro diagnostické účely v humánní medicíně.However, according to the process of the invention, it is possible to prepare a larger amount of a stable compound with non-radioactive iodine and to carry out the self-labeling periodically only in the required amount intended for rapid consumption. Exchange reactions (bimolecular substitution) with radioactive iodine, which is very easy, can be used for labeling (see eg P. Hradílek, L. Konrád, K. Kopička: Preparation of thyroxine by isotope exchange reaction, Radioisotopes 22/4 /, 553 This procedure allows the rapid preparation of a preparation with high radiochemical purity, containing no side reaction products and with high specific radioactivity, suitable for diagnostic purposes in human medicine.

PříkladExample

K roztoku 0,342 g /0,1 m/ kyseliny 4-/N-acetyl-L-tyrosyl/-aminobenzoové a 0,504 g /0,6 m/ hydrogenuhličitanu sodného v 7 ml vody bylo za míchání přidáno postupně 0,510 g /0,2 m/ jódu. Průběh reakce byl sledován chromatografií na tenké vrstvě silikagelu v systému benzen-aceton-octan ethylnatý-methanol-kyselina octová v poměru 120:10:10::5.2; látky byly detekovány postřikem 2 % síranu ceričitého v 10 % kyselině sírové a zahřátím. Po skončené reakci byla zfiltrovaná reakční směs okyselena přebytkem 2N kyseliny sírové a vyloučený produkt byl odfiltrován a promyt vodou. Pak byl rozpuštěn v 25 ml ethanolu a vysrážen přidáním stejného objemu vody. Odfiltrovaný vlhký gel byl rozpuštěn v 20 ml acetonu, k roztoku byl přidán stejný objem benzenu a vše bylo odpařeno ve vakuu do sucha. Bylo získáno 0,538 g /90,6 K/ bílé krystalické kyseliny t. t. 242 až 244 °C /rozkl./. Pro C^gN^I,, /594,2/ vypočteno: 36,40 % C, 2,71 % H, 4,72 % N, 42,8 % I;To a stirred solution of 0.342 g (0.1 m) of 4- (N-acetyl-L-tyrosyl) aminobenzoic acid and 0.504 g (0.6 m) of sodium bicarbonate in 7 ml of water was gradually added 0.510 g (0.2 g). m / iodine. The reaction was monitored by thin layer chromatography on silica gel in benzene-acetone-ethyl acetate-methanol-acetic acid 120: 10: 10 :: 5.2; substances were detected by spraying 2% cerium sulfate in 10% sulfuric acid and heating. After completion of the reaction, the filtered reaction mixture was acidified with an excess of 2N sulfuric acid, and the precipitated product was filtered off and washed with water. It was then dissolved in 25 ml of ethanol and precipitated by adding an equal volume of water. The filtered wet gel was dissolved in 20 ml of acetone, an equal volume of benzene was added to the solution and the whole was evaporated to dryness in vacuo. 0.538 g (90.6 K) of white crystalline acid were obtained, mp 242-244 ° C (dec.). For C 18 H 18 N 2 O 3 (594.2) calculated: 36.40% C, 2.71% H, 4.72% N, 42.8% I;

nalezeno: 36,52 % C, 2,78 % H, 4,41 % N, 41,8 % I.found: 36.52% C, 2.78% H, 4.41% N, 41.8% I.

Claims

OBJECT OF THE INVENTION

4- [N-acetyl-3,5-diiodo-L-tyrosyl] -aminobenzoic acid of the formula I, in which J denotes iodine or a radioactive isotope thereof.

2. A process for preparing an acid according to claim 1, wherein the 4- (N-acetyl-L-tyrosyl) -aminobenzoic acid is treated with iodine in an aqueous or aqueous-alcoholic medium while neutralizing the hydroiodic acid formed with a hydroxide, carbonate or bicarbonate solution. alkali metal to pH> 6 at a temperature of 0 to 50 ° C, after completion of the reaction, the precipitated acid of formula I is filtered off from the reaction mixture at pH <6.