CS85292A3 - Process for preparing preparations containing biosynthetic pesticidalproducts and the use of the products obtained in such a manner - Google Patents

Process for preparing preparations containing biosynthetic pesticidalproducts and the use of the products obtained in such a manner Download PDF

Info

Publication number
CS85292A3
CS85292A3 CS92852A CS85292A CS85292A3 CS 85292 A3 CS85292 A3 CS 85292A3 CS 92852 A CS92852 A CS 92852A CS 85292 A CS85292 A CS 85292A CS 85292 A3 CS85292 A3 CS 85292A3
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
tannin
culture
paste
added
microorganisms
Prior art date
Application number
CS92852A
Other languages
Czech (cs)
Inventor
Rene Detroz
Michel Caprasse
Lucien Charmoille
Original Assignee
Novo Nordisk As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk As filed Critical Novo Nordisk As
Publication of CS85292A3 publication Critical patent/CS85292A3/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/22—Bacillus
    • A01N63/23—B. thuringiensis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/22—Bacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Escalators And Moving Walkways (AREA)

Description

/Λ-?:/ Λ- ?:

Způsob výroby přípravků s obsahem biosynthetickýchpesticidních produktů a použití takto získaných přípravků. Předmětem tohoto vynálezu je způsob výroby přípravků s obsa-hem biosynthetických pestigidních produktů, získaných z mikroorga-nismů rodu Bacillaceae a způsob použití takto získaných příprav-ků·A method of making formulations comprising biosynthetic pesticidal products and using the formulations thus obtained. SUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides a process for the preparation of compositions comprising biosynthetic pestigidic products obtained from Bacillaceae microorganisms and a method of using such preparations.

Způsob získávání biosynthetických pesticidních produktů zmikroorganismů zahrnuje ohecně a obvykle tyto dále uvedené hlavnístupně; fermentování mikroorganismů až se získá kultura,shromáždění získané kultury, úprava produktu do formy pasty, prášku, grenulátu či krému.The method for obtaining biosynthetic pesticidal products of microorganisms includes filamentous and usually the following main steps; fermenting the microorganisms until a culture is obtained, collecting the culture obtained, treating the product into a paste, powder, grenule or cream.

Shromáždění či sebrání kultury je veifmi delikátním stupněm v celého postupu; tento stupen, který v podstatě záleží v odděleníkultury ve formě biomasy od kapaliny kultury, je v podstatě právětím stupněm, který způsobuje ztrátu produktu a tím je také příčinouchabých výtěžků, jak se obvykle docilují. Dále pak je účinná látka pesticidního produktu obvykle velmicitlivou sloučeninou se zřetelem na svou biologickou strukturu, asnadno se denaturuje, nejsou-li přísně dodržovány určité podmínky,jako je - a to zvláště - teplota, hodnota pH, rozpouštědla a pří-sady.Gathering or collecting culture is very delicate in the process; this degree, which essentially depends on the separation of the culture in the form of biomass from the culture liquid, is essentially the right degree that causes the loss of the product and thus also the poor yields as is usually achieved. Further, the active ingredient of the pesticide product is usually a large-scale compound with respect to its biological structure, and is easily denatured if certain conditions such as, in particular, temperature, pH, solvents and additives are not strictly adhered to.

Chabé výtěžky, jak jsou pozorovány během shromázďování kultu-ry, jsou podmíněny hlavně nedostatečným oddělením četných složekkultury, jež je z větší či menší míry viskosní, dále pak se zdeprojevují mechanické vlivy v průběhu oddělování, které způsobujíodbourávání účinné složky pesticidního materiálu a s tím je spojeni pokles biologické účinnosti, dále se zde projevuje vliv přidáváníadjuvantií, která ovlivňují stálost přípravku a/nebo jeho fyzikál-ní stav a vzezření, jako je tekutost pasty, oddělování pasty čikrému během skladování, jakož i možnost dispergování přípravkudo vody. Dále pak lze pozorovat nápadný pokles biologické účinnosti -2- zvláště v případě, kdy se přípravek upravuje a zpracovává doformy pasty. Tato úprava má v některých případech svou výhodu,protože odpadá stupeň sušení, kdy dochází z větší či menší míryk degradaci produktu, což je sice nákladné, ale nutné se zřetelemna uchovávání po dlouhou dobu. Při propočítávání míry biologické účinnosti lze pozorovatpokles o 30 až 50% mezi biologickou účinností kultury a biolo-gickou účinnosti pasty, jak byla pozorována, zatím co nižší poklesbiologické účinnosti práškové formy, získané sušením takové pastyve srovnání s kulturou je třeba konstatovat. Biologická účinnostpasty podle toho zřejmě není zcela dostupná a využitelná.The poor yields observed during the culture accumulation are mainly due to the inadequate separation of the numerous components of the culture, which is, to a greater or lesser degree, viscous, furthermore, the mechanical effects during the separation which cause the degradation of the active ingredient of the pesticidal material and the associated decrease biological activity, the effect of addition of adjuvants, which affects the stability of the formulation and / or its physical state and appearance, such as the flowability of the paste, the separation of the paste of the chick during storage, and the possibility of dispersing the water preparation. Furthermore, a noticeable decrease in biological activity is observed -2-especially when the formulation is treated and processed with paste doforms. This treatment has the advantage in some cases, since the degree of drying is eliminated, whereby the product is degraded to a greater or lesser extent, which is expensive but necessary to preserve for a long time. When calculating the rate of biological activity, a decrease of 30-50% between the biological activity of the culture and the biological efficacy of the paste can be observed, while a lower decrease in the bioavailability of the powder form obtained by drying such a paste compared to the culture should be noted. Accordingly, the biological efficacy of pastes is apparently not entirely available and usable.

Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION

Tento vynález si klade za úkol získat přípravky bez uvede-ných nedostatků. Zvláště pak si klade za úkol získat přípravkys biologickou účinností, jež je tak vysoká, jak je to vůbec možnéa získat je navíc ekonomickým způsobem, to znamená vyvarovat seztrát výtěžků na všech stupních, jakož i s ohledem na kvantitu ikvalitu i se zřetelem na biologickou účinnost, přičemž přípravekmusí být stálý a vyznačovat se uspokojivým fyzickým vzezřením.Navíc pak bylo pozorováno a zjištěno, že přípravky podle tohotovynálezu se vyznačují zvláště vysokou biologickou účinností.SUMMARY OF THE INVENTION It is an object of the present invention to provide compositions without the aforementioned drawbacks. In particular, it is an object of the present invention to provide formulations with biological activity that is as high as possible to obtain them in an economical manner, that is to say, to avoid yields at all stages, as well as to the quantity and quality of biological activity. the preparation must be stable and exhibit satisfactory physical appearance. In addition, it has been observed and found that the compositions of the present invention are distinguished by a particularly high biological activity.

Posléze se vynález týká způsobu výroby přípravků, obsahují-cích biosynthetické pesticidní produkty z mikroorganismů roduBacillaceae a nejméně jeden tanin či fierivát taninu, přičemžzpůsob výroby zahrnuje tyto další stupně: 1) v prvém stupni se kultivuje mikroorganismus v prostředíkultury tak, že se získá mohutná kultura řečeného mikroorganis-mu, 2) ve druhém stupni se přidává k takto získané kultuře urči-té množství taninu nebo jeho derivátu, 3) ve třetím stupni se oddělí voda od kultury, obsahujícítanin nebo derivát taninu tak, že se získá pasta, a 4) ve čtvrtém stupni se zpracovává do konečné formy taktozískaná p^sta. Výhodným způsobem provedení postupu podle tohoto vynálezu jeten, kdy se taninová kyselina přidává do kultury ve druhém stupni. -3-Finally, the invention relates to a process for the preparation of compositions comprising the biosynthetic pesticide products of microorganisms of the genus Bacillaceae and at least one tannin or tannin fier wherein the method comprises the following steps: 1) in the first step, the microorganism is cultured in a culture so as to obtain a robust culture of said in the second step, a certain amount of tannin or derivative thereof is added to the culture thus obtained; 3) in the third step, the water is separated from the culture, containing the tannin or tannin derivative, to obtain a paste, and 4) in the second step. the fourth stage is processed into the final form so obtained. In a preferred embodiment of the process of the invention, the tannic acid is added to the culture in the second stage. -3-

Biosynthetická pesticida, získaná z rodu Bacillaceae, mo-hou být v koncentrátech přípravků ve velmi různých formách.The biosynthetic pesticide obtained from the genus Bacillaceae can be in very different forms in the formulations of the compositions.

Tak tam mohou být ve formě organismů jako takových v jakémkolistadiu jejich vývoje, počítaje v to všechny možné vegetativníformy, jak se zde vyskytují v kultivačním prostředí ve zceladokonalé či částečně lyžované formě, v částečně Či dokonalé spo-rulující formě nebo ve formě částečně či dokonale opuštěnýchsporů, což múze být způsobeno různýefe prostředky, jako je mikro-biální autolyza, nebo mohou být ve formě produktů, které mikro-organismy spontáně vylučují, jako to jsou tedy exotoxiny, nebo veformě produktů, které se dají extrahovat z uvedených mikroorganis-mů, jako jsou endotoxiny, to za použití postupů, které jsou jakotakové známé, zahrnující či nezahrnující lyzjn předmětných mikro-organizmů, nebo tam mohou být ve formě produktů, jež se uvolnilyz mikroorganizmů během některých stupňů jejich vývoje (krystalynebo endotoxiny ve spojitosti se spory či mimo ně), nebo i jinaksoučasně v několika takových formách, jak byly právě uvedeny.Thus, there may be in the form of organisms as such in their development, including all possible vegetative forms as they occur in the culture medium in semi-lysed or partially lysed form, in part or in perfect conjugate form, or in the form of partially or completely abandoned spores which may be caused by various means such as microbial autolysis, or may be in the form of products which spontaneously exclude microorganisms, such as exotoxins, or the formation of products that can be extracted from the microorganisms, such as they are endotoxins, using procedures that are asotaks known, including or not including the subject microorganisms, or they may be in the form of products that have been released from the microorganisms during certain stages of their development (crystals or endotoxins in association with or beyond spores) , or else in someone else such forms as just mentioned.

Tyto různé formy mohou být případně spojeny s různýdh; zbytky kultivačního prostředí. Dobrých výsledků bylo dosaženo se směsí,obsahující spory, krystaly nebo asociované endotoxiny a případněi exotoxiny, k jejichž vzniku došlo spontánng během autolysy mikroorganizmu v koncové fázi sporulace. Taková, směs může obsahovatkromě sporů krystaly, spojené či nespojený, se spory, případněexotoxiny, buňky či jejich zbytky jakož i zbylé pevné produktyživného prostředí, jež bylo použito během kultivování.These different forms may optionally be combined with different forms; culture medium residues. Good results have been obtained with a mixture comprising spores, crystals or associated endotoxins, and possibly exotoxins that have occurred spontaneously during autolysis of the microorganism at the end-stage of sporulation. Such a composition may contain, in addition to spores, crystals, whether or not linked, with spores, optionally with toxins, cells or residues thereof, as well as residual solid productive media used during cultivation.

Jako mikroorganizmy rodu Bacillaceae, jež jsou obecně vysocevhodné jako zdroje biosynthetických pesticid, lze uvést dáleuvedený bacily rodu Bacillaceae, jako jsou Bacillus thuringiensis,Bacillus sphaericus, Bacillus popilliae, Bacillus cereus, Bacilluslarvae, Bacillus lentimorbus, Bacillus fribourgensis a Bacilluspenetrans (Pasteuria).Bacillaceae microorganisms, which are generally highly suitable as sources of biosynthetic pesticides, include Bacillaceae bacilli such as Bacillus thuringiensis, Bacillus sphaericus, Bacillus popilliae, Bacillus cereus, Bacilluslarvae, Bacillus lentimorbus, Bacillus friborgensis and Bacilluspenetrans (Pasteuria).

Dobrých výsledků bylo dosaženo použitím Bacillus sphaericusa Bacillus thuringiensis vše^možných serotypů, kamže patří imikroorganismy z genetických transformací, zvláště pak Bacillussphaericus serotypů la, 2a2b, 2a2c, 5a5b, 6, 25, 26a26b, 26a26c a -4- a Bacillus thuringiensis serotypů 1, 3a, 3831), 4, 6, 7, 8, 8a8b, 9, 10 a 14. Nejlepších výsledků bylo dosaženo s Bacillussphaericus serotypů 5a5b a 25 a Bacillus thuringiensis serotypů1 (varieta thuringiensis), 3a3b (varieta kurstaki), é^rarietysubtoxicus a entomocidus), 7 { varieta aizawau), 8a8b (varietamorrisoni) a 14 (varieta izraelská). Různé typy Bacillus thu-ringiensis a ^acillus sphaericus se mohou použít v přípravcíchpodle tohoto vynálezu ve formš mikroorganizmů jako takových,jakož i jejich lyzátů, spor, odpovídajících endotoxinů nebokrystalů, spojených či nespojených se spory nebo v několika ztakových forem. Tyto různé formy mohou být případně spojenyse zbytky kultivačního prostředí. Dobrých výsledků bylo dosaženoza použití směsi, obsahující spory a asociované krystaly, kterévznikly spontánně během autolyzy mikroorganizmu ku konci spo-rulace. Taková směs může obsahovat kromě sporů a krystalů, aso-ciovaných Či neasociovaných se spory, buňky nebo jejich zbytky,jakož i zbylý pevný produkt živného prostředí, použitého běhemkultivování. Přípravky, získané podle tohoto vynáleeu, mohou být veformě suspense pevných částeček biosynthetického pesticidníhoproduktu v kapalině nebo v pevné formě, jako je prášek či granulát. Přípravky, získané postupem podle tohoto vynálezu mohouobsahovat další četné přísady, jejichž povaha a funkce i úlohaje závislá na použití takových přípravků; takové možnosti jsouobeznámeným nat tomto úseku jasné. Přípravky, získané postupem podle tohoto vynálezu mohouobsahovat také zbytky z produkte biosynthetického pesticidu.Good results were obtained using Bacillus sphaericusa Bacillus thuringiensis all possible serotypes, including imiroorganisms from genetic transformations, especially Bacillussphaericus serotypes 1a, 2a2b, 2a2c, 5a5b, 6, 25, 26a26b, 26a26c and -4- and Bacillus thuringiensis serotypes 1, 3a, 3831), 4, 6, 7, 8, 8a8b, 9, 10, and 14. Best results were obtained with Bacillussphaericus serotypes 5a5b and 25 and Bacillus thuringiensis serotypes1 (thuringiensis variety), 3a3b (kurstaki variety), and rarietysubtoxicus; entomocidus), 7 (varietas aizawau), 8a8b (varietamorrisoni) and 14 (Israeli varietas). Various types of Bacillus thistringiensis and acillus sphaericus can be used in the formulations of the present invention in the form of microorganisms per se, as well as lysates, spores, corresponding endotoxins or crystals, linked or unconnected with spores, or in several mold forms. Optionally, these various forms may be combined with residues of the culture medium. Good results have been achieved by the use of a mixture comprising spores and associated crystals that have spontaneously formed during the autolysis of the microorganism to the end of the sporulation. Such a mixture may contain, in addition to spores and crystals, associated or unassociated spores, cells or residues thereof, as well as residual solid product of the culture medium used during cultivation. The compositions obtained according to the invention may be in the form of a suspension of solid particles of a biosynthetic pesticidal product in liquid or solid form, such as a powder or granulate. The compositions of the present invention may contain other numerous additives, the nature and function of which depend on the use of such formulations; such possibilities are clear to those familiar with this section. The compositions of the present invention may also contain residues from the biosynthetic pesticide product.

Pokud jsou přípravky, získané postupem podle tohoto vynále-zu, ve formě suspensí v kapalině, pak tyto suspense obsahujíobvykle hmotnostně od 10 do 45% a nej častěji od 15 do 40% biosyn-thetického pesticidního produktu či produktů. Kapalina musí býtinertní se zřetelem k biosynthetickým pesticidům a obzvláště jenesmí deaktivovat nebo vyvolat jejich srážení či jakoukoli jinoufyzickou změnu. Kapalinou může být jedno jediné rozpouštědlonebo jejich směs. Obecně se jako rozpouštědlo použije voda. -5-When formulations of the present invention are formulated as suspensions in a liquid, such suspensions typically contain from about 10% to about 45%, and most often from about 15% to about 40%, of the biosynthetic pesticide product (s). The liquid must be inert with respect to biosynthetic pesticides and in particular may not deactivate or induce precipitation or any other physical change. The liquid may be a single solvent or a mixture thereof. In general, water is used as the solvent. -5-

Velmi dobrých výsledků se dosahuje, pokud rozpouš-tědlo obsahuje hmotnostně nejméně 80% a nejčastěji nejméně95% vody. Obecně je kapalným rozpouštědlem pro přípravekpodle tohoto vynálezu v podstatě jen voda. V druhém stupni postupu podle tohoto vynálezu činí potřeb- né množství taninu či derivátu taninu hmotnostně mezi 0,05 až4%, přepočteno na kulturu, obvykle mezi 0,1 až 3% a s výhodoumezi 0,25 až 2%. Třetí stupeň, záležející v oddělení vody od kultury, seprovádí obvyklými postupy oddělování vody, jako je ods£j?edění,ultrafiltrace, vysrážení přidáním rozpouštědla, nemísáféo se svodou, filtrace nebo vyvločkování, takže se tím získá pasta. S výhodou se používá odstředění a/nebo ultrafiltrace. Během této úpravy se přidávají k pastě případné další pří-sady. V případech Bacillus thuringiensis a Bacillus sphaericus sekultivační prostředí odebere na příklad ku konci sporulační fá-ze.Very good results are obtained when the solvent contains at least 80% by weight and most often at least 95% water. In general, the liquid solvent for the formulation of the present invention is essentially water. In the second step of the process according to the invention, the required amount of tannin or tannin derivative is between 0.05 and 4% by weight, usually between 0.1 and 3% and preferably between 0.25 and 2%. The third step, depending on the separation of water from the culture, is carried out by conventional water separation techniques such as dilution, ultrafiltration, precipitation by addition of solvent, no leakage, filtration or flocculation, so as to obtain a paste. Preferably, centrifugation and / or ultrafiltration is used. During this adjustment, any additional ingredients are added to the paste. In the case of Bacillus thuringiensis and Bacillus sphaericus, the culture medium is taken, for example, to the end of the sporulation phage.

Jiný způsob záleží v oddělení frakcí, bohatých na endotoxinynebo na spory nebo na oba tyto produkty současně z kultivačníhoprostředí mikroorganismů, ze kterých vznikají biosynthetické pes-ticidní produkty a to na konci sporulační fáze. Tyto frakcese pak zpracovávají za použití stejných technických postupů,jak byly použity při zpracovávání past.Another method is to separate endotoxin-rich or spore-rich fractions, or both, simultaneously from the culture medium of the microorganisms from which biosynthetic pesicidal products are formed, at the end of the sporulation phase. These fractions are then processed using the same techniques used in paste processing.

Mají-li se získat přípravky ve formě suchých prášků, pak sesuší takto získaná pasta běžnými postupy, jako je sušení rozpra-šováním, lyofylizací nebo sušením v otáčivém bubnu, takže setím získají pevné částečky, obsahující obecně 8«£itóH&x32ížx3CXXX3t$Íí?íméně než 12% a s výhodou méně než 7% vody.If dry powder formulations are to be obtained, then the paste thus obtained is dried by conventional means such as spray drying, lyophilization, or rotary drum drying so that solids are obtained by seeding containing generally 8 < tb > less than 12% and preferably less than 7% water.

Další postup záleží v přidávání případných dalších možnýchpřísad do pasty před jejím sušením podle jednoho či jiného zpostupů, jak jsou zde uvedeny výše.Another procedure is to add any other possible additions to the paste prior to drying according to one or other of the methods as set forth above.

Mají-li se získat přípravky podle tohoto vynálezu ve forměsuspensí, mohou se pevné pesticidní částečky dispergovat v ka-palné fázi, jež obsahuje s výhodou vodu a jež navíc obsahujetanin nebo derivát taninu, jakož i další možné přísady, takže —o— vzniká krém.In order to obtain the compositions of the present invention in the form of a suspension, the solid pesticidal particles may be dispersed in a liquid phase which preferably contains water and which in addition contains a tannin or tannin derivative as well as other possible additives such that a cream is formed.

Tento vynález se rovněž týká způsobů využití získanýchpřípravků. Přípravky podle tohoto vynálezu se mohou použít jako pesti-cide a zvláště pak jako činidla, jimiž se zničí hmyz v kterém-koli stupni jeho vývoje. K tomu účelu se nastříkávájí na infiko-vané povrchy, tedy rostliny, řeky, potoky a jakékoli vodní tokyza použití postupů, které jsou obecně známé, jako je ručnípostřik, mechanický postřik a zvláště pak postřik ze vzduchu.Zvláště pak se mohou nastřikovat na povrchy, infikované hmyzema obzvláště pak, kde infikování provedla Lepidoptera (motýli),Diptera (dvoukřídlí, jako jsou tiplice, slídilky a bejlonožky),Goleoptera (brouci), Aphaniptera (blechy), Orthoptera (rovno-křídlí, jako jsou kobylky, sarančata a xřvrčci), Isoptera (všeka-zi) a Homoptera(stejnokřídlí, jako jsou kříci, křísci a pidikřísci)The present invention also relates to methods of using the compositions obtained. The compositions of the present invention may be used as pesticides, and in particular as agents to destroy insects at any stage of their development. For this purpose, they are sprayed onto infected surfaces, i.e. plants, rivers, streams, and any water stream using procedures that are generally known, such as hand-spraying, mechanical spraying, and, in particular, air-spraying. infected with insects, especially where the infection was carried out by Lepidoptera (butterflies), Diptera (diptera, such as tiplets, prickly moths and snouts), Goleoptera (beetles), Aphaniptera (fleas), Orthoptera (straight-winged, such as locusts, locusts and x-rays) , Isoptera (all-zi) and Homoptera (monkeys such as cries, crosses and pidicas)

Používané dávky jsou závislé na biosynthetickém pesticidui na zasažené oblasti, jež se ma oprostit od nákazy. V případě použití Bacillus thuringiensis a Bacillus sphae-ricus se obvykle používá na hektar množství od 50 do 5000 g pevnýchčásteček. Přípravek podle tohoto vynálezu se může rozstřikovatjako takový, pokud je k dispozici ve formě suspensí. Přípravekse může obdobně dispergovat, ředit nebo emulzifikovat v ředidle,jako je voda nebo organické ředidlo. V takovém případě se ředíjednou až třistakrát, obvykle dvakrát až stodvacetkrát a s výho-dou čtyřikrát až šedesátkrát odpovídajícím objemem ředidla.The doses used are dependent on the biosynthetic pesticide on the affected area to be free from infection. In the case of the use of Bacillus thuringiensis and Bacillus spermicus, an amount of 50 to 5000 g of solids is usually used per hectare. The composition of the present invention may be sprayed as such when available in the form of suspensions. The preparation may likewise be dispersed, diluted or emulsified in a diluent such as water or an organic diluent. In this case, they are diluted from 1 to 3 times, usually from 2 to 100 times, and preferably from 4 to 60 times the appropriate volume of diluent.

Další příklady jsou použity k blizš-ímu ozřejmění vynálezu. Příklady Příklad 1 450 g sojové moučky, obsahující asi 52^ proteinů, 250 ghydrolyžovaného škrobu, 20 g prim.hydrogenfosforečnanu draselného,20 g sek.hydrogenfosforečnanu draselného, 3,2 g heptahydrátu síra-nu hořečnatého, 0,12 g monohydrátu sírar^u manganatého, 0,14 gheptahydrátu síranu zinečnatého, 0,2 g bezvodého síranu železité-ho, 1,5 g monohydrátu chloridu vápenatého a 10 1 vody se smísív sterilizovatelném fermentačním zařízení BIOLAFFITE o objemu 15 1, -7- vykavenén míchadlem, čidlem sledujícím pH, jakož i stav v kyslíku a přívodem pro provzdušnování.Other examples are used to illustrate the invention. EXAMPLES EXAMPLE 1 450 g of soya meal containing about 52 µl of protein, 250 g of hydrolyzed starch, 20 g of potassium phosphate monobasic, 20 g of potassium dihydrogen phosphate, 3.2 g of magnesium sulphate heptahydrate, 0.12 g of sulfuric acid monohydrate zinc sulfate, 0.14 g of zinc sulfate, 0.2 g of anhydrous ferric sulfate, 1.5 g of calcium chloride monohydrate and 10 liters of water are mixed with a sterilizable BIOLAFFITE fermenter of 15 liters, pumped out with a pH sensor. , as well as the oxygen state and the aeration inlet.

Kultivační prostředí se míchá, až je homogenní, hodnota pH · tohoto prostředí se upraví na 7· Totc prostředí se potom sterili-zuje 30 minut na 12O°C, po ochlazení na 30°G se přidá litr kultú-ry Bacillus thuringiensis serotyp 14 (varieta izraelská) vefázi vzrostu za dodržení sterility·The culture medium is agitated until homogeneous, the pH of the medium is adjusted to 7 ° C. The medium is then sterilized for 30 minutes at 12 ° C, after cooling to 30 ° C a liter of Bacillus thuringiensis serotype 14 is added ( Israeli varieties) will grow in phase with sterility;

Permentační zařízení se potom míchá (450 otáček za minutu)a provzdušňuje se za použití poměru 0,4 wm (objem vzduchu naobjem prostředí za minutu)·The fermentation apparatus is then stirred (450 rpm) and aerated using a ratio of 0.4 wm (air volume per minute).

Po 32 hodinách je tamže Bacillus thuringiensis obsažen vbformě částečně lyžovaného sporulujícího mikroorganizmu· KulturaAfter 32 hours, Bacillus thuringiensis is present in the form of a partially lysed sporulating microorganism.

Q obsahuje 1,1 · 10^ sporů na ,1 ml, hodnota pH je 7,5 a obsahsušiny 3 g na litr·Q contains 1.1 · 10 ^ of spores per, 1 ml, pH is 7.5 and the dry matter content is 3 g per liter ·

Insekticidní aktivita tohoto prostředí se testuje za použi·tí komára Aedesjaegypti titrační biologickou methodou podleH. de Barjac-a a I.Larget-a, WH0-VB0-97.744. Zjištěná hodnota: 300 U/ml +/- 20%. K takto získanému produktu se přidá práškovaná kyselinacitrónová v množství dva díly na tisíc, pH produktu se upravína 4 přidáváním fosforečné kyseliny·The insecticidal activity of this medium is tested using the Aedesjaegypti mosquito titration method by H. de Barjac-a and I.Larget-a, WH0-VB0-97.744. Observed value: 300 U / ml +/- 20%. To the product thus obtained is added acid-citric acid powder in two parts per thousand, the pH of the product is adjusted by adding phosphoric acid 4

Potom se na 500 g takto získaného produktu přidá 5 g taninu,obchodní označení TANIN PB5 (PHARMACHEMIC comp.), obsahujícího99% kyseliny taninové.Thereafter, 5 g of tannin was added to 500 g of the product thus obtained, the trade name TANIN PB5 (PHARMACHEMIC comp.) Containing 99% tannic acid.

Insekticidní aktivita takto získaného produktu je stejnás výhradou chyb, vzniklých při měření, jako je tomu u výše uvede-né kultury, takže přidaná kyselina i tanin nejsou toxickéxa vůči zasahovanému hmyzu·The insecticidal activity of the product thus obtained is the same as the measurement errors, as in the above-mentioned culture, so that the added acid and tannin are not toxic to the affected insects.

Produkt se potoin zahustí odstředěním, takže vzniká pasta .obsahující přibližně 12% sušiny. Tato pasta je charakterizována·insekticidní aktivitou 2800 U/mg +/- 20%·The product is concentrated by centrifugation to form a paste containing about 12% dry matter. This paste is characterized by an insecticidal activity of 2800 U / mg +/- 20%.

Tato pasta je tekutá a stabilní po dlouhou dobu. Příklad 2 R (pro srovnání)This paste is liquid and stable for a long time. Example 2 R (for comparison)

Kultura Bacillus thuringiensis serotyp 14 se připraví ja-ko v příkladu 1«, Dále se připraví totožná pasta jako v příkladu 1 -8- s tou výhradou, že se nepřidává tanin. Získaná pasta sevyznačuje insekticidní aktivitou 1500 U/mg +/- 20%. Z výsledků, srovnávání příkladu 1 podle tohoto vynálezua příkladu 2R je patrné, že přidávání kyseliny taninové dokultury před odstředěním usnadňuje soustředění hmoty, vý-těžek při odstřeďování se zvýší a je tím dána možnost získatúčinný materiál produktu. Příklad 3 (pro srovnáni)Bacillus thuringiensis serotype 14 culture was prepared as in Example 1, and the same paste was prepared as in Example 1-8 except that no tannin was added. The paste obtained has an insecticidal activity of 1500 U / mg +/- 20%. From the results of the comparison of Example 1 of the present invention and Example 2R, it can be seen that the addition of tannic acid to the culture prior to centrifugation facilitates the concentration of the mass, the centrifugation yield is increased, and an effective product material is obtained. Example 3 (for comparison)

Jako v příkladu 1 se připraví kultura Bacillus thuringiensis serotyp 14. Připraví se pasta, stejná jako v příkladu 1 stou změnou, že se přidávání taninu nehradí přidáváním 0,1%oxidu křemičitého, obch.označení AEROSIL R 972 silica (DEGUSSACo.).As in Example 1, a culture of Bacillus thuringiensis serotype 14 is prepared. A paste is prepared, as in Example 1, by altering the addition of tannin by adding 0.1% silica, labeling AEROSIL R 972 silica (DEGUSSACo.).

Insekticidní aktivita pasty činí 1300 U/mg +/- 20%, Pasta jekompaktní a ve vodě se nedisperguje.The paste's insecticidal activity is 1300 U / mg +/- 20%, the paste is compact and does not disperse in water.

4 w4 w

Claims (5)

Pat n t o v éPat n t o 1. Způsob výroby přípravků obsahujících biosyn- » thetické pesticidní produkty získané z mikroorganizmů roduBacillaceae a nejméně jeden tanin či derivát taninu, vyznačený’tím, že zahrnuje tyto dále uvedené stupně: 1) v prvém stupni se mikroorgamizmus kultivuje v kulti-vačním prostředí a získá se tím bohatá kultura řečené-hp mikroorganizmu, 2) ve druhém stupni se přidá do takto připravené kulturyurčité množství taninu nebo derivátu taninu, 3) ve třetím stupni se oddělí voda od kultury, obsahujícítanin nebo derivát taninu a získá se tak pasta, a 4) ve čtvrtém stupni se provede úprava takto získané pas-ty.A process for the preparation of compositions comprising biosynthetic pesticide products obtained from microorganisms of the genus Bacillaceae and at least one tannin or tannin derivative comprising the following steps: 1) in a first step, microorgamism is cultured in a culture medium and recovered thereby rich culture of said hp microorganism, 2) in the second step, a certain amount of tannin or tannin derivative is added to the culture thus prepared, 3) in the third step, the water is separated from the culture, containing the tannin or tannin derivative to obtain a paste, and 4) in the fourth stage, the wafer is thus treated. 2. Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že se vedruhém stupni přidává taninová kyselina.Process according to Claim 1, characterized in that a tannic acid is added in a second step. 3. Způsob podle kteréhokoli z předchozích nároků, vyzna-čený tím, že se jako kultivovaný mikroorganizmus používá Bacil-lus thuringiensis nebo Bacillus gjlaericus a jejich odvozené typy.A method according to any one of the preceding claims, characterized in that Bacillus thuringiensis or Bacillus gjlaericus and their derived types are used as cultured microorganisms. 4. Způsob podle kteréhokoli z předchozích nároků, vyzna-čený tím, že se ve druhém stupni přidává takového množství tani-nu nebo derivátu taninu, že to odpovídá hmotnostně podílu mezi0,05 až 4%, přepočteno na hmotnost kultury, do které se tatolátka přidává.Process according to any one of the preceding claims, characterized in that in the second stage an amount of tannin or tannin derivative is added such that it corresponds to a weight ratio of between 0.05 to 4%, calculated on the weight of the culture to which the substance is adds. 5. Způsob ničení hmyzu, vyznačený tím, že se na infiko- vané povrchy nastříkávají přípravky, připravené podle kterého-*koli z nároků 1 až 4. ·5. A method for destroying insects, characterized in that preparations prepared according to any one of claims 1 to 4 are sprayed onto the infected surfaces.
CS92852A 1990-07-23 1992-03-20 Process for preparing preparations containing biosynthetic pesticidalproducts and the use of the products obtained in such a manner CS85292A3 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
BE9000738A BE1004492A3 (en) 1990-07-23 1990-07-23 Compositions of products biosynthetic pesticides and at least one tannins, methods for their production and use.
PCT/DK1991/000213 WO1992001383A1 (en) 1990-07-23 1991-07-18 Process for the production of compositions containing biosynthetic pesticidal products and use of the compositions obtained

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS85292A3 true CS85292A3 (en) 1992-08-12

Family

ID=3884881

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS92852A CS85292A3 (en) 1990-07-23 1992-03-20 Process for preparing preparations containing biosynthetic pesticidalproducts and the use of the products obtained in such a manner

Country Status (10)

Country Link
EP (1) EP0499629A1 (en)
JP (1) JPH05501723A (en)
AU (1) AU8296491A (en)
BE (1) BE1004492A3 (en)
BR (1) BR9105844A (en)
CA (1) CA2066664A1 (en)
CS (1) CS85292A3 (en)
HU (1) HUT65725A (en)
PL (1) PL294568A1 (en)
WO (1) WO1992001383A1 (en)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6268181B1 (en) 1992-11-05 2001-07-31 Valent Biosciences, Corporation Methods for producing a potentiator of Bacillus pesticidal activity
ZA938163B (en) * 1992-11-05 1994-06-06 Novo Nordisk Entotech Inc Potentiator of bacillus pesticidal activity
US6277624B1 (en) 1992-11-05 2001-08-21 Valent Biosciences, Inc. Mutants which produce a potentiator of Bacillus pesticidal activity
US6406691B1 (en) 1992-11-05 2002-06-18 Valent Biosciences Corp. Potentiator of Bacillus pesticidal activity

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0059707A4 (en) * 1980-09-15 1983-01-14 Battelle Development Corp Microbial insecticide.

Also Published As

Publication number Publication date
PL294568A1 (en) 1992-11-30
JPH05501723A (en) 1993-04-02
AU8296491A (en) 1992-02-18
WO1992001383A1 (en) 1992-02-06
HUT65725A (en) 1994-07-28
HU9201365D0 (en) 1992-07-28
CA2066664A1 (en) 1992-01-24
EP0499629A1 (en) 1992-08-26
BE1004492A3 (en) 1992-12-01
BR9105844A (en) 1992-09-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12219960B2 (en) Methods and compositions for improving soybean yield
RU2646138C1 (en) Method for treating a plant seed
EP2920293B1 (en) Microbial strains, compositions, and methods for increasing available phosphate for plants
EP0492946B1 (en) Biocontrol particles
KR101729123B1 (en) Competitive and effective bradyrhizobium japonicum strains
US20020041866A1 (en) Water-dispersible granules based on live organisms
TW201428097A (en) Bacillus sp. strain with antifungal, antibacterial and growth promotion activity
AU722891B2 (en) Antifungic and antibacterial peptide
CN104093680A (en) Combination of lipochitooligosaccharides and/or chitooligosaccharides with phosphate-solubilizing microorganisms to promote plant growth
US20250280833A1 (en) Methods and compositions for improving soybean yield
US3150062A (en) Method of manufacturing biological insecticide and product thereof
CN113575614A (en) Beauveria bassiana dispersible oil suspending agent and efficient use method
CA2066664A1 (en) Process for the production of compositions containing biosynthetic pesticidal products and use of the compositions obtained
US4133716A (en) Method for the biosynthesis of a microbial insecticide
RU2027369C1 (en) Method for production of endotoxin-containing entomopathogeneous preparations
US4661351A (en) Compositions containing biosynthetic pesticidal products and at least one phosphate, processes for their preparation and their use
US20200146300A1 (en) Crop pathogen control using competitive probiotic competition
US5902580A (en) Controlling Cyperus weeds with Ascochyta sp. FERM BP-5176
KR0186032B1 (en) Manufacturing method of microbial insecticide
RU2588483C2 (en) Bradyrhizobium strain for improving plant growth (versions), composition containing said strain and seed coated with composition
RU2796852C2 (en) Solid composition for agricultural use
JPH0912418A (en) Disease control agent and control method for useful plants of grass family using weed pathogens
JPH0327307A (en) Compound concentrate contain- ing biosynthetic insecticide and its manufacture
WO1998017780A1 (en) Microorganism of the genus ascochyta and use thereof
JPH0959111A (en) Agricultural and horticultural fungicides