CZ20001285A3 - Substituované 4-aminothiazol-2-ylové sloučeniny jako inhibitory cyklin-dependentních kinas - Google Patents

Abstract

Řešení se týká aminothiazolových sloučenin vzorce, kde R1 je substituovaný nebo nesubstituovaný Ci.6- alkyl, Ci.6-alkenyl; Ci.6-alkinyl; Ci-e-alkoxyl; Cpe-alkohol; cykloalkyl; aryl; karbonyl; ether; (Ct.6-alkyl)-karbonyl; (Ci.6-alkyl)-aryl; (Ci.6- alkyl)-cykloalkyl; (Ci_6-alkyl)-(Ci.6-alkoxyl); aryl-(Ci.6- alkoxyl); thioether, thiol; a sulfonyl; a R2 je karbocyklická nebo heterocyklická, monocyklická nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická, kruhová struktura, která má substituent na pozici sousedící s místem připojení, přičemž kruhová strukturaje popřípadě dále substituovaná; nebo farmaceuticky přijatelných solí sloučeniny vzorce (I), nebo proléčiv nebo farmaceuticky aktivního metabolitu sloučeniny vzorce (I) nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, pro inhibici cyklin-dependentních kinas (CDK), jako je CDK1, CDK2, CDK4 a CDK6. Řešení se rovněž týká terapeutického nebo profylaktického použití farmaceutických prostředků obsahujících tyto sloučeniny a způsobů léčeni zhoubných nádorů a jiných chorob podáváním účinného množství těchto sloučenin.

Description

Substituované 4-aminothiazol-2-ylové sloučeniny jako inhibitory čyklin-dependentních kinas

Oblast techniky:

Tento vynález se týká farmaceutických prostředků obsahujících aminothiazolové sloučeniny pro inhibici cyklin-dependentních kinas (CDK), jako je CDK1, CDK2, CDK4 a CDK6. Vynález je rovněž veden na terapeutické nebo profylaktické použití famaceutických prostředků obsahujících tyto sloučeniny a na způsoby léčení zhoubných nádorů a jiných chorob podáváním účinného množství těchto sloučenin.

Dosavadní stav techniky:

Nekontrolovaná buněčná proliferace je znakem rakoviny. Buněčná proliferace jako odezva na různé stimulace se prokazuje deregulací cyklu dělení buňky, procesu, kterým se buňky násobí a dělí. Buňky tumoru mají typicky poškození na genech, které přímo nebo nepřímo regulují progresi buněčného cyklu dělení.

CDK tvoří třídu enzymů, které hrají zásadní roli v regulaci přechodů mezi různými fázemi buněčného cyklu, jako je progrese.z klidového stavu v G1 (mezera mezi mitosou a počátkem DNA replikace pro nové kolo buněčného dělení) na S (perioda syntézy aktivní DNA), nebo progrese z G2 do M fáze, při níž dochází k aktivní mitose a buněčnému dělení. Viz, např., článek uvedený ve Science, sv. 274 (1996), str.1643-1677; a Ann.Rev.

Cell Dev. Biol., sv.13 (1997), str. 261-291. CDK komplexy jsou vytvořeny spojením regulační subjednotky cyklinu (jako cyklinu A,

Bl, B2, Dl, D2, D3 a E) a katalytické subjednotky kinasy (jako cdc2 (CDK1), CDK2, CDK4, CDK5 a CDK6) . Jak vyplývá z názvu, e * vykazuje CDK absolutní závislost na cyklinové podjednotce za účelem fosforylace jejich cílových substrátů, a rozdílné párové funkce kinas/cyklinu pro regulaci progrese přes specifické části buněčného cyklu.

D cykliny jsou citlivé na signály extracelulárního růstu a aktivuji se v odezvě na mitogeny během fáze G1 buněčného cyklu. CDK4/cyklin D hraje důležitou roli v progresi buněčného cyklu fosforylací, a tedy inaktivaci, proteinu retinoblastomu (Rb). Hypofosforylovaný Rb se váže na rodinu transkripčních regulátorů, ale během hyperfosforylace Rb prostřednictvím CDK4/cyklinu D jsou tyto faktory transkripce uvolňovány na aktivované geny, jejichž produkty jsou responsibilní pro progresi S fáze. Rb fosforylace a inaktivace CDK4/cyklínem D připouští průchod buňky přes restrikční bod Dl fáze, načež se citlivost na extracelulární růst nebo inhibiční signály ztrácí a buňka je odevzdána buněčnému dělení. V průběhu dalšího G1 je Rb také fosforylován a inaktivován CDK2/cyklinem E, a nedávný důkaz svědčí o tom, že CDK2/cyklin E může rovněž regulovat progresi na S fázi paralerní cestou, která je nezávislá na fosforylaci Rb (viz Lukas a kol., Cyklin E-induced S Phase Without Activation of the pRb/E2F Pathway, Genes and Dev., sv.ll (1997), str.1479-1492).

Progrese z G1 na S fázi, dokončená působením CDK4/cyklinu D a CDK4/cyklinu E, je náchylná ke změně regulačního mechanismu růstu, a to jak k negativní, tak pozitivní. Podněty růstu, jako mitogeny, způsobují zvýšenou, syntézy cyklinu Dl a tak zvýšenou funkční CDK4. Naproti tomu může být buněčný růst ovládán, jako odpověd na poškození DNA nebo negativní podněty růstu, indukcí endogenních inhibičních proteinů. Tyto přirozeně se vyskytující proteinové inhibitory zahrnuji p21^WAF/CIP1, p27^KIPI, a pl6^INK4 rodinu, ta poslední z nich inhibuje výlučně CDK4 (viz Harper, Cyklin Dependent Kinase Inhibitors”, Cancer Surv., sv.

(1997), str.91-107). Odchylky v tomto kontrolním systému, zejména takové, které ovlivňují funkci CDK4 a CDK2, jsou e e e « · zahrnuty do růstu buněk do vysoce proliferuj ícího stavu příznačného pro zhoubné nádory, jako jsou dědičné melanomy, karcinomy jícnu a rakoviny pankreatu (viz např. Halí a Peters, Genetic Alterations of Cyclins, Cyklin-Dependent Kinases, and CDK Inhibitors in Human Cancer, Adv. Cancer Res., sv. 68 (1996), str. 67-108; a Kamb a kol., A Cell Cycle Regulátor Potentially Involved in Genesis of Many Tumor Types, Science, sv. 264 (1994), str. 436-440). Přílišná exprese cyklinu D je spojena s karcinomy jícnu, prsu, a dlaždicových buněk (viz např. DelSal a kol., Cell Cycle and Cancer: Critical Events at the G1 Restriction Point, Critical Rev. Oncogenesis, sv. 71 (1996), str. 127-142). Geny kódující CDK4-specifické inhibitory pl6 rodiny mají často v rodině dědičné delece a mutace melanomu, gliomů, leukémií, sarkomů a pankreatických karcinomů, karcinomů ne-malých plicních buněk, a karcinomů klavy a krku (viz Nobori a kol., Deletions of the Cyclin-Dependent Kinase-4 Inhibitor Gene in Multiple Human Cancers, Nátuře, sv. 368 (1994), str.

753-756). Amplifikace a/nebo přílišná exprese cyklinu E byla rovněž pozorována u široké řady pevných tumorů, a zvýšené hladiny cyklinu E byly vztahovány ke špatným prognózám. Dále, buněčné hladiny CDK inhibitoru p27, který působí jako substrát i inhibitor CDK2/cyklinu E, jsou abnormálně nízké v nádorech prsu, střeva a prostaty, a hladiny exprese p27 jsou nepřímo vztahovány ke stavu nemoci (viz Loda a kol., Increased Proteasome-dependent Degradation of the Cyclin-Dependent· Kinase Inhibitor p27 in Aggřessive Colorectal Carcinomas, Nátuře Medicine, sv. 3 (1997), str. 231-234). Proteiny p21 se rovněž zdají být, že transmitují p53 tumor-supresivní signál k CDK; tudíž mutace p53 v přibližně 50 % lidských rakovin může nepřímo rezultovat v deregulaci CDK aktivity.

Objevující se údaje poskytují Silnou oporu pro použití sloučenin inhibujících CDK a CDK4 a CDK2, zejména, jako anti-proliferačních činidel. Určité biomolekuly byly pro tyto ρ ρ ρ · * Ρ Γ Γ ρρρρ ρ Ρ Ρ · ρ r ρ rrpp ρ rpppp Ρ'· rrr ^r r Γ

- C P prP <- r ~ r

P - Ρ ρ Ρ Ρ Γ - r· r ρ Γ '

účely navrženy. Například patent US 5 621 082, autor Xiong a kol., popisuje nukleovou kyselinu kódující inhibitor CDK6, a evropská patentová přihláška EP 0 666 270-A2 popisuje peptidy a mimetické peptidy, které působí jako inhibitory CDK1 a CDK2.. Více malých molekul bylo identifikováno jako CDK inhibitory (z nedávného pohledu viz Webster, The Thěrapeutic Potential of Targeting the Cell Cycle, Exp. Opin. Invest. Drugs, sv. 7 (1998), str. 865-887). Flavon flavopiridol vykazuje mírnou selektivitu pro inhibici CDK oproti jiným kinasám, ale inhibuje

CDK4, CDK2 a CDK1 rovnocenně, s IC₅₀s v rozmezí 0,1-0,3 μΜ. Flavopiridol je v současné době ve Fázi II klinických zkoušek jako onkologické chemoterapeutikum (Sedlaček a kol.,

Flavopiridol (L86-8275; NSC 649890), A New Kinase Inhibitor for Tumor Therapy, Int. J. Oncol., sv. 9 (1996), str. 1143-1168). Analogy flavopiridolu jsou předmětem dalších publikací, např. patentu US 5 733 920 od Mansuri a kol., (Mezinárodní přihláška zvěř. pod č. WO 97/16447) a mezinárodní přihlášky WO 97/42949 a WO 98/17662. Výsledky s deriváty na bázi purinu jsou popsány autorem Schow a kol., Bioorg. Med. Chem. Lett., sv. 7 (1997), str. 2697-2702; Grant a kol. Proč. Amer. Assoc. Cancer Res., sv. 39 (1998), Abst. 1207; Legravend a kol., Bioorg. Med. Chem.

Lett., sv. 8 (1998), str. 793-798; Gray a kol., Science, sv. 281 (1998), str. 533-538; a Furet a kol., 216th ACS Nati. Mtg. (Aug. 23-27, 1998, Boston), Abst. MEDI-218. Jako další popisují následující publikace některé pyrimidiny, které inhibují cyklin-dependentní kinasy á růstovým faktorem zprostředkované kinasy: Mezinárodní přihláška WO 98/33798; Ruetz a kol., Proč. Amer. Assoc. Cancer Res., sv. 39 (1998), Abst. 3796; a Meyer a kol., Proč. Amer. Assoc. Cancer Res., sv. 39 (1998), Abst. 3794.

Exisuje tedy potřeba sloučenin s malými molekulami, které mohou být snadno syntetizovány a jsou možnými inhibitory pro jeden nebo více komplexů CDK nebo CDK/cyklin. Protože CDK4 může sloužit jako obecný aktivátor buněčného dělení ve většině buněk a protože komplexy CDK4/cyklinu D a CDK2/cyklinu E určují rannou G1 fázi buněčného cyklu, existuje potřeba získat účinné a specifické inhibitory CDK4 a/nebo CDK2 pro léčení jednoho nebo více typů tumorů.

Podstata vynálezu

Jedním předmětem vynálezu je získání sloučenin a léčivých kompozicí, které inhibují aktivitu jedné nebo více CDK, jako je CDK2, CDK4 a/nebo CDK6, nebo jejich cyklinových komplexů. Dalším předmětem je poskytnout účinnou metodu léčení rakovinných příznaků prostřednictvím CDK inhibice, přednostně inhibici komplexů CDK4 nebo CDK4/D-typu cyklinu a/nebo komplexů CDK2 nebo CDK2/E-typu cyklinu. Dalším předmětem je získání farmaceutických prostředků obsahujících sloučeniny účinné k blokování přechodu rakovinných buněk do jejich proliferační fáze. Tyto a další předměty a výhody vynálezu, které budou vysvětleny v dalším podrobném popise, jsou získány prostřednictvím činidel podle vynálezu, kontrolujících/regulujících buněčný cyklus, popsaných dále.

Z obecného hlediska se vynález týká farmaceutických prostředků obsahujících:

(a) látku regulující buněčný cyklus, vybranou ze (i) sloučeniny vzorce I nh₂ ,O (I)

R' f f r r c f* f r ' r kde R¹ je substituovaná nebo nesubstituovaná skupina vybraná z: (\_g-alkylu, jako je methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sek.butyl nebo terč.butyl;

.Cj.g-alkenylu; Ci.g-aikinylu; C^g-alkoxyskupiny; C^-alkoholu; karbocyklického nebo heterocyklického cykloalkylu, který může být monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl; nebo heterocykloalkyl, který může být monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, jako pyrrolidinyl, piperidinyl, morfolinyl; karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického arylu, jako je fenyl, naftyi, pyrrolyl, indonyl, furanyl,thiofenyl, imidazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, pyrazolyl, pyridinyl, chinolinyl, isochinolinyl, akridinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, benzimidazolyl, benzothiofenyl nebo benzofuranyl; karbonyl, jako je karboxyl, ester, aldehyd nebo keton; ether;

(Ci.g-alkyl)-karbonyl; (C^-alkyl)-aryl; (Cx.g-alkylJ-cykloalkyl; (C^g-alkyl) - (C_L.g-alkoxyl); aryl-(C^.g-alkoxyl); thioether, jako aryl-S-aryl)., cykloalkyl-S-aryl, cykloalkyl-S-cykloalkyl nebo dialkylsulfid; thiol; a sulfonyl; a

R² je substituovaná nebo nesubstituovaná: karbocyklická nebo heterocyklická, monocyklická nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická, kruhová struktura;

kde každý možný substituent R¹ a R² je nezávisle halogen, jako chlor, brom, jod nebo fluor; kyslík (=0) ; halogenalkyl, jako trif luormethyl; C^g-alkyl; C^g-al kenyl ; Cx.g-alkinyl; hydroxyl; C^g-alkoxyl; karbocyklický cykloalkyl, který může být monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, jako cyklopropyl, cyklobutyl, r e e r c c e r r r· r r ( r c f <- r - <· r cyklopentyl, nebo cyklohexyl; nebo heterocykloalkyl, který může být monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, jako pyrrolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, morfolinyl nebo thiazinyl; karbocyklický nebo.

heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický aryl, jako fenyl, naftyl, pyrrolyl, indolyl, furanyl, thiofenyl, imidazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, pyrazolyl, pyridinyl, chinolinyl, isochinolinyl, akridinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, benzimidazolyl, benzothiofenyl nebo benzofuranyl; amino - primární, sekundární nebo terciární; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester;

(ii) farmaceuticky přijatelných solí sloučenin vzorce I; a (iii) proléčiv a farmaceuticky aktivních metabolitů sloučenin vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí; a (b) farmaceuticky přijatelný nosič.

Z dalšího obecného hlediska se vynález týká farmaceutických prostředků obsahujících:

(a) látku regulující buněčný cyklus, vybranou ze (i) sloučeniny vzorce I:

e rr Γ rrr f r r r rrre c r c r r r A p r e e - r r r > r r c r r . r r r r kde:

R¹ je vybráno z

R² je substituovaná nebo nesubstituovaná: karbocyklická nebo heterocyklická, monocyklické nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická, kruhová struktura;

kde každý možný substituent R² je nezávisle halogen, jako chlor, brom, jod nebo fluor; kyslík (=0); halogenalkyl, jako trifluormethyl; C_w-alkyl; C_>6-alkenyl; Ci.g-alkinyl; hydroxyl; Cj.g-alkoxyl; karbocyklický cykloalkyl, který může být monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, jako cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, nebo cyklohexyl; nebo heterocykloalkyl, který může být monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, jako pyrrolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, morfolinyl nebo thiazinyl; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický aryl, jako fenyl, naftyl, pyrrolyl, indolyl, furanyl, thiofenyl, imidazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, pyrazolyl, pyridinyl, chinolinyl, isochinolinyl, akridinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, benzimidazolyl, benzothiofenyl nebo benzofuranyl; amino - primární, sekundární nebo r r<- e r f terciární; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester;

(ii) farmaceuticky přijatelných solí sloučenin vzorce I; a (iii) proléčiv a farmaceuticky aktivních metabolitů sloučenin vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí; a (b) farmaceuticky přijatelný nosič.

Tyto prostředky jsou vhodné jako inhibitory savčích CDK/cyklinových komplexů, CDK hmyzu nebo fungálních CDK komplexů. Tyto prostředky jsou rovněž vhodné pro regulaci proliferace, diferenciace a/nebo apoptosy. Jeden z obecných aspektů vynálezu je tedy veden na farmaceutické prostředky obsahující farmaceuticky účinná množství látek regulujících buněčný cyklus.

Ve výhodném provedení je vynález veden na potentní, buněčný cyklus regulující látky, kde R² ve vzorci I je orto-substituovaná arylová kruhová struktura (jako o-substituovaný fenyl). Zejména výhodnými mezi těmito látkami jsou ty, v nichž R² je o-disubstituovaný fenyl.

Vynález se dále týká způsobů použití látek regulujících buněčný cyklus pro léčeni nemocí nebo poruch zprostředkovaných CDK inhibici, zejména těch, které jsou zprostředkované CDK4 a/nebo CDK2 inhibici. Ještě výhodněji je vynález veden na způsoby léčení maligních onemocnění nebo chorob typu rakoviny podáváním farmaceutického prostředku obsahujícího látku regulující buněčný cyklus. Dále se vynález týká použití látek regulujících buněčný cyklus k zabránění nebo léčení mykotických infekcí.

Další aspekty, výhody a vhodné znaky vynálezu budou zřejmé z podrobného popisu dále.

Podrobný popis a výhodná provedeni vynálezu

Z obecného hlediska se vynález týká farmaceutikých prostředků, které obsahují:

(a) množství látky regulující buněčný cyklus, účinné inhibovat CDK, přičemž látkou regulující buněčný cyklus je:

(i) sloučenina vzorce I:

NH₂ (I) kde R¹ je substituovaná nebo nesubstituovaná skupina vybraná z: C^-alkylu; C₁.₆-alkenylu; C₁.₆-alkinylu; Ci.g-alkoxylu; karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, cykloalkylu; karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, arylu; karbonylu; etheru; (C_>6-alkyl) -karbony lu; (C^g-alkyl)-arylu; (Ci.g-alkyl)cykloalkylu; (C^-alkyl) - (Cj.g-alkoxyl) u; aryl- (C^-alkoxyl) u thioetheru a sulfonylu;

a

R² je substituovaná nebo nesubstituovaná, karbocyklické nebo heterocyklická, monocyklická nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická struktura;

kde každý možný substituent R¹ a R² je nezávisle halogen; halogenalkyl; C₁.₆-alkyl; C₁.₆-alkenyl; C,.₆-alkinyl;

r r

Γ Γ '

hydroxyl; Cj.g-alkoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester;

(ii) farmaceuticky přijatelnou sůl sloučeniny vzorce I; nebo (iii) proléčivo a farmaceuticky aktivní metabolit sloučeniny vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a (b) farmaceuticky přijatelný nosič.

V dalším obecném provedení může být každý volitelný substituent pro R¹ a R² nezávisle vybrán z, spolu s výše identifikovanými skupinami, následujících skupin: kyslíku, karbocyklického nebo heterocyklického., monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, cykloalkylu; a karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, arylu. Tyto substituenty mohou být popřípadě dál substituovány substituenty vybranými z těchto skupin.

Příklady pro R¹ část zahrnují substituovaný nebo nesubstituovaný aryl a alkyl, jako je fenyl, pyridyl, benzimidazol, benzyl a C^-alkyl. Ve výhodném provedení mají tyto skupiny jeden nebo více substituentů vybraných z: halogenu; kyslíku; halogenalkylu; C^g-alkylu; cykloalkylu; hterocykloalkylu; arylu; hydroxylu; Ci.galkoxylu; amino; nitro; thioetheru; kyano; amido; karboxylu; sulfonamido; ketonu; aldehydu; a esteru.

Dalšími výhodnými částmi pro R ¹ jsou fenylové skupiny substituované alkylaminem nebo pyridinovou skupinou mající případné substituenty vybrané ze skupiny popsané výše v odstavci pro R¹ . Alkylaminový substituent může být 5-7-členný heterocykloalkyl popřípadě obsahující, spolu s atomem dusíku v r r ·- r kruhu, jeden nebo více heteroatomů vybraných z N, 0 a S.

Příklady těchto výhodných R ¹ skupin zahrnují fenyl substituovaný v para-pozici s heterocykloalkylem, například piperidinyl,' piperazinyl, thiazinyl nebo morfolinyl, nebo . pyridylová skupina.

Následují příklady výhodných R¹ skupin:

e· c c r r r13

Další zejména výhodné R¹ skupiny zahrnují fenylové skupiny substituované karbonylovou nebo sulfonamidovou částí, přičemž uhlík karbonylu a dusík sulfonamidu jsou výhodně dále substituovány. Následují, příklady výhodných R¹ skupin:

kde R³ je vybrán z Cx-Cealkylu, Ci-C₆alkoxylu, arylu, aryloxyskupiny a aminu.

Další výhodné příklady pro R¹ část zahrnují substituovaný nebo nesubstituovaný fenyl, alkylbenzyl, alkyl, benzylkarboxylester, benzyloxyfenyl, dimethylaminofenyl, pyridinyl, fenethyl, alkylkarboxyl, alkylpiperidinyl, fenylamino, cyklohexyl, benzylkarboxyalkyl, benzylnitro, fenyl-alkoxyl, ethylbenzoat, benzylkarboxyl, alkylbenzoimidazol, benzoimidazol, benzyldimethylamino, pyridinyl-sulfanyl, kyanobenzyl, a fenylsulfamyl.

Ve výhodných provedeních je R² ve vzorci I objemná skupina, jako je substituovaný nebo nesubstituovaný karbocyklický nebo heterocyklický monocyklus, nebo substituovaný nebo nesubstituovaný kondenzovaný nebo nekondenzovaný karbocyklický nebo heterocyklický polycyklus. Ještě výhodněji je R² substituovaný (karbo nebo póly)-(monocyklus nebo polycyklus); dokonce ještě výhodněji je R² taková cyklická kruhová struktura nesoucí substituent na místě přiléhajícím nebo sousedícím k místu připojení (na strukuře’ jádra).

r ι14

Například výhodné druhy pro R² zahrnují orto-substituovanou aromatickou kruhovou strukturu jako je o-substituovaný fenyl nebo thienyl, nebo 1,2-substituovanou cykloalkyl- nebo cykloalkenylovou kruhovou strukturu jako je 2-substituovaný cyklopentyl-l-enyl. Zejména výhodné příklady pro část R² zahrnují substituované nebo nesubstituované: o-halogenfenyl (např.

0-fluorfenyl, o-chlorfenyl, o-jodfenyl, nebo o-bromfenyl), o-nitrofenyl, o-aminofenyl, o-C^-alkylfenyl, o-Ci.g-alkoxyfenyl (např. o-methoxyfenyl nebo o-ethoxyfenyl), o-Ci.g-alkoxybenzothiofenyl, o-methylthiofenyl, benzonitril a karboxybenzyl. Zejména výhodné příklady pro část R² také zahrnují orto-disubstituované aryly, například 2,6-dihalogenfenyl (např.

2, 6-difluorfenyl) a 2-halogen-6-trifluormethylfenyl (např. 2-fluor-6-trifluormethylfenyl). Sloučeniny vzorce I, kde R² je 1,2-substituovaná cyklická kruhová struktura, výhodně mající jeden nebo více dalších substituentů, jako je orto-substituovaný aryl mající další substituent na para-pozici, byly překvapivě nalezeny jako potentní CDK inhibitory.

Zejména výhodné příklady sloučenin vzorce I zahrnují:

nh₂s'^

O ,a

LA ch₃ e« r i* e r f' e e e r

Dalšími výhodnou sloučeninou vzorce I je:

Další zejména výhodné příklady sloučenin vzorce I zahrnují:

h₂n-| o

h₃c τ&λ

•S.

H₃CFarmaceutické prostředky podle vynálezu mohou, alternativně nebo spolu se sloučeninou vzorce I, obsahovat jako účinnou složku farmaceuticky přijatelnou sůl sloučeniny vzorce I, nebo proléčivo (prodrug) nebo farmaceuticky účinný metabolit takové sloučeniny nebo soli. Tyto sloučeniny, soli, proléčiva a metabolity jsou zde někdy společně označovány jako látky regulující buněčný cyklus.

Prostředky v souladu s předloženým vynálezem inhibují aktivitu kinasy v CDK/cyklínových komplexech, jako například tu, která je aktivní v G_o nebo Gj stupni buněčného cyklu, jako CDK2, CDK4 a /nebo CDK6 komplexů. Výhodné prostředky podle vynálezu obsahují látky regulující buněčnou aktivitu mající inhibiční konstantu proti CDK4 nebo komplexu CDK4/D-typu cyklinu asi 1 μΜ nebo méně, výhodněji asi 500 nM nebo méně, a ještě výhodněji asi 200 nM nebo méně, a nejvýhodněji asi 100 nM nebo méně. Zejména výhodné sloučeniny podle vynálezu zahrnuji ty, které máji inhibiční konstantu CDK4/cyklin D3 (Κ_£ CDK4/D3) asi 100 nM nebo méně. Další výhodné prostředky'podle vynálezu obsahují látky regulující buněčný cyklus mající inhibiční konstantu proti CDK2 nebo komplexu CDK2/E-typu cyklinu asi 1 μΜ nebo méně, výhodněji asi 500 nM nebo méně, dokonce ještě výhodněji asi 200 nM nebo méně, a nejvýhodněji asi 100 nM nebo méně.

Určité sloučeniny vzorce I mohou existovat v různých stereoisomerních nebo tautomerních formách. Předložený vynález zahrnuje všechny takové CDK-inhibující sloučeniny, včetně aktivních sloučenin ve formě v podstatě čistých enantiomerů, racemických směsi a tautomerů.

Termín farmaceuticky přijatelný označuje farmakologicky přijatelnou a pro subjekt, kterému se podává, v podstatě netoxickou látku regulující buněčný cyklus.

Farmaceuticky přijatelné soli zahrnují běžné adiční soli kyselin nebo adiční soli s bázemi, vzniklé z vhodných netoxických organických nebo anorganických kyselin nebo anorganických bází. Příkladné adiční soli s kyselinami zahrnují ty, které jsou odvozené z anorganických kyselin jako je kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina jodovodíková, kyselina sírová, kyselina sulfamová, kyselina fosforečná a kyselina dusičná, a odvozené z organických kyselin, jako je kyselina p-toluensulfonová, methansulfonová kyselina, ethandisulfonová kyselina, isethionová kyselina, oxalová kyselina, p-bromfenylsulfonová kyselina, kyselina karbonová, kyselina jantarová, kyselina citrónová, kyselina benzoová, kyselina 2-acetoxybenzoová, kyselina octová, kyselina fenyloctová, kyselina propionová, kyselina glykolová, kyselina stearová, kyselina mléčná, kyselina jablečná, kyselina vinná, r r e r r r kyselina askorbová, kyselina maleinová, kyselina hydroxymaleinová, kyselina glutamová, kyselina salicylová, kyselina sulfanilová a kyselina fumarová. Příklady bázických adičních solí zahrnují soli odvozené od hydroxidů amonných (tedy kvarterního hydroxidu amonného stejně jako tetramethylamoniumhydroxidu), soli odvozené od anorganických bází jako jsou hydroxidy alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin (jako sodné, draselné, lithné, vápenaté nebo hořečnaté soli), a soli odvozené od organických bází, jako jsou uhličitany, hydrogenuhličitany, aminy, benzylaminy, piperidiny a pyrrolidiny.

Termín proléčivo (prodrug) označuje metabolický prekurzor sloučeniny vzorce I (nebo její soli), který je farmaceuticky přijatelný. Proléčivo může být inaktivní, když je podáváno subjektu, ale in vivo se konvertuje na aktivní sloučeninu vzorce I. Termín aktivní (účinný) metabolit označuje metabolický produkt sloučeniny vzorce I, který je farmaceuticky přijatelný a účinný. Proléčiva a aktivní metabolity sloučenin vzorce I mohou být stanoveny technikami známými ze stavu techniky.

Látky regulující buněčný cyklus, podle předloženého vynálezu, jsou vhodné jako farmaceutické látky pro léčení proliferačních poruch u savců, zejména lidí, nápadných nechtěnou proliferaci endogenní tkáně. Sloučeniny vzorce I mohou být použity pro léčení subjektů majících choroby spojené s nadbytečnou buněčnou proliferaci, tedy rakovinami, psoriasou, imunologickými poruchami, které zahrnují nežádoucí proliferaci leukocytů, a restenosou a dalšími chorobami hladkého svalstva. Dále mohou být tyto sloučeniny použity pro prevenci de-diferenciace postmitotické tkáně a/nebo buněk.

Farmaceutické prostředky nebo přípravky podle vynálezu zahrnují farmaceuticky přijatelný nosič a účinné množství alespoň jedné látky regulující buněčný cyklus. Termín účinné r r r r r r množství označuje množství, které výrazně inhibuje proliferaci a/nebo brání de-diferenciaci eukaryotické buňky, tedy savčí, hmyzí, rostlinné nebo fungální buňky, a je účinné při indikovaném využití, tedy pro konkrétní terapeutické ošetření.

Konkrétní dávkové množství látky regulující buněčný cyklus, které se podává pro získání terapeutických nebo inhibičních účinků, může být samozřejmě stanoveno postupem známým ze stavu techniky podle konkrétních okolností případu, včetně například konkrétní látky, která má být podávána, cesty podávání, stavu, který má být léčen, a subjektu nebo hostitele, který má být léčen. Příkladně celková denní dávka látky regulující buněčný cyklus, která má být podána v jediné nebo v násobných dávkách, obsahuje množství dávky od asi 0,01 mg/kg tělesné hmotnosti až asi 50 mg/kg tělesné hmotnosti.

Látka regulující buněčný cyklus, podle vynálezu, může být podávána jakoukoliv vhodnou cestou, tedy orálně, rektálně, transdermálně, subkutánně, intravenosně, intramuskulámě, nebo intranasálně. Látky regulující buněčný cyklus jsou přednostně formulovány před podáním do prostředků vhodných pro požadovanou cestu podávání.

Farmaceutický prostředek nebo přípravek podle vynálezu obsahuje účinné množství látky regulující buněčný cyklus a farmaceuticky přijatelný nosič, jako je ředidlo nebo excipient pro látku. Pokud slouží nosič jako ředidlo, může jím být· pevný, polopevný, nebo kapalný materiál působící jako vehikulum, excipient nebo prostředí pro účinnou složku (složky). Prostředky podle vynálezu mohou být vyrobeny smísením účinné složky/složek s nosičem, nebo jejím ředěním s nosičem, nebo jejím uzavřením nebo opouzdřením nosičem, takže mohou být ve formě kapsle, sáčku, papírového kontejneru nebo podobných. Příkladné složky, spolu s jednou nebo více látkami regulujícími buněčnou aktivitu a dalšími účinnými složkami, zahrnují Ávicel (mikrokrýštalickou celulózu), škrob, laktosu, síran vápenatý dihydrát, sádrovec, sacharosu, talek, želatinu, agar, pektin, klovatinu, stearat hořečnatý, podzemnicový olej, olivový olej, glyceryl monostearat, Tween 80 (polysorbat 80), 1,3-butandiol, kakaové máslo, včelí vosk, polyethylenglykol, sorbiťan monostearat, polysorbat 60, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol, glycin, kyselinu sorbovou, sorbat draselný, hydrogenfosfat sodný, chlorid sodný, a vodu.

Prostředky podle vynálezu mohou být připraveny v jakékoliv možné formě vhodné pro požadovaný typ podávání. Například mohou být farmaceutické prostředky připraveny ve formě tablet, pilulí, prášků, pastilek, sáčků, tobolek, elixirů, suspenzí, emulzí, roztoků, sirupů, aerosolů (jako pevných nebo v kapalném prostředí), mastí (např. obsahujících do 10 % hmotnostních látky regulující buněčný cyklus), kapslí z měkkého gelu a tvrdého gelu, čípků , sterilních injekčních roztoků, sterilních balených prášků a podobně.

Farmaceutický : prostředek podle vynálezu obsahuje látku regulující buněčný cyklus a, výhodně, jednu nebo více dalších účinných složek, jako je známé antiproliferační činidlo, které je kompatiilní s látkou regulující buněčný cyklus, a je vhodné pro léčenou indikaci. Ve výhodném provedení zahrnuje farmaceutický prostředek podle vynálezu účinné množství látky regulující buněčný cyklus vzorce I jako účinnou složku.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny postupy analogickými k těm, které budou konkrétně popsány dále, a kde jsou příklady označeny písmeny (tedy A, B, C, D, E, F, G, H, J, K, L, M a N), určujícími schémata obecných syntéz.

f. _{r r} r· r Γ r r r (.<-(*** r ( r 0 r- _f r r. f r rrr r < r < r r

Příklady provedení vynálezu * Příklad A(l) :

(4-Amino-2-fenylaminothiazol-5-yl)-(3-nitrofenyl)methanon

Podle postupu autora Gewald a kol., J. Pract. Chem., sv. 35 (1967), str.97-104, byl sodík (188 mg, 8,20 mmol) opatrně rozpuštěn v methanolu (9 ml) při 0 °C a ponechán ohřát na teplotu místnosti. Získaný roztok byl přidáván po částech do směsi kyanamidu (345 mg, 8,20 mmol) a fenylisothiokyanátu (0,98 ml, 8,2 mmol), přičemž se uvolňovalo teplo. Byl přidán 2-brom-3'-nitroacetofenon (2,00 g, 8,2 .mmol), a získaná směs byla míchána přes noc při teplotě okolí. Směs byla zředěna vodou (150 ml). Žluto-hnědá pevná látka byla odfiltrována, promyta vodou a malým množstvím etheru, sušena pod vakuem a rekrystalizovala z ethanolu za vzniku 2,17 g (52% výtěžek) sloučeniny uvedené v názvu ve formě tmavě hnědých krystalů, teplota tání (t.t., m.p.) 186-187 °C.

1H NMR (DMSO-d₆) : ď 10,95 (1H, t, J = 1,9 Hz), 8,54-8,22 (2H, bs), 8,34 (1H, ddd, J = 8,2, 1,9, 0,9 Hz), 8,12 (1H, ddd, J =

8,2, 1,9, 0,9 Hz),. 7,78 (H, t, J = 8,2 Hz), 7,62 (2H, d, J = 7,8 Hz), 7,36 (H, t, J= 7,8 Hz), 7,09 (1H, t, J = 7,8 Hz) .

ESIMS (MH⁺ ):341.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₂N₄O₃S . EtOH: C, 55, 94; H, 4,70; N, 14,50; S, 8,30. Nalezeno: C, 55,96; H, 4,73; N, 14,40; S, 8,29.

* Příklad A(2) :

(4-amino-2-fenylamino-thiazol-5-yl) - (4-nitrofenyl) -methanon

Γ Γ ρ r ρ r r r prrc γ ρ r r r p , r r p p Γ p r Pí rrr p , r P í r r-

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l) . Fenylisothiokyanat a 2-brom-4'-nitroacetofenon poskytly, po rekrystalizaci z ethanolu, 3,06 g (55% výtěžek) červeno-hnědých krystalů, t.t. 162-164 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): 6 10,91 (1H, s), 8,23 (2H, bs), 8,30 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,90 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,59 (2H, d, J = 7,5 Hz), 7,36 (2H, t, J = 7,5 Hz), 7,10 (1H, d, J = 7,5 HZ).

FABMS (MH* ):341.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₂N„O₃S: C, 56,46; H, 3,55; N, 16,46; S,

9,42. Nalezeno: C, 56,54; H, 3,54; N, 16,52; S, 9,42.

* Příklad A(3):

/4-Amino-2-(pyridin-3-ylamino)thiazol-5-yl/-fenyl-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l) . Pyridin-3-yl-isothiokyanat a fenacylchlorid poskytly, po rekrystalizaci z ethanolu, 4,1 g (75% výtěžek) žlutých krystalů, t.t. 227-229 °C.

^ΣΗ NMR (DMSO-d₆) : d 10,95 (1H, s), 8,82 (1H, d, J = 2,5), 8,28 (1H, dd, J = 4,7, 1,2 Hz), 8,23 (2H, bs), 8,12 (1H, ddd, J = 8,4, 2,8, 1,6 Hz), 7,68 (1H, d, J = 6,9 Hz), 7,66 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,54 - 7,44 (3H, m), 7,39 (1H, dd, J = 8,4, 4,7 Hz).

HRFABMS: vypočteno pro C₁₅H₁₃N₄OS (MH⁺ ): 297,0810. Nalezeno:

ρ ρ ρ r r r Pí C <7 ^r *“ _r ι r Γ /- r pf rrc r Γ r r r ^r ' r ^{Γ r}r ·' ^r

297,0515.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₂N₄OS . EtOH: C, 59,63; H, 5,30; N, 16,36; S, 9,36. Nalezeno: C, 59,62; H, 5,32; N, 16,43; S, 9,41.

* Příklad A(4):

(4-Amino-2-fenylamino-thiazol-5-yl)-pyridin-2-yl-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l) . Fenylisothiokyanat a 2-(2-bromacetyl)pyridin (viz Menassé a kol., Helv. Chim. Acta, sv. 38 (1955), str. 1289-1291; Imuta a kol., J.Org. Chem., sv. 45 (1980), str. 3352-3355) poskytly, po rekrystalizaci z 95% ethanolu, 510 mg (71% výtěžek) hnědých jehliček, t.t. 181,5 183,0 °C.

^:H NMR (DMSO-dJ: ď 10,75 (1H, s), 8,92 (1H, bs), 8,66 (1H, ddd,

J = 5,1, 1,8, 1,2 Hz), 8,22 (1H, bs), 8,13 (1H, dt, J - 7,5, 1,2

Hz),	8,01	(1H,	dt,	J = 7,5,	1,8 Hz), 7,69	(2H, dd, J = 7,5,	1,2
Hz),	7,54	(1H,	ddd,	J = 7,5,	5,1, 1,2 Hz) ,	7,36 (2H, t, J ='	7,5
Hz),	7,07	(1H,	dt,	J = 7,5,	1,2 Hz).

HRFABMS: Vypočteno pro C₁₅H₁₃N₄OS (MH⁺ ): 297,0810. Nalezeno: 297,0818.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₂N₄O₃S . H₂0: C, 57,31; H, 4,49; N, 17,82; S, 10,02. Nalezeno: C, 57,31; H, 4,46; N, 17,80; S, 10,14.

* Příklad A(5) :

Ethyl 4-/4-Amino-5-(2-nitro-benzoyl)-thiazol-2-ylamino/-benzoat

H₃CCH^0'

Γ <“

Γ C

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l). 4-Karboethoxy-fenylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly, po rekrystalizaci z ethanolu, 1,2 g (59% výtěžek) žlutého krystalického prášku, t.t. 262-265 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : cí 11,08 (1H, s), 8,12 (2H, bs) , 8,08 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,93 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,82 (1H, dt, J = 7,2, 1,2 Hz), 7,77-7,66 (3H, m), 7,73 (1H, d, J = 8,7 Hz), 4,28 (2H, q, J = 7,2 Hz), 1,30 (3H, t, J = 7,2 Hz).

ESIMS (MH⁺ ): 413.

Anal. vypočteno pro Ο₁₉Η_1ΘΝ₄Ο₃3: C, 55,33; H, 3,91; N, 13,58; S, 7,77. Nalezeno: C, 55,22; H, 3,86; N, 13,48; S, 7,67.

* Příklad A (6) :

/4-Amino-2- (2-methyl-lH-benzimidazol-6-ylamino) -thiazol-5-yl/-(2-nitrofenyl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l).

6-Isothiokyanato-2-methyl-lH-benzoimidazol (viz Galley a kol., Německá patentová přihláška DE 2259220 (1973); C.A. č. 478781 (1983)) a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly, po rekrystalizaci z ethanolu, 1,2 g (62% výtěžek) hnědých krystalů, t.t. 190,0 192,5 °C.

NMR (DMSO-d₅) : <f 12,20 (1H, bs), 10,76 (1H, s) , 8,10 - 8,76 (3H, m), 7,60 (1H, t, J = 7,0 Hz), 7,70 - 7,58 (3H, m), 7,40 (1H, d, J= 8,4 Hz), 7,13 (1H, dd, J = 8,4, 1,6 Hz), 2,44 (3H, s) .

FABMS (MH⁺ ) : 395.

e e r r

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₄N₆O₃S . H₂0: C, 52,42; H, 3,91; N, 20,38; S, 7,77. Nalezeno: C, 52,29; H, 3,89; N, 20,31; S, 7,86.

* Příklad A(7) :

/4-Amino-2- (4-jodo-fenylamino) -thiazol-5-yl/-(2-nitrofenyl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l) . 4-Jodfenylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly 7,9 g (88% výtěžek) oranžově-červeného prášku, t.t. 182-184 °C.

^XH NMR (DMSO-dJ : ef 10,89 (1H, s), 8,20 (1H, s), 8,50 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,80 (1H, dd, J= 8,7, 6,2 Hz), 7,72-7,62 (4H, m), 7,41 (2H, d, J = 8,7 Hz).

FABMS (MH⁺ ) : 467.

Anal. vypočteno pro C₁₆H_nN₄O₃SI: C, 41,21; H, 2,38; N, 12,02; S, 6,88; I, 27,22. Nalezeno: C, 41,34; H, 2,46; N, 12,07; S, 7,02;

I, 27,35.

* Příklad A(8) :

/4-Amino-2-(4-nitro-fenylamino)-thiazol-5-yl/fenyl-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l). 4-Nitrofenylisothiokyanat a fenacylchlorid poskytly 2,5 g (60% výtěžek) pevné látky,

Γ Γ r r r f r r r c r rr r r -- r r <* r r r

Γ Γ Γ <* ^r f r ' rr-r ' r r < . r r r <- r r r r i- c r · · r ' ·

t.t. 280,0 - 281,5 °C.

*H NMR (DMSO-d₆): 3 11,38 (1H, s), 8,30 - 8,18 (2H, bs), 8,23 (2H, d, J = 9,3 Hz), 7,87 (2H, d, J = 9,3 Hz), 7,69 (2H, dd, J = 7,8, 1,6 Hz), 7,56 - 7,44 (3H, m) .

FABMS (MH⁺ ): 341.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₂N₄O₃S: C, 56,46; H, 3,55; N, 16,46; S,

9,42. Nalezeno: C, 56,40; H, 3,49; N, 16,40; S, 9,41.

* Příklad A (9) :

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-yl-amino)-thiazol-5-yl/-(2-nitrofenyl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l). 6-Isothiokyanat-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.}, sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly, po rekrystalizací z ethanolu/ methanolu, 1,5 g (83% výtěžek) červeno-hnědého amorfního prášku, t.t. 249 - 255 °C.

¹H NMR (DMSO-dg) : á 12,50 (1H, bs), 10,84 (1H, s), 8,20 (1H, s),

8,60 (2H, bs), 8,03 (1H, d, J= 8,1 Hz), 7,88 - 7,78 (1H, m),

7,76 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,66 (1H, t, J = 7,5 Hz), 7,65 (1H, s),

7,55 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,21 (1H, d, J = 8,7 Hz).

FABMS (MH⁺ ): 381.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₂N₆O₃S: C, 53,68; H, 3,18; N, 22,09; S,

8,43. Nalezeno: C, 53,69; H, 3,14; N, 21,99; S, 8,39.

r e * Přiklad A (10) :

/4-Amino-2- (4-methoxy-fenylamino) -thiazol-5-yl/- (2-nitrofenyl) methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l). 4-Methoxyfenylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly, po rekrystalizací z vodného ethanolu, 562 mg (43% výtěžek) červeno-hnědých krystalů, t.t. 185-188 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆) : & 10,65 (IH, s), 8,25 (2H, bs), 8,20 (IH, d, J = 7,5 Hz), 7,77 (IH, t, J = 7,5 Hz), 7,66 (IH, t, J = 7,5 Hz),

7,62 (IH, d, J = 7,5 Hz), 7,41 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,92 (2H, d,

J = 8,7 Hz), 3,72 (3H, s).

FABMS (M + Na⁺) : 393.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₄N₄O₄S: C, 55,13; H, 3,81; N, 15,13; S, 8,66. Nalezeno: C, 55,08; H, 3,83; N, 15,11; S, 8,56.

* Příklad A (11) :

(4-Amino-2-(pyridin-3-ylamino)-thiazol-5-yl/-(2-nitrofenyl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jako v příkladu A(l). Pyridin-3-yl-isothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly, po chromatografií na koloně s 5% MeOH/CH₂Cl₂, r r f r- Γ r r erc r ·’ r r i c r r

Γ < r r r t r : r r r r

750 mg (42% výtěžek) žluté pevné látky, t.t. 143,5 - 146,0 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆): <f 10,95 (IH, bs), 8,62 (IH, s), 8,19 (IH, dd, J = 4,7, 1,3 Hz), 8,08 - 7,86 (4H, m), 7,76 (IH, td, J = 8,3, 0,9 Hz), 7,66 (IH, dd, J = 8,4, 1,3 Hz), 7,62 (IH, d, J=7,5Hz),

7,31 (IH, dd, J = 8,4, 4,7 Hz).

FABMS (MH⁺ ):342.

Anal. vypočteno pro C₁₅H_UN₅O₃S . 0,5 H₂O . 0,4 EtOH: C, 51,46; H, 3,94; N, 18,99; S, 8,69. Nalezeno: C, 51,86; H, 3,88; N, 19,24;

S, 8,88.

* Příklad A (12): Methylester kyseliny

4-amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)-thiazol-5-karboxylové

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l). 6-Isothiokyanat-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překlad), sv. 24 (1990), str. 812-822) a methylbromacetat poskytly v 63% výtěžku žlutou pevnou látku, t.t. 266-267 °C.

’Ή NMR (DMSO-dg): X 12,37 (IH, bs), 10,52 (IH, s), 7,92 (IH, s), 7,52 (IH, d, J = 8,7 Hz), 7,23 (IH, dd, J = 8,7, 1,9 Hz), 6,89 (2H, bs), 3,62 (3H, s) .

FABMS (MH⁺ ): 250.

Anal. vypočteno pro Ο^Η^Ο^ . 0,15 EtOH: C, 49,87; H, 4,05; N,

23,64; S, 10,82. Nalezeno: C, 49,94; H, 3,94; N, 23,41; S, 10,79.

Příklad A (13) r

p r p r r r ρ i ^r pec ρ / r r r Γ r r r r r r r - r /4-Amino-2- (p-tolylamino) -thiazol-5-yl/- (2, 4-dimethoxyfenyl) methanón

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A(l) . p-Tolylisothiokyanat a 2-brom-2',4'-dimethoxyacetofeno poskytly, po rekrystalizací z MeOH/CHCl₃ , 78 mg (24% výtěžek) žluté pevné látky, t.t. 215-216 °C.

’Ή NMR (DMSO-dJ : á 10,51 (ÍH, s), 7,88 (2H, bs), 7,41 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,16 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,12 (2H, d, J = 8,4 Hz),

6,58 (ÍH, d, J =2,2 Hz), 6,52 (ÍH, dd, J = 8,4, 2,2 Hz), 3,78 (3H, s), 3,74 (3H, s), 2,24 (3H, s) .

IR (KBr): 3279, 2959, 16,6, 1515, 1432, 1306, 1284, 1209, 1157, 1124, 1032 cm'¹ .

Anal. vypočteno pro C,₉H₁₉N₃O₃S: C, 61,77; H, 5,18; N, 11,37; S, 8,68. Nalezeno: C, 61,69; H, 5,16; N, 11,33; S, 8,79.

* Příklad A (14) :

/4-Amino-2-(p-tolylamino)-thiazol-5-yl/-(2, 4-dimethylfenyl)methanón

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno u příkladu A.(l) . p-Tolylisothiokyanat a

2-brom-2', 4'-dimethylacetofenon poskytly, po rekrystalizací z r r r r r r p r r P Γ r r

P P p p “ • P · P P p P P r .· p p c p

MeOH/CHCl₃, 65 mg (33% výtěžek) žlutých krystalů, t.t. 220-221 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): á 10,58 (IH, s), 7,99 (2H, bs) , 7,39 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,17 (2H, d, J = 7,8 Hz), 7,13 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,04 (IH, s), 7,00 (IH, d, J = 8,7 Hz), 2,73 (3-H, s), 2,24 (3H, s), 2,22 (3H, s).

IR (KBr) : 3266, 2921, 1612, 1598, 1546, 1518, 1431 cm-¹.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₉N₃OS: C, 67,63; H, 5,68; N, 12,45; S, 9,50. Nalezeno: C, 67,70; H, 5,73; N, 12,47; S, 9,62.

* Příklad B:

/4-Amino-2-(p-tolylamino)-thiazol-5-karbonyl/-fenyl -benzoat

Meziprodukt, S-(4-benzoyloxyfenylacetyl)-N'-kyano-N -p-tolyl-isomočovina, byl nejprve připraven postupem podle Gevalda a kol., J. Prakt, Chem., sv. 35 (1967), str. 97-104. V methanolu (0,5 ml) byl opatrně rozpuštěn sodík (6,7 mg, 0,29 mmol) a byl ponechán ochladit na teplotu okolí. Do získaného roztoku byl přidán p-tolylisothiokynat (43 mg, 0,29 mmol) a kyanamid (12 g, 0,29 mmol). Po 1 hodině byl přidán 4-bromacetylfenylbenzoat (92 mg, 0,29 mmol) a získaná směs byla míchána přes noc při teplotě okolí. Potom byla směs zředěna vodou (10 ml). Získané pevné činivo bylo odfiltrováno, promyto vodou a malým množstvím etheru, sušeno pod vakuem a rekrystalizovalo z ethanolu / CHC1₃ za vzniku výchozí dávky 63 mg (51% výtěžek) S-(4-benzoyloxyfenylacetyl) -Ν'- kyano-N' '-p-tolyl-isomoČoviny (jako bílých jehliček):

r cr r r r rrrr r r c r r · r ·* r r _r f - a r r r r <*· r . * r r ·' Γ Γ r r _r, r r r c ' ^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 8,10-8,04 (2H, m), 7,72 (1H, ddd, J = 7,5, 1,8, 1,8 Hz), 7,67 - 7,54 (4H, m), 7,20 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,03 (4H, dd, J = 11,2, 8,7 Hz), 4,10 (1H, d, J = 12,1 Hz), 3,77 (1H, d, J =12,1 Hz),2,19 (3H, s) .

Z meziproduktu byla sloučenina uvedená v názvu připravena následujícím způsobem: Syrová S-(4-benzoyloxyfenylacetyl)-N'-kyano-N''-p-tolyl-isomočovina (0,29 mmol) a triethylamin (101 μΐ, 0,73 mmol) v ethylacetátu (1 ml) byly zahřívány pod zpětným chladičem po 2 hodiny, potom byly ponechány ochladit na teplotu okolí, a koncentrovat ve vakuu na syrovou pevnou látku, která krystalizovala z MeOH /CHC1₃ v dílčích dávkách za získání 67 ml (54% výtěžek) žlutých jehliček, t.t. 245 - 247 °C.

^ΧΗ NMR (DMSO-d₆) : δ 10,71 (1H, s), 8,34-8,11 (4H, m), 7,80 - 7,72 (3H, m), 7,66-7,57 (2H, m), 7,46 (2H, d, J=.8,l Hz), 7,38 (2Ή, d, J = 8,4 Hz), 7,16 (2H, d, J = 8,4 Hz), 2,26 (3H, s).

IR (KBr): 3451, 3332, 3026, 1732, 1597, 1533, 1444, 1264, 1206, 1164, 1062, 708 cm’¹ .

HRFABMS: vypočteno pro C₂₄H₁₉N₃O₃SCs (M+Csý :562,0201. Nalezeno: 562,0184.

Anal. vypočteno pro C₂₄H₁₉N₃O₃S: C, 67,12; H, 4,46; N, 9,78; S,

7,47. Nalezeno: C, 66,90; H, 4,43; N, 9,70; S, 7,50.

* Příklad C(l): Methylester kyseliny

4-/4-amino-5-(4-methoxy-benzoyl)-thiazol-2-ylamino/-benzoové h₃co·

ih₂Z ich₃ r r

Do směsi 4-methoxykarbonylfenylisothiokyanatu (82 mg, 0,5 mmol) a kyanamidu (23 mg, 0,55 mmol) v acetonitrilu (5 ml) byl přidán roztok terč.butoxidu draselného (61 mg, 0,55 mmol) v terč. butanolu (5 ml). Po 30 minutách při teplotě ókolí byl přidán 2-brom-4'-methoxyacetofenon (115 mg, 0,5 mmol). Po 2 hodinách při teplotě okolí byla reakční směs zředěna vodou (50 ml). Produkt byl spojen filtrací, promyt vodou a ethyletherem, a sušen pod vakuem za získání žlutě pevné látky, 172 g ( 90% výtěžek).

¹ NMR (DMSO-d₆): δ 8,00 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,84 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,72 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,10 (2H, d, J = 8,2 Hz), 3,90 (6H, s) .

FABMS (MH+): 384

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₇N₃O₄S . 0,5 H₂O: C, 57,36; H, 4,71; N, 10,56; S, 8,06. Nalezeno: C, 56,97; H, 4,74; N, 10,51; S, 8,07.

* Příklade(2):

/4-Amino-2-(4-benzyloxy-fenylamino)thiazol-5-yl/-(4-methoxyfenyl) -methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu C(l). 4-Benzyloxyfenylisothiokyanat a 2-brom-4'-methoxyacetofenon poskytly žluto-hnědou pevnou látku v 85% výtěžku, t.t. 222-224 °C.

^LH NMR (DMSO-dJ : δ 7,70 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,58 - 7,34 (7H, m), 7,06 (4H, dd, J = 7,5, 1,2 Hz), 5,18 (2H, s), 3,94 (3H, s).

FABMS (MH+): 432

Anal. vypočteno pro C₂₄H₂₁N₃O₃S: C, 66,80; H, 4,91; N, 9,47; S, 7,43. Nalezeno: C, 66,86; H, 4,91; N, 9,76; S, 7,53.

c P r* r

P P r P * Příklad C (3) :

/4-Amino-2-(4-dimethylamino-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(4-methoxyfenyl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu C(l) z dimethylamino-fenylisothiokyanatu a 2-brom-4'-methoxyacetofenonu za vzniku produktu jako žluté pevné látky v 85% výtěžku, t.t. 178-180 °C.

^XH NMR (DMSO-dJ : δ 7,70 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,34 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,00 (2H, d, J = 8,6 Hz), 6,80 (2H, d, J = 8,6), 3,94 (3H, s), 2,94 (6H, s).

Anal. vypočteno pro C₁₉H₂₀₁N₄O₂S: C, 61,94; H, 5,47; N, 15,21; S, 8,70. Nalezeno: C, 66,22; H, 5,48; N, 15,03; S, 8,58.

* Příklad C(4) :

/4-Amino-2- (4-dimethylamino-fenylamino) -thiazol-5-yl/-(2-nitrofenyl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu C(l). 4-Dimethylaminofeny-lisothiokyanat a 2-brom-2'-nitro-acetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 90% výtěžku, t.t. větší než 195 °C (rozkl.).

²H NMR (DMSO-d₆) : δ 8,06 (2H, bs), 7,76 (2H, m) , 7,27 (2H, bs) , 6,74 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,38 (6H, s).

FABMS (MH⁺): 384.

Anal. vypočteno pro Ο_1ΘΗ₁₇Ν₅Ο₃8 . 0,5 CH₃CN: C, 56,94; H, 4,62; N,

19,07; S, 7,94. Nalezeno: C, 56,71; H, 4,64; N, 19,09; S, 7,88.

* Příklad C(5) :

(4-Amino-2-f enethylamino-thiazol-5-yl) - (2-ni tro-f enyl) -methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě podobně, jako je popsáno v příkladu C(l). Fenethylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly amorfní žlutou pevnou látku v 90% výtěžku, t.t. 75,0 - 81,5 °C (rozkl).

NMR (DMSO-d₆) : δ 8,67 (1H, bs), 8,00 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,80

(2H, bs),	7,75	(1H, t, J = 7,5 Hz), 7,65 (1H, t, J = 7,5 Hz),
7,58	(1H,	d,	J	= 6,5 Hz), 7,04	- 7,32 (5H, m), 3,50 (2H,	bs),
2,82	(2H,	t,	J	= 7,2 Hz) .

FABMS (MH+): 369.

Anal. vypočteno pro C_igH₁₆N₄O₃S . 0,1 H₂O . 0,1 C₆H₁₄ : C, 58,97; H, 4,68; N, 14,79; S, 8,46. Nalezeno: C, 58,97; H, 4,78; N, 14,54; S, 8,37.

* Příklad C (6) : . Methyl2 (S) -/4-Amino-5-(4-nitro-benzoyl) -thiazol-2-ylamino/-butyrat

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobným způsobem, jako je popsáno v příkladu C(1). Methyl 2(S)-isothiokyanato-butyrat a 2-brom-4'-nitroacetofenon poskytly amorfní červeno-hnědou pevnou látku v 89% výtěžku.

²H NMR (CDClj): δ 8,28 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,86 (2H, J = 8,2 Hz), 3,94 (3H, s), 4,32 (1H, bs), 2,12 (1H, m), 1,88 (1H, m), 0,96 (3H, t, J = 6,4 Hz).

Γι I* c* C

Γ r Γ <· ^{r ř} e r ' r 9

FABMS (MH+): 365 * Příklad C (7) :

/4-Amino-2- ((4-dimethylaminofenyl)amino) -thiazol-5-yl/-(3-methylbenzo/b?thiofen-2-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l). 4-Dimethylminofenylisothiokyanat a 2-(2-bromacetyl)-3-methyl-benzo /b/thiofen poskytly, po rekrystalizaci z ethanolu, 210 mg (92% výtěžek) žlutého prášku, t.t. 123-126 °C.

^XH NMR (DMSO-dJ: δ 10,50 (1H, s) , 8,20 (2H, bs) , 7,96 (1H, ddd, J = 5,0, 5,0, 1,9 Hz), 7,82 (1H, ddd, J= 4,1, 4,1, 1,7), 7,44 (2H, ddd, J = 9,0, 4,5,' 4,5 Hz), 7,26 (2H, d, J = 8,5 Hz), 6,69 (2H, d, J = 9,0 hz), 2,84 (6H, s).

FABMS (MH+): 409.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₀N₄OS₂ . 0,5 H₂0 . 0,5 MeOH: C, 59,56; H, 5,35; N, 12,92; S, 14,79. Nalezeno: C, 59,87; H, 5,39; N, 12,86;

S, 14,69.

* Příklade(8):

/^r4-Amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino) -thiazol-ó-yl/-(3-methylbenzo/b7thiofen-2-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobně jako v příkladu C(l). 6-Isothiokyanat-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl .překl.)., sv. 24 (1990), str. 818-822) a 2-(2-bromacetyl)-3-methyl-benzo/b/thiofen poskytly 160 mg (53% ·' Γ výtěžek) žlutého prášku , t.t. 235-240 °C.

^XH NMR <DMS0-d₆): δ 12,50 (IH, s), 10,9 (IH, s), 8,28 (2H, bs), 8,19 (IH, s), 8,20-7,93 (IH, m), 7,93 - 8,00 (2H. m), 7,56 (IH, d, J = 8,7 Hz), 7,50 - 7,40 (2H, m), 7,25 (IH, d, J = 8,7 Hz), 2,49 (3H, s).

FABMS (MH+): 406.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₅N₅OS₂ . 0,5 H₂0: C, 57, 95; H, 3,89; N, 16,90; S, 15,47. Nalezeno: C, 57,98; H, 3,88; N, 17,06; S, 15,55. * Příklade(9):

f4-Amino-2- (5-chlor-3-methyl-benzo/b/thiofen-2-ylamino) -thiazol-5 -yl/-(4-dimethylamino-fenyl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jako v příkladu C(1). 4-Dimethylaminofenyl-isothiokyanat a 2-(2-bromacetyl)-5-chlor-3-methyl-benzo/b/thiofen poskytly 54% výtěžek žlutého prášku , t.t. 265-268 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,60 (IH, s), 8,04 (2H, bs), 8,00 (IH, d, J =

8,7 Hz), 7,88 (IH, d, J = 1,8 Hz), 7,46 (IH, dd, J = 8,7, 1,8 Hz), 7,34 - 7,20 (2H, m), 6,68 (2H, d, J = 9,0 Hz), 2,85 (6H, s), 2,43 (3H, s).

FABMS (MH+): 443/445.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₁₉N₄OS₂C1: C, 56,94; H, 4,32; N, 12,65; S, 14,48; Cl, 8,00. Nalezeno: C, 56,82; H, 4,39; N, 12,42; S, 14,42; Cl, 8,17.

* Příklad C(10):

/4-Amino-2- (lH-benzimidazol-6-yl-amino) -thiazol-5-yV- (5-chlor-3~

-methyl-benzo/b/thiofen-2-yl)-methanon r

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobně jako v přikladu C(l). 6-IsothiokyanaťlH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl .překl.)., sv. 24 (1990), str. 818-822) a 2-(2-bromacetyl)-5-chlor-3-methyl-benzo/b/thiofen poskytly 59% výtěžek žlutého prášku , t.t. 275-280 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆) : δ 12,44 (1H, s), 10,86 (1H, s), 8,30 (2H, bs), 8,18 (1H, s), 8,02 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,90 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,86 (1H, bs), 7,55 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,45 (1H, dd, J = 8,7, 2,0 Hz), 7,25 (1H, d, J = 8,7 Hz), 2,46 (3H, s).

ASIMS (MH+): 440/442.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₄N₅OS₂C1 . 1,0 H,O: C, 52,45; H, 3,52; N, 15,29; S, 14,00; Cl, 7,74. Nalezeno: C, 52,61; H, 3,60; N, 15,15; S, 14,12; Cl, 7,81.

* Příklad C (11) :

/'4-7\mino-2- (benzo/1, 3/dioxol-5-yl-amino) -thiazol-5-yl?^- (2-nitrofenyl) -methanon

NH,

NOj

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k příkladu C (1). 3,4-Methylendioxyfenyl-isothiokyanat a 2-brom-2'-nitro-acetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 73% výtěžku, t.t. 200,0 - 202,5 °C.

Ή NMR (DMSO-dj) : δ 10,69 (1H, s), 8,04 (2H, bs), 8,03 (1H, d, J =

7.8 Hz), 7,78 (1H, dd, J = 7,8, 6,5 Hz), 7,67 (1H, dd, J = 7,2,

6,5 Hz), 7,63 (1H, d, J=7,2Hz), 7,28 (1H, s), 6,89 (1H, d, J=

8.9 Hz), 6,85 (1H, d, J = 8,9 Hz), 6,00 (2H, s) .

FABMS (MH+): 385.

Γ c c C

C r·

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₂N₄O₅S: C, 53,12; H, 3,15; N, 14,58; S 8,34. Nalezeno: C, 53,02; H, 3,20; N, 14,39; S, 8,27.

* Příklad C (12) :

/4-Amino-2- (4-methoxy-fenylamino)-thiazol-5-yl/-/2-jodo-fenyl) -methanon

2-Brom-2'-jodacetofenon, který má strukturní vzorec byl poprvé připraven následujícím postupem. Podle postupu Kinga a kol·., J. Org. Chem, sv. 29 (1964), str. 3459-3461, byl do roztoku 2'-jodacetofenonu (3,54 g, 14,4 mmol) v EtOAc přidán bromid měďnatý (6,34 g, 28,8 mmol), a získaná směs byla zahřívána pod refluxem po 90 minut. Směs byla ponechána ochladit a pevné látky byly odfitrovány a promyty EtOAc. Filtrát byl koncentrován a bylo získáno 4,60 g (98% výtěžek)

2-brom-2'-jodacetofenonu jako žlutého oleje, který souhlasil s předtím popsaným materiálem (Lutz a kol., J. Org. Chem., sv.12 (1947), str. 617).

Sloučenina uvedená v názvu potom byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l). 4-Methoxyfenylisothiokyanat a 2-brom-2'-jodacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 71% výtěžku, t.t. 187-190 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,56 (1H, s), 8,03 (2H, bs), 7,85 (1H, d, J =

7,5 Hz), 7,32-7,48 (3H, m), 7,29 (1H, dd, J = 7,5, 1,6 Hz), 7,12 (1H, td, J = 7,5, 1,6 Hz), 7,12 (1H, td, J = 7,5, 1,6 Hz), 6,90 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,51 (3H, s).

FABMS (MH+): 452.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₄N₃O₂SI .0,05 C₆H₆ . 0,2 EtOH: C, 45,78; H,

3,36; N, 9,05;. S, 6,90; I, 27,53. Nalezeno: C, 46,08; H, 3,54; N, r f β e

9,09; S, 7,04; I, 27,62.

* Příklad C (13) :

/4-Amino-2-(4-nitro-fenylamino)-thiazol-4-yl/~(2-nitro-fenyl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem, jak je popsáno v příkladu C(l). 4-Nitrofenylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 45% výtěžku, t.t. 266,0-268,2 °C.

NMR (DMSO-d₆): δ 10,80 (IH, s) , 8,23 (2H, d, J = 9,4 Hz), 8,15 (2H, bs), 8,08 (IH, d, J = 8,1 Hz), 7,84 (2H, d, J = 9,4 Hz),

7,83 (IH, t, J = 7,5 Hz), 7,75 - 7,66 (2H, m).

FABMS (MH+): 386.

Anal. vypočteno pro CigH^NgOsS: C, 49,87; H, 2,88; N, 18,17; S, 8,32. Nalezeno: C, 49,83; H, 2,90; N, 18,10; S, 8,27.

* Příklad C(14):

(4-Amino-2-cyklohexylamino-thiazol-5-yl)- (2-nitro-fenyl) -methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogicky k příkladu C(1). Cyklohexylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 45% výtěžku, t.t. 116-118 °C.

NMR (DMSO-dg): δ 8,62 (IH, bs), 8,00 (IH, d, J = 8,1 Hz), 7,97 (2H, bs), 7,75 (IH, dd, J = 8,1, 7,5 Hz), 7,64 (IH, dd, J = 8,1,

7,5 Hz), 7,59 (IH, d, J = 7,5 Hz), 3,62 (IH, bs), 1,94 - 1,78 (2H, m), 1,73-1,60 (2H, m), 1,58 - 1,46 (IH, m), 1,32 -1,02 (5H, m) .

Ρ Ρ

FABMS (ΜΗ+): 347.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₈N₄O₃S .0,7 H₂O: C, 53,53; H, 5,45; N, .15,61; S, 8,93. Nalezeno: C, 53,79; H, 5,24; N, 15,44; S, 8,93.

* Příklad C(15):

/4-Amino-2- (4-isopropyl-f enylamino )-thiazol-5-yl/- (2-nitro-fenyl) -methanón

no₂

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l). Isopropylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 58% výtěžku, t.t. 202,5-205,0 °C.

^LH NMR (DMSO-d_s) : δ 10,74 (ÍH, s), 8,05 (2H, bs), 8,03 (ÍH, d, J =

7,5 Hz), 7,78 (ÍH, dt, J = 7,5, 1,3 Hz), 7,71 - 7,60 (2H, m) ,

7,41 (2H, d, J = 8,3 Hz), 7,20 (2H, d, J = 8,3 Hz), 2,83 (1H, heptet, J = 6,9 Hz) , 1,16 (6H, d, J = 6,9 Hz).

FABMS (MH+): 383.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₈N₄O₃S: C, 59,67; H, 4,74; N, 14,65; S, 8,38. Nalezeno: C, 59,62; H, 4,77; N, 14,56; S, 8,43.

* Příklad C(16) :

//l-Amino-2-/2- (4-chlorfenyl) -ethylamino?-thiazol-5-yl/- (2-nitrofenyl)-methanón

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 4-Chlorfenethylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 61% výtěžku, t.t. 117-120 °C.

r e r c r e c ^TH NMR (DMSO-d₆) : δ 8,74 (1H, bs), 8,00 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,95 (2H, bs), 7,75 (1H, td, J= 7,5, 1,2 Hz), 7,64 (2H, td, J= 8,1,

1,6 Hz), 7,57 (1H, dd, J = 7,5, 1,2 Hz), 7,33 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,23 (2H, d, J = 8.4 Hz), 3,60-3,35 (2H, m), 2,81 (2H, t, J = 6,8 Hz) .

FABMS (MH+): 403.

Anal. vypočteno pro C₁₃H₁₅N₄O₃SC1.0, 5 EtOH: C, 53,58; H, 4,26; N, 13,16; S, 7,53; Cl, 8,32. Nalezeno: C, 53,63; H, 4,33; N, 13,22; S, 7,47; Cl, 8,45.

* Příklad C(17):

/4-Amino-(2-(4-diethylamino-fenylamino) -thiazol-5-ylý- (2-nitrofenyl )-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 4-Diethylaminofenylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 63% výtěžku, t.t. 202,5- 205,0 °C.

^LH NMR (DMSO-d₆) : δ 10,45 (1H, s) , 8,01 (1H, d, J = -8,1 Hz), 7,97 (2H, bs), 7,75 (1H, dd, J = 8,1, 7,8 Hz), 7,64 (1H, dd, J = 8,1, 7,8 Hz), 7,59 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,18 (2H, d, J = 9,0 Hz),

6,61 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,28 (4H, q,.J = 7,2 Hz), 1,05 (6H, t, J = 7,2 Hz).

FABMS (MH+): 412.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₂₁N₅O₃S: C, 58,38; H, 5,14; N, 17,02; S, 7,79. Nalezeno: C, 58,28; H, 5,20; N, 16,77; S, 7,94.

* Příklad C(18):

/4-Amino-2-(4-diethylamino-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(4-nitrofenyl )-methanon r· r

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 4-Diethylaminofenylisothiokyanat a 2-brom-4'-nitroacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 63% výtěžku, t.t. 220-221 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,51 (IH, s), 8,42 (2H, bs), 8,26 (2H, d, J = 12,0 Hz), 7,84 (2H, d, J = 12,0 Hz), 7,22 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,63 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,26 (4H, q, J = 6,8 Hz), 1,05 (6H, t,

J = 6,8 Hz) .

FABMS (MH+): 412.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₂₁N₅O₃S: C, 58,38; H, 5,14; N, 17,02; S, 7,79. Nalezeno: C, 58,23; H, 5,16; N, 16,94; S, 7,86.

* Příklad C(19) :

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)-thiazol-5-yl/-(3-methylthiofen-2-yl)-methanon nh₂

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 6-Isothiokyanat-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-(2-bromacetyl)-3-methyl-thiofen (patent US 5 189 049; acetyl brómovaný bromidem měďnatým postupem podle Kong a kol., J. Org. Chem., sv. 29 (1964), str. 3459 - 3461; ukázkový postup v příkladu C(19)) poskytly žlutý prášek v 67% -výtěžku, t.t. 285-287 °C.

e r e e ^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 12,60 (1H, bs), 10,78 (1H, s), 8,23 (1H, s), 8,17 (2H, bs), 7,93 (1H, s), 7,56 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,55 (1H, d, J = 5,0 Hz), 7,27 (1H, dd, J = 8,7, 1,9 Hz), 6,60 (1H, d, J= 5,0 Hz), 2,36 (3H, s) .

FABMS (MH+): 356.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₃N₅OS₂ .0,6 H₂O: C, 52,47; H, 3,91; N,

19,12; S, 17,51. Nalezeno: C, 52,50; H, 3,90; N, 19,10; S, 17,71. * Příklad C(20) /4-Amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino) -thiazol-5-yl/- (2,4-dimethylfenyl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(lj. 6-Isothiokyanat-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-brom-2',4'-dimethylacetofenon poskytly 77% výtěžek žlutého prášku, t.t. 290-292 °C.

^XH NMR (DMSO-d_s) : δ 12,43 (1H, bs), 10,65 (1H, s), 8,18 (2H, bs), 7,80 (1H, bs), 7,54 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,20 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,16 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,03 (1H, s) , 6,99 (1H, d, J=

7,5 Hz), 2,26 (3H, s), 2,22 (3H, s).

FABMS (MH+): 364.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₇N₅OS: C, 62,79; H, 4,71; N, 19,27; S,

8,82. Nalezeno: C, 62,50; H, 4,78; N, 19,22; S, 8,72.

* Příklad C(21) /'4-Amino-2- (pyridin-3-ylamino) -thiazol-5-ylý- (2,4-dimethylfenyl)methanon

o ρ ρ e r

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v přikladu C(l). 3-Pyridyl-Isothiokyanat a

2- brom-2',4'-dimethylacetofenon poskytly 63% výtěžek žlutého prášku, t.t. 200-202 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆): δ 10,82 (1H, s), 8,76 (1H, d, J = 2,5 Hz), 8,O6(1H, d, J = 8,4 Η), 8,04 (2H, bs), 7,36 (1H, dd, J = 8,4,

4,1 Hz), 7,21 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,06 (1H, s), 7,02 (1H, d, J = 7,5 Hz), 2,28 (2H, s), 2,23 (3H, s).

FABMS (MH+): 325.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₆N₄OS: C, 62,94; H, 4,97; N, 17,27; S,

9,88. Nalezeno: C, 65,86; H, 5,03; N, 17,17; S, 9,95.

* Příklad C(22)

3- /4-Amino-5- (2-kyano-benzoyl) -thiazol-2-ylamino7-benzonitril

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě způsobem jako je popsáno v přikladu C(l). 3-Kyanofenylisothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly oranžovou pevnou látku v 94% výtěžku, t.t. 235-236 °C.

^JH NMR (DMSO-d₆) : δ 8,26 (1H, bs) , 8,06 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,8 (1H, t, J = 7,0 Hz), 7,74 - 7,64 (3H,m), 7,58 - 7,48 (2H, m) .

IR (KBr): 3460, 33,7, 3271, 3083, 2214, 1625, 1601, 1525 cm'¹.

Anal. vypočteno pro C₁₇H_UN₅O₃S: C, 55,80; H, 3,03; N, 19,17; S, 8,78. Nalezeno: C, 55,70; H, 3,05; N, 19,01; S, 8,73.

* Příklad C(23) /4-Amino-2- (3-methoxypropylaxnino) -thiazol-5-yl/- (2-nitrofenyl)methanon r r

-A mh₂

no₂ h₃coSloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 3-Methoxypropyl- isothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly žlutou pevou látku v 99% výtěžku, t.t. 170-172 °C.

^XH NMR (DMSO-dJ: δ 8,02 - 7,92 (2H, m) , 7,4 (1H, t, J = 7,0 Hz), 7,68 - 7,56 (2H, m), 3,38 - 3,22 (7H, m), 1,78 - 1, 66 (2H, m).

Anal. vypočteno pro C₁₄H₁₆N₄O₄S: C, 49,99; H, 4,79; N, 16,66; S, 9,53. Nalezeno: C, 50,04; H, 4,81; N, 16,69; S, 9,61.

* Příklad C(24) í^-<f4-Amino-5- (2-nitrobenzoyl) -thiazol-2-ylaminq/fenylJethanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 4-Acetylfenyl-isothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 87% výtěžku, t.t. 264-265 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 8,06 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,92 <2H, d, J = 9,0 Hz), 7,84. - 7,78 (1H, m), 7,73 - 7, 64 (4H, m), 2,42 (3H, s) .

IR (KBr): 3389, 3248, 1690, 1655, 1573, 1472, 1420, 1273 cm'¹.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₄N₄O₄S: C, 56,54; H, 3,69; N, 14,65; S, 8,39. Nalezeno: C, 56,39; H, 3,73; N, 14,44; S, 8,31.

* Příklad C(25) (4-Amino-2-/í-(2-chlor-5-trifluormethyl-pyridin-2-ylsulfanyl)-fenylamino/-thiazol-5-yl/-(2-nitro-fenyl)methanon

Γ Ρ

Ρ Ρ

Γ Ρ * β ρ ρ ρ ρ ρ γ ρ ρ ρ ρ ρ © ι- Ρ

Ρ Ρ Γ ρ ρ Ρ ,· C t Ρ f Γ

Ρ Γ . Γ

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l).

2-/4- (2-Chlor-4-trifluormethyl-pyridin-2-yl-sulfanyl)-fenyl/-isothiokyanat a 2-brom-2'-nitroacetofenon poskytly oranžovou pevnou látku v 52% výtěžku, t.t. 150-152 °C.

NMR (DMSO-dJ: δ 8,65 (lH,bs), 8,38 (1H, bs), 8,06 (2H, d, J = 8,0 Hz), 7,80 (1H, t, J = 7,0 Hz), 7,74-7, 64 (4H, m), 7,54 (2H, d, J = 8,0 Hz) .

IR (KBr): 3272, 3048, 1596, 1531, 1431, 1320 cm-¹.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₁₃C1F₃N₅O₃S: C, 47,87; H, 2,37; N, 12,60; S, 11,62; Cl, 6,42. Nalezeno: C, 47,79; H, 2,44; N, 12,54; S, 11,70; Cl, 6,52.

* Příklad C (26)

Methyl 3-/4-Amino-5- (2-methoxybenzoyl) -thiazol-2-ylamino/benzoat

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 3-Methoxykarbonylfenylisothiokyanat a 2-brom-2'-methoxy-acetofenon poskytly slonovinovou pevnou látku v 59% výtěžku, t.t. 214-215 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,81 (1H, s), 8,12 - 7,90 (4H, m), 7,62 (1H, ddd, J = 7,8, 1,2, 1,2 Hz), 7,49 (1H, t, J = 7,9 Hz), 7,39 (1H, ddd, J = 8,7, 8,7, 1,7 Hz), 7,25 (1H, dd, J=7,5, 1,9 Hz), 7,09 (1H, d, J = 8,4 Hz), 6,98 (1H, ddd, J = 7,5, 7,5, 0,6 Hz), 3,85 (3H, s), 3,87 (3H, s).

r r e- r

1417, 1294

10,96; S, r r ^{ r r r f r- t- Λ c <

<- f r· ? r c ^r r c r r r r ·46

FABMS(MH+): 327.

IR (KBr): 3473, 3333, 3261, 3092, 1718, 1602, 1527, cm^-1.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₇N₃O„S: C, 59,52; H, 4,47; N,

8,36. Nalezeno: C, 59,41; H, .4,46; N, 10,93; S, 8,3:

* Příklad C(27) /4-Amino-2-/2- (4-chlorfenyl) -ethylamino_?-thiazol-5-yl/- (2-methoxy -fenyl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). Produkt 4- chlorfenethylisothiokyanatu a 2-brom-2'-methoxyacetofenonu byl extrahován 10% i-PrOH/CHCl₃. Získaná pevná látka byla promyta Et₂O za vzniku slonovinové pevné látky v 49% výtěžku, t.t. 150-151 °C.

’Η NMR (DMSO-dg): 5 8,53 (2H, bs), 7,87 (IH, bs), 7,39 - 7,28 (3H, m), 7,23 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,17 (IH, dd, J = 7,5, 1,6 Hz), 7,03 (IH, d, J = 8,4 Hz), 6,93 (IH, t, J = 7,5 Hz),

3,40 (2H, bs), 2,81 (2H, t, J = 7,0 Hz).

FABMS (MH+): 388

IR (KBr): 3354, 3214, 3166, 3103, 1600, 1578, 1544,

1363 cm ~^í.

Anal. vypočteno pro C₁₉H_L8C1N₃O₂S: C, 58,83; H, 4,68;

8,27. Nalezeno: C, 58,70; H, 4,62; N, 10,75; S, 8,25.

* Příklad C(28) /”4-Amino-2- (pyridin-3-y lamino) -thiazol-5-yl/-(2,4-óichlorfenyl)3,88 (3H, s),

1525, 1462,

N, 10,83; S,

-methanon e « e r

o

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 3-Pyridyl-isothiokyanat a 2,2', 4'-trichloracetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 39% výtěžku, t.t. 209-210 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 10,95 (1H, s),8,77 (1H, d, J = 2,5 Hz), 8,28 (1H, dd, J = 4,7, 1,6 Hz), 8,16 (2H, bs), 8,06 (1H, bd, J = 9,6 Hz), 7,70 (1H, d, J = 1,6 Hz), 7,48 (2H, dd, J = 11,5, 8,1 Hz), 7,37 (1H, dd, J = 8,4, 4,7 Hz).

FABMS (MH+): 365

IR (KBr): 3378, 3272, 3175, 3072, 1608, 1586, 1561, 1525, 1424 cm¹.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₀C1₂N₄OS. 0,9 H₂O: C, 47,23; H, 3,12; N, 14,69; S,8,41. Nalezeno: C, 47,03; H, 3,09; N, 14,52; S, 8,42.

* Příklad C(29) /*4-Amino-2- (pyridin^-3-ylamino) -thiazol-5-yl?- (2-methoxyfenyl) methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 3-Pyridyl-isothiokyanat a 2-brom-2'-methoxyacetofenon poskytly téměř bílou / slonovinovou pevnou látku v 67% výtěžku, t.t. 245-246 °C.

^XH NMR (DMSO-d₅): δ 10,80 (1H, s), 8,77 (1H, d, J = 2,8 Hz), 8,25 (1H, dd, J = 4,7, 1,2 Hz), 8,07 (1H, ddd, J = 8,4, 2,8, 1,6 Hz),

8,00 (2H, bs), 7,44 - 7,33 (2H, m), 7,24 (1H, dd, J= 7,5, 1,6

C ρ r r r r ρ f r Γ γ Γ ι Ρ

Γ Ρ

Ηζ), 7,09 (IH, d, J = 8,1 Hz), 6,98 (IH, t, J = 7,5 Hz), 3,76 (3H, s).

FABMS (MH+) : 327

IR (KBr): 3424, 3310, 2971, 1632, 1603, 1526, 1459, 1405 cm

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₄N₄O₂S: C, 58,88; H, 4,32; N, 17,17; S, 9,28. Nalezeno: C, 58,84; H, 4,33; N, 17,07; S, 9,90.

Příklad C(30) /4-Amino-2-(pyridin-3-ylamino)-thiazol-5-yl/-naftalen-2-ylmethanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě způsobem jako je popsáno v příkladu C(l). 3-Pyridyl-isothiokyanat a 2-brom-2'-acetofenon poskytly, po rekrystalizací z EtOH, žlutou pevnou látku v 12% výtěžku, t.t. 242-243 °C.

^XH NMR (DMSO-dJ : δ 10,97 (IH, s), 8,82 (IH, d, J = 2,5 Hz), 8,36 8,18 (3H, m), 8,13 (IH, ddd, J = 8,4, 4,0, 1,6 Hz), 8,08 - 7,93 (2H, m), 7,77 (IH, dd, J = 8,4, 1,6 Hz), 7,60 (2H, ddd, J = 14,3, 10,6, 7,9, 2,2 Hz), 7,39 (IH, dd, J = 8,4, 5,0 Hz).

FABMS (MH+): 347.

IR (KBr): 3462, 3316, 3261, 3071, 1623, 1584, 1531, 1421 cm L

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₄N₄OS: C, 65,88; H, 4,07; N, 16,17; S,

9,26. Nalezeno: C, 65,80; H, 4,09; N, 16,09; S, 9,34.

* Příklad C(31) /4-Amino-2-(2-methoxy-benzylamino)-thiazol-5-yl/-(5-chlor-benzofuran-2-yl)-methanon

•ci r r r r *

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 2-Methoxybenzyl-isothiokyanat a

2-bromacetyl-5-chlorbenzofuran poskytly 62% výtěžek žlutého prášku, t.t. 241-242 °C. .

’Ή NMR (DMSO-d₆) : δ 9,17 (1H, bs), 8,78 (1H, bs) , 8,21 (1H, bs), 7,83 (1H, d, J = 2,2 Hz), 7,66 (1H, d, J = 9,0 Hz),7,44 (1H, dd, J = 9,0, 2,2 Hz), 7,39 (1H, s), 7,28 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,25 (1H, dd, 7,5, 7,2 Hz), 7,01 (1H, d, J = 8,1 Hz), 6,92 (1H, dd, J = 7,5, 7,2 Hz), 4,51 (2H, bs), 3,82 (3H, s) .

FABMS (MH+): 414/416.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₆N₃O₃ClS: C, 58,04; H, 3,90; N, 10,15; S, 7,75; Cl, 8,57. Nalezeno: C, 57,97; H, 3,85; N, 10,11; S, 7,85;

Cl, 8,63.

* Příklad C(32) /4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ýlamino)-thiazol-5-yl/-(2-methoxyfenyl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsáno v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv.

(1990), str. 812-822) a 2-brom-2'-methoxyacetofenon poskytly 72% výtěžek amorfního žlutého prášku, t.t. 180-185 °C (rozkl.).

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 12,40, (1H, bs), 10,61 (1H, bs), 8,16 (1H, s), 7,94 (2H, bs), 7,83 (1H, bs), 7,53 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,36 (1H, ddd, J = 8,4, 7,6, 1,6 Hz), 7,24 - 7,16 (2H, m), 7,05 (1H, d, J= 8,1 Hz), 6,95 (1H, dd, J = 7,6, 7,2 Hz), 3,74 (3H,s).

FABMS (MH+): 366.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₅N₅O₂S . 0,5 H₂O: C, 57,74; H, 4,31; N, r * r r r ř r ,- r r z rrr f 50

18,71; S, 8,56. Nalezeno: C, 57,78; H, 4,29; N, 18,64; S, 8,53. * Příklad C(33)

4-/4-Amino-5-(2,4-dimethoxy-benzoyl)-thiazol-2-ylamino/-benzensulfonamid

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Isothiokyanat-benzensulfonamid a 2-brom-2',4'-dimethoxyacetofenon poskytly 75% výtěžek žlutého prášku, t.t. 249-250 °C.

NMR (DMSO-d₅): δ 10,93 (1H, bs), 7,93 (2H, bs), 7,75 (4H, bs), 7,25 (2H, bs),-7,21 (1H, d, J = 8,1 Hz), 6,61 (1H, d, J = 1,9 Hz) ,· 6,55 (1H, dd, J % 8,1 Hz),. 3,79 (3H, s) , 3,76 (3H, s) .

FABMS (MH+): 435.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₃N₄O₅S₂: C, 49,76; H, 4,18; N, 12,89; S, 14,86.

* Příklad C(34)

Ethyl 4-/4-Amino-2-(4-sulfamoyl-fenylamino)-thiazol-5-karbonyl/benzoat

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Isothiokyanat-benzensulfonamid a ethyl 4-bromacetylbenzoat poskytly 95% výtěžek žlutého prášku, t.t. 225-227 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 11,16 (1H, s), 8,32 (2H, bs), 8,04 (2H, d, J 8,4 Hz), 7,80 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,78 (4H, bs), 7,26 (2H, bs),

4,33 (2Η, q, J = 7,2 Hz), 1,33 (3H, t, J = 7,2 Hz).

FABMS (MH+): 447.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₈N₄O₅S₂ . 0,4 H₂O: C, 50,30; H, 4,18; N, 12,38; S, 14,13. Nalezeno: C, 50,11; H, 3,97; N, 12,26; S, 14,14. * . Příklad C(35)

4-/4-Amino-5- (2,4-dimethyl-benzoyl)-thiazol-2-ylamino/-benzensulfonamid

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Isothiokyanatbenzensulfonamid a 2-brom-2',4'-dimethylacetofenon poskytly 75% výtěžek

žlutého prášku, t.t. 242-244 °C.
XH NMR (DMSO-d6) : δ 10,97	(ÍH,	bs),	8,00	(2H, bs),	7,76 (2H, d, J
9,7 Hz) , 7,72 (2H, d, J =	= 9,7	Hz),	7,24	(2H, bs),	7,22 (1H, d, J
= 7,5 Hz), 7,07 (ÍH, s) ,	7,03	(ÍH,	d, J	= 7,5 Hz)	,2,29 (3H, s),

2,23 (3H, s).

FABMS (MH+): 403.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₈N₄O₃S₂: C, 53,71; H, 4,51; N, 13,92; S, 15,92. Nalezeno: C, 53,47; H, 4,54; N, 13,69; S, 15,83.

* Příklad C(36) /'4-Amino-2-/“4- (2-chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl-sulfanyl) fenylamino/-thiazol-5-yl/- (2,6-dichlor-4-trifluormethylfenyl)methanón nh₂ n· r <52

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě způsobem popsaným v příkladu C(l). 2-/4-(2-chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl-sulfanyl) fenyl/isothiokyanat a

2-brom-2', 6'-dichlor-4 '-trif luormethyl-acetof enon poskytly oranžovou pevnou látku v 52% výtěžku, t.t. 130-132 °C.

Ή NMR (DMSO-d_s): δ 8,65 (IH, bs), 8,38 (IH, bs) , 8,06 (2H, d, J = 8,0 Hz), 7,80 (IH, t, J = 7,0 Hz), 7,74 - 7, 64 (4H, m), 7,54 (2H, d, J = 8,0 Hz).

IR (KBr) : 3272, 3048, 1596, 1531, 1431, 1320 cm’¹.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₁₃C1F₃N₅O₃S₂: C, 47,87; H, 2,37; N, 12,69; S 11,62; Cl, 6,42. Nalezeno: C, 47,79; H, 2,44; N, 12,54; S, 11,70; Cl, 6,52.

* Příklad C(37) /4-Amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino/-thiazol-5-yl/- (2, 6-dichlor-4-trifluormethylfenyl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-brom-2', 6'-dichlor4'-trifluormethyl-acetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 56% výtěžku, která se rozkládala při teplotě nad 180 °C.

^LH NMR (DMSO-dg): δ 12,45 (IH, bd, J = 16,0 Hz), 11,10-10,80 (lH,s), 8,00 (2H, s), 7,70 - 7,45 (2H, m), 7,20 (IH, d, J = 8,0 Hz) .

IR (KBr): 3191, 2974, 1619, 1559, 1467, 1309 cm'¹.

FABMS (MH+): 472.

Anal. vypočteno pro C_igH₁₀Cl₂F₃N₅OS . 0,6 HOAc . 0,1 CH₂C1₂ . H₂O: C, e *

Γ . 53

45,58; Η, 2,95; Ν, 12,18; S, 5,69; C1, 13,92. Nalezeno: C, 45,70; Η, 3,05; Ν, 12,45; C1, 13,87.

* Příklad C(38)

4-/4-Amino-5- (2, 6-dichlor-4-trifluormethyl~benzoyl) -thiazol-2-ylamino/-benzensulfonamid

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Isothiokyanatbenzensulfonamid a 2-brom-2', 6'-dichlor-4'- (trifluormethyl)acetofenon poskytly, po rekrystalizací z EtOH/H₂O a sušení přes benzenový azeotrop, žlutou pevnou látku ve 46% výtěžku, t.t. 294-296 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 8,10 (1H, s) , 8,05 (2H, sj, 7,77 (4H, dd, J = 9,0, 14,0 Hz).

HRFABMS (MH+) : Vypočteno pro C₁₇H₁₂C1₂F₃N₄O₃S₂(MH+) : 510,9680. Nalezeno: 510,9697.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₂C1₂F₃N₄O₃S₂. 0,1 H₂0 . C_aH₅: C, 40,28; H, 2,51; N, 10,30; S, 11,97; Cl, 13,51. Nalezeno: C, 40,58; H, 2,28; N, 10,75; S, 12,31; Cl, 13,61.

* Příklad C(39)

Fenyl 4-/4-Amino-2- (4-sulfamoylfenylamino)-thiazol-5-karbonyl/benzoat

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem popsaným v příkladu.C(l). 4-Isothiokyanatbenzensulfonamid a 4-(bromacetyl)fenyl benzoat poskytly žlutou pevnou r i54 látku v 77% výtěžku, t.t. nad 300 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 11,13 (1H, s), 8,26 (2H, bs), 8,15 (2H, dd, J 7,2, 1,6 Hz), 7,83 - 7,73 (7H, m), 7,66 - 7,59 (2H, m), 7,41 (2H, d, J = 6,9 Hz), 7,27 (2H, bs).

HRFABMS (MH+): Vypočteno: 95,0797. Nalezeno: 495,0812.

Anal. vypočteno pro C₂₃H₁₈N₄O₅S₂. 0,2 H₂O: C, 55,45; H, 3,72; N, 11,25; S, 12,87. Nalezeno: C, 55,34; H, 3,592; N, 11,01; S,

12,83.

* Příklad 40:

/4-Amino-2- (4-methoxyfenylamino)-thiazol-5-yl/- (4-methyl-lH-imidazol-5-yl)methanon

5-Bromacetyl-4-methyl-lH-imidazol, který má strukturní vzorec: f? _u byl připraven první, následujícím

postupem. Brom (0,40 ml, 7,77 mmol) byl přidáván po kapkách do roztoku 5-acetyl-4-methyl- -lH-imidazolu (964 mg; 7,77 mmol; LaMattina a kol., J. Org. Chem., sv. 48 (1983), str. 897-898) v HOAc (20 ml) . Po dvou dnech byla HOAc odstraněna ve vakuu a zbytek byl rozdělen CH₂C1₂ a nasyceným NaHCO₃ .Organická vrstva byla promyta solným roztokem, sušena nad Na₂SO₄ a odpařena za získání světle hnědé pevné látky, 625 mg (40% výtěžek), která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (DMSO-dg): δ 12,65 (1H, bs) , 7,67 (1H, s) , 4,62 (2H, s) , 2,44 (3H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 4-Methoxyfenyl-isothiokyanát a 5-bromacetyl-4-methyl-lH-imidazol poskytly r r e žlutý prášek v 57% výtěžku, t.t. 245-50 °C.

NMR (DMSO-d₆): δ 12,28 (1H, bs), 10,21 (1H, s), 8,00 (2H, bs), 7,56 (1H, s), 7,49 (2H,. d, J = 9,0 Hz), 6,94 (2H, d, J = 9,0 Hz), .3,75 (3H, s), 2,50 (3H, s) .

HRFABMS (M+Na+): Vypočteno: 325,0844. Nalezeno: 352,0840.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₅N₅O₂S. 0,5 H₂O: C, 53,24; H, 4,77; N, 20,70; S, 9,48. Nalezeno: C, 53,43; H, 4,78; N, 20,54; S, 9,38.

* Příklad C(41) /4~Amino-2-(4-imidazol-l-yl-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(2,4-dime thyl fenyl) met hanon

.1-(4-Isothiokyanat-fehyl)-lH-imidazol, který má strukturní vzorec ^N_^y__NCS < byl připraven první. Do roztoku

1-(4-aminofenyl)-lH-imidazolu (l,00g, 6,30 mmol; Venuti a kol., J.Med.Chem., sv. 31 (1988). str. 2136-2145) v acetonu (10 ml) byl při 0 °C současně přidáván roztok thiofosgenu (580 mikrolitrů, 7,6 mmo) v acetonu (15 ml) a roztok 25% Na₂CO₃ (15 ml). Směs byla míchána při 0 °C po 0,5 hodin a byla ponechána ohřát na teplotu místnosti po 1,5 hodiny. Acetat byl odstraněn za sníženého tlaku a zbytek byl zředěn vodou. Smetanově zbarvená sraženina byla odfiltrována, promyta vodou a sušena pod vysokým vakuem za vzniku 1,20 g (95% výtěžek suroviny) světlé pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 8,33 (1H, s), 7,81 (1H, s), 7,76 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,61 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,12 (1H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). l-(4-Isothiokyanat-fenyl)-lH-imidazol a 2-brom-2' ,4'-dimethylacetofenon e ρ.

* * r <· p r r p r P poskytly žlutý prášek v 14% výtěžku, t.t. 180-180,5 °C.

NMR (DMSO-dg) : δ 10,80 (1H, bs), 8,10 (1H, s), 8,02 (1H, bs) , 7,68 (2H, d, J =7,5 Hz), 7,58. (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,20 (1H, d, J= 7,8 Hz), 7,10-7,00 (2H, m), 2,28 (3H, s), 2,24 (3H, s).

IR (KBr): 3393, 3119, 2925, 1612, 1566, 1524, 1425 cm'¹.

FABMS (MH+): 390.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₁₉N₅OS. 0,2 H₂O: C, 64,17; H, 4,97; N, 17,82; S, 8,16. Nalezeno: C, 64,14; H, 4,98; N, 17,68; S, 8,21.

* Příklad C(42):

/4-Amino-2-(4-imidazol-l-yl-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(3-methyl-

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným jako je popsán v příkladu C(l).

1- (4-Isothiokyanat-fenyl)-ΙΗ-imidazol (z příkladu C(41)} a

2- bromacetyl-3-methyl-thiofen (z příkladu C(19)) poskytly žlutou pevnou látku v 83% výtěžku, t.t. vyšší než 300 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 10,98 (1H, s), 8,25 (1H, s), 8,18 (1H, bs),

7,77 (1H, s), 7,72 (2H, J=6,5Hz), 7,65 (1H, s), 7,62.(2H, J = 4,7), 7,10 (1H, s), 6,98 (1H, d, J = 5,0 Hz), 2,28 (3H, s).

IR (KBr): 3402, 3278, 3103, 2982, 1609, 1523, 1422, 1306 cm’¹ .

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₆N₅OS₂: C, 56, 67; H, 3,96; N, 18,36; S, 16,81. Nalezeno: C, 56,38; H, 4,06; N, 18,13; S, 16,67.

* Příklad C(43) /4-Amino-2-(lH-benzimidazol-5-ylamino)-thiazol-5-yl/-(l-methyl-lH-pyrrol-2-yl)methanon

/

Η

Ο

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.}., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-chloracetyl-N-methylpyrrol (Croce a kol., Synthesis (1990), str. 212-213) poskytly žlutou pevnou látku v 42% výtěžku, t.t. 284-285 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 12,43 (IH, bs) , 10,65 (IH, bs) , 8,18 (IH, s), 7,94 (3H, bs), 7,55 (IH, d, J = 8,7 Hz), 7,27 (IH, dd, J= 8,7,

1,9 Hz), 6,92 (IH, m), 6,62 (IH, dd, J = 3,7, 2,1 Hz), 6,04 (IH, dd, J = 4,1, 2,1 Hz), 3,80 (3H, s).

HRFABMS (MH+j : Vypočteno:.339,1028. Nalezeno: 339,1024.

Anal. vypočteno pro C_lgH₁₄N₆OS . 0,3 H₂O: C, 55,90; H, 4,28; N, 24,45; S, 9,33. Nalezeno: C, 56,08; H, 4,28; N, 24,46; S, 9,33.

* Příklad C(44) :

l“Z4-/4^-Amino-5- (3-methyl-thiofen-2-karbonyl) -thiazol-2-ylamino/fenyl/ethanon

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Acetylfenyl-isothiokyanat a 2-bromacetyl-3-methyl-thiofen (z příkladu C (19)) poskytly žlutou pevnou látku v 89 % výtěžku, t.t. 171-172 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 11,14 (IH, s), 8,22 (2H, bs), 7,95 (2H, d, J = p r ρ r

9,0 Hz), 7,76 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,62 (1H, d, J = 5,0 Hz, 7,00 (1H, d, J = 5,0 Hz), 2,53 (3H, s), 2,39 (3H, s) .

IR (KBr): 3618, 3354, 3254, 3178, 3072, 1651, 1599, 1524, 1403, 1355, 1318, 1275, 1170 cm’¹.

FABMS (MH+): 357.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₅N₃O₂S₂ . 0,5 H₂O: C, 55,72; H, 4,40; N, 11,47; S, 17,50. Nalezeno: C, 55,92; H, 4,44; N, 11,51; S, 17,44. * Příklad C (45) trans-3RS-Amino-4RS-/4-f4-amino-5- (3-methylthiof en-2-karbonyl) -thiazol-2-ylamino?benzoyl/-dihydrofuran-2-on

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(l). Produkt 4-isothiokyanat-benzoyl-DL-homoserin-laktonu a 2-bromacetyl-3-methyl-thiofenu (z příkladu C (19)) byl extrahován v 10% i-PrOH/CHCl₃. Mžiková chromatografie na koloně se stoupajícím gradientem 2-3-4-5-6% MeOH/CH₂Cl₂ poskytla žlutou pevnou látku v 43% výtěžku, t.t. 162-163 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 11,05 (1H, s), 8,88 (2H, d, J = 8,1 Hz), 8,32 (2H, bs), 7,85 (2H, d,. J = 9,0 Hz), 7,74 (2H, d, J=9,0Hz, 7,61 (1H, d, J = 5,0 Hz), 6,99 (1H, d, J = 5,0 Hz), 4,73 (1H, q, J = 9,3 Hz), 4,40 (1H, ddd, J = 10,8, 8,7, 2,0 Hz), 4,26 (1H, ddd, J = 10,2, 8,7, 6,7).

IR (KBr): 3413, 3284, 3084, 1773, 1637, 1608, 1524, 1413, 1313, 1254, 1181 cm’¹.

FABMS (MH+): 443.

Anal. vypočteno pro C₂oH₁₈N₄0₄S₂ . 0,4 H₂0: C, 53,41; H, 4,21; N,

C r

12,46; S, 14,26. Nalezeno: C, 53,56; H, 4,28; N, 12,30; S, 14,43. * Příklad C(46):

Ethyl 3RS-/4-Amino-5- (3-methyl-thiofen-2-karbonyl) -thiazol-2-y1amino/-butyrat

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(l). Produkt ethyl dl-3-isothiokyanat-butyratu a 2-bromacetyl-3-methyl-thiofen (z příkladu C (19)) byl extrahován 10% i-PrOH/CHCl₃ . Mžiková chromatografie na koloně s 3% MeOH/CH₂Cl₂ poskytla žlutou pevnou látku v 45% výtěžku, t.t. 129-130 °C.

^XH NMR (DMSO-d₅): δ 8,61 (IH, d, J = 7,8 Hz), 8,08 (2H, bs), 7,53 (IH, d, J = 5,0 Hz), 6,94 (IH, d, J = 5,0 Hz, 4,05 (2H, q, J = 7,2 Hz), 2,33 (3H, s), 1,22-1,12 (6H, m).

IR (KBr): 3307, 3213, 1976, 1737, 1618, 1586, 1526, 1423, 1349, 1215, 1183, 1091 cm'¹.

FABMS (MH+): 353.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₉N₃O₃S₂: C, 50,97; H, 5,42; N, 11,89; S, 18,41. Nalezeno: C, 50,81; H, 5,39; N, 11,72; S, 17,97.

* Příklad C(47):

4-/4-Amino-5- (4-methyl-thiazol-5-karbonyl) -thiazol-2-ylamino/benzensulfonamid

5-Bromacetyl-4-methyl-thiazol, který má strukturní vzorec byl připraven, jak je popsáno od Sych a kol., J. Gen. Chem. USSR, r r

Γ p sv. 32 (1996), str. 970-975. Brom (0,75 ml, 7,77 mmol) byl přidáván po kapkách do roztoku 1-(4-methyl-thiazol-5-yl)ethanonu (2,05 mg, 14,5 mmol; Ganapathi a kol., Proč.-Indián Acad. Sci. Séct. A, sv. 22 (1945), str. 362-378) v HOAc (3 ml) . Směs byla míchána při 85 °C po 1,5 hodiny a stal se z ní žlutý koláč. Byla přidána HOAc (3 ml), a po 1,5 hodiny bylo vše ponecháno ochladit. HOAc byla odstraněna ve vakuu a zbytek byl rozdělen mezi CH₂C1₂ a nasycený vodný NaHCO₃. Organická vrstva byla promyta solankou, sušena nad Na₂SO₄ a odpařena za vzniku černé pevné látky, výtěžek 1,3 g (41%), která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDCla): δ 8,85 (1H, s), 4,28 (2H, s), 2,81 (3H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-isothiokyanat-benzensulfonamid a 5-bromacetyl-4-methyl-thiazol poskytly hnědou pevnou látku v 31 % výtěžku, t.t. 262-266 °C.

'H NMR (DMSO-dJ: δ 11,18 (1H, s), 9,08 (1H, s), 8,30 (2H, bs) ,

7,78 (4H, bs), 7,72 (2H, bs), 2,55 (3H, s) .

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₃N₅O₃S₃ : C, 45,52; H, 3,31; N, 17,11; S, 24,32. Nalezeno: C, 42,28; H, 3,33; N, 17,15; S, 24,52.

* Příklad C(48):

4-/4-Amino-5- (3-methyl-thiofen-2-karbonyl)-thiazol-2-ylamino/benzensulfonamid

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Isothiokyanat-benzensulfonamid a 2-bromacetyl-3-methyl-thiofen (z příkladu C (19)) poskytly žlutou pevnou látku v 69 % výtěžku, t.t. 284,5-286,0 °C.

Γ Γ <·<<·«· ; r γ <· r r ' r λ ' ^r r r - r - ^ΧΗ NMR (DMSO-d₆) : δ 11,11 (ΙΗ, s), 8,20 (2Η, bs), 7,80 (2Η, d, J = 10,7 Hz), 7,76 (2H, d, J = 10,7 Hz), 7,61 (1H, d, J = 5,0 Hz), 7,26 (2H, s), 6,90 (1H, d, J = 5,0 Hz), 2,38 (3H, s) .

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₄N₄O₃S₃: C, 45,67; H, 3,58; N, 14,20; S, 24,39. Nalezeno: C, 45,52; H, 3,58; N, 14,04; S, 24,36.

* Příklad C (49) :

4-/4 -Amino-5- (3-methyl-benzo/b/ thiof en-2-karbonyl) -thiazol-2-ylamino/benzensulfonamid

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(1). 4-Isothiokyanat-benzensulfonamid a 2-(2-bromacetyl)-3-methyl-benzo/b/thiofen poskytly žlutý pevný prášek v 73% výtěžku, t.t. 274,0-275,5 °C.

Έ NMR (DMSO-d,) : δ 11,17 (1H, bs) , 8,33 (2H, bs), 8,04 -7, 97 (1H, m, 7, 90-7,84 (1H, m), 7,78 (4H, bs), 7,51-7,44 (2H, m), 7,27 (2H, s), 2,52 (3H, s).

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₆N₄O₃S₃ : C, 51,33; H, 3,63; N, 12,60; S, 21,64. Nalezeno: C, 51,19; H, 3,67; N, 12,31; S, 21,37.

* Příklad C(50) :

4-/4-Amino-5- (2,5-dimethyl-thiofen-3-karbonyl) -thiazol-2-ylamino?-benzensulfonamid

3-Bromacetyl-2,5-dimethyl-thiofen, který má strukturní vzorec

Br^- , byl připravn způsobem analogickým k o ch₃

C r postupu přípravy 2-brom-2'-jodacetofenonu z příkladu C(12). 3-Acetyl-2,5-dimethylthiofen (6,83 g, 44,3 mmol) poskytl 10,1 g (98% výtěžek) žlutého oleje, který byl použit bez použití další purifikace.

^XH NMR (CDCla): δ 7,22 (1H, s), 4,64 (2H, s), 2,58 (3H, s) , 2,36 (3H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Isothiokyanat-benzensulfonamid a 3-bromacetyl-2, 5-dimethyl-thiofen poskytly žlutý prášek v

69 % výtěžku, t.t.	163-265 °C.
XH NMR (DMSO-dJ : δ	11,02 (1H, s),	8,05	(2H, bs), 7,76 (4H, s),
7,25 (2H, s), 6,87	(1H, s), 2,43	(3H,	S), 2,38 (3H, s).
Anal. vypočteno pro	Cíí^is^OjSj : C,	47,	04; H, 3,95; N, 13,71; S,
23,55. Nalezeno: C,	47,01; H, 3,92	; N,	13,62; S, 23,47.

* Příklad C(51):

4-/4-Amino-5-(2-oxo-l,2,3,4-tetrahydrochinolin-6-karbonyl)-thiazol-2-ylamino/benzensulfonamid

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Isothiokyanat-benzensulfonamid a 6-(bromacetyl)-2-oxo-l,2,3,4-tetrahydrochinolin poskytly šedo-žlutou pevnou látku v 48% výtěžku, t.t. 300-305 °C(d).

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 11,08 (1H, s), 10,32 (1H, s), 8,17 (2H, bs), 7,82-7,70 (4H, m), 7,58 - 7,45 (3H, m), 7,27 (1H, s), 6,90 (1H, d, J = 8,1 Hz), 2,93 (4H, t, J = 7,7 Hz).

IR (KBr): 3266, 3193, 3069, 1679, 1597, 1525, 1434, 1365, 1317, 1153 cm'¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₁₉H₁₃N₅O₄S₂ (MH+) : 444,0800. Nalezeno:

»! e e e r ρ

444,0816.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₇N₅O₄S₂ . 0,6 MeOH: C, 50,88; H, 4,23; N, 15,13; S, 13,86. Nalezeno: C, 51,02; H, 4,00; N, 15,00; S, 13,60.

* Příklad C(52) :

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)thiazol-5-yl?-(2,6-dichlor-fenyl)-methanon

ΛΛ2-Brom-2 ,6 -dichlor-acetofenon, který má stukturní vzorec:

Cí byl připraven následně: Do 2',6'-dichloracetofenonu (1,0 g, 5,30 mmol) v HOAc (5 ml) byl přidán po kapkách brom (272 mikrolitrů,

5,30 mmol). Směs byla ohřívána na 90 °C po 1 hodinu, potom byla zředěna ledovou vodou a rozdělena mezi ether a nasycený vodný NaHCO₃. Organická vrstva byla promyta solankou, sušena nad MgSO₄, koncentrována a dvakrát azeotropicky destilována s heptanem za získání 1,41 g (100% výtěžek) světle žlutého oleje, který odpovídal ^XH NMR a IR popsaným dříve (viz Mlotkowska a kol., Pol.

J. Chem., sv. 55 (1981), str. 631-642) a byl použit bez další purifikace.

^:H NMR (CDC1₃): δ 7,39 - 7,33 (3H, m), 4,23 (2H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(1). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.}., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-brom-2',6'-dichloracetofenon (z příkladu C(52) poskytly žlutou pevnou látku v 47% výtěžku, t.t. 203-208 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 12,47 (1H, d, J = 17,7 Hz), 10,83 (1H, d, J =

16,5 Hz), 8,22-7,80 (3H, m), 8,18 (1H, s), 7,76-7,36 (5H, m), r- r e c r r

Γ <- r ' * r r r p P PP ^r

Γ - * c r .' r f ·- r r - Γ f r .* Γ · P r p ^A _ ^r

7,19 (ÍH, d, J = 8,4 Hz).

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₂N₅OSC1₂: C, 50,51; H, 2,74; N, 17,32; S, 7,93; Cl, 17,54. Nalezeno: C, 50,32; H, 2,78; N, 17,11; S, 7,91; Cl, 17,75.

* Příklad C(53):

/4-Amino-2-/4- (lH-imidazol-2-yl) -fenylami.no/thiazol-5-yl/- (2,6— -dichlor-4-trifluormethyl-fenyl)-methanón

2-(4-Nitrofenyl)-ÍH-imidazol, který má strukturní vzorec:

•no₂ byl nejprve připraven následujícím postupem: Do roztoku 2-fenylimidazolu (5,00 g, 34,7 mmol) v konc. H₂SO₄ (20 ml) byl při 0 °C přidán roztok konc. HNO₃ (2,2 ml, 35 mmol) v konc. H₂SO₄ (5 ml). Získaná hnědá směs byla míchána při 0 °C po 2 hodiny a zchlazena rozdrceným ledem. Vytvořila se bledá bílá sraženina, která byla filtrována. Filtrát byl upraven na pH 9 pomocí 2N NaOH. Vytvořila se žlutá sraženina, která byla odfiltrována, promyta H₂O a rekrystalizovala z vroucího MeOH za vzniku 3,0 g (46% výtěžek) žluté pevné látky. Tento syrový produkt byl použit bez jakékoliv další purifikace.

^ΣΗ NMR (MeOH-d₄): δ 8,34 (2H, d, J = 9,0 Hz), 8,08 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,26 (2H, s).

t/v ^NH2

4-(lH-Imidazol-2-yl)anilin, který má strukturní vzorec: h byl dále připraven následujícím postupem. Do suspenze

2-(4-nitro-fenyl)-lH-imidazolu (1,5 g, 7,93 mmol) v absolutním ethanolu (30 ml) byl přidán 10% Pd-C (250 mg). Získaná směs byla míchána pod atmosférou H₂po 5 hodin. Směs byla filtrována přes vložku z Celitu. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku za získání 1,20 g (95% výtěžek surového oleje) červené pryskyřice, která byla použita bez další purifikace.

2-(4-Isothiokyanato-efnyl)-lH-imidazol, který má strukturní vzorec:

byl připraven postupem analogickým k přípravě 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-lH-imidazolu z příkladu C(41). 4- (lH-Imidazol-2-yl)anilin poskytl bledě hnědou pevnou látku, která rekrystalizovala z CHC1₃ v 85% výtěžku, a byla použita bez jakékoliv další purifikace.

^XH NMR (MeOH-dJ: δ 7,88 (4H, bd, J = 7,8 Hz), 7,58 (2H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu C(l). 4-Isothiokyanat-fenyl)1Himidazol a 2-brom-2',6'-dichlor-4'-trifluormethyl-acetofenon poskytly, po purifikaci pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie s MeOH:CHCl₃ (8:92) jako eluens, žlutou pevnou látku v 21% výtěžku, t.t. 195-197 °C(d).

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 11,10 (IH, s), 8,18 (IH, s) , 8,02 (2H, s), 7,88 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,62 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,12 (2H, bs).

IR (KBr) : 3400, 2929, 1610, 1527, 1426, 1310 cm-¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C^^Cl^AOS (MH+) : 498,0170. Nalezeno: 498,0183.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₂C1₂F₃N₅OS . H₂0: C, 46,52; H, 2,73; N,

13,56; Cl, 13,73; S, 6,21. Nalezeno: C, 46,45; H, 2,78; N

13,40; Cl, 13,73; S, 6,11.

* Příklad C(54):

/4-Amino-2- (4-morfolin-4-yl-fenylamino) -thiazol-5-yl/- (2, 4-dimethyl fenyl) -methanon

o

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)morfolin, který má strukturu vzorce:

, byl připraven následně. Do 4-morfolinanilinu (2,0 g, 11,2 mol) a triethylaminu (5,01 ml, 35,9 mmol) v THF (200 ml) při 0 °C byl přidán po kapkách thiofosgen (1,03 ml, 13,5 mmol). Směs byla míchána při teplotě okolí přes noc, a potom byla rozdělena mezi ether a vodu. Etherová vrstva byla promyta vodou a solankou, sušena nad MgSO₄ a koncentrována za vzniku 2,46 g (99%) tmavě hnědé pevné látky.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,15 (2H, d, J = 9,3 Hz), 6,87 (2H, d, J = 9,3 Hz), 3,80 (4H, t, J = 5,0 Hz), 3,19 (4H, t, J = 5,0 Hz).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 4-(4-Isothiokyanato-fenyl) morf olin a 2-brom-2', 4'-dimethylacetofenon poskytly žlutou' pevnou látku ve.28% výtěžku, t.t. 253-254,5 °C.

Hí NMR (DMSO-d₆): δ 10,44 (IH, s), 7,98 (2H, bs), 7,31 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,14 (IH, d, J = 7,8 Hz), 7,02 (IH, s), 6,99 (IH, d, J = 7,8 Hz), 6,90 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,70 (4H, t, J = 4,7 Hz), 3,04 (4H, t, J = 4,7 Hz), 2,26 (3H, s), 2,20 (3H, s).

Analyt. vypočteno pro C₂₂H₂₄N₄O₂S : C, 64,68; H, 5,92; N, 13,71; S, 7,85. Nalezeno: C, 64,49; H, 5,97;N, 13,64; S, 7,93.

* Příklad C(55) :

/4-Amino-2-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)thiazol-5-yl/-(2, 6-dichlor - fenyl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla v podstatě připravena způsobem popsaným v příkladu. C(l). 4-(4-Isothiokyanat-fenyl)morfolin (z příkladu C(54)) a 2-brom-2’, 6'-dichloracetofenon (z r r *

příkladu C(52)) poskytly žlutou pevnou látku v 9% výtěžku, t.t. 245-275 °C(d).

NMR (DMSO-d₆) : δ 10,58 (lH,.s), 8,02 (2H, bs), 7,52 (2H, d, J = 7,3 Hz), 7,41 (1H, m), 7,30 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,92 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,72 (4H,dd, J = 5,0, 4,2 Hz), 3,06 (4H, dd, J = 5,0,

4,2 Hz).

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₈N₄O₂SCl: C, 53,46; H, 4,04; N, 12,47; S, 7,14; Cl, 15,78. Nalezeno: C, 53,39; H, 4,04; N, 12,47; S, 7,21; Cl, 15,71.

* Příklad C(56) :

Ethyl 4-/4-amino-5-(2,6-dichlorbenzoyl)-thiazol-2-ylamino/benzoat

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem, jako je popsaným v příkladu C(l). 4-Ethoxykarbonylfenyl isothiokyanat a 2-brom-2',6'-dichloracetofenon (z příkladu C(52)) poskytly amorfní žlutou pevnou látku v 48% výtěžku.

'H NMR (DMSO-dg) : δ 11,13 (1H, s), 8,15 (2H, bs), 7,92 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,70 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,58 - 7,40 (3H, m), 4,27 (2H, q, J % 7,0 Hz), 1,29 (3H, t, J = 7,0 Hz).

Anal. vypočteno pro C_1?H,₅N₃O₃SC1₂: C, 52,30; H, 3,47; N, 9,63; S, 7,35; Cl, 16,25. Nalezeno: C, 52,50; H, 3,42; N, 9,63; S, 7,44; Cl, 16,26.

* Příklad C(57):

(4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)thiazol-5-yl/-(2,4,6-trimethylfenyl)-methanon

r ρ ' e e

2-Brom-2',4',6'-trimethyl-acetofenon, který má strukturní vzorec ?h₃

HaC ch₃ , byl připraven postupem analogickým ke způsobu přípravy 2-brom-2'-jod-acetofénonu, viz příklad C(12). 2,4,6-Trimethylacetofenon (1,50 g, 9,25 mmol) poskytl 2,26 g (100 %) čirého oleje, který byl použit bez další purifikace.

'H NMR (CDC1₃): δ 6,87 (2H, s), 4,27 (2H, s), 2,22 (9H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(l) . 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-brom-2',4',6'-trimethyl-acetofenon poskytly žlutý prášek ve 26% výtěžku, která se rozkládala nad teplotou 185 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 12,42 (1H, bs), 10,66 (1H, bs), 8,17 (1H, S), 7,96 (2H, bs), 7,75 (1H, bs), 7,44 (1H, bs), 7,16 (1H, d, J= 8,7), 6,82 (2H, s), 2,21 (3H, s), 2,11 (6H, s).

HRFABMS (MH+): Vypočt.: 378,1389. Nalez.: 378,1381.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₉N₅OS . 0,3 H₂0: C, 62,74; H, 5,16; N, 18,29; S, 8,37. Nalezeno: C, 62,96; H, 5,14; N, 18,24; S, 8,35.

* Příklad C(58):

/4-Amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino) thiazol-5-yl/-(2,3, 6-trimethylfenyl)-methanon

vzorec:

2-Brom-2',3',6'-trimethyl-acetofenon, který má strukturní ^Br_^H3^^cH₃ Připraven analogickým postupem k

2-brom-2'-jod-acetofenonu v příkladu C(12). 2',3', 6'-trimethylacetofenon (1,50 g, 9,25 mmol) poskytl 2,10 g (93%) čirého oleje, e r který byl použit bez další purifikace.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-brom-2',3',6'-trimethyl-acetofenon poskytly žlutý prášek v 70% výtěžku, který se rozkládal při teplotě nad 196 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆): δ 12,41 (IH, bs), 10,65 (IH, bs), 8,17 (IH, s), 7,96 (2H, bs), 7,70 (IH, bs), 7,52 (IH, bs), 7,17 (IH, dd, J= 8,4, 1,9 Hz), 6,82 (2H, s), 2,11 (9H, s).

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₉N₅OS: C, 63, 64; H, 5,07; N, 18,55; S, 8,50. Nalezeno: C, 63,40; H, 5,17; N, 18,37; S, 8,36.

* Příklad C(59):

/4-Amino-2-(4-sulfamoyl-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(3,5-dimethylpyridin-4-yl)-methanon

Nejprve byl připraven 4-(bromacetyl)-3,5-dimethylpyridin hydrobromid, který má strukturní vzorec: Bii^^Jí*³ následujícím postupem. h₃ct^-<n ’^HBr

4-Acetyl-3,5-dimethylpýridin. (500 mg, 3,36 mmol; Kutney a kol., Can.J.Chem., sv. 41 (1963), str. 695-702) byl rozpuštěn v 30% HBr v kyselině octové (1 ml), zahřát na 70 °C a zpracován se směsí bromu (0,17 ml, 3,36 mmol) v 30% HBr v kyselině octové (0,5 ml). Po 2 hodinách byla směs ponechána ochladit na teplotu okolí a byl přidán ether (8 ml). Získaná sraženina byla odfiltrována, promyta etherem (2x), a sušena za získání 1,03 g (100%) fialové pevné látky, t.t. 222-225 °C, která byla použita bez další purifikace.

⁷⁰

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l). 4-Isothiokyanato-benzensulfonamid a 4-(bromacetyl)-3,5-dimethylpyridin-hydrobromid poskytly pevnou látku, která byla purifikována chromatografií na koloně s 10% MeOH/CHCl₃ a krystalizovala z MeOH za získání 35 mg (51%) amorfní žluté pevné látky.

^XH NMR (DMSO-d₅) : δ 11,09 (1H, s), 8,32 (1H, s), 8,18 (2H, bs),

7,74 (4H, dd, J= 11,5, 9,3 Hz), 7,27 (2H, s), 2,15 (6H, s).

IR (KBr): 3378, 3342, 3260, 3160, 1625, 1594, 1560, 1518, 1443, 1342, 1160 cm·¹.

HRFABMS: Vypočt. pro C₁₇H₁₈N₅O₃S₂ (MH+) : 404,0851. Nalez. :404,0840

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₇N₅O₃S₂. 0,4 H₂O . 0,3 MeOH: C, 49,44; H, 4,56; N, 16,66; S, 15,26. Nalezeno: C, 49,13; H, 4,31; N, 16,61;

S, 15,10.

* Příklad C(60):

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)thiazol-5-yl/~(2,6-dimethyl-fenyl)-methanon

2', 6'-Dimethylacetofenon, který má strukturní vzorec:

byl připraven postupem pro o-nitró-acetofenon (Reynolds a kol., Org.Syn.Coli., sv.IV (1963) , str. 708-710). 2,6-Dimethylbenzoová kyselina (3,00 g, 20,0 mmol) poskytla 2,56 g (86% výtěžek) žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,16 (1H, t, J = 7,2 Hz), 7,02 (2H, d, J = 7,2 Hz), 2,48 (3H, s), 2,25 (6H, s).

^Βγ'^>Ύ|)

2-Brom-2',6'-dimethyl-acetofenon, strukturního vzorce:

byl připraven způsobem analogickým k 2-brom-2'-od-acetofenonu, viz příklad C(12). 2', 6'-dimethylacetofenon (1,50 g, 10,1 mmol) poskytl 2,04 g (89% výtěžek) čirého oleje, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,21 (1H, t, J = 7,2 Hz), 7,05 (2H, t, J = 7,2

Hz), 4,29 (2H, s), 2,26 (6H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-brom-2',6'-dimethylacetofenon poskytly žlutou pevnou látku v 71% výtěžku, která se rozkládala nad 185 °C.

*H NMR (DMSO-d_ž) : δ 12,41 (1H, bs), 10,67 (1H, bs), 8,17 (1H, s) , 7,99 (2H, s), 7,60 (1H, s), 7,52 (1H, s), 7,17 (1H, dd, J= 8,7, 1,9 Hz), 7,12 (1H, d, 7,1 Hz), 7,02 (1H, d, J = 7,5 Hz), 2,15 (6H, s).

HRFABMS (MH+): Vypočt.: 364,1232. Nalezeno: 364,1227.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₇N₅OS. 0,3 CH₃OH: C, 62,14; H, 4,92; N, 18,77; S, 8,60. Nalezeno: C, 62,43; H, 5,15; N, 18,91; S, 8,60.

* Příklad C(61):

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)thiazol-5-yl/-(2-methyl-6-nitrofenyl)-methanon

2'-Methyl-6'-nitroacetofenon, strukturního vzorce: o₂n'^^_j byl připraven podle postupu pro o-nitro-acetofenon (viz Reynolds a kol., Org.Syn.Coli., sv. IV, (1963), str. 708-710.) 2-Methyl-6-nitrobenzoová kyselina (15,0 g, 82,8 mmol) poskytla 14,7 g (99% výtěžek) žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

'H NMR (CDC13): 5 8,04 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,55 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,44 (1H, dd, J = 8,4, 7,5 Hz), 2,56 (3H, s), 2,35 (3H, s).

2-Brom-2'-methyl-6'-nitroacetofenon, který má strukturní vzorec: í? i ^SAA byl připraven způsobem analogickým k 5-bromacetyl-4-methyl-lH-imidazolu v příkladu C(40). Surový 2'methyl-6'-nitroacetofenon (1,56 g, 8,72 ml) poskytl bílou pevnou látku, 2,17 g (97% výtěžek), který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC13): δ 8,11 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,62 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,52 (1H, d, t = 7,8 Hz), 4,33 (2H, s), 2,40 (3H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-břom-2'-methyl-6'-nitroacetofenon poskytly hnědou pevnou látku v 32% výtěžku, t.t. 198-201 °C.

'H NMR (DMSO-dJ: δ 12,40 (1H, bs) , 10,78 (1H, bs) , 8,17 ( 1H, d, J = 10,6 Hz), 8,00 (2H, bs), 7,92 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,68 (1H, d,

J = 7,5 Hz), 7,62 - 7,44 (2H, m), 7,19 (1H, d, J = 7,5 Hz), 2,30 (3H, s).

HRFABMS (MH+): Vypočt.: 395,0926. Nalezeno: 395,0920.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₄N₆O₃S. 0,5 H₂O: C, 53,59; H, 3,75; N,

20,83; S, 7,95. Nalezeno: C, 53,43; H, 3,67; N, 20,68; S, 7,81.

* Příklad C(62) :

/4-Amino-2-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)thiazol-5-yl/-(2,6-dimethylfenyl)methanon

Λ Γ Γ r «· r r r ρ < r Γ

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k příkladu C(l) . 4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-morfolin (z příkladu C(54)) a 2-brom-2',6'-dimethylacetofenon (z příkladu G(60)) poskytly hnědou pevnou látku ve 23% výtěžku, t.t. 221-223 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 10,42 (1H, s), 7,95 (2H, bs), 7,30 ( 2H, d, J 9,0 Hz), 7,18 - 7,10 (1H, m), 7,02 (2H, d, J = 7,5 Hz), 6,91 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,72 (4H, t, J = 4,8 Hz), 3,05 (4H, t, J = 4,8 Hz), 2,16 (6H, s).

HRFABMS (M+): Vypočt.: 408,1620. Nalezeno: 408,1607.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₄N₄O₂S. 0,75 H₂O: C, 62,61; H, 6,09; N, 13,28; S, 7,60. Nalezeno: C, 62,64; H, 6,10; N, 13,05; S, 7,55.

* Příklad C(63):

/4-Amino-2- (lH-benzoimidazol-5-yl-amino) thiazol-5-yl/- (3,5-dichlorpyridin-4-yl)-methanon

4-Bromacetyl-3,5-dichlorpyridin, se strukturou vzorce:

byl nejprve připraven následujícím způsobem: Směs 3,5-dichlorpyridin- 4 -karboxylové kyseliny (4,00 g, 20,9 mmol; Cale a kol.,

J.Med.Chem., sv. 32 (1989), str. 2178-2199), benzenu (20 ml), DMF (0,4 ml) á thionylchloridu (3,80 ml, 52,0 mmol) byla zahřívána pod refluxem po 60 min, ponechána ochladit na teplotu okolí, koncentrována ve vakuu, suspendována v etheru (20 ml), a opatrně zpracována s roztokem trimethylsilyldiazomethanu (25 ml 2,0M v hexanu). Po 72 hodinách byl po kapkách opatrně přidáván 48% HBr (18 ml) po dobu 20 min, s intenzivním vývojem plynu. Po 30 minutách byla směs opatrně alkalizována s NaHCO₃ a extrahována etherem. Etherová vrstva byla sušena nad Na₂SO₄ a odpařena za vzniku oranžového oleje, který byl purifikován kolonovou chromatografií s eluens 50% CH₂Cl₂/hex. k oddělení 2,50 g (51%)

3,5-dichlorpyridin-4-karbonylchloridu jako žlutého oleje, a získáním požadovaného produktu, 2,00 g (36%) bledě žlutých krystalů, které tmavly při teplotě okolí, a které byly použity bez další purifikace.

NMR (CDC1₃) : 5 8,58 (2H, s) , 4,37 (2H, s) .

Anal. vypočt.pro C₇H₄BrCl₂NO . 0,02 C₆H₁₄ : C, 31,60; H, 1,59; N, 5,18. Nalezeno: C, 31,92; H, 1,59; N, 5,24.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a

4-(bromacetyl)-3,5-dichlorpyridin poskytly produkt, který byl extrahován v 10% MeOH/CHCl₃ a kolonovou chromatografií tímtéž za získání žluté amorfní pevné látky, 198 mg (55%). Analytický vzorek byl vysrážen z EtOH, t.t. 235-240 °C (d).

*H NMR (CD₃OD): δ 8,60 (2H, s) , 8,18 (IH, s) , 7,98 (IH, bs), 7,58 (IH, d, J = 9,0 Hz), 7,30 (IH, dd, J = 1,2, 8,7 Hz).

IR (KBr) : 3183, 1608, 1544, 1461, 1427, 1355 cm’¹ .

HRFABMS : Vypočt. pro C₁₆H_nCl₂N₆OS (MH+) : 405,0092. Nalezeno: 405,0079.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₀C1₂N₆OS. 1,1 H₂O: C, 45,51; H, 2,89; N, 19,77;C1, 16,68, S, 7,54. Nalezeno: C, 45,49; H, 2,59; N, 19,64; Cl, 16,62; S, 7,43.

* Příklad C(64):

2S-/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-5-yl-amino)thiazol-5-karbonyl/~ -N-karbobenzyloxy-pyrrolidon

2S-Bromacetyl-N-karbobenzyloxy-pyrrolidin, který má strukturní e r vzorec

HRO , byl připraven první následujícím postupem. Kyselý chlorid N-karbobenzyloxy-L-prolinu (1,20 g, 4,80 mmol) byl vyroben podle Aoyama a kol., Chem.Pharm.Bull., sv. 29 (1981), str. 3249-3255, s oxalylchloridem a katalytickým množstvím DMF. Do roztoku surového kyselého chloridu v THF (5 ml) a MeCN (5 ml) při 0 °C byl opatrně přidán po kapkách roztok trimethylsilyldiazomethanu (5,0 ml v 2,0M v hex.), a zpočátku byl pozorován intenzivní vývin plynu. Získaná červená suspenze byla ponechána ohřát na teplotu místnosti a byla míchána přes noc. Potom byla hnědá směs ponechána ochladit na 0 °C, opatrně byla zpracována se směsí 47% HBr (4,1 ml) a etheru (10 ml), následoval intenzivní vývin plynu. Směs byla ponechána ohřát na teplotu okolí přes 1 hodinu, potom byla alkalizována nasyceným vodným NaHCO₃ (20 ml) a extrahována EtOAc (2 x 20 ml). :Spojené organické vrstvy byly sušeny nad Na₂SO₄ a odpařeny za vzniku hnědého oleje, 1,57 g (100%), který byl použit bez další purifikace.

NMR (CDC1₃): δ 7,44-7,24 (5H. m) , 4,34 (ÍH, d, J = 15,6 Hz), 4,27 (ÍH, d, J = 15,6 Hz) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým způsobem k příkladu popsanému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (ňngl. překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2S-bromacetyl-N-karbobenzyloxy-pyrrolidon poskytly pevnou látku, která byla dvakrát vysrážena z iPrOH/hex za vzniku žluté amorfní pevné látky, 154 mg (54%), t.t.150-165 °C.

^ΊΉ NMR (DMSO-dg) : δ 12,40 (ÍH, d, J = 7,8 Hz), 10,68 (ÍH, d, J =

19,3 Hz), 8,20 (ÍH, d, J=0,6 Hz), 8,10-7,70 (2H, m), 7,52 (1H, dd, J= 8.7, 34,8 Hz), 7,54-7,05 (5H, m), 5,17-4,80 (2H, m), 4,32 (ÍH, d, J = 4,9 Hz), 4,30 - 4,18 (ÍH, bm), 2,33-1,70 (2H, bm).

r r ' '

IR (KBr): 3278, 1686, 1599, 1560, 1421, 1356, 1121 cm'¹ .

HRFABMS : Vypočt. pro C₂₃H₂₃N₅O₃S (MH+) : 463,1552. Nalezeno: 463,1538.

Anal. vypočteno pro C₂₃H₂₂N₆O₃S. 0,1 H₂0 .0,7 iPrOH: C, 59,53; H, 5,53; N, 16,60; S, 6,63. Nalezeno: C, 59,53; H, 5,53; N, 16,60; S, 6,22.

* Příklad C(65):

2S-/4-Amino-2-(4-sulfamoyl-fenylamino)-thiazol-5-karbonyl/-N-karbobenzyloxy-pyrrolidin nh₂

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l). 4-Isothiokyanat-benzensulfonamid a 2S-bromacetyl-N-karbobenzyloxy-pyrrolidin (viz příklad C(64)) poskytly pevnou látku, která byla purifikována chromatografií na koloně 5% eluens MeOH/CHCl₃ za vzniku žluté amorfní pevné látky, 140 mg (46%), t.t. 150-160 °C (d).

^LH NMR (DMSO-d₆): δ 11,05 (1H, d, J = 10,0 Hz), 7,98 (2H, bd, J = 17,1 Hz), 7,79 (4H, dd, J= 12,1, 9,7 Hz), 7,41-7,11 (5H, m), 5,15-4,89 (2H, m), 4,37-4,21 (1H, bm), 3,51-3,40 (2H, bm), 2,35 2,13 (1H, bm), 1,93 - 1,75 (3H, bm).

IR (KBr): 3288, 1686, 1598, 1550, 1427, 1420, 1157 cm-¹ .

HRFABMS : Vypočt. pro C₂₂H₂₃N₅O₅S₂Cs (M+Cs+) : 634,0195. Nalezeno: 634,0215.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₃N₅O₅S₂ . 0,3 H₂0 .0,1 CHC1₃: C, 51,15; H,

4,60; N, 13,50; S, 12,36. Nalezeno: C, 51,36; H, 4,63; N, 13,31;

S, 12,47.

Příklad C(66):

Γ Γ /4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)-thiazol-5-yl/-(2-brom-6-methyl-fenyl)methanon .

2'-Brom-6'-methyl-acetofenon, který má strukturní vzorec:

byl připraven způsobem podobným k o-nitro-acetofenonu (viz Reynolds a kol., Org. Syn. Coli., sv.IV (1963) str. 708-710). Z 2-methyl-6-brombenzoové kyseliny (3,10 g, 14,4 mmol) bylo poskytnuto 2,45 g (80% výtěžek) žlutého oleje, který odpovídal dříve popsanému materiálu Ή NMR (Swenton a kol., J. Org. Chem., sv. 58 (1993), str. 3308-3316) a byl použit bez další purifikace.

2,2'-Dibrom-6'-methyl-acetofenon, který má strukturní vzorec:

byl připraven způsobem analogickým k 2-brom-2'-jod-acetofenonu, viz Příklad C(12). Surový 2'-brom-6'-methylacetofenon (1,00 g, 4,69 mmol) poskytl 1,48 g žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

^:H NMR /CDC13): δ 7,44-7,37 (1H, m) , 7,21-7,17 (2H, m), 4,24 (2H, s), 2,31 (3H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl překl.)., sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2,2'-dibrom-6'-methylacetofenon poskytly hnědou pevnou látku, v 32% výtěžku, t.t.208-210 °C.

^XH NMR (DMSO-dg) : δ 12,43 (1H, bs), 10,74 (1H, bs), 8,18 (1H, s), 8,02 (2H, s), 7,75 (1H, bs), 7,4 (lH,bs), 7,44 (1H, d, J = 7,5 r ·· ρ Γ r r ř r r f r _e r· r r r r · r f r Γ f r o

Hz), 7,28 - 7,14 (3H, m), 2,22 (2H, s) .

ESIMS: (MH+): 428/430.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₄N₅OSBr . 1,0 H₂O: C, 48,44; H, 3,61; N, 15,69; S, 7,18, Br, 17,90. Nalezeno: C, 48,54; H, 3,69; N, 15,57; S, 7,11; Br, 17,88.

* Příklad C(67):

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)-thiazol-5-yl/-(3-methylbifenyl-2-yl)-methanon

1- (3-Methyl-bifenyl-2-yl)ethanon, strukturního vzorce:

byl. připraven následujícím způsobem. Do 2'-brom-6'-me.thyl-acetofenonu ( z příkladu C(66)); 760 mg, 3,58 mmol) a Pd(OAc)₂ (114 mg) v DME (38 ml) při 0 °C a pod Ar byla přidána v přebytku kyselina fenylboritá (495 mg) a 2M vodný Na₂CO₃ (1,6 ml). Směs byla ohřívána na 90 °C po 3 hodiny, potom byla zředěna vodou (50 ml) a extrahována etherem (2 x 100 ml). Etherové extrakty byly koncentrovány na surový produkt, který byl purifikován chromatografií na koloně s 2-5% ether/hexanovým krokovým gradientem za získání 670 mg ( 89% výtěžek) žlutého oleje, použitého bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,44 - 7,31 (5H, m), 7,25 - 7,19 (2H, m), 7,16-7,09 (IH, m),2,33 (3H, s), 1,93 (3H, s).

2- Bromacetyl-3-methyl-bifenyl, který má strukturní vzorec:

byl připraven způsobem analogickým k 2-brom-2'-jod-acetofenonu, viz příklad C(12)), Surový 1-(3-methyl-bifenyl-2-yl)ethanon (295 mg, 1,40 mmol) poskytly žlutý olej, který byl použit bez další

r r purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,48 - 7,18 (8H, m), 4,42 (2H, s), 2,38 (3H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu .byla připravena postupem analogickým k postupu v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Phar,. Chem. J. (Angl. překlad), sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-bromacetyl-3-methylbifenyl poskytly žlutou pevnou látku v 49% výtěžku, t.t. 184-190 °C.

^XH NMR (DMSO-dg): 8 8,13 (IH, s), 7,87 (IH, s) , 7,53 (IH, d, J = 8,7 Hz), 7,46-7,39 (2H, m), 7,38 - 7,15 (7H, m), 2,35 (3H, s). HRFABMS (M+) : Vypočt.: 42.3,1389. Nalezeno: 426,1374.

Anal. vypočteno pro C₂₄H₁₉N₅OS. 1,0 H₂0 .0,3 CH₃CN: C, 64,82; H, 4,84; N, 16,29; S, 7,03. Nalezeno: C, 64,88; H, 4,69; N, 16,40;

S, 7,28.

* Příklad C(68):

/4-Amino-2-(4-methoxy-benzylamino)-thiazol-5-yl/- (2,5-dimethylthiofen-3-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem podobným postupu v příkladu C(l).

3-Bromacetyl-2,5-dimethyl-thiofen (z příkladu C(52)) a

1-(2-isothiokyanato-ethyl)-4-methoxy-benzen poskytly bílou pevnou látku v 72% výtěžku, t.t. 175 °C.

Ή NMR (DMSO-dg): δ 6,68 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,74 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,41 (IH, s), 6,24 (IH, s), 4,88 (2H, s), 3,78 (3H, s), 2,40 (3H, s), 1,98 (3H, s).

IR (KBr): 3311, 2920, 1663, 1552, 1514, 1244 cm’¹.

FABMS (MH+): 380 r r * Ρ r e ' '

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₉N₃O₂S₂ : C, 57,88; H, 5,13; N, 11,25; S, 17,17. Nalezeno: C, 57,97; H, 5,11; N. 11,53; S, 17,28.

* Příklad C(69) :

/4-Amino-2~/4-morfolin-4-yl-fenylamino/-thiazól-5-yl)-(3,5-dichlorpyridin-4-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-morfolin (z příkladu C(54)) a 4-bromacetyl-3,5-dichlorpyridin (z příkladu C(63)) poskytly žlutou pevnou látku v 58% výtěžku, t.t. 291,5-292,5 °C.

’Ή NMR (DMSO-d₆): 5 10,75 (2H, s), 8,71 (2H, s), 8,32 (1H, s) , 8,01 (1H, bs), 7,30 (2H, bs), 6,92 (2H, d, J=9,0Hz), 3,70 (4H, t, J = 4,5 Hz), 3,05 (4H, t, J = 4,5 Hz).

FABMS (MH+): 450/452

Anal. vypočteno pro C_X9H₁₇N₅O₂SC1₂ : C, 50,67; H, 3,80; N, 15,55;

S, 7,12, Cl, 15,74. Nalezeno: C, 50,55; H, 3,83; N, 12,59; S,

6,95; Cl, 15,47.

* Příklad C(70):

/4-Amino-2-/4-(4-methyl-piperazin-l-yl)fenylamino/thiazol-5-yl/-(3,5-dichlor-pyridin-4-yl)-methanon nh₂ h₃c._n^ </^N .Cl •s

Cl l-Methyl-4-(4-nitrofenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec:

/^N~ •no₂ e r byl připraven jako první. Směs 1-methyl-piperazinu (4,00 g, 39,9 mmol) a l-chlor-4-nitrobenzenu (3,14 g, 20,0 mmol) byla zahřívána při 80 °C po 24 hodiny, pak byla ponechána ochladit a byla zředěna vodou. Vodná vrstva byla extrahována MeOH : CH₂C1₂ (20:80; 4x50 ml). Spojené organické vrstvy byly spojeny nad MgSO₄, filtrovány, koncentrovány za sníženého tlaku, a rekrystalizovaly z ethanolu za získání 3,2 g (75% výtěžek) žluté pevné látky, která odpovídala dříve popsanému materiálu stanoveným ³H NMR (de Silva a kol., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, sv. 9 (1993), str. 1611-1616) a byla použita bez další purifikace.

4-(4-Methyl-piperazin-l-yl)anilin, se strukturním vzorcem:

potom byl připraven následujícím postupem. Do suspenze 1-methyl-4-(4-nitrofenyl)piperazinu (2 g, 9,02 mmol) v absolutním ethanolu (30 ml) byl přidán 10% Pd-C (250 mg) . Získaná směs byla míchána pod atmosférou H₂ po 5 hodin, potom byla zfiltrována přes vložku z celitu. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku za získání 1,7 g (99% výtěžek) hnědé pevné látky, která byla použia bez další purifikace.

Έ NMR (CDC1₃): δ 6,81 (2H, d, J = 8,8 Hz), 6,62 (2H, d, J = 8,8 Hz), 3,42 (2H, bs), 3,15 (4H, t, J = 5,0Hz), 2,68 (4H, t, J = 5,0 Hz), 2,40 (3H, s).

1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-methylpiperazin, který má strukturní vzorec:

byl připraven postupem analogickým k

1-(4-isothiokyanato-fenyl)-IH-imidazolu z příkladu C(41) .

4-(4-Methyl-piperazin-l-yl)-anilin poskytl 1,7 g (83% výtěžek) smetanově zbarvené pevné látky. t.t. 118-120 °C. (lit. 120-122 °C, Galstuckova a kol., J.Org.Chem. USSR (ňngl .překlad), sv.5

P P e e p c (1969), str. 1121-1124), která byla použitá bez další purifikace. IR spektrum odpovídalo spektru uvedenému Martvonem a kol., Chem. Zvěsti, sv. 27 (1973), str. 808-810.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,20 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,82 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,20 (4H, dd, J = 5,0, 4,7 Hz), 2,52 (4H, dd, J = 5,0, 4,7 Hz), 2,24 (3H, s).

Anal. vypočteno pro C₁₂H₁₅N₃S : C, 61,77; H, 6,48; N, 18,01; S, 12,69. Nalezeno: C, 61,51; H, 6,56; N, 17,86; S, 13,69.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem podobným, jako je popsáno v příkladu C(l). 1- (4-Isothiokyanatfenyl)-4-methyl-piperazin a 4-bromacetyl-3,5-dichlor-pyridin (z příkladu C(63)) poskytly surový produkt, který po rekrystalizací s EtOH/H₂O poskytl 40 mg (23% výtěžek) bledě hnědé pevné látky, t.t. 150-151 °C.

•H NMR (DMSO-d₆): δ 10,78 (IH, s), 8,70 (IH, s), 8,00-8,41 (2H, m), 7,24 (2H, bs), 6,88 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,08 (4H, dd, J % 5,0,

4,7 Hz), 2,40 (4H, dd, J= 5,0, 4,7 Hz), 2,20 (3H, s) .

IR (KBr) : 3395, 2925, 1618, 1546, 1514, 1426, 1240 cm-¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₀H₂₁C1₂N₅OS (MH+) : 463,0875. Nalezeno: 563,0861.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₂₀N₆OSC1₂ . 0,6 H₂O . 0,1 EtOH . 0,05 CHC1₃: C, 50,20; H, 5,06; N, 16,22; S, 6,19, Cl, 14,71. Nalezeno: C, 50,34; H, 5,11; N, 16,53; S, 6,43; Cl, 14,74.

* Příklad C(71):

/4-Amino-2-^- (4-methyl-piperazin-l-yl) -fenylamino/-thiazol-5-/-(2,6-dichlor-fenyl)-methanon

e r

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán v příkladu C(l). 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-4-methyl-piperazin (z příkladu C(70)) a 2-brom-2', 6'-dichlor-acetofenon (z příkladu G(52)) poskytly, po rekrystalizaci s H₂0/ EtOH/CH₂Cl₂, 2,2 g (64% výtěžek) žluté pevné látky. t.t. 160-162 °C.

^XH NMR (DMSO-dJ : δ 10,60 (1H, s), 8,00 (2H, bs), 7,20-7,41 (4H, m), 6,88 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,08 (4H, dd, J = 5,0, 4,7 Hz), 2,40 (4H, dd, J = 5,0, 4,7 Hz), 2,18 (3H, s) .

IR (KBr): 3394, 3164, 2942, 2810, 1610, 1546, 1427, 1242 cm'¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₁H₂₂C1₂N₅OS (MH+): 462,0922. Nalezeno: 462,0906.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₁N₅OSC1₂ . .0,5 H₂0 . 1 EtOH . 0,1 CH₂C1₂: C, 52,75; H, 5,40; N, 13,32; S, 6,10, Cl, 14,83. Nalezeno: C, 53,06; H, 5,37; N, 13,51; S, 6,26; Cl, 14,63.

* Příklad C(72):

f4-Amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino) thiazol-5-yl/- (3,5-dibromthiofen-2-yl)-methanon

Br,

Br

2-Acetyl-3,5-dibromthiofen, se strukturním vzorcem:

byl připraven jako první následujícím postupem. Do roztoku 2,4-dibromthiofenu (2,0 g, 8,27 mmol) a acetylchloridu (0,82 ml, 11,6 mmol) v etheru (3 ml) byl přidán po částech A1C1₃ (1,5 g,

11,2 mmol). Po 4 hodinách byl přidán další díl acetylchloridu a

A1C1₃, směs byla refluxována po 1 hodinu a ponechána ochladit.

Reakční směs byla opatrně zchlazena ledem a extrahována etherem.

Etherové vrstvy byly odbarveny aktivním uhlím, sušeny nad MgSO₄ , převedeny skrz vložku ze silikagelu a koncentrovány za vzniku

errr eerr r e .-· - r r r r r e , Γ ·· - r r r r r r r r ' r r r ~ r- - _r ~ c

I, 8 g (77% výtěžek) temně hnědého oleje, který měl ^XH NMR spektrum odpovídající výše popsanému, viz del Agua a kol., J. Heterocycl. Chem., sv. 18 (1981),str. 1345-1347, a byl použit bez další charakterizace.

2-Bromacetyl-3,5-dibromthíofen, který má strukturní vzorec:

byl potom připraven postupem popsaným analogicky k 2-brom-2'-jodo-acetofenonu, viz příklad C(12).

2-Acetyl-3,5-dibrom-thiofen (220 mg, 0,77 mmol) poskytl 295 mg temně hnědé pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ7,13 (1H, s) , 4,54 (2H, s) .

Konečně látka uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem.

J. (Angl. překlad), sv. 24 (1990), str. 812-822), a

2-bromacetyl-3,5-dibromthiofen poskytly temně hnědou pevnou látku v 50% výtěžku, t.t. 261-264 °C.

'*H NMR (DMSO-d₅): δ 12,50 (1H, bs), 10,94 (2H, s), 8,27 (2H, bs) , 8,21 (1H, s), 7,87 (1H, bs), 7,57 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,36 (1H, s), 7,24 (1H, d, J = 8,7).

HRFABMS (MH+): Vypočteno : 499,8673. Nalezeno: 499,8686.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₉N₅OS₂Br₂ . 0,5 H₂0: C, 35,45; H, 1,98; N, 13,78; S, 12,62; Br, 31,45. Nalezeno: C, 35,37; H, 1,73; N,

13,52; S, 12,75; Br,. 31,25.

* Příklad C(73):

4-^4-Amino-5- (3,5-dibrom-thiofen-2-karbonyl) -thiazol-2-ylaminoy'benzensulfonamid

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem r r e r analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

4-Isothiokyanato-benzensulfonamid a 2-bromacetyl-3,5-dibromthiofen (z příkladu C(72)) poskytly žlutý prášek v 41% výtěžku, t.t. 254-255 °C.

NMR (DMSO-dg) : 5 11,24 (1H, s), 8,31 (2H, bs), 7,77 (4H, s), 7,40 (1H, s), 7,28 (2H, s) .

FABMS (MH+): 539/538/540.

Anal. vypočteno pro C₁₄H₁₀N₄O₃S₃Br₂: C, 31,24; H, 1,87; N, 10,41; S, 17,87; Br, 29,69. Nalezeno: C, 31,08; H, 1,90; N, 10,16; S, 17,69; Br, 29, 96.

* Příklad C(74):

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)thiazol-5-yl/-(1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-yl)methanon nh₂ ;h₃

N'

H ^N^^N'CH₃

1,5-Dimethyl-lH-imidazol-4-karboxylová kyselina, která má strukturní vzorec: ho ³L_n>ch₃ byla připravena jako první následujícím cspostupem. Čerstvý roztok NaOH (3,86 g, 96,5 mmol) ve vodě (20 ml) byl přidán do . roztoku ethyl 1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-karboxylatu (5,39 g,

32,0 mmol); Ohno a kol., Chem. Pharm. Bull., sv. 42 (1994), str. 1463-1473) v EtOH (20 ml). Po 5 hodinách byla směs ochlazena na 0 °C a okyselena 38% HCI na pH 3-4. Získaná pevná látka byla odfiltrována, promyta malým množstvím studeného EtOH:H₂O (1:1), a sušena pod vysokým vakuem za vzniku 3,51 g (78%) bílé pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (D₂O) : δ 8,49 (1H, s), 3,73 (3H, s) , 2,46 (3H, s) .

Γ Γ

Anal. vypočteno pro C₆H₈N₂O₂: C, 51,42; H, 5,75; N, 19,99. Nalezeno: C, 51,52; H, 5,78; N, 19,98.

N-methoxy-N-methylamid kyseliny 1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-karboxylové, který má strukturní vzorec: ³

byl potom připraven následujícím postupem: Do směsi

1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-karboxylové kyseliny (2,01 g, 14,4 mmol) v DMF (20 ml) byl přidán 0-(7-azabenzotriazol-l-yl)-Ν,Ν,Ν',Ν'-tetramethyluronium hexafluorfosfat (HATU; 6,00 g, 15,8 mmol) a diisopropylethylamin (7,5 ml, 43 mmol). Po 5 minutách byl do výsledného čirého roztoku přidán N,O-dimethylhydroxylaminhydrochlorid (1,54 g, 15,79 mmol). Po 1 hodině byl získaný žlutý roztok rozdělen mezi CHC1₃ a vodu. Oddělená organická vrstva byla promyta vodou, a solankou, sušena nad K₂CO₃, koncentrována a sušena pod vysokým vakuem za vzniku 1,88 g (72% výtěžek) světle hnědé pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^lH NMR (CDC1₃): δ 7,36 (1H, s), 3,81 (3H, s), 3,56 (3H, s) , 3,47 (3H, s), 2,45 (3H, s).

1-(1,5-Dimethyl-lH-imidazol-4-yl)ethanon, který má strukturní vzorec:

byl potom připraven následujícím postupem: Do roztoku surového N-methoxy-N-methylamidu kyseliny 1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-karboxylové (1,69 g, 9,21 mmol) v THF (55 ml) při -78 °C byl přidán po kapkách 1,4M CH₃MgBr v etheru (8,55 ml, 12,0 mmol) . Směs byla ponechána ohřát na teplotu okolí přes jednu hodinu, potom byla zchlazena IN HCI, upravena na zásadité pH 9 IN NaOH, koncentrována za sníženého tlaku, aby se odstranil THF, a extrahována EtOAc (200 ml). Organická vrstva byla oddělena, r r sušena nad K₂CO₃, a odpařena za získání 1,2 g (94% výtěžku) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

Ή NMR (CDC1₃): δ 7,35 (ÍH, s), 3,57 (3H, s), 2,55 (3H, s), 2,53 (3H, s) .

2-Brom-l-(1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-yl)ethanon, který má strukturní vzorec: ^H3<?

byl dále připraven o následujícím postupem.

Do 1-(1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-yl)ethanonu (464 mg, 3,36 mmol) v HOAc (8,5 ml) byl při 0 °C přidán po kapkách brom (173 μΐ, 3,36 mmol). Po 36 hodinách byla při teplotě okolí surová hydrobromidová sůl 2-brom-l-(1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-yl)ethanonu odfiltrována jako hnědá pevná látka, která byla následně promyta minimálním množstvím vody a etheru, rozpuštěna v CHC1₃ , ochlazena na 0 °C, zpracována.s NaHCO₃ a koncentrována pod sníženým tlakem pod 40 °C za získání 719 mg (99% výtěžek) žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

'H NMR (DMSO-d₅) : δ 8,40 (ÍH, s), 4,68 (2H, s), 3,66 (3H, s), 2,67 (3H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanat-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překl.), sv. 24 (1990), str. 812-822) a 2-brom-l-(1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-yl)ethanon poskytly tmavě hnědou pevnou látku v 15% výtěžku, t.t. 275,5 - 277 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆) : δ 12,42 (ÍH, s) , 10,42 (ÍH, s), 8,16 (ÍH, s), 7,94 (ÍH, s), 7,61-7,30 (2H, m), 7,26 (ÍH, dd, J = 8,4, 1,9 Hz), 3,54 (3H, s), 2,51 (3H, s) .

HRFABMS(MH+): Vypočt. 354,1137. Nalezeno: 354,1132.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₅N₇OS. 0,5 H₂0 . 0,8 CH₃OH: C, 52,00; H, 4,99; N, 25,27; S, 8,26. Nalezeno: C, 52,27; H, 4,81; N, 25,06; S, 8,12.

* Příklad C(75) :

/'4-Amino-2- (4-morfolin-4-yl-fenylamino)thiazol-5-yl/- (2,6-dichlor-3-nitro-fenyl)methanon

2-Brom-2 vzorec:

,6'-dichlor-3'-nitro-acetofenon, který má strukturní ct

Br—⁷ \==/

Cl no_2i roztoku 2'', 6'-dichlor-3 Breslin a kol., J. Med. ledové kyselině octové byl připraven následujícím postupem. Do -nitro-acetofenonu (1,3 g, 5,6 mmol;

Chem., sv. 38 (1995), str. 791-793) v (5 ml) byl při teplotě okolí přidán brom (325 μΐ, 6,83 mmol). Výsledná směs byla ohřátá na 80 °C po 1 hodinu, ponechána ochladit a byla zředěna etherem. Organická vrstva byla promyta ledově chladnou H₂0 (25 ml), nasyceným vodným NaHCO₃ (3x25 ml), a solankou (25 ml), sušena nad MgSO₄ a koncentrována za sníženého tlaku za vzniku 1,7 g (97% v surovém výtěžku) žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

Ή NMR (CDC1₃): δ 7,98 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,38 (1H, d, J = 8,7 Hz), 4,40 (2H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným, jako je popsán v příkladu C(l). 2-Brom-2',6'-dichlor-3'-nitroacetofenon a 4-(4-isothiokyanato-fenyl)morfolin (z příkladu C(54)) poskytly pevnou surovinu, která po purifikaci mžikovou kolonovou chromatografií s hexanem/EtOAc (70:30) jako eluens poskytla tmavě hnědou pěnu v 52% výtěžku, t.t. 170-172 °C. .

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,70 (1H, s), 8,30 (1H, s), 8,10 (1H, d, J = 9,0 Hz), 7,90 (1H, d, J=8,7 Hz), 7,20-7,30 (2H, m), 6,90 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,70 (4H, dd, J = 5,0, 4,7 Hz), 3,06 (4H, dd, J = 5,0, 4,7 Hz) .

IR(KBr): 3289, 2966, 2848, 1634, 1542, 1425, 1343, 1225, 1108 cm^-1.

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₀H₁₇Cl₂N₅O₄SNa (M+Na⁺) : 516,0276.

Nalezeno: 516,0258.

Anal. vypočt. pro C₂₀H₁₇Cl₂N₅O₄S . 0,35 CHC1₃: C, 45,59; H, 3,26; N, 13,06; S, 5,98; Cl, 20,27. Nalezeno: C, 45,33; H, 3,37; N, 12,96; S, 5,93; Cl, 20,27.

* Příklad C(76):

4-/4-Amino-5-(1,5-dimethyl-lH-imidazol-4-kyrbonyl)-thiazol-2-ylamino/benzensulfonamid

N^^N-CH₃

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 4-Isothiokyanato-benzensulfonamid a 5-bromacetyl-l,5-dimethyl-lH-imidazol (z příkladu C(74)) poskytly žlutou pevnou látku v 8% výtěžku, t.t. 293-294 °C.

'H NMR (DMSO-d₅) : δ 10,80 (1H, s), 7,81 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,75 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,62 (1H, s), 7,24 (2H, s), 3,56 (3H, s), 2,52 (3H, s).

HRFABMS (M+Na⁺) : Vypočt. : 415,0623. Nalezeno: 415,0609.

Anal. vypočt. pro C₁₅H₁₆N₆O₃S₂ · 1/0 CH₃OH . 1,0 CHC1₃: C, 42,53; H, 4,45; N, 18,26; S, 13,93.

Nalezeno: C, 42,57; H, 4,41; N, 18,18; S, 14,07.

* Příklad C(77):

/4-Amino-2- (4-morfolin-4-yl-fenylamino) thiazol-5-yl/-(1,5-di-methyl-lH-imidazol-4-yl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena analogickým postupem k použitému v příkladu C(l). 4-(4-Isothiokyanato-fenyl)morfolin (z příkladu C(54)) a 5-bromacetyl-l,5-dimethyl-lH-imidazol (z příkladu C(57)) poskytly žlutou pevnou látku ve 12% výtěžku, t.t. vyšší než 300 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,21 (IH, s), 7,57 (IH, s), 7,42 (2H, d, J = 8,8 Hz), 6,94 (2H, d, J=8,8Hz), 3,72 (4H, t, J = 4,7 Hz), 3,54 (3H, s), 3,06 (4H, t, J = 4,7 Hz), 2,50 (3H, s).

HRFABMS (M+): Vypočt.: 398,1525. Nalezeno: 398,1516.

Anal. vypočt. pro C₁₉H₂₂N_sO₂S . 0,2 CH₃OH . 0,2 CHC1₃ :C, 54,53; H, 5,41; N, 19,60; S, 7,48.

Nalezeno: C, 54,63; H, 5,27; N, 19,56; S, 7,47.

* Příklad C(78):

/4 -Amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino) thiazol-5-yl7- (3-methyl-5-nitrothiofen-2-yl)methanon

2-Acetyl-3-methyl-5-nitrothiofen se strukturním vzorcem: byl připraven jako první následujícím postupem.

2-Brom-3-methyl-5-nitrofen (5,17 g, 23,3 mmol; Spinelli a kol.,

Γ I“ !* Γ r Γ r r c r 9 .·· r r ^{Γ Γ f} . 2 ? ·- - ^r

J. Chem. Soc.Perkin Trans. 2, (1975), str. 620-622), tributyl(1-ethoxyvinyl)cíničitý (8,65 ml, 25,6 mmol), a dichlorbis-(trifenylfosfin)paladnatý (163 mg, 0,23 mmol) v toluenu (10,5 ml) byly zahřívány pod Ar při 100 °C po 2,5 hodiny. Byl přidán 5% vodný HCI (78 ml), a směs byla míchána po 15 min při 60 °C, potom byla rozdělena etherem a vodou. Organická vrstva byla oddělena, sušena nad MgSO₄ a koncentrována na zbytek, který byl rozpuštěn v etheru (130 ml).

1,8-Diazabicyklo/5.4.0/undek-7-en (DBU; 2,2 ekv.) a 0,lM roztok jodu v etheru byl přidáván po kapkách, až barva setrvávala po několik sekund. Výsledný roztok byl převeden skrz krátkou kolonu silikagelu a koncentrován ve vakuu za vzniku 3,74 g (87% výtěžek) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,71 (1H, s) , 2,58 (3H, s) , 2,57 (3H, s) .

2-Bromacetyl-3-methyl-5-nitrothiofen, který má strukturní vzorec h₃c ^BrV-<X_N0 o ^{s N}°², byl připraven způsobem analogickým k 2-brom-2'-jod-acetofenonu, viz příklad C( 12). 2-Acetyl-3-methyl-5-nitro-thiofen (230 mg, 1,24 mmol) poskytl 330 mg matně žlutého oleje, který obsahoval stopy dvojbromového vedlejšího produktu, stanoveno NMR, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDCI3): δ 7,75 (1H, s) , 4,28 (2H, s) , 2,60 (2H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Phar. Chem.J. (angl .překl.), sv. 24 (1990), str. 818-822) a 2-bromacetyl-3-methyl-5-nitro-thiofen poskytly žlutou pevnou látku ve 23% výtěžku, t.t. nad 300 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 12,51 (1H, d, J = 14,3 Hz), 11,01 (1H, bs), r r

8,40 (2H, bs), 8,21 (1H, s), 8,02 (1H, s), 7,63 (1H, bs), 7,52 (1H, bs), 7,36 (1H, d, J = 11,0 Hz), 2,33 (3H, s) .

HRFABMS (M+) : Vypočt.: 401,0491. Nalezeno: 401,0474.

Anal. vypočt. pro C_lsH₁₂N₆O₃S₂ . 0,7 H₂O . 0,8 CH₃OH: C, 46,00; H, 3,81; N, 19,16; S, 14,62.

Nalezeno: C, 45,92; H, 3,50; N, 19,096; S, 15,49.

* Příklad C(79):

/4-Amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino) thiazol-5-yl/-(2, 6-difluorfenyl)methanon

2-Brom-2',6'-difluoracetofenon, který má strukturní vzorec byl připraven jako první postupem analogickým k postupu přípravy 2-brom-2'-jod-acetofenonu, viz příklad C(12).

2',6'-difluoeracetofenon (703 mg, 4,5 mmol) poskytl 1,01 g (96% výtěžek) světle žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,56 - 7,42 (1H, m), 7,07 - 6,98 ( 7,42 (2H, d, J = 2H, m), 4,38 (2H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k použitému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Phar. Chem.J. (angl.překl.), sv. 24 (1990), str. 818-822) a 2-brom-2', 6'-difluoracetofenon poskytly žluté pevné krystaly v 78% výtěžku, t.t. 194-200 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 12,45 (1H, s), 10,86 (1H, s), 8,19 (1H, s),

8,16 (2H, bs), 7,80 (1H, bs), 7,59 - 7,44 (2H, m), 7,22 - 7,11 (3H, m) .

r ··

C ί* r t- r r r r r r r <“ f r r r r

HRFABMS (MH+): Vypočt.: 372,0731. Nalezeno:. 372,0725.

Anal. vypočt. pro CpHnNsOSFj . 0,5 H₂0: C, 53,86; H, 3,18; N, 18,41; S, 8,43.

Nalezeno: C, 53,73; H, 3,14; N, 18,32; S, 8,53.

* Příklad C(80):

/4-Amino-2-^4- (4-methyl-piperazin-l-yl) fenylamino7thiazol-5-yl/-(2,6-difluor-fenyl)methanon imh₂

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

1-(4-Isothio-kyanato-fenyl)4-methyl-piperazin (z příkladu C(70)) a 2-brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly žlutou pevnou látku v 71% výtěžku, t.t. 168-170 °C.

^XH NMR (DMSO-dg): δ 10,62 (1H, s), 8,11 (2H, bs) , 7,54 - 7,43 (1H, m), 7,28 (2H, d, J = 7,5 Hz), 7,20 - 7,10 (2H, m), 6,90 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,08 (4H, t, J = 4,8 Hz), 2,41 (4H, t, J = 4,8 Hz), 2,19 (3H, s).

IR (KBr): 2942, 2809, 1620, 1590, 1546, 1516, 1464, 1429, 1238, 1002 cm'¹ .

HRFABMS (MH+): Vypočt.: 430,1513. Nalezeno: 430,1502.

Anal. vypočt. pro C₂₁H₂₁N₅OSF₂ . 0,3 H₂0: C, 58,00; H, 5,01; N,

16,10; S, 7,37.

Nalezeno: C, 57,98; H, 4,92; N, 16,08; S, 7,42.

* Příklad C(81):

(/4-Amino-2-^4- (4-methyl-piperazin-l-yl) fenylaminj^-thiazol-5-yl/-(2, 6-dichlor-4-trifluormethyl-fenyl)methanon o

HjC—N

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným postupu v příkladu C(l). 1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-methyl-piperazin (z příkladu C(70)) a 2-brom-2',6'-dichlor-4'-trifluormethykacetofenon poskytly, po rekrystalizací z EtOAc/ hexanu, žluté jehličky v 68% výtěžku, t.t. 239-240 °C.

^XH NMR (DMSO-dJ: δ 8,00 (2H, s), 7,28 (2H, bs), 6,91 (2H, d, J = 8,7 Hz), 3,10 (4H, dd, J = 5,1, 4,7 Hz), 2,42 (4H, dd, J - 5,1, .4,8 Hz) , 2,20 (3H, s) .

IR (KBr) : 3377, 3283, 2942, 2831, 1598, 1542, 1513, 1425 cm’¹ . FABMS (M+Na+): 552.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₀C1₂F₃N₅OS . H,0 . 0,7 C₆H₁₄:C, 52,00; H, 5,23; N, 11,57; S, 5,30, Cl, 11,72.

Nalezeno: C, 51,94; H, 4,98; N, 11,18; S, 5,20; Cl, 11,48.

* Příklad C(82):

N-/3-£l-Amino-2- (lH-benzoimidazol-5-ylamino) thiazol-5-karbonyl7~ -2,4-dichlor-fenyl/acetamid

3'-Amino-2', 6'-dichloracetofenon, který má strukturní vzorec ^{Cl NH2} byl připraven první následujícím postupem. Do roztoku SnCl₂.2H₂O (7,70 g, 34,2 mmol) v 6N vodné HCl (20 ml) byl přidán

2',6'-dichlor-3'-nitroacetofěnon (4,00 g, 17,1 mmol; Breslin a kol., J.Med.Chem., sv.38 (1995)), str 791-793). Získaná směs f Γ f ϊ byla zahřívána pod refluxem po 5 hodin, ponechána ochladit a opatrně byla zpracována bezvodým Na₂CO₃. Získaná bílá sraženina byla odfiltrována a promyta CHC1₃. Organická vrstva byla uzavřena a vodná vrstva byla extrahována CHC1₃ (3x50 ml). Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO₄, filtrovány a koncentrovány ve vakuu za vzniku Černého oleje, který byl purifikován mžikovou kolonovou chromatografií s EtOAc:hexanu (20:80) jako eluens. V tomto postupu bylo získáno 2,6 g (75% výtěžek) bledě hnědého oleje, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,08 (IH, d, J = 8,7 Hz), 6,70 (IH, d, J = 8,7 Hz), 4,12 (2H, bs), 2,56 (3H, s).

N-(3-Acetyl~2,4-dichlor-fenyl)acetamid, který má strukturní vzorec

, byl připraven následně. Do roztoku

3-amino-2',6'-dichloracetofenonu (2,40 g, 11,8 mmol) v ledové kyselině octové (25 ml) byl přidán acetanhydrid (5,53 ml, 58,8 mmol). Získaná směs byla zahřívána pod refluxem po2 hodiny, ponechána ochladit a zředěna etherem (100 ml). Organická vrstva byla promyta H₂0 (2 x 50 ml),' sušena nad MgSO₄, koncentrována ve vakuu a azeotropický zpracována s n-heptanem za vzniku 2,3 g bledě bílé pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 8,38 (IH, d, J = 9,1 Hz), 7,62 (IH, bs), 7,34 (IH, d, J = 9,0 Hz), 2,60 (3H, s), 2,22 (3H, s).

N-(3-Bromacetyl-2,4-dichlorfenyl)acetamid, který má strukturní vzorec

Ck [ [ N ch₃ o ci ^H , , byl připraven postupem analogickým k

2-brom-2',6'-dichlor-3'-nitroacetofenonu pro příklad C(75).

r- f r f »· r r r r

Γ f f r c c r C r c

'

N-(3-Acetyl-2,4-dichlorfenyl)-acetamid poskytl bledě hnědý olej ve 100% výtěžku suroviny, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 8_Z48 (1H, d, J =8,7 Hz), 7,60 (1H, bs), 7,38 (1H, d, J = 9,0 Hz), 4,40 (2H, s), 2,2 (3H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán pro příklad C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překlad)., sv. 24 (1990), str. 818-822) a N-(3-bromacetyl-2,4-dichlorfenyl)acetamid poskytly produkt, který byl purifikován mžikovou chroamtografií s krokovým gradientem MeOH:CH₂Cl₂ (10:90) do HOAc: MeOH :CH₂C1₂ (1:10:90) za získání žluté pěny v 56% výtěžku, která se rozkládala při teplotě nad 200 °C.

^XH NMR (DMSO-dJ: δ 9,90 (1H, s)- 8,20 (1H, s), 7,84-7,96 (1H, m) . 7,68 (1H, d, J = 7,4 Hz), 7,58 (1H, d, J = 8,8 Hz), 7,24 (1H, d,

J = 8,4 Hz), 2,20 (3H, sj.

IR(KBr) :3295, 1625, 1525, 1425 cm'¹.

HRFABMS. Vypočtěno (MH⁺,: 461,0354. Nalezeno: 461,0344.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₅C1₂N₆O₂S . H₂O . 3H0Ac: C, 45,53;H, 4,28; N, 12,74; S, 4,86; Cl, 10,75.

Nalezeno: C, 45,93; H, 4,08; N, 12,49; S, 4,83; Cl, 10,45.

rr *Příklad C(83):

/4-Amino-2- (4-morf olin-4-yl-f enylamino) -thiazol-5-yl7~ (3-methylbifenyl-2-yl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným postupu v příkladu C(l).

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-morfolin (z příkladu C(54)) a 2-bromacetyl-3-methylbifenyl (z příkladu C(67) poskytly žlutou pevnou látku ve 29% výtěžku, t.t. 125-35 °C.

^XH NMR (DMSO-dg): δ 10,40 (1H, s), 7,86 (2H, s) , 7,42-7,24 (9H, d, J = 7,5 Hz), 6,93 (2H, d, J = 8,7 Hz), 3,73 (4H, t, J = 4,4 Hz), 3,07 (4H, t, J = 4,4 Hz), 2,26 (3H, s).

HRFABMS (M): Vypočt.: 471,1855. Nalezeno:471,1839.

Anal. vypočteno pro C₂₇H₂₆N₄O₂S . 1,0 CF₃CO₂H: C/ 59,58; H, 4,66; N, 9,58; S, 5,48. Nalezeno: C, 59,41; H, 5,01; N, 9,26; S, 5,18.

r ··*

000 r· 0

0 r 0 r r 0cr ♦Příklad C(84):

/4-Amino-2-(4-morfolin-4-yl-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(2-brom-6-methylfenyl)methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným postupu v příkladu C(l).

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-morfolin (z příkladu C(54)) a

2,2'-dibrom-6'-methylacetofenon (z příkladu C(66) poskytly surovou pevnou látku, která byla rozmělněna s MeOH/CHCl, za získání žluté pevné látky ve 22% výtěžku, t.t. 105-125 °C.

’Ή NMR (DMSO-dJ: δ 10,57 (1H, s), 8,01 (2H, bs), 7,46 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,39-7,18 (4H, m), 6,96 (2H, d, J = 8,7 Hz), 3,74 (4H, t, J = 4,7 Hz), 3,09 (4H, t, J = 4,7 Hz), 2,20 (3H, s).

HRFABMS (MH⁺): Vypočt.: 73,0647/475. Nalezeno:473,0657/475.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₁N₄O₂SBr . 0,7 MeOH. 0,6 CHC1_;.: C, 47,60; H, 4,37; N, 9,98; S, 5,71. Nalezeno: C, 47,95; H, 4,05; N, 9,77; S, 5,51.

♦Příklad C(85):

4-(f4-Amino-5- (2,6-difluor-benzoyl) thiazol-2-ylamino/-benzensulfonamid

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným postupu v příkladu C(l). (4-Isothiokyanato-benzensulfonamid a 2-brom-2',6'-difluoracetofenob (z příkladu C(79) ) poskytly světle žluté krystaly v 69% výtěžku, t.t. 258-260 °C.

^XH NMR (DMSO-dgj: 5 11,20 (ÍH, s), 8,20 (2H, bs) , 7,79 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,74 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,61-7,49 (1H, m), 7,26 (2H, s), 7,22 (ÍH, d, J = 7,9 Hz), 7,19 (ÍH, d, J = 8,0 Hz).

IR.(KBr): 3310, 1622, 1599, 1547, 1525, 1467, 425, 1410, 1318, 1156 cm -¹.

HRFABMS (MH⁺)_ Vypočt.: 411,0397. Nalezeno:411,0410.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₂N₄O₃S₂F₂ . 0,7 CH₃OH: C, 46,34; H, 3,45; N, 12,94, S, 14,82. Nalezeno: C, 46,19; H, 3,12; N, 12,83; S, 14,94.

♦Příklad C(86):

N- (3-/'4-T\mino-2-^4- (4-methylpiperazin-l-yl) fenylamino?-thiazol-5-karbonyl/-2,4-dichlorfenyl)acetamid

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným postupu v příkladu C(l). 1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-methylpiperazin (z příkladu C(70)) a N-(2-bromacetyl-3-chlorfenyl)acetamid (z příkladu C(82) poskytly, po rekrystalizací s EtOH/CHCl₃ 60 mg (13% výtěžek) žluté pevné látky, t.t. 195-197 °C.

ΐ NMR (DMSO-d₆) : δ 10,62 (ÍH, s), 9,62 (ÍH, s), 7,90 (1H, bs) , 7,78 (ÍH, dd, J = 8,9, 4,4 Hz), 7,47 (ÍH, d, J = 8,8 Hz), 7,30 (2H, bs), 6,92 (2H, d, J= 9,1 Hz), 3,08 (4H, dd, J= 5,1, 4,6 Hz), 2,42 (4H, dd, J = 5,1, 4,6 Hz), 2,18 (3H, s), 2,08 (3H, s) . IR (KBr): 3260, 3025, 2801, 1666, 1613, 1525, 1437, 1382, 1299 cm -¹.

100

HRFABMS. Vypočt. (M+Na⁺) : 541,0956. Nalezeno:541, 0970.

Anal. vypočteno pro C₂₃H₂₄C1₂N₆O₂S . 0,5 H₂O . 0,4 EtOH: C, 52,27; H 5,05; N, 15,37; S, 4,86, Cl, 12,97. Nalezeno: C, 52,13; H, 5,09; N, 15,13; H, 5,09; N, 15,13; S, 5,78; Cl, 12,96.

♦Příklad C(87):

f4-Amino-2-/4- (4-_methylpiperazin-l-yl) -fenylaminq/thiazol-5-yl/-3-methyl-thiofen-2-yl-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným postupu v příkladu C(1). 1-(4-Xsothiokyanato-fenyl)4-methylpiperazin (z příkladu C(70)) a 2-bromacetyl-3-methylthiofen (z příkladu C(19) poskytly, po rekrystalizaci s EtOH/CHCl tmavě žlutou pevnou látku v 75% výtěžku, t.t. 237,0-237,5 °C.

NMR (DMSO-d₆) : δ 10,50 (1H, s), 8,10 (1H, bs), 7,56 (1H, d, J = 5,0 Hz), 7,38 (2H, d, J = 8,8 Hz), 6,96 (3H, m), 3,10 (4H, dd, J = 5,1, 4,7 Hz), 2,45 (4H, dd, J = 4,9, 4,7 Hz), 2,38 (3H, s),

2,24 (3H, s).

IR (KBr): 3484, 3319, 2943, 2809, 1593, 1546, 1414 cm’¹.

HRFABMS. Vypočt. (ΜΗ*): 414,1422. Nalezeno: 414,1408.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₂₃N₅OS₂ . 3 H₂O: C, 57,34; H, 5,68; N, 16,72 S, 15,31. Nalezeno: C, 57,01; H, 5,72; N, 16,41; S, 15,34.

♦Příklad C(88):

trans-3RS-Amino-4RS-/^-/^-amino-5- (3,5-dichlorpyridin-4-karbonyl)

-thiazol-2-ylamino_z/benzoyl/dihydro-furan-3-on r r <- ·

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným postupu v příkladu C(l). 4-Isothiokyanato-benzoyl-DL-homoserin lakton a 4-bromacetyl-3,5-dichlorpyridin (z příkladu C(63) poskytly produkt, který byl purifikován chromatografií na koloně s 10% MeOH/CHCl₃ jako eluens za vzniku amorfní žluté pevné látky, 203 mg (79%), která se rozkládala při teplotě nad 150 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 11,17 (1H, s), 8,89 (1H, d, J = 8,0 Hz), 8,76 (2H, s), 7,86 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,69 (2H, d, J = 8,7 Hz), 4,73 (1H, q, J = 9,3 Hz), 4,42 (1H, ddd, J = 8,9, 8,7, 1,8 Hz), 4,27 (1H, ddd, J = 10,0, 8,7, 6,7 Hz).

HRFABMS. Vypočteno pro C₂₀H₁₅Cl₂N_sO₄SNa (M+Na⁺): Vypočt.: 514,0120. Nalezeno: 514,0133.

IR (KBr): 3284, 1774, 1610, 1524, 1459, 1423, 1348, 1306, 1180 cm^-1.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₅Cl₂N₅O₄S . 0,25 H₂O . 0,6 CHC1₃: C, 43,52;

H., 2,85; N, 12,32; Cl, 23,70; S, 5,64. Nalezeno: C, 43,31; H, 2,78; N, 12,46; Cl, 24,07; S, 5,63.

♦Příklad C(89):

/^-amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino) -thiazol-5-yl/- (2,6-dichlor-3-nitrofenyl)methanon

102·

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán pro příklad C(l). 2-Brom-2', 6'-dichlor-3'-nitroacetofenon (z příkladu C(57)) a 6-isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a'kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překlad)., sv. 24 (1990), str. 818-822) poskytly, po chromatografii na koloně s 1% HOAc/10% MeOH/CH₂Cl₂ jako eluens 26% výtěžek žlutého prášku, t.t. 250-252 °C.

ýí NMR (DMSO-d₆): δ 8,18 (1H, s), 8,00 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,80 (1H, d,J = 8,7 Hz), 7,52 (1H, bd, J= 8,1Hz), 7,24 - 7,10 (2H,m) . IR (KBr): 3385, 1607, 1500 cm’¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₁₇H₉C1₂N₆O₃S (M-H⁺): 447,9930. Nalezeno:

447,9930.

Anal. vypočteno pro C_:7H₁₀Cl₂N_gO₃S . 0,1 H₂O . 1 MeOH . 0,7 HOAc . 0,1 CH₂C1₂: C, 43,30; H, 3,35; N, 15,54; S, 5,93; Cl, 14,42. Nalezeno: C, 43,26; H, 3,01; N, 14,74; S, 7,14; Cl, 14,74.

♦Příklad C(90):

/4-Amino-2-(4- (4-methylpiperazin-l-yl)-fenylamino/thiazol-5-y 1/-(2, 5-dimethyl-thiofen-3-yl)-methanon h₃c<

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem podobným postupu v příkladu C(l). 1-(4-Isothiokyanato-fenyl)4-methylpiperazin (z příkladu 0(70)) a 3-bromacetyl-2,5-dimethylthiofen (z příkladu C(50)) poskytly, po purifikaci mžikovou kolonovou chromatografii s 5-10% MeOH:CH₂Cl₂ jako krokovým postupným eluens, žlutou pevnou látku v 70% výtěžku, t.t. 205-206,5 °C.

103 ¹H NMR (DMSO-d₆) : δ10,50 (IH, s), 8,00 (2H, bs), 7,48 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,95 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,80 (IH, s), 3,10 (4H, dd, J = 5,0, 4,4 Hz), 2,46 (4H, t, J =4,7 Hz), 2,42 (3H, s), 3,38 (3H, s), 2,24 (3H, s).

IR (KBr) : 3154, 2944, 2804, 1609, 1543, 1516, 1420, 1296 cm-¹·

HRFABMS. Vypočt. pro C₂₁H₂₆N₅OS₂ (MH⁺) : 428,1579. Nalezeno: 428,1566

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₅N₅OS₂ . 0,7 H₂O: C, 57,30; H, 6,04; N, 15,91; S, 14,57. Nalezeno: C, 57,19; H, 6,06; N, 15,77; S, 14,55.

*Příklad C(91):

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)-thiazol-5-yl7-(3-amino-4-brom-2,6-dichlor-fenyl)-methanon

3'-Amino-4'-brom-2',6'-dichloro-acetofenon, který má strukturní vzorec

byl připraven první následuj ícím postupem. 3'-Amino-2',6'-dichloracetofenon (z příkladu C(82); 2,15 g, 11,3 mmol) v HOAc (8,7 ml) byl opatrně odplyněn argonem a ochlazen na 0 °C, byl přidán brom a reakční směs potom byla ponechána ohřát na teplotu okolí. Po 0,5 hodině byla směs zředěna ledem/vodou a extrahována etherem. Spojené etherové vrstvy byly promyty nasyceným vodným NaHCO₃ a solankou, sušeny nad K₂CO₃ a odpařeny za získání 2,87 g (90%) hnědé pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

3' -Amino-2,4' strukturní vzorec

-dibrom-2',6'-dichloracetofenon, který má

r rt

104 byl připraven způsobem analogickým k 5-bromacetyl-4-methyl-1H-imidazolu z příkladu C(40).

3' -Amino-4'-brom-2',6'-dichloracetofenon poskytl po chromatografií na koloně s krokovým gradientem 2,5-5 % CH₂C1₂ /hex, 725 mg (22% výtěžek) bílé pevné látky, která bylá použita bez další purifikace. Tyto frakce poskytly 33% regeneraci výchozího materiálu.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem.

J. (Angl. překlad), sv. 24 (1990), str. 818-822) a 3'-amino-2,4'-dibrom-2',6'-dichloracetofenon poskytly světle žluté krystaly ve 34% výtěžku, t.t. 227-230 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆) : 512,48 (IH, bs) , 10,85 (IH, s), 8,22 (lH,s) 8.06 (2H, bs), 7,80 (IH, bs), 7,34 (IH, s), 7,58 (IH, d, J=8,5Hz), 7,22 (IH, d, J = 8,5 Hz), 5,75 (2H, s).

FABMS (MH⁺): Vypočt.: 498,9333. Nalezeno: 498,9312.

Anal. vypočteno pro C₁₇H_uN₆OSCl₂Br . 0,8 H₂O: C, 39,83; H, 2,48; N, 16,39; S, 6,26. Nalezeno: C, 39,92; H, 2,43; N 16,26; S, 6,14.

* Příklad C(92):

4-/“4-Amino-5- (2,5-dichlorthiofen-3-karbonyl) -thiazol-2-ylamino7-benzensulfonamid

3-Bromacetyl-2,5-dichlorthiofen, strukturního vzorce⁸¹ byl připraven postupem obdobným k 2-brom-2'-jodoacetofenonu, viz příklad C(12). 3-Acetyl-2,5-dichlorthiofen (2,0 g, 10,2 mmol) r r·

105 poskytl 2,9 g (100% výtěžek) žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

Ή, NMR (CDC1₃): δ7,25 (IH, s), 4,40 (2H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 4-Isothiokyanato-benzensulfonamid a 3-bromacetyl-2,5-dichlorthiofen poskytly žlutou pevnou látku v 65% výtěžku, t.t. 274-276 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆): 6 11,20 (IH, s) , 8,24 (2H, bs), 7,80 (4H, s), 7,33 (IH, s), 7,31 (2H, s).

FABMS (MH⁺) : 449/451.

Anal. vypočteno pro C_uH₁₀N₄O₃S₃Cl₂: C, 37,42; H, 2,24; N, 12,47; S, 21,41, Cl, 15,78. Nalezeno: C, 37,56; H, 2,19; N, 12,39; S, 21,29; Cl. 1,71.

* Příklad C(93):

/4-Amino-2- (lH-benzoimidazol-6-ylamino) -thiazol-5-yl/- (2,5-dichlorthiofen-3-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 6-Isothiokyanato-lH-benzoimidazol (viz Boev a kol., Pharm. Chem. J. (Angl. překlad), sv. 24 (1990), str. 818-822) a 3-brom-acetyl-2,5-dichlorthiofen (z příkladu C(92)) poskytly, po vysrážení THF, amorfní žlutou pevnou látku v 52% výtěžku, t.t. vyšší než 300 °C.

Ή NMR (DMSO-dg): δ 12,52 (IH, bs), 10,89 (IH, s), 8,26 (IH, s), 8,21 (2H, bs), 7,90 (IH, bs), 7,60 (IH, d, J = 8,4 Hz), 7,28 (IH, s), 7,27 (IH, d, J = 8,4 Hz).

ř © r ©

Γ Γ

106 . .

ESIMS (ΜΗ⁺): 410/412.

Anal. vypočteno pro C_i5H₉N₅OS₂Cl₂. 0,1 HCI . 0,6 THF: C, 45,71; H, 3,06; N, 15,32; S, 14,03, Cl, 16,28. Nalezeno: C, 45,84; H, 2,83 N, 15,01; S, 14,27; Cl, 16,00.

*Příklad C(94) :

/4-Amino-2-/3-(4-methyl-piperazin-l-yl)-fenylamino/-thiazol-5-yl/-(3-methyl-5-nitro-thiofen-2-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-methyl-piperazin (z příkladu C(70)) a 2-bromacetyl-3-methyl-5-nitro-thiofen (z příkladu C(78)) poskytly, po vysrážení vodným EtOH, amorfní tmavě hnědou pevnou látku v 64% výtěžku.

^XH NMR (DMSO-d₆): 510,88 (1H, s), 8,38 (2H, bs) , 8,04 (1H, s), 7,38 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,98 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,35 (4H, bs), 3,15 (4H, bs), 2,34 (3H, s), 2,28 (3H, s).

HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 459,1273. Nalezeno: 459,1259.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₂₂N₆O₃S₂. 0,8 H₂O . 0,2 EtOH: C, 50,18; H, 5,18; N, 17,43; S, 13,30. Nalezeno: C, 50,94; H, 4,98; N, 17,13; S, 13,55.

*Příklad C(95):

4-/'4-Amino-5- (3-methyl-5-nitro-thiofen-2-karbonyl) -thiazol-2♦. ylamino/-benzensulf onamid

no₂ ·

107 · . .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(1) . 6-Isothiokyanato-benzensulfonamid a 3-bromacetyl-5-nitrothiofen (z příkladu C(78)) poskytly tmavě hnědou látku v 38% výtěžku, t.t. 268-269 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆) : δ 11,31 (1H, s), 8,46 (2H, bs), 8,08 (1H, s), 7,81 (4H, s), 7,32 (2H, s), 2,38 (3H, s) .

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₃N₅O₅S₃: C, 40,99; H, 2,98; N, 15,94; S, 21,89. Nalezeno: C, 41,11; H, 2,95; N, 15,66; S, 21,70.

*Příklad C(96):

(3-Amino-4-brom-2, 6-dichlorfenyl) -^4-amino-2-^4- (4-methylpiperazin-l-yl ) -fenylaminq?-thiazol-5-yl/-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l) .

1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-methyl-piperazin (z příkladu C(70)) a 3'-amino-2,4'-dibrom-2',6'-dichloracetofenon (z příkladu C(91)) poskytly, po rekrystalizací z EtOH, žlutý prášek ve 43% výtěžku, t.t. 180-182 °C.

^lH NMR (DMSO-dg): δ 10,61 (1H, s), 8,01 (2H, bs), 7,59 (1H, s) , 7,28 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,94 (2H, d, J = 8,7 Hz), 5,74 (2H, s), 3,11 (4H, bs), 2,45 (4H, bs), 2,23 (3H, s) .

HRFABMS (MH⁺): Vypočt.: 555,0136/557/559. Nalezeno: 555,0122/557/ 559.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₁N₆OSCl₂Br₂ . 0,7 H₂0 . 0,6 EtOH: C, 44,70; H, 4,39; N, 14,09; S, 5,38. Nalezeno: C, 44,84; H, 4,18; N,

13,95; S, 5,27.

r κ p r

108 . .

*Příklad C(97):

2-/4- (l-Acetyl-piperazin-4-yl) -fenylamino/-4-amino-thiazol-6-yl-(2,6-dichlorfenyl)-methanon

l-Acetyl-4-(4-nitro-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec

, byl připraven první způsobem analogickým k N-(3-acetyl-2,4-dichlorfenyl)-acetamidu z příkladu C(82). 1-(4-Nitro-fenyl)-piperazin poskytl žlutou pevnou látku v 83% výtěžku, který odpovídal materiálu dříve popsanému ^XH NMR (Katz a kol., J. Amer. Chem. Soc., sv. 111 (1989),' str.7554 -7557).

l-Acetyl-4-(4-amino-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec

, byl připraven postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(82) pro

4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilin. l-Acetyl-4-(4-nitro-fenyl)piperazin poskytl téměř bílý prášek ve 100% výtěžku suroviny, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃ ): δ 6,85 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,98 (2H, d, J = 8,7

Hz), 3,78 (2H, dd, J = 5,3, 5,0 Hz), 3,62 (2H, t, J = 5,3, 5,0

Hz), 3,62 (2H, dd, J = 5,3, 5,0 Hz), 2,98-3,10 (4H, m), 2,18 (3H, e 0 r <·

s). .

l-Acetyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec

, byl připraven postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(41) pro

1- (4-isothiokyanat-fenyl)-ΙΗ-imidazol. l-Acetyl-4-(4-amino-fenyl)-piperazin poskytl smetanově zbarvený prášek v 88% výtěžku.

Hi NMR (CDC1₃ ): δ7,18 (2H, d, J=9,0Hz), 6,82 (2H, d, J=9,0 Hz), 3,78 (2H, dd, J = 5,1, 5,3 Hz), 3,64 (2H, dd, J = 4,9, 5,3 Hz), 3,16-3,27 (4H, m), 2,10 (3H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán v příkladu C(1). 2-Brom-2', 6'-dichlor-acetofenon (z příkladu C(52)) a l-acetyl-4-(4-isothiokyanatofenyl)piperazin poskytly surový produkt, který byl vysrážen z hexanu za vzniku krémové pevné látky v 37% výtěžku, t.t. 265-267 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆) : 5 10,60 (1H, bs), 8,02 (2H, bs), 7,50 (2H,d, J =

1,9 Hz), 7,42 (1H, m), 7,38 (2H, bs), 6,98 2H, d, J = 9,0 Hz), 3,60 (4H, s), 3,20-3,10 (4H, m), 2,00 (3H, s).

IR (KBr): 3377, 3166, 1601, 1542, 11425 cm'¹.

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₂H₂₂C1₂N₅O₂S (MH⁺) : 490,0871. Nalezeno: 490,0858.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₁C1₂N₅O₂S. 0,16 H₂O . 0,1 C₅H₁₄: C, 54,08; H, 4,56; Cl, 14,13; N, 13,95; S, 6,39. Nalezeno: C, 53,88; H, 4,32; Cl, 14,46; N, 14,28; S, 6,54.

♦Příklad C(98):

2- /4-(l-Acetyl-piperazin-4-yl) fenylamino/-4-amino-thiazol-5-yl-(3-methyl-thiofen-2-yl)-methanon

110

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 1-Acetyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin (z příkladu C(97)) a 2-bromacetyl-3-methylthiofen (z příkladu C(19)) poskytly žlutou pevnou látku v 37% výtěžku, t.t. 290-292 °C.

'H NMR (DMSO-d₆): 510,60 (1H, bs) , 8,10 (2H, bs), 7,48 (1H, d, J = 5,0 Hz), 7,40 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,96-7,04 (2H, m), 3,60 (4H, s), 3,18 (2H, bs), 3,12 (2H, bs), 2,40 (3H, s), 2,02 (3H, s).

IR (KBr): 3377, 3166, 1633, 1601, 1542, 1425, 1225 cm'¹.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₃N₅O₂S . 1 H₂0: C, 56,89; H, 5,27; N, 15,80; S, 14,46. Nalezeno: C, 56,98; H, 5,27; N, 15,72; S, 14,35.

♦Příklad C(99):

4-^*4-Amino-5- (2-f luor-6-trifluormethyl-benžoyl) -thiazol-2-yl- amino^benzensulfonamid

2-Brom-2'-fluor-6'-trifluormethylacetofenon, který má strukturní vzorec , byl připraven způsobem analogickým k

2-brom-2'-jod-acetofenonu, viz příklad C(12).

2'-Fluor-β'-(trifluormethyl)acetofenon (745 mg, 3,61 mmol)

Γ «*

111 poskytl 1,05 g žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(1). 4-Isothiokyanato-benzensulfonamid a surový 2-brom-2 '-fluor-6'-trifluormethyl-acetofenon poskytly světle žlutou pevnou látku v 21% výtěžku, t.t. 290-292 °C.

’Ή NMR (DMSO-d₆) : 511,15 (ÍH, s), 8,20 (2H, bs) , 7,83-7,68 (7H, m), 7,31 (2H, s).

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₂N,O₃S₂F₄: C, 44,35; H, 2,63; N, 12,17; S, 13,93. Nalezeno: C, 44,42; H, 2,64; N, 12,13; S, 13,94.

♦Příklad C(100):

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-methyl-piperazin (z příkladu 0(70)) a 2-brom-2'-fluor-6'-trifluormethyl-acětofenon (z příkladu C(99)) poskytly surový produkt, který rekrystalizoval z EtOH za vzniku žlutého prášku v 74% výtěžku, t.t. 155-158 °C.

’H NMR (DMSO-d₆): 5 10,62 (ÍH, s), 8,06 (2H, bs), 7,72-7,62 (3H, m), 7,10 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,93 (2H, d, J = 8,7 Hz), 3,11 (4H, bs), 2,45 (4H, bs), 2,22 (3H, s).

HRFABMS (MH⁺): Vypočt.:480, 1481. Nalezeno: 480,1486 r r r r

112 ' . .

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₁N₅OSF₄ . 1,0 EtOH·: C, 54,84; H, 5,18; N, 13,33; S, 6,10. Nalezeno: C, 55,11; H, 5,11; N, 13,31; S, 6,00.

♦Příklad C(101) :

4-Amino-2-?4-(1-terc.butoxykarbonyl-piperazin-4-yl)-feny lamino?-thiazol-5-yl-(2,6-difluorfenyl)-methanon

1-terč.butoxykarbonyl-4-(4-nitrofenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec :

\ >-Q-^N°² byl připraven první následujícím postupem. Do suspenze l-(4-nitro -fenylpiperazinu (2,00 g, 9,65 mmolj v dioxanu (30 ml) byl přidán diisopropylethylamin (1,48 ml, 10,6 mmol) a di-terc.butyl-dikarbonát (2,10 g, 9,65 mmol). Po 12 hodinách byla směs nalita do vody (100 ml) a extrahována EtOAc (2x50 ml) . Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO₄ , filtrovány a koncentrovány ve vakuu za vzniku žluté pevné látky, která rekrystalizovala z EtOAc/hexanu za získání 2,2 g žlutých jehliček. Tento materiál byl použit bez další purifikace.

¹H NMR (CDC1₃) : δ 8,20 (2H, d, J= 9,3 Hz), 6,82 (2H,d, J=9,3 Hz), 3,58-3,64 (4H, m), 3,28-3,44 (4H, m), 1,54 (9H, s).

1-(4-Amino-fenyl)-4-terc.butoxykarbonyl-piperazin, který má strukturní vzorec:

byl připraven způsobem analogickým k

4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilinu pro příklad C(70). l-terc.butoxykarbonyl-4-(nitro-fenyl)-piperazin poskytl bledě f

113 ' . · hnědý gel ve 100% výtěžku suroviny, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDClj): δ 6,84 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,67 (2H, d, J = 8,8 Hz) , 3,58 (4H, dd, J = 5.1, 5.0 Hz), 2,97 (4H, dd, J = 5,2, 4,8 Hz), 1,52 (9H, s).

1-terc.butoxykarbonyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec:

byl připraven způsobem analogickým k

1-(4-isothiokyanat-fenyl)-IH-imidazolu pro příklad C(41).

1-(4-Amino-fenyl)-terč.butoxykarbonyl-4-piperazin poskytl krémově zbarvené jehličky v 87% výtěžku, které byly použity bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,18 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,82 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,64 (4H, t, J=5,3Hz), 3,24 (4H, t, J=5,3Hz), 1,54 (9H, s) . .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

1- terc.butoxykarbonyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin a

2- brom-2',6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly surový produkt, který rekrystalizoval z EtOH za získání žluté pevné látky v 67% výtěžku, t.t. 140-143 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ10,67 (IH, s), 8,13 (2H, bs), 7,59-7,45 (IH, m), 7,35 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,23-7,13 (2H, m), 6, 96 (2H, d, J-= 9,0 Hz), 3,46 (4H, bs), 3,07 (4H, bs), 1,43 (9H, s).

HRFABMS (MH⁺): Vypočteno: 516,1881. Nalezeno: 516,1900.

Anal. vypočteno pro C₂₅H₂₇N₅O₃SF₂ . 0,8 H₂O . 0,8 EtOH: C, 56,56; H, 5,57; N, 12,99; S, 5,95. Nalezeno: C, 56,34; H, 5,54; N, 12,89;

S, 5,83.

114 *Příklad C(102):

4-/'4-Amino-5- (2, 6-difluor-benzoyl) -thiazol-2-ylamino/-benzamid

4-Isothiokyanato-benzamid, který má strukturní vzorec : ² byl připraven první postupem podle McKee a kol., J. Am.Chem. Soc., sv. 48 (1946), str. 2506-2507. Do roztoku 4-aminobenzamidu (5,00 g, 36,7 mmol) ve vodě (60 ml) a 38% vodné HCI (15 ml) byl přidán thiofosgen (3,08 ml, 40,4 mmol). Po přibližně 30 minutách byla vzniklá bílá sraženina odfiltrována, promyta vodou a sušena pod vysokým vakuem za získání 4,66 g ( 78% výtěžek) bílého prášku, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (DMSO-dg): δ 8,08 (IH, bs), 7,94 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,53 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,51 (IH, bs).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). 4-Isothiokyanato-benzamid a 2-brom-2',6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79) ) poskytly žlutý pevný produkt ve 26% výtěžku, t.t. 297-298 °C.

^XH NMR (DMSO-dg): δ 11,07 (IH, s), 8,22 (2H, bs), 7,91 (IH, s), 7,88 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,66 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,62-7,50 (IH, m), 7,31 (IH, s), 7,27-7,18 (2H, m).

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₂N₄SF₂ : C, 54,54; H, 3,23; N, 14,97; S, 8,57. Nalezeno: C, 54,27; H, 3,27; N, 14,68; S, 8,35.

*Příklad C(103):

terc-Butyl(/4-^4-amino-5-(2,6-difluor-benzoyl)-thiazol-2-ylaminoý -fenyl/-methyl-amino)-acetat \ ₀

A-í-víRí

H

115' terč. Butyl£(methyl- (4-nitro-fenyl)-amino/acetat, který má strukturní vzorec ,

byl připraven první následujícím postupem. Do roztoku terc.butylesteru sarcosinu, hydrochloridu (2,0 g, 11 mmol) v DMSO (6 ml) byl přidán 4-fluor-nitrobenzen (1,6 g, 11 mmol) a triethylamin (3,4 ml, 24 mmol). Získaná směs byla ohřívána na 100 °C po 12 hodin. Získaná žlutá suspenze byla ponechána ochladit, byla zředěna vodou (100 ml) a extrahována etherem (2 x 100 ml). Spojené organické extrakty byly sušeny nad MgSO₄, filtrovány a koncentrovány ve vakuu za vzniku žlutých jehliček, které rekrystalizovaly z etheru/hexanu za vzniku 2,0 g žlutých jehliček, které byly použity bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 8,18 (2H, d, J = 9,3 Hz) , 6,62 (2H, d, J = 9,7 Hz), 4,08 (2H, s), 3,20 (3H, s), 1,42 (9H, s).

terč.Butyl [(4-amino-fenylj-methyl-aminoZ-acetat, který má strukturní vzorec , byl připraven postupem analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilinu pro příklad C(70). terč.Butyl /methyl-(4-nitro-fenyl)-aminq/-acetat poskytl červený olej v 95% výtěžku suroviny, který byl použit bez další purifikace.

’Ή NMR (CDC1₃): 6 6, 60-6,80 (4H, m) , 4,08 (2H, s), 3,20 (2H, bs)

3,80 (2H, s), 2,82 (3H, s), 1,42 (9H, s).

terč. Butyl /“(4-isothiokyanato-f enyl) -methyl-amino/-acetat, který má strukturní vzorec /

byl připraven r e

116' · postupem analogickým k 1- (4-isothiokyanato-fenyl) ΙΗ-imidazolu pro příklad C(41). terč.Butyl / (4-amino-f enyl)-methyl-amino/-acetat poskytl bledě hnědou pevnou látku v 98% výtěžku, která byla použita bez další purifikace.

¹H NMR (CDClj): δ7,10 (2H, d, J= 9,1 Hz), 6,52 (2H, d, J= 9,1 Hz), 3,90 (2H, s), 2,92 (3H, s), 1,30 (9H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). terč.Butyl /(4-isothiokyanato-fenyl)-methyl-amino/acetat a 2-brom-2',6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly smetanový prášek v 34% výtěžku, t.t. 200,0-200,5 °C.

’Ή NMR (DMSO-dg): 5 7,44-7,56 (1H, m), 7,10-7,30 (4H, m), 6,62 (2H, d, J = 9,0 Hz), 4,08 (2H, s), 2,95 (3H, s), 1,32 (9H, s).

IR (KBr): 3248, 3142, 2978, 1725, 1619, 1537, 1466, 1231 cm'¹.

Anal. vypočteno pro C₂₃H₂₄F₂N₄O₃S: C, 58,22; H, 5,10; N, 11,81; S, 6,76. Nalezeno: C, 58,27; H,5,ll; Cl, N, 11,53; S, 6,63.

* Příklad C(104)

4-Amino-2-f4-(1-terc.butoxykarbonyl-piperazin-4-yl)-fenylaming?thiazol-5-yl-(3-methyl-thiofen-2-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). terc.Butoxykarbonyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin (z příkladu C(101)) a 2-bromacetyl-3-methyl-thiofen (z příkladu C(91)) poskytly, po rekrystalizaci s EtOAc/hexanem, 387 mg (52% výtěžek) žluté pevné látky, t.t. 175-176 °C.

^XH NMR (CDC1₃): 5 7,00-6,85 (4H, m), 3,62 (4H, dd, J= 5,3, 5,0 Hz), 3,18 (4H, dd, J = 5,3, 5,0 Hz), 2,48 (3H, s), 1,42 (9H, s).

f* f

117' ·

IR (KBr): 3260/ 2978, 1725, 1684, 1601, 1531, 1419, 1231 cm’¹.

Anal. vypočteno pro C₂₄H₂₉N₅O₃S₂: C, 57,68; H, 5,85; N, 14,02; S, 12,83. Nalezeno: C, 57,74; H, 5,82; Cl, N, 13,95; S, 12,95. ♦Příklad C (105) :

4-Amino-2-/4-(l-terc.butoxykarbonyl-piperazin-4-yl)-fenylamino/-thiazol-5-yl-(2,6-dichlorfenyl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l). terc.Butoxykarbonyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin (z příkladu C(101)) a 2-brom-2',6'-dichlor-acetofenon (z příkladu C(52)) poskytly surový podukt, který byl purifikován mžikovou chromatografií na koloně s MeOH:CH₂Cl₂ (2,5:97,5) jako eluens a azeotropicky zpracován s hexanem za vzniku žluté pevné látky v 90% výtěžku, t.t. 165-167 °C.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,22 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,92 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,60 (4H, m), 3,18 (4H, m), 1,42 (9H, s).

IR (KBr) : 3401, 3271, 2966, 1689, 1607, 1542, 1460, 1255 cm'¹.

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₅H₂₃N₅O₃C1S: (MH⁺) : 548,1290. Nalezeno: 548,1270.

Anal. vypočteno pro C₂₅H₂₇N₅O₃C1₂S . 0,1 C₆H₁₄: C, 55,23; H, 5,07; N, 12,58; S, 5,76. Nalezeno: C, 55,34; H, 5,28; N, 12,29; Cl, 12,48; S, 5,58.

* Příklad C (106):

(3-Acetamido-2,6-dichlorfenyl)-/l-amino-2-/’4-terc.butoxykarbonylpiperazin-l-yl)-amino-thiazol-5-yl/-methanon r r

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem, jak je popsán v příkladu C(l) . terč.Butoxykarbonyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin (z příkladu C(101)) a N-(3-bromacetyl-2,4-dichlor-fenyl)-acetamid (z příkladu C(82)) poskytly bledě žlutou pevnou látku v 57% výtěžku, t.t. 248-150 °C.

^XH NMR (CDC1₃): 5 7,20 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,92 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,54-3,66 (4H, m), 3,12-3,22 (4H, m), 2,28 (3H, s), 1,42 (9H, s).

IR (KBr): 3377, 3271, 3177, 2978, 1672, 1548, 1437, 1290, 1231 cm'¹.

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₇H₃₁C1₂N₆O₄S: (MH⁺) : 605,1505. Nalezeno: 605,1528.

Anal. vypočteno pro C₂₇H₃₀Cl₂N_gO₄S . 1,3 H₂O: C, 51,56; H, 5,22; N, 13,36; Cl, 11,27; S, 5,10. Nalezeno: C, 51,50; H, 5,18; Cl, 11,15; N, 13,19; S, 4,99.

* Příklad C (107):

4-^4-amino-5-(2,4,6-trichlor-benzoyl)-thiazol-2-yl-aminq?benzensulfonamid

2,4,6-Trichloracetofenon, který má strukturní vzorec byl připraven první následujícím způsobem. Byl to upravený postup od Reynoldse a kol., Org. Syn. Coli., sv. IV (1963), str.

708-710. Do Mg kroužků (283 mg, 11,3 mmol) a EtOH (0,25 ml) byl r ~

119' přidán CC1₄. Následná reakce se zklidnila před přidáváním roztoku diethylmalonatu (1,71 ml, 11,33 mmol) v EtOH (0,91 ml) rychlostí pro udržení reakce. Po 30 minutách byla směs refluxována, aby se vypotřeboval Mg, po dobu jedné hodiny, a potom byla ponechána ochladit. Pevná hmota byla suspendována v etheru (25 ml) a potom byl opatrně přidáván roztok

2,4,6-trichlorbenzoylchloridu (2,50 g, 10,3 ml) v etheru (5 ml). Po 3 dnech byl opatrně přidáván roztok H₂SO₄ (0,6 ml) ve vodě (10 ml), aby se rozpustily pevné látky, a byla provedena extrakce etherem (2 x 10 ml) . Extrakty byly sušeny nad MgSO₄ a odpařeny na matný olej, který byl vložen do HOAc ( 3 ml), H₂O (2 ml) a H₂SO₄ (0,33 ml), a zahříván pod refluxem. Po 7,5 hod byla směs ponechána ochladit přes noc. Směs byla zalkalizována IN NaOH (35 ml) a extrahována etherem (3 x 10 ml). Spojené etherové vrstvy byly sušeny s MgSO₄ a odpařeny za vzniku 1,80 g (78 %) bílé pevné látky, která byla použita bez další purifikace (dříve popsané Bakerem á kol., J. Chem. Soc. (1941), str. 796-802).

2-Brom-2', 4',6'-trichloracetofenon, který má strukturní vzorec q q , byl připraven způsobem analogickým k 2-brom-2'-jod-acetofenonu v příkladu C(12) . Surový 2',4', 6'-trichloracetofenon poskytl 1,27 g (94 %) zlatých krystalků, které byly použity bez další purifikace (dříve popsal Baker a kol., J. Chem.Soc. (1941), str. 796-802).

’Ή NMR : δ7,42 (2H, s) , 4,42 (s, 2H) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l) s tím rozdílem, že byl použit přebytek terc.butoxidu draselného (2,2 ekvivalentů). 4-Isothiokyanato-benzensulfonamid a 2-brom-2',4',6'-trichloracetofenon poskytly temně hnědou gumu, která byla purifikována chromatografií na koloně s 10% MeOH/CHCl₃ a vysrážena z MeOH/ CHC1₃ za získání 96 mg (21%) amorfní, bledě žluté pevné látky.

Ρ P e « fí r

120' · · ^XH NMR (CD₃OD) : δ7,87 (4H, dd, J= 14,6, 9,0 Hz), '7,60 (2H, s) .

IR (KBr): 3312, 1593, 1545, 1459, 1421, 1161 cm'¹.

ESIMS (MH⁺): 477/479/481. (M“): 475/477/479.

Anal. vypočteno pro C₁₆H_UC1₃N₄O₃S₂: C, 40,22; H, 2,32; N, 11,73; Cl, 22,26; S, 13,42. Nalezeno: C, 40,12; H, 2,34; N, 11,56; Cl,

22,41; S, 13,43.

* Příklad C (108):

4-^4-amino-5-(2, β-difluor-benzoyl) -thiazol-2-ylaminoy'-N-methyl benzensulfonamid

4-Amino-N-methyl-benzensulfonamid, který má strukturní vzorec ^HsC'

7~^nh2 h o n=/ byl připraven první následujícím způsobem. N-Methyl-4-nitro-benzensulfonamid (2,58 g, 11,9 mmol; Khanna a kol., J. Med. Chem., sv. 40 (1997), str.1619-1633) a 10% Pd/C (250 mg) v MeOH (60 ml) byl míchán pod atmosférou dusíku po 2 hodiny a filtrován. Filtrát byl koncentrován ve vakuu za vzniku 2,17 g (98% výtěžek) bezbarvých krystalických vloček, které odpovídaly ^XH NMR uvedenému v literatuře (Khanna a kol., J. Med. Chem., sv. 40 (1997), str. 1619-1633) a byly použity bez další purifikace.

„no

4-Isothiokyanato-N-methyl-benzensulfonamid, který má strukturní vzorec byl připraven způsobem analogickým ke 4-isothiokyanato-benzamidu z příkladu C (102). 4-Amino-N-methyl-benzensulfonamid (2,17 g, .11,7 mmol) poskytl 2,10 g (79% výtěžek) bílého prachového prášku, který byl použit

Γ Γ < r

121 bez další purifikace ^XH NMR(DMSO-d₆) : 8 7,83 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,65 (2H,d, J = 8,4 Hz), 7,61 (1H, q, J = 4,9 Hz), 2,43 (3H, d, J = 4,9 Hz).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l). 4-Isothiokyanato-N-methyl-benzensulfonamid a 2-brom-2', 6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly surový produkt, který byl extrahován 10% i-PrOH/CHCl₃ a purifikován chromatografií na koloně s 5% MeOH/CHCl₃ za získání amorfního žlutého prášku ve 41% výtěžku, který se rozkládal nad 200 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 11,23 (1H, s), 8,33 (2H, bs), 7,81 (2H, d, J =

8,5 Hz), 7,54 (2H, d, J = 8,5 Hz), 7,62-7,41 (1H, m) , 7,39 (1H, q, J = 5,0 Hz), 7,23 (2H, t, J = 7,1 Hz), 2,41 (3H, d, J = 5,0 Hz) .

HRFABMS (MH⁺): Vypočt.: 425,0554. Nalezeno: 425,0566.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₄N₄O₃S₂F₂ . 0,5 CH₃OH: C, 47,72; H, 3,66; N, 12,72; S, 14,56. Nalezeno: C, 47,56; H, 3,52; N, 12,72; S, 14,77. * Příklad C (109):

4-/4-amino-5- (2, 6-difluor-benzoyl)-thiazol-2-ylamino_<?-N,N-dimethyl-benzensulfonamid

4-Amino-N,N-dimethyl-benzensulfonamid, který má strukturní vzorec κ₃ς fl

H₃C ó •nh₂ byl připraven první následujícím způsobem. Surový N,N-dimethyl-4-nitro-benzensulfonamid (3,89 g,

16,9 mmol; Khanna a kol., J. Med. Chem., sv. 40 (1997), str.

1619-1633), 10% Pd/C (800 mg), MeOH (80 ml) a THF (200 ml) byly r r

0

122 míchány pod atmosférou vodíku po 6 hodin a filtrovány. Filtrát byl koncentrován ve vakuu za vzniku 3,68 g žluté pevné látky, která odpovídala spektru ^XH NMR popsanému v literatuře: Khanna a kol., ,J. Med. Chem., sv. 40 (1997), str. 1619-1633, a byla použita bez další purifikace.

4-Isothiokyanato-N,N-dimethyl-benzensulfonamid, který má strukturní vzorec byl připraven následujícím způsobem. Do roztoku 4-amino-N,N-dimethylbenzensulfonamidu (2,0 g, 10 mmol) v acetonu (50 ml) při 5-10 °C byly současně přidávány roztok thiofosgenu (0,91 ml, 12 mmol) v acetonu (20 ml) a 25% vodný Na₂CO₃ (10 ml) . Po 5 minutách při 5-8 °C byla směs ponechána ohřát a byla míchána při teplotě místnosti po dobu půl hodiny. Rozpouštědlo bylo odpařeno a byla přidána voda (70 ml). Získaná světle žlutá sraženina byla odfiltrována, promyta vodou a sušena pod vakuem za získání 2,35 g (97% výtěžek) bílého prášku, který byl použit bez další purifikace.

Ή NMR(DMSO-d₅) : δ 7,82 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,69 (2H, d, J = 8,4 Hz), 2,63 (6H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak jť popsáno v příkladu C(l). 4-Isothiokyanato-N,N-dimethyl-benzensulfonamid a 2-brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly surovou hnědou pevnou látku, která rekrystalizovala z EtOH za získání světle hnědých krystalů v 52% výtěžku, t.t. 240-242 °C.

^:H NMR (DMSO-d_s) : δ 11,24 (1H, s), 8,14 (2H, bs), 7,84 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,72 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,62-7,49 (1H, m), 7,23 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,20 (1H, d, J = 8,0 Hz), 2,59 (6H, s).

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₆N₄O₃S₂F₂ : C, 49,31; H, 3,68; N, 12,78; S, 14,63. Nalezeno: C, 49,29; H, 3,71? N, 12,68; S, 14,50.

Γ -

r - r

123 * Příklad C (110):

(4-Amino-2-/4-/^( 2-dimethylamino-ethyl) -methyl-amino/-f enylamino?-thiazol-5-yl) - (2, 6-difluor-fenyl) -methanon

N-(4-Nitrofenyl)-Ν,N strukturní vzorec ,N'-trimethyl-ethan-1,2-diamin, který má

. byl připraven první způsobem analogickým k terc.butyl /methyl-(4-nitro-fenyl)-aminoj^-acetatu z příkladu C (103)). 4-Fluornitrobenzen a Ν,Ν,Ν'-trimethyl-ethylendiamin poskytly hnědý olej v 87% výtěžku suroviny, která byly použity bez další purifikace.

Ή NMR(CDC1₃) : 5 8,14 (2H, d, J = 9,6 Hz), 6,64 (2H, d, J = 9,3

Hz), 3,58 (2H, t, J = 7,5 Hz), 3,12 (3H, s), 2,52 (2H, t, J = 7,5 Hz), 2,32 (6H, s).

N- (4-Aminofenyl) -N,N' ,N'-ethan-l, 2-diamin, který má strukturní vzorec ch₃ byl připraven způsobem analogickým ke 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilinu z příkladu C (70). N- (4-nitrofenyl) -Ν,Ν,Ν'-trimethyl-ethan-1,2-diamin poskytl načervenale-hnědý olej v 92% výtěžku suroviny, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR(CDC1₃) : δ 6,62 (4H, s), 3,30 (2H, dd, J = 7,6, 7,4 Hz), 2,85 (3H, s), 2,47 (2H, dd, J= 7,7, 7,2 Hz), 2,32 (6H, s).

N- (4-Isothiokyanato-fenyl)-N,N' ,N'-trimettiylethan-l, 2-diamin,

124

který má strukturní vzorec ^CH’ byl připraven postupem analogickým k 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-lH-imidazolu z příkladu Č(41). N-(4-Aminofenyl)-N,N',N'-ethan-l,2-diamin poskytl hnědý olej v 75% výtěžku suroviny, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR(CDC1₃) : δ 7,13 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,01 (2H, d, J = 8,2 Hz), 3,99 (2H, dd, J= 7,6, 7,1 Hz), 3,15 (1H, bs), 3,02 (3H, s), 2,80 (6H, s) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l). N- (4-Isothiokyanato-fenyl)-N,N' ,N'-trimethyl-ethan-1,2-diamin a 2-brom-2', 6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly surový produkt, který byl purifikován chromatografii na koloně s krokovým gradientem MeOH:CH₂Cl₂ (2,5:97,5-10:90) za získání žluté pevné látky v 55% výtěžku, t.t.: 96-98 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 7,42-7,55 (1H, m), 7,10-7,24 (4H, m), 6,64 (2H, d, J = 9,0 Hz), 2,90 (3H, s), 2,38 (2H, dd, J = 7,2, 6,5 Hz) , 2,18 (6H, s).

IR (KBr): 3394, 3180, 2948, 2828, 1620, 1546, 1523, 1466 cm-¹.

HRFABMS : Vypočt. pro C₂₁H₂₄F₂N₅OS (MH’) : 432, 1670. Nalezeno: 432,1658.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₃F₂N₅OS . 0,4 H₂O: C, 57,49; H, 5,47; N, 15,96; S, 7,31. Nalezeno: C, 57,36; H, 5,45; N, 15,77; S, 7,27.

* Příklad C(lll):

2-/4- (1-Acetyl-piperazin-4-yl) -f enylamino/-4-amino-thiazol-5-yl-(2, 6-difluorfenyl)-methanon

r r λ.-γ γ r r f · Γ < '

125'

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l).

1- Acetyl-4- (4-isothiokyanato-fenyl) -piperazin (z příkladu C (97)) a 2-brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly 320 mg (66% výtěžek) krémově zbarvené pevné látky, t.t. 298 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 7,44-7,58 (1H, m), 7,36 (2H, bd, J = 7,2 Hz), 7,18 (2H, dd, J = 8,1, 7,5 Hz), 6,95 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,58 (4H, bs), 3,00-3,20 (4H, m), 2,05 (3H, s).

IR (KBr): 3389, 3154, 1607, 1601, 1542, 1419, 1231 cm'¹.

HRFABMS : Vypočt. pro C₂₂H₂₁F₂N₃OSNa (M+Na): 480,1282. Nalezeno: 480,1266.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₁N₅O₂F₂S . 0,3 H₂O: C, 57,08; H, 4,70; N, 15,31; S, 6,93. Nalezeno: C, 56,95; H, 4,74; N, 15,16; S, 6,82.

* Příklad C(112):

2- f4- (l-Acetyl-piperazin-4-yl)-fenylamíno/-4-aruino-thiazol-5-yl-(2,5-dimethyl-thiofen-3-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem jak je popsán v příkladu C(1).. l-Acetyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)piperazin (z příkladu C(97)) a 3-bromacetyl-2,5-dimethylthiofen (z příkladu C(50)) poskytly 200 mg (53% výtěžek) bledě krémově zbarvené pevné látky, t.t. 282-283 °C.

Ή NMR (DMSO-dg): δ 7,42 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,98 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,82 (1H, s), 3,60 (4H, bs), 3,02-3,20 (4H, m), 2,46 (3H, s), 2,38 (3H, s), 2,05 (3H, s).

IR (KBr): 3401, 3166, 1637, 1601, 1542, 1425, 1231 cm'¹.

126

HRFABMS : Vypočt. pro C₂₂H₂₆N₅O₂S₂ (MH^f) : 456,1528. Nalezeno: 456,1510.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₅N₅O₂S: C, 57,87; H, 5,74; N, 15,34; S, 14,05. Nalezeno: C, 57,85; H, 5,53; N, 15,23; S, 14,20.

* Příklad C(113):

4-/'4-Amino-5- (2-fluor-6-trifluormethyl-benzoyl) -thiazol-2-ylamino/benzamid

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu v přikladu C(l). 4-Isothiokyanato-benzamid (z příkladu C(102)) a 2-brom-2'-fluor-6'-trifluormethylacetofenon (z příkladu C(99)) poskytly surový produkt, který byl purifikován chromatografii na koloně s krokovým gradientem

8-10%EtOH/CHCl₃ za získání amorfní žluté pevné látky v 14% výtěžku, který se rozkládal nad 145 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆): δ 8,30 (IH, bs), 8,10 (IH, bs), 7,94-7,82 (3H, m), 7,74-7,62 (5H, m), 7,30 (IH, s).

HRFABMS (MHU: Vypočt.: 425,0695. Nalezeno: 425,0709.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₂N₄O₂SF₄. 0,9 EtOH: C, 51,05; H, 3,76; N, 12,03; S, 6,88. Nalezeno: C, 51,14; H, 3,78; N, 1236; S, 6,79.

* Příklad C(114):

4-_<f4-Amino-5- (3-methyl-thiofen-2-karbonyl) thiazol-2-ylamino/-N-methyl-benzensulfonamid

r r e e e r

127 ' ·

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l) . 4-Isothiokyanato-N-methyl-benzensulfonamid (z příkladu C(108)) a 2-bromacetyl-3-methylthiofen (z příkladu C(19)) poskytly žlutou pevnou látku v 57% výtěžku, t.t. 197,0-199,5 °C.

^XH NMR (DMSO-dg) : 5 11,19 (ÍH, s), 8,24 (2H, bs), 7,86 (2H, d, J = 8,7 Hz),7,75 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,65 (ÍH, d, J = 5,0 Hz), 7,36 (1H, q, J = 6,1 Hz), 7,03 (ÍH, d, J = 5,0 Hz), 2,42 (3H, s) , 2,41 (3H, d, J= 6,1 Hz).

HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 409,0463. Nalezeno: 409,0474.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₆N₄O₃S₃: C, 46,23; H, 4,07; N, 13,48; S, 23,14. Nalezeno: C, 46,28; H, 3,98; N, 13,38; S, 23,08.

* Příklad C(115)

4-/Amino-5-(2,4,β-trifluorbenzoyl)-thiazol-2-yl-amino/-benzensulfonamid

2-Chlor-2',4',6'-trifluoracetofenon, který má ci.

strukturní vzorec JL 1

I byl připraven následně. Do mechanicky míchaného roztoku 1,3,5-trifluorbenzenu (5,17 ml, 50,0 mmol) v dichlormethanu (12,5 ml) byl postupně opatrně přidáván A1C1₃ (13,4 g, 115 mmol) po dobu 15 minut. Bylo pozorováno prudké klokotání a vývin plynného HCI. Směs byla opatrně zahřívána pod refluxem a po kapkách byl přidáván chloracetylchlorid (6,20 g, 4,37 ml, 55,0 mmol) po dobu 45 minut. Po 6 hodinách pod zpětným chladičem byla směs ponechána ochladit po 12 hodin, potom byla opatrně nalita na sněhovou kaši ledu/vody (asi 200 ml) a extrahována etherem (3 x 50 ml). Spojené etherové vrstvy byla promyty 10% vodným HCI (2 x 30 ml),

C ř

128

IN vodným NaOH (3 x 30 ml), a solankou (25 ml), sušeny nad MgSO₄ a odpařeny za vzniku 5,28 g ( 51%) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace. Analytický vzorek krystalizoval z etheru/hexanu za získání žlutých mikrokrystalů, t.t. 43-45 °C.

^XH NMR (CDClj): δ 6,81-(2H, t, J = 8,4 Hz), 4,54 (2H, s) .

IR (KBr): 1721, 1637, 1616, 1447, 1201, 1128, 1045 cm’¹.

Anal. vypočteno pro C₈H₄C1F₃O: C, 46,07; H, 1,93; Cl, 17,00. Nalezeno: C, 45,92; H, 1,95; Cl,16,97.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě postupem analogickým k postupu popsanému v příkladu C(l), s tím rozdílem, že byl použit přebytek terc.butoxidu draselného (2,2 ekvivalenty). 4-Isothiokyanato-benzensulfonamid a 2-chlor-2',4', 6'-trifluoracetofenon poskytly červeno-hnědou pevnou látku, která byla purifikována chromatografií na koloně s 5% MeOH/CH₂Cl₂ jako eluens. Srážení se stopami hexanu v MeOH/CH₂Cl₂' poskytlo 70 mg (33%) žlutého amorfního prášku, který se rozkládal nad 148 °C.

^:H NMR (CD₃OD) : δ 7,91 (IH, s) , 7,86 (4H, dd, J=14,9, 6,9 Hz), 6,99 (2H, dd, J = 9,0, 7,5 Hz) .

IR (KBr): 3278, 1602, 1549, 1425, 1155 cm-¹.

HRFABMS: Vypočt. pro C₁₆H₁₂F₃N₄O₃S₂ : (MH⁺) : 429,0303. Nalezeno: 429,0315.

Anal. vypočteno pro C₁₆H_UF₃N₄O₃S₂. 1,1 H₂0:, C, 42,87; H, 2,79; N, 12,50; S, 14,31. Nalezeno: C, 42,98; H, 2,73; N, 12,12; S, 14,48; * Příklad C(116) /4-Amino-2^- (4-methyl-piperazin-l-sulfonyl) -fenylamino/thiazol-5-yl/-(2,6-difluorfenyl)-methanon r c r 0 ř r r c 0 r 000 0 _r 0 0,-r f C 0 0 1 0 r 0 r

129 · · l-Methyl-4-(4-nitro-benzensulfonyl)-piperazin, který má strukturní vzorec _y. o .__ η₃ο-^^_/Ν-^-^Λ_κ__ΝΟ2 byl připraven způsobem analogickým k postupu použitému pro N-methyl-4-nitro-benzensulfonamid v příkladu C(108) (Khanna a kol., J. Med. Chem., sv. 40 (1997), str. 1619-1633). 4-Nitrobenzensulfonylchlorid a 1-methylpiperazin poskytly 5,1 g (88% výtěžek) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

4-(4-Methyl-piperazin-l-sulfonyl)-anilin, který má strukturní vzorec _ a _ byl připraven ^h3C-N^_nh₂ způsobem analogickým k postupu použitému pro

N-methyl-4-amino-benzensulfonamid z příkladu C(108).

l-Methyl-4-(4-nitrobenzensulfonyl)piperazin poskytl šedou pevnou látku v 99%výtěžku, která byla použita v následujícím kroku bez další purifikace.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ7,37(2Η, d, J = 8,8 Hz), 6,67 (2H, d, J = 8,8 Hz), 6,16 (2H, bs), 3,30 (4H, bs), 3,03 (4H, bs), 2,58 (3H, s).).

1-(4-Isothiokyanato-benzensulfonyl)-methyl-piperazin, který má strukturní vzorec /—\ 9 byl vyroben způsobem analogickým k 4-isothiokyanato-benzamidu v příkladu C (102). 4-(4-Methyl-piperazin-l-sulfonyl)-anilin poskytl 1,1 g . (94%) výtěžku bílých krystalů, které byly použity bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,74 (2H, d, J = 8,6 Hz), 7,35 (2H, d, J = 8,6 Hz), 3,27 (4H, bs), 2,77 (4H, bs), 2,47 (3H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě postupem analogickým k postupu popsanému v příkladu C(l).

r e r r

130 ·

1- (4-Isothiokyanato-benzensulfonyl)-4-methyl-piperazin a

2- brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C (79)) poskytly žlutou pevnou látku v 69% výtěžku, t.t. 172-174 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 11,23 (IH, bs), 8,21 (2H, bs), 7,84 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7,69 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,62-7,49 (IH, m). 7,22 (IH, d, J = 7,8 Hz), 7,19 (IH, d, J = 8,1 Hz), 2,87 (4H, t, J = 4,5 Hz), 2,35 (4H, t, J = 4,5 Hz), 2,13 (3H, s).

HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 494,1132. Nalezeno: 494,1120.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂iN₃O₃S₂F₂ . 0,1 H₂O . 0,5 CH₃OH: C, 50,50; H, 4,57; N, 13,70; S, 12,54. Nalezeno: C, 50,34; H, 4,39; N, 13,51; S, 12,63.

* Příklad C(117) (4-Amino-2-/4-/(2-dimethylamino-ethyl)-methyl-amino/-fenylamino/-thiazol-5-yl)-(3-methyl-thiofen-2-yl)-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem jako je popsán v příkladu C(l). N-(4-Isothiokyanato-fenyl)-N,N',N'trimethylethan-1,2-diamin (z příkladu C(110) a 2-bromacetyl-3-methylthiofen (z příkladu C(19) poskytly, po purifikaci mžikovou chromatografií na koloně s MeOH:CH₂Cl₂ (5:95) jako eluens, žlutou pěnu v 70% výtěžku.

X NMR (DMSO-dg) : δ 7,22 (IH, d, J = 5,0 Hz), 7,16 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,72 (IH, d, J = 5,0 Hz), 6,58 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,44 (2H, dd, J= 7,7, 7,4 Hz), 3,00 (3H, s), 2,42 (3H, s), 2,3 (6H, s) .

IR (KBr) : 3377, 3269, 2937, 2821, 1609, 1543, 1518, 1423 cm-¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₀H₂₆C1₂N₅OS₂ (MH⁺) : 416,1579. Nalezeno: 416,1594.

r r e f r p r e p p p P r P r r r . c r

131 ·

Anal. vypočteno pro C₂₀H₂₅C1₂N₅OS₂ . 1 H₂0: C, 55,40; H, 6,28; N, 16,15; S, 14,71. Nalezeno: C, 55,43; H, 5,94; N, 16,37; S, 14,57.

* Příklad C(118)

4-/4-/4-Amino-5-(2, 6-difluorbenzoyl) -thiazol-2-ylamino/-fenyl/-l-methyl-piperazin-2-on

4-(4-Nitro-fenyl)-piperazin-2-on, který má strukturní vzorec v

^hv/O- no₂ byl vyroben první způsobem analogickým k terc.butyl/methyl-(4-nitrofenyl)amino/acetatu v příkladu C (103). Piperazin-2-on (Aspinall a kol., J. Amer. Chem. Soc., sv. 62 (1940), str. 1202-1204) a 4-fluornitrobenzen poskytly žlutou pevnou látku v 63% výtěžku, která byla použita bez jakékoliv další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): 5 8,10 (2H, d, J = 8,8 Hz), 6,80 (2H, d, J = 9,2 Hz), 6,38 (1H, bs), 4,10 (2H, s), 3,74 - 2,52 (4H, m) .

l-Methyl-4-(4-nitrofenyl)-piperazin-2-on, vzorce byl dále připraven následně.

h₃c-n no₂

Do suspenze 4-(4-nitro-fenyl)-piperazin-2-onu (500 mg, 2,26 mmol) v THF (5 ml) byl přidán NaH (60 mg, 2,5 mmol). Směs byla ochlazena na 0 °C, byl přidán jodomethan (162 μΐ, 2,59 mmol), a potom byla směs ponechána ohřát na teplotu okolí. Po 12 hodinách bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu za vzniku žluté pryskyřice, která byla zpracována s H₂0. Získaná žlutá sraženina byla odfiltrována, promyta H₂O a sušena pod vysokým vakuem po několik hodin za získání 420 mg (79% výtěžek).

^XH NMR (CDCI3): 5 8,18 (2H, d, J = 9,4 Hz), 6,78 (2H, d, J = 9,4 Hz), 4,08 (2H,'s), 3,68 (2H, dd, J = 4,7, 3,6 Hz), 3,54 (2H, dd,

132

J = 4,9, 3,7 Hz), 3,02 (3H, s).

4-(4-Aminofenyl)-l-methyl-piperazin-2-on, který má strukturní vzorec

byl připraven způsobem analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilinu z příkladu C(70). l-Methyl-4-(4-nitro-fenyl)-piperazin-2-on poskytl hnědou pryskyřici, která byla použita bez jakékoliv další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : 5 6,78 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,60 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,76 (2H, s), 3,44 (2H, dd, J= 5,8, 4,9 Hz), 3,20 (2H, dd,

J = 4,9, 4,0 Hz), 3,02 (3H, s).

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-l-methyl-piperazin-2-on, který má strukturní vzorec

’ byl připraven způsobem analogickým k 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-lH-imidazolu z příkladu C(41). 4-(4-Amino-fenyl)-l-methyl-piperazin-2-on poskytl krémově zbarvený prášek v 85% výtěžku, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDCI3) : δ7,18 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,80 (2H, d, J = 9,0. Hz), 3,90 (2H, s), 3,50 (4H, bs), 3,70 (3H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě postupem analogickým k postupu popsanému v příkladu C(l).

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-methyl-piperazin-2-on a 2-brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C (79)) poskytly žlutou pevnou látku v 77% výtěžku, t.t. větší než 300 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): 5 7,60-7,70 (1H, m), 7,48 (2H, bd, J = 8,3 Hz), 7,31 (2H, t, J= 7,9 Hz), 7,09 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,88 (2H, s), 3,58 (4H, bd, J = 4,4 Hz), 3,02 (3H, s) .

133'

Anal. vypočteno pro C₂₁H₁₉F₂N₅O₂S: C, 56,88; H, 4,32; N, 15,79; S, 7,23. Nalezeno: C, 56,81; H, 4,42; N, 15,83; S, 7,31.

* Příklad C(119) /4-Amino-2-(4-thiomorfolin-4-yl-fenylamino)-thiazoÍ-5-yl/-{2,6-di fluor-fenyl/-methanon

4-Thiomorfolin-4-yl-anilin, který má strukturní vzorec byl připraven první následně. 4-(4-Nitro-fenyl)-thiomorfolin (1,50 g, 6,70 mmol; Beach a kol·., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2 (1984), str. 217-221) a 10% Pd/C (200 mg vlhkého DeGussa typu,

50% hmotn.) byly míchány v. ethylacetátu (20 ml) a MeOH (20 ml) pod vodíkem přes noc a filtrovány. Filtrát byl koncentrován ve vakuu za vzniku 1,28 g (98% výtěžek) bílých krystalických vloček, které byly použity bez další purifikace.

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-thiomorfolin, který má strukturní vzorec

byl připraven způsobem analogickým k

4-isothiokyanato-N,N-dimethylbenzensulfonamidu v příkladu C(109). 4-Thiomorfolin-4-yl-anilin poskytl žlutý prášek v 83% výtěžku.

’Ή NMR (CDClj): 5 7,13 (2H, d, J=9,lHz), 6,79 (2H, d, J=9,l Hz, 3,59 (4H,’ddd, J= 5,2, 5,0, 2,6 Hz), 2,72 (4H, ddd, J= 5,2, 5, 0, 2, 6 Hz) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě postupem analogickým k postupu popsanému v příkladu C(l).

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)thiomorfolin a 2-brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C (79)) poskytly žlutý prášek v 51% _r r r r- r r r f r r ' f Γ

134 · · výtěžku, t.t. 128-130 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): 5 10,64 (ÍH, s), 8,12 (2H, bs), 7,56 - 7,44 (ÍH, m), 7,30 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,18 (ÍH, d, J = 7,7 Hz), 7,15 (ÍH, d, J = 8,1 Hz), 6,91 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,47 (2H, dd, J = 5,1, 5,0 Hz), 2,65 (2H, dd, J = 5,1, 5,0 Hz).

HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 433,0968. Nalezeno: 433,0980.

Anal. vypočt. pro C₂₀H₁₈N₄OS₂F₂ . 0,2 H₂O: C, 55,08; H, 4,25; N, 12,85; S, 14,71. Nalezeno: C, 55,02; H, 4,14; N, 12,72; S, 14,53. * Příklad C(120)

4-/4-/4-Amino-5- (1,6-difluorbenzoyl) -thiazol-2-ylairu.no/-fenyl/-l-piperazin-2-on

4-(4-Amino-fenyl)-piperazin-2-on, který má strukturní vzorec

V __Z ^N~^2y~NH₂ byl vyroben analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)anilinu (70). 4-(4-Nitrofenyl)piperazin-2-on (z příkladu bledě hnědý olej ve 100% výtěžku suroviny, která jakékoliv další purifikace.

způsobem v příkladu C C(115)) poskytl byla použita bez

Ή NMR (CD₃OD) : 5 7,02 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,91 (2H, d, J = 8,8 Hz), 3,81 (2H, s), 3,59 (2H, dd, J= 5,9, 4,8 Hz), 3,46 (2H, dd, J = 5,9, 4,8 Hz) .

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-piperazin-2-on, který má strukturní vzorec _n' o byl připraven způsobem analogickým k 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-ΙΗ-imidazolu v příkladu C(41). 4-(4-Amino-fenyl)-piperazin-2-on poskytl krémově

135 · zbarvenou pevnou látku, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 9,00 (IH, bs), 8,20 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,80 (2H, d, J = 9,0 Hz), 4,50 (2H, s), 4,00-4,30 (4H, m). (3H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě postupem analogickým k postupu popsanému v příkladu C(l).

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-piperazin-2-on a 2-brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C (79)) poskytly žlutou pevnou látku v 56% výtěžku, t.t. 280 - 282 °C.

^XH NMR (DMSO-d_s): δ 9,12 (3H, s), 8,32-8,44 (IH, m), 8,18 (2H, bd, J = 6,9 Hz), 8,05 (2H, t, J= 8,2 Hz), 7,78 (2H, d, J = 9,0 Hz), 4,52 (2H, s).

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₀H₁₈F₂N₅O₂S (MHU: 430,1149. Nalezeno: 430,1138.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₇F₂N₅O₂S . 0,3 H₂O: C, 55,24; H, 4,08; N, 16,11; S, 7,37. Nalezeno: C, 55,24; H, 4,10;. N, 15, 87; S, 7,34.

* Příklad C(121):

/4-Amino-2-/4- (4-cyklopropylmethyl-piperazin-l-yl) -fenylami.no/-thiazol-2-yl/-(2,6-difluor-fenyl/-methanon

l-Cyklopropylmethyl-4-(4-nitro-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec >—f \=/ byl vyroben následujícím postupem. Do suspenze 1-(4-nitro-fenyl)-piperazinu (2,50 g, 12,1 mmol) v DMF (10 ml) byl přidán bezvodý Na₂CO₃ (639 mg, 6,03 mmol) a brommethylcyklopropan (585 μΐ, 6,03 mmol). Směs byla ohřívána na 100 °C přes noc, potom byla ponechána ochladit a byla zředěna vodou (30 ml). Oddělená vodná vrstva byla extrahována CHC1₃ (3x

136 ml) . Spojené organické vrstvy byly sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku za vzniku oranžové-hnědé pevné látky, která byla purifikována mžikovou chromatografií na koloně s 2,5% MeOH/CH₂Cl₂ jako eluens za vzniku 2,65 g (84% výtěžek) žluté pevné látky. Tento materiál byl použit bez jakékoliv další purifikace.

'H NMR (CDC1₃) : 5 8,10 (2H, d, J= 10,7 Hz), 7,11 (2H, d, J=9,5 Hz), 3,45 (4H, dd, J = 5,3, 5,1 Hz), 2,65 (4H, dd, J = 5,3, 5,1 Hz), 2,29 (2H, d, J = 6,6 Hz), 0,84-0,98 (IH, m), 0,50-0,58 (2H, m), 0,10-0,15 (2H, m) .

4-(4-Cyklopropylmethyl-piperazin-l-yl)-anilin, který má strukturní vzorec byl připraven způsobem analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilinu v příkladu C(70) . l-Cyklopropylmethyl-4-(4-nitro-fenyl)-piperazin poskytl červenou pevnou látku v 99% výtěžku suroviny, která byla použita bez další purifikace.

*H NMR (CDClj): δ 6,85 (2H, d, J = 9,9 Hz), 6,62 (2H, d, J = 8,8 Hz), 3,42 (2H, bs), 3,10 (4H, dd, J = 5,1, 4,8 Hz), 2,69 (4H, dd J = 5,1, 4,9 Hz), 2,30 (2H, d, J = 6,5 Hz), 0,90-0,98 (IH, m),

0,50-0,56 (2H, m), 0,10-0,15 (2H, m) .

l-Cyklopropylmethyl-4- (4-isothiokyanato-fenyl) -piperazin, který má strukturní vzorec

byl připraven způsobem analogickým k 1-(4-isothiokyanat-fenyl)-ΙΗ-imidazolu v příkladu C(41) . 4-(4-Cyklopropylmethyl-piperazin-l-yl)-anilin poskytl tmavě hnědý olej v 95% výtěžku, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 6,80 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,68 (2H, d, J = 9,1 r r r r

137'

Hz), 3,08 (4H, bs), 2,55 (4H, bs), 2,10 (2H, d, J = 6,2 Hz), 0,65-0,80 (1H, m), 0,42 (2H, d, J = 8,0 Hz), 0,00 (2H, d, J = 4,6 Hz).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán v příkladu C(l).

1- Cyklopropylmethyl-4- (4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin a

2- brom-2', 6'-difluoracetofenon (z příkladu C (79)) poskytly, po krystalizací z EtOH, žlutou pevnou látku v 17% výtěžku, t.t. 215-218 °C.

¹H NMR (DMSO-dJ : 8 10,60 (1H, s), 8,04 (2H, bs), 7,46-7,56 (1H, m), 7,18-7,20 (2H, m), 7,08 (2H, dd, J= 8,0, 7,7 Hz), 6,82 (2H, d, J = 9,1 Hz), 2,98-3,03 (4H, m), 2,47 (4H, bs), 2,12 (2H, d, J = 6,6 Hz), 0,72-0,78 (1H, m), 0,34-0,42 (2H, m), 0,00-0,12 (12H, m) .

IR (KBr): 2917, 1620, 1513, 1428 cm-¹.

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₄H₂5F₂N₅OSCs (M+Cs⁺) : 602,0802. Nalezeno:

602,0818.s

Anal. vypočteno pro C₂₄H₂₅F₂N₅OS . 0,5 H₂O . 0,1 EtOH: C, 60,16; H, 5,55; N, 14,49; S, 6,64. Nalezeno: C, 59,94; H, 5,24; N, 14,19;

S, 6,92.

* Příklad C(122) /4-Amino-2- (4-pyridin-4-yl-fenylamino) -thiazol-5-yl/-(2, 6-difluor -fenyl)-methanon

138

4-Pyridin-4-yl-anilin, který má strukturní vzorec y3hCX^nh2 byl připraven jako první následujícím postupem. Směs 4-(4-nitrofenyl) -pyridinu (600 mg; 3,0 mmol; Wang a kol., J.Phys.Chem., sv. 99 (1955), str. 6876-6888) a 10% Pd/C (100 mg) v EtOH (20 ml) byl míchán pod atmosférou vodíku přes noc. Katalyzátor byl ofiltrován a filtrát byl koncentrován ve vakuu za získání 510 mg (100% výtěžek) bílé pevné látky.

‘H NMR (CDC1₃) : 5 8,59 (2H, dd, J = 6,2, 1,6 Hz), 7,51 (2H, d, J =

8,6 Hz), 7,46 (2H, dd, J = 6,2, 1,6 Hz), 6,79 (2H, d, J = 8,6 Hz) .

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-pyridin, který má strukturní vzorec

byl připraven následujícím postupem. Do 4-pyridin-4-yl-anilinu (200 mg, 1,18 mmol) v THE (35 ml) při 0 °C byl přidán v přebytku Et₃N (0,33 mi, 2,4 mmol) a thiofosgen (99 μί, 1,29 mmol) po kapkách. Po 20 min při 0 °C, potom při teplotě okolí po 10 min, rozpouštědlo bylo odpařeno. Zbytek byl suspendován ve vodě, filtrován, promyt malým množstvím vody, a sušen pod vakuem za získání hnědé pevné látky, 240 mg (96% výtěžek), která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDCI3): 5 8, 62 (2H, d, J = 6,3 Hz), 7,57 (2H, d, J = 8,6 Hz), 7,45 (2H, d, J = 6,3 Hz), 7,27 (2H, d, J = 8,6 Hz).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(1).

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-pyridin a 2-brom-2', 6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly, po rekrystalizaci z EtOH, hnědý prášek v 64% výtěžku, t.t. větší než 300 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : 5 11,08 (1H, s), 8,61 (2H, d, J = 6,0 Hz), 8,25 (2H, s), 7,85 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,73 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,71 (2H, d, J = 6,0 Hz), 7,61-7/49 (1H, m), 7,23 (1H, d, J = 7,7 Hz),

7,20 (1H, d, J = 8,1 Hz).

• <!

Γ .139

HRFABMS (ΜΗ⁺): Vypočt.: 409,0935. Nalezeno: 409,0921.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₁₄N₄OSF₂ . 0,4 H₂O . 0,3 EtOH: C, 60,41; H, 3,90; N, 13,05; S, 7,47.

Nalezeno: C, 60,51; H, 3,65; N, 12,69; S, 7,86.

* Příklad C(123) /4-Amino-2-/4-(4-karbamoyl-piperazin-l-yl)-fenylamino)-thiazol-5yl/-(2,6-difluor-fenyl)-methanon nh_{2 o}

H l-Karbamoyl-4-(4-nitrofenyl)piperazin, který má strukturní vzorec

byl připraven jako první postupem podle Cain a kol._z J.Med.Chem., sv. 20 (1977), str. 987-996, přičemž 1-(4-nitrofenyl)piperazin byl zpracován s kyanatem draselným za získání bílé pevné látky, 705 mg (99%), která byla použita bez další purifikace.

NMR (CDClj) : δ 6,71 (2H, d, J = 8,6 Hz) , 6,50 (2H, d, J = 8,6 Hz), 5,97 (2H, bs), 4,58 (2H, bs), 3,39 (4H, dd, J= 5,1, 4,9 Hz), 2,82 (4H, dd, J = 5,1, 4,9 Hz).

1-(4-Amino-fenyl)-4-karbamoyl-piperazin, který.má strukturní vzorec byl připraven následujícím postupem. Směs amidu kyseliny 4-(4-nitrofenyl)-piperazin-1-karboxylové (760 mg, 3,22 mmol), 10% Pd/C (120 mg), MeOH (20 ml), a THF (20 ml) byla míchána pod vodíkem po 2 hodiny.

Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl koncentrován ve vakuu

140 za vzniku bílé pevné látky, 705 mg (99%), která byla použita bez další purifikace.

Ή NMR (CDClj) : δ 6,71 (2H, d, J=8,6Hz), 6,50 (2H, d, J=8,6 Hz), 5,97 (2H, bs), 4,58 (2H, bs), 3,39 (4H, dd, J = 5,1, 4,9 Hz), 2,82 (4H, dd, J = 5,1, 4,9 Hz).

l-Karbamoyl-4-(4-i strukturní vzorec sothiokyanato-fenyl)-piperazin, který má o byl připraven „ZvrC NCS následujícím postupem. Do suspenze

1-(4-amino-fenyl)-4-karbamoyl-piperazinu (300 mg, 1,36 mmol) v THF (30 ml) při -35 °C byl postupně přidán po kapkách triethylamin (0,38 ml, 2,73 mmol) a thiofosgen (104 μΐ, 1,36 mmol). Vzniklá světle hnědá pevná látka byla odfiltrována, promyta malým množstvím vody a sušena pod vakuem za získání hnědého prášku,. 337 mg (94% výtěžek), který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,08 (2H, d, J=9,0Hz), 6,76 (2H, d, J=9,0 Hz), 4,45 (2H, bs), 3,50 (4H, dd, J = 5,4, 5,0 Hz), 3,15 (4H, dd, J = 5,4, 5,0 Hz) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(1). 1-Karbamoyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin a 2-brom-2',6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly světle šedý prášek ve 45% výtěžku, t.t. 278,5 - 279 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : 3 10,69 (1H, s), 8,16 (2H, bs), 7,63-7,51 (1H, m), 7,38 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,25 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,21 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,02 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,09 (2H, bs), 3,48 (2H, t, J = 4,7 Hz), 3,11 (2H, t, J = 4,7 Hz).

HRFABMS (M+Na): Vypočt.: 81,1234. Nalezeno: 481,1246.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₀N₆O₂SF₂ . 0,5 H₂O: C, 53,95; H, 4,53; N, r

141

17,98; S, 6,86. Nalezeno: C, 53,92; H, 4,35; N, 17,64; S, 6,64.

* Příklad C(124) / 4-Amino-2-/4- (3R, 4-dimethyl-piperazin-l-yl) -f enylamino) -thiazol5-yl/-(2,6-difluor-fenyl)-methanon

3R-Methyl-1-(4-nitrofenyl)piperazin, který má strukturní vzorec

· byl připraven jako první následujícím postupem. (R)-(-)-2-Methylpiperazin (186 mg, 1,86 mmol), l-fluor-4-nitrobenzen (131 mg, 0,93 mmol), Et₃N (0,26 ml, 1,86 mmol) a acetonitril (2 ml) byly refluxovány přes noc a koncentrovány va vakuu. Zbytek byl suspendován ve vodě a získaná pevná látka byla odfiltrována, promyta minimálním množstvím vody a sušena pod vakuem za získání jasně žluté pevné látky, 128 mg (62% výtěžek), která byla použita bez další purifikace.

^:H NMR (CDC1₃): 5 8,12 (2H, d, J = 9,5 Hz), 6,82 (2H, d, J = 9,5 Hz), 3,80-3,71 (2H, m), 3,18-3,08 (1H. m), 3,04-2,88 (3H, m), 2,58 (1H, dd, J = 12,3 Hz), 1,16 (3H, d, J = 6,3 Hz).

1,2R-Dimethyl-4-(4-nitro-fenyl)piperazin, který má strukturní vzorec

byl připraven následujícím postupem. Směs 3R-methyl-l-(4-nitro-fenyl)piperazinu (124 mg, 0,56 mmol), mravenčanu sodného (93 mg, 1,37 mmol), kyseliny mravenčí (1,5 ml) a formalinu (1,5 ml) byla míchána při °C přes noc, ochlazena, ňalita do ledu/vody a extrahována

CHC1₃. Organická vrstva byla promyta solankou, sušena nad Na₂SO₄ a

Γ

142 koncentrována za získání 116 mg (71% výtěžek) žlutých krystalů, které byly použity bez další purifikace.

XH NMR	(CD	Cl3) :	δ 8,12 (2H, d, J	= 9,4 Hz),	6,82	(2H, d, J = 9,4
Hz), 3,	67	(IH,	d, J = 12,4 Hz),	3,14 (IH,	ddd,	J = 12,4, 11,7,
1,5 Hz)	r	2,90	(IH, d, J = 11,7	Hz), 2,74	(IH,	dd, J = 11,7, 10
Hz), 2,	40	(IH,	m), 2,34 (3H, s),	, 2,22 (IH,	m),	1,16 (3H, d, J =
6,3 Hz)

4-(3R,R-Dimethyl-piperazin-l-yl)-anilin, který má strukturní vzorec ^H3C_NyD^sl_^^“^NH2 h₃c byl připraven následujícím postupem. Směs 1,2R-dimethyl-4-(4-nitrofenyl)-piperazinu (168 mg, 0,71 mmol), 10%Pd/C (30 mg), a MeOH (10 ml) byla míchána pod vodíkem po 1,5 hodiny. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl koncentrován ve vakuu za získání matně žlutého oleje, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 6,91 (2H, d, J = 8,8 Hz) , 6,75 (2H, d, J = 8,8 Hz), 3,66-3,32 (4H, m), 3,05-2,89 (2H, m), 2,63-2,48 (2H, m) ,

2,44 (3H, s), 1,22 (3H, d, J = 6,1 Hz.

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-1,2R-dimethyl-piperazin, který má strukturní vzorec

byl připraven následujícím postupem. Do 4-(3R,4-dimethyl-piperazin-l-yl)-anilinu (0,71 mmol) v THF (15 ml) při -35 °C byl přidán v přebytku Et₃N (0,20 ml, 1,43 mmol) a thiofosgen (58 μΐ, 0,75 mmol) po kapkách. Rozpouštědlo bylo odpařeno a zbytek byl rozdělen CHC1₃ a vodou. Organická vrstva byla sušena s Na₂SO₄ a koncentrována za získání hnědého prášku, 184 mg, který obsahoval stopy Et₃N, stanoveno NMR, ale byl vyhovující pro použití bez další purifikace.

142 /£ťf © © c © © r r r© © i r © c © © ©r r . <··-·»<- · f r r r·

Γ f · © Γ - © ©

Ή NMR (CDC1₃): 5 7,12 (2H, d, J = 9,1 Hz), 6,82 (2H, d, J = 9,1 Hz), 3,58-3,46 (2H, m), 3,13-3,03 (2H, m), 2,89-2,75 (1H, m), 2,65-2,41 (2H, m), 2,49 (3H, s), 1,27 (3H, d, J = 6,3 Hz).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

4- (4-isothiokyanato-fenyl)-l,2R-dimethyl-piperazin a

2-brom-2',6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly žlutý prášek v 57% výtěžku, t.t. 115 - 118 °C.

^XH NMR (DMSO-d₅): 510,65 (1H, bs) , 8,15 (2H, bs) , 7,62-7,50 (1H, m), 7,35 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,23 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,20 (1H, d, J = 8,0 Hz), 6,97 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,59-3,49 (2H, m), 3,34 (3H, s), 2,90-2,72 (2H, m), 2,40 (1H, t, J = 10,9 Hz), 2,28-2,05 (2H, m), 1,09 (3H, d, J = 6,2 Hz).

HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 444,1670. Nalezeno: 444,1656.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₃N₅OSF₂ . 0,8 H₂O . 0,6 t-BuOH: C, 58,33; H, 6,14; N, 13,94; S, 6,38. Nalezeno: C, 58,38; H, 5,92; N, 13,89;

S, 6,33.

* Příklad C(125) /4-Amino-2-/4-(3S,4-dimethyl-piperazin-l-yl)-fenylamino)-thiazol5- yl/-(2,6-difluor-fenyl)-methanon

4-(4-Isothiokyanato-fenyl)-1,2S-dimethyl-piperazin, který' má strukturní vzorec ~^ⁿA_/-^{ncs 7} ·- byl připraven postupem použitým pro jeho enantiomer, 4-(4-isothiokyanato-fenyl)-1,2R-dimethyl-piperazin v příkladu C (124). Získaný žlutý prášek

143 r r r r r r r r rr r < r

144 vykazoval srovnatelné NMR spektrum a byl použti bez další purifikace.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

4-(4-isothiokyanato-fenyl)-1,2S-dimethyl-piperazin a 2-brom-2', 6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly žlutý prášek v 77% výtěžku, t.t. 110 - 116 °C.

Hí NMR (DMSO-dJ : δ 10,65 (1H, bs), 8,15 (2H, bs), 7, 62-7,50 (1H, m), 7,35 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,23 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,20 (1H, d, J = 8,0 Hz), 6,97 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,59-3,49 (2H, m), 3,34 (3H, s), 2,90-2,72 (2H, m), 2,40 (1H, t, J = 10,9 Hz), 2,28-2,05 (2H, m), 1,09 (3H, d, J = 6,2 Hz).

IR (KBr): 3386, 3274, 3168, 2970, 2807, 1620, 1589, 1547, 1517, 1464, 1429, 1238, 1001 cm'¹.

HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 444,1670. Nalezeno: 444,1659.

Anal.- vypočteno pro C₂₂H₂₃N₅OSF₂ . .0,7 ΗΌ . 0,2 t-BuOH: C, 58,15; H, 5,65; N, 14,87; S, 6,81. Nalezeno: C, 58,06; H, 5,61; N, 14,58;

S, 6,90.

* Příklad C(126) /4-Amino-2-/4-/ (3-dimethylamino-propyl)-methyl-amino/-fenylamino/ -thiazol-5-yl)-(2,6-difluor-fenyl)-methanon

h₃c

NO, byl připraven jako

N-(4-Nitrofenyl)-N,N',N'-trimethyl-propan-l,3-diamin, který má strukturní vzorec

Γ

Γ

145 první postupem analogickým k terč.butyl /methyl-(4-nitro-fenyl)amino/acetatu z příkladu C (103). 4-Fluornitrobenzen a Ν,Ν,Ν'-trimethyl-propandiamin poskytly žlutý olej, který byl zahříván na 280 °C při tlaku 1 torr (133,3 Pa), aby se odstranily výchozí materiály, za získání oranžového oleje, 4,26 g (850 výtěžek suroviny), který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDClj): 58,10 (2H, ddd, J= 9,5, 8,2, 5,3 Hz), 6,64 (2H, ddd, J = 9,5, 8,2, 5,3 Hz), 3,50 (2H, t, J = 7,2 Hz), 3,08 (3H, s), 2,07 (3H, t, J = 6,8 Hz), 2,23 (6H, s), 1,72-1,82 (2H, m) .

N-(4-Aminofenyl)-N,N',N'-propan-l, 3-diamin, který má strukturní vzorec

byl připraven následujícím postupem. Směs N-(4-nitro-fenyl)-N,N',N'-trimethyl-propan-1,3-diaminu (1,72 g, 7,25 mmol)ý chloridu cínatého (II) dihydratu (8,05 g, 36,2 mmol), dioxanu (25 ml) a ethanolu (5 ml) byla zahřívána pod refluxem po 3,5 h, potom byla ponechána ochladit. Do získané směsi byl přidán vodný nasycený Na₂CO₃, až nebylo pozorováno žádné vyvíjení plynu. Pro usnadnění následné fitrace byl přidán celit. Pevné látky byly promyty MeOH a filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a extrahován 10% MeOH/CHCl₃ (4x). Spojené extrakty byly promyty solankou, sušeny nad Na₂SO₄ a odpařeny za vzniku černého oleje, který byl purifikován chromatografií na koloně s aluminou (neutrální, aktivita I) a 1% MeOH/CH₂Cl₂) jako eluens za získání 0,39 g (26%) tmavnoucího hnědého oleje, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): 5 6,67 (4H, dd, J = 9,0, 8,6 Hz), 3,22 (2H, t, J = 7,2 Hz), 2,82 (3H, s), 2,31 (2H, t, J = 7,5 Hz), 2,23 (6H, s), 1,70 (2H, p, J = 7,4 Hz).

N-(4-Isothiokyanato-fenyl)-N,N',N'-trimethyl-propan-l,3-diamin, který má strukturní vzorec h₃c r p e r r p , r r r r ..<-· * r- , e r ^r c ^r r r p ' , ^r _r ^{f Γ Γ}

146 byl připraven způsobem analogickým k 4-(4-isothiokyanato-fenyl)-1,2R-dimethyl-piperazinu z příkladu C(124).

N-(4-Aminofenyl)-N,N',N'-propan-1,3-diamin poskytl černý olej v 86% výtěžku suroviny, který byl použit bez další.purifikace.

^XH NMR (CDCla): δ 7,09 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,59 (2H, d, J = 9,

Hz), 3,38 (2H, J = 7,2 Hz), 2,94 (3H, s), 2,36 (2H, t, J = 7,2 Hz), 2,29 (6H, s), 1,78 (2H, p, J=7,2Hz).

IR (KBr): 2127, 1605, 1514, 1379 cm-¹.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(1).

N- (4-Isothiokyanato-fenyl)-N,N',N'-trimethylpropan-l,3-diamin a 2-brom-2’, 6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly hnědý olej, který byl purifikován mžikovou chromatografii na koloně v krokovým gradientem 7-14% MeOH/CHClj a vysrážen z CH₂C1₂/ hex za získání amorfní žluté pevné látky v 51% výtěžku, t.t. 115-120 °C (sloučen).

^:H NMR (DMSO-d_ó): δ 10,50 (1H, bs), 8,05 (2H, bs), 7,50 (1H, ddd, J = 15,3, 8,4, 6,7 Hz), 7,10-7,35 (4H, m), 6,68 (2H, d, J = 9,1

Hz), 2,84 (3H, S), 2,27 (2H, t, J=7,2Hz), 2,16 (6H, s) , 1,61 (2H, p, J = 7,3 Hz).

IR (KBr): 3393, 3279, 3165, 2951, 1619, 1545, 1524, 1462, 1436 cm¹.

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₂H_2ÍF₂N₅OS (MH*) : 446,1826. Nalezeno:

446,1810.

Anal. vypočteno pro C₂₁H₂₃F,N₅CS . 0,8 H₂0 . 0,4 C₆H₁₄: C, 59,28; H, 6,56; N, 14,16; S, 6,49. Nalezeno: C, 59,37; H, 6,31; N, 13,76;

S, 6,26.

♦Příklad C(127) (2, 6-Difluor-fenyl) -/2-/4- (4-pyridin-4-yl-piperazin-l-yl) -fenylamino/thiazol-5-yl/methanon

147

0-0

1-(4-Nitro-fenyl)-4-pyridin-4-yl-piperazin, který má strukturní vzorec — byl připraven postupem

NO, analogickým k terč. butyl/methyl-/4-nitro-fenyl)-amino/acetatu z příkladu C (103). 4-Fluornitrobenzen a 1-(4-pyridyl)piperazin (Ratous a kol., J. Med. Chem., sv. 8 (1965), str. 104-107) poskytly hnědý prášek ve 27% výtěžku, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CD₃0D) : δ 8,20 (2H, d, J=5,0Hz), 8,08 (2H, d, J=9,4 Hz), 7,04 (2H, d, J = 9,5 Hz), 3,62-3,68 (4H, m), 3,50-3,56 (4H, m) .

4-(4-Pyridin-4-yl-piperazin-l-yl)-anilin, strukturní vzorec a ./ \ /=\

-nh₂ který má byl připraven postupem analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilinu z příkladu C(70). 1-(4-Nitro-fenyl)-4-pyridin-4-yl-piperazin poskytl hnědý prášek ve 100% výtěžku suroviny, který byl použit bez další purifikace.

^lTH NMR (CD3OD) : δ 8,12 (2H, d, J = 6,7 Hz),. 6,90 (4H, bd, J. = 8,9 Hz), 6,74 (2H, d, J = 6,6 Hz), 3,56 (4H, dd, J = 5,3, 5,0 Hz), 3,14 (4H, dd, J = 5,0, 4,2 Hz).

1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-pyridin-4-yl-piperazin, který má strukturní vzorec \ /=\ byl připraven následujícím postupem. Do roztoku 4-(4-pyridin-4-yl-piperazin-1-yl)anilin (2,00 g, 7,86 mmol) v 10% vodném HCI (1 ml) byl

148 přidán thiofosgen (720 μΐ, 9,43 mmol). Po 0,5 h byla získaná žlutá sraženina odfiltrována, promyta nasyceným vodným NaHCO₃ a H₂O a sušena pod vysokým vakuem za získání 1,9 g (82% výtěžek) žlutého prášku, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 6,73 (4H, d, J = 8,8 Hz), 6,51 (4H, d, J = 8,8 Hz), 3,32 (4H, bs), 3,29 (4H, bs).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán v příkladu C(l) . 1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-pyridin-4-yl-piperazin a 2-brom-2',6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly po rekrystalizací se stopami DMSO v MeOH/CHCl₃ světle hnědý prášek ve 30% výtěžku, t.t. 155 - 157 °C.

^XH NMR (DMSO-dg) : δ 8,16 (2H, d, J = 6,0 Hz), 8,04 (IH, bs), 7,40-7,52 (IH, m), 7,32 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,15 (2H, t, J = 7,7 Hz), 6,96 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,85 (2H, d, J = 5,5 Hz), 3,60 (4H, bs).

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₅H₂₃F₂N₆OS (MH⁺) : 493,1622. Nalezeno:

493,1606.

Analyt. stanoveno pro C₂₅H₂₃F₂N₆OS . 0,7 MeOH . 0,1 CHC1₃ . 0,1 DMSO: C, 58,40; H, 4,81; N, 15,72; S, 6,60. Nalezeno: C, 58,38; H,

4,50; N, 15,37; S, 7,00.

* Příklad C(128) /4-Amino-2-/4- (l-methyl-/l,4/-diazepan-4-yl)-fenylamino/-thiazol-5-yl/-(2, 6-difluor-fenyl)-methanon

1-Methyl-N-(4-nitrofenyl)-/1,4/diazepan, který má strukturní vzorec

Γ r rc r γ

Γ Τ' r r c c γ β Γ Γ Γ Γ “ ř ·- r Γ » γ ,-1* e

149 byl připraven postupem analogickým k terc.butyl /methyl-(4-nitro-fenyl)- amino/acetatu z příkladu C (103). 1-Methyl-homopiperazin poskytl žlutý prášek v 93% výtěžku, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 8,12 (2H, d, J=9,5Hz), 6,64 (2H, d, J=9,5 Hz), 3,56- 3,70 (4H, m), 2,74 (2H, dd, J= 4,9, 3,3 Hz), 2,58 (2H, dd, J = 4,9, 3,3 Hz), 2,58 (2H, dd, J = 5,6, 5,4 Hz), 2,40 (3H, s), 2,00-2,08 (2H, m).

4-(4-Methyl-/l,4/diazepan-l-yl)anilin, který má strukturní vzorec

byl připraven postupem analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)anilinu z příkladu C(70). l-Methyl-4-(4-nitro-fenyl)-/1,4/-diazepan poskytl fialový olej ve 100% výtěžku suroviny, který byl bezprostředně použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDClj): δ 6,68 (2H, d, J = 12,2 Hz), 6,60 (2H, d, J = 6,8 Hz), 3,52 (2H, dd, J = 4,8, 4,7 Hz), 3,43 (2H, t, J = 6,3 Hz), 2,71 (2H, dd, J = 4,9, 4,7 Hz), 2,58 (2H, dd, J = 5,5, 5,4 Hz), 2,38 (3H, s), 1, 95-2,04 (IH, m) .

1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-methyl-/l,4/diazepan, který má strukturní vzorec

byl připraven způsobem analogickým k 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-IH-imidazolu z příkladu C(41) . 4-(4-Methyl-/l,4/diazepan-l-yl)anilin poskytl surový produkt, který byl extrahován CHC1₃ a byl získán černý olej v 85% výtěžku suroviny, který byl použit bezprostředně bez další purifikace.

^XH NMR (CDClj) : δ 7,02 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,56 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,54 (2H, dd, J = 4,8, 4,8 Hz), 3,45 (2H, t, J = 6,3 Hz),

150

2,67 (2H, dd, J = 4,9, 4,8 Hz), 2,53 (2H, dd, J = 5,6, 5,4 Hz), 2,36 (3H, s), 1,97 (2H, p, J = 5,7 Hz).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

1- (4-Isothiokyanato-fenyl)-4-methyl-/l, 4/-diazepin a

2- brom-2',6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly, po krystalizací z vroucího EtOH, světle hnědý prášek ve 26% výtěžku, t.t. 138-140 °C.

Ή NMR (DMSO-d₆) : δ8,05 (ÍH, bs), 7,42-7,52 (ÍH, m) , 7,10-7,22 (4H, m), 6,64 (2H, d, J = 9,1 Hz), 3,36-3,52 (4H, m), 2,58 (2H, dd, J = 4,8, 4,7 Hz), 2,42 (2H, dd, J = ,6, 5,4 Hz), 2,25 (3H, s), 1,82-1,92 (2H, m).

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₂H₂₄F₂N₅OS (MH') : 444,1670. Nalezeno: 444,1656.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₃F₂N₅OS . 0,5 H₂Ó . 0,8 EtOH: C, 57,92; H, 5,93; N, 14,31; S, 6,55. Nalezeno: C, 58,05; H, 5,69; N, 14,15;

S, 6,55.

♦Příklad C(129)

3- (/4-/4-Amino-5- (2, 6-difluorbenzoyl) -thiazol-2-yl-amino/-fenyl/-methylamino)-propionitril

3-/Methyl-(4-nitro-fenyl)amino/-propionitril, který má strukturní vzorec _Hac byl připraven následujícím nc V^Ano₂ postupem. Hydroxid benzyltrimethylamonný (7,23 ml 40% roztoku v

MeOH) byl přidán do suspenze N-methyl-4-nitroanilinu (5,00 g,

32,9 mmol) a akrylonitrilu (7,23 ml) v dioxanu (80 ml). Získaný roztok byl zahříván při 55 °C po 3,5 h, potom byl nalit na vodu

Γ

Γ ·' f

Γ r

151 · a extrahován 20% isopropanolem v chloroformu. Oddělené organická vrstva byla promyta vodou, sušena nad K₂CO₃ a koncentrována do formy suspenze žluté pevné látky, která byla zředěna etherem. Pevná látka byla odfiltrována a sušena pod vakuem za získání 6,15 g (91% výtěžek) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ8,17 (2H, d, J- 9,4 Hz), 6,66 (2H, d, J = 9,4 Hz), 3,82 (2H, t, J = 6,7 Hz), 3,19 (3H, s), 2,66 (2H, t, J = 6,7 Hz) .

3-/(4-Amino-fenyl)-methyl-amino/propionitril, který má strukturní vzorec byl připraven

NcT'' ΌχΗ₂ t

postupem analogickým k

4-(3S,4-dimethyl-piperazin-l-yl)-fenylaminu z příkladu C(134). 3-/Methyl- (4-nitro-fenyl) -amino/propionitril poskytl hnědý olej ve 100% výtěžku, který byl použit bez další purifikace.

¹H NMR (CDC1₃) : 5 6, 68 (4H, s), 3,57 (2H, t, J=7,0Hz), 2,90 (3H,' s), 2,51 (2H, t, J = 7,0 Hz).

3-/ (4-Isothiokyanato-fenyl)-methyl-amino/-propionitril, který má strukturní vzorec - byl připraven

způsobem analogickým k·

4- (4-isothiokyanato-f enyl)-1,2S-dimethyl-piperazinu v příkladu C(134). 3-/(4-Amino-fenyl)-methyl-amino/-propionitril poskytl hnědou pevnou látku v 95% výtěžku, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : 5 7,15 (2H, d, J = 9,1 Hz), 6,62 (2H, d, J= 9,1 Hz), 3,72 (2H, t, J = 6,8 Hz), 3,05 (3H, s), 2,58 (2H, t, J = 6,8 Hz) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem

0

152' analogickým k postupu použitému v příkladu C(l).

3-/4-(4-Isothiokynato-fenyl)-methylamino/-propionitril a

2-brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly morfní žlutý prášek v 66% výtěžku, t.t. 120-130 °C (rozklad).

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,52 (1H, bs), 8,10 (2H, bs), 7,49 (1H, ddd, J = 15,3, 8,2, 6,7 Hz), 7,26 (2H, bd, J = 8,2 Hz), 7,15 (2H, dd, J = 8,1, 7,7 Hz), 6,76 (2H, d, J = 9,1 Hz), 3,63 (2H, t, J = 6,7 Hz), 2,91 (3H, s), 2,69 (2H, t, J = 6,7 Hz).

IR (KBr): 3417, 3,9, 1618, 1548, 1523, 1463, 1436, 1376, 1356, 1234, 1001 cm ^-1.

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₀H₁₇N₅OSF₂Na (M+Na⁺) : 436,1020.

Nalezeno:436,1030.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₇N₅OSF₂ . 0,2 H₂O . 0,45 terc.BuOH: C, 5,13; H, 4,90; N, 15,55; S, 7,12.

Nalezeno: C, 57,88; H, 4,79; N, 15,16; S, 6,95.

* Příklad C(130)

2-/4-Amino-2-(4-nitro-fenylamino)-thiazol-5-karbonyl/-fenyl benzoat o₂n.

nh₂

A

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l). Dále byly izolovány dva reakční produkty po mžikové chromatografií na koloně a identifikovány charakteristiky pro (Z)- a (E)-4-(2-hydroxy-fenyl)-3H-thiazol-2-yliden-kyanamid následují. 4-Nitrofenylisothiokyanat a 2'-benzoyloxy-2-brom-acetofenon poskytly sloučeninu uvedenou v názvu jako žlutou pevnou látku, t.t.: 258-260 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 11,35 (1H, s) , 8,23 (2H, d, J = 9,3 Hz),

7, 98-8,04 (4H, m), 7,85 (2H, d, J = 9,2 Hz), 7,36-7,67 (1H, m),

153 r*r r r r r r , r ,·· κ r- r r

7,52-7,63 (4H, m), 7,93-7,45 (2H, m) .

¹³C NMR (MeOH-dJ : 5 181,5, 166,4, 164,4, 147,2, 145,8, 142,0, 135,2, 134,3, 131,2, 130,0, 129,3, 129,2, 128,3, 126,5, 125,6, 123,9, 118,3.

Anal. vypočt. pro C₂₅H_UN₄O₅S: C, 59,99; H, 3,50; N, 12,17; S, 6,96. Nalezeno: C, 58,25; H, 3,54; N, 11,77; S, 6,94.

Sloučenina, která eluovala dříve, (Z)-4-(2-hydroxy-fenyl)-3- (4-nitrofenyl)-3H-thiazol-2-yliden-kyanamid, která má strukturní vzorec byla

izolována jako žlutá amorfní látka.

Ή NMR (DMSO-d₆): δ 9,79 (1H, s), 8,18 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,55 (2H, d, J= 9,0 Hz), 7,26 (1H, dd, J= 7,5, 1,5 Hz), 7,17 (1H, ddd, J = 7,5, 7,4, 1,5 Hz), 7,05 (1H, s), 6,79 (1H, dd, J = 7,6, 7,4 Hz), 6,65 (1H, d, 8,2 Hz)./ ¹³C NMR (MeOH-d₄): δ 176,8, 157,9, 150,3, 143,6, 141,7, 134,3, 134,2, 132,0, 126,0, 122,1, 119,5, 119,3, 117,9, 107,3.

HRFABMS : Vypočt. pro C₁₅H₁₀N₄O₃S (MH⁺) : 339,0552. Nalezeno: 339,0550.

Sloučenina, která eluovala později, (E)-4-(2-hydroxy-fenyl)-3- (4-nitrofenyl) -3H-thiazol-2-yliden-kyanamid, která má strukturní vzorec

,byla izolována jako žlutá amorfní látka.

^rH NMR (DMSO-dg): δ 13,2 (1H, s), 8,25 (2H, d, J = 9,2 Hz), 7,55 (1H, dd, J = 7,8, 1,5 Hz), 7,55 (1H, ddd, J = 8,6, 7,5, 1,1 Hz), p ρ p p

154 ··

7,41 (1H, ddd, J= 8,6, 7,5, 1,1 Hz), 7,25 (1H, dd, J= 8,1, 1,0 Hz), 7,13 (1H, d, 9,2 Hz), 7,01 (1H, s).

“C NMR (MeOH-dJ : δ 174,8, 162,1, 152,2, 143,6, 134,0, 131,4, 129,9, 126,4, 126,2, 122,0, 121,5, 117,8, 105,6.

ESIMS: Vypočteno pro C₁₆H₁₀N₄O₃S (MH⁺) : 339. Nalezeno: 339.

* Příklad C (131):

(4-Amino-2-/4-/4-(2,2,2-trifluorethyl)-piperazin-l-yl/-fenylanu.no/-thiazol-5-yl) -2, 6-dif luor-f enyl) -methanon

1-(4-Nitrofenyl)-4-(2,2,2-trifluorethyl)-piperazin, který má strukturní vzorec no₂ byl připraven způsobem analogickým k terč.butyl/methyl-(4-nitrofenyl)-amino/-acetatu z příkladu C(103). 1-(4-Nitro-fenyl)-piperazin a

1,1,l-trifluor-2-jodo-ethan poskytly žluto-oranžovou pevnou látku ve 33 % výtěžku suroviny.

Ή NMR (CDClj) : 6 8,13 (2H, d, J = 9,2 Hz), 6,82 (2H, d, J = 9,2 Hz), 3,51-3,38 (4H, m), 3,10-2,99 (2H, m), 2,87-2,77 (4H, m) .

4-/4-(2,2,2-Trifluor-ethyl)-piperazin-l-yl/-anilin, který má strukturní vzorec 'NH, připraven -anilinu z postupem příkladu byl potom analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl) C(70) .

Γ IΓ #*

1-(4-Nitro-fenyl)-4-(2,2,2-trifluor-ethyl)-piperazin poskytl bledě hnědou pevnou látku ve 100% výtěžku suroviny.

155 ·

Hz).

1-(4-Isothiokyanato-fenyl)-4-(2,2,2-trifluor-ethyl)piperazin, který má strukturní vzorec byl připraven způsobem analogickým k

1-(4-isothiokyanato-fenyl)-4-methyl-piperazinu z příkladu C(70) z 4-/4-(2,2,2-trifluor-ethyl)-piperazin-l-yl/-anilinu, za získání hnědého prášku v 89% výtěžku.

^XH NMR (CDClj): δ 7,15 (2H, d, J = 9,1 Hz), 6,85 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,25 (4H, dd, J= 4,9, 5,2 Hz), 3,05 (2H, g, J='9,5 Hz),

2,86 (4H, dd, J = 5,1, 4,8 Hz).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán v příkladu C(l).

1- (4-Isothiokyanato-fenyl)-4-(2,2,2-trifluor-ethyl)-piperazin a

2- brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly, po purifikaci chromatografií na koloně s 5% MeOH/CHCl₃ jako eluens, žlutý prášek v 63% výtěžku, t.t. 99-102 °C.

X NMR (DMSO-d₆) : δ 8,12 (IH, bs), 7,58-7,46 (IH, m), 7,30 (2H, bd J = 7,4 Hz), 7,18 (2H, dd, J = 7,8, 7,7 Hz), 6,92 (2H, d, J = 8,9 Hz), 3,24 (2H, q, J = 10,3 Hz), 3,12 (4H, dd, J = 4,1, 5,0 Hz), 2,76 (4H, bd, J = 4,6 Hz).

IR (KBr): 3394, 3276, 3178, 3058, 2954, 2829, 1617, 1588, 1547, 1462, 1426, 1231 cm'¹ .

Anal. vypočt. pro C₂₂H₂OF₂N₅OS . 0,15 CHC1₃: C, 51,62; H, 3,94; N, 13,59; S, 6,22. Nalezeno: C, 51,68; H, 3,93; N, 13,39; S, 6,03.

r r

156 * Příklad D (1) :

(3-Aminofenyl) - (4-amino-2-fenylamino-thiazol-5-yl) -methanon

Směs sloučeniny uvedené v názvu z příkladu A(l) ((4-amino-2-fenylamino-thiazol-5-yl) - (3-nitrofenyl) -methanon, 520 mg, 1,53 mmol) a 10% paladium na uhlíku (80 mg) v THF (10 ml) byla míchána pod atmosférou vodíku přes noc. Katalyzátor byl odfiltrován a filtrát byl koncentrován ve vakuu za získání 470 mg surové pevné látky, která rekrystalizovala z ethylacetatu/benzenu za získání 100 mg (19% výtěžek) světle žlutého prášku, t.t. 162-164 °C.

^XH NMR (DMSO-d₅): δ 10,75 (IH, s) , 8,42 (2H, bs), 8,15 (2H, bs), 7,60 (2H, d, J = 7,8 Hz), 7,34 (2H, d, J ='7,8 Hz)., 7,23 (IH, t,

J = 7,8 Hz), 7,14 (IH, s) , 7,07 (IH, d, J = 7,8 Hz), 7,05 (IH, t, J = 7,8 hz), 6,91 (IH, d, J = 7,8 Hz).

FABMS (MH⁺) : 311.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₄N₄OS . H₂O . C₆H₆: C, 59,30; H, 4,98; S, 9,54. Nalezeno: C, 59,02; H, 4,61; N, 16,34; S, 9,25.

* Příklad D(2) :

(4-Amino-fenyl) - (4-amino-2-feriylamino-thiazol-5-yl)-methanon

o nh₂

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán v příkladu D(l). Katalytická redukce sloučeniny uvedené v

157 názvu příkladu Α(2) ((4-nitro-fenyl)-(4-amino-2-fenylaminothiazol-5-yl)-methanonu) poskytla, po rekrystalizaci z ethanolu, 410 mg (90% výtěžek) červeného amorfního prášku, t.t. větší než 300 °C.

¹H NMR (DMSO-d₆) : δ 10,85 (1H, bs), 8,44-8,20 (2H, bs) , 8,36 (1H, d, J = 8,7 Hz), 8,17 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,89 (1H, d, J = 15,9 Hz), 7,62 (2H, d, J = 7,8 Hz), 7,37 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,09 (1H, t, J = 7,8 Hz).

FABMS (MH⁺) : 311.

Anal. vypočteno pro C_1SH₁₄N₄OS . 0,5 H₂O: C, 60,17; H, 4,73; N, . 17,54; S, 10,04. Nalezeno: C, 60,09; H, 4,73; N, 17,58; S, 9,93. * Příklad D(3):

/4-Araino-2- (4-dime thy lamino-feny lamino) -thiazol-5-yl/- (2-aminofenyl)-methanon h₃c<pn₃ iH_aZ\

nh₂

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán v příkladu D(l). Katalytická redukce sloučeniny uvedené v názvu příkladu C(4) poskytla 26 mg (30% výtěžek) amorfní pevné látky.

^XH NMR (DMSO-dg): δ 10,38 (1H, s), 8,06 (2H, bs), 7,31 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,30 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,08 (1H, t, J = 7,5 Hz), 6,72 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,68 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,51 (1H, t, J = 7,5 Hz), 5,75 (2H, s), 2,88 (6H, s).

FABMS (MH⁺) : 354.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₉N₅OS . 0,5 H₂0 . 0,3 MeOH: C, 59,07; H, 5,74; N, 18,82; S, 8,62. Nalezeno: C, 59,2.4; H, 5,56; N, 18,51; S, 8,36.

re r r r r r r r r r řece r r c r r ^{r r}

158 * Příklad D(4):

/4-Amino-2-(4-amino-fenylamino-thiazol-5-yl/-fenyl-methanon

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem jako je popsán v příkladu D(l). Katalytická redukce sloučeniny uvedené v názvu příkladu A(8) (tedy /4-amino-2-(4-nitrofenylamino)thiazol-5-yl/-fenyl-methanon, 450 mg, 1,32 mmol) poskytla, po rekrystalizaci z ethanolu, 120 mg (29% výtěžek) oranžového prášku, t.t. 167-169 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,38 (IH, bs), 8,15 (2H, bs), 7, 64-7,55 (2H, m), 7,47-7,38 (3H, m), 7,10 (2H,. d, J=8,6Hz), 6,55 (2H, d, J =

8,6 Hz), 5,20 (2H, bs) .

FABMS (MHU: 311.

Anal. vypočteno pro C₁₆H₁₄N₄OS . H₂0: C, 56, 96; H, 5,08; N, 16,61;

S, 9,50. Nalezeno: C, 56,94; H, 5,07; N, 16,60; S, 9,64.

* Příklad D(5) :

4-/4-Amino-5-(3-amino-5-amino-thiofen-2-karbonyl)-thiazol-2-ylamino/-benzensulfonamid

nh₂

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu použitému v příkladu D(l). Sloučenina z názvu příkladu C(95) byla hydrogenovaná a rekrystalizovala z EtOH za získání hnědého prášku v 96% výtěžku, t.t. 268-271 °C.

Ή NMR (DMSO-dg): δ 10,97 (IH, s), 7,91 (2H, s), 7,82 (2H, d, J = <

Γ ©

Γ Γ rrrr © © r r r r r

Γ © Γ © © < ' © Γ r r © r ·· ' ^r ©' · - © r r r r · r ^r

159' · ·

9,1 Hz), 7,78 (2H, d, J = 9,1 Hz), 7,28 (2H, s), 6,43 (2H, s),

5,81 (1H, s), 2,34 (3H,s).

FABMS (MH⁺) : 410.

Anal. vypočteno pro C₁₅H₁₅N₅O₃S₃ . 0,1 H₂O . 0,3 EtOH: C, 44,07; Ή, 4,03; N, 16,47; S, 22,63. Nalezeno: C, 44,23; H, 3,93; N, 16,07; S, 23,01.

* Přiklad E(l):

4-/4-Amino-5-(2-nitro-benzoyl)-thiazol-2-ylamino/-benzoová kyselina

H

Do suspenze sloučeniny uvedené v názvu z příkladu A(5) (tedy ethyl 4-/4-amino-5-(2-nitro-benzoyl)-thiazol-2-ylamino/benzoatu, 950 mg, 2,3 mmol), v methanolu -(15 ml), byl přidán 3N NaOH (10 ml). Po 30 minutách byla směs okyselena na pH 4 s IN HCI, přičemž se vytvořila žlutá sraženina. Směs byla zředěna vodou (100 ml). Pevná látka byla odfiltrována a promyta vodou. Rekrystalizace z ethanolu poskytla 672 mg (76% výtěžek) žlutých krystalů, t.t. 286-292 °C.

1H NMR (DMSO-d₆) : δ 12,75 (1H, s), 11,13 (1H, s), 8,12 (2H, bs), 8,08 (12H, d, J = .7,8 Hz), 7,91 (2H, d, J= 8,7 Hz), 7,82 (1H, td, J = 8,4, 0,9 Hz), 7,78-7,68 (4H, m).

FABMS (MH⁺) : 385.

Anal. vypočteno pro C₁₉H₁₈N₄O₃S: C, 53,12; H, 3,15; N, 14,58; S, 8,34. Nalezeno: C, 53,29; H, 3,25; N, 14,31; S, 8,11.

* Příklad E(2) :

4-/4-Amino-2-(4-sulfamoyl-fenylamino)-thiazol-5-karbonyl/benzoová

Γ r r 0

160 kyselina

Do suspenze ethyl 4-/4-amino-2-(4-sulfamoyl-fenylamino)-thiazol-5-karbonyl/-benzoatu (500 mg, 1,12 mmol; příklad C(34)) v MeOH (10 ml) byl přidán IN vodný NaOH (3,4 ml, 3,4 mmol). Po 4 hodinách byla získaná směs okyselena IN vodnou HCI na pH 3 a filtrována. Izolovaná hnědá pevná látka krystalizovala v EtOH za získání 330 mg (70% výtěžek) světle hnědých krystalů, t.t. 298,5-300 °C.

'H NMR (DMSO-d₅) : δ 13,15 (1H, s) , 11,14 (1H, s) , 8,31 (2H, bs), 8,02 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,78 (4H, s), 7,77 (2H, d, J = 8,1 Hz), 7,26 (2H, s).

FABMS (M+ Na⁺) : Vypočt.: 441,0303. Nalezeno: 441,0320.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₄N₄O₅S₂ . 0,4 H₂O: C, 47,97; H, 3,50; N, 13,16; S, 15,07. Nalezeno: C, 48,04; H, 3,48; N, 12,98; S, 15,18.

* Příklad F:

2-/4-Amino-2-(4-methoxy-fenylamino)-thiazol-5-karbonyl/-benzonitril h₃c

Do roztoku sloučeniny z příkladu 0(12) (2,00 g, 4,43 mmol) v pyridinu (5 ml) byl přidán kyanid měďný (709 mg, 8,86 mmol), a směs byla zahřívána pod refluxem. Po 2 hodinách byla získaná směs ponechána ochladit, byla okyselena IN vodnou HCI, a r r r r

161' · · extrahována 20% MeOH/GHCl₃. Extrakty CHC1₃ byly spojeny, promyty H₂0 a solankou, sušeny nad Na₂SO₄ a odpařeny za získání temně hnědého viskozního oleje, který byl purifikován preparativní ťenkovrstvou chromatografií s 5% MeOH/CH₂Cl₂ a vysrážen z EtOH za získání 255 mg (61% výtěžek) žluté amorfní pevné látky, která se rozkládala při 110-116 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): 5 10,70 (ÍH, s), 8,24 (2H, bs), 7,91 (ÍH, d, J = 7,8 Hz), 7,80-7,66 (2H, m) , 7,61 (1H, td, J = 7,8, 1,2 Hz), 7,42 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,92 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,72 (3H, s) .

FABMS (MH⁺) : 351.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₁₄N₄O₂S . 0,25 H₂O . 0,2 EtOH: C, 60,69; H, 4,35; N, 15,39; S, 8,81. Nalezeno: C, 60,84; H, 4,24; N, 15,07;

S, 9,02.

* Příklad G:

/4-Amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)-thiazol-5-yl/-(3-amino-2,β-dichlorfenyl)methanón

Sloučenina uvedená v názvu z příkladu C(82),

N-/3-/4-amino-2-(lH-benzoimidazol-6-ylamino)-thiazol-5-karbony1/2,4-dichlorfenyl/acetamid (100 mg, 0,220 mmol), byla vložena do 6N vodné HCI (4 ml) a míchána při teplotě okolí po 24 hodiny.

Směs byla upravena na pH 7 pomocí 2N vod. NaOH a získaná bledě žlutá sraženina byla odfiltrována, promyta vodou, rekrystalizovala z MeOH/H₂O a byla usušena pod vysokým vakuem. Žlutá pevná látka byla získána v 36% výtěžku, t.t. 235-237 °C.

^;H NMR (DMSO-dg): δ 8,16 (ÍH, bs), 7,86 (2H, bs), 7,38-7,62 (ÍH, m), 7,18 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,02 (ÍH, d, 7 =8,8 Hz), 6,68 (ÍH, r e r c r r r e r r

162 ' · · d, J = 8,7 Hz), 5,50 (1H, bs).

IR (KBr) : 3177, 1614, 1543, 1443, 1308 cm'¹.

FABMS (MH⁺) : 419.

Anal. vypočteno pro C₁₇H₁₂C1₂N₆OS . 0,8 H₂0. 1 MeOH: C, 46,42; H, 3,81; N, 18,04; S, 6,88. Nalezeno: C, 46,37; H, 3,45; Cl, 15,29; N, 17,84; S, 6,77.

* Příklad H(l):

/.4-Amino-2-(4-piperazin-l-yl-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(3-methyl thiofen-2-yl)-methanon trihydrochlorid

H

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena, následujícím způsobem. Do roztoku sloučeniny uvedené v názvu z příkladu C(104) (100 mg, 0,20 mmol) ve směsi THF (1 ml) a MeOH (0,5 ml) byl přidán roztok 4N HCl v dioxanu (200 μΐ, 0,80 mmol). Získaná suspenze byla ohřívána pod refluxem po 2 hodiny. Suspenze byla ponechána ochladit a pak byla zfiltrována. Izolovaná pevná látka byla promyta bezvodým etherem a sušena za získání žluté pevné látky v 97% výtěžku, t.t. 198-200 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 10,80 (1H, m), 9,22 (1H, bs), 7,60 (1H, d, J 5,0 Hz), 7,42 (1H, d, J = 8,7 Hz), 6,98-7,08 (3H, m), 3,38 (4H, d, J = 4,4 Hz), 3,22 (4H, s), 2,18 (3H, s) .

IR (KBr): 3177, 1614, 1543, 1443, 1308 cm-¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₁₉H₂₂N₅OS₂ (MH⁺) : 400,1266. Nalezeno: 400,1254.

Anal. vypočteno pro Ο₁₉Η₂₁Ν₅Ο3₂. 0,6 H₂0 . 3 HCl: C, 43,91; H, 4,89 N, 13,47; S, 12,34. Nalezeno: C, 43,61; H, '4,97; N, 13,12; S, r r

12,16.

* Příklad H (2):

(J-Amino-2,6-dichlor-fenyl)-/4-amino-2- (4-piperazin-l-yl-fenylamino)-thiazol-5-yl/-methanon trihydrochlorid.

h h₂n

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem, jako je popsán v příkladu H(l). Sloučenina uvedená v názvu příkladu C(106) poskytla žlutou pevnou látku ve 48% výtěžku, t.t. větší než 280 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆) : 5 8,88 (1H, bs), 8,00 (1H, bs), 7,40 (2H, bs), 7,18 (1H, d, J = 8,7 .Hz), 6,98 (2H, d, J = 8,4 Hz),. 6,80 (1H, d, J=8,7Hz), 3,38 (4H, s), 3,12 (4H, s).

IR (KBr): 3406, 1618, 1560, 1458, 1308 cm¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₀H₂₁C1₂N₆OS (MH⁺) : 463,0875. Nalezeno: 463,0862.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₂₀C1₂N₆OS. 3 HCI . 0,5 dioxan: C, 42,84; H, 4,41; Cl, 28,74; N, 13,62; S, 5,20. Nalezeno: C, 42,96; H, 4,47; Cl, 28,58; N, 13,53; S, 5,15.

* Příklad H(3) :

/4-amino-2-(4-piperazin-l-yl-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(2, 6-dichlorfenyl)-methanon

ΗΝ^'Ά

r

r r

164 '

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem, jako je popsán v příkladu H(l). Sloučenina uvedená v názvu příkladu

C(105) poskytla žlutou pevnou látku ve 44% výtěžku, t.t. 298-300 °Č.

Ή NMR (DMSO-d₆): δ 7,60-7,50 (5H, m), 7,08 (2H, d, J = 7,8 Hz), 3,44 (4H, bs).

IR (KBr) : 3395, 2959, 1618, 1513, 1425 cm'¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₀H₂₀C1₂N₅OS (MH⁺) : 448,0766. Nalezeno: 448,0749.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₉C1₂N₅OS. 1,2 H₂O . 0,9 HCI: C, 47,78; H, 4,47; Cl, 20,45; N, 13,93; S, 6,38. Nalezeno: C, 47,99; H, 4,38; Cl, 20,57; N, 13,56; S, 6,24.

* Příklad J(l) :

/4-Amino-2-(4-piperazin-l-yl-fenylamino)-thiazol-5-yl/-(2,4,6-trichlorfenyl)-methanon

/4-Amino-2-/4-/4-terc.butoxykarbonyl-piperazin-l-yl)-fenylamino/thiazol-5-yl/-(2,2,6-trichlorfenyl).-methanon, který má strukturní

byl připraven jako je popsáno v příkladu C(l) . 1-terc.Butoxykarbonyl-4-(4-isothikyanato-fenyl)-piperazin (z příkladu C(101) a 2-brom-2',4',6'-trichloracetofenon (z příkladu C (107)) poskytly černý dehet, který se vysrážel z EtOH za získání 144 mg (50%) žlutého amorfního prášku, t.t. 192-193 °C (d) .

Γ

0 c

r 0 r r 0 f 0 0 0 < 0 ř 0 r 0 r- ^f'

165 ^XH NMR (DMSO-dg) : δ 7,78 (2H, s), 7,33 (2H, bm), 6,98 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,15-3,05 (4H, m), 1,45 (9H, s).

IR (KBr): 3389, 3276, 3166, 1676, 1608, 1577, 1544, 1461, 1421, 1366, 1235, 1202, 1164 cm'¹. ·

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₅H₂₆C1₃N₅O₃SCs (M+Cs⁺) : 715,9847. Nalezeno: 715,9822.

Anal. vypočteno pro C₂₅H₂₆C1₃N₅O₃S. 0,75 H₂0 . 0,4 EtOH: C, 50,40; H, 4,90; Cl, 17,30; N, 11,39; S, 5,22. Nalezeno: C, 50,69; H, 5,16; Cl, 17,70; N, 10,98; S, 4,90.

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena následujícím způsobem. /4-Amino-2-/4-/4-terc.butoxykarbonyl-piperazin-l-yl) -fenylamino/-thiazol-5-yl/~ (2,2,6-trichlorfenyl) -methanon, (50 mg, 0,086 mmol) byl míchán v trifluoroctové kyselině (TFA;

0,5 ml) při 0 °C. Po 20 min při 0°C bylo přidáno minimální množství vody, a pro neutralizaci byl použit nasycený NaHCO₃. Získaná suspenze byla filtrována za získání žluté pasty, která poskytla suspenzi s MeOH/CHCl₃ a vedla k izolaci 22 mg (42%) žlutého amorfního prášku.

^XH NMR (DMSO-dJ: δ 7,80 (2H, s), 7,38 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,01 (2H, d, J = 9,0 Hz) .

IR (KBr): 3396, 3284, 3178, 1676, 1614, 1543, 1461, 1423, 1202, 1137 cm'¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₀H₁₅C1₃N₅OS (MH^T) : 484,0346. Nalezeno: . 484,0333.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₈C1₃N₅OS. 0,8 MeOH . 0,8 CHC1₃: C, 42, 96; H, 3,67; N, 11,60. Nalezeno: C, 42,87; H, 3,45; N, 11,27.

* Příklad J(2) /4-Amino-2- (4-piperazin-l-yl-fenylamino) -thiazol-5-yl/- (2, 6-difluorfenyl)-methanon

P P r P p

166

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu J(l). Do sloučeniny uvedené v názvu příkladu C(101) (250 mg, 0,48 mmol)v CH₂C1₂ při 0 °C byl přidán TFA (5 ml). Po 20 min při 0 °C byl vzniklý čirý roztok koncentrován ve vakuu na zbytek, který byl suspendován v minimálním množství vody, ochlazen na 0 °C a upraven zásadou, nasyc. Na₂CO₃ na pH 9. Pevné látky byly spojeny a rekrystalizovaly z EtOH za získání 116 mg (58% výtěžek) žluté pevné látky, t.t. 190-193 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 8,13 (2H, bs), 7,52 (IH, p, J = 7,3 Hz), 7,36 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,19 (2H, t, J = 8,7 Hz), 6,99 (2H, t, d =

8,7 Hz), 3,24 (4H, bs), 3,13 (4H, bs).

HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 416,1357. Nalezeno: 416,1370.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₉N₅OSF₂ .0,7 H₂O. 0,7 CF₃COOH:C, 49,96; H, 4,11; N, 13,49; S, 6,17.

Nalezeno: C, 50,16; H, 4,33; N, 13,14; S, 6,06.

* Příklad J(3) /4-Amino-2-(4-piperazin-l-yl-fénylamino)-thiazol-5-yl/-(2,4,6-trifluorfenyl)-methanon

NH;

/4-Amino-2-/4-(4-terč.butoxykarbonyl-piperazin-l-yl)-fenylamino/thiazol-5-yl/-(2,4,6-trifluorfenyl)methanon, který má strukturní vzorec byl připraven v podstatě jak je popsáno v příkladu C(l) .' r r r» r

167

1-Terč. butoxy-karbonyl-4- (4-isothiokyanato-fenyl) piperazin (z příkladu 101) a 2'-brom-2,4,6-trifluoracetofenon (z příkladu C (115)) poskytly žlutou pevnou látku, která krystalizovala z EtOH za získání 200 mg (80%). žlutého amorfního prášku, který tmavnul při 125-130 °C, t.t. 132-135 °C (rozklad).

^XH NMR (CD₃CN): δ 8,69 (IH, bs), 7,46 (2H, d, J = 9,0 Hz),

7,20-7,10 (4H, m), 3,74 - 3,62 (4H, m), 3,28- 3,20 (4H, m) , l,60-(s, 9H).

IR (KBr):3389, 3282, 3479, 3178, 1686, 1637, 1604, 1546, 1428, 1366, 1343, 1233, 1168, 1121, 1035, 999 cm ^_1.

HRFABMS : Vypočt. pro C₂₅H₂₇F₃N₃O₃S (MH ): 534,1787. Nalezeno: 534,1772.

Anal. vypočteno pro C₂₅H₂₃N₅OSF₃ .1 H₂0. 0,5 EtOH: C, 54,35; H, 5,44; N, 12,19; S, 5,58.

Nalezeno: C, 54,26; H, 5,07; N, 11,92; S, 5,50..

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena v podstatě jak je popsáno v příkladu j(l) za získání hnědé pevné látky, která byla purifikována chromatografií na koloně 10% MeOH/CHCl₃ jako eluens, která poskytla 57 mg (60%) žluto-oranžové amorfní pevné látky, která se rozkládala nad 205 °C.

Ή NMR (CD₃CN) : δ 7,78 (2H, s), 7,42 (2H, d, J= 9,0 Hz), 7,01 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,30-3,18 (4H, m), 3,14-3,02 (4H, m) .

IR (KBr) : 33406, 1603, 1544, 1430, 1237, 1120, 1034 cm'¹.

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₀H₁₈F₃N₅OS (MH⁺): Vypočt.: 431,1262. Nalezeno: 434,1274.

Anal. vypočteno pro C₂₀H₁₃N₅OSF₃ .0,7 MeOH . 0,7 CHC1₃: C, 47,65; H, 4,02; N, 12,98; S, 5,94.

Nalezeno: C, 47,84; H, 3,64; N, 12,59; S, 5,69.

Příklad J(4) :

168

4-/4-Amino-5-(2,6-difluor-benzoyl)-thiazol-2-ylamino/-N-piperidin-4-ylmethyl-benzensulfonamid

H!

X

H

N-terc.Butoxykarbonyl-4-karbamoyl-piperidin, který má strukturní vzorec byl připraven následujícím postupem. Do isonipecotamidu (5,00 g, 39,0 mmol) v dioxanu (100 ml) byl přidán di-terc.butyldikarbonat (8,51 g, 39,0 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (6,0 ml, 42,9 mmol). Směs byla ponechána míchat přes noc, potom byla odpařena za sníženého tlaku dosucha. Zbytek byl rozdělen mezi CHC1₃ a IN HCI. Organická vrstva byla promyta vodou a solankou, sušena nad Na₂SO₄ a koncentrována za získání 8,3 g (93% výtěžek) bilé pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^:H NMR (CDC1₃) : δ 5,53 (2H, bs),' 4,03 (2H, d, J = 13,7 Hz), 2,33 (2H, tt, J = 11,8, 3,7 Hz), 2,08 (2H, bs), 1,89 (2H, dd, J =

13,7, 3,7 Hz), 1,69 (1H, dd, J = 11,8, 4,4 Hz), 1,65-1,57 (1H, m), 1,44 (9H, s).

4-Aminomethyl-N-terc.butoxkarbonyl-piperidin, který má strukturní vzorec \ byl připraven následujícím postupem. Do N-terc.butoxykarbony1-4-karbamoyl-piperidinu (15,6 mmol) v THF (40 ml) při -78 °C pod Ar byl přidán LiAlH₄ (592 mg, 15,6 mmol). Směs byla ponechána pomalu ohřát na teplotu okolí a po půl hodině byla opět ochlazena na -78 °C, zchlazena ethylacetátem a rozdělena mezi EtOAc a 2N NaOH. Organická vrstva byla oddělena, sušena nad K₂CO₃ a koncentrována za získání 1,98 g (59% výtěžek) žluté kaše, která byla použita bez další purifikace.

<· Γ

169

N-terc.Butoxykarbonyl-4-/ (4-nitro-benzensulfonylamino) -methyl/-piperidin, který má strukturní vzorec byl přípraven následujícím postupem.

4-Nitrobenzensulfonylchlorid (2,05 g, 9,24 mmol) byl přidán do roztoku 4-aminomethyl-N-terc. butoxykarbonyl-piperidinu (1,98 g, 9,24 mmol) v THF (20 ml) při teplotě okolí. Směs byla refluxována po 1 hodinu, koncentrována ve vakuu a rozdělena mezi CH₂C1₂ a IN HCI. Organická vrstva byla promyta solankou, sušena nad Na₂SO₄ , protlačena skrz podložku ze silikagelu a koncentrována za získání 1,71 g (46%) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

4-/ (4-Amino-benzensulfonylamino) -methyl/-N-terc.butoxykarbonyl-pipěridin, který má strukturní vzorec byl připraven následujícím postupem.

N-terc.Butoxykarbonyl-4-/ (4-nitro-benzensulfonylamino) -methyl/-piperidin (1,70 g, 4,26 mmol), 10% Pd/C (250 mg), MeOH (10 ml) a THF (10 ml) byl míchán pod vodíkem po 2 hodiny a zfiltrován. Filtrát byl koncentrován na zbytek, který byl purifikován chromatografii na koloně s 5% MeOH/CHCl₃ jako eluens, a bylo získáno 1,39 g (88% výtěžek) bílé pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

N-terc.Butoxykarbonyl-4-/ (4-isothiokyanato-benzensulfonylamino)-methyl/-piperidin, který má strukturní vzorec •NCS p r p r

170 · byl připraven způsobem analogickým k 1-(4-isothiokyanato-fenyl)morfolinu pro příklad C{54). 4-/(-Amino-benzensulfonylamino)-methyl/N-terc.butoxykarbony1-piperidin poskytl žlutou pevnou látku v 39% výtěžku, která byla použita bez další purifikace.

4-//4- (5-Acetyl-4-amino-thiazol-2-ylamino) -benzensulfonylamino/-methyl/-N-terc.butoxykarbonyl-piperidin, který má strukturní vzorec

byl připraven způsobem analogickým k příkladu C(l) .

N-terc.Butoxykarbonyl-4-/ (4-isothiokyanato-benzensulfonylamino) -methyl/-piperidin a 2-brom-2', 6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly žlutou pevnou látku v 50% výtěžku.

^XH NMR (DMSO-dg): δ 11,22 (1H, s), 8,20 (2H, bs), 7,84-7,73 (3H, m), 7,62-7,54 (2h, m), 7,24. (2H, dd, J = 7,8, 7,7. Hz), 3,89 (2H, d, J = 12,8 Hz), 3,35 (2H, s), 2,52 (2H, d, J = 1,2 Hz), 1,60 (2H, d, J = 10,1 Hz), 1,56-1,42 (1H, m), 1,39 (9H, s), 0,91 (2H, d, J = 12,8 Hz) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k příkladu použitému v příkladu J (1) .

4-//4- (5-Acetyl-4-amino-thiazol-2-ylamino) -benzensulfonylamino/-methyl/-N-terc.butoxykarbonyl-piperidin poskytl hnědou pevnou látku ve 28% výtěžku.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 8,11, (2H, bs), 7,70 (4H, bs), 7,58-7,42 (1H, m), 7,20 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,15 (1H, d, J = 7,8 Hz), 3,80 (2H, bs), 3,05 (2H, d, J = 10,0 Hz), 2,60 (2H, d, J = 6,8 Hz), 1,65 (2H, d, J = 12,2 Hz), 1,52 (1H, bs), 1,07 (2H, d, J = 10,0 Hz). HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 507,1210. Nalezeno: 507,1206.

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₃N₅O₃S₂F₂ .0,1 CH₃OH . 0,2 CF₃COOH: C, 50,65; H, 4,73; N, 13,12; S, 12,02. Nalezeno: C, ,50,92; H, 4,46; N, r r

171'· · ·

12,87; S, 12,18.

* Příklad J(5) /4-Amino-2-/4- (cis-3,5-dimethyl-piperazin-l-yl) -fenylamino/·-thiazol-5-yl/-(2,6-difluor-fenyl)-methanon

2,6-cis-dimethyl-4-(4-nitro-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec

NO, byl připraven v podstatě jako je popsáno u 3R-methyl-l-(4-nitro-fenyl)-piperazinu z příkladu 0(124). cis-2,6-Dimethylpiperazin poskytl 2,19 g (100% výtěžek) žlutého prášku, t.t. 130-131,5 °C, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 8,03 (2H, d, J = 9,5 Hz), 7,02 (2H, d, J = 9,5 Hz), 3,88 (2H, dd, J = 12,4, 2,0 Hz), 2,82-2,68 (2H, m),

2,44-2,33 (3H, m), 1,03 (6H, d, J = 6,3 Hz).

IR (KBr): 1596, 1509, 1482, 1316, 1252, 1193, 1119, 1101 cm Λ

Anal.nalezeno pro C₁₂H₁₇N₃O₂ : C, 61,26; H, 7,28; N, 17,86.

Nalezeno: C, 61,25; H, 7,42; N, 17,84.

l-terc.Butoxykarbonyl-2,6-dimethyl-4-(4-nitro-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec no₂ byl připraven následujícím postupem. Do 2,6-cis-dimethyl-4-(4-nitrofenyl)-piperazinu (1,00 g, 4,25 mmol) v dioxanu (20 ml) r r e e

172 ' · · byl přidán di-terc.butyldikarbonat (1,12 g, 5,12 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (1,37 ml, 9,76 mmol). Po 3 hodinách při 80 °C byla směs ponechána ochladit a odpařit dosucha. Pevná látka byla suspendována ve vodě, odfiltrována, promyta vodou a sušena pod vakuem za získání 1,40 g (98% výtěžek) žlutého prášku, který byl použit bez další purifikace.

Ή NMR (CDC1₃): δ 8,12 (2H, ddd, J = 7,3, 2,1, 2,1 Hz), 6,80 (2H, ddd, J= 7,3, 2,1, 2,1 Hz), 4,30 (2H, ddd, J= 13,2, 6,8, 4,5 Hz), 3,71 (d, 2H, J = 13,2 Hz), 3,22 (dd, 2H, J = 12,8, 4,5 Hz), 1,49 (9H, s), 1,29 (6H, d, J = 6,8 Hz).

IR (KBr) : 1689, 1594, 1489, 1400, 1322, 1257, 1057 cm’¹.

1- (4-Amino-fenyl)-4-terc.butoxykarbonyl-3,5-dimethyl-piperazin, který má strukturní vzorec ~ \ byl

-^N~C ’ Z~^NH2

připraven následujícím postupem. Hydrogenace surového l-terc.butoxykarbonyl-2,6-dimethyl-4- (4-nitro-fenyl) -piperazinu (1,48 g, 4,41 mmol) v THF (20 ml) a MeOH (20 ml) s 10% Pd/C jako katalyzátorem poskytla 1,12 g (83% výtěžek) čirého lepivého oleje, který byl použit bez další purifikace.

*H NMR (CDC1₃): δ 8,13 (2H, d, J = 9,4 Hz), 6,81 (2H, d, J = 9,4 Hz), 4,30 (2H, ddd, J = 13,2, 6,8, 4,5 Hz), 3,71 (2H, d, J = 13,2 Hz), 3,21 (2H, dd, J= 13,2, 4,5 Hz), .1,49 (9H, s), 1,29 (6H, d,

J = 6,8 Hz).

1-(terč.Butoxykarbonyl)-2,6-cis-dimethyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec

byl připraven způsobem analogickým k postupu 4-(4-isothiokyanatofenyl) -morfolinu v příkladu C(54).

f Γ r r r r r r r r r r r f r r

173 ·

1- (4-Amino-fenyl)-4-terc-butoxykarbonyl-3,5-dimethyl-piperazin poskytl čirou lepivou pěnu, která rekrystalizovala z chladného etheru/hexanu za získání bledě hnědých krystalů v 68% výtěžku, t.t. 97-98 °C.

^XH NMR (CDClj): δ 6,74 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,67 (2H, d, J = 8,7 Hz), 4,20-4,08 (2H, m), 3,08 (2H, d, J= 11,6 Hz), 2,71 (2H, dd, J = 11,6, 3,9 Hz), 1,41 (9H, s), 1,28 (6H, d, J = 6,8 Hz).

IR (KBr): 2175, 2135, 1691, 1507, 1395, 1341, 1246, 1177, 1098 cm'¹.

Anal. vypočteno pro C₁₈H₂₅N₃O₂S: C, 62,21; H, 7,25; N, 12,09; S, 9,23. Nalezeno: C, 62,31; H, 7,32; N, 11,96; S, 9,39.

4-Amino-2-/4- (l-terc.butoxykarbonyl-2, 6-dimethyl-piperazin-4-yl)fenylamino/-thiazol-5-yl-(2,6-difluorfenyl)-methanón, který má strukturní vzorec

byl připraven postupem analogickým k postupu z příkladu C(l). 1-(terč.Butoxykarbonyl) -2, 6-cis-dimethyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin a 2-brom-2^z, 6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly žlutou pevnou látku v 51% výtěžku, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 10,66 .(1H, s), 8,12 (2H, bs)', 7,56-7,44 (ÍH, m), 7,38 (2H, d, J=9,0Hz), 7,18 (1H, d, J=7,7Hz), 7,15 (ÍH, d, J = 8,1 Hz), 6,95 (2H, d, J = 9,0 Hz), 4,14-4,03 (2H, m), 3,49 - 3,14 (2H, m), 2,75 (2H, dd, J = 12,2, 4,4 Hz), 1,42 (9H, s), 1,24 (6H, d, J = 6,7 Hz).

FABMS (M+Na⁺) : 566

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena způsobem analogickým k postupu použitému v příkladu,J (1).

P P « P e r e p r r e r r rr p P r

174

4-Amino-2-/4-(1-terc.butoxykarbonyl-2, 6-dimethyl-piperazin-4-yl) -fenylamino/-thiazol-5-yl-(2,β-difluorfenyl) -methanon poskytl hnědý prášek ve 52% výtěžku, t.t. 293-294,5 °C.

^ΧΗ NMR (DMSO-d₆): δ 8,11 (2H, bs), 7,56-7,44 (1H, m), 7,26 (2H, d,. J = 9,0 Hz), 7,18 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,14 (1H, d, J = 8,1 Hz), 6,89 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,48 (2H, dd, J = 10,9, 2,2 Hz), 2,88-2,76 (2H, m), 2,07 (4H, t, J = 10,9 Hz), 1,00 (6H, d, J =

6,3 Hz) .

HRFABMS(MH⁺) : Vypočt.: 444,1670. Nalezeno: 444,1658.

Anal. vypočt. pro C₂₂H₂₃N₅OSF₂ .0,4 H₂0: C, 58,63; H, 5,32; N, 15,54; S, 7,11. Nalezeno: C, 58,64; H, 5,40; N, 15,23; S, 6,96.

* Příklad J(6) / 4-Amino-2-/4- (3,3-dimethyl-piperazin-l-yl) -fenylamino/-thiazol-5-yl/-(2,6-difluor-fenyl)-methanon

2,2-Dimethyl-4-(4-nitrofenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec ^η<Ρ^ν“Ο-^ν°₂ byl připraven jako první následujícím postupem. Surový 2,2-dimethylpiperazin (10,0 mmol; Chu a kol., Can. J. Chem., sv. 70 (1992), str.1328-1337), 4-fluor-nitrobenzen (5,0 mmol, 706 mg) a K₂CO₃ (8,3 g, 60,0 mmol) v DMSO (10 ml) byl zahříván při 100 °C po 4 hodiny, ochlazen, zředěn vodou (100 ml) a extrahován etherem:ethylacetátem (200:50 ml). Organická vrstva byla promyta vodou (3x) a solankou, a koncentrována za získání 1,17 g (100% výtěžek) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

c r r r

175

Ή NMR (CDC1₃) : δ 8,13 (2H, d, J = 9,5 Hz), 6,80 (2H, d, J = 9,5 Hz), 3,38 (2H, dd, J = 5,5, 5,0 Hz), 3,20 (2H, s), 3,07 (2H, dd, J = 5,5, 5,0 Hz), 1,21 (6H, s).

l-terc.Butoxykarbonyl-2,2-dimethyl-4-(4-nitrofenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec byl připraven způsobem ⁰ analogickým k 1-(4-amino-fenyl)-4-terc.butoxykarbonyl)-2,6-dimethyl-piperazinu v příkladu J(5). 2,2-Dimethyl-4-(4-nitrofenyl) -piperazin poskytl ostře žlutou pevnou látku v 99% výtěžku, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): 6 8,15 (2H, d, J = 9,4 Hz), 6,64 (2H, d, J = 9,4 Hz), 3,90 (2H, dd, J = 6,0, 5,5 Hz), 3,54 (2H, dd, J = 6,0, 5,5 Hz), 3,53 (2H, s), 1,51 (9H, s), 1,44 (6H, s).

1-(4-Amino-fenyl)-4-(terč.butoxykarbonyl)-3,3-dimethyl-piperazin, který má strukturní vzorec byl připraven následujícím postupem. 1-terc.Butoxykarbonyl-2,2-dimethyl-4-(4-nitro-fenyl)-piperazin (700 mg, 2,09 mmol) a 10% Pd/C (100 mg) v THF (15 ml) a MeOH (15 ml) byl míchán pod vodíkem po 2 hodiny a zfiltrován. Filtrát byl koncentrován ve vakuu za získání světle hnědé kaše, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDCI3) : δ 6,69 -5, 65 (4H, m) , 3,67 (2H, dd, J = 5,8, 5,4 Hz), 3,21-3,14 (2H, m), 3,01 (2H, s), 1,49 (9H, s), 1,43 (6H, s).

1-(terč.Butoxykarbonyl)-2,2-dimethyl-4-(4-isothiokyanato-fenyl)-piperazin, který má strukturní vzorec r r

Γ ř

176 byl připraven analogicky k 4-isothiokyanato-benzamidu z C(102). 1- (4-Amino-f enyl) -4-terc. butoxykarbonyl) -3,3-dimethyl-piperazin poskytl bílou pevnou látku v 80% výtěžku, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,15 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,63 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,85 (2H, dd, J = 5,9, 5,5 Hz), 3,42 (2H, dd, J = 5,9, 5,5 Hz), 3,37 (2H, s), 1,57 (9H, s), 1,44 (6H, s) .

4-Amino-2-/4- (l-terc.butoxykarbonyl-2,2-dimethyl-piperazin-4-yl)-fenylamino/-thiazol-5-yl-(2, 6-dif luorfenyl)-methanon, který má strukturní vzorec byl připraven postupem analogickým k příkladu C(l) .

1- (terč. Butoxy karbonyl) -2,2-dimethyl-4- (4-isothiokyanato-fenyl) -piperazin a 2-brom-2', 6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79)) poskytly žlutý prášek v 60% výtěžku, který·.byl .použit bez další purifikace. ' _ ^XH NMR (DMSO-d₆) : δ 10,58 (1H, s), 8,13 (2H, bs) , 7,61-7,48 (1H, m), 7,40 - 7,15 (5H, m), 6,79 (2H, d, J = 9,1 Hz), 3,74 (2H, dd,

J = 5,8, 5,3 Hz), 3,41 -3,30 (4H, m), 1,48 (9H, s), 1,39 (6H, s).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena postupem analogickým k postupu použitému v příkladu J(l).

4-Amino-2-/4- (l-terc.butoxykarbonyl-2,2-dimethyl-piperazin-4-yl) -fenylamino/-thiazol-5-yl- (2,6-dif luorfenyl) -methanon poskytl žlutou pevnou látku v 51% výtěžku, t.t. 205-210 °C.

^XH NMR (DMSO-d₅) : δ 8,15 (2H, bs), 7,63-7,54 (1H, m) , 7,35 (2H, d, J = 9,0 Hz), 7,25 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,22 (1H, d, J = 8,1 Hz), 6,98 (2H, d, J = 9,0 Hz), 3,10-3,04 (2H, m), 3,02-2, 95 (2H, m,), 2,92 (2H, s), 1,21 (6H, s).

IR (KBr): 3276, 2961, 1620, 1590, 1546, 1516, 1464, 1429, 1364, 1257, 1232, 1002 cm’¹.

r r r r·

<“ r r r r c r r r- r ^r r r r _{r r r} ^{r r} · - r r r ' r f - r

177 ·

HRFABMS (MH⁺) : Vypočt.: 444,1670. Nalezeno: 444,1657.

Anal. stanoveno pro C₂₂H₂₃N_sOSF₂ . 0,7 CH₃OH: C, 58,51; H, 5,58; N, 15,03; S, 6,88;. Nalezeno: C, 58,61; H, 5,68; N, 14,87; S, 6,76.

* Příklad K:

/4-Amino-2-/4-(4-pyridin-2-yl-piperazin-l-yl)-fenylamino/-thiazol -5-yl/-2,6-difluor-fenyl)-methanon

N \

1-(4-Nitro-fenyl)-4-pyridin-2-yl-piperazin, který má strukturní vzorec

0~Oⁿ~0~no₂ byl připraven první způsobem analogickým k terč.butyl/methyl-(4-nitro-fenyl) amino/acetatu v příkladu C(103). l-Pyridin-2-yl-piperazin a 4-fíuornitrobenzen poskytlý žlutou pevnou látku v 85% výtěžku.

^XH NMR (CDC1₃): δ 8,13-8,28 (3H, m),7,50-7,58 (2H, m), 7,52 (IH, ddd, J = 15,7, 7,3, 2,0 Hz), 6,88 (2H, d, J = 9,4 Hz), 6,70 (2H, dd, J = 7,4, 5,1 Hz), 3,78 (4H, dd, J = 7,4, 5,0 Hz), 3,62 (4H, dd, J = 5,7, 3,3 Hz).

4-(l-Pyridin-2-ýr-piperazin-4-yl) anilin, který má strukturní vzorec.

byl připraven způsobem analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilinu z příkladu C(70). 1-(4-Nitro-fenyl)-4-pyridin-2-yl-piperazin poskytl šedou pevnou látku v 94% výtěžku, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 8,22 (IH, bd, J = 3,5 Hz), 7,52 (IH, ddd, J =

178

17,6, 7,2, 1,9 Hz), 6,88 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6, 62-6,78 (4H, m), 3,72 (4H, dd, J = 5,2, 5,0 Hz), 3,48 (2H, bs), 3,18 (4H, t, J = 5,2, 5,0 Hz).

1- (4-Isothiokyanato-fenyl).ř4-pyridin-2-yl-piperazin, který má strukturní vzorec byl připraven způsobem analogickým k 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-4-pyridin-4-yl-piperazinu z příkladu C(127). 4-(4-Pyridin-2-yl-piperazin-l-yl)-anilin poskytl 2,2 g (95% výtěžek) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

¹H NMR (CDC1₃): δ 8,26 (1H, bd, J = 6,3 Hz), 7,91 (1H, ddd, J = 18,1, 7,1, 1,8 Hz), 7,18 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,82-7,00 (4H, m), 4,10 (4H, dd, J = 5,3, 5,1 Hz), 3,48 (4H, dd, J - 5,3, 5,2 Hz).

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena následujícím postupem. Do roztoku 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-4-pyridin-2-yl-piperazinu (25, mg, 0,84 mmol) v suchém methanolu (4 ml) byl přidán kyanamid (35 mg, 0,84 mmol) a čerstvý roztok NaOH (67 mg, 1,67 mmol) v suchém MeOH (4 ml) . Po 1 hodině byl přidán 2-brom-2',6'-difluor-acetofenon (z příkladu C(79); 178 mg, 0,76 mmol). Další den byla získaná žlutá suspenze filtrována. Pevná látka byla promyta H₂O a sušena pd vysokým vakuem za získání žluté pevné látky v 86% výtěžku, t.t. 138-140 °C.

^XH NMR (DMSO-d₆): δ 8,12 (2H, dd, J = 6,5, 1,7 Hz), 7,42-7,60 (2H, m), 7,32 (2H, bd, J=8,5Hz), 7,08 (2H, t, J .= 9,0Hz), 6,98 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,88 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,64 (1H, dd, J = 7,0, 5,0 Hz), 3,62 (4H, t, J = 4,7 Hz), 3,20 (4H, t, J = 4,7 Hz).

IR (KBr): 3369, 3180, 2835, 1620, 1597, 1546, 1466, 1433, 1232 cm'¹.

HRFABMS: Vypočt. pro C₂₅H₂₃F₂N₅OS (MH⁺) : 493,1622. Nalezeno:

493,1608.

r r

Γ c

179 Anal. vypočteno pro C₂₅H₂₂F₂N₆OS . 0,9 H₂0: C, 58,90; H, 4,90; N, 16,49; S, 6,29. Nalezeno: C, 58,91; H, 4,64; N, 16,55; S, 6,24.

Příklad L:

/4-Amino-2-/4- (4-kařboxamido-piperidin-l-yl) -fenylamino/-thiazol-5-yl/-2,6-difluorfenyl)-methanon

4-Karboxamido-l- (4-nitro-fenyl)-piperidin, který má strukturní vzorec no₂ byl připraven způsobem analogickým k terc.butyl/methyl-(4-nitrofenyl)-amino/-acetatu z příkladu C(103) . 4-Fluoronitrob'enezn a isonipekotarnid poskytly žlutý prášek v 98% výtěžku suroviny, která byla použita bez další putifikace. ^XH NMR (CD₃OD) : 5 8,22 (2H, d, J = 9,5 Hz), 7,12 (2H, d, J = 9,5 Hz), 4,20 (2H, d, J = 12,5 Hz), 3,16 (2H, ddd, J = 25,6, 13,3,

2,7 Hz), 2,62-2,70 (IH, m) , 2,02 (2H, bd, J= 10,3 Hz), 1,85-1,95 (2H, m) .

1- (4-Amino-fenyl)-4-karboxamido-piperidin, který má strukturní vzorec byl připraven způsobem analogickým k 4-(4-methyl-piperazin-l-yl)-anilinu z příkladu C(70). 4-Karboxamido-l-(4-nitro-fenyl)-piperidin poskytl blědě žlutý prášek ve 100% výtěžku suroviny, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CD3OD) : δ 6,60 (2H, bs), 6,42 (3H, bs), 3,22 (2H, bs), 2,38 (2H, bs), 2,02 (IH, bs), 1,72-1,92 (4H, m)

Γ *

180

4-Karboxamido-l- (4-isothiokyanatofenyl) -piperidin, který má strukturní vzorec byl připraven způsobem analogickým k 1-(4-isothiokyanato-fenyl)-4-pyridin-2-yl· -piperazinu v příkladu K(1).

1-(4-Amino-fenyl)-4-karboxamido-piperidin poskytl krémově zbarvený prášek v 93% výtěžku, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃): δ 7,14 (2H, d, J = 9,0 Hz), 6,86 (2H, d, J = 9,0 Hz), 5,50 (1H, bs), 5,30 (1H, bs), 3,74 (2H, d, J = 12,8 Hz), 2,82 (ddd, J = 24,3, 12,5, 2,8 Hz), 2,30-2,40 (1H, m), 1,80-2,08 (4H, m) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena následujícím postupem. Do roztoku 4-karboxamido-l-(4-isothiokyanatofenyl)-piperidinu (198 g, 0,76 mmol) v MeOH (3.ml)· byl přidán kyanamid (32 mg, 0,76 mmol) a roztok methoxidu sodného v MeOH (1,65 ml 0,5N, 0,83 mmol). Po 30 min byl přidán 2-brom-2',6'-difluor-acetofenon (162 mg, 0,69 mmol; z příkladu C(79)). Po 2 hodinách byla přidána voda. Žlutá sraženina byla odfiltrována, promyta vodou, a rekrystalizovala z vroucího MeOH za získání 200 mg (63% výtěžek) amorfního žlutého prášku, t.t. vyšší než 300 °C.

^XH NMR (DMSO-d₅): δ 7,46-7,58 (1H, m), 7,28 (2H, dd, J = 8,8 Hz)

7,16 (3H, dd, J = 8,0 7,7 Hz), 6,82 (2H, d, J = 9,1 Hz), 3,68 (2H, bd, J = 12,6 Hz), 3,64 (2H, ddd, J = 13,7, 12,1, 2,8 Hz), 2,04-2,18 (1H, m), 1,52-1,82 (4H, m) .

HRFABMS: Vypočteno pro C₂₂H₂₁F₂N₅O₂SNa (M + Na⁺) : 480,1282. Nalezeno: 480,1266.

Anal. stanoveno pro C₂₂H₂₁F₂N₅O₂S . 0,2 H₂O: C, 57,31; H, 4,68; N, 15,19; S, 6,95. Nalezeno: C, 57,25; H, 4,63; N, 15,31; S, 7,01.

* Příklad M:

r ©

181

1- (4-/4-Amino-5- (2, 6-difluor-benzoyl) -thiazol-2-ylamino/-fenyl/piperidin-4-karboxylová kyselina

HC

1-(4-Nitrofenyl)-piperidin-4-karboxylová kyselima, která má strukturní vzorec byla připravena

XXS způsobem analogickým k terč.butyl/methyl-(4-nitrofenyl)-amino/acetatu v příkladu C(103). 4-Fluornitrobenzen a hexahydropyridin-3-karboxylová kyselina poskytly žlutý prášek v 89% výtěžku suroviny, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 8,00 (2H, d, J = 10,8 Hz) , 6,71 (2H, d, J = 10,7 Hz), 3,80 (1H, t, J= 3,9 Hz), 3,72 (1H, t, J = 3,8 Hz), 2,98 (2H, ddd, J = 24,3, 11,0, 3,0 Hz), 2,48-2,60 (lH, m), 1,88-2,02 (2H, m), 1,68-1,82 (2H, m).

Benzyl 1-(4-nitrofenyl)-piperidin-4-karboxylat, který má strukturní vzorec byl připraven

následujícím postupem. Do suspenze

1-(4-nitro-fenyl)-piperidin-4-karboxylové kyseliny (500 mg, 2,01 mmol) v acetonitrilu (10 ml) byl přidán K₂CO₃ (612 mg, '4,44 mmol) a benzylbromid (265 μΐ, 2,22 ml). Získaná směs byla zahřívána pod refluxem po 2 hodiny, byla ponechána ochladit a byla zředěna vodou. Vodná vrstva byla extrahována etherem (2 x 50 ml) .

Spojené organické vrstvy byly sušena nad MgSO₄, filtrovány a koncentrovány ve vakuu za získání 470 mg (64% výtěžek suroviny) žluté pevné látky, která byla použita bez další purifikace.

^XH NMR (CDC1₃) : 8,13 (2H, d, J = 9,4 Hz), 7,30-7,42 (5H, m), 6,83

182

2,08 (2H, dd, J = 13,5, 3,5 Hz), 1,84-1,94 (2H, m) .

. Benzyl 1-(4-aminofenylj-piperidin-4-karboxylat, který má strukturní vzorec o

byl připraven následujícím postupem. Do roztoku benzyl 1-(4-nitro-fenyl)-piperidin-4-karboxylatu (400 mg, 1,18 mmol) v dioxanu (5 ml) a ethanolu (1 ml) byl přidán chlorid cínatý (II) dihydrát (1,06 g, 4,70 mmol). Získaný roztok byl zahříván pod refluxem po 4 hodiny, byl ponechán ochladit, a k agregaci pevných látek bylo přidáno malé množství celitu. Směs byla upravena na pH 8 nasyceným vodným NaHCO₃ a filtrována. Filtrát byl zředěn vodou (50 ml) a extrahován 5% MeOH v CHC1₃ (2x50 ml) . Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO₄, filtrovány a koncentrovány ve vakuu za získání 400 mg (100% výtěžek suroviny)- krémově zbarveného prášku, který byl použit bez další purifikace.

^ΣΗ NMR (CDC1₃): δ 7,30 (5H, bs) , 6,58 (2H, d, J = 8,8 Hz), 6,42 (2H, d, J = 8,8 Hz), 4,94 (2H, s), 3,28 (1H, dd, J = 3,6, 3,1 Hz), 3,18 (1H, dd, J = 3,6, 3,0 Hz), 2,46 (2H, ddd, J = 2,2,

11,8, 2,8 Hz), 2,14-2,28 (1H, m), 1,60-1,88 (4H, m) .

Benzyl 1-(4-isothiokyanatofenyl)-piperidin-4-karboxylat, který má strukturní vzorec byl připraven následujícím postupem. Do roztoku benzyl 1-(4-amino-fenyl)-piperidin-4-karboxylatu (400 mg, 1,29 mmol) v THF (5 ml) při -35 °C byl přidán v přebytku Et₃N (435 1, 3,12 mmol) a thiofosgen (108 1, 1,42 mmol). Získaná směs byla ponechána ohřát na teplotu okolí, míchána po 0,5 hodiny, zředěna vodou (50 ml) a extrahována

Γ C e e

183' ·

CHCI3 (2χ 50 ml). Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku za získání 400 mg (92% výtěžek) žlutého prášku, který byl použit bez další purifikace.

Ή nm:	R (CC	>3OD) :	δ 8,10	(2H, d, J = 9,5 Hz),	7,38	(5H, d, J = 4,5
Hz),	6,92	(2H,	d, J =	9,5 Hz), 5,18 (2H, s	), 4,	00 (1H, t, J = 3,4
Hz),	3,96	(1H,	dd, J =	: 3,5, 3,2 Hz), 3,13	(2H,	ddd, J = 24,9,
13,8,	2,9	Hz),	2,71-2,	77 (1H, m), 2,05 (2H	, dd,	J = 14,1, 3,4
Hz),	1,74-	-1,83	(2H, m)

Benzyl l-/4-/4-amino-5-(2,6-difluorbenzoyl)-thiazol-2-ylamino/-fenyl/-piperidin-4-karboxylat,

NH· který má strukturní vzorec byl-připraven způsobem podobným, jako je popsáno u sloučeniny uvedené v názvu příkladu C(l). Benzyl 1-(4-isothiokyanato-fenyl)piperidin-4-karboxylat a 2-brom-2',6'-difluoracetofenon (z příkladu C(79)) poskytly hnědý prášek v 82% výtěžku, který byl použit bez další purifikace.

Ή NMR (DMSO-d₆): δ 7,30 (1H, m), 7,18 (2H, d, J= 8,9 Hz), 6,92 (2H, d, J = 9,0 Hz), 4,96 (2H, s), 3,62 (2H, bd, J = 9,2 Hz),

2,80 (2H, ddd, J= 26,4, 14,1, 2,6 Hz), 2,36-2,58 (1H, m), 2,04 (2H, bd, J = 3,0 Hz), 1,80-1, 92 (2H, m) .

Sloučenina uvedená v názvu byla připravena následujícím postupem. Do směsi benzyl l-/4-/4-amino-5-(2,6-difluor-benzoyl)-thiazol-2-yl-amino/-fenyl/-piperidin-4-karboxylatu (150 mg, 0,27 mmol), v ethanolu (10 ml) byl přidán 20% hydroxid palladnatý na uhlíku (60 mg) . Získaná směs byla míchána pod vodíkovou atmosférou po 48 hodin. Katalyzátor byl filtrován na podložce .z celitu a promyt ethanolem. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a k vyvolání srážení bylo přidáno minimální množství í> »

184 · · ethylacetátu a CHC1₃. Pevná látka byla odfiltrována, promyta ethylacetátem a sušena za získání 40 mg (30%) bledě modrého amorfního prášku, t.t. 275-277 °C, který byl použit bez další purifikace.

^XH NMR (DMSO-d_s) : δ 8,10 (1H, bs), 7,46-7,58 (1H, m), 7,30 (2H, bd, J = 7,5 Hz), 7,16 (2H, dd, J = 8,0, 7,9 Hz), 6,92 (2H, d, J = 9,1 Hz), 3,58 (2H, bd, J= 12,6 Hz), 2,52 (2ti, dd, J = 11,2, 10,4 Hz), 2,32-2,40 (1H, m), 1,88 (2H, bd, J= 16,1 Hz), 1,58-1,70 (2H, m) .

Anal. vypočteno pro C₂₂H₂₀F₂N₄O₃S . 0,9 H₂O . 0,1 CHC1₃ :C, 54,55; H, 4,54; N, 11,51; S, 6,59. Nalezeno: C, 54,55; H, 4,30; N, 11,13;

S, 6,40.

* Příklad N(l) :

/4-Amino-2-(4-nitro-fenylamino) -thiazol-5-yl/- (2-hydroxy-fenyl)-methanon

a * Příklad N(2) :

N-/5-(2-Hydroxy-benzoyl)-2-(4-nitro-fenylamino) -thiazol-4-yl/-benzamid /1

Obě sloučeniny byly získány ze stejného experimentu. Sloučenina uvedená v názvu příkladu C(130) byla míchána ve směsi 2,5% vod. KOH (5 ekv.) v tetrahydrofuranu po dobu ječné hodiny. Směs syrového produktu byla oddělena mžikovou chromatografii na koloně s 5% MeOH/CH₂Cl₂ za získání dvou slo.učenin uvedených v názvu jako žlutých amorfních látek v 30, resp. 50% výtěžku v

Ρ Γ « Γ Γ * · · ρ * « ' ^{Γ Γ} βΓΓΡ · r e ^Γ ' ~ (> , r <- f- e f r r. r ^r ·

Ρ _Γ Γ . ' - r ^Γ . ' ' r '

185 · příkladu N(l) resp. N(2).

Pro příklad N(l): /4-Amino-2-(4-nitro-fenylamino)-thiazol5-yl/-(2-hydroxy-fenyl)-methanon:

^XH NMR (DMSO-d₆) : 5 11,40 (1H, s), 11,00 (1H, s), 8,24 (4H, d, J =

9,3 Hz), 7,89 (2H, d, J = 9,3 Hz), 7,47 (1H, d, J = 6,9 Hz), 7,34 (1H, dd, J = 7,9, 7,7 Hz), 6,92 (2H, d, J = 7,8 Hz).

HRFABMS: Vypočt. pro C₁₆H₁₂N₄O₄S (MH ⁺): 357,0658. Nalezeno: 357,0660

Pro příklad N(2): N-/5-(2-Hydroxy-benzoyl)-2-(4-nitro-fenylamino)-thiazol-4-yl/-benzamid:

^XH NMR (DMSO-d_s) : δ 11,80 (1H, s), 11,60 (1H, s), 10,30 ((4H, d, J

H, s), 8,27 (2H, d, J = 9,2 Hz), 8,00 (2H, d, J = 9,2 Hz), 7,92 (2H, d, J = 7,1 Hz), 7,56 - 7,68 (3H, m), 7,43 (1H, dd, J = 7,6,

I, 6 Hz), 7,34 (1H, ddd, J = 8,5, 7,0, 1,6 Hz), 6,94 (1H, d, J = 8,2 Hz), 6,89 (1H, dd, J = 7,6, 7,5 Hz).

ESIMS: Vypočt . pro C₂₃H₁₆N₄O₅S (MH ⁺): 461. Nalezeno: 461.

Další sloučeniny mohou být připraveny podle vynálezu postupem podobným těm, které byly popsány výše. Další příkladné sloučeniny podle vynálezu jsou identifikovány v Tabulkách I, II a III dále, které uvádějí výsledky biochemických a biologických testů.

BIOCHEMICKÉ A BIOLOGICKÉ ZHODNOCENÍ

Aktivita cyklin-dependentní kinasy byla měřena kvantifikací enzymem katalyzovaným, na čase závislým zabudováním radioaktivního fosfátu z /³²P/ATP nebo / ³³P/ATP do proteinového substrátu. Pokud není uvedeno jinak, prováděla se zkouška v

96-prohlubňových deskách v celkovém objemu 50 μί za přítomnosti mM HEPES (N-/2-hydroxyethyl/piperazin-N'-/2-ethansulfonová kyselina/) (pH 7,4), 10 mM MgCl₂, 25 μΜ adenosin trifosfatu (ATP) r ř*

186 ' · mg/ml ovalbuminu, 5 gg/ml leupeptinu, 1 mM dithiothreitolu, 10 mM ,-glycerofosfatu, 0,1 mM vanadičnanu sodného, 1 mM fluoridu sodného, 2,5 mM ethylenglykol-bis(β -aminoethylether)-Ν,Ν,Ν'-N'-tetraoctové kyseliny (EGTA), 2% (obj./obj.) dimethylsulfoxidu'a

0,03 - 0,4 pCi /^32/33P/ATP na reakci. Reakce byla iniciována enzymem, inkubována při 30 °C a ukončena po 20 minutách přidáním kyseliny ethylendiamintetraoctové (EDTA) do 250 mM. Potom byl fosforylovaný substrát zachycen na nitrocelulozovou nebo fosfocelulozovou membránu s použitím 96-prohlubňového mnohonásobného filtru a volná radioaktivita byla odstraněna opakovaným promýváním 85% kyselinou fosforečnou. Radioaktivita byla kvantifikována exponováním usušených membrán fosfor-zobrazovači.

Zdánlivé řQ hodnoty byly měřeny testováním aktivity enzymu za přítomnosti rozdílných koncentrací sloučenin inhibitoru a odečtením pozadí radioaktivity měřeného za nepřítomnosti enzymu. Kinetické parametry (Kcat, Km pro ATP) byly měřeny pro každý enzym za obvyklých podmínek stanovením závislosti výchozích rychlostí' na ATP koncentraci. Inhibiční data byla doplněna do rovnice pro kompetitivní inhibici použitím Kaleidagrafu (Synergy Software), nebo byla doplněna do rovnice pro kompetitivní těsně vázanou inhibici použitím softwaru KineTic (BioKin, Ltd).

Inhibice aktivity CDK4/Cvklin D retinoblastomu kinásv

Komplex lidského CDK4 a cyklinu D3, nebo komplexu cyklinu Dl a fuzního proteinu lidského CDK4 a gluathion-S-transferasy (GST-CDK4), nebo komplexu lidské CDK4 a geneticky upraveného (1-264) cyklinu D3, byl purifikován s použitím tradičních biochemických chromátografických metod z buněk hmyzu, které byly spoluinfikovány odpovídajícími bačulovirovými expresními vektory (viz např. Meijer a Kim, Chemical Inhibitors of Cyclin-Dependent Kinases, Methods in Enzymol., sv. 283 (1997), str. 113-128).

187

Enzymový komplex (5 nebo 50 nM) byl testován s 0,3-0,5 μς purifikovaného rekombinantního proteinového fragmentu retinoblastomu (Rb) jako substrátu. Konstruovaný Rb fragment (zbytky 389-928 nativního proteinu retinoblastomu; 62,3 kDa) obsahuje větší podíl fosforylačních míst nalezených v nativním 106-kDa proteinu; stejně jako konec šesti histidinových zbytků pro usnadnění purifikace. Fosforylovaný Rb substrát byl zachycen mikrofiltrací na nitrocelulozové membráně a kvantifikován použitím fosfor-zobrazovače, jak bylo posáno výše. Pro měření těsně vázaných inhibitorů byla koncentrace enzymového komplexu snížena na 5 nM, a průběh zkoušky byl prodloužen na 60 minut, přičemž během této doby byla závislost tvorby produktu na čase lineární.

Inhibice aktivity CDK2/Cvklin A retinoblastomu kinásv

CDK2 byl purifikován použitím zveřejněné metodologie (Rosenblatt a kol., Purification a Crystallization of Human Cyclin-dependent Kinase 2, J. Mol. Biol., sv. 230, 1993, str. 1317-1319) z buněk hmyzu, které byly infikovány baculovirovým expresním vektorem. Cyklon A byl purifikován z buněk E.coli exprimujících plnou délku rekombinantního cyklinu A, a upravený konstrukt cyklinu A byl generován limitovanou proteolýzou a purifikován, jak bylo popsáno dříve. (Jeffrey a kol., Mechanism CDK activation revealed by the structure of cyclin A-CDK2 complex, Nátuře, sv. 376 (27. červenec 1995), str. 313-320). Purifikovaný, proteolyzovaný cyklin A byl zahrnut do testu s třiaž pětinásobkem molárního přebytku k CDK2. Alternativně byl připraven komplex CDK2 a proteolyzovaného cyklinu A a purifikován gelovou filtrací. Substrátem pro tuto zkoušku byl stejný Rb substrátový fragment použitý pro CDK4 testy, a metodologie CDK2/cyklin A a CDK4/cyklin D3 testů byla v podstatě stejná, s tím rozdílem, že CDK2 byl přítomen v množství 150 nM nebo 5 nM. Hodnoty K_t byly měřeny, jak je popsáno výše.

t- r e pp r « tí p e * ti < r p p ! p r p - p r

P P p · ' f

188 · ·

Inhibice aktivity CDK1 (cdc2)/Cvklin B Histon Hl kinasv:

Komplex lidské CDK1 (cdc2) a cyklinu B byl dodán z New England Biolabs (Beverly MA). Alternativně byl purifikován komplex CDKl/glutathion-S-transferasa-cyklin Bl s použitím afinitní chromatografie glutathionu z buněk hmyzu, které byly spoluinfikovány odpovídajícími baculovirovými expresními vektory. Testy byly prováděny, jak je popsáno výše, při 30 °C s použitím 2,5 jednotek cdc2/cyklin B, 10 pg proteinu histonu Hl, a 0,1-0,3 gCi /^32Z33P/ATP na jeden test. Substrát fosforylovaného histonu byl zachycen mikrofiltrací na membráně z fosfocelulosy P81 a kvantifikován za použití fosfor-zobrazovače, jak bylo popsáno výše. Hodnoty Κ_χ byly stanoveny použitím popsaných programů pro vystižení dat křivkou.

Výsledky testů prováděných se sloučeninami, které zahrnují konkrétní příklady popsané výše stejně jako další příklady označené prefixem ”1 (např. příklady I (1), 1(2), atd), kde označuje sloučeninu, která má známou strukturu (tedy sloučeninu per se známou), jsou uvedeny v tabulkách I, II a III dále. Pokud nebude uvedeno jinak v konkrétní poznámce, jsou použité jednotky a testy stejné, jako jsou uvedeny v použitelném sloupci tabulky. Zkratka N.I. označuje, že při uvedené koncentraci nebyla pozorována žádná inhibice.

rt rt • · » r <* r f - r

Γ rt r r- Tabulka I ΐς pro CDK

Příkl.	Struktura	K, CDK 4/D (nM)	K, CDK 2/A (nM)	Ki CDK 1/B (μΜ)
KD’	w H 0	640“; 102b	460	0.5
1(2)’	H 0	8000“; -30 gMb	8700
1(3)’		>5 μΜ“; >100 μΜ6
A(D	07Φ H 0	660“; 770b	1200
D(D		490b	900
K4)’		3.1 μΜ1’	4.3 μΜ	3.9
K5)’	0	1100“ 870b	4600	4.5
C(4)	Χψ.	95“	810	0.09
A(2)	H O	-300“
D(2)		>5000“

a - D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3 ν r <· • re e tře r e r r *· r - r r

190

Tabulka I K, pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K,· CDK 4/D (nM)	K, CDK 2/A (nM)	K, CDK 1/B (μΜ)
A(3)	w	2000a	.6100	3.5
C(5)		140a	780	0.293
C(6)	H 0	> 10 μΜ3
1(6)	°w H o	none @ 10 μΜ“
D(3)	2.21	3803
1(7)	fHj	- 15003
1(8)		4300a
K9)	2# H O	25003
A(4)		20003	3100	2.7
1(10)	22' H 0	>20 μΜ3

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

Tabulka I iq pro CDK (pokrač.) * r r· e * e i r c f ' r Γ ** C * i

191 · -

Příkl.	Struktura	~KT CDK 4/D (nM)	κ, CDK 2/A (nM)	K, CDK 1/B (μΜ)
1(11)	H 0	520“
K12)		380“	4170
1(13)		2400“
K14)		>50 μΜ“
K15)	44- H O	440“
1(16)		1880“
1(17)	oxo > Η 0	<1000“
K18)	0 OJ)	>25 μΜ“
K19)	P” Η ,Ο-14 ►Γ o	1600“	4800	neX @ 100 μΜ
A(5)	OCHjCHj	97“	690	0.163

a. - D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3 r e e «

192

Tabulka I K pro CDK (pokrač.) r · r e f r 9 9 ' r e r 9 f 9 9 9 9 9 · 9 t 9 9 < Γ 9 i r

- f9 r ~ - r '

Příkl.	Struktura	K, CDK 4/D (nM)	K,· CDK 2/A (nM)	Kz CDK 1/B (μΜ)
E(l)	u w H a NOj	420’	320	0.03
A(6)		150’	292	0.052
A(7)		310’
A(8)	w	>25 μΜ1
D(4)	H 0	800’
A(9)		100’	230	0.053
A(10)	W,	36’	318	0.057
1(20)	w H 0	nent*@ 25 μΜ’
K21)	fH, • H J	neru'@ 25 μΜ’
1(22)		nenf @ 25 μΜ’	nenť <§> 100μ M

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený ϋζΚ • β c Γ c

193

Tabulka I K, pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K, CDK 4/D (nM)	Kř CDK 2/A (nM)	K, CDK 1/B (μΜ)
1(23)	yjčp ή 0	1500’
A(ll)		130a
1(24)		N.I. 25 μΜ3
C(7)	N 0	510“
C(9)	H &	740a
C(10)		680a
C(8)		27a	389	0.097
C(II)		130a
C(12)		27a	670
A(12)	0	9400a	4100

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3 .

♦ e r r r r r

194

Tabulka I pro CDK (pokrač.) e * r·· - r r e r © r © r ©

Příkl.	Struktura	K; CDK 4/D (nM)	Kř CDK 2/A (nM)	K CDK VB (μΜ)
C(13)		51a
C(14)		57a
C(15)	H	57a
C(16)	A+a ti 0	170a
C(25)	A	1300a
C(24)		8a	248	0.046
C(22)		67a
C(17)	Wi	72a
C(18)	Άχα’ H 0	12900“	nen/ @ 10 μΜ
C(37)	A-Ai.	7a	310	0.233
C(23)	W H	330a

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3 f <-

η 195

Tabulka I íý pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	Ki CDK 4/D (nM)	K,· CDK 2/A (nM)	K, CDK 1/B (μΜ)
C(19)	r-O. xC H	0	15.8a	277
F	NH ká Tv H	\ CN 0	40.71	350	0.2
C(20)	H'	/Ts CH,*	22a	145
C(21)		117a	480
A(13)		£	250a
A(14)		Λ	180a
	H	<λ.
C(36)	NHj H c,~Zl CF,	13900a
B	ýt	X	N.I. 100 μΜ1
C(31)	HjCO-A^s/ q- 5* H 0	£Ύ°	Ν.Ϊ. 100 pMa
C(32)	NH, tO,V- 4 H		94a

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

C·“ cr r r f · r r f ř e < e e e r r r ř’ r r re rre r <*

196

Tabulka I Kj. pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	Ke CDK 4/D (nM)	K SDK < 2/A (nM)	K, SDK 1/B (pM)
C(33)	-//A	57a	20
C(35)	H V M °	ll1	23
C(34)	.Av . ž H 0	140a	131
C(26)	W-	330a
C(27)	H	1020a
C(28)	w	240a	-
C(29)	W-	357a
C(30)		1400a
C(38)		25a	39
C(39)	H S 0	>100 pMa

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

f r

197

Tabulka I ΐς pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K CDK < 4ZD (nM)	Kf SDK < 2/A (nM)	K SDK 17B (μΜ)
E(2)		1170a
C(40)		3840a
C(41)		350a	336
C(42)		750a	207
C(43)	H 0	315a
C(44)		- 128a
C(45)	30,¾ <T H	51a	103	0.249
C(46)	m δ V	244a	1790
C(47)	H	30a	26
C(48)		14a	11.1	0.015

a = D-typ cyklinu je D3; b - D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3 e r

198

Tabulka I lý. pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K,· CDK 4/D (nM)	K CDK 2/A (nM)	K, CDK 1/B (pM)
C(49)	HAJ» /“% 0o. s 0	23a	10	0.034
C(50)	CH,	25.5a	5.6	0.029
C(51)		85a	33.3
C(52)	Η H	lla	105
C(53)	Q-o-Mí,	85a	180
C(54)	H 0	34a	453.
C(55)		8.5a	493	0.504
C(56)		195a	1020
C(57)	| M H CHa	30a	259
C(58)	H HI=	34 a	306

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

199

Tabulka I K, pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K, CDK 4/D (nM)	K/ CDK 2/A (nM)	κ, CDK 1/B (μΜ) .
C(59)		100“	135
C(60)		56“	574
1(25)		639“	280
C(61)		120“	1200
C(62)		72“	1710
C(63)		17“	200	0.133
C(64)		44000“	42 μΜ
C(65)		38000“	14.3 μΜ
C(66)		53’	574
C(67)		3170“	13.2 μΜ

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3 r 0 r ~ 0

200

Tabulka I pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K, CDK 4/D (nM)	K· CDK 2/A (nM)	Kf CDK 1/B (pM)
C(68)		>30 μΜ“
C(69)		20“	638
C(70)		2.8“	1120	1.37
C(71)	H	2“	482	0.827
C(72)	0	13.5“	169
C(73)	χ H S 0 B’	6.3“	6.8	0.02
C(74)	PMK	4800“	10.6 μΜ
C(75)	ooHi	23“	1080
C(76)	H/k/ /«Iř/V043 H U	2000“	507
C(77)	/''j /«, rZy*» Hxďr- H	3000“	Nenj @ 5μΜ

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

201

Tabulka I K, pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K,· CDK 4/D (nM)	κ,· SDK 2/A (nM)	Κ· 3DK 1/B μΜ)
C(78)		32“	83
C(79)	pA’	54“	162
C(80)	H	, 3.3“	220	0.325
C(81)		12.3a	872	1.24
C(82)	y-0*’. 1 M O H	44.2a	467
C(83)		1800“	32 μΜ
C(84)		53a	1040
C(85)	f 0	13“	5.7	3.0022
C(86)	H	15“	1100	1.31
C(87)	°o> H	9“	607	0.826

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3 e r r «

202

Tabulka I K, pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura.	•Kf CDK 4/D (nM)	Kř CDK 2/A (nM)	K, CDK 1/B (μΜ)
C(88)	7 NHj 444	653	305
C(89)		55“	326
G		23 a	178
C(90)		2?a	771
C(91)	A B,	6.8“	81
C(92)	HA,<P V	63“	9.4.
C(93)	H 0	285“	1040
C(94)	H#v\ y°< H	41“	1040	1.41
C(95)	h* 0 CHl	25“	<50	0.075
D(5)	NH, ’+Μ H 0	159“	233

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

203

Tabulka I Kj^ pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K,· CDK < 4/D (nM)	Ki CDK ( 2/A (nM)	κ· CDK 1/B (μΜ)
C(96)	Η	1.5“	324	1231
H(l)	3 HCI H	8.2a	370	0.681 .
H(2)	3HCI T1 p H	3.6a	474	0.361
C(97)	7<>ο-Λΰ	8.5a	392
C(98)	H	27a	565	0.72
H(3)		2.4a	405	0.472
J(D	NH, Η Ό	2.3 a	452	0.732
C(99)	NH, o’ VAtř f-O	16.4a	39.5	0.04
C(100)	NH, ťV\JC?í	6.5a	620	0.911
C(101)	H	103a	300	0.32

a - D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

204

Tabulka I K* pro CDK (pokrač.)

Přikl.	Struktura	Kř CDK 4/D (nM)	K, CDK 2/A (nM)	K· CDK 1/B (pM)
C(102)		21’	49	0.017
C(103)	H	110“	595
C(104)		190“	730
C(105)		60“	1060
C(106)		134“	1460
J(2)	•CFjCOOH	6.4“	135	0.405
C(107)	H 'ci	13.8“	12.5
C(108)		23“	6.8	0.009
C(109)	7* o	83“	28	0.035
C(110)		14“	260	0.104

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

205

Tabulka I K pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K, CDK 4/D (nM)	Kř CDK 2/A (nM)	Kř CDK 1/B (μΜ)
C(lll)		21“	216
C(112)	H	23 a	408
C(113)	“MÍ	17.3“	238
C(114)	Η	21“	8.5	0.028
C(115)	O H	57a 55c	18	0.05
J(3)		15“ 19c	572	2.0
J(4)		10.2 a	13.5	0.022
C(116)	NH,	121“	120	0.077
J(5)		6.3“	331	0.76
C(117)	P p H	10c	423	0.417

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3 r r

206

Tabulka I pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K, CDK 4/D (nM)	K, CDK 2/A (nM)	Kt CDK 1/B (μΜ)
C(118)		10.3“	191	0.097
C(119)	H	24“	86	0.247
C(120)		10.9“	80	0.062
C(121)		10.6'	953
K	H	43c	364
C(122)		35=	165
J(6)		8.1c	548	0.511
C(123)	NH, H	15.4“	164
C(124)		17=	611	0.68
C(125)	NH, Hj/ “ P—\ 7	5.4C	602	0.65

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

207

Tabulka I pro CDK (pokrač.)

Příkl.	Struktura	K, CDK 4/D (nM)	Kř CDK 2/A (nM)	Ke CDK 1/B (μΜ)
L		22c		0.193
M	H	46c	290
C(126)	/A	24c	390
C(127)		26c	215
C(128)	-0-0/¾	30c	440
C(129)		64c	.270

a = D-typ cyklinu je D3; b = D-typ cyklinu je Dl; c = D-typ cyklinu je omezený D3

Inhibice buněčného růstu: Posouzení cvtotoxicitv:

Inhibice buněčného růstu byla měřena použitím testu s tetrazoliovou solí, která je založena na schopnosti živých buněk redukovat 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-/2H/-difenyltetrazolium bromid (MTT) na formazan (Mossman, Journal of Immunological Methods, sv. 65 (1983), str. 55-58). Ve vodě nerozpustný fialový produkt formazan byl potom detekován spektrofotometricky. Různé buněčné linie (HCT-116, Saos-2,

208

U2-OS, SW480, COLO-205, RFX-393, M14, MDA-MB-468 a MCF7) byly kultivovány na 96-prohlubňových plotnách. Plotny byly vloženy do příslušného media při objemu 135 ml/prohlubeň, buď do McCoy 5A media (pro Saos-2, U2-OS, SW480 a HCT-116 prohlubní), RPMI (pro COLO-205, RFX-393, MÍ4 buňky), nebo do Minimum Essential Medium Eeagle (pro buňky MDA-MB-468 a MCF7). Plotny byly inkubovány po 4 hodiny před přidáním inhibitorové sloučeniny. Byly přidávány různé koncentrace sloučenin inhibitoru v 0,5% (obj./obj.) dimethylsulfoxidu (15 ml/prohlubeň), a buňky byly inkubovány při 37 °C (5% CO₂ ) po čtyři až šest dní (v závislosti na buněčném typu). Na konci inkubace byl přidán MTT na výslednou koncentraci 0,2 mg/ml, a buňky byly inkubovány po další 4 hodiny při 37 °C. Po odstředění ploten a odstranění media byla měřena při 540 nm absorbance formazanu (solubilizovaného v dimethylsulfoxidu). Koncentrace sloučeniny inhibitoru vykazující 50% inhibici růstu byla určena z lineárního podílu semi-logaritmického grafického znázornění koncentrace inhibitoru proti procentické inhibici. Všechny výsledky byly srovnávány s kontrolními vzorky buněk, které byly zpracovány pouze s 0,5% (obj./obj.) dimethylsulfoxidem.

* Γ tab.II

209

TABULKA II: IC₅₀ s různými buněčnými liniemi rakoviny v MTA testu

s ^3, § u >—< s o )—t A d H	SW-480	C\ rf	0.4,3	15% @ 30	©\ H	O @ ,-S @ fe' fO Ό O .	£ 00 o in n cf ·© c4	1.7,3	23% @ 30	5,15
MDA- MB-468
MCF-7
2 m
M14 melanom .
COLO- 205					-
Saos-2
U2-OS
HCT116	2.5,10	o fO ť o	41% @30	in C4	29% @30	1 16% @ 30	26,(85% @ 30)	S S g	20, 30
+Γ 5 -Sr <S.	(I)V	S- o	(e)v	C(5)	A(4)	O? ri HS	(S)V	WH w	(9)V

• Γ tab.II

210 o

rr vi

fa

O

Tab. II: IC₅₀,IC₉₀ (μΜ) o S js

O ε

o p

o υ

CM f

M

O ea

CZ3

C/0

O cm

P \o »-(

U ffi

O *5

V) o

CM

4,10	0.7,7.5	8.3,20.0
	0.72,1.7	6.8,15
	0.65,5.5	15, >25 (82%)
						».
	1.3,4.6	6.2,18.0	2.1,4.8	CO ri rt »—t	14.0,>25( 70%)	7.0,18.0	1.0, 1.6	o ro 1—I · O\ rf	13.0,23.0	8.0,20.0
	0.9,1.6	o ‘ ee 1-1 ín CM Λ	1.9,6.0	1.9,3.0 .1	16.0,>25(80 %)	15.0, >25(77%)	1.0,20.0	6.5,>25(74% )	22.0, >25(57%)	12.0,22.0
20,30	0.95,1.8	18, >25 (88%)	2.0,5.0	0.7, 1.5 :1	10.0,25.0	9.0,23.0 • ·	1.0,2.6	6.1, 25	9.0, 22.0	9.0,19.0
e? *,—. <	o rH	CC u	C(12)	rr cm u	C(37)	z—·»» r-l P	fa	. C(20)	C(21)	C(35)

r r tab.II

211

Tab. II: IC50, IC₉₀ (μΜ)

SW-480

. 00 O řA S I

0.26, 0.60

! 0.48,1.5

< 0 s

2.6, >25 (82%)

[ 3.0, >25 (88%)

RXF- 393

0.8, 1.6

>5.0

M14 melanom

0.6, 1.8

2.0, 1.8

3 O rS u

0.29, 0.60

1.2,>5.0

Saos-2

< § Μ ίΉ rS Λ

2.0,10.0

r—( in uf ri

0.42,0.75

0 6 rs 0 τ'

1 1.3,2.8

9.0,22.0

i“ ** Os t*· SO 1—( *—' Cí A

9.0,20.0

12.0, 26.0

5.8,12.0

4.0,7.0

U2-OS

11.0, >25(87%)

5.5,12.0

c 0 rs a o

1.0, 1.5

14.0, 22.0

2.0, 3.0

15.0, 23.0

ts CG ft 1-1 ' tn rs Λ

16.0, >25(84%)

14.0, 26.0

5.0,11.0

0 ss «X en H

HCT116

O Os r-t rn TÍ

2.0,8.0

4.2, 7.8 . ' _ 1

0.34,0.70

0 T-4 SO <n

SO rH rí SO O

8.5,17.0

4.3,17.0

12.0,22.0

5.0,15.0

2.2, 5.9

tí TÍ t> i-5

X 'Si

C(38)

C(45)

řt Tf O

C(48)

Η—\ Os s 0

C(50)

C(52)

C(55)

z—X SO u

Z—X Os SO u

C(70)

C(71)

tab.II

212

2 5 o es u KM O •n o rt* rt* ^2 « ř-	SW-480
' I 00 á š § s		rn r-í O? rr o	4.7,9.3		0.22, 0.59
MCF-7		0.4,1.7	3.9,16.0		3.9,13.0
RXF- 393		0.84, 1.3	>5.0		cq o rt* fO		in co τ* cq
M14 melanom		0.92, 2.5	3.8, >5		0.71,2.2		1.5,4.2
COLO- 205		0.28,1.0	>5.0	• ·	0.24, 0.58		0.39,1.7
Saos-2	1.3, 5.0	VJ r-í C? O*	13.0,22.0	>25 (15%)	0.28,0.67 i	1 12,22	2.0,4.0	22, >25 (56%)	5.9,23.0	2.2,5.0	1.8,4.5	17.0,25.0
U2-OS	in O\ 1-Γ v	1.0, 2.3	o cq rt* eC	>25(1%)	00 ri 1—1.	14, 22	O rr co i-4	6Č Ό G ΙΛ cq Λ	19.0, >25	© «c V eo	3.9,5.8	>25
	HCT116	1.4, 3.4	0.4, 1.1	10.0, 20.0	>25 (1%)	Ό tn o tn cq ©	1 6.5,17.0	0.95, 2.9	19, >25 (70%) _____	4.7,18.0	1.3, 3.1	1.5,3.0	1.9,5.0
	Z~\ m ω	C(80)	C(81)	C(82)	C(85)	(98)3	C(87)	C(88)	z—s C\ '«wZ u	O\ U	z— m Os u	Z—\ G Q

r r tab.II

213 * r f- ř* f r r r

K f r r Γ Γ i r - .· — r < c r t

Tab. II: IC₅o,IC₉o (μΜ)

SW-480
MDA- MB-468								-			0.34, 0.7
MCF-7											0.48,1.7
RXF- 393		oo 00 © O									0.55, 1.1
M14 melanom		© Cs *» ττ <S									0.65,2.0
COLO- 205		0.2, 0.6					-		•		0.9,2.7
Saos-2	4.2,10.0	ττ Ť-H rf ί- ο	o rš ts ©	9.0,20.0	2.7,5.3	| 1.8,3.0	1.0,5.9 1	1.1,2.9	0*01‘ST	0.88,2.2	rg r-5 00 u> ©	O c4 1—» ví	0.31,3.2
U2-OS	8.0,12.0	0.85,1.5	16.0,21.0	10.0, 21.0	2.4,5.2	3.5,5.8	O\ vi uf ri	4.0,8.0	12.0,22.0	xř ví i-T ro	1.7,2.8	o ts of	00 xř xř
HCT116	m ΓΜ s-\ Λ © ts • 00 00 1—(	0.58,1.4 i 1	15.0, 25.0	3.9,11.0	1.3, 2.9	0.88,2.4	o ri rn	0.88, 2.7	1 2.3,6.1 i ·	1.1, 2.4	0.3, 0.73	2.5, 7.0	0.4, 1.4
cr 'X.	C(96)	(l)H	řř S	C(97)	00 Os u	H(3)		Cs U	C(100)	C(102)	Γ4	C(107)	C(108)

tab.II

214 ··

Tab. II: IC_So,IC₉₀ (μΜ)

SW-480
MDA- MB-468		0.44, 0.75
MCF-7		0.4, 1.7
to ro g a
M14 melanom
COLO- 205								-
Saos-2	1.5,14.0	0.89,1.8	3.8,5.9	2.8,9.0	1.3,4.8	1 0.8,2.2	2.2,4.9	0.9, 1.5	0.89,1.5	0.94,1.5	7.0,13.0	2.6,5.2	o es 1-H r-T in	6.0,13.0	3.7,10.0
U2-OS	O cs l-H «» Tř	0.7.1.6	3.0,5.5	8.0,19.0	3.0,5.2	2.7,5.0	2.9,5.2	oo 1-H O 1—5	oT O	o tZ Tf rs	7.8,12.0	O i-H 1-H in	6.0,11.0	3.5, 6.0	1.5, 4.7
HCT116	1.6,3.0	0.64,1.7	1.7,3.8	3.8, 8.0	1.1, 2.8	0.98,2.1	00 rí c? o	SO 1-H o	1.8, 2.9	0.64,1.4	4.0, 7.0	3.5, 6.0	2.5,5.3	3.5, 6.2	1.7, 4.8
	C(109)	x—\ o ^H 1-H o	x-\ rH i-H 1-H o	x-> en PH rH SeX u	C(114)	řr? 1-H l-H 'w' o	x-s en ^5	tn	C(117)	x-\ oo 1-H ΓΗ v—' u	X“\ es 1-H 1—5 u	X*S O es i-H s^X u	C(121)		C(122)

tab.II

215

^3. O C\ u o m υ >-d >—1 pQ C3 H	SW-480
MDA- MB-468 1
MCF-7
RXF- 393
M14 melanom
COLO- 205	•
Saos-2	0.47, 0.77	2.9,5.7	0.98,1.6	0.9,1.5
on O O	0.51,1.3	7.1,12.0	1.3, 2.5	1 1.2,2.3
HCT116	0.26,0.6	2.7,7.0	0.54,1.6	0.62,1.8	. >12.5	>25	0.6, 1.4
$ f ·	»“9	C(123)	C(124)	C(125)		s	C(126)

Γ

216' · · pRb Imunoblotinq:

Schopnost sloučenin inhibovat fosforylaci proteinu retinoblastu (pRb) byla testována analýzou westernovým přenosem. Anti-Rb protilátka byla použita pro měření konverze hyper-fosforylovaného pRb na hypo-fosforylovaný pRb. Anti-fosfo-Rb (ser 780) protilátka byla použita pro konkrétní měření defosforylace na šeřinu 780, místě, které bylo dříve prokázáno, že je fosforylováno CDK4/cyklinem D. Inhibice pRb fosforylace je indikována +” v tabulce III dále, a závada v inhibici pRb fosforylaci je v tabulce indikována .

Lidské buňky střevního tumoru (HCT-116 buněk; 5 χ 10⁵) byly vloženy do 100 mM misek a ponechány růst přes noc. Pět mikromolů každé sloučeniny bylo přidáno po 12 hodinách. Potom byly buňky spojeny a odstředěny. Buněčné pelety byly lyžovány přidáním 100 ml pufru lýzy (50 mM HEPES (pH 7,0), 250 mM NaCl, 5 mM ethylendiamintetraoctové kyseliny, 0,1% Nonidet P-40, 1 mM dithiothreitolu, 2 mM pyrofosfatu sodného, 1 mM orthovanadičnanu sodného, 1 mg/ml aprotinu, 1 mg/ml leupeptinu, 50 mg/ml fenylmethylsulfonyl fluoridu). Čtyřicet mikrogramů proteinu bylo odděleno elektroforézou óodecylsulfatu sodného - polyakrylamidového gelu (SDS-PAGE) na 6% gel. Proteiny byly přeneseny do nitrocelulosy a přes noc byly blokovány 5% blokačním pufrem v Tris-pufrovém roztoku. Anti-Rb protilátka (Pharmigen), anti-fosfo-Rb (Ser 780) protilátka (MBL), a se-kundární protilátka byly inkubovány po jednu hodinu při teplotě místnosti, potom následovaly tři kroky promývání v 0,01% Twen-20 v Tris-pufrovém roztoku. Protein Rb byl detekován použitím chemiluminiscence podle výrobce (Amersham).

r r r*

217 ·

Tabulka III: Inhibice pRb fosfoxylace

Příkl. Slouč.	Inhibuje PRb fosfo- rylaci	Inhibuje pRb (ser 780) fosfo- rylaci
C(85)	4·	+
J(2)	4-	+
C(80)	+	4-
C(48)	4·	+
H(l)	4-	4-
C(50)	+	+
C(87)	+	4-
C(73)	4·	4-
C(81)	4*	+
C(94)	4·	+
F	-	-
C(71) .	+ -	+

Příklady výše dokládají sloučeniny podle vzorce I a testy, které mohou být snadno uskutečněny ke stanovení jejich hladin aktivity proti různým CDK/cykl i novým komplexům. Je zřejmé, že k výběru inhibitoru, majícího požadovanou úroveň aktivity proti vybranému cíli, mohou být použity tyto zkoušky nebo jiné vhodné testy známé ze stavu techniky

Ačkoliv byl vynález ilustrován odkazy na konkrétní a fl ©

218' · výhodná provedení, odborník ze stavu techniky rozpozná, které variace a modifikace mohou být vyrobeny rutinním experimentováním a praktickým uskutečňováním vynálezu. Například takový odborník s'tavu techniky určí, které variace nebo substituce sloučenin vzorce I mohou být připraveny bez nepříznivého ovlivnění významným způsobem jejich účinnosti ve farmaceutických prostředcích. Proto není tento vynález omezen předcházejícím popisem, ale je definován připojenými patentovými nároky a jejich ekvivalenty.

Claims (17)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Sloučenina vzorce I kde:

   R¹ je substituovaná nebo nesubstituovaná skupina vybraná z: C_w-alkylu, C^g-alkenylu; C^g-alkinylu; Ci.g-alkoxylu; C^g-alkoholu; karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, cykloalkylu; karbocyklického nebo heterocyklického., monocyklického nebo kondenzovaného ' nebo nekondenzovaného polycykiického, arylu; karbonylu; etheru; (C^g-alkyl)-karbonylu; (C^-alkyl)-arylu ; (Cx.g-alkyl) -cykloalkylu; (Ci.₆-alkyl) - (C^g-alkoxylju; aryl-(C^g-alkoxylju; thioetheru, thiolu; a sulfonylu;

   přičemž kde je R¹ substituovaný, každý substituent je nezávisle halogen; halogenalkyl; C^g-alkyl; Cx.g-alkenyl; Ci.g-alkinyl; hydroxyl; C^g-altoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; ester; kyslík; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, cykloalkyl; nebo karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, aryl; a

   R² je karbocyklická nebo heterocyklická, monocyklická

   220 · · nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická, kruhová struktura, která má substituent na pozici sousedící s místem připojení, přičemž kruhová struktura je popřípadě dále substituovaná, kde každý substituent R² je nezávisle halogen; halogenalkyl; C^g-alkyl; C^-alkenyl; C^-alkinyl; hydroxyl; Cýg-alkoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; ester; kyslík; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, cykloalkyl; nebo karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, aryl;

   nebo farmaceuticky přijatelná sůl sloučeniny vzorce I, nebo proléčivo nebo farmaceuticky aktivní metabolit sloučeniny vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.
2. 2. Sloučenina, farmaceuticky přijatelná sůl, proléčivo nebo jejich farmaceuticky aktivní metabolit podle nároku 1, kde:

   R¹ je substituovaný, každý substituent je nezávisle halogen; halogenalkyl; Cx.g-alkyl; Cx-g-alkenyl; C^-alkinyl; hydroxyl; kyslík; C^g-alkoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester;

   a každý substituent R² je nezávisle halogen; halogenalkyl; Ci-g-alkyl; C^-alkenyl; C^g-alkinyl; hydroxyl; Cx.g-alkoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester.
3. 3.

   Sloučenina, farmaceuticky přijatelná' sůl, proléčivo nebo r r

   221 ' aktivní metabolit podle nároku 1, kde R¹ je substituovaná fenylová skupina.
4. 4. Sloučenina, farmaceuticky přijatelná sůl, proléčivo nebo aktivní metabolit podle nároku 1, kde R¹ je fenyl substituovaný alkylaminovou nebo pyridinovou skupinou.
5. 5. Sloučenina, farmaceuticky přijatelná sůl, proléčivo nebo aktivní metabolit podle nároku 1, kde R¹ je vybrán ze skupiny sestávající z:

   e β

   222
6. 6. Sloučenina, farmaceuticky přijatelná sůl, proléčivo nebo aktivní metabolit podle nároku 1, kde R¹ je fenyl substituovaný případně substituovaným karbonylem nebo sulfonamidem.
7. 7. Sloučenina, farmaceuticky přijatelná sůl, proléčivo nebo aktivní metabolit podle nároku 1, kde R¹ je vybrán ze skupiny sestávající z:

   kde R³ je vybrán ze skupiny sestávající z Cx-Cgalkylu, Cj-Cgalkoxyskupiny, arylu, aryloxyskupiny a aminoskupiny.
8. 8. Sloučenina, farmaceuticky přijatelná sůl, proléčivo nebo aktivní metabolit podle nároku 1, kde R² je orto-substituovaný fenyl nebo thienyl.
9. 9. Sloučenina, farmaceuticky přijatelná sůl, proléčivo nebo aktivní metabolit podle nároku 1, kde R² je o-halogenfenyl nebo o-dihalogenfenyl.
10. 10. Sloučenina, farmaceuticky přijatelná sůl, proléčivo nebo aktivní metabolit podle národu 1, kde R² je o-difluorfenyl.

    e r

    223' · ·
11. 11. Sloučenina podle nároku 1 vybraná ze skupiny sestávající z;

    H₃C__n^ .m» h₃c

    -3 HCI NHaS^S ,e a její farmaceuticky přijatelné metabolity.

    Η ^HsCkN^ kxN.

    nh₂s‘ ψ' ^s o H

    CH₃ soli, proléčiva a aktivní
12. 12. Sloučenina podle nároku 1 vybraná ze skupiny sestávající z:

    •s.

    224 a jejich farmaceuticky přijatelných solí, proléčiv a aktivích metabolitů.
13. 13. Sloučenina vybraná ze skupiny sestávající z:

    o

    225

    HgC-n^, nebo farmaceuticky přijatelné soli, metabolitu uvedené sloučeniny.

    proléčiva, nebo aktivního
14. 14. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje:

    (a) množství látky regulující buněčný cyklus, účinné inhibovat CDK4 nebo komlex CDK4/cyklinu, přičemž látka regulující buněčný cyklus je vybrána ze skupiny sestávající ze:

    (I) « «!

    per r p r r p r r

    Γ r r226 (i) sloučeniny vzorce I:

    NH, kde R¹ je substituovaná nebo nesubstituovaná skupina vybraná z: C_x.₆-alkylu; C^-alkenylu; C_x_₆-alkinylu; Ci.g-alkoxylu; C_x_₆-alkoholu; karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, cykloalkylu; karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, arylu; karbonylu; etheru; (C^-alkyl)-karbonylu; (C_x.₆-al kyl)-arylu (C_x__s-alkyl) -cykloalkylu; (C₁.₆-alkyl)-(C₁.₆-alkoxyl)u; aryl-(C_x_g-alkoxyl) u; thioetheru; thiolu a sulfonylu;

    přičemž pokud R¹ je substituovaný, každý substituent je nezávisle halogen; halogenalkyl; C_x_₆-alkyl; C_x_₆-alkenyl; C_x.₆-alkinyl; hydroxyl; C_x.₆-alkoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; ester; kyslík; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, cykloalkyl; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický aryl;

    a

    R² je karbocyklická nebo heterocyklická, monocyklická nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická, kruhová struktura mající substituent na pozici sousedící s místem připojení, přičemž kruhová struktura je. popřípadě dále substituovaná, kde každý substituent R² je nezávisle • « • t! f ·*

    227 ' · halogen; halogenalkyl; Cýg-alkyl; ^.g-alkenyl; C^-alkinyl; hydroxyl; CYg-alkoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; ester; kyslík; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, cykloalkyl; nebo karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, aryl;

    (ii) farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny vzorce I; a (iii) proléčiva nebo farmaceuticky aktivního metabolitu sloučeniny vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a (b) farmaceuticky přijatelný nosič.
15. 15. Způsob léčení nemocí nebo poruch zprostředkovaných inhibici CDK4 nebo komplexu ČDK4/cyklin,' zahrnující podávání subjektu, který toto léčení potřebuje, látky regulující buněčný cyklus vybrané ze skupiny sestávající ze:

    kde:

    R¹ je substituovaná nebo nesubstituovaná skupina vybraná z: C^-alkylu; C^-alkenylu; C^-alkinylu; Ci.g-alkoxylu; Cx-g-alkoholu; karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, cykloalkylu; karbocyklického nebo heterocyklického, monocyklického nebo

    228 kondenzovaného nebo nekondenzovaného polycyklického, arylu; karbonylu; etheru; (C^g-alkyl)-karbonylu; (C^-alkyl)-arylu (Ci-g-alkyl) -cykloalkylu; (C^-alkyl) - (Cx.g-alkoxyl) u; aryl- (Cj_₆-alkoxyl)u; thioetheru;. thiolu a sulfonylu;

    přičemž pokud R¹ je substituovaný, každý substituent je nezávisle halogen; halogenalkyl; C^-alkyl; C^-alkenyl; C_x.₆-alkinyl; hydroxyl; kyslík; Cx.g-alkoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester;

    a

    R² je karbocyklické nebo heterocyklická, monocyklická nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická, kruhová struktura mající substituent na pozici sousedící s místem připojení, přičemž kruhová struktura je popřípadě dále substituovaná, kde každý substituent R² je nezávisle . halogen; halogenalkyl; C_x.₆-alkyl; Cx-.g-alkenyl; C^g-alkinyl; hydroxyl; Ci.g-alkoxyl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester;

    farmaceuticky přijatelných solí sloučenin vzorce I; a proléčiv a farmaceuticky aktivních metabolitu sloučenin vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelných solí.
16. 16. Sloučenina vzorce I:

    NH· .O

    R' (I) e *

    Ρ Γ r r 0

    00, ' 0 r r ·· 0

    Γ - ·

    229 kde:

    R¹ je vybrán z:

    R² je substituovaná nebo nesubstituovaná: karbocyklická nebo heterocyklická, monocyklická nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická, kruhová struktura, kde každý případný substituent pro R² je nezávisle halogen; kyslík; halogenalkyl·; C^-alkyl; C^g-alkenyl; C^-alkinyl; hydroxyl; Ci.g-alkoxyl; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, cykloalkyl; nebo karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, aryl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester;

    nebo farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny vzorce I, nebo proléčiva nebo farmaceuticky aktivního metabolitu sloučeniny vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
17. 17. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje:

    (a) účinné množství látky regulující buněčný cyklus, účinné inhibovat CDK nebo komlex CDK/cyklinu, vybrané ze:

    p r e r· r·· * e p r *· e r e p r r p r r r i* t* r c p f erc r- _r r- r r . r

    230 · · (i) sloučenin vzorce I:

    kde: R¹ je vybrán z:

    R² je substituovaná nebo nesubstituovaná: karbocyklická nebo heterocyklická, monocyklická nebo kondenzovaná nebo nekondenzovaná polycyklická, kruhová struktura, kde každý případný substituent pro R² je nezávisle, halogen; kyslík; halogenalkyl; Cx.g-alkyl; Cj.g-alkenyl; C^g-alkinyl; hydroxyl; Cx.g-alkoxyl; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, cykloalkyl; karbocyklický nebo heterocyklický, monocyklický nebo kondenzovaný nebo nekondenzovaný polycyklický, aryl; amino; nitro; thiol; thioether; imin; kyano; amido; fosfonato; fosfin; karboxyl; thiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; keton; aldehyd; nebo ester;

    231 ' (ii) farmaceuticky přijatelných solí sloučenin vzorce I; a (iii) proléčiv a farmaceuticky aktivních metabolitů sloučenin vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí; a (b)farmaceuticky přijatelný nosič.