CS270192B1 - Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 - Google Patents
Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 Download PDFInfo
- Publication number
- CS270192B1 CS270192B1 CS888150A CS815088A CS270192B1 CS 270192 B1 CS270192 B1 CS 270192B1 CS 888150 A CS888150 A CS 888150A CS 815088 A CS815088 A CS 815088A CS 270192 B1 CS270192 B1 CS 270192B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- herpes simplex
- glycoprotein
- type
- simplex virus
- hybridoma
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
RieSenie ea týká mySieho lymfooytárneho hybridámu, produkujúoeho monoklonálnu protilátku voči glykoproteínu gC virusu Herpes simplex typ 1, uloženého v zbierke hybridámov Virologiokóho ústavu SAV v Bratislavě pod označením Vu T96/4. Monoklonálna protilátka produkovaná hybridómom VÚ T9Č/4 je vhodná na diagnostické účely v imunofluoresoenčnom teste /IF/ v rádioimunoanalytickom teste /RIA/ a v imuňoenzymatlokej analýze /ELISA/ na stanovenie přítomnosti a množstva virusového antigánu v testovanom materiále. Je vhodná aj na imunoafinitnú purifikáoiu glykoproteínu gC z extraktov infikovaných buniek.
Description
Vynález sa týká nového hybridimu, tj. hybridnáho jednobunkového organizmu, zostrojenáho fúzlou myšej myelŮmovej buňky Sp2/0 a myšej alezinovej lymfoldnej buňky,produkujúoej protilátku vodí glykoproteinu gC virusu Herpes simplex typ 1.
U virusu Herpes simplex rozeznáváme dva entigánne odlišné typy Herpes simplex typ 1 a typ 2. Doteraz sa protilátky /antisére/ vodi virusu Herpes simplex typ 1 připravovali imunlzáolou pokusných zvierat, najdastejšie králikov, purifikováným, alebo nepurifikovaným virusem resp. nlektorým izolovaným proteinem /Forghani B., Schmidt N,, Lennette E.H. t Solid phase radioimmunoassay far identifioation of herpesvirus hominis types 1 and 2 from clinical material.Appl. Microbiol. 28, /1974/ 661 - 667:' Dreesman G.R., Watson D.O,, Courtney R.J., Adam E.t Melnick J.L.: Deteotion of herpesvirus type-speolflo antibody by mloroaolid-phaae radioimmunometrio assay: Intervirology 12. /1979/ 115 - 119 )· Sérum takto imunizovaných zvierat, odebrané po viaoerýoh dávkách antigánu, elúžilo ako zdroj protilátek tzv. typovošpeoifiokýoh, ktoré sa využívali na d8kaz antigánu virusu Herpes simplex typ 1 v základném výskume a v imunodiagnostlokej praxi. Vzhíadom na to, že virusy Herpes simplex typ 1 a 2 obaahujú nielen typovošpeoifloká, ale aj typovospolodne antigénns determinanty, takto připravené antiséra vodí virusu Herpes simplex typ 1 obsahuji! vysoké hladiny typovospolodných protilátek, které slažuju resp. úplné znemožňuji! správné urdenie typu infikujúoeho virusu pri dlagnostiokom testovaní. Typovospolodné protilátky sa obvykle odstraňuji! zo sér vysycovaním s virusom Herpes simplex typ 2, do Je prooedúra velmi národna na materiál naviao len v malom podte prípadov úspěšná. Výrobně šarže konvendnýoh typovošpeoifiokýoh antisěr sa dajú ležko Standardizoval a bývajú v širokom rozmedzl kvality. V poalednom Sase sa s úspeohom použlvajú na typlzáoiu virusu Herpes simplex typ 1 monoklonálne protilátky tzv. typovošpeoifloká, ktoré sú schopné ^etegovaí infekolu virusom Herpes simplex typ 1 v kliniokom materiále.
Uvedené nevýhody doteraz používaných postupov sa nevyskytnú, ak Je k dispozici! hybridómová buňková línia produkujúoa typovošpeoifloků monoklonálnu protilátku vodí glýkoproeinu gC virusu Herpes simplex typ 1, ktorá Je uložená v zbierke. hybridámov Vlrologlokého ústavu SAV, Mlýnská dolina 1, Bratislava pod oznadenlm VÚ 96/4.
Uvedeny hybridám bol získaný spSsobom známým z odbomej literatúry (Kohler, G., Milstein, C.t Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity. Nature, 256, /1975/» 495., Gerhard, W.: Fusion of cells in suspension and outgrowth of hybrids in conditioned medluia· Monoclonal antibodies: A now dimension In Biological analyses. Kennett R. H. a spol., eds. Now York, Plenum Prose /1980/, 370.) Hybridně buňky získané po fúzll myších myelůmovýoh Sp2/0 buniek a buniek získaných zo sleziny myši BALB/o imunlzovanej extraktem buniek infikovaných virusem Herpes simplex typ 1, bell klonovaná a po otestovaní bol vybraný klon VÚ T96/4. Výhodou hybridůmu Je, že produkuje homogánnu protilátku, tzv. monoklonálnu protilátku, ktorá Jo schopná Specificky reagoval s virusom Herpes simplex typ 1. Hybridům VÚ T96/4 možno kultivoval in vitro v mádlech vhodných pre žlvodlšne buňky alebo in vivo v porltonsálnoj dutině myší kmeňa BALB/o. Z konzerv zmrazených buniek uchovaných v kvapalnom dusíku, možno zadal produkciu protilátky bez SalšeJ imunizáoie zvierala antigánom.
Přiklad:
Za údělem získanla vadšieho množstva monoklonálnej protilátky VÚ T96/4 kultiváoiou hybridůmových buniek in vivo, 5x10$ buniek sa aplikovalo do perltoneálnej dutiny mySi. Pre lepšie uohytenle buniek bo.la myš 15 dni před aplikáoiou buniek premedikovaná parafínovým olojom /0,5 ml intraperitonoálno na 1 myš/. Po 10 dňooh rastu hybriditou v peritonoAlnej dutině, bola myš zabitá a vyprodukovaná asoitioká tekutina odobraná. Týmto postupem možno priemerne získal asi 7 ml asoitiokej tekutiny obsahujuoej 8 mg/ml protilátky. Aacitioká tekutina obsehujúoa produkt hybridimu VÚ 96/4 vykazovala špeoifiokú vazbu k virusu Herpes simplex typ 1 v rádioimunoanalytiokom teste /RIA/, v imunoenzymetlokeJ analýze /ELISA/ a v imunoflucrescendhom teste /IF/. Metodou rádloimunopreoipltáoie a elektroforézy
CS 270 192 Bl v polyakrylamidovom géli aa zlatila vazba monoklonálnej protilátky na glykoprotein gC virusu Herpes simplex typ 1.
Buňky hybridámu VÚ T96/4 rastů in vitro ako polosuspenzná kultura. Majů guíatý tvar a veíkosl charakteristická pro myelámové buňky. Obsahujů fázovaná buňkoví Jadra, sú aneuploidné. Buňky hybridámu VÚ T9Ó/4 máju ultraštruktárny obraz typických myelámovýoh bunlek, kde prevažujúoou erganelou au volné a na membránu viazaná polyribozómy. Základným kultivačným mádlom je Dulbeooova modlfikáoia Eagleovho mlnimálneho esenolálneho mádla (Dulbecoo, R., Freeman. G., Virology JB /1959/, 396 ). Toto mádlům, označované ako DMEM, Je pre kultiváoiu hybridámu doplnění gentamyoihom a inaktivovaným prekoloatrálnym telaoim sárom (10$, Bloveta, Ivanovice na Haní). Hybridem Je kultivovaný pri 37 °C v atmosféře' 5¼ C02. Jeho generační doba Je přibližné 24 h. Produkovaná protilátka Je monoklonálny imunoglobulin podtriedy IgG 2b. ,
Hybridám VÚ T96/4 móže byl využívaný ako zdroj protilátky vočl glykoproteinu gC virusu Herpes simplex typ 1, ktorá sa da použil na kvalitativny dfikaz přítomnosti virusu Herpes simplex typ 1 vo vyáetrovanom materiále, n* kvantitativné stanovenie množstva infikujúoeho virusu resp. glykoproteinu gC, pri vyhodnocovaní epidemiologiokej sltuáole, na purifikáolu glykoproteinu gC z extraktov infikovaných bunlek pomocou imuaoaflnltnoj ohromatografie a ako zdroj protilátky jedinej podtriedy (igC 2b) pre přípravu antlsár Spaoiflokýoh pro uvedená podtriodu. , '
Claims (1)
- PRBDMET V YN Á L E Z VMyMí lymfooytárny hybridám VÚ T96/4, produkujáoi monoklonálnu protilátku podtriedy IgG 2b vočl glykoproteinu gO virusu Herpes simplex typ 1.Opravy ve vytištěných popisech vynálezuVe vytištěném popisu vynálezu k autorskému osvědčení č. 270 192 (PV 8150-88,X) je vlevo dole chybně vytištěno číslo popisu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888150A CS270192B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS888150A CS270192B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS815088A1 CS815088A1 (en) | 1989-10-13 |
| CS270192B1 true CS270192B1 (sk) | 1990-06-13 |
Family
ID=5431702
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS888150A CS270192B1 (sk) | 1988-12-09 | 1988-12-09 | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS270192B1 (sk) |
-
1988
- 1988-12-09 CS CS888150A patent/CS270192B1/sk unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS815088A1 (en) | 1989-10-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Walsh et al. | Monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus proteins: identification of the fusion protein | |
| Rowe et al. | Differences in B cell growth phenotype reflect novel patterns of Epstein‐Barr virus latent gene expression in Burkitt's lymphoma cells. | |
| Pereira et al. | Type-common and type-specific monoclonal antibody to herpes simplex virus type 1 | |
| US4634666A (en) | Human-murine hybridoma fusion partner | |
| EP0610250B2 (en) | Porcine reproductive respiratory syndrome (prrs) vaccine and diagnostic | |
| US4535057A (en) | Immunoassay employing monoclonal herpes simplex antibody and biotin-avidin detection system | |
| Yeargan et al. | Rapid subtyping of equine herpesvirus 1 with monoclonal antibodies | |
| Balachandran et al. | Monoclonal antibodies to two glycoproteins of herpes simplex virus type 2 | |
| EP0162533A2 (en) | The detection of human cytomegalovirus specific IgM | |
| Routledge et al. | The development of monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus and their use in diagnosis by indirect immunofluorescence | |
| US4743562A (en) | Purified human cytomegalovirus protein | |
| AU735981B2 (en) | Peptide reagent for the detection of human cytomegalovirus (CMV) | |
| KR100523972B1 (ko) | 엡스타인-바르바이러스펩타이드및이들펩타이드에대한항체 | |
| Cui et al. | Monoclonal-antibody-mediated enzyme-linked immunosorbent assay for detection of reticuloendotheliosis viruses | |
| Ohlin et al. | Characterization of human monoclonal antibodies directed against the pp65-kD matrix antigen of human cytomegalovirus | |
| Lenkei et al. | High correlations of anti-CMV titers with lymphocyte activation status and CD57 antibody-binding capacity as estimated with three-color, quantitative flow cytometry in blood donors | |
| US5130232A (en) | Monoclonal antibody immunoassay kit for avian reticuloendotheliosis virus | |
| Forghani et al. | Serological reactivity of some monoclonal antibodies to varicella-zoster virus | |
| Franko et al. | Monoclonal antibodies specific for Hantaan virus. | |
| CS270192B1 (sk) | Myší lymfooytámy hybridám VÚ T96/4 | |
| Forghani et al. | Antisera to human cytomegalovirus produced in hamsters: reactivity in radioimmunoassay and other antibody assay systems | |
| Kao et al. | Monoclonal antibodies for the rapid diagnosis of respiratory syncytial virus infection by immunofluorescence | |
| US4572896A (en) | Monoclonal antibodies to herpes simplex virus type I polypeptides | |
| CS270194B1 (cs) | Myší lymfocytárny hybridem VÚ 499/1 | |
| Osterhaus et al. | Production and potential use of monoclonal antibodies against polio viruses. |