CZ2000349A3 - Process of removing beta-2 microglobulin from blood - Google Patents

Process of removing beta-2 microglobulin from blood Download PDF

Info

Publication number
CZ2000349A3
CZ2000349A3 CZ2000349A CZ2000349A CZ2000349A3 CZ 2000349 A3 CZ2000349 A3 CZ 2000349A3 CZ 2000349 A CZ2000349 A CZ 2000349A CZ 2000349 A CZ2000349 A CZ 2000349A CZ 2000349 A3 CZ2000349 A3 CZ 2000349A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
blood
beads
polymer
microglobulin
groups
Prior art date
Application number
CZ2000349A
Other languages
Czech (cs)
Inventor
Andrew Braverman
Vadim Davankov
Original Assignee
Advanced Renal Technologies, Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Advanced Renal Technologies, Llc filed Critical Advanced Renal Technologies, Llc
Priority to CZ2000349A priority Critical patent/CZ2000349A3/en
Publication of CZ2000349A3 publication Critical patent/CZ2000349A3/en

Links

Landscapes

  • External Artificial Organs (AREA)

Abstract

Způsob odstraňování beta- 2 mikroglobulinu z krve sestává z kroků odnímání krve z pacienta, průchodu krve materiálem, jehož velikost a strukturajsou zvoleny tak, aby byl z krve odstraňován beta - 2 mikroglobulin, a opětné zavádění krve, ze které byl odstraněn beta - 2 mikroglobulin, do pacienta. Průchod krve s výhodou zahrnuje průchod krve materiálem, obsahujícím hyperzesíťované pryskyřice polystyrénového typu, s povrchem kuliček modifikovaným tak, aby zabraňoval absorpci velkých bílkovin a krevních destiček a aby minimalizoval aktivaci krevního doplňkového sytému, aniž by znatelně ovlivňoval přístupnost vnitřního absorpčního prostoru kuliček pro malé a středně velké molekuly jedovatých látek.The method of removing beta-2 microglobulin from blood consists from the steps of removing blood from the patient, passing blood through the material, whose size and structure are chosen to be blood removing beta-2 microglobulin, and re-introducing blood, from which the beta-2 microglobulin has been removed from the patient. The passage of blood preferably includes the passage of blood through the material, containing polystyrene hyper-crosslinked resins type, with the surface of the balls modified to prevent absorption of large proteins and platelets and make minimizing the activation of the blood supplemental system without significantly affect the accessibility of the internal absorption space balls for small and medium sized poisonous molecules substances.

Description

Způsob odstraňování beta-2 mikroglobulinu z krveA method for removing beta-2 microglobulin from blood

Oblast technikyTechnical field

Předložený vynález se týká způsobu odstraňování beta - 2 mikroglobulinu z krve.The present invention relates to a method of removing beta-2 microglobulin from blood.

Dosavadní stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION

Beta-2 mikroglobulin, bílkovina, se nachází ve značně vysokých koncentracích v pacientech s chronickým selháním ledvin nebo s trvalou dialýzou. Beta-2 mikroglobulin je u zdravého jedince odstraňován endocytózou ledvinami v proximálních trubicích. Molekulou je ko-dimer v dimerické struktuře třídy-1 HLA antigenů. Tyto antigeny se nacházejí ve vysoké koncentraci v lymfocytech a jsou nalézány ve všech jaderných savčích buňkách. U pacientů se špatnou funkcí ledvin se beta-2 mikroglobulin akumuluje od 40ti až do 60ti násobku normálu. Akumulace beta-2 mikroglobulinu je základem počátku s dialýzou spojené amyloidózy, to znamená ukládáním amyloidu v tkáních. To je klinická podstata věci, která způsobuje vznik artropatie a neuropatie (postižení kloubů a nervů). Primárním účinkem je silná destrukce kloubu a bolest. U mnoha pacientů je vyžadován opravný chirurgický zákrok, jako například karpální tunelová laminektomie nebo laminektomie krční páteře. Navíc se vyžaduje použití analgetik (látek pro utišení bolesti) a protizánětlivých léků, aby bylo možno léčit symptomy DRA.Beta-2 microglobulin, a protein, is found at very high concentrations in patients with chronic renal failure or permanent dialysis. Beta-2 microglobulin in a healthy individual is removed by endocytosis by the kidneys in the proximal tubes. The molecule is a co-dimer in the dimeric structure of class-1 HLA antigens. These antigens are found in high concentrations in lymphocytes and are found in all nuclear mammalian cells. In patients with renal impairment, beta-2 microglobulin accumulates from 40 to 60 times normal. The accumulation of beta-2 microglobulin is the basis of the onset of dialysis-associated amyloidosis, i.e., deposition of amyloid in the tissues. This is the clinical nature of the cause that causes arthropathy and neuropathy (joint and nerve involvement). The primary effect is severe joint destruction and pain. Many patients require corrective surgery, such as carpal tunnel laminectomy or cervical spine laminectomy. In addition, the use of analgesics and painkillers is required to treat the symptoms of DRA.

Byly prováděny pokusy odstraňovat beta-2 mikroglobulin, jak je například zveřejněno v článku A new Therapeutic Approach to Dialysis Amyloidosis: Intensive Removal of β2 - Microglobulin with Adsorbent Column (Nový terapeutický přístup k amyloidóze dialýzy: Intenzívní odstraňování β2 - Mikroglobulinu pomocí adsorpčního sloupce) autorů Fumitake Geiyo, Noriyuki Homma, Shin Hasegawa a Massaaki Arakawa, který byl publikován oddělením interního lékařství Department of Internal Medicine (II) při Niigata University School of Medicine v Niigata v Japonsku.Attempts have been made to remove the beta-2 microglobulin, as for example disclosed in the article A New Therapeutic Approach to Dialysis Amyloidosis: Intensive Removal of β 2 - microglobulin with adsorbent column (novel therapeutic approach to amyloidosis, dialysis Strong removing β 2 - microglobulin through adsorption column ) by Fumitake Geiyo, Noriyuki Homma, Shin Hasegawa, and Massaaki Arakawa, published by the Department of Internal Medicine (II) at Niigata University School of Medicine in Niigata, Japan.

·· ······ ftft ftft • · · ftft · · ft · · • ftft ftft · ftftftft ft · ftft ftft · · ftftft ft· · • · ftftftft ftftftft • ftft · ftft ·· ftft ··· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION

Předmětem tohoto vynálezu je způsob odstraňování beta-2 mikroglobulinu, který je dalším zlepšením známého existujícího způsobu.It is an object of the present invention to provide a method for removing beta-2 microglobulin, which is a further improvement of the known existing method.

Se zřetelem k tomuto účelu a k dalším, které budou vysvětleny v následujícím popisu, jeden z rysů tohoto vynálezu spočívá, stručně řečeno, ve způsobu odstraňování beta-2 mikroglobulinu, podle kterého prochází krev porézním materiálem, který má velikost pórů a strukturu zvolenou tak, aby docházelo k odstraňování beta-2 mikroglobulinu z krve.With this in mind and others to be explained in the following description, one feature of the present invention consists, in short, of a method for removing beta-2 microglobulin by passing blood through a porous material having a pore size and structure selected to beta-2 microglobulin was removed from the blood.

V souladu s výhodným provedením tohoto předloženého vynálezu je velikost pórů materiálu zvolena tak, že se nachází v rozsahu od 1 do 10 nm, a struktura materiálu je zvolena tak, že hydrofóbní povrch v těchto pórech by měl být obnažen vůči molekulám střední velikosti. Hydrofóbní mikroporézní a mezoporézní polymerické materiály jsou nejvhodnější k odstraňování beta-2 mikroglobulinu. Tyto materiály mohou rovněž obsahovat dopravu zlepšující makropóry, jejichž povrch však musí být upraven tak, aby byl biokompatibilní, tak jako zbývající povrch kuliček polymeru.According to a preferred embodiment of the present invention, the pore size of the material is selected to be in the range of 1 to 10 nm, and the structure of the material is selected such that the hydrophobic surface in these pores should be exposed to medium size molecules. Hydrophobic microporous and mesoporous polymeric materials are most suitable for removing beta-2 microglobulin. These materials may also contain transport-improving macropores, but the surface of which must be treated to be biocompatible, as well as the remaining surface of the polymer beads.

Jestliže je uvedený způsob prováděn podle tohoto předloženého vynálezu, dochází k účinnému odstraňování beta-2 mikroglobulinu z krve.When the method is carried out according to the present invention, beta-2 microglobulin is effectively removed from the blood.

Nové účinky, které jsou považovány za charakteristické pro tento předložený vynález, jsou vyloženy zejména v patentových nárocích. Vynález sám o sobě však, jak co své konstrukce, tak i způsobu své činnosti, společně s dalšími svými předměty a výhodami, bude lépe pochopen z následujícího popisu konkrétních provedení.The novel effects which are considered to be characteristic of the present invention are set forth in particular in the claims. However, the invention per se, both in its construction and mode of operation, together with other objects and advantages thereof, will be better understood from the following description of specific embodiments.

Příklady provedení vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

V souhlase s předloženým vynálezem je navržen způsob odstraňování beta-2 mikroglobulinu z krve. Krev pacienta je odebírána z přístupného místa arteriálního krevního oběhu, prochází polymerem, který odstraňuje beta-2 mikroglobulin, a opět vstupuje do pacienta v přístupném žilním místě. Polymer má takovou velikost pórů a • · • · · ·· to · to to · • · · · · to · to to · ·····♦· · ♦ · · ·· · • · ···· ···· «·· · ·· ·· ·· ·· strukturu, která umožňuje odstraňování beta-2 mikroglobulinu. S výhodou je velikost pórů polymeru v rozmezí od 1 do 2 nm.In accordance with the present invention, there is provided a method of removing beta-2 microglobulin from blood. The patient's blood is drawn from an accessible arterial blood circulation site, passed through a polymer that removes beta-2 microglobulin, and re-enters the patient at an accessible venous site. The polymer has such a pore size, and it has a pore size, and it has a pore size. A structure that allows the removal of beta-2 microglobulin. Preferably, the pore size of the polymer is in the range of 1 to 2 nm.

Polymery pro daný účel mohou být s výhodou vytvořeny na bázi styrenů, akrylátů, nebo to mohou být jakékoli jiné polymery, které vyhovují výše uvedeným podmínkám.The polymers for the purpose may preferably be based on styrene, acrylates, or any other polymers that meet the above conditions.

Jedním z příkladů materiálu, kterým může procházet krev za účelem odstraňování beta-2 mikroglobulinu, je sorbent pro odstraňování toxických látek z krve nebo plasmy, který obsahuje množství kuliček z pryskyřice typu polystyrenu s hyperzesíťovanou strukturou. Tyto kuličky mají povrch modifikovaný tak, že zabraňuje adsorpci velkých bílkovin a destiček (plateíetu) a minimalizuje aktivaci doplňkového krevního systému, aniž by se znatelně ovlivňovala přístupnost vnitřního adsorpčního prostoru kuliček pro malé a střední molekuly jedovaté látky.One example of material that blood can pass through to remove beta-2 microglobulin is a sorbent for removing toxic substances from blood or plasma, which comprises a plurality of beads of a polystyrene type resin with a hypercrosslinked structure. These beads have a surface modified to prevent the adsorption of large proteins and platelets and minimize activation of the complementary blood system without appreciably affecting the accessibility of the internal adsorption space of the beads to small and medium-sized toxic substances.

Aby bylo dosaženo požadované chemické modifikace povrchu kuliček, které mají sloužit pro zlepšení hemokompatibility materiálu, je jedním možným přístupem vytváření vrstev podobných tuku na povrchu polystyrénových kuliček, které by simulovaly strukturu biomembrán. Kopolymery 2-methakryloyloxyethylephosphorylcholinu s n-butyl-metakrylátem mohou být roubovány na povrchu těchto materiálů. Bylo ukázáno, že kopolymer adsorbuje volné fosfolipidy z krve a vytváří organizovanou strukturu, podobnou dvouvrstvé membráně. Je pravděpodobné, že jsou tak vytvářeny membránovité povrchy, které snižují adsorpci bílkovin a krevního plateíetu (krevních destiček) a způsobují, že materiál se stává více biokompatibilním. Podle našeho přístupu dochází k vytváření phosphatidylcholinu na povrchu polystyrénových kuliček, aniž by přitom docházelo k předběžnému roubování hydrofilního kopolymeru, jak uvádí Ishihara a kol.In order to achieve the desired chemical modification of the bead surface to serve to improve the hemocompatibility of the material, one possible approach is to form fat-like layers on the surface of the polystyrene beads that simulate the structure of the biomembranes. Copolymers of 2-methacryloyloxyethylephosphorylcholine with n-butyl methacrylate can be grafted on the surface of these materials. The copolymer has been shown to adsorb free phospholipids from the blood and to form an organized structure similar to a two-layer membrane. This is likely to create membrane surfaces that reduce the adsorption of proteins and blood platelets (platelets) and make the material more biocompatible. In our approach, phosphatidylcholine is formed on the surface of polystyrene beads without pre-grafting the hydrophilic copolymer, as reported by Ishihara et al.

Druhý přístup spočívá v nanášení heparinu na povrch polystyrénových kuliček. To může být prováděno několika způsoby, včetně (I) chemické kovalentní vazby heparinu na polystyrénové řetězce na povrchu kuliček, anebo (II) elektrostatické adsorpce heparinových molekul, které jsou nabity záporným nábojem, na kladně nabité ionogenické skupiny , zavedené do povrchové vrstvy kuliček. Heparin inhibuje aktivaci krevního doplňkového systému a zabraňuje vytváření sraženin.The second approach is to deposit heparin on the surface of polystyrene beads. This can be accomplished in several ways, including (I) chemical covalent binding of heparin to polystyrene chains on the bead surface, or (II) electrostatic adsorption of negative charge heparin molecules to positively charged ionogenic groups introduced into the bead surface layer. Heparin inhibits the activation of the blood supplementary system and prevents the formation of clots.

·· · ·· · · · · · • · · ·· · · · · · • ···· · · · · · · · · · • · ···· ···· ·· · · · · ·· · · ····················································· ·· · · ··

Dalším možným přístupem je vázání dlouhých hydrofilnich polymerových řetězců na povrch kuliček, které by zabraňovaly kontaktu mezi krevními bílkovinami a buňkami s hydrofobním povrchem polystyrenu.Another possible approach is to bind long hydrophilic polymer chains to the surface of the beads to prevent contact between blood proteins and cells with the hydrophobic surface of the polystyrene.

Konečně, čtvrtým přístupem je nanášení fluorovaného polyalkoxyphosphazenu s vysokou molekulární hmotností na vnějším povrchu kuliček. Phosphazen představuje nejlepší biokompatibilní polymerní materiál. Modifikace sorbentního povrchu spočívá ve styku polystyrénových kuliček s odpovídajícím množstvím roztoku polyphosphazenu v organickém rozpouštědle. Vzhledem ke schopnosti polystyrenu s hyperzesíťovanou strukturou silně nabobtnat v rozpouštědle, tento se po velmi krátkém čase objevuje zcela zabudován v kuličkách, kdežto rozpuštěný polyphosphazen zůstává usazený na povrchu kuliček. Rozpouštědlo, přimíšené v kuličkách, je potom odstraněno ohříváním kuliček při sníženém tlaku. Velký rozměr polyphosphazenových molekul, použitých v této proceduře, zabraňuje jejich pronikání do pórů kuliček. Proto zůstává celý vnitřní povrch materiálu aktivní a přístupný pro krevní jedovaté látky, kdežto vnější povrch je obnažen pro krevní bílkoviny a buňky, nerozpustné ve vodě a biokompatibilní polyphosphazen.Finally, a fourth approach is to deposit a high molecular weight fluorinated polyalkoxyphosphazene on the outer surface of the beads. Phosphazen is the best biocompatible polymer material. The modification of the sorbent surface consists in contacting the polystyrene beads with a corresponding amount of a solution of polyphosphazene in an organic solvent. Due to the ability of polystyrene with a hypercrosslinked structure to swell strongly in a solvent, it appears completely embedded in the beads after a very short time, while the dissolved polyphosphazene remains deposited on the surface of the beads. The solvent admixed in the beads is then removed by heating the beads under reduced pressure. The large size of the polyphosphazene molecules used in this procedure prevents their penetration into the pores of the beads. Therefore, the entire inner surface of the material remains active and accessible to blood poisonous substances, while the outer surface is exposed for water-insoluble blood proteins and cells and biocompatible polyphosphazene.

Chemická modifikace povrchu pohlcujících kuliček, ke které dochází v případě prvních třech výše uvedených modifikačních přístupů, je usnadněna pozoruhodnou zvláštností hyperzesíťovaného polystyrenu, zejména skutečností, že reaktivní funkční skupiny polymeru jsou převládajícím způsobem umístěny na jeho povrchu. Hyperzesíťovaný polystyren je obecně připravován zesíťováním polystyrénových řetězců s velkým množstvím bifunkčních sloučenin, zvláště těch, které nesou dvě reaktivní chlorometylové skupiny. Ty alkylují ve dvou reakčních krocích, a to na dvě fenylové skupiny nejbližších polystyrénových řetězců tak, jak odpovídá FriedelCraftově reakci, při vyvinutí dvou molekul HCI a vytvoření křížového můstku. Trojrozměrná síť, vytvářená během zesíťovací reakce, získává tuhost. Tato vlastnost pozvolna snižuje rychlost druhého kroku zesíťovací reakce, jelikož snížená mobilita odpovídající druhé funkční skupiny počátečních zesíťovacích reagentů způsobuje , že je stále těžší a těžší nalézt vhodného druhého účastníka alkylizační reakce. To je speciální znak druhých funkčních skupin, které jsou právě obnaženy na povrchu kuličky. Tedy v nezreagovaných chlorometylových skupinách v konečném hyperzesíťovaném polymeru je největší část, či spíše většina skupin umístěna naThe chemical modification of the surface of the absorbent beads that occurs in the first three above-mentioned modification approaches is facilitated by the remarkable peculiarity of the hypercrosslinked polystyrene, in particular by the fact that the reactive functional groups of the polymer are predominantly located on its surface. Hyperlinked polystyrene is generally prepared by crosslinking polystyrene chains with a large number of bifunctional compounds, especially those bearing two reactive chloromethyl groups. These alkylate in two reaction steps, to the two phenyl groups of the nearest polystyrene chains, as in the FriedelCraft reaction, to develop two HCl molecules and to form a cross bridge. The three-dimensional network formed during the crosslinking reaction gains stiffness. This property slowly decreases the rate of the second step of the crosslinking reaction, as the reduced mobility of the corresponding second functional group of the initial crosslinking reagents makes it increasingly difficult and harder to find a suitable second participant in the alkylation reaction. This is a special feature of the other functional groups that are just exposed on the surface of the ball. Thus, in the unreacted chloromethyl groups in the ultimate hypercrosslinked polymer, the largest part, or rather the majority of the groups, is located on the

4 94 9

4 94 9

4 4 · ·4 4 · ·

4 44 9 44 44 9 5

44 povrchu kuličky (anebo na povrchu velkých pórů). Tato okolnost umožňuje převažující modifikaci povrchu polymerových kuliček tím, že zahrnuje výše uvedené chlorometylové skupiny do různých chemických reakcí, které jsou předmětem tohoto předloženého vynálezu.44 (or on the surface of large pores). This circumstance allows for a predominant modification of the surface of the polymer beads by including the above chloromethyl groups in the various chemical reactions of the present invention.

Následující příklady jsou zde uvedeny proto, aby osvětlily, avšak nijak neomezovaly tento vynález. Obecně řečeno, příklady a s nimi spojené přípravné protokoly, ilustrují modifikace povrchu mikroporéznich a biporézních hyperzesíťovaných polystyrénových kuliček, připravených rozsáhlým zesíťováním odpovídajících styren - divinylbenzenových kopolymerů, využívajících monochlorodimethyl eterjako bifunkční reagent, případně využívajících další konvenční chlorometylační a postzesítěné protokoly. Obsah reziduálních chlorometylových skupin v polystyrénových kuličkách dosahuje 0,5 - 1,0% CL pro mikroporézní a až do 7% pro biporézní materiály. Kuličky počátečního materiálu by měly být s výhodou sférické a hladké, aby se minimalizovala možná poškození hematocytů.The following examples are provided to illustrate but not limit the invention. Generally speaking, the examples and the associated preparation protocols illustrate surface modifications of microporous and biporous hypercrosslinked polystyrene beads prepared by extensive crosslinking of the corresponding styrene-divinylbenzene copolymers using monochlorodimethyl ether as a bifunctional reagent, optionally using other conventional chloromethylation and post-conversion protocols. The content of residual chloromethyl groups in polystyrene beads reaches 0.5 - 1.0% CL for microporous and up to 7% for biporous materials. Preferably, the beads of the starting material should be spherical and smooth to minimize possible damage to the hematocytes.

Sorbenty, připravované v souhlasu s tímto předloženým vynálezem, jsou plněny do kolony nebo servisního náboje. Kolona by měla být s výhodou opatřena vstupem a výstupem, navrženými tak, aby bylo usnadněno propojení s krevním oběhem. Dále by měla být opatřena dvěma porézními filtry, umístěnými mezi vstupem a sorbentní vrstvou, a dále mezi sorbentní vrstvou a výstupem. Kolona může být zhotovena z biokompatibilního materiálu, skla, polyethylenu, polypropylenu, polykarbonátu, polystyrenu. Z těchto uvedených materiálů jsou výhodné zejména polypropylen a polykarbonát, protože kolona, vyplněná sorbentem, může být sterilizována (například se jedná o autokláv nebo o sterilizaci gamma-ozářením) před použitím.The sorbents prepared in accordance with the present invention are packed into a column or service hub. The column should preferably be provided with an inlet and an outlet designed to facilitate communication with the blood stream. Further, it should be provided with two porous filters located between the inlet and the sorbent layer, and further between the sorbent layer and the outlet. The column may be made of biocompatible material, glass, polyethylene, polypropylene, polycarbonate, polystyrene. Of these materials, polypropylene and polycarbonate are particularly preferred since the column packed with sorbent can be sterilized (e.g. autoclave or gamma irradiation) prior to use.

Kolona nebo náboj je pak vyplněna jednoprocentním roztokem bílkoviny lidského séra (tekutá složka krve, která se odděluje od krevní sraženiny) v normálním fyziologickém roztoku a uskladněna pri teplotě 4°C. Jakmile je připravena k použití, je kolona vypláchnuta 0,9% -ním roztokem NaCl, do kterého byl přidán vhodný antikoagulant jako například ACD-A, obsahující heparin v účinném množství. Pro náboj o objemu 250 ml jde o přibližně jeden litr roztoku chloridu sodného , do kterého se přidává 150 ml ACD-A, obsahujícího 6000 jednotek heparinu.The column or charge is then packed with a 1% solution of human serum protein (the liquid component of the blood that separates from the blood clot) in normal saline and stored at 4 ° C. Once ready for use, the column is flushed with a 0.9% NaCl solution to which a suitable anticoagulant such as ACD-A containing heparin in an effective amount has been added. For a 250 ml cartridge, this is approximately one liter of sodium chloride solution to which 150 ml ACD-A containing 6000 units of heparin is added.

····

0 00 0 00000 00 0 0000

000 00 0 0000000 00 0 0000

0000000 0 000 00 00000000 0 000 000 0

0 0000 00000000 0000

000 0 00 00 00 00 • · 00« 0000 0 00 00 00 00 00

Obvykle mohou být použity následující dva typické mimotělní systémy krevního oběhu:Typically, the following two typical extracorporeal circulation systems may be used:

(i) Krev, odebíraná z cévy pacienta, protéká v nuceném oběhu kolonou, vyplněnou sorbentem podle tohoto předloženého vynálezu, a vyčištěná krev se navrací do cévy pacienta.(i) Blood drawn from a patient's blood vessel flows in a forced circulation column filled with a sorbent of the present invention, and the purified blood is returned to the patient's blood vessel.

(ii) Krev, odebíraná z pacienta, je nejprve separována pomocí separační membrány, odstřeďováním, anebo podobně na hemocyty a plasma, načež takto separovaná plasma je pak proháněna kolonou, vyplněnou sorbentem podle tohoto předloženého vynálezu, aby z ní byly odstraněny jedovaté látky; pak je vyčištěná plasma z kolony promíchávána se separovanými hemocyty, a směs se vrací do cévy pacienta.(ii) Blood collected from the patient is first separated by a separation membrane, centrifugation, or the like into hemocytes and plasma, and then the separated plasma is then passed through a sorbent-filled column of the present invention to remove toxic substances therefrom; then the purified plasma from the column is mixed with the separated hemocytes, and the mixture is returned to the patient's vessel.

Z těchto dvou způsobů je posledně uvedený praktičtější vzhledem k menším ztrátám hemocytů a například s ohledem na adhezi krevních destiček a erytrocytů.Of these two methods, the latter is more practical due to the less loss of hemocytes and, for example, with respect to the adhesion of platelets and erythrocytes.

Jakékoli další způsoby promývání krve nebo promývání plasmy lze použít s modifikovanými sorbenty podle tohoto předloženého vynálezu. Zvláště nadějným se zdá výše zmíněný návrh Boddena (USA patent č. 5,089,662 z prosince 1991), podle kterého vysoké koncentrace protirakovinných činidel jsou promývány játry nebo jiným tělesným orgánem, obsahujícím tumor a pak vytékající krev je podrobena mimotělnímu promývání krve, aby se odstranil přebytek léků než se krev vrací do systému krevního oběhu pacienta. Další perspektivní systém je podle Shettigera a kol. (USA patent č. 5,211,850 z roku 1993), kde bylo navrženo dosažení jak konvektivního, tak i difusního transportu plasmy membránou s dutými vlákny přes uzavřenou komoru se sorbentem a poté zpět do kanálu s vlákny. Komora by mohla být vyplněna sorbentem podle tohoto předloženého vynálezu.Any other methods of blood washing or plasma washing can be used with the modified sorbents of the present invention. Particularly promising is the above-mentioned Bodden proposal (US Patent No. 5,089,662 of December 1991) that high concentrations of anticancer agents are washed by the liver or other body containing the tumor and then the blood leaking is subjected to an extracorporeal blood wash to remove excess drugs. before the blood returns to the patient's blood circulation system. Another perspective system is, according to Shettiger et al. (US Patent No. 5,211,850 of 1993), which proposed to achieve both convective and diffuse transport of plasma through a hollow fiber membrane through a closed sorbent chamber and then back into the fiber channel. The chamber could be filled with a sorbent according to the present invention.

Obecně řečeno, sorbenty typu modifikovaného hyperzesíťovaného polystyrenu podle tohoto předloženého vynálezu, mají za účel nahradit při postupech promývání krve a promývání plasmy veškeré druhy aktivního uhlí. Nový materiál je mechanicky stabilní a neuvolňuje jemné částice (fines), které mohou způsobit embolii; je daleko více hemokompatibilní, vykazuje vyšší sorpční schopnosti v širokém rozsahu pro krev jedovatých látek, a může být v principu regenerovatelný a znovu využitelný.Generally speaking, the modified hypercrosslinked polystyrene type sorbents of the present invention are intended to replace all types of activated carbon in the blood and plasma washing processes. The new material is mechanically stable and does not release fines that can cause embolism; it is far more haemocompatible, exhibits higher sorption capabilities over a wide range for the blood of poisonous substances, and can in principle be regenerable and reusable.

• · ····• · ····

Adsorpční spektrum modifikovaných hyperzesíťovaných polystyrénových sorbentů podle tohoto předloženého vynálezu se rozšiřuje na látky s molekulární hmotností v rozsahu mezi 100 a 20,000 daltony. K maximální adsorpci dochází u molekul s hmotností v rozsahu mezi 300 a 5,000 daltony, které jsou klinicky identifikovány jako střední molekuly, a které jsou přítomny v abnormálním množství u ureamických a jiných pacientů a jsou ne zcela úplně odstraňovány konvenčními postupy hemodialýzy. Takové sloučeniny, jako jsou kreatinin, barbiturát, phenobarbital, salicylát sodný, amphetaminy, síran morfinu, meprobamat, glutethimid a další, mohou být účinně a rychle odstraňovány z krve s použitím mikroporézních a biporézních sorbentů. (Aby se předešlo odnímání užitečných léků z krve během promývání krve na nových sorbentech, mohou být tyto sorbenty předem saturovány odpovídajícím lékem na vhodné úrovni). Navíc, mimo odstraňování malých a středních molekul, vykazují biporézní sorbenty rovněž vynikající schopnost absorbovat cytochrom C a beta-2-mikroglobulin (o molekulové hmotnosti přibližně 20,000 daltonů), stejně tak se to týká i vitaminu B12.The adsorption spectrum of the modified hypercrosslinked polystyrene sorbents of the present invention extends to substances with a molecular weight in the range between 100 and 20,000 daltons. Maximum adsorption occurs for molecules weighing between 300 and 5,000 daltons, which are clinically identified as intermediate molecules, and which are present in abnormal amounts in ureamic and other patients and are not completely removed by conventional hemodialysis procedures. Such compounds as creatinine, barbiturate, phenobarbital, sodium salicylate, amphetamines, morphine sulphate, meprobamate, glutethimide and others can be effectively and rapidly removed from the blood using microporous and biporous sorbents. (To avoid removal of useful drugs from blood during blood washing on new sorbents, these sorbents may be pre-saturated with the appropriate drug at the appropriate level). In addition to the removal of small and medium molecules, biporous sorbents also have an excellent ability to absorb cytochrome C and beta-2-microglobulin (molecular weight approximately 20,000 daltons) as well as vitamin B12.

Při přípravě počátečního hyperzesíťovaného polystyrenu na roztok 87.6 g xylylen dichloridu (0,5 mol) v 600 ml suchého ethylen dichloridu bylo přidáno 104 g (I mol) styren kopolymerů s 0,5% - ním divinylbenzenem, suspenze byla míchána po dobu jedné hodiny a byl k ní přidán roztok 116.8 ml tetrachloridu cínu (I mol) ve 100 ml etylen dichloridu. Reakční směs pak byla zahřívána po dobu desíti hodin při teplotě 80°C, polymer byl filtrován a pečlivě promyt v acetonu, směsi acetonu s 0.5 N HCI, 0.5 N HCI a vody, až nebyly ve filtrátu detekovány žádné chlorové ionty. Produkt, vysušený ve vakuu, představoval mikroporézní hyperzesíťovaný polystyren. Obsahoval 0.65% dosud nezreagovaného chloru a vykazoval plochu vnitřního povrchu o velikosti až 980 m2/g.To prepare the initial hypercrosslinked polystyrene to a solution of 87.6 g of xylylene dichloride (0.5 mol) in 600 ml of dry ethylene dichloride, 104 g (1 mol) of styrene copolymers with 0.5% divinylbenzene were added, the suspension was stirred for one hour and a solution of 116.8 ml of tin tetrachloride (1 mol) in 100 ml of ethylene dichloride was added. The reaction mixture was then heated for 10 hours at 80 ° C, the polymer was filtered and washed thoroughly in acetone, a mixture of acetone with 0.5 N HCl, 0.5 N HCl and water until no chlorine ions were detected in the filtrate. The product, dried under vacuum, was microporous hypercrosslinked polystyrene. It contained 0.65% of unreacted chlorine and had an internal surface area of up to 980 m 2 / g.

Do suspenze 104 g (I mol) makroporézního styren kopolymerů se 4 % divinylbenzenů v 500 ml suchého ethylen dichloridu byl přidán roztok 76 ml (I mol) monochlordimethyl etheru a 116.8 ml (I mol) tetrachloridu cínu (I mol) ve 100 ml ethylen dichloridu. Směs byla potom zahřívána při teplotě 80°C po dobu deseti hodin, polymer byl filtrován a pečlivě promyt v acetonu, směsi acetonu s 0.5 N HCI, 0.5 N HCI a vody, tak dlouho, až nebyly detekovány žádné chlorové ionty. Produkt, vysušený ve vakuu, představoval biporézní hyperzesíťovaný polystyren a obsahoval • · ftftftft • ft ftftftft • ft · ftftftft • ft ft ftftft· ftft · ftftft ftft · ft · ftftftft ftftftft • ftftft ftftftft ftftftftTo a suspension of 104 g (1 mol) macroporous styrene copolymers with 4% divinylbenzenes in 500 ml dry ethylene dichloride was added a solution of 76 ml (1 mol) monochlorodimethyl ether and 116.8 ml (1 mol) tin tetrachloride (1 mol) in 100 ml ethylene dichloride . The mixture was then heated at 80 ° C for ten hours, the polymer was filtered and washed thoroughly in acetone, a mixture of acetone with 0.5 N HCl, 0.5 N HCl and water until no chlorine ions were detected. The product, dried in vacuum, was a biporous hypercrosslinked polystyrene and contained • ftftftft ftftftftft ftftftftftft ftftftftftftftftftftftftftftftftftftftftft ftftftftftftftft ftftftft

3.88% dosud nezreagovaného chloru. Výše uvedené rozsáhlé zesíťování mělo za následek zvětšení jeho vnitřní povrchové plochy ze 120 na 1,265 m2/g.3.88% of unreacted chlorine. The abovementioned extensive cross-linking resulted in an increase in its internal surface area from 120 to 1.265 m 2 / g.

Vytváření lipidovitých povrchových struktur:Creation of lipid-like surface structures:

Příklad 1.Example 1.

K disperzi 10 g biporézního polymeru ve 30 ml směsi dioxanemethanolu (5:1, obj./obj.) byl přidán smíchaný roztok 1 g NAI a 6 ml 2-ethanolaminu v 1 ml téže látky, poté byl zahříván na teplotě 80°C po dobu devíti hodin. Polymer byl filtrován, promýván směsí dioxane - methanolu a methanolu 0.1 N HCI (aby došlo k protonaci sekundárních aminoskupin) a konečně propláchnut vodou a 50 ml methanolu. K polymeru, vysušenému ve vakuu, bylo přidáno 25 ml suchého pyridinu a poté 1 ml POCb v 5 ml suchého pyridinu. Reakční směs byla udržována po dobu 15 hodin při teplotě okolního prostředí, filtrována, polymer byl propláchnut suchým pyridinem a v roztoku 1.4 g cholone chloridu v 25 ml suchém dimethyl sulfoxidu při teplotě 40°C. Směs byla zahřívána na teplotu 60°C po dobu čtyř hodin, udržována při teplotě okolního prostředí po dobu patnácti hodin, opatřena 5 ml suchého pyridinu a, po dalších pěti hodinách, pečlivě propláchnuta destilovanou vodou a opláchnuta ethanolem. Pryskyřice byla před použitím udržována v ethanolu při teplotě 5°C.To a dispersion of 10 g of biporous polymer in 30 ml of dioxanemethanol (5: 1, v / v) was added a mixed solution of 1 g of NAI and 6 ml of 2-ethanolamine in 1 ml of the same, then heated to 80 ° C. for nine hours. The polymer was filtered, washed with a mixture of dioxane-methanol and methanol 0.1 N HCl (to protonate the secondary amino groups) and finally rinsed with water and 50 ml of methanol. To the polymer, dried in vacuo, was added 25 mL dry pyridine followed by 1 mL POCl 3 in 5 mL dry pyridine. The reaction mixture was maintained for 15 hours at ambient temperature, filtered, the polymer was washed with dry pyridine and in a solution of 1.4 g of cholone chloride in 25 ml of dry dimethyl sulfoxide at 40 ° C. The mixture was heated to 60 ° C for four hours, maintained at ambient temperature for fifteen hours, treated with 5 ml dry pyridine and, after another five hours, rinsed thoroughly with distilled water and rinsed with ethanol. The resin was kept in ethanol at 5 ° C before use.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 2.Example 2.

Na 3 g biporézního polymeru, upraveného 2-ethanol aminem a aktivovaného pomocí POCI3, jak bylo popisováno v Příkladu 1, bylo působeno roztokem 0.3 g tert.-butyloxycarbonyl-L-serinu ve 2 ml suchého pyridinu při teplotě okolního prostředí po dobu patnácti hodin, poté následovalo promytí ethyl acetátem, dioxanem, vodou a methanolem a vysušení. Ochranné BOC - skupiny byly odstraněny pomocí 5 ml trifluoroctové kyseliny, působící po dobu jedné hodiny při teplotě okolního prostředí. Konečný produkt byl promyt etherem, ethanolem a vodou.3 g of 2-ethanol amine treated biporous polymer treated with POCl3 as described in Example 1 was treated with a solution of 0.3 g of tert.-butyloxycarbonyl-L-serine in 2 ml of dry pyridine at ambient temperature for 15 hours, followed by washing with ethyl acetate, dioxane, water and methanol and drying. The BOC protecting groups were removed with 5 ml of trifluoroacetic acid, operating for one hour at ambient temperature. The final product was washed with ether, ethanol and water.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 3Example 3

9 ·9449 · 944

9 49 4

9 49 4

4 94 9

9 4 49 4 4

9999

9494

4 4 94 4 9

4 4 94 4 9

4 9 4 9. 4 9 4 9

4 4 44 4 4

44 g biporézního hyperzesíťovaného polymeru se nechalo nabobtnat pomocí 16 ml 8% - ního roztoku NaOH v ethylen glykolu a pak zahříváno na teplotu 180°C po dobu pěti hodin, aby došlo k substituci reziduálních chloromethylových skupin ethylen glykol skupinami. Polymer pak byl promýván ethanolem, vodou, acetonem a vysušen ve vakuu. Suchý polymer pak byl aktivován pomocí POCI3 a reagován s choline chloridem, jak bylo popisování v Příkladu 1.44 g of biporous hypercrosslinked polymer was swelled with 16 mL of 8% NaOH in ethylene glycol and then heated to 180 ° C for five hours to replace residual chloromethyl groups with ethylene glycol groups. The polymer was then washed with ethanol, water, acetone and dried in vacuo. The dry polymer was then activated with POCl 3 and reacted with choline chloride as described in Example 1.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 4 g biporézního hyperzesíťovaného polymeru bylo modifikováno ethylen glykolem, jak je popisováno v Příkladu 13, aktivovaného pomocí POCI3, jak je popisováno v Příkladu 1 a reagováno se směsí 3 ml ledové kyseliny octové a 3 ml 2 - ethanol aminu při teplotě okolního prostředí po dobu tří dnů. Produkt byl poté promyt v pyridinu, vodě a ethanolu.Example 4 g of a biporous hypercrosslinked polymer was modified with ethylene glycol as described in Example 13, activated with POCl 3 as described in Example 1 and reacted with a mixture of 3 ml glacial acetic acid and 3 ml 2-ethanol amine at ambient temperature for for three days. The product was then washed in pyridine, water and ethanol.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Nanášení heparinu na povrch:Heparin coating:

Příklad 5Example 5

Produkt reakce počátečního biporézního polymeru s 2 - ethanol aminem podle Příkladu 1 byl promýván v 0.5 I 0.1 N HCI a vody, s 5 ml vodného roztoku heparinu (5,000 U / ml) a udržován po dobu patnácti hodin při teplotě okolního prostředí a po dobu čtyř hodin při teplotě 5°C. Polymer s iontově absorbovaným heparinem byl filtrován od přebytečného roztoku a udržován před použitím v ethanolu při teplotě 5°C.The reaction product of the initial biporous polymer with the 2-ethanol amine of Example 1 was washed in 0.5 L of 0.1 N HCl and water, with 5 ml of an aqueous solution of heparin (5,000 U / ml) and maintained for fifteen hours at ambient temperature and for four hours at 5 ° C. The ion-absorbed heparin polymer was filtered from excess solution and kept at 5 ° C in ethanol before use.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

4444

4 4 4 • · · · • « · 44 4 4 •

4 4 44 4 4

44 • · · ···· · · ♦r ·49· • · • · • · • · ·44 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

Příklad 6Example 6

Heparin, absorbovaný na polymeru podle Příkladu 5, byl vázán kovalentně vystavením polymeru po dobu čtyř hodin působení vodného roztoku glutare dialdehydu (2.0 ml 25% - ního roztoku na 1 g vlhkého polymeru). Odpovídající aldehydové skupiny byly poté vázány s L - asparágovou kyselinou (0.2 g L-Asp ve 3 ml 1 N NaOH pro 1 g polymeru) po dobu čtrnácti hodin. Polymer, promytý pomocí 0.1 N NaOH a vody, byl udržován před použitím v ethanolu při teplotě 5°C.Heparin, absorbed on the polymer of Example 5, was covalently bound by exposing the polymer for four hours to an aqueous solution of glutare dialdehyde (2.0 mL of a 25% solution per g wet polymer). The corresponding aldehyde groups were then bound with L-aspartic acid (0.2 g of L-Asp in 3 ml of 1 N NaOH for 1 g of polymer) for 14 hours. The polymer, washed with 0.1 N NaOH and water, was kept at 5 ° C in ethanol before use.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 7Example 7

Heparin, absorbovaný na polymeru podle Příkladu 5, byl kovalentně spojen promytím polymeru v 500 ml suchého methanolu, 200 ml suchého dioxanu a bylo na něj působeno po dobu pěti hodin roztokem 0.1 g hexamethylen diisokyanatanu ve 3 ml dioxanu (na 1 g polymeru). Polymer byl filtrován, promyt dioxanem a odpovídajícími isokyanatanovými skupinami, vázanými s L - asparágovou kyselinou, načež bylo na polymer působeno 1 g tris.trimethylsilyl derivátem L - Asp ve 3 ml heptanu po dobu patnácti hodin při teplotě okolního prostředí. Polymer byl propláchnut heptanem, methanolem, 0.1 N NaOH a vodou a před použitím udržován v ethanolu pri teplotě 5°C.The heparin absorbed on the polymer of Example 5 was covalently combined by washing the polymer in 500 mL dry methanol, 200 mL dry dioxane, and treated for 5 hours with a solution of 0.1 g hexamethylene diisocyanate in 3 mL dioxane (per 1 g polymer). The polymer was filtered, washed with dioxane and the corresponding L-aspartic acid-linked isocyanate groups, then treated with 1 g of tris-trimethylsilyl L-Asp derivative in 3 mL of heptane for 15 hours at ambient temperature. The polymer was rinsed with heptane, methanol, 0.1 N NaOH and water and kept at 5 ° C in ethanol before use.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 8 g produktu z reakce počátečního biporézného polymeru se 2 - ethanol aminem podle Příkladu 1 byl opláchnut vodou a bylo na něj působeno 4 ml 25% - ního vodného roztoku glutare dialdehydu po dobu pěti hodin pri teplotě okolního prostředí. Přebytečné množství reagentu pak bylo odstraněno pomocí vody a na polymer poté bylo působeno 2.5 ml roztoku heparinu (5,000 U / ml) po dobu patnácti hodin při teplotě okolního prostředí a konečně byl opláchnut vodou.Example 8 g of the product from the reaction of the initial biporous polymer with the 2-ethanol amine of Example 1 was rinsed with water and treated with 4 ml of a 25% aqueous glutare dialdehyde solution for five hours at ambient temperature. Excess reagent was then removed with water and the polymer was then treated with 2.5 ml heparin solution (5,000 U / ml) for 15 hours at ambient temperature and finally rinsed with water.

• · ♦ · ···· ·* ·· ·· · · · · · · · · • · · ft· · ···· • ···· · · · · · · ·'· · • · ···· ···· ··· · ·· ·· ·· ··• · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ··· ···· ··· · ·· ·· ·· ··

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 9 g produktu z reakce počátečního biporézního polymeru s 2 - ethanol aminem podle Příkladu 1 bylo promytu methanolem, vysušeno ve vakuu, bobtnáno pomocí dioxanu a poté na něj působeno roztokem 0.1 g hexamethylen diisokyanatanu ve 3 ml dioxanu. Po uplynutí deseti hodin byl produkt promyt suchým dioxanem a dimethyl sulfoxidem a byl vystaven působení vodného roztoku heparinu (5,000 U / ml) po dobu tří dnů. Přebytečný heparin byl odstraněn pomocí vody a polymer byl před použitím udržován v ethanolu při teplotě 5°C.Example 9 g of the product from the reaction of the initial biporous polymer with the 2-ethanol amine of Example 1 was washed with methanol, dried under vacuum, swelled with dioxane and then treated with a solution of 0.1 g hexamethylene diisocyanate in 3 ml dioxane. After ten hours, the product was washed with dry dioxane and dimethyl sulfoxide and exposed to an aqueous solution of heparin (5,000 U / ml) for three days. Excess heparin was removed with water and the polymer was kept in ethanol at 5 ° C before use.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Modifikace hydrofilními polymery:Modifications with hydrophilic polymers:

Příklad 10 g produktu z reakce počátečního biporézního polymeru se 2 - ethanol aminem a aktivace pomocí glutare dialdehydu podle Příkladu 8 byl vystaven působení 2 ml vodného roztoku 0.16 g polyethylen glykolu (molekulové hmotnosti 20,000) po dobu tří dnů při teplotě okolního prostředí a pak pečlivě promyt vodou.Example 10 g of the product from the reaction of the initial biporous polymer with 2-ethanol amine and activation with glutare dialdehyde according to Example 8 was exposed to 2 ml of an aqueous solution of 0.16 g of polyethylene glycol (molecular weight 20,000) for three days at ambient temperature and then thoroughly washed water.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Přikladli g produktu z reakce počátečního biporézního polymeru s 2 - ethanol aminem a jeho následné aktivace s hexamethyl diisokyanatanem podle Příkladu 9 bylo vystaveno působení 2 ml vodného roztoku 0.16 g polyethylen glykolu (molekulová hmotnost 20,000) po dobu tří dnů při teplotě okolního prostředí a potom pečlivě omyto vodou.Example g of the product from the reaction of the initial biporous polymer with 2-ethanol amine and its subsequent activation with hexamethyl diisocyanate according to Example 9 was exposed to 2 ml of an aqueous solution of 0.16 g of polyethylene glycol (molecular weight 20,000) for three days at ambient temperature and then carefully washed with water.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 12 g biporézního hyperzesíťovaného polymeru se nechalo nabobtnat pomocí 16 ml 8% - ního roztoku NaOH v ethylen glykolu a pak bylo zahříváno na teplotě 180°C po dobu pěti hodin, aby došlo k substituci zbytkových chloromethylových skupin ethylen glykolovými skupinami. Polymer byl promyt ethanolem, vodou, acetonem a vysušen ve vakuu. 2 g suchého polymeru, nabobtnalého pomocí suchého dioxanu, bylo aktivováno pomocí hexamethylen diisokyanatanu, jak bylo popisováno v Příkladu 9, následovalo promytí v suchém dioxanu a přidání roztoku 1.2 g polyethylen glykolu (molekulové váhy 40,000) v 10 ml suchého dimethyl sulfoxidu, zahřátí na teplotu 80°C po dobu šesti hodin a poté omytí v ethanolu a vodě.Example 12 g of biporous hypercrosslinked polymer was swelled with 16 ml of 8% NaOH in ethylene glycol and then heated at 180 ° C for five hours to substitute residual chloromethyl groups with ethylene glycol groups. The polymer was washed with ethanol, water, acetone and dried in vacuo. 2 g of dry polymer swollen with dry dioxane was activated with hexamethylene diisocyanate as described in Example 9, followed by washing in dry dioxane and adding a solution of 1.2 g of polyethylene glycol (molecular weight 40,000) in 10 ml of dry dimethyl sulfoxide, heating to temperature. 80 ° C for six hours and then washed in ethanol and water.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 13 g ethylen glykolem modifikovaného polymeru, připraveného podle Příkladu 12, bylo aktivováno pomocí glutare dialdehydu podle postupu, popisovaného v Příkladu 8 a vystaveno působení roztoku 1.2 g polyethylen glykolu (molekulové hmotnosti 40,000) v 10 ml vody po dobu jednoho dne při teplotě okolního prostředí. Polymer byl potom omýván ethanolem a vodou.Example 13 g of ethylene glycol-modified polymer prepared according to Example 12 was activated with glutare dialdehyde according to the procedure described in Example 8 and exposed to a solution of 1.2 g of polyethylene glycol (40,000 molecular weight) in 10 ml of water for one day at ambient temperature. . The polymer was then washed with ethanol and water.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 14Example 14

Ke 3 g suchého biporézního polymeru, nabobtnalého pomocí suchého benzenu, bylo přidáno 15 ml roztoku, obsahujícího 8 g alkoholátu polyethylen glykolu (o molekulové hmotnosti 12,000) v suchém benzenu a směs byla podrobena varu v argonové atmosféře; potom byly přidávány malé kousky sodíku, dokud se nerozpustil v reakční směsi (přibližně deset hodin). Po dalších dvou dnech pří pokojové teplotě byl polymer pečlivě promyt ethanolem.To 3 g of dry biporous polymer swelled with dry benzene was added 15 ml of a solution containing 8 g of polyethylene glycol alcoholate (molecular weight 12,000) in dry benzene and the mixture was boiled under argon; then small pieces of sodium were added until dissolved in the reaction mixture (approximately ten hours). After another two days at room temperature, the polymer was thoroughly washed with ethanol.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

·· « · » · · ··· · 9 · · · · · ······« · ··· · · · • · · · · · · · · · ··* · ·* 44 44 449 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29

Příklad 15 ·«··Example 15 · «··

Podle postupu, popisovaného v Příkladu 14, byl 1 g polymeru vystaven působení 1 g alkoholátu polyethylen glykolů nižší molekulové hmotnosti (6,000).Following the procedure described in Example 14, 1 g of polymer was exposed to 1 g of lower molecular weight polyethylene glycols (6,000).

Příklad 16Example 16

K roztoku 0.2 g polyethylen glykolů (molekulové hmotnosti 12,000) ve 4 ml suchého benzenu bylo přidáno nejprve 0.1 ml hexamethylen diisokyanatanu, a pak, po dvou hodinách, 2 g suchého biporézního polymeru, který byl předtím modifikován ethylen glykolem podle postupu, popisovaného v Příkladu 12.To a solution of 0.2 g of polyethylene glycols (molecular weight 12,000) in 4 ml of dry benzene was first added 0.1 ml of hexamethylene diisocyanate, and then, after two hours, 2 g of dry biporous polymer previously modified with ethylene glycol according to the procedure described in Example 12. .

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

Příklad 17Example 17

Postup, popisovaný v Příkladu 16, byl opakován s polyethylen glykolem o nižší molekulové hmotnosti (6,000).The procedure described in Example 16 was repeated with lower molecular weight polyethylene glycol (6,000).

Příklad 18Example 18

0.2 g chitosanu bylo rozpuštěno v 6 ml koncentrované kyselině octové a přidáno ke 2 g suchého biporézního polymeru. Po dvou hodinách bylo pomalu přidáno k uvedené směsi 10 ml studeného 30% - ního roztoku NaOH, polymer byl separován z reakční směsi, opláchnut vodou, dehydrován methanolem, vysušen a zahříván na teplotu 80°C s 10 ml roztoku 0.1 g Nal ve směsi dioxane-methanolu (5:1, obj./obj.) po dobu osmi hodin, aby bylo dosaženo alkylace chitosan aminových skupin chloromethyl skupinami polymeru. Konečný produkt byl omyt vodnou kyselinou octovou a potom ethanolem.0.2 g of chitosan was dissolved in 6 ml of concentrated acetic acid and added to 2 g of dry biporous polymer. After two hours, 10 ml of cold 30% NaOH solution was slowly added to the mixture, the polymer was separated from the reaction mixture, washed with water, dehydrated with methanol, dried and heated to 80 ° C with 10 ml of 0.1 g NaI in dioxane. methanol (5: 1, v / v) for eight hours to alkylate the chitosan amine groups with chloromethyl groups of the polymer. The final product was washed with aqueous acetic acid and then with ethanol.

Mikroporézní hyperzesíťovaný polymer byl modifikován přesně stejným postupem.The microporous hypercrosslinked polymer was modified in exactly the same manner.

• · ftft··• ftft ··

Roztok 0.0009 g póly (trifluorethoxy) pshosphazenu (molekulové hmotnosti 1000) v 8 ml ethyl acetátu byl rychle přidán ke 3 g suchého biporézního polymeru a promícháván, dokud se veškeré rozpouštědlo úplně neabsorbovalo polymerovými kuličkami. Materiál byl pak vysušen při sníženém tlaku a omyt ethanolem.A solution of 0.0009 g of (trifluoroethoxy) p-phosphazene (molecular weight 1000) in 8 ml of ethyl acetate was quickly added to 3 g of dry biporous polymer and mixed until all solvent was completely absorbed by the polymer beads. The material was then dried under reduced pressure and washed with ethanol.

ftft ·«·· ·· ·♦ • · · · · · · • ft · ftftftft ftft · ft · · ftft ft • · ftft·· ftftftft • ftft ft ftft ft· ·· ft·ftft ftft ftft ftft ftft ftft ftft ftft ftft ftft ftft ftft ftft ft ft ft

Pokrytí phosphazenem:Phosphazene coverage:

Příklad 19Example 19

Příklad 20Example 20

Roztok 130 g p-ethylstyrenu, 132 g divinylbenzenu (směsi para a metha-izomerů v poměru přibližně 1 :1) a 2.62 g benzoyl peroxidu ve směsi 600 ml toluenu a 100 ml iso-amyl alkoholu byl suspendován ve 4 litrech čisté vody, obsahující 1 % celulózového stabilizátoru. Po 39 minutách míchání při pokojové teplotě byla směs zahřívána na teplotě 40°C po dobu jedné hodiny, teplotě 60°C po dobu dvou hodin, při teplotě 80°C po dobu pěti hodin a při teplotě 96°C po dobu dvou hodin. Po ochlazení směsi na pokojovou teplotu byly získané kuličky filtrovány a omývány horkou vodou, methanolem a vodou. Polymer byl vysušen v peci při teplotě 80°C během jednoho dne.A solution of 130 g of p-ethylstyrene, 132 g of divinylbenzene (approximately 1: 1 mixture of para and meta-isomers) and 2.62 g of benzoyl peroxide in a mixture of 600 ml of toluene and 100 ml of iso-amyl alcohol was suspended in 4 liters of pure water. 1% cellulose stabilizer. After stirring at room temperature for 39 minutes, the mixture was heated at 40 ° C for one hour, at 60 ° C for two hours, at 80 ° C for five hours, and at 96 ° C for two hours. After cooling the mixture to room temperature, the obtained beads were filtered and washed with hot water, methanol and water. The polymer was oven dried at 80 ° C for one day.

Příklad 21Example 21

Roztok 75 g butyl akrylátu, 51 g ethylen bis - diakrylátu a 1 g benzoyl peroxidu v 650 ml toluenu byl suspendován v 2.4 litru čisté vody, obsahující 15 g celulózového stabilizátoru při pokojové teplotě. Po 30 minutách míchání byla směs zahřívána po krocích při 60°C, 80°C a 95°C po dobu tří hodin pro každou z uvedených teplot. Po ochlazení na pokojovou teplotu byly získané kuličky filtrovány, omývány horkou vodou, methanolem a vodou. Kuličky byly potom vysušeny v peci po dobu sedmi hodin při teplotě 80°C.A solution of 75 g of butyl acrylate, 51 g of ethylene bis-diacrylate and 1 g of benzoyl peroxide in 650 ml of toluene was suspended in 2.4 liters of pure water containing 15 g of cellulose stabilizer at room temperature. After stirring for 30 minutes, the mixture was heated in steps at 60 ° C, 80 ° C, and 95 ° C for three hours at each temperature. After cooling to room temperature, the obtained beads were filtered, washed with hot water, methanol and water. The beads were then oven dried for 7 hours at 80 ° C.

Je třeba rozumět, že každý z prvků výše popisovaných, anebo po dvou nebo více společně, rovněž může najit užitečnou aplikaci v jiných typech nebo produktech a metodách, odlišujících se od typů výše popisovaných.It is to be understood that each of the elements described above, or two or more together, may also find useful application in other types or products and methods other than those described above.

• · ·· ·· · ·«····* • · » · · · ♦ · · · • ···· · · · ··· · » · • · · · · · ···· ··· » ·· ·· ·· ·« »· ····· · · · · · · · · · · »» »» »» »» «»

Zatímco byl tento předložený vynález znázorňován a popisován jako ztělesnění sorbentu, sloužícího pro odstraňování jedovatých látek z krve nebo plasmy, a dále jako způsob jeho výroby, není to zamýšleno tak, že by byl vynález omezen na ukázané podrobnosti, protože různé modifikace a strukturální změny mohou být provedeny, aniž by přitom docházelo k jakémukoli odklonu od ducha předloženého vynálezu.While the present invention has been illustrated and described as an embodiment of a sorbent for the removal of poisonous substances from blood or plasma, and further as a method for its manufacture, it is not intended that the invention be limited to the details shown, as various modifications and structural changes may without departing from the spirit of the present invention.

Bez další analýzy bude tak předcházející text v takové míře plně odhalovat smysl předloženého vynálezu, že jiní jej mohou, při aplikování současných znalostí, snadno uzpůsobit pro různé aplikace, aniž by přitom byly vynechány jeho základní rysy, čímž jsou konstituovány základní charakteristiky generických nebo specifických aspektů tohoto vynálezu.Without further analysis, the foregoing text will thus fully reveal the meaning of the present invention that others, while applying current knowledge, can easily adapt it to different applications without omitting its essential features, thereby constituting the essential characteristics of generic or specific aspects. of the invention.

Co je nárokováno jako nové a požadováno pro ochranu patentem, je vyjádřeno v připojených nárocích.What is claimed as new and required for patent protection is set forth in the appended claims.

Claims (15)

Patentové nárokyPatent claims 1. Způsob odstraňování beta - 2 mikroglobulinu z krve, sestávající z kroků odnímání krve z pacienta, průchodu krve materiálem, jehož velikost a struktura jsou zvoleny tak, aby byl z krve odstraňován beta - 2 mikroglobulin, a opětné zavádění krve, ze které byl odstraněn beta - 2 mikroglobulin, do pacienta.A method for removing beta-2 microglobulin from blood, comprising the steps of withdrawing blood from a patient, passing blood through a material whose size and structure are selected to remove beta-2 microglobulin from the blood, and reintroducing blood from which it has been removed beta-2 microglobulin, to the patient. 2. Způsob, jak byl definován v nároku 1, kde uvedený průchod zahrnuje průchod krve materiálem, obsahujícím hyperzesíťované pryskyřice polystyrénového typu, s povrchem kuliček modifikovaným tak, aby zabraňoval absorpci velkých bílkovin a krevních destiček a aby minimalizoval aktivaci krevního doplňkového systému, aniž by znatelně ovlivňoval přístupnost vnitřního absorpčního prostoru kuliček pro malé a středně veliké molekuly jedovatých látek.A method as defined in claim 1 wherein said passage comprises passing blood through a material comprising polystyrene-type hyper-crosslinked resins with a surface of the beads modified to prevent the absorption of large proteins and platelets and to minimize activation of the blood complement system without appreciably influenced the accessibility of inner bead absorption space for small and medium sized molecules of toxic substances. 3. Způsob podle nároku 2, kde uvedené kuličky jsou modifikovanými kuličkami kopolymerů styren - divinylbenzenu, vystavené širokému zesítění v nabobtnalém stavu s bifunkčními zesíťovacími činidly.The method of claim 2, wherein said beads are modified beads of styrene-divinylbenzene copolymers subjected to broad crosslinking in a swollen state with bifunctional crosslinking agents. 4. Způsob podle nároku 3, kde uvedené bifunkční zesíťovací činidlo je činidlem, tvořeným monochlorodimethyl etherem a p - xylylen diclnloridem.The process of claim 3, wherein said bifunctional crosslinking agent is a monochlorodimethyl ether reagent and p-xylylene dicloride. 5. Způsob podle nároku 2, kde uvedené kuličky jsou modifikovanými kuličkami kopolymerů styren - divinylbenzenu, vystavené chlorometylaci a dodatečnému zesítění.The method of claim 2, wherein said beads are modified beads of styrene-divinylbenzene copolymers exposed to chloromethylation and additional crosslinking. 6. Způsob podle nároku 2, kde uvedená modifikace zahrnuje nanášení póly (N trifluoralkoxy) phosphazenu s vysokou molekulovou hmotností na povrch kuliček, vystavení kuliček působení roztoku pshosphazenu v organickém rozpouštědle a odpaření rozpouštědla.The method of claim 2, wherein said modification comprises depositing high molecular weight (N trifluoralkoxy) phosphazene poles on the surface of the beads, exposing the beads to a solution of pshosphazene in an organic solvent and evaporating the solvent. 7. Způsob podle nároku 2, kde uvedená modifikace zahrnuje elektrostatickou vazbu heparinu z jeho vodného roztoku na kuličky, jejichž chlormethylové skupiny byly substituovány aminofunkcemi prostřednictvím reakce s aminem.The method of claim 2, wherein said modification comprises electrostatic coupling of heparin from its aqueous solution to spheres whose chloromethyl groups have been substituted with amino functions via reaction with an amine. • · ··· ·· · ···· ··· · · · · · · · ······· · ··· · · · • · ···· ···· ··· · · · ·· ·· ··· · ··· ·· · ···· ··· · · · · · · ···· ···· ··· · · ·· ·· ·· 8. Způsob podle nároku 7, kde uvedený amin je tvořen 2 - ethanol aminem.The process of claim 7, wherein said amine is 2-ethanol amine. 9. Způsob podle nároku 2, kde uvedená modifikace zahrnuje substituování chloromethylových skupin na povrchu kuliček 2- ethanol aminovými ligandy a kovalentní vazbu heparinu na ligandy prostřednictvím materiálu, zvoleného ze skupiny, obsahující glutare dialdehyd a hexamethylen diisokyanatan složky a vazební skupiny, zvolené ze skupiny, obsahující přebytečné aldehydové skupiny a izokyanatanové skupiny s L - asparágovou kyselinou.The method of claim 2, wherein said modification comprises substituting chloromethyl groups on the surface of the beads with 2-ethanol amine ligands and covalently binding the heparin to ligands via a material selected from the group consisting of glutaric dialdehyde and hexamethylene diisocyanate components and linking groups selected from the group consisting of containing excess aldehyde groups and isocyanate groups with L-aspartic acid. 10. Způsob podle nároku 2, kde uvedená modifikace zahrnuje substituci chloromethylových skupin materiálem, zvoleným ze skupiny, obsahující 2 - ethanol amin a ethylen glykolové ligandy, aktivování ligandů materiálem, zvoleným ze skupiny, obsahující glutare dialdehyd a hexamethylen diisokyanatan a kovalentní vazby hydrofilních polyethylene glykolových řetězců.The method of claim 2, wherein said modification comprises substituting chloromethyl groups with a material selected from the group consisting of 2-ethanol amine and ethylene glycol ligands, activating ligands with a material selected from the group consisting of glutaric dialdehyde and hexamethylene diisocyanate and covalent bonds of hydrophilic polyethylene glycol strings. 11. Způsob podle nároku 2, kde uvedená modifikace zahrnuje kovalentní vazby hydrofilních polyethylene glykolových řetězců prostřednictvím reakcí jejích alkoholátů sodíku s polystyren chloromethylovými skupinami.The method of claim 2, wherein said modification comprises covalently bonding hydrophilic polyethylene glycol chains through reactions of its sodium alcoholates with polystyrene chloromethyl groups. 12. Způsob podle nároku 2, kde uvedená modifikace zahrnuje kovalentní vazby hydrofilních řetězců chitosanu prostřednictvím reakcí jejich aminoskupin s polystyren chloromethylovými skupinami.The method of claim 2, wherein said modification comprises covalently bonding the hydrophilic chains of chitosan through reactions of their amino groups with polystyrene chloromethyl groups. 13. Způsob podle nároku 2, kde uvedená modifikace zahrnuje substituování chloromethylových skupin s ligandy, zvolenými ze skupiny, obsahující 2 - ethanol aminové ligangy nebo ethylen glykolové ligandy, aktivování ligandů fosfor oxychloridem, a kovalentní vazby hydrofilních složek, zvolených ze skupiny, obsahující cholin, serin a 2 - ethanol amin.The method of claim 2, wherein said modification comprises substituting chloromethyl groups with ligands selected from the group consisting of 2-ethanol amine ligands or ethylene glycol ligands, activating ligands with phosphorus oxychloride, and covalently bonding hydrophilic components selected from the group consisting of choline, serine and 2-ethanol amine. 14. Způsob podle nároku 1, kde uvedený průchod zahrnuje průchod materiálem, který je tvořen porézním hydrofobním akrylickým polymerem.The method of claim 1, wherein said passage comprises passing through a material that is formed by a porous hydrophobic acrylic polymer. 15. Způsob podle nároku 1, kde uvedený průchod zahrnuje průchod materiálem, který je tvořen kopolymerem mezoporézního ethylstyren - divinylbenzenu.The method of claim 1, wherein said passage comprises passing through a material comprised of a mesoporous ethylstyrene-divinylbenzene copolymer.
CZ2000349A 1998-07-29 1998-07-29 Process of removing beta-2 microglobulin from blood CZ2000349A3 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2000349A CZ2000349A3 (en) 1998-07-29 1998-07-29 Process of removing beta-2 microglobulin from blood

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2000349A CZ2000349A3 (en) 1998-07-29 1998-07-29 Process of removing beta-2 microglobulin from blood

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ2000349A3 true CZ2000349A3 (en) 2000-08-16

Family

ID=5469446

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2000349A CZ2000349A3 (en) 1998-07-29 1998-07-29 Process of removing beta-2 microglobulin from blood

Country Status (1)

Country Link
CZ (1) CZ2000349A3 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5904663A (en) Method of removing beta-2 microglobulin from blood
US5773384A (en) Sorbents for removing toxicants from blood or plasma, and method of producing the same
US6127311A (en) Method of producing material for purification of physiological liquids of organism
US6416487B1 (en) Method of removing beta-2 microglobulin from blood
US6325939B2 (en) Surface modified polymer beads
US20120152847A1 (en) Sorbent for endotoxins
US8932590B2 (en) Method of adsorbing transforming growth factor β
US20020146413A1 (en) System for treating patient with bacterial infections
JP3176753B2 (en) Adsorbent for blood processing
CZ2000349A3 (en) Process of removing beta-2 microglobulin from blood
JPH0260660A (en) Adsorbent for treating body fluid
JPH0611333B2 (en) Immune complex adsorbent and immune complex removing apparatus using the same
JP4032465B2 (en) Thrombogenic substance adsorbent and extracorporeal circulation column
EP0888178A1 (en) Sorbents for removing toxicants from blood or plasma, and method of producing same
JPH01124468A (en) Adsorbent of beta2-microglobulin
van Berlo The filmadsorber
McPhillips et al. Grafted synthetic sorbents for enhanced removal of toxic chemical agents from plasma
JPH0523395A (en) Blood purifying adsorbent
JPH0771632B2 (en) Adsorbent and removal device using the same
van Berlo The filmadsorber: some aspects of its development, manufacturing and use for bloodpurification
JPH05168707A (en) Adsorbent for hemocatharsis
JPH05245198A (en) Leucocyte capturing body and its production
JPH0623042A (en) Blood purifying adsorbent and blood purifying method
Davankov et al. Hypercrosslinked Polystyrene as Hemosorbents
Partch et al. 4 Synthesis and Engineering of Polymeric Latex

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic