CS272627B1 - Method of silver-treated analytic materials' quantitative evaluation - Google Patents

Method of silver-treated analytic materials' quantitative evaluation Download PDF

Info

Publication number
CS272627B1
CS272627B1 CS845088A CS845088A CS272627B1 CS 272627 B1 CS272627 B1 CS 272627B1 CS 845088 A CS845088 A CS 845088A CS 845088 A CS845088 A CS 845088A CS 272627 B1 CS272627 B1 CS 272627B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
silver
iodide
iodine
isotope
concentration
Prior art date
Application number
CS845088A
Other languages
Czech (cs)
English (en)
Other versions
CS845088A1 (en
Inventor
Julius Ing Csc Brtko
Jan Ing Drsc Knopp
Peter Rndr Filipcik
Original Assignee
Julius Ing Csc Brtko
Jan Ing Drsc Knopp
Peter Rndr Filipcik
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Julius Ing Csc Brtko, Jan Ing Drsc Knopp, Peter Rndr Filipcik filed Critical Julius Ing Csc Brtko
Priority to CS845088A priority Critical patent/CS272627B1/cs
Publication of CS845088A1 publication Critical patent/CS845088A1/cs
Publication of CS272627B1 publication Critical patent/CS272627B1/cs

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)

Description

Vynález sa týká sposobu kvantitativného vyhodnotenia striebrom epracovaných analytických materiálov; najmS jednorozaerových 1 dvojrozměrových elektroforetogramov po frakcionácii najmď proteinov alebo nukleovýoh kyselin, ako aj rffntgenogramov; histograaov a autorádiograaov β iných povrohov obsahujúcich vrstvičku kovového striebra.
Metóda stanovenie elektroforeticky analyzovaných bielkovín v systéme polyakrylaaidového gélu pomocou roztoku amoniakálneho strieborného komplexu# prinieela od jej vzniku (Switzer R.C.; Merril C.R.; Shlfrin S.t Anal. Biochen., 98,· 231-237; 1979) velký počet zlepšení za účelom doslahnutia vysokej citlivosti stanovenie β einimálnym pozadím» Najvffčšie uplatnenie detekčnej techniky β použitia amoniakálneho strieborného komplexu sa našlo najmS pri kvalitativnom vyhodnocováni dvojrozměrných elektroforetogramov podlá 0'Farrella (O*Farrel P.H.: 3. Biol. Chem.; 250; 4007-4021; 1975).
Kvantitativné vyhodnocovanie stríebrom epracovaných jednorozměrných i dvojrozměrných elektroforetogramov je v dnešnej době vo evete realizované pomocou velmi nákladných laserových denzitoaetrov (Ultra Skaň XL laser densitometer# Katalog LKB Bromma 1987; s.
2222). alebo za použitia aetódy atómovej absorbčnej spektroekópie (Yflkeel, K.fl., Gracy R.W·': Electrophoreeis# 6; 361-366, 1985).
Uvedené nevýhody doterajších metód kvantitativného vyhodnotenia striebroa opracovaných jednorozměrných i dvojrozměrných elektroforetogramov; hietologických preparátov; rffntgenografiekých animkov a iných materiálov odstraňuje sposob kvantitativného vyhodnotenia podlá vynálezu# ktorého podstata spočívá v tom; že ea materiály apracované striebroa inkubujú v roztoku; ktorý obsahuje alkalickú alebo amónnu sol hexakyanoželezltanu a jodid alkalickej eoli v hmotnostnom pomere 1:1 a 1:4,- spolu so stopovým množstvom izotopu jódu l25I alebo 131I označeného jodidu sodného o vopred známej koncentrácii 0#l až 100 MBcj/ al# až kým čierňe-farba kovového striebra dosiahne svetložlté sfarbenie izotopem jódu ίοκ 131
I alebo označeného jodidu strieborného. Materiál sa premýva pod tečúcou vodou minimálně 15 min.# najlepšie 1 až 2 hodiny. Potoa ss zmerla rádioaktivita škvfn izotojog 121 porn - X alebo X označeného jodidu strieborného v gamapočitači.
Oe výhodné# ak hmotnostný poměr soli hexakyanoželezltanu a jodidu je 1:2 a ak je 125 121 končentrácia izotopem jódu I alebo X označeného jodidu sodného 2 MBq/ml.
Výsledky uvedeného sposobu kvantitativného vyhodnotenia materiálov spočivejú v tom; že sa výrazné znižia náklady eúvislace so zabezpečením ekonomicky nákladných laserových denzitometrov alebo metód atómovej absorbčnej spektroskopie. Metóda umožňuje pracovat so zanedbatelnou hodnotou požadia# pri zachovaní vysokej rozlišovecej schopnosti a reprodu kovátelnosti stanovenie.
Přiklad 1
Striebroa sprecovaný polyakrylamldový gél obsahujúci proteiny rozdělené podlá no- “ lekulovej hmotnosti /resp. jeho fragmenty získané exciziou/ sa inkubuje v roztoku o koncentrácii 0;8 % hexakyanoželezltanu draselného s 1.6 % jodidu draselného spolu 125 s izotopom jódu X označeného jodidu sodného v množstva 1850 kBq/100 ml roztoku; až kým sa čierna ferba kovového striebra zrněni na svetložltú. Gól ea vymývá tečúcou vodovodnou vodou po dobu 2 hodin a rádioaktivita svetložltých skvrn 8 rádioligandom *25X označeného jodidu strieborného sa zmenia v gama-počitači. Údaje o počte impulzov po odpočítaní počtu impulzov požadia gélu rovnakej plochy reprezentujú koncentráciu testovaných proteinov.
Přiklad 2
Striebroa spracované fragmenty polyakrylemidového gélu o prieaere 5 mm a hrúbke mm ea inkubujú v roztoku o koncentrácii 0,!7 % hexakyanoželezltanu draselného a 1,4 % jodidu sodného apolu s izotopom jódu 125I označeného jodidu sodného v množstve 3 MBq/
100 ml roztoku# až kým sa čierna ferba kovového striebra změní na svetložltú. Fragmenty gélu sa prepierajú v tečúcej vodě 3 hodiny. Rádioaktivita svetložltých pruhov reprezeni
CS 272627 Bl tujúclch koncentráciu protelnov v rozsahu od 500 do 2 500 ng sa zmeria v gama-počítači. Údaje o počte impulzov,' po odpočítaní počtu impulzov pozadia· gélu rovnakej plochy, reprezentujú koncentráciu testovaného enzýmu beta-gaiaktozidázy.
Přiklad 3
Striebrom spracovanó výřezy rOntgenovóho filmu obsahujúceho kresbu kovového striebra na fotomatsriále sa inkubujú v roztoku o koncentrácií 0,75 % hexakyanoželezitanu draselτ 25 ného a 1,;5 % jódidu sodného spolu s izotopom Jódu I označeného jodidu sodného v množstve 2 MBg/100 ml roztoku^) pokým sa čisrna farba na filme zmsni na svetložltú. Výřezy rentgenového filmu sa prepierajú v tečúcej voda 1 hodinu* Rádioaktivlta výrezov filmu,' reprezentujúcich rožnu hustotu striebra ne exponovanou) mieste,) sa zmsria v gamapočitači.
Vynález je možné využi? všade tam,’ kde je nevyhnutné kvantifikovat nanogramové množetvá bielkovín analyzovaných v plátcových polyakrylemidových géloch spracovaných striebrom ako aj kvantifikovanie vyvolaných Skvrn rOntgenografických snimkov autorádiolOR gramov a včade tam>i kde ea dá využit konverzia striebra na izotopom jódu I označený jodid striebornýj’ na pracoviskách najrožnejšieho zamerania vedecko-výskuranóho charakteru,* v zdravotnictvo ako aj v priemyselných odvetviach, napr. vo farmaceutickou! priemyslo.

Claims (4)

  1. PREDMET VYNALEZU
    1, Spoeob kvantitativného vyhodnotenla striebrom spracovaných analytických materiálov,1. najmff elektroforetogramov po frakclonácii β výhodou proteínov alebo nukleových kyselin^ rOntgenogramov, histogramov a autorádiogramov a iných materiálov obsahujúcich vrstvičku kovového striebra, vyznačujúci sa tým, že materiály opracované striebrom sa inkubujú v roztoku^ ktorý obsahuje alkalickú alebo amónnu sol hexakyanožslezitanu a Jodid alkalického kovu v hmotnostnom pomere 1:1 až 114,- spolu so stopovým množstvom izotopu jódu 23I aiebo ^3lj označeného jodidu sodného o vopred známej koncentrácií O,>1 až 100 MB^/ml,' až do změny čiernej farby kovového striebra na svatložlté efarbsnie izotopom jódu I alebo X označeného Jodidu strleborného,1 potom ea materiál premýva v tečúcej vodě minimálně po dobu 15 min., a potom sa zraeria rádioaktivlta T25 131
    Skvfn Izotopom I alebo ‘ί označeného jodidu strleborného,
  2. 2. Spoeob podlá bodu 1,' vyznačujúci sa tým,; žs hmotnostný poměr solí hexakyanoželezitanu a jodidu je 1:2,
  3. 3. Spoeob podle bodu lj! vyznačujúci sa tým, žs koncentrácia izotopu jódu ·*·25Ι alebo označeného Jodidu eodného je 2 MBg/ml.
  4. 4, Spoeob podlá bodu ljj! vyznačujúci ea tým,· že sa materiál premýva v tečúcej voda 1 až 2 hodiny.
CS845088A 1988-12-20 1988-12-20 Method of silver-treated analytic materials' quantitative evaluation CS272627B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS845088A CS272627B1 (en) 1988-12-20 1988-12-20 Method of silver-treated analytic materials' quantitative evaluation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS845088A CS272627B1 (en) 1988-12-20 1988-12-20 Method of silver-treated analytic materials' quantitative evaluation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS845088A1 CS845088A1 (en) 1990-05-14
CS272627B1 true CS272627B1 (en) 1991-02-12

Family

ID=5435024

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS845088A CS272627B1 (en) 1988-12-20 1988-12-20 Method of silver-treated analytic materials' quantitative evaluation

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS272627B1 (sk)

Also Published As

Publication number Publication date
CS845088A1 (en) 1990-05-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Switzer III et al. A highly sensitive silver stain for detecting proteins and peptides in polyacrylamide gels
Syrový et al. Staining and quantification of proteins separated by polyacrylamide gel electrophoresis
Sammons et al. Ultrasensitive silver‐based color staining of polypeptides in polyacrylamide gels
Igloi A silver stain for the detection of nanogram amounts of tRNA following two-dimensional electrophoresis
Sheffield et al. A solid-phase method for the quantitation of protein in the presence of sodium dodecyl sulfate and other interfering substances
Irie et al. A faithful double stain of proteins in the polyacrylamide gels with Coomassie blue and silver
Jimidar et al. Determination of nitrate and nitrite in vegetables by capillary electrophoresis with indirect detection
Timerbaev et al. Speciation studies by capillary electrophoresis-Simultaneous determination of chromium (III) and chromium (VI)
Timerbaev Recent advances and trends in capillary electrophoresis of inorganic ions
Aguilar et al. Determination of gold (I) and silver (I) cyanide in ores by capillary zone electrophoresis
Cornelis et al. Trace elements in medicine: Speciation: the new frontier
Harrington et al. Differences in cerebrospinal fluid proteins between patients with schizophrenia and normal persons.
Shakulashvili et al. Simultaneous determination of alkali, alkaline earth and transition metal ions by capillary electrophoresis with indirect UV detection
Alexander et al. Continuous-flow potentiometric monitoring of. alpha.-amino acids with copper wire and tubular electrodes
CA2394847C (en) Capillary electrophoresis probes and method
Peats Quantitation of protein and DNA in silver-stained agarose gels
Knight et al. Problems associated with determining protein concentration: a comparison of techniques for protein estimations
CS272627B1 (en) Method of silver-treated analytic materials' quantitative evaluation
Kinard Diagnosis of metal poisoning and evaluation of chelation therapy by differential pulse anodic stripping voltammetry coupled to a novel digestion procedure
Boxberg Protein analysis on two-dimensional polyacrylamide gels in the femtogram range: use of a new sulfur-labeling reagent
Ali et al. Determination of metal ions in water, soil, and sediment by capillary electrophoresis
Bakker Selectivity of carrier-based ion-selective electrodes: is the problem solved?
Stone et al. Characterization of biological macromolecules by electrophoresis and neutron activation
Timerbaev et al. Improved photometric detection of metal ions by capillary zone electrophoresis after precapillary complexation
Nakao et al. Electrophoretic extraction of protein complexes after separation and detection by a combined method of non-denaturing two-dimensional electrophoresis and reversible staining