CS387991A3 - Short peptides with insulin activity - Google Patents
Short peptides with insulin activity Download PDFInfo
- Publication number
- CS387991A3 CS387991A3 CS913879A CS387991A CS387991A3 CS 387991 A3 CS387991 A3 CS 387991A3 CS 913879 A CS913879 A CS 913879A CS 387991 A CS387991 A CS 387991A CS 387991 A3 CS387991 A3 CS 387991A3
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- carbon atoms
- asn
- group
- tyr
- formula
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 50
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 28
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 54
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 title description 27
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 title description 27
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 title description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 title description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 15
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229910052739 hydrogen Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000001257 hydrogen Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 claims abstract 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 53
- -1 alkoxy radical Chemical class 0.000 claims description 29
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 18
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 16
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 16
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 15
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 14
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 10
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 9
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 7
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 7
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 7
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 6
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims description 5
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 5
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 4
- 125000003798 L-tyrosyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C(O[H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 4
- 244000191761 Sida cordifolia Species 0.000 claims description 4
- XBWKCYFGRXKWGO-SRVKXCTJSA-N Tyr-Cys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XBWKCYFGRXKWGO-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 4
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- YNQMEIJEWSHOEO-SRVKXCTJSA-N Asn-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O YNQMEIJEWSHOEO-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UWTATZPHSA-N D-Asparagine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UWTATZPHSA-N 0.000 claims description 3
- 150000005840 aryl radicals Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000000000 cycloalkoxy group Chemical group 0.000 claims description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims description 2
- 125000004209 (C1-C8) alkyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims 1
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 claims 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 1
- JGPMMRGNQUBGND-UHFFFAOYSA-N idebenone Chemical compound COC1=C(OC)C(=O)C(CCCCCCCCCCO)=C(C)C1=O JGPMMRGNQUBGND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000002346 iodo group Chemical group I* 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical group [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 abstract 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 14
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 12
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 11
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 8
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 8
- 230000006377 glucose transport Effects 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 5
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 5
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 5
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 125000002059 L-arginyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])C(=N[H])N([H])[H] 0.000 description 4
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 4
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethanethiol Chemical compound CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 230000004132 lipogenesis Effects 0.000 description 4
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 4
- 108700022737 rat Fat1 Proteins 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 4
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- SWZCTMTWRHEBIN-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C1=CC=C(O)C=C1 SWZCTMTWRHEBIN-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 3
- HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 4-ethylmorpholine Chemical compound CCN1CCOCC1 HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical group NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002066 L-histidyl group Chemical group [H]N1C([H])=NC(C([H])([H])[C@](C(=O)[*])([H])N([H])[H])=C1[H] 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 125000002707 L-tryptophyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(C([C@](N([H])[H])(C(=O)[*])[H])([H])[H])=C([H])N([H])C2=C1[H] 0.000 description 3
- 238000005684 Liebig rearrangement reaction Methods 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 108010066381 preproinsulin Proteins 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- OHSJPLSEQNCRLW-UHFFFAOYSA-N triphenylmethyl radical Chemical compound C1=CC=CC=C1[C](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 OHSJPLSEQNCRLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical group OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RDFMDVXONNIGBC-UHFFFAOYSA-N 2-aminoheptanoic acid Chemical compound CCCCCC(N)C(O)=O RDFMDVXONNIGBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JTNCEQNHURODLX-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanimidamide Chemical compound NC(=N)CC1=CC=CC=C1 JTNCEQNHURODLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 3-aminoalanine Chemical compound [NH3+]CC(N)C([O-])=O PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 2
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 2
- 125000000570 L-alpha-aspartyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[C@]([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 125000000899 L-alpha-glutamyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C(O[H])=O 0.000 description 2
- 125000000415 L-cysteinyl group Chemical group O=C([*])[C@@](N([H])[H])([H])C([H])([H])S[H] 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 125000001176 L-lysyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000002842 L-seryl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- 125000000769 L-threonyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])[C@](O[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-N Methanethiol Chemical compound SC LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KSPIYJQBLVDRRI-UHFFFAOYSA-N N-methylisoleucine Chemical compound CCC(C)C(NC)C(O)=O KSPIYJQBLVDRRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical group CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N diphenyl Chemical compound C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZUOUZKKEUPVFJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 235000019138 food restriction Nutrition 0.000 description 2
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 2
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 2
- 239000004026 insulin derivative Substances 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000343 potassium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- BJBUEDPLEOHJGE-UHFFFAOYSA-N (2R,3S)-3-Hydroxy-2-pyrolidinecarboxylic acid Natural products OC1CCNC1C(O)=O BJBUEDPLEOHJGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNZIFNXFAFKRKT-NSHDSACASA-N (2s)-2-azaniumyl-3-[4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]phenyl]propanoate Chemical compound CC(C)(C)OC1=CC=C(C[C@H]([NH3+])C([O-])=O)C=C1 SNZIFNXFAFKRKT-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-5-amino-2-(aminomethyl)-6-[(2r,3s,4r,5s)-5-[(1r,2r,3s,5r,6s)-3,5-diamino-2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-hydroxycyclohexyl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]oxyoxane-3,4-diol;sulfuric ac Chemical compound OS(O)(=O)=O.N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JHTPBGFVWWSHDL-UHFFFAOYSA-N 1,4-dichloro-2-isothiocyanatobenzene Chemical compound ClC1=CC=C(Cl)C(N=C=S)=C1 JHTPBGFVWWSHDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PHRABVHYUHIYGY-UHFFFAOYSA-N 1-methylnaphthalene Chemical compound C1=CC=C2C([CH2])=CC=CC2=C1 PHRABVHYUHIYGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HAWJUUUDZFZUKG-UHFFFAOYSA-N 2,2-diaminoheptanedioic acid Chemical compound OC(=O)C(N)(N)CCCCC(O)=O HAWJUUUDZFZUKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLMSKXASROPJNG-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-2-thiophen-2-ylacetate Chemical compound OC(=O)C(N)C1=CC=CS1 XLMSKXASROPJNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-thiophen-2-ylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CS1 WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLRMQYXOBQWXCR-UHFFFAOYSA-N 2154-56-5 Chemical compound [CH2]C1=CC=CC=C1 SLRMQYXOBQWXCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HZCOYHCYNIAEOL-UHFFFAOYSA-N 3-acetyl-1-hydroxypyrrolidine-2,5-dione Chemical compound CC(=O)C1CC(=O)N(O)C1=O HZCOYHCYNIAEOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XABCFXXGZPWJQP-UHFFFAOYSA-N 3-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)CC(N)CCC(O)=O XABCFXXGZPWJQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-1,2,3-benzotriazin-4-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)N(O)N=NC2=C1 HJBLUNHMOKFZQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035657 Abasia Diseases 0.000 description 1
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 description 1
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101001011741 Bos taurus Insulin Proteins 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSQKUIVOSBEUAZ-UHFFFAOYSA-N C1=CC=CC2=CC([CH2])=CC=C21 Chemical compound C1=CC=CC2=CC([CH2])=CC=C21 LSQKUIVOSBEUAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005915 C6-C14 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 125000002353 D-glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000030595 Glucokinase Human genes 0.000 description 1
- 108010021582 Glucokinase Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 108010001483 Glycogen Synthase Proteins 0.000 description 1
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical group NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCWXJXMHJVIJFK-UHFFFAOYSA-N Hydroxylysine Natural products NCC(O)CC(N)CC(O)=O LCWXJXMHJVIJFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JUQLUIFNNFIIKC-YFKPBYRVSA-N L-2-aminopimelic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCC(O)=O JUQLUIFNNFIIKC-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- 125000000010 L-asparaginyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-ZZWDRFIYSA-N L-glucose Chemical compound OC[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-ZZWDRFIYSA-N 0.000 description 1
- 125000003677 L-glucosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101500021084 Locusta migratoria 5 kDa peptide Proteins 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OLNLSTNFRUFTLM-UHFFFAOYSA-N N-ethylasparagine Chemical compound CCNC(C(O)=O)CC(N)=O OLNLSTNFRUFTLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N N-methyl-L-valine Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(O)=O AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 102000001105 Phosphofructokinases Human genes 0.000 description 1
- 108010069341 Phosphofructokinases Proteins 0.000 description 1
- 108010005991 Pork Regular Insulin Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010053763 Pyruvate Carboxylase Proteins 0.000 description 1
- 102100039895 Pyruvate carboxylase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 241001125862 Tinca tinca Species 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WJKJJGXZRHDNTN-UWVGGRQHSA-N Tyr-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 WJKJJGXZRHDNTN-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-MDMQIMBFSA-N alpha-L-glucose Chemical compound OC[C@@H]1O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-MDMQIMBFSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 235000010290 biphenyl Nutrition 0.000 description 1
- IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N bovine insulin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940043430 calcium compound Drugs 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- BJBUEDPLEOHJGE-IUYQGCFVSA-N cis-3-hydroxy-D-proline zwitterion Chemical compound O[C@H]1CCN[C@H]1C(O)=O BJBUEDPLEOHJGE-IUYQGCFVSA-N 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- JVHIPYJQMFNCEK-UHFFFAOYSA-N cytochalasin Natural products N1C(=O)C2(C(C=CC(C)CC(C)CC=C3)OC(C)=O)C3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 JVHIPYJQMFNCEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMAODHOXRBLOQO-UHFFFAOYSA-N cytochalasin-A Natural products N1C(=O)C23OC(=O)C=CC(=O)CCCC(C)CC=CC3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 ZMAODHOXRBLOQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N delta-DL-hydroxylysine Natural products NCC(O)CCC(N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N diazepam Chemical compound N=1CC(=O)N(C)C2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000447 dimerizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N diphosphonate Chemical compound O=P(=O)OP(=O)=O YWEUIGNSBFLMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 210000000918 epididymis Anatomy 0.000 description 1
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N erythro-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-UHNVWZDZSA-N 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000005188 flotation Methods 0.000 description 1
- 125000003983 fluorenyl group Chemical group C1(=CC=CC=2C3=CC=CC=C3CC12)* 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000004110 gluconeogenesis Effects 0.000 description 1
- 150000002303 glucose derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N glycerol 1-phosphate Chemical compound OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- QJHBJHUKURJDLG-UHFFFAOYSA-N hydroxy-L-lysine Natural products NCCCCC(NO)C(O)=O QJHBJHUKURJDLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- RGXCTRIQQODGIZ-UHFFFAOYSA-O isodesmosine Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC[N+]1=CC(CCC(N)C(O)=O)=CC(CCC(N)C(O)=O)=C1CCCC(N)C(O)=O RGXCTRIQQODGIZ-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002681 magnesium compounds Chemical class 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N n-hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide Chemical compound C1=CC2CC1C1C2C(=O)N(O)C1=O ZUSSTQCWRDLYJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 description 1
- 238000005897 peptide coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N phosphorus pentoxide Inorganic materials O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000020073 positive regulation of transport Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 description 1
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSMODUONRAFBET-WHFBIAKZSA-N threo-5-hydroxy-L-lysine Chemical compound NC[C@@H](O)CC[C@H](N)C(O)=O YSMODUONRAFBET-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- TUQOTMZNTHZOKS-UHFFFAOYSA-N tributylphosphine Chemical compound CCCCP(CCCC)CCCC TUQOTMZNTHZOKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N β-(2-naphthyl)-alanine Chemical compound C1=CC=CC2=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC=C21 JPZXHKDZASGCLU-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
- 1 Í1504 PRAHA 1, Žitné 25
Krátké peptidy s insulinovým účinkem
Oblast techniky
l· 5 nx '8 i
Vynález se týká nových peptidů s insulinovým účinkem,které jsou vhodné pro léčení Diabetes mellitus /cukrovka/.
Dosavadní stav techniky
Insuliny jsou tvořeny dvěma polypeptidovými řetězci,a sice řetězcem A, který obsahuje 21 aminokyselinových zbyt-ků a řetězcem B, který obsahuje 30 aminokyselinových zbytků.Oba tyto řetězce A a B jsou vzájemně spojeny dvěma disulfi-dovými můstky, přičemž jsou spojeny cysteinové zbytky v po-lohách A7 a B7, jakož i cysteinové zbytky v polohách A20 aB19* Třetí disulfidový můstek se nachází mezi polohami A6a A11. Zvířecí a lidský insulin se tvoří ve slinivce břišníve formě přeproinsulinu. Lidský preproinsulin sestává na-příklad z prepeptidu s 24 aminokyselinovými zbytky, na kte-rý navazuje proinsulin s 86 aminokyselinovými zbytky,a uve-dený preproinsulin má následující konfiguraci:
Pre peptid-B-Arg-Arg-C-Lys-Arg-A, přičem obecný substituent C znamená aminokyselinový řetě-zec 3 31 zbytky. V průběhu vylučování z Langerhandsscheno-vých ostrůvků se prepeptid odštěpí za vzniku proinsulinu.Potom se řetězec C proteolyticky štěpí a vzniká účinný lids-ký insulin.
Insulin vykazuje v insulinsensitivní tkání široké spektrum účinků. Nejvýraznějším z těchto účinků je rychlé - 2 - snižování hladiny glukosy u savců v případě aplikace insu-linu. To je způsobeno rychlým převodem glukosy z krve dosvalů a tukových buněk, kde je glukosa spotřebována. Insu-lin dále aktivuje glykogen-syntetasu a inhibuje lipolysu.
Insulin také podporuje syntézu proteinů z aminokyselin azesiluje indukci glukokinasy a fosfofruktokinasy a inhibujetvorbu určitých enzymů glukoneogenese, jakými jsou pyruvat-karboxylasa a fruktosadifosfatasa.
Diabetes II.typu /na insulinu nezávislý Diabetes/souvisí s resistenci vůči insulinu perferních tkání, jakýmijsou svalové nebo tukové tkáně. Zmenšená míra využití glukosy, ke které přitom dochází, je způsobena chybějící insuli-novou stimulací transportu a následného metabolického zpra-cování glukosy. Tato násobná resistence je pravděpodobnězpůsobena defektem v receptorové nebo postreceptorové rovi-ně, t.zn, před vznikem členu nazývaného "second messenger”/Garvey, Diabetes/Metabolism Eewiews, 5 /1989/ 727-742/.
Nyní bylo s překvapením zjištěno, že krátké peptidymohou mít insulinový účinek a že se proto hodí k léčení cu-krovky /diabetes mellitus/.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou peptidy obecného vzorce I
X-Y-Z-A-B-C-Cys-D-E /1/ ve kterém A znamená B znamená C znamená a/ aminokyselinu nebo kovalentnívazbu a/ aminokyselinu nebo kovalentnívazbu, a/ aminokyselinu, b/ aromatickou aminokyselinu, kte-rá je na kruhu jednou nebo více-krát substituována 1/obecným substituentem ,který znamená 1.1 alkylovou skupinu s 1až 18 uhlíkovýni atomy, 1.2 cykloalkylovou skupinuse 3 až 18 uhlíkovýmiatomy, 1 .3 arylovou skupinu s 6 až14 uhlíkovými atomy, 1.4 arylovou skupinu s 6 až 14 uhlíkovými atomy, kte-rá je jednou nebo vícekrátsubstituována 1.4·1 alkylovou skupinou s 1až 8 uhlíkovými atomynebo 1,5. alkylovou skupinu s 1 až8 uhlíkovými atomy, kte-rá je jednou nebo více-krát substituována 1.5.1 arylovou skupinou se 6 až 14 uhlíkovými atomy, 2 vt ja-
2/obecným substituentem B rý znamená 2.1 alkylovou skupinu s 1 až18 uhlíkovými atomy, 2.2 cykloalkylovou skupinu se3 až 18 uhlíkovými atomy, 2.3 alkoxylovou skupinu s 1až 18 uhlíkovými atomy, 2.4 cykloalkoxylovou skupinuse 3 až 14 uhlíkovými ato-my, 2.5 arylovou skupinu s 6 až 14atomy uhlíku, 2.6 arylovou skupinu se 6 až14 uhlíkovými atomy, kteráje jednou nebo vícekrátsubstituována 2.6.1 alkylovou skupinou s 1až 8 uhlíkovými atomy, 2.6.2 alkoxylovou skupinou s 1až 8 uhlíkovými atomy, 2.7 aryloxy-skupinu se 6 až14 uhlíkovými atomy, 2.8 aryloxy-skupinu, která jejednou nebo vícekrát sub-stituována 2.8.1 alkylovou skupinou s 1až 8 uhlíkovými atomy, 2.8.2 alkoxylovou skupinou s 1 až 8 uhlíkovými atomy, 2.9 alkylovou skupinu s 1 až8 uhlíkovými atomy, kteráje jednou nebo vícekrátsubstituována 2.9.1 arylovou skupinou se 6až 14 uhlíkovými atomy, 2.10 alkoxylovou skupinu s 1 až8 uhlíkovými atomy, kteráje jednou nebo vícekrátsubstituována - 5 - D znamená £ znamená X znamená 2.10.1 arylovou skupinou s 1až 14 uhlíkovými atomy, 2.11 atom halogenu, jako atomfluoru, chloru, bromu ne-bo jodu, 2.12 nitro-skupinu nebo 2.13 trifluormethylovou sku-pinu, c/ kovalentní vazbu, a/ aminokyselinu, b/ C-koncovou aminoskupinu -NR^ ,ve ktere R , které mohou býttotožné nebo odlišné, znamenají1/ alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, 2/ alkylovou skupinu s 1 až 3atomy uhlíku, která je jednounebo vícekrát substituována 2.1 atomem fluoru, 2.2 hydroxy-skupinou, 3/ cyklopropylovou skupinu, 4/ cyklopropylovou skupinu, kteráje jednou nebo vícekrát sub-stituována 4.1 atomem fluoru, 4.2 hydroxy-skupinou nebo 5/ atom vodíku, c/ kovalentní vazbu, a/ aminokyselinu, b/ kovalentní vazbu nebo c/ C-koncovou aminoskupinu -Nr\ve které R , které mohou být to-tožné nebo odlišné, mají výšeuvedený význam, a/ atom vodíku, b/ skupinu R1-CO, kde R1 má výšeuvedený význam, - 6 - c/ alkoxy-CO-skupinu, ve které alkoxylový zbytek mé 1 až 18 uhlíko-vých atomů, d/ cykloalkoxy-CO-skupinu, ve kteréoykloalkoxylový zbytek má 3 až18 uhlíkových atomů nebo e/ aryl-alkoxy-CO-skupinu, ve kteréarylový zbytek mé 6 až 14 uhlí-kových atomů a alkoxylový zbytekmá í až 3 uhlíkových atomů, Y znamená aminokyselinu nebo kovalentní vazbu,Z znamená aminokyselinu nebo kovalentní vazbu, nebo dimery peptidů obecného vzorce I s cystinem jako dime-rizujíeí složkou, jejich případné stereisomerní formy nebofysiologicky přijatelné soli peptidů obecného vzorce I, s výjímkou sloučeniny H-Tyr-Gln-Leu-Glu~Asn-Tyr-Cys-Asn-QH nebo H-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH. Výhodnými peptidy jsou peptidy obecného vzorce I, ve kterém A znamená Glu, pGlu, Gin, Leu, Met, Arg, Lys nebo Orn, B znamená Asn, Thr, Ser, Gly, Ala, Val nebo Ile, C znamená Tyr, Tyr/R1/, Phe/R2/, Trp/R2/ nebo Nal, D znamená Asp, Asn, L-Asp, D-Asn, bAla, Azagly-NH^ ne- bo NH-R3, Ξ znamená NH^, Asp, Asn, Glu nebo Gin, X znamená atom vodíku nebo acylový zbytek, 1 2 3 R , R a R mají výše uvedený význam, Y znamená tyrosin nebo kovalentní vazbu a Z znamená glutamin, leucin nebo kovalentní vazbu. - 7 - /11/
Obzvláště výhodnými peptidy jsou peptidy obecnéhovzorce II
X-C-Cys-L ve kterém C znamená Tyr, D znamená Asp, bo NH-R3 aX znamená a/ b/ c/ d/ e/
Tyr/R1/, Phe/R2/, Trp/R2/ nebo Kal,
Asn, D-Asp, D-Asn, bAla, Azagly-KH^ ne- atom vodíku,skupinu R^-CO, alkoxy-CO-skupinu, ve které alkoxylovýzbytek má 1 až 18 uhlíkových atomů/,cykloalkoxy-CO-skupinu, ve které cyklo-alkoxylový zbytek má 3 až 18 uhlíkovýchatomů, nebo aryl-alkoxy-CO-skupinu, ve které arylo-vý zbytek má 6 až 14 uhlíkových atomůa alkoxylový zbytek má 1 až 8 uhlíko-vých atomů, nebo dimery peptidú obecného vzorce II s cystinem jako dime-rizující složkou, jejich případné stereoisomerní formy nebofysiologicky přijatelné soli peptidů obecného vzorce II,přičemž R , R a RJ mají výše uvedený význam.
Mimořádně výhodnými jsou peptidy
Asn Tyr Cys Asn neboTyr Cys Asn.
Pod pojmem aminokyseliny jsou míněny například stereoisomerní formy, t.zn. D- nebo L-formy následujících slouče-nin : alanin, cystein, kyselina asparagová, kyselina glutamové, fenylalanin, glycin, histidin, isoleucin, lysin, leucin, methionin, asparagin, prolin, glutamin, arginin, šeřin, threonin, valin, tryptofan, tyrosin, kyselina 2-aminoadipová,kyselina 3-aminoadipová,beta-alanin, kyselina 2-aminoméselná,kyselina 4-aminomóselná,kyselina piperidové,kyselina 6-aminokapronová,kyselina 2-aminoheptanová, 2-/2-thienyl/glycin,pěnicilamin, kyselina 2-aminoisomáselnó,kyselina 3-aminoisomóselnó,kyselina 2-aminopimelovó,desmosin, kyselina 2,2-diaminopimelovó,kyselina 2,3-diaminopropionová, - 9 - N-ethylglycin, 3-/2-thienyl/alanin, N-ethylasparagin, hydroxylysin, allo-hydroxylysin, 3- hydroxyprolin, 4- hydroxyprolin,isodesmosin,allo-isoluecin,N-methylglycin,sarkosin,N-methylisoleucin6-N-methyllysin,N-methylvalin,norvalin,norleucin neboornitin.
Zkrácený zápis aminokyselin se zde řídí obvyklýmizásadami, které pro takový zápis všeobecně platí /Schroder,Lubke, The Peptides, sv.I, New York 1965, str. XXII až XXIII;Houben-Weyl, Methoden der Org. Chemie, sv. XV/1 a 2, Stutt-gart 1974/.
Aminokyselina pGlu znamená pyroglutamyl, Nal zname-ná 3-/2-naftyl/alanin, Azagly-N^ znamená sloučeninu vzorceN^-NH-CON^ a D-Asp znamená jD-formu kyseliny asparagové.Peptidy jsou svojí chemickou povahou amidy kyselin a při hy-drolýze se rozpadají na aminokyseliny.
Pod výrazem "cykloalkyl" se rozumí také alkylem sub-stituované zbytky, jako například 4-methylcyklohexylový zby-tek nebo 2,3-ďimethylcyklopentylový zbytek.
Arylovou skupinou se 6 až 14 uhlíkovými atomy je na- příklad fenylová skupina, naftylová skupina, bifenylová sku- 10 pina nebo fluorenylová skupina; výhodnými arylovými skupina-mi jsou fenylová skupina a naftylová skupina. To samé platípro odvozené zbytky, jakými jsou například aryloxy-zbytek,aralkylový zbytek a aralkoxy-zbytek. Pod pojmem "aralkylovýzbytek"se rozumí alkylová skupina s 1 až 8 uhlíkovými atomyvázaná na nesubstituovaný nebo substituovaný arylový zbyteks 6 až 14 uhlíkovými atomy, například benzylový zbytek, 1-naftylmethylový zbytek, 2-naftylmethylový zbytek, halogen-benzylový zbytek a alkoxybenzylový zbytek, přičemž se všakuvedeny aralkylový zbytek neomezuje pouze na jmenované zbyt-ky.
Pod pojmem "alkylová skupina" se rozumí alkylová sku-pina s přímým nebo rozvětveným uhlovodíkovým řetězcem. Tosamé platí pro zbytky odvozené od alkylové skupiny, jakýmijsou například alkoxylový zbytek, aralkylový zbytek a alka-noylový zbytek.
Pod pojmem "fysiologicky přijatelné soli sloučeninobecného vzorce I" se rozumí zejména farmaceuticky použitel-né nebo netoxické soli. Takové soli budou například tvořenyreakcí sloučenin obecného vzorce I, které obsahují kyseléfunkční skupiny, například karboxylové skupiny, s bázemiodvozenými od alkalických kovů a kovů alkalických zemin,jakými jsou například sodík, draslík, hořčík a vápník, nebos fysiologicky přijatelnými organickými aminy, jakými jsounapříklad triethylamin a tris-/2-hydroxyethyl/amin. Slouče-niny obecného vzorce I, které obsahují bázické skupiny, jakonapříklad aminoskupiny nebo guanidiniové skupiny, tvoří solis anorganickými kyselinami, jakými jsou například kyselinasolná, kyselina sírová nebo kyselina fosforečná, a s orga-nickými kyselinami, tj. s organickými karboxylovými nebosulfonovými kyselinami, jakými jsou například kyselina octo-vá, kyselina citrónová, kyselina benzoová, kyselina maleino-vá, kyselina fumarová, kyselina vinná a kyselina p-toluen-sulfonová. Sloučeniny, které mají stejný počet kyselých abázických skupin, tvoří vnitřní soli a nejsou odkázány na 11 třetí solnotvornou složku. Předmětem vynálezu je rovněž způsob výroby peptidůobecného vzorce I, jehož podstata spočívá v tom, že se a/ uvede v reakci segment s C-koncovou volnou karbo-xylovou skupinou nebo jeho aktivovaný derivát sodpovídajícím segmentem s N-koncovou volnou ami-noskupinou nebo se b/ peptid postupně vykonstruuje, načež se ve sloučenině získané ve stupni a/ nebo b/ případ-ně odštěpí jedna nebo více ochranných skupin zavedených dosloučenin za účelem dočasné ochrany dalších funkčních sku-pin a takto získané sloučeniny obecného vzorce I se případ-ně převedou na jejich fysiologicky přijatelné soli.
Peptidy podle vynálezu se připraví obecnými metodamipoužívanými běžně v chemii peptidů spočívajícími bud v po-stupné výstavbě peptidů od C-koncového konce nebo v kopula-ci vhodných segmentů /Houben-Weyl, Methoden der OrganischenChemie, sv. 15/1,2/. Peptidové kopulace mohou být napříkladprovedeny metodou směsných anhydridů, přes aktivní esternebo karbodiimidovou metodou a to zejména za přídavku látekurychlujících reakci a bránících racemizaci, jakými jsounapříklad 1-hydroxybenzotriazol, N-hydroxysukcinimid, 3-hy-droxy-4-oxo-3,4-dihydro-1,2,3-benzotriazin, N-hydroxy-5-nor-bornen-2,3-dikarboximid, a dále za použití aktivních deri-vátů 1-hydroxybenzotriazolu nebo anhydridů kyseliny fosfo-rečné, fosfonové nebo fosfinové při reakční teplotě meziteplotou -10 °C a teplotou varu použitého rozpouštědla, svýhodou při teplotě mezi -5 a 40 °C.
Vhodnými rozpouštědly pro takové reakce jsou dimethyl-formamid, dimethylacetamid, N-methylpyrrolidon nebo dimethyl-sulfoxid. 12
Pokud to rozpustnost reakčních složek dovoluje, mo-hou být jako rozpouštědla použity methylenchlorid, chloro-form nebo tetrahydrofuran. Uvedené metody přípravy peptidůjsou popsány: Meinehofer-Gross, "The Peptides/, AcademiePress, sv. I, /1979/. V případě, že jsou funkční skupiny v bočním řetězciaminokyselin chráněny za účelem zabránění vedlejších reakcínebo za účelem syntézy speciálních peptidů chráněny vhodný-mi ochrannými skupinami /viz například T.W. Greene, "Pro-tective Groups in Organic Synthesis/, potom se především používají:
Arg/Tos/,
Arg/Mts/,
Arg/Mtr/,
Arg/PMC/,
Asp/OBzl/,
Asp/OBut/,
Cys~/4-MeBzl/,
Cys/Acm/,
Cys/SBut/,
Glu/OBzl/,
Glu/OBut/,
His/Tos/,
His/Fmoc/,
His/Lnp/,
His/Trt/,
Lys/Cl-Z/,
Lys/Boc/,
Met/O/,
Ser/Bzl/,
Ser/But/,
Thr/Bsl/,
Thr/But/,
Trp/Mts/,
Trp/CHO/,
Tyr/Br-Z/, - 13 -
Tyr/Bzl/ nebo
Tyr/But/.
Jakožto ochranné skupiny aminové skupiny se výhodněpoužívají benzyloxykarbonylový zbytek /Z-/, který je odště-pitelný katalytickou hydrogenací, 2-/3,5-ůimethyloxyfenyl/-propyl/2/oxykarbonylový zbytek /Ldz-/, který je odštěpitel-ný slabými kyselinami, nebo tritylový zbytek /Trt-/, kterýje rovněž odštěpitelný slabými kyselinami, a 9-fluorenylme-thyloxykarbonylový zbytek /Fmoc-/, který je odštepitelný se-kundárními aminy. Skupina SH cysteinu může být blokovánacelou řadou ochranných skupin. S výhodou se zde používajítritylový zbytek /Trt-/ a S-terc.butylový zbytek /StBu-/.Tritylový zbytek může být odštěpen buď oxidací jodem zavzniku cystinových sloučenin nebo redukujícím kyselým ště-pením za vzniku cysteinových sloučenin /Liebigs Ann. Chem.1979, 227-247/.
Naproti tomu S-terc.butylový zbytek bude nejlépeodštěpen redukčně působením tributylfosfinu /Aust. J. Chem.19 /1966/ 2355-236Ο/. Skupiny OH a COOH v bočních řetězcíchse nejlépe chrání kysele odštěpitelným terc.butylovým zbyt-kem /tBu-/ /viz také: Meienhofer-Gross: "The Peptides", sv.3/.
Sloučeniny obecného vzorce I nebo obecného vzorce IIa jejich fysiologicky přijatelné soli slouží především jakoúčinné látky pro farmaceutické přípravky pro léčení cukrovky/Diabetes mellitus/ nebo cukrovky nezávislé na insulinu. Předmětem vynálezu je proto také farmaceutická kompo-zice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje alespoň jed-nu sloučeninu obecného vzorce I nebo II a/nebo alespoň jednuz jejich fysiologicky přijatelných solí v rozpuštěné, amorfnía/nebo krystalické formě, výhodně v amorfní a/nebo krysta-lické formě, přičemž nejsou vyloučeny ani sloučeniny H-Leu- - Η -
Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH nebo H-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-CysAsn-OH.
Pro tuto farmaceutickou kompozici jsou vhodnými pepti dy :
Asn Tyr Cys Asn, H-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH nebo
Tyr Cys Asn a/nebo jejich fysiologicky přijatelné soli.
Farmaceutickou kompozicí je s výhodou roztok nebosuspense pro injekční účely s hodnotou pH mezi asi 3,0 a9,0, s výhodou mezi asi 5,0 a 8,5, který, popřípadě kteráobsahuje vhodné isotonické činidlo, vhodné konzervační či-nidlo a případně vhodný pufr, jakož i případně depotní účin-nou složku, všechno přirozeně ve sterilním vodném roztokunebo ve sterilní vodné suspenzi. Zbytek kompozice je tvořennosičem.
Vhodnými isotonickými činidly jsou například glyce-rin, glukosa, mannit, chlorid sodný a vápenaté nebo horeč-naté sloučeniny, jako například chlorid vápenatý nebo chlo-rid hořečnatý.
Vhodnými konzervačními činidly jsou například fenol,m-kresol, benzylalkohol a/nebo/p-hydrčxy\ester kyseliny /ben-zoové.
Jako pufry mohou být zejména k nastavení hodnoty pHmezi 5,0 a 8,5 použity například octan sodný, citran sodnýa fosforečnan sodný. Jinak jsou k nastavení hodnoty pH kom-pozice vhodné i fysiologicky nezávadné zředěné kyseliny/typicky kyselina chlorovodíková/ popžípadě louhy /typickyhydroxid sodný/.
Za účelem modifikace účinkového profilu kompozice po- dle vynálezu mohou být do kompozice přimíšeny i modifikované - 15 - /viz EP-B 132 769 a EP-B 132 770/ a/nebo nemodifikovanéinsuliny, s výhodou hovězí, vepřový nebo lidský insulin,zejména lidský insulin.
Farmaceutické kompozice podle vynálezu se připravítak, že se do vhodné aplikační formy upraví směs alespoňjedné sloučeniny obecného vzorce I nebo II a/nebo alespoňjedné z jejich fysiologicky přijatelných solí a případněmodifikovaných a/nebo nemodifikovaných insulinů nebo jejichderivátů s fysiologicky přijatelným nosičem a případně svhodnými přísadami a pomocnými látkami. V následující části popisu bude vynález blíže objas-něn pomoci konkrétních příkladů jeho provedení, přičemžtyto příklady mají pouze ilustrativní charakter a vlastnirozsah vynálezu, definovaný formulací patentových nároků,nikterak neomezuji. Příklady provedení vynálezu Příklad 1
H-Tyr-Cy s-A sn-OH
Stupeň 1 a
Fmoc-Tyr/tBu/-Cys/Trt/-Asn-OtBu K roztoku 3,4 g Fmoc-Tyr/tBu/-OH, 3)95 g /7,4 molu/H-Cys/Trt/-Asn-QtBu /Liebigs Ann. Chem. 1979, 242/, a 1 gHOBT v 50 ml dimethylformamidu se při teplotě 0 “C a za mí-chání přidá 1,63 g DCC, načež se získaná směs míchá po dobujedné hodiny při teplotě 0 °C a potom se odstaví přes noc - 16 - při pokojové teplotě. Druhý den se filtrací pod tlakem oddělí sraženina a filtrát se zahustí. Zbytek se rozetře s octanem ethylnatým, přičemž se získá 2,83 g produktu. Z mateč-ného louhu se izoluje ještě 3,63 g produktu.
Celkový výtěžek: 6,46 g /89 %/; C58H62N4°8 /975,21S/ teplota tání: 112-114 °C; / oC.7^ = -15,3° /c=1, v methanolu/.
Stupeň 1b H-Tyr/tBu/-Cys/Trt/-Asn-OtBu 6 g /8,15 molu/ Fmoc-Tyr/tBu/-Cys/Trt/-Asn-OtBu serozpustí ve 100 ml dimethylformamidu. K takto získanému roztoku se potom přidá 6,8 g diethylaminu a směs se nechá státpo dobu 10 minut při pokojové teplotě. Potom se směs zahus-tí za vysokého vakua a zbytek se chromatografuje na silika-gelu za použití eluční soustavy tvořené methylenchloridem,kterou se eluuje lipofilní nečistota, zatímco požadovanálátka se eluuje směsí methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 9,5 θ, 5 · Výtěžek: 4,4 olejovitého produktu /95 %/; c43H52N4°6S /752,976/.
V
Stupen 1c
H-Tyr-Cys-Asn-OH 2,2 g /2,9 mmolu/ H-Tyr/tBu/-Cys/Trt/-Asn-OtBu serozpustí ve směsi 25 ml kyseliny trifluoroctové a 25 mlethylmerkaptanu. Po 4 hodinách se roztok nalije do 250 mlvody. Vodný roztok se potom třikrát extrahuje etherem anakonec vysuší mrazovou sublimací /lyofilizací/. Výtěžek: 1,05 g /91 %/; - 17 - /-°^.7ρ^ - -1,1° /c=1 ve vodě/. Příklad 2
H-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH
Stupen 2a
Fmoc-Asn-Tyr/tBu/-Cys/Trt/-Asn-0t3u K roztoku 2,2 g /2,9 mmolu/ H-Tyr/tBu/-Cys/Trt/-Asn-OtBu, 1,04 g Fmoc-Asn-OH, 0,39 g HOBt ve 30 ml dimethylform-amidu se za míchání a při teplotě 0 °C přidá 0,64 g DCC.
Směs se potom míchá po dobu jedné hodiny při teplotě 0 °C ,načež se přes noc odstaví při pokojové teplotě. Druhého dnese sraženina oddělí podtlakovou filtrací a filtrát se zahus-tí. Zbytek se rozpustí v octanu ethylnatém a potom postup-ně extrahuje vodou, nasyceným roztokem hydrogenuhličitanusodného, roztokem hydrogensíranu draselného a vodou, načežse vysuší nad síranem sodným. Zbytek se rozetře s petrol-etherem. Výtěžek: 1,98 g /63 %/. C62H68H6°10S Z’08?-323/; p2 = -18,8° /c=1 v methanolu/.
Stupeň 2b F-Asn-Tyr/tBu/-Cys/trt/-Asn-OtBu 1,9 g /1,74 mmolu/ Fmoc-Asn-Tyr/tBu/-Cys/Trt/-Asn-OtBu se rozpustí v 50 ml dimethylformamidu. K takto získa-nému roztoku se potom přidá 1,8 ml diethylaminu a směs seodstaví na dobu 15 minut při pokojové teplotě. Reakční směsse potom zahustí za vysokého vakua a zbytek se rozetře v 18 - octanu ethylnatém a vysuší za vakua. Výtěžek: 0,98 g /65 %/; C47H58N6°8S /867,081/; /”<*>7^ = -7,2° /c=1, v methanolu/.
Stupeň 2c
H-Asn-Tyr-Cys-Asn-QH 0,9 g /1 mmol/ výše uvedeným způsobem získané slou-čeniny se rozpustí ve směsi 10 ml ethylmerkaptanu a 10 mlkyseliny trifluoroctové. Po 4 hodinách se reakční směs na-lije do 100 ml vody. Vodný roztok se potom třikrát extra-huje etherem a vysuší mrazovou sublimací /lyofilizací/.Výtěžek: 455 mg /89 %/; C20H28N6°8S /512,547/ /”oC7 = -26,0° /c=1 , ve vodě/. Příklad 3
Acetyl-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH K roztoku 2,0 g /1,56 mmolu/ H-Leu-Glu/OtBu/-Asn-Tyr/tBu/-Cys/Trt/-Asn-OtBu-trifluoracetátu /Liebigs Ann.Chem. 1979, 243/ ve 30 ml dimethylformamidu se přidá 0,4 mlN-ethylmorfolinu a 0,53 g acetyl-N-hydroxysukcinimidu. Počtyřech hodinách při teplotě okolí se reakční směs zahustiza vysokého vakua. Zbytek se rozpustí v octanu ethylnatéma získaný roztok se postupně vytřepe do nasyceného vodné-ho roztoku hydrogenuhličitanu sodného, vodného roztoku hy-drogensíranu draselného a do vody. Přitom vypadne sraženinakterá se oddělí podtlakovou filtraci, přičemž se získá 1,3produktu. Ethylacetátová fáze se vysuší nad síranem sodnýma zahustí, Zbytek se rozetře s diethyletherem a odsaje. Zís - 19 - ká se 0,8 g produktu.
Celkový výtěžek: 2,1 g /vyšší než 100 %/. 1»3 g /asi 1,07 mmolu/ výše uvedeným způsobem získa-né čisté šarže Ac-Leu-Glu/OtBu/-Asn-Tyr/tBu/-Gys/Trt/-Asn-OtBu se rozpustí ve směsi 30 ml kyseliny trifluoroctové a30 ml ethylmerkaptanu. Po čtyřech hodinách se reakční směsnalije do 300 ml vody a vodný roztok se třikrát extrahujediethyletherem. Vodná fáze se potom vysuší mrazovou subli-mací /lyofilizací/. Výtěžek: 740 mg /87 //; C33H48N8°13S /79ó’86/; / ~ -25 »1° /c=1 , ve vodě/. Příklad 4
Syntéza H-Tyr/BuV-Gln-Leu-Glu/OBuV-Asn-Tyr/BuV-Cys/Trt/-Asn-OBut.HBr /7 HBr/
Stupeň 4a
Ddz-Tyr/BuV-Gln-ONb /16/ K roztoku 25,24 g /55 mmolu/ Ddz-Tyr/BuV-QH, 15)68 g/50 mmolů/ H-Gln-OKb.HCl a 6,75 g 1-hydroxybenzotriazolhy-drátu ve 100 ml N,N-dimethylformamidu se při teplotě -3 °Cpřidá 6,4 ml /50 mmolů/ N-ethylmorfolinu a 10,5 g dicyklo-hexylkarbodiimidu. Tato směs se míchá po dobu jedné hodinypři teplotu 0 °C a potom ještě po dobu jedné hodiny při te-plotě okolí, načež se odstaví přes noc při teplotě okolí.Vyloučená sraženina se oddělí podtlakovou filtrací a filtrátse zahustí. Rezultující olej se rozpustí v octanu ethylnatéma získaný roztok se potom postupně promyje vodným roztokemhydrogenuhličitanu sodného, citrátovým pufrem /pH 3/ a vodou, - 20 načež se vysuší nad síranem sodným a zahustí. Olejovitýprodukt se rozetře s petroletherem na prášek a oddělí pod-tlakovou filtrací Potom se třikrát povaří vždy se 100 mldiisopropyletheru a dekantuje. Nakonec se rozetře se stude-ným diisopropyletherem, oddělí podtlakovou filtrací a pro-myje petroletherem. Výtěžek: 32,8 g /92 %/; teplota tání: 80 až 90 °C; /~= + 15,1° /c = 1, v methanolu/: elementární analýza: C37H46N4°11 C/r/ H/%/ N/%/ jí 4W Η- N vypočteno 61 ,48 6,41 7,75 nalezeno 61,3 6,7 7,9.
Stupeň 4b
Dd z-Tyr/Bu1/-Gln-OH.d i cyklohexylami n K roztoku 32,5 g /45 mmolů/ produktu 16 v 500 ml me-thanolu se přidá 5 ml vody a Pd/BaSO^ a směs se hydrogenujjepo dobu 7 hodin. Potom se katalyzátor odstraní podtlakovoufiltrací a filtrát se zahusti. Rezultující olej se potomrozpustí ve 250 ml octanu ethylnatého. K získanému roztokuse přidá 11,3 ml /55 mmolů/ dicyklohexylaminu a směs se ne-chá stát po dobu několika hodin při teplotě 3 °C, načež sevyloučená sraženina oddělí podtlakovou filtrací. Tato sra-ženina se potom rozetře v třecí misce s octanem ethylnatým,oddělí podtlakovou filtrácí a vysuší za vakua. Výtěžek: 27 g /78 %/; teplota tání: 170-171 °C; rot 723 = +,o ,2° /c = 1, v methanolu/.
Elementární analýza: C42H64N4°9 C/%/ H/%/ N/%/ vypočteno 65,6 8,39 7,28 nalezeno 65,4 8,5 7,3 · - 21
Stupeň 4c
Ddz-Tyr/BuV-Gln-OH /17/ 2,9 g /3,7 mmolu/ Ddz-Tyr/Bu^/-Gln-OH.dicyklohexyl-aminu se rozdělí mezi octan ethylnatý a citrátový pufr /pH3/. Ethylacetátová fáze se promyje vodou až do neutrálníreakce, vysuší nad síranem sodným a zahustí. Jako.zbytekse získá amorfní produkt 17. Výtěžek: 2 g /90 %/; teplota tání: 110-115 °C; /~0C.7^2 - + 19,8 /c = 1, v methanolu/.
Elementární analýza: C30H41N3O9 /587,68/ C/%/ H/%/ N/%/ vypočteno 61,31 7,03 7,15 nalezeno 60,6 7,2 7,0.
Stupeň 4d
Ddz-Tyr/But/-Gln-Leu-Glu/OBut/-Asn-Tyr/Bu^'/-Cys/Trt/-Asn-OBu1 /18/ 9,7 g /16,5 mmolu/ produktu 17, 19,2 g /15 mmolů/sloučeniny z přikladu 3 a 2,025 g /15 mmolů/ HOBt se připokojové teplotě a za míchání rozpustí ve 30 ml N,N-dime-thylformamidu. Směs se potom ochladí na teplotu 0 °C, přidáse k ni 1,95 ml /15 mmolů/ N-ethylmorfolinu, jakož i roztok3>3 g /16 mmolů/ dicyklohexylkarbodiimidu a 9 ml N,N-dime-thylformamidu a směs se nejdříve míchá při teplotě 0 Cpo dobu ječné hodiny a potom ještě čtyři hodiny při pokojo-vé teplotě, načež se pres noc nechá stát při pokojové teplo-tě a dicyklohexylmočovina se odsaje. Po dvojnásobném pro-mytí vždy 4,5 ml Ν,Ν-dimethylformamidu se filtrát přilijedo 1 59 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sod- - 22 ného a směs se míchá tak dlouho, až se vyloučí prášková sra-ženina. Tato sraženina se odsaje, rozetře s citrétovým puf-rem, znovu odsaje, promyje vodou až do neutrální reakce avysuší při tlaku asi 13,3 Pa /výtěžek: 23,1 g/. Tento suro-vý produkt se zahřeje na parní lázni až téměř k teplotě varu,řídká suspenze se přechovává přes noc při teplotě 3 °C, sra-ženina se odsaje a promyje octaném ethylnatým a etherem.Výtěžek: 20 g /76,8 ^/; C&J t? = "10,2° /c = 1, v methanolu/. Získaný produkt se rozkládá při teplotě od 20? °C a zuhelna-tí zhruba při teplotě 250 °C; aminokyselinová analýza:
Asp 2,00; Glu 2,01; Cys 0,75; Leu 0,99; Tyr 1,95·
Elementární analýza: C92H1 23N11°20S ^735,1 5/ C/%/ H/%/ N/%/ S/%/ vypočteno 63,68 7,15 8,88 1 ,85 nalezeno 62,0 7,2 6,6 2,1.
Stupeň 4e H-Tyr/But'/-Gln-Leu-Glu/QBut/-Asn-Tyr/But'/-Cys/Trt/-Asn/GBut/.HBr /7. HBr/ 3,5 g /2 mmoly/ produktu 18 se za míchání rozpustíve směsi 1,75 ml kyseliny trifluoroctové /20 mmolů/, 0,35 ne-vody a 33 ml methylendichloridu /asi 35 ml 5% roztoku v ky-selině trifluoroctové s 1 % vody/ a 3»5 ml anisolu. Získanýroztok se potom míchá po dobu 3 hodin při pokojové teplotě,načež se k němu přidá pyridin v množství 2 ml /24,8 mmolu/a směs se zahustí při tlaku asi 13»3 Pa. Zbytek se rozetřes etherem, podstlakově odfiltruje, promyje etherem, vysuší, - 23 - promuje vodou a vysuší nad oxidem fosforečným /výtěžek: 3,35 g/· 2a účelem dalčího čištění se produkt dvakrát krát-ce povaří vždy s 20 ml octanu ethylnatého, načež se za teplapodtlakově odfiltruje. Potom se produkt ještě promyje ethe-rem. Výtěžek: 3,0 g /92 %/; teplota tání: 255-265 °C /za rozkladu/; /-dj |2 = -20,2° /c - 1, v methanolu/.
Aminokyselinová analýza:
Asp 1,97; Glu 2,00; Cys 0,6l ; Leu 1,00; Tyr 2,01. Elementární analýza: G80H110ΒγΝ11°16S 593,8/ C/%/ H/%/ N/%/ S/%/ vypočteno 60,23 6,96 9,67 2,01 nalezeno 60,6 7,0 9,5 2,2. Příklad 5
Biologická aktivita peptidů podle vynálezu obecnéhovzorce I neboli byla stanovena pomocí vypreparovaných tuko-vých buněk a výseků bránice /diafragma/ krys. Výraz tripep-tid se vztahuje na Tyr Cys Asn-OH a výraz hexapeptid se vzta-huje na acetyl-Leu Glu Asn Tyr Cys Asn-OH. Výraz "basální"se vztahuje na aktivitu bez stimulace, výraz insulin sevztahuje na lidský insulin a dpm znamená radioaktivní rozpa-dy za minutu.
Preparace tukových buněk z krys probíhala následují-cím způsobem: tuková tkáň nadvarlat /krysy Wistar s tělesnou hmotností 160 až 180 g a s žádným omezením v potravě/ se zpracuje kol- lagenasou a získané osamostatnělé tukové buňky se vícekrát - 24 - promyjí flotací. Příprava výseků krysí diafragmy: z vícekrát promyté hemi-diafragmy /krysy Wistar s tělesnou hmotnosti 60 až 70 g as žádným omezením v potravě/ byly vyseknuty malé kousky/průměr 5 mm/ tkáně.
Oba následující testy zahrnují insulinem stimulová-telné pohlcení glukosy, které vyžaduje insulinem indukovanoukaskádu přenosu signálů a transport glukosy, a to nezávislena tom, zda je glukosa metabolizována oxidačně /glykolysa,přes pentosofosfát/ nebo neoxidačně. Je sledována transfor-mace na lipidy, glykogen nebo membránou neprostupné vedlej-ší produkty /glukoso-6-fosfát/, avšak nikoliv vznik laktátu. a/ Krysí tukové buňky se inkubují v přítomnosti nebo nepří-tomnosti insulinu a peptidu s D-/~U-^C_7glukosou /koncovákoncentrace D-glukosy 22 ^uM/. Tukové buňky se potom oddě-lí odstředěním přes vrstvu silikonového oleje od ostatníhomédia, izolují se a potom se stanoví radioaktivita přidru-žené k těmto buňkám. b/ Výseky krysí diafragmy se inkubují v přítomnosti nebonepřítomnosti insulinu a peptidu s D-/TV-1^C_7glukosou /kon-cová koncentrace D-glukosy 75/Ulí/. Médium se odsaje. Výsekytkáně se několikrát promyjí a potom se solubilizují zpraco-váním alkálií za účelem stanovení radioaktivity přidruženék této tkáni. Získané výsledky jsou shrnuty v následující tabulce 1. - 25 -
Tabulka 1
Pohlcení glukosy b/ di-afragma a/ tukové buňky Insu- Tri- Hexa- Insu- Tri- Hexa- lin peptid peptid lin peptid peptid /~dp m_7 0,1 πώί 7551 7429 1838 1488 0,5 mM 8540 7752 2947 1917 1 mM 11588 8597 6533 4218 0,5 ng 10055 4379 5 ng 20841 26312 basální 7348 1235 Příklad 6
Transport glukosy
Tukové buňky a výseky diafragmy byly získány stejnýmpostupem jako v příkladu 5· Následující testy zahrnuji vý-lučně insulinem stimulovatelný specifický transport glukosy/ulehčená difuse/ přes plasmatickou membránu prostřednictvímnosiče glukosy včetně insulinem indukované kaskády přenosusignálů. Vliv glukosového metabolismu na transport glukosybyl vyloučen použitím nemetabolisovatelného glukosovéhoanalogu. a/ Krysí tukové buňky byly inkubovény v přítomnosti nebo ne - 26 - přítomnosti insulinu a peptidu s 2-deoxy-L-/-!-3H_7gluko-sou /koncová koncentrace L-glukosy 0,2 mM/ a L-/~1glukosou /netransportovatelná/. Za účelem stanovení radio-aktivity / /"3H_7 a /”14C_7 se buňky oddělí od media odstře-děním přes vrstvu silikonového oleje. Specifický stereose-lektivní glukosový transport se vypočte jako rozdíl mezicelkovou radioaktivitou přidruženou k tukovým buňkám //~3H__7glukosa/ a radioaktivitou přidruženou k těmto buňkám difúzía nespecifickým vlivem //-14C_7glukosa/. b/ Výseky krysí diafragmy se inkubují v přítomnosti nebo ne-přítomnosti insulinu a peptidu s 2-desoxy-L-/~1-3H_7glukosou/koncová koncentrace L-glukosy 0,1 mM/ a L-/“1-14C_7glukosouVýseky tkáně byly potom odděleny od média rychlou filtracípřes skleněnou fritu a intenzivně promyty. Radioaktivita seměří v alkalickém extraktu. Získané výsledky jsou shrnuty v následující tabulce 2.
Tabulka 2
Transport glukody a/ tukové buňky b/ diafragma
Insu- lin
Tri- Hexa Insupeptid peptid lín
Tri Hexa-peptid peptid /~~dpm_7 0,1 mM 2289 2218 8836 8450 0,5 mM 3055 2842 9822 8928 1 mM 5781 3922 11252 9676 0,5 ng 4851 10828 5 ng 20342 17750 basální 2311 8522 - 27 - Přiklad 7
Esterifikace in vitro Při tomto testu se míra insulinem stimulovatelnéesterifikace měří na transormaci glycerin-3-fosfétu na li-pidové produkty /triglyceridy, fosfolipidy/. Této esteri-fikaci se zúčastňují enzymy lipidové syntézy /napf. Acyl-CoA: L-glycerin-3-fosfát acyltransferasa/ včetně insulinemindikované kaskády přenosu signálů. Transport glukosy při-tom nehraje žádnou roli, jak to dokazuje chybějící inhibiceesterifikace cytochalasinem 3.
Krysí tukové buňky získané postupem popsaným v pří-kladu 5 se inkubují s D-glukosou /koncová koncentrace 33/uM/v přítomnosti nebo nepřítomnosti insulinu a peptidu, načežse za účelem permeabilizace plasmatickou membránou /bez po-rušení vnitřních membrán/ zpracují nízkými koncentracemisaponinu. Po přidání L-/ U-^C_7glycerin-3-fosfátu se vinkubaci pokračuje. Potom se přidá v toluenu rozpustnéscintilační činidlo a lipid se od vodné fáze oddělí odstře-děním. Toluenová fáze obsahující lipid se odstraní a stano-ví se její radioaktivita. Získané výsledky jsou uvedené vnásledující tabulce 3.
Tabulka 3
Esterifikace tukovými buňkami
Insulin /fdpm 7 Tripeptid/~dpm 7 0,1 mií 3710 0,5 mM 4422 1 mil 5398 - 28
Tabulka 3 /pokračování/ 0,5 ng 5 ng 364Ο basální 3842 Příklad 8
Lipogenese
Krysí tukové buňky,získané postupem podle příkladu5, se zpracuji nízkými koncentracemi trypsinu za účelemproteolytické inaktivace insulinových receptorů. Po přídav-ku protease-inhibitorů se tukové buňky dvakrát promyjí flo- tací a v inkubaci se pokračuje po dobu 15 minut při teplotěO * > 37 C. Tyto buňky se potom použijí pro test na stimulacilipogenese peptidy. Kontrolní inkubace s insulinem ukazuje,že trypsinem ošetřene buňky vykazují je velmi malou insu-linem stimulovanou lipogenesi a tím i jen ohraničený početfunkčních insulinových receptorů /s ohledem na vázání insu-linu/. Tento test takto měří stimulaci lipogenese zásahydo insulinem indikované kaskády přenášení signálů po vázáníinsulinu jeho receptory. Získané výsledky jsou uvedeny vnásledující tabulce 4. - 29 -
Tabulka 4
Lipogenese
Insulin Tripeptid d pm_7 /“*d pm_7 0,1 mM 3250 0,5 mM 4145 1 mM 5072 5 ng 3067 0,5 ng - basální 2355 Přiklad 9
Profil krevní glukosy u myší
Myší samičky Charles River Wiga Balb-C s tělesnouhmotností 17 až 21 g /stáří asi 30 dnů/ dostávaly standard-ní potravu. 16 hodin před započetím testu již myši nedosta-ly žádnou potravu. Skupinám po 5 pokusných zvířatech bylintravenosně podán vodný roztok /pH 6/ sloučeniny z příkla-du 4 /oktapeptid/. Aplikační objem činil 0,3 ml/zvíře.
Tabulka 5 ukazuje hodnoty krevní glukosy v procen-tech jako rozdíl mezi kontrolní skupinou /5 pokusných zví-řat; aplikován pouze roztok pufru pH 6 v aplikačním objemu0,3 ml/zvíře/ a skupinou zvířat, kterým byl aplikován okta-peptid. V tabulce je uvedena vždy pro každou skupinu průměrná hodnota.
Claims (9)
- - 30 - Tabulka 5 Profil krevní glukosy Čas / minuty_7 Oktapeptid Γ"%7 500/ug/zvíre 1000/Ug/zvíře 20 - 2 -?1 40 - 5 -19 60 -13 -23 75 -21 -24 90 -21 -19 advokát ί?5Θ4 PRAHA 1, Ž»né g? - 31 - ΊΙ.-íd C λΛ3Γ3θν' λΥ3ΐν* A -d avan PATENTOVÉ NÁROKYl 6 I1X '8 t1. Peptid obecného vzorce I X-Y-Z-A-B-C-Cys-D-E , /1/ ve kterém A znamená a/ aminokyselinu nebo kovalentní vazbu, B znamená a/ aminokysdinu nebo kovalentní vazbu , a/ aminokyselinu, C znamená^ t,/ aromatickou kyselinu, která je nakruhu jednou nebo vícekrát substi-tuována 1/ obecným substituentem r\ kterýznamená 1.1 alkylovou skupinu s 1 až 18uhlíkovými atomy, 1.2 cykloalkylovou skupinu se 3až 18 uhlíkovými atomy, 1.3 arylovou skupinu s 6 až 14uhlíkovými atomy, 1.4 arylovou skupinu s 6 až 14uhlíkovými atomy, která jejednou nebo vícekrát substi-tuována 1.4.1 alkylovou skupinou s 1 až 8uhlíkovými atomy, nebo 1.5 alkylovou skupinu s 1 až 8uhlíkovými atomy, která je - 32 - jednou nebo vícekrát sub-stituována 1.5*1 arylovou skupinu se 6 až 14uhlíkovými atomy, p 2/ obecným substituentem R , kterýznamená 2.1 alkylovou skupinu-s 1 až 18uhlíkovými atomy, 2.2 cyk-L o alkylovou skupinu se 3až 18 uhlíkovými atomy, 2.3 alkoxylovou skupinu s 1 až18 uhlíkovými atomy, 2.4 cykloalkoxylovou skupinu se3 až 14 uhlíkovými atomy, 2.5 arylovou skupinu se 6 až 14uhlíkovými atomy, 2.6 arylovou skupinu se 6 až 14uhlíkovými atomy, která jejednou nebo vícekrát substi-tuována 2.6.1 alkylovou skupinou s 1 až 8uhlíkovými atomy, 2.6.2 alkoxylovou skupinou s 1 až 8uhlíkovými atomy, 2.7 aryloxyskupinu se 6 až 14uhlíkovými atomy, 2.8 aryloxy-skupinu se 6 až 14uhlíkovými atomy, která jejednou nebo vícekrát substi-tuována 2.8.1 alkylovou skupinou s 1 až 8uhlíkovými atomy, 2.8.2 alkoxylovou skupinou s 1 až8 uhlíkovými atomy, 2.9 alkylovou skupinu s 1 až 8uhlíkovými atomy, která je - 33 - jednou nebo vícekrát substi-tuována 2.9.1 arylovou skupinou se 6 až14 uhlíkovými atomy, 2.10 alkoxylovou skupinu s 1 až 8uhlíkovými atomy, která jejednou nebo vícekrát substi-tuována 2.10.1arylovou skupinou s 1 až 14uhlíkovými atomy, 2.11 atom halogenu, jako atom chlo-ru, bromu, fluoru nebo jodu, 2.12 nitro-skupinu nebo 2.13 trifluormethylovou skupinuc/ kovalentní vazbu, D znamená a/ aminokyselinu, b/ C-koncovou aminoskupinu -Nr\, ve které R , které mohou být totožné ne-bo oslišné, znamenají1/ alkylovou skupinu s 1 až 3 uhlíko- vými atomy, 2/ alkylovou skupinu s 1 až 3 uhlíko-vými atomy, která je jednou nebovícekrát substituována 2.1 atomem fluoru, 2.2 hydroxy-skupinou, 3/ cyklopropylovou skupinu, 4/ cyklopropylovou skupinu, která jejednou nebo vícekrát substituována 4.1 atomem fluoru, 4*2 hydroxy-skupinou, nebo 5/ atom vodíku,c/ kovalentní vazbu, E znamená a/ aminokyselinu, b/ kovalentní vazbu nebo - 34 - c/ C-koncovou aminoskupinu -NR3O, vekteré R , které jsou totožné neboodlišné, mají výše uvedený význam, X znamená a/ atom vodíku, b/ skupinu R^-CO, ve kterém R^ má výše uvedený význam, c/ alkoxy-CO-skupinu, ve které má alko-xylový zbytek 1 až 18 uhlíkových ato-mů, d/ cykloalkoxy-CO-skupinu, ve které mácykloalkoxylový zbytek 3 až 1 δ uhlí-kových atomů, nebo e/ aryl-alkoxy-CO-skupinu, ve které máarylový zbytek 6 až 14 uhlíkovýchatomů a alkoxylový zbytek má 1 až 8uhlíkových atomů, znamená aminokyselinu nebo kovalentní vazbua znamená aminokyselinu nebo kovalentní vazbu, nebo dimery peptidů obecného vzorce I s cystinem jako dime-rizující složkou, jejich případné stereoisomerní formy nebojejich fysiologicky přijatelné soli peptidu obecného vzor-ce I, s výjimkou sloučenin H-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH a H-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH.
- 2. Peptid obecného vzorce I podle nároku 1, ve kterém A znamená Glu, pGlu, Gin, Leu, Met, Arg, Lys nebo Orn, B znamená Asn, Thr, Ser, Gly, Ala, Val nebo IIe, C znamená Tyr/R1/, Phe/R2/, Trp/R2/ nebo Nal, D znamená Asp, Asn, D-asp, D-Asn, bAla, Azagly-NH^ ne- bo NH-R3, E znamená Asp, Asn, Glu, Gin nebo NH^, - 35 - X znamená vodík nebo acylový zbytek, 12 3 R , R a R mají významy uvedené v nároku 1, Y znamená tyrosin nebo kovalentní vazbu nebo Z znamená glutamin, leucin nebo kovalentní vazbu.
- 3. Peptid obecného vzorce II X-C-Cys-D , /11/ ve kterém C znamená Tyr, Tyr/RV, Phe/R^/, Trp/R^/ nebo Nal, D znamená Asp, Asn, D-Asp, D-Asn, bAla, Azagl-NH^ nebo NH-R3 aX znamená a/ vodík,b/ skupinu R^-CO, c/ skupinu alkoxy-Co s 1 až 18 uhlíkovými atomy,d/ cykloalkoxy-CO-skupinu se 3 až 18 uhlíkovými ato ay, e/ aryl-alkoxy-CO-skupinu, ve která arylová skupinamá 6 až 14 uhlíkových atomů a alkoxylová skupinamá 1 až 8 uhlíkových atomů, nebo dimery peptidů obecného vzorce II s cystinem jako dime1 2 1 ri2ující složkou, přičemž R , R a RJ mají význam uvedený vnároku 1, jejich případné stereoisomerní formy nebo fysio-logicky přijatelné soli peptidu obecného vzorce II.
- 4. Peptid obecného vzorce I podle nároku 1 se sekvencí Asn Tyr Cys Asn nebo Tyr Cys Asn. - 36 - 5· Farmaceutická kompozice, vyznačená tím,že obsahuje účinné množství alespoň jednoho peptidu obecné-ho vzorce I nebo II podle některého z nároků 1 až 4 v roz-puštěné, amorfní nebo krystalické formě.
- 6. Farmaceutická kompozice podle nároku 5, vyzna-čená tím, že obsahuje alespoň jeden modifikovanýnebo nemodifikovaný insulin nebo jeho derivát.
- 7. Způsob přípravy farmaceutické kompozice podle nároku5 nebo 6, v y z n a č e n ý t í m, že se do vhodné apli-kační formy upraví alespoň jedna sloučenina obecného vzor-ce I nebo II s fysiologicky přijatelným nosičem a případněs vhodnými přísadami a/nebo pomocnými látkami.
- 8. Způsob podle nároku 7,vyznačený tím, žese použije alespoň jeden modifikovaný nebo nemodifikovanýinsulin nebo jeho derivát.
- 9. Způsob přípravy peptidu obecného vzorce I podle ně^terého z nároků 1 až 4,vyznačený tím, že se a/ uvede v reakci segment s C-koncovou volnou kar-boxylovou kyselou skupinou nebo jeho aktivovanýderivát s odpovídajícím segmentem s N-koncovouvolnou aminoskupinou nebo se b/ peptid postupně zkonstruuje, a sloučenina získaná ve stupni a/ nebo b/ se případně zbaví jedné nebo více dočasně zavedených ochranných skupin pro ochranu ostatních funkcí a takto získané sloučeniny se pří- padně převedou na jejich fysiologicky přijatelné soli. - 37 -
- 10. Použití alespoň jednoho peptidu obecného vzorce Inebo II podle některého z nároků 1 až 4> přičemž nejsouvyloučeny H-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH nebo H-LeuGlu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH, pro výrobu farmacetické kompozicepro léčení Diabetes mellitus nebo cukrovky nezávislé nainsulinu. Zastupuje :
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4040574 | 1990-12-19 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS387991A3 true CS387991A3 (en) | 1992-07-15 |
| CZ284568B6 CZ284568B6 (cs) | 1999-01-13 |
Family
ID=6420676
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5461035A (cs) |
| EP (1) | EP0491361B1 (cs) |
| JP (2) | JP3378588B2 (cs) |
| KR (1) | KR100237948B1 (cs) |
| AT (1) | ATE177753T1 (cs) |
| AU (1) | AU643349B2 (cs) |
| CA (1) | CA2058020C (cs) |
| CZ (1) | CZ284568B6 (cs) |
| DE (1) | DE59109109D1 (cs) |
| DK (1) | DK0491361T3 (cs) |
| ES (1) | ES2130130T3 (cs) |
| FI (1) | FI105816B (cs) |
| GR (1) | GR3030510T3 (cs) |
| HR (1) | HRP940839B1 (cs) |
| HU (1) | HU222493B1 (cs) |
| IE (1) | IE914408A1 (cs) |
| IL (1) | IL100400A (cs) |
| NO (1) | NO308951B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ241029A (cs) |
| PT (1) | PT99850B (cs) |
| SK (2) | SK282361B6 (cs) |
| TW (1) | TW227004B (cs) |
| YU (1) | YU189891A (cs) |
| ZA (1) | ZA919938B (cs) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE59209745D1 (de) * | 1991-11-29 | 1999-10-21 | Hoechst Ag | Peptide mit insulinartiger Wirkung |
| SE0002716L (sv) * | 2000-07-18 | 2002-01-19 | Lars Wahlberg | Komposition mot insekter |
| WO2002055290A1 (fr) * | 2001-01-15 | 2002-07-18 | Societe De Technologie Michelin | Tambour de conformation pour la fabrication de pneumatiques |
| US7833513B2 (en) | 2004-12-03 | 2010-11-16 | Rhode Island Hospital | Treatment of Alzheimer's Disease |
| KR101909052B1 (ko) | 2017-02-09 | 2018-10-17 | 강원대학교산학협력단 | 인슐린의 a 사슬로부터 유래된 펩타이드 단편 및 이를 포함하는 당뇨병 또는 당뇨병성 창상의 예방 또는 치료용 약학 조성물 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2740406A1 (de) * | 1977-09-08 | 1979-03-22 | Hoechst Ag | Teilgeschuetzte human-insulin-a-kette und verfahren zu ihrer herstellung |
| DE2801175A1 (de) * | 1978-01-12 | 1979-07-19 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung cysteinhaltiger peptide |
| DD147942A1 (de) * | 1979-08-20 | 1981-04-29 | Guenter Losse | Verfahren zur herstellung von cystin-peptiden mit insulinaehnlicher wirkung |
| FR2525592B1 (cs) * | 1982-04-26 | 1984-09-14 | Pasteur Institut |
-
1991
- 1991-11-28 TW TW080109358A patent/TW227004B/zh not_active IP Right Cessation
- 1991-12-06 YU YU189891A patent/YU189891A/sh unknown
- 1991-12-17 FI FI915933A patent/FI105816B/fi active
- 1991-12-17 NZ NZ241029A patent/NZ241029A/xx not_active IP Right Cessation
- 1991-12-17 AT AT91121624T patent/ATE177753T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-12-17 DK DK91121624T patent/DK0491361T3/da active
- 1991-12-17 IL IL100400A patent/IL100400A/en not_active IP Right Cessation
- 1991-12-17 ES ES91121624T patent/ES2130130T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-17 DE DE59109109T patent/DE59109109D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-17 EP EP91121624A patent/EP0491361B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-18 NO NO914999A patent/NO308951B1/no not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 AU AU89825/91A patent/AU643349B2/en not_active Expired
- 1991-12-18 KR KR1019910023282A patent/KR100237948B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-18 CA CA002058020A patent/CA2058020C/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-18 JP JP33475591A patent/JP3378588B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-18 IE IE440891A patent/IE914408A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 SK SK232-2001A patent/SK282361B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 PT PT99850A patent/PT99850B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 SK SK3879-91A patent/SK282360B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 ZA ZA919938A patent/ZA919938B/xx unknown
- 1991-12-18 CZ CS913879A patent/CZ284568B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1991-12-18 HU HU9104009A patent/HU222493B1/hu active IP Right Grant
-
1994
- 1994-08-04 US US08/285,443 patent/US5461035A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 HR HRP-1898/91A patent/HRP940839B1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-06-15 GR GR990401585T patent/GR3030510T3/el unknown
-
2002
- 2002-10-02 JP JP2002289401A patent/JP3802863B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2205836C2 (ru) | Усовершенствованный способ получения предшественника инсулина с правильно соединенными цистиновыми мостиками | |
| US4649131A (en) | Growth hormone releasing factor analogs | |
| US5446130A (en) | Parathyroid hormone antagonists | |
| US5354900A (en) | An H-ANP peptide, pharmaceutical composition and method of use | |
| KR20010103772A (ko) | 공유적으로 가교결합된 인슐린 이량체 | |
| DK149597B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af calcitoninanaloge hentriaconpeptidderivater eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte eller komplekser deraf | |
| DK151034B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af somatostatinanaloge cyclopeptider eller fysiologisk taalelige syreadditionssalte eller komplekser deraf | |
| EP0155786B1 (en) | New peptide, and production and use thereof | |
| EP0017746B1 (en) | Peptides having somatostatin activity, compositions comprising them and process for making the peptides | |
| DK167361B1 (da) | Grf-analoge peptider, farmaceutisk acceptable salte heraf og fremgangsmaader til fremstilling af disse | |
| AU695315B2 (en) | Analogues of hGH-RH (1-29)NH2 having antagonistic activity | |
| US4734399A (en) | Growth hormone releasing factor analogs | |
| FI98731C (fi) | Menetelmä superaktiivisten insuliinianalogien valmistamiseksi | |
| EP0283956B1 (en) | Fluorine containing atrial natriuretic peptides | |
| CS387991A3 (en) | Short peptides with insulin activity | |
| JP3324804B2 (ja) | インシュリン様作用を有するペプチド | |
| EP0153865A2 (en) | Diuretic peptide, and production and use thereof | |
| US4474765A (en) | Biologically active peptides | |
| US5376635A (en) | Fluorine containing atrial natriuretic peptides | |
| JPH0667901B2 (ja) | ３―チオプロピオン酸誘導体の製造法 | |
| Hardy | Biological chemistry. Part (i) Peptides and proteins | |
| JPS6124598A (ja) | 〔Ｎｌｅ↑８，Ｎｌｅ↑１↑８〕−ｈ−ＰＴＨ（１−３４）ＮＨ↓２ | |
| JPS5890539A (ja) | レニン抑制ペプチド |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20111218 |