CZ20002102A3 - Monoarginylová sůl kyseliny (E)-3-[l-N-butyl-5[2-(2-karboxyfenyl)methoxy-4-chlorfenyl]-lHpyrazol-4-yl]-2-[(5-methoxy-2,3dihydrobenzofuran-6-yl)inethylj-prop-2-enové - Google Patents

Abstract

Monoarginylová sůl kyseliny (E)-3-[l-N-butyl-5-[2-(2karboxyfenyl)methóxy-4-chlorfenyl]-lH-pyrazol-4-yl]-2-[(5methoxy-2,3-dihydrobenzofiiran-6-yl)methyl]-prop-2-enové, 1 farmaceutická kompozice ji obsahující, způsob její výroby a její použití jako antagonisty endothelinového receptoru při ■ léčbě hypertense, selhání ledvin cerebrovaskulámí choroby.

Description

Oblast techniky 'Tento vynález se týká nové monoarginylové soli antagonisty endothelinového receptorů, kyseliny (E)-3-[l-Nbutyl-5-[2-(2-karboxyfenyl)methoxy-4-chlorfenyl]-lHpyrazol-4-yl]-2-[(5-methoxy-2,3-dihydrobenzofuran-6-^; ;yl) methyl]-prop-2-enové.

Dosavadní stav techniky,

Tato sloučenina, kyselina (E)-3-[l-N-butyl-5-[2-(2karboxyfenyl) methoxy-4-chlorfenyl]-lH-pyrazol-4-yl]-2-[ (5-^; methoxy-2,3-dihydrobenzofuran-6-yl)metnyl]-prop-2-enová, se řadí do velké generické třídy sloučenin popsaných a', nárokovaných v souběžné PCT přihlášce PCT/US 9612581. Je popsáno, že sloučeniny existují buď ve formě volné kyseliny; nebo jako „farmaceuticky přijatelné soli. Příklad 2 z PCT/US 9612581 představuje způsob výroby dikyseliny,. kyseliny (E) -3-[l-N-butyl-5-[2- (2-karboxyfenyl)methoxy-4chlorfenyl]-lH-pyrazol-4-yl]-2-[ (5-methoxy-2,3-;

^;,dihydrobenzofuran-6-yl)methyl]-prop-2-enové. Aktivita této sloučeniny jako antagonisty endothelinového receptorů je popsána v PCT/US 9612581.

Podstata vynálezu

Tento vynález zahrnuje monoarginylovou sůl kyseliny (E) -3-[l-N-butyl-5-[2- (2-karboxyfenyl)methoxy-4-chlorfenyl]-;

lH-pyrazol-4-yl]-2-[ (5-methoxy-2,3-dihydrobenzo.furan-6-^: yl)methyl]-prop-2-enové, u které bylo překvapivě zjištěno, že má zvýšenou biologickou dostupnost ve srovnání, s disodnou solí nebo kompozicemi dikyseliny zvyšujícími rozpustnost, t. j. kompozicemi ve kterých je obsaženo', povrchově aktivní činidlo Tween 80 buď samostatně nebo' v kombinaci s pufrujícím činidlem N-methylglukaminem.'.

Vynález dále zahrnuje farmaceutické kompozice monoarginylové soli kyseliny (E)-3-[l-N-butyl-5-[2-(2karboxyfenyl) methoxy-4-chlorfenyl]-lH-pyrazol-4-yl]-2-[ (5methoxy-2·, 3-dihydrobenzofuran-6-yl) methyl]-prop-2-enové ai -jejich použití jako antagonisty endothelinového receptorů, které jsou užitečné při prevenci nebo ošetření různých‘.kardiovaskulárních a ledvinových chorob zahrnující ale neomezených na: hypertenzi, akutní a chronické selhání’ ledvin, cyklosporidinem indukovanou nefrotoxicitu, benigní prostatickou hypertrofii, pulmonární hvpertnezi, migrénu, mrtvici, subarachnoidní hemoragii, cerebrovaskulární angiospazmy, myokardiální ischémii, angínu, městnavé¹. srdeční selhání, nestabilní angínu, koronární angiospazmy a myokardiální choroby (salváže), následky diabetů včetně ale. .bez omezení na: atherosklerózu, diabetickou nefropathii,' diabetickou, retinopathii, retinopathii, diabetickou' makrovaskulární chorobu; a jako doplněk při angioplastice pro prevenci restenózy;

;Tento vynález dále zahrnuje způsob antagonizace endothelinových receptorů u zvířat i lidí, který zahrnuje· podávání účinného množství sloučeniny vzorce (I) živočichovi, který to potřebuje..

i- 3

Detailní popis vynálezu; ·

Sloučenina podle, vynálézu je reprezentována strukturním vzorcem (I)::

Vzorec (I);

'Rozpustnost dikyseliny sloučeniny vzorce (I) ve vodě je velmi omezena za kyselých podmínek. Rozpustnost je menši, než 0,1 ug/ml při pH < 5,34. Pro sloučeniny vykazující profil rozpustnosti závislý na pH tohoto typu neni neběžnénajit složku limitující míru rozpustnosti pro orální biologickou dostupnost. Pro dikyselinu vzorce (I) je toto' tvrzení podpořeno zjištěním, že orální biologická dostupnost u psů po intráduodenálním podávání nevodného; rozioku dikyseliny sloučeniny vzorce (I) byla přibližně 15 %, což je blízko teoretické maximální, hodnotě 18 %. i(enterohepatický extrakční poměr je 0,82). Naproti tomu orální biologická dostupnost u psů po orálním dávkování 'jednoduché zakapsulované kompozice dikyseliny vzorce (I) byla pouze 3,9 %. Za účelem překonání omezení souvisejících: s mírou rozpustnosti a pro 'zvýšení orální biologické dostupnosti byly studovány různé soli.';

neočekávaně zjištěno, že nově připravená sůl vzorce (I) vykazuje zvýšenou biologickou; srovnání s disodnou solí nebo kompozicemi .Nyní bylo monoarginylová dostupnost ve

·· -i

• · ♦ · • · dikyseliny zvyšujícími rozpustnost, tj. těmi, kde je; obsaženo povrchově aktivní činidlo Tween 80 samostatně nebo v kombinaci s pufrovacím činidlem N-methylglukaminem.. Průměrná procentická orální biologická dostupnost byla 13,3 %, která je srovnatelná s intradoudenélním dávkováním: nevodného roztoku disodné formy. Srovnávací data testování biologické dostupnosti jsou uvedena v tabulce l.i

Tabulka 1

Testy biologické dostupnosti prováděné u psů za použití kompozic a solí vzorce (I)i

Podávaná forma	Podávaná kompozice	Průměrné % orální biologické dostupnosti ± směrodatná odchylka
Disodná sůl	Nevodný roztok3	14,5b
Dikyselina	Kapsle0	3,9 ± 0,5
Dikyselina	Kapsle s 0,5 % Tween 80d	2,3 + 3,7
Dikyselina	Kapsle s 0,5 % Tween 80 & 2 Meq NMGd	6,3 ± 5,3
Disodná sůl	Kapslec	6,2 ± 4,1
Monoarginylová sůl	Kapsle0	13,8 ± 7,6

Roztok obsahoval 99 % PEG 4 00 a 1 % DMSO a byl:

dávkován intaduodenálně.

^b · Podáváno pouze 2 zvířatům/ ;^c Kompozice také obsahovala mikrokrystalickou celulózu jako ředidlo.:

;^d Kompozice také obsahovala mikrokrystalickou celulózu, laktózu a škrob.;

• 8 • 8

* ·

- 5 - .

Jak je uvedeno v tabulce 2, monoarginylová sůl byla; minimálně hygroskopická, absorbovala pouze 2,3 % vlhkosti za relativní vlhkosti 0 až 90 %. Byla o něco vícehygroskopická než forma dikyseliny a podstatně méně hygroskopická než amorfní forma disodné soli. Zrychlené; testy stability prováděné s monoarginylovou solí ukazují, že je chemicky stabilní po dobu alespoň tří týdnů při; ^skladování při 50 °C.

Tabulka 2;

Testy hygroskopicity pro díkyselinu a disodnou sůl a monoarginylovou sůl vzorce li

	% nabrané vlhkosti při	25 °Ca
% relativní vlhkosti	dikyselina	disodná sůl	monoargininová sůl
0	0	0	0
10 ~	0,077	1,849	0,261
20	0,088	2,838	0,382
30	0,126	3, 821	0,26
4 0	0,184	5,013	0,689
50	0,24 5	6, 773	0,827
60	0,316	10,188	. 0,982
70	0,395	15,919	1,092
80	0,509	22,472	1,434
90	0,518	33,671	2,334

Měřeno na analyzátoru dynamické sorpce par jakoi i přírůstek hmotnosti vzorku

Předmětem tohoto vynálezu jsou také farmaceutické:

kompozice mající aktivitu antagonisty endothelinového receptoru, které obsahují farmaceutický nosič a aktivní alei ^netoxické množství morioarginylové soli sloučeniny vzorce i

··

Pro použití pro léčení lidí a ostatních savců je'; monoarginylová sůl sloučeniny vzorce (I) obvykle formulována v souladu s běžnou farmaceutickou praxí jako farmaceutická kompozice.

Monoarginylová sůl vzorce (I) může být podávána běžným, způsobem pro léčení uvedených chorob, například orálně, parenterálně, sublinguálně, transdermálně, rektálně, pomocí inhalace, okulárním podávání nebo bukálním podáváním.

Monoarginylová sůl vzorce (I) při orálním podávání; může být formulována jako sirup, tableta, kapsle nebo pastilka. Sirup bude obecně sestávat ze suspenze neboi roztoku sloučeniny v kapalném nosiči, například ethanolu, podzemnicovém oleji, olivovém oleji, glycerinu nebo vodě s ochucovacími činidly a barvivý. Pokud je kompozice ve formě tablety, může být použit jakýkoli farmaceutický nosič'· běžně používaný pro přípravu pevných kompozic. Příklady těchto nosičů zahrnují stearát hořečnatý, bílou hlinku,, mastek, želatinu, agar, pektin, arabskou gumu, celulózu, mannitol, kyselinu stearovou, škrob, laktózu a sacharózu.. Pokud je kompozice ve. formě kapsle, je vhodný jakýkoli běžný způsob zapouzdření, například za použití výše uvedených nosičů v tvrdé želatinové kapsli. Pokud je kompozice ve formě měkké želatinové kapsle, je možno použít; jakýchkoli běžných farmaceutických nosičů pro přípravu disperzí nebo roztoků, jako jsou například vodné gumy, (celulózy, silikáty nebo oleje, které jsou zavedeny do měkké želatinové kapsle.;

‘Typické parenterální kompozice sestávají z roztoku nebo suspenze sloučeniny ve sterilním vodném nebo nevodném'; -nosiči případně obsahujícím parenterálně přijatelný olej, například polyethylenglykol, polyvinylpyrrolidon, lecithin, podzemnicový olej a sezamový olej.

:- 7 Typické kompozice pro inhalaci jsou ve formě roztoku,', suspenze nebo emulze, které mohou být podávány jako suchý prášek nebo ve formě aerosolu za použití běžného nosného plynu, jako je dichlordifluormethan nebo trichlorf luormethan iTypická kompozice pro čípek zahrnuje monoarginylovou sůl vzorce (I) s matricovým a/nebo lubrikačním činidlem,, například polymerními glykoly, želatinami, kakovým máslem nebo jinými rostlinnými vosky nebo tuky s nízkým bodem tání: nebo s jejich syntetickými analogy.

Typické transdermální kompozice zahrnují konvenční' ívodné nebo nevodné nosiče, například pro krém, mast, lotion nebo pastu, nebo jsou ve formě medicinální náplasti,'polštářku nebo membrány..

Typické oftalmické kompozice jsou isotonickými roztoky· pufrovanými do neutrálního pH v rozmezí 6,5 až 7,8; například citrátový pufr vytváří izotonický. roztok: s chloridem sodným.

.Výhodně je kompozice v jednotkové dávkové formě, například ve formě tablety, kapsle nebo odměřené aerosolové; dávce, takže pacient si sám může naměřit jednotkovou dávku.

Každá dávkovači jednotka pro orální podávání obsahuje: '.vhodně od 0,1 mg do 500 mg/kg a výhodně od 1 mg do 100 mg/kg, každá dávkovači, jednotka pro parenterální; podávání obsahuje vhodně od 0,1 mg do 100 mg monoarginylové soli vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli; přepočteno na volnou kyselinu. Každá dávkovači jednotka pro intranasální podávání obsahuje vhodně 1 až 4 00 mg a výhodně . 10 až 200 mg na osobu. Topické kompozice obsahují vhodně 0,01 až 1,0 % monoarginylové soli sloučeniny vzorce (I)..

.Denní dávkovači režim pro orální podávání je vhodně asi 0,01 mg/kg až, 40 mg/kg monoarginylové soli vzorce (I):

• ♦ • 4 nebo její farmaceuticky přijatelné soli přepočteno na: volnou kyselinu. Denní dávkovači režim pro parenterální podávání je vhodně asi 0,001 mg/kg až 40 mg/kg; monoarginylové soli sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli, přepočteno na volnou kyselinu. Denní dávkovači režim pro intranasální podávání a orální inhalaci je vhodně asi 10 až asi 500 mg/osobu..:· Aktivní složka může být podávána od 1 do 6 krát denně, dostatečně k vykázání požadované aktivity.:

Pokud se sloučenina podává v souladu s tímto vynálezem, neočekávají se žádné nepřijatelné toxikologické: účinky.

i Biologická účinnost monoarginylové soli sloučeniny vzorce (I) byla testována následujícím testem::

:Testy biologické dostupnosti

Byli použiti čtyři samci beagla (přibližná hmotnost 10' až 15 kg). Test byl proveden jako křížový ve třech dnech a zvířata byla ponechána v klidu po dobu jednoho týdne mezi. každým experimentem. Na zvířatech byl proveden. CBC screening před každým testovacím dnem k získání základních: hodnot a zajištění hematologických hodnot. V každém dni testu byl - zaveden katetr do cefalické žíly pro odebírání: vzorků krve. Třetí den (testovací den tři) byl také zaveden do safenózní žíly katetr pro i.v. podávání. Zvířata byla: uvázána přes noc před ošetřením a potrava byla připravena po 240 min odebrání krevních vzorků. V prvním a druhém dni. provádění testu (orální dávkování) byli psi upoutání v postrojích po dobu přibližně 1 hodiny a poté přepraveni: do metabolických klecí. Ve třetím testovacím dni byli psi upoutání v postrojích po dobu 2 hodin během testu a poté: převedeni do metabolických klecí. Zvířata byla umístěna do individuálních klecí v pokojích s jednosměrně proudícím'

,

- 9 • Φ Φ· » φ φ * » φ φφ » · · « » · · « • Φ ·· » · φ « » · · <

• Φ ·· vzduchem za regulované teploty (22 + 2 °C a relativní, vlhkosti (50 ± 10 %) a 12h cyklech světlo/tma (6.00 18.00). Psi byly aklimatizování po dobu alespoň 5 .dnů přeď experimentem a krmeni kromě noci před dávkováním. Přefiltrovaná vodovodní voda byla k dispozici podle: libosti.

Zvířata byla uvázána před podáváním sloučeniny. Potrava byla poskytnuta po odebrání vzorků krve (240 min)

'.Příprava dávkovaných roztoků a postup dávkování

Pro první -orální podávání byla. monoarginylová sůl ^sloučeniny vzorce I triturována skleněným tlouč.kem ve skleněné misce pro získání jednotné velikosti' částic.; iSloučenina a Avicel PH 102 byly smíchány vpoměru 50 : 50 a zapouzdřeny do bílé'neprůhledné želatinové kapsle (velikost 00) .

)Pro druhé orální podávání byla pevná dikyselina vzorce (I) triturována skleněným tloučkem.ve skleněné misce ik zí-skání jednotné velikosti částic. Sloučenina a Avicel PH 102 byly smíchány v poměru 50 : 50 a naplněny do bílé' 'neprůhledné želatinové kapsle (velikost 00) .

Dávkovači roztok pro i.v. podávání byl připraven.

:v injektovatelném fyziologickém roztoku obsahujícím méně než 3 % ethanolu.;

;Ve zkušebním dni jedna dostala dvě zvířata monoarginylovou sůl sloučeniny vzorce (I) (16,2 umol) [10 mg]/kg cílové dávky) v želatinové kapsli a další dvě zvířata dostala dikyselinu vzorce (I) (16,2 umo! [10 mg]/kg^: icílové dávky) v želatinové, kapsli.

Ve zkušebním dni dva byly použity stejné kompozice,; iale zkušební zvířata byla vzájemně .zaměněna a byla jim i

•Lh Xř '

7S

·· ··

podávána opačná kompozice, než byla ta, kterou dostala ve; dni jedna.

Ve zkušebním dni tři psi dostali sloučeninu vzorce (I) (0,5 mg/ml injektovatelého fyziologického roztoku) jako 90 min intravenosní infusi (2,43 umol [1,5 mg]/kg cílové dávky, 2 ml/kg/h, 3 ml/kg celkového objemu).

Odebírání vzorků krve

Vzorky krve (přibližně 0,25 ml) byly odebírány do 1 ml stříkaček z katetru cefalické žíly přibližně v časech ai objemech uvedených v níže uvedené tabulce a byly převedeny do heparinizovaných 1,5 ml Eppendorfových zkumavek.. Plazma; (50 ul) byla izolována ze vzorků krve odstředěním, převedena do Eppendorfových zkumavek a rychle zmražena na: suchém ledu. Další plazma byla zmražena a uložena. Všechny vzorky byly uloženy při asi -70 °C až do analýzy.;

Přibližný čas odběru vzorku po orálním podávání

Čas	0	5	15	30	45	60	90	120	180	240	360	480
(min)

a dále v

600

720

1440

(Celkem odebráno krve: přibližně 11,5 ml (včetně předchozích odběrů) • · » · · « » · · « •·· ··

Přibližný čas odběru vzorku po zahájení intravenózní infuze-

Čas	0	15	30	45	60	75	90	92	95	105	120
(min)

r r (počátek infuze konec infuze pokračování času odběru i.v. vzorků:

240

360

.480

600

720

1440

Celkem odebráno krve: přibližně 13,5 ml (včetně; (předchozích odběrů) (Koncentrace sloučeniny vzorce (I) ve vzorcích plazmy byla kvantifikována za použití metody HPLC/MS/MS.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1;

(Příprava monoarginylové soli kyseliny (E)-3-[l-N-butyl-5[2- (2-karboxyfenyl)methoxy-4-chlorfenyl]-lH-pýrazol-4-yl]-2-( '.[ (5-methoxy-2,3-dihydrobenzofuran-6-yl) methyl]-prop-2-enové

Ke směsi methanolu (4 1) a vody (40 ml), která byla: jzahřátá na asi 40. °C, byl přidán za míchání L-arginin ((152,25 g, 0,87 mol). Teplota byla pak zvýšena na 50 °C a suspenze byla míchána po dobu 15 minut. Byl přidán SB: ^:247083 (525 g, 0,85 mol) a suspenze byla zahřáta na asi 55 °C. Poté, co.se rozpustila veškerá pevná látka, byl: .roztok přefiltrován. Filtrát byl míchán a pomalu ochlazen na pokojovou teplotu. Po dosažení pokojové teploty byl filtrát míchán po dobu asi 1 hodiny. Výsledné krystaly byly odfiltrovány a promyty asi 200 ml methanolu. Pak byly^: • · · · ;

·· ·· · · 2 ! 2 • · · · · .· ·, ·· »· ·· ’ asi 30 'minut a poté:

- 12.- .·* • · · · krystaly vysoušeny vzduchem po dobu vysušeny za vakua při 50 až 60 °C.'

Ostré endothermy při 214,4 °C (delta H = 85 J/g) z DSC.

Příklad 2.

Příprava farmaceutické kompozice monoarginylové soli kyseliny (E)-3-[l-N-butyl-5-[2-(2-karboxyfenyl)methoxy-4-; ^;chlorfenyl]-lH-pyrazol-4-yl]-2-[ (5-methoxy-2,3dihydrobenzofuran-6-yl)methyl]-prop-2-enovéi .

'Kompozice pro farmaceutické použití zahrnující sloučeninu podle tohoto vynálezu mohou být připraveny. v různých formách a s množstvím vehikul. Příklady těchto kompozicí jsou uvedeny níže.;

.Kompozice pro inhalaci '

Sloučenina vzorce (I) (1 mg až 100 mg) byla převedena do aerosolu pomocí inhalátoru s odměřenou dávkou k podání, požadovaného množství léčiva.

Složky/ .Množství na tabletu

1. aktivní složka (sloučenina	40,0	mg:;
vzorce (I)
2. Laktóza .	40,0	mg
3. Mikrokrystalická celulóza	16,0	mg
4. Škrobový glykoláť sodný	4,0	mg
5. Povidon	5,3	mg.
6. Mikrokrystalická celulóza	89,2	mg
7. Škrobový glykolát sodný	4,0	mg
. 8. Stearát hořečnatý	1,5	mg

Celkově

200,0 mg

	«« · ·· *· • ··· · · * · ·····«	• r · ·· • · · · • · · *
	ío · ·····» . - 13 - · · · · · ·	• ·· · · < • · · · 9 · · ·
	···· 9 99 99 ♦ ·
Způsob	výroby tablet::
Krok -1	Smíchání složek č. 1, 2, 3, 4 a 5 , ve	vhodném

mixeru/směšovači.

Krok 2 Za míchání přidání vody do směsi k přípravě vlhké hmoty, poté granulace dokud se nezíská vhodná vlhká granulační směs.

.Krok 3 Převedení vlhké hmoty přes mlýn vybavený vhodnou přepážkou.'· ;Krok 4 Vysušení granulátu ve fluidní sušárně při vhodné teplotě /' ' . . . . .

iKrok 5 Přetřídění granulátu v mlýně vybaveném vhodným sítem/ ’

Krok 6 Smíchání granulí se složkami číslo 6, 7 a 8.

Krok 7 Tabletování kompozice ve vhodném tabletovacím stroji.

Parenterální kompozice;

;Farmaceutická kompozice pro parenterální podávání' byla připravena rozpuštěním vhodného množství sloučeniny vzorce; (I) v polyethylenglykolu za zahřívání. Tento roztok byl pak zředěn vodou pro injekce Ph Eur (na 100 ml). Roztok byl pak sterilizován filtrací přes membránový filtr 0,22 mikrometrů a zataven do sterilních nádobek/

Claims (16)

PATENTOVÉ NÁROKY': φφφφ η 2.000-1-102. • · Φ · • · · φ * · · φ « C · Φ φ φ« ·»

1. Monoarginylové sůl kyseliny (E)-3-.[l-N-butyl-5-[2-(2ř ^! karboxyf enyl) methoxy-4-chlorfenyl]-lH-pyrazol-4-yl]-2-[ (5methoxy-2,3-dihydrobenzofuran-6-yl)methýl]-prop-2-ěnové.

2. Farmaceutická kompozice zahrnující sloučeninu podle .nároku 1 a farmaceuticky přijatelný nosič.

3. Kompozice podle nároku 2 pro orální podávání.:

:

4. Sloučenina podle nároku.1 pro použití jako antagonista endothelinového receptoru. A

5. Způsob léčení chorob způsobených přebytkem endothelinu, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného:, množství antagonisty endothelinového receptoru podle nároku 1' subjektu, který to potřebuje.?

i

6. Způsob léčení,hypertenze, selhání ledvin nebo cerebrovaskulární choroby, vyznačující se tím, že: zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 subjektu, který to potřebuje.:

7. Způsob léčení chronického selhání ledvin, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny: podle nároku 1 subjektu, který to potřebuje.

8. Způsob léčení benigní prostatické hypertrófie,; vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 subjektu, který to potřebuje.

9. Způsob léčení městnavého srdečního selhání,;

vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle-nároku 1 subjektu, který to potřebuje.

10. Způsob léčení nestabilní angíny,: koronárního angiospazmu a salváže myokardu, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 subjektu, který to potřebuje.;

.

11. Způsob prevence nebo léčení restenózy., vyznačující setím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny, podle nároku 1 subjektu, který to potřebuje.

12. Způsob léčení pulmonářní hypertenze, vyznačující se. tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 subjektu, který to potřebuje;·

13. Způsob léčení atherosklerózy, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle; nároku 1 subjektu, který to potřebuje.

14. Způsob prevence a léčení následků diabetů,!

vyznačující se tím; že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 subjektu, který to': potřebuje. .

15. Způsob léčení mrtvice nebo subarachnoidní hernoragie, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného; množství sloučeniny podle, nároku 1 subjektu, který to potřebuje..

t

- 16- 16. Způsob výroby sloučeniny podle nároku 1 přídavkem. L·argininu ke kyselině (E) -3-[l-N-butyl-5-[2-; (2karboxyfenyl) methoxy-4-chlorfenyl]-lH-pyrazol-4-yl]-2-[ (5-í methoxy-2,3-dihydrobenzofuran-6-yl)methyl]-prop-2-enové.