CS273084B1 - Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation - Google Patents
Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation Download PDFInfo
- Publication number
- CS273084B1 CS273084B1 CS655988A CS655988A CS273084B1 CS 273084 B1 CS273084 B1 CS 273084B1 CS 655988 A CS655988 A CS 655988A CS 655988 A CS655988 A CS 655988A CS 273084 B1 CS273084 B1 CS 273084B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- beta
- glucan
- gluco
- fraction
- carboxymethyl
- Prior art date
Links
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 title claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 title abstract 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims abstract description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 31
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 13
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 8
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 4
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 claims 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 8
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 description 1
- 241000222480 Schizophyllum Species 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- -1 alkali metal salt Chemical class 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 108010001062 polysaccharide-K Proteins 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 238000001226 reprecipitation Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Vynález sa týká sposobu přípravy definovaných frakoií sodnej soli karboxymetyl-(1*6)-beta-D-gluko-(1+3)-beta-D-glukánu.
Stěnový (1-*6)-beta-D-gluko-(l*3)-beta-D-glukán izolovaný z kvasiniek, húb a lišajníkov zvyšuje rezistenoiu organizmov voči infekčným a malígnyra ochoreniam. Je doležitou adjuvantnou složkou vakcín a významným induktorom krvitvorby živočichov [n.R. Diluzio, Springer Semin. Iramunopathol., 8, 387, 1985]· Biologické efekty tohto polysacharidu (imunomodulačný, antibakteriálny, antivirový a antituraorový) úzko súvisia s jeho-molekulovými parametrami. Napr. u sohizofylanu, extracelulámeho polysacharidu produkovaného hubami Schizophyllum oommune, sa zistilo, že podmlenkou antitumorovej aktivity na sarkom 180 je molekulová hmotnost nad 5x10^ Da, optimálně výše 2x103 Da [t. Kojima,
K. Tabata, W. Itoh, T. Yanaki, Agric. Biol. Chem., 50 (1), 231-232, 1986]. Tiež bol sledovaný protinádorový účinok a protistafylokoková aktivita rozpustného glukánu, připraveného z partikulárneho glukánu z buniek kvasiniek Saooharorayces oerevisiae jjr. R. Di Luzio, D. Ir. Williams, R. B. McNamee, B. P. Edwarda, A. Kitahama, Int. J. Canoer, 24, 773-779, 1979]. Sodná soí karboxymetyl-(l*6)-beta-D-gluko-(l-*3)-beta-D-glukánu, ktorá sa dá připravil chemickou modifikáciou (l->ó)-beta-D-gluko-(1->3)-beta-D-glukánu, izolovaného zo Saccharomyces oerevisiae (AO 261819, PV 1789-87; 270103 , PV 3944-86), je látkou s poměrně širokou di3tribúoiou molekulovej hmotnosti.
Tieto nedostatky je možné odstrániť přípravou jej definovaných frakcii spásobom podía vynálezu. Podstata vynálezu spočívá v tom, že 0,1 až 0,5 %-ný roztok sodnej soli karboxymetyl-(1-^6)-beta-D-gluko-(1-»3)-beta-D-glukánu v 0,3 až 1 %-nom roztoku alkaliokej soli minerálnej kyseliny s výhodou v chloride sodnom alebo draselnom, sa prezráža organickým rozpúšťadlom rozpúšťajúoim sa vo vodě, krotým može byť aceton, n-propylalkohol, izopropylalkohol, etylalkohol, dioxán apod. Oddělí sa hrubá predfrakeia a získaný roztok sa postupné opakované zráža organickým rozpúšťadlom, aké sa použilo na prezrážanie. Získané frakcie sa oddelia (napr. odoentrifugovaním) a vysušia z éteru. Před vysušením sa mázu ešte přečistit prezrážaním rovnakým organickým rozpúšťadlom.
Riešenie podía vynálezu umožňuje pripraviť definované frakoie sodnej soli karboxyraetyl-(l-i6)-beta-D-gluko-(1->3)-beta-D-glukánu s definovaným a opakovateíným zložením.
Uvedené příklady ilustrujú, ale neobmedzujú predmet vynálezu.
Příklad 1 g sodnej soli karboxymetyl-(1*6)-beta-D-gluko-(l*3)-beta-D-glukánu sa rozpustí v 250 ml 0,5 % hmot. vodného roztoku NaCl. Nerozpustný podiel sa oddělí odstředěním.
K čirému roztoku sa přidá 220 ml acetonu, až vznikne jemná suspenzia. Táto sa ochladí na teplotu 10 °C a potom sa odstředí. Sediment (10 %) sa oddělí ako hrubá predfrakeia s nejednotnou molekulovou hmotnosťou (dokaž gélovou chroraatografiou). K čirému roztoku sa Sálej přidá 60 ml acetonu a vzniknutá suspenzia sa ochladí na 10 °C a odstředí. Sediment sa rozpustí v 10 ml 0,5 % hmot. vodného roztoku NaCl, prezráža acetónom (60 ml) a dekantuje s 2x60 ml acetonu a s 2x40 ml dietyléteru. Nakoniee sa vysuší pri laboratórnej teplote. Výťažok takto pripravenej širokej frakcie sodnej soli karboxymetyl-(1-6)-beta-D-gluko-(1-3)-beta-D-glukán je 72,3 %· Jej limitné-viskozitné Číslo stanovené v 0,1 M vodnom roztoku NaCl při 25 °C je-0,966 dl.g1. Molekulová hmotnosť vrcholu ehromatografického záznamu vztiahnuté na kalibraoné Standardy dextránu je 1,02 x 10^ Da. Příklad 2
Prakcia z příkladu 1 v množstve 1,2 g sa rozpustí v 300 ml 0,5 % hmot. vodného roztoku NaCl. Potom sa zráža 296 ml acetonu a vzniknutá suspenzia sa ochladí na 10 °C a odstředí. Sediment sa oddělí (9,3 %) ako frakcia s nejednotnou molekulovou hmotnosťou (gélovou chromatografiou sa získá trojvrcholový záznam frakoie). Supernatant sa zráža Sálej s 20 ml acetónom a po oohladení na 10 °C sa suspenzia odstr.edí. Sediment
CS 273 084 B1 aa prezráža a vysuší ako v příklade 1. Výťažok frakcie je 45,9 %. Supernatant sa použije v příklade 3. 0,55 S vysušeného sedimentu sa rozpustí v 138 ml 0,5 % hmot. vodného roztoku NaCl. Roztok sa zráža s 123 ml acetonu a vzniknutá suapenzia sa po ochladení na 10 °C odstředí. Získaný sediment sa prezráža a vysuší ako v příklade 1. Takto sa získá frakcia I, ktorej výťažok je 11 %. Chromatogram tejto frakcie má 2 píky, a to 1,5x10^ Da a 1,6x10^ Da. Získaný supernatant sa dalej zráža s 20 ml acetonu. Vypadne zrazenina, ktorá sa oddělí po ochladení na 10 °C odstředěním. Po prezrážaní a vysušení ako v příklade 1 sa získá frakcia II (výťažok 20,5 %). Jej J^] stanovené ako v příklade 1 je 1,193 dl.g^ a molekulová hmotnost' z chromatografického záznamu je 2,3x10^ Da. Supernatant po oddělení frakcie II sa áalej zráža s prehytkom acetonu (40 ml) a po ochladení na 10 °C sa zrazenina odstředí. Po prezrážaní a vysušení ako v příklade 1 sa získá frakcia III (výtažok 9,7 %)· Jej limitné viskozitné číslo a molekulová hmotnost stanovené ako v příklade 1 sú 1,074 dl.g a 6,75 x 10 Da.
Přiklad 3
Supernatant z příkladu 2 sa zráža s 20 ml acetonu. Vzniknutá suspenzia sa ochladí na 10 °0, odstředí sa a sediment sa prezráža a vysuší ako v příklade 1. Získá sa frakcia IV, ktorá gélovou chromatografiou dává dvojpíkový záznam. Supernatant po oddělení frakcie IV sa dalej zráža 20 ml acetonu, suspenzia sa ochladí na 10 °C, odstředí a sediment sa prezráža a vysuší ako v příklade 1. Získá sa frakcia V (výťažok 7,7 %) s dvojpikovým chromatografickýra záznamom. Supernatant po oddělení frakcie V sa zráža s 20 ml acetonu, vzniknutá suspenzia sa ochladí na 10 °C, odstředí a spracuje ako v příklade 1. Získá sa frakcia VI (výťažok 10,5 %). Limitné viskozitné číslo a molekulová hmotnosť stanovené ako v příklade 1 sú 1,012 dl.g-1 a 2,9x10J Da. Supernatant získaný oddělením frakcie VI sa zráža s naďbytkom acetonu (60 ml), suspenzia sa ochladí na 10 °0, odstředí a sediment sa spracuje ako v příklade 1. Získá sa frakcia VII (výťažok 8,8 %). Jej limitné viskozitné číslo a molekulová hmotnost' stanovená ako v příklade 1 sú 0,657 dl.g-1 a 8,6x10^ Da.
Vynález može nájsť uplatnenie v humánnej a veterinárnej medicíně ako imunostimulátor, v ohemickom priemysle ako referenčnó materiály pre kvapalinovú-chromatografiu.
Claims (3)
1. Spásob přípravy definovaných frakoií sodnej soli karboxyraetyl-(1-*6)-beta-D-gluko-(1->3)-beta-D-glukánu vyznačujúci sa tým, že 0,1 až 0,5 %-ný roztok sodnej soli karboxymetyl-(l-»6)-beta-D-gluko-(1-»3)-beta-D-glukánu v 0,3 až 1,0 %-nom vodnom roztoku alkalickej soli minerálnej kyseliny, po predzrážaní organickým rozpúšťadiom rozpúšťajúoim sa vo vodě a oddělení hruběj predfrakcie, sa postupné opakované zráža rovnakým organickým rozpúšťadiom, získané frakcie sa oddelia a vysušia z éteru.
2. Spfisob přípravy podťa bodu 1 vyznačujúci sa tým, že ako alkalická sol’ minerálnej kyseliny sa použije chlorid sodný.
3. SpSsob přípravy podťa bodu 1 vyznačujúci sa tým, že ako organické rozpúšťadlo rozpúšťajúce sa vo vodě sa použije aceton.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS655988A CS273084B1 (en) | 1988-10-03 | 1988-10-03 | Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS655988A CS273084B1 (en) | 1988-10-03 | 1988-10-03 | Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS655988A1 CS655988A1 (en) | 1990-07-12 |
| CS273084B1 true CS273084B1 (en) | 1991-03-12 |
Family
ID=5412948
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS655988A CS273084B1 (en) | 1988-10-03 | 1988-10-03 | Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS273084B1 (sk) |
-
1988
- 1988-10-03 CS CS655988A patent/CS273084B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS655988A1 (en) | 1990-07-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2022962C (en) | Process for the preparation of extracts having high content in anthocyanosides | |
| EP1414865B1 (en) | Isolation of glucan particles and uses thereof | |
| EP0046581B1 (en) | Process for separation of mucopolysaccharides | |
| EP0485614B1 (en) | Cyclodextrin derivative | |
| Nishimura et al. | Bioactive chitin derivatives. Activation of mouse-peritoneal macrophages by O-(carboxymethyl) chitins | |
| Flodin et al. | Separation of acidic oligosaccharides by gel filtration | |
| JP2702376B2 (ja) | α−Ｌ−イズロン酸−２−Ｏ−硫酸が修飾されたヘパリンまたはヘパラン構造を有する半合成グリコサミノグリカン | |
| CA2401704A1 (en) | Salmon-origin chondroitin sulfate | |
| GB2189245A (en) | Producing modified cyclodextrins | |
| JP2702377B2 (ja) | ３位を求核基で置換されたα−Ｌ−ガラクツロン酸を含有する半合成グリコサミノグリカン類 | |
| HU188599B (en) | Process for preparing physiologically active substance designated as ch-1 | |
| EP0527236A1 (en) | Polysaccharide derivative, production thereof, and separating agent | |
| US2959583A (en) | Method of purifying sulfated polysaccharides | |
| CS273084B1 (en) | Method of carboxymethyl-(1-6)-beta-d-gluco-(1-3)-beta-d-glucan's sodium salt's defined fractions preparation | |
| CA2035948A1 (en) | Polysaccharides with immunomodulating properties from astragalus membranaceus and pharmaceutical compositions containing them | |
| KR920003692B1 (ko) | 다당류의 해중합 및 황산염화 방법 | |
| Ukai et al. | Polysaccharides in Fungi. I. Purification and characterization of acidic heteroglycans from aqueous extract of Tremella Fuciformis Berk | |
| US4664806A (en) | Anionically modified polysaccharides chromatography agents | |
| GB818336A (en) | A new acid aminopolysaccharide and a process for the production thereof | |
| US5512672A (en) | Curdlan sulfate | |
| Stacey et al. | 313. Structure of the dextran synthesised from sucrose by a new strain of Betacoccus arabinosaceous | |
| Van der Want et al. | Synthesis of linear oligomers of ε‐amino. Caproic acid: Synthesis of a tri‐, tetra‐and penta‐ω‐peptide | |
| US4973581A (en) | Glucan derivatives having tumoricidal activity | |
| US6933372B2 (en) | Method to produce a solid form of heparin | |
| EP0413248B1 (en) | Substances with heparin-like structure and their method of production |